【발명의 명칭】

2, 4,5 -치환된 피리미딘 유도체， 이의 체조방법 및 이를 유-효정분 으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

【기술분야】

2，4, 5 -치환된 피리미딘 유도체， 이의 제조방법 및 이를 유효성분 으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

【배경기술】

암의 발생은 화학물질 , 방사선， 바이러스를 포함하는 여러 가지 환경적인 요인과 종양 유전자， 종양 억제 유전자， 세포사멸 (apoptosis)과 DNA 복구에 관련된 유전자의 변화 등에 관련되어 있는 데， 최근 이러한 암의 분자적 메커니즘을 이해함에 따라 새로운 치료 법인 표적 항암치료가 가능하게 되었다. 표적 치료제들은 일반적으로 암세포가 특징적으로 가지고 있는 분자를 표적으로 하여 그 효과를 나타낼 수 있도록 만들어지며， 분자 적 표적이 되는 것은 암세포의 신호전달경로 ( s i gnal transduct ion pathway) , 혈관신생 (angi ogenes i s ) , 세포간질 (matrix)， 세포주기조절 인자 (cell cycle regulator ) , 세포사멸 (apoptosis) 등에 관련된 유전 자들이다. 현재 치료에서 중요한 표적 치료제로 사용되고 있는 것으로 는 티로신 키나아제 (tyrosine kinase) 억제제를 비롯한 ¹ 신호전달경로 억제제’와 신생혈관생성 억제제 ¹ 들이 있다. 단백질 티로신 키나아제 (protein tyrosine kinase)는 많은 악성 종양에서 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀졌으며， 특히 erbB 패밀리의 수용체 티로신 키나아제 (receptor tyrosine kinase)인 상피 성장 인자 수용체 (epidermal growth factor receptor , EGFR)는 비소세포폐암종 (NSCLC), 유방암， 신경교종， 두경부의 편평 세포 암종， 대장암， 곧창 자 생암종, 두경부암, 위암 및 전립선암을 포함한 많은 상피세포 종양 에서 비정상적으로 활성화되어 있고， 상기 EGFR-티로신 키나아제의 활 성화가 지속적인 세포 증식， 주변 조직에 대한 침범， 원격 전이， 혈관 형성을 일으키며 세포 생존을 증가시킴이 알려진 바 있다. 구체적으로， 상기 EGFR은 ErbB 티로신키나아제 수용체군 (tyrosine kinase receptors family; EGFR , HER-2 , ErbB-3 , ErbB-4) 중의 하나로, 세포외 리간드결합영역 ( ext race 11 uar ligand-binding domain)과 티로신 키나아제영역 ( tyros ine kinase domain)을 포함한 세 포내 영역 ( intrace 1 lu lar domain)을 가지고 있는 막경유 티로신키나아 제 ( t ransmembr ane tyrosine kinase)이다 . 호모다이머 (homodimer ) 또는 헤테로다이머 (heterodimer )를 이룬 수용체에 리간드가 결합하면 세포 내의 티로신키나아제가 활성화되고 이렇게 EGFR에 의해 자극된 신호는 포스파티딜이노지톨 3 -키나아제 (phosphat idyl inosi tol 3- kinase(PI3K)/AKT/inT0R, RAS/RAF/MAPK， JAK/STAT) 신호전달 경로를 활 성화한다 (Nat Rev Cancer 2007 : 7 : 169-81 ) .

EGFR은 특히， 비소세포폐암 (non-sma 11 cell 1 ungcancer , NSCLC) 의 절반이상에서 과발현되어 치료의 표적으로 많은 연구들이 시행되었 다 . EGFR 티로신키나아제 활성을 억제하는 EGFR TKI (tyrosine kinase inhibitor)가 개발되었으며 , 대표적인 약제로는 제피티닙 ( IRESSAä ) , 에를로티닙 ( TARCEVAä ) , 라파티닙 ( TYKERBä , TYVERBä )이 있다 . 한편， 2004년 EGFR의 활성화 돌연변이가 비소세포 폐암 (NSCLC: non-sma 11 -cel 1 1 ungcancer )에서 제피티닙 요법에 대한 반응과 상관관 계가 있다는 것이 보고되었다 (Science [2004] Vo 1.304, 1497-500 및 New England Journal of Medicine [2004] Vo 1. 350 , 2129-39) .

구체적으로， 상기 EGFR 돌연변이는 크게 민감성 (sensitizing) 돌 연변이와 내성 (resi stant ) 돌연변이로 구분되는데 엑손 19의 결손 (deletion)과 엑손 21의 L858R 점 돌연변이 (point mutation)가가장 중 요한 민감성 돌연변이로서 약 85〜 90%를 차지하고 있고 엑손 19 del 돌연변이가 TKI에 대한 민감성이 더 좋은 것으로 알려져 있다. 반면 엑손 20의 T790M 점 돌연변이는 가장 중요한 내성 돌연변이로서 획득 내성 환자의 50% 이상에서 발견되는 것으로 알려져 있다 (Clin Cancer Res 2006;12:6494-6501. ) . 지금까지 동정된 체세포 돌연변이에는 엑손 19 내 틀내 결손 또 는 엑손 20 내 삽입뿐만 아니라， 발현된 단백질 내에서 단일 핵산 잔 기가 변형된 점 돌연변이 (예컨대， L858R, G719S, G719C, G719A,

L861Q)가 포함된다 (Fukuoka et al. JC0 2003； Kris et al JAMA 2003 and Shepherd et al NEJM 2004) .

EGFR 돌연변이를 갖는 NSCLC 환자에게서 제피티닙 /에를로티닙의 초기 임상 효과에도 불구하고， 대부분의 환자에게서 결국에는 이들 제 제에 대한 요법을 받는 동안 진행성 암이 발병한다. 재발된 표본의 초 기연구에서 제피티닙 및 에를로티닙을 EGFR 키나아제 활성의 비효과적 인 억제제가 되게 하는 이차 EGFR 돌연변이， T790M가 동정되었다 (Kobayashi et al NEJM 2005 and Pao et al PL0S Medicine 2005). EGFR T790M 돌연변이가 제피티닙 또는 에를로티닙에 대해 내성을 획득 한 환자 유래 종양의 대략 50%(24/48)에서 발견됨이 후속 연구에서 입 증되었다 (Kosaka et al CCR 2006; Balak et a 1 CCR 2006 and Engelman et al Science 2007). 이러한 이차 유전적 변형은 키나아제 억제제로 치료된 환자에게서 ’게이트키퍼 (gatekeeper)’ 잔기 및 이것과 연관된 이차 내성 대립 유전자와 유사한 위치에서 야기된다 (예를 들어 , 이마 티닙 내성 CML에서 ABL 내 T315I). EGFR 돌연변이인 EGFR_dell9 또는 EGFR_L858R이 비소세포폐암과 두경부암의 주요한 원인이라는 것은 오래 전부터 알려져 왔고， 이들의 치료약물인 이레사， 타세바가 개발되어 현재 임상에서 사용되고 있다. 하지만， 이러한 약물을 환자에 사용하였을 때 약물의 구조에 기반을 두는 EGFR 2차 돌연변이가 생기는 획득내성 (acqui red resistance)이 관찰되었고， 이것이 실제 약제내성의 주요원인이라는 것도 밝혀졌다. EGFR 1세대 저해제를 평균 10개월 정도 사용하게 되면 EGFR 키나아제 의 게이트키퍼 (gatekeeper)에 위치한 T790M 돌연변이라는 획득내성이 발생하여 EGFR 1세대 저해제들이 약효를 내지 못하는 것이다. 즉， EGFR_deU9_T790M 또는 EGFR_L858R_T790M 이중돌연변이가 발생하여 기 존 치료제가 약효를 나타내지 못하게 된다.

【발명의 상세한 설명】

【기술적 과제】

본 발명의 일 목적은 2, 4, 5 -치환된 피리미딘 유도체， 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 2, 4,5 -치환된 피리미딘 유도체의 제 조방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 2 ,4,5 -치환된 피리미,딘 유도체 , 이 의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으 로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 2,4,5 -치환된 피리미딘 유도체， 이 의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으 로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.

【기술적 해결방법】

상기 목적을 달성하기 위하여 ,

본 발명의 일 측면에 따라， 하기 화학식 1로 표시되는 화합물， 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다:

[화학식 1] 2019/177375 1»（：1^112019/002915

4

(상기 화학식 1에서 ，

/\는 요 ¹ 은 비치환 또는 치환된 ， 0 및 £로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 15원자의 헤테로아릴이고 ,

된 사이클로알킬 또는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되 는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환 된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬 또는 3 내지 10원자의 헤테로 사이클로알킬 (：卜 ₃ 알킬이고，

상기 치환된 아릴， 헤테로아릴 , 사이클로알킬 및 헤테로사이클로 알킬은 _(：(=0)·!? ⁵ , - ⁵ ， - 야 , - 대 ⁶ ， 할로겐， 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알콕시로 이루어지는 군 으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있고 , 묘 ⁵ ， 요 ⁶ 및 ^는 독 립적으로 직쇄 또는 분지쇄의 ( - ₅ 알킬 또는 사犯¾ ⁹ 이고， 요 ⁸ 및 요 ⁹ 는 독 립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬이고 ; 는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (: ^^ ₅ 알콕시이고 ; 요 ³ 은 내요 ^{10 1} 또는 -아 ² 이고，

여기서 ， 。, 요 ¹¹ 및 요 ¹² 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 알킬이고， 여기서 상기 알킬숀 비치환 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 ^- ₅ 알킬으로 하나 이상 치환된 아민으로 하나이상 치환될 수 있 고，

또는， 요 ¹⁽⁾ 및 요 ¹¹ 은 이들이 결합된 원자와 함께 0 및 3로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고， 상기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬로 하나 이상 치환된 1八 0 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포 함하는 5 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다). 본 발명의 다른 측면에 따라， 상기 화학식 1으로 표시되는 화합 물， 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 제공된다. 본 발명의 다른 측면에 따라， 상기 화학식 1으로 표시되는 화합 물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품이 제공된다. 본 발명의 다른 측면에 따라, 상기 화학식 1으로 표시되는 화합 물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 약 학적 조성물 또는 건강기능식품 조성물을 필요한 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법이 제공된다. 본 발명의 다른 측면에 따라， 암의 예방 또는 치료에 있어서의 , 상기 화학식 1으로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약학적 조성물 또는 건강기능식품 조성물의 용도가 제 공된다.

【유리한 효과】

본 발명에 따른 2,4,5 -치환된 피리미딘 유도체는 EGFR( epidermal growth factor receptor) 야생형 또는 돌연변이에 대하여 높은 억제능 을 나타내므로 , EGFR 야생형 또는 EGFR 돌연변이가 발현된 암의 치료 에 유용하게 사용될 수 있고， 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바， 특히， 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

【발명의 실시를 위한 최선의 형태】

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명의 일 측면은， 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

[화학식 1] 02019/177375 1»（그 ^1{2019/002915

6

0 및 으로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 15원자의 헤테로아릴이고，

여기서 ， 는 비치환 또는 치환된 (： _6-14 아릴， 직쇄 또는 분지쇄의 - ₁₀ 알킬 , 직쇄 또는 분지쇄의 -내알콕시 - ₃ 알킬， 비치환 또는 치환 된 ◦사이클로알킬 또는 ， 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되 는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환 된 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬 또는 3 내지 10원자의 헤테로 사이클로알킬 0 _1-3 알킬이고，

상기 치환된 아릴， 헤테로아릴 , 사이클로알킬 및 헤테로사이클로 알킬은 _(:(=0)·!? ⁵ ， - ⁵ ， -· (=0)1?¾ ⁷ ， 할로겐， 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 ⁽ ᅱ알콕시로 이루어지는 군 으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있고， 모 ⁵ , 및 묘 ⁷ 는 독 립적으로 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 또는 내묘¾ ⁹ 이고 , 묘 ⁸ 및 ^는 독 립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 -5알킬이고 ;

, 는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (^- ₁₀ 알콕시이고 ; 요 ³ 은 - ^{10 1} 또는 -0묘 ¹² 이고,

여기서 ， 요 ¹ ᄋ， 요 ¹¹ 및 요 ¹² 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 알킬이고， 여기서 상기 알킬은 비치환 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 - ₅ 알킬으로 하나 이상 치환된 아민으로 하나이상 치환될 수 있 고,

또는， 요 ¹⁽⁾ 및 요 ¹¹ 은 이들이 결합된 N 원자와 함께 0 및 로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고， 상기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 ^- ₅ 알킬로 하나 이상 치환된 0 2019/177375 1»（：1^112019/002915

7 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포 함하는 5 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다). 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 13로 표시되는 화합물일 수 있다.

