COMPOSES INHIBITEURS DE L'ACETYLCHOLINESTERASE ET AGO ISTES DES RECEPTEURS SEROTONINERGIQUES 5HT4, A EFFET PROMNESIANT, LEURS PROCEDES DE PREPARATION ET COM OSITIONS PHARMAC UTIQUES LES CONTENANT La présente invention concerne de nouveaux dérivés de la 3-{pipéridîn-4-yl)-l-(4'- amino-phényl)propan-l~ûne ainsi que leur utilisation comme médicament à effet promnésiant dans te traitement des maladies neurologiques avec déficits mnésiques,

La présente invention a permis de constater de façon inattendue, que des composés mixtes inhibiteurs cataiytiques et périphériques d'acétylchoiinestérase et agonîstes du récepteur de la sérotonine de type 5-HT4 possèdent des activités promnésîantes, et en particulier, « anti-Alzheimer ».

De nombreuses pathologies et accidents peuvent provoquer un syndrome amnésique :

- les amnésies progressives associées aux démences telles qu'entre autres la maladie d'Alzheîmer {MA} et Ses démences vasculaires ;

- îes traumatismes crâniens (amnésie post-traumatique permanente ou temporaire) ;

- les accidents vasculaires cérébraux ;

- le syndrome de Korsakoff ;

- les tumeurs ou lésions cérébrales ;

- d'autres causes liées à des maladies récurrentes et à long terme telles que l'épilepsie.

La MA est devenue la 4 ^èrn" cause de décès dans les pays industrialisés et à l'heure actuelle aucun des médicaments sur le marché ne semble en mesure d'exercer un effet curatif. Il s'agit en effet pour la plupart d'entre eux d'inhibiteurs de l'acétylcholinestérase (AChE) dont l'efficacité demeure assez faible et la tolérance médiocre, lî semble nécessaire aujourd'hui d'associer à cet effet symptoma tique un effet curatif avec des composés à pluralité d'action {Muiti Target Directed Ligands ou MTDL).

Différents MTDL ciblant la MA sont actuellement à l'étude. Cependant aucun parmi ces travaux n'a pour l'instant associé au sein d'une même structure une activité anti-AChE et une activité agoniste 5-HT4, même si des inhibiteurs d'AChE et des agonistes 5-Hï4, ^! indépendamment les uns des autres ou en association" ont démontré des propriétés promnésîantes, Or cette dualité d'effet apparaît extrêmement prometteuse dans le cadre d'une chimiothérapie MTDL de la MA. En effet cette approche peut permettre d'exercer avec un seul principe actif un effet symptomatique, lié à la restauration de la transmission choii nergique par l'action inhibitrice catalytique de l'AChE, ¹ " ainsi qu'un double effet potentiellement curatif. Ce dernier serait à mettre au compte d'une part de la promotion du clivage non amyloïdogénique du précurseur de la protéine β-Α, et par conséq uent de la formation de la protéine sAPP neurotrophique, en relation avec un effet agoniste 5-HT4.' ^v Cet effet curatif serait, d'autre part, également imputable à l'inhibition d'un second rôle récemment identifié pour TACHE, celui de promouvoir l'agrégation amyioïde par interaction entre la protéine β-Α et un site périphérique de l'enzyme.

La présente invention concerne le développement de nouveaux médicaments capables d'exprimer, notamment à travers à la fois ('inhibition catalytique et périphérique de l'acétylcholinestérase et un agonisme vis-à-vis des récepteurs à la sérotonine 5-HT4, un véritable effet proninésiant et constitue donc une nouvelle opportunité de tra iter entre autres la maladie d'Alzheimer. Il a été découvert que des composés de form ule ( I) tels que définis ci-après répondent à un tel objectif.

A la connaissance des inventeurs, les composés de form ule {1} définis ci-après n'ont à ce jour jamais été décrits et font partie de l'invention à titre de produits nouveaux. Lesdits composés de formule (I) possèdent un mécanisme d'action original mïxarrt à la fois l'inhibition catalytique et périphérique de l'AChE et la stimulation des récepteurs 5-HT4. L'originalité de ce mécanisme d'action pour combattre entre autres la maladie d'Alzheimer fait pa rtie également de l'invention.

Ainsi, selon un premier de ses aspects, la présente invention concerne un composé de formule générale (!) :

dans laquelle :

X représente

un atome d' hydrogène ou

un atome d'haiogène (Hal), (Ha!) désignant le fluor, le chlore, le brome ou l'iode, ou un groupement polyhalogénoalkyl C _p Haî _2p+î , en chaîne droite ou ra mifiée, avec p = 1, 2, 3 ou 4 (Hal) ayant la même signification que ci-dessus indiqué ; Y représente

un atome d'oxygène, ou

un atome de soufre ; ou

un radical N-R" où R" représente un atome d'hydrogène, un radical -QI-I, un radica l alkyi C _q H _2qtl , en chaîne droite ou ramifiée, avec q = 1, 2, 3 ou 4, ou

un radical -OR'" où R'" représente un radical C _q H _2ci+1 , en chaîne droite ou ramifiée, avec q = 1, 2, 3 ou 4 ;

Z représente

un radical alkyi en C1-C6, en chaîne droite ou ramifiée, ou

un radical N-R" où R" représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyi C _q H _2q+1 , en chaîne droite ou ramifiée, avec q - 1, 2, 3 ou 4, ou

un atome d'oxygène, ou

un atome de soufre ;

()m représente un nombre m de groupe{s} méthylène, dont la valeur est 1, 2 ou 3

()n représente un nombre n de groupe(s) méthylène, dont la valeur est 0, 1, 2 ou 3

()r et ()s représentent respectivement un nombre r et s de groupe(s) méthylène, dont les valeurs sont : r = s = 0 ; ou r = s - 1 ; ou r = s ^■ = 2 ; ou r = 0 et s = 1 ; ou enfin r = 0 et s = 2 ; R représente

u atome d'hydrogène ou

un groupe alkyi en Cl-CS, en chaîne droite ou ramifiée pouvant porter un ou plusieurs atomes de F

représente

un radical alkyi en C1-C6, en chaîne d roite ou ramifiée, ou

un groupe cycloalkyl en C3-CI0 ou bicyclique en C5-C12 pouvant porter un ou plusieurs groupements R et pouvant posséder un atome d'oxygène, ou un atome d'azote pouvant être substitué pa r R, ou au atome de soufre ou un radical tel q ue -SO - ou -50- ou

un radical CH ₂ N HS0 ₂ R"", où R"" représente un groupe alkyj en C1-C5, en chaîne droite ou ramifiée, pouvant porter un ou plusieurs atomes de F,

ainsi que ses énantiomères et ses racëmiques, ses sels d'acide, ses hydrates ou ses produits de soivatation. Comme il ressort des exemples ci-après, des composés de formule (î) selon l'invention présentent des propriétés particulièrement intéressantes à l'égard des symptômes mriéstques, entre autres de la maladie d'Alzheimer.

Selon un mode de réalisation, dans la formule (I), X représente un atome d'halogène.

Selon un autre mode de réalisation, dans la formule (I), Y représente un atome d'oxygène.

Selon au autre mode de réalisation, dans sa formule (i), Z représente un groupe méthylène ou un groupe CH-CH ₃ .

Selon un autre mode de réalisation, dans sa formule (1), tous les coefficients m, n,r et s ont la valeur !>

Selon un autre mode de réalisation, dans la formule {!), R représente H, CH ₃ , CH ₂ CH ₃ ou CH CH ₂ F

Selon un autre mode de réalisation, dans Sa formule (1), R' représente un radical pris dans le groupe formé par Ses radicaux n-propyl, cyclopropyi, cy obutyl, cyclopentyl, cyclohexy.l, 4-pipéridine, -CH2NHSO ₂ CH3,

Selon un autre mode de réaiisation, dans la formule (i), R représente un radical méthyl et R' un radical cycfoalkyi en C ₄ -C ₇ .

L'invention comprend également plusieurs procédés pour préparer les composés de formule (1).

L'invention porte donc aussi sur un premier procédé de préparation des composés de formule (i) pour lesquels R=CH ₃ , Y=0 et Z,X,m,n,r,s et R' ont les significations précédemment indiquées pour là formule (I), caractérisé en ce que

a) on fait réagir du carbony!diimida?.ole, puis du mandate d'éthyle de potassium dans le tétrahydrofurane en présence de chlorure de magnésium avec un acide 4-amîno-2- méthoxybenzoïque pour obtenir un composé de formule générale (11}

formule dans laqueîle X a la même signification que celle indiquée pour la formule (I) ; b) on fait réagir le composé (I!) ainsi obtenu avec un 4~(ha!ogénoalkyl)pipéridine-l- carboxylate de tertiobutyle dans le diméthylformamide en présence de carbonate de potassium, puis avec de i'hydroxyde de potassium dans un mélange éthanol/eau pour obtenir un composé de formule générale (III)

formule dans laquelle Z représente un groupement méthylèn et X, m, r et s ont les mêmes significations que celles indiquées pour la formule (1) ;

c) on fait réagir le composé de formule (III) obtenu à l'étape précédente avec de l'acide trifluoracétique dans le dichlorométhane puis avec un halogénure d'alkyle ou de 4- alkyfpipéridine N-substituée en présence d'un excès de carbonate de potassium dans îe diméthylformamide, ce qui permet d'obtenir Ses composés de formule (I) désirés.

L'invention porte aussi sur un deuxième procédé caractérisé en ce que

a) on fait réagir un acide -amino-3-méthoxybenzo ^' fque avec un 4- (aminoalkyl)pipéridine-l-carboxylate de tetbutyie en présence d'hydroxybenzotriazole, d'éthyl-3-(3-dîméthylaminopropyi)carbodiimide et de triéthylamine dans le diméthylformamide, pour obtenir des composés de formule (III) où Z représente un groupement amino secondaire et où X, m, r et s ont les significations indiquées pour la formule (i) ;

b) on fait réagir le composé de formule (III) obtenu dans l'étape a) ci-dessus selon le protocole indiqué à l'étape c) du premier procédé susmentionné, pour obtenir les composés de formule (1) désirés.

L'invention porte aussi sur un troisième procédé de préparation des composés de formule (!), dans la formule desquels i¾=CH ₃ , Y==Z=0 et X,m,n,r,s et R' ont les significations indiquées pour la formule (I), caractérisé en ce que l'on fait réagir un acide 4-amîno-3- méthoxybenïoïque avec une l-alkyt-4(hydroxyaiky}pipérîdine en présence de carbonylediimidazoie et de carbonate de potassium dans ie tétrahydrofurane pour obtenir le composé de formule (i) désiré. L'invention porte aussi sur un quatrième procédé de préparation des composés dans îa formule (I) desquels R=H et X,Y,Z,m,n,r,s, et R' ont les significations indiquées pour la formule 0), caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule {1} dans îa formule duquel R représente un groupe méthyl avec du chlorure d'aluminium en présence d'iodure de sodium dans i'acétonitrile, pour obtenir le composé de formule fl) désiré.

L'invention porte aussi sur un cinquième procédé de préparation des composés de formule (i) dans la formule desquels R représente un radical alkyl en C1-C3, en chaîne droite ou ramifiée, pouvant porter un ou plusieurs atomes de fluor, X, Y, 1, m, n, , s, et R' ayant ies significations indiquées pour la formule (i), caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (i), dans lequel R = H et X, Y, 1, m, n, r, s, et R' ayant les significations précédemment indiquées pour la formule (i), avec un halogénure ou un tosylate d'alkyl en C1-C3, en chaîne droite ou ramifiée, pouvant porter un ou plusieurs atomes de fluor, en présence de carbonate de potassium, dans un solvant approprié.

L'invention porte aussi sur un sixième procédé de préparation des composés de formule (I) dans la formule desquels Y est un groupe oxime éventuellement O-substttué, 2 représente un groupe méthylène pouvant être substitué par un groupe alkyl en C1-C3, en chaîne droite ou ramifiée, X, m, n et R' étant tels qu'indiqués pour Îa formule ^caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé dans la formule (1) duquel Z, X, m, n et R' ont les significations indiquées ci-dessus et Y - 0, avec un sel d'bydroxyîamine G-substituée en présence de carbonate de calcium dans un mélange éthanol/eau, pour obtenir le composé de formule (!) désiré.

