技术领域

本发明涉及与糖尿病相关的药物领域。 具体而言， 本发明涉及对糖尿病 有治疗作用的在异头位含有烷基的苯基 C-葡萄糖苷结构的 2型钠葡萄糖共 转运子 (SGLT2)抑制剂及其制备方法， 以及含有它们的药物组合物。 背景技术

全球糖尿病患者目前大约有 1.7亿左右， 其中绝大多数为 II型 （即非胰岛 素依赖型）糖尿病患者。 目前在临床使用的抗糖尿病药物主要有二曱双 胍类、 磺酰脲类、 胰岛素类、噻唑烷二酮类、 α-葡糖苷酶抑制剂类和二肽基肽酶 -IV 抑制剂类药物，这些药物具有良好的治疗效果 ，但长期治疗存在安全性问题， 如： 肝毒性， 部分药物尚有体重增加等诸多问题。

2型钠葡萄糖共转运子 (SGLT2)是近年来发现的治疗糖尿病的新靶点。 SGLT2主要分布在肾脏近端小管， 其作用是吸收尿中的葡萄糖， 并将其返回 到血液中， 因此抑制 SGLT2就能够降低血液中葡萄糖的浓度， 这个方法通过 与以往不同的途径降低了血糖水平。 当 SGLT2功能受阻时， 尿液中将分泌更 多的葡萄糖， 这将有助于糖尿病患者保持正确的血糖水平。 由于 SGLT2抑制 剂不介入葡萄糖代谢， 它可以作为血糖控制主流方法的补充手段。

中国专利 CN200610093189.9公开了下列结构的化合物作为 SGLT2抑制 剂：

其中， Α为 0, S, NH, (CH ₂ ) _n , n = 0-3。

中国专利 CN200380110040.1公开了下列结构的化合物作为 SGLT2抑制 剂： 其中， A为共价键， O, S, NH, (CH ₂ ) _n , n = l-3。

中国专利 CN200480006761.2公开了下列结构的化合物作为 SGLT2抑制 剂：

其中

发明概述

本发明的一个目的是克服现有技术的缺点和不 足，提供一种具有良好活 性的 SGLT2抑制剂， 该 SGLT2抑制剂为具有通式 I的化合物或其药学上可 接受的盐或前药酯。

本发明的另一个目的是提供制备具有通式 I的化合物或其药学上可接受 的盐或前药酯的方法。

本发明的再一个目的是提供含有通式 I的化合物或其药学上可接受的盐 或前药酯作为有效成分， 以及一种或多种药学上可接受的载体、 赋形剂和 / 或稀释剂的药用组合物， 及其在治疗糖尿病中的用途。

本发明提供的异头位含烷基的苯基 C-葡萄糖苷类衍生物是新型的 SGLT2抑制剂，这些抑制剂为制备进一步可以用� ��治疗糖尿病，特别是非胰 岛素依赖型糖尿病的药物打下了基础。 发明

本发明提供了一种 (I)所示的化合物

其中，

R ¹ 选自 d-C ₅ 的烷基， 所述烷基任选地被一个或者多个选 F、 Cl、 Br、 I 和 OH的基团取代；

R ² 和 R ³ 独立选 |] H、 OH、 d-C ₅ 的烷基、 F、 Cl、 Br、 I、 CN、 N0 ₂ 、 CF ₃ 、 CHF ₂ 、 CH ₂ F、 OR ⁸ 、 SMe和含 3-5个碳原子的环烷基， 其中 R ⁸ 选自 d-C ₅ 的烷 基， 所述烷基或者环烷基任选地被一个或多个选自 F和 C1的原子取代；

R ⁴ 和 R ⁵ 独立选 H、 C _r C ₅ 的烷基、 含 3-5个碳原子的环烷基和 OR ⁸ , 其 中 R ⁸ 选自 C _r C ₅ 的烷基或含 3-5个碳原子的环烷基，所述烷基或者环烷基任 选 地被一个或多个选自 F和 C1的原子取代；

