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Title:
Β-ACID MONOESTER SALT AND USES THEREOF SERVING AS ANIMAL FEED ADDITIVE
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2015/100800
Kind Code:
A1
Abstract:
Disclosed are a β-acid monoester salt and uses thereof serving as an animal feed additive. The β-acid monoester salt has higher stability and can promote growth of livestock.

Inventors:
PENG XIANFENG (CN)
QIN ZONGHUA (CN)
Application Number:
PCT/CN2014/070606
Publication Date:
July 09, 2015
Filing Date:
January 14, 2014
Export Citation:
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Assignee:
GUANGZHOU INSIGHTER BIOTECHNOLOGY CO LTD (CN)
International Classes:
A23K1/14
Foreign References:
CN102481000A2012-05-30
CN1652809A2005-08-10
Attorney, Agent or Firm:
GUANGZHOU KEYUE I.P. LAW OFFICE (CN)
广州科粤专利商标代理有限公司 (CN)
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Claims:
权利要求书 1、 β-酸

式 1

其中: R1为异丙基、 仲丁基或异丁基, R2为 1〜17碳直链烷烃基, L为钙、 镁、 铜、 锌、 锰或钴。

2、 根据权利要求 1所述的 β-酸单酯盐, 其特征在于, 所述的 R2为甲基、乙 基或丙基。

3、 根据权利要求 1所述的 β-酸单酯盐, 其特征在于, 所述的 L为钙或镁。

4、 权利要求 1所述的 β-酸单酯盐在制备动物伺料添加剂中的应用。

5、 根据权利要求 4所述的应用, 其特征在于, 所述的动物为各个生长阶段 的猪、 鸡、 鸭、 鹅、 肉牛、 奶牛、 羊、 鱼、 虾、 狐、 貂或貉。

6、 根据权利要求 4所述的应用, 其特征在于, 所述的 β-酸单酯盐, 其在动 物伺料中的添加剂量为 0.1〜500ppm。

7、 根据权利要求 6所述的应用, 其特征在于, 所述的 β-酸单酯盐, 其在动 物伺料中的添加剂量为 0.5〜50ppm。

Description:
P-酸单酯盐及其做为动物饲料添加剂的应用 技术领域:

本属于动物伺料添加剂领域,具体涉及高稳定 性的 β-酸单酯盐及其做为动物 伺料添加剂的应用。 背景技术:

虽然一系列美国专利 US8197863B2 , US8012516B2 , US20080213342A1 , US20060269588 , US20040219240, US7090873 , US20060134248 , US8012516, US20110311663 , US7553504, US20130018106 , US6251461等以及一系列欧洲 专利 EP2606742A1, EP1542543A1 , EP2429311A2, EP1722635A2等都描述了酒 花酸 (Hops acids) 作为替代伺用抗生素类生长促进剂的应用。 但是, 首先这些 专利所描述的都是应用酒花植物或酒花酸的提 取物 (α-酸及 β-酸混合物等) 作为 伺料添加剂应用, 而这些酒花提取物(混合物)其实已经在中国 伺料添加剂目录 上, 只是作为伺用香料应用; 其次, 这些专利所依据的基本是体外试验结果,体 外消化试验等, 动物伺养试验结果很少; 再次, 这些天然产物及它们的组分、以 及不同酯、盐、等的稳定性在满足作为动物伺 料添加剂应用必须的要求方面没有 资料支持。 发明内容:

本发明的第一个目的是提供具有更高的稳定性 、能够促进畜禽生长的, 更适 合作为伺料添加剂应用的 β-酸单酯盐。

本发明的 β-酸单酯盐, 其结构通式如式 1所示:

式 1

其中: R1为异丙基、 仲丁基或异丁基, 1 2为 1〜17碳直链烷烃基, L为钙、 镁、 铜、 锌、 锰或钴。

所述的 R2优选为甲基、 乙基或丙基。

所述的 L优选为钙或镁。

所述的 β-酸是现有技术中的物质, 其含合蛇麻酮 (colupulone )、 蛇麻酮 (lupulone)及加蛇麻酮(adlupulone)三个主要组分, 它们的含量范围分别在商 业提取物标定范围内即可。