［화학식 1

(상기 화학식 에서 ,

은 비치환 또는 치환된 아릴， -·- ⁴ 또는 0 및 로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 15원자의 헤테로아릴이고 ,

여기서， 는 비치환 또는 치환된 (： _6-14 아릴， 직쇄 또는 분지쇄의 ^- ₁₀ 알콕시 - ₃ 알킬 , 비치환 또는 치환된 - ₁₀ 사이클로알킬 또는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이 클로알킬 또는 3 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬 - ₃ 알킬이고，

상기 치환된 아릴， 헤테로아릴， 사이클로알킬 및 헤테로사이클로 알킬은 -(:(=0 ⁵ ， -的八 ⁵ ， -· , ⑴ ⁷ ， 할로겐， 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알콕시로 이루어지는 군 으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있고， V ⁵ , Y ⁶ 및 는 독 립적으로 직쇄 또는 분지쇄의 0^ ₅ 알킬 또는 내 ⁹ 이고， V ⁸ 및 ⁹ 는 독 립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (^- ₅ 알킬이고 ; 는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (: ^ ₀ 알콕시이고; 은 내 ¹¹ 또는 -0 ² 이고，

여기서， 。 및 ¹ 은 독립적으로 수소， 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-5 알킬 또는 ¹ %-; _? 알킬이고， ² 는 수소 또는 ¹ %-： _? 알킬이고， 상기 ³ ， ⁴ ， V ¹⁵ 및 ⁶ 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬이거나， 。 및 ¹ 은 이들이 결합된 원자와 함께 비치환 또 는 치환된 5 내지 8원자의 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고, 이 때 , 상기 헤테로사이클로알킬은 을 하나 이상 더 포함할 수 있고， 상 기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 비치 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

8 환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬로 하나 이상 치환된 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5 내지 10원자의 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다）. 상기 화학식 1 ₃ 에서 ,

상기 은 비치환 또는 치환된 （： _6-10 아릴， -·- 0 또는 0 및 £ 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 해테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 10원자의 헤테로아릴이고， 여기서 , 는 비치환 또는 치환된 -내아릴， 직쇄 또는 분지쇄의

^- ₅ 알콕시 - ₃ 알킬， 비치환 또는 치환된 - ₇ 사이클로알킬 또는 I 0 및 온로 이루어지는 군으로부터 선택되는 해테로 원자를 하나 이상 포 함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 7원자의 헤테로사이클로알킬 또는 3 내지 7원자의 헤테로사이클로알킬（ ᅱ알킬이고，

상기 치환된 아릴， 헤테로아릴， 사이클로알킬 및 헤테로사이클로 알킬은 -（:（=0）애 , - 八 ⁵ , -■的介 ⁵ ， -P（=0）Y ⁶ Y ⁷ , 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있고， ， 먕 및 는 독립 적으로 직쇄 또는 분지쇄의 （ - ₃ 알킬 또는 - ⁹ 이고, V ⁸ 및 I ⁹ 는 독립 적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 （ - ₃ 알킬이고 ; 는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알콕시이고; 은 내 ¹¹ 또는 -0 ² 이고，

여기서 , 。 및 ¹ 은 독립적으로 수소， 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-3 알킬 또는 ¹ ； ¹⁴ （：卜 ₃ 알킬이고， ² 는 수소 또는 알킬이고， 상기 V ¹³ , ⁴ , V ¹⁵ 및 ⁶ 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 （ - ₃ 알킬이거나， 。 및 게은 이들이 결합된 원자와 함께 비치환 또 는 치환된 5 내지 8원자의 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고， 이 때， 상기 헤테로사이클로알킬은 을 하나 이상 더 포함할 수 있고 ,상 기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 알킬 및 비치 환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 （^- ₃ 알킬로 하나 이상 치환된 ， 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 이 상 포함하는 5 또는 6원자의 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로 부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다. 또한， 상기 화학식 1å1에서，

상기 은 비치환 또는 치환된 페닐， -·- ⁴ 또는 비치환 또는 치환된 인돌리닐이고，

여기서， 는 비치환 또는 치환된 페닐 , 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-3 알콕시 ^- ₂ 알킬 , 비치환 또는 치환된 （： _3-5 사이클로알킬 또는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 하나 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 또는 6원자의 헤테로사이클로알 킬 또는 5 또는 6원자의 헤테로사이클로알킬메틸이고，

상기 치환된 페닐 , 인돌리닐 , 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알 킬은 _（：（=0川 ⁵ ， - 介 ⁵ ， -애的^ ⁵ ， （=0作 ⁷ , 메틸 , 에틸， 메톡시 및 에톡시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있고， ， V ⁶ 및 는 독립적으로 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-3 알킬 또는 내 ⁹ 이고 , 방 및 ^는 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분 지쇄의 - ₃ 알킬이고 ; 는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알콕시이고 ; 은 내 ¹¹ 또는 -0 ² 이고，

여기서 ， 。 및 ¹ 은 독립적으로 수소， 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-3 알킬 또는 ¹⁴ 에틸이고 , ² 는 수소 또는 ¹⁶ 에틸이고 , 상기 ³ , 4， V ¹⁵ 및 ⁶ 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알킬 이거나， 。 및 ¹ 은 이들이 결합된 사 원자와 함께 비치환 또는 치환 된 피페라진 또는 피페리딘을 형성할 수 있고， 상기 치환된 피페라진 및 피페리딘은 메틸， 에틸 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알 킬로 하나 이상 치환된 피페라지닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다.

이고 ; 2019/177375 1»（：1^묘2019/002915

10 는 수소 또는 메톡시이고;

본 발명에 따른 상기 화학식 로 표시되는 화합물의 예로는 하 기의 화합물들을 들 수 있다:

<13-1> -（5-（（5-（3,6-디하이드로-에-피란- 4 -일）-4-（（2-（이소프 로필설포닐）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시- 2-（ 4 -메틸피 페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드 ;

< -2 ñ -（5-（（5-（3,6-디하이드로 _21卜피란- 4 -일）-4-（（2-（이소프 로필설포닐）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2 -（（2-（다이메틸아미 노）에틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 ;

<1 3 ñ -（5-（（5-（3, 6 -디하이드로 피란- 4 -일）-4-（（2-（디메틸 포스폴리）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2-（디메틸아미노）에 틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드， 2, 2, 2 -트리플루오로아 세트산염 ;

<比-4 ñ -（ 5-（（5-（3, 6 -디하이드로 피란- 411）-4-（（2-대 -디 메틸설파모일）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸 피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드, 2 ,2,2 -트리플루오로아세트산염 ;

<13-5> （5-（（5-（3,6 -디하이드로 -에ᅳ피란- 4 -일）- 4-（（2-대川 - 디 메틸설파모일 ）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2-（디메틸아미 노）에틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드， 2,2,2 -트리플루오 로아세트산염 ;

<18-6> 1（ 5-（（5-（3, 6 -디하이드로 -래-피란- 4 -일）- 4-（（2 ,4 -디메톡 시페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메 틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드， 2, 2, 2 -트리플루오로아세트산 염 ;

<13-7> （5-（（5-（3,6 -디하이드로 -211-피란- 4-기）-4-（（2-（메틸설 폰 ⁰ ]·미도）페닐） ⁰ ]·미노）피리미딘 - 2 -일） ⁰ ]·미노）- 2-（（ 2-（다이메틸 미노） 에틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 , 2, 2, 2 -트리플루오로 아세트산염 ;

<13-8 ñ （묘）- -（5-（（5-（3,6 -디하이드로 _래_피란- 4 -일）-4-（（（테트 라하이드로퓨란- 2 -일）메틸）아미노）피리미딘 - 2 -일）아미노）- 2-（（ 2-（디메 틸아미노）에틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드， 2 , 2 , 2 -트리 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

11 플루오로아세트산염 ;

<1 9 ñ （3-（（5-（3, 6 -디하이드로 피란- 4 -일）-4-（（2- 川 -디 메틸설파모일）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 5-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드, 2 ,2, 2 -트리플루오로아세트산염 ;

<13-10 ñ （5-（（5-（3 ,6 -디하이드로 _2｝卜피란- 4 -일）-4-（（2-（이소프 로필설포니）페닐）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 - 2-（ 4-（4 -메 틸피페라진- 1 -일）피페리딘- 1 -일）페닐）아크릴아미드 2 ,2 ,2 -트리플루오 로아세트산염 ;

<13-11 ñ 2-（（2-（（5 -아크릴아미도- 4-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메 틸）아미노）- 2 -메톡시페닐）아미노）- 5-（3, 6 -디하이드로 -211-피란- 4 -일）피 리미딘- ₄ -일）아미노）- 메틸벤조아미드 2 ,2 ,2 -트리플루오로아세트산 염 ;

<13-12 ñ （5-（（5-（3,6 -디하이드로 -2^1-피란- 4 -일）-4-（ 1 -메틸-내- 인돌- 3 -일）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피페라진사 _· -일） 페닐）아크릴아미드;

<13-13> -（5-（（5-（3,6 -디하이드로 -2［ᅡ피란- 4 -일）-4-（ 1 -메틸-내一 인돌- 3 -일）피리미딘 - 2 -일）아미노）- 2-（（2-（다이메틸아미노）에틸）（메틸） 0｝미노） - ₄ -메톡시페닐）아크릴아미드 ;

<13-14> （5-（（5-（3,6 -디하이드로 _2｝卜피란- 4 -일）-4-（ 1 -메틸-내- 인돌 -3 -일）피리미딘 - 2 -일）아미노） -4 -메톡시 -2-（4 -（ 4 -메틸피페라진 - 1- 일）피페리딘- 1 -일）페닐）아크릴아미드 2, 2, 2 -트리플루오로아세트산염 :

<13-15 ñ ᅡ（5-（（5-（3,6 -디하이드로 -에_피란- 4 -일）-4-（ 1 -메틸-내- 인돌 _3 -일）피리미딘 - 2 -일）아미노）- （ 2-（디메틸아미노）에톡시） -4 -메톡 시페닐）아크릴아미드 2，2,2 -트리플루오로아세트산염 :

<13-16 ñ （5-（（5-（3,6 -디하이드로 -에-피란- 4 -일）-4-（내-인돌- 3- 일）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메틸）아� �노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 2, 2,2 -，트리플루오로아세트산염 ;

<13-17 ñ （5-（（5-（3, 6 -디하이드로 -래-피란- 4ᅳ일）-4-（（2 -메톡시 에틸）아미노）피리미딘一 2 -일）아미노）一 2-（（2-（다이메틸아미노）에틸）（메 틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 2,2,2 -트리플루오로아세트산 염 :

<13-18 ñ 1（5-（（4-（사이크로프로필아미노）- 5-（3, 6 -디하이드로- 해-피란- 4 -일）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2_（디메틸아미노）에틸）（메 틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 ;

<13-19 ñ -（5-（（5-（3,6 -디하이드로 -래_피란- 4 -일）-4-（（1 -메틸피 페리딘- 4 -일）아미노）피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（（2-（디메틸아미노）에 틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 2 ,2, 2 -트리플루오로아세 트산염 . 표시되는 화합물은， 하기 반응식 13에 나타낸

화학식 73로 표시되는 화합물과 화학식 8크로 표시되는 화합물을 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

12 반응시켜 화학식 53로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 1）;

화학식 53로 표시되는 화합물과 화학식 63로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 43로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 2）;

화학식 43로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 2크로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 3）； 및

화학식 23로 표시되는 화합물과 화학식 33로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 13로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 4）;를 포함하는 상기 화학식 13로 표시되는 화합물의 제조방법으로 제조될 수 있다.

[반응식 13 ]

（상기 반응식 13에서， ， X ² 및 은 상기 화학식 13에서 정의한 바와 같고; 및

X ¹ , X ² 및 X ³ 은 독립적으로 할로겐이다）. 이하， 본 발명에 따른 상기 화학식 로 표시되는 화합물의 제조 방법을 상세히 설명한다. 상기 반응식 1å1의 단계 1은 화학식 73로 표시되는 화합물과 화학 식 83로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 5크로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로， 구체적으로, 화학식 7å1로 표시되는 화합물의 할로겐 과 화학식 83로 표시되는 화합물의 1차 아민이 반응하여 화학식 53로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 13의 단계 1 반응은 통상적으로 알려진 할로겐과 아 민을 결합시켜 아민본드를 형성할 수 있는 조건이라면 특히 한정되지 않는다.

본 발명에서는 크 !!을 통하여 반응을 진행하였으며， 염기 및 금속 리간드 존재하에 반응을 수행하였으며， 상기 염기는 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

13 통상적으로 사용하는 염기라면 한정되지 않고， -다이메틸아미노피리딘（아ᅵ쇼! ⁵ ） , 피리딘， 트라이에틸아민， ， -다이 이소프로필에틸아민 , 1，8 -디아자비사이클로 [5.4.0]_7 -운데센 에） 등 의 유기염기 또는 소둠카보네이트， 소둠바이카보네이트 , 수산화나트륨， 수산화칼륨， 내 등의 무기염기가 있으며 ， 이를 단독 또는 혼합하여 ， 당량 또는 과량으로 사용할 수 있다. 또한, 상기 금속 리간드는 팔라 둠 , 니켈， 구리 리간드 등을 사용할 수 있다 . 본 발명의 일 실시예에 서는 팔라듐 리간드로서 ?（1 ₂ （（比3） ₃ 를 사용하였으나， 이는 일례일 뿐 , 이에 한정되는 것은 아니다.