L'invention porte aussi sur un composé de formule (II) obtenu è la fin de l'étape a) du premier procédé de préparation ci-dessus mentionné et sur un composé de formule (III) obtenu à la fin de l'étape b) de ce même procédé de préparation.

L'invention porte enfin sur une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre de principe actif, au moins un composé de formule (I).

Selon un premier aspect de l'invention, la composition, qui vient d'être définie, comporte un excipient pharmaceutiquernent acceptable.

Selon un autre aspect de l'invention, le(s) composais) de formule (I), que contient la composition, est (sont) un (des) cell(s) pharmaceutiquernent acceptable(s).

Selon un autre aspect de l'invention, la composition contient au moins un principe actif ayant une action inhîbitrice d'acétylcholinestérase et choisi dans le groupe formé par : a) la î,2,3,4-TétraHyciroacridin-9-amine

c) la (S)-N-êihYi-N-méthyl-3-[(l-dîméthylamino)éthyl3-phényi carbamare et ά) la 4aS _/ 6R _i 8aS}-5,6,9,10,ll _J 12-lTexahydro-3-méthoxy-ll-méthyl-4aH-

[I.3beriZofuro[3a,3,2-ef] [2]benzazépin~6-ol

Selon un autre aspect de l'invention, la composition contient au moins un agûniste partiel des récepteurs 5-HT4 choisi dans le groupe formé par :

a) le l-(4-amfno-5-chloro-2-méthoxyphényl)-2-[l-butyl- -ptperidy propan-l one, b) le N-{2-(4-(3-(4-amino-5-chloro-3-méthoxyphéPyl}-3-oxypropyl} pipértdin-l- yl)éthyl)méthane sulfonamîde,

ledit agoniste étant dans une proportion comprise entre 10/90 et 90/10 par rapport au{x) principe(s) a tif(s) constitué(s) par au moins un composé de formule (S),

Selon un autre aspect de l'invention, la composition pharmaceutique est destinée à être administrée à des mammifères et a un effet promnésiant utilisable dans les maladies neurologiques avec déficit amnésique.

Selon un autre aspect de l'invention, la composition est utilisable dans le traitement de la maladie d'Alzheimer chez un sujet humain.

Selon un autre aspect de l'invention, la composition est utilisée à des doses journalières d'actif(s) de formule (I) comprises entre 1 et 20 mg/kg de poids corporel du mammifère à traiter, de préférence de 2mg/kg.

Selon un autre aspect de l'invention, fa composition est. administrée à des doses de 10 à .1.000 mg par jour, les composés de formule (I) étant administrés de préférence à raison de 0,2 à 2mg une à cinq fois par jour.

Selon un autre aspect de l'invention, la composition est administrée par voie orale, notamment sous forme de comprimés, gélules, microcapsules, poudres, granulés, sirops, solutions ou suspensions prises en buccal ou sublingual ou par voie sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse.

Selon un autre aspect de l'invention, le principe actif est conditionné sous forme de mélange avec des agents de dispersion, des agents mouillants, des agents de mise en suspension, des édulcorants ou des correcteurs de goût. Selon un autre aspect de l'invention, la composition est administrée par voie parentérale, sous forme de suspension aqueuse, de solution saline, de solution stérile ou de solution injectable.

Pour mieux faire comprendre l'objet de l'invention et illustrer celle-ci de façon non limitative, on va décrire ci-après un certain nombre d'exemples. Pour faciliter le repérage des différents composés illustrés clans les exemples, on a fourni, ci-après, un tableau 1 correspondant aux composés de formule (i), un tableau 2 correspondant aux composés de formule (II) et un tableau 3 correspondant aux composés de formule (lii) et en donnant, dans chacun de ces tableaux, les significations des différents substituants pour chacun des exemples fournis dans le texte ci-après. Les numéros apparaissant dans ces exemples, correspondent aux composés portant respectivement les mêmes numéros dans les tableaux ci-dessus. Les chiffres apparaissant dans le texte en exposant, correspondent à des références utilisées pour la réalisation des exemples. La figure 1 fournit les résultats obtenus sur tes souris pour l'amélioration des performances de mémoire.

Tableau 1 : composés de formule (I)

Composé X Y 2 m n r s R R'

ί I H 0 CH ₂ 1 I 1 1 Me n-propyl

2 I Br 0 CH ₂ 1 1 1 1 Me n-propyl

3 I 0 _ i CH ₂ 1 1 1 i Me n-propyl

4 I H CH ₂ 1 1 1 i Me cydohexyl

5 ¹ F 0 CH ₂ 1 1 1 1 Me cyciohexyl

S Cl 0 CH _Z i ί i 1 Me cyclopropyi

7 CI 0 CH2 1 1 1 1 Me cyciobutyi

8 CI 0 CH ₂ 1 1 1 1 Me cydopentyi

9 Cl 0 CH ₃ 1. 1 1 1 Mie cyciohexyl

10 Ci 0 CHCHâ i 1 1 1 Me cyciohexyl

11 Ci 0 CH ₂ ^" 1 ^" l i 1 Me 2-methylcyclohexyl

12 C! 0 CH ₂ 1 1 ί 1 Me cycloheptyl

13 Cl 0 CHz 1 1 ___ 1__ 1 Me 4-pipéridine

14 Br 0 F ΊΓ 1 ^' Me cyciohexyl

15 I 0 CH ₂ 1 1 1 i Me 1 cyciohexyl 16 Cl 0 CH ₂ 1 2 1 1 Me i cyciohexyl ï? Cl 0 H 1 1 1 1 Me 1 cyclohexyi

18 Br Q NH 1 1 i 1 Me 1 cyciohexyl

19 I 0 H I 1 i 1 Me j cyciohexyl

20 Ci 0 0 .1. .1. 1 1 Me cyciohexyl

21 a 0 CH ₂ 1 i 1 i H cyciohexyl

22 a 0 CH ₂ 1 i 1 1 Et cyciohexyl

23 Cl 0 CH? 1 1 1 1 F(CH ₂ } _2. cyciohexyl

24 Cl N- CH ₂ 1 1 1 1 Me S cyciohexyl

Tableau 2 : composés de formule (II)

Tableau 3 : com osés de formule (111}

Références pour ia réalisation des exemples :

' ^' Fitistache, F., Desgranges, B. Concepts et modèles en neuropsychoiagte de la mémoire. (2003). in Meulemans, T., Desgranges, B., Adam, 5., Eustache, F, (eds.). Evaluation et prise en charge des troubles rnnésiques. Marseille ; Solal.

¹ Mingaud F orrnede C, Etchamendy N„ Mons ., Niedergang B., Wietrzych M., Paliet V.,

Jaffard R., Krezel VV,, Higueret P., Marighetto A., 2008 J. Neurosci. 28, 279-291.

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39.

1 Moser, P.C., Bergis, O.E., Jegham, S., Lochead, A., Duconseiite, £., Terranova, J.P. J

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1 Yang, W. ; Ruan, Z. ; Wang, Y. ; Van Kirk, K,; Ma, Z.; Arey, B. J.; Cooper, C. B.; Seethaia, R.; Feyen, J. H. M.; Dickson Jr, J. K. J. Med. Chem. 2009, 52 (4), 1204 -12QS

1 Kaspi, j. ; Lerman, O. ; Arad, O. ; Ainabari, M.; San/, Y- Eur. Pat. Appl. 2004, 1386607

Exemple 1

l-(4-amino-2-mètboxyphényl)-3-[l-butyl-4-pipéridyi]pro pan-l-one

A 184 mg de 4-[3-(4-amtno-2-méthoxy)-3~oxopr ^' opyl]pipérîdine-l-carboxytate de iert-butyie (0,51 mrnol) en solution dans 1 ml de DCM est ajouté 1 mi de TFA. Le milieu réactionnel est agité à TA pendant 15 minutes puis concentré à l'évaporateur rotatif sous pression réduite. Le résidu est repris dans NaHC0 ₃ saturée puis extrait 3 fois à l'AcOEt. Les phases organiques sont regroupées puis lavées à la saumure. La phase organique est ensuite séchée et concentré pour obtenir 42 mg de produit déprotégé. Celui-ci est directement engagé dans la réaction d'alkyiation en le solubilisant dans 3 ml de DM F auquel on ajoute 28 mg de K ₂ C0 ₃ (0,21 mmol) et 20 pL d'iodobutane (0,18 mmol). Le nouveau milieu réactionnel est placé à 110°C pendant 2h. Après dilution dans i'AcOEt, le mélange est lavé 4 fois à fa saumure, séché sur MgS0 ₄ puis concentré. Le résidu obtenu est purifié sur coionne de geî de silice {DCM/AcOEt 10/0 à 0/10 puis M ^' eOH 5%). Le produit obtenu est obtenu avec un rendement de 22%. PF = 80°C RM N H (CDCI ₃ ) : 0,89 (t, J « 7,3Hz, 3H, CH _;( }, 1,27 (m, 5H, 3 CH, CH _{a BU1} ), 1,45 (m, 2H, CH ₂ BUT), _. 1,56 (m, 2H), 1,68 (m, 2H), 1,85 {m, 2H, 2 CHN), 2,27 (m, 2H, CH ₂ IM), 2,90 (m, H, GH¾ 2 CHN), 3,83 {s, 3H, CH ₃ ), 4,03 {5, 2H, N H ₂ ), 6,13 (d, J - 2,0Hz, 1H, H _Ar ), 6,24 (dd, J = 8,7Hz, J == 2,0Hz, 1H, H _Ar ), 7,69 {d, J = 8,7Hz, 1H, H _Ar j,

IR (KBr, cm ^'1 } : 3438,2, 3255,4, 3228,4, 2952,1, 2926,8, 2932,8, 2856,9, 1726,5, 1640,7, 1594,1, 1468,1, 1434,3, 1272,4, 1259,8, 1212,6, 1177,1, 1030,2.

Exemple 2

l-(4-amino-5-bromo-2-méthoxyphényl)-3-[l-butyi-4-pipén dvl]propa ii-l-or>e

Le composé 3 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considé rant les quantités suivantes :

4-[3-{4-amino-5-bromo-2-méthoxy)-3-oxopropyi] pipéridine-l-ca rboxylate de tertbutyie: 90 mg (0,19 mmol)

Acide trifluoroacétîque : 1 ml

DCM : 1 mi

iodobuta ne : 26 μΐ (0,23 mmoî)

2CO;5 ; 34 mg (0,25 mmol)

DMF : 4 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 50% et se présente sous la forme d'une poudre jaune pâle.

Il possède les ca ractéristiques suiva ntes :

Ci _S H _i3 8rN ₂ 0 ₂

PF = 205 ^e C

RM N (CDCI3) : 0,91 {t, J = 7,3Hz, 3H, CH ₃ ), 1,29 (m, 5H, 3 CH, CH _{2 8UT} ), 1,48 (m, 2 H, CH ₂ OU _Ï ).- 1,58 [m, 2H), 1,70 {m, 2H), 1,89 {m, 2H, 2 CHN}, 2,31 (m, 2H, CH ₂ N), 2,91 (m, 4H, CH _? „ 2 CHN), 3,84 (s, 3H, CH :}, 4,55 (s, 2H, NH ₂ ], 6,27 (s, 1 H, H _Af ), 7,93 (s, 1H, H _Ar j .

IR ( KBr, cm ^Λ ) : 3436,2, 3255,8, 3156,4, 2961,4, 2932,8, 2873,5, 2633,0, 2516,0, 1725,7, 1655,3, 1619,3, 1584,6, 1461,4, 1417,0, 1300, 1, 1253,4, 1216,2, 1179,2, 1044,2. Exemple 3

l-{4~amino-5-iodo-2-méthoxyphényl}-3-[l-buÎy!-4-pipér idyl] propan-l-one

le com posé 4 est préparé suivant ie mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant Ses quantités suivantes :

4-[3-(4-amino-5-iodo-2-méthoxy)-3-oxopropyS]pipéricline-l- carboxylate de tertbutyie: 124 mg (0,25 mmoi)

Acide trifluoroacétîque : 1 mi

DCM : 1 ml

iodobutane : 28 uL (0,25 mmol)

2CO _Î : 37 mg (0,27 mmol} DM F : 4 ml

Le composé attend u est obtenu avec un rendement de 45% et se présente sous la forme d'une poudre jaune pâle.

