In US 3,452, 136, Dissertation R. U. Meyer, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Dissertation V. Leitenberger, Universität Stuttgart, Deutschland 1991, Synthesis (1992), (10), 1025-30, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 (1992), (1), 123-30, J. Chem.

Soc., Chem. Commun. (1991), (10), 744, Synthesis (1991), (5), 409-13, J. Chem.

Soc., Chem. Commun. (1991), (5), 275-7, J. Antibiot. (1985), 38 (11), 1462-8, J.

Antibiot. (1985), 38 (11), 1453-61, wird der Naturstoff Biphenomycin B als antibakteriell wirksam beschrieben. Die Struktur von Biphenomycin B entspricht nachfolgender Formel (I), wobei Rl, R2, R3, R4, R7, R8 und R9 gleich Wasserstoff sind, R3 gleich 3-Amino-2-hydroxy-prop-1-yl ist und C (0) NR5R6 durch Carboxyl (COOH) ersetzt ist. Teilschritte der Synthese von Biphenomycin B werden in Synlett (2003), 4,522-525 beschrieben.

Chirality (1995), 7 (4), 181-92, J. Antibiot. (1991), 4} (6), 674-7, J. Am. Chem. Soc.

(1989), 111 (19), 7323-7, J. Am. Chem. Soc. (1989), 111 (19), 7328-33, J. Org. Chem.

(1987), 52 (24), 5435-7, Anal. Biochem. (1987), 165 (1), 108-13, J. Org. Chem.

(1985), 50 (8), 1341-2, J. Antibiot. (1993), 46 (3), C-2, J. Antibiot. (1993), 46 (1), 135-40, Synthesis (1992), (12), 1248-54, Appl. Environ. Microbiol. (1992), 58 (12), 3879-8, J. Chem. Soc., Chem. Commun. (1992), (13), 951-3 beschreiben einen struk- turell verwandten Naturstoff, Biphenomycin A, der am Makrozyklus eine weitere Substitution mit einer Hydroxygruppe aufweist.

Die Naturstoffe entsprechen hinsichtlich ihrer Eigenschaften nicht den Anforde- rungen, die an antibakterielle Arzneimittel gestellt werden. Auf dem Markt sind zwar

strukturell andersartige antibakteriell wirkende Mittel vorhanden, es kann aber regelmäßig zu einer Resistenzentwicklung kommen. Neue Mittel für eine gute und wirksamere Therapie sind daher wünschenswert.

Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, neue und alternative Ver- bindungen mit gleicher oder verbesserter antibakterieller Wirkung zur Behandlung von bakteriellen Erkrankungen bei Menschen und Tieren zur Verfügung zu stellen.

Überraschenderweise wurde gefunden, dass Derivate dieser Naturstoffe, worin die Carboxylgruppe des Naturstoffs gegen eine Amidgruppe ausgetauscht wird, antibakteriell wirksam sind.

Gegenstand der Erfindung sind Verbindungen der Formel worin Rl gleich Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl, Heteroarylsulfonyl oder ein carbonyl- gebundener Aminosäurerest ist, wobei Rl außer Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten Rl-l, wobei die Substituenten Rl-l unabhängig voneinander

ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluor- methyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy und Carboxyl, R gleich Wasserstoff oder Alkyl ist, wobei R2 außer Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R-1, wobei die Substituenten R-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Amino, Alkylamino und Dialkylamino, oder Rl und R zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten Rut-2, wobei die Substituenten Rl-2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl und Aminocarbonyl, R3 gleich Wasserstoff, Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3-1, wobei die Substituenten R3-l unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkyl- aminocarbonyl, Guanidino und Amidino, worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3-2, wobei die Substituenten R3-2 unabhängig

voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino, und worin freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkyl- carbonyl, Arylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Alkoxy- carbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylamino-carbonyl, Arylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclyl-sulfonyl oder Heteroarylsulfonyl substituiert sein können, R3 gleich Wasserstoff, Cl-C6-ALkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, R4 gleich Wasserstoff, Ci-C6-Alkyl oder C3-Cg-Cycloalkyl ist, R5 gleich Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Hetero- cyclyl oder ein amingebundener Aminosäurerest ist, wobei Rs substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-1, wobei die Substituenten n unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Aminosulfonyl, Alkylaminosulfonyl, Dialkylaminosulfonyl, Arylaminosulfonyl, Heterocyclyl- aminosulfonyl, Heteroarylaminosulfonyl, Aminocarbonylamino, Hydroxy- carbonylamino und Alkoxycarbonylamino, worin Alkyl, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-2, wobei die Substituenten R5-2 unabhängig

voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Carboxyl und Aminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff, Alkyl oder Cycloalkyl ist, oder R5 und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-6, wobei die Substituenten R5-6 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluor- methyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, halogeniertes Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, R7 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-Cs-Cycloalkyl ist, R8 gleich Wasserstoff oder Cl-C6-Alkyl ist und R9 gleich Wasserstoff oder C-C6-ALkyl ist, und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.

Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formel (r) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) und/oder (I') umfassten, nachfolgend als Ausführungs- beispiel (e) genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) und/oder (I') umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in stereoisomeren Formen (Enantiomere, Diastereomere) existieren. Die Erfindung betrifft deshalb die Enantiomeren oder Diastereomeren und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/oder Diastereomeren lassen sich durch bekannte Verfahren wie Chromatographie an chiraler Phase oder Kristallisation mit chiralen Aminen oder chiralen Säuren die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren.

Die Erfindung betrifft in Abhängigkeit von der Struktur der Verbindungen auch Tautomere der Verbindungen.

Als Salze sind im Rahmen der Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfin- dungsgemäßen Verbindungen bevorzugt.

Physiologisch unbedenkliche Salze der Verbindungen (I) umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z. B. Salze der Chlorwasserstoff- säure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumar- säure, Maleinsäure, Trifluoressigsäure und Benzoesäure.

Physiologisch unbedenkliche Salze der Verbindungen (I) umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z. B. Natrium-und Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z. B. Calcium-und Magnesiumsalze) und Ammonium- salze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C-Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiiso- propylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methylmorpholin, Dihydro- abietylamin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und Methylpiperidin.

Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der Verbindungen be- zeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungs- mittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung : Alkyl sowie die Alkylteile in Substituenten wie Alkoxy, Mono-und Dialkylamino, Alkylsulfonyl umfassen lineares und verzweigtes Alkyl, z. B. Cl-Cl2-, insbesondere Ci-C6-und Cl-C4-Alkyl.

C1-C6-Alkyl umfasst Methyl, Ethyl, n-und i-Propyl, n-, i-, sek.-und tert.-Butyl, n- Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, Hexyl, ____-Alkvl umfasst Methyl, Ethyl, n-und i-Propyl, n-, i-, sek.-und tert.-Butyl, Alkylcarbonyl steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Methylcarbonyl, Ethylcarbonyl, n-Propylcarbonyl, Isopropylcarbonyl und t-Butylcarbonyl.

Alkenyl umfasst lineares und verzweigtes C2-C12-, insbesondere C2-C6-und C2-C4- Alkenyl, wie z. B. Vinyl,. Allyl, Prop-1-en-1-yl, Isopropenyl, But-1-enyl, But-2-enyl, Buta-1.2-dienyl, Buta-1.3-dienyl.

Alkinyl umfasst lineares und verzweigtes C2-C12-, insbesondere C2-C6-und C2-C4- Alkinyl, wie z. B. Ethinyl, Propargyl (2-Propinyl), 1-Propinyl, But-1-inyl, But-2-inyl.

Cycloalkyl umfasst polycyclische gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit bis zu 14 Kohlenstoffatomen, nämlich monocyclisches C3-C12-, vorzugsweise C3-C8-Alkyl,

insbesondere C3-C6-Alkyl wie z. B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclo- hexyl, Cycloheptyl, Cyclooctyl, Cyclononyl, und polycyclisches Alkyl, d. h. vor- zugsweise bicyclisches und tricyclisches, gegebenenfalls spirocyclisches C7-C14- Alkyl, wie z. B. Bicyclo [2.2. 1]-hept-1-yl, Bicyclo [2.2. 1] -hept-2-yl, Bicyclo [2.2. 1] - hept-7-yl, Bicyclo [2.2. 2] -oct-2-yl, Bicyclo [3.2. 1] -oct-2-yl, Bicyclo [3.2. 2] -non-2-yl und Adamantyl.

Aryl steht im Rahmen der Erfindung für einen aromatischen Rest mit vorzugsweise 6 bis 10 Kohlenstoffatomen. Bevorzugte Arylreste sind Phenyl und Naphthyl.

Alkoxy steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxyrest insbesondere mit 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 bis 3 Kohlenstoff atomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxyrest mit 1 bis 3 Koh- lenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Methoxy, Ethoxy, n- Propoxy, Isopropoxy, t-Butoxy, n-Pentoxy und n-Hexoxy.

Alkoxycarbonyl steht im Rahmen der Erfindung vorzugsweise für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxyrest mit 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, der über eine Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, n-Propoxycarbonyl, Isopropoxy- carbonyl und t-Butoxycarbonyl.

Monoalkylamino (Alkylamino) steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino- Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkylsubstituenten, der vor- zugsweise 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatome aufweist. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Monoalkylamino-Rest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen.

Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Methylamino, Ethylamino, n-Propyl- amino, Isopropylamino, t-Butylamino, n-Pentylamino und n-Hexylamino.

Dialkylamino steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe mit zwei gleichen oder verschiedenen geradkettigen oder verzweigten Alkylsubstituenten, die vorzugsweise jeweils 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatome aufweisen. Be- vorzugt sind geradkettige oder verzweigte Dialkylamino-Reste mit jeweils 1, 2,3 oder 4 Kohlenstoffatomen pro Alkylsubstituent. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : N, N-Dimethylamino, N, N-Diethylamino, N-Ethyl-N-methylamino, N-Methyl- <BR> <BR> <BR> N-n-propylamino, N-Isopropyl-N-n-propylamino, N-t-Butyl-N-methylarnino, N-Ethyl- N-n-pentylamino und N-n-Hexyl-N-methylamino.

Monoalkylaminocarbonyl (Akylaminocarbony) oder Dialkylaminocarbonyl steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe, die über eine Carbonylgruppe verknüpft ist und die einen geradkettigen oder verzweigten bzw. zwei gleiche oder verschiedene geradkettige oder verzweigte Alkylsubstituenten mit vorzugsweise jeweils 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatomen aufweist. Beispielhaft und vorzugs- weise seien genannt : Methylaminocarbonyl, Ethylaminocarbonyl, Isopropylamino- carbonyl, t-Butylaminocarbonyl, N, N-Dimethylaminocarbonyl, N, N-Diethylamino- carbonyl, N-Ethyl-N-methylaminocarbonyl und N-t-Butyl-N-methylaminocarbonyl.

Arylaminocarbonyl steht im Rahmen der Erfindung für einen aromatischen Rest mit vorzugsweise 6 bis 10 Kohlenstoffatomen, der über eine Aminocarbonyl-Gruppe verknüpft ist. Bevorzugte Reste sind Phenylaminocarbonyl und Naphthylamino- carbonyl.

Alkylcarbonylamino (Acylamino) steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino- Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkanoylsubstituenten, der vor- zugsweise 1 bis 6, 1 bis 4 bzw. 1 oder 2 Kohlenstoffatome aufweist und über die Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein Monoacylamino-Rest mit 1 oder 2 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Formamido, Acet- amido, Propionamido, n-Butyramido und Pivaloylamido.

Alkoxycarbonylamino steht im Rahmen der Erfindung für eine Amino-Gruppe mit einem geradkettigen oder verzweigten Alkoxycarbonylsubstituenten, der vorzugs- weise im Alkoxyrest 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist und über die Carbonylgruppe verknüpft ist. Bevorzugt ist ein Alkoxycarbonylamino-Rest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt : Methoxycarbonyl- amino, Ethoxycarbonylamino, n-Propoxycarbonylamino und t-Butoxycarbonylamino.

Heterocyclyl (Heterocyclus) steht für einen mono-oder polycyclischen, hetero- cyclischen Rest mit 4 bis 10 Ringatomen und bis zu 3, vorzugsweise 1 Heteroatomen bzw. Heterogruppen aus der Reihe N, O, S, SO, SO2. 4-bis 8-gliedriges, insbe- sondere 5-bis 6-gliedriges Heterocyclyl ist bevorzugt. Mono-oder bicyclisches Heterocyclyl ist bevorzugt. Besonders bevorzugt ist monocyclisches Heterocyclyl.

Als Heteroatome sind N und O bevorzugt. Die Heterocyclyl-Reste können gesättigt oder teilweise ungesättigt sein. Gesättigte Heterocyclyl-Reste sind bevorzugt. Die Heterocyclylreste können über ein Kohlenstoffatom oder ein Heteroatom gebunden sein. Besonders bevorzugt sind 5-bis 6-gliedrige, monocyclische gesättigte Hetero- cyclylreste mit bis zu zwei Heteroatomen aus der Reihe O, N und S. Beispielsweise und vorzugsweise seien genannt : Oxetan-3-yl, Pyrrolidin-2-yl, Pyrrolidin-3-yl, Pyrrolinyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydrothienyl, Pyranyl, Piperidin-1-yl, Piperidin- 2-yl, Piperidin-3-yl, Piperidin-4-yl, Thiopyranyl, Morpholin-1-yl, Morpholin-2-yl, Morpholin-3-yl, Perhydroazepinyl, Piperazin-1-yl, Piperazin-2-yl. Ein Stickstoff- Heterocyclylring ist dabei ein Heterocyclus, der als Heteroatome nur Stickstoffatome aufweist.

Heteroaryl steht für einen aromatischen, mono-oder bicyclischen Rest mit 5 bis 10 Ringatomen und bis zu 5 Heteroatomen aus der Reihe S, O und/oder N. Bevorzugt sind 5-bis 6-gliedrige Heteroaryle mit bis zu 4 Heteroatomen. Der Heteroarylrest kann über ein Kohlenstoff-oder Heteroatom gebunden sein. Beispielsweise und vorzugs- weise seien genannt : Thienyl, Furyl, Pyrrolyl, Thiazolyl, Oxazolyl, Imidazolyl, Pyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, Indolyl, Indazolyl, Benzofuranyl, Benzothiophenyl, Chinolinyl, Isochinolinyl.

Carbonyl steht für eine-C (0)-Gruppe. Dementsprechend sind Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl und Heteroarylcarbonyl an der Carbonylgruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d. h. Aryl, Heterocyclyl etc.

Sulfonyl steht für eine-S (O) 2-Gruppe. Dementsprechend sind Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl und Heteroarylsulfonyl an der Sulfonylgruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d. h. Alkyl, Aryl etc.

Aminosulfonyl steht für eine-S (O) 2NH2-Gruppe. Dementsprechend sind Alkyl- aminosulfonyl, Dialkylaminosulfonyl, Arylaminosulfonyl, Heterocyclylamino- sulfonyl und Heteroarylaminosulfonyl an der Aminogruppe mit den entsprechenden Resten substituiert, d. h. Alkyl, Aryl etc.

Halogen schließt im Rahmen der Erfindung Fluor, Chlor, Brom und Iod ein. Bevor- zugt sind Fluor oder Chlor.

Unter der Seitengruppe einer Aminosäure wird im Rahmen der Erfindung derjenige organische Rest eines a-Aminosäuremoleküls verstanden, der an das a- Kohlenstoffatom der Aminosäure gebunden ist. Bevorzugt sind dabei die Reste natürlich vorkommender a-Aminosäuren in der L-oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende a-Aminosäuren in der natürlichen L- Konfiguration.

Hierzu zählen beispielsweise Wasserstoff (Glycin), Methyl (Alanin), Prop-2-yl (Valin), 2-Methyl-prop-1-yl (Leucin), 1-Methyl-prop-1-yl (Isoleucin), eine (3- Indolyl)-methylgruppe (Tryptophan), eine Benzylgruppe (Phenylalanin), eine Methylthioethylgruppe (Methionin), Hydroxymethyl (Serin), p-Hydroxybenzyl (Tyrosin), 1-Hydroxy-eth-1-yl (Threonin), Mercaptomethyl (Cystein), Carb- amoylmethyl (Asparagin), Carbamoylethyl (Glutamin), Carboxymethyl (Asparagin- säure), Carboxyethyl (Glutaminsäure), 4-Aminobut-1-yl (Lysin), 3-Guanidinoprop-1- yl (Arginin), Imidazol-4-ylmethyl (Histidin), 3-Ureidoprop-1-yl (Citrullin),

Mercaptoethyl (Homocystein), Hydroxyethyl (Homoserin), 4-Amino-3-hydroxybut- 1-yl (Hydroxylysin), 3-Amino-prop-1-yl (mithin), 2-Hydroxy-3-amino-prop-1-yl (Hydroxyornithin).

Carbonylgebundener Aminosäurerest steht für einen Aminosäurerest, der über die Carbonylgruppe der Aminosäure-Säurefunktion gebunden ist. Bevorzugt sind dabei a-Aminosäuren in der L-oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende a-Aminosäuren in der natürlichen L-Konfiguration, z. B. Glycin, L- Alanin und L-Prolin.

Amingebundener Aminosäurerest steht für einen Aminosäurerest, der über die Aminogruppe der Aminosäure gebunden ist. Bevorzugt sind dabei a-Aminosäuren oder ß-Aminosäuren. Besonders bevorzugt sind dabei a-Aminosäuren in der L-oder in der D-Konfiguration, insbesondere natürlich vorkommende a-Aminosäuren in der natürlichen L-Konfiguration, z. B. Glycin (R5 gleich Carboxylmethyl), Alanin (R5 gleich 1-Carboxyleth-1-yl). Die Säurefunktion der Aminosäure kann auch als Ester, z. B. Methyl-, Ethyl-, tert-Butylester, oder als Amid, z. B. Aminocarbonyl-, Alkylaminocarbonyl-, Dialkylaminocarbonyl-, Benzylaminocarbonyl-Grüppe, vorliegen.

Unter Aminoschutzgruppen werden im Rahmen der vorliegenden Erfindung solche organischen Reste verstanden, mit denen Aminogruppen vorübergehend gegen den Angriff von Reagenzien geschützt werden können, so dass Reaktionen wie Oxida- tion, Reduktion, Substitution und Kondensation nur an den gewünschten (unge- schützten) Stellen stattfinden. Sie sind für die Dauer des Schutzes unter allen Bedingungen der durchzuführenden Reaktionen und Reinigungsoperationen stabil und wieder unter milden Bedingungen selektiv und mit hoher Ausbeute abspaltbar (Römpp Lexikon Chemie-Version 2.0, Stuttgart/New York : Georg Thieme Verlag 1999 ; T. W. Greene, P. G. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed., John Wiley, New York, 1999)

Bevorzugt sind hierbei Oxycarbonylderivative wie Carbamate und insbesondere die folgenden Gruppen : Benzyloxycarbonyl, 4-Brom-benzyloxycarbonyl, 2-Chlor- benzyloxycarbonyl, 3-Chlor-benzyloxycarbonyl, Dichlorbenzyloxycarbonyl, 3, 4-Di- methoxybenzyloxycarbonyl, 3,5-Dimethoxybenzyloxycarbonyl, 2,4-Dimethoxy- benzyloxycarbonyl, 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 2- Nitrobenzyloxycarbonyl, 2-Nitro-4, 5-dimethoxybenzyloxycarbonyl, 3,4, 5-Tri- methoxybenzyloxycarbonyl, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Isobutoxycarbonyl, tert-Butoxycarbonyl, Pentoxycarbonyl, Isopentoxycarbonyl, Hexoxycarbonyl, Cyclohexoxycarbonyl, Octoxycarbonyl, 2-Ethylhexoxycarbonyl, 2-Iodhexoxycarbonyl, 2-Bromethoxy- carbonyl, 2-Chlorethoxycarbonyl, 2,2, 2-Trichlorethoxycarbonyl, 2,2, 2-Trichlor-tert- butoxycarbonyl, Benzhydryloxycarbonyl, Bis- (4-methoxyphenyl) methoxycarbonyl, Phenacyloxycarbonyl, 2-Trimethylsilylethoxycarbonyl, Phenacyloxycarbonyl, 2- Trimethylsilylethoxycarbonyl, 2- (Di-n-butyl-methyl-silyl) ethoxycarbonyl, 2-Tri- phenylsilylethoxycarbonyl, 2- (Dimethyl-tert-butylsilyl) ethoxycarbonyl, Methyloxy- carbonyl, Vniyloxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, Phenoxycarbonyl, Tolyloxycarbonyl, 2, 4-Dinitrophenoxycarbonyl, 4-Nitrophenoxycarbonyl, 2,4, 5-Trichlorphenoxy- carbonyl, Naphthyloxycarboyl, Fluorenyl-9-methoxycarbonyl, Valeroyl, Isovaleroyl, Butyryl, Ethylthiocarbonyl, Methylthiocarbonyl, Butylthiocarboyl, tert- Butylthiocarbonyl, Phenylthiocarbonyl, Benzylthiocarbonyl, Methylaminocarbonyl, Ethylaminocarbonyl, Propylaminocarbonyl, iso-Propylaminocarbonyl, Formyl, Acetyl, Propionyl, Pivaloyl, 2-Chloräcetyl, 2-Bromacetyl, 2-Iodacetyl, 2,2, 2- Trifluoracetyl, 2,2, 2-Trichloracetyl, Benzoyl, 4-Chlorbenzoyl, 4-Methoxybenzoyl, 4- Nitrobenzyl, 4-Nitrobenzoyl, Naphthylcarbonyl, Phenoxyacetyl, Adamantylcarbonyl, Dicyclohexylphosphoryl, Diphenylphosphoryl, Dibenzylphosphoryl, Di- (4- nitrobenzyl) -phophoryl, Phenoxyphenylphosphoryl, Diethylphosphinyl, Diphenyl- phosphinyl, Phthaloyl, Phthalimido oder Benzyloxymethylen.

Besonders bevorzugt sind tert-Butyloxycarbonyl (Boc), 9-Fluorenylmethyl- oxycarbonyl (FMOC), Benzyloxycarbonyl (Cbz-/Z-) und Allyloxycarbonyl (Aloc).