반응 용매는 아이소프로판올 , 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란 애） ; 디옥산; 에틸 에테르 , 1 , 2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（야00 , 디메틸설폭사이드（¾格0）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄 , 물， 아세토나젠설포네이트， 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트， 에틸아세테이트 , 페닐아세테이트， 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트 , 시크레이트， 락테이트 , 하이드록시부티레이트， 글리콜레이트 , 말레이트 , 타트레이트， 메탄설포네이트， 프로판설포네 이트， 나프탈렌 -1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며 ， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 13의 단계 2는 화학식 53로 표시되는 화합물과 화학 식 6크로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 43로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로 , 구체적으로， 화학식 53로 표시되는 화합물의 할로겐 과 화학식 6크로 표시되는 화합물의 수소가 반응하여 화학식 43로 표시 되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 의 단계 2 반응은 할로겐과 수소가 치환반응하는 조건이라면 특히 한정되지 않는다 .

반응 용매는 아이소프로판올， 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란（대 ; 디옥산; 에틸 에테르 , 1，2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（ 10， 디메틸설폭사이드（01 0）， 메틸렌클로라이드 , 디클로로에탄， 물， 아세토나젠설포네이트 , 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트， 에틸아세테이트 , 페닐아세테이트， 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트 , 시크레이트， 락테이트， 하이드록시부티 레이트， 글리콜레이트， 말레이트， 타트레이트， 메탄설포네이트 , 프로판설포네 이트 , 나프탈렌 -1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며 ， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 13의 단계 3은 화학식 43로 표시되는 화합물을 반응 시켜 화학식 23로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로， 구체적으로， 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

14 화학식 43로 표시되는 화합물의 니트로가 촉매 존재하에 수소화하여 1 차 아민이 되어 화학식 23로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다 . 상기 반응식 13의 단계 3 반응은 수소화가 일어날 수 있는 조건 이라면 한정되지 않으며 ， 그 촉매 또한 통상적으로 사용되는 촉매라면 한정되지 않고 사용할 수 있으며 ， 본 발명에서는 311이 ₂ · 2¾0를 사용 하였으나， 이에 한정되는 것은 아니다.

반응 용매는 아이소프로판올， 메탄올， 에탄올 , 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란 배） ; 디옥산 ; 에틸 에테르， 1 , 2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（^ ， 디메틸설폭사이드（에 ）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄 , 물， 아세토나젠설포네이트 , 톨루엔설포네이트 , 클로로벤젠설포네이트 , 크실렌설포네이트， 에틸아세테이트， 페닐아세테이트， 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트 , 시크레이트， 락테이트， 하이드록시부티레이트 , 글리콜레이트， 말레이트， 타트레이트， 메탄설포네이트， 프로판설포네 이트， 나프탈렌 -1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며 ， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 13의 단계 4는 화학식 23로 표시되는 화합물과 화학 식 33으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 13로 표시되는 화합물 을 제조하는 단계로， 구체적으로， 화학식 23로 표시되는 화합물의 1차 아민과 화학식 33으로 표시되는 화합물의 할로겐이 반응하여 아민본드 를 형성하여 화학식 로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 13의 단계 4 반응은 할로겐과 아민을 결합시켜 ^· 민 본드를 형성할 수 있는 조건이라면 특히 한정되지 않는다 .

본 발명에서는 염기 조건을 사용하였으며 ， 상기 염기로는

이메틸아미노피리딘 쇼! ⁵ ）， 피리딘， 트라이에틸아민， ， -다이이소프 로필에틸아민， 1，8 -디아자비사이클로［5.4.0］-7 -운데센내81］） 등의 유기 염기 또는 소둠카보네이트 , 소듐바이카보네이트， 수산화나트륨， 수산 화칼륨 , 애 등의 무기염기가 있으며 , 이를 단독 또는 혼합하여 , 당량 또는 과량으로 사용할 수 있다.

반응 용매는 아이소프로판올 , 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란 애） ; 디옥산; 에틸 에테르 , 1,2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（아 ）， 디메틸설폭사이드（ ! ）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄， 물， 아세토나젠설포네이트， 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트， 에틸아세테이트， 페닐아세테이트， 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트， 시크레이트， 락테이트， 하이드록시부티레이트， 글리콜레이트 , 말레이트 , 타트레이트 , 메탄설포네이트， 프로판설포네 이트， 나프탈렌 -1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트 , 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며 , 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

15

상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 113로 표시되는 화합물일 수 있다.

[화학식 113 ]

（상기 화학식 내에서，

은 -배 ⁴ 또는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 15원자 의 헤테로아릴이고,

2 ⁴ 는 직쇄 또는 분지쇄의 0 _{1- 1} ᄋ알킬， 비치환 또는 치환된 0 _{6- 14} 아 릴 또는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 10원자의 헤테로사이 클로알킬 - ₃ 알킬이고，

상기 치환된 아릴 , 헤테로아릴， 및 헤테로사이클로알킬은 -30 ₂ 2 ⁵ -?（=0）å ⁶ å ⁷ , -ᄄ대） ， 직쇄 또는 분지쇄의 （ - ₅ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고， 1、 1\ I ¹ 및 은 독립적으로 직쇄 또는 분지 쇄의 （ - ₅ 알킬 또는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 （ - ₅ 알킬으로 하 나 이상 치환된 아민이고; 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 （: 알콕시이고; 3은 내2¾ ¹⁰ 또는 - ^{1 1} 이고，

여기서 , ⁹ ， 및 이은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 - ₅ 알킬이고， 여기서 상기 알킬은 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄 의 （ ᅭ ₅ 알킬으로 하나 이상 치환된 아민으로 하나이상 치환될 수 있고, 또는 냔 및 ¹ （）은 이들이 결합된 원자와 함께 0 및 3로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고， 상기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 10원자의 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-5 알킬로 하나 이상 치환된 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로부 2019/177375 1»（：1/10公019/002915

16 터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다).

나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 8원자의 헤테로사이클로 알킬 1-3알킬이고,

상기 치환된 아릴， 헤테로아릴， 및 헤테로사이클로알킬은 - ， -? {=0)1 ⁶ 1 ⁷ , -0：=0)애2 ⁸ , 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알킬 및 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고， 1\ 1\ I ¹ 및 은 독립적으로 직쇄 또는 분지 쇄의 ^- ₃ 알킬 또는 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (^- ₃ 알킬으로 하 나 이상 치환된 아민이고; 2는 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알콕시이고; 은 - ¹⁰ 또는 - ¹¹ 이고，

여기서， 1\ ¹ ᄋ 및 ¹¹ 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 - ₃ 알킬이고， 여기서 상기 알킬은 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄 의 - ₃ 알킬으로 하나 이상 치환된 아민으로 하나이상 치환될 수 있고， 또는 ₂ ⁹ 및 。은 이들이 결합된 원자와 함께 0 및 으로 이 루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 8원자의 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있 고， 상기 치환된 헤테로사이클로알킬은 직쇄 또는 분지쇄의 - ₅ 알킬 및 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 3 내지 8원자의 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 - ₃ 알 킬로 하나 이상 치환된 헤테로사이클로알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다. 상기 화학식 에서，

상기 ¹ 은 -■-å ⁴ 또는 ^ 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또 는 치환된 5 내지 9원자의 헤테로아릴이고 ,

^는 직쇄 또는 분지쇄의 (^- ₃ 알킬， 비치환 또는 치환된 페닐 또 는 0 및 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5 또는 6원자의 헤테로사이클로알 킬 - ₃ 알킬이고,

상기 치환된 페닐， 헤테로아릴， 및 헤테로사이클로알킬은 -드어 ， (=0)2¾ ⁷ ， -0：=0)· , 메틸， 에틸 , 메톡시 및 에톡시로 이루어지는 군으로부터 선택되는 치환기로 하나 이상 치환될 수 있고， 1\ 1\ I ¹ 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

17 및 은 독립적으로 직쇄 또는 분지쇄의 ( - ₃ 알킬 또는 비치환 또는 메 틸으로 하나 이상 치환된 아민이고; 수소 또는 직쇄 또는 분지쇄의 (^- ₃ 알콕시이고; 3은 - ¹⁰ 또는 -的 ¹¹ 이고，

여기서， å ⁹ , 。 및 ¹ 은 독립적으로 수소 또는 직쇄 또는 분지 쇄의 (^- ₃ 알킬이고， 여기서 상기 알킬은 비치환 또는 메틸로 하나 이상 치환된 아민으로 하나이상 치환될 수 있고，

또는， ⁹ 및 。은 이들이 결합된 ^ 원자와 함께 비치환 또는 치 환된 피페리딘 또는 피페라진을 형성할 수 있고, 상기 치환된 피페리 딘 및 피페라진은 메틸， 에틸 및 비치환 또는 직쇄 또는 분지쇄의 0 _1-3 알킬로 하나 이상 치환된 피페라지닐 또는 모폴리닐로 이루어지는 군 으로부터 선택되는 하나 이상으로 치환될 수 있다.

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

18

본 발명에 따른 상기 화학식 113로 표시되는 화합물의 예로는 하 기의 화합물들을 들 수 있다:

<113-1 ñ （5-（（4-（（2-（이소프로필설포닐）페닐） 아미노）- 5 -모폴리 노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크 릴아미드 2,2,2 -트리플루오로아세트산염 ;

<113-2 ñ -（2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메틸）� ��미노）- 5-（（4-（（2-

（이소프로필설포닐）페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4- 메톡시페닐） ⁰ ]·크릴 이드 ;

<11 3 ñ （2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메틸）� �미노）- 5-（（4-（（ 2-

（디메틸포스폴리）페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메 톡시페닐）아크릴아미드 2, 2, 2 -트리플로오르아세트산염 :

<11> ^_ 4> （디메틸 ⁰ ！ ^· 미노）에틸）（메틸） ⁶ 1미노）一4 -더 1톡 시 -5-（（5 -몰포리노- 4-（（（테트라하이드로퓨란 -2 -일）메틸）아미노）피리미 딘- 2 -일）아미노）페닐）아크릴아미드 2, 2, 2 - 트리플로오르아세트산염 ;

<11 5 ñ -（5-（（4-（（2- 川 -디메틸설파모일）페닐）아미노）- 5 -모폴 리노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아 크릴아미드 2, 2, 2 -트리플로오르아세트산염 ;

<11）-6 ñ 1사_（ 2-（（ 2—（디메틸아미노）어!틸）（메틸）아미노� ��一 5—（（ 4-（（2- -디메틸설파모일）페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）-

4 -메톡시페닐）아크릴아마이드 2,2,2 -트리플로오르아세트산염 :

<11）-7 ñ （5-（（4-（（2, 4 -디메톡시페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미 딘一2 -일 노）-2-（（2-（디메틸 ⁰ ]·미노）에틸）（메틸） ⁰ ]·미노）-4-메톡시페 닐）아크릴아미드 2,2, 2 -트리플로우르아세트산염 ;

<11）-8 ñ 2-（（ 2-（（ 5- ⁰ ] ^· 크릴 ⁰ ！미도- 4 -（（ 2_（디메틸 ⁰ !·미노）에틸）（메 틸）아미노）- 2 -메톡시페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -일）아미노）_ 메틸벤젠아미드 2 ,2 ,2 -트리플로우르아세트산염

<113-9 ñ 2-（（2-（（5 -아크릴아미도- 2 -메톡시

일）페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -일）아미

2.2.2 -트리플로우르아세트산염 ;

<11 10> （5-（（4-（（2-（이소프로필설포닐）페닐） 아미노）- 5 -몰포리 노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 - 2-（4-（4 -메틸피페라진 - 1 -일）피페리 딘- 1 -일）페닐）아크릴아미드 2,2, 2 -트리플로우르아세트산염 ;

<113-11 ñ （4 -메톡시 -5-（（4-（1 -메틸 - 111-인돌- 3 -일）-5 -모폴리노피 리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진 - 1 -일）페닐）아크릴아마이드

2.2.2 -트리플로오르아세트산염 ;

<11 ₃ -12 ñ （2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메틸）� �미노）- ₄ -메톡시 -

5-（（4-（1 -메틸 -내-인돌 - 3 -일）-5 -모폴리노피리미딘 - 2 -일）아미노）페닐） 아크릴아마이드 2 ,2,2 -트리플로오르아세트산염 ;

<] -13 ñ （4 -메톡시- 5-（（4-（1 -메틸-내-인돌- 3 -일）-5 -모폴리노피 리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（4 -모폴리노피페리딘- 1 -일）페닐）아크릴아미드

2.2.2 -트리플로오르아세트산염 : 2019/177375 1»（그1^112019/002915

19

<113 ^_ 14> -（2-（2 -（디메틸아미노）에톡시）-4-메톡시 ~5 -（（4-（1 -메틸 -내-인돌- 3 -일）-5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）페닐）아크릴아미드 2, 2, 2 -트리플로오르아세트산염 ;

<11 15 ñ -（4 -메톡시- 5-（（4-（메틸아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2- 일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드 2, 2 ,2 -트리플 로우르아세트산염 ;

<11 16 ñ ᅡ（2-（（2-（디메틸아미노）에틸）（메틸� �아미노）- 4 -데톡시 -

5-（（4-（메틸아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）페닐）아크릴아미 드 2,2,2 -트리플로우르아세트산염 . 상기 화학식 내로 표시되는 화합물은, 하기 반응식 113에 나타낸 바와 같이 ,

화학식 7 ₃ 로 표시되는 화합물과 화학식 813로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 애로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 1）; 화학식 51）로 표시되는 화합물과 화학식 예로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 413로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 2）; 화학식 413로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 래로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 3）; 및

화학식 로 표시되는 화합물과 화학식 로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 比로 표시되는 화합물을 제조하는 단계（단계 4）;를 포함하는 상기 화학식 내로 표시되는 화합물의 제조방법으로 제조될 수 있다.

