La présente invention concerne de nouveaux inhibiteurs de la protéine DyrkIA basés sur un motif 3,5-diaryl-azaindole et leur utilisation en tant que médicaments, notamment dans le traitement des troubles cognitifs liés à un dysfonctionnement de la protéine DyrkIA.

La protéine DyrkIA (Dual specificity tyrosine regulated kinase 1A) est une sérine/thréonine kinase exprimée dans le cerveau du fœtus et dans le cerveau adulte. Cette protéine est impliquée dans le développement du cerveau humain et le maintien de son fonctionnement normal. Son rôle est essentiel dans les processus d'apprentissage, de mémorisation et de la cognition. Chez l'être humain, le gène codant pour cette protéine est porté par le chromosome 21 .

Le syndrome de Down (trisomie 21 ) est une maladie génétique congénitale retrouvée dans près d'une naissance sur 700 aux Etats-Unis et représente près de 40 % des cas modérés à sérieux de retard mental chez l'adulte. Chez les sujets atteints de trisomie 21 totale ou partielle touchant la partie critique du chromosome 21 (« Down Syndrome Critical Région », DSCR), le gène codant pour la protéine est tripliqué et la protéine DyrkIA est alors synthétisée à un taux 1 ,5 fois supérieur au taux normal. Il a été montré sur des modèles murins que cette surexpression de la protéine DyrkIA était impliquée dans les altérations cérébrales et cognitives associées au syndrome de Down.

Des études récentes ont entre autres montré que la protéine DyrkIA était impliquée dans la phosphorylation de la protéine associée aux microtubules tau. La phosphorylation aberrante de cette protéine conduit à une agrégation intracellulaire de ces protéines qui est une des causes du développement de la maladie d'Alzheimer.

La maladie d'Alzheimer est une maladie neuro-dégénérative qui touche environ 24 millions de personnes dans le monde. Les symptômes de cette maladie sont la perte du souvenir des événements récents, des déficits cognitifs qui atteignent différentes fonctions comme la motricité, le langage, la mémoire, la perception ou encore la cognition.

Des composés permettant d'inhiber la protéine DyrkIA présentent donc un grand intérêt pour le traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down et pour la prévention et/ou le traitement du processus d'altérations cognitives liées à la maladie d'Alzheimer.

Des inhibiteurs de la protéine DyrkIA ont déjà été décrits dans l'art antérieur. L'un des premiers inhibiteurs de la protéine DyrkIA mis en évidence est l'harmine, une β- carboline d'origine naturelle. Des analogues synthétiques ont par la suite été préparés, principalement basés sur des noyaux aromatiques, par exemple de type indole et aminoimidazole.

Debdab et al (Journal of Médicinal Chemistry 201 1 , 54, 4172-4186) décrit l'utilisation d'un composé extrait d'épongés marines, la leucettamine B, et de dérivés synthétiques basés sur un motif 2-aminoimidazolin-4-one (Leucettines). Le composé le plus efficace présente une activité inhibitrice (IC ₅₀ ) sur la protéine DyrkIA de l'ordre de 40 nmolaires.

Neagoie et al (European Journal of Médicinal Chemistry, 2012, 49, 379-396) décrit des chromanones et leur pouvoir inhibiteur sur la protéine DyrkIA. Le composé le plus efficace présente une IC ₅₀ de l'ordre de 70 nmolaires et une bonne sélectivité pour la protéine DyrkIA.

Des inhibiteurs de la protéine DyrkIA dérivés de 7-azaindoles substitués en position 3 par des amino-pyrimidines ont également été préparés par Meijer et al (J. Med. Chem 2008, 51 , 737-751 ; WO2008129152). Ces mériolines présentent des IC ₅₀ de l'ordre de plusieurs dizaines de nmolaires sur la protéine DyrkIA. Leur manque de sélectivité pour cette protéine spécifique est en revanche un problème, ces composés s'avérant cytotoxiques.

L'un des principaux inconvénients des composés de l'art antérieur connus pour inhiber la protéine DyrkIA est en général leur faible affinité et/ou sélectivité pour la protéine DyrkIA et/ou leur cytotoxicité.

Des 3,5-diaryl-7-azaindoles ont récemment été préparés par Hong et al (Journal of Médicinal Chemistry 2012, 55, 5337-5349). De nombreux composés ont été préparés et leur efficacité d'inhibition de la tyrosine kinase A évaluée. Parmi les composés synthétisés, le plus efficace est capable d'inhiber la tyrosine kinase A avec une IC ₅₀ de l'ordre d'1 nmolaire.

D'autres 3,5-diaryl-7-azaindoles capables de moduler ou d'inhiber l'activité de protéines kinases ont été décrits dans les demandes de brevet WO 2007/106236 et WO 2008/124849. La capacité inhibitrice de ces 3,5-diaryl-7-azaindoles a été testée sur des kinases impliquées dans le développement cellulaire et tumoral telles que c-Abl (Abelson tyrosine kinases), MET (Met receptor tyrosine kinases) et Aurora-2 pour lesquelles ils présentent une IC ₅₀ parfois très inférieure à 500 nmolaire.

Ainsi, les 3,5-diaryl-7-azaindoles connus de l'art antérieur possèdent une activité inhibitrice remarquable sur des kinases impliquées dans la croissance cellulaire. Des composés cytotoxiques ne pouvant pas être utilisés pour le traitement de pathologies telles que la maladie d'Alzheimer ou le syndrome de Down, il était envisagé que des composés possédant une structure proche de celle des 3,5-diaryl-7-azaindoles décrits dans l'art antérieur ne pourraient pas être utilisés pour inhiber la protéine DyrkIA de façon sélective.

Il existe pourtant un besoin pour de nouveaux inhibiteurs de la protéine DyrkIA, spécifiques de cette kinase et ne montrant pas de cytotoxicité, en particulier de neurotoxicité.

De façon surprenante, les inventeurs ont découvert que les 3,5-diaryl-7-azaindoles selon la présente invention sont capables d'inhiber la protéine DyrkIA avec des IC ₅₀ faibles, sont sélectifs de cette kinase et ne présentent pas ou peu de cytotoxicité.

La présente invention concerne donc des composés de formule (I) suivante et leurs sels, solvates et hydrates pharmaceutiquement acceptables ou leurs prodrogues :

(I)

dans laquelle :

X1-X5 sont indépendamment les uns des autres H, F, Cl, Br, OR1 ou SR ₂ , de préférence H, F, OR1 ou SR ₂ ,

Y1-Y5 sont indépendamment les uns des autres H, F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ , de préférence H, F, OR ₃ ou SR ₄ , où

Ri et R ₃ représentent indépendamment les uns des autres H ; (d-C ₆ )- alkyle, en particulier méthyle ; acyle, en particulier acétyle ; aralkyle éventuellement substitué, en particulier benzyle ; ou aryle éventuellement substitué ; de préférence H ou méthyle,

R ₂ et R ₄ représentent indépendamment les uns des autres H ; (CrC ₆ )- alkyle, en particulier méthyle ; acyle, en particulier acétyle ; aralkyle éventuellement substitué, en particulier benzyle ; ou aryle éventuellement substitué ; de préférence H ou méthyle,

1 à 3 radicaux parmi X1-X5 sont différents de H,

1 à 3 radicaux parmi Y1-Y5 sont différents de H, et

au moins un radical parmi les radicaux X1-X5 et Y1-Y5 différents de H représente F, OH ou S H, de préférence OH,

pour leur utilisation dans le traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down. Avantageusement, au moins un radical parmi les radicaux X1-X5 différents de H est F, OH ou SH, de préférence OH et au moins un radical parmi les radicaux Y1-Y5 différents de H est F, OH ou SH, de préférence OH.

Dans les composés selon la présente invention, les radicaux X1-X ₅ différents de H sont de préférence F ou OR1 et les radicaux Y1-Y5 différents de H sont de préférence F ou OR ₃ . Avantageusement, R-ι et R ₃ représentent indépendamment les uns des autres H, méthyle, acétyle ou benzyle.

Dans la présente invention, on entend par « pharmaceutiquement acceptable » ce qui est utile dans la préparation d'une composition pharmaceutique qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation vétérinaire de même que pharmaceutique humaine.

Par « sels, solvates et hydrates pharmaceutiquement acceptables » d'un composé, on entend désigner dans la présente invention des sels, solvates et hydrates qui sont pharmaceutiquement acceptables, comme défini ici, et qui possèdent l'activité pharmacologique souhaitée du composé parent. De tels sels comprennent :

(1 ) les sels d'addition d'acide formés avec des acides inorganiques tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique et similaires ; ou formés avec des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide benzènesulfonique, l'acide benzoïque, l'acide camphresulfonique, l'acide citrique, l'acide éthane-sulfonique, l'acide fumarique, l'acide glucoheptonique, l'acide gluconique, l'acide glutamique, l'acide glycolique, l'acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2- hydroxyéthanesulfonique, l'acide lactique, l'acide maléique, l'acide malique, l'acide mandélique, l'acide méthanesulfonique, l'acide muconique, l'acide 2- naphtalènesulfonique, l'acide propionique, l'acide salicylique, l'acide succinique, l'acide dibenzoyl-L-tartrique, l'acide tartrique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide triméthylacétique, l'acide trifluoroacétique et similaires ; et

(2) les sels formés lorsqu'un proton acide présent dans le composé parent soit est remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin (Na ⁺ , K ⁺ ou Li ⁺ par exemple), un ion de métal alcalino-terreux (comme Ca ²⁺ ou Mg ²⁺ ) ou un ion d'aluminium ; soit se coordonne avec une base organique ou inorganique. Les bases organiques acceptables comprennent la diéthanolamine, l'éthanolamine, N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires. Les bases inorganiques acceptables comprennent l'hydroxyde d'aluminium, l'hydroxyde de calcium, l'hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium et l'hydroxyde de sodium.