Ein Symbol * an einer Bindung bedeutet die Verknüpfungsstelle im Molekül.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen, welche der Formel entsprechen, worin Ri bis R9 die gleiche Bedeutung wie in Formel (I) haben, und ihre Salze, ihre Solvate und die Solvate ihrer Salze.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Ri gleich Wasserstoff, Alkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heterocyclylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl, Heteroarylsulfonyl oder ein carbonyl- gebundener Aminosäurerest ist, wobei Rl außer Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten Roi-1, wobei die Substituenten Rl-l unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluor- methyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy und Carboxyl,

gleich Wasserstoff oder Alkyl ist, wobei Ruz außer Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R2-1, wobei die Substituenten R-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Amino, Alkylamino und Dialkylamino, oder Rl und R2 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten Rl-2, wobei die Substituenten Rl-2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl und Aminocarbonyl, R3 gleich Wasserstoff, Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3-l, wobei die Substituenten R3-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3-2, wobei die Substituenten R3-2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino, und worin freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heteroarylcarbonyl,

Heterocyclylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Arylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, Heterocyclylsulfonyl oder Heteroarylsulfonyl substituiert sein können, R3 gleich Wasserstoff oder Ci-Ce-Alkyl ist, R4 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, Rs gleich Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Hetero- cyclyl oder ein amingebundener Aminosäurerest ist, wobei Rs substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten l5-1, wobei die Substituenten R5-l unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff, Alkyl oder Cycloalkyl ist, oder RUZ und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten Rus-6, wobei die Substituenten R5-6 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluor- methyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, halogeniertes Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkylcarbonyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,

gleich Wasserstoff oder C1-C6-Alkyl ist, R3 gleich Wasserstoff oder Ci-C6-Alkyl ist, und R9 gleich Wasserstoff oder Cl-C6-Alkyl ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R1 gleich Wasserstoff, Alkyl, Alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, Heterocyclyl- carbonyl, Heteroarylcarbonyl, Alkoxycarbonyl oder ein carbonylgebundener Aminosäurerest ist, wobei Rl außer Wasserstoff substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten Rl-l, wobei die Substituenten Rl-l unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Phenyl, 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5- bis 6-gliedriges Heterocyclyl, Hydroxy und Alkoxy, R gleich Wasserstoff oder Methyl ist, R3 gleich Aminocarbonylmethyl, 3-Aminopropyl, 2-Hydroxy-3-aminopropyl, 3- Guanidinopropyl, 2-Aminocarbonylethyl, 2-Hydroxycarbonylethyl, 4-Amino- butyl, Hydroxymethyl oder 2-Hydroxyethyl, 4-Amino-3-hydroxybutan-1-yl ist, und worin freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl, Alkenyl, C3-C6-Cycloalkyl, Alkylcarbonyl, Phenylcarbonyl, 5-bis 6- gliedriges Heteroarylcarbonyl, 5-bis 6-gliedriges Heterocyclylcarbonyl,

Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylamino- carbonyl, Phenylaminocarbonyl, Alkylsulfonyl, Arylsulfonyl, 5-bis 6- gliedriges Heterocyclylsulfonyl oder 5-bis 6-gliedriges Heteroarylsulfonyl substituiert sein können, R3 gleich Wasserstoff ist, R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, R gleich Wasserstoff, Alkyl, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5-bis 6-gliedriges Heterocyclyl oder ein amingebundener Amino- säurerest ist, wobei für den Fall, dass R gleich Alkyl, C3-C6-Cycloalkyl oder 5-bis 6- gliedriges Heterocyclyl ist, dieses substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substi- tuenten R5-2, wobei die Substituenten R5-2 unabhängig voneinander ausge- wählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Trifluormethyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5-bis 6-gliedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylamino- carbonyl, und wobei für den Fall, dass R gleich Phenyl oder 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl ist, dieses substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5-3, wobei die Substituenten R5-3 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5-bis 6-gliedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl,

und wobei für den Fall, dass Rs gleich amingebundener Aminosäurerest, dieser substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten Rus-4, wobei die Substituenten R5-4 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, 5-bis 6-gliedriges Heteroaryl, 5-bis 6-gliedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff, Alkyl oder C3-C6-Cycloalkyl ist, oder und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5-bis 6-gliedrigen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1 oder 2 Substituenten R5-6, wobei die Substituenten R5-6 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Amino, Alkylamino, Di- alkylamino, C3-C6-Cycloalkyl, Phenyl, halogeniertes Phenyl, 5-bis 6-glie- driges Heteroaryl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl und Aminocarbonyl, R7 gleich Wasserstoff ist, R8 gleich Wasserstoff ist, und R9 gleich Wasserstoff oder Methyl ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Rl gleich Wasserstoff, Alkyl oder Alkylcarbonyl ist, R gleich Wasserstoff ist, R3 gleich Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3-1, wobei die Sub- stituenten R3-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Nitro, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylamino- carbonyl, Guanidino und Amidino, worin Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R, wobei die Substituenten R3- 2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl und Amino, und worin freie Aminogruppen in der Seitengruppe der Aminosäure mit Alkyl substituiert sein können, R3 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl oder Cs-Cs-Cycloalkyl ist, R4 gleich Wasserstoff, C-Alkyl oder C3-Cg-Cycloalkyl ist, gleich Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Hetero- cyclyl oder ein amingebundener Aminosäurerest ist,

wobei Alkyl, Alkenyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-l, wobei die Substituenten R5-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, worin Alkyl, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-2, wobei die Substituenten R5-2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Carboxyl und Aminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff, Alkyl oder Cycloalkyl ist, oder Rs und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Heterocyclus bilden, der substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten Rus-6, wobei die Substituenten R5-6 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Alkyl,. Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, R7 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl, Alkylcarbonyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, Rs gleich Wasserstoff ist, und

R9 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Rl gleich Wasserstoff ist, R2 gleich Wasserstoff ist, R3 gleich Alkyl oder die Seitengruppe einer Aminosäure ist, worin Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R3'1, wobei die Sub- stituenten R3~1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkylaminocarbonyl, Dialkylaminocarbonyl, Guanidino und Amidino, worin Cycloalkyl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1 oder 2 Substituenten R3-2, wobei die Substituenten R3- 2 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl und Amino, R3 gleich Wasserstoff ist, R4 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl oder C3-Cs-Cycloalkyl ist, Rs gleich Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl oder ein amingebundener Aminosäurerest ist, wobei Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-l, wobei die Substituenten Razz unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus

Halogen, Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Nitro, Cyano, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl, Aminocarbonyl, Alkyl- aminocarbonyl und Dialkylaminocarbonyl, worin Alkyl, Alkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-2, wobei die Substituenten W-2. unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Hydroxy, Amino, Carboxyl und Aminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff, Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, oder R und R zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein Piperidinyl, Morpholinyl, Piperazinyl oder Pyrrolidinyl bilden, wobei Piperidinyl, Morpholinyl, Piperazinyl und Pyrrolidinyl substitiuiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten, wobei die Substituenten unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Alkyl, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, Alkoxycarbonyl und Aminocarbonyl, R7 gleich Wasserstoff ist, R8 gleich Wasserstoff ist, und R9 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Rl gleich Wasserstoff ist, R2 gleich Wasserstoff ist, R3 gleich Aminocarbonylmethyl, 3-Aminoprop-l-yl, 2-Hydroxy-3-aminoprop-1- yl, 1-Hydroxy-3-aminoprop-1-yl, 3-Guanidinoprop-1-yl, 2-Aminocarbonyl- ethyl, 2-Hydroxycarbonylethyl, 4-Aminobut-1-yl, Hydroxymethyl, 2- Hydroxyethyl, 2-Aminoethyl, 4-Amino-3-hydroxybut-1-yl oder (1-Piperidin- 3-yl) -methyl ist, R gleich Wasserstoff ist, R4 gleich Wasserstoff, Methyl, Ethyl, iso-Propyl oder Cyclopropyl ist, R5 gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl oder C3-C8-Cycloalkyl ist, wobei Alkyl und Cycloalkyl substituiert sein können mit 0, 1, 2 oder 3 Sub- stituenten R5-1, wobei die Substituenten R5~1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Cl-C6-Alkyl, Trifluormethyl, Trifluormethoxy, Amino, C1-C6-Alkylamino, C1-C6-Dialkyl- amino, C3-C8-Cycloalkyl, C6-Clo-Aryl, 5-bis 10-gliedriges Heteroaryl, 5-bis 7-gliedriges Heterocyclyl, Hydroxy, Alkoxy, Carboxyl, C1-C6-Alkoxy- carbonyl, Amino-carbonyl, Cl-C6-Alkylaminocarbonyl und C1-C6-Dialkyl- aminocarbonyl, R6 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, oder

R und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein Piperidinyl oder Morpholinyl bilden, R7 gleich Wasserstoff ist, R8 gleich Wasserstoff ist, und R9 gleich Wasserstoff ist.

Besonders bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Ri gleich Wasserstoff ist, R gleich Wasserstoff ist, R3 gleich 3-Aminoprop-1-yl oder 2-Hydroxy-3-aminoprop-1-yl ist, R3 gleich Wasserstoff ist, R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, R gleich Wasserstoff, Ci-C6-Alkyl oder Cyclopropyl ist, wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten RS-l, wobei die Substituenten R5-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Amino, Hydroxy, Carboxyl, Amino- carbonyl und Phenyl,

R6 gleich Wasserstoff oder Methyl ist, R7 gleich Wasserstoff ist, R8 gleich Wasserstoff ist, und R9 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen Rl gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R2 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R3 gleich 3-Aminoprop-l-yl oder 2-Hydroxy-3-aminoprop- 1-yl ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R3 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R4 gleich Wasserstoff oder Methyl ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R gleich Wasserstoff, Cl-C6-Alkyl oder Cyclopropyl ist,

wobei Alkyl substituiert sein kann mit 0, 1, 2 oder 3 Substituenten R5-1, wobei die Substituenten R5-1 unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe bestehend aus Trifluormethyl, Amino, Hydroxy, Carboxyl, Amino- carbonyl und Phenyl, Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R6 gleich Wasserstoff oder Methyl ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R5 und R6 zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, ein Piperidinyl oder Morpholinyl bilden.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R7 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind aucherfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R8 gleich Wasserstoff ist.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind auch erfindungsgemäße Verbindungen, bei denen R9 gleich Wasserstoff ist.

Gegenstand der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur Herstellung der Ver- bindungen der Formel (I), wobei Verbindungen der Formel

worin Rl bis R4 und R7 bis R9 die oben angegebene Bedeutung haben, wobei die Verbindungen (II) gegebenenfalls in aktivierter Form (Acyldonor) vorliegen können, mit Verbindungen der Formel H-NR5R6 (III), worin RS und Rs die oben angegebene Bedeutung haben, umgesetzt werden.

Gegebenenfalls wird vor der Umsetzung von Verbindungen der Formel (II), mit Verbindungen der Formel (III) die Blockierung reaktiver Funktionalitäten (z. B. freie Aminofunktionen) in Verbindungen der Formel (II) vorgenommen. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind säurelabile Schutzgruppen an Rl (oder R2), oder als Substituenten in den Resten R3 und R3, insbesondere bevorzugt ist Boc. Reaktive Funktionalitäten in den Resten RS und R6 von Verbindungen der Formel (III) werden bereits geschützt mit in die Synthese eingebracht, bevorzugt sind säurelabile Schutzgruppen (z. B. Boc). Nach erfolgter Umsetzung zu Verbindungen der Formel (I) können die Schutzgruppen durch Entschützungsreaktion abgespalten werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie. Bevorzugt sind Entschützungsreaktionen unter sauren Bedingungen.

Stellt z. B. R2 in Verbindungen der Formel (I) eine selektiv abspaltbare Schutzgruppe dar, kann nach Entschützung (z. B. nach Hydrogenolyse im Fall R2 = Z) die frei- gelegte Aminofunktion H) mit dem gewünschten Substituenten R2 funktionali- siert werden.

Zur Überführung der Verbindungen (II) in die aktivierte Form (Acyldonor) sind beispielsweise Carbodiimide wie z. B. N, N'-Diethyl-, N, N,'-Dipropyl-, N, N'-Diiso- propyl-, N, N'-Dicyclohexylcarbodiimid, N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethyl- carbodiimid Hydrochlorid (EDC) (gegebenenfalls in Gegenwart von Pentafluor-

phenol (PFP)), N-Cyclohexylcarbodiimid-N-propyloxymethyl-Polystyrol (PS- Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxa- zoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-1, 2-oxazolium-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl- 5-methyl-isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-l- ethoxycarbonyl-1, 2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Iso- butylchloroformat, oder Bis- (2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphorylchlorid oder Benzo- triazolyloxy-tri (dimethylamino) phosphoniumhexafluorophosphat, oder 0- (Benzo- triazol-1-yl)-N, N, N', N'-tetra-methyluronium-hexafluorophosphat (HBTU), 2-(2-Oxo- 1- (2H)-pyridyl)-1, 1, 3, 3-tetramethyluroniumtetrafluoroborat (TPTU) oder 0- (7-Aza- benzotriazol-1-yl)-N, N, N', N'-tetramethyl-uroniumhexafluorophosphat (HATU), oder Benzotriazol-l-yloxytris (dimethylamino)-phosphoniumhexafluorophosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen mit Basen, gegebenenfalls in Gegenwart von Kupp- lungsadditiven wie 1-Hydroxybenzotriazol (HOBt), geeignet.

Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z. B. Natrium-oder Kaliumcarbonat, oder-hydrogencarbonat, oder organische Basen wie Trialkylamine z. B. Triethyl- amin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diiso- propylethylamin.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Acetonitril oder Dimethylformamid. Ebenso ist es mög- lich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Dimethylformamid.

Bevorzugt ist die Aktivierung mit 0- (7-Azabenzotriazol-1-yl)-NNN', N'-tetra- methyl-uroniumhexafluorophosphat (HATU) in Dimethylformamid.

Die Verbindungen der Formel (III) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel aI) sind bekannt oder können hergestellt werden, indem in Verbindungen der Formel worin Rl bis R4 und R7 bis R9 die oben angegebene Bedeutung haben und Rl° gleich Benzyl (alternativ für Alkyl, z. B. Methyl oder Ethyl) ist, der Ester gespalten wird. Diese Esterspaltung erfolgt im Fall von Rlo gleich Benzyl vorzugsweise mit Wasserstoff in Gegenwart von Palladium auf Kohle. Als Löse- mittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reak- tionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoff wie Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid oder Alkohole (bevorzugt sind Methanol, Ethanol und Isopropanol), gegebenenfalls in Gegenwart von Säure mit einem oder mehreren Säureäquivalenten. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen.

Besonders bevorzugt sind Ameisensäure in Ethanol, wässrige Essigsäure und THF.

Alternativ können die Ester (Rl° = Benzyl, Alkyl) auch durch basische Hydrolyse in die entsprechenden Carbonsäuren gespalten werden. Als Basen werden bevorzugt wässriges Lithium-oder Natriumhydroxid eingesetzt. Als Lösemittel eignen sich hierbei organische Lösemittel, die teilweise oder unbegrenzt mit Wasser mischbar

sind. Hierzu gehören Alkohole (bevorzugt sind Methanol und Ethanol), Tetra- hydrofuran, Dioxan und Dimethylfonnamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Methanol, Tetrahydrofuran und Dimethylformamid.

Schema 1 : Synthese der Ausführungsbeispiele Die Verbindungen der Formel (IIa) können hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel worin

Rl bis R4 und R7 bis R10 die oben angegebene Bedeutung haben, wobei diese Verbindungen gegebenenfalls in aktivierter Form vorliegen, unter Peptidkupplung zyklisiert werden. Alternativ kann ein mehrstufiger Prozess erfolgen, bei dem Verbindungen der Formel worin Rl bis R4 und R7 bis Rl° die oben angegebene Bedeutung haben, Rll nach Aktivierung gleich Pentafluorphenol ist und Rl2 gleich eine Aminschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist, durch Schutzgruppenabspaltung der Aminschutzgruppe (zu R12 gleich Wasserstoff) und anschließende Zyklisierung unter basischen Bedingungen zu Verbindungen der Formel (IIa) umgesetzt werden.

Zur Überführung der Verbindungen in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbo- diimide wie z. B. N, N'-Diethyl-, N, N,'-Dipropyl-, N, N'-Diisopropyl-, N, N'-Dicyclo- <BR> <BR> <BR> hexylcarbodiimid, N- (3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC) (gegebenenfalls in Gegenwart von Pentafluorphenol (PFP)), N-Cyclohexyl- carbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbin-

dungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5- phenyl-1, 2-oxazolium-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl-5-methyl-isoxazolium-perchlorat, oder Acylamino Verbindungen wie 2-Ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1, 2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Isobutylchloroformat, oder Bis- (2-oxo-3- oxazolidinyl) -phosphorylchlorid oder Benzotriazolyloxy-tri (dimethylamino) phos- phoniumhexafluorophosphat, oder 0- (Benzotriazol-1-yl)-N, N, N', N'-tetramethyluro- nium-hexafluorophosphat (HBTU), 2- (2-Oxo-1- (2H)-pyridyl)-1, 1,3, 3-tetramethyl- uroniumtetrafluoroborat (TPTU) oder 0-(7-Azabenzotriazol-l-yl)-N, N, N', N'-teka- methyluroniumhexafluorophosphat (HATU), oder Benzotriazol-1-yloxytris (di- methylamino) -phosphoniumhexafluorophosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen mit Basen, gegebenenfalls in Gegenwart von 1-Hydroxybenztriazol (HOBt), geeignet.

Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z. B. Natrium-oder Kaliumcarbonat, oder-hydrogencarbonat, oder bevorzugt organische Basen wie Trialkylamine z. B.

Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid oder Acetonitril. Ebenso ist es mög- lich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dichlormethan und Dimethylformamid.

Besonders bevorzugt ist die Aktivierung in Form eines Pentafluorphenylesters (Ril- C6F5) und anschließendem basenkatalysierten Ringschluss.

Die Verbindungen der Formel (IV) sind bekannt, können analog bekannten Ver- fahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel

worin Rl bis R4 und R7 bis Rl° und R12 die oben angegebene Bedeutung haben und Rll gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2- (Trimethylsilyl)-ethyl, ist, nach Abspaltung der Schutzgruppe an R, mit Fluorid, insbesondere mit Tetrabutylammoniumfluorid, umgesetzt werden.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan und Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel ein- zusetzen. Bevorzugte Lösungsmittel sind Tetrahydrofuran und Dimethylformamid.

Die Verbindungen der Formel (IVb) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel

worin Rl, R2, R4, R7, R8 und R10 die oben angegebene Bedeutung haben, Rll gleich eine Silylschutzgruppe ist, mit Verbindungen der Formel worin R3, R3, R 9 und R12 die oben angegebene Bedeutung haben und wobei die Verbindungen gegebenenfalls in aktivierter Form vorliegen können, umgesetzt werden.

Zur Überführung der Verbindungen in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbo- diimide wie z. B. N, N'-Diethyl-, N, N,'-Dipropyl-, N, N'-Diisopropyl-, N, N'-Dicyclo- hexylcarbodiimid, N- (3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid Hydrochlorid (EDC) (gegebenenfalls in Gegenwart von Pentafluorphenol (PFP)), N-Cyclohexyl- carbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbin- dungen wie Carbonyldiimidazol, oder 1,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5- phenyl-1, 2-oxazolium-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl-5-methyl-isoxazolium-perchlorat, oder Acylaminoverbindungen wie 2-Ethoxy-l-ethoxycarbonyl-1, 2-dihydrochinolin, oder Propanphosphonsäureanhydrid, oder Isobutylchloroformat, oder Bis- (2-oxo-3- oxazolidinyl) -phosphorylchlorid oder Benzotriazolyloxy-tri (dimethylamino) phos- phoniumhexafluorophosphat, oder O-(Benzotriazol-1-yl)-N,N, N', N'-tetra-methyluro-

niumhexafluorophosphat (HBTU), 2- (2-Oxo-1- (2H)-pyridyl)-1, 1, 3,3-tetramethyl- uroniumtetrafluoroborat (TPTU) oder 0- (7-Azabenzotriazol-1-yl)-N, NN', N'-tetra- methyluroniumhexafluorophosphat (HATU), oder Benzotriazol-l-yloxytris (di- methylamino) -phosphoniumhexafluorophosphat (BOP), oder Mischungen aus diesen mit Basen, gegebenenfalls unter Zusatz von Kupplungsadditiven wie 1-Hydroxy- benzotriazol (HOBt), geeignet.

Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z. B. Natrium-oder Kaliumcarbonat, oder-hydrogencarbonat, oder bevorzugt organische Basen wie Trialkylamine z. B.

Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es mög- lich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Dimethylformamid.

Besonders bevorzugt ist die Umsetzung in Gegenwart von HATU und N, N Düso- propylethylamin.

Die Verbindungen der Formel (VI) sind bekannt oder können analog bekannten Ver- fahren hergestellt werden.

Die Verbindungen der Formel (V), beziehungsweise ihre Salze (z. B. Hydrochloride), sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin Rl, R2, R4, R7, R8 und R10 die oben angegebene Bedeutung haben, Rll gleich eine Silylschutzgruppe ist, und R13 gleich eine Aminschutzgruppe, insbesondere Boc, ist, durch Entschützung an R13 hergestellt werden. Dies geschieht nach Standard- verfahren der Schutzgruppenchemie, im Falle von R13 gleich Boc bevorzugt mit Chlorwasserstoff in Dioxan.

Schema 2 : Synthese geschützter Derivate von Biphenomycin

Die Verbindungen der Formel (Va) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel

worin R4 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben, Rl° gleich Benzyl oder Alkyl ist und R13 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist, mit Verbindungen der Formel worin Rl, R2 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und Rll gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2- (Trimethylsilyl)-ethyl, ist, umgesetzt werden. Die Umsetzung, bekannt als Suzuki-Reaktion (Synlett 1992,207- 210 ; Chem. Rev. 1995,95, 2457-2483), erfolgt in Gegenwart von Palladium- Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis (diphenylphosphino)- ferrocen-palladium (II) chlorid und Caesiumcarbonat.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.

Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.

Die Verbindungen der Formel (VII) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin R4 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben, Rlo gleich Benzyl oder Alkyl ist und R13 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist, mit Bis (pinacolato) diboron umgesetzt werden. Diese Umsetzung, bekannt als spezielle Variante der Suzuki-Reaktion (J. Org. Chem. 1995, 7508-7510 ; Tetrahedron Lett., 1997,3841-3844), erfolgt in Gegenwart von Palladium- Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis (diphenylphosphino)- ferrocen-palladium (Il) chlorid und von Kaliumacetat.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.

Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.

Die Verbindungen der Formel (VIIa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin R4 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben und R13 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist, nach Aktivierung der freien Carboxylatfunktion mit l°R-OH (bevorzugt Benzyl- alkohol, Allylalkohol und niedere aliphatische Alkohole) in Gegenwart von 4-Di- methylaminopyridin umgesetzt werden.