［반응식 1

2\> 比

（상기 반응식 比에서 , 1\ I ² 및 은 상기 화학식 내에서 정의한 바와 같고; 및

X ¹³ , X ²³ 및 표 는 독립적으로 할로겐이다）. 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

20 이하， 본 발명에 따른 상기 화학식 내로 표시되는 화합물의 제조 방법을 상세히 설명한다. 상기 반응식 내의 단계 1은 화학식 713로 표시되는 화합물과 화학 식 813로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 513로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로， 구체적으로， 화학식 713로 표시되는 화합물의 할로겐 과 화학식 813로 표시되는 화합물의 1차 아민이 반응하여 화학식 引 3로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 113의 단계 1 반응은 통상적으로 알려진 할로겐과 아 민을 결합시켜 아민본드를 형성할 수 있는 조건이라면 특히 한정되지 않는다.

본 발명에서는 통하여 반응을 진행하였으며 ， 염기 및 금속 리간드 존재하에 반응을 수행하였으며 ， 상기 염기는 1¾11（：11\ 1（1 63 1011에서 통상적으로 사용하는 염기라면 한정되지 않고， 川 -다이메틸아미노피리딘 쇼?）， 피리딘， 트라이에틸아민 , ， -다이 이소프로필에틸아민， 1,8 -디아자비사이클로 [5.4.0]-7 -운데센내에） 등 의 유기염기 또는 소듐카보네이트， 소둠바이카보네이트， 수산화나트륨， 수산화칼륨 , 애 등의 무기염기가 있으며 , 이를 단독 또는 혼합하여 ， 당량 또는 과량으로 사용할 수 있다 . 또한, 상기 금속 리간드는 팔라 둠， 니켈， 구리 리간드 등을 사용할 수 있다 . 본 발명의 일 실시예에 서는 팔라듐 리간드로서 므〔1 ₂ （北크） ₃ 를 사용하였으나， 이는 일례일 뿐， 이에 한정되는 것은 아니다.

반응 용매는 아이소프로판올， 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란 ） ; 디옥산; 에틸 에테르， 1， 2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（0¾ ）， 디메틸설폭사이드（0¾ 0）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄， 물 , 아세토나젠설포네이트 , 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트 , 에틸아세테이트， 페닐아세테이트， 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트 , 시크레이트， 락테이트 , 하이드록시부티레이트， 글리콜레이트 , 말레이트， 타트레이트 , 메탄설포네이트， . 프로판설포네 이트, 나프탈렌 -1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트 , 아세토나이트릴 등이 있으며 ， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 11）의 단계 2는 화학식 5 로 표시되는 화합물과 화학 식 애로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 的로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로 , 구체적으로 , 화학식 5）3로 표시되는 화합물의 할로겐 과 화학식 613로 표시되는 화합물의 수소가 반응하여 화학식 로 표시 되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 내의 단계 2 반응은 할로겐과 수소가 치환반응하는 조건이라면 특히 한정되지 않는다.

반응 용매는 아이소프로판올， 메탄올 , 에탄올 , 프로판올 및 부탄 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

21 올을 포함하는 저급 알코올; 테트라하이드로퓨란 배） ; 디옥산; 에틸 에테르， 1 , 2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（야 ）， 디메틸설폭사이드（ ）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄， 물， 아세토나젠설포네이트, 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트, 에틸아세테이트 , 페닐아세테이트 , 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트， 시크레이트， 락테이트， 하이드록시부티레이트， 글리콜레이트， 말레아트， 타트레이트， 메탄설포네이트, 프로판설포네 이트， 나프탈렌 - 1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 내의 단계 3은 화학식 朴로 표시되는 화합물을 반응 시켜 화학식 개로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로， 구체적으로， 화학식 로 표시되는 화합물의 니트로가 촉매 존재하에 수소화하여 1 차 아민이 되어 화학식 로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다. 상기 반응식 의 단계 3 반응은 수소화가 일어날 수 있는 조건 이라면 한정되지 않으며， 그 촉매 또한 통상적으로 사용되는 촉매라면 한정되지 않고 사용할 수 있으며 , 본 발명에서는 （：1 ₂ · 2¾0룰 사용 하였으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

반응 용매는 아이소프로판올， 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올 ; 테트라하이드로퓨란 ）; 디옥산; 에틸 에테르， 1，2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（야00 , 디메틸설폭사이드（아! ）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄， 물， 아세토나젠설포네이트， 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트 , 에틸아세테이트， 페닐아세테이트, 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트， 시크레이트， 락테이트， 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트， 타트레이트， 메탄설포네이트， 프로판설포네 이트， 나프탈렌 - 1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트， 만델레이트， 아세토나이트릴 등이 있으며 , 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 상기 반응식 내의 단계 4는 화학식 213로 표시되는 화합물과 화학 식 313로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 11）로 표시되는 화합물을 제조하는 단계로, 구체적으로, 화학식 213로 표시되는 화합물의 1차 아 민과 화학식 313로 표시되는 화합물의 할로겐이 반응하여 아민본드를 형성하여 화학식 113로 표시되는 화합물이 제조되는 단계이다.

상기 반응식 比의 단계 4 반응은 할로겐과 아민을 결합시켜 아민 본드를 형성할 수 있는 조건이라면 특히 한정되지 않는다.

본 발명에서는 염기 조건을 사용하였으며 , 상기 염기로는 川 -다 이메틸아미노피리딘 ， 피리딘 , 트라이에틸아민 , 川 -다이이소프 로필에틸아민 , 1 , 8 -디아자비사이클로 [ 5 . 4 . 0 ] -7 -운데센대311） 등의 유기 염기 또는 소듐카보네이트， 소둠바이카보네이트， 수산화나트륨, 수산 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

22 화칼륨, 애 등의 무기염기가 있으며 , 이를 단독 또는 혼합하여， 당량 또는 과량으로 사용할 수 있다.

반응 용매는 아이소프로판올, 메탄올， 에탄올， 프로판올 및 부탄 올을 포함하는 저급 알코올; 테트라하이드로퓨란（대 ; 디옥산; 에틸 에테르， 1，2 -다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매 ; 디메틸포름아 미드（야00， 디메틸설폭사이드（야60）， 메틸렌클로라이드， 디클로로에탄 , 물， 아세토나젠설포네이트， 톨루엔설포네이트， 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트， 에틸아세테이트， 페닐아세테이트, 페닐프로피오네 이트， 페닐부티레이트， 시크레이트, 락테이트， 하이드록시부티레이트， 글리콜레이트 , 말레이트， 타트레이트， 메탄설포네이트， 프로판설포네 이트， 나프탈렌 - 1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네이트, 만델레이트, 아세토나이트릴 등이 있으며， 이를 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있 다. 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며 , 염으로는 약학적으로 허용가능 한 유리산（ 근근 01）에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가 염은 염산， 질산， 인산， 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산， 아질산， 아인산 등과 같은 무기산류， 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐- 치환된 알카노에이트， 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산， 트리플루오로아세트산， 아세테이트, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인 산， 글루콘산, 메탄설폰산， 4 -톨루엔설폰산, 주석산， 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염의 종류로 는 설페이트， 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트， 바이설파이트 , 니트레이트， 포스페이트， 모노하이드로겐 포스페이트， 디하이드로겐 포스페이트， 메타포스페이트， 피로포스페이트 클로라이드 , 브로마이드， 아이오다이드, 플루오라이드， 아세테이트， 프로피오네이트, 데카노에 이트, 카프릴레이트， 아크릴레이트 , 포메이트 , 이소부티레이트, 카프 레이트 , 헵타노에이트， 프로피올레이트 , 옥살레이트 , 말로네이트 , 석 시네이트, 수베레이트， 세바케이트 , 푸마레이트， 말리에이트, 부틴_ 1 , 4 -디오에이트， 핵산- 1，6 -디오에이트， 벤조에이트， 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 다니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시 벤조에이트， 프탈레이트, 테레프탈레이트， 벤젠설포네이트， 톨루엔설 포네이트, 클로로벤젠설포네이트， 크실렌설포네이트， 페닐아세테이트， 페닐프로피오네이트， 페닐부티레이트， 시트레이트， 락테이트， |3 -하이 드록시부티레이트， 글리콜레이트, 말레이트， 타트레이트， 메탄설포네 이트 , 프로판설포네이트， 나프탈렌 - 1 -설포네이트， 나프탈렌 -2 -설포네 이트， 만델레이트 등을 포함한다.

본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며 , 예를 들면 화학식 1의 유도체를 메탄올, 에탄올， 아세톤， 메틸렌클로 라이드， 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기 산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나， 용매와 과 량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜서 제 조할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량 의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용 해하고， 비용해 화합물 염을 여과하고， 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때 , 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약 상 적합하다. 또한， 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토 금속 염을 적당한 음염 (예， 질산은)과 반응시켜 얻는다.

나아가， 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약 학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라， 이로부터 제조될 수 있는 용매화 물， 광학 이성질체， 수화물 등을 모두 포함한다. 본 발명의 다른 측면은， 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다 .

이때 , 상기 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor ) 야생형 또는 EGFR 돌연변이를 억제할 수 있다.

상기 EGFR 돌연변이는 EGFR Del 19， EGFR L858R, EGFR

Dell9/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S , EGFR Dell9/T790M/C797S, EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA 및 HER2 YVMA으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이 상일 수 있다.

상기 화합물은 ABLKF317I ) -phosphor yl at ed , ABLKF317L)- phosphorylated, BLK, BTK, EGFR, EGFR(E746-A750de 1 ) , EGFR(G719C) , EGFR(G719S) , EGFR(L747-E749de 1 , A750P) , EGFR(L747-S752de 1 , P753S) , EGFR(L747-T751del ,Sins) , EGFRCL858R) , EGFR(L858R,T790M) ,

EGFR L861Q), EGFR(T790M) , ERBB2 , ERBB4, 및 TNK2로 이루어지는 군으 로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 키나아제에 대하여 저해활성을 나타낼 수 있다.

상기 암은 EGFR에 대하여 돌연변이가 발현된 것일 수 있다.

상기 암은 가성점액종， 간내 담도암 , 간모세포종， 간암 , 갑상선 암, 결장암， 고환암， 골수이형성증후군， 교모세포종, 구강암, 구순암, 균상식육종, 급성골수성백혈병 , 급성림프구성백혈병， 기저세포암， 난 소상피암， 난소생식세포암， 남성유방암， 뇌암, 뇌하수체선종, 다발성 골수종， 담낭암， 담도암， 대장암, 만성골수성백혈병， 만성림프구백혈 병， 망막모세포종， 맥락막흑색종， 바터팽대부암， 방광암， 복막암， 부 갑상선암, 부신암, 비부비동암, 비소세포폐암， 설암， 성상세포종， 소 세포폐암, 소아뇌암， 소아림프종, 소아백혈병， 소장암, 수막종， 식도 암, 신경교종， 신우암, 신장암, 심장암, 십이지장암， 악성 연부조직 암， 악성골암, 악성림프종, 악성중피종， 악성흑색종， 안암， 외음부암， 요관암, 요도암, 원발부위불명암， 위림프종, 위암， 위유암종， 위장관 간질암， 윌름소암 , 유방암 , 육종， 음경암， 인두암， 임신융모질환， 자 궁경부암， 자궁내막암, 자궁육종, 전립선암, 전이성 골암， 전이성뇌암, 종격동암 , 직장암， 직장유암종， 질암， 척수암， 청신경초종 , 췌장암, 침샘암， 카포시 육종， 파제트병 , 편도암， 편평상피세포암 폐선암, 폐 암， 폐편평상피세포암， 피부암， 항문암, 횡문근육종， 후두암， 흉막암， 혈액암， 및 흉선암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다. 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 Ba/F3세포주에서 EGFR 야생형에서도 우수한 억제능을 나타낼 뿐만 아니라 , EGFR 단일， 이중 또는 삼중 돌연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타낸다 (실험예 la 및 lb 참조) .