Il possède les caractéristiques suivantes :

e _i9 H ₂₉ I N ₂ 0 ₂

PF ^ 130"C

RMN ^X (CDCfs) : 0,91 (t, J = 7,8Hz, 3H, CH ₃ ), 1,27 (m, 5H, 3 CH, CH ₂ BUT), 1, 7 (m, 2H, CH _{2 BUT} }, 1,59 (m, 2H), 1,70 {m, 2H), 1,87 (m, 2H, 2 CHH), 2,29 (m, 2H, CH ₃ N}, 2,91 (m, 4H, CH ₂ , 2 CH N), 3,84 (s, 3H, CH ₃ ), 4,49 (s, 2H, IM H ₂ ), 6,25 (s, 1H, H _Ar ), 8,11 (s, 1H, H _Ar ).

iR (KBr, cm ^"1 ) : 3453,8, 3342,7, 3209,3, 2952,1, 2927,6, 2860,0, 1621,7, 1577,9, 1468,1, 1450,2, 1412,1, 262,9, 1216,4, 1177,1, 1040,6.

Exemple 4

l-{4-amîno^2-méthoxyphéiiyl}-3-[l-{cyclohexylméÎhyi) -4-pipéridyi]propan-l-one

Le composé 1 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considéra nt ies quantités suiva ntes :

4-[3-(4-amino-2-méthoxy)-3-oxopropyl]pipéridine-l-carboxyi ate de iert-butyle: 310 mg {0,86 mmoi)

Acide trifîuoroacétique : 2 ml

DCM : 2 ml

(iodométhyi)cycÎo exane : 87 μϊ (0,63 mmol)

2C0 ₃ : 102 mg (0,74 mmoi)

DM F : 5 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 39% et se présente sous la forme d'une poud re jaune.

li possède les caractéristiques suivantes :

PF = 90°C

C _Ï2 H _M N ₂ 0 ₂

R ¹ H (CDCU : 0,87 (m, 2H, 2 CH), 1,18 (m, 6H, 6 CH), 1,47 (m, 1H, CH}, 1,64 (m, 7H, 5 CH, CH ₂ ), 1,75 (m, 2H, 2 CH}, 1,81 (m, 2H, 2 CHN), 2,08 (d, J = 7,1Hz, 2H, CH ₂ N), 2,85 (m, 2 H, 2 CHN), 2,90 (m, 2H, CH ₂ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 4,09 (s, 2 H, NH ₂ ), 6,16 (d, j = 2,0Hz, 1H, H _Ar ), 6,25 (dd, J = 8,5Hz, J = 2,0Hz, 1H, H _Af ), 7,70 (d, J = 8,5Hz, 1H, H _A ,J.

IR (KBr, cm ^"1 } ; 3447,7, 3366,5, 3245,1, 2922,8, 2847,0, 2809,3, 2770,5, 1590,7, 1601,8,

1508.7, 468,1, 1448,3, 1429,4, 1347,3, 1310;9, 1272,3, 1257,2, 1218,0, 1206,9, 1134,0,

1122.8, 1031,4, 823,1.

Exemple 5

l-(4-amino-5-fluoro-2-méthoxyphényl)-3-[l-{cy ^

A 72 mg de 4-[3-{4-ammo-5-fîuoro-2-méthoxy}-3-oxopropyl]pipéridine-l -carboxylate de rert-buty!e (0,19 mmoi) en solution da ns i ml de DCM est ajouté 1 ml de TFA. Le milieu réactionnet est agité à TA pendant 15 minutes puis concentré à i'évaporàteur rotatif sous pression réduite . Le résidu est dissous dans 3 ml de DMF auquel on ajoute 262 mg de _¾ C0 ₃ (1,89 mmoi) et 35 μΐ de iodométhyicydohexane (0,25 mmoi). Le nouveau milieu réactionnel est placé à lïO°C pendant 3h. Après dilution dans l'AcOEt, le mélange est lavé 4 fois à la sa umure, séché sur MgS0 ₄ puis concentré. Le résidu obtenu est purifié sur colonne de gel de silice (gradient d'é ^' iution : DCM/AcOEt 10/0 à 0/10 puis DCM + 2% Et ₃ N). Le produit attendu est obtenu avec un rendement de 56%,

Aspect : solide jaune

PF = 97 "C

C ₂₂ H _Ï3 FN ₂ 0 ₂

R H (CDCi _;i } : 0,86 (m, 2H, 2 CH), 1,20 (m, 6H, 6 CH), 1,48 (m, 1H, CH), 1,64 {m, 7H, 5 CH, CH ₂ ), 1,74 (rn, 2H, 2 CH), 1,82 (m, 2H, 2 CHN), 2,08 (d, J = 7, 1Hz, 2 H, CH,N), 2,85 ( m, 2H, 2 CHN), 2,91 (m, 2H, CH ₂ ), 3,84 {s, 3H, CHj), 4, 14 (s, 2H, NH ₂ ), 6,27 (d, J _H . _F = 7,1 Hz, 1H, H _Ar }, 7,55 (d, Jn. _F = 12,2Hz, IH, H , _¾ ,·}.

! R ( Br, cm ^"1 } : 3352,5, 3220,5, 2921,4, 2849,5, 2801,2, 2768,3, 1626,5, 1601,8, 1520,8, 1467,2, 1449,7, 1428,3, 1357,0, 1310;9, 1250,5, 1207,2, 1171,0, 1148,3, 1028,9, 823,8.

Exempte 6

l-{4-amino-5-chioro-2-méthoxyphényl)-3-[l-{c^^

Le composé 6 est préparé suiva nt le mode opératoire de l'exemple 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4"[3~(4-amino-5-chloro-2-méthoxy)-3-oxopiOpyî]ptpéridfne- l-carboxy1ate de ieri-butyie : ^* ' 159 mg {0,40 mmoi)

Acide trifluoroacétique : 2 mi

DCM : 2 ml

(iodométhyl)cyclopropane : 43 mg (0,48 mmoi)

K ₂ C0 ₃ : 553 mg (4,00 mmoi)

DM F : 4 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 39% et se présente sous la forme d'une poud re jaune.

PF = 162 °C

RMN l (CD3OD) : 0,18 (m, 2 H), 0,58 (m, 2H), 0,94 (m, IH), 1,34 (m, 3H), 1,61 (m, 2 H), 1,79 (m, 2H ), 2, 10 (m, 2Ή), 2,33 ( m, 2H), 2,95 (m, 2H), 3,15 (m, 2H), 3,89 (s, 3H, CH ₃ ), 6,31 (s, 1 H, HA,-}, 7,51 (s, 1H, H _Ar ).

I (KBr, cm ^*1 ) : 3466,5, 3349,8, 2923,7, 2849,4, 2804,8, 2779,7, 1644,0, 1621,5, 1586,4, 1500,8, 1465,2, 1419,9, 1376,9, 1313;2, 1252,0, 1215,3, 1177,9, 1118,6, 825,7.

Exem le 7

l-(4-amino-5-chloro-2-méîho^yp ^^ Le composé 7 est préparé suivant le mode opératoire de i'exempie 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4- [3-{4--amino-S-ch!oro-2-rnéthoxy)-3-oxopropyi]pi.péndine-l ~carboxyiate de terf-butyle : 159 mg (0,40 mmo!)

Acide tnfluoroacétique : 2 m l

DCM : 2 ml

(iodométhyl)cyciobuta ne : 34 μί (0,30 mmoi)

:CO ; : 45 mg {4,00 mmoi)

DMF : 4 ml

Le com posé attendu est obtenu avec u n rendement de 45% et se présente sous la forme d'une poudre jaune.

PF = 143 °C

C ₂₀ H _2!} C]N ₂ O ₂

RM IM H {CDCI ₃ ) : 1,25 (m, 3 H, 3 CH ), 1,57 (m, 2H, CH ₂ ), 1,78 (m, 8H, 4 CH _BU T, 2 CH, 2 CH N), 2,06 (m, 2 H, 2 CH _BUT I 2,37 (d, J = 6,6Hz, 2 H, CH ₂ M), 2,54 (m, IH, CH _3l)T }, 2,83 (m, 2H, 2 CHN), 2,90 (m, 2H, CH ₂ ), 3,85 (s, 3H, CH ₃ ), 4,42 (s, 2 H, H _? ), 6,25 (s, IH, H _Ar ), 7,78 (s, IH, H _AR ).

IR {KBr, cm ^'1 ) : 3484,7, 3226,9, 2923,5, 2852,3, 2804,8, 2763, 1, 1642,3, 1623,5, 1574,6, 1453,8, 1420,7, 1397,2, 1306,3, 1257,4, 1214,1, 1175,4, 1011,2, 830,4. Exemple 8

l-(4-amino-5-chloro-2-mét oxyphényl)-3-[l-(cyclopentylmëthyl)-4-pipéridyl]propan-'l -orie Le composé 8 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-amino-5-chloro-2-méthoxy)-3-oxDpropyl]p!péndine-l- carboxy!ate de terf-butyîe : 134 mg (0,34 mmoi)

Acide tnfluoroacétique ; 2 m!

DCfvl : 2 ml

(iodométhyl)cyclopentane : 57 mg (0,27 mmoi)

JCO _Ï : 41 mg (0,29 mmoi)

DM F : 3 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 35% et se présente sous Sa forme d'une poudre ja une.

PF - 142 "C : 1,21 (m, 5H, 2 C» _nm , 3 CH), 1,50 (m, 2H, 2 CH _PB1T ), 1,60 (m, 6H, 2 CH _m „, CH ₂ , 2 CH), 1,76 (m, 2H, 2 CH _PEM T), 1,86 (m, 2H, 2 CHN), 2,05 (m, IH, Q ), 2,24 (d, j = 7,1Hz, 2H, CH ₂ N ), 2,90 (m, 4H, CH ₂ , 2 CHN), 3,85 (s, 3H, CH ₃ ), 4,44 (s, 2H, NH ₂ ), 6,26 (s, IH, H _Af ), 7,79 (s, IH, H _Ar ).

ÎR (KBr, cm ^{' 1} ) : 3485,6, 3332, 1, 2936,2, 2923,8, 2860,0, 2799,7, 2768,0, .1643,8, 1622,7.. 1599,5, 1574,2, 1453,4, 1421,6, 1310,5, 1266,0, 1214,2, 1175,8, 1018,4, 831,0. Exemple S

l-{4-amino-5^hloro-2-méthoxYphényl)^

Le composé 9 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-amir)0~2-méthoxy)-3-oxopropy!]pipéridÎne-l-carbox ylate de terr-butyie: 953 mg (2,41 mmol)

acide trifluoroacétique : 2 mi

DOvï : 2 ml

(bromométhyl)cyclohexane : 262 μΐ (1,88 mmoi)

KJCOJ : 281 mg (2,03 mmol)

DM F : 4 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 44% présente sous îa forme d'un solide jaune pâle.

l possède les caractéristiques suivantes :

PF = 154T

RMN ^J H (CDCy : 0,85 (m, 2H, 2 CH), 1,20 (m, 6H, 6 CH), 1,47 (m, 1H, CH), 1,68 (m, lîH, 7 CH, 2 CHN, CH ₂ ), 2,08 (d, J ~ 6,8Hz, 2H, CH ₂ N), 2,84 (m, 2H, 2 CHN), 2,89 (m, 2H, CH ₂ ), 3,85 (S, 3H, CH ₃ ), 4,44 (s, 2H, NH ₂ ), 6,26 (s, 1H, H }, 7,79 {s, 1H, H _Ar ),

Î (KBr, cm ^"1 ) : 3484,8, 3229,8, 2920,7, 2850,0, 2803,0, 2768,0, 1640,7, 1623,0, 1575,0, 1452,8, 1420,9, 1313,8, 1255,6, 1214,3, 1177,2, 1012,7, 831,0. Exemple 10

l-(4-amino-5-chloro-2~méthoxyphényl)-3--[l-{cyclohexy.i méthyl)"4-pipéridyl3-2- méthylpropan- -one

Le composé 10 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-amino-5 hioro-2-méthoxy)-2-méthyl-3-oxopropylîpipéridtne-l-carbo xylate de tert- butyie ; 50 mg (0,12 mmol}

Acide trifluoroacétique : 500 μΐ.

DC : 2 ml

(bromométhyl)cyclohexarse : 20 μΐ (0,15 mmol)

2C0 ₃ : 168 mg (1,22 mmol)

D F : 1 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 42% et se présente sous ia forme d'une huile jaune.