Zur Überführung der Carbonsäuren in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbo- diimide wie z. B. N, N'-Diethyl-, N, N, '-Dipropyl-, N, N'-Diisopropyl-, N, N'-Dicyclo- <BR> <BR> <BR> hexylcarbodiimid, N- (3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC) N-Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol geeignet.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es mög-

lich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Acetonitril.

Bevorzugt sind Umsetzungen mit Aktivierung durch EDC oder DIC in absolutem Acetonitril oder Dichlormethan bei tiefer Temperatur (-10°C).

Die Verbindungen der Formel (VIII) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin Rl, W und R8 die oben angegebene Bedeutung haben nach Aktivierung der freien Carboxylatfunktion mit"R-OH (bevorzugt 2-Tri- methylsilylethanol) in Gegenwart von 4-Dimethylaminopyridin umgesetzt werden.

Zur Überführung der Carbonsäuren in die aktivierte Form sind beispielsweise Carbo- diimide wie z. B. N, N'-Diethyl-, N, N,'-Dipropyl-, N, N'-Diisopropyl-, N, N'-Dicyclo- hexylcarbodiimid, N- (3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (EDC) N-Cyclohexylcarbodiimid-N'-propyloxymethyl-Polystyrol (PS-Carbodiimid) oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimidazol geeignet.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol,

Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Dimethylformamid. Ebenso ist es mög- lich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind wasserfreies Dichlormethan und Acetonitril.

Bevorzugt sind Umsetzungen mit Aktivierung durch EDC oder DIC in absolutem Acetonitril oder Dichlormethan bei tiefer Temperatur (-10°C).

Die Carbonsäuren der Formel (IXa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin Rl und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und Rl5 gleich eine Aminoschutzgruppe, insbesondere Boc, ist, in der ersten Stufe an Rl5 entschützt werden. Dies geschieht nach Standardverfahren der Schutzgruppenchemie, im Falle von R15 gleich Boc bevorzugterweise mit Chlorwasserstoff in Dioxan oder mit Trifluoressigsäure in Dichlormethan in Gegenwart geringer Mengen Wasser. Das erhaltene freie Amin worin Rl und R8 die oben angegebene Bedeutung haben, wobei das Amin gegebenenfalls in Form eines Salzes, vorzugsweise Hydrochlorid oder Trifluoracetat, vorliegen kann, wird in der zweiten Stufe mit R2-X, worin R2 die oben angegebene Bedeutung hat und X für eine Abgangsgruppe steht, in Gegenwart einer Base in inerten Lösungs- mitteln umgesetzt, gegebenenfalls in Gegenwart von Kaliumiodid, bevorzugt in einem Temperaturbereich von 0°C über Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck um. Bevorzugt für X sind Mesylat, Tosylat, Succinat oder Halogen, wobei für Halogen Chlor, Brom oder Iod bevorzugt ist.

Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate, wie z. B. Natrium-oder Kaliumcarbonat, oder-hydrogencarbonat, oder organische Basen wie Trialkylamine z. B. Triethyl- amin, N-Methylpiperidin, 4-Dimethylaminopyridin oder Diisopropylethylamin.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan oder Trichlormethan, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Dioxan, Aceton oder Dimethylformamid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethyl- formamid und Dichlormethan.

Schema 3 : Synthese von Biphenyl-bisaminosäurederivaten R2 kann optional eine Schutzgruppe (z. B. Z, d. h. Benzyloxycarbonyl) darstellen.

In einem Alternatiwerfahren können die Verbindungen der Formel (Va) hergestellt werden, indem Verbindungen der Formel

worin R4 und R7 die oben angegebene Bedeutung haben, Rl° gleich Benzyl oder Alkyl ist und RI3 gleich eine Aminoschutzgruppe (bevorzugt Boc) ist, mit Verbindungen der Formel worin Rl, R2 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und Riz gleich eine Silylschutzgruppe, insbesondere 2- (Trimethylsilyl)-ethyl, ist, umgesetzt werden. Die Umsetzung, bekannt als Suzuki Reaktion (Synlett 1992,207- 210 ; Chem. Rev. 1995,95, 2457-2483), erfolgt in Gegenwart von Palladium- Katalysatoren und einer Base, bevorzugt in Gegenwart von Bis (diphenylphosphino)- ferrocen-palladium (II) chlorid und Caesiumcarbonat.

Als Lösemittel eignen sich hierbei inerte organische Lösemittel, die sich unter den Reaktionsbedingungen nicht verändern. Hierzu gehören Kohlenwasserstoffe wie

Benzol, Toluol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid. Ebenso ist es möglich, Gemische der Lösemittel einzusetzen. Besonders bevorzugt sind Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.

Die Verbindungen der Formel (VIIIa) können aus den Verbindungen der Formel (VIII) nach dem für die Verbindungen (VII) beschriebenen Verfahren hergestellt werden.

Die enantiomerenreinen Verbindungen der Formeln (IX) und (IXb) sind bekannt oder können aus racemischen Vorläufern nach bekannten Verfahren, wie z. B. Kri- stallisation mit chiralen Aminbasen oder durch Chromatograpie an chiralen, stationären Phasen, erhalten werden.

Die Verbindungen der Formeln (IX) und (IXb) sind bekannt, können analog be- kannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln worin R4 und R7 und Rl und R8 die oben angegebene Bedeutung haben, R13 und Rl5 gleich eine Aminoschutzgruppe sind und R14 gleich Alkyl (besonders bevorzugt Ethyl) ist,

decarboxyliert werden. Diese Reaktion findet bevorzugt in basischem Medium in einem Wasser-Ethanol-Gemisch statt.

Die Verbindungen der Formeln (X) und (Xa) sind bekannt, können analog bekannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln worin R7 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben, mit Verbindungen der Formeln 13 _COOR 14 15 _COOR 14 OOR"" COOR" (XI) beziehungweise (XIa) worin R4 und Rl die oben angegebene Bedeutung haben, R13 und R15 gleich eine Aminoschutzgruppe sind und R14 gleich Alkyl (bevorzugt Ethyl) ist,

umgesetzt werden. Diese Reaktion findet bevorzugt mit Alkalialkoholat in Alkohol, besonders mit Natriumethylat in Ethanol statt.

Die Verbindungen der Formeln (XII) und (XIIa) sind bekannt, können analog be- kannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formeln worin R7 und Ra die oben angegebene Bedeutung haben, mit Phosphortribromid umgesetzt werden. Bevorzugt findet die Reaktion in Toluol statt.

Die Verbindungen der Formeln (XIIb) und (XIIc) sind bekannt, können analog be- kannten Verfahren hergestellt werden oder indem Verbindungen der Formel worin R7 und W die oben angegebene Bedeutung haben,

reduziert werden. Die Reduktion findet bevorzugt mit Diisobutylaluminiumhydrid- Lösung in Dichlormethan unter nachfolgender Zugabe einer gesättigten Kalium- natriumtartrat-Lösung statt.

Die Verbindungen der Formeln (XIId) und (XIIe) sind bekannt, können analog be- kannten Verfahren hergestellt werden oder indem 2-Hydroxy-5-iod-benzaldehyd mit Verbindungen der Formeln R7-X beziehungsweise R8-X (XIII) (ma), worin R7 und R8 die oben angegebene Bedeutung haben und X für eine Abgangsgruppe steht, in inerten Lösungsmitteln umgesetzt werden, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base, gegebenenfalls in Gegenwart von Kaliumiodid, bevorzugt in einem Temperaturbereich von Raumtemperatur bis zum Rückfluss der Lösungsmittel bei Normaldruck um. Bevorzugt für X sind Mesylat, Tosylat oder Halogen, wobei für Halogen Chlor, Brom oder Iod bevorzugt sind.

Inerte Lösungsmittel sind beispielsweise Halogenkohlenwasserstoffe wie Methylen- chlorid, Trichlormethan oder 1,2-Dichlorethan, Ether wie Dioxan, Tetrahydrofuran oder 1,2-Dimethoxyethan, oder andere Lösemittel wie Aceton, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, 2-Butanon oder Acetonitril, bevorzugt Tetrahydrofuran, Methy- lenchlorid, Aceton, 2-Butanon, Acetonitril, Dimethylformamid oder 1, 2-Dimethoxy- ethan. Bevorzugt ist Dimethylfonnamid.

Basen sind beispielsweise Alkalicarbonate wie Cäsiumcarbonat, Natrium-oder Kaliumcarbonat, oder Natrium-oder Kaliummethanolat, oder Natrium-oder Kalium-

ethanolat oder Kalium-tert.-butylat, oder Amide wie Natriumamid, Lithium-bis- (trimethylsilyl) amid oder Lithiumdiisopropylamid, oder metallorganische Verbin- dungen wie Butyllithium oder Phenyllithium, tertiäre Aminbasen wie Triethylamin oder Diisopropylethylamin, oder andere Basen wie Natriumhydrid, DBU, bevorzugt Kalium-tert.-butylat, Cäsiumcarbonat, DBU, Natriumhydrid, Kaliumcarbonat oder Natriumcarbonat. Bevorzugt ist Kaliumcarbonat.

Die Verbindungen der Formeln (XIII) und (XIIIa) sind bekannt oder können analog bekannten Verfahren hergestellt werden.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch folgendes Syntheseschema verdeutlicht werden. Hierbei ist der besseren Übersichtlichkeit halber die in der Beschreibung verwendete lateinische Nummerierung beibehalten, das Schema zeigt jedoch teilweise spezielle Ausführungsformen, insbesondere R14 in (XI) und (XIa) gleich Ethyl und R13 und Ris gleich Boc.

Schema 4 : Synthese von Phenylalaninderivaten In einem alternativen Verfahren können die Substituenten R und R auch über die Verbindungen der Formel (VII) bzw. (VIIa) in die Synthese eingebracht werden. Dazu wird die Säurefunktion der Verbindungen der Formel (VII) bzw. (VIIa) nach

dem Fachmann bekannten Bedingungen freigesetzt und mit Verbindungen der Formel (III) nach dem Fachmann bekannten Bedingungen umgesetzt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen ein nicht vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches und pharmakokinetisches Wirkspektrum Sie eignen sich daher zur Verwendung als Arzneimittel zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Krankheiten bei Menschen und Tieren.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können aufgrund ihrer pharmakologischen Eigenschaften allein oder in Kombination mit anderen Wirkstoffen zur Behandlung und/oder Prävention von Infektionskrankheiten, insbesondere von bakteriellen Infektionen, eingesetzt werden.

Beispielsweise können lokale und/oder systemische Erkrankungen behandelt und/oder verhindert werden, die durch die folgenden Erreger oder durch Mischungen der folgenden Erreger verursacht werden : Gram-positive Kokken, z. B. Staphylokokken (Staph. aureus, Staph. epidermidis) und Streptokokken (Strept. agalactiae, Strept. faecalis, Strept. pneumoniae, Strept. pyogenes) ; gram-negative Kokken (neisseria gonorrhoeae) sowie gram-negative Stäbchen wie Enterobakteriaceen, z. B. Escherichia coli, Hämophilus influenzae, Citrobacter (Citrob. freundii, Citrob. divernis), Salmonella und Shigella ; ferner Klebsiellen (Klebs. pneumoniae, KIebs. oxytocy), Enterobacter (Ent. aerogenes, Ent. agglomerans), Hafnia, Serratia (Serr. marcescens), Proteus (Pr. mirabilis, Pr. rettgeri, Pr. vulgaris), Providencia, Yersinia, sowie die Gattung Acinetobacter. Darüber hinaus umfaßt das antibakterielle Spektrum die Gattung Pseudomonas (Ps. aeruginosa, Ps. maltophilia) sowie strikt anaerobe Bakterien wie z. B. Bacteroides fragilis, Vertreter der Gattung Peptococcus, Peptostreptococcus sowie die Gattung Clostridium ; ferner Mykoplasmen (M. pneumoniae, M. hominis, M. urealyticum) sowie Mykobakterien, z. B. Mycobacterium tuberculosis.

Die obige Aufzählung von Erregern ist lediglich beispielhaft und keineswegs be- schränkend aufzufassen. Als Krankheiten, die durch die genannten Erreger oder Mischinfektionen verursacht und durch die erfindungsgemäßen topisch anwendbaren Zubereitungen verhindert, gebessert oder geheilt werden können, seien beispiels- weise genannt : Infektionskrankheiten beim Menschen wie z. B. septische Infektionen, Knochen-und Gelenkinfektionen, Hautinfektionen, postoperative Wundinfektionen, Abszesse, Phlegmone, Wundinfektionen, infizierte Verbrennungen, Brandwunden, Infektionen im Mundbereich, Infektionen nach Zahnoperationen, septische Arthritis, Mastitis, Tonsillitis, Genital-Infektionen und Augeninfektionen.

Außer beim Menschen können bakterielle Infektionen auch bei anderen Spezies behandelt werden. Beispielhaft seien genannt : Schwein : Coli-diarrhoe, Enterotoxamie, Sepsis, Dysenterie, Salmonellose, Metritis- Mastitis-Agalaktiae-Syndrom, Mastitis ; Wiederkäuer (Rind, Schaf, Ziege) : Diarrhoe, Sepsis, Bronchopneumonie, Sahno- nellose, Pasteurellose, Mykoplasmose, Genitalinfektionen ; Pferd : Bronchopneumonien, Fohlenlähme, puerperale und postpuerperale Infektio- nen, Salmonellose ; Hund und Katze : Bronchopneumonie, Diarrhoe, Dermatitis, Otitis, Harnwegsinfekte, Prostatitis ; Geflügel (Huhn, Pute, Wachtel, Taube, Ziervögel und andere) : Mycoplasmose, E. coli-Infektionen, chronische Luftwegserkrankungen, Salmonellose, Pasteurellose, Psittakose.

Ebenso können bakterielle Erkrankungen bei der Aufzucht und Haltung von Nutz- und Zierfischen behandelt werden, wobei sich das antibakterielle Spektrum über die vorher genannten Erreger hinaus auf weitere Erreger wie z. B. Pasteurella, Brucella,

Campylobacter, Listeria, Erysipelothris, Corynebakterien, Borellia, Treponema, Nocardia, Rikettsie, Yersinia, erweitert.

Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin Verbindungen der Formel (I) zur Bekämpfung von Erkrankungen, insbesondere bakterieller Erkrankungen, Arzneimittel, enthaltend Verbindungen der Formel (I) und Hilfsstoffe sowie die Verwendung von Verbindungen der Formel (I) zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von bakteriellen Erkrankungen.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, vorzugsweise zusammen mit einem oder mehre- ren pharmakologisch unbedenklichen Hilfs-oder Trägerstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.

Der Wirkstoff kann systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck kann er auf geeignete Weise appliziert werden, wie z. B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat.

Für diese Applikationswege kann der Wirkstoff in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.

Für die orale Applikation eignen sich bekannte, den Wirkstoff schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, wie z. B. Tabletten (nicht überzogene sowie überzogene Tabletten, z. B. mit magensaftresistenten Überzüge versehene Tabletten oder Filmtabletten), Kapseln, Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Lösungen und Aerosole.

Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes ge- schehen (intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan,

oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applika- tionsformen u. a. Injektions-und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten und sterilen Pulvern.

Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z. B. Inhalationsarzneiformen (u. a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen/-lösungen, Sprays ; lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren-und Augen-präparationen, Vaginalkapseln, wässrige Suspensionen (Lotionen, Schüttel- mixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, Milch, Pasten, Streupuder oder Implantate.

Die Wirkstoffe können in an sich bekannter Weise in die angeführten Applika- tionsformen überführt werden. Dies geschieht unter Verwendung inerter nicht- toxischer, pharmazeutisch geeigneter Hilfsstoffe. Hierzu zählen u. a. Trägerstoffe (z. B. mikrokristalline Cellulose), Lösungsmittel (z. B. flüssige Polyethylenglycole), Emulgatoren (z. B. Natriumdodecylsulfat), Dispergiermittel (z. B. Polyvinylpyrroli- don), synthetische und natürliche Biopolymere (z. B. Albumin), Stabilisatoren (z. B.

Antioxidantien wie Ascorbinsäure), Farbstoffe (z. B. anorganische Pigmente wie Eisenoxide) oder Geschmacks-und/oder Geruchskorrigentien.

Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 5 bis 250 mg/kg Körpergewicht je 24 h zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Menge etwa 5 bis 100 mg/kg Körpergewicht je 24 h.

Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszu- kommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden

muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.

Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente ; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.

A. Beispiele Verwendete Abkürzungen : Aloc Allyloxycarbonyl aq. Wässrig Äquiv. Äquivalent Bn Benzyl Boc tert.-Butoxycarbonyl CDC13 Chloroform CH Cyclohexan D dublett (im 1H-NMR) Dd Dublett von dublett DCM Dichlormethan DCC Dicyclohexylcarbodiimid DIC Diisopropylcarbodiimid DIPEA Diisopropylethylamin DMSO Dimethylsulfoxid DMAP 4-N, N-Dimethylaminopyridin DMF Dimethylformamid d. Th. der Theorie EDC N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid x HCl EE Ethylacetat (Essigsäureethylester) ES1 Elektrospray-Ionisation (bei MS) ges. gesättigt HATU O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium- hexafluorphosphat HBTU O- (Benzotriazol-1-yl)-N, N, N ; N'-tetramethyluronium- hexafluorphosphat HOBt 1-Hydroxy-1H-benzotriazol x H20 H Stunde (n) HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie

LC-MS Flüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektroskopie M multiplett (im'H-NMR) Min Minuten MS Massenspektroskopie MeOH Methanol NMR Kernresonanzspektroskopie MTBE Methyl-tert.-butylether Pd/C Palladium/Kohle proz. Prozent Q quartett (im IH-NMR) Rf Retentionsindex (bei DC) RT Raumtemperatur Rt Retentionszeit (bei HPLC) S singulett (im'H-NMR) T triplett (im'H-NMR) TBS tert.-Butyldimethylsilyl THF Tetrahydrofuran TMSE 2- (Trimethylsilyl)-ethyl TPTU 2- (2-Oxo-1 (2H)-pyridyl)-1, 1, 3, 3- tetramethyluroniümtetrafluoroborat Z Benzyloxycarbonyl Allgemeine Methoden LC-MS und HPLC Präparative RP-HPLC : Säule : YMC-Gel ; Eluent : Acetonitril/Wasser (Gradient) ; Fluß : 50 ml/min ; Temp. : 25°C; Detektion UV 210 nm.

Methode 1 (HPLC) : Säule : Kromasil C18, L-R Temperatur : 30°C ; Fluss : 0.75 ml/min ; Eluent A : 0.01 M HClO4, Eluent B : Acetonitril, Gradient :- 0.5 min 98% Au 4.5 min 10% A # 6.5 min 10% A.

Methode 2 (HPLC) : Säule : Kromasil C18 60*2 mm, L-R Temperatur : 30°C ; Fluss : 0. 75 ml/min, Eluent A : 0.01 M H3P04, Eluent B : Acetonitril, Gradient : o 0. 5 min 90% A # 4.5 min 10% A-> 6.5 min 10% A.

Methode 3 (HPLC) : Säule : Kromasil C18 60*2 mm, L-R Temperatur : 30°C ; Fluss : 0.75 ml/min ; Eluent A : 0.005 M HC104, Eluent B : Acetonitril, Gradient : o 0. 5 min 98% A # 4. 5 min 10% A--> 6.5 min 10% A.

Methode 4 (HPLC) : Säule : Symmetry C18 2.1x150 mm ; Säulenofen : 50°C ; Fluss : 0.6 ml/min ; Eluent A : 0.6 g 30% ige Salzsäure/1 Wasser, Eluent B : Acetonitril, Gradient : 0.0 min 90%A # 4.0 min 10% A # 9 min 10% A.

Methode 5 (LC-MS) : Instrument Micromass Quattro LCZ ; Säule Symmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 Fm ; Temperatur : 40°C ; Fluss : 0.5 ml/min ; Eluent A : Acetonitril + 0. 1 % Ameisensäure, Eluent B : Wasser + 0. 1% Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 10% A o 4 min 90% A < 6 min 90% A Methode 6 (LC-MS) : Instrument Micromass Platform LCZ ; Säule Symmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3.5 am ; Temperatur : 40°C ; Fluss : 0. 5 ml/min ; Eluent A : Acetonitril + 0. 1% Ameisensäure, Eluent B : Wasser + 0. 1% Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 10% A # 4 min 90% A # 6 min 90% A.

Methode 7 (LC-MS) : Instrument Micromass Quattro LCZ ; Säule Symmetry C18, 50 mm x 2.1 mm, 3. 5 um ; Temperatur : 40°C ; Fluss : 0.5 ml/min ; Eluent A : Acetonitril + 0. 1% Ameisensäure, Eluent B : Wasser + 0. 1% Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 5% A # 1 min 5% A # 5 min 90% A # 6 min 90% A Methode 8 (HPLC) : Säule : 250*4 mm, Kromasil 100, C-18,5 um ; Temperatur : 40°C ; Fluss : 1 ml/min ; Eluent : Acetonitril 15% und 0.2 % ige Perchlorsäure 85% ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 9 (LC-MS) : Instrument : Waters Alliance 2790 LC ; Säule : Symmetry C18, 50 nun x 2.1 mm, 3. 5 um ; Eluent A : Wasser + 0.1% Ameisensäure, Eluent B : Acetonitril + 0. 1% Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 5% B # 5. 0 min 10% B e 6.0 min 10% B ; Temperatur : 50°C ; Fluss : 1.0 ml/min ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 10 (LC-MS) : ZMD Waters ; Säule : Inertsil ODS3 50 mm x 2.1 mm, 3 um ; Temperatur : 40°C ; Fluss : 0. 5 ml/min ; Eluent A : Wasser + 0. 05 % Ameisensäure, Eluent B : Acetonitril + 0. 05 % Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 5% B # 12 min 100 % B o 15 min 100% B.

Methode 11 (LC-MS) : MAT 900, Finnigan MAT, Bremen ; Säule : X-terra 50mm x 2.1 mm, 2. 5 um ; Temperatur : 25°C ; Fluss : 0. 5 ml/min ; Eluent A : Wasser + 0.01 % Ameisensäure, Eluent B : Acetonitril + 0.01 % Ameisensäure, Gradient : 0. 0min 10 %B # 15 min # 90 % B 9 30 min 90% B.