R ⁶ 和 R ⁷ 独立选自 H和 C _r C ₅ 的烷基， 或者 R ⁶ 和 R ⁷ 与它们连接的碳原子一起 形成含 3-5个碳原子的环烷基。

优选地， 在通式 (I)所示的化合物中，

R ¹ 选自 d-C ₃ 的烷基，所述烷基任选地被一个或者多个 选自 F和 OH的基团 取代；

R ² 和 R ³ 独立选 H、 OH、 d-C ₃ 的烷基、 F、 Cl、 CN、 N0 ₂ 、 CF ₃ 、 OR ⁸ 、 SMe和环丙基， 其中 R ⁸ 选自 C _r C ₃ 的烷基， 所述烷基或者环丙基任选地被一个 或多个 F原子取代；

R ⁴ 和 R ⁵ 独立选 H、 d-C ₃ 的烷基、 环丙基和 OR ⁸ , 其中 R ⁸ 为 d-C ₃ 的烷基 或环丙基， 所述烷基或者环丙基任选地被一个或多个 F原子取代； R ⁶ 和 R ⁷ 独立选自 11和 i -C ₃ 的烷基， 或者 R ⁶ 和 R ⁷ 与它们连接的碳原子 形成环丙基。

更优选地， 通 (I)所示的化合物选自以

上述路线 ttig试剂） III 反应后再与 TBDPSCl反应， 最终转化为 IV； 化合物 IV经过 Wacker氧化转化 为 V； 化合物 V与芳基锂化合物 VI反应得到化合物 VII； 化合物 VII中的叔丁 基二曱基硅烷基（TBDPS)保护基用四丁基氟化铵 （TBAF)处理除去得到 化合物 VIII； 化合物 VIII经过酸催化环化得到化合物 IX, 优选地所述酸为三 氟乙酸、 曱磺酸、 三氟曱橫酸、 硫酸、 HC1等； 化合物 IX用二氯二氰对苯醌 (DDQ)脱去其中的对曱氧基苄基（PMB)保护基， 得到目标化合物 I； 其 中 -R ⁷ 的定义如以上所述， R ⁹ 和 R ^1G 独立选自 H和 C _r C ₄ 的烷基。

n-Bu ₃ SnH/

AIBN/

上述路线中的 R ⁹ R ^1G CH = R ¹ ; 化合物 V用强碱处理后再与 Tf ₂ 0反应， 得 到化合物 X, 优选地所述强碱为二异丙基氨基锂（LDA ) ； 化合物 X与芳基 硼酸 XI在 Pd催化剂催化下偶合得到化合物 XII , 优选地所述 Pd催化剂为 Pd(PPh ₃ ) ₄ ; 化合物 XII用 1 ₂ 处理而发生环化得到化合物 XIII； 化合物 XIII用 «-Bu ₃ SnH和偶氮二异丁腈（AIBN ) 处理脱去碘， 得到化合物 XIV； 化合物 XIV用 DDQ处理脱去 PMB保护基， 得到化合物 I； 其中的 -R ⁷ 的定义如以上 所述， R ⁹ 和 R ^1G 独立选自 H和 C _r C ₄ 的烷基。

本发明所述式 I化合物的药学上可接受的前药酯， 包括分子中的任意一 个或多个羟基与乙酰基、 特戊酰基、 各种磷酰基、 氨基曱酰基、 烷氧曱酰基 等形成的酯。

本发明所述式 I的化合物，可以通过与一种或多种药学上可� �受的载体、 赋形剂和 /或稀释剂混合来制成药物组合物。该药物组� �物可以制成固体口服 制剂、 液体口服制剂和注射剂等剂型。 所述固体及液体口服制剂包括： 普通 片剂、 分散片、 咀嚼片、 包衣片、 颗粒剂、 干粉剂、 胶嚢剂和溶液剂。 所述 的注射剂包括： 小针、 大输液和冻干粉针等。

