[1,2,4]三唑并 [4,3-a]吡啶类衍生物， 其制备方法或其在医药上的应用 技术领域

本发明涉及一种新的 [1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶类衍生物， 其制备方法及含有该 衍生物的药物组合物以或其作为治疗剂（特别 是作为 c-Met抑制剂）和在制备免疫 抑制剂的药物中的用途。 背景技术

肝细胞生长因子（HGF)受体， 也叫作 c-Met， 是一种酪氨酸激酶受体。 它是 单链蛋白前体通过 α和 β这两个亚基经二硫键连接起来而形成的成熟� ��受体。

c-Met是一种膜受体， 它是胚胎发育和伤口愈合必不可少的。 肝细胞生长因子 (HGF)是唯一已知的 c-Met受体的配体。 c-Met通常是在上皮细胞中表达的， 而 HGF的表达则局限于间叶细胞中。 经由 HGF激发后， c-Met可以诱发产生一些生 物反应， 这些生物反应协同起作用从而导致细胞存活和 增殖， 细胞迁移与入侵其 他组织， 并且阻断细胞凋亡。

c-Met异常激活与癌症的不良预后有关连， C-Met在遇到异常激活后会引发肿 瘤的生长与新血管的形成 （血管再生， 它可以为肿瘤提供营养） ， 帮助癌症扩散 到其它器官 （转移） 。 在许多类型的人类恶性肿瘤中， 比如膀胱癌， 肝癌， 肾癌， 胃癌，乳腺癌，鳞状细胞癌，脑癌都存在 c-Met过度表达或失调 （WO2007/126799)。

c-Met异常发现于多种类型的肿瘤， 例如肝癌 HCC， 非小细胞肺癌 NSCLC, 胃癌， 结肠癌等。 c-Met异常可表现为表达量升高， 基因扩增， 基因突变， 或者 HGF 表达量升高。 在这些异常情况下， c-Met可处于一种被激活的异常状态， 从 而导致癌变和不良预后。 由于 c-Met的这些特性， c-Met是多种癌症治疗的重要靶 点。 制药业目前针对 c-Met为靶点的药物可分为这样三类： c-Met特异性药物， 多 靶点 （包括 c-Met) 选择性药物， 抗体药物。

抑制 c-Met信号通路是治疗肿瘤的重要策略之一。目� ��已经发现了许多能够有 效阻断 HGF/c-Met信号传导途径的小分子化合物， 但迄今还没有此类小分子化合 物的 c-Met酪氨酸激酶抑制剂上市。

目前还没有 FDA批准的 c-Met特异性药物， 与 c-Met特异性药物相关的处于 临床阶段的化合物有 SGX-523 , JNJ3887705 ( Johnson& Johnson ) ， INCB28060 (Novartis/InCyte)。 SNG-523 和 JNJ3887705 因为对肾脏的毒性已经中止临床试验， AMG-208 禾卩 INCB28060 现处于临床一期。 发明内容 本发明的目的在于提供一种如通式（I)所示的� ��合物或其药学上可接受的盐， 以或其代谢产物和代谢前体或前药。 本发明提供一种如通式 （I) 所示的化合物， 其结构如下：

其中：

选自吡唑基、 烷基、 环烷基、 卤代烷基、 烷氧基、 芳基、 杂芳基或杂环基， 任选进一步被一个或多个选自卤素、 羟基、 烷基、 烷氧基、 环烷基、 杂环基、 芳 基、杂芳基、 -(CH ₂ ) _n C(0)OR ₅ 、 -C(0)NR6R ₇ 、 -NHC(0)R ₅ 、 -NR ₆ R ₇ 、 -NHC(0)NR6R ₇ 、 -NHC(0)(0)R ₅ 或 -NHS(0) _m R ₅ 的取代基所取代； 优选吡唑；

R ₂ 选自氢、 卤素、 C _r C ₆ 烷氧基或 C _r C ₆ 卤代烷氧基； 优选氢或卤素， 更优选 卤素；

R ₃ 选自卤素、 d-C ₆ 烷基、 d-C ₆ 烷氧基、 Ci-C ₆ 卤代烷氧基、 3至 8元杂环基、 -NHR ₈ 或NR ₈ R ₉ ， 任选进一步被一个或多个选自卤素、 羟基、 烷基、 烷氧基、 环烷 基、 杂环基、芳基、 杂芳基、 -(CH ₂ ) _n C(0)OR ₅ 、 -C(0)NR6R ₇ 、 -NHC(0)R ₅ 、 -NR ₆ R ₇ 、 -NHC(0)NR6R ₇ -NHC(OXC R ₅ 或 -NHS(C _m R ₅ 的取代基所取代； 优选烷氧基或卤 素， 更优选卤素；

R4选自氢、 吡唑基、 d-C ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 C _r C ₆ 烷氧基、 芳基、 杂芳 基、 3至 8元杂环基、 -NHR ₈ 或 NR ₈ R ₉ ，任选进一步被一个或多个选自卤素、羟 基、 烷基、 烷氧基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -(CH ₂ ) _n C(;C OR ₅ 、 -C(0)NR6R ₇ -NHC(0)R ₅ 、 -NR ₆ R ₇ 、 -NHC(0)NR6R ₇ 、 -NHC(0)(0)R ₅ 或 -NHS(0) _m R ₅ 的取代基所 取代；

或者， R ₃ 、 与其相连的碳可形成 C ₅ -C _1Q 的脂肪环、 可以含一到三个杂原子 且其中杂原子可以是氧、 氮或硫的杂环、 内酯、 内酰胺、 硫代内酰胺、 脲或硫脲， 并任选的进一步被一个或多个选自卤素、 羟基、 烷基、 烷氧基、 烷氧烷基、 环烷 基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)R ₅ 、 -C(0)NR6R ₇ 、 -NHC(0)R ₅ 、 -NReRy -OC(0)NR ₆ R ₇ -NHC(0)NR6R ₇ -NHC(0)(0)R ₅ 或 -NHS(0) _m R ₅ 的取代基所取代； 更优选 R ₃ 、 R4与其相连的碳可形成 C ₅ -C ₈ 杂环内酰胺；

R ₅ 选自氢原子、 C C ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 3至 8元杂环基、 C ₂ -C ₆ 烯基、 C ₂ -C ₆ 块基、 芳基或杂芳基， 其中所述烷基、 环烷基、 杂环基、 芳基或杂芳基各自独立 地任选进一步被一个或多个选自烷基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 环烷基、 杂 环基、 芳基、 杂芳基、 -(CH ₂ ) _n C(0)OR ₈ 、 -C(0)NR ₉ Rio -NHC(0)R ₈ 、 -NR ₉ R ₁₀ 、 -NHC(0)NR ₉ Rio -NHC(0)OR ₈ 或^!^^^!^的取代基所取代； 或 各自独立地选自氢原子、 C _r C ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 3至 8元杂环基、 芳基或杂芳基， 其中所述烷基、 环烷基、 杂环基、 芳基或杂芳基各自独立地任选 进一步被一个或多个选自烷基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 环烷基、 杂环基、 羟烷基、 块基、 芳基、 杂芳基、 或 -OR ₈ 的取代基所取代；

R ₈ 选自氢原子、 C _r C ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 C _r C ₆ 烷氧基、 3至 8元杂环基、 羟烷基、 芳基或杂芳基；

R ₉ 或 R _1Q 各自独立地选自氢原子、 d-C ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 3至 8元杂环 基、 芳基或杂芳基；

m， n的值各自独立地选自 0、 1或 2。

在本发明的一个优选实施方案中， 如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接 受的盐为如通式 （Π) 所示的 盐：

其中： R ₂ 、 R ₃ 、 R4的定义如通式 （I) 所定义。

在本发明的又一个优选实施方案中， 如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可 接受的盐为 ：

其中： R ₂ 、 R ₃ 的定义如通式 （I) 所定义。

优选地， 为如通式 （ΠΙΑ) 与 （ΙΠΒ) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 其中： R ₂ 选自氢、 卤素、 d-C ₆ 烷氧基或卤代 d-C ₆ 烷氧基， 优选氢或卤素。

优选地， 为如通式 （ΠΙΑ) 与 （ΙΠΒ) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 其中： R ₃ 选自氢、 卤素、 d-C ₆ 烷基、 C _r C ₆ 烷氧基、 卤代 d-C ₆ 烷氧基、 -NHR ₈ 或 NR ₈ R ₉ ， 优选卤素或 d-C ₆ 烷氧基， 其中 R ₈ 、 R ₉ 的定义如上所述。

在本发明的又一个优选实施方案中， 如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可 接受的盐为如通式 （IV) 所 的盐：

其巾：

R ₂ 的定义如通式 （I) 所定义; X=0、 N或 S; 优选 O;

Y=0、 N或 S; 优选 O;

m=0、 1或 2；

Rn R ₁₂ 、 Ri3 Ri4分别选自氢原子、 CrC ₆ 烷基、 C ₃ -C _1Q 环烷基、 3至 8元杂 环基、 C ₂ -C ₆ 烯基、 C ₂ -C ₆ 块基、 芳基或杂芳基； 其中 R„或 R ₁₂ 与 R ₁₃ 或 R ₁₄ 与其 相连的碳可以形成 5-10元环或杂环， 或者， R _u 、 ₂ 或 ₃ 、 R ₁₄ 与其相邻的杂原 子可以形成 5-10元环或杂环； 其中所述烷基、 环烷基、 杂环基、 芳基或杂芳基各 自独立地任选进一步被一个或多个选自烷基、 卤素、 羟基、 氨基、 烷氧基、 环烷 基、 杂环基、 芳基、 杂芳基所取代。

优选地， 为如通式 （IV) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 其中： R ₂ 选 自氢、 卤素、 d-C ₆ 烷氧基或卤代 d-C ₆ 烷氧基， 更优选氢或卤素。

在本发明的又一个优选实施方案中， 如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可 接受的盐为如通式 （V) 所 的盐：

其巾：

R ₂ 的定义如通式 （I) 所述；

W选自 CH ₂ 、 0、 N、 S， 优选 0、 N， 更优选 O;

R ₁₅ 、 Ri6 分别选自氢、 卤素、 d-C ₆ 烷基或烷氧基；

R ₁₇ 选自氢、 C _r C ₆ 烷基、 C _r C ₆ 烷氧基、 C _r C ₆ 烷氧烷基、 C(0)R ₅ 、 C ₃ -C _1Q 环烷 基或 3至 8元杂环基；

m=0或 1。

优选地， 为如通式（V)所示的化合物或其药学上可接受� ��盐， 其中： R ₂ 选自 氢、 卤素、 C _r C ₆ 烷氧基或卤代 C _r C ₆ 烷氧基， 优选氢或卤素。

优选地， 为如通式 （V) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 其中： R ₁₇ 选 自选自氢、 C C ₆ 烷基、 d-C ₆ 烷氧基、 d-C ₆ 烷氧烷基、 C(0)R ₅ 、 C ₃ -C _1Q 环烷基或 3至 8元杂环基； 优选 d-C ₆ 烷基或 C ₃ -C _1Q 环烷基。

本发明中所述的药学上可接受盐为本发明的化 合物与选自下列的酸形成的 盐酸、 对甲苯磺酸、 酒石酸、 马来酸、 乳酸、 甲磺酸、 硫酸、 磷酸、 柠檬酸、 乙酸或三氟乙酸； 优选盐酸、 对甲苯磺酸、 酒石酸或三氟乙酸。

具体地， 本发明包括如下的典型化合物， 但不限于：

实施例编号 化合物结构与命名

进一步， 本发明涉及一种如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接受的盐的 制备方法，

通式 （IA) 的化合物和通式 （IB) 的化合物， 在碱性条件下， 通过 S-芳基化 偶联反应， 得到通式 （I) 的化合物； 其中： 、 R ₂ 、 R ₃ 、 R, 如前所述。

本反应所用的溶剂选自 1，4-二氧六环、 乙腈、 N，N-二甲基甲酰胺、 二甲亚砜、 N-甲基吡咯烷酮， 优选 1，4-二氧六环、 N， N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜。

本反应在碱的存在下进行， 所用的碱选自无机碱 （如碳酸钠、 碳酸钾、 碳酸 氢钠、 磷酸钾、 叔丁基钠、 叔丁基钾） 或有机碱 （如三乙胺、 吡啶、 哌啶、 叔丁 胺、 二乙基异丙基胺） ， 优选叔丁基钠、 叔丁基钾或二乙基异丙基胺。

本发明的一个方面提供了一种药物组合物， 所述药物组合物含有治疗有效剂 量的如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 或药学上可接受的载体或 赋形剂。 本发明还提供所述药物组合物在制备治疗与蛋 白质激酶有关的疾病的药 物中的用途， 其中所述蛋白激酶选自 c-Met和 VEGFR受体酪氨酸激酶。本发明还 提供所述药物组合物在制备治疗癌症的药物中 的用途， 优选在制备治疗肺癌、 乳 腺癌、 表皮鳞癌或胃癌的药物中的用途。

本发明的另一个方面提供了一种调节蛋白激酶 催化活性的方法， 其中包括将 所述蛋白激酶与如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接受的盐， 或与其药物组 合物相接触， 所述蛋白激酶选自 c-met和 VEGFR受体酪氨酸激酶。

本发明的另一个方面提供了如通式（I)所示的� ��合物或其药学上可接受的盐， 含有所述化合物或其药学上可接受的盐的药物 组合物， 在制备蛋白激酶抑制剂中 的用途， 其中所述蛋白激酶选自 c-Met和 VEGFR受体酪氨酸激酶。

本发明的另一个方面提供了如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接受的盐 在制备治疗与蛋白质激酶有关的疾病的药物中 的用途， 所述蛋白激酶选自 c-Met 和 VEGFR受体酪氨酸激酶。

本发明的另一个方面提供了如通式（I)所示的� ��合物或其药学上可接受的盐， 含有所述化合物或其药学上可接受的盐的药物 组合物， 用作治疗与蛋白质激酶有 关的疾病的药物， 其中所述蛋白激酶选自 c-Met和 VEGFR受体酪氨酸激酶。

本发明的另一个方面提供了如通式（I)所示的� ��合物或其药学上可接受的盐， 含有所述化合物或其药学上可接受的盐的药物 组合物， 用作治疗癌症的药物， 优 选用作治疗肺癌、 乳腺癌、 表皮鳞癌或胃癌的药物。

本发明的另一个方面提供了如通式 （I) 所示的化合物或其药学上可接受的盐 在制备治疗癌症的药物中的用途， 优选在制备治疗肺癌、 乳腺癌、 表皮鳞癌或胃 癌的药物中的用途。

本发明的化合物可以用于治疗瘤形成， 包括癌症和转移， 包括但不限于： 癌 例如膀胱癌、 乳腺癌、 结肠癌、 肾癌、 肝癌、 肺癌 （非小细胞肺癌） 、 皮肤癌； 淋巴系统造血肿瘤 （包括白血病、 急性淋巴细胞白血病、 急性成淋巴细胞白血病 等） ； 骨髓系统造血瘤 （包括急性和慢性骨髓性白血病、 骨髓发育不良综合征和 前髓细胞白血病） ； 间充质起因的肿瘤 （包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤以或其他肉 瘤例如软组织肉瘤和骨肉瘤） ； 中枢和外周神经系统的肿瘤 （包括星形细胞瘤、 神经母细胞瘤、 神经胶质瘤和神经末梢瘤） ； 以或其他肿瘤 （包括恶性黑素瘤、 精原细胞瘤、 畸胎癌、 甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤等） 。

优选地， 本发明的化合物用于治疗肺癌、 乳腺癌、 表皮鳞癌或胃癌。

"药物组合物"表示含有一种或多种本文所述化� ��物或其生理学上 / 可药用 的盐或前体药物与其他化学组分的混合物， 以及其他组分例如生理学 / 可药用的 载体和赋形剂。 药物组合物的目的是促进对生物体的给药， 利于活性成分的吸收 进而发挥生物活性。

本领域技术人员所熟知的， 药物的给药剂量依赖于多种因素， 包括但并非限 定以下因素： 所用特定化合物的活性、 病人的年龄、 病人的体重、 病人的健康状 况、 病人的行被、 病人的饮食、 给药时间、 给药方式、 排泄的速率、 药物的组合 等； 另外， 最佳的治疗方式如治疗的模式、 通式化合物 （I) 的日用量或药学上可 接受的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验 证。

除非有相反陈述， 在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述 含义。

"烷基 "指饱和的脂族烃基团， 包括 1至 20个碳原子的直链和支链基团。 优选 含有 1至 10个碳原子的烷基， 例如甲基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁基、 异丁基、 叔丁基或戊基等。 更优选的是含有 1至 4个碳原子的低级烷基， 例如甲基、 乙基、 丙基、 2-丙基、 正丁基、 异丁基或叔丁基等。 烷基可以是取代的或未取代的， 当被 取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"环烷基"指 3至 8元全碳单环基团，其中 3至 8元全碳单环可以含有一个或多 个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系统。 例如环丙基、 环丁基、 环戊 基、 环戊烯基、 环己烷基、 环己二烯基、 环庚烷基、 环庚三烯基等。 环烷基可以 是取代或未取代的。 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选 自烷基、烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基、 环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NR _1Q R _u 、 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO2NR10R11、 -NHC(0)R ₉ 或 -NRwRi 1。

"烯基 "指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组� ��的如上述定义的烷基。 例如乙烯基、 1-丙烯基、 2-丙烯基、 1-， 2-或 3-丁烯基等。 烯基可以是取代的或未 取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷 氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NR _1Q R _u 、 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -S0 ₂ NRioRn -NHC(0)R ₉ 或 -NR^R^

"块基"指至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键 组成的如上所定义的烷基。 例 如乙块基、 1-丙块基、 2-丙块基、 1-， 2-或 3-丁块基等。 块基可以是取代的或未取 代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧 基、卤素、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环 基、芳基、杂芳基、 -C(0)OR ₉ -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"杂环基"指 3至 8元单环基团，其中一个或多个环原子选自氮� �氧或 S(0)n (其 中 n是整数 0至 2)的杂原子， 其余环原子为碳。 这些环还可以具有一个或多个双 键， 但没有一个环具有完全共轭的 π电子系统。 例如吡咯烷基、 哌啶基、 哌嗪基、 吗啉基、 硫代吗啉基、 高哌嗪基等， 杂环基可以是取代的或未取代的。 当被取代 时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、烷氧基、 卤素、羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"双环烷基"指 5至 14元全碳稠合环 （"稠合"环系意味着系统中的每个环与体 系中的其他环共享毗邻的一对碳原子） 基团， 其中一个或多个环可以含有一个或 多个双键， 但没 一个环具有完全共轭的 π电子系统。 例如