Par « halogène », on entend, au sens de la présente invention, un atome de brome, chlore, iode ou fluor. Par « (CrC ₆ )-alkyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6 atomes de carbone, en particulier les groupes méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, iso-butyle, sec- butyle, tert butyle, n-pentyle, n-hexyle.

Par « aryle », on entend, au sens de la présente invention, un groupement hydrocarboné aromatique éventuellement substitué, comportant de préférence de 6 à 10 atomes de carbone et comprenant un ou plusieurs cycles accolés, comme par exemple un groupement phényle ou naphtyle. Avantageusement, il s'agit du phényle.

Lorsque le groupement aryle est substitué, il pourra avantageusement être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi un atome d'halogène, de préférence un atome de fluor, un groupe (CrC ₆ )alkyle, (CrC ₆ )alcoxy, aryle, N ₃ , N0 ₂ , NH ₂ , ou -NH- ((CrC ₆ )alkyle) ; de préférence choisis parmi un atome d'halogène, un groupe (d- C ₆ )alkyle, (CrC ₆ )alcoxy ou aryle.

Par « aralkyle », on entend, au sens de la présente invention, un groupe aryle, tel que défini ci-dessus, lié à la molécule par l'intermédiaire d'une chaîne (CrC ₆ )alkyle, telle que définie ci-dessus.

Par « acyle », on entend, au sens de la présente invention, un groupe (CrC ₆ )- alkyle ou aryle tel que défini ci-dessus, lié au reste de la molécule par l'intermédiaire d'un groupement carbonyle (CO). Il peut s'agir en particulier d'un groupement acétyle ou benzoyle.

Par « groupe N-protecteur », on entend, au sens de la présente invention, tout substituant qui protège le groupe NH contre les réactions indésirables tels que les groupes N-protecteur décrits dans Greene, « Protective Groups In Organic synthesis », (John Wiley & Sons, New York (1981 )) et Harrison et al. « Compendium of Synthetic Organic Méthods », Vols. 1 à 8 (J. Wiley & sons, 1971 à 1996). Les groupes N- protecteurs comprennent, fonction aminé protégée incluse, les carbamates, les amides, les sulfonamides, les dérivés N-benzylés, les dérivés N-silylés, les dérivés mono- alkylaminopropargylamines et les dérivés N-hétéroatome.

Par « groupe O-protecteur », on entend, au sens de la présente invention, tout substituant qui protège le groupe hydroxyle ou carboxyle, c'est à dire un atome d'oxygène réactif, contre les réactions indésirables tels que les groupes O-protecteur décrits dans Greene, « Protective Groups In Organic synthesis », (John Wiley & Sons, New York (1981 )) et Harrison et al. « Compendium of Synthetic Organic Methods", Vols. 1 à 8 (J. Wiley & sons, 1971 à 1996). Les groupes O-protecteur comprennent les éthers de méthyle ou d'alkyle substitués ou non, par exemple, méthoxyméthyle, benzyloxyméthyle, 2-méthoxyéthoxyméthyle, 2-(triméthylsilyle) éthoxyméthyle, t-butyle, benzyle et triphénylméthyle, les éthers de benzyle (substitués ou non), les tétrahydropyranyle éthers, les éthers d'allyle, les éthyle éthers substitués, par exemple, 2,2,2-trichloroéthyle, les silyle éthers ou les éthers d'alkylsilyle, par exemple, triméthylsilyle (TMS), t- butyldiméthylsilyle (TBDMS ou TBS) et t-butyldiphénylsilyle, les éthers d'hétérocycle; et les esters préparés par réaction du groupe hydroxyle avec un acide carboxylique par exemple, les esters de tert-butyle, de benzyle ou de méthyle, les carbonates en particulier le carbonate de benzyle ou d'halogénoalkyle, l'acétate, le propionate, le benzoate et similaires.

Par « groupe S-protecteur », on entend, au sens de la présente invention, tout substituant qui protège le groupe thiol (SH) contre les réactions indésirables tel que les groupes S-protecteur décrits dans Greene, « Protective Groups In Organic synthesis »,

(John Wiley & Sons, New York (1981 )). Les groupes S-protecteur comprennent les éthers de benzyle (substitués ou non), par exemple le p-méthoxybenzyl ou le p-nitrobenzyl, les éthers de trityl, les thioacétates, les thioacétals et les thioéthers.

Par « déprotection », on entend, au sens de la présente invention, le procédé par lequel un groupe protecteur est éliminé une fois que la réaction sélective est achevée.

Certains groupes protecteurs peuvent être préférés par rapport à d'autres en raison de leur commodité ou de leur facilité relative d'élimination.

Par "prodrogue", on entend désigner, au sens de la présente invention, un composé qui est administré sous une forme inactive (ou moins active) et qui est métabolisé in vivo, notamment par action d'enzymes ou de l'acide gastrique, en une forme active (ou plus active). L'utilisation d'une prodrogue permet d'améliorer en particulier les paramètres physico-chimiques d'une molécule tels que la solubilité ainsi que la pharmaco-cinétique (vectorisation, biodisponibilité, etc.), afin de favoriser son assimilation par un organisme après administration. En particulier, lorsqu'une molécule porte un groupement hydroxy (OH), la prodrogue pourra résulter en particulier de l'acylation ou de la phosphorylation de ce groupement hydroxy.

Dans certains composés de formule (I), un seul des radicaux parmi Y1-Y5 est différent de H. Avantageusement, le radical parmi Y1-Y5 différent de H est Y-i , Y ₂ ou Y ₃ , notamment Y ₂ ou Y ₃ et de préférence Y ₃ .

Dans d'autres composés de formule (I), deux des radicaux parmi Y Y ₅ sont différents de H. Avantageusement, les deux radicaux parmi Y1-Y5 différents de H sont Y-i et Y ₃ ou Y ₂ et Y ₃ et de préférence Y ₂ et Y ₃ .

Dans encore d'autres composés de formule (I), trois des radicaux parmi Y1-Y5 sont différents de H. Avantageusement, les trois radicaux parmi Y1-Y5 différents de H sont Y ₂ ,

Y ₃ et Y ₅ ou Y ₂ , Y ₃ et Y ₄ . Avantageusement, au moins Y ₃ est différent de H.

Dans certains composés de formule (I), un seul radical parmi X1-X5 est différent de H. Avantageusement, le radical parmi X1-X5 différent de H est X^ X ₂ ou X ₃ , notamment Xi ou X ₃ et de préférence X ₃ .

Dans d'autres composés de formule (I), deux des radicaux parmi X X ₅ sont différents de H. Avantageusement, les deux radicaux parmi X1-X5 différents de H sont Xi et X ₃ , Xi et X ₂ , Xi et X ₄ ou X ₂ et X ₃ , notamment X ₂ et X ₃ , Xi et X ₄ ou Xi et X ₃ et de préférence Xi et X ₃ ou X ₂ et X ₃ .

Dans encore d'autres composés de formule (I), trois des radicaux parmi X1-X5 différents de H. Avantageusement, les trois radicaux parmi X X ₅ qui ne sont pas un atome d'hydrogène sont X ₂ , X ₃ et X ₅ ou X ₂ , X ₃ et X ₄ .

Avantageusement, au moins un de Xi , X ₃ ou X ₄ est différent de H, de préférence

X ₃ .