根据本发明的药物组合物包含药学上可接受的 辅料， 所述药学上可接受 的辅料选自： 填充剂、 粘合剂、 崩解剂、 润滑剂、 助流剂、 泡腾剂、 矫味剂、 防腐剂、 包衣材料、 表面活性剂、 pH调节剂和稳定剂等。

优选地， 所述的填充剂包括乳糖、 蔗糖、 糊精、 淀粉、 预胶化淀粉、 甘 露醇、 山梨醇、 磷酸氢钙、 硫酸 4弓、 碳酸 4弓和微晶纤维素中的一种或几种； 所述的粘合剂包括 糖、 淀粉、 聚维酮、 羧曱基纤维素钠、 羟丙曱纤维素、 羟丙纤维素、 曱基纤维素、 聚乙二醇、 药用乙醇和水中的一种或几种； 所述 的崩解剂包括淀粉、 交联聚微酮、 交联羧曱基纤维素钠、 低取代羟丙基纤维 素、 羧曱基纤维素钠、 泡腾崩解剂中的一种或几种； 所述润滑剂包括硬脂酸 镁； 所述助流剂包括滑石粉； 所述矫味剂包括香精和阿司帕坦； 所述表面活 性剂包括泊洛沙姆、 十二烷基硫酸钠、 吐温 80; 所述 pH调节剂包括枸橼酸 和氢氧化钠和所述稳定剂包括枸橼酸等。

本发明所述通式 I化合物具有 SGLT2酶的抑制作用， 可作为有效成分 用于制备糖尿病方面的治疗药物。 本发明所述通式 I化合物的活性是通过体 内降糖模型验证的。

本发明的通式 I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。 例如 每天服用的剂量约在 1 mg- 1000 mg/人范围内， 分为一次或数次给 药。 实际服用本发明通式 I化合物的剂量可由医生根据有关的情况 来决定。 这些情况包括： 被治疗者的身体状态、 给药途径、 年龄、 体重、 对药物的个体反应， 症状的严重程度等。 实施发明的最佳方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。 需要说明的是， 下述实施例 仅是用于说明， 而并非用于限制本发明。 本领域技术人员根据本发明的教导 所做出的各种变化均应在本申请权利要求所要 求的保护范围之内。 实施例 1

(2S,3R, ,5S,6R)-2-[4-氯 -3-(4-乙氧基苄基)苯基] -6-羟曱基 -2-曱基 -2,3,5,6-四 氢 -2H-吡喃 -3,4,5-三醇 (1-1)

合成方法 A:

上述合成路线中的化合物 1- 1和 ΙΠ-1〜： IX-1均是相应的 I和 III~IX所代 表的化合物中的一个。

1. 化合物 IV- 1的合成

一只 100 mL的干燥圓底烧瓶中加入 6.61 g化合物 II , 以 20 mL干燥的

THF 溶解， 烧瓶用氮气吹扫后迅速用橡皮塞密封。 烧瓶在 -10 °C的冰盐浴中 冷却， 用注射器慢慢滴加 25 mL 1.0 M的化合物 ΠΙ-1的 THF溶液。 滴加完 毕后， 所得反应混合物在室温下搅拌过夜。 烧瓶再次用冰水浴冷却， 用注射 器慢慢滴加 2.75 g TBDPSC1 (叔丁基二苯基氯硅烷）溶于 2 mL干燥 THF制 成的溶液， 滴加完毕后所得溶液在室温下搅拌 2小时。

反应混合物小心倾倒到 300 mL含有冰块的饱和 NH ₄ C1溶液中， 搅拌， 用 50 mL X 3的二氯曱烷萃取。 合并萃取液， 用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠 干燥， 而后在旋转蒸发仪上蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合 物 IV- 1的纯品， 无色油状物， ESI-MS, m/z = 897 ([M+H] ⁺ )。