优选为 5元 /5元或 5元 /6元双环烷基，更优选为 5元 /5元。 双环烷基可以是取 代的或未取代的。 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自 烷基、烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基、环 烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NR _1Q R _u 、 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO2NR10R11、 -NHC(0)R ₉ 或 -NRwRi 1。

"双杂环基" 指 5至 14元稠合环 ("稠合"环系意味着系统中的每个环与体系中 的其他环共享毗邻的一对碳原子)基团， 其中一个或多个环原子选自氮、 氧或 S(0)n (其中 n是整数 0至 2)的杂原子，其余环原子为碳。这些可以含有� ��个或多个 双 一个环具有完全共轭的 π电子系统。 优选为 7至 10元。 例如

进一步优选为 5元 /5元或 5元 /6元双杂环基， 更优选为 5元 /5元。 双杂环基 可以是取代的或未取代的。 当被取代时， 取代基优选为一个或多个， 独立地选自 烷基、烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基、环 烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NR _1Q R _u 、 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO2NR10R11、 -NHC(0)R ₉ 或 -NRwRi 1。

"桥环烷基"指 5至 14元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原� ��的全碳多 环基团， 这些可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系 统。 优选为 7至 10元。 例如：

根据组成环的数目可以分为双环、 三环、 四环或多环桥环烷基， 优选为双环、 三环或四环， 更有选为双环或三环。 桥环烷基可以是取代的或未取代的， 当被取 代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤素、 羟 基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"桥杂环基"指 5至 14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子� ��多环基团， 这些可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系统， 其中 一个或多个环原子选自氮、 氧或 S(0)n (其中 n是整数 0至 2) 的杂原子， 其余环 原

根据组成环的数目可以分为双环、三环、 四环或多环桥环烷基， 优选为双环、 三环或四环， 更优选为双环或三环。 桥杂环基可以是取代或未取代的， 当被取代 时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"螺环烷基"指 5至 14元， 单环之间共用一个碳原子 (称螺原子)的多环基团， 这些可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系统。 优选 为

根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基 分为单螺环烷基、 双螺环烷基 基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环 烷基。更优选为 4元 /4元、 4元 /5元、 4元 /6元、 5元 /5元或 5元 /6元单螺环烷基。 螺环烷基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤 素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

"螺杂环基"指 5至 14元， 单环之间共用一个原子 （称螺原子） 的多环烃， 其 中一个或两个环原子选自氮、 氧或 S(0)n (其中 n是整数 0至 2) 的杂原子， 其余 环原子为碳。 这些可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π 电 子系统。 优选为 7至 10

根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基 分为单螺环烷基、 双螺环烷基 基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环 烷基，更优选为 4元 /4元、 4元 /5元、 4元 /6元、 5元 /5元或 5元 /6元单螺杂环基。 螺杂环基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤 素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、

p元 /q元的双环烷基、 双杂环基、 单螺环烷基或单螺杂环基， 指双环烷基、 双 杂环基、单螺环烷基或单螺杂环基的两个环的 环原子数量分别为 p个和 q个， p或 q选自 3〜8的整数， 优选为 4〜7的整数。

"3〜8元杂环基"指构成环原子的数量为 3〜8元， 构成环的原子中含有一个或 多个 N、 0或 S(0)n杂原子， 环内可以含有 1〜2个双键， 为单环或双环的非芳香 族的环基， 构成环的原子中含有氮原子时， 可以从氮原子伸出结合键。优选为 4〜 6元杂环基， 更优选为 5〜6元， 例如吡咯烷基、 哌啶基或哌嗪基等。 3〜8元杂环 基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ -OC(0)NR _1Q R _u 、羰基、 -S(0) _n R ₉ -OS0 ₂ R ₉ 、 -S0 ₂ NRioRn -NHC(0)R ₉ 或 -NR^R^

"芳基 "指 6至 14元全碳单环或稠合多环 (也就是共享毗邻碳原子对的环)基团， 具有共轭的 π电子体系的多环 (即其带有相邻对碳原子的环)基团， 优选为 6至 10 元， 例如苯基、 萘基和蒽基。 芳基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代 基优选为一个或多个以下基团， 独立地选自烷基、 烷氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(0)NRioRn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -SO ₂ NR ₁₀ R _u 、 -NHC(0)R ₉ 或 -NR ₁₀ R _U 。

"杂芳基"指包含 1至 4个杂原子， 5至 14个环原子的杂芳族体系， 其中杂原 子包括氧、 硫和氮。 杂芳基优选为是 5元或 6元杂芳基。 例如呋喃基、 噻吩基、 吡啶基、 吡咯基、 N-烷基吡咯基、 嘧啶基、 吡嗪基、 咪唑基、 四唑基等。 杂芳基 可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个以下基团， 独 立地选自烷基、 烷氧基、 卤素、 羟基、 硝基、 氰基、 环烷基、 杂环基、 芳基、 杂 芳基、 -C(0)OR ₉ 、 -OC(0)R ₉ 、 -0(CH ₂ ) _m C(0)OR ₉ 、 -OC(O)NRi ₀ Rn 羰基、 -S(0) _n R ₉ 、 -OS0 ₂ R ₉ 、 -S0 ₂ NRioRn -NHC(0)R ₉ 或 -NR^R^

"芳氧基"指 -O-芳基和 -O-杂芳基， 芳基和杂芳基定义同上。 例如苯氧基、 吡啶 氧基、 呋喃氧基、 噻吩氧基、 嘧啶氧基、 吡嗪氧基等或其衍生物。

"浣氧基"指 -0- (烷基)和 -0- (未取代的环烷基)。 例如 C1-6烷氧基， 具体如甲氧 基、 乙氧基、 丙氧基、 丁氧基、 环丙氧基、 环丁氧基、 环戊氧基、 环己氧基等。 烷氧基可以是取代的或未取代的， 当被取代时， 取代基优选为一个或多个， 独立 地选自为卤素、 烷氧基、 羟基、 氨基、 氰基、 硝基、 环烷基或杂环基。

"羟基 "指 -OH基团。

"卤素"指氟、 氯、 溴或碘。

"氨基 "指 -NH ₂ 。

"氰基 "指 -CN。

"硝基 "指 -N0 ₂ 。

"双环辛烷基 "指 。

"氮杂双环辛烷基"指 或 。

"任选 "或"任选地 "意味着随后所描述地事件或环境可以但不必� �生，该说明包 括该事件或环境发生或不发生地场合。例如， "任选被烷基取代的杂环基团"意味着 烷基可以但不必须存在， 该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环 基团不被 烷基取代的情形。

"药物组合物 "表示含有一种或多种本文所述化合物或其生� �学上 /药学上可接 受的盐或前体药物与其他化学组分的混合物， 以或其他组分例如生理学 /药学上可 接受的载体和赋形剂。 药物组合物的目的是促进对生物体的给药， 利于活性成分 的吸收进而发挥生物活性。

m， n和 R ₉ 〜R„的定义如通式 （I) 化合物中所述。

本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的， 可以采用但不限于如下技术方案：

本发

(IA) (IB) (I) 通式 (IA)化合物和通式 (IB)化合物， 在碱性条件下， 通过 S-芳基化偶联反应， 得到通式 （I) 化合物； 其中 R， R ₂ ， R ₃ ， R ₄ 如前所述。

本反应所用的溶剂选自 1，4-二氧六环、 乙腈、 N， N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、 N-甲基吡咯烷酮， 优选 1，4-二氧六环、 N， N-二甲基甲酰胺、 二甲亚砜。

本反应在碱存在下进行， 所用的碱选自无机碱 （如碳酸钠、 碳酸钾、 碳酸氢 钠、 磷酸钾、 叔丁基钠、 叔丁基钾） 或有机碱 （如三乙胺、 吡啶、 哌啶、 叔丁胺、 二乙基异丙基胺） ， 优选叔丁基钠、 叔丁基钾、 二乙基异丙基胺。

所用钯催化剂可以包括： 烯丙基氯化钯二聚物、 双氰苯氯化钯、 乙酸钯、 氯 化钯、 四 (三苯磷)化钯、 三 (二苄基丙酮)二钯、 三 (二苄基丙酮） 二钯氯仿加合物； 优选三 (二苄基丙酮)二钯、 三 (二苄基丙酮） 二钯氯仿加合物。

本发明的 下步骤：

本合成路线以 1-甲基 -4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 为起始原料， 经 Suzuki、 肼代、 环化得到中间体化合物 （IA) 。 另一片段从 6-溴 喹啉 -4-羟基出发， 经碘代、 氯化、 经胺代， 烷氧代或卤素交换得到中间体 （IB) ， 然后用 S-芳基化偶联得到目标化合物 （I) 。

具体实施方式

以下结合实施例用于进一步描述本发明， 但这些实施例并非限制着本发明的 范围。

化合物的结构是通过核磁共振 （NMR) 或 /和质谱 （MS) 来确定的。 NMR位 移（δ) 以百万分之一（ppm)的单位给出。 NMR的测定是用 Bruker AVANCE-400 核磁仪， 测定溶剂为氘代二甲基亚砜（DMSO- ) ， 氘代氯仿 （CDC1 ₃ ) 内标为四 甲基硅烷 （TMS)。

MS的测定用 FINMGAN LCQAd (ESI) 质谱仪 （生产商： Thermo, 型号：

Finnigan LCQ advantage MAX) 。 HPLC的测定使用安捷伦 1200DAD高压液相色谱仪 （Sunfire C18 150x4.6mm 色谱柱）和 Waters 2695-2996高压液相色谱仪 （Gimini C18 150x4.6mm色谱柱） 。

激酶平均抑制率及 IC _5Q 值的测定用 NovoStar酶标仪 （德国 BMG公司） 。 薄层层析硅胶板使用烟台黄海 HSGF254或青岛 GF254硅胶板， TLC采用的 规格是 0.15mm〜0.2 mm, 薄层层析分离纯化产品采用的规格是 0.4 mm〜0.5 mm。

柱层析一般使用烟台黄海硅胶 200〜300目硅胶为载体。

本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以 在市场上买到， 或者可以采用 或按照本领域已知的方法来合成。

本发明的所有反应无特殊说明均在连续的磁搅 拌下， 在干燥氮气或氩气氛下 进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氢气气球。

实施例中无特殊说明， 溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明， 反应的温度为室温。

室温为最适宜的反应温度， 为 20°C〜30°C。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法（ TLC)， 反应所使用的展开剂的 体系有： 二氯甲烷和甲醇体系， 正己烷和乙酸乙酯体系， 石油醚和乙酸乙酯体系， 丙酮， 溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调 节。

柱层析的洗脱剂的体系包括： A: 二氯甲烷和甲醇体系， B: 正己烷和乙酸乙 酯体系， C: 二氯甲烷和乙酸乙酯体系， D: 乙酸乙酯和甲醇， 溶剂的体积比根据 化合物的极性不同而进行调节， 也可以加入少量的氨水和醋酸等进行调节。

实施例：

实施例一

)

步骤一： 2,3-二氟 -5-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基)吡啶 lb

250mL单口瓶中加入 5-氯 -2,3-二氟吡啶 (6.16 g， 41.2 mmol), 1-甲基

-4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 (10.26 g， 49.4 mmol) 醋酸钯 (464 1¾，2.06 1^^)1)，2-二环己基磷-2，4，6-三异丙基联苯 （1.96 g， 4.12 mmol), 磷酸 钾 （26.24 g， 123.6 mmol), 二氧六环 /水 (80 mL/8 mL), 抽换气三次， 氮气保护， 力口 热至 100 ^υ ， 反应过夜。 LC-MS监测原料原料转化完全， 停止反应， 加硅胶， 直接 旋干柱层析， 石油醚 /乙酸乙酯 (5/1到 3/1)， 得 2，3-二氟 -5-G-甲基 -1Η-吡唑 -4-基)口比 啶 lb (6.1 g， 白色固体)， 收率 76%。

MS m/z (ESI): 196.0 Ή NMR (400MHz, CDC1 ₃ , ppm) δ 8.32-8.25 (m， 3 H)， 8.01 (d, / = 0.4 Hz, 1 H)， 3.88 (s, 3 H).

步骤二: 3 -氟 -2-肼基 -5-ί 1 -甲基- 1 Η-吡唑 -4-基)吡啶 1 c.

50 mL单口瓶中加入 2,3-二氟 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)卩比啶（1.8 g， 9.2 mmol) 85%水合肼 （1.8 g， 46 mmol) 乙醇 （25 mL)， 氮气保护， 加热至回流， 反应过夜， 冷 至室温， 析出大量白色固体， 抽滤， 冷的乙醇洗涤， 得 3-氟 -2-肼基 -5-G-甲基 -1H-吡 唑 -4-基)吡啶 lc (1.4 g， 白色针状固体)， 收率 73%.

MS m/z (ESI): 208.0

步骤三： 8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-硫醇 Id. 50mL单口瓶中加入 3-氟 -2-肼基 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) B比啶 （1.4 g， 6.7 mmol)，二硫化碳 (1.0 g， 13.4 mmol), 氢氧化钾 (395 mg， 7.0 mmol),乙醇 /水 （20 mL/5 mL), 氮气保护， 加热至回流， 反应 46小时， 旋去溶剂， 加入氢氧化钠水溶液 (1 M， 30 mL), 加水至固体溶解， 水相用二氯甲烷萃取两次， 水相分离盐酸酸化 （1 M)， 有大量乳黄色固体析出，静置 1 小时， 以慢速滤纸抽滤，水洗，得到产物 8-氟 -6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (1.1 g， 浅黄色)， 收率 68%.

MS m/z (ESI): 249.96

1H NMR (400 M， DMSO-Je, ppm) δ 14.89 (s, 1 H)， 8.39 (s, 1 H)， 8.23 (s, 1 H)， 8.04 (s， 1 H)， 7.81 (dd， / = 1.2, 12.4 Hz, 1 H)， 3.88 (s， 3 H).

实施例二

6-(Y8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -4-甲氧基喹

步骤一： 6-溴 -4-甲氧基喹啉 2b

10mL单口瓶中依次加入 6-溴 -4-氯喹啉（0.50 g， 2.06 mmol), 甲醇 （5 mL), 甲 醇钠 （0.56 g， 10.3 mmol), 50°C过夜， TLC监测， 反应结束。 加入硅胶旋干， 柱层 析 (石油醚 /丙酮 = 10/1)， 得 6-溴 -4-甲氧基喹啉 2b (0.25 g， 白色固体)， 产率： 51%.

MS m/z (ESI): 238.0

步骤二： 6-(ϊ8-氟 -6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -4-甲氧基喹啉 （2)

25mL单口瓶中加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 （100 mg， 0.4 mmol), 6-溴 -4-甲氧基喹啉 （95 mg， 0.4 mmol), 三 (二亚苄基丙 酮）二钯 （37 mg， 0.04 mmol) , 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 （46 mg， 0.08 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 (5 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室温搅拌 5分钟， 直 至固体溶解。 加入 N，N-二异丙基乙基胺 （162 mg， 1.6 mmol), 加热至 100°C， 反应 过夜。 LC-MS监测反应不再进行后， 停止反应， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 = 20/1) 得 6-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡 啶 -3-基)硫代) -4-甲氧基喹啉 2 (2.1 mg， 白色固体).

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.76 (s, 1 Η), 8.26 (s, 1 Η), 8.09 (m, 2 Η), 7.65 (m， 3 Η)， 7.19 (dd， / = 10.0 Hz, 0.4 Hz, 1 H)， 6.83 (d, / = 5.2 Hz, 1 H)， 4.09 (s， 3 H)， 3.97 (s, 3 H).

MS m/z (ESI): 407.1

实施例三

9-((8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2,3-二氢

步骤一： 6-溴 -3-碘喹啉 -4-酚 3b.

50mL单口瓶中加入 6-溴喹啉 -4-酚 （15 g， 66.95 mmol), 1-碘吡咯烷 -2,5-二酮 (12.05 g, 53.56 mmol), 加入乙酸乙酯 （400 mL)， 搅拌均匀后， 加热至 60°C， 反应 4.5 小时， 停止加热， 冷至室温， 抽滤得固体。 将得到的固体置于 2升烧杯中， 加 入碳酸钠水溶液， 调至近中性， 用碳酸氢钠水溶液调节 pH 8-9， 静置 1小时， 抽 滤， 得灰白色固体， 水洗 (如需得到很纯产物， 可用冷丙酮洗涤)干燥得 6-溴 -3-碘喹 啉 -4-酚 3b (18 g， 白色固体)， 收率 77%。

MS m/z (ESI): 349.7

步骤二: 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 3c

250mL 封管中加入 6-溴 -3-碘喹啉 -4-酚 （25 g， 71.4 mmol), 三氯氧膦（150 mL), 加热至 100°C反应过夜， 得红色溶液， LC-MS监测原料转化完全， 停止反 应。 冷至室温后， 搅拌下， 将反应液缓慢加入到 35。C的温水 （20 mL)中， 通过冰 水浴和加冰控制温度在 30-45°C， 加毕， 搅拌 15分钟， 静置后布氏漏斗抽滤， 水 洗， 加入到 2升烧杯中， 碳酸钠水溶液调节 pH 8-9， 搅拌 1小时， 静置 30分钟， 抽滤， 水洗， 干燥， 得 6-溴 -3-碘喹啉 -4-酚 3c (22 g， 浅黄色固体)， 收率 84%.

MS m/z (ESI): 367.6

步骤三: 9-溴 -2,3-二氢 -「1,41二噁英并「2,3-cl喹啉.

250mL 封管中加入 6-溴 -3-碘喹啉 -4-酚 （3.7 g， 10.0 mmol), 碳酸铯 （9.8 g， 30.12 mmol), 碘化亚铜 （382 mg， 2.0 mmol), 乙二醇 （100 mL)， 加热至 100°C反应 过夜。 LC-MS监测原料转化完全， 中间体消失， 停止反应。 冷至室温后， 高真空 旋去大部分溶剂， 加入水中， 乙酸乙酯萃取， 有机相合并， 饱和氯化钠溶液洗涤 三次， 有机相碳酸钾干燥。 柱层析 (二氯甲烷含 2%甲醇)， 得 9-溴 -2,3-二氢 -[1，4]二 噁英并 [2，3-c]喹啉 3d (800 mg， 白色固体)， 收率 30%.