Dans un premier mode de réalisation particulier selon l'invention, Xi et Y ₃ sont simultanément différents de H, Xi représente F, Cl, Br, ORi ou SR ₂ , notamment F ou ORi et Y ₃ représente F, Cl, Br, OR ₃ ou S R ₄ , notamment F ou OR ₃ . Notamment, Xi et Y ₃ sont simultanément différents de H et X ₂ , X ₃ , X ₄ , X ₅ , Υ-ι , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

Dans certains composés de formule (I) selon ce mode de réalisation, X-i , Y ₂ et Y ₃ sont simultanément différents de H, Xi représente F, Cl, Br, ORi ou SR ₂ , notamment F ou ORi et Y ₂ et Y ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ , notamment F ou OR ₃ . Notamment, X ₂ , X ₃ , X ₄ , X ₅ , Υ-ι , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

Dans d'autres composés de formule (I) selon ce mode de réalisation, X^ X ₃ et Y ₃ sont simultanément différents de H, Xi et X ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, ORi ou SR ₂ notamment F ou ORi et Y ₃ représente F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ notamment F ou OR ₃ . Notamment, X ₂ , X ₄ , X ₅ , Υ-ι , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

Dans un second mode de réalisation particulier selon l'invention, X ₃ et Y ₃ sont différents de H, X ₃ représente F, Cl, Br, ORi ou SR ₂ , notamment F ou ORi et Y ₃ représente F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ , notamment F ou OR ₃ . Notamment, Xi , X ₂ , X ₄ , X ₅ , Y-i , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

Dans certains composés de formule (I) selon ce mode de réalisation, X ₃ , Y ₂ et Y ₃ sont différents de H, X ₃ représente F, Cl, Br, ORi ou SR ₂ notamment F ou ORi et Y ₂ et Y ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ , notamment F ou OR ₃ . Notamment, Χ-ι , X ₂ , X ₄ , X ₅ , Υ-ι , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène. Dans un troisième mode de réalisation particulier selon l'invention, X ₂ , X3 et Y ₃ sont différents de H, X ₂ et X ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, OR1 ou SR ₂ notamment F ou OR1 et Y ₃ représente F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ notamment F ou OR ₃ . Notamment, Xi , X ₄ , X ₅ , Y-i , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

Dans un quatrième mode de réalisation particulier selon l'invention, X ₂ , X ₃ , Y ₂ et Y ₃ sont différents de H, X ₂ et X ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, OR1 ou SR ₂ notamment F ou OR1 et Y ₂ et Y ₃ représentent indépendamment l'un de l'autre F, Cl, Br, OR ₃ ou SR ₄ notamment F ou OR ₃ . Préférentiellement, Χ-ι, X ₄ , X ₅ , Υ-ι, Y ₄ et Y ₅ représentent simultanément hydrogène.

La présente invention concerne également une méthode de prévention et/ou de traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down comprenant l'administration d'une quantité efficace d'au moins un composé de formule (I), ses sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou ses prodrogues tel que défini ci-dessus à un patient en ayant besoin.

La présente invention concerne également l'utilisation d'au moins un composé de formule (I), ses sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou ses prodrogues tels que définis ci-dessus pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down.

La présente invention concerne également les nouveaux composés de formule (Γ) tels que définie ci-dessous, et leurs sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou leurs prodrogues :

dans laquelle :

Xi , X ₂ , X ₄ , X ₅ , Yi , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ sont indépendamment les uns des autres H, F, Cl, Br, OH ou SH, de préférence H, F, OH ou SH,

X ₃ est F, OH ou SH, de préférence OH,

Y ₃ est F, OH ou SH, de préférence OH, et

1 à 2 groupes parmi les radicaux X1 , X ₂ , X ₄ et X ₅ sont différents de H et/ou 1 à 2 groupes parmi les radicaux Y1 , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ sont différents de H.

Ainsi, dans les composés de formule (Γ), un des cycles aromatiques en positions 3 et 5 du 7-azaindole est substitué par au moins un groupe F, Cl, Br, OH ou SH, de préférence F, OH ou SH, en plus des radicaux X ₃ et Y ₃ . Un des cycles aromatiques en positions 3 et 5 du 7-azaindole est donc di- ou tri-substitué et le second cycle aromatique mono-, di- ou tri-substitué.

Le nombre et la position des radicaux XrX ₅ et Yi-Y ₅ , ainsi que les modes de réalisation tels qu'ils sont définis pour les composés de formule (I) sont applicables aux composés de formule (Γ).

Notamment, dans les composés de formule (Γ), au moins un radical parmi X X ₅ représente OH et au moins un radical parmi Y1-Y5 représente OH. Avantageusement, le radical parmi X X ₅ représentant OH est X ₂ ou X ₃ et le radical parmi Y1-Y5 représentant OH est Ύ ₂ ou Y ₃ . De préférence, X ₃ et Y ₃ sont OH.

De manière avantageuse, dans les composés de formule (Γ), tous les radicaux parmi X X ₅ différents de H sont indépendamment les uns des autres F ou OH et de préférence OH et tous les radicaux parmi Y1-Y5 différents de H sont indépendamment les uns des autres F ou OH et de préférence OH.

Les composés de formule (Γ) sont notamment choisis parmi les composés suivants :

La présente invention concerne également des composés de formule (Γ), leurs sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou leurs prodrogues tels que définis ci-dessus pour leur utilisation en tant que médicament.

La présente invention concerne également des composés de formule (Γ), leurs sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou leurs prodrogues tels que définis ci-dessus pour leur utilisation dans la prévention et/ou le traitement des troubles cognitifs liés au dysfonctionnement de la protéine DyrkIA, notamment dans la prévention et/ou le traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down ou à la maladie d'Alzheimer.

La présente invention concerne également une méthode de prévention et/ou de traitement des troubles cognitifs liés au dysfonctionnement de la protéine DyrkIA, notamment une méthode de prévention et/ou de traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down ou à la maladie d'Alzheimer, comprenant l'administration d'une quantité efficace d'au moins un composé de formule (Γ), ses sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou ses prodrogues tels que définis ci-dessus à un patient en ayant besoin.

La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule (Γ), ses sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou ses prodrogues tels que définis ci-dessus pour la fabrication d'un médicament, notamment destiné au traitement des troubles cognitifs liés au dysfonctionnement de la protéine DyrkIA, en particulier à la prévention et/ou au traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down ou à la maladie d'Alzheimer.

La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant au moins un composé de formule (Γ), ses sels, solvates, hydrates pharmaceutiquement acceptables ou ses prodrogues tel que défini ci-dessus et un excipient pharmaceutiquement acceptable.

La composition pharmaceutique comprenant au moins un composé de formule (Γ) est destinée au traitement des troubles cognitifs liés au dysfonctionnement de la protéine DyrkIA, en particulier à la prévention et/ou au traitement des troubles cognitifs liés au syndrome de Down ou à la maladie d'Alzheimer.

Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être formulées pour une administration parentérale (par exemple sous-cutanée, intra-péritonéale, intramusculaire, intraveineuse, intrathécale, etc.), orale, sublinguale, transdermique, locale ou rectale, destinée aux mammifères, y compris l'homme. La posologie varie selon le traitement et selon l'affection en cause.

Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention, l'ingrédient actif peut être administré sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, aux animaux ou aux êtres humains.

Les formes unitaires d'administration par voie orale appropriées comprennent les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, et les formes d'administration parentérale, notamment intra-péritonéale.

Lorsque l'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange l'ingrédient actif principal avec un véhicule pharmaceutique tel que la gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose ou d'autres matières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de principe actif. On obtient une préparation en gélules en mélangeant l'ingrédient actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures.

Une préparation sous forme de sirop ou d'élixir peut contenir l'ingrédient actif conjointement avec un édulcorant, un antiseptique, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié.

Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir l'ingrédient actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants, ou des agents de mise en suspension, de même qu'avec des correcteurs de goût ou des édulcorants.

Pour une administration parentérale, on utilise des suspensions aqueuses, des solutions salines isotoniques ou des solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion et/ou des agents mouillants pharmacologiquement compatibles.

Le principe actif peut être formulé également sous forme de microcapsules, éventuellement avec un ou plusieurs supports additifs.

La présente invention a également pour objet un procédé de préparation d'un composé de formule (Γ) tel que défini précédemment ou l'un de ses sels, solvates et hydrates pharmaceutiquement acceptables comprenant les étapes de :

(a) réaction entre un composé de formule (ΙΓ) :

dans lesquels :

PG représente un groupe N-protecteur,

Hal représente un atome d'halogène, en particulier le brome, ou un groupe OS0 ₂ CF _3, E ₂ représente un acide boronique B(OH) ₂ ou l'un de ses dérivés,

les radicaux Χ ₃ · et Υ ₃ · sont F, OPd ou SPG ₂ , où PG1 représente un groupe O-protecteur et PG ₂ représente un groupe S-protecteur,

les radicaux X1 , X ₂ , X ₄ , X5, Yi , Y ₂ , Y ₄ et Y ₅ sont indépendamment les uns des autres H, F, Cl, Br, OPd ou SPG ₂ ,

PG1 représente un groupe O-protecteur et PG ₂ représente un groupe S-protecteur, pour donner un composé de formule (IV) :

(b) déprotection du groupe N-PG du composé de formule (IV), et des groupes OPG1 et SPG ₂ pour donner un composé de formule (Γ),

(c) éventuellement salification, solvatation ou hydratation pour donner un sel, solvate ou hydrate pharmaceutiquement acceptable d'un composé de formule

(!') ^■

Les groupes N-protecteurs préférés selon la présente invention sont les tosylamides tels que le benzènesulfonamide, le 4-nitrobenzènesulfonamide et le para- toluènesulfonamide et les carbamates tels que le t-butyloxycarbonyle (Boc), le benzyloxycarbonyle (Cbz), les carbamates de benzyle.

Les groupes O-protecteur préférés selon l'invention sont les éthers de benzyle, éventuellement substitués tel que le 4-méthoxybenzyle ; le groupement méthoxyméthyle et les éthers d'alkyle tels que l'éther méthylique et les esters tels qu'un groupement acyle et de préférence un groupement acétyle.