Methode 12 (LC-MS) : TSQ 7000, Finnigan MAT, Bremen ; Säule : Inertsil ODS3 50 mm x 2.1 mm, 3 um ; Temperatur : 25°C ; Fluss : O. 5 ml/min ; Eluent A : Wasser + 0. 05 % Ameisensäure, Eluent B : Acetonitril + 0. 05 % Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 15%B # 15 min # 100%B # 30 min 100% B.

Methode 13 (LC-MS) : 7 Tesla Apex II mit externer Elektrospray-Ionenquelle, Bruker Daltronics ; Säule : X-terra C18 50 mm x 2.1 mm, 2. 5 um ; Temperatur : 25°C ; Fluss : 0. 5 ml/min ; Eluent A : Wasser + 0. 1 % Ameisensäure, Eluent B : Acetonitril + 0.1 % Ameisensäure, Gradient : 0.0 min 5%B # 13 min # 100%B # 15 min 100%B.

Methode 14 (HPLC) : Säule : X-TerraTM der Firma Waters, RP8, 5 gm, 3. 93150 mm ; Start : 95% A, 5%B ; 12 min : 5% A, 95% B. Eluent A : Wasser + 0. 01% Trifluoressigsäure ; Eluent B : Acetonitril + 0. 01 % Trifluoressigsäure ; Fluss : 1. 2 ml/min.

Methode 15 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2795 ; Säule : Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4. 6mm ; Eluent A : Wasser + 500 ut 50% igue Ameisensäure/1 ; Eluent B : Acetonitril + 500 ul 50% ige Ameisensäure/1 ; Gradient : 0.0 min 10% B 3.0 min 95% BO 4.0 min 95% B ; Ofen : 35 °C ; Fluss : 0. 0 min 1.0 ml/min# 3.0 min 3.0 ml/min- 4.0 min 3.0 ml/min ; UV- Detektion : 210 nm.

Methode 16 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2795 ; Säule : Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4. 6mm ; Eluent A : Wasser + 500 ul 50% ige Ameisensäure/1 ; Eluent B : Acetonitril + 500 Al 50% ige Ameisensäure/1 ; Gradient : 0.0 min 10% BO 2.0 min 95% B 4.0 min 95% B ; Ofen : 35 °C ; Fluss : 0.0 min 1.0 ml/mini 2.0 min 3.0 ml/min# 4.0 min 3.0 ml/min ; UV- Detektion : 210 nm.

Methode 17 (LC-MS) : Instrument : Micromass Platform LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100 ; Säule : Grom-SIL120 ODS-4 HE, 50 mm x 2.0 mm, 3 um ; Eluent A : 1 1 Wasser + 1 ml 50% ige Ameisensäure, Eluent B : 1 1 Acetonitril + 1 ml 50% ige Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 100% A 9 0.2 min 100%A # 2.9 min 30% A # 3.1 min 10% A # 4.5 min 10% A ; Ofen : 55°C ; Fluss : 0.8 ml/min ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 18 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2795 ; Säule : Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 50x4. 6mm ; Eluent A : Wasser + 500 ul 50% ige Ameisensäure/1 ; Eluent B : Acetonitril + 500 µl 50% ige Ameisensäure/1 ; Gradient : 0.0 min 10% B 3.0 min 95% B 4.0 min 95% B ; Ofen : 35 °C ; Fluss : 0.0 min 1.0 ml/min 3.0 min 3.0 mUminO 4.0 min 3.0 ml/min ; UV- Detektion : 210 nm.

Methode 19 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2790 ; Säule : Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50 mm x 2 mm, 3.0 um ; Eluent B :

Acetonitril + 0.05% Ameisensäure, Eluent A : Wasser + 0. 05% Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 5% B) 2.0 min 40%B # 4.5 min 90% BO 5.5 min 90% B ; Ofen : 45 °C ; Fluss : 0.0 min 0.75 ml/min 4. 5 min 0.75 ml/min# 5.5 min 1.25 ml/min ; UV-Detektion: 210 nm.

Methode 20 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2790 ; Säule : Uptisphere C 18,50 mm x 2.0 mm, 3. 0 um ; Eluent B : Acetonitril + 0.05% Ameisensäure, Eluent A : Wasser + 0.05% Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 5% B # 2.0 min 40% Bu 4.5 min 90% B W 5.5 min 90% B ; Ofen : 45 °C ; Fluss : 0.0 min 0.75 ml/min @ 4. 5 min 0.75 ml/min# 5.5 min 1.25 ml/min ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 21 (LC-MS) : Instrument : Micromass Quattro LCZ mit HPLC Agilent Serie 1100 ; Säule : UPTISPHER. E HDO, 50 mm x 2.0 mm, 3 um ; Eluent A: 1 1 Wasser + 1 ml 50% ige Ameisensäure, Eluent B : 1 1 Acetonitril + 1 ml 50% ige Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 100% A # 0.2 min 100% A + 2.9 min 30%A # 3.1 min 10% A-> 4.5 min 10% A ; Ofen : 55°C ; Fluss : 0.8 ml/min ; UV-Detektion : 208-400 nm.

Methode 22 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : HP 1100 Series ; UV DAD ; Säule : Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 jim ; Eluent A : Wasser + 500 µl 50% ige Ameisensäure/1, Eluent B : Acetonitril + 500 gl 50% ige Ameisensäure/1 ; Gradient : 0.0 min 0% B o 2.9 min 70% B o 3. 1 min 90% B-3 4.5 min 90% B ; Ofen : 50 °C ; Fluss : 0.8 ml/min ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 23 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : Waters Alliance 2795 ; Säule : Phenomenex Synergi 2µ Hydro- RP Mercury 20x4 mm ; Eluent A : 1 1 Wasser + 0.5 ml 50% ige Ameisensäure, Eluent B : 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50% ige Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 90% A (Fluss : 1 ml/min) # 2.5 min 30% A (Fluss : 2 ml/min) + 3.0 min 5% A (Fluss : 2 ml/min) + 4.5 min 5% A (Fluss : 2 ml/min) ; Ofen : 50°C ; UV-Detektion : 210 nm.

Methode 24 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : HP 1100 Series ; UV DAD ; Säule : Phenomenex Synergi 2p Hydro-RP Mercury 20x4 mm ; Eluent A : 1 1 Wasser + 0.5 ml 50% ige Ameisensäure, Eluent B : 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50% ige Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 90% A (Fluss : 1 ml/min) # 2.5 min 30% A (Fluss : 2 ml/min) # 3.0 min 5% A (Fluss : 2 ml/min) e 4.5 min 5% A (Fluss : 2 ml/min) ; Ofen : 50°C ; U-V-Detektion : 210 nm.

Methode 25 (LC-MS) : Gerätetyp MS : Micromass ZQ ; Gerätetyp HPLC : HP 1100 Series ; W DAD ; Säule : Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50x2 mm, 3.0 jim ; Eluent A : Wasser + 500 µl 50% ige Ameisensäure/1, Eluent B : Acetonitril + 500 ul 50% ige Ameisensäure/1 ; Gradient : 0. 0 min 70% B E 4.5 min 90% B ; Ofen : 50 °C, Fluss : 0.8 ml/min, UV-Detektion : 210 nm.

Methode 26 (LC-MS) : Instrument : Micromass Quattro LCZ, mit HPLC Agilent Serie 1100 ; Säule : Grom-SIL120 ODS-4 HE, 50 mm x 2.0 mm, 3 um ; Eluent A : 1 1 Wasser + 1 ml 50% ige Ameisensäure, Eluent B : 1 1 Acetonitril + 1 ml 50% ige Ameisensäure ; Gradient : 0.0 min 100% A--> 0.2 min 100% A @ 2.9 min 30% A # 3.1 min 10% A # 4.5 min 10% A ; Ofen : 55°C ; Fluss : 0.8 ml/min ; UV-Detektion : 208-400 nm.

Chemische Synthese der Beispiele Synthese der Ausgangsverbindungen : Synthese von substituierten Phenylalaninderivaten am Beispiel von (-)-3- (2- Benzyloxy-5-iodophenyl) -2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure [(-)-6A]

Synthese von geschützten Biphenyl-bisaminosäuren am Beispiel von 2 (@-Benzyl- <BR> <BR> oxycarbonylanino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 ()-benzyloxycarbonyl-2 (S)-tert-bu-<BR> <BR> toxycarbonyl-amino-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2 (S)-trimethylsilanyl-ethyl- ester (12A)

Synthese geschützter Hydroxyornithinderivate am Beispiel von 5-Benzyloxycar- bonylamino-2 (S)-tert-butoxcarbonylamino-4 (R)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pen- tansäure (14A)

Synthese geschützter Biphenomycin-Derivate am Beispiel von (8S,11S,14S)-14- [ (tert-Butoxycarbonyl) amino]-11- { (2R)-3- [ (tert-butoxycarbonyl) amino]-2-hydroxy- propyl}-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo[14. 3.1. 12,6]-hencosa- 1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure (21A)

Ausizanizsverbindungen Beispiel 1A 2-Hydroxy-5-iod-benzaldehyd Zu einer Lösung von 188 g (1.54 mol) Salicylaldehyd in 1 1 wasserfreiem Di- chlormethan in einem ausgeheizten Kolben wird eine Lösung von 250 g (1.54 mol) Iodchlorid in 600 ml wasserfreiem Dichlormethan unter Argon über 2 h zugetropft.

Nach 3 Tagen Rühren bei RT wird eine gesättigte wässrige Natriumsulfit-Lösung unter kräftigem Rühren hinzugegeben. Die organische Phase wird abgetrennt, einmal mit Wasser und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird eingedampft und der Rückstand aus Essigsäureethylester umkristallisiert. Man erhält 216 g (57% d. Th. ) des Pro- duktes.

LC-MS (ESI, Methode 10) : m/z= 246 (M-H)-.

1H-NMR (400 MHz, CDC13) : 8 = 6. 7 (d, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.85 (d, 1H), 9.83 (s, 1H), 10.95 (s, 1H).

Beispiel 2A 2-Benzyloxy-5-iodbenzaldehyd

Zu einer Lösung von 100 g (0.40 mol) 2-Hydroxy-5-iodbenzaldehyd (Beispiel 1A) in 1.5 1 Dimethylformamid werden 67.2 g (0.48 mol) Kaliumcarbonat und nach wenigen Minuten 51 ml (0.44 mol) Benzylchlorid hinzugegeben. Das Reaktions- gemisch wird 24 h bei 120°C unter Rückfluss gerührt. Nach weiteren 24 h Rühren bei RT und Zugabe von 1. 5 1 Wasser kristallisiert ein Feststoff aus. Der Niederschlag wird abgesaugt, zweimal mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Der Feststoff wird aus 230 ml Ethanol umkristallisiert. Man erhält 122.9 g (90% d. Th.) des Produktes.

LC-MS (ESI, Methode 10) : m/z = 338 (M+H) +.

IH-NMR (400 MHz, CDC13) : 8 = 5.18 (s, 2H), 6.84 (d, 1H), 7.33-7. 45 (m, 5H), 7.78 (dd, 1H), 8. 12 (d, 1H), 10.4 (s, 1H).

Beispiel 3A (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-methanol Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 33.98 g (100.5 mmol) 2-Benzyloxy-5-iod- benzaldehyd (Beispiel 2A) in 200 ml Dichlormethan werden 100 ml einer 1 M Diisobutylaluminiumhydrid-Lösung in Dichlormethan zugegeben. Nach 2 h Rühren bei 0°C wird unter Kühlung eine gesättigte Kaliumnatriumtartrat-Lösung hinzugegeben (stark exotherme Reaktion) und das Reaktionsgemisch 2 h weiter gerührt. Nach Abtrennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft. Man erhält 31.8 g (93% d. Th. ) des Produktes.

1H-NMR (400 MHz, CDC13) : 6 = 2.17 (t, 1H), 4. 68 (d, 2H), 5.1 (s, 2H), 6.72 (d, 1H), 7.32-7. 42 (m, 5H), 7.54 (dd, 1H), 7.63 (d, 1H).

Beispiel 4A 1-Benzyloxy-2-brommethyl-4-iodbenzol Zu einer Lösung von 35 g (103 mmol) (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl) -methanol (Bei- spiel 3A) in 350 ml Toluol werden bei 40°C 3.3 ml (35 mmol) Phosphortribromid hinzugetropft. Innerhalb von 15 min wird die Temperatur des Reaktionsgemisches auf 100°C erhöht und weitere 10 min bei dieser Temperatur gerührt. Nach Ab- kühlung werden die beiden Phasen getrennt. Die organische Phase wird zweimal mit destilliertem Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und einge- dampft. Die Ausbeute beträgt 41 g (99% d. Th.).

'H-NMR (300 MHz, CDC13) : 8 = 4.45 (s, 2H), 5.06 (s, 2H), 7.30 (m, 8H).

Beispiel 5A 2- (2-Benzyloxy-5-iod-benzyl)-2-tert-butoxycarbonylamino-malons äure- diethylester

Zu einer Lösung von 28 g (101.7 mmol) 2- [N-(tert-Butoxycarbonyl) amino] malon- säure-diethylester und 7.9 ml (101.7 mmol) Natriumethylat in 300 ml Ethanol werden 41 g (101.7 mmol) von 1-Benzyloxy-2-brommethyl-4-iodbenzol (Beispiel 4A) hinzugegeben. Nach 3 h Rühren bei RT saugt man das ausgefallene Produkt ab.

Nach Trocknung im Vakuum werden 55 g (90% d. Th. ) Produkt isoliert.

1H-NMR (400 MHz, CDC13) : b = 1. 12 (t, 6 H), 1.46 (s, 9H), 3.68 (s, 2H), 3.8-3. 9 (m, 2H), 4.15-4. 25 (m, 2H), 5.0 (s, 2H), 5.7 (s, 1H), 6.58 (d, 1H), 7.28-7. 4 (m, 6H), 7.4 (dd, 1H).

Beispiel 6A (+/-)-3- (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2-tert-butoxycarbonylamino-propio nsäure Zu einer Suspension von 58 g (97 mmol) 2- (2-Benzyloxy-5-iod-benzyl)-2-tert- butoxycarbonylamino-malonsäurediethylester (Beispiel 5A) in 800 ml eines Gemisches von Ethanol und Wasser (7 : 3) werden 400 ml 1 N Natronlauge hinzu- gegeben. Nach 3 h unter Rückfluss wird der pH-Wert der Reaktionsmischung nach Abkühlung auf Raumtemperatur mit konz. Salzsäure auf ca. pH 2 eingestellt. Die Reaktionsmischung wird eingedampft. Der Rückstand wird in MTBE und Wasser aufgenommen. Die wässrige Phase wird dreimal mit MTBE extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Trocknung im Vakuum erhält man 47 g (97% d. Th. ) des Produkts.

H-NMR (400 MHz, DMSO) : 5 = 1. 32 (s, 9H), 2.68 (dd, 1H), 3.18 (dd, 1H), 4.25 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.88 (d, 1 H), 7.08 (d, 1H), 7.30-7. 40 (m, 3 H), 7.45-7. 55 (m, 3 H).

Beispiel (-)-6A <BR> <BR> 3- (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure Das Racemat aus Beispiel 6A [ (+/-)-3- (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (S)-tert-butoxy- carbonylamino-propionsäure] wird an einer chiralen stationären Kieselgelphase, basierend auf dem Selektor aus Poly (N-Methacryloyl-L-Leucin-dicyclopropyl- methylamid), mit einem Gemisch aus i-Hexan/Ethylacetat als Elutionsmittel ge- trennt. Das zuerst eluierte Enantiomer (98.9% ee) ist in Dichlormethan rechtsdrehend ( [a] D : + 3. 0°, c = 0.54, Dichlormethan) und entspricht dem (R)-Enantiomer Beispiel (+) -6A, wie durch Einkristallröntgenstrukturanalyse bestimmt wurde. Die Reinheit des zweiten, linksdrehenden Enantiomers Beispiel (-) -6A, d. h. des (S)- Enantiomers, beträgt > 99% ee.

Beispiel 7A 3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-propionsäure benzylester

Unter Argon werden 10 g (20.11 mmol) (-)-3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (5)-tert- butoxycarbonylamino-propionsäure [Beispiel (-) -6A] in 200 ml Acetonitril gelöst.

Dazu werden 246 mg (2.01 mmol) 4-Dimethylaminopyridin und 4.16 ml (40.22 mmol) Benzylalkohol hinzugefügt. Die Mischung wird auf-10°C abgekühlt und mit 4.63 g (24.13 mmol) EDC versetzt. Man lässt alles langsam auf RT kommen und rührt über Nacht. Nach ca. 16 h wird das Gemisch im Vakuum einrotiert und der Rückstand säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel : Dichlormethan) ge- reinigt. Ausbeute : 10.65 g (88% d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 6.03 min ; LC-MS (Methode 9) : Rt = 4.70 min MS (DCI) : m/z = 605 (M+NH4) +.

1H-NMR (200 MHz, CDC13) : 5 = 1.38 (s, 9H), 2.97 (dd, 1H), 3.12 (dd, 1H), 4.50- 4.70 (m, 1H), 5.00-5. 10 (m, 4H), 5.22 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 7.28-7. 36 (m, 7H), 7.37- 7.52 (m, 5H).

Beispiel 8A 3- [2-Benzyloxy-5- (4, 4,5, 5-tetramethyl- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-yl)-phenyl]-2 (S)- tert-butoxycarbonylamino-propionsäurebenzylester Zu einer Lösung von 10.30 g (17.53 mol) 3- (2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (S)-tert- butoxycarbonylamino-propionsäurebenzylester (Beispiel 7A) in 70 ml DMSO werden 5.15 g (52.60 mmol) Kaliumacetat zugegeben. Die Mischung wird deoxy- geniert, indem durch die kräftig gerührte Lösung 15 min lang Argon durchgeleitet wird. Dann werden 5.17 g (20.16 mmol) Bis (pinacolato) diboran und 515 mg (0. 70 mmol) Bis (diphenylphosphino) ferrocenpalladium (II) chlorid zugegeben. Unter

leichtem Argonstrom wird nun auf 80°C erhitzt und nach 6 h wieder abgekühlt. Die Mischung wird säulenchromatographisch an Silicagel (Laufmittel : Dichlormethan) gereinigt. Vorhandene Reste an DMSO werden per Kugelrohrdestillation abgetrennt.

Der Rückstand wird erneut säulenchromatographisch an Silicagel (Laufinittel : Cyclo- hexan : Ethylacetat 4 : 1) gereinigt.

Ausbeute : 8.15 g (79% d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 6.26 min.

LC-MS (Methode 6) : Rt = 5.93 und 6.09 min.

MS (EI) : m/z = 588 (M+H) +. lH-NMR (200 MHz, CDC13) : 8 = 1.26 (s, 6H), 1.33 (s, 9H), 1.36 (s, 6H), 2.91-3. 10 (m, 1H), 3.12-3. 28 (m, 1H), 4.49-4. 68 (m, 1H), 5.05 (dd, 2H), 5.11 (dd, 2H), 5.30 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 7.27-7. 37 (m, 7H), 7.38-7. 42 (m, 3H), 7.55-7. 62 (m, 1H), 7.67 (dd, 1H).

Beispiel 9A 2 (S)-Amino-3- (2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure Hydrochlorid 12 g (24.13 mmol) 3-(2-Benzyloxy-5-iod-phenyl)-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino- propionsäure [Beispiel (-) -6A] werden unter Argon in 60 ml 4 M Salzsäure-Lösung in Dioxan gegeben und 2 h bei RT gerührt. Die Reaktionslösung wird eingeengt und im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 10.47 g (100 % d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 4.10 min.

MS (EI) : m/z = 398 (M+H-HCl) +.

IH-NMR (200 MHz, CDC13) : 5 = 3.17-3. 31 (m, 1H), 3.33-3. 47 (m, 1H), 4.22 (t, 1H), 5.13 (s, 2H), 6.69 (d, 1 H), 7.24-7. 40 (m, 2H), 7.41-7. 45 (m, 2H), 7.48 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 8.66 (br. s, 2H).

Beispiel 10A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- (2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure Eine Lösung aus 10.46 g (24.13 mmol) 2 (S)-Amino-3-(2-benzyloxy-5-iod- phenyl) -propionsäure Hydrochlorid (Beispiel 9A) in DMF wird mit 9.25 ml (53. 09 mol) N, N Düsopropylethylamin versetzt. Dazu gibt man 6.615 g (26. 54 mmol) N (Benzyloxycarbonyl) succinimid (Z-OSuc) zu. Die resultierende Lösung wird über Nacht gerührt und dann im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird in Dichlormethan aufgenommen und jeweils zweimal mit 0.1 N Salzsäurelösung und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Mischung wird durch Säulen- chromatographie an Silicagel (Laufmittel : Cyclohexan/Diethylether 9 : 1 bis 8 : 2) gereinigt.

Ausbeute : 8.30 g (65% d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 5.01 min.

MS (EI) : m/z = 532 (M+H) +.

1H-NMR (200 MHz, DMSO) : 6 = 3.14-3. 3 (m, 2 H), 4.25-4. 45 (m, 1H), 4.97 (s, 2H), 5.14 (s, 2H), 6.88 (d, 1 H), 7.20-7. 56 (m, 12 H), 7.62 (d, 1 H), 12.73 (br. s, 1H).

Beispiel 11A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- (2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure- (2- trimethylsilyl)-ethylester 8.35 g (15.7 mmol) 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2-benzyloxy-5-iod-phe- nyl) -propionsäure (Beispiel 10A) werden in 150 ml THF vorgelegt und mit 2.14 g (18. 07 mmol) 2-Trimethylsilylethanol und 250 mg (2.04 mmol) 4-Dimethyl- aminopyridin versetzt. Die Mischung wird auf 0° abgekühlt und mit 2.38 g (2.95 ml, 18.86 mmol) N, N'-Diisopropylcarboddiimid, gelöst in 40 ml THF, versetzt. Es wird über Nacht bei RT gerührt und zur Aufarbeitung im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird in Dichlormethan aufgenommen und jeweils zweimal mit 0.1 N Salzsäurelösung und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung ausgeschüttelt.

Die organische Phase wird getrocknet, filtriert und eingeengt. Die Mischung wird säulenchromatographisch (Silicagel, Laufmittel : Cyclohexan/Diethylether 9 : 1 bis 8 : 2) gereinigt.

Ausbeute : 8.2 g (83% d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 6.42 min MS (EI) : m/z = 532 (M+H) +.