C ₂₃ H _3S C1N ₂ 0 ₂

RMN ^l H (COCU) : 0,86 (m, 2H, 2 CH), 1,05 (d, J = 6,8Hz, 3H, CH ₃ ), 1,19 (m, 6H, 6 CH), 1,49 (m, 1H, CH), 1,60 (m, 7H, 5 CH, CH ₂ ), 1,73 (m, 2H, 2 CH), 1,86 (m, 2H, 2 CH ), 2,15 (d, J = 6,6Hz, 2H, CH ₂ N), 2,85 {m, 2H, 2 CHN), 3,57 (qti, J = 6,8Hz, 1H, CH), 3,81 (s, 3H, CH ₅ ), 4,42 (s.. 2H, H _a ), 6,24 (s, 1H, H _Af ), 7,67 (s, 1H, H _Ar ).

I R ( Br, cm ^'1 } : 3477,5, 3351,5, 2922,4, 2851,8, 2801,6, 2766,2, 1650,4, 1621,4, 1590,8, 1464,5, 1450,3, 1417,3, 1305,1, 1255,8, 1214,8, 1178,2, 1007,6.

Exemple lî

l-(4-ammo-5 hiQro-2-méthoxyph½

propan-l-one

Le composé 11 est préparé suivant le mode opératoire de l'exem ple 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-a minO _' 5-chloro-2-méthoxy)-3-O Opropyl]pipér ^' tdine-l-carboxylate de fert-butyîe :

175 mg {0,44 mmol)

Acide trifluoroacétique : 1,5 ml

DCM : 3 mi

(iodométhyl}-2-méthylcyclohexane ; 127 mg (0,53 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 610 mg (4,42 mmol)

D F : 4 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 45% et se présente sous la forme d'un solide jaune,

PF = 111 °C

C ₃₃ H _3S CIN ₂ 0 ₂

RM N Ή {CDCy : 0,83 (d, J = 7,1Hz, 3H, CH ₃ ), 1,28 (m, 7H, 7 CH), 1,60 {m, 8H, 6 CH, CH ₂ }, 1,66 (m, 2H, 2 CH), 1,86 (m, 2H, 2 CHN), 2,13 (d, j = 6,8Hz, 2:H, CH ₂ N), 2,89 (m, 4H, CH ₂ , 2 CHN), 3,84 (s, 3H, CH ₃ ), 4,49 (s, 2H, H ₂ ), 6,27 (s, 1H, H _Ar ), 7,78 (s, 1H, H _Ar ).

IR ( Br, cm ^'1 ): 3482,4, 3336,7, 3209,3, 2921,4, 2850,5, 2803,8, 2771,2, 1640,7, 1618,5, 1585,3, 1466,1, 1453,4, 1421,6, 1310,5, 1253,4, 1215,0, 1180,3, 1018,4.

Exemple 12

l-{4-am ino-5-chloro-2-méthoxyphényl}-3- l-(cycJohepty]méthyl)-4-pi

Le composé 12 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-{4-amino-5-chloro-2-rriéthoxy)-3-oxopropyi]pipéridÎr îe"l-carboxylate de iert-butyle : 152 rng (0,38 mmol)

Acide trifluoroacétique : 1 mi

DCM ; 2 mi

fiodométhyljcycloheptane : 110 mg (0,46 mmol)

K _? C0 ₃ : 535 mg ( 3,84 mmol)

DMF : 4 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 42% et se présente sous la forme d' un solide jaune.

PF = 148 T z3H _3S Cl ₂ 0 ₂

RM N ³ Ή (CDC!;,) : 1,12 (m, 2H, 2 CH), 1,50 (m, 18H, CH ₂ , 16 CH), 1,95 {m, 2H, 2 CHN), 2,15 (m, 2H, CH ₂ N), 2,89 (m, 4H, CH _¾ 2 CHN), 3,85 (s, 3H, CH ₃ ), 4,49 (s, 2H, NH ₂ ), 6,27 (s, 1.H, H _Ar ), 7,78 (s, !(·!, H,J.

IR (KBr, cm ⁴ ) : 3481,0, 3247,7, 2919,6, 2850,2, 2800,3, 2768,1, 1637,6, 1621,7, 1582,3,

1453,6, 1419,5, 1307,1, 1252,8, 1214,4, 1176,1, 1012,6.

Exemple 13

Dichlorohydrate de l-(4-amfno-5-chtoro-2-méÎhoxvphényl)-3-[l-[{pipéridin-4- yf)méthvj]-4- pipé ridyi] propa n-i-one

L'intermédiaire, menant au composé 13, est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-amino-5-chloro-2-méthoxy)-3-oxopropyl]pipéridine-l -carboxylate de ferf-butyle :

212 mg (0,53 mmo )

Acide trifiuoroacétiq ue : 1 mi

OC ; 2 mi

4-(iodométhyl)pipértdine-l-carboxylate de tert-butyle: 124 mg (0,38 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 62 mg (0,45 mmol)

DMF : 4 ml

Cet intermédiaire est obtenu avec un rendement de 24% et se présente sous la forme d'une huile.

40 mg de cet intermédiair (0,09 mmol) sont ensuite dissous dans 5 ml d'EtOH auxquels sont ajoutés 300 ml d'HCi concentré. Après 3 heures d'agitation à température ambiante, la solution est concentrée à l'évaporateur rotatif. Du toluène est ajouté pour faire un mélange azéotropique avec les traces d'eau restantes.. Le résidu sec obtenu est ensuite repris dans l'éther éthyiique puis filtré, 30 mg de produit attendu sont alors obtenus avec un rendement de 80%.

PF >260 °C

C _i H _M CI ₃ N ₃ 0 ₂

R ^X H (D SO-d6) : 1,38 (m, 2 H,. 2 CH), 1,46 (m, 3H, CH., CHj), 1,63 (m, 2H, 2 CH), 1,76 ( m, 2H, 2 CHJ, 1,96 (m, 2H, 2 CH), 2, 11 {m, 1H, CH), 2,81 (m, 6H, 4 CHN, CH _; ), 2,91 (m, 2 H, CH ₂ N), 3,22 (m, 2H, 2 CH N), 3,45 (m, 2Ή, 2 CHN), 3,79 (s, 3H, CH ₃ ), 6,46 (s, 1H, H _Ar ), 7,53 {s, 1H, H _Ar ), 9,03 (m, 2H, 2 N H), 10,2 (m, ÎH, NH).

I {KBr, crrf ¹ ): 3390,0, 3295,6, 3194,0, 2938,4, 2731,7, 1660,0, 1625,1, 1592,8, 1464,5, 1449,1, 1417,2,. 1316,4, 1262,8, 1249,0, 1212,0, 180,4,

Exempie 14

l-(4-amino-5-bromo-2-métrioxyphényl)-3-El-(cyc!ohexytméth yi)-4-pipér!dyl]propan-l-or)e

Le composé 14 est prépa ré suivant le mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes : 4-[3-(4-amino-5-bromo-2-méthoxY}-3-oxopropyl]pipéridine-l- carboxylate de tert-butyle :

65 mg (0,19 mmo!}

Acide trifluoroacétique : 1 ml

DC ; 1 ml

(biomométhyl)cyclohexane : 32 μΐ (0,23 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 34 mg {0,25 mmo!)

DMF : 4 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 60% et se présente sous la forme d'une poudre jaune pâle.

PF = 148 "C

C ₂₂ H _î3 BrN ₂ 0 ₂

RMN ΐ-ί (CDCI ₃ ) : 0,87 (m, 2 H, 2 CH), 1,20 {m, 6H, 6 CH), 1,48 (m, 1H, CH), 1,60 (m, 7Ή, 5 CH, CH _a ), 1,74 {m, 2H, 2 CH), 1,81 (m, 2H, 2 CHN), 2,09 (d, J = 6,8Hz, 2H, CH ₂ N), 2,87 (m, 4H, 2 CHN, CH _? j, 3,84 (s, 3H, CH ₃ ), 4,51 (s, 2H, NH ₂ ), 6,26 (s, 1H, H _At ), 7,93 (s, 1H, H _Ar ).

iR (KBr, cm ^'1 ): 3471,6, 3224,0, 2920,9, 2851,8, 2801,6, 2766,2, 1634,4, 1621,5, 1580,7,

1449.7, 1417,3, 13Q2;3, 1260,8, 1216,5, 1178/2, 1042,4,

Exemple 15

l-{4-amino-5-iQdo-2-rnéthoxyphény!)-3-[M^

Le composé 12 est préparé suivant îe mode opératoire de l'exemple 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[3-(4-ammo-5-iodo-2-méthoxy)-3-oxopropyl]pipéridine-l-C3 rboxylate de terî-tautyie : 110 mg (0,23 mmol}

Acide trifluoroacétique : 2 ml

DC : 2 m!

(bromornéthyl}cyelohexane : 36 μΐ (0,26 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 33 mg {0,24 mmol)

DM F : 2 m l

Le composé attendu est obtenu avec un rendemen de 42% et se présente sous la forme d'une poudre jaune,

il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 178 - 180 °C

C ₂₂ H ₃₃ IN ₂ 0 ₂

RMN *H (CDCI3) : 0,85 (m, 2 H, 2 CH), 1,20 {m, 6H, 6 CH), 1,47 (m, 1H, CH), 1,69 (m, 11H, 7 CH, 2 CHN, 1 CH ₃ ), 2,07 (d, J ~ 7,1 Hz, 2H, CH ₂ N), 2,84 {m, 2H, 2 CHN), 2,88 (m, 2H, CH ₂ ), 3,84 (s, 3H, CH ₃ }, 4,49 (s, 2H, NH ₂ ), 6,25 {s, 1H, H _Ar ), 8,11 (s, 1H, H _ftr ),

iR (KBr, cm ^'1 ): 3323,7, 3212,5, 2919,4, 2847,4, 2799,7, 2768,1, 1634,4, 1624,9, 1574,7,

1448.8, 1412,1, 1262,9, 1215,3, 1177,1, 1040,6, 834,2. Exemple 16

l-(4-ami:no-5-ch!oro-2-méthoxyphényl)-3-[l-{cyclohexyléth yt)-4-pipéridyl3propan-l-one Le composé 16 est préparé suivant ie mode opératoire de l'exemple Sdécrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4 3-{4-amino-5-chloro-2-méîl 3xy)-3-oxopropyl pipéridsne-l arboxyiate de ierf-butyle :

145 mg {0,37 mmol)

Acide îrifluoroacétique : 2 m!

DCM : 2 mi

(iodoethyl)cyciohexane : 140 mg (0,44 mmol)

2C0 ₃ : 506 mg (3,66 mmol)

DMF : 5 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 40% et se présente sous la forme d'une poudre jaune.

il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 170

RMN ³ Ή (CDCy : 0,90 (m,. 2H, 2 CH), 1,20 (m, 7H, 7 CH), 1,36 (m, 2H, CH ₂ ), 1,61 (m, 9H, 7 CH, CH ₂ ), 1,83 (m, 2 H, 2 CHN), 2,28 (m, 2H, CH ₂ N), 2.89 (m, 4H, 2 CHN, CH ₂ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 4,42 (s, 2H, NH ), 6,23 (s, 1H, H _Ar ), 7,76 (s, 1H, H _Ar ).

IR {KBr, cm ^"1 ): 3480,5, 2921,3, 2851,8, 1639,6, 1624,0, 1575,6, 1453,0, 1420,3, 1383,6, 1306,2, 1256,9, 1213,7, 1174,9, 1022,2, 830,2.

Exemple 17

~amino-5-chtoro-W [lH ^c Y ^c ^°hexYlm^

Le composé 17 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 5 décrit, ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[[(4-amîno-5-chloro-2-méthoxv-benzoyl)amino]méthyi]pip� �ridine-l-carboxyiate de tert- btftyle : ^VI 66 mg (0,17 mmol)

Acide trifluoroacétique : 1 ml

DCM : 2 ml

(bromométhyi)cycîohexane 39 mg (0,22 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 232 mg {1,68 mmol)

DMF : 3 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 38% et se présente sous la forme d'un solide blanc.

Il possède les caractéristiques suivantes i

PF = 154 - 155 °C

C ₂₁ H ₃₂ CiN ₃ G _? .