2. 化合物 V- 1的合成

一只 100 mL的圓底烧瓶中加入上述制备的化合物 IV-1 (7.27 g) , 以 50 mL N,N-二曱基曱酰胺（DMF )溶解， 室温下搅拌， 而后加入 5 mL水、 0.10 g CuCl ₂ 和 0.15 g PdCl ₂ , 所得混合物在 0 ₂ 的气氛下（气球）搅拌 24小时， 此 时薄层色语 ( TLC )显示反应完成。

反应混合物抽滤， 滤液倾倒到 300 mL食盐水中， 而后用 50 mL X 3的二 氯曱烷萃取。 合并萃取液， 用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋 转蒸发仪上蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合物 V-1的纯品， 无色油状物， ESI-MS, m/z = 913 ([M+H] ⁺ )。

3. 化合物 IX- 1的合成

一只 100 mL的干燥圓底烧瓶中加入 3.26 g (2-氯 -5-溴苯基 )(4-乙氧基苯 基)曱烷， 以 20 mL干燥的四氢呋喃 （THF )溶解， 氮气吹扫后用橡皮塞封 口。 烧瓶用 -78 °C的液氮 -乙醇冷却， 开动电磁搅拌， 而后用注射器慢慢滴加 10 mL 1.0 M的《-BuLi正己烷溶液。 滴加完毕后反应混合物在 -78 °C搅拌 1 小时， 而后升温至 -20°C , 再用注射器慢慢滴加上述合成的 V-1 (6.95 g)溶解 到 5 mL干燥的 THF中制成的溶液， 滴加完毕后， 所得混合物在室温下搅拌 1小时。

室温下用注射器往上述反应混合物中慢慢加入 10 mL 1.0 M的 TBAF的 THF溶液， 加完后室温下搅拌 5小时。 而后在冰水冷却下用注射器往烧瓶中 慢慢加入 9.6 g MsOH (曱磺酸） 。 所得混合物在室温下搅拌过夜。

反应混合物倾倒到 300 mL食盐水中，而后用 50 mL X 3的二氯曱烷萃取。 合并萃取液， 用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋转蒸发仪上蒸 去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合物 IX-1 的纯品， 白色固体， ESI-MS, m/z = 903 ([M+H] ⁺ )。

4. 化合物 1-1的合成

在一只 100 mL的圓底烧瓶中加入上述制备的化合物 IX-1 (3.85 g),以 40 mL二氯曱烷溶解， 室温下搅拌， 而后依次加入 9.00 g DDQ和 4 mL水， 所 得混合物在室温下搅拌过夜后再升温回流 3小时。 此时 TLC显示反应完成。

反应混合物用 200 mL二氯曱烷稀释， 而后用 100 mL 2的碳酸氢钠饱 和溶液洗涤， 再用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋转蒸发仪上 蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合物 1-1 的纯品， 白色泡沫状 固体， ESI-MS, m/¾ = 423 ([M+H]+)。 合成方法 B:

上述合成路线中的化合物 X-1~XIV-1均是相应的 X和 XIV所代表的化 合物中的一个。

1. 化合物 X- 1的合成

一只 100 mL的干燥圓底烧瓶中加入 1.01 g干燥的 -Pr ₂ NH和 10 mL干燥 的 THF。 烧瓶用氮气吹扫后迅速用橡皮塞封口， 而后置于 -78 °C的液氮 -乙醇 中冷却， 开动电磁搅拌。 用注射器慢慢往烧瓶中逐滴加入 6.2 mL 1.6 M的 w-BuLi的正己烷溶液， 滴加完毕后所得溶液在该温度下搅拌 1小时。 而后再 用注射器逐滴加入 9.13 g 干燥的 V- 1溶于 10 mL干燥的 THF制成的溶液。 滴 加完毕后， 所得反应混合物在 -78 °C下继续搅拌 1 小时， 而后再用注射器慢 慢滴加 2.82 g Tf ₂ 0溶于 2 mL干燥的 THF中制得的溶液。滴加完毕后，所得反 应混合物慢慢升温至室温， 继续搅拌 1小时。