'H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 6 = 0. 01 (s, 9H), 0.88 (t, 2H), 2.96 (dd, 1H), 3.13 (dd, 1H), 4.04-4. 17 (m, 2H), 4.51-4. 62 (m, 1H), 4. 95-5. 05 (m, 4H), 5.44 (d, 1H), 6.64 (d, 1H), 7.25-7. 33 (m, 7 H), 7.37 (dd, 4H), 7.45 (dd, 1H).

Beispiel 12A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxycar- <BR> <BR> bonyl-2-tert-butoxycarbonylamino-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propi onsäure-2- (tri- methylsilyl)-ethylester Methode A : Zu einer Lösung von 0.316 g (0.5 mmol) 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- (2-benzyl- oxy-5-iod-phenyl)-propionsäure- (2-trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel l lA) in 2. 5 ml entgastem DMF werden unter Argon bei RT 45. 8 mg (0.05 mmol) Bis (diphenylphosphino) ferrocen-palladium (II) chlorid (PdCl2 (dppf)) und 0.325 g (1. 0 mmol) Cäsiumcarbonat hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf 40°C erhitzt. Innerhalb von 30 min wird eine Lösung von 0.294 g (0.5 mmol) 3- [2-Ben- zyloxy-5- (4, 4,5, 5-tetramethyl- [1, 3,2] dioxaborolan-2-yl) -phenyl]-2 (S)-tert-butoxycar- bonylamino-propionsäurebenzylester (Beispiel 8A) in 2.5 ml entgastem DMF zugetropft. Das Reaktionsgemisch wird 4 h bei 40°C und weitere 2 h bei 50°C gerührt. Das Lösungsmittel wird eingedampft und der Rückstand in Essig- säureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird zweimal mit Wasser ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Dichlormethan/Essigsäureethylester (30/1) gereinigt. Man erhält 0.320 g (66% d. Th. ) des Produktes.

Methode B : Eine Lösung von 6.99 g (11.06 mmol) 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3-(2- benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure- (2-trimethylsilyl)-ethylester (Beispiel 11A)

und 6.50 g (11.06 mmol) 3- [2-Benzyloxy-5- (4, 4,5, 5-tetramethyl- [1, 3,2] dioxa- <BR> <BR> <BR> borolan-2-yl) -phenyl]-2 ()-tet-butoxycarbonylamino-propionsäurebenzylester (Bei- spiel 8A) in 40 ml DMF wird entgast, indem Argon durchgeleitet wird (ca. 30 min).

Anschließend gibt man 812 mg (1. 11 mmol) Bis (diphenylphosphino) ferrocen- palladium (II) chlorid (PdCl2 (dppf)) und 7.21 g (22.13 mmol) Cäsiumcarbonat dazu.

Das Reaktionsgemisch wird mit Argon leicht überströmt und für 2. 5 h auf 80°C erhitzt. Die Mischung wird abgekühlt und säulenchromatographisch an Silicagel (Laufinittel : Cyclohexan/Ethylacetat 7 : 3) gereinigt. Vor der kompletten Einengung zur Trockne wird die Mischung mit Diisopropylether versetzt. Die entstandenen Kristalle werden abgesaugt und im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 6.54 g (61% d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 7.65 min MS (EI) : m/z = 987 (M+Na), 965 (M+H) +.

1H-NMR (200 MHz, CDC13) : 8 = 0.00 (s, 9H), 0.90 (t, 2H), 1.37 (s, 9H), 3.02-3. 35 (m, 4H) 4.06-4. 25 (m, 2H), 4.55-4. 73 (m, 2H), 4.98-5. 18 (m, 8H), 5.40 (d, 1H), 5.63 (d, 1H), 6. 88-7. 00 (m, 2H), 7.19-7. 39 (m, 20H), 7.42-7. 53 (m, 4H).

Beispiel 13A Na-(tert-Butoxycarbonyl)-N#(benzyloxycarbonyl)-(2S,4R)-hydro xyornithin- lacton Eine Lösung von 7.60 g (17. 3 mmol) 5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxy- carbonylamino-4 (R)-hydroxy-pentansäure-tert-butylester (Darstellung beschrieben in Org. Lett., 2001,3, 20,3153-3155) in 516 ml Dichlormethan und 516 ml Trifluoressigsäure wird 2 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird eingedampft.

Das zurückbleibende Rohprodukt wird in 2.6 1 wasserfreiem Methanol gelöst und unter Rühren bei 0°C werden 6.3 g (28.8 mmol) Di-tert-Butyldicarbonat und 7.3 ml (52.43 mmol) Triethylamin hinzugegeben. Nach 15 h wird die Reaktionslösung eingedampft und der Rückstand in 1 1 Essigsäureethylester aufgenommen. Nach Trennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit einer 5%-igen Zitronensäure-Lösung, zweimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt.

Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Toluol/Aceton (5/1) gereinigt. Man erhält 4.92 g (78% d. Th. ) des Produktes.

LC-HR-FT-ICR-MS (Methodel3) : ber. für ClsH28N306 (M+NH4) + 382. 19726 gef. 382. 19703.

1H-NMR (400 MHz, CDC13) : 8 = 1.45 (s, 9H), 2.3-2. 4 (m, 1H), 2.45-2. 55 (m, 1H), 3.3-3. 4 (m, 1H), 3.5-3. 6 (m, 1H), 4.17-4. 28 (m, 1H), 4.7-4. 8 (m, 1H), 5.0-5. 15 (m, 4H), 7.3-7. 4 (m, 5H).

Beispiel 14A 5-Benzyloxycärbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)- (tert-butyl- dimethyl-silanyloxy)-pentansäure Methode A : Zu einer Lösung von 0.73 g (2 mmol) Na-(tert-Butoxyvarbonyl)-N£ (benzyloxy- carbonyl)-(2S, 4R)-hydroxyornithinlacton (13A) in 50 ml 1,4-Dioxan werden bei 0°C 2 ml 1 M Natronlauge hinzugegeben. Die Reaktionslösung wird 2 h gerührt und dann eingedampft. Der Rückstand wird in 50 ml Dichlormethan aufgenommen. Zu dieser Lösung werden 1.12 ml (8 mmol) Triethylamin hinzugegeben und nach einer kurzen

Zeit 1.38 ml (6 mmol) Trifluormethansulfonsäure-tert-butyl-dimethylsilylester zuge- tropft. Nach 3 h Rühren bei RT wird das Reaktionsgemisch mit Dichlormethan verdünnt. Die organische Phase wird mit 1 N Natriumbicarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird in 7.4 ml 1,4- Dioxan gelöst und mit 36.2 ml 0.1 N Natronlauge versetzt. Nach 3 h Rühren bei RT wird die Reaktionslösung eingedampft und der Rückstand in Wasser und Essig- säureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird dreimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 0.90 g (90% d. Th. ) des Produktes.

Methode B : Eine Lösung von 14.0 g (38 mmol) 2 (@-tert-Butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy-5- nitro-pentansäure-benzylester in 840 ml Ethanol/Wasser 9/1 wird mit 1.96 g Palla- dium auf Kohle (10% ig) versetzt und unter Normaldruck 24 h bei RT hydriert. Es wird über Kieselgur filtriert, und das Filtrat wird mit 14.7 g (114 mmol) Diiso- propylethylamin versetzt. Anschließend werden 11.4 g (45.6 mmol) N (Benzyloxycarbonyloxy)-succinimid hinzugegeben, und es wird 4 h bei RT gerührt.

Die Lösung wird eingeengt, der Rückstand in Dichlormethan aufgenommen und zweimal mit 0.1 N Salzsäure ausgeschüttelt. Die organische Phase wird abgetrennt und mit 14.7 g (114 mmol) Diisopropylamin alkalisch gestellt. Die Lösung wird auf 0°C gekühlt, mit 30.1 g (114 mmol) Trifluormethansulfonsäure-dimethyl-tert-butyl- silylester versetzt und bei RT 2.5 h gerührt. Die organische Phase wird mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat ge- trocknet und einrotiert. Der Rückstand wird in 50 ml Dioxan gelöst, mit 200 ml 0. 1N Natronlauge versetzt und 3 h bei RT gerührt. Es wird mehrmals mit Essig- säureethylester extrahiert, die gesammelten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird an Kiesel- gel chromatographiert (Laufmittel : Dichlormethan/Ethanol 20/1,9/1). Man erhält 8.11 g (43% d. Th. ) des Produkts.

MS (ESI) : m/z = 497 (M+H) +.

H-NMR (300 MHz, d6-DMSO) : 5 = 0.00 (s, 6H), 0.99 (s, 9H), 1.33 (s, 9H), 1.59 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 2.75-3. 15 (m, 2H), 3.81 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 4.96 (m, 2H), 7.04 (d, 1H), 7.19 (m, 1H), 7.30 (m, 5H), 12.37 (br. s, 1H).

Beispiel 15A <BR> 3-[3'-(2 (0-Amino-2-benzyloxycarbonyl-ethyl)-4, 4'-bis-benzyloxy-biphenyl-3-yll- 2 (S)-benzyloxycarbonylamino-propionsäure-2- (trimethylsilyl)-ethylester Hydro- chlorid Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 2.65 g (2.75 mmol) 2 (S)-Benzyloxy- <BR> <BR> <BR> <BR> carbonylamino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 ()-benzyloxycarbonyl-2-tert-butoxycar- bonylamino-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2- (trimethylsilyl)-ethylester (Bei- spiel 12A) in 50 ml wasserfreiem Dioxan werden 50 ml einer 4 M Salzsäure-Dioxan- Lösung über ca. 20 min hinzugegeben. Nach 3 h Rühren wird die Reaktionslösung eingedampft und im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 100% d. Th.

HPLC (Methode 3) : Rt = 5.96 min.

MS (EI) : m/z = 865 (M+H) +.

Beispiel 16A 2 (S)- [5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)- (tert- <BR> <BR> butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3- 4, 4'-bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyl-<BR> <BR> oxycarbonylamino-2- (2-trimethylsilyl-ethoxycarbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}- propionsäurebenzylester Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 0.520 g (0.58 mmol) 3- [3'- (2 (S)-Amino-2- benzyloxycarbonyl-ethyl)-4, 4'-bis-benzyloxy-biphenyl-3-yl] -2 (S)-benzyloxycarbo- nylamino-propionsäure- (2-trimethylsilyl)-ethylester Hydrochlorid (Beispiel 15A) und 0.287 g (0.58 mmol) 5-Benzyloxycarbonylamino-2 ()-tert-butoxycarbonyl- amino-4 (R)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentansäure (Beispiel 14A) in 7.3 ml wasserfreiem DMF werden 0.219 g (0.58 mmol) HATU und 0.082 g (0.63 mmol) N, N-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Nach 30 min Rühren bei 0°C werden zusätzliche 0.164 g (1.26 mmol) N, N-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 15 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird dann eingedampft und der Rückstand in Essigsäureethylester aufgenommen. Die organische Phase wird dreimal mit Wasser und einmal mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt.

Das Rohprodukt wird durch Kieselgelchromatographie mit Dichlor- methan/Essigsäureethylester (Gradient 30/1-"20/1-"10/1) gereinigt. Man erhält 533 mg (66% d. Th. ) des Produktes.

LC-MS (ESI, Methode 12) : m/z = 1342 (M+H) +, 1365 (M+Na) +.

Beispiel 17A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3-{4, 4'-bis-benzyloxy-3'-12 (5)-benzyloxycar- <BR> <BR> bonyl-2-(5-benzyloxycarbonylamino-2 (æ-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-<BR> <BR> hydroxy-pentanoylamino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure Methode A : Zu einer Lösung von 0.360 g (0.27 nunol) 2 (S)- [5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)- <BR> <BR> tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3-<BR> ; <BR> {4, 4'-bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxycarbonylamino-2- (2-trimethylsilyl-ethoxy- carbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäurebenzylester (Beispiel 16A) in 22.5 ml wasserfreiem DMF werden 0.80 ml einer 1.0 M Lösung von Tetra- butylammoniumfluorid in THF hinzugegeben. Nach 1 h Rühren bei RT wird das Reaktionsgemisch auf 0°C gekühlt und mit Wasser versetzt. Nach Zugabe von Essigsäureethylester werden die Phasen getrennt. Die organische Phase wird mit einer 1.0 M Lösung Kaliumhydrogensulfat gewaschen, über Natriumsulfat ge- trocknet und eingedampft. Man erhält 0.331 g des Rohproduktes. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

LC-MS (ESI, Methode 10) : m/z 1129 (M+H) +.

LC-HR-FT-ICR-MS : ber. für C65H69N4O14 (M+H)+ 1129. 48048 gef. 1129.48123.

Methode B : Zu einer Lösung von 800 mg (0.6 mmol) 2 (S)- [5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert- butoxycarbonylamino-4 (R)- (tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino]-3- {4, 4'- bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxycarbonylamino-2- (2-trimethylsilyl-ethoxycarbo- nyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäurebenzylester (Beispiel 16A) in 26 ml abso- lutem DMF werden bei RT tropfenweise 1.8 ml IN Tetrabutylammoniumfluorid in THF hinzugegeben. Nach 25 min bei RT wird auf 0°C gekühlt und mit viel Eiswasser versetzt. Es wird sofort mit Ethylacetat und etwas IN Salzsäure-Lösung versetzt. Die organische Phase mit Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und 1 h im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

Beispiel 18A 2 (S)- (5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy- pentanoylamino)-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxycarbonylamino-2-<BR> pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsä urebenzylester Methode A : Zu einer auf-25°C gekühlten Lösung von 104 mg (92 u. mol) 2 (S)- <BR> <BR> Benzyloxycarbonylamino-3- {4, 4'-bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxycarbonyl-2- (5- benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy-pentanoyl-

amino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure (Beispiel 17A) in 3 ml Dichlormethan werden unter Argon 90 mg Pentafluorphenol (0.49 mmol), in wenig Dichlormethan gelöst, 1.1 mg 4-Dimethylaminopyridin (10 uM) und 19.4 mg (0.10 mmol) EDC hinzugegeben. Nach 15 h Rühren wird das Reaktionsgemisch eingeengt. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

LC-MS (ESI, Methode 11) : m/z = 1317 (M+Na) +, 1295 (M+H) + LC-HR-FT-ICR-MS : ber. für C7IH68FsN4014 (M+H) + 1295. 46467 gef. 1295.46430.

Methode B : 691 mg (Rohgemisch, ca. 0.6 mmol) 2 (<S)-Benzyloxycarbonylamino-3- {4, 4'-bis- benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxycarbonyl-2- (5-benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert- butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy-pentanoylamino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}- propionsäure (Beispiel 17A) werden in 25 ml Dichlormethan vorgelegt und mit 547. 6 mg (2.98 mmol) Pentafluorphenol, gelöst in 6 ml Dichlormethan, versetzt.

Man fügt 7.3 mg (0.06 mmol) DMAP hinzu und kühlt auf-25°C (Etha- nol/Kohlendioxid-Bad). Bei-25°C werden 148 mg (0.774 mmol) EDC hinzugefügt.

Die Mischung erwärmt sich über Nacht langsam auf RT. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum kurz getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

Beispiel 19A 5,17-Bis-benzyloxy-14 (S)-benzyloxycarbonylamino-11 ()- (3-benzyloxycarbonyl- amino-2 (R)-hydroxy-propyl)-10, 13-dioxo-9, 12-diaza-tricyclo [14.3. 1. 12'6]- henicosa-1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S)-carbonsäurebenzylester Methode A : Zu einer Lösung von 119. 3 mg 2 (S)- (5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert- <BR> <BR> <BR> <BR> butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy-pentanoylamino)-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> benzyloxycarbonylamino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)- biphenyl-3-yl]-pro- pionsäurebenzylester (Beispiel 18A) in 2.7 ml 1,4-Dioxan werden 4 ml einer 4 M Salzsäure-Lösung in 1, 4-Dioxan hinzugegeben. Bis zum Reaktionsende werden weitere 1.5 ml 4 M Salzsäure-Lösung in 1,4-Dioxan zugegeben. Die Reaktionslösung wird eingedampft und zweimal mit Chloroform codestilliert. Das Rohprodukt (LC- HR-FT-ICR-MS, Methode 13 : ber. für C66H60FsN4Ol2 (M+H) + 1195.41224, gef.

1195.41419) wird in 100 ml Chloroform gelöst und über 3 h zu einer sehr gut gerührten Suspension von 200 ml Chloroform und 100 ml gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung hinzugetropft. Die Reaktionsmischung wird 2 h kräftig gerührt. Nach Trennung der zwei Phasen wird die wässrige Phase mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit 5%-iger wässriger Zitronensäure-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Das Rohprodukt wird mit Acetonitril gewaschen und im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 60.5 mg (65% d. Th.)

LC-MS (ESI, Methode) : m/z 1011 (M+H) +.

Methode B : Circa 0.595 mmol 2 (S)- (5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonyl- amino-4 (R)-hydroxy-pentanoylamino)-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxy- <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> carbonyl-amino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl -3-yl]-propionsäure- benzylester (Beispiel 18A) werden in 8 ml Dioxan gelöst und dann bei 0°C mit 16 ml 4 N Salzsäure-Lösung in Dioxan tropfenweise versetzt. Nach 45 min erfolgt erneute Zugabe von 6 ml 4 N Salzsäure-Lösung in Dioxan und nach 15 min nochmals 8 ml.

Die Mischung wird 30 min bei 0°C gerührt, bevor die Reaktionslösung schonend eingeengt, mit Chloroform codestilliert (zweimal) und kurz im Hochvakuum getrocknet wird. Das Rohprodukt (732 mg, 0.59 mmol) wird in 1000 ml Chloroform gelöst und tropfenweise mit einer Lösung von 6 ml Triethylamin in 50 ml Chloroform versetzt. Es wird über Nacht bei RT gerührt. Zur Aufarbeitung wird das Gemisch schonend im Vakuum einrotiert und der Rückstand in Acetonitril verrührt.

Die entstandenen Kristalle werden abgesaugt, mit Acetonitril gewaschen und im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 360 mg (60 % d. Th.).

MS (EI) : m/z = 1011 (M+H) +.

HPLC (Methode 3) : Rt = 5.59 min.

'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) : 8 = 1.52-1. 65 (m, 1H), 1.73-1. 84 (m, 1H), 2.82- 3.01 (m, 3H), 3.02-3. 11 (m, 1H), 3.46 (s, 1H), 3.57-3. 68 (m, 1H), 4.47-4. 56 (m, 1H), 4.64-4. 71 (m, 1H), 4.73-4. 85 (m, 2H), 4.88-5. 00 (m, 4H), 5.09 (s, 2H), 5.14-5. 20 (m, 4H), 6.29 (d, 1H), 7.00-7. 11 (m, 4H), 7.21-7. 40 (m, 20H), 7.41-7. 48 (m, 9H), 8.77 (d, 1H), 8.87 (d, 1H).

Beispiel 20A 14 (S)-Amino-11 (S)- (3-amino-2 (R)-hydroxy-propyl)-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo- 9,12-diaza-tricyclo [14. 3.1. 12'6] henicosa-1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S)- carbonsäure Dihydrochlorid Methode A : Eine Lösung von 10 mg (9. 9 µM) 5,17-Bis-benzyloxy-14 (S)-benzyloxycar- bonylamino-11(S)-(3-benzyloxcarbonylamino-2(R)-hydroxy-propy l)-10, 13-dioxo- 9,12-diaza-tricyclo [14.3. 1. 126] henicosa-1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (5)-car- bonsäurebenzylester (Beispiel 19A) und 50 ul Ameisensäure in 10 ml Ethanol wird in Gegenwart von 10 mg Pd/C über 16 h unter Wasserstoff bei Normaldruck kräftig gerührt. Die Reaktionslösung wird eingedampft, der Rückstand in 1 N Salzsäure- Lösung aufgenommen und filtriert. Das Rohprodukt wird über eine RP 18 Kartusche mit Acetonitril/Wasser gereinigt. Man erhält 2 mg (42.8% d. Th. ) des Produktes.

Methode B : Es werden 200 mg (0.20 mmol) 5, 17-Bis-benzyloxy-14 (S)-benzyloxycarbonylamino- 11 (S)-(3-benzyloxycarbonylamino-2 (R)-hydroxy-propyl)-10, 13-dioXo-9, 12-diaza-tri- cyclo [14. 3. 1. 126] henicosa-l (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S)-carbonsäure-ben- zylester (Beispiel 19A) in einem Gemisch aus 220 ml Essigsäure/Wasser/Ethanol 4 : 1 : 1 gegeben (Ethanol kann durch THF substituiert werden). Dazu gibt man 73 mg 10 % ige Palladium/Kohle (10 % Pd/C) und hydriert anschließend 15 h bei

Normaldruck. Das Reaktionsgemisch wird über vorgewaschenem Kieselgur filtriert und das Filtrat im Vakuum einrotiert. Der Rückstand wird mit 4.95 ml 0.1 N wässriger Salzsäure versetzt und eingeengt. Man verrührt den Rückstand mit 10 ml Diethylether und dekantiert ab. Der zurückgebliebene Feststoff wird im Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 103 mg (95 % d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 3.04 min ; LC-MS (Methode 6) : Rt = 0. 38 min MS (EI) : m/z = 473 (M+H) +.

1H-NMR (400 MHz, D2O) : 8 = 2.06-2. 20 (m, 1H), 2.74-2. 89 (m, 1H), 2.94-3. 05 (m, 1H), 3.12-3. 25 (m, 2H), 3. 53 (d, 1H), 3.61-3. 72 (m, 1H), 3.97-4. 07 (m, 1H), 4. 53 (s, 1H), 4.61 (d, 1H), 4.76-4. 91 (m, 12H), 7.01-7. 05 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 7.40-7. 45 (m, 2H), 7.51 (d, 1H).

Beispiel 21A (8S, llS, 14S)-14-[(Tert-butoxyearbonyl) amino]-11-{(2R)-3-[(tert-butoxy- carbonyl) amino]-2-hydroxypropyl}-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9, 12-diaza- tricyclo [14. 3.1. 12'6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure

Methode A : 5. 2 mg (9. 5 p. mol) 14 (S)-Amino-11 (S)- (3-amino-2 (R)-hydroxy-propyl)-5, 17-di- hydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diaza-tricyclo [14. 3.1. 12,'] henicosa- 1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S)-carbonsäure Dihydrochlorid (Beispiel 20A) werden unter Argon in trockenem Methanol (p. a., 0.5 ml) gelöst. Unter starkem Rühren werden bei Raumtemperatur zunächst eine wässrige Natriumhydro- gencarbonat-Lösung (1 M, 100 p1) und dann eine methanolische Lösung von Di- tert.-butylcarbonat (0. 1 M, 570 µl, 57 µmol) zugetropft. Nach etwa 1-2 Tagen ist vollständiger Umsatz erreicht. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingedampft und im Hochvakuum getrocknet. Das erhaltene Rohprodukt wird durch Gel- chromatographie [Sephadex LH-20 ; Methanol/l M Natriumhydrogencarbonat- Lösung (1 : 0.0001)] aufgereinigt. Man erhält 5.3 mg (83% d. Th. ). Produkt.