本发明的第二个目的是提供上述 β-酸单酯盐在制备动物伺料添加剂中的应 用。

所述的动物为各个生长阶段的猪、 鸡、 鸭、 鹅、 肉牛、 奶牛、 羊、 鱼、 虾、 狐、 貂或貉等动物。

所述的 β-酸单酯盐, 其在动物伺料中的添加剂量为 0.1〜500ppm, 优选剂量 为 0.5〜50ppm。

所述的动物伺料可以是全价配合伺料。

本发明的如式 1所示的 β-酸单酯盐对畜禽低毒或者无毒,最重要是稳 定性大 幅提高, 其比目前专利覆盖相关化合物有更高的稳定性 及更强的生长促进性能, 因此更适合作为伺料用生长促进剂, 在养殖行业具有非常好的应用前景。 附图说明:

图 1是 β-酸单乙酯鎂盐的 HPLC图谱;

图 2是 β-酸单乙酯钙盐的 HPLC图谱;

图 3是 β-酸单乙酯锌盐的 HPLC图谱;

图 4是 β-酸单乙酯铜盐的 HPLC图谱;

图 5是 β-酸单乙酯钴盐的 HPLC图谱;

图 6是 β-酸单乙酯锰盐的 HPLC图谱;

图 7是 β-酸镁盐的 HPLC图谱;

图 8是 β-酸钙盐的 HPLC图谱。 具体实施方式:

以下实施例是对本发明的进 步说明, 而不是对本发明的限制

-酸单酯合成

以下实施例中的 β -酸均购自美国斯丹纳酒花集团公司

1. Ρ-酸单乙酯(IST-010-005)制备操作过程

称取 50g P-酸 (121mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 力 B 12.2g三乙胺 ( 121mmol), 搅拌降温至 -5〜0°C。将 9.5g 乙酰氯(121mmol)溶于 80ml二氯甲 烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 2小时, HPLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 100ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 100ml 水洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 减压脱溶, 得到 59g油状产品, 即为 β-酸单乙酯, 收率 107%。

2. Ρ-酸单丙酯(IST-010-010)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺

( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 2.2g丙酰氯 (24.1mmol) 溶于 80ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。然后继续反应 1小时, HPLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 80ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 80ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 7g油状产品, 即为 β-酸单 丙酯, 收率 60%。

3. (5-酸单丁酯(IST-010-011 )制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 2.6g丁酰氯 (24.3mmol) 溶于 50ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 80ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 50ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 7g油状产品, 即为 β-酸单 丁酯, 收率 60%。

4. Ρ-酸单戊酯(IST-010-012)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol), 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 2.9g戊酰氯 (24.0mmol) 溶于 50ml二氯 甲烷,滴加到 β-酸溶液中,大约 1小时加完。反应完成后自然升温到室温,加 80ml 纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 50ml水洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干 燥, 脱溶, 得到 9g油状产品, 即为 β-酸单戊酯, 收率 74%。

5. (5-酸单庚酯(IST-010-014)制备操作过程

称取 lO.Og P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺

( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 3.6g庚酰氯 (24.2mmol) 溶于 20ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。然后继续反应 1小时, HPLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 80ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 80ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 l lg油状产品, 即为 β-酸单 庚酯, 收率 87%。

6. Ρ-酸单辛酯(IST-010-006)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 3.9g辛酰氯 (23.9mmol) 溶于 30ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 50ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 80ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 11.5g油状产品, 即为 β-酸 单辛酯, 收率 88%。

7. Ρ-酸单壬酯(IST-010-019)制备操作过程

称取 20g P-酸 (48.2mmol ), 溶于 40ml二氯甲烷中, 力 B 4.8g三乙胺 (48.2mmol), 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 12.8g壬酰氯 (72.4mmol)溶于 30ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 0.5小时加完。然后继续反应 1小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 50ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 50ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 28g油状产品, 即为 β-酸单 壬酯, 收率 104% (含有少量醋酸)。 8. P-酸单癸酯(IST-010-015)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 30ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 4.6g癸酰氯 (24.1mmol) 溶于 20ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 40ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 50ml水 洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 硅胶脱色, 脱溶, 得到 7g油状产品, 即为 β-酸单癸酯, 收率 51%。

9. Ρ-酸单十一酸酯(IST-010-016)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 4.9g ^—烷酰氯 (23.9mmol) 溶于 20ml 二氯甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监 控。反应完成后自然升温到室温, 力 B 40ml纯水, 搅拌, 分相。分出有机相, 50ml 水洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 10g油状产品, 即为 β- 酸单 ^一酸酯, 收率 69%。

10. P-酸单十二酸(月桂酸)酯(IST-010-017)制备操 过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 5.3g十二烷酰氯 ( 24.1mmol) 溶于 30ml 二氯甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监 控。反应完成后自然升温到室温, 力 B 40ml纯水, 搅拌, 分相。分出有机相, 50ml 水洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 12g油状产品, 即为 β- 酸单十二酸 (月桂酸) 酯, 收率 83%。