反应混合物倾倒到冷却的 300 mL食盐水中，而后用 50 mL 3的二氯曱 烷萃取。 合并萃取液， 用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋转蒸 发仪上蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合物 X-1的纯品， 无色 油状物， ESI-MS, m/z = 1045 ([M+H] ⁺ )„

2. 化合物 XII- 1的合成

一只 100 mL的圓底烧瓶中加入上步制备的化合物 X- 1 (9.09 g)、 2.81 g 4- 氯 -3-(4-氯苄基)苯基硼酸、 2.12 g碳酸钠、 0.23 g Pd(PPh ₃ ) ₄ 、 40 mL曱苯、 20 mL水和 10 mL乙醇， 所得混合物在氮气气氛中回流过夜， 此时 TLC显示反应 完成。

反应混合物冷却后， 倾倒到 300 mL饱和食盐水中， 用 100 mL 3的二 氯曱烷萃取。 合并萃取液， 用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋 转蒸发仪上蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得到化合物 XII-1的纯品， 白色固体， ESI-MS, m/z = 1 141 ([M+H]+)。

3. 化合物 ΧΠΙ- 1的合成

一只 100 mL的干燥圓底烧瓶中加入上步制备的 XII- 1 (7.25 g) , 以 30 mL 干燥的二氯曱烷溶解， 室温下搅拌， 而后加入 2.00 g l ₂ , 室温下继续搅拌过 夜。

反应混合物倾倒到 300 mL饱和食盐水中，用 50 mL X 3的二氯曱烷萃取。 合并萃取液， 依次用 10%的 Na ₂ S ₂ 0 ₃ 和饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 而后在旋转蒸发仪上蒸去溶剂。所得残余物用 柱层析纯化，得到化合物 XIII- 1 的纯品， 白色固体， ESI-MS, m々= 1029 ([M+H]+)。

4. 化合物 XIV- 1的合成

一只 100 mL的干燥圓底烧瓶中加入上一步制备的化合物 XIII-1 (3.86 g)、 3.0 g «-Bu ₃ SnH、 0.10 g AIBN (偶氮二异丁腈 )和 50 mL干燥的曱苯， 所 得混合物在氮气气氛中緩' f曼回流 3小时， 再加入 0.10 g AIBN, 继续回流 3 消失。 此时 TLC显示反应完成。

反应混合物冷却后， 用 200 mL二氯曱烷稀释， 用饱和食盐水洗涤， 无水 硫酸钠干燥， 而后在旋转蒸发仪上蒸去溶剂。 所得残余物用柱层析纯化， 得 到化合物 XI V- 1的纯品， 白色固体， ESI-MS, m/z = 903 ([M+H] ⁺ )。

5. 化合物 1-1的合成

按照方法 A中第 4步的操作合成 1-1。白色泡沫状固体， ESI-MS, m/z = 423 ([M+H] ⁺ )。 实施例 2-18

可以理解的是， 使用实施例 1 中的方法 A和方法 B , 改变 -R ⁷ , 可以得 到下表所列的化合物。 - -

IS UO/ZlOZ lD/lDd 809W0/£I0Z OAV - -

IS UO/ZlOZ lD/lDd 809 /£I0Z OAV 实施例 19 普通片剂

用量 /片

实施例 1样品 10 mg

微晶纤维素 80 mg

预胶化淀粉 70 mg

聚维酮 6 mg

羧曱基淀粉钠 5 mg

硬脂酸镁 2 mg

滑石粉 2 mg

将实施例 1样 ^过 80目筛，

品、 预胶化淀粉和微晶纤维素充分混合均匀， 加入 10% (重量 /体积） 聚维 酮水溶液混合， 制软材， 过筛， 制湿颗粒， 于 55°C干燥。 将羧曱基淀粉钠， 硬脂酸镁和滑石粉加到上述的颗粒中， 测定中间体含量， 压片， 包装。 实施例 20 錄片