또한， 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 폐암 세포주인 A549 , PC9 , PC9GR, H1975 세포에 대하여 우수한 증식 억제능을 나타낸 다 (실험예 la 및 lb 참조 ) . 따라서， 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은

EGFR( ep i derma 1 growth factor receptor ) 야생형 또는 돌연변이에 대 하여 높은 억제능을 나타내므로， EGFR 야생형 또는 EGFR 돌연변이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고， 폐암 세포주 증식 억제 능이 우수한 바, 특히， 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가 능한 염은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여 될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제， 증량제 , 결합 제， 습윤제， 붕해제， 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제 , 환제， 산제， 과립제， 캡슐제 등 이 포함되며， 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적 어도 하나 이상의 부형제 예를 들면， 전분， 탄산칼슘， 수크로오스

(sucrose) 또는 락토오스 ( lactose)， 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘， 탈크 등과 같은 윤활제들 도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제 , 내용액제， 유제， 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파 라핀 이외에 여러 가지 부형제 , 예를 들면 습윤제， 감미제 , 방향제， 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수 용액 , 비수성용제 , 현탁제， 유제가 포함된다. 비수성용제 , 현탁용제로 는 프로필렌글리콜 (propylene glycol ) , 폴리에틸렌 글리콜， 올리브 오 일과 같은 식물성 가름， 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가 능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있 으며， 비경구 투여는 피하주사， 정맥주사， 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.

이때 , 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1 로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 안정제 또 는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고， 이 를 엠플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제， 안정화제 , 수화제 또는 유화 촉진제， 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제， 및 기타 치료적으로 유 용한 물질을 함유할 수 있으며， 통상적인 방법인 혼합， 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다. 경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제 , 환제， 경/연질 캅셀제， 액제， 현탁제， 유화제， 시럽제， 과립제 , 엘릭시르제， 트로키제 등이 있는데， 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제 (예 : 락토즈， 덱스트로즈, 수크로즈， 만니톨， 솔비톨， 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제 (예 : 실 리카， 탈크， 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리 에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이 트, 전분 페이스트， 젤라틴 , 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메될셀룰로 즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘 등과 같은 결합제를 함유할 수 있으며， 경우에 따라 전분， 한천 , 알긴산 또는 그의 나트륨 염 등과 같은 붕해 제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제， 착색제 , 향미제， 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물， 이의 광학 이성질체 또는 이 의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또 는 치료용 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나, 다른 사용중인 항암제와 병용투여하여 사용할 수 있다. 본 발명의 다른 측면은， 상기 화학식 1로 표시되는 화합물， 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.

이때 , 상기 화합물은 EGFR(epidermal growth factor receptor ) 야생형 또는 EGFR 돌연변이를 억제할 수 있다.

상기 EGFR 돌연변이는 EGFR Del 19， EGFR L858R, EGFR Dell9/T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S , EGFR DeU9/T790M/C797S, EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA 및 HER2 YVMA로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상 일 수 있다.

상기 화합물은 ABLKF317I)-phosphorylated, ABLKF317L)- phosphorylatecl, BLK, BTK, EGFR, EGFR(E746-A750del ) , EGFR(G719C) , EGFR(G719S), EGFR(L747_E749de 1 , A750P) , EGFR(L747-S752de 1 , P753S) , 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

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£0?요（1 747 - 175 1， ） £0?1 85810， £0 요（ 581?，179에）

EGFR（L861Q）， 묘0 묘0790¾0， £요832， 및 1狀2로 이루어지는 군으 로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 키나아제에 대하여 저해활성을 나타낼 수 있다.

상기 암은 묘 요에 대하여 돌연변이가 발현된 것일 수 있다.

상기 암은 가성점액종 , 간내 담도암， 간모세포종， 간암， 갑상선 암， 결장암， 고환암, 골수이형성증후군， 교모세포종， 구강암, 구순암, 균상식육종， 급성골수성백혈병 , 급성림프구성백혈병， 기저세포암， 난 소상피암, 난소생식세포암， 남성유방암， 뇌암， 뇌하수체선종， 다발성 골수종, 담낭암, 담도암， 대장암, 만성골수성백혈병， 만성림프구백혈 병 , 망막모세포종 , 맥락막흑색종， 바터팽대부암， 방광암， 복막암， 부 갑상선암, 부신암, 비부비동암， 비소세포폐암， 설암, 성상세포종, 소 세포폐암， 소아뇌암， 소아림프종， 소아백혈병 , 소장암, 수막종， 식도 암, 신경교종， 신우암， 신장암, 심장암， 십이지장암, 악성 연부조직 암, 악성골암, 악성림프종， 악성중피종， 악성흑색종, 안암， 외음부암， 요관암, 요도암， 원발부위불명암, 위림프종， 위암, 위유암종， 위장관 간질암， 윌름스암, 유방암， 육종， 음경암, 인두암， 임신융모질환, 자 궁경부암， 자궁내막암， 자궁육종, 전립선암， 전이성 골암， 전이성뇌암， 종격동암, 직장암， 직장유암종， 질암, 척수암， 청신경초종， 췌장암， 침샘암, 카포시 육종， 파제트병 , 편도암， 편평상피세포암， 폐선암， 폐 암， 폐편평상피세포암, 파부암, 항문암， 횡문근육종， 후두암， 흉막암， 혈액암, 및 흉선암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다 . 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은， 묘 요 야생형 , 돌연변이에 대하여 높은 억제능을 나타냄으로써， 암의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물로 식품， 음료 등의 건강기능보조 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 식품에 그대 로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고， 통 상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적（예방 또는 개선용）에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0 . 1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하 거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며 , 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 또한， 본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제 한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화 물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예 는 모노사카라이드， 예를 들어， 포도당， 과당 등 ; 디사카라이드， 예를 들어 말토스 , 슈크로스 등 ; 및 폴리사카라이드 , 예를 들어 덱스트린， 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당， 및 자일리톨， 소르비、톨, 에리 트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 （타우마틴， 스테비아 추출물（예를 들어 레바우디오시드 쇼， 글리시르히 진등） 및 합성 향미제（사카린， 아스파르탐 등）를 유라하게 사용할 수 있다 . 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 요당 일반적 으로 약 1 내지 바람직하게는 약 5 내지 12 _§ 이다. ^' 나아가, 상기 외에 본 발명에 따른 화학식 1로 .표사되는 화합은 여러 가지 영양제， 비타민， 광물（전해질）， 합성 풍미제 및 천연 풍미 제 등의 풍미제， 착색제 및 중진제（치즈， 초콜릿 등 ^· X 펙트산 및 그의 염 , 알긴산 및 그의 염， 유기산， 보호성 콜로이드: ^. .중점제 , 조절제， 안정화제 , 방부제， 글리세린 , 알코올， 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물 은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과 육을 함유할 수 있다. 본 발명의 다른 측면은， 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성 물 또는 건강기능식품 조성물을 필요한 대상에게 투여하는 단계를 포 함하는 암의 예방 또는 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 다른 측면은, 암의 예방 또는 치료에 있어서의， 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약학적 조성물 또는 건강기능식품 조성물의 용도를 제공한다 .

【발명의 실시를 위한 형태】

이하， 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단， 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐， 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

＜정제용 중압액체크로마토그래피（Medium pressure liquid chromatography； MPLC）＞

중압액체크로마토그래피는 TELEEDYNE I SCO사의 CombiFlash Rf +UV을 사용하였다.

＜분석용 HPLC 조건 （ACQUITY UPLC H-Class Core System） ñ

Waters사 제조 UPLC system（ACQUITY UPLC PDA Detector）에 Waters사 제조 mass QDA Detector가 장착된 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 ACQUITY UPLC®BEH C18 (1.7 _， 2.1X50 _)였으며 컬럼온도는 30 ^° C에서 진행하였다

이동상 A는 0.1% 포름산이 포함된 물， 이동상 B는 0.1%의 포름산 이 포함된 아세토니트릴을 사용하였다.

Gradient cond i t i on( 10-100% B로 3분, 이동속도 =0.6 ml/min)

＜정제용 Prep-LCMS (Preparative-Liquid chromatography mass spectrometry ñ

Waters乂！· 제조 Autopur i f i cat i onHPLC system(2767 sample manger , 2545 binary gradient module, 2998 Photodiode Array Detector)에 Waters사 제조 mass QDA Detector가 장착된 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 SunFire®Prep C18 0BD™(5 쎈1 , 19X50 _)였으며 컬 럼온도는 실온에서 진행하였다 .

이동상 A는 0.035% 트리플루오로아세트산이 포함된 물， 이동상 B 는 0.035% 트리플루오로아세트산이 포함된 메탄올을 사용하였다.

Gradient cond i t i on( 10-100% B로 10분, 이동속도 =25 ml /min) á정제용 Prep-150 LC System (Preparative-Liquid chromatography UV spectrometry ñ

Waters乂！· 제조 Prep 150 LC system(2545 Quaternary gradient module, 2998 Photodiode Array Detector, Fraction collector 江［)에 Waters사 제조 장비를 사용하였다. 사용 컬럼은 Water사의 XTERRA®Prep RP18 0BD™ (10 卵 , 30X300 _)였으며 컬럼온도는 실온 에서 진행하였다.

Gradient condi t ion(3-100% B로 120분 , 이동속도 =40m 1 /mi n)

＜마이크로파 반응＞

Biotage사의 Initiator에 의해， 스냅 캡 반응 바이알 (snap cap react i on vial)을 사용하였다. 사용된 시판 시약은 추가 정제 없이 사용하였다. 본 발명에서 실 온이란 20~25 ^° C정도의 온도를 말한다 . 감압하 농축 또는 용매 증류 제 거는, 회전식 증발기 (rotary evaporator)를 사용하였다.

＜실시예 la-l＞ 於 (5-((5-(3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일 )- 4-((2- (이소프로필설포닐 )페닐 )아미노)피리미딘- 2 -일 )아미노)- 4 -메톡시 - 2- (4 -메틸피페라진- 1-일)페닐)아크릴아미드의 제조 2019/177375 1»（：1/10公019/002915

29

단계 1： 5 로- （2-（이소프로필설포닐）페닐）피리미 딘- 4 아민의 제

0 ^° （：에서 1/1.01 ）의 혼합물 중의 수소화나트륨

（60%, 234.（½요, 현탁액에 （2.71111八）.3 ） 중의

2-（이소프로필설포닐）아닐린（583.아 ， 2.93[에1 ₀ 1）을 천천히 적가하였다. 반응용액을 0公에서 30분 동안 교반하고， ■1"야 0（2.71111八）.31]!1）에 희 석된 5 -브로모- 2,4 -디클로로피리미딘（1.0요， 4.39_01）을 천천히 적가 하였다. 반응용액을 실온까지 서서히 가온시키고 밤새 교반하였다. 반 응혼합물을 0 에서 얼음물을 적가하여 반응을 종결시키고， 생성된 고 체를 여과하여 갈색고체의 목적화합물 5 -브로모- 2ᅳ클로로- （2-（이소 프로필설포닐）페닐）피리미딘- 4 -아민（789.011 , 69%）을 수득하였다 .

{^/å） : 392.1 [1+1] ⁺ , 1正1乂： I·. I （ !!） : 1.77 단계 2： 2 -클로로- 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）-，（2-（이소 프로필설포닐）페닐）피리미딘- 4 -아민의제조

상기 실시예 -1의 단계 1에서 얻어진 5 -브로모- 2 -클로로- -（ 2- （이소프로필설포닐）페닐）피리미딘- 4 -아민（200.01 ， 0.51_ ₀ 1）과 3,6- 디하이드로 -2分-피란 -4 -보로닉 엑시드 피나콜 에스터（108.0 _| ， 0.51빼01）이 녹아있는 1,4 -다이옥산（4.6 ）의 혼합용액에 加 ₂ （：0 ₃ （1.5 1.53_ ₀ 1）을 넣은 후 10분 동안 질소를 흘려주면서 초 음파 처리를 하였다. 반응 혼합물에 〔1 1¾ ₃ ） ₄ （59.011 , 0.05 _1111110 1）를 넣은 후， 80 3시간 동안 교반하였다. 반응 완결 후 에틸아세테이트 와 물을 이용하여 추출하였다. 모아진 유기층을 소금물로 씻어주고 무 수 황산나트륨으로 건조한 다음 감압 하에서 농축하고, ¾1此（：（디클로로 메탄/메탄올）로 정제하여 목적 화합물（207.011 , 100%）을 얻었다.