MS m/z (ESI): 266.0 步骤四： 9-(ϊ8-氟 -6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -2,3-二氢 -「1,41二噁英并「2,3-cl喹啉 3

25mL单口瓶中加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 (132 mg， 0.53 mmol), 9-溴 -2,3-二氢 -[1，4]二噁英并 [2，3-c]喹啉 （128 mg， 0.481 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （66 mg， 0.072 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 （83 mg， 0.144 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （8 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （58 mg， 0.608 mmol), 室温搅拌 5 分钟后， 在加热至 100°C， 反应过夜。 停止反应， 旋干 N， N二甲基甲酰胺， 用二 氯甲烷溶解固体， 水洗两次， 浓縮后反相柱层析得 9-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4- 基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)代) -2,3-二氢 -[1，4]二噁英并 [2，3-c]喹啉 3.

MS m/z (ESI): 321.1

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.52 (s， 1 H)， 8.04 (s， 1 H)， 7.99 (s， 1 H)， 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.67 (s， 1 H)， 7.59 (s， 1H), 7.47 (d， J = 8.4 Hz, 1 H)， 7.16 (d， J = 10.4 Hz, 1 H)， 4.49 (s, 2 H)， 4.39 (s, 2H), 3.95 (s, 3 H).

实施例四

6-(Ϊ8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -4-甲氧基

步骤一: 1 -(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吡咯垸 -2-酮 4b

25mL单口瓶中加入 6-溴 -3-碘 -4-甲氧基喹啉 4a (0.6 g， 1.65 mmol), 碘化亚铜

(0.18 g, 0.19 mmol), 磷酸钾 (0.7 g, 3.3 mmol), 二甲亚砜 (10 mL), 抽换气三次， 氮气保护， 加入吡咯烷 -2-酮 (0.18 g, 2.12 mmol), Ν,Ν'-二甲基乙二胺 (36 mg, 0.41 mmol), 加热至 50°C， 反应过夜。 停止加热， 向反应液中加入乙酸乙酯 (100 mL)， 饱和氯化钠水溶液洗涤三次，有机相用无水硫 酸钠干燥，浓縮，加硅胶，柱层析 (展 开剂:乙酸乙酯)， 得 1-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吡咯烷 -2-酮 (0.3 g， 黄色固体)， 收 率 56%.

MS m/z (ESI): 321.1

步骤二： 1-(6-(ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -4-甲氧基喹啉 -3-基)吡咯垸 -2-酮 4

25mL 单口瓶中加入 1-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吡咯烷 -2-酮（116 mg, 0.47 mmol), 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (150 mg, 0.47 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （43 mg， 0.047 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲 基氧杂蒽 （54 mg， 0.01 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （；6 mL)， 抽换气， 氮气保 护， 室温搅拌 5 分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 C54 mg， 0.56 mmol), 室温搅 拌 5分钟后， 加热至 100°C， 反应过夜。 LC-MS监测反应结束， 旋干 N，N二甲基 甲酰胺， 二氯甲烷溶解固体， 水洗两次， 浓縮后柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 = 20/1), 得 1-(6-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-甲氧 基喹啉 -3-基)吡咯烷 -2-酮 4 (10 mg, 白色固体).

MS m/z (ESI): 490.2

¾ NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.71 (s, 1 H)， 8.12 (s, 1 H)， 8.06 (m， 2 H)， 7.68 (s, 1 H)， 7.60 (m， 1 H)， 7.27 (s, 1 H)， 7.19 (d, / = 10.4 Hz, 1 H)， 4.03 (s, 3 H)， 3.95 (s, 3 H)， 3.84 (t， / = 6.8 Hz, 2 H)， 2.63 (t， J = 8.0 Hz, 2 H)， 2.32 (m， 2 H).

实施例五

4-氟 -6-(Y8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「l 41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代 )-3-Π-甲

歩骤一： 6-溴 -4-氯 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 5b

250mL单口瓶中加入 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 （1.1 g， 3.0 mmol), 1-甲基 -4-(4，4，5，5- 四甲基 -1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 （0.75 g， 3.6 mmol), [1，Γ-双 (二苯基膦基)二 茂铁]二氯化钯 (0.22 g， 0.3 mmol), 碳酸钾 (0.83 g， 6.0 mmol), 二氧六环 /水 (50 mL/10 mL), 抽换气三次， 氮气保护， 加热至 35°C， 反应过夜。 LC-MS监测原料 转化完全， 停止反应， 加硅胶， 直接旋干柱层析， 石油醚 /乙酸乙酯 （10:1到 1 :1)， 得 6-溴 -4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉（0.5 g， 白色固体)， 收率 52%.

MS m/z (ESI): 322.0

步骤二： 6-溴 -4-氟 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 5c

15mL封管中加入 6-溴 -4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （0.2 g， 0.62 mmol), 氟化铯 (0.59 g， 3.1 mmol), 干燥二甲亚砜 （8 mL)，加热至 90°C，反应 3小时。 LC-MS 监测原料转化完全， 停止加热， 反应液倾入 50毫升乙酸乙酯中， 用饱和氯化钠水 洗三次， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 浓縮， 柱层析 （乙酸乙酯)， 得 6-溴 -4-氟 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （0.19 g， 白色固体)， 收率 100%.

MS m/z (ESI): 306.0

步骤三： 4-氟 -6-(ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基) 硫代) -3-ί 1 -甲基 - 1 H-吡唑 -4-基)喹啉 5

25 mL单口瓶中加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 (98 mg, 0.39 mmol), 6-溴 -4-氟 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （120 mg, 0.39 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （36 mg， 0.039 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 （45 mg， 0.078 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （5 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室温搅拌 5 分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （41 mg， 0.43 mmol), 室温搅拌 5 分钟， 加热至 100°C， 反应 6小时。 LC-MS监测反应结束， 旋干 N，N二甲基甲酰 胺， 二氯甲烷溶解固体， 水洗两次， 浓縮后柱层析 (二氯甲烷： 甲醇 = 20 : 1), 得 4-氟 -6-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -3-(1-甲 基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 5 (2.9 mg， 白色固体).

MS m/z (ESI): 475.1

¾ NMR (400 MHz, OMSO-d ₆ , ppm): δ 9.28 (d, / = 10.4 Hz, 1 H)， 8.60 (s， 1 H)， 8.40 (d, / = 13.6 Hz, 2 H)， 8.09 (m， 3 H)， 8.01 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.87 (d, / = 12.0 Hz, 1 H)， 7.59 (dd, / = 8.8, 1.6 Hz, 1 H)， 3.94 (s， 3 H)， 3.85 (s， 3 H).

实施例六

3-ί6-(ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「l 41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代 4-甲氧基

步骤一： 3-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)噁唑垸 -2-酮 6b

25mL单口瓶中加入 6-溴 -3-碘 -4-甲氧基喹啉 （0.2 g， 0.55 mmol) ， 噁唑烷 -2- 酮 (0.07 g， 0.83 mmol),碘化亚铜 (0.05 g， 0.28 mmol), 磷酸钾 (0.18 g， 0.83 mmol), 二甲亚砜 （5 mL) , 抽换气三次， 氮气保护， Ν,Ν'-二甲基乙二胺 （0.05 g， 0.55 mmol), 加热至 35°C， 反应过夜。 停止加热， 向反应液中加入乙酸乙酯 （50 mL)， 饱和氯化钠水溶液洗涤三次， 有机相用无水硫酸钠干燥， 浓縮， 加硅胶， 柱层析 (EA)， 得 3-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)噁唑烷 -2-酮 （0.08 g， 黄色固体)， 收率 45%。

MS m/z (ESI): 323.0

步骤二： 3-(6-(ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1 ,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -4-甲氧基喹啉 -3-基)噁唑垸 -2-酮 6

25mL单口瓶中加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 (137 mg， 0.55 mmol), 3-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)噁唑烷 -2-酮 （160 mg， 0.50 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （46 mg， 0.05 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 （58 mg， 0.1 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （5 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室 温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （55 mg， 0.58 mmol), 室温搅拌 5分 钟， 加热至 100°C， 反应 5小时。 LC-MS监测反应结束， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 二氯甲烷溶解固体，水洗两次，浓縮后反相柱 层析 （20% 乙腈的水中)，得 3-(6-((8- 氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-甲氧基喹啉 -3- 基)噁唑烷 -2-酮 6 (2.6 mg， 白色固体).

MS m/z (ESI): 492.1 Ή NMR (400 MHz, OMSO-d ₆ , ppm): δ 8.84 (s， 1 H)， 8.59 (s， 1 H)， 8.38 (s， 1 H) _: 8.16 (s, 1 H)， 8.09 (s, 1 H)， 7.96 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.86 (d, / = 12.0 Hz, 1 H)， 7.61 (d _: J = 9.2 Hz, 1 H)， 4.56 (t， / = 7.8 Hz, 2 H)， 4.05 (m， 5 H)， 3.86 (s, 3 H).

实施例七

(S)-9-(T8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫

':4,51「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 (7)

步骤 1 : (S)-6-溴 -3-碘 -4- (吡咯垸 -2-基甲氧基)喹啉 7b

25mL单口瓶中加入 (； S)-吡咯烷 -2-基甲醇 （0.165 g， 1.63 mmol), 无水四氢呋喃 (5 mL), 抽换气， 氮气保护， 室温搅拌 5分钟， 加入氢化钠 C46 mg， 0.05 mmol), 室温搅拌 15分钟， 滴加 10 mL 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 3c ( 0.3 g， 0.81 mmol)的四氢呋 喃溶液， 室温搅拌 30分钟， 升至 40°C反应 3小时， LC-MS监测反应结束， 加入 硅胶旋干， 柱层析 (5% 甲醇在二氯甲烷中)， 得 （S)-6-溴 -3-碘 -4- (吡咯烷 -2-基甲氧 基)喹啉 C0.182 g， 白色固体)， 收率 51%.

MS m/z (ESI): 432.9

步骤二： SV9-溴 -2,3,12,12a-四氢 -1H-吡咯并「Γ,2':4,51「1,41氧杂联氮基「3,2-cl 喹啉

25mL 单口瓶中加入 (S)-6-溴 -3-碘 -4- (吡咯烷 -2-基甲氧基)喹啉 （0.17 g， 0.39 mmol), 碳酸铯 (0.38 g, 1.18 mmol), 碘化压铜 (0.075 mg， 0.39 mmol), N， N二甲基 甲酰胺 （8 mL), 抽换气， 氮气保护， 加热至 100°C， 反应过夜。 LC-MS监测反应 结束， 停止反应。 冷至室温后， 旋去溶剂， 加入二氯甲烷溶解， 饱和氯化钠溶液 洗涤三次， 有机相无水硫酸钠干燥。柱层析 (二氯甲烷)， 得 (S)-9-溴 -2，3，12，12a-四氢 -1H-吡咯并 [1'，2':4，5][1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 （0.065 g， 白色固体)， 收率 54%.

MS m/z (ESI): 305.0

步骤三： (S)-9-(T8-氟 -6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基) 代) -2 12,12a -四氢 -1H-吡咯并「Γ,2':4,51「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹 啉 Ί

25mL单口瓶中加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 (65 mg， 0.26 mmol), (S)-9-溴 -2，3，12，12a-四氢 -1H-吡咯并 [Γ，2':4，5][1，4]氧杂联氮 基 [3，2-c]喹啉 （80 mg， 0.26 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （24 mg， 0.026 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (30 mg， 0.052 mmol), 无水 N， N二甲基甲酰胺 (5 mL), 抽换气， 氮气保护， 室温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。加入叔丁醇钠 （30 mg， 0.31 mmol), 室温搅拌 5分钟，加热至 100°C， 反应 5小时。 LC-MS监测反应结束， 旋干 DMF， DCM溶解固体， 水洗两次， 浓縮后反相柱层析 (水中含 40% 的乙腈)， 得 (S)-9-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1,2,4]三唑并 [4,3-a]吡啶 -3-基 ) 代) -2，3，12，12a-四氢 -1H-吡咯并 [Γ，2':4，5][1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 Ί (5.1 mg， 白色 固体).

MS m/z (ESI): 473.9

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.41 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.90 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.67 (s， 1 H)， 7.58 (s， 1 H)， 7.45 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.15 (d, / = 10.8 Hz, 1 H)， 4.30 (dd， J = 10.0 Hz, 2.4 Hz, 2 H)， 3.95 (m， 4 H)， 3.56 (t， J = 8.8 Hz, 1 H)， 3.40 (m， 2 H)， 2.31 (m， 1 H)， 2.02 (m， 1 H)， 1.82 (m， 2 H).

实施例八

(R)-9-(Y8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「l 41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)代 2 12,12a- ':4,51「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 (8)

化合物 8的合成参照化合物 7的合成从 (R)-吡咯烷 -2-基甲醇开始.

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.34 (s， 1 Η)， 8.04 (d， / = 1.2 Hz, 1 H)， 7.94 (d, J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.81 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.64 (m， 2 H)， 7.36 (dd， J = 8.8 Hz, 2.4 Hz, 1 H)， 7.12 (dd， J = 9.6 Hz, 0.8 Hz, 1 H)， 4.26 (dd， J = 10.0 Hz, 3.2 Hz, 1 H)， 3.92-3.86 (m， 4 H)， 3.51 (m， 1 H)， 3.37 (m， 2 H)， 2.26 (m， 1 H)， 1.98 (m， 1 H)， 1.77 (m， 2 H).

¹⁹ F NMR (376 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): -126.68 (d, / = 10.9 Hz, 1 F).

MS m/z (ESI): 473.9

实施例九

3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-

氮气保护下， 向 25mL单口瓶中加入三氟乙醇 （4.2 mg，0.042 mmol)， 二甲亚 砜 (l mL)， 叔丁醇钠 （5.1 mg，0.053 mmol)， 室温下搅拌 15分钟， 加入 4-氯 -3-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-( 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫 代)喹啉 （10 mg， 0.021 mmol)， 室温反应 1小时， LC-MS监测反应结束， 停止反应。 反相柱层析 (水中含 40%乙腈)， 得 3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-(2，2，2-三氟乙氧基)喹啉 9 (9.6 mg， 白 色固体)， 收率 85%.

MS m/z (ESI): 536.9 !H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ , ppm): δ 8.92 (s, 1 H)， 8.20 (s, 1 H)， 8.01 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.89 (m， 3 H)， 7.83 (s, 1 H)， 7.68 (s, 1 H)， 7.61 (s, 1 H)， 7.56 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.50 (d， J = 9.6 Hz, 1 H)， 4.09 (q, / = 8.1 Hz, 2 H)， 4.01 (s, 3 H)， 3.93 (s, 3 H).

¹⁹ F NMR (376 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): -74.10 (t， / = 8.1 Hz, 3 F).

实施例十

4-异丙氧基 -3- 1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并

「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 (10)

氮气保护下， 向 25mL单口瓶中加入异丙醇 （5.1 mg， 0.053 mmol), 二甲亚砜 (1 mL), 叔丁醇钠 C2.5 mg， 0.042 mmol), 室温下搅拌 15分钟， 加入 4-氯 -3-( 甲基 -1H-吡唑 -4-基） -6- ((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代） 喹啉 （10 mg， 0.021 mmol), 室温反应过夜 . LC-MS监测反应结束， 停止反应。 反相 柱层析 (水中含 40% 乙腈)得 4-异丙氧基 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 10 (2.2 mg， 白色固体)， 收 率 21%.

MS m/z (ESI): 496.9.

!H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ , ppm): δ 8.88 (s, 1 H)， 8.20 (s, 1 H)， 8.01 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.91 (m， 3 H)， 7.81 (s, 1 H)， 7.67 (s, 1 H)， 7.59 (s, 1 H)， 7.54 (dd, / = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H)， 7.49 (dd， / = 9.6 Hz, 1.6 Hz, 1 H)， 4.32 (m， 1 H)， 3.99 (s, 3 H)， 3.94 (s， 3 H)， 1.10 (d, /= 6.0 Hz, 6 H).

实施例 ^一

4-(4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹 啉 -3-基)吗啉 -3-酮 αι)

步骤一：4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗啉 -3-酮

25mL 单口瓶中加入 6-溴 -3-碘 -4-甲氧基喹啉 (0.2 g， 0.55 mmol), 吗啉 -3-酮 (0.083 g， 0.83 mmol), 碘化亚铜 (0.052 g， 0.28 mmol), 磷酸钾 (0.18 g， 0.83 mmol), 二甲亚砜 (3mL)， 抽换气三次， 氮气保护， 加入 Ν,Ν'-二甲基乙二胺 (48 mg， 0.55 mmol), 加热至 50°C， 反应过夜。停止加热， 向反应液中加入乙酸乙酯 （lOO mL), 饱和氯化钠水溶液洗涤三次，有机相用无水硫 酸钠干燥，浓縮，加硅胶，柱层析 (二 氯甲烷： 甲醇 = 20： 1), 得到 4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗啉 -3-酮 （0.17 g， 黄色 固体)， 收率 91%。 MS m/z (ESI): 336.9

步骤二： 4- 4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3- 基)硫代)喹啉 -3-基)吗啉 -3-酮 11

25mL单口瓶中加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (127 mg， 0.55 mmol) 4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗啉 -3-酮 （169 mg， 0.50 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （46 mg， 0.05 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (58 mg， 0.1 mmol),无水 N， N二甲基甲酰胺 (10 mL)，抽换气，氮气保护，室温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。加入叔丁醇钠 （60 mg， 0.63 mmol),室温搅拌 5分钟，加热至 100°C， 反应过夜。 LC-MS监测反应结束， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 二氯甲烷溶解固体， 水洗两次， 浓縮后反相柱层析 (水中含 20%乙腈)， 得 4-(4-甲氧基 甲基 -1H- 吡唑 -4-基 [1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)吗啉 -3-酮 11 (4.6 mg， 白 色固体).

MS m/z (ESI): 487.9

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.54 (s, 1 H)， 8.12 (s, 1 H)， 8.01 (d， J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.91 (d, /= 8.8 Hz, 1 H)， 7.82 (d, /= 9.6 Hz, 1 H)， 7.63 (s, 1 H)， 7.54 (s, 1 H)， 7.50 (dd, / = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H)， 7.43 (dd， / = 9.6 Hz, 1.6 Hz, 1 H)， 4.34 (s, 2 H)， 4.03 (t， / = 5.2 Hz, 2 H)， 3.96 (s, 3 H)， 3.88 (s, 3 H)， 3.68 (t， / = 5.0 Hz, 2 H).