11. Ρ-酸单十四酸酯(IST-010-018)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 20ml二氯甲烷中, 加 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol), 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 5.8g十四烷酰氯 (23.5mmol) 溶于 50ml 二氯甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 1小时, TLC监 控。反应完成后自然升温到室温, 加 80ml纯水, 搅拌, 分相。分出有机相, 80ml 水洗三次, 分出有机相, 无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 14g油状产品, 即为 β- 酸单十四酸酯, 收率 93%。

12. Ρ-酸单棕榈酸酯(IST-010-007)制备操作过程 称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 50ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 将 6.6g棕榈酰氯 (24.1mmol) 溶于 50ml二 氯甲烷,滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。然后继续反应 1小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 50ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 无水硫 酸钠干燥, 脱溶, 得到 13g油状产品, 即为 β-酸单棕榈酸酯, 收率 82%。

13. Ρ-酸单硬脂酸酯(IST-010-025)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 30ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol), 搅拌降温至 -5 °C。 将 7.3g棕榈酰氯 (24.1mmol) 溶于 50ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 2小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 50ml纯水, 分相。 分出有机相, 无水硫酸钠干 燥, 脱溶, 得到 14g油状产品, 即为 β-酸单硬脂酸酯, 收率 85%。

14. Ρ-酸单苯甲酸酯(IST-010-009)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 50ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol), 搅拌降温至 -5 °C。 将 3.4g棕榈酰氯 (24.2mmol) 溶于 30ml二氯 甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 大约 1小时加完。 然后继续反应 3小时, TLC监控。 反应完成后自然升温到室温, 加 50ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 50ml水 洗 3次无水硫酸钠干燥, 脱溶, 得到 10g油状产品, 即为 β-酸单苯甲酸酯, 收率 80%。

15. Ρ-酸单 -010-002)制备操作过程

称取 lOg P-酸 (24.1mmol ), 溶于 30ml二氯甲烷中, 力 B 2.4g三乙胺 ( 24.1mmol) , 搅拌降温至 -5〜0°C。 取 3.7g三氯氧磷 (24.1mmol) 溶于 20ml二 氯甲烷, 滴加到 β-酸溶液中, 约 1小时加完。 继续反应 1小时 HPLC监控。 反 应完成后自然升温到室温, 加 80ml纯水, 搅拌, 分相。 分出有机相, 水洗三次, 分出有机相, 脱溶, 得到 9g棕黑色油状产品, 即得 β-酸单磷酸酯, 收率 75%。

上述 15个化合物的结构式如表 1所示 表 1 : 上述 15个化合物的结构式

表中的 R为异丙基、 仲丁基或异丁基。

实施例 2: P-酸单乙酯盐的合成

1. β-酸单乙酯镁盐制备过程

称取 6.1g P-酸单乙酯溶于 30ml 95%乙醇,搅拌冷却到 -10°C。滴加 100ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 1.8g硫酸镁, 溶于 100ml水中, 滴加到前述溶 液中。 加完后继续搅拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到淡黄色固体 5.6g, 即为 β- 酸单乙酯镁盐, 收率约 90%。

β -酸单乙酯镁盐的 HPLC条件: 色谱柱是 Wondasil C18 ( 250mm X 4.6mm, 5μηι) 柱; 流动相是乙腈 -1.4%磷酸水溶液 (85:15, v/v); 检测波长 315nm; 柱 温 25°C ; 进样量 2(^L; 流速 1.0ml/min。 分析图如图 1所示, 其中后 3个峰为 β -酸单乙酯镁盐。

2. β-酸单乙酯钙盐制备过程

称取 5.7g β-酸单乙酯溶于 25ml 95%乙醇, 搅拌冷却到 -10°C。 滴加 80ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 2.0 g氯化钙加到前述溶液中。 加完后继续搅 拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到淡黄色固体 5g, 即为 β-酸单乙酯钙盐, 收率约 84%。

β -酸单乙酯钙盐的 HPLC条件同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图 2所示, 其中后 3个峰为 β -酸单乙酯钙盐。

3. β-酸单乙酯锌盐制备过程

称取 8.5g β-酸单乙酯溶于 40ml 95%乙醇, 搅拌冷却到 -10°C。滴加 137ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 3.3g氯化锌, 加到前述溶液中。 加完后继续搅 拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到淡黄色固体 8.2g, 即为 β-酸单乙酯锌盐, 收率约 89%。