HPLC/UV-Vis (Methode 14) Rt = 7.4 min. max (qualitativ) =-193 nm (s), 206 (sh), 269 (m),-284 (sh) (H2O/Acetonitril + 0.01% TFA [4 : 6]).

LC-HR-FT-ICR-MS : ber. für C33HY44N4O11 [M+H] 673. 3079 gef. 673.3082.

Methode B : 50 mg (0.09 mmol) 14 (5)-Amino-11 (S)- (3-amino-2 (R)-hydroxy-propyl)-5, 17-di- hydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diaza-tricyclo [ 14. 3. 1. 126] henicosa- 1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (5)-carbonsäure Dihydrochlorid (Beispiel 20A) werden in einem Gemisch von 8 ml Methanol/Wasser (9 : 1) vorgelegt. Dazu gibt man 1 ml 1 N Natriumhydrogencarbonatlösung und anschließend 80 mg (0.37 mmol) Di- tert-butyldicarbonat in 2 ml Methanol/Wasser (9 : 1). Es wird über Nacht bei RT gerührt. Die Lösung wird zur Aufarbeitung mit 60 ml Ethylacetat und 30 ml Wasser versetzt. Die organische Phase wird einmal mit 0.1 normaler Salzsäure gewaschen, getrocknet und im Vakuum einrotiert.

Ausbeute : 49 mg (79 % d. Th.).

LC-MS (Methode 9) : Rt = 2.56 min.

MS (EI) : m/z = 673 (M+H) +.

Beispiel 22A tert-Butyl-(2R)-3[(8S,11S,14S)-8-(aminocarbonyl)-14-[(tert-b utoxycarbonyl)- amino]-5, 17-dihydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14.3. 1. l2, 6] llenicosa- 1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2-hydroxypropylcarbamat Methode A : 4.1 mg (6. 1 µmol) (8S,11S,14S)-14[(tert-Butoxcarbonyl)amino]-11{(2R)-3-[(tert- butoxycarbonyl) amino]-2-hydroxypropyl}-5, 17-dihydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diaza- tricyclo [14. 3. 1. 126] henicosa-l (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 21A) werden unter Argonschutzgasatmosphäre in trockenem N, N-Dimethylformamid (p. a., 0.5 ml) gelöst. Nach Zugabe von festem Natriumdisulfit (6.1 umol) wird bei RT eine frisch zubereitete Lösung von Diisopropylethylamin (7.9 mg, 61 mol), Ammoniumchlorid (1.6 mg, 30 u. mol) und HATU (4.6 mg, 12. 2 u. mol) in Dimethyl- formamid (0.5 ml, Lösung A) zugetropft. Bis zum vollständigen Eduktumsatz muss Lösung A noch zweifach zugegeben werden (nach 1.5 h Reaktionszeit und nach 2 h Reaktionszeit). Man rührt weitere 20 min und bricht die Reaktion dann durch Zugabe von Wasser (0.5 ml) ab. Das Reaktionsgemisch wird eingefroren und anschließend gefriergetrocknet. Das erhaltene Rohprodukt wird durch Gelchromatographie [Sepha- dex LH-20 ; Methanol/Essigsäure (1 : 0.0001) dotiert mit Natriumdisulfit] aufgereinigt.

Ausbeute : 2.2 mg (52% d. Th.).

HPLC-UV-Vis (Methode 14) : Rt = 7.06 min.

Xmax (qualitativ) =-202 mn (s), 268 (m),-285 (sh). (Ha0/Acetonitril + 0.01% TFA [4 : 6]).

LC-HR-FT-ICR-MS (Methode 13) : ber. für C33H46NsOlo [M+H] + 672.3239 gef. 672.3239.

Methode B : Unter Argon werden 49 mg (0.07 mmol) (8S, 11S, 14S)-14[(Tert-butox7ycar- bonyl) amino]-11- { (2R)-3- [ (tert-butoxycarbonyl) amino]-2-hydroxypropyl}-5, 17-di- hydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14.3. 1. 12,6]henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16,18- hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 21A) in 1 ml DMF gelöst und auf 0°C abgekühlt.

Dazu gibt man 42 mg (0.11 mmol) HATU hinzu und lässt 10 min bei 0°C nach- rühren. 1.46 ml (0.73 mmol) einer 0.5 molaren Ammoniaklösung in Dioxan werden zugetropft und über Nacht bei RT gerührt. Nach ca. 18 h werden die gleichen Mengen an Reagenzien noch einmal dazu gegeben. Nach 3 Tagen wird das Gemisch im Vakuum einrotiert und mittels RP-HPLC präparativ gereinigt.

Ausbeute : 16 mg (33 % d. Th.).

HPLC (Methode 3) : Rt = 3.83 min.

Beispiel 23A tert-Butyl-(2R)-3-[(8S,11S,14S)-8[(benzylamino0carbonyl]-14- [(tert-butoxy- carbonyl) amino]-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9,12-diazatricyclo [14.3. 1. l2, 6 henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2-hydroxypropylcarbamat

Zu einer auf 0°C gekühlten Lösung von 7 mg (0.01 mmol) ((8S,11S,14S)-14[(tert- butoxycarbonyl) mino]-11- { (2R)-3- [ (tert-butoxycarbonyl) amino]-2-hydroxypropyl}- 5,17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14. 3.1. 12,6] henicosa- 1 (20), 2 (21), 3, 5, 16,18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 21A) in 0.5 ml absolutem DMF werden unter Argon 7.9 mg (0.021 mmol) HATU zugegeben. Nach 10 min bei 0°C werden 2.3 mg (0.021 mmol) Benzylamin zugeben, und es wird über Nacht bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand mittels präparativer RP-HPLC getrennt.

Ausbeute : 1.5 mg (18.9 % d. Th.).

LC-MS (Methode 6) : Rt = 4.4 min.

MS (ESI-pos) : m/z = 785 (M+Na) +, 762 (M+H) +.

Beispiel 24A tert-Butyl-(2R)-3-[(8S, 11S, 14S)-14-[(tert-butoxyearbonyl) amino]-5, 17-di- hydroxy-8-{1 (2-hydroxyethyl) (methyl) amino] carbonyl}-10, 13-dioxo-9, 12- di-aza-tricyclo [14.3. 1. 12'6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3, 5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2- hydroxypropylcarbamat Unter Argon werden 15 mg (0.022 mmol) (8S, 11S,14S)-14-[(tert-Butoxy- carbonyl) amino]-I 1- { (2R)-3- [ (tert-butoxycarbonyl) amino] -2-hydroxypropyl} -5, 17- dihydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14. 3. 1. 12,6] henicosa-

1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 21A) in 0.5 ml DMF gelöst und auf 0°C abgekühlt. Dazu gibt man 10.2 mg (0.027 mmol) HATU und 8.64 mg (0.067 mmol) N, N-Diisopropylethylamin und lässt 10 min bei 0°C nachrühren. 3.34 mg (0.045 mmol) 2-Methylaminoethanol werden hinzugegeben und über Nacht bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird eingeengt und mittels Gilson-HPLC gereinigt.

Ausbeute : 3.8 mg (23% d. Th.).

LC-MS (Methode 21) : Ri= 3.90 min.

In Analogie zu Beispiel 24A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 25A bis 32A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 25A HPLC (Methode 3) : HO OH Rt = 3. 15 min. H O Hs HN 0 BocHN aN 4Ns OH 0 NHBoc 26A HPLC (Methode 3) : HO OU Rt 3. 18 nün. H O H AN H NHBoc 0 H0"0 OHIO NHBoc Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 27A HPLC (Methode 3) : HO OH Rt= 3. 10 min. ZON N\ H BocHN N N, CH3 NHBoc NHBoc NHBoc 28A LC-MS (Methode 21) : HO OH Rt = 3. 97 min. NH N No BocHN ZOZO OH 0 NHBoc 29A HPLC (Methode 4) : HO OU HC Rt = 4. 15 min. NEZ N BocHN H H \¢OH NHBoc 30A HPLC (Methode 3) : HO OU Rt = 3. 42 min. H O N\ NUCF3 BocHN N @N\/CF OH 0 O OH O NHBoc Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 31A HO-OH LC-MS (Methode 15) : Nu H O O H BocHN N"CH3MS (EI) : m/z = 834 ° \OH ° CH3 (M+H) NHBoc 32A/'-\/=\ HPLC (Methode 4) : HOOH g CH3 Rt 4. 16 min. H N'° \ BocHN H OH 0 OH O NHBoc

In Analogie zu Beispiel 24A können unter Verwendung von 2 Äquiv. HATU und 3 Äquiv. Amin die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 33A und 34A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 33A y\/==\ HPLC (Methode 3) : Rt = 3. 18 min H O zon N HO NHBoc o H I NHBOC NHBoc Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 34A -HPLC (Methode 3) : HO OH Rt = 3. 37 min. N N HJ J BocHN N \OH 0 OH 0 NHBoc

In Analogie zu Beispiel 24A können unter Verwendung von 2 Äquiv. HATU, 2 Äquiv. Amin und ohne Zugabe von DIPEA die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 35A und 36A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten 35A HPLC (Methode 3) : Rt = 3. 04 min 1 N t 1 N HAN BocHN N NOH OH 0 OH O NHBoc 36A HPLC (Methode 1) : HO OH OH Rt 1. 75 min. H [O [ N N OH BocHN N O H ou O NHBoc Beispiel 37A <BR> <BR> Benzyl-2- (benzyloxy)-N- (tert-butoxycarbonyl)-5-iod-L-phenylalanyl-L-<BR> <BR> phenylalaninat

0.4 g (0.8 mmol) 2- (Benzyloxy)-N- (tert-butoxycarbonyl)-5-iod-L-phenylalanin (Bei- spiel 6A) und 0.282 g (0.970 mmol, 1.2 Äquiv. ) L-Phenylalaninbenzylester Hydrochlorid werden unter Argon in 6 ml DMF vorgelegt und nacheinander mit 0.382 g (1.01 mmol, 1.25 Äquiv. ) HATU und 0.49 ml (0.36 mg, 2.8 mmol, 3.5 Äquiv. ) Diisopropylethylamin bei RT versetzt. Die Mischung wird 12 Stunden bei RT nachgerührt. Nach Versetzen mit 150 ml Wasser fällt das Produkt in Form weißer Kristalle aus. Die Kristalle werden abgesaugt, mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet.

Ausbeute : 0.669 g (quant.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 3.11 min.

MS (EI) : m/z = 735 (M+H) + In Analogie zu Beispiel 37A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 38A bis 41A hergestellt werden. Beispiel- Nr. Struktur Analytische Daten LC-MS (Methode 15) : o 38A Rt = 2. 86 min. 3A _ H X >~lf MS (EI) : m/z = 659 0 IN 0"o H 0 (M+H) + HC't"CH, CH3 LC-MS (Methode 15) : o 39A Rt = 2. 96 min. cl 0 05N NH3 jj MS (EI) : m/z = 659 No (m+H) + o / H3C'I'CH3 CH3 LC-MS (Methode 15) : o Rt = 2. 85 min. 40A MS (EI) : m/z = 644 i""Y'"Y) o H3C CH3 CH3 °X/ LC-MS (Methode 15) : 41A Rt = 2. 93 min. 'I H N MS (EI) : m/z = 659 H l o cH, J (M+H)'' H, C" CH, CH3

Beispiel 42A <BR> <BR> 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [tert-<BR> <BR> butoxycarbonylamino (3-amino- [1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyll-3- oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'-biphenyl-3-yl]] propanoat 0.593 g (0.939 mmol) 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (benzyloxy)-N- [ (benzyloxy)- carbonyl]-5- (4, 4,5, 5-tetramethyl-1, 3,2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat (Bei- spiel 84A) und 0.734 g (0.939 mmol) Benzyl-2- (benzyloxy)-N- (tert-butoxy- carbonyl)-5-iod-L-phenylalanyl-L-phenylalaninat (Beispiel 37A) werden unter Ar- gon in 6 ml DMSO gelöst. Die entstehende Lösung wird 30 min mit Argon gespült.

Anschließend versetzt man mit 0.069 g (0.094 mmol, 0.1 Äquiv. ) Bis (di- phenylphosphino) ferrocen-palladium (II) chlorid und 0.612 g (1.88 mmol, 2.0 Äquiv. ) Cäsiumcarbonat. Nach 10-minütigem Spülen mit Argon erhitzt man für 3 Tage bei 80°C, wobei weiterhin mit Argon gespült wird. Nach Abkühlen auf RT reinigt man die Rohlösung durch Chromatographie an Kieselgel (Cyclohexan/Essig- säureethylester 2 : 1). Anschließend werden die eingeengten produkthaltigen Frak- tionen über eine präparative RP-HPLC gereinigt.

Ausbeute : 0.367 g (29 % d. Th.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 3.50 min. In Analogie zu Beispiel 42A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 43A bis 46A hergestellt werden. Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. LC-MS (Methode 15) : o/\ \/o Rt = 3. 39 min. 43A H \ O'' N I/H/C O O H33CoCiH3 nor CH, H3C Ha LC-MS (Methode 15) : \/Rt = 3. 42 min. p H3 0 44A J.. L J) 44A tac 5H, MS (EI) : m/z = 1036 n Hz H Zu Hui CL, H3C Ha /\-/LC-MS (lVlethode 15) : o/\ \/o Rt = 3. 38 min. 45A VII" 0 MS (EI) : m/z 1022 N H C CHa 0 i'+ 3 C 3 Her CH, Cl3 9\oOo/4 LC-MS (Methode 15) : 46A Rt 3. 40 min. \ O N O O/\H O I \ I "o o cH, MS (EI) : m/z = 1036 r H3C CH3 H3 ( Ho-i CH,

Beispiel 47A 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [amino (3-amino- [1-(S)-bnezyloxy-1-oxo-2-phenyl-3thyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'- biphenyl-3-yl]] propanoat

0.37 g (0.27 mmol) 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [tert-butoxyvarbonylamino (3-amino- [1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxo- propyl) ] -4, 4'-bis (benzyloxy)-l, 1'-biphenyl-3-yl]] propanoat (Beispiel 42A) wird unter Argon in 10 ml einer 4 M Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan gelöst und 3 h bei RT gerührt. Man engt am Rotationsverdampfer ein und trocknet im Vakuum. Das Rohprodukt wird ohne weitere Charakterisierung weiter umgesetzt.

In Analogie zu Beispiel 47A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 48A bis 51A hergestellt werden. Beispiel- Struktur Nr. o WoX 48A o N o 0 H, N Po han H3C S H'C CH 3 H 49A 9 r" ? } 0 04 49A si C J f/J p O/ H3CCH3 0 0 O \/O 50A H I \ O H O HzN N O (\ /./O O/ H3CC 0 0 H, °4 Si 51A O N C HaN = O /H C O CH3// (/ H3Cwg 0 H, I CH,

Beispiel 52A <BR> <BR> 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5-benzyloxy-<BR> <BR> carbonylamino-2 (5)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-(tert-butyldimethyl- silyloxy)-pentanoylamino (3-amino- (1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3- oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'-biphenyl-3-yl]] propanoat

0.27 g (0.27 mmol) 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [amino (3-amino- [1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (ben- zyloxy)-l, 1'-biphenyl-3-yl]] propanoat (Beispiel 47A) und 0.16 g (0. 32 mmol, 1.2 <BR> <BR> <BR> Äquiv. ) 5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)- (tert-butyl- dimethylsilyloxy) -pentansäure werden unter Argon in 5 ml wasserfreiem DMF gelöst. Bei RT wird 0.13 g (0.34 mmol, 1.25 Äquiv. ) HATU und 0.16 ml (0.12 g, 0.95 mmol, 3.5 Äquiv. ) N, N-Diisopropylethylamin hinzugegeben. Das Reaktions- gemisch wird 12 h bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wird direkt per präparativer RP-HPLC gereinigt und ohne weitere Charakterisierung umgesetzt.

Ausbeute : 0.288 g (71 % d. Th.) In Analogie zu Beispiel 52A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiel 53A bis 56A hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. /\ °/\ /° \/ LC-MS (Methode 15) : 11 0 W °_ _N ° HN N °''Rt = 3. 84 min. 5 ; 3A H H 0 0 N, 0 0 MS (EI) : m/z 1415 Spi 3 H3C H3C CH3 CHCH' CH3 NH'GH3 o L oX cl, cl ° i H3 o LC-MS (Methode 15) : 54A |) ß Rt392min ° ° '-° ° MS (EI) : m/z = 1415 H3y Ha ° ° CHa CH--H + g CH 3 H3C-iH3C 1H ( SOB O o o/\ O \/ O O o H 0 5 ö H HN N v'O I w LC/MS (Methode 15) : 0-HMH ° N,, ° o Rt = 3. 97 min H3CwIi 0'L o cH MS (EI) : m/z = 1401 (MHK C H"CHg i CH, 3 o ° Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. r 0 o LC-MS (Methode 16) : Po Hz O Rt = 2. 98 min. / O N O'CH3 po H3c\ j3C o/O CH3 cH MS (EI) : m/z = 1415 $I 3 H, I x, 1--1 H HC i H. C CH,-1 3 00.

Beispiel 57A 2- (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5-benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert- butoxycarbonylamino-4 (R)-(hydroxy0oxy)-pentanoylamino(3-amino-[1-(S)- benzyloxy-1-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'- biphenyl-3-yl]] propionsäure

Zu einer Lösung von 0.29 g (0.19 mmol) 2- (Trimethylsilyl) ethyl-2- (6)-benzyl- oxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5-benzyloxycarbonylamino-2 (-tert-butoxycarbonyl- amino-4 (R)-(tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoylamino (3-amino-[1-(5)-benzyloxy- 1-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'-biphenyl-3-yl]] propa- noat (Beispiel 52A) in 3 ml DMF werden 1.2 ml einer 1.0 M Lösung von Tetra- butylammoniumfluorid in THF (1. 2 mmol, 6.3 Äquiv. ) hinzugegeben. Nach 4 h Rühren bei RT wird das Reaktionsgemisch auf 0°C gekühlt und mit 50 ml Wasser versetzt. Nach Zugabe von 50 ml Essigsäureethylester und 1 ml 1 N wässriger Salz- säure werden die Phasen getrennt. Die wässrige Phase wird mehrfach mit Essigsäureethylester extrahiert. Nach Trocknen der organischen Phase über Magnesiumsulfat wird im Vakuum eingeengt und am Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

In Analogie zu Beispiel 57A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 58A bis 61A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Strulitur /\/\ ° \/ ° \/ O jHa O OHOy. 0' OH //N% O HaC, O \OH HC (CHa nu O''O I \ Nu O \/O 0 0 6OA \ O H ° H HN I \ i/OH OsiiN., ° O Zo HN 60A 0 N H H H NH NH SoO+OX O \/O 0 N O HN Y O \ 61A = OHON 0 CH Hic y 3 0 OH J" NH

Beispiel 62A <BR> <BR> Pentafluorphenyl-2- (-benzyloxycarbonylamino-3- 3' [-2- [5-benzyloxy-<BR> <BR> carbonylamino-2 (e-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)-(hydroxyoxy)-pentanoyl- amino (3-amino-[1-(S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oXopropyl) ]-4, 4'-bis- (benzyloxy)-1,1'-biphenyl-3-yl]]propionat

0.25 g (Rohgemisch, ca. 0.19 mmol) 2- (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5- benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)- (hydroxyoxy)-penta- noylamino (3-amino- [1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis- (benzyloxy)-1, 1'-biphenyl-3-yl]] propionsäure (Beispiel 57A) werden in 4 ml DCM vorgelegt und mit 0.18 g (0.97 mmol, 5.0 Äquiv. ) Pentafluorphenol und 0.02 g (0.02 mmol, 0.1 Äquiv. ) DMAP versetzt. Man kühlt auf-25°C und gibt 0.048 g (0.25 mmol, 1.3 Äquiv. ) EDC hinzu. Die Mischung erwärmt sich über Nacht langsam auf RT. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum kurz getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung um- gesetzt. In Analogie zu Beispiel 62A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 63A bis 66A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur aoX3voX \ O HN N ZOZO 63A C~f ocNH"t ° oAon3 F oh F FEZ zozo /\/\ \/O \/ O i H3 O O HN N ''O \ \ O N 64A'S FH O BocNH,, O O F oh F F FI F H /\/\ \/\/ c) 0 Zo A _... lu 65A H F bock i oh Ou F F NU O''O Beispiel-Nr. Struktur o o HoX - 0 0 0 2 0 H \ O/N O HN 11 N\/O \ 66A 4N 4° HN4N>o F 1 OH taon3 F F nu

Beispiel 67A Pentafluorphenyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5-benzyloxyearbonyl- amino-2 (S)-amino-4 (R)- (hydroxyoxy)-pentanoylamino (3-amino- [1- (S)-benzyl- oxy-1-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'-biphenyl-3- yl]] propionat

0.28 g (0.19 mmol) Pentafluorphenyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3' [-2- [5- benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R)- (hydroxyoxy)-penta- noylamino (3-amino- [1- (S)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis- (benzyloxy)-l, l'-biphenyl-3-yl]] propionat (Beispiel 62A) werden bei RT in 4 ml einer 4 M Chlorwasserstoff-Dioxan-Lösung gelöst. Nach 3 h bei RT wird die Reak- tionslösung bei 30°C im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum getrocknet. Das Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung umgesetzt.