实施例十二

4- (环丙基甲氧基) -3-( 1 -甲基 - 1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-ί 1 -甲基 -1Η-吡唑 -4-基) -「 1 ,2,41

氮气保护下， 向 25mL单口瓶中加入异丙醇 （3.0 mg， 0.042 mmol), 二甲亚砜 ( 1 mL), 叔丁醇钠 (5.1 mg， 0.053 mmol), 室温下搅拌 15分钟， 加入 4-氯 -3-(1-甲 基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代） 喹啉 （10 mg， 0.021 mmol), 室温反应过夜。 LC-MS监测反应结束， 停止反应。 反 相柱层析 (水中含 35% 乙腈)， 得 4- (环丙基甲氧基) -3-G-甲基 -1H-吡唑 -4- 基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 12 (4.6 mg， 白色固体)， 收率 43%.

MS m/z (ESI): 508.9.

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.94 (s, 1 H)， 8.20 (s, 1 H)， 8.07 (d, J = 8.8

Hz, 1 H)， 7.96 - 7.89 (m， 4 H)， 7.68 (s, 1 H)， 7.61 (s, 1 H)， 7.56 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.50 (d, / = 9.6 Hz, 1 H)， 4.00 (s, 3 H)， 3.94 (s, 3 H)， 3.67 (d, / = 7.2 Hz, 2 H)， 1.07 (m， 1 H)， 0.52 (m， 2 H)， 0.12 (m， 2 H).

实施例十三 9-(T8- (二氟甲氧基 )-6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -4- 联氮基「3,2-cl -3 4H 酮 Π3)

N ₂ 保护下， 向 25mL单口瓶中加入 9-((8-羟基 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4] 三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-甲基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 （41 mg， 0.09 mmol)，碳酸钾 （25 mg， 0.18 mmol)，氯二氟乙酸乙酯 （16 mg， 0.098 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （3 mL),室温搅拌 5分钟，加热至 70°C，反应过夜。 LC-MS 监测反应结束， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 二氯甲烷溶解固体， 水洗两次， 浓縮后 柱层析 (二氯甲烷： 甲醇 = 25:1)， 得 9-((8- (二氟甲氧基 )-6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4- 基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-甲基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 12 (3.5 mg， 白色固体).

MS m/z (ESI): 509.8

!H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.58 (s, 1 H)， 8.02 (s, 1 H)， 8.00 (d， / = 2.0 Hz, 1 H)， 7.87 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.50 (t， / = 73.4 Hz, 1 H)， 7.60 (s， 1 H)， 7.56 (s， 1 H) 7.44 (dd， / = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1 H)， 7.15 (s, 1 H)， 4.82 (s, 2 H)， 3.88 (s, 3 H)， 3.44 (s, 3 H).

¹⁹ F NMR (376 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): -83.39 (t， /= 73.3 Hz, 2 F).

实施例十四

10-(Y8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -3,4-二氢

-「1,41二噁庚并「2,3-cl

步骤一： 10-溴 -3,4-二氢 -2H-「1,41二噁庚并「2,3-cl喹啉

lOOmL封管中加入 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 3c (1.5 g, 4.07 mmol), 碳酸铯 (3.98 g, 12.21 mmol), 碘化亚铜 （388 mg， 2.0 mmol), 1， 3-丙二醇 （50 mL)， 加热至 100 °C 反应过夜。 LC-MS监测原料转化完全， 中间体消失， 停止反应。 冷至室温后， 反 应液倾入冰水中， 二氯甲烷萃取， 有机相合并， 饱和氯化钠溶液洗涤三次， 有机 相碳酸钾干燥。 柱层析 (二氯甲烷： 甲醇 = 20: 1), 得 10-溴 -3,4-二氢 -2H-[1，4]二噁 庚并 [2，3-c]喹啉 C200 mg， 白色固体 收率 18%.

MS m/z (ESI): 279.8

步骤二： 10-(Ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -3,4-二氢 -「1,41二噁庚并「2,3-cl喹啉 14 25 11^单口瓶中加入8-氟-6-(1-甲基-111-吡唑-4-基)-[1� ��2，4]三唑并[4，3-&]吡啶-3- 硫 1 (112 mg， 0.45 mmol) 10-溴 -3,4-二氢 -2H-[1，4]二噁庚并 [2，3-c]喹啉 14b (100 mg， 0.41 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （46 mg， 0.05 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲 基氧杂蒽 (47 mg， 0.08 mmol),无水 N， N二甲基甲酰胺 （5 mL),抽换气，氮气保护， 室温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （52 mg， 0.54 mmol), 室温搅拌 5 分钟， 加热至 100°C， 反应过夜。 LC-MS监测反应结束， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 而氯甲烷溶解固体，水洗两次，浓縮后柱层析 (二氯甲烷： 甲醇 = 20: 1),得 10-((8- 氟—6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -3,4-二氢 -[1，4]二噁 庚并 [2，3-c]喹啉 14 (61 mg， 白色固体)， 收率 33%。

MS m/z (ESI): 448.9

Ή NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.55 (s， 1 H)， 8.15 (s， 1 H)， 8.06 (s， 1 H)， 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.65 (d， J = 12.0 Hz, 2 H)， 7.43 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.16 (d， J = 10.4 Hz, 1 H)， 4.53 (t， / = 5.4 Hz, 2 H)， 4.37 (t， / = 5.8 Hz, 2 H)， 3.95 (s, 3 H)， 2.35 (m， 2 H).

1 ⁹ F NMR (376 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): -126.73 (d, / = 10.9 Hz, 1 F).

实施例十五

环丙基 (9-(T6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2H-「1,41

步骤一: 3-氨基 -6-溴 -喹啉 -4-酚

lOOmL单口瓶中加入化合物 6-溴 -3-硝基喹啉 -4-酚 （2.5 g， 9.0 mmol), 加入甲 醇 （10 mL), 在冰浴下加入水合肼（2.7 g， 46.5 mmol), 搅拌，加入催化量的雷尼镍， 在室温下搅拌 1 小时， 点板监测至反应结束。 过滤反应液， 滤饼用甲醇洗涤三遍， 有机相旋干， 得到化合物 3-氨基 -6-溴 -喹啉 -4-酚 （2.20 g) ， 产率 95%.

MS m/z (ESI): 238.9

步骤二: 9-溴 -3,4-二氢 -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉

50mL单口瓶中加入化合物 3-氨基 -6-溴 -喹啉 -4-酚 （0.26 g， 1.09 mmol), 碳酸钾 (0.90 g， 6.54 mmol), 1,2-二溴乙烷 (0.62 g， 3.27 mmol)和 N，N-二甲基甲酰胺 (10 mL)。 升温至 80°C， 反应 4个小时。 反应结束后， 将反应液倒入水中 （200 mL)， 用乙酸乙酯 （50毫升， 3次） 萃取。 合并有机相， 干燥， 旋干。 粗品经柱层析 （石 油醚 /乙酸乙酯 =10: 1至 4: 1， v/v) 分离， 得到 9-溴 -3,4-二氢 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 (102 mg， 淡黄色固体)， 收率 35%.

MS m/z (ESI): 264.9

步骤三： (9-溴 -2H-「 1 ,41氧杂联氮基「3,2-c|喹啉 -4(3H 基) (环丙基)甲酮 25mL 单口瓶中加入化合物 9-溴 -3,4-二氢 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 (76 mg， 0.29 mmol)乙基二异丙基胺 (0.11 ml, 0.57 mmol)和二氯甲烷 (10 mL)。 室温 搅拌 5分钟后，缓慢加入环丙基酰氯 (30 0.32 mmol). 室温反应 3个小时后终止 反应。 旋干反应液， 残留物用制备板分离 (石油醚： 乙酸乙酯 = 5: l,v/v) 得到 （9- 溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -4(3H)-基) (环丙基)甲酮 （57 mg， 白色固体)， 收 率 60%.

MS m/z (ESI): 333.0

步骤四： 环丙基 (9-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -2H-「 1 ,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -4( H)-基)甲酮 15

将化合物 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-)-[1，2，4]噻唑 [4，3-a]吡啶 -3-硫酚 （28 mg， 0.12 mmol),化合物 (9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -4(3H)-基) (环丙基)甲酮 （34 mg _: 0.10 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （6.0 mg， 0.011 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二 甲基氧杂蒽 (12 mg, 0.022 mmol)和叔丁醇钾 (23.0 mg， 0.21 mmol)溶于无水 N，N-二甲 基甲酰胺中 （10 mL) o 在氮气保护下， 反应升温至 100 oC 并搅拌反应 36小时。 旋干反应液， 残留物经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =20: 1， v/v)分离得到环丙基 (9-((6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c] 喹啉 -4(3H)-基)甲酮 15 (6 mg， 淡黄色固体)， 收率 12%.

MS m/z (ESI): 484.1

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ) δ 9.02 (s， 1 H)， 8.23 (t， / = 1.3 Hz, 1 H)， 8.10 (d, / = 2.1 Hz, 1 H)， 7.93 (dd， / = 13.6, 9.1 Hz, 2 H)， 7.71 (s， 1 H)， 7.64 (s， 1 H)， 7.53 (ddd， / = 18.4, 9.1， 1.9 Hz, 2 H)， 4.57 (t， / = 4.6 Hz, 2 H)， 4.13 - 4.04 (m， 2 H)， 3.97 (s， 3 H)， 0.97 (dq, / = 7.3, 3.9 Hz, 2 H)， 0.93 - 0.82 (m， 3 H).

实施例十六

4-甲基 -9-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2H-「1,41氧

步骤一： 9-溴 -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3 4H 酮

50 mL反应瓶中加入 3-氨基 -6-溴 -喹啉 -4-酚 （300 mg, 1.3 mmol), 碳酸钾 (520 mg, 3.8 mmol),无水 N，N-二甲基甲酰胺 （7 mL), 室温搅拌 3分钟后， 缓慢滴加氯乙 酰氯 (160 mg， 1.3 mmol). 反应过夜， LC-MS监测原料转化完全， 停止反应。 将反 应液加入冰水中， 搅拌 10 分钟， 静置后布氏漏斗抽滤， 水洗， 干燥， 得浅紫色固 体 9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 (200 mg， 浅紫色固体)， 收率 57%.

MS m/z (ESI): 278.9

步骤二：9-溴 -4-甲基 -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3(4H)-酮 100 mL封管中加入 9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 （1.0 g， 3.6 mmol), 叔丁醇钠 C516 mg， 5.4 mmol), 无水 N，N-二甲基甲酰胺 （；20 mL)， 室温搅 拌 15分钟，加入碘甲烷 (560 mg， 3.9 mmol),有大量固体析出，室温反应过夜。 LC-MS 监测原料转化完全， 加入适量乙酸乙酯， 丙酮， 水， 乙醇析出固体， 抽滤得到浅 黄色粉末 (424 mg)， 母液浓縮重结晶一次得到 268mg黄色粉末， 共得到 9-溴 -4-甲 基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H 酮 （692 mg， 黄色粉末)， 收率 66%。

MS m/z (ESI): 292.9.

步骤三： 4-甲基 -9-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「U,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3(4H)-酮 16

25mL 单口瓶中加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-)-[1，2，4]噻唑 [4，3-a]吡啶 -3-硫酚 （44 mg， 0.19 mmol) 9-溴 -4-甲基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 （46 mg， 0.157 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯（10 mg， 0.016 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二 甲基氧杂蒽 (20 mg， 0.032 mmol), 无水 N，N-二甲基甲酰胺 (10 mL)， 抽换气， 氮气 保护， 室温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （20 mg， 0.188 mmol), 室 温搅拌 5分钟， 加热至 100°C， 反应 24小时。停止反应， 旋干 N，N-二甲基甲酰胺， 粗品经柱层析（二氯甲浣 /甲醇 =25: 1， v/v)分离得到 4-甲基 -9-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)- 酮 16 (12 mg， 淡黄色固体)， 收率 16%.

MS m/z (ESI): 444.1

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ) δ 8.56 (s, 1 H)， 8.16 - 8.12 (m， 1 H)， 7.94 - 7.90 (m，

1 H)， 7.87 - 7.79 (m， 2 H)， 7.61 (d， / = 0.8 Hz, 1 H)， 7.56 (d, / = 0.9 Hz, 1 H)， 7.41 (ddd _: / = 9.0， 2.9, 1.9 Hz, 2 H), 7.20 (s, 1 H), 4.80 (s, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H).

实施例十七

4-(4— (环丙基甲氧基) -6-((6-ί1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫

步骤一: 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 （5.00 g， 13.57 mmol), 吗啡啉 （1.42 g， 16.29 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （1.24 g， 1.36 mmol)和 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 （1.57 g， 2.71 mmol) 溶在无水 N， N二甲基甲酰胺 (90 mL)中， 在氮气保护下， 反应温度升至 35 °C并搅拌 1小时。 然后往里加入叔丁醇钠 (1.56 g， 1.629 mmol), 体系在此温度下继续反应 16小时。减压浓縮干， 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥。 过滤，浓縮干，粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =100: 1， v/v)分离，打浆，过滤得到 4-(6- 溴 -4- (环丙基甲氧基)喹啉 -3-基)吗啉 （2.5 g， 白色固体)， 收率 56%. MS m/z (ESI): 326.9.

步骤二: 4-(6-溴 -4- (环丙基甲氧基)喹啉 -3-基)吗啉

25mL 封管中加入化合物 4-(6-溴 -4- (环丙基甲氧基)喹啉 -3-基)吗啉 (100 mg, 0.31 mmol)环丙基甲醇 (8 mL)和甲醇钠 (81 mg， 1.5 mmol). 反应升温至 120 °C， 反 应 12小时后， 降至室温。 减压蒸馏蒸除多余的环丙基甲醇， 残留物用制备板分离 (石油醚： 乙酸乙酯 =5:1)， 得到 4-(6-溴 -4- (环丙基甲氧基)喹啉 -3-基)吗啉 (65 mg， 淡 黄色固体)， 收率 58%.

MS m/z (ESI): 363.0.

步骤三： 4- 4- (环丙基甲氧基 )-6-(ϊ6-Π -甲基 - 1H-吡唑 -4-基) -「 1 ,2,41三唑并「4,3-al 吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)吗啉 (17)

25 mL单口瓶中加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (42 mg, 0.182 mmol), 4-(6-溴 -4- (环丙基甲氧基)喹啉 -3-基)吗啉 (60 mg, 0.166 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （10 mg， 0.017 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (20 mg, 0.034 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （；10 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室温搅 拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （24 mg， 0.249 mmol), 室温搅拌 5分钟， 加热至 100°C， 反应 16小时。 停止反应， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 粗品经制备板 分离 (二氯甲浣 /甲醇 =20:1， v/v)分离得到 4-(4- (环丙基甲氧基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡 唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)吗啉 17 (46 mg, 淡黄色固 体)， 收率 49%.

MS m/z (ESI): 514.2

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ) δ 8.65 (s， 1 H)， 8.20 (s， 1 H)， 7.99 (d， / = 11.9 Hz, 2 H)， 7.89 (d， / = 9.4 Hz, 1 H)， 7.67 (s， 1H), 7.60 (s， 1 H)， 7.47 (t， / = 10.7 Hz, 2 H)， 4.07 (d, / = 7.3 Hz, 2 H)， 3.95 (s, 3 H)， 3.91 - 3.84 (m， 4 H)， 3.26 - 3.19 (m， 4 H)， 1.08 (dd， J = 10.1， 5.5 Hz, 1 H)， 0.50 (d, / = 7.4 Hz, 2 H)， 0.17 (d, /= 7.0, 6.2 Hz, 2 H).

实施例十八

9-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2H-「1,41氧杂联氮 基「3,2-cl喹啉 -3 4H 酮 (18)

25mL单口瓶中加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (51 mg, 0.22 mmol) 9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 （55 mg, 0.2 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （12 mg， 0.02 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 C24 mg， 0.04 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （；5 mL)， 抽换气， 氮气保护， 室 温搅拌 5分钟， 直至固体溶解。 加入叔丁醇钠 （39 mg， 0.4 mmol), 室温搅拌 5 分 钟， 加热至 100°C， 反应 16小时。 停止反应， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 粗品经柱 层析 （二氯甲烷 /甲醇 =20:1， v/v) 分离得到黄色固体 9- 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4- 基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 18 (34 mg, 黄色固体)， 收率 37%.

MS m/z (ESI): 430.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ ) δ 11.09 (d, / = 10.6 Hz, 1 H)， 8.64 (s， 1 H)， 8.46 (s 1 H)， 8.35 (s， 1 H), 8.11 - 7.95 (m， 2 H)， 7.97 - 7.76 (m， 3 H)， 7.47 (dd， / = 9.0， 2.1 Hz, 1 H)， 4.87 (s, 2 H)， 3.86 (s, 3 H).

实施例十九

9-((8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2H-「1,41氧杂 联氮基「3,2-cl喹啉 -3 4H 酮 (19)

30mL微波管中依次加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 （118 mg, 0.516 mmol), 9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 （120 mg 0.430 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯（25 mg, 0.043 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二 甲基氧杂蒽 (50 mg, 0.086 mmol), 叔丁醇钠 （50 mg, 0.516 mmol)和无水 N， N二甲 基甲酰胺 （5 mL). 氮气扫吹， 微波加热至 120°C反应 4个小时. 反应结束后， 旋干 N，N二甲基甲酰胺，反相柱层析分离，得到 9-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4] 三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 19(6 mg, 白色固体)， 收率 3%.

MS m/z (ESI): 448.1.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ ) δ 11.09 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.38

(s, 1 H)， 8.08 (s, 1 H)， 7.92 (d, / = 2.1 Hz， 1 H)， 7.86 (dd， J = 10.6， 8.2 Hz, 2 H)， 7.49 (dd， /= 9.1， 2.1 Hz, 1 H)， 4.89 (s, 2 H)， 3.86 (s, 3 H).

实施例二十

4- 2-甲氧基乙基) -9-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫

步骤一: 9-溴 -4- 2-甲氧基乙基) -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3(4H)-酮

25mL单口烧瓶中， 加入无水 N，N二甲基甲酰胺 （5 mL)后， 加入化合物 9-溴 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 (100 mg, 0.358 mmol), 叔丁醇钠 (50 mg, 0.534 mmol)， 室温搅拌 15分钟后， 加入 1-溴 -2-甲氧基乙烷 (65 mg， 0.465 mmol), 室温反应 4小时后， 蒸干 N，N二甲基甲酰胺， 残留固体制备板分离 (石油醚： 乙酸 乙酯 =7:1) 得到化合物 9-溴 -4-(2-甲氧基乙基) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2- _C ]喹啉 -3(4H)-酮 (56 mg), 收率 46%.