Les groupes S-protecteur préférés selon l'invention sont les thioéthers de benzyle éventuellement substitués tel que le 4-méthoxybenzyle ; les thioesters tels qu'un groupement acyle et de préférence un groupement acétyle.

Avantageusement, cette réaction est réalisée en présence d'un catalyseur à base d'un métal de transition tel que Pd, Ni, Cu et de préférence Pd. Les catalyseurs préférés sont les complexes du palladium, du nickel ou du cuivre et de préférence du palladium. Par exemple, le catalyseur peut être Pd(PPh ₃ ) ₄ ou Pd(OAc) ₂ .

La réaction est réalisée à une température comprise entre 20 et 150 °C, de préférence entre 80 et 1 10 °C.

Les solvants utilisés pour effectuer cette réaction sont les solvants aromatiques tels que le toluène ; les alcools tels que l'éthanol, le propanol et l'isopropanol et les cétones telles que l'acétone. De préférence, la réaction est réalisée dans un mélange d'un solvant aromatique et d'un alcool, notamment dans un mélange toluène/éthanol.

La réaction peut être réalisée en présence d'une base. Des exemples de bases sont les carbonates tels que Na ₂ C0 ₃ ou K ₂ C0 ₃ , et les hydroxydes de métaux alcalins tels que NaOH ou KOH. L'étape de déprotection peut être réalisée selon des méthodes bien connues de l'homme du métier comme celles décrites dans Greene, « Protective Groups In Organic synthesis », (John Wiley & Sons, New York (1981 )) et Harrison et al. « Compendium of Synthetic Organic Methods », Vols. 1 à 8 (J. Wiley & sons, 1971 à 1996).

Les composés de formule (Γ) peuvent être préparés à partir d'un 5-halo-3-iodo- azaindole selon le procédé représenté dans le schéma suivant :

Le procédé selon l'invention comprend les étapes de :

(a) protection de l'azote 1 -indolique avec un groupe N-protecteur,

(b) réaction entre le 3-iodo-5-halo-azaindole et un acide aryl-boronique ou l'un de ses dérivés en présence d'un catalyseur métallique,

(c) réaction entre le 3-aryle-5-halo-azaindole et un acide aryl-boronique ou l'un de ses dérivés en présence d'un catalyseur métallique,

(d) déprotection du groupe N-PG, et éventuellement des groupes OPGi ou SPG ₂ , pour donner un composé de formule (Γ) tel que défini précédemment,

(e) éventuellement salification, solvatation ou hydratation pour donner un sel, solvate ou hydrate pharmaceutiquement acceptable d'un composé de formule (Γ).

La présente invention a enfin pour objet une méthode de dosage de l'activité phosphorylante de la kinase DyrkIA. Cette méthode est basée sur la séparation, la détection et la quantification d'un substrat peptidique de l'enzyme et de son produit phosphorylé. Ce substrat porte un groupement fluorescent permettant une détection sensible et spécifique du substrat et du produit. Par « substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent », on entend au sens de la présente invention une molécule qui est phosphorylée par l'enzyme DyrkIA et sur laquelle est greffé un groupement fluorescent.

Le terme « substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent » désigne au sens de la présente invention le produit obtenu après phosphorylation par l'enzyme DyrkIA du substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent.

Dans les conditions de la méthode de dosage, la protéine DyrkIA transforme le substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent en un substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent. La proportion de substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent et de substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent pendant un temps déterminé dépend de l'activité phosphorylante de la protéine DyrkIA. En présence d'un inhibiteur, l'activité phosphorylante de la protéine DyrkIA est d'autant plus réduite que cet inhibiteur est efficace. La détermination de la proportion de substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent et de substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent pendant un temps déterminé permet donc de mesurer l'activité phosphorylante de la protéine DyrkIA.

La méthode de dosage comprend les étapes de :

(a) Mise en contact de la protéine DyrkIA avec le substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent pour donner le substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent et le substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent,

(b) Séparer le substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent par l'enzyme et le substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent par chromatographie, et

(c) Mesurer la proportion substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent / substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent grâce à un détecteur de fluorescence.

Le substrat non phosphorylé est notamment un peptide ou une protéine. Il peut s'agir d'un peptide ayant pour séquence ISGRLSPIMTEQ (SEQ-ID 1 ) ou KKISGRLSPIMTEQ (SEQ-ID 2) tels que décrits dans Woods, Y. et al. Biochem. J. 355, 597 (2001 ); Woods, Y. et al. Biochem. J. 355, 609 (2001 ); Klumpp, M. et al. J. Biomol. Screen. 1 1 , 617 (2006).

Le groupement fluorescent est choisi de préférence parmi le groupe constitué de l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC), de la fluorescéine, de la p-Nitroaniline (pNA) et de la biotine. La préparation du substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent est réalisée selon des méthodes bien connues de l'homme du métier.

Avantageusement, le substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent est le peptide Fluorescéine-KKISGRLSPIMTEQ.

La séparation du substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent et du substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent peut être réalisée par chromatographie. La séparation est notamment réalisée par colonne de chromatographie haute pression (UFLC : Ultra Fast Liquid Chromatography). De préférence, le substrat phosphorylé portant un groupement fluorescent par l'enzyme est séparé du substrat non phosphorylé portant un groupement fluorescent par chromatographie sur une colonne en C ₈ -Ci ₈ hydrophobe couplée à un appareil UFLC et à un détecteur de fluorescence.

La Figure 1 représente les résultats obtenus in vivo avec les composés selon l'invention sur l'état de phosphorylation de deux cibles en aval de DyrkIA dans les voies de signalisation.

Figure 1 a : l'axe des ordonnées représente le rapport GSK phosphorylée (pGSK) / GSK non phosphorylée (GSK) mesuré par une technique de slot-blot. L'axe des abscisses indique les composés testés sur des animaux contrôles (WT) ou sur des animaux modèle de trisomie pour le gène Dyrkl a (TG).

Figure 1 b : l'axe des ordonnées représente le rapport CAMKII phosphorylée (pCAMKII) / CAMKII non phosphorylée (CAMKII) mesuré par une technique de slot-blot. L'axe des abscisses indique les composés testés sur des animaux contrôles (WT) ou sur des animaux modèle de trisomie pour le gène Dyrkl a (TG).

La présente invention sera mieux comprise à la lumière des exemples non limitatifs qui suivent.

EXEMPLES

Exemple 1 : Synthèse des 3,5-diaryl-azaindoles :

La préparation du 3-phényl-5-(2-hydroxyphényl-1 H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (Composé A) est donnée à titre d'exemple.

3-iodo-5-bromo-1 H-pyrrolor2,3-b1-pyridine (produit commercial) A une solution de 5-bromo-1 H-pyrrolo[2,3-b]-pyridine (produit commercial, 1 g, 5.10 mmol) dans 200 ml_ de CH ₂ CI ₂ est ajouté KOH (145 mg, 2.55 mmol) à température ambiante. Après 30 minutes, N-iodosuccinimide (1 .2 g, 5.10 mmol) est ajouté et la solution agitée pendant 15 heures, neutralisée avec une solution saturée de Na ₂ S ₂ 0 ₃ et extraite plusieurs fois avec du CH ₂ CI ₂ . Les phases organiques sont combinées, séchées sur MgS0 ₄ et concentrées sous pression réduite. Le produit attendu est obtenu avec un rendement quantitatif et utilisé dans l'étape suivante sans purification supplémentaire. ¹ H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 12.34 (s, 1 H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H);

1 ³ C NMR (DMSO-d6, 75 MHz) δ 146.5, 143.8, 132.5, 129.9, 123.8, 1 1 1.5, 53.6.

HRMS (ESI+) calcd for C ₇ H ₄ ⁷⁹ BrlN ₂ [M+H]+ 322.8681 , found 322.8682, HRMS (ESI+) calcd for C ₇ H ₄ ⁸¹ BrlN ₂ [M+H]+ 324.8660, found 324.8670.

IR (cm-1 ): v 31 18, 2821 , 1638. 3-iodo-5-bromo-1 -(phénylsulfonvD-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine

A une solution de 3-iodo-5-bromo-1 H-pyrrolo[2,3-b]-pyridine (500 mg, 1 .55 mmol) dans du CH ₂ CI ₂ (4.1 mL) sont ajoutés de l'hydrure de sodium 60% (186 mg, 4.66 mmol) et du chlorure de benzyltriéthylammonium (8 mg, 0.03 mmol) sous argon à 0 °C. Après 30 minutes, du chlorure de benzènesulfonyle (240 μί, 1 .86 mmol) est ajouté à 0 °C et le mélange est agité à température ambiante pendant 2 heures. Le mélange est neutralisé avec de l'eau et extraite plusieurs fois avec du CH ₂ CI ₂ . Les phases organiques sont combinées, séchées sur MgS0 ₄ et concentrées sous pression réduite. Le résidu est précipité avec du méthanol et le solide résultant filtré pour donner le produit attendu sous la forme d'un solide rose avec 97 % de rendement.