用量 /片

实施例 2样品 10 mg

乳糖 80 mg

预胶化淀粉 70 mg

羟丙曱纤维素 6 mg

交联聚维酮 5 mg

硬脂酸镁 4 mg

将实施例 2样 ^过 80目筛，

品、 预胶化淀粉和乳糖充分混合均匀， 加入 1% (重量 /体积）羟丙曱纤维素 水溶液混合， 制软材， 过筛， 制湿颗粒， 于 55°C干燥。 将交联聚维酮和硬脂 酸镁加到上述的颗粒中， 测定中间体含量， 压片， 包装。 实施例 21 咀嚼片

用量 /片

实施例 4样品 10 mg

甘露醇 100 mg

微晶纤维素 30 mg 乳糖 50 mg

聚维嗣 6m g

阿司帕坦 5 mg

香精 2mg

硬脂酸镁 1 mg

将实施例 4样品过 80目筛， 辅料过 60目筛。 按处方量称取实施例 4样 品、 聚维酮、 阿司帕坦和香精先混合均匀， 再依次与甘露醇、 微晶纤维素和 乳糖充分混合均匀， 最后加入硬脂酸镁混合均匀， 测定中间体含量， 压片， 包装。 实施例 22 胶嚢

用量 /粒

实施例 5样品 10 mg

乳糖 80 mg

磷酸氢钙 20 mg

羟丙纤维素 3 mg

交联象曱纤维素钠 6mg

硬脂酸镁 2mg

滑石粉 1 mg

将实施例 5样品过 80目筛， 其它辅料过 60目筛。 按处方量称取实施例 5样品、 磷酸氢钙、 交联羧曱纤维素钠和乳糖充分混合均匀， 加入 2% (重 量 /体积）羟丙纤维素水溶液混合， 制软材， 过筛， 制湿颗粒， 于 55°C干燥。 将硬脂酸镁和滑石粉外加到上述的颗粒中，测 定中间体含量，装入 3号胶嚢， 包装。 实施例 23 注射液

用量 /50mL

实施例 8样品 10 mg

枸橼酸 100 mg

NaOH 适量（调 pH 4.0-6.0 )

活性炭 适量

注射用水 50 mL 将枸橼酸加入 40ml注射用水中， 搅拌溶解后， 再加入实施例 8样品， 微热使溶解， 调 pH值为 4.0-6.0, 加入基于整个注射液的重量计 1%的活性 碳， 室温下搅拌 20分钟， 测定 pH值。 滤过， 脱碳， 补加注射用水至全量。 按每安瓿 5毫升分装， 充氮， 封口。 于 121 °C灭菌 30分钟， 即得注射液。 实施例 24 注射液

用量 /50mL

实施例 9 10 mg

枸橼酸 100 mg

磷酸二氢钠 30mg

注射用水 50 mL

将枸橼酸加入 40ml注射用水中， 搅拌溶解后， 再加入实施例 8样品和 磷酸二氢钠， 微热使溶解， 调 pH值为 3.0-5.0, 加入基于整个注射液的重量 计 1%的活性碳， 室温下搅拌 20分钟， 测定 pH值。 滤过， 脱碳， 补加注射 用水至全量。 按每安瓿 2毫升分装， 充氮， 封口。 于 121 °C灭菌 30分钟， 即 得注射液。 实施例 25 冻干制剂

用量 /lOOmL

实施例 10 3-0g

泊洛沙姆 l.Og

氢氧化钠 0.2g

枸橼酸 适量（ QS )

甘露醇 26.0g

乳糖 23.0g

注射用水 lOOmL

制备工艺： 取注射用水 80mL, 按处方量加实施例 10样品、 甘露醇、 乳 糖和泊洛沙姆搅拌使溶解后， 加枸橼酸或氢氧化钠调节 pH至 6.0 - 8.0, 补 加注射用水至 100mL。 加入 0.5g活性炭， 在 30°C下搅拌 20分钟， 脱炭， 采 用微孔滤膜过滤除菌， 滤液按每支 lmL进行分装， 预冻 2小时后， 冷冻下 减压干燥 12小时， 至样品温度到室温后， 再干燥 5小时， 制得白色疏松块 状物， 封口即得。 实施例 26 颗粒剂