MS m/z (ESI): 337.0.

步骤二： 4- 2-甲氧基乙基 )-9-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「U,41三唑并「4,3-al吡 啶 -3-基)硫代) -2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3(4H)-酮 20

30mL微波管中依次加入 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 28d (50 mg, 0.216 mmol), 9-溴 -4-(2-甲氧基乙基) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹 啉 -3(4H)-酮 （56 mg, 0.166 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （10 mg, 0.017 mmol), 4,5- 双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (20 mg， 0.034 mmol), 叔丁醇钠 （25 mg， 0.249 mmol) 和无水 N， N二甲基甲酰胺 (5mL). 氮气扫吹， 微波加热至 120°C反应 2.5个小时。 反应结束后， 旋干 N， N 二甲基甲酰胺， 反相柱层析分离， 得到 4-(2-甲氧基乙 基) -9-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2H-[1，4]氧杂 联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 20 (20 mg, 白色固体） 收率 24%.

MS m/z (ESI): 488.1.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ ) δ 8.90 (s， 1 H)， 8.70 - 8.62 (m， 1 H)， 8.35 (s， 1 H)， 8.10 - 7.98 (m， 2 H)， 7.95 - 7.79 (m， 3 H)， 7.50 (dd， / = 9.0， 2.1 Hz, 1 H)， 4.96 (s， 2 H)， 4.25 (t， / = 5.4 Hz, 2 H)， 3.86 (s, 3 H)， 3.57 (t， / = 5.4 Hz, 2 H)， 3.39 (d, / = 11.4 Hz, 1 H)， 3.21 (s, 3 H).

实施例二 ^一

9-((8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -4-(2-甲氧基 乙基 2H-「1,41氧杂联氮基「3,2-cl喹啉 -3 4H 酮 (21)

30mL微波管中依次加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡 啶 -3-硫醇 （75 mg, 0.299 mmol), 9-溴 -4-(2-甲氧基乙基) -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c] 喹啉 -3(4H)-酮 （84 mg, 0.249 mmol),三 (二亚苄基丙酮)二钯 （15 mg, 0.025 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (30 mg, 0.05 mmol), 叔丁醇钠 （30 mg, 0.299 mmol)和无水 N，N二甲基甲酰胺 (5 mL). 氮气扫吹，微波加热至 120°C反应 4个小 时。 反应结束后， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 反相柱层析分离， 得到 9-((8-氟 -6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-(2-甲氧基乙基) -2H- [1,4] 氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)-酮 21(20 mg， 白色固体)， 收率 15%.

MS m/z (ESI): 506.1.

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ) δ 8.91 (s, 1 H)， 8.08 - 7.98 (m， 2 H)， 7.93 (d， J = 8.9 Hz, 1 H)， 7.67 (s, 1 H)， 7.61 (s, 1 H)， 7.50 (dd, / = 8.9， 2.1 Hz, 1 H)， 7.17 (d, / = 10.3 Hz, 1 H)， 4.87 (s, 2 H)， 4.23 (t, / = 5.2 Hz, 2 H)， 3.95 (s, 3 H)， 3.70 (t， / = 5.2 Hz, 2 H)， 3.33 (s, 3 H). 实施例二十二

9-(ϊ8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「U,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代 4-甲基

30 mL微波管中依次加入 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡 啶 -3-硫醇 （93 mg， 0.375 mmol), 9-溴 -4-甲基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c]喹啉 -3(4H)- 酮 （100 mg， 0.341 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （20 mg， 0.034 mmol), 4,5-双二 苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (40 mg， 0.068 mmol), 叔丁醇钠 （40 mg， 0.409 mmol)和无 水 N，N二甲基甲酰胺 （5 mL)。 氮气扫吹， 微波加热至 120°C反应 4个小时。 反应 结束后， 旋干 N，N二甲基甲酰胺， 反相柱层析分离， 得到 9-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H- 吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-甲基 -2H-[1，4]氧杂联氮基 [3，2-c] 喹啉 -3(4H)-酮 22 (36 mg， 白色固体)， 收率 23%。

MS m/z (ESI): 462.1.

1H NMR (400 M， DMSO-Je, ppm) δ 8.82 (s, 1 H)， 8.57 (s, 1H), 8.38 (s, 1 H)， 8.08 (s， 1 H)， 7.97 (s, 1 H)， 7.91 (d， / = 9.2 Hz, 1 H)， 7.85 (d, / = 12.0 Hz, 1 H)， 7.52 (d, / = 9.6 Hz, 1 H)， 4.98 (s, 2 H)， 3.86 (s, 3 H)， 3.43 (s, 3 H).

实施例二十三

2-环丙基 -8-「(6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑「4,3-al吡啶 -3-基) -硫代 1噻唑「4,5-c

步骤一: N-(6-溴 4-羟基喹啉) -3-环丙酰胺 23c

5m反应瓶中加入 3-氨基 -6-溴喹啉 -4-酚 15b (200 mg， 0.84 mmol),三乙胺 （214 mg， 2.1 mmol), 无水二氯甲烷 C20 mL)， 零下 30 ^Q C搅拌下， 滴加环丙基酰氯 （79 mg， 0.75 mmol), 在零下 30 ^Q C下反应 30分钟， 然后室温反应过夜， LC-MS监测 原料转化完全， 停止反应。 过滤， 固体用二氯甲烷洗涤， 空气中干燥， 得 N-(6-溴 -4-羟基喹啉) -3-环丙酰胺 （100 mg， 黑色固体)， 收率 34%.

MS m/z (ESI): 307, 309.

1H-NMR (DMSO, 400 MHz): δ 12.10 (s, 1 H)， 9.57 (s, 1 H)， 8.96 (s, 1 H)， 8.27 (d， J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.77 (dd， /= 2.0, 8.8 Hz, 1 H)， 7.57 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 2.19-2.26 (m， 1 H)， 0.76-0.79 (m， 4 H).

步骤二： 8-溴 -2-环丙基噻唑「4,5-c|喹啉 23d 50mL反应瓶中加入 N-(6-溴 4-羟基喹啉) -3-环丙酰胺 (0.15 g， 0.49 mmol),五硫 化二磷 （0.22 g， 0.98 mmol), 无水吡啶 (；5 mL)， 回流两小时。 LC-MS监测原料转化 完全， 旋干， 残留物加入乙酸乙酯溶解 （40 mL)， 加入饱和碳酸氢钠溶液调节 pH 值到 9， 分液， 有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤， 盐水洗涤， 有机相干燥， 过 滤， 旋干，粗产物用大板分离（石油醚:乙酸乙酯 = 3: 1 )得 8-溴 -2-环丙基噻唑 [4,5-c] 喹啉 （90 mg， 白色固体)， 收率 60%.

MS m/z (ESI): 305 , 307.

1H-NMR (CDCls, 400MHz): δ 9.23 (s, 1 H)， 8.00-8.02 (m， 2 H)， 7.70 (dd， J= 2.0, 8.8 Hz, 1 H)， 2.47-2.54 (m， 1 H)， 1.34-1.36 (m， 4 H)。

步骤三： 2-环丙基 -8-「(6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑「4,3-al吡啶 -3-基) -硫 代 1噻唑「4,5-c|喹啉 23

lOOmL 三口烧瓶中加入 8-溴 -2-环丙基噻唑 [4，5-c]喹啉 （0.04 g， 0.13 mmol), 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-)-[1，2，4]噻唑 [4，3-a]吡啶 -3-硫酚 (0.03 g， 0.13 mmol), 三 (二亚苄 基丙酮)二钯（0.024 g， 0.026 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 （0.015 g， 0.026 mmol), 叔丁醇钠 （0.016 g， 0.17 mmol)，无水无水 N， N二甲基甲酰胺 （4 mL)， 抽换气三次， 氮气保护， 加热至 100°C， 反应过夜。 LC-MS监测原料原料转化完 全， 停止反应， 硅藻土过滤， 乙酸乙酯洗涤 (30 mL), 有机相用盐水洗涤， 干燥， 过滤，旋干，粗产物用反相色谱分离得 2-环丙基 -8-[(6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4] 三唑 [4，3-a]吡啶 -3-基) -硫代]噻唑 [4，5-c]喹啉 23 (15 mg, 淡黄色固体)， 收率 25%.

MS m/z (ESI): 456;

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): δ 9.31 (s， 1 H)， 8.23 (s， 1 H)， 8.17 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.88-7.91 (m， 2 H)， 7.69 (s， 1 H)， 7.60 (s， 1 H)， 7.56 (dd， J = 1.6， 8.8 Hz, 1 H)， 7.49 (dd， J = 1.6， 8.8 Hz, 1 H)， 3.94 (s, 3 H)， 2.45-2.51 (m， 1 H)， 1.31-1.35 (m， 4 H)。

实施例二十四

2-环丙基 -8-「ί8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 41三唑「4,3-al吡啶 -3-基 硫代 1噻唑

lOOmL三口烧瓶中加入 8-溴 -2-环丙基噻唑 [4，5-c]喹啉 （0.055 g， 0.18 mmol), 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-)-[1，2，4]噻唑 [4，3-a]吡啶 -3-硫酚 （0.05 g， 0.20 mmol), 三 (二亚 苄基丙酮)二钯（0.016 g， 0.018 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 （0.021 g， 0.036 mmol), 叔丁醇钠 （0.021 g， 0.22 mmol), 无水 N， N二甲基甲酰胺 (5 mL)， 抽 换气三次， 氮气保护， 加热至 100°C， 反应 4小时。 LC-MS监测原料原料转化完 全， 停止反应， 硅藻土过滤， 乙酸乙酯洗涤 (30mL)， 有机相用盐水洗涤， 干燥， 过 滤， 旋干， 粗产物用反相色谱分离得 2-环丙基 -8-[(8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4- 基 )-[1，2，4]三唑 [4，3-a]吡啶 -3-基) -硫代]噻唑 [4，5-c]喹啉 24 (10 mg， 白色固体)， 收率 12%。

MS m/z (ESI): 474[M+H+],

1H-NMR (CDCls, 400MHz): δ 9.32 (s， 1 H)， 8.13 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 8.08 (s， 1 H) 7.91 (s, 1 H)， 7.67 (s, 1 H)， 7.60 (s, 1 H)， 7.57 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.18 (d, / = 10.4 Hz, 1 H)， 3.95 (s, 3 H)， 2.46-2.51 (m， 1 H)， 1.31-1.35 (m， 4 H).

实施例二十五

3-甲基—8-「(6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「U,41三唑「4,3-al吡啶 -3-基 硫代 1噁唑「4,5-cl

步骤一： 8-溴噁唑「4,5-cl喹啉 -2( H)-酮 25b

50 mL单口瓶中加入 3-氨基 -6-溴喹啉 -4-酚 (0.5 g， 2.09 mmol), Ν,Ν'-羰基二咪 唑 (0.51 g，3.14 mmol)， 四氢呋喃 （20 mL)， 氮气保护， 加热至回流， 反应 4 小时， 旋去溶剂， 残留物中加入乙酸乙酯 (30 mL)和稀盐酸 (2M， 15 mL)， 过滤， 固体在空 气中干燥， 得 8-溴噁唑 [4，5-c]喹啉 -2(3H)-酮 （0.4 g， 浅黄色固体)， 收率 72%。

MS m/z (ESI): 265, 267.

步骤二： 8-溴 -3-甲基噁唑「4,5-c|喹啉 -2( H)-酮 25c

50mL三口烧瓶中加入 8-溴噁唑 [4，5-c]喹啉 -2(3H)-酮 （0.10 g， 0.28 mmol), 无 水 N，N二甲基甲酰胺 （2 mL)，氮气保护，冰浴下搅拌，氢化钠 (60%矿物油， 0.023 g， 0.57 mmol)加入到反应体系中， 反应半小时， 碘甲烷 C0.081g， 0.57 mmol)加入到 反应体系中， 室温反应两小时， LC-MS监测反应完成， 停止反应， 加入乙酸乙酯 (40 mL)过滤， 滤液用盐水洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 旋干， 粗产物 用大板分离 (石油醚 /乙酸乙酯 = 1/1) 得 8-溴 -3-甲基噁唑 [4，5-c]喹啉 -2(3H)-酮 （50 mg， 淡黄色固体)， 产率， 48%.

MS m/z (ESI): 279, 281.

1H-NMR (CDCI3, 400MHz): δ 8.75 (s, 1 Η)， 8.20 (s, 1 Η)， 8.00 (d， J= 8.8 Hz, 1 H) _: 7.74 (d, J= 8.8 Hz, 1 H)， 3.61 (s, 1 H).

步骤三： 3-甲基 -8-「(6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑「4,3-al吡啶 -3-基) -硫 代 1噁唑「4,5-c|喹啉 -2( 氢) -酮 (25)

10mL三口烧瓶中加入 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫 醇 (0.041 g， 0.18 mmol) 8-溴 -3-甲基噁唑并 [4，5-c]喹啉 -2(3H)-酮 (0.05 g， 0.18 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯（0.016 g， 0.018 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 (0.021 g， 0.036 mmol), 叔丁醇钠 (0.026 g， 0.27 mmol), 无水 N， N二甲基甲 酰胺 （3 mL), 抽换气三次， 氮气保护， 加热至 100°C， 反应 2小时. LC-MS监测原 料原料转化完全， 停止反应， 硅藻土过滤， 乙酸乙酯洗涤 (30 mL), 有机相用盐水洗 涤， 干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用反相色谱分离得 3-甲基 -8-[(6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4- 基 HU，4]三唑 [4，3-a]吡啶 -3-基) -硫代]噁唑 [4，5-c]喹啉 -2(3氢) -酮 25 (5 mg， 白色固 体)， 收率 7%。

MS m/z (ESI): 430.

1H-NMR (CDCls, 400MHz): δ 8.69 (s， 1 H)， 8.22 (s， 1 H)， 8.02 (d， J = 8.8 Hz, 1 H) 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.85 (s， 1 H)， 7.69 (s， 1 H)， 7.64 (s， 1 H)， 7.49-7.53 (m， 2 H)， 3.95 (s, 3 H)， 3.57 (s, 3 H).

实施例二十六

4- (二氟甲氧基 )-3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )41 41三唑

步骤一： 6-溴 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基)喹啉 -4-酚 26c

30mL微波管中加入化合物 6-溴 -4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基)喹啉 (100 mg， 0.31 mmol), 氢氧化钾水溶液 (2M， 2 mL), 二甲基亚砜 （8 mL), 80°C下微波反应 1 小时， 冷却至室温， LCMS监测反应完成， 反应液用乙酸乙酯稀释， 加入稀盐酸调 节 pH 值至 6， 分液， 水相用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用大板分离 (石油醚 /乙酸乙酯= 1/1)得 6-溴 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基) 喹啉 -4-酚 （50 mg， 灰色固体)， 收率 53%。

MS m/z (ESI):304, 306[M+H+].

步骤二： 6-溴 -4- (二氟甲氧基) -3-ί 1 -甲基 - 1 H-吡唑 -5-基)喹啉 26d.

10mL微波管中加入化合物 6-溴 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基)喹啉 -4-酚（50 mg， 0.16 mmol), 氢氧化钾水溶液（；2 M， 1 mL), 乙腈（；3毫升)， 零下 20°C下搅拌， 然 后将溴二氟甲基磷酸二乙酯 (92 mg， 0.35 mmol)加入反应体系中， 然后室温反应过 夜， LCMS监测产物生成， 将乙腈旋干， 然后用乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 无水硫 酸钠干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用大板分离 (二氯甲浣 /甲醇 = 25/1) 得 6-溴 -4- (二氟 甲氧基 )-3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基)喹啉（15 mg， 白色固体)， 收率 13%。

MS m/z (ESI): 354, 356[M+H+].

步骤三： 4- (二氟甲氧基 )-3 -ί 1 -甲基 - 1 H-吡唑 -4-基 )-6-(ϊ6-ί 1 -甲基 - 1 Η-吡唑 -4- 基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 26

25mL 三口烧瓶中加入 6-溴 -4- (二氟甲氧基 )-3-(1-甲基 -1H-吡唑 -5-基）喹啉

(0.015 g， 0.04 mmol), 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (0.012 g， 0.05 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯（0.004 g， 0.004 mmol), 4,5-双二苯基 膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 （0.005 g， 0.008 mmol), 叔丁醇钠 （0.005 g， 0.05 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （3 mL)， 抽换气三次，氮气保护，加热至 85°C， 反应 14小时。 LC-MS监测原料转化完全， 停止反应， 硅藻土过滤， 乙酸乙酯洗涤 (30 mL)， 有机 相用盐水洗涤， 干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用反相色谱分离得 4- (二氟甲氧基 )-3-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫 代)喹啉 26 C5 mg， 白色固体)， 收率 24%。

MS m/z (ESI): 505.

1H-NMR (CDCls, 400 MHz): δ 9.03 (s, 1 H)， 8.21 (s, 1 H)， 8.03 (m， 2 H)， 7.95 (s, 1 H)， 7.90 (m， 2 H)， 7.68 (s, 1 H)， 7.61 (s, 1 H)， 7.57 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.50 (d， / = 8.8 Hz, 1 H) ， 6.29 (t， /= 7.4 Hz, 1 H)， 4.02 (s, 3 H)， 3.94 (s, 3 H)。

实施例二十七

N-甲基 -N-( -甲基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫

步骤一： 6-溴小甲基 -3-硝基喹啉 -4(1 H)-酮 27b

lOOmL三口烧瓶中加入化合物 6-溴 -3-硝基喹啉 -4-酚 (1.0 g， 3.7 mmol), 碳酸 钾（1.02 g， 7.4 mmol)乙腈 （50 mL)， 室温搅拌， 碘甲烷（2.64 g， 18.6 mmol)加入 反应体系中， 室温搅拌 14小时， LCMS监测产物生成， 盐水洗涤， 有机相干燥， 过滤， 旋干得 6-溴 -1-甲基 -3-硝基喹啉 -4(1H)-酮 27b， (600 mg， 黑色固体)， 收率 55%。 粗产物直接用于下一步反应. R _f : 0.55 (；二氯甲浣 /甲醇 = 20/1).

MS m/z (ESI): 283, 285[M+H+].