RMN ^:l H (CDCIj) : 0,90 (m, 2 H, 2 CH), 1,16 {m, 4H, 4 CH), 1,34 (m, 2H, 2 CH), 1,47 (m, 1H, CH), 1,68 (m, 7H, 7 CH), 1,88 (m, 2H, 2 CHN), 2,11 (d, J = 7,1Hz, 2H, CH ₂ N), 2,89 (m, 2H, 2 CHN), 3,29 (m, 2H, CH ₂ N), 3,88 {s, 3H, CH ₃ ), 4,35 (s, 2H, N M>), 6,27 (s, 1H, H _Ar ), 7,73 (t, i - 5,2Hz, 1H, NH), 8,03 (s, 1H, H _Ar ). !R (KBr, cm ^"1 ) : 3399,9, 2925,1, 2853,7, 1621,7, 1593,0, 1536,1, 1497,9, 1453,4, 1418,5, 1313,7, 1256,5, 1212,0, 1145,4, 989,8, 729,5,

Exem le 18

Le composé 18 est préparé suivant le mode opératoire de l'exempte 1 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[[(4-amino-5-bromo-2-méthoxy-benzoyl)amino]méthyl]pipér idine- -carboxy de tert- fautyie : 250 mg (0,56 rrimol)

Acide trifluoroacétique : 4 ml

DC : 4 ml

(bromométhyl)cydohexane : 68 μΐ (0,72 mmol}

K ₂ CO _; : 92 mg (0,66 mmol)

DM F : 6 m!

PF = 162 X

M H (CDjOD) : 0,93 (m, 2H), 1,23 (m, 5H}, 1,41 (m, 2H), 1,61 (m, 1H), 1,70 (m, 8H), 2,21 (m, 2HJ, 2,36 (m, 2H), 3.09 (m, 2H), 3,90 (s, 3H, CH ₃ ), 6,27 (s, ÎH, H _Ar ), 7,94 (s, 1H, H ,¾,)..

IR {KBr, cm ^"1 ) : 3450,5, 3406,0, 3319,5, 3195,6, 2918,3, 2847,5, 2763,4, 2417,3, 1634,8, 1593,8, 1543,1, 1496,2, 1463,1, 1448,0, 1309;8, 1255,6, 1210,2, 1179,1, 1134,8, 1041,2, 979,1, 838,9,

Exemple 19

4-amino-5-iodo-./V-[[l--(cyclohexytméthyl}-4-pipéridyl]mé thyl]-2-méthoxyfaenzamîde Le composé 19 est préparé suivant le mode opératoire de l'exempie 5 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

4-[i(4-amino-5-iodo-2-mét oxy-benzoyl}amino]iTiéthY!]pipéridine-l-carboxylate de tert- bu yie : 138 mg (0,28 mmol)

Acide trifluoroacétique : 1 ml

DCM : 2 m!

{bromométhyl)cyclohexane : 60 mg (0,34 mmol)

K ₂ C0 ₃ : 390 mg (2,82 mmol)

D F : 3 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 40% et se présente sous Sa forme d'une poudre jaune.

Il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 174 ^* C.

e _M H _¾ iM ₃ 0 _?

RMN 'H (CDCi _;5 ) : 0,85 (m, 2H, 2 CH), 1,20 (m, 4H, 4 CH), 1,34 (m, 2H, 2 CH), 1,47 (m, 1H, CH), 1,67 (m, 7H, 7 CH), 1,86 (m, 2H, 2 CHN), 2,10 (d, J = 7,1Hz, 2H, CH ₂ ), 2.88 (m, 2H, 2 CHN), 3.31 (m, 2H, CH ₂ N), 3,90 (s, 3H, CH ₃ ), 4,40 (s, 2 H, N Hj), 6,27 (s, 1 H, H _Al ), 7,69 (t, J = 4,8Hz, 1H, NH), 8,45 (s, 1H, H _Ar ).

IR ( Br, cm ^"1 } : 3451,5, 3407,6, 3313,5, 3196,4, 2916,7, 2845,4, 2792,0, 1636,2, 1582,8, 1551,4, 1490,2, 1446,1, 1408,6, 1302,1, 1267,0, 1211,3, 1182,3, 1143,0, 1043,1, 977,6, 836,4.

Exemple 20

[l-{cyciohexylméthyl)-4-pipéric!yl]méthyl 4-ammo-5-chloro-2-mdthoxybenzoate

Sous N _2î à une suspension de 101 mg d'acide 4-a mmo-5-chloro-2-méthoxybenzoïquè (0,50 mmo!) da ns 3 mi de THF fraîchement d istillé sont ajoutés 89 mg de CDI {0,55 mmo!}. Le milieu reactionnel est agité à température ambiante pendant 24h puis une solution de 106 mg de (l-(cyciohexylméthyl)pipéridin-4-yl}méthanol (0,50 mmol} dans 2 ml de THF fraîchement distillé puis 21 mg de Na H {0,55 mmol). Après agitation à TA pendant un week- end, le THF est évaporé. Le résidu obtenu est repris dans Î'AcOEt, lavé à l'eau puis séché sur M;gS0 ₄ . Après concentration, le brut réactionnel est purifié sur colonne de gel de silice (gradient d'élution : DC.M 100% à ÂcOEt 100%) pour obtenir le produit attendu avec un rendement de 31%.

Aspect; solide blanc crème

PF = 129 °C

C ₇ , H ₃₁ C1N ₂ 0 ₃

RMN ^X H (CDCi ₃ ) : 0,86 (m, 2H, 2 CH), 1,19 (m, 4H, 4 CH), 1,39 (m, 2H, 2 CH}, 1,48 (m, 1H, CH), 1,69 {m, 7H, 7 CH), 1,86 (m, 2.H, 2 CHN), 2,10 (d, J = 7,1Hz, 2H, CH _Î N), 2,88 (m, 2H, 2 CHN), 3,84 (s, 3H, CH ₃ ), 4,08 (d, J = 6,0Hz, 2 H, CH ₂ 0), 4,45 (s, 2H, NH ₂ ), 6,29 (s, 1H, H _AR ), 7,81 (s, 1H, H _Ar ).

i {KBr, cm ^"1 ) : 3472,9, 3329,8, 2919,7, 2850,5, 1694,9, 1621,3, 1600,1, 1449,3, 1316,9, 1275,6, 1234,3, 1109,2, 1072,4, 1053,3, 983,4.

Exemple 21

l-{4-amino-5 hloro-2-hydroxyphényS)-3-[l-{cyclohexylméthyl)-4--pipérid yl]propan-l-one A une solution de 140 mg de l-(4-amino-5-chloro-2-méthoxyphényl)-3~[l- (cyclohexylméthyl}-4-pÎpéridyl] propan-l-one (exemple 6, 0,36 mmo!) dans 10 m! de CH ₃ CM sont ajoutés 72 mg d'AiCI ₃ {0,54 m mol) et 81 mg de (Mal (0,54 mmol}.. Le milieu réactionnel est ensuite porté à reflux pendant 4h . Après dilution au DCM, la phase organique est lavée à l'eau puis au NaHC0 ₃ saturée. Après séchage sur WigS<¾, filtration et concentration, le résidu est purifié sur gel de silice (gradient d'élution : DCM à DCM/MeOH (9/1)) pour obtenir 109 mg de l-(4-amino-5-chloro-2-hydroxyphényl)-3-[l-{cyclohexyiméÎh yl)-4- pipëridyl]propan-l-one avec un rendement de 81%.

Aspect: solide jaune pâle

PF = 124 "C

RMN "H (CDCb) : 0,86 (m, 2H, 2 CH), 1,22 (m, 6H, 6 CH), 1,48 (m, 1H, CH) _t 1,71 (m, 9H, 7 CH, CH ₂ ), 1,35 {m, 2 H, 2 CHN), 2, 10 (d, J ~ 6,8Hz, 2H, CH _? ), 2,85 (m, 4H, CH ₂ , 2 CHN}, 4,65 (s, 2H, N H _¾ ), 6,23 (s, 1H, H _ftr ), 7,61 {s, 1H, H _Ar ), 12,72 (s, 1H, OH).

IR (KBr, cm ¹ ) : 3471,8, 3368,2, 2920,9, 2849,0, 2800,3, 2766,4, 1636,8, 1521,4, 1505,8, 1448,7, 1424,0, 1379,3, 1352,3, 1320,5, 1270,7, 1230,6, 1212,4, 1112,0, 812,5,

Exemple 22

l-(4-aminO''5-c k ^' jro--2 Îhoxyphényl)-3~ [l- {cyciohexylrnéthyl)"4

A une solution de 37 mg de l-(4-am!no-5-ch!oro-2-hydro) yphénYi)-3-tl-(cyeiohexyl ^' méthyl}- 4-pipéridyl]propan-l-one (0,10 mmol) dans 2 mi de DMF sont ajoutés 27 mg de K ₂ CC (0,20 mmol) et 8,5 μΐ de iodoéthane (0,11 mmol). Le milieu réactionnel est agité 2h30 à 11Q°C.

La solution est ensuite diluée à AcOEt puis est iavées 4 fois avec une solution NaCi saturée.

La phase organique est ensuite séchée sur gS0 ₄ , filtrée et concentrée. Le résidu obtenu est ensuite purifié sur gel de silice (préparation : DCM + 2% Et ₃ N ; élution : DOvl {9/1)) pour obtenir 33 mg de produit attendu (rdt = 84%) sous la forme d'un solide blanc.

PF = 147°C

CZBHÎSCI A.

RM N ^: H (CDC! ₃ } : 0,81 (m, 2H, 2 CH), 1,20 {m, 6H, 6 CH}, 1,44 (t, J = 7,1Hz, 3H, CB ₃ ), 1,47 (m, 1H, CH), 1,68 (m, 11H, 7 CH, 2 CHN, CH ₇ J, 2,05 {d, J = 6,8Hz, 2H, CH ₂ N), 2,82 (m, 2 H, 2 CHN), 2,92 {t, J = 6,8Hz, 2H, CH _Z }, 4,03 (qd, J = 7,1Hz, 2H, CH _z O},4,39 (s, 2H, NH _Z ), 6,21 (s, 1H, H _Ar ), 7,76 (s, 1H, H _ftr ).

iR (KBr, cm ^"1 ) : 3441, 1, 3214,2, 2926,3, 2853,7, 1651,8, 1621,7, 1586,1, 1501,8, 1434,3, 1383,5, 1307,3, 1259,7, 1205,7, 1132,7, 1028,4, 802,5. Exemple 23

l-[4-amino-5-chloro-2-(2-fiuoroéthoxy)phériyl]-3 l-(cyclohexylméthyl)-4-pipéndyl]propan- 1-one

Le composé 23 est prépa ré suivant le mode opératoire de l'exem ple 22 décrit ci-dessus en considérant les q uantités suivantes :

l-(4-amÎno-5-chiorO-2 -hydroxyphényi)-3-[l-(cyctohexylméthyl)-4-pipérid : 44 mg (0,12 mmol)

tosyiate de 2-fluoroéih e : 28 mg (0,13 mmol)

K;CO: ^* 32 mg (0,23. mmol)

DM F : 3 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 86% et se présente sous la forme d'un soiide blanc.

il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 144-146 "C

Q ₃ H _M Cîi¾0; RM 'Η (CDClu) : 0,82 (m, 2H, 2 CH), 3,18 ( , 6H, 6 CH), 1,44 {m, ÎH, CH), .1,66 (m, 11H, 7 CH, CH;., 2 CHN), 2,05 (d, J = 7,1Hz, 2H, CH ₂ N), 2,81 (m, 2H, 2 CHN), 2,94 (m, 2H, CH _? ), 4,17 (m, &H, CH), 4,24 {m, 1H, CH), 4,43 (s, 2H, NH,), 4,69 (m, 1H, CH), 4,82 (m, 1H, CH), 5,20 (s, 1H, H ,·.,).· 7,78 (s, 1H, H _Ar ).

! (KBr, cm ^"1 ) : 3431,6, 3266,5, 2926,7, 2853,7, 2675,9, 1644,3, 1618,5, 1586,8, 1501,0, 1450,2, 1434,3, 1383,5, 1342,3, 1310,5, 1256,5, 1205/7, 1183,5, 1164,4, 1072,4, 1047,3, 1018,4, 812,0.