¹ H NMR (CDCIs, 500 MHz) δ 8.46 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.19 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.88 (s, 1 H), 7.82 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.64-7.61 (m, 1 H), 7.54-7.51 (m, 2H);

¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 146.7,144.7, 137.6, 134.6, 132.5, 131.2, 129.2, 128.2, 126.7, 1 16.0, 60.6.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₃ H ₉ N ₂ 0 ₂ S ⁷⁹ Br [M+H] ⁺ 462.8613, found 462.8605, HRMS (ESI+) calcd for Ci ₃ H ₉ N ₂ 0 ₂ S ⁸¹ Br [M+H] ⁺ 464.8592, found 464.8596.

IR (cm ^"1 ): v 2851 , 1613, 1370. 3-phényl-5-bromo-1 -(phénylsulfonv -1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine

A une solution de 3-iodo-5-bromo-1 -(phénylsulfonyl)-1 H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (250 mg, 0.54 mmol) dans un mélange toluène/éthanol 3:1 (17 mL) sont ajoutés l'acide benzène boronique (65 mg, 0.54 mmol), K ₂ C0 ₃ (1 .6 mL d'une solution 2M dans l'eau, 3.20 mmol) et Pd(PPh ₃ ) ₄ (1 .5 mol%) et la réaction est chauffée à 1 10°C pendant 3 h 30 sous argon. Le mélange est refroidi à température ambiante, concentré sous vide et redissous dans un mélange eau / CH ₂ CI ₂ . La phase aqueuse est extraite plusieurs fois avec du CH ₂ CI ₂ et les phases organiques combinées séchées sur MgS0 ₄ . Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu purifié par chromatographie « flash » sur gel de silice (CH ₂ CI ₂ 100%) pour donner le produit purifié sous la forme d'un solide blanc avec 89 % de rendement.

¹ H NMR (CDCIs, 300 MHz) δ 8.50 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.25-8.20 (m, 3H), 7.90 (s, 1 H), 7.64-7.36 (m, 8H);

1 ³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 145.7, 145.6, 137.9, 134.3, 131 .8, 131.1 , 129.1 , 129.0, 128.0, 127.9, 127.3, 123.9, 123.1 , 1 19.8, 1 15.5.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₄ N ₂ 0 ₂ S ⁷⁹ Br [M+H] ⁺ 412.9959, found 412.9969, HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₄ N ₂ 0 ₂ S ⁸¹ Br [M+H] ⁺ 414.9939, found 412.9958.

IR (cm ^"1 ): v 2919, 1605, 1383.

3-phényl-5-(4-méthoxyphényl)-1 -(phénylsulfonyl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine

A une solution de 3-phényl-5-bromo-1 -(phénylsulfonyl)-1 H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (309 mg, 0.75 mmol) dans un mélange toluène/éthanol 3 :1 (24 mL) sont ajoutés de l'acide 2- méthoxy-benzène boronique (125 mg, 0.83 mmol ), K ₂ C0 ₃ (2.4 mL d'une solution 2M dans l'eau, 4.5 mmol), Pd(PPh ₃ ) ₄ (1 .5 mol%), et le mélange est chauffé à 85 °C pendant 2 heures sous argon. Le mélange est refroidi à température ambiante, concentré sous vide et redissous dans un mélange eau / CH ₂ CI ₂ . La phase aqueuse est extraite plusieurs fois avec du CH ₂ CI ₂ et les phases organiques combinées séchées sur MgS0 ₄ . Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu purifié par chromatographie « flash » sur gel de silice (CH ₂ CI ₂ 100 %) pour donner le produit purifié sous la forme d'une huile incolore avec un rendement de 98 %.

1 H N MR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 8.66 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.31 -8.25 (m, 3H), 7.92 (s, 1 H), 7.65-7.58 (m, 3H), 7.55-7.45 (m, 4H), 7.41 -7.30 (m, 3H), 7.1 -7.0 (m, 2H), 3.81 (s, 3H); ¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 156.5, 146.5, 146.3, 138.4, 134.0, 132.7, 131 .0, 130.1 , 129.6, 129.3, 129.0, 129.0, 128.0, 127.6, 127.4, 127.3, 122.7, 121 .1 , 121 .0, 120.6, 1 1 1 .2, 55.5. HRMS (ESI+) calcd for C2 ₆ H21 N2O ₃ S [M+H] ⁺ 441 .1273, found 441 .1273.

I R (cm ^"1 ): v 2925, 1601 , 1385.

3-phényl-5-(2-méthoxyphényl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine

A une solution de 3-phényl-5-(2-méthoxyphényl)-1 -(phénylsulfonyl)-1 H-pyrrolo[2,3- b]pyridine (374 mg, 0.85 mmol) dans du méthanol (2.3 mL) est ajouté du NaOH (260 μί d'une solution 2N dans l'eau, 0.51 mmol). Le mélange est chauffé à 80 °C pendant 1 heure puis refroidi à température ambiante.

Le mélange est refroidi à température ambiante, concentré sous vide et redissous dans un mélange eau / CH ₂ CI ₂ . La phase aqueuse est extraite plusieurs fois avec du CH ₂ CI ₂ et les phases organiques combinées séchées sur MgS0 ₄ . Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu purifié par chromatographie « flash » sur gel de silice

(CH ₂ CI ₂ /MeOH, gradient 100/0 à 98 :2) pour donner le produit purifié sous la forme d'un solide jaune avec 42 % de rendement.

1 H NMR (CDCI ₃ , 500 MHz) δ 1 1 .50 (br s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 7.70 (d, J = 8.0

Hz, 2H), 7.62 (s, 1 H), 7.49-7.38 (m, 4H), 7.33-7.30 (m, 1 H), 7.13-7.10 (m, 1 H), 7.06 (br d,

J = 8.0 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3H);

¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 156.7, 148.3, 143.9, 135.1 , 131 .3, 129.4 (2CH), 128.9, 128.8, 128.7, 127.1 (2CH+C), 126.1 , 122.7, 121 .0, 1 18.3, 1 16.5, 1 1 1 .3, 55.6.

HRMS (ESI+) calcd for C ₂ oH ₁₇ N ₂ 0 [M+H] ⁺ 301 .1341 , found 301 .1337.

I R (cm ^"1 ): v 3 ^* 124, 2833, 1599.

UPLC Ri = 4.35 min; area 100%.

3-phényl-5-(2-hvdroxyphényl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine (A)

A une solution de 3-phényl-5-(2-méthoxyphényl)-1 H-pyrrolo[2,3-b]pyridine (1 13 mg, 0.38 mmol) dans du CH ₂ CI ₂ (325 μΙ_) est ajouté BBr ₃ (1 .1 ml_ d'une solution 1 N dans CH ₂ CI ₂ , 1 .13 mmol). Le mélange réactionnel est agité pendant 15 heures à température ambiante et neutralisé à 0°C avec du méthanol. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu purifié par chromatographie sur couche mince préparative (CH ₂ CI ₂ /MeOH 94:6) pour donner le produit attendu sous la forme d'un solide blanc avec un rendement de 34 %.

1H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.42 (s, 1 H), 8.32 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.63 (br d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.58 (s, 1 H) 7.40-7.35 (m, 2H), 7.31 -7.28 (m, 1 H), 7.24-7.14 (m, 2H), 6.95-6.89 (m, 2H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 155.6, 148.5, 144.5, 136.3, 131 .9, 130.3, 129.8 (2CH), 129.7, 128.6, 127.9 (2CH), 127.6, 127.0, 124.4, 121.2, 1 19.6, 1 17.4, 1 17.0.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 0 [M+H] ⁺ 287.1 184, found 287.1 188.

IR (cm ^"1 ): v 3267, 2869, 1602, 1262.

UPLC R _t = 3.67 min; area 100%.

Les autres composés ont été préparés suivant la même méthode à partir des acides aryle-boroniques appropriés.

3-phényl-5-phényl-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine (B)

¹ H NMR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 10.93 (s, 1 H), 8.65 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.45 (d, J = 1 .8 Hz,

1 H), 7.73-7.6 (m, 4H), 7.54 (s, 1 H), 7.52-7.46 (m, 4H), 7.43-7.31 (m, 2H);

¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 148.7, 142.4, 139.5, 134.9, 130.3, 129.0 (2CH), 128.9 (2CH),

127.5 (2CH), 127.2 (2CH), 127.1 , 126.9, 126.3, 122.9, 1 18.6, 1 16.8.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ [M+H] ⁺ 271 .1235, found 271 .1226.

IR (cm ^"1 ): v. 3136, 2884, 1602. UPLC R _t = 4.51 min; area 100%. 3-phényl-5-(4-hvdroxyphényl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine (C)

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.40 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.32 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.64 (br d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.61 (s, 1 H) 7.48-7.39 (m, 4H), 7.28-7.25 (m, 1 H), 6.89 (br d, J = 8.7 Hz, 2H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 158.2, 148.9, 142.4, 136.3, 131 .8 (2CH), 131 .3 (2CH), 129.9 (2CH), 129.4 (2CH), 127.9 (2CH), 127.1 , 127.0, 124.7, 120.0, 1 17.3, 1 16.8 (2CH). HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 0 [M+H] ⁺ 287.1 184, found 287.1 188.