歩骤二： 3-氨基 -6-溴小甲基喹啉 -4ΠΗ)-酮 27c

lOOmL 单口瓶中加入化合物 6-溴 -1-甲基 -3-硝基喹啉 -4(1H)-酮 (0.6 g， 2.12 mmol), 加入甲醇 （20 mL), 在冰浴下加入水合肼 （0.63 g， 10.6 mmol), 搅拌， 加入 催化量的雷尼镍， 在室温下搅拌 1 小时， 点板监测， 反应结束后过滤， 滤饼用甲醇 洗涤三遍，有机相旋干得产物 3-氨基 -6-溴 -1-甲基喹啉 -4(1H)-酮 （0.5 g)，产率： 93% MS m/z (ESI): 253, 255.

步骤三： N-(6-溴小甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基)环丙甲酰胺 27d

50 mL反应瓶中加入 3-氨基 -6-溴 -1-甲基喹啉 -4(1H)-酮 （230 mg， 0.91 mmol), 三乙胺 （231 mg， 2.28 mmol), 无水二氯甲烷 （20 mL), 冰浴下搅拌， 然后滴加环丙 基酰氯 （105 mg， 1 mmol), 室温反应过夜， LC-MS监测原料转化完全， 停止反应. 旋干， 残留物用乙酸乙酯溶解， 饱和碳酸氢钠溶液洗涤， 盐水洗涤， 干燥， 过滤， 旋干， 得 N-(6-溴 -1-甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基)环丙甲酰胺 （145 mg， 黄色固 体)， 收率 50%。

MS m/z (ESI): 321, 323. 步骤四： N-(6-溴小甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基) -N-甲基环丙甲酰胺 27e 50mL三口烧瓶中加入 N-(6-溴 -1-甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基)环丙甲酰胺 (0.145 g， 0.45 mmol), 无水 N，N二甲基甲酰胺 （3 mL)， 氮气保护， 冰浴下搅拌， 氢化钠 C60% 矿物油中， 0.034 g， 0.86 mmol) 加入到反应体系中， 反应半小时， 碘 甲烷 （0.122 g， 0.86 mmol) 加入到反应体系中， 室温反应 14小时， LC-MS监测 反应完成， 停止反应， 加入乙酸乙酯 (40 mL)盐水洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用大板分 (石油醚 /乙酸乙酯 = 1/1), 得 N-(6-溴 -1-甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基) -N-甲基环丙甲酰胺 （70 mg， 白色固体)， 产率， 46%。

MS m/z (ESI): 279, 281.

歩骤五： N-甲基 -Ν-Π-甲基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「U,41三唑并「4,3-al 吡啶 -3-基)硫代) -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基)环丙甲酰胺 27

25mL三口烧瓶中加入 N-(6-溴小甲基 -4-羰基 -1,4-二氢喹啉 -3-基) -N-甲基环丙 甲酰胺 (0.040 g， 1.19 mmol), 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3- 硫醇 （0.028 g, 1.19 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 （0.011 g， 0.019 mmol), 4,5-双 二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (0.014 g， 0.038 mmol), 叔丁醇钠 （0.015 g， 1.55 mmol), 无水 N， N二甲基甲酰胺 （4 mL), 抽换气三次， 氮气保护， 加热至 100°C， 反应 14小时。 LC-MS监测原料原料转化完全， 停止反应， 硅藻土过滤， 乙酸乙酯洗涤 (30 mL)有机相用盐水洗涤， 干燥， 过滤， 旋干， 粗产物用反相色谱分离得 N-甲基 -N-(l-甲基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -4-羰 基 -1,4-二氢喹啉 -3-基)环丙甲酰胺 27 (8 mg， 白色固体)， 收率 15%。

MS m/z (ESI): 486.

1H-NMR (CDCls, 400M Hz): δ 8.70 (s, 1 H)， 8.29 (s, 1 H)， 7.87 (d， J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.71-7.77 (m， 4 H)， 7.52 (d, / = 9.2 Hz, 1 H)， 7.39 (d, / = 9.2 Hz, 1 H)， 3.99 (s， 3 H) 3.83 (s, 3 H)， 3.21 (s, 3 H)， 1.43 (m， 1 H)， 1.08 (m， 1 H)， 0.89-0.92 (m， 1 H)， 0.58-0.60 (m， 2 H).

实施例二十八

4-(4-氟 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「U,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基） 吗啡啉 (28)

步骤一 :2-氟 -5-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基)吡啶 28b

将化合物 5-溴 -2-氟吡啶 (10.0 g， 56.82 mmol), 化合物 1-甲基 -4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 (11.8 g， 56.82 mmol), [1，Γ-双- (二苯基磷)二茂铁] 二氯化钯 (4.6 g， 5.68 mmol)和碳酸钾 (23.5 g， 170.5 mmol)溶在 1,4-二氧六环 (120 mL) 和水 (30 mL)的混合溶剂， 加热到 75°C， 反应 4小时。冷却到室温， 反应液浓縮干， 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤。 有机相经干燥， 过滤后浓縮干。 粗品经柱层析 (石油醚 / 乙酸乙酯 =2: 1， v/v)后得到 2-氟 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) B比啶 （11.3 g， 白色固体)， 收率近 100%。

MS m/z (ESI): 178.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.47 (s， 1 H)， 8.23 (s， 1 H)， 8.15 (td， J = 8.4 Hz, / = 2.4 Hz, 1 H)， 7.95 (s, 1 H)， 7.19 (dd, / = 8.4， 2.8 Hz, 1 H)， 3.87 (s, 3 H).

步骤二： 2-肼基 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)口比啶 28c

在水合肼 C85%水溶液， 30 mL)中加入化合物 2-氟 -5-( 甲基 -1H-吡唑 -4-基)口比 啶 (11.3 g， 56.82 mmol), 此悬浮液加热至 100°C， 反应 3小时。 然后将体系冷却至 10 °C并有固体析出， 此固体用布氏漏斗过滤收集， 并用冷的乙醇洗涤， 经干燥后 得到 2-肼基 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) B比啶 （12.5 g， 白色的固体)， 收率近 100%。

MS m/z (ESI): 190.1

步骤三： 6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-硫醇 28d

将化合物 2-肼基 -5-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) B比啶 (9.30 g， 49.15 mmol)溶于乙醇

(100 mL), 在室温下， 往其中加入预先配好的氢氧化钾 (3.03 g， 54.16 mmol, 25 mL) 的水溶液。然后再缓慢往里滴加二硫化碳 (7.85 g， 103.2 mmol). 此黄色溶液在 65 °C 下反应 48小时。 反应液浓縮至小体积， 然后溶于 50 mL的氢氧化钠水溶液 (2 N) 中。 不溶的固体过滤除去， 滤液用 2 N的盐酸溶液酸化至 pH=4。 析出的固体经过 滤收集， 干燥后得到 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 （7.5 g， 黄色粉末)， 收率 96%。

MS m/z (ESI): 232.1 Ή NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 14.65 (s, 1 H)， 8.37 (s, 1 H)， 8.35 (s, 1 H)， 8.02 (s, 1 H)， 7.77 (d， / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.69 (d, /= 9.6 Hz, 1 H)， 3.89 (s, 3 H).

步骤四： 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉 28e

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 (5.00 g， 13.57 mmol), 吗啡啉 (1.42 g， 16.29 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (1.24 g， 1.36 mmol) 和 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (1.57 g, 2.71 mmol) 溶在无水 N， N-二甲基甲酰胺 (90 mL)， 在氮气保护下， 反应 温度升至 35 oC并搅拌 1小时。 然后往里加入叔丁醇钠 (1.56 g， 1.629 mmol), 体系 在此温度下继续反应 16 小时。 减压浓縮干， 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥。 过滤， 浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =100:1， v/v)分离， 打浆， 过滤得到 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉 （2.5 g， 白色固体)， 收率 56%。

MS m/z (ESI): 329.0

步骤五 :4-(6-溴 -4-氟喹啉 -3-基)吗啉 28f

将化合物 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉 (160 mg， 0.49 mmol)和氟化铯 （222 mg， 1.47 mmol)溶于无水二甲亚砜 (10 mL)， 体系在 100 °C下搅拌反应 6天。 当大部分 原料 (〜90%)转化为产品， 反应停止。 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥。 过滤， 浓 縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =100: 1， v/v)分离， 打浆， 过滤得到 4-(6-溴 -4- 氟喹啉 -3-基)吗啉 （80 mg， 白色固体)， 收率 53%。

MS m/z (ESI): 311.0

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.94 (d, / = 10.8 Hz, 1 H)， 8.23 (s， 1 H)， 7.99 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 3.85 (t， J = 4.8 Hz, 4 H)， 3.37 (t， J = 4.8 Hz, 4 H).

步骤六： 4-(4-氟 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代)喹啉 -3-基)吗啡啉 （28)

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (60 mg， 0.26 mmol), 化合物 4-(6-溴 -4-氟喹啉 -3-基)吗啉 （80 mg， 0.26 mmol) 三 (二亚苄基 丙酮)二钯 (24 mg， 0.026 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (30 mg， 0.052 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺 (133 mg， 1.04 mmol)溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 48小时。 减压浓縮干， 粗 品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 /氨水 =500: 10： 1， v/v/v) 分离得到黄色固体， 打浆， 过滤得到 4-(4-氟 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) 喹啉 -3-基)吗啡啉 28 (12 mg， 白色固体)， 收率 10%。

MS m/z (ESI): 462.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.79 (d, / = 10.8 Hz, 1 H)， 8.64 (s， 1 H)， 8.34 (s， 1 H)， 8.03 (s， 1 H)， 8.01 (d, J = 9.4 Hz, 1 H)， 7.92 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.82 (d， J = 9.4 Hz, 1 H)， 7.80 (d, J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.42 (dd， J = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.76 (t， J = 4.8 Hz, 4 H)， 3.26 (t， J = 4.8 Hz, 4 H).

实施例二十九 4-甲氧基 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉

(29)

步骤一： 6-溴 -4-甲氧基喹啉 29a

将 4-氯 -6-溴喹啉 (1.00 g， 4.124 mmol)和甲醇钠（1.11 g， 20.62 mmol)溶于甲醇

(15 mL)中， 在密闭体系中升温至 108 °C， 反应 16小时。 浓縮干， 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥。 过滤， 浓縮后经柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1， v/v)得到 6-溴 -4- 甲氧基喹啉 （872 mg， 淡黄色固体)， 收率 89%。

MS m/z (ESI): 238.0

步骤二： 4-甲氧基 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基) 硫代)喹啉 29

将化合物 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (100 mg， 0.43 mmol), 4-甲氧基 -6-溴喹啉 (103 mg， 0.43 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (40 mg， 0.043 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (50 mg， 0.086 mmol) 和 N， N-二异丙基乙胺 (223 mg， 1.73 mmol) 溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (2 mL). 在氮 气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二 氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离， 打浆， 过滤得到 4-甲氧基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 29 (70 mg， 白色固体)， 收率 42%。

MS m/z (ESI): 389.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.71 (d, / = 5.2 Hz, 1 H)， 8.65 (s， 1 H)，

8.35 (s, 1 H)， 8.06 (d， / = 2.0 Hz, 1 H)， 8.03 (s, 1 H)， 7.99 (d， / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.81 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.60 (dd， J = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 7.04 (d, J = 5.2 Hz, 1 H)， 4.00 (s, 3H), 3.86 (s, 3 H).

实施例三十

4-(6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基)

将化合物 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 Hl，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (80 mg， 0.35 mmol), 4-吗啡啉 -6-溴哇啉 (101 mg， 0.35 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (32 mg， 0.035 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (40 mg， 0.069 mmol)和 N， N- 二异丙基乙胺 C179 mg， 1.38 mmol) 溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (；2 mL). 在氮气 保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯 甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v)分离， 打浆， 过滤得到 4-(6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4] 三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基)吗啉 30 (71 mg， 白色固体)， 收率 46%。

MS m/z (ESI): 444.2

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.64-8.66 (m， 2 H)， 8.34 (s， 1 H)， 8.08 (d， J = 9.6 Hz, 1 H)， 8.02 (s， 1 H)， 7.95 (d, / = 9.2 Hz, 1 H)， 7.86 (d, / = 9.4 Hz, 1 H)， 7.68 (dd， / = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 7.37 (d， / = 2.4 Hz, 1 H)， 6.96 (d， / = 4.8 Hz, 1 H)， 3.84 (s， 3 H)， 3.56 (t, / = 4.0 Hz, 4 H)， 2.90 (t， / = 4.4 Hz, 4 H).

实施例三 ^一

9-((6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 ,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -2,3-二氢 -「1 ,41

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (80 mg， 0.35 mmol), 化合物 9-溴 -2,3-二氢 -[1，4]二噁英并 [2，3-c]喹啉 (92 mg， 0.35 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (32 mg， 0.035 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (40 mg， 0.069 mmol) 禾 B N， N-二异丙基乙胺（179 mg， 1.38 mmol) 溶于无水 N， N-二 甲基甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压 浓縮干，粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离，打浆，过滤得到 9-((6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -2,3-二氢 -[1，4]二噁英并 [2，3-c]喹啉 31 (12 mg， 白色固体)， 收率 8%。

MS m/z (ESI): 417.1

1H NMR (400 MHz, OMSO-d ₆ , ppm): δ 8.64 (s， 1 H)， 8.51 (s， 1 H)， 8.35 (s， 1 H)， 8.04 (s, 1 H)， 8.01 (d， / = 9.4 Hz, 1 H)， 7.86 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.82 (dd， / = 9.2， 1.6 Hz, 1 H)， 7.77 (d, J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.47 (dd， J = 8.8， 2.4 Hz, 1 H)， 4.49-4.51 (m， 2 H)， 4.37-4.39 (m, 2 H), 3.86 (s, 3 H).

实施例三十二

4-氯 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1 ,2,41三唑并「4,3-al （32 )

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (200 mg， 0.86 mmol), 4-氯 -6-溴喹啉 (210 mg， 0.86 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (79 mg， 0.086 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (100 mg， 0.17 mmol)和 N， N-二异 丙基乙胺 (447 mg， 3.46 mmol)溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (5 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲 醇 =20: 1， v/v) 分离， 打浆， 过滤得到 4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三 唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 32 (135 mg， 白色固体)， 收率 40%。

MS m/z (ESI): 393.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.81 (d， J = 4.8 Hz, 1 H)， 8.69 (s， 1 H)，

8.35 (s， 1 H)， 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 8.04 (s， 1 H)， 8.03 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 8.02 (d， / = 2.0 Hz, 1 H)， 7.85 (d， / = 9.4 Hz, 1 H)， 7.78 (d， / = 4.8 Hz, 1 H)， 7.63 (d， / = 9.0 Hz, 1 H)， 3.85 (s, 3 H).

实施例三十三

2-(Υ6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1 ,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基

步骤一： 2-(Y6-溴喹啉 -4-基)氧代)乙醇 34a

在氮气保护下， 将氢化钠 (；60%， 330 mg, 8.25 mmol)悬浮在无水 N， N-二甲基 甲酰胺 (15 mL)中并搅拌， 逐滴加入乙二醇 (1.28 g， 20.62 mmol). 在加入 4-氯 -6-溴 哇啉 （1.00 g， 4.12 mmol)之前， 反应继续搅拌 20分钟。 然后体系加热至 90 °C， 反应 16小时， 冷却， 减压浓縮干， 依次用 1 N氢氧化钠水溶液和盐水洗涤， 干燥。 过滤浓縮后经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: l , v/v) 分离得到 2-((6-溴喹啉 -4-基)氧代） 乙醇 （230 mg， 白色固体)， 收率 21%。

MS m/z (ESI): 268.0

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.75 (d， J = 52 Hz, 1 H)， 8.44 (s， 1 H)， 7.85-7.91 (m， 2 H)， 7.07 (d, / = 5.2 Hz, 1 H)， 5.16 (t， / = 5.8 Hz, 1 H)， 4.26 (t， / = 4.4 Hz, 2 H)， 3.85-3.89 (m， 2 H).

步骤二： 2-(ϊ6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1 ,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代） 喹啉 -4-基)氧代)乙醇 33

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (80 mg , 0.35 mmol), 化合物 2-((6-溴喹啉 -4-基)氧代）乙醇 (93 mg， 0.35 mmol),三 (二亚苄基 丙酮)二钯 (32 mg, 0.035 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (40 mg, 0.069 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺 (179 mg， 1.38 mmol)溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗 品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， 二氯甲浣 /丙酮 =8 : 1， v/v) 分离， 打浆， 过滤 得到 2-((6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基) 氧代)乙醇 33 (15 mg, 白色固体)， 收率 10%。

MS m/z (ESI): 419.1. Ή NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 8.70 (d， /= 5.2 Hz, 1 H)， 8.67 (s， 1 H)， 8.39 (s, 1 H)， 8.35 (s, 1 H)， 8.03 (s, 1 H)， 7.98 (d， /= 9.2 Hz, 1 H)， 7.87 (d， J= 8.8 Hz, 1 H)， 7.81 (d,/=9.2 Hz, 1 H)， 7.49 (d,/=8.8 Hz, 1 H)， 7.05 (d， /= 5.2 Hz, 1 H)， 5.13 (t， /= 5.8 Hz, 1 H)， 4.25 (t， /= 4.8 Hz, 2 H)， 3.87 (s， 3 H)， 3.83-3.86 (m， 2 H).

实施例三十四

2- (甲基 (6-(Y6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基)

将化合物 4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) 喹啉 （70mg， 0.18 mmol) 禾 B 2-甲氨基乙醇 (3 mL)置于封管中， 加热至 120°C， 反 应 16小时。 冷却， 减压浓縮干。 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离 得到 2- (甲基 (6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-基)氨基)乙醇 34C45mg， 淡黄色固体)， 收率 58%。

MS m/z (ESI): 432.2

1H NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 8.63 (s, 1 H)， 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 1 H)，

8.33 (s， 1 H)， 8.18 (s， 1 H)， 8.01 (s， 1 H)， 7.99 (d,/=9.6 Hz, 1 H)， 7.85 (d， J= 9.2 Hz, 1 H)， 7.81 (d,/=9.6 Hz, 1 H)， 7.53 (d,/=8.8 Hz, 1 H)， 6.91 (d, /= 5.2 Hz, 1 H)， 4.81 (t， J = 5.2 Hz, 1 H)， 3.86 (s, 3 H)， 3.56-3.58 (m， 2 H)， 3.23 (t, J = 5.6 Hz, 2 H)， 2.90 (s, 3 H).