β-酸单乙酯锌盐的 HPLC条件同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图

3所示, 其中后 3个峰为 β-酸单乙酯锌盐。

4. β-酸单乙酯铜盐制备过程

称取 10.2g β-酸单乙酯溶于 50ml 95%乙醇,搅拌冷却到 -10°C。滴加 162ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 5.0g氯化铜, 溶于 20ml水中, 滴加到前述溶 液中。 加完后继续搅拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到墨绿色固体 9.8g, 即为 β- 酸单乙酯铜盐, 收率约 89%。

β -酸单乙酯铜盐的 HPLC条件同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图 4所示, 其中后 3个峰为 β -酸单乙酯铜盐。

5. β-酸单乙酯钴盐制备过程 称取 6.2 g p-酸单乙酯溶于 60ml 95%乙醇, 搅拌冷却到 -10°C。滴加 100ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 4.2g六水合二氯化钴加到前述溶液中。 加完后 继续搅拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到淡黄色固体 5.8g, 即为 β-酸单乙酯钴盐, 收率约 88%。

β-酸单乙酯钴盐的 HPLC条件同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图

5所示, 其中后 3个峰为 β-酸单乙酯钴盐。

6. β-酸单乙酯锰盐制备过程

称取 10.5g β-酸单乙酯溶于 50ml 95%乙醇,搅拌冷却到 -10°C。滴加 180ml 3% KOH水溶液, 约 0.5h滴完。 称取 4.1g氯化锰, 溶于 30ml水中, 滴加到前述溶 液中。 加完后继续搅拌 lh。 过滤, 水洗, 干燥, 得到咖啡色固体 10.1g, 即为 β- 酸单乙酯锰盐, 收率约 91%。

β-酸单乙酯锰盐的 HPLC条件同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图 6所示, 其中后 3个峰为 β-酸单乙酯锰盐。

7. β-酸镁盐制备过程

8. 称取 5.0g贝塔酸溶于 15ml乙醇。 称取 1.8gKOH溶于 20ml水中, 加入贝塔 酸溶液中, 搅拌 lh。称取 5.0g六水氯化镁, 溶于 100ml水中, 滴加到贝塔酸 碱液中。 逐渐形成类白色固体。 过滤, 水洗, 干燥, 得到白固体 5.5g, 收率 约 104%。 HPLC条件同 "β-酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图 7所示, 其中后 3个峰为 β-酸镁盐。

9. β-酸钙盐制备过程

称取 5.0g贝塔酸溶于 15ml 95%乙醇。 称 1.9g KOH溶于 32ml水, 滴加到贝 塔酸中, 搅拌成钾盐。 称取 2.7g氯化钙, 溶于 100ml水中, 滴加到前述溶液中, 搅拌 lh。 过滤, 水洗, 凉干, 得到淡黄色固体 3.1g, 收率约 56%。 HPLC条件 同 " β -酸单乙酯镁盐制备过程", 分析图如图 8所示,其中后 3个峰为 β-酸钙盐。

本实施例所用到的 β-酸单乙酯是实施例 1中制备的 β-酸单乙酯。

实施例 3: Ρ-酸单酯或 /和盐系列产品高温稳定性试验

将 β酸和实施例 1和 2制备的不同的 β酸酯及 β-酸单乙酯盐分别用玉米芯粉配 制为终浓度质量分数 2%的预混剂。 称取待测试样 (预混剂) 于坩埚中, 平铺, 于 100°C烘箱中处理 17小时后, 测试预混剂中相应产品含量的变化。 测试方法: 称取 l .Og样品 (每个样平行制备 3份) 于具塞锥形瓶中加乙醇 50ml, 超声提取 10min, 用滤纸过滤, 滤液转移至 50ml容量瓶中, 乙醇定容至 刻度, 摇匀, 取滤液经 0.45μηι微孔滤膜过滤, 进行 HPLC分析。色谱条件如下: 色谱柱是 Wondasil C 18 (250mmx4.6mm, 5μηι) 柱; 流动相是乙腈 -1.4%磷酸水 溶液(85: 15, v/v);检测波长 315nm; 柱温 25 °C ;进样量 20μΙ^;流速 1.0ml/min。

试验结果如表 2显示, 所有 β酸单酯类衍生物稳定性有提高但是仍不理想 所有 β酸盐类仍不稳定。 β-酸单乙酯镁盐在 100°C加热 17小时后, 其中主要成分 的含量未发生较大变化,由此说明 β-酸单乙酯镁盐在 100°C的情况下稳定性较好, 说明 β-酸的单乙酯镁盐是基本稳定的。