15 （미/ : 394.3 [¾!+1] ⁺ , 1. （1 11） : 1.77 단계 3： 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- -（4 -플루오로- 2 -메 톡시 -5 -니트로페닐）- -（2-（이소프로필설포닐）페닐）피리미딘- 2, 4 -디아 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

30 민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 2에서 얻어진 2 -클로로- 5-（3,6 -디하이 드로- 2分-피란- 4 -일） - （2-（이소프로필설포닐）페닐）피리미딘- 4 -아민 （207.01^, 0.53_01）, 4 -플루오로- 2 -메톡시- 5 -니트로아닐린（ 147.01犯，

0.791 01）과 탄산칼륨（364.이끼 2.63_101）를 ）에 첨가 하여 녹인 후 질소하에서 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였 다 . 반응 혼합물에 ?〔1 ₂ （ 3） ₃ （48.0111용， 0.0511111101） 및 표；）]! （25.011 ，

0.05_101）을 100 I：에서 첨가한 후， 2시간 동안 교반 하였다 . 반응 완 결 후 셀라이트로 여과하고， 디클로로메탄으로 씻어주었다. 얻어진 여 과액을 농축한 후 , 此 디클로로메탄/메탄올）로 정제하여 목적화합물 （104.0111 _§ , 36%）을 수득하였다.

미/ : 544.3 [¾1+1] ⁺ ， \JPLC !·. （ : 1.54 단계 4： 5-（3, 6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）-#-（2-（이소프로필설 포닐）페닐）- -（2 -메톡시- 4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）-5 -니트로페닐）피리 미딘- 2,4 -디아민의 제조

상기 실시예 _1의 단계 3에서 얻어진 5-（3 ,6 -디하이드로 -2分-피 란- 4 -일）- -（4 -플루오로- 2 -메톡시 -5 -니트로페닐）- -（2-（이소프로필 설포닐）페닐）피리미딘-2,4-디아민（55.811 ， 0.10_01）를 1， 4 -다이옥산

（2.01111）에 녹인 후， 1 -메틸피페라진（0.1 ， 1.031111!101）을 넣고 2시간동 안 1001：에서 교반하였다. 반응용액의 온도를 실온으로 내린 후， 감압 농축한 다음 잔류물을 ¾ 1乂：（디클로로메탄/메탄올）로 정제하여 원하는 목적 화합물（32.011 ， 51%）을 얻었다

/ : 624.5 [¾1+1] ⁺ ， 1乂： I、 I （ ） : 1.23 단계 5： -（5 -아미노- 2 -메톡시 - 4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）- 5-（3, 6 -디하이드로 -2分-피란- 4 -일）- -（2-（이소프로필설포닐）페닐）피리 미딘 - 2 ,4 -디아민의 제조

상기 실시예 -1의 단계 4에서 얻어진 5-（3,6 -디하이드로- 2"-피 란- 4 -일）- -（2-（이소프로필설포닐）페닐）- -（2 -메톡시 -4-（4 -메틸피페 라진- 1 -일）- 5 -니트로페닐）피리미딘- 2,4 -디아민（32.½요， 0.05_1 ₀ 1） 및 SnCl ₂ .2H ₂ O ll8.Omg， 0.52_ ₀ 1）을 에틸아세테이트 （6.0미1）에 녹인 다 음, 50公에서 2시간동안 교반하였다. 반응용액의 온도를 실온으로 내 린 후， 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 적가하였다. 반응 혼합물 에 무수 소둠 카보네이트를 첨가하여 7로 조절하였다 . 반응 혼합물 을 셀라이트로 여과하고, 에틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다. 여 과액을 감압 농축하여 목적 화합물（28.0!^， 92%）을 얻었으며 , 정제없 이 다음 반응에 사용하였다.

: 594.5 [1+1] ⁺ , 1止 I、 I （ ） : 1.11 단계 6： 於（5-（（5-（3,6 -디하이드로 _2分 ^~ 피란- 4 -일）- 4-（（2-（이소프 로필설포닐）페닐）아미노）피리미딘 - 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피 2019/177375 1»（그1^1{2019/002915

31 페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 5에서 얻어진 -（5 -아미노- 2 -메톡시- 4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）-5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란- 4 -일、- - （2-（이소프로필설포닐）페닐）피리미딘- 2 ,4 -디아민（28.3!]^, 0.0511111101）을 1^（8.01111）에 녹인 후 , 포화 的0 ₃ （8.（½1）을 가한 뒤， 01：에서 격렬 히 교반 하면서 아크릴로일 클로라이드（ 1 ₀ （±1아 6）（45.0 ， 0.4811111101）를 천천히 적가하였다. 10분 동안 교반 후 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 주줄한 후 , 모아진 유기증을 무수 황산나트륨으로 건조하였다 . 여과액을 감압 농축한 후 ¾田 （실리카겔， 디클로로메탄 : 메탄올 = 15:1）로 정제하여 목적화합물（8.011 ， 26%）을 수득하였다 .

15（111/2） : 648.5 [¾!+1] ⁺ ， 1、 [ （ ） : 1.18 상기 실시예 13-1과 동일한 방법으로 실시예 13-2 내지 13-11을 제조하였으며， 실시예 1 ₃ -1 내지 13-11의 화학구조를 하기 표 1에 , 화 합물명 , 수율， 및 1平1止 분석 결과를 하기 표 2에 정리하여 나타내었다.

2019/177375 1»（：1/10公019/002915

33

표 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

34

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

35 - 2019/177375 1»（：1^묘2019/002915

36

<실시예 13-12> 於（5-（（5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（1- 메틸- 1分-인돌 -3 -일）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시- 2-（4 -메틸피페라 진- 1 -일）페닐）아크릴아미드의 제조

단계 1： 3-（5 -브로모- 2 -클로로피리미딘- 4 -일）- 1分-인돌의 제조 질소 하에 인돌（10.3 _§ ， 87.77_ ₀ 1）을 재 100.0이 1）에 녹인 후， 이하에서 메틸마그네슘브로마이드 용액（29.31111， 87.77_ ₀ 1 , 3M 뇨아）을 20분에 걸쳐 천천히 적가하였다. 그 혼합용액을 상온에서 100분 동안 교반한 후， ! ^' 배（40.01 ）에 녹아져 있는 5 -브로모- 2,4 -디클 로로피리미딘（10.0 _§ ， 43.88_1 ₀ 1）을 실온에서 첨가하였다 . 그 반응 용 액을 60 ^° （：로 가열한 후， 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온 으로 냉각시키고 메탄올을 첨가하여 반응을 종결한 후， 에틸아세테이 트 및 물을 이용하여 추출하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조한 후 감압하에서 농축하였다 . 잔류물을 핵산/에틸아세테이트로 재결정하며 고체의 목적 화합물（7.4 _§ ， 54%）을 수득하였다.

15（111/2） : 308.0 [¾1+1] ⁺ ， 卵沈 1 ^* . I ） : 1.79 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

37 단계 2： 3-（5 -브로모- 2 -클로로피리미딘- 4 -일）- 1 -메틸- 1分-인돌의 제조

상기 실시예 13-12의 단계 1에서 얻어진 3-（5 -브로모- 2 -클로로피 리미딘- 4 -일）- 1 인돌（3.0요， 9.72_ ₀ 1）을 녹인 후， 온 도를 01：로 넁각한 다음， 수소화나트륨（ 12.64_ ₀ 1）을 넣었다. 혼합용액을 01：에서 30분동안 반응시킨 후, 요오드화메틸 （0.8| ， 12.6411111101）을 적가하였다. 그 반응용액을 상온에서 1.5시간 동안 반응시켰다. 과량의 물을 넣어 형성된 고체를 여과하여 건조 시 켜 고체의 목적 화합물（3.0 _§ ， 96%）을 수득하였다.

/ : 322.5 [¾1+1] ⁺ , 애 1、 （이 ） : 1.97 3： 3-（2 -클로로- 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）피리미딘- 메틸- 1分-인돌의 제조

실시예 13-1의 단계 2와 유사하게 수행하여 목적화합물 제조하였다.

（ ） : 326.2 [¾1+1] ⁺ , 1正1乂： :、 I （ 비 : 1.81 단계 4： 5-（3, 6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- -（4 -플루오로- 2 -메톡 시- 5 -니트로페닐）-4-（1 -메틸- 1分-인돌 -3 -일）피리미딘- 2 -아민의 제조 상기 실시예 -1의 단계 3과 유사하게 수행하여 목적화합물

（62%）을 제조하였다.

15 : 476.3 [1{+1]\ 1正1乂： 1. . （미 ） : 1.63 단계 5： 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- #-（2 -메톡시 - 4-（4 -메 틸피페라진- 1 -일）-5 -니트로페닐）-4-（1 -메틸- 1分-인돌 -3 -일）피리미딘 - 2- 아민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 4와 유사하게 수행하여 목적 화합물

（62%）을 제조하였다.

七. （111111） : 1.28 단계 6： -（5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（1 -메틸- 1分-인 돌- 3 -일）피리미딘- 2 -일）-6 -메톡시 -4-（4 -메틸피페라진- 1-일）벤젠- 1,3- 디아민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 5와 유사하게 수행하여 목적 화합물

（88%）을 얻었으며， 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

13 （（ ₁₁ /2） : 526.4 [¾1+1] ⁺ ， [平 . （이比） : 1.12 단계 7： （5-（（5_（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（1 -메틸- 1分_ 인돌- 3 -일）피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피페라진- 1 -일） 페닐）아크릴아미드의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 6과 유사하게 수행하여 목적 화합물

（30%）을 제조하였다. 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

38 出 (111/ X ) : 580.5 []\1+1] ⁺ , 1. 七. ( 1111 II ) : 1.16 상기 실시예 -12와 동일한 방법으로 실시예 13-13 내지 1크-16 을 제조하였으며， 실시예 -12 내지 13-16의 화학구조를 하기 표 3에， 화합물명， 수율， 및 분석 결과를 하기 표 4에 정리하여 나타내었 다.

【표 3]

【표 4] 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

40

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

41

＜실시예 13-17＞ -（5-（（5-（3, 6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（（2- 메톡시에틸）。1·미노）피리미딘- 2 -일）^1·미노）一 2-（（2-（다이메틸（가·미노）에 틸）（메틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드 2 ,2,2 -트리플루오로아세 트산염의 제조

단계 1： 5 -브로모- 2 -클로로- -（2 -메톡시에틸）피리미딘- 4 -아민의 제조

5 -브로모- 2,4 -디클로로피리미딘（1.0 _§ ， 4.39_ ₀ 1）을 ¾ 0 20.（½1） 에 희석한 용액에 트리에틸아민（1.1 1， 7.46|_01）과 2 -메톡시에탄- 1- 아민（0.41111， 4.281에1 ₀ 1）을 순차적으로 넣은 후 상온에서 5시간 동안 교 반하였다. 반응 종결 후 반응 용매를 농축한 다음 에틸아세테이트와 증류수를 이용하여 주줄한 뒤 , 황산나트륨으로 건조하였다. 여과액을 감압 농축하여 목적화합물（1.2용， 103%）을 얻었으며 , 정제없이 다음 반 응에 사용하였다.

（111/2） : 266.0 1. （1^11） : 1.48 단계 2： 2 -클로로- 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- -（2 -메톡시 에틸）피리미딘- 4 -아민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 2와 유사하게 수행하여 목적화합물

（63%）을 제조하였다.

15（111/2） : 270.1 [¾1+1] ⁺ ， \JFLC （111111） : 1.46 단계 3： 5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- -（4 -플루오로- 2 -메 톡시 - 5 -니트로페닐） - -（ 2 -메특시에틸）피리미딘 - 2， 4 -디아민의 제조 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

42 상기 실시예 13-1의 단계 3과 유사하게 수행하여 목적화합물 （96%）을 제조하였다.

13（111八） : 420.3 +1] ⁺ ， 에니： 七. （ 11） : 1.22 단계 4： 5ᅳ（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- -（4-（（2-（디메틸아 미노）에틸）（메틸）아미노）- 2 -메톡시 -5 -니트로페닐）- -（2 -메톡시에틸） 피리미딘- 2,4 -디아민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 4에서 사용한 , 1 -메틸피페라진을 대신 하여 ， ， -트리메틸에탄- 1，2 -디아민을 사용한 것을 제외하고, 상기 실시예 13-1의 단계 4와 유사하게 수행하여 목적화합물（57%）을 제조하 였다.

15（111/2） : 502.4 [1+1]\ 1 ^* . I （01^） : 1.04 단계 5： -（5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（（2 -메톡시에 틸）아미노）피리미딘 ^_ 2 -일） - -（ 2_（디메틸아미노）에틸） _5 -메톡시 - _메 틸벤젠- 1,2，4 -트리아민의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 5와 유사하게 수행하여 목적화합물 （43%）을 제조하였다.