In Analogie zu Beispiel 67A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 68A bis 71A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur /\/\ \/o \/ po ion 68A 0 N H FH >04 0 /O HzN, O O"O F OH F F F NU F NH H _ I H3 O HN N\/O I \ 69A \ ° I../J F p HZN'° O O/ F OH F F F nu _ Beispiel-Nr. Struktur /\ o/\ /o \/ R H 7OA \ O-'N O HN N v'O \ H /F O HzN<, O O/ H o HIN"0 70A OH F F NH O ole /\ O/\ \/O \/ 71A 0N H /lA \ O''N O HN N Y O \ I/FH O HzNr. O O C I/ F OH F F H oSon3 F

Beispiel 72A Bnezyl-N-{[(8S,11,S14S)-5, 17-bis (bneozyloxy)-14-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}- 11-(($2r)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amiono}-2-hydroxypropyl)-1 0,13-dioxo-9, 12- diazatricyclo [14. 3.1. 1296] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-yl]carbonyl}-L- phenylalaninat

0.26 g (0.19 mmol) Pentafluorphenyl-2- (S)-benzyloxycarbonylamino-3- [3 [-2- [5- benzyloxycarbonylamino-2 (S)-amino-4 (R)- (hydroxyoxy)-pentanoylamino- (3-amino- [l- (6)-benzyloxy-l-oxo-2-phenyl-ethyl]-3-oxopropyl)]-4, 4'-bis (benzyloxy)-1, 1'-bi- phenyl-3-yl] ] propionat (Beispiel 67A) werden in 200 ml Chloroform gelöst und bei RT innerhalb von 4 h zu einer Lösung aus 2000 ml Chloroform und gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung getropft. Nach beendeter Zugabe wird 1 h nachgerührt. Anschließend werden die Phasen getrennt. Die wässrige Phase wird zweimal mit 500 ml DCM gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen mit 2000 ml 0.1 M wässriger Salzsäure gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in 15 ml Acetonitril : Methanol (2 : 1) suspendiert und 1 h bei RT gerührt. Der ungelöste Feststoff wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Zur weiteren Reinigung wird der Feststoff 15 min in Methanol gekocht. Man filtriert erneut ab, trocknet im Vakuum und erhält so das Produkt.

Ausbeute : 0. 022 g (10 % d. Th.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 3.13 min.

MS (EI) : m/z 1158 (M+H) + In Analogie zu Beispiel 72A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 73A bis 76A hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. LC-MS (Methode 15) : 0 0 n 73A \ oN NN N ow Rt = 2. 97min. H H 0 OH0 0 MS (EI) : m/z = 1082 NH oo \ +H) + /\/\-\/ O \/° LC-MS (Methode 15) : /'\ N NH\/' 74A \ ° H H I/° \ R = 3. 0 min ° H ° t O. NH MS (EI) : m/z 1082 (M+H) + o SoN LC/MS (Methode 15) : 75A \ °H NH NO \ 2H NH MS (EI) : m/z = 1068 (M+W \ ll'1-i-j11+ oSoX +H) + LC/MS (Methode 15) : 76A so N aN aO<) Rt = 2. 95 min. ° XOH ° CH3 MS (EI) : m/z =1083 NH + T (M+H)

Beispiel 77A 2 (S)- [S-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-pentanoyl- <BR> <BR> amino]-3-t4, 4'-bis-benzyloxy-3'-[2 (S)-benzyloxycarbonylamino-2-(2-trimethyl-<BR> <BR> silyl-ethoxy-carbonyl)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäurebe nzylester

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 16A aus 0.47 g (0.51 mmol) der Verbindung aus Beispiel 15A und 0.19 g (0.51 mmol) Nα-Boc-N#-Z-L-Ornithin mit 0.19 g (0.51 mmol) HATU und 0.35 ml (1.65 mmol) N, N-Diisopropylethylamin in 5.55 ml trockenem DMF.

Ausbeute : 0.58 g (92% d. Th.) LC-MS (Methode 18) : Rt = 3.46 min MS : m/z= 1212 (M+H) +

Beispiel 78A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- {4, 4'-bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxy- carbonyl-2- (5-benzyloxycarbonylamino)-2 (S) -tert-butoxycarbonylamino- pentanoylamino)-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 17A aus 0.82 g (0.68 mmol) der Verbindung aus Beispiel 77A mit 2 Äquiv. (1.3 ml) Tetrabutylammoniumfluorid (1 M in THF) in 30 ml getrocknetem DMF.

Ausbeute : 772 mg (94% d. Th.) LC-MS (Methode 20) : Rt= 1. 62 min.

MS : m/z = 1112 (M+H) +

Beispiel 79A <BR> <BR> 2 (S)- (5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert.-butoxycarbonylamino-pentanoyl-<BR> <BR> amino)-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxycarbonylamino-2-pentafluor-<BR> <BR> phenyloxycarbonylethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäurebenzyles ter

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 18A (Methode A) aus 422 mg (0.38 mmol) der Verbindung aus Beispiel 78A und 349 mg (1.9 mmol) Pentafluorphenol mit 80 mg (0.42 mmol) EDCI und 4.63 mg (0.04 mmol) DMAP in 4 ml Dichlormethan.

Ausbeute : 502 mg (95% d. Th.) LC-MS (Methode 20) : Rt = 3.13 min.

MS : m/z= 1278 (M+H) +

Beispiel 80A 2 (S)- (5-Benzyloxycarbonylamino-2 (S)-amino-pentanoylamino)-3- [4, 4'-bis- <BR> <BR> benzyloxy-3'- (2- (S)-benzyloxycarbonylamino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl- ethyl)-biphenyl-3-yll-propionsäurebenzylester-Hydrochlorid

215 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 79A werden in einem Eisbad unter Rühren mit 5 ml 4 M Dioxan/Chlorwasserstoff-Lösung versetzt. Man lässt eine Stunde rühren und dampft alles im Vakuum bis zur Gewichtskonstanz ein.

Ausbeute : 200 mg (92% d. Th.) LC-MS (Methode 20) : Ru= 425 min.

MS : m/z 1178 (M+H) +

Beispiel 81A 5, 17-Bis-benzyloxy-14 (S)-benzyloxycarbonyl-amino-ll (S)- (3-benzyloxy- carbonylamino-propyl)-10, 13-dioxo-9, 12-diaza-tricyclo [14.3. 1. 12'6]-henicosa- 1 (19), 2,4, 6 (21), 16 (20), 17-hexaen-8 (S)-carbonsäurebenzylester

1.35 g (0.91 mmol) der Verbindung aus Beispiel 80A werden in 3 1 Chloroform vorgelegt und unter kräftigem Rühren innerhalb von 20 min bei RT mit 2.54 ml (18. 2 mmol) Triethylamin in 50 ml Chloroform versetzt. Man lässt über Nacht nachrühren und dampft alles im Vakuum zur Trockne ein. Den Rückstand verrührt man mit 5 ml Acetonitril, filtriert und trocknet den Rückstand bis zur Gewichtskonstanz.

Ausbeute : 890 mg (93% d. Th.) LC-MS (Methode 20) : Rt = 5.10 min.

MS : m/z = 994 (M+H) +

Beispiel 82A (8S, llS, 14S)-14-Amino-11- (3-aminopropyl)-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9. 12- diazatricyclo [14. 3.1. 12X6]-henicosa-1 (20), 2 (21), 3, 5, 6,18-hexaen-8-carbonsäure- Dihydrochlorid

50 mg (0.05 mmol) der Verbindung aus Beispiel 81A werden in 50 ml Eisessig/ Wasser/Ethanol (4/1/1) suspendiert, mit 30 mg Pd/C (10%-ig)-Katalysator versetzt und 20 Stunden bei RT hydriert. Nach Abfiltrieren des Katalysators über Kieselgur dampft man das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein und versetzt unter Rühren mit 2.5 ml 0.1 N Salzsäure. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und trocknet bis zur Gewichtskonstanz.

Ausbeute : 17 mg (63% d. Th.) DC (Methanol/Dichlormethan/25%-iger Ammoniak = 5/3/2) : Rf = 0.6 LC-MS (Methode 9) Rt = 0.28 min.

MS : m/z = 457 (M+H) +

Beispiel 83A (8S, 11S, 14S)-14- [ (tert-Butoxycarbonyl)-amino-11- [3- [ (tert-butoxycarbonyl)- amino] propyl}-5, 17-dihydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14.3. 1. 12'6]- henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16,18-hexaen-8-carbonsäure

225 mg (0.42 mmol) der Verbindung aus Beispiel 82A werden in 2.25 ml Wasser und 2.25 ml 1 N Natronlauge gelöst, im Eisbad gekühlt und unter Rühren mit 278 mg (1.27 mmol) Di-tert-butyl-dicarbonat versetzt. Man erwärmt nach der Zugabe kurz auf 30°C und lässt über Nacht bei RT weiterreagieren. Man säuert mit 0.1 N Salzsäure bis etwa pH = 5 an und dampft alles vorsichtig im Vakuum bei RT zur Trockne ein. Den Rückstand rührt man mit Diethylether aus, filtriert und trocknet ihn bis zur Gewichtskonstanz.

Ausbeute : 259 mg (93% d. Th.) LC-MS (Methode 18) : Rt = 19.96 min.

MS : m/z = 656 (M+H) + Beispiel 84A 2-(Trimethylsilyl) ethyl-2-(benzyloxy)-N- [(benzyloxy) carbonyl]-4-(4, 4,5, 5- tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat 0.924 g (3.64 mmol, 1.15 Äquiv. ) 4,4, 4', 4', 5,5, 5', 5'-Octamethyl-2, 2'-bi-1, 3,2- dioxaborolan, 0.932 g (9.50 mmol, 3 Äquiv.) Kaliumacetat und 0.116 g (0.160 mmol, 0.05 Äquiv. ) Bis- (diphenylphosphino) ferrocenpalladium (II) chlorid werden bei RT zu einer entgasten Lösung von 2.00 g (3.17 mmol) 2 (S)- <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Benzyloxycarbonylamino-3- (2-benzyloxy-5-iod-phenyl)-propionsäure- (2-trimethyl- silyl) -ethylester (Beispiel 11A) in 20 ml DMF gegeben. Die Mischung wird 6 Stunden bei 80°C nachgerührt. Man nimmt in Wasser und Essigsäureethylester auf, trennt die Phasen und wäscht die wässrige Phase mehrfach mit Essigsäureethylester.

Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Chromatographie an Kieselgel (Cyclohexan/Essigsäureethylester 10 : 1) gereinigt.

Ausbeute : 1.12 g (56% d. Th.) LC-MS (Methode 22) : Rt = 4.50 min MS (EI) : m/z = 632 (M+H) + IH-NMR (200 MHz, CDC13) : 8 = 0.92 (dd, 2H), 1.31 (s, 12H), 2.95-3. 95 (m, 2H), 4.11 (mc, 2H), 4.55 (11 (mc, 1H), 4.99 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 5.53 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 7.15-7. 47 (m, 10 H), 7. 58 (d, 1H), 7.67 (dd, 1H).

In Analogie zu Beispiel 37A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 85A bis 87A hergestellt werden. Beispiel- Nr. Struktur Analytische Daten LC-MS (Methode 15) : Rt = 3. 12 min. 85A i \ ! o H MS (EI) : m/z = 701 N-o OJN N/\O \ + l 0 . CH, H3C'I'CH3 3 CH3 3 LC-MS (Methode 15) : Rt = 3. 08 min. 05nu mus (EI) : m/z = 687 , INN", o zozo H3C4CH3 H3C CH3 CH3 LC-MS (Methode 15) : o Rt = 3. 14 min. 87A i \ I o | H MS (EI) : m/z 701 N , IL N", k Hr zu H3C'I'CH3 H3C CH3 H3 ""3 CHg In Analogie zu Beispiel 42A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 88A bis 90A hergestellt werden. Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. LC-MS (Methode 16) : Rt = 2. 59 min. H 88A \ ° \ o'H ° °HN T O MS (EI) : m/z = 1078 H, C CH33"r (M+H) H3Cs 3 CH3 cl3 H3C CHa LC-MS (Methode 15) : \/Rt = 3. 49 min. 89A ° H °II I w oH ° H ° No MS (EI) : m/z = 1064 89A H3C'CHCHa H3CCHa + + zizi HH3CsCH3 'CL, CHa LC-MS (Methode 15) : Rt = 3 55 min H 90A J ° 90A ° N N ° MS (EI) : m/z = 1078 0 N, YN" ? i Hot HaCw CH, zizi H3C Ha In Analogie zu Beispiel 47A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 91A bis 93A hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. LC-MS (Methode 16) : ° \/° Rt = 2. 59 min. 0 H, ° \ MS (EI) : m/z = 1078 0 N H z /O CH ° CH3/ H3C CH3 3 11y1-i-II) i'i3C\ Cii3 Hac-ii CH, /\/\ /o \/ O zozo nif \ O H'I'H 5 I /° H3C CHCH'H3CCH3 \% e0X04 N3 i hui Cl ;, 0 O \ O 93A o \ O N ° HzN N"o'\ __ t ! H H3Csv J CH3 /y i H3C CH, In Analogie zu Beispiel 52A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiel 94A bis 96A hergestellt werden.

Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 0 LC-MS (Methode 16) : O 94A zu N HHX N Rt = 3. 40 min. Hz 0 N, 0 MS (EI) : m/z 1457 MS (EI) : m/z = 1457 y ?' H x H3C'I HaC CH3 CHCH3 NFi'CH3 0 0 \ o ffi o LC-MS (Methode 16) : 0 95A 01, N0 H Rt = 3. 17 min ho ly"0 H, C MS (EI) : m/z = 1442 H3C\ a O °\Si CH3 CH3 CH, CH NH CH, 3CH3 (M+H) + 0 -o-", \ oAoX o zozo LC-MS (Methode 16) : 96A 0 N 0 96A I \ °H o N', HN o ° Rt = 3. 33 min oAoB 0 Rt 3. 33 min ii oH3 MS (EI) : m/z = 1457 H3C 1 HaC CHa CH a CH3 NH 3 CH3 '+H) + ° o IIVl In Analogie zu Beispiel 57A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 97A bis 99A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur of 3eon 0 OH O HN N v'O \ 97A \ o N H OH O Ne O O CH3 bzw HaC O OH CHa H3 NU nu 98A moJ4N40 N HN O oAon3 O H N N !'O \ 98A = w I/O H OH O N O OH CCH/ Hazy j OH NH NH O''O'\ 0 H 0 \ 0 N HN H 99A \ O_'N O HN N'O \ , w I/H OH O N'O H C,/ HaC, O OH a GHa 0au NH O''O I \ In Analogie zu Beispiel 62A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 100A bis 102A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur - F-0 0 0 0 0 H 0 p HN' (N Y'O \ 0\ O"N po han F, OH CHa 0 OH CH, F NU /\/\ \/O \/ F F NH 0 0 lOlA, \ o'H HN \ \o I w '/F p BocNH,, p H CCH/ F a a , oh 0 N F F NH ouzo /\ p/\ \/p \/ Zo ION O HN N.. O \ F 0 0 ho F'j'H F F, OH CHa F F F NH "i-l In Analogie zu Beispiel 67A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 103A bis 105A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur /\ o/\ \-/o \/ 0 0 0 0 H 0 i 0 N""i Zo mon 0 N H 0 103A I/O FH O HZN., O O CH3 H, N 0 0 F, OH HaC F F F NU 103A 0 0 0 0 H 0 0 Ni 0 HN 104A \ O H HN Y'O F 0 HC CH, OH 1 oh , F FI F NU 105A O/\ \/O \/ HO Po O N,. IOSA I O H O H2N HN O o aC"O F H F OH Han /F F F NH In Analogie zu Beispiel 72A können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 106A bis 108A hergestellt werden. Beispiel- Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. /\ o/\-o \/ o 0 o LC-MS (Methode 15) : N N N N ° H H ° Rt = 3. 10 min. 0 0 c NH CL, MUS (EI) : m/z = 1124 0)-0,-- (M+H) + /\/\-\/ o \/° LC-MS (lVlethode 24) : N N N 107A ¢> o H H ° R = 3. 31 min. ° °H H3CCH3 I/t NH MS (EI) : m/z = 1110 (M+I+ (M+1-I) + 0 ° LC-MS (Methode 24) : 1 OHA O N N N N '''O H ° ö ° Rt = 3. 32 min. HIC 108A HZY H Rt = 3. 32 min. 0 0 NH CH'MS (EI) : m/z = 1124 oAo93 (M+H) + In Analogie zu Beispiel 24A kann das in der folgenden Tabelle aufgeführte Beispiel 109A hergestellt werden. Beispiel-Nr. Struktur Analytische Daten - LC-MS (Methode 24) : 109A HO-OH Rt Rt= 1. 94 min Hz j HX NH2 MS (EI) : m/z = 729 \ (M+H) + NHBoc Beispiel 110A <BR> <BR> 2- (Benzyloxy)-N- (tert-butoxycarbonyl)-iod-N-methyl-L-phenylalanin Unter Argonatmosphäre werden 500 mg (1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 6A in 20 ml THF gelöst, mit 90.5 mg (3.02 mmol) Natriumhydrid und 0.51 ml (1141. 6 mg ; 8.04 mmol) Methyliodid (80%-ig) versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Man verdünnt mit 25 ml Essigsäureethylester und 25 ml Wasser und stellt mit 0.1 N Salzsäure auf pH = 9 ein. Man engt im Vakuum auf ein kleines Volumen ein. Man versetzt mit 10 ml Essigsäureethylester und 10 ml Wasser, schüttelt alles heftig und trennt die organische Phase ab. Nach Trocknen mit Natriumsulfat und Einengen im Vakuum erhält man 140 mg Produkt (19% d. Th.).

Die wässrige Phase säuert man an (pH = 3) und schüttelt sie dreimal mit 20 ml Essigsäureethylester aus. Nach Einengen im Vakuum und Trocknen im Vakuum erhält man 351 mg Produkt (68% d. Th.).

LC-MS (Methode 17) : Rt = 3.9 min.

MS (EI) : m/z = 511 (M+H) + Beispiel 111A <BR> Benzyl-2- (benzyloxy)-N- (tert-butoxycarbonyl)-5-iod-N-methyl-L-phenylalaninat Die Herstellung erfolgt analog zu Beispiel 7A aus 350 mg (0.68 mmol) der Verbindung aus Beispiel 110A, 8.29 mg (0.07 mmol) DMAP, 148 mg (1.37 mmol) Benzylalkohol und 157.46 mg (0.82 mmol) EDC in 3 ml Acetonitril.

Ausbeute : 382 mg (93% d. Th.) LC-MS (Methode 17) : Rt = 4.8 min.

MS (EI) : m/z = 601 (M+H) + Beispiel 112A Benzyl-2- (benzyloxy)-N- (tert-butoxycarbonyl)-N-methyl-5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl- 1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl)-L-phenylalaninat Analog zu Beispiel 8A werden 380 mg (0.63 mmol) der Verbindung aus Beispiel 111A in einem ausgeheizten Kolben in 4 ml DMF vorgelegt und unter Rühren bei Raumtemperatur mit 184.5 mg (0.73 mmol) 4,4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-Octamethyl-2, 2'-bi- 1,3, 2-dioxaborolan, 186 mg (1.9 mmol) Kaliumacetat und 23.15 mg (0.03 mmol) Bis (diphenylphosphino)-ferrocen-palladium (II) chlorid versetzt. Man lässt 4 h bei 80°C reagieren. Nach der Aufarbeitung und Chromatographie (Kieselgel 60, Laufmittel : Cyclohexan/Essigsäureethylester = 4/1) erhält man das Produkt.

Ausbeute : 196 mg LC-MS (Methode 17) : Rt = 4.9 min.

MS (EI) : m/z = 601 (M+H) + Beispiel 113A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxy- <BR> <BR> <BR> carbonyl-(2-tert-butoxycarbonyl-2-methyl) amino-ethyl)-biphenyl-3-yl]-<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> propionsäure-2- (trimethylsilyl)-ethylester

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 12A (Methode B) aus 190 mg (0.32 mmol) der Verbindung aus Beispiel 112A, 199.5 mg (0.32 mmol) der Verbindung aus Beispiel 11A, 195.5 mg (0.63 mmol) Cäsiumcarbonat und 23.15 mg (0.03 mmol) Bis (diphenylphosphino) ferrocen-palladium (II) chlorid in 1.5 ml DMF unter Argonatmosphäre.

Ausbeute : 212 mg (66% d. Th.) LC-MS (Methode 25) : Rt= 4.86 min.

MS (EI) : m/z = 978 (M+H) + Beispiel 114A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxy- carbonyl-2-methylaminoethyl-biphenyl-3-yl]-propionsäure-2-( trimethylsilyl)- ethylester-Hydrochlorid

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 15A aus 930 mg (0.95 mmol) der Verbindung aus Beispiel 113A und 22.14 ml einer 4 M Dioxan/- Chlorwasserstofflösung in 15 ml Dioxan.

Ausbeute : 915 mg (78% d. Th.) LC-MS (Methode 25) : Rt = 2.53 min.

MS (EI) : m/z = 878 (M+H) + Beispiel 115A 2 (S)- {Methyl- [5-benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R) - (tert-butyldimethylsilyloxy)-pentanoyl] amino}-3-{4, 4'-bis-benzyloxy-3'-[2 (S) - benzyloxycarbonylamino-2- (2-trimethylsilyl-ethoxycarbonyl) ethyl]-biphenyl-3-<BR> yl}-propionsäurebenzylester Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 16A aus 922 mg (1.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 114A, 0.5 g (1.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 14A, 421 mg (1. 11 mmol) HATU und 0.7 ml (518 mg ; 3.27 mmol) DIPEA in 4.2 ml DMF.

Ausbeute : 703 mg (51% d. Th.) LC-MS (Methode 16) : Rt = 3.17 min.

MS (EI) : m/z = 1356 (M+H) +

Beispiel 116A 2 (S)-Benzyloxycarbonylamino-3- {4, 4'-bis-benzyloxy-3'- [2 (S)-benzyloxy- <BR> <BR> carbonyl-2- {methyl- (5-benzyloxycarbonylamino-2 (S)-tert-butoxycarbonyl- amino-4 (R)-hydroxy-pentanoyl) amino}-ethyl]-biphenyl-3-yl}-propionsäure Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 17A aus 360 mg (0.27 mmol) der Ver- bindung aus Beispiel 115A und 0.8 ml (3 Äquiv.) 1 M Tetrabutylammoniumfluorid- Lösung (THF) in 20 ml DMF.

Ausbeute : 159 mg (53% d. Th.) LC-MS (Methode 23) : Rt = 3.19 min.

MS (EI) : m/z = 1142 (M+H) + Beispiel 117A 2 (S)- [Methyl- (5-benzyloxycarbonylamino)-2 (S)-tert-butoxycarbonylamino-4 (R) - hydroxy-pentanoyl] amino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S)-benzyloxycarbonyl-<BR> amino-2-pentafluorphenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-pr opionsäure- benzylester

Die Herstellung erfolgt analog Beispiel 18A (Methode A) aus 330 mg (0.29 mmol) der Verbindung aus Beispiel 116A, 265.6 mg (1.44 mmol) Pentafluorphenol, 3. 53mg (0.03 mmol) DMAP und 60.87 mg (0.32 mmol) EDC in 10 ml Di- chlormethan.