Exemple 24

2 hloro-4-[[2-{l-(cyclo exyîméthYl)-4-pipértdyl}ét Yi]-W-méthoxycarbonimidoyi3--5~

méthoxyaniline

A une solution de 90 mg de l-(4-amino~5-chforo-2-méthoxyphényi)-3-[l- (cyt1ohexytmét yi)-4-pipéridy pîOpan-l-one (0,23 mmoî) dans 2. m! de pyridine sont ajoutés 69 mg de chlorhydrate de méthoxyamine (0,82 mrnol). Le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 24h. Après dilution dans i'eau, la phase aqueuse est extraite 3 fois à l'AcOEt. Les phases organiques sont regroupées puis lavées 5 fois à la saumure, sëchèes sur MgS0 ₄ puis concentrées. Le résidu est purifié sur gel de silice (préparation : DCM + 2% Et ₃ N ; gradient d'élution DCM/AcOEt : 10/0 à 9/1} pour obtenir 41 mg du produit attendu (stéréoisomère E) sous Sa forme d'une huile jaune pâte (rdt = 42%). : 0,83 (m, 2H, 2 CH), 1,22 (m, 8H, 6 CH, CH _? j, 1,44 (m, 1H, CH), 1,65 (m, 9H,

7 CH, 2 CHN), 2,04 (d, J ^ 6,8Hz, 2H, CH ₂ N), 2,63 (m, 2H, CH ₂ ), 2,79 (m, 2H, 2 CHN), 3,72 (s,

3H, CH ₃ ), 3,89 (s, 3H, CH ₃ ), 4,09 (s, 2H, N H ₇ J, 6,25 (s, 1H, H _Ar ), 7,12 (s, 1H, H,-.. }.

1 (KBr, cm ^'1 } : 3475,2, 3385,4, 2921,3, 2849,7, 2800,7, 2766,8, 1621,2, 1506,2, 1463,8, 1450,4, 1411,0, 1337,9, 1257,8, 1212,9, 1176,3, 1051,6, 984,8, 877,6.

Exemple 25 ^v "

3-{2-méthoxy-4-méthyfphény!)-3-oxoprQparioate d'éthyie

A une suspension de 300 mg d'acide 4-amino-2-méthoxybeiT7.oïque (1,78 mmoi) dans 15 ml de THF distillé sont additionnés précautionneusement 320 mg de CDI (1,98 mrnol), Le mélange est agité à température ambiante pendant 4h. Ensuite, sont ajoutés par portion 366 mg du sel potassique du 3-éthoxy-3-oxopropanoate (2,16 mmoi) et 205 mg de MgClj (2,16 mrnol). Le mélange ^' réacttonnel est agité à température ambiante pendant 2 jours. Après extension avec 30 ml d'Et ₂ 0,. la solution est lavée successivement à t'eau, à une solution saturée de NaHCOj et à une solution saturée de NaCI. Après séchage sur MgS0 ₄ , la phase organique est évaporée et te produit brut est purifié sur gel de silice (gradient d'élution : DCM à DC /AcOEt 95/5) pour donner 194 mg de 3-(4-amino-2-méthoxyphény!)- 3-oxopropanoate d'éthyie avec un rendement de 4-6%.

Aspect : huile incolore N ^:1 H (CDCI3) : 1,24 (t, J = 7,8Hz, 3H, CH ₃ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 3,88 (s, 2H, CH ₂ ), 4, 17 (q, J = 7,8Hz, 2H, CH ₂ ), 4,18 (s, 2H, N H ₂ ), 6,12 (d, J = 2,1 Hz, 1H, H _Ar ), 6,27 (ei !, J = 8,8Hz, J ^■ = 2,1Hz, 1 _. H, H _Ar ), 7,83 {d, J - 8,8Hz, 1H, H.-.,).

I R ( Br, cm ^'1 } : 3460,2, 3365,2, 3228,0, 2980,7, 1729,3, 1640,7, 1592,1, 1471,0, 1433,6, 1322,6, 1253,2, 1215,2, 1129,9, 1026,2, 830,3.

Exem le 26 ⁱ⁰

3-(4-amïno-5-chlGro-2-méthoxy-phényl}-3-oxopropanoate d'éthyie

A une suspension de 603 mg d'acide 4-arnino-5-chloiO-2-méthôxybenzoïque (2,99 mmol) dans 30 ml de TH F distillé sont additionnés précautionneusement 533 mg de CDI (3,29 mmol}. ¹⁰ Le mélange est agité à température ambiante pendant 6h. Ensuite, sont ajoutés par portion 611 mg du sei potassique du 3-éthoxy~3-oxopropanoate {3,59 mmol) et 342 mg de M ^' CIi {3,59 mmol). Le mélange réactionnel est agité à 40°C pendant 2 jours. Après extension avec 30 ml d'Et ₂ Q, ia solution est lavée successivement à l'ea u, à une solution saturée de Na HC0 ₃ et à une solution saturée de NaCI, Après séchage sur IvlgSCX,, la phase orga nique est évaporée et le produit brut est purifié sur gel de silice (gradient d'édition : CH/AcOËt 8/2 à 7/3) pour donner 507 mg de 3-(4-amino-5-chloro-2-méthoxyphény!)-3- oxopropanoate d'éthyie avec un rendement de 62%.

Aspect: solide blanc

PF = 124 X

C ₁₂ H _M C1N0

RM N H (CDCI ₃ ) : 1,24 {t, J = 7,3 Hz, 3H, CH ₃ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 3,87 (s, 2H, CH ₂ ), 4,17 (q, J = 7,3Hz, 2Ή, CH ₂ ), 4,56 (s, 2H, NH ₂ ), 6,23 (s, 1H, H _Ar ), 7,92 {s, 1H, H _/ )-

I R (KBr, cm ^"1 } ; 3463,0, 3362,5, 3222,9, 2982,6 _. , 1725,0, 1647,9, 1621/7, 1572,8, 1468,9, 1456,5, 1422,8, 1325,5, 1261,6, 1221,0, 1155,4, 1024,0, 836,8.

Exemple 27

3-{4-amino-5-fluoro-2-méthoxy-phényl)-3-oxopropanoate d'éthyie

Le com posé 27 est préparé suiva nt le mode opératoire de l'exem ple 26 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

Acide 4--amino--5-fluoro-2-méthoxybenzoïque ; 272 mg (1,47 mmol)

CDI : 262 mg ( 1,62 mmol)

se! potassique du 3-éthoxy-3-oxopropanoate : 300 mg (1,76 mmol}

MgCI ₂ : 168 mg (1,76 mmoi)

TH F : 30 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 65% et se présente sous la forme d'un solide blanc.

PF - 83-85 °C

C _1?; H _M F:N0 ₄ R N *H (CDCI _a ) : 1,24 (t, j = 7,1Hz, 3 H, CH ₃ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 3,88 (s, 2 H, CH ₂ ), 4, 17 (q, J = 7,1Hz, 2 H, CH-i), 4,26 (s, 2H, NH ₂ ), 6,24 (d, J ~ 7,1Hz, 1H, H _Af ), 7,65 (d, J = 11,9Hz, 1H, H _Ar ). [R (KBr, cm ^"1 ) : 3469,7, 3464,2, 3231,6, 2981,7, 1729,6, 1652,9, 1628,0, 1604,2, 1522,4, 1469,6, 1431,7, 1366,9, 1319,2, 1250,2, 1211,3, 1189,8, 1139,2, 1026,3, 829,9.

Exemple 28

3-{4-amino-5-bromo-2-méthoxy-phény!)-3-oxopropanoate d'éthyle

Le composé 28 est préparé suivant le mode opératoire de i'exemple 26 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

Acide 4-amino-5-bromo-2-méthoxybenzoïque : 500 mg (2,03 mmol)

CDI :: 362 mg (2,23 mmoi)

sel potassique du 3-éthoxy-3-oxopropanoate : 414 mg (2,44 mmol)

MgCI;, : 232 mg (2,44 mmol)

THF : 30 mi

Le composé attendu est obtenu, avec un rendement de 50% et se présente sous la forme d'une poudre blanche,

li possède les caractéristiques suivantes :

PF = 128 X

C _u H _M BrN0 ₄

RM N ^! H (CDCI ₃ ) : 1,24 (t, J = 7,8Hz, 3H, CH ₃ ), 3,83 (s, 3H, CH ₃ ), 3,87 (s, 2H, CH ₂ ), 4,18 (q, J = 7,8 Hz, 2H, CH ₂ ), 4,59 (s, 2H, N H ₂ ) 6,23 (s, 1H, H _Ar ), 8,08 (s, 1H, H _Ar ).

iR {KBr, cm ^'1 ) : 3456,3, 3358,0, 32.17,6, 2981,0, 1724,9, 1647,4, 1620,4, 1578,0, 1468,2, 1454,3, 1420,4, 1321,5, 1265,7, 1221,2, 1153,7, 1023,7, 835,0. Exemple 29

3-(4-amino-5-îodo-2-mêthoxy-phényl)-3.-oxopropanoate d'éthyle

Le composé 29 est préparé suiva nt le mode opératoire de l'exemple 26 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

Acide 4-amtno-5-iodo-2-methoxybenzofque : 355 mg (1,21 mmol)

CDI : 216 mg (1,33 mmol)

sel potassique du 3-éthoxy-3-oxopropanoate : 247 mg (1,45 mmol)

MgCI ₂ : 138 mg ( 1,45 mmoi)

TH F : 30 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 55% et se présente sous la forme d'une poudre blanche.

If possède les caractéristiques suivantes: :

PF = 140 °C

C _¾ H _M lNO,j

RM *H (CDCy : 1,24 {t, J = 7,8Hz, 3 H, CH ₃ ), 3,82 (s, 3H, CH ₃ ), 3,87 (s, 2H, CH,), 4,17 (q, J = 7,8Hz, 2H, CHj), 4,65 (s, 2H, NH ₂ ), 6,22 (s, 1H, H _Ar ), 8,25 (s, 1H, H _Ar ). IR (KBr, cm ^'1 ) : 3454,0, 3350,0, 3212,1, 2976,2, 1732,2, 1645,6, 1619,0, 1569,6, 1467,0, 1454,5, 1421,4, 1325,2, 1264,7, 1225,9, 1190,5, 1153,4, 1031,9, 831,2.

Exemple 30™

4-[3-(4-amino-2-méthoxyphényl)-3-oxopropyl]pipéridine- l-carboxyl3te de ferf-butyie

A une solution de 379 mg du composé de l'exemple 22 (1,58 mmol) dans 30 ml de D F sont ajoutés 437 mg de l¾CG ₃ (3, 16 mmol) et 617 mg de 4-(iodométhy ^' l)pipéridine-l- carhoxylate de ieri-butyle ( 1,89 m mol). Le mélange réactionnei est agité à température ambiante pendant 1 semaine. Après dilution dans l'ea u, le produit est extrait à l'Et ₂ 0 (3 X 40 ml). Les phases organiq ues sont regroupées, iavées 3 fois à l'eau et une fois à la saumure puis séchées sur !VlgS0 ₄ . Après concentration, le résidu est dissous dans 10 ml d'un mélange binaire EtOH/H ₂ 0 (5/1) auquel 407 mg de KO H {7,27 mmol) sont ajoutés. Le nouveau milieu réactionnei est porté à reflux pendant 4 heures. L'EtOH est éliminé à S'évaporaient' rotatif puis la phase aq ueuse résultante est diluée à l'eau, extraite au DCM. Les phases organiques sont regroupées, lavées à l'eau et à la saumure, séchées sur g50 ₄ puis concentrées. Le produit brut est purifié sur gel de silice (gradient d'ékition : DCM à DCM/AcOEt 6/4) pour obtenir 469 mg du 4-[3-{4-amîno-2-méthoxy)-3- oxopropy pipéridîne-l-carbOxylate de tert-butyle avec un rendement, de 82%. Aspect: huile jaune

C _2O H _{30 ?} O,

RMN ^! Ή {CDCy : 1,11 (m, 2H, 2 CH), 1,45 (m, 10H, 3 CH ₃ , CH), 1,61 (m, 2H, CH ₂ ), 1,68 (m, 2H, 2 CH), 2,67 (m, 2H, 2 CHN), 2,90 (m, 2H, CH.-}, 3,86 {s, 3H, CH ₃ ), 4,07 (m, ,2 H, 2 CH ), 4,62 {s, 2H, NrljJ, 6,16 (d, J = 2,0Hz, 1 H, H _Af ), 6,27 (dd, J = 8,6Hz, J = 2,0Hz, 1H, H _Ar ), 7,71 (d, J = 8,6Hz, 1H, H _Ar ),

I R (KBr, cm ^'1 } : 3442,8, 3355,8, 3240,2, 2974,2, 2930,5, 2851,3, 1675,9, 1642,3, 1595,9, 1468,4, 1431,1, 1365,6, 1277,7, 1212,9, 1162,6.