IR (cm ^"1 ): v 3142, 2890, 1602, 1259.

UPLC R _t = 3.44 min; area 100%.

3-phényl-5-(3-hvdroxyphényl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine (D)

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.45 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.38 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.69-7.65 (m, 3H), 7.46-7.41 (m, 2H), 7.31 -7.24 (m, 2H), 7.13-7.08 (m, 2H), 6.80 (dd, J = 8.1 Hz, 1 .5 Hz, 1 H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) 159.1 , 149.4, 142.7, 142.0, 136.3, 131.3, 131 .1 , 129.9 (2CH), 128.0 (2CH), 127.6, 127.2, 125.0, 120.0, 1 19.6, 1 17.5, 1 15.2, 1 15.0.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 0 [M+H] ⁺ 287.1 184, found 287.1 182.

IR (cm ^"1 ): v 3124, 2919, 1596.

UPLC R _t = 3.64 min; area 100%.

3-phényl-5-(3,4-dihvdroxyphényl)- -pyrrolor2,3-b1pyridine (E)

¹ H NMR (DMSO-d ₆ , 300 MHz) δ 1 1.90 (br s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H), 8.44 (d, J = 1 .8 Hz, 1 H), 8.27 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 7.76 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.48-7.43 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 7.01 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.84 (d, J = 8.1 Hz, 1 H); ¹³ C NMR (DMSO-d _6! 75 MHz) δ 148.2, 145.6, 144.8, 141.6, 135.1, 131.3, 130.4, 130.3, 129.2, 128.9, 126.3, 125.6, 124.4, 124.3, 118.0, 117.2, 114.4.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 02 [M+H] ⁺ 303.1134, found 303.1143.

IR(cm ^"1 ): v 3112, 2830, 1601, 1254.

UPLC Ri = 3.74 min; area 100%.

3-phényl-5-(2,4-dihvdroxyphényl)-1 H-pyrrolor2,3-b1pyridine (F) ¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.39 (s, 2H), 7.69 (br d, J = 9.3 Hz, 2H), 7.62 (s, 1 H), 7.45- 7.39 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 1H), 7.15 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.45-6.41 (m, 2H);

1 ³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 159.2, 156.5, 148.3, 144.5, 136.5, 132.4, 130.1, 129.9 (2CH), 128.9, 127.9 (2CH), 127.0, 124.3, 119.7, 119.3, 117.3, 108.4, 104.1.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 02 [M+H] ⁺ 303.1134, found 303.1124.

IR (cm ^"1 ): v 3252, 2833, 1605, 1259. UPLC R _t = 2.94 min; area 100%.

3-(3-méthoxyphényl)-5-(3-méthoxyphényl)-1H-pyrrolor2, 3-b1pyridine (G) ¹ H NMR(CDCI ₃ ,300 MHz)510.64 (brs, 1 H), 8.63 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.44 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45-7.38 (m, 2H), 7.31-7.18 (m, 5H), 6.97-6.87 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.90 (s, 3H); ¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 160.1, 160.0, 148.4, 142.1, 140.9, 136.1, 130.2, 130.0 (2CH), 127.2, 123.2, 120.0, 119.7, 118.7, 116.8, 113.4, 113.1, 112.5, 111.7, 55.4, 55.3. HRMS (ESI+) calcd for C ₂ iH ₁₉ N ₂ 02 [M+H] ⁺ 331.1447, found 331.1443.

IR(cm ^"1 ): v 3109, 2830, 1607, 1207.

UPLC R _t = 4.39 min; area 100%.

3-(3-hvdroxyphényl)-5-(3-hvdroxyphényl)-1H-pyrrolor2,3- b1pyridine (la) ¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.45 (s, 1 H), 8.42 (d, J = 2.1 Hz, 1 H ), 7.64 (s, 1 H), 7.32- 7.24 (m, 2H), 7.19-7.08 (m, 4H), 6.82-6.70 (m, 2H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 159.1, 158.9, 149.3, 142.6, 142.0, 137.6, 131.2, 131.1, 131.0, 127.7, 124.9, 119.9, 119.6, 119.3, 117.5, 115.2, 115.0, 114.7, 114.2.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 02 [M+H] ⁺ 303.1134, found 303.1127.

IR (cm ^"1 ): v 3314, 3014, 1599, 1275.

UPLC R _t = 2.91 min; area 100%. 3-(4-méthoxyphényl)-5-(4-méthoxyphényl)-1H-pyrrolor2,3-b 1pyridine (H)

Mp 190°C.

¹ H NMR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 10.60 (br s, 1 H), 8.58 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.33 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.63-7.57 (m, 4H), 7.51 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 4H) 3.89 (s, 3H), 3.88 (s, 3H); ¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 159.1, 158.3, 148.3, 142.1, 132.1, 129.8, 128.5 (2CH), 128.3 (2CH), 127.5, 126.4, 122.1, 118.7, 116.4, 114.5 (2CH), 114.4 (2CH), 55.4, 55.3.

HRMS (ESI-) calcd for C21 H17N202 [M-H]- 329.1290, found 329.1282.

IR(cm-1): v 3143, 2853, 1606.

UPLC Rt = 4.20 min; area 100%.

3-(4-hvdroxyphényl)-5-(4-hvdroxyphényl)-1H-pyrrolor2,3- b1pyridine (Ib)

Mp 150-160°C.

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.38 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.52-7.46 (m, 5H), 6.92-6.88 (m, 4H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 158.1, 157.1, 148.8, 142.2, 132.0, 131.1, 129.4 (2CH),

129.3 (2CH), 127.7, 127.2, 123.9, 120.2, 117.5, 116.9 (2CH), 116.8 (2CH).

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 02 [M+H] ⁺ 303.1134, found 303.1127.

IR(cm ^"1 ): v 3136, 2937, 1601, 1257.

UPLC Ri = 2.47 min; area 100%. 3-(4-méthoxyphényl)-5-(2,4-diméthoxyphényl)-1H-pyrrolor2 ,3-b1pyridine (J)

e

Mp 90°C.

1H NMR(CDCI ₃ ,300 MHz) δ 10.21 (br s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.61- 7.58 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.32-7.29 (m, 1H), 7.03-7.00 (m, 2H), 6.65-6.61 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 3H);

¹³ C NMR (CDCIs, 75 MHz) δ 160.5, 158.3, 157.6, 147.5, 143.9, 131.6, 129.3, 128.3 (2CH), 127.5, 126.9, 121.7, 121.4, 118.4, 116.5, 114.4 (2CH), 104.8, 99.1, 55.6, 55.5, 55.3.

HRMS (ESI+) calcd for C22H21N2O ₃ [M+H] ⁺ 361.1552, found 361.1557.

IR(crrf ¹ ): v3312, 1998, 1616.

UPLC Ri = 4.08 min; area 100%.

3-(4-hvdroxyphényl)-5-(2,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrrolor 2,3-b1pyridine (l'a)

Mp201-210°C.

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.34 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.14 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 8.4 Hz, 2.1 Hz, , 2H), 6.44 (s, 1 H), 6.41-6.45 (m, 1H);

1 ³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 159.1, 157.0, 156.5, 148.3, 144.4, 132.5, 130.0, 129.2 (2CH), 128.6, 127.9, 123.2, 119.8, 119.4, 117.4, 116.7 (2CH), 108.4, 104.1.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 0 ₃ [M+H] ⁺ 319.1083, found 319.1087.

IR(crrï ¹ ): v3189, 3008, 1605, 1260.

UPLC Ri = 2.10 min; area 100%.

3-(4-méthoxyphényl)-5-(3,4-diméthoxyphényl)-1H-pyrrol or2,3-b1pyridine (K) e

¹ H NMR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 9.85 (br s, 1 H), 8.29 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.08 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.24 (s, 1H), 6.93.6.86 (m, 2H), 6.79-6.72 (m, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.61 (s, 3H);

1 ³ C NMR (CDCIs, 75 MHz) 5158.5, 149.4, 148.7, 147.5, 141.5, 132.3, 130.2, 128.4 (2CH), 127.1, 127.0, 122.3, 119.8, 119.0, 116.7, 114.5 (2CH), 111.7, 110.9, 56.1, 56.0, 55.4. HRMS (ESI-) calcd for C ₂ 2H ₁₉ N ₂ 0 ₃ [M-H] ^" 359.1396, found 359.1389.

IR(cm ^"1 ): v 3112, 2833, 1571, 1241.

UPLC Ri = 3.85 min; area 100%.

3-(4-hvdroxyphényl)-5-(3,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrrolor 2,3-b1pyridine (l'b)

Mp 275°C (dégradation).

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.37 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.27 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.52-7.49 (m, 3H), 7.08 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.00-6.97 (m, 1H), 6.91-6.86 (m, 3H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 157.1, 148.9, 146.8, 146.1, 142.2, 132.6, 131.2, 129.3

(2CH), 127.7, 127.1, 123.8, 120.2, 119.8, 117.5, 117.0, 116.8 (2CH), 115.3.

HRMS (ESI-) calcd for Ci9H ₁₃ N ₂ 0 ₃ [M-H] ^" 317.0926, found 317.0936.