实施例三十五

N- 2-甲氧基乙基 N-甲基 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「U,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-

将化合物 4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) 喹啉 （60mg， 0.153 mmol) 禾卩 2-甲氧基 -N-甲基乙胺 （2 mL) 置于封管中， 加热至 回流， 反应 16小时。 冷却， 减压浓縮干。 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v)分离得到 N-(2-甲氧基乙基) -N-甲基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -4-胺 35 (36 mg， 淡黄色固体)， 收率 53%。

MS m/z (ESI): 446.2.

1H NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 8.62 (s, 1 H)， 8.55 (d, J = 5.6 Hz, 1 H)，

8.33 (s, 1H)， 8.02 (d， /= 9.4 Hz, 1 H)， 8.00 (s, 1 H)， 7.95 (s, 1 H)， 7.88 (d,/= 8.8 Hz, 1 H)， 7.82 (d,/=9.4 Hz, 1 H)， 7.62 (d,/= 8.8 Hz, 1 H)， 6.93 (d,/=5.6 Hz, 1 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.43 (t， /= 5.2 Hz, 2 H)， 3.30-3.33 (m， 2H), 3.17(s, 3 H)， 2.91 (s， 3 H). 实施例三十六

4-氯 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 6-(Y6-n-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 41三唑并「4,3-al吡

步骤一： 4-氯 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑 并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 （36)

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (72 mg， 0.31 mmol), 化合物 6-溴 -4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 (100 mg， 0.31 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (28 mg， 0.031 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (36 mg， 0.062 mmol)禾 B N， N-二异丙基乙胺 (160 mg， 1.25 mmol)溶于无水 1， 4-二氧 六环 （2 mL)在氮气保护下， 反应升温至 85°C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: lv/v)分离， 打浆， 过滤得到 4-氯 -3-(1-甲基 -1H- 吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 (80mg, 白色固体)， 收率 54%。

MS m/z (ESI): 473.1

1H NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 9.10 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H)， 8.13 (s, 1 H)， 8.09 (d,/ = 2.0 Hz, 1 H)， 8.05 (s, 1 H)， 8.04 (d, / = 6.4 Hz, 1 H)， 8.01 (d， / = 6.4 Hz, 1 H)， 7.85 (dd， / = 9.6， 1.6 Hz, 1 H)， 7.56 (dd， / = 9.2， 1.6 Hz, 1 H)， 3.95 (s, 3 H)， 3.85 (s, 3 H).

实施例三十七

4-甲氧基 -3-d-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-a—

将化合物 4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三 唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 (65 mg， 0.14 mmol), 甲醇钠 (37 mg， 0.69 mmol)和 甲醇 (2 mL) 置于封管中， 加热至 112 °C， 反应 16小时。 冷却， 减压浓縮干。 粗品 经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离和重结晶得到 4-甲氧基 -3-G-甲基 -1H- 吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 37 (41 mg, 白色固体)， 收率 64%。

MS m/z (ESI): 469.2.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 9.16 (s, 1 H), 8.70 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H)， 8.10 (s, 1 H)， 8.05 (s, 1 H)， 8.03 (d， / = 9.4 Hz, 1 H)， 7.96 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.84 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.52 (dd， J = 8.8， 2.0 Hz, 1 H) 3.93 (s, 3 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.73 (s, 3 H).

实施例三十八

4-甲氧基 -6-(Y8-甲氧基 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代)—3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （38)

将化合物 4-氯 -6-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基) 硫代) -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 (65 mg， 0.13 mmol)甲醇钠 (36 mg， 0.66 mmol) 和甲醇 （5 mL) 置于封管中， 加热至 100 °C， 反应 16小时。 冷却， 减压浓縮干。 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离，打浆，过滤后得到 4-甲氧基 -6-((8- 甲氧基 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 38 (30 mg， 白色固体)， 收率 45%。

MS m/z (ESI): 499.2.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 9.16 (s, 1 H)， 8.37 (s, 2 H)， 8.31 (s, 1 H)， 8.10 (s， 1 H)， 8.05 (s， 1 H)， 7.96 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.94 (s， 1 H)， 7.49 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.15 (s， 1 H)， 4.11 (s， 3 H)， 3.93 (s， 3 H)， 3.85 (s， 3 H)， 3.75 (s， 3 H).

实施例三十九

4- 4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉

步骤一 :4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗啉 39a

将化合物 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉 (83 mg， 0.25 mmo)和甲醇钠 (68 mg， 1.27 mmol)溶于甲醇 （5 mL) 中， 体系加热至 65°C， 反应 16小时。 冷却， 减压浓縮干。 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20: 1， v/v)分离得到 4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗 啉 （32 mg， 白色固体)， 收率 39%。

MS m/z (ESI): 323.0

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.79 (s, 1 H)， 8.20 (s, 1 H)， 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.72 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 4.04 (s, 3 H)， 3.83 (t， / = 4.8 Hz, 4 H)， 3.23 (t， J = 4.8 Hz, 4 H).

步骤二： 4- 4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3- 基)硫代)喹啉 -3-基)吗啡啉 （39)

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (33 mg， 0.14 mmol), 化合物 4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基)吗啉（46 mg， 0.14 mmol), 三 (二亚 苄基丙酮)二钯 (13 mg， 0.014 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (16 mg， 0.029 mmol) 禾 B N， N-二异丙基乙胺 (74 mg， 0.57 mmol) 溶于无水 N， N-二甲基甲 酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 110 °C， 搅拌反应 56小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25: 1， 二氯甲浣 /丙酮 =5: 1， v/v) 分离， 打浆， 过 滤得到 4-(4-甲氧基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫 代)喹啉 -3-基)吗啡啉 39 C12mg， 白色固体)， 收率 18%。

MS m/z (ESI): 474.2

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.61 (s, 1 H)， 8.13 (s, 1 H)， 8.07 (s, 1 H)， 8.01 (s, 1 H)， 7.83 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.62 (s， 1 H)， 7.55 (s， 1 H)， 7.41-7.45 (m， 2 H)， 4.04 (s, 3 H)， 3.88 (s, 3 H)， 3.84 (t， / = 4.8 Hz, 4 H)， 3.14 (t， / = 4.8 Hz, 4 H).

实施例四十

6-((8-氟 -6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) -4-甲氧基

步骤一： 6-溴 -4-甲氧基 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 40a

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （50 mg， 0.16 mmol) 和甲醇 钠 (42 mg， 0.77 mmol) 溶于甲醇 (2 mL) 中， 体系加热至 65 °C， 反应 16小时。 冷 却， 减压浓縮干。 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =20: 1， v/v) 分离得到 6-溴 -4-甲 氧基 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （83 mg， 棕色固体） 直接用于下一步.

MS m/z (ESI): 318.0

步骤二： 6-(ϊ8-氟 -6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代) -4-甲氧基 -3-( -甲基 - 1 H-吡唑 -4-基)喹啉 40

将化合物 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (65 mg， 0.26 mmol) 化合物 6-溴 -4-甲氧基 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 （83 mg， 0.26 mmol)， 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (24 mg， 0.026 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽 (30 mg， 0.052 mmol) 禾 B N， N-二异丙基乙胺 （135 mg， 1.04 mmol) 溶于无水 1， 4-二氧六环 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 85 °C， 搅拌反应 16小时。减压 浓縮干， 粗品经两次柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25: 1， v/v)分离， 得到固体再经反相 柱分离得到 6-((8-氟 -6-( 1 -甲基 - 1 H-吡唑 -4-基) - [ 1，2,4]三唑并 [4，3 -a]吡啶 -3 -基)硫 代) -4-甲氧基 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 40 (3 mg， 白色固体).

MS m/z (ESI): 487.2

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 9.23 (s, 1 H)， 8.68 (s, 1 H)， 8.44 (s, 2 H)， 8.16 (s， 1 H)， 8.14 (s， 1 H)， 8.13 (s, 1 H)， 8.01 (d，/ = 8.8 Hz， 1 H), 7.92 (d, / = 12 Hz, 1 H)， 7.60 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 3.99 (s， 3 H)， 3.90 (s， 3 H)， 3.84 (s， 3 H).

实施例四 ^一 4-氟 -3-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡

-3-基)硫代)喹啉 （4

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (76 mg， 0.33 mmol), 化合物 6-溴 -4-氟 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)喹啉 (100 mg， 0.33 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (30 mg， 0.033 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (38 mg， 0.066 mmol) 禾 B N， N-二异丙基乙胺（169 mg， 1.31 mmol)溶于无水 N， N-二甲 基甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓 縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离， 得到固体再经反相柱分离 得到 4-氟 -3-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a: 吡啶 -3-基)硫代)喹啉 41 C30 mg， 淡黄色固体)， 收率 20%。

MS m/z (ESI): 457.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 9.26 (d, / = 10.0 Hz, 1 H)， 8.68 (s， 1 H)， 8.41 (s, 1 H)， 8.36 (s, 1 H)， 8.12 (s, 1 H)， 7.99-8.05(m, 3 H)， 7.93 (s, 1 H)， 7.84 (d, / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.56 (d, / = 9.0 Hz, 1 H)， 3.94 (s, 3 H)， 3.85 (s, 3 H).

实施例四十二

4-(4-氟 -6-(Y8-氟 -6-il-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉

将化合物 8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (55 mg， 0.22 mmol), 化合物 4-(6-溴 -4-氟喹啉 -3-基)吗啉 (69 mg， 0.22mmol), 三 (二亚 苄基丙酮)二钯 (20 mg， 0.022 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (26 mg， 0.044 mmol) 和 N， N-二异丙基乙胺 （114 mg， 0.88 mmol) 溶于无水 N， N-二甲基 甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 100 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮 干， 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离， 得到的固体再经反相柱分离 得到 4-(4-氟 -6-((8-氟 -6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代) 喹啉 -3-基)吗啉 42 (1.5 mg， 白色固体).

MS m/z (ESI): 480.1.

1H NMR (400 MHz, CDC1 ₃ ， ppm): δ 8.61 (d, / = 10.4 Hz, 1 H)， 7.98 (s， 1 H)， 7.86 (s, 2 H)， 7.60 (s, 1 H)， 7.54 (s, 1 H)， 7.38 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.11 (d, J = 10.4 Hz, 1 H) 3.89 (s, 3 H)， 3.83 (t， / = 4.4 Hz, 4 H)， 3.23 (t， /= 4.4 Hz, 4 H).

实施例四十 (4-氯 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-

步骤一： 二乙基 2-W4-溴苯基)氨基)亚甲基)丙二酸酯 43a

将 4-溴苯胺 (50 g， 290.7 mmol)和化合物二乙基 2- (乙氧基亚甲基)丙二酸酯 (63.5 g, 293.7 mmol)置于 500 mL圆底烧瓶中， 升温至 90 °C反应 5小时。 缓慢加 入 200 mL乙醇， 冷却至室温。 析出的固体经过滤收集， 并用冷的乙醇洗涤， 干燥 后得到二乙基 2-(((4-溴苯基)氨基)亚甲基)丙二酸酯 （85.7 g， 白色固体)， 收率 86%。

MS m/z (ESI): 342.0

步骤二：乙基 6-溴 -4-羟基喹啉 -3-羧酸酯 43b

将化合物二乙基 2-(((4-溴苯基)氨基)亚甲基)丙二酸酯 44a (85.7 g， 250.0 mmol) 分批加入热的二苯醚 (130 mL)中， 待加料完毕， 温度升至 232 °C， 反应 5小时。 然 后将温度降至 100 °C， 缓慢加入 200 mL乙醇， 继续在此温度下搅拌约 10分钟， 冷却至室温后， 将固体过滤收集， 乙醚洗涤， 干燥后得到乙基 6-溴 -4-羟基喹啉 -3- 羧酸酯 （59.6 g， 白色固体)， 收率 80%。

MS m/z (ESI): 296.0

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 12.47 (s, 1 H)， 8.60 (s, 1 H)， 8.23 (s, 1 H)， 7.87 (dd， / = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 7.61 (d， / = 8.4 Hz, 1 H)， 4.23 (q， 2 H)， 1.28 (t, / = 7.2 Hz, 3 H).

步骤三： 6-溴 -4-羟基喹啉 -3-羧酸 43c

将化合物乙基 6-溴 -4-羟基喹啉 -3-羧酸酯 (59.6 g， 201.0 mmol)分散在乙醇 (600 mL)中， 加入氢氧化钠 (24.1 g， 604.0 mmol)的水 (200 mL)溶液， 体系温度升到 50 °C 反应 5小时， 冷却至室温后， 将不溶固体过滤除去， 滤液用 3 N的盐酸中和， 固体经 过滤收集， 水洗涤， 干燥后得到 6-溴 -4-羟基喹啉 -3-羧酸 (52.8 g， 白色固体)， 收率 98%。

MS m/z (ESI): 368.0

步骤四： 6-溴 -4-氯喹啉 -3-羰基氯化 43d

将化合物 6-溴 -4-羟基喹啉 -3-羧酸 (1.00 g， 3.730 mmol)置于三氯氧磷 (20 mL) 中， 加热至 100 °C反应 16小时。 减压蒸馏， 除去多余的三氯氧磷， 残液再用甲苯 共沸带走少量的三氯氧磷。 粗品 6-溴 -4-氯喹啉 -3-羰基氯化直接下一步反应。 步骤五：（6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) (吗啉代)甲酮 43e

将吗啡啉 (488 mg， 5.61 mmol)和三乙胺 (1.13 g， 11.21 mmol)溶于二氯甲烷 (30 mL)中，然后在 0°C下分批加入化合物 6-溴 -4-氯喹啉 -3-羰基氯化 (1.14 g， 3.74 mmol), 待加料完毕， 继续在此温度下反应 2 小时。 反应液浓縮至小体积， 固体经过滤收 集， 水洗干燥后得到 (6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) (吗啉代)甲酮 （508 mg， 黄色固体)， 收率 38%。

MS m/z (ESI): 357.0

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.91 (s, 1 H)， 8.43 (s, 1 H)， 8.09 (s, 2 H)， 3.69-3.76 (m， 4 H)， 3.53-3.57 (m， 2 H)， 3.24-3.26 (m， 2 H).

步骤六： （4-氯 -6-(ϊ6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代) 喹啉 -3-基) (吗啉代)甲酮 （43 )

将化合物 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (330 mg， 1.43mmol), 化合物 (6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) (吗啉代）甲酮 (508 mg， 1.43 mmol), 三 (二亚 苄基丙酮)二钯 (131 mg， 0.143 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (165 mg， 0.29 mmol)和 N，N-二异丙基乙胺 (737 mg， 5.71 mmol)溶于无水 1,4-二氧六环 (5 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 85°C， 搅拌反应 16小时， 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =25： 1， v/v)分离， 重结晶后得到 (4-氯 -6-((6-(1 -甲基 - 1 H-吡唑 -4- 基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基 X吗啉代)甲酮 43(332mg， 黄色固 体)， 收率 46%.

MS m/z (ESI): 506.1

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.82 (s， 1 H)， 8.69 (s， 1 H)， 8.36 (s， 1 H)， 8.02-8.09 (m， 4 H)， 7.85 (d， J = 9.6 Hz, 1 H)， 7.68 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 3.86 (s， 3 H)， 3.66-3.73 (m， 4 H)， 3.49-3.52 (m， 2 H)， 3.19-3.21 (m， 2 H).

实施例四十四

4- 4-氯 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)

将化合物 6-0甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (100 mg， 0.43 mmol), 化合物 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)吗啉 (145 mg， 0.43 mmol), 三 (二亚苄基 丙酮)二钯 (40 mg， 0.043 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (50 mg， 0.086 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺 (223 mg， 1.73 mmol)溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (5 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 90 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经 柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离， 再经反相柱分离后得到 4-(4-氯 -6-((6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)吗啉 44 (20 mg， 淡黄色固体)， 收率 10%。 MS m/z (ESI): 477.9.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.82 (s， 1 H)， 8.67 (s， 1 H)， 8.36 (s， 1 H)， 8.04 (s, 1 H)， 8.03 (d， / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.98 (s, 1 H)， 7.97 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.84 (d, J = 9.6 Hz, 1 H)， 7.46 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.78 (t， / = 4.0 Hz, 4 H)， 3.22 (t，/ = 4.0 Hz，4 H).

实施例四十五

4-(4-氯 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基 「l 41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-

步骤一： ₄ -(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 45a

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 (300 mg， 0.81 mmol), 化合物 (3,5-二甲基异噻唑 -4-基)硼酸 (276 mg， 1.95 mmol), [1，Γ-双（二苯基磷）二茂铁]二氯化钯 (60 mg， 0.081 mmol)和碳酸钾 (338 mg， 2.44 mmol)溶于 1， 4-二氧六环 (5 mL)和水 (1 mL)的混合溶 剂， 在 35 °C下反应 16小时。 减压浓縮干， 加入乙酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥， 过 滤， 浓縮后经柱层析 (石油醚 /乙酸乙酯 =3 : 1， v/v)分离得到 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3- 基) -3,5-二甲基异噻唑 （200 mg， 无色油状物)， 收率 73%。

MS m/z (ESI): 339.0

步骤二： 4- 4-氯 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫 代)喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 45b

将化合物 6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (137 mg，

0.59 mmol), 化合物 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 (200 mg， 0.59 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (54 mg， 0.059 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (69 mg， 0.12 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺 (306 mg， 2.37 mmol)溶于无水 1， 4-二氧六 环 (5 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 75°C， 搅拌反应 16小时. 减压浓縮干， 粗品 经柱层析 (；二氯甲烷 /甲醇 =25 :1， v/v)分离得到 4-C4-氯 -6-( 6-0甲基 -1H-吡唑 -4- 基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 （140mg， 黄 色固体)， 收率 48%.

MS m/z (ESI): 488.1

步骤三： 4- 4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3- 基)硫代)喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 45

将化合物 4-(4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基) 硫代)喹啉 -3-基) -3,5-二甲基异噻唑 (140 mg， 0.2869 mmol)和甲醇钠 (77 mg， 1.434 mmol)溶于甲醇 (5 mL)中， 体系加热至 75 °C， 反应 16小时。 减压浓縮干， 加入乙 酸乙酯， 盐水洗涤， 干燥， 过滤， 浓縮后经反相柱分离得到 4-(4-甲氧基 -6-((6-(1- 甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基) -3，5-二甲基异噻 唑 45 (100 mg, 白色固体)， 收率 72%。

MS m/z (ESI): 484.0

1H NMR (400 MHz, OMSO-d ₆ , ppm): δ 8.69 (s， 2 H)， 8.36 (s， 1 H)， 8.10 (s， 1 H)， 8.05 (s, 1 H)， 8.02 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 8.00 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.83 (d， / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.61 (d, / = 8.8 Hz, 1 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.59 (s, 3 H)， 2.34 (s, 3 H)， 2.15 (s, 3 H).