Exemple 31

4-[3-{4-amino-5-chloro-2-méthoxyphényl)-2-mét.hyl-3-ox opropyl] pipérid ine-l-carboxylate de f rf-butyîe

A une solution de 300 mg de 4-[3-{4-amino-5-chioro~2-méthoxyphénvl)-2-méthyl-3- oxopropyi]pipérîdine-l -carboxyIate de ferf-butyîe (0,76 mmol) dans 3 mi de TH F fraîchement distillé sont ajoutés, sous N ₂ , à -10"C, 909 μΐ de UHMDS 1 dans le THF (0,909 mmol). Le milieu réactionnei est agité 15 minutes a -10°C puis sont additionnés 57 ml de Îodomëthane (0,909 mmol) . Après 3h et un retour tra nquille à TA, ta solution est concentrée sous pression réduite. Le résidu est repris dans l'AcOEt et lavée 2 fois à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS0 ₄ puis concentrées. Le produit brut est purifié sur gel de silice (gradient d'élution : DCM à DCM/AcOEt 95/5) pour obtenir 76 mg de produit attendu (rdt = 25%). Aspect: huile jaune pâle

RMH hi CDCki : 1,00 (m, 2H, 2 CH), 1,06 (d, J - 7,1Hz, 3H, CH ₃ ) 1, 18 (m, 1H, 1 CH), .1,46 (m, 10H, 3 CH ₃ , CH), 1,55 (m, 2H, 2 CH), 1,68 (m, 1H, 1 CH), 2,62 (m, 2 H, 2 CHN), 2,90 {m, 2H, 2. CH N), 3,58 (sext, J = 7,1Hz, 1 H, H), 3,81 (s, 3H, CH ₃ ), 4,01 (m, ,2 H, 2 CHN), 4,44 (s, 2H, 1\!H ₂ ), 6,24 (S, 1 H,. HA _T ), 7,67 {s, 1H, H _AR ).

IR ( KBr, cm ^'1 ) : 3471,8, 3350,1, 3240,2, 2973,9, 2927,8, 2849,4, 1673,2, 1622,4, 1590,1, 1465, 1, 1419,2, 1365,5, 1278,3, 1250,5, 1215,6, 1174,8.

Exemple 32

4- 3-{4-a mino-5-fluoro-2-méthoxyphényr)-3-oxopropyi]pipéridine-l arboxylate de tert- butyle

Le composé 32 est prépa ré suivant te mode opératoire de l'exemple 30 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

3- {4-amino-5-fluoro-2-méthoxyphényi)-3-oxopropanoate d'éthyle: 185 mg (0,72 mmol)

4- (iodométhyl)pipér!d ine-l-carboxylate de ferf-butySe ; 283 mg (0,87 mmol)

C0 ₃ : 200 mg (1,45 mmol)

O F : 5 ml

KO H : 187 mg (3,33 mmol)

EtOH :10 m l

H ₂ 0 : 2 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 70% et se présente sous la forme d' u ne poudre blanche.

ii possède les caractéristiques suivantes :

PF = 171 X

C ₂₀ H ₂₉ FN ₂ O ₄

M N H-i (CLXiy ; 1, 11 (m, 2H, 2 CH), 1,43 (m, 1H, CH), 1,45 (s, 9H, 3 CH ₃ ), 1,59 (m, 2H, CH ₂ ), 1,67 (m, 2H, 2 CH), 2,67 (m, 2H, 2 CH), 2,92 (m, 2 H, CH ₂ ), 3,84 (s, 3H, CH _;î ), 4,08 (m, ,2H, 2 CHN), 4,15 (s, 2H, Ν Η,), 6,27 {d, J _H , _F = 7.1Hz, 1H, H _Af ), 7,94 (s, J _H . _F = 11.9Hz, 1H, H _Ar ).

I R {KBr, cm ^'1 ) : 3438,0, 3350,6, 3229,9, 2974,2, 2927,4, 2853,0, 1675,1, 1628,6, 1604,4, 1467,6, 1428,0, 1365,6, 1311,5, 1249,4, 1168,8.

Exemple 33

4--[3-(4-amino-5 5romo-2--méthoxyphényi)-3-oxoptOpyl3pipérid!ne-l-carboxyl ate de tert- buty!e

Le com posé 33 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 30 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

3-(4-arnino-5"bromo-2~méthoxypbényf)-3-oxopropa noate d'éthyle : 250 mg (0,79 mmoi) 4-(iodométhyl)pipëridine-l-carboxylate de tert-butyle : 309 mg (0,95 mmol}

K ₂ C0 ₃ ; 218 mg (158 mmol)

DM F : 5 ml

KO H : 204 mg (3,63 mmol]

EtOH : 8 ml

H ₂ 0 : 2 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 68% et se présente sous la forme d'une poudre blanche.

Il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 146-148*0

0H ₂₉ BrNjO ₄

R N ^J H (CDC : 1,07 (m, 2H, 2 CH), 1,43 (m, 10H, 3 CH ₃ , CH), 1,57 (m, 2H, CH ₃ ), 1,64 (m, 2H, 2 CH}, 2,64 (m, 2H, 2 CH), 2,88 (m, 2H, CH ₂ J, 3,81 (s, 3H, CH ₃ ), 4,06 (m, ,2H, 2 CHN), 4,61 (s, 2H, H ₂ ), 6,25 (s, 1H, H _ftr ), 7,91 (s, ÎH, H _Ar ).

IR (KBr, cm ⁴ ) : 3469,7, 3353,1, 3225,2, 2977,5, 2928,4, 2853,7, 1688,8, 1672,5, 1621,6, 1584,9, 1419,6, 1365,8, 1311,6, 1250,4, 1218,0, 1172,8.

Exemple 34

4-[3-(4-amino-5-iodo-2-méthoxyphényi)-3-oxopropyi)pîpéri dir»e-l-carboxyl3te de tert- butyie

Le composé 33 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 30 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

3- (4-amino-5-iodo-2-méthoxyphényl)-3-oxopropanoàte d'éthyle : 172 mg (0,47 mmol)

4- {iodomethyl)piperidine-l-carboxylate de tert-butyle : 169 mg (0,52 mmol)

2C0 ₃ : 131 mg (0,95 mmol)

DM F : 5 ml

KO H : 122 mg (2,18 mmol)

EtOH: S ml

H ₂ 0: 2 mi

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 65% et se présente sous la forme d'une poudre blanche.

H possède les caractéristiques suivantes :

PF = 152 ^D C

C ₂ aH _a i:N ₂ 0 ₄

RM ^l H (CDCI ₃ ) : 1,10 (m, 2H, 2 CH), 1,45 (m, 10H, 3 CH ₃ , CH), 1,59 (m, 2H, CHj), 1,67 (m, 2H, 2 CH), 2,67 (m, 2H, 2 CHN), 2,90 (m, 2H, CH ₂ ), 3,85 (s, 3H, CH ₃ ), 4,08 (m, ,2H, 2 CHU), 4,51 (s, 2H, NH ₂ ), 6,25 (s, 1H, H _Ar }, 8,13 (s, 1H, H _Ar ).

IR (KBr, cm ^{' 1} ) : 3459,4, 3341,2, 3219,9, 2972,8, 2928,5, 2850,1, 1672,7, 1621,3, 1578,9, 1451,4, 1415,0, 1365,2, 1265,5, 1217,3, 1164,6. Exemple 35

4-([{4-amino-5-bromo-2-méthoxybenzo de tert- butyle

A une solution de 474 mg d'acide 4-àmiriO'5-brorno-2-méthoxyben2o ^' !que {1,93 mmol) dans 4 mi de DM F sont ajoutés à 269 ml de Et ₃ N {1,93 mmol) et 414 mg de 4- (aminométhyl)pipéridine -1-carboxylate de iert-hutyle (1,93 mmol}. ⁹ La solution est placée à -5"C puis sont ajoutés 261 mg de HOBT {1,93 mmol) et 371 mg d'EDCI.HCI (1,93 mmol). Le milieu réactionne! est. ensuite ajouté une nuit à TA. La solution est diluée à l'eau puis extraite 3 fois à l'AcOEt. Les phases organiques sont regroupées puis lavées 4 fois à l'eau . La phase organique est séchée sur Mg$<¾, filtrée puis concentrée. Le brut réactionnel est ensuite purifié sur gel de silice (gradient d'éiution : DCM à DCM/AcOEt 7/3) pour obtenir 630 rng de produit attendu (rdt = 74%).

PF - 125X

C _ls H _¾ BrN ₃ 0 ₄ IVlN ³ H (CDCb) : 1,17 (m, 2H, 2 CH), 1,45 (m, 9H, 3 CH ₃ ), 1,75 (m, 3H, 3 CH), 2,69 {m, 2H, 2 CHN), 3,32 (m, 2H„ CH ₂ IM), 3,89 (s, 3H, CH _? ), 4,10 {m, ,2H, 2 CH ), 4,53 (s, 2 H, NH ₂ ), 6,32 {s, 1H, H _Ar ), 7,76 (t, J = 5,6Hz, 1H, H), 8,24 (s, 1H, H _ftr ).

iR { Br, cm ^"1 ) : 3448,2, 3337,2, 3206,8, 2970,9, 2927,7, 2854,9, 1689,0, 1631,6, 1593,5, 1559,2, 1491,2, 1465,4, 1430,2, 1364,5, 1247,0, 1179,2, 1147,3.

Exemple 36

4-[[{4-ammo-5-iodo-2-méthaxybenzoyl)3mino]méthy0pip.éridi ne-l-carb.oxyl3te de tert- butyle

Le composé 35 est préparé suivant le mode opératoire de l'exemple 34 décrit ci-dessus en considérant les quantités suivantes :

acide 4-amlno-5-iodo-2-méthoxybenzoïque : 342 mg (1,16 mmol)

4-(amïnométhyl)pipérîclîne-l-carboxylate de tert- butyle : 214 mg (1,16 mmol)

Et ₃ N : 162 j.iL (1,16 mmol)

EDCI.Hd : 223 mg (1,16 mmol)

HOBT : 157 mg {1,16 mmol)

DM F : 5 ml

Le composé attendu est obtenu avec un rendement de 80% et se présente sous îa forme d'une poudre jaune pâle.

Il possède les caractéristiques suivantes :

PF = 13 SX

RM "H (CDCI3) : 1,18 (m, 2H, 2 CH), 1,45 (m, 9H, 3 CH ₃ ), 1,73 (m, 3H, 3 CH), 2,69 (m, 2H, 2 CHN), 3,32 (m, 2H, CH ₂ N), 3,90 (s, 3H, CH ₃ ), 4,12 {m, ,2H, 2 CHN), 4,42 {s, 2H, NH ₂ ), 6,28 {s, 1H, H A,), 7,72 (t, .1 - 5,8 Hz, 1H, NH), 8,45 (s, 1H, H _Ar ). IR (KBr, cm ^"1 } : 3408,0, 3333,5, 3209,0, 2973,8, 2927,4, 2850,1, 1679,3, 1627,9, 1586,5, 1536,2, 1491,2, 1465,4, 1425,6, 1365,3, 1251,7, 1212,4, 1171,3, 1142,5,

Les propriétés biologiques des composés selon l'invention mentionnés ci-dessus ont été testées afin de déterminer ;

- leur affinité vis-à-vis du récepteur 5-HT4

- la puissance de leur effet agoniste vis-à-vis du récepteur 5-HT4

- leur effet inhibiteur de l'acétylcholinestérase (test d'Eilman)

- leu interaction avec le site périphérique de l'acétylcholinestérase (test de déplacement du propidîum)

- leur capacité à augmenter ïn vivo chez le rongeur le délai d'extinction de la trace mnésique dans un test de reconnaissance d'objets modélisant la mémoire épisodîque (nature de l'objet) chez le rongeur (test de reconnaissance d'objet). A) affinité vis-à-vis des récepteurs 5-HT4

Matériel et méthodes

Prélèvement du tissu striatal et préparations membranaires

L'ensemble des procédures décrites dans ce chapitre est issu des travaux de Grossman et ai. (1993). Brièvement, les animaux (Cobayes mâles : 300-350 g, IFFA CREDO, France) sont euthanasiés par décapitation, puis le cerveau rapidement prélevé à +4°C. Les régions striatales sont soigneusement disséquées puis regroupées. L'ensemble des striata est placé dans 10 volumes de tampon HEPES 50mM, pH 7,4 à +4T. Après homogénéisation à +4°C f Ultra -Tu rrax, vitesse maximale, 15 sec), et uitracentrifugatîon (23 000 g, 60 min, +4T), ie culot est remis en suspension dans du tampon HEPES SQmivî, pH 7,4 à +4°C de manière à obtenir une concentration tissuiaire de l'ordre de 15 mg.mi ¹ (dosage des protéines par la méthode de lowry et al., 1951, utilisant l'albumine de sérum bovin comme standard).