IR(cm ^"1 ): \ 3264, 3017, 1601, 1257.

UPLC Ri = 2.22 min; area 100%.

3-(3,4-diméthoxyphényl)-5-(3,4-diméthoxyphényl)-1H-py rrolor2,3-b1pyridine (L)

¹ H NMR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 10.10 (br s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.24-7.11 (m, 4H), 7.01 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.96 (s, 6H); ^Ί NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 149.4 (2C), 148.8, 148.2, 146.9, 140.9, 132.0, 130.3, 127.4, 127.3, 122.7, 119.8, 119.7, 119.4, 117.1, 111.9, 111.8, 110.9, 110.8, 56.1 (4CH ₃ ).

HRMS (ESI+) calcd for C ₂ 3H ₂₃ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 391.1658, found 391.1663.

IR (cm ^"1 ): v 3124, 2833, 1604, 1247.

UPLC R _t = 3.52 min; area 100%.

3-(3,4-dihvdroxyphényl)-5-(3,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrr olor2,3-b1pyridine (l'c)

Mp 190°C.

1H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.37 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.31 (d, J = 2.1 Hz, 1 H ), 7.49 (s, 1H), 7.14 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.03-6.97 (m, 2H), 6.89 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 6.86 (d, J=3.9 Hz, 1H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 148.8, 146.8, 146.6, 146.0, 145.1, 142.2, 132.6, 131.2, 128.3, 127.2, 123.8, 120.1, 119.8, 119.6, 117.6, 117.0 (2CH), 115.3 (2CH).

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 335.1032, found 335.1038.

IR (cm ^"1 ): v 3172, 3047, 1596, 1270.

UPLC R _t = 1-99 min; area 100%.

3-(3,4-diméthoxyphényl)-5-(2,4-diméthoxyphényl)-1H-py rrolor2,3-b1pyridine (M)

¹ H NMR (CDCI ₃ ,300 MHz) δ 10.70 (br s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.33 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.24-7.18 (m, 2H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65-6.60 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 3H);

¹³ C NMR (CDCI ₃ ,75 MHz) δ 160.5, 157.6, 149.3, 147.8, 147.6, 143.9, 131.5, 129.2, 128.0, 126.9, 122.0, 121.3, 119.5, 118.4, 116.5, 111.8, 110.8, 104.8, 99.1, 56.0, 55.9, 55.6, 55.5. HRMS (ESI+) calcd for C ₂₃ H ₂₃ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 391.1658, found 391.1657.

IR(cm ^"1 ): v 3124, 2934, 1611, 1248.

UPLC R _t = 3.74 min; area 100%. 3-i3,4-dihvdroxyphényl)-5-i2,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrrolo r2,3-b1pyridine (l'd)

Mp 197°C.

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.36-8.33 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.16-7.13 (m, 2H), 7.02- 6.98 (m, 1 H), 6.85 (br d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.45-6.40 (m, 2H);

¹³ C NMR (CD ₃ OD, 75 MHz) δ 159.1, 156.5, 148.3, 146.6, 145.0, 144.4, 132.5, 130.0, 128.6, 128.5, 123.2, 119.8, 119.7, 119.5, 117.5, 116.9, 115.3, 108.4, 104.1.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 335.1032, found 335.1025.

IR(cm ^"1 ): v3136, 2842, 1604, 1259.

UPLC R _t = 1-89 min; area 100%.

3-(3,4-diméthoxyphényl)-5-(2,5-diméthoxyphényl)-1H-py rrolor2,3-b1pyridine (N)

¹ H NMR (CDCI ₃ , 300 MHz) δ 10.89 (br s, 1H), 8.56 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.39 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.25-7.18 (m, 2H), 7.00-6.97 (m, 3H), 6.93-6.88 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.79 (s, 3H);

¹³ C NMR (CDCI ₃ , 75 MHz) δ 153.9, 150.9, 149.3, 147.9, 147.8, 143.8, 129.5, 129.3, 127.8, 126.8, 122.1, 119.5, 118.4, 117.1, 116.6, 113.1, 112.6, 111.8, 110.7, 56.3, 56.0, 55.9, 55.8.

HRMS (ESI+) calcd for C ₂ 3H ₂₃ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 391.1658, found 391.1648.

IR (cm ^"1 ): v 3130, 2830, 1582, 1245.

UPLC R _t = 3.80 min; area 100%.

3-(3,4-dihvdroxyphényl)-5-(2,5-dihvdroxyphényl)-1H-pyrr olor2,3-b1pyridine (l'e)

Mp 180°C.

¹ H NMR (CD ₃ OD, 300 MHz) δ 8.40 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.13 (d, J

(dd, J= 8.1 Hz, 2.1 Hz, 1H), 6.87-6.77 (m, 3H), 6.68-6.64 (m, 1H); ¹³ C NMR (CD ₃ OD,75 MHz) δ 151.7, 148.6, 148.4, 146.6, 145.0, 144.3, 130.2, 128.4 (3C), 123.4, 119.7, 119.6, 118.1, 118.0, 117.7, 116.9, 116.1, 115.3.

HRMS (ESI+) calcd for Ci ₉ H ₁₅ N ₂ 04 [M+H] ⁺ 335.1032, found 335.1023.

IR (cm ^"1 ): v 3216, 2916, 1605, 1276.

UPLC R _t = 1-75 min; area 100%.

3-(4-fluorophényl)-5-(3,4-diméthoxyphényl)-1H-pyrrolor 2,3-b1pyridine (If):

), 7.14-7.21 (m,4H), 7.56 (s, 1H), 7.61-7.65 (m, 2H), 8.31 (d, J= 1.9 Hz, 1 H), 8.59 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 11.0 (s, 1H).

¹³ C NMR (75 MHz, CDCI ₃ ) δ 56.0, 56.1, 110.9, 111.7, 115.7 (d, J = 21.4 Hz, 2C), 115.8,

118.7, 119.9, 123.0, 126.5, 128.6 (d, J = 7.7 Hz, 2C), 130.3, 130.8 (d, J = 3.3 Hz, 1C),

132.3, 141.9, 148.1, 148.7, 149.4, 160.0 (d, J = 245.4 Hz, 1C).

HRMS (ES+) m/z calcd for C ₂ iH ₁₈ FN ₂ 02 [M + H] ⁺ , 349.1352; found, 349.1357.

IR(cm- ¹ ) \ 3130, 3033, 2904, 1247.

UPLC R _t = 4.07 min; area 100%.

3-(4-fluorophényl)-5-(3,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrrolor2 ,3-b1pyridine (l'f):

¹ H NMR (300 MHz, DMSO) δ 6.83 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.98 (dd, J = 8.1 , 2.1 Hz, 1 H), 7.09 (d, J = 2.3 Hz, 1 H), 7.24-7.30 (m, 2H), 7.77-7.81 (m, 2H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 8.24 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.43 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 8.99 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 11.90 (s, 1 H).

1 ³ C NMR (75 MHz, DMSO) δ 113.4, 114.4, 115.5 (d, J = 21.4 Hz, 2C), 116.1, 117.1, 118.0, 124.3, 128.0 (d, J = 7.7 Hz, 2C), 129.2, 130.3, 131.5 (d, J = 3.3 Hz, 1C), 141.6, 144.8, 145.7, 148.1, 158.9 (d, J= 242.1 Hz, 1C).

HRMS (ES+) m/z calcd for Ci ₉ H ₁₄ FN ₂ 02 [M + H] ⁺ , 321.1039; found, 321.1045.

IR(cm ^"1 ) V3246, 3044, 2926, 1217.

UPLC R _t = 3.25 min; area 100%.

3-(3,4-difluorophényl)-5-(3,4-diméthoxyphényl)-1H-pyrr olor2,3-b1pyridine (Ig)

¹ H NMR(300 MHz, CDCI ₃ ) δ 3.96 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 7.00 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.17 (dd, J= 8.3, 1.7 Hz, 1H), 7.22-7.31 (m, 1H), 7.35-7.40 (m, 1H), 7.42- 7.50 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 8.32 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 8.59 (d, J= 1.9 Hz, 1 H), 11.19 (s, 1H). ¹³ C NMR (75 MHz, CDCI ₃ ) δ 56.0, 56.1, 110.9, 111.8, 114.9, 115.7 (d, J= 17.6 Hz, 1C), 117.7 (d, J = 17.0 Hz, 1C), 118.4, 119.9, 122.9-123.0 (m), 123.4, 126.4, 130.6, 131.8- 131.9 (m), 132.1, 142.2, 147.4 (dd, J = 247.6, 12.6 Hz, 1C), 148.1, 148.8, 148.9 (dd, J = 247.6, 12.6 Hz, 1C), 149.4.

HRMS (ES+) m/z calcd for C ₂ iH ₁₇ F ₂ N ₂ 0 ₂ [M + H] ⁺ , 367.1258; found, 367.1266.

IR(crrf ¹ ) \/3128, 3027, 2965, 1268.

UPLC R _t = 4.24 min; area 100%.

3-(3,4-difluorophényl)-5-(3,4-dihvdroxyphényl)-1H-pyrro lor2,3-b1pyridine(l'g)

, 7.16 (s, 1H), 7.45-7.55 (m, 1H), 7.64-7.68 (m, 1H), 7.83-7.90 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.48-8.54 (m, 2H), 12.38 (s, 1H).