15（1^/ ₂ ） : 472.4 +1] ⁺ ， 七. （ 11） : 0.80 단계 6： 於（5-（（5-（3,6 -디하이드로 -2分-피란 -4 -일）- 4-（（2 -메톡시 에틸）아미노）피리미딘一 2 -일）아미노）一 2-（（2-（다이메틸아미노）에틸）（메 틸）아미노）- 4 -메톡시페닐）아크릴아미드， 2, 2, 2 -트리플루오로아세트산 염 의 제조

상기 실시예 13-1의 단계 6에서 사용한 크로마토그래피를 대신하 여 쇼 01乂:- 장치를 사용한 것을 제외하고, 상기 실시예 1 ₃ _1의 단계 6과 유사하게 수행하여 목적화합물（2%）을 제조하였다.

분석용 1正[乂： （1.02분）

요 / : 526.4 +1] ⁺ ， I （ : 1.02 상기 실시예 13-17과 동일한 방법으로 실시예 1크-18 및 13-19를 제조하였으며， 실시예 1 ₃ -17 내지 -19의 화학구조를 하기 표 5에 , 화합물명， 수율, 및 1正1止 분석 결과를 하기 표 6에 정리하여 나타내었 다.

【표 5】

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

43

【표 6]

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

44

<실시예 11）-1> （5-（（4-（（2-（이소프로필설포닐）페닐） 아미노）- 5- 모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노） -4-메톡시 -2-（4 -메틸피페라진-! _· -일）페 닐）아크릴아마이드 2, 2,2 -트리플루오르아세트산염의 제조

단계 1: 5 -모폴린피리미딘- 2, 4（1分, 3分）-디온의 제조 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

45

5 -브로모우라실（12. ， 62.8이_01）을 모폴린（1081111， 1.2411101）에 넣은 후， 마이크로파를 조사하여 1001：에서 10분동안 가열한 후， 온도 를 실온으로 낮추어 반응을 종료하였다. 생성된 현탁액에 메탄올로 희 석한 다음 필터하여 목적 화합물（11.0요， 89%）을 얻었다.

（미/ : 198.2 [¾1+1] ⁺ ， I （ : 0.38 단계 2： 4-（2,4 -디클로로피리미딘- 5 -일）모폴린의 제조

상기 실시예 比-1 단계 1에서 얻어진 화합물（12.0 _§ ， 60.901_01） 과 트리에틸아민 염산염（25.1 _§ , 182.40_101）을 이 ）을 넣어서 801：에서 4（ 동안 교반 후 마지막 3시간동안 교반 환류를 하였다. 반 응물을 실온으로 식힌 후, 남은 를 감압하에서 농축하여 얼음물 에 넣었다. 생성된 고체를 과량의 에틸아세테이트에 녹여 포화 å^（：0 ₃ 용액으로 닦아 준 뒤， 유기층을 황산나트륨으로 건조 후 감압하에서 농죽하여 목적 화합물 4-（2,4 -디클로로피리미딘- 5 -일）모폴린（7.0용， 50%）을 얻었다.

¾ （111/2） : 234.1 +1] ⁺ , 미凡。 1 （11^11） : 1.57 단계 3： 2-（（2 -클로로- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -일）아미노）-久 -디 메틸벤젠설폰아마이드의 제조

0 ^° （：에서 수소화나트륨（60%, 319.0! , 7.96_01）을 ■ ■30（비율 9/1）의 혼합용액에 넣은 현탁액에 2-（이소프로필설포닐）아닐린 （794.51^， 3.98|빼01）을 / （비율 9/1） 혼합용액에 희석한 것을 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 01：에서 30분 동안 교반하고 , ■ /■ （비율 9/1）에 희석된 4-（2, 4 -디클로로피리미딘- 5 -일）모폴린 （1.4 _§ , 5.981_ ₀ 1）을 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 실온까지 서서 히 가온시키고 밤새 교반하였다 . 반응혼합물을 01：에서 얼음물을 적가 하여 반응을 종결시키고， 생성된 고체를 여과하여 갈색고체의 목적화 합물 2-（（2 -클로로- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -일）아미노）-ᄊ -디메틸벤젠 설폰아마이드（1.2 _§ , 84%）을 수득하였다 .

（ ） : 397.3 [¾1+1] ⁺ ， !乂： I、 （ ） : 1.70 단계 4： -（4 -플루오르 -2 -메톡시- 5 -나이트로페닐）- -（2-（이소 프로필설폰）페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -디아민의 제조

상기 실시예 113-1 단계 3에서 얻어진 화합물 2-（（2 -클로로- 5 -모 폴리노피리미딘 - 4 -일）아미노） -久 디메틸벤젠설폰아마이드（ 220.이 ， 0.55_01）， 4 -플루오르 -2 -메톡시 - 5 -나이트로아니린 （154.7 _|1 ,

0.83_01）과 탄산칼륨（383.01 ， 2.77_ ₀ 1）를 -加에（6 ）에 첨가하 여 녹인 후 질소를 흘리면서 , 10분동안 초음파 처리하여 가스를 제거 하였다. 반응 혼합물에 ?（! ₂ （（比3） ₃ （50.81 , 0.05_01） 및 !）1103（26.4111요， 0.051^01）을 100 公에서 첨가한 후， 2시간 동안 교반 하였다 . 반응 후 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고， 디클로메탄으로 씻어주었다. 얻 어진 여과액을 농축한 후 , 중압액체크로마토그래피（디클로메탄/메탄 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

46 올） 로 정제하여 고체의 목적화합물 # ² ᅳ（ 4 -들루오르- 2 -메톡시 - 5 -나이 트로페닐）- -（2-（이소프로필설폰）페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2 ,4 -디아 민（16011 ， 53%）을 수득하였다 .

¾ （미/ : 547.3 [¾1+1] ⁺ ， 1、 I （ ） : 1.53 단계 5： -（2-（이소프로필설포닐）페닐）- -（2 -메톡시 - 4-（4 -메틸 피페라진- 1 -일）-5 -나이트로페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -디아민의 제 조

상기 실시예 113-1 단계 4에서 얻어진 화합물 -（4 -플루오르 -2- 메톡시 -5 -나이트로페닐）-#-（2-（이소프로필설폰）페 닐）-5 -모폴리노피리 미딘-2,4-디아민（80.01 ， 0.151_01）을 1 , 4 -다이옥산（ 2 ）에 녹인 후， 1 -메틸피페라진（163.4 ， 1.46_01）을 넣고 2시간동안 1001：에서 교반 하였다 . 반응 종결 후 감압 농축하고 잔류물을 중압액체크로마토그래 피（실리카겔 디클로메탄:메탄올 = 15:1）로 정제하여 원하는 목적 화합물 -（2-（이소프로필설포닐）페닐）- -（2 -메톡시 -4-（4 -메틸피페라진- 1- 일）-5 -나이트로페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -디아민（67.8« ， 74%）을 얻었다.

（111八） : 627.5 [¾!+1] ⁺ ， 1正1乂： （1 11） : 1.24 단계 6： -（5 -아미노- 2 -메톡시 - 4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）- -（2-（이소프로필설포닐）페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -디아민의 제 조

상기 실시예 내-1 단계 5에서 얻어진 화합물 -（2-（이소프로필 설포닐）페닐）- -（2 -메톡시 -4-（4 -메틸피페라진 - 1 -일）-5 -나이트로페 닐）- 5 -모폴리노피리미딘- 2,4 -디아민（67.81^, 0.11_ ₀ 1） 및 （：1 ₂ · 2¾0（244.11 ， 1.1_01）을 에틸아세테이트（2（½1）에 녹인 후， 진한염산 한방울을 적가하였다 . 반응 혼합물을 501：에서 5시간동안 교 반하였다. 반응혼합물의 온도를 실온으로 내린 후， 5가 될 때까지 암모니아수 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물에 고체 탄산수소나트륨를 첨가하여 7로 조절하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 에 틸아세테이트로 여러 번 닦아 주었다 . 여과액을 감압하에 농축하여 목 적 화합물 -（ 5 -아미노- 2 -메특시 - 4_（ 4 -메틸피페라진 - 1 -일）페닐）- 7 - （2-（이소프로필설포닐）페닐）-5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -디아민（62.411 ， 97%）을 얻었으며 , 정제없이 다음 반응에 사용하였다.

（미/ : 597.5 +1] ⁺ ， 11?1石 ᄂ 0 11） : 1.08 단계 7： 於（5-（（4-（（2-（이소프로필설포닐）페닐 ）아미노）- 5 -모폴리 노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡시 -2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크 릴아마이드 2, 2, 2 -트리플루오로아세트산염의 제조

상기 실시예 113-1 단계 6에서 얻어진 화합물 -（5 -아미노- 2 -메 톡시 -4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）- -（2-（이소프로필설포닐）페닐）- 5 -모폴리노피리미딘- 2,4 -디아민（62.41 , 0.11_01）을 1'배（15 ）에 녹 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

47 인 후, 포화 애（：0 ₃ （151111）을 가한 뒤， 01：에서 /\ 기 ₀ 기 （±1아 1（16（84.6/·^,， 1.10_01）를 천천히 적가하였다. 같은 온도에서 10 분간 격렬히 교반한 후， 반응 종결 후 에틸아세테이트와 증류수를 이 용하여 추출한 후, 황산나트륨으로 건조한다. 여과액을 감압 농축 ^61）-150 장치를 이용하여 정제한 후 목적 화합물 （5-（（4-（（2-（이소 프로필설포닐）페닐）아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）- 4 -메톡 시- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아마이드 트리플루오로아세트 산염（20.3|1 , 25%）을 얻었다.

（미 ） : 651.5 [¾[+1] ⁺ ， 1. 1;. （미 ） : 1.19 상기 실시예 내-1과 유사한 방법으로 실시예 113-2 내지 113-10을 제조하였으며， 실시예 내_1 내지 比-10의 화학구조를 하기 표 7에 , 화 및 1 1乂： 분석 결과를 하기 표 8에 정리하여 나타내었다.

2019/177375 1»（：1/10公019/002915

48

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

49

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

50

2019/177375 1»（：1^¾2019/002915

51

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

52

<실시예 11）-11> 7^·（4 -메톡시 - 5-（（4-（ 1 -메틸- 1分·인돌- 3 -일）- 5 -모 폴리노피리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아 마이드 트리플루오로아세트산염의 제조 2019/177375 1»（그1^1{2019/002915

53

사보란- 2 -일）- 1分-인돌（79이1 ， 3.07_ ₀ 1）이 녹아 있는 1，4 -다이옥산

（11.52 ）의 혼합용액에 내 3 ₂ （：0 ₃ （3.84 ）을 넣은 후, 10분 동안 질 소를 흘려주면서 초음파 처리를 하였다. 반응 혼합물에 （1 1¾ ₃ ） ₄ 를 넣은 후， 80 ^° 0 3시간 동안 교반 한 후， 반응이 종결되면 에틸아세테이 트 및 소금물로 추출하여 유기층을 합한다. 유기층을 황산나트륨으로 건조한 후 감압하여 농축후 중압액체크로마토그래피（실리카겔 디클로 메탄:메탄올 = 15:1）로 정제하여 목적 화합물 4-（2 -클로로- 4-（1 -메틸- ）피리미딘- 5 -일）모폴린（700 , 83%）을 얻었다.

） : 329.2 +1] ⁺ ， 1 1乂： I （미 ） : 1.84 단계 2： （4 -플루오로- 2ᅳ메톡시 - 5 -나이트로페닐）- 4-（1 -메틸- 1分- 인돌- 3 -일）- 5 -모폴리노피리미딘- 2 -아민의 제조

상기 실시예 내-1의 단계 4에서 동일한 방법으로 수행하여 목적 화합물（42%）을 얻었다.

（미/ : 479.3 [¾1+1] ⁺ ， \JPIC 1·. I （111^1） : 1.88 단계 3： -（2 -메톡시 - 4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）- 5 -나이트로페닐）_ 4-（1 -메틸-！ -인돌- 3 -일）-5 -모#리노피리미딘- 2 -아민의 제조

상기 실시예 내-1의 단계 5에서 동일한 방법으로 수행하여 목적 화합물（74%）을 얻었다.

I·. I （ ） : 1.26 단계 4： 6 -메톡시 - -（4-（1 -메틸- 1分-인돌 -3 -일）- 5 -모폴리노피리 미딘- 2 -일）-4-（4 -메틸피페라진- 1 -일）벤젠- 1,3 -디아민의 제조

상기 실시예 113-1의 단계 4에서 동일한 방법으로 수행하여 목적 2019/177375 1»(그1^1{2019/002915

54 화합물（67%）을 얻었다. 정제없이 다음 반응 진행 하였다.