表 2: β-酸单酯或 /和盐系列产品在 100°C加热 17h时主要成分的变化情况 化合物样品或其编号 处理前含量 (%) 100°C 17h含量 (%) β-酸单乙酯镁盐 2.0 1.888258

β-酸 2.0 0

IST-010-005 2.0 0.9%

IST-010-002 2.0 0

IST-010-010 2.0 0.82%

IST-010-017 2.0 0.83%

IST-010-016 2.0 0.88%

IST-010-018 2.0 0.35%

IST-010-009 2.0 0.53%

IST-010-011 2.0 0.83%

IST-010-006 2.0 0.73%

IST-010-007 2.0 0.75%

IST-010-002 2.0 0% β-酸 Mg盐 2.0 0.26% β-酸 Ca盐 2.0 0 实施例 4: P-酸单乙酯盐系列产品高温稳定性试验

将试验制备的 β-酸单乙酯盐系列产品用玉米芯粉配制为终浓 度质量分数约 2%的预混剂。 称取待测试样 β-酸单乙酯盐系列样品 (预混剂) 于坩埚中, 平铺, 于 60°C或 100°C烘箱中处理不同时间后, 称取 l .Og样品 (每个样平行制备 3份) 于具塞锥形瓶中加乙醇 50ml, 超声提取 10min, 用滤纸过滤, 滤液转移至 50ml 容量瓶中, 乙醇定容至刻度,摇匀,取滤液经 0.45μηι微孔滤膜过滤,进行 HPLC 分析。 色谱条件如下: 色谱柱是 Wondasil C 18 (250mm*4.6mm, 5μηι) 柱; 流动 相是乙腈 -1.4%磷酸水溶液(85: 15, v/v); 检测波长 315nm; 柱温 25 °C ; 进样量 20μ ^, 流速 1.0ml/min。 稳定性结果见表 3

表 3 : 不同 β-酸单乙酯盐的高温稳定性试验

从表 3可以看出,本发明的 β-酸单乙酯盐在 60°C加热 20h后,其中主要成份 的含量都没有发生较大变化, 由此说明 β-酸单乙酯盐在 60°C的情况下稳定性较 好。 本发明的 β-酸单乙酯盐中除了 β-酸单乙酯钴盐在 100°C加热 20h后, 其中主 要成份的含量有较大幅度的降低之外, 其他 β-酸单乙酯盐都没有较大变化, 甚至 加热 40h也未发生较大变化, 由此说明本发明的 β-酸单乙酯盐中除了 β-酸单乙酯 钴盐在 100°C的情况下稳定性较好。

综上所述, 本发明的 β-酸单乙酯盐是基本稳定的。

实施例 5: Ρ-酸单酯盐在猪料中的应用效果

60头体重相近的 67日龄杜大长三元杂瘦肉型小猪随机分为 6组, 每组 10 头。 按表 4每组添加不同种类或剂量的 β-酸单乙酯盐。 试验期自由采食和饮水。 试验期共 14天, 试验期 β-酸单乙酯钙盐和 β-酸单乙酯镁盐试验组在试验猪的增 重和料肉比方面均有显著改善。 分组及结果见表 4及表 5。

15 表 4: 试验动物分组及添加剂用法、 用

-: 表示不添加 β-酸单酯盐的空白对照。 表 5 : β-酸单酯盐在猪料中的应用的试验结果

实施例 6: P-酸单酯盐在鸡料中的应用效果

250羽 1 日龄健康、 生长状态相同且体重相近的快大黄羽肉鸡 (母苗)按表 6随机分成 5个处理组,每组 50羽,并分别在每组中添加不同剂量的 β-酸单乙酯 镁盐或 β-酸。 试验期笼养, 自由采食和自由饮水。 试验期共 30天, 试验期 β-酸 单乙酯镁盐试验组在试验鸡的增重和料肉比方 面均有显著改善,且相同剂量的 β- 酸单乙酯镁盐较 β-酸对动物的生产性能改进更明显 (表 7)。

表 6: 试验动物分组及添加剂用法、 用量

表示不添加 β-酸单酯盐或 β-酸的空白对照。

7 : β-酸单酯盐在鸡料中的应用的试验结果

别 初重 (g ) 存活率(%) 平均增重 (g ) 耗料( kg ) 平均日增重 (g ) 料肉比

1 40.0 100 74 1 77.3.2 24.70 2.087

2 40.0 100 744 73.88 24.80 1.986

3 39.8 100 769 73.97 25.63 1.924

4 40 100 77 1 74.59 25.70 1.935

5 39 100 788 73.2 1 26.27 1.858