¹³ C NMR (75 MHz, DMSO) δ 113.7, 115.1, 115.6 (d, J= 17.6 Hz, 1C), 116.6, 118.3 (d, J = 16.7 Hz, 1C), 118.8, 119.1 (d, J = 5.2 Hz, 1C), 123.6, 126.5-126.7 (m), 127.6-127.7 (m), 129.6, 130.1, 132.5, 139.3-139.7 (m), 145.7, 146.2, 146.7 (dd, J= 244.5, 12.6 Hz, 1C), 147.0, 148.6 (dd, J = 244.5, 12.6 Hz, 1C)

HRMS (ES+) m/z calcd for Ci ₉ H ₁₃ F ₂ N ₂ 0 ₂ [M + H] ⁺ , 339.0945; found, 339.0932.

IR (cm ^"1 ) v 3117, 2924, 1269.

UPLC R _t = 3.43 min; area 100%.

Les composés de formule (le) et (l'h) ont été préparés à partir de la 3-(3-fluoro-4- méthoxyphényl)-5-(4-benzyloxyphényl)-1 H-pyrrolo[2,3-b]pyridine. 3-(3-fluoro-4-méthoxyphényl)-5-(4-hvdroxyphényl)-1H-pyrro lor2,3-b1pyridine (le)

¹ H NMR (300 MHz, DMSO) δ 3.87 (s, 3H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.20 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 4H), 7.86 (s, 1H), 8.29 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 9.69 (s, 1H), 11.93 (s, 1H).

1 ³ C NMR (75 MHz, DMSO) δ 56.1 , 113.2 (d, J = 2.2 Hz, 1C), 113.7 (d, J= 18.7 Hz, 1C), 114.4 (d, J= 1.6 Hz, 1C), 115.9, 117.1, 122.4 (d, J = 2.7 Hz, 1C), 124.3, 124.5, 128.2, 128.3 (d, J= 7.1 Hz, 1C), 129.0, 129.6, 141.7, 145.1 (d, J= 11.0 Hz, 1C), 148.1, 150.3 (d, J = 243.2 Hz, 1C), 157.0.

HRMS (ES+) m/z calcd for C ₂ oH ₁₆ FN ₂ 0 ₂ [M + H] ⁺ , 335.1196; found, 335.1191.

IR(crrf ¹ ) v 3371, 3015, 2931, 1266.

UPLC R _t = 3.42 min; area 95%.

3-(3-fluoro-4-hvdroxyphényl)-5-(4-hvdroxyphényl)-1H-pyr rolor2,3-b1pyridine (l'h)

1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 6.93-6.96 (m, 2H), 7.03 (t, J = 8.8 Hz, 1H).7.34-7.38 (m, 1 H), 7.39 (dd, J = 12.1 , 2.1 Hz, 1 H), 7.56-7.59 (m, 2H), 7.79 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.74 (d, J= 1.3 Hz, 1H).

¹³ C NMR (75 MHz, MeOD) δ 115.9 (d, J= 19.2 Hz, 1C), 117.2, 119.4 (d, J = 3.3 Hz, 1C), 124.7 (d, J = 2.7 Hz, 1C), 126.2 (d, J = 6.0 Hz, 1C), 126.8, 129.0, 129.7, 133.3, 135.2, 142.1, 145.5 (d, J= 12.6 Hz, 1C), 151.6 (d, J = 241.0 Hz, 1C), 153.5, 153.8, 154.1, 159.2. HRMS (ES+) m/z calcd for Ci ₉ H ₁₄ FN ₂ 0 ₂ [M + H] ⁺ , 321.1039; found, 321.1045.

IR (cm ^"1 ) v 3173, 2922, 1259.

UPLC R _t = 2.68 min; area 95%. Exemple 2 : Validation de la méthode de mesure et évaluation in vitro de l'affinité des composés selon l'invention pour la protéine DyrkIA.

La validité du test de mesure a tout d'abord été prouvée avec la mesure de l'activité de l'enzyme DyrkIA.

Le test mis au point repose sur l'utilisation d'un peptide substrat de DyrkIA dont un des acides aminés a été marqué par la fluorescéine. La séquence de ce peptide (Fluorescéine-KKISGRLSPIMTEQ) est dérivée de la protéine Forkhead et possède un résidu de sérine pouvant être phosphorylé par DyrkIA. Dans notre test, le peptide phosphorylé par His-Dyrk1A-AC est séparé du peptide non phosphorylé sur une colonne C ₈ ou C18 ydrophobe couplée à un appareil UFLC {Ultra Fast Liquid Chromatography) avec un détecteur de fluorescence. La détection est spécifique et très sensible grâce à la présence dans le peptide du groupement fluorescéine et à l'utilisation d'un détecteur de fluorescence. Des analyses enzymologiques montrent que le test est linéaire en fonction du temps et de la quantité d'enzyme His-Dyrk1A-AC (Figure 1 ).

Nous avons également déterminé les IC ₅₀ pour des inhibiteurs connus de DyrkIA tels que l'Harmine et l'épigallocathechin-3-gallate (EGCG). Des valeurs similaires à celles de la littérature obtenues avec des tests d'activité kinase basés sur des composés radioactifs ont été obtenues.

L'IC ₅₀ des différents composés de l'exemple 1 sur la protéine DyrK1 A a ensuite été évaluée. Le dosage de l'activité DyrkIA se fait sur plaque 96 puits dans un volume final de 50 μί contenant 50 mM TrisHcl pH 7.4, 100 μΜ EGTA, 1 mM DTT, 5 mM d'acétate de Magnésium, de 50 à 1000 μΜ d'ATP, de 5 à 30 μΜ de peptide substrat, 10 ng d'enzyme ADyrkIA.

L'incubation se fait à 37°C et la réaction est stoppée à différents temps par l'ajout de 50 μί d'une solution d'acide perchlorique 15%. La plaque est ensuite centrifugée et 20 L du surnageant est injecté dans le système de chromatographie haute pression.

Les résultats de ces tests sont consignés dans le tableau 1 .

Tableau 1

1. L'IC ₅₀ est exprimée en nanomoles (nmol).

Les résultats montrent que les composés de formule (I) et de formule (Γ) ont une excellente affinité pour la protéine DyrkIA.

Exemple 3 : Evaluation de la cytotoxicité des composés selon l'invention

La cytotoxicité des composés selon la présente invention a été évaluée sur des cellules de la souche KB à différentes concentrations. Les mesures ont été réalisées selon la méthode décrite dans Pons et al (ACS Médicinal Chemistry Letters, 201 1 , 2, 565-570). Les résultats de ces tests sont consignés dans le tableau 2. Tableau 2

1. Exprimé en pourcentage d'inhibition de la croissance cellulaire de cellules KB.

2. « - » indique que la valeur n'a pas été déterminée.

Les composés de formule (I) et de formule (Γ) présentent une faible toxicité sur les cellules KB à des doses très supérieures aux IC ₅ o mesurés. La cytotoxicité des composés de formule (Γ) est significativement réduite. Exemple 4 : Tests in vivo de l'activité des composés selon l'invention

Pour tester in vivo l'efficacité de ces inhibiteurs, l'effet des composés selon l'invention sur l'état de phosphorylation de deux cibles en aval de DyrkIA dans les voies de signalisation a été mesuré : la protéine GSKIII beta (Figure 1 a) et la protéine CAMKII (Figure 1 b).

Ces mesures ont été réalisées dans le cerveau d'animaux contrôles (WT) et d'animaux modèles de trisomie pour le gène Dyrkl a (TG).

Pour cela les composés ont été administrés par injection intrapéritonéale à la dose de 1 mg/kg à tO puis t16 (heures) et les animaux ont été sacrifiés à t17-t18. Les protéines de cerveau ont ensuite été extraites et les quantités de protéines GSKIIIbeta, pGSKIIIbeta, CAMKII et pCAMKII ont été mesurées par une technique de slot-blot avec les anticorps appropriés.

Les résultats de ces tests sont consignés dans la Figure 1 : l'axe des ordonnées représente le ratio protéine phosphorylée / protéine non-phosphorylée mesuré sur les animaux non traités (WT et TG) et sur les animaux traités avec les composés selon l'invention.

Résultats :

Pour la protéine GSKIIIbeta hyperphosphorylée chez les animaux modèles TG, on observe une correction excessive avec les composés C (TG-C) et l'c (TG-I'c) et une correction efficace pour les composés Ib (TG-lb) et l'a (TG-I'a).

Pour la protéine CAMKII hypophosphorylée chez les animaux modèles TG, les composés C (TG-C) et l'c (TG-I'c) ne produisent pas une correction suffisante alors que les composés Ib (TG-lb) et l'a (TG-I'a) ramènent le niveau de phosphorylation à la valeur observée chez les individus contrôles.

Les composés de formule (I) et de formule (Γ) présentent donc une activité inhibitrice importante sur la protéine DyrkIA (IC50 < 100 nM), une cytoxicité très faible et ont une activité élevée in vivo sur des animaux modèles de trisomie 21.