用量 /100袋

实施例 11样品 30.0g

乳糖 55.0g

甘露醇 14.0g

阿司帕坦 0.05g

香精 0.05g

2 %羟丙曱纤维素

(纯水配制 ) ^QS

制备工艺： 将实施例 11样品过 80目筛， 辅料过 60目筛。 称取处方量 乳糖、 甘露醇、 阿司帕坦、 香精与实施例 11样品充分混合， 再加入 2 % (重 量 /体积）羟丙曱纤维素水溶液制软材， 16目筛制粒， 55°C干燥， 14目筛整 粒， 测定中间体含量及水分， 包装， 共制得 100袋颗粒剂。 实施例 27

下表 1 中列出的实施例 1-2、 4-5、 8-12、 14和 16-18的样品以 1% (重 量 /体积）羧曱基纤维素钠配制成 5 mg/mL浓度的混悬液， 给药剂量为 0.2 mL/20g体重， 相当于 10 mg/kg剂量。

健康 ICR小鼠，雌雄各半，体重 20-24 g,符合一级标准。动物禁食 16h, 给药后 2h腹腔注射 2g/kg的葡萄糖盐水溶液（ Dapagliflozin给药后 1.5h注射 葡萄糖） ， 于造模后 0.5h、 1.0h、 1.5h、 2.5h和 3h定时使用毛细管自小鼠球 后静脉丛取血， 离心分离血清， 用葡萄糖氧化酶法测定各时间点血清葡萄糖 含量（结果见表 1 ) 。

表 1 葡萄糖氧化酶法测定各时间点血清葡萄糖含量 结果

3h血糖 剂量 0.5h血糖值 1.5h血糖值 2h血糖值 2.5h血糖值 组别

(mg/kg) (mg/dl) (mg/dl) (mg/dl) (mg/dl) 值 模型 - 441.1±51.5 291.1±42.6 189.2±24.3 130.6±12.6

Dapagliflozin 10 243.2±32.1 132.4±25.5 96.3±26.2 81.4±22.3 实施例 1样品 10 241.2±42.5 143.3±14.3 94.2±21.6 76.2±12.8 实施例 2样品 10 290.2±43.5 171.2±37.2 107.2±21.6 72.2±24.2 实施例 4样品 10 297.2±31.4 167.2±22.5 112.3±15.2 82.2±12.3 73.5±12.1 实施例 5样品 10 159.2±41.0 130.2±14.2 103.1±10.1 70.1±11.1 65.1±11.4 实施例 8样品 10 292.3±34.2 201.4±23.0 140.2±21.1 103.1±12.4 80.1±12.3 实施例 9样品 10 220.2±32.4 165.1±22.1 113.4±15.5 91.1±14.5 70.2±21.0 实施例 10样品 10 201.1±33.2 155.2±24.1 138.4±21.3 91.0±11.8 70.1±14.1 实施例 11样品 10 210.3±31.3 181.1±34.5 120.1±22.7 96.0±12.7 67.0±15.2 实施例 12样品 10 295.1±29.2 190.1±24.1 107.3±21.3 79.8±21.8 65.1±12.7 实施例 14样品 10 152.2±22.5 147.2±28.2 92.2±11.3 69.1±20.7 65.1±12.3 实施例 16样品 10 199.3±23.2 160.1±11.5 133.4±12.7 73.4±22.2 63.1±13.4 实施例 17样品 10 248.4±43.4 181.1±21.7 140.1±22.3 103.1±11.7 77.1±12.1 实施例 18样品 10 252.1±34.5 151.3±24.6 125.2±33.3 121.1±11.3 71.2±11.5 以上结果表明，各给药均能显著降低葡萄糖引 起的小鼠血糖耐 受量。