Etudes de compétition des produits à étudier en compétition contre le [ ⁵ H]~ G RI 13.808

Préalablement aux études de compétition, une série de courbes de saturation sont effectuées afin de vérifier que les paramètres pharmacologiques Kd, Bmax et coefficient de Hill du [ ³ H]-GR113808, obtenus dans nos conditions expérimentales, sont concordants avec ceux publiés dans la littérature. Pour cela, des échantillons de préparation rnembranaire à 7,5 pg/VL, sont incubés en duplicata (tampon HEPES 50 mM, pH 7.4, +37T) à +37X et pendant 30 minutes, en présence de 7 concentrations croissantes (0,05-1,5 nM, 200 μΙ de volume final) de [3Hj-GR113808 (Grossman et al., 1993). Au moyen d'un système Brandei Celi Harvester, la liaison du radioiigand aux protéines est interrompue par filtration rapide du milieu d'incubation sur une bande filtre (FP-100 HATMAN GF/B) pré-incubée dans la poiyéthylénimine (PEI 0,5% clans l'eau) ; la filtration est suivie de 3 rinçages par 4 ml de tampon HEPES 50 mM, pH 7,4 à +4°C. La liaison non spécifique du ( ³ H)-G 1Î3808 est quantifiée en présence de 30 μΜ de sérotonine, la liaison spécifique étant ainsi estimée comme la différence : (liaison en absence de sérotonine)-(liaison en présence de sérotonine}.

Les études de compétition sont effectuées avec 0,1 n de r ^:t H ^' j-6 lI3808 en présence de 10 ^'6 ou 10 ^;' M, ou n concentrations pour les Ki, de lîgancl à étudier, le prucalopride. étant utilisé comme agoniste 5-HT de référence. Après incubation, les procédures de fi!tration et de rinçage étaient identiques à celles décrites ci-dessus.

Résultats

A titre d'exemples les affinités de plusieurs composés selon l'invention vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 sont reportées dans le tableau 4.

Tableau 4 : affinité de plusieurs composés selon l'invention vis-à-vis des récepteurs 5-HT4, le prucalopride étant pris

B) caractère agoniste vis-à-vis du récepteur 5-HT4

Matériel et méthodes

Le caractère agoniste vis-à-vis du récepteur 5--HT4 de plusieurs composés seîon î'Înventïon est déterminé par la mesure de l'accumulation d'AMP cyclique intracellulaire. Pour cela, ries cellules stables transfectées sont cultivées jusqu'à confluence et incubées avec un milieu serum-free 4 h avant le début de l'expérimentation. Les celluîes sont ensuite pré-incubées durant 15 min avec un milieu serum-free suppiémenté avec 5 roM de théophylline, 10 μΜ de pargyline et 1 μΜ de composé GR127935 dans des cellules CHO pour bloquer l'activité endogène des récepteurs 5-HT1B. De la sérotonine est ensuite ajoutée pendant 15 minutes supplémentaires. La réaction est stoppée par aspiration du milieu et addition de 500 μΐ d'éthanol glacé. Après 30 min d'incubation, la fraction éthanolique est collectée et évaporée sous vide, La pastille est reconstituée et l'AMP cyclique est quantifié par test radioimmunologique (cyctic AMP compétitive radioimrnunoassay, immunotech, Marseille, France). Les tests de Student sont réalisés en utilisant Se logiciel CiuickTTest. Les résultats sont exprimés en pourcentage d'effet agoniste par rapport à la sérotonine. Le prucalop ide, agoniste entier des récepteurs 5-HT4 est utilisé comme référence.

Résultats

A titre d'exemples les puissances d'effet agoniste de plusieurs composés selon l'invention vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 sont reportées dans le tableau 5.

Tableau 5 : puissance de l'effet agoniste de plusieurs composés selon l'invention vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 {%}.

C) Test d'EHrnan Matériel et méthodes

De l'acétylcholinestérase extraite d'éryt rocytes humains (solution aqueuse tamponnée, > 500 unités/mg, Sigma Aldrich) est diluée dans 20m M de tampon HEPES à pH8, 0,1% Triton X-100 de façon à obtenir d'une solution titrée à 2,5 unités d'activité enzymatique / ml, 100 μΐ d'une solution d'acide 5,5-dithiobis(2-nitroberizoïque) (DTIMB) à 0,3mM dans un tampon phosphate à pH7,4 sont introduits dans une plaque 96 puits, suivis de 50μ1 de composé à tester en solution dans le DMSO et de ΒΟμί de solution d'enzyme. Après 5 min de préincubation, îa réaction est initiée par l'injection de 5ϋμΙ de solution à lOmM d'iodure d'acétylthiochofine. L'hydrolyse de l'acétyîthîocholirie est suivie par la formation de l'anion 5-ihio-2-nitrobenzoate, produit de la réaction du DTNS avec la thiocholine libérée par l'hydrolyse enzymatique de l'acétylthiocholine, au moyen d'un lecteur de microplaques (TECAN Infinité M20Q, Lyon, France) à la longueur d'onde de 412 nm chaque minute durant 10 minutes. Le donépézil est utilisé comme produit de référence. Pour ies composés présentant une inhibition de i'acétylcholînestérase significative ( 50%) après 4 min de réaction, ies valeurs d'iC ₅₀ sont mesurées graphiquement à partir de 6 points de la courbe d'inhibition au moyen du logiciel Origin. Résultats

A titre d'exemples ies activités inhibitrices de l'acétylchoiinestérase humaine de plusieurs composés selon l'invention vis-à-vis des récepteurs 5-HT4 sont reportées dans le tableau 6,

Tableau 6 : inhibition de l'acétylchoiinestérase humaine de plusieurs composés selon l'invention, le donèpézil étant pris comme référence (ICso en ntvl).

D) test de déplacement du propidium

Matériel et méthodes

Le diiodure de propidium lorsqu'il, se lie au site périphérique de i'AChE produit une augmentation de fluorescence qui peut être utilisée comme preuve de sa liaison à l'enzyme, les mesures de fluorescence sont effectuées dans 200 μί. de solution en piaques 96 puits grâce à un lecteur de microplaques Tecan Infinité M200. Cinq unités d'eeAChE sont incubées pendant 15 min à 25°C dans du tampon 1 rntvl Tris/HCI, pH 8,0 avec 150 μΐ de solution 10 ^'S M de composés à tester ou de donépézil comme référence. 50 μΐ de solution micromolaire de diiôdure de propidium sont ajoutés 10 m in avant la mesure de fluorescence. La longueur d'onde d'excitation est mesurée à 535 nm, celle d'émission à 595 nm. Chaque essai est répété au moins trois fois.

Résultats

A titre d'exem ples les va leurs de déplacement du diiôdure de propidium du site périphérique de l'eeAChE de plusieurs composés selon l'invention sont reportées dans le tableau 7.

Tableau 7 : déplacement du diiôdure de propidium du site périphérique de t'eeAChf: de plusieurs composés selon l'invention (%)

E) test de reconnaissance d'objet

Matériel et méthodes

Animaux

Les tests sont effectués avec des souris mâles de souche N MRI âgées d'environ 3 mois au moment des tests. Ces souris sont hébergées par groupes de 15 dans des cages standa rd en poiycarbonate (42 x 29 x 15 cm ³ ), dans une an imalerie dont la température est maintenue à 22 ± 2*C et le pourcentage d'humidité à 55 ± 10%. Elles ont un libre accès à la nourriture et à l'eau et sont maintenues en cycle inversé (phase de lumière entre 20h00 et 8h00) afin de pouvoir réaliser les expériences durant leur phase d'activité.

Test de reconnaissance d'objet

Le test de reconnaissance d'objet est basé sur îa préférence spontanée des rongeurs pour la nouveauté, sans mettre en jeu de privation de nourriture ni de choc électrique. C'est un test qui permet d'évaluer une forme de mémoire èpisodique chez le rongeu r dans le sens où l'on évalue ia capacité de l'anima! à mémoriser une information liée à un contexte spatio-temporel (Dere et ai., 2007).

Le dispositif se compose d'une enceinte en PVC carrée (3.3 x 33 x 20 cm, illuminée à 10 lux au centre) dont les surfaces sont noires. Le test se déroule en 2 phases : l'une de familiarisation, permettant aux animaux de se familiariser avec l'environnement du test (enceinte, pièce, expérimentateur), l'autre d'évaluation des performances de mémoire. Une caméra est située au dessus de l'appareillage, elle est reliée à un système de video- tracking (ViewPoint ^® ). Lors des tests comportementaux, l'expérimentateur ne se trouve pas dans ia pièce d'expérimentation mais dans une pièce adjacente où se trouve le système de video-îracking.

Après une phase de familiarisation (jour 1, exposition individuelle pendant 5 minutes à î'open-field sans objet} Sa phase d'évaluation des performances de mémoire débute le 2ème jour et est elle-même composée de 2 sessions, l'une de présentation, l'autre de test. Immédiatement avant la session de présentation, la souris est. familiarisée à nouveau à l'appareillage pendant une minute, puis deux objets identiques, notés Ai et A2, sont placés à environ S cm des murs de l'enceinte. La souris est placée dos aux objets, face à l'expérimentateur, et explore librement le dispositif. La session est arrêtée lorsque la souris atteint un temps total d'exploration dés deux objets de 30 secondes. Le temps d'exploration de chaque objet, respectivement al et si, ainsi que le temps pour atteindre le critère d'exploration sont mesurés. Après un délai intersessions de 24 heures, une session de test est réalisée. Deux objets sont utilisés : un objet A3 familier (une copie de Al ou A2 non présenté précédemment) et un objet B, différent de l'objet A, qui correspondra à l'objet nouveau, La session est arrêtée par l ^' expérimentateur lorsque la souris atteint un critère d'exploration totale de 30 secondes, Le temps pour atteindre le critère d'exploration ainsi que le temps d'exploration de l'objet nouveau sont mesurés et ce dernier est comparé au niveau chance {15 s).

Les objets utilisés lors du jour test sont un dauphin bleu en céramique (4 cm de diamètre et 10 cm de haut) et un flacon transparent rempli de sable (3 x 4,5 x 9 cm), disponibies en quatre exemplaires, qui sont nettoyés après chaque utilisation (Ethano! 70%). Ces objets sont maintenus avec de ia Patafix ^® au niveau du plancher de Topen fieid de manière à ce que les souris ne puissent pas les déplacer. Les combinaisons d'objets (flacon/flacon et dauphin/dauphin) et l'emplacement du nouvel objet (gauche/droite) sont déterminés aléatoirement pour éviter les biais dus à une éventuelle préférence d'objet ou de place.

Les résultats sont exprimés par le pourcentage d'exploration de chaque objet pendant la session test Les données sont analysées par une analyse de va îance (AI OVA) avec mesures répétées, suivie d'un test de comparaison multiple de Student-Ne man- Keuis (SNK) .

Administration des composés

Des lots de 10 à 12 souris sont constitués par groupé expérimental. Les composés en solution dans le sérum physiologique sont administrés par voie i ^' ntrapéritonéaîe (volume d'injection, 10 ml/kg de poids corporel), 30 minutes avant la session d'acquisition. Un lot contrôle (sérum physiologique) est constitué.

Résultats (figure 1) A titre d'exemple, le composé 9 induit une amélioration des performances de reconnaissance d'objets par rapport au lot contrôle avec un effet maximal dès la dose de 0,3 mg/kg (figure 1).

Tem s d'exploration (moyenne+écartype)

gfo jôt familier m objet uveau

aC! composé

0,3 rnq/kçi 1 rnq/kq 3 rn q/kq

Figure 1 : Le composé g améliore les performances de mémoire dans le test de reconnaissance d'objet chez la souris. N=12 par groupe. *p<0,05 versus objet familier ÇANOVA puis test de Newman- euls),