实施例四十六

3- (苯并「dl「Ul二噁唑 -5-基) -4-甲氧基 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 ,2,41三唑并

步骤一： 3- (苯并「dl「Ul二噁唑 -5-基) -6-溴 -4-氯喹啉 46a

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 (300 mg， 0.81 mmol)化合物苯并 [d][l，3]二噁唑 -5- 基硼酸 (149 mg, 0.90 mmol), [1，Γ-双 (二苯基磷)二茂铁]二氯化钯 (60 mg, 0.081 mmol)和碳酸钾 (338 mg, 2.44 mmol)溶于 1， 4-二氧六环 (4 mL)和水 (0.5 mL)的混合 溶剂，在 35 °C下反应 16小时。反应析出的固体经过滤收集，水洗干� ��后得到 3- (苯 并 [d][l，3]二噁唑 -5-基) -6-溴 -4-氯喹啉 （272 mg， 白色固体)， 收率 92%。

MS m/z (ESI): 363.9

歩骤二： 3- (苯并「dl「Ul二噁唑 -5-基 4-氯 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1 41 三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 46b

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (100 mg,

0.43 mmol)化合物 3- (苯并 [d][l，3]二噁唑 -5-基) -6-溴 -4-氯喹啉 (157 mg, 0.43 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (40 mg, 0.043 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (50 mg, 0.086 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺 (223 mg， 1.73 mmol)溶于无水 1， 4-二氧 六环 (5 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 75 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析（二氯甲浣 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离得到 3- (苯并 [d][l，3]二噁唑 -5-基) -4- 氯—6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 （173 mg, 淡黄色固体)， 收率 78%。

MS m/z (ESI): 513.1

步骤三： 3- (苯并「dl「Ul二噁唑 -5-基) -4-甲氧基 - ί Χζ甲基 -1Η-吡唑 -4- 基) -「1 ,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 46

将化合物 3- (苯并 [d][l，3]二噁唑 -5-基) -4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4] 三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 (173 mg， 0.34 mmol)和甲醇钠 (91 mg, 1.69 mmol) 溶于甲醇 (5 mL)中， 体系加热至 75 °C， 反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离， 打浆， 过滤， 干燥得到 3- (苯并 [d][l，3]二噁唑 -5- 基) -4-甲氧基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 46 (100 mg, 白色固体)， 收率 58%

MS m/z (ESI): 508.9.

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 8.77 (s， 1 H)， 8.67 (s， 1 H)， 8.35 (s， 1 H)， 8.06 (d， / = 2.0 Hz, 1 H)， 8.04 (s, 1 H)， 8.01 (d, / = 9.2 Hz, 1 H)， 7.97 (d， / = 8.8 Hz, 1 H)， 7.82 (d, / = 9.2 Hz, 1 H)， 7.58 (d， / = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 7.20 (s， 1 H)， 7.05-7.11 (m， 2 H)， 6.10 (s, 2 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.56 (s, 3 H).

实施例四十七

l-(4-(4-甲氧基 -6-((6-ί1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹

步骤一： 叔 -丁基 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-羧酸酯 47a

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 (1.00 g， 2.714 mmol) , 叔-丁基哌嗪 -1-羧酸酯 (605mg, 3.26 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (250 mg, 0.27 mmol)和 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 C315mg， 0.54 mmol)溶在无水 N， N-二甲基甲酰胺 (50 mL), 在氮 气保护下， 反应温度升至 35 oC并搅拌 1小时。 然后往里加入叔丁醇钠 (315 mg, 3.26 mmol), 体系在此温度下继续反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯 甲烷 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离， 得到叔 -丁基 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-羧酸酯 (0.98 g， 棕色油状物)， 收率 85%。

MS m/z (ESI): 428.0

步骤二： 6-溴 -4-氯 -3- (哌嗪 -1-基)喹啉 47b

将化合物叔 -丁基 4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-羧酸酯 (0.98 g， 2.30 mmol)溶 于二氯甲烷 (3 mL)和三氟乙酸 （l mL) 中， 室温下搅拌 30分钟。 减压浓縮干， 粗 品 6-溴 -4-氯 -3- (哌嗪 -1-基)喹啉直接用于下一步反应。

MS m/z (ESI): 328.0

步骤三： 1-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 47c

将化合物 6-溴 -4-氯 -3- (哌嗪 -1-基)喹啉（200 mg， 0.6124 mmol)和三乙胺（186 mg, 1.84 mmol) 溶于二氯甲烷 （2 mL) 中， 然后在 0。C下滴加乙酰氯 （58 mg， 0.74 mmol)， 待加料完毕， 室温下反应 1小时。 反应液浓縮干， 粗品经柱层析（二 氯甲浣 /甲醇 =25 : 1， v/v)分离得到 1-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 （88 mg, 淡黄色固体)， 收率 39%。

MS m/z (ESI): 370.0 步骤四： 1-(4-(4-氯 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基） 硫代)喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 47d

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (55 mg， 0.24 mmol), 化合物 1-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 (88 mg， 0.24 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (22 mg， 0.024 mmol), 4，5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 (28 mg， 0.048 mmol)和 N， N-二异丙基乙胺（123 mg， 0.95 mmol)溶于无水 1， 4-二氧六 环 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 75 °C， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮干， 粗 品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25： 1； v/v)分离得到 1 -(4-(4-氯 -6-((6-( 1 -甲基 - 1 H-B比唑 -4- 基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 （58 mg， 淡黄色 固体)， 收率 47%。

MS m/z (ESI): 519.1

歩骤五： 1-(4-(4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基 「U,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 47

将化合物 1-(4-(4-氯 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基) 硫代)喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮（58 mg， 0.11 mmol)和甲醇钠（30 mg， 0.56 mmol) 溶于甲醇 （2 mL) 中， 体系加热至 75。C， 反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱 层析（二氯甲浣 /甲醇 =25 : l，v/v)分离，打浆，过滤，干燥得到 1-(4-(4-甲氧基

甲基 -1H-吡唑 -4-基) -[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基)哌嗪 -1-基)乙酮 47 (10 mg, 淡黄色固体)， 收率 18%。

MS m/z (ESI): 515.0

1H NMR (400 MHz, DMSO- , ppm): δ 8.70 (s, 1 H)， 8.64 (s, 1 H)， 8.34 (s, 1 H)， 8.03 (s, 1 H)， 8.01 (d, J = 9.6 Hz, 1 H)， 7.92 (d,J = 2.0 Hz, 1 H)， 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1 H)， 7.82 (d, J = 9.6 Hz, 1 H)， 7.40 (dd， J = 8.8 Hz, J = 2.4 Hz, 1 H)， 3.94 (s, 3 H)， 3.85 (s, 3 H)， 3.62-3.64 (m， 4 H)， 3.18-3.20 (m， 2 H)， 3.12-3.14 (m， 2 H)， 2.05 (s， 3 H).

实施例四十八

2-(4-(4-甲氧基 -6-(ϊ6-( -甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹

步骤一： 2-(4-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑小基)乙醇 48a 将化合物 4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 (1.00 g， 5.15 mmol) 碳酸乙烯酯 (500 mg， 5.670mmol)和氢化钠 (206 mg， 5.16 mmol)溶于 N， N-二甲基甲 酰胺 (10 mL)， 升温至 160 °C反应 2小时， 冷却至室温， 加入活性碳， 搅拌 1小时， 过滤， N， N-二甲基甲酰胺洗涤， 滤液经浓縮干得粗品 2-(4-(4，4，5，5-四甲基 -1，3，2- 二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇， 直接用于下一步反应。

MS m/z (ESI): 239.1

歩骤二： 2-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基 1H-吡唑 -1-基)乙醇 48b

将化合物 6-溴 -4-氯 -3-碘喹啉 (155 mg， 0.42 mmol), 化合物 2-(4-(4，4，5，5-四甲基

-1，3，2-二噁硼戊环 -2-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 (220 mg， 0.46 mmol), [1，Γ-双 (二苯基磷) 二茂铁]二氯化钯 (31 mg， 0.042 mmol)和碳酸钾 (174 mg， 1.26 mmol)溶于 1， 4-二氧 六环 (4 mL)和水 (1 mL)的混合溶剂， 在 35 °C下反应 16小时， 减压浓縮干， 残液经 柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =20:1， v/v)分离， 得到 2-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1- 基)乙醇 （165mg， 灰白色固体)， 收率 89%。

MS m/z (ESI): 354.0

步骤三： 2-(4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 48c

将化合物 2-(4-(6-溴 -4-氯喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 (100 mg， 0.2836 mmol) 和甲醇钠 (77 mg， 1.418 mmol)溶于甲醇 (2 mL)中，体系加热至 65 °C， 反应 16小时。 减压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲浣 /甲醇 =25: 1， v/v)分离， 得到 2-(4-(6-溴 -4- 甲氧基喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 （53 mg， 白色固体)， 收率 54%。

MS m/z (ESI): 348.0

步骤四： 2-(4-(4-甲氧基 -6-(ϊ6-Π-甲基 -1H-吡唑 -4-基) -「1,2,41三唑并「4,3-al吡啶 -3-基)硫代)喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 48

将化合物 6-G-甲基 -1H-吡唑 -4-基 HU，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-硫醇 (35 mg，

0.15 mmol), 化合物 2-(4-(6-溴 -4-甲氧基喹啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 (53 mg， 0.15 mmol), 三 (二亚苄基丙酮)二钯 (14 mg， 0.015 mmol), 4,5-双二苯基膦 -9,9-二甲基氧 杂蒽（18 mg， 0.030 mmol)禾 B N， N-二异丙基乙胺 (28 mg， 0.61 mmol) 溶于无水 N， N-二甲基甲酰胺 (2 mL). 在氮气保护下， 反应升温至 90°C， 搅拌反应 16小时。 减 压浓縮干， 粗品经柱层析 (二氯甲烷 /甲醇 =25:1， v/v)分离， 再经反相柱分离得到 2-(4-(4-甲氧基 -6-((6-(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基 )-[1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶 -3-基)硫代)喹 啉 -3-基) -1H-吡唑 -1-基)乙醇 48 (30 mg， 白色固体)， 收率 40%。

MS m/z (ESI): 498.9

1H NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ , ppm): δ 9.17 (s, 1 H)， 8.69 (s, 1 H)， 8.37 (s, 1 H)， 8.34 (s， 1 H)， 8.12 (s， 1 H)， 8.03 (s， 1 H)， 8.02 (d, / = 9.6 Hz, 1 H)， 7.96 (d， J = 8.8 Hz, 1 H)， 7.93 (d, J = 2.4 Hz, 1 H)， 7.82 (d, J = 9.2 Hz, 1 H)， 7.51 (dd， J = 8.8， 2.0 Hz, 1 H)， 4.94 (t， / = 5.6 Hz, 1 H)， 4.23 (t， / = 5.6 Hz, 2 H)， 3.84 (s, 3 H)， 3.76-3.80 (m， 2 H)， 3.73 (s, 3 H). 生物学评价

实验例一

实验目的: 考察化合物在分子水平对 c-MET酪氨酸激酶活性的影响， 通过测定不同浓度 的化合物对 c-MET酪氨酸激酶磷酸化的抑制率来确定化合物� �� IC50值，以此来评 价化合物。

实验方法：

1、 阳性对照及受试样品先溶于 100% 二甲基亚砜中， 配置成 20 mM的储备 溶液， 保存于 -20°C冰箱中。

2、 实验前将上述储备溶液稀释至终浓度 4%二甲基亚砜中。

3、 将 5x 的激酶缓冲液 用水稀释至 1.33x 的激酶缓冲液。

4、 在 1.33x 的激酶缓冲液中配制 4 mol/L 的多肽底物和 2x激酶混和物。 5、 在 1.33x 的激酶缓冲液中中配制 4 mol/L 的磷酸化多肽底物。

6、 在 1.33x 的激酶缓冲液中配制合适浓度的 ATP

7、 按照需要的稀释倍数将内切酶稀释至显示缓冲 液 B中.

8、 所有的化合物都稀释至 96孔板中。

9、将 4 mol/L 的多肽底物和 2x激酶混和物， 4x ATP液分配到一块 96孔板中， 用 12道排枪将试剂转移至 384孔板中。

10、 反应板在室温中反应 1小时。

11、 加入 5 L 显示缓冲液， 室温下反应 1小时。

12、 使用 NovoStar酶标仪读荧光， 激发波长： 400nm， 发射波长： 445nm和 520nm。

13、在 GraphPad软件中， 用化合物浓度对抑制率做非线性曲线回归， 用 S型 量效曲线拟合来计算 IC50。 化合物抑制率的计算请参照以下公式：

14、 发射光波比例 = (Coumarin发射光波 445nm) ÷ (Fluorescein发射光波 520nm)

15、 抑制百分比 =1- 磷酸化 (吸收)％/磷酸化 (发散)％

实验结果：

分子水平的酶活性测试表明， 本发明的 [1，2，4]三唑并 [4，3-a]吡啶类化合物在浓 度为纳摩尔水平时对 c-MET酪氨酸激酶有很好的抑制效果，其结果如� ��表所示. 参考文献

Neru Munshi, Sebastien Jeay, Youzhi Li, et al. Molecular Caner Therapeutics. Mol Cancer Ther 2010;9 : 1544- 1553. 实验例二

实验目的： 测定化合物对肝癌 HCCLM3 , MHCC97-H, MHCC97-L, 胃癌 SNU5, MK -45细胞的生长抑制作用。

样品贮存和配制： 阳性对照及受试样品先溶于 100% 二甲基亚砜中，配置成 10 mM的储备溶液， 放于 -20°C冰箱保存。实验前用含 0.6%二甲基亚砜的培养液将上述储备溶液稀释� � 各个试验浓度 20倍的溶液。

实验步骤

(1) 在 96 孔细胞培养板各孔中加 ΙΟΟμΙ 含 2000 个细胞的培养液

( HCCLM3/MHCC97-H/ MHCC97-L 培养液为含 10%FBS 的 DMEM; SNU5 培 养液为含 10% FBS 的 IMDM 培养液； MK 45 培养液为含有 10% GFBS 的 RPMI1640 ) ， 在 5% C02培养箱里培养过夜。

(2) 每孔加 20μ1稀释的阳性对照或受试样品样品， 每个稀释度 2个重复孔。 空白孔和对照孔各加 20μ1含 0.6%二甲基亚砜的培养液。二甲基亚砜最终浓� �保持 为 0.1%。

(3) 72小时后， 每孔加 60μ1 CellTiter-Glo 试剂 ( Promega) ， 在摇床上混合 2 分钟。

(4) 在室温下孵育 45分钟以稳定冷光信号。

(5) 用 BioTek酶标仪测每个孔的冷光信号。

(6) 在 GraphPad软件中， 用化合物浓度的对数对抑制率做非线性曲线回 归， 用 S型量效曲线拟合来计算 IC50。

参考文献

Neru Munshi, Sebastien Jeay, Youzhi Li, et al.， ARQ 197, a Novel and Selective Inhibitor of the Human c-Met Receptor Tyrosine Kinase with Antitumor Activity. Mol Cancer Ther 2010;9: 1544-1553.

实验结果

~本发明实施例化合物对受体酪氨酸激酶 c-MET的 ~

半数抑制浓度

实施例编号 酶活 (nM) ~~细胞活性 (nM)

2 4.9 1.4

3 3.9 4.3

4 1 1.3 123.8

5 3.1 1 1.8

6 3.3 598

7 122.7 327.1

8 37 n/a

9 17.8 14.1

10 8.6 1.6

1 1 308.7 >1000

12 28.3 4.2

13 >1000 >1000

14 12.1 1 1.7

15 42.5 12.3

16 12 3

17 8.5 15.2 18 9.3 85.8

19 7.9 17.8

20 20.1 19.1

21 11.4 4.5

22 2.9 2

23 13.9 18.9

24 15.3 24.1

25 56.6 428.5

26 5.5 0.9

27 608.2 >1000

28 3.6 2.1

29 7.1 6.2

30 122.3 >10000

31 12.1 12.5

32 10 9.9

33 35.9 188.5

34 439.5 540.4

35 174.8 123.8

36 4.6 0.2

37 2.2 0.2

38 484.8 >1000

39 5 0.4

40 2.5 0.5

41 3.2 2.8

42 10.7 0.7

43 461.7 >1000

44 4.4 0.6

45 210.8 333.2

46 43 9.5

47 5.7 1.8

48 2.4 2.6 实验例三： 药代动力学评价

本发明化合物的药代动力学测试

1、 摘要

以大鼠为受试动物，应用 LC/MS/MS法测定了大鼠灌胃给予实施例 3， 22或实施 例 28化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。 研究本发明化合物在大鼠体内的药代 动力学行为， 评价其药动学特征。

2、 试验方案

2.1 试验药品

实施例 3， 22 和实施例 28化合物

2.2 试验动物

健康成年 SD大鼠 8只， 雌雄各半， 平均分成 2组， 每组 4只， 购自上海西普尔- 必凯实验动物有限公司， 动物生产许可证号： SCXK (沪 )2008-0016。

2.3 药物配制 称取一定量药物，力口 l.O mL 二甲基亚砜使溶解，加生理盐水配制成 1.0 mg/mL 溶液， DMSO含量为 5%。

2.4 给药

SD大鼠禁食过夜后灌胃给药， 给药剂量均为 10.0 mg/kg, 给药体积均为 10.0

3、 操作

大鼠灌胃给药实施例 3， 22和实施例 28化合物， 于给药前及给药后 0.5， 1.0， 2.0， 3.0， 4.0， 6.0， 8.0， 12.0， 24.0， 36.0小时由眼眶采血 0.2 mL， 置于肝素化试 管中， 4°C、 10000转 /分钟离心 10 分钟分离血浆， 于 -20°C保存， 给药后 2小时进 食。

测定不同浓度的药物灌胃给药后大鼠血浆中的 待测化合物： 取给药后各时刻 的大鼠血浆 50 μL·, 加入内标溶液 50 μL·, 甲醇 100 μL·, 涡旋混合 3 分钟， 离心 10 分钟 （13500 转 /分钟)， 取上清液 10 L进行 LC/MS/MS分析。

4、 药代动力学参数结果

本发明化合物的药代动力学参数如下:

结论： 本发明化合物的药代吸收良好， 具有明显的药代动力学优势。