13 （111八） : 529.4 대+1] ⁺ , \JPLC （ 11） : 1.06 단계 5： （4 -메톡시- 5-（（4-（1 -메틸- 1分-인돌 -3 -일）- 5 -모폴리노피 리미딘- 2 -일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아마이드 트 리플루오로아세트산염 제조

상기 실시예 내-1의 단계 7에서 동일한 방법으로 수행하여 목적 화합물（26%）을 얻었다.

（111111） : 1.03 상기 실시예 11）-11과 유사한 방법으로 실시예 내-12 내지 113-14 를 제조하였으며， 실시예 113-11 내지 11）-14의 화학구조를 하기 표 9에， 화합물명과 1^333 및 1正1止 분석 결과를 하기 표 10에 정리하여 나타내 었다.

【표 9]

【표 10】

2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

56

<실시예 11）-15> -（4 -메톡시 - 5-（（4-（메틸아미노）- 5 -모폴리노피리 미딘- 2 -일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드의 트리 플루오로아세트산염의 제조

1）을 메탄올（10此）에 녹인 후 33% 메틸아민/에탄올（0.2此， 2.14빼01） 및 디 이소프로필에틸아민 （0.3711止， 2.141_ ₀ 1）를 넣고 상온에서 16시동안 교 반하였다. 상기 반응 용액을 감압 농축하고 에틸아세테이트/물로 추출 하였다. 모아진 유기층을 소금물로 세척하고， 황산나트륨으로 건조한 후， 감압하에 농축하였다. 잔사를 에틸아세테이트/핵산으로 재결정하 여 흰색 고체의 목적화합물 2 -클로로- 메틸- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -아 수율）을 수득하였다.

485.4 [¾1+1] ⁺ ， 七. （111111） : 1.08 단계 2： #-（4 -플루오로- 2 -메톡시 - 5 -나이트로페닐）- -메틸- 5 -모 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

57 폴리노피리미딘- 2,4 -디아민의 제조

상기 실시 예 1의 단계 4에서 2-（（2 -클로로- 5 -모폴리노피리미딘- 4 -일）아미노）-ᄊ -디메틸벤젠설폰아미드 대신하여 2 -클로로-於메틸- 5- 모폴리노피리미딘- 4 -아민을 사용한 것을 제외하고， 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물（64%）을 얻었다.

13 （미/ : 379.3 [¾1+1] ⁺ , 卵 1、 （ ） : 1.19

단계 4: #-（ 5 -아미노- 2 -메톡시 - 4-（ 4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）- # -메틸- 5 -모폴리노피리미딘- 2, 4 -다아민의 제조

상기 실시 예 1의 단계 6에서 동일한 방법으로 수행하여 목적화 합물（100%）을 얻었다.

託 （미/ : 429.4 [1{+1]\ 1正 ： I·. 1;. （111 1） : 0.75 단계 5： （4 -메톡시 - 5-（（4-（메틸아미노）- 5 -모폴리노피리미딘- 2- 일）아미노）- 2-（4 -메틸피페라진- 1 -일）페닐）아크릴아미드의 트리플루오 로아세트산염의 제조

상기 실시 예 1의 단계 7에서 ? 1）-150 대신 ） - 1 _{1 33} 을 사용 한 것을 제외하고, 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물（3%）을 얻었 다 .

¾ {^/å） : 483.3 +1] ⁺ , \JPLC I、 I （미비 : 1.08 시예 比- 15과 유사한 방법으로 실시예 11）- 16을 제조하였 比-15 및 11 ₃ -16의 화학구조를 하기 표 11에， 화합물명과 분석 결과를 하기 표 12에 정리하여 나타내었다.

【표 12】

<실험예 la> Ba/F3 및 폐암세포 증식 억제활성 평가

본 발명에 따른 화학식 la로 표시되는 화합물의 EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 및 폐암세포 증식에 대한 억제활성을 평가하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.

EGFR 유전자를 발현하는 폐암세포주 중에 A549는 DMEM (Invitrogen)에 10% FBS (HyClone)을 넣은 후 배양하고， 다른 암세포 들은 10% FBS를 첨가한 RPMI-1640 ( Invi trogen)를 사용한다. Ba/F3 세 포는 10% FBS와 5 ng/ml IL-3 (R&D Systems)을 넣은 RPMI-1640를 사용 한다. 형질도입된 Ba/F3 세포는 같은 배지에 1 ug/mlpuromycin ( Invi trogen)을 추가하여 배양한다 . 세포는 화합물을 처리하기 24 시 간 전에 , 3000-5000 개 세포를 white clear bottom 96 well plate (Corning)의 well마다 분주해 놓는다. 화합물은 다이메틸설폭사이드에 2019/177375 1»(：1/10公019/002915

59 희석시켜 (3 배씩 희석 ， 총 12개 농도) 최종농도가 0.3 nM - 50 uM이 되도록， 0.5 씩 주입하였다. 살아있는 세포의 측정은 화합물 처리후 72 시간 뒤에 Cel ITi ter-Glo luminescentcell -viability reagent (Pr omega)를 사용하여 상온에서 10분 보관한 후에 , 판독기 (SynergyNeo , Biotek)를 이용하여 발광강도를 측정하였다 . 각 시험은 세번씩 반복하였다 . 결과값은 대조군과 비교한 세포성장비율 ( 로 산 출하였다. GraphPad Prism version 5.0 프로그램을 사용하여 그래프를 그리고 IC ₅₀ 값을 계산하였다.

EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 세포의 증식 억제 활성 평가 결 과를 표 13 및 표 14에 ， 폐암세포 증식에 대한 억제 활성을 표 15에 나타내었다.

【표 13】

SM : 단일 돌연변이 (Single mutant )

DM : 이중 돌연변이 (Double mutant)

TM: 삼중 돌연변이 (Triple mutant )

WT： 야생형 (Wi Id Type) 상기 표 13에 나타난 바와 같이 ， Ba/F3세포주에서 본 발명의 모 든 화학식 la로 표시되는 화합물의 실시예 화합물이 EGFR 야생형에서 도 우수한 억제능을 나타낼 뿐만 아니라， EGFR 단일， 이중 또는 삼중 돌연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타냄을 알 수 있다.

【표 14】

상기 표 14에 나타난 바와 같이 , 8크/ 3세포주에서 본 발명의 화 학식 로 표시되는 화합물의 실시예 화합물이 엑손 20 삽입 돌 연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타냄을 알 수 있다 . 【표 15】

상기 표 15에 나타난 바와 같이 , 본 발명의 화학식 la로 표시되 ¾ 화합물의 실시예 화합물은 폐암 세포주인 PC9GR, H1975 , PC9 , A549 , U87 세포에 대하여 우수한 증식 억제능을 나타냄을 알 수 있다 . 따라서 , 본 발명에 따른 화학식 la로 표시되는 화합물은 EGFR( ep i derma 1 growth factor receptor ) 야생형 또는 돌연변이에 대 하여 높은 억제능을 나타내므로， EGFR 야생형 뿐만 아니라 , EGFR Del 19 , EGFR L858R, EGFR Dell9 /T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S, EGFR De 1 19 /T790M/C797S , EGFR NPH, EGFR SVD,

EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA, HER2 YVMA 등의 EGFR 돌연변 이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고， 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바， 특히 , 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다. <실험예 lb> Ba/F3 및 폐암세포 증식 억제활성 평가

본 발명에 따른 화학식 lb로 표시되는 화합물의 EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 및 폐암세포 증식에 대한 억제활성을 실험예 la와 동 일한 방법을 통해 평가하였다.

EGFR 돌연변이를 발현하는 Ba/F3 세포의 증식 억제 활성 평가 결 과를 표 16 및 표 17에 , 폐암세포 증식에 대한 억제 활성을 표 18에 나타내었다 .

【표 16】

SM : 단일 돌연변이 (Single mutant) 、,

DM : 이중 돌연변이 (Double mutant)

TM: 삼중 돌연변이 (Triple mutant )

WT： 야생형 (Wi Id Type) 상기 표 16에 나타난 바와 같이 , Ba/F3세포주에서 본 발명의 모 든 화학식 lb로 표시되는 화합물의 실시예 화합물이 EGFR 야생형에서 도 우수한 억제능을 나타낼 뿐만 아니라， EGFR 단일， 이중 또는 삼중 돌연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타냄을 알 수 있다.

【표 17】

상기 표 17에 나타난 바와 같이 ， 8크/ 3세포주에서 본 발명의 화 학식 로 표시되는 화합물의 실시예 화합물이 엑손 20 삽입 돌 연변이에 대하여도 높은 억제능을 나타냄을 알 수 있다.

【표 18】

상기 표 18에 나타난 바와 같이 , 본 발명의 화학식 lb로 표시되 는 화합물의 실시예 화합물은 폐암 세포주인 PC9GR, H1975 , PC9 , A549 세포에 대하여 우수한 증식 억제능을 나타냄을 알 수 있다 . 따라서 ， 본 발명에 따른 화학식 lb로 표시되는 화합물은 EGFR（epidermal growth factor receptor） 야생형 또는 돌연변이에 대 하여 높은 억제능을 나타내므로， EGFR 야생형 뿐만 아니라 , EGFR Dell9 , EGFR L858R, EGFR Dell9 /T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR L858R/T790M/C797S, EGFR De 1 19 /T790M/C797S , EGFR NPH, EGFR SVD, EGFR NPG, EGFR H, EGFR ASV, EGFR FQEA, HER2 YVMA 등의 EGFR 돌연변 이가 발현된 암의 치료에 유용하게 사용될 수 있고， 폐암 세포주 증식 억제능이 우수한 바， 특히 ， 폐암의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

<실험예 2> 본 발명에 따른 화합물의 다양한 키나아제 저해 활성 평가

본 발명에 따른 화합물의 보다 많은 효소에 대한 저해활성을 평 가 하기 위해 하가와 같은 실험을 수행하였다.

구체적으로， 본 발명의 실시예 화합물 중， 선별된 실시예 1 ₃ -2 에 대하여 , 사에 의뢰하여 효소（ 패36） 선택성을 측정하기 로 하고 , 분석용 패널을 사용하여 실험을 진행하였 다. 이때， 효소에 처리되는 약물의 농도는 야犯0에 1 로 하였고 , 하기 수학식 1과 같은 방법으로 조절 백분율（% （：01 01 ^' 1）을 정하였고， 그 결 과를 하기 표 19에 나타내었다

[수학식 1 ]

（실시예 화합물 - 양성 대조군）/（음성 대조군 - 양성대조군） X

100 여기서 ， 상기 양성 대조군은 0%의 조절 백분율을 나타내튼 화합 물을 말하며 ， 음성 대조군은 마 ◦로 100%의 조절 백분율을 나타낸다 . 또한， 본 발명의 효소 선택성은 각각의 효소에 대하여 조절 백분율이 <35%（즉， 35% 미만）이면 해당 효소에 대하여 활성을 갖는 것으로 판단 하였다. 【표 19]

상기 표 19에서 확인할 수 있듯이， 본 발명에 따른 화합물은 쇼81그 3171）_1）}1031）110 1 6（1， 쇼81그 3171）-1）11031）110 1 근선， 묘내, , 도 , 묘6 746-쇼75（½6" , 표0 1 719（：）， 표 묘 ） , 표6?묘（1 47- £749선이， 쇼 애） , 묘 요ᄄ 거 선이 , ?7535） , 표0 1?（1747- 이 ,^때） , £0?요江85810， £0 요（1858묘,179에）， £0 요＜ 86 ）， 묘 요 개에）， £1¾82, 묘1州84， 또는 1狀2 키나아제에 대하여 조절 백분 율 35%보다 작은 값을 가지는 것을 알 수 있다. 이는 본 발명에 따른 화합물이 상기 나열된 효소에 대하여 억제 활성을 갖고 있음을 나타내 는 것이며 , 이로부터 상기 나열된 효소와 관련된 질환에 사용시 유용 한 효과가 있음을 암시하는 것이다. 따라서， 본 발명에 따른 유도체 화합물은 따른 쇼811 3171） - 애 아 1 선， 쇼81」_ 3171 _/ ）-1）110313110 316（1， 1（, ! ， 표 묘, £&?요 746-요750〔 1）, £0 요 719（:）， £0^^7193）, £0 요（1/747새749（!61 , 쇼7501））， EGFR（L747-S752del , ?7533） , 묘 요ᄄ 거 내이， ^때），

£0 묘（ 58{0 , 묘0 1 丄8581?，179에） , £ 1（1861이， £0?요 79에）， £1花82， 또는 狀2 키나아제 관련 질환의 치료 또는 예방용 조성물로 2019/177375 1»（：1^1{2019/002915

76 유용하게 사용될 수 있다.

【산업상 이용가능성】

본 발명에 따른 2 , 4 , 5 -치환된 피리미딘 유도체는 암의 치료에 유 용하게 사용될 수 있다.