Ausbeute : 271 mg (69% d. Th.) LC-MS (Methode 23) : Rt = 3.38 min.

MS (EI) : m/z = 1308 (M+H) + Beispiel 118A 2 (S)- [Methyl- (5-benzyloxycarbonylamino)-2 (S)-amino-4 (R)-hydroxy-penta- noyl] amino-3- [4, 4'-bis-benzyloxy-3'- (2 (S) -benzyloxycarbonylamino-2-penta- <BR> <BR> <BR> <BR> fluor-phenyloxycarbonyl-ethyl)-biphenyl-3-yl]-propionsäureb enzylester-Hydro- chlorid

130 mg (0.1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 117A werden in 0.5 ml Dioxan gelöst und vorsichtig mit 5 ml 4 M Dioxan-Chlorwasserstoff-Lösung versetzt (Eisbad). Nach 30 Minuten lässt man bei Raumtemperatur noch 2 h weiterreagieren. Man dampft alles im Vakuum zur Trockne ein und trocknet im Hochvakuum bis zur Gewichtskonstanz.

Ausbeute : 130 mg (70% d. Th.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 2. 68 min.

MS (EI) : m/z = 1208 (M+EI) + Beispiel 119A <BR> Benzyl- (8S, 115, 14S) -5,17-bis (benzyloxy)-14-{[(benzyloxy) carbonyl] amino}-11- ((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hydroxypropyl-9-methy l-10,13-dioxo- 9,12-diazatricyclo [14. 3.1. 126] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carboxylat 130 mg (0.1 mmol) der Verbindung aus Beispiel 118A werden in 220 ml trockenem Chloroform vorgelegt. Bei Raumtemperatur versetzt man unter Rühren innerhalb von 20 Minuten mit 23 ml (20 Äquiv. ) Triethylamin in 5 ml Dichlormethan. Man lässt über Nacht nachrühren. Anschließend wird alles im Vakuum zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird mit Acetonitril ausgerührt. Nach dem Trocknen des Rückstandes gewinnt man 44 mg Produkt. Aus der Mutterlauge wird durch RP- HPLC noch weiteres Produkt gewonnen (30 mg).

Ausbeute : 74 mg (69% d. Th.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 3.13 min.

MS (EI) : m/z= 1024 (M+H) + Beispiel 120A (8S, 11S, 14S)-14-Amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5, 17-dihydroxy-9- methyl-10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo (14. 3. 1. l2, 6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16,18- hexaen-carbonsäure-Di-trifluoracetat

33 mg (0.032 mmol) der Verbindung aus Beispiel 119A werden mit verdünnter Trifluoressigsäure vorsichtig behandelt. Die entstandene klare Lösung wird an- schließend lyophilisiert.

Ausbeute : 23 mg (quantitativ) LC-MS (Methode 15) : Rt = 0.92 min.

MS (EI) : m/z = 486 (M+H) +

Beispiel 121A <BR> <BR> (8S, llS, 14S) -5,17-Bis (benzyloxy)-14-{[benzyloxycarbonyl] amino}-11-(2R)-3- { [benzyloxycarbonyl]-amino}-2-hydroxypropyl-9-methyl-10, 13-dioxo-9, 12- diazatricyclo [14. 3. 1. 12s6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure

37 mg (0.04 mmol) der Verbindung aus Beispiel 119A werden in 2 ml THF gelöst, mit 0.14 ml 1 N Lithiumhydroxid-Lösung versetzt und 3 h bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend säuert man mit 1 N Salzsäure an und dampft alles im Hochvakuum zur Trockne ein.

Ausbeute : 33 mg (71% d. Th.) LC-MS (Methode 23) : Rt = 2.90 min.

MS (EI) : m/z = 934 (M+H) +

Beispiel 122A <BR> <BR> (8S, llS, 14S) -5,17-Bis (benzyloxy)-14-{[benzyloxyearbonyl] amino}-11-(2R)-3- { [benzyloxycarbonyl] amino}-2-hydroxypropyl-9-methyl-10, 13-dioxo-9, 12-diaza- tricyclo [14. 3. 1. 12S6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäureamid 30 mg (0.03 mmol) der Verbindung aus Beispiel 121A werden in 1 ml DMF gelöst und mit 0.01 ml (3 Äquiv.) Triethylamin versetzt. Nach Abkühlen der Reaktionslösung im Eisbad versetzt man mit 8. 76 mg (2 Äquiv. ) Chlor- ameisensäureisobutylester und lässt 30 Minuten reagieren. Nach einer weiteren Stunde Rühren bei Raumtemperatur versetzt man mit 0.64 ml (10 Äquiv. ) 0.5 N Dioxan-Ammoniak-Lösung und rührt über Nacht. Nach Einengen im Vakuum wird der Rückstand mittels RP-HPLC gereinigt.

Ausbeute : 11 mg (37% d. Th.) LC-MS (Methode 23) : Rt = 2.91 min.

MS (EI) : m/z = 934 (M+H) + Analog zu den oben aufgeführten Vorschriften der Beispiele 115A bis 122A werden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 123A bis 129A aus den entsprechenden Edukten hergestellt : Beispiel-Struktur hergestellt Analytische Daten Nr. analog 123A Bno-T-oBn 115A LC-MS (Methode 25) : Rt = 4. 85 min. Hz Z-HN zozo Bn MS (EI) : m/z = 1226 OTMSE p -. (M+H)'' BOC-HN'1 HN-Z 124A,/=\116ALC-MS (Methode 25) : Rt = 2. 04 min. Z-HN COZH H'° CoZBn MS (EI) : m/z = 1126 (M+H) + - NH-Z Boc-HN 125A, Y/, 117A LC-MS (Methode 25) : Rt = 3. 79 min. Z-HN H3C MS (EI) : m/z = 1292 ? 0=C NH-Z. F ...... - (M+H)" Boc-HN F F F F 126A oy-r-cBn118A LC-MS (Methode 25) : Rt = 3. 72 min. Z-HN HaC ? ° MH-Z + O=C NH-Z F F0=C NH-Z (M+H) + I han F F x HCI F 127A \-119A LC-MS (Methode 25) : Rt = Bn0 \/OBn 4. 39 min. [H ° 8 MS (EI) : m/z = 1008 Z-HN N\N CO Bn S '. (M+H)" 0 cl3 Z-HN Beispiel-Struktur hergestellt Analytische Daten Nr. analog 128A Bno 121A LC-MS (Methode 26) : Rt = Oben 3. 64 min. 0 N MS (EI) : m/z = 918 Z-HN N COH °/H3C (M+H) + Z-HN 129A BnOOBn 122A LC-MS (Methode 25) : Rt = OBn 3. 8 min. 0 Z-HNS, MS (EI) : m/z = 917 Z-ho o H O (M+H) + Z-HN Beispiel 130A 2 (S)-tert-Butoxycarbonylamino-5-nitro-4-oxo-pentansäure-benz ylester Eine Lösung A von 10 g (30.9 mmol) 2 ()-tert-Butoxycarbonylamino-bern- steiinsäure-1-benzylester und 5.27 g (32.5 mmol) 1, l'-Carbonyldiimidazol in 100 ml Tetrahydrofuran wird 5 h bei RT gerührt. Zu einer Lösung B von 3.2 g (34.2 mmol) Kalium-tert-butylat in 100 ml Tetrahydrofuran werden bei 0°C 18.8 g (30.9 mmol) Nitromethan zugetropft. Die Lösung B wird unter Erwärmen auf RT nachgerührt, und anschließend wird bei RT Lösung A zugetropft. Die resultierende Mischung

wird 16 h bei RT gerührt und mit 20% iger Salzsäure auf pH 2 eingestellt. Das Lösungsmittel wird eingedampft. Das zurückbleibende Rohprodukt wird in Essigsäureethylester/Wasser aufgenommen. Nach Trennung der Phasen wird die organische Phase zweimal mit Wasser ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Man erhält 13 g (99% d. Th. ) des Produkts.

MS (ESI) : m/z = 334 (M+H) + 1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO) : 8 = 1.37 (s, 9H), 2.91 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.81 (m, 2H), 7.2-7. 5 (m, 5H).

Beispiel 131A 2 (S)-tert-Butoxycarbonylamino-4 (R)-hydroxy-5-nitro-pentansäure-benzylester Eine Lösung von 11.3 g (30.8 mmol) 2 (@-tert-Butoxycarbonylamino-5-nitro-4-oxo- pentansäure-benzylester in 300 ml Tetrahydrofuran wird auf-78°C gekühlt, mit 30.8 ml einer 1M Lösung von L-Selectrid in Tetrahydrofuran tropfenweise versetzt und 1 h bei-78°C nachgerührt. Nach Erwärmen auf RT wird die Lösung vorsichtig mit gesättigter Ammoniumchlorid-Lösung versetzt. Die Reaktionslösung wird ein- geengt und der Rückstand in Wasser und Essigsäureethylester aufgenommen. Die wässrige Phase wird dreimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird an Kieselgel 60 vorgereinigt (Laufinittel : Cyclohexan/Essig- säureethylester 10/1), die gesammelten Fraktionen werden eingeengt und mit Cyclo- hexan/Essigsäureethylester 5/1 ausgerührt. Die zurückbleibenden Kristalle werden abgesaugt und getrocknet. Man erhält 2. 34 g (21% d. Th. ) des gewünschten

Diastereomers. Aus der Mutterlauge erhält man durch chromatographische Trennung an Lichrospher Diol 10 µM (Laufmittel : Ethanol/iso-Hexan 5/95) weitere 0.8 g (6.7%) des Produkts.

MS (ESI) : m/z = 369 (M+H) +.

1H-NMR (300 MHz, d6-DMSO) : 5 = 1.38 (s, 9H), 1.77 (m, 1H), 1.97 (m, 1H), 4.10- 4.44 (m, 3H), 4.67 (m, 1H), 5.12 (m, 2H), 5.49 (d, 1H), 7.25-7. 45 (m, 5H).

Ausführungsbeispiele Die Synthese von Ausführungsbeispielen kann ausgehend von partiell geschützten Biphenomycin-Derivaten (wie z. B. 21A) erfolgen.

Beispiel 1 (8S, llS, 14S)-14-Amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5, 17-dihydroxy- 10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14.3. 1. 12,6-]henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16,18-hexaen- 8-carbonsäureamid Dihydrochlorid

Methode A : Zu einer Lösung von 2.15 mg (3.2 llmol) tert-Butyl-(2R)-3-[(8S, llS, 14S)-8-(amino- carbonyl)-14-[(tert-butoxyvarbonyl) amino] -5,17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9,12-diaza- tricyclo [14. 3.1. 12'6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2-hydroxy-propyl- carbamat (Beispiel 22A) in trockenem Dioxan (p. a., 1.0 ml) wird unter Argon eine 4 M Lösung von Salzsäuregas in Dioxan (1. 0 ml) zugetropft. Nach ca. 30 min ist vollständiger Umsatz erreicht. Das Reaktionsgemisch wird eingefroren und mittels Gefriertrocknung von Lösungsmitteln befreit. Die Aufreinigung erfolgt durch Gel- chromatographie [SephadexLH-20 ; Methanol/konzentrierte Salzsäure (1 : 0.0001) dotiert mit Natriumdisulfit], wobei 1. 4 mg (80% d. Th. ) Produkt erhalten werden.

HPLC-UV-Vis (Methode 14) : Rt = 3.09 min.

Smax (qualitativ) =-204 nm (s), 269 (m),-285 (sh) (H20/Acetonitril + 0. 01% TFA [7 : 3]).

1H-NMR (500 MHz, CD30D) : 6 = 1.79 (ddd, 1H, J = 13. 6,9. 2,5. 9Hz), 1.99 (ddd, 1H, J = 13. 6,9. 6,4. 0Hz), 2.82 (dd, 1H, J = 12.8, 9.6Hz), 2.87 (dd, 1H, J = 17.1, 12. 1Hz), 3.04 (dd, 1H, J= = 12. 8,2. 9Hz), 3.11 (dd, 1H, J = 14. 8,3. -Hz), 3.38 (dd, 1H, J = 16. 9, 1. 9Hz), 3.57 (dd, 1H, J = 11. 7,5. 4Hz), 3.92 (tt, 1H, J = 9.4, 3. 5Hz), 4.23 (dd, 1H, J = 4.9, 3. 0Hz), 4.90 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 6.79 (d, 1H, J = 8.3Hz), 6.85 (d, 1H, J= 8.4Hz), 7.10 (d, 1H, J = 2. 3Hz), 7.25 (dd, 1H, J = 8.3, 2.3Hz), 7. 36 (dd, 1H, J = 8.5, 2.4Hz), 7.44 (d, 1H, J = 2. 1Hz).

13C NMR (125.5 MHz, CD30D) : 8 = 30.3, 30.8, 39.5, 45.4, 50.6, 53.8, 55.3, 65.3, 115.6, 116.3, 120.8, 125.3, 126.2, 126.8, 127.0, 130.9, 132.7, 133.5, 155.0, 155.7, 168.4, 172.8, 177.0.

LC-HR-FT-ICR-MS (Methode 13) : ber. für C23H30N506 [M+H] + 472. 2191 gef. 472. 2191.

Methode B : Unter Argon werden 14.8 mg (0.02 mmol) tert-Butyl-(2R)-3-[(8S,11S,14S)-8- <BR> <BR> <BR> <BR> (aminocarbonyl)-14-[(tert-butoxycarbonyl) amino] -5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9,12- diazatricyclo [14. 3.1. 12w6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2-hydroxy- propylcarbamat (Beispiel 22A) in 0.5 ml Dioxan vorgelegt. Die Mischung wird auf 0°C abgekühlt und mit 0.8 ml 4 M Salzsäurelösung in Dioxan tropfenweise versetzt.

Nach 45 min wird das Gemisch im Vakuum einrotiert und der Rückstand noch zweimal mit Dioxan aufgenommen und erneut im Vakuum einrotiert. Das Produkt wird am Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute : 12 mg (100 % d. Th.).

HPLC (Methode 8) : Rt = 4.87 min.

MS (EI) : m/z = 472 (M+H-2HC1) +.

H-NMR (400 MHz, D20) : 8 = 0.58-0. 67 (m, 2H), 1.65-1. 86 (m, 3H), 1.88-1. 98 (m, 1H), 2.03-2. 13 (m, 1H), 2.87-3. 02 (m, 4H), 3.09-3. 19 (m, 2H), 3.38 (d, 1H), 3.59- 3.69 (m, 2H), 3.88-3. 96 (m, 1H), 4.46-4. 51 (m, 1 H), 4. 85-5. 01 (m, 5H), 6.98 (dd, 2H), 7.05 (dd, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.50 (dd, 1H).

Beispiel 2 (8S, llS, 14S)-14-Amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-N-benzy1-5, 17-di- hydroxy-10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14. 3.1. 1] henicosa- 1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-carboxamid Dihydrochlorid

Zu einer Lösung von tert-Butyl- (2R)-3- [ (8S, 1lS, 14S)-8- [ (benzylamino) carbonyl] -14- [(tert-butoxycarbonyl) amino] -5,17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9,12-diazatricyclo- [14.3. 1. 12'6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-11-yl]-2-hydroxypropylcarbamat (Beispiel 23A) in 0.5 ml 1,4-Dioxan werden unter Eiskühlung 0.5 ml 4 N Salzsäure- Lösung in Dioxan getropft. Die Eiskühlung wird entfernt und die Mischung wird 2 h bei RT gerührt, bevor im Vakuum eingeengt und im Hochvakuum getrocknet wird.

Der Rückstand wird in einem Gemisch von Dichlormethan und Methanol aufgenommen und die Lösungsmittel über Nacht abgedampft.

LC-MS (Methode 7) : Rt = 2.02 min.

MS (ESI-pos) : m/z = 562 (M+H-2HC1) +.

1H-NMR (400MHz, D20) : 8 = 1. 70-1.81 (m, 1H), 1.82-1. 91 (m, 1H), 2.71-2. 84 (m, 2H), 2.89-2. 97 (m, 2H), 3.18 (d, 1H), 3.42-3. 53 (m, 1H), 3.67-3. 73 (m, 1H), 4.21- 4.26 (m, 1H), 4.29 (d, 1H), 4.27-4. 33 (m, 1H), 4.34 (d, 1H), 6.80-6. 83 (m, 2H), 6.89 (s, 1H), 7.19-7. 24 (m, 4H), 7.26-7. 31 (m, 3H), 7.35 (d, 1H).

Analog zu Beispiel 1 können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 3 bis 14 hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 3 HO OH LC-MS (Methode 20) : Rt =1. 13 min. 0 N-- MS (ESIpos) : m/z = H2N N H o OH 512 (M+H) + x 2 HCI x 2 HC 4 HO OH LC-MS (Methode 20) : Oh Rt = 2. 09 min. oh H N N MS (ESIpos) : m/z = 1 H 0 0 OH 540 (M+H) + ou NHCI NHZ 5 HO OH LC-MS (Methode 20) : OH rut =1. 44 min. H O CH3 ZH N-CH3 MS (ESIpos) : m/z= ICH 0 H O \_OH 500 (M+H) + x 2 HCI NH Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 6 LC-MS (Methode 20) : HO OU Rt Rt= 0. 35 min. Zon N\ N Ha MS (ESIpos) : m/z = HZN H O OH 500 (M+H) + x 2 HCI NH 7 LC-MS (Methode 20) : HO OU Rt = 0. 32 min. H H H2NX NCH3 MS (ESIpos) : m/z = HzN'= N I H p 0 oH 486 (M+H) + x 2 HCI NH 8 Ho/\/\ oH LC-MS (Methode 20) : HOti \></\ » OH Rt = 0. 35 min. zon HN \ß\N/9 OH MS (ESIpos) : m/z = HaN Y N 0 oH 516 (M+H) + x 2 HCI NH 9 LC-MS (Methode 21) : HO OH OH Rt = 2. 79 min. pro N MS (ESIpos) : m/z = HzN"H O CHs ° Nt 530 (M+H) + x2 HCI N Hz Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 10 LC-MS (Methode 21) : HO OH Rt = 2. 85 min. H 0 0 t on C o Rt = 2. 85 min. Jk MS (ESIpos) : m/z = HZN Y N H O o-o 542 (M+H) + OH x 2 HCI Nez LC-MS (Methode 21) : OH Rt = 3. 09 min. zon N MS (ESIpos) : m/z = H O 3/ 0 OH 576 (M+H) + x 2 Hci NH 12 LC-MS (Methode 21) : HO OH Rt = 2. 88 min. f Hz MS (ES1pos) : m/z = H2N"Y V"N"TF 0 554 (M+H) + oH x 2 HCI NH 13 HO < OH LC-MS (Methode 21) : HO OU Rt = 3. 10 min. 0 N NCH MS (ESIpos) : m/z = 1 H 0 oH 576 (M+H) + x 2 HCI NH2 Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. IH-NMR (400MHz, HO OH_ D201 : oH g = 1. 78-1. 88 (m, 1H), 0 'oH 1. 93-2. 00 (m, 1H), 2. 78-2. 88 (m, 2H), H2N 2. 98-3. 06 (m, 2H), O _ H O 3. 17-3. 30 (m, 2H), oH 3. 33 (d, 1H), 3. 42- 2 H 3. 57 (m, 3H), 3. 73- NH2 3. 84 (m, 1H), 4. 68- 4. 82 (m, 2H), 6. 86 (d, 1H), 6. 87 (d, 1H), 7. 24 (m, 1H), 7. 32 (d, 1H), 7. 40 (d, 1H). MS (EI) : m/z = 546 (M+H) +, 568 (M+Na) +

Beispiel 15 N-{[(8S,11S,14S)-14-amiino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl] -5, 17-dihydroxy- 10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14. 3. 1. 12, 61henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexan- 8-yl]carbonyl}-L-phenylalanin Dihydrochlorid

0.02 g (0.02 mmol) Benzyl-N- {[(8S,11S,14S)-5, 17-bis (benzyloxy)-14- { [ (benzyloxy)- carbonyl]maino}-11-((2R)-3-{[(benzyloxy)carbonyl]amino}-2-hy droxypropyl)- 10,13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14.3. 1. 126] henicosa-l (20), 2 (21), 3,5, 16, 18-hexaen-8-

yl] carbonyl)-L-phenylalaninat werden in 6 ml Essigsäure : Wasser : Ethanol (4 : 1 : 1) suspendiert und mit 0.01 g Pd/C versetzt. Man hydriert bei Normaldruck unter kräftigem Rühren für 48 h. Die Reaktionslösung wird filtriert. Der Rückstand wird mit 0.25 ml 0.1 N Salzsäure versetzt. Nach Einengen am Rotationsverdampfer trocknet man im Vakuum. Zur weiteren Reinigung wird in Isopropanol : Diethylether (1 : 1) ausgerührt.

Ausbeute : 0.0037 g (28 % d. Th.) LC-MS (Methode 15) : Rt = 1. 27 min.

MS (EI) : m/z = 620 (M+H) + In Analogie zu Beispiel 15 können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 16 und 17 hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 15) : 0 16 H H Rt = 0. 701 min. N 2 MS (EI) : m/z = 544 OH NH2 . Ho OH LC-MS (Methode 17) : 0 CH 0 17 H 1 Rt = 1. 55 min. 2 2 = H MS (EI) : rn/z = 544 0 oH o x 2 Hcl NH

Ausgehend von (8S, 11S,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl0-amino-11-[3-[(tert-butoxy - carbonyl) amino] propyl}-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9,12-diazatricyclo [14. 3. 1. 12'6]- henicosa-1 (20), 2 (21), 3, 5, 16, 18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 83A) können die in der folgenden Tabelle aufgeführten L-Ornithin-haltigen Amide hergestellt werden (Beispiele 18 bis 24). Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. HO OH o LC-MS (Methode 20) : H 18 Nu Rt = 0. 33 min N o MS (EI) : m/z = 456 (M+H) + x2HC)/ H2N Ho oh LC-MS (Methode 19) : H 19 H Rt Rt =1. 54 min. HZN NH NOCH3- 0 H MS (EI) : m/z = 514 (MHz NH x 2 HCI Ho OH LC-MS (Methode 18) : 0 H H3C CH 20 H Rt 0. 66 min. H2N N N N OH MS (EI) : m/z = 528 (M+H) + NH. x2HC ! Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. HO OH 0 H fi N ! \N LC-MS (Methode 19) : H2N H 21 °/ ! Rt=1. 6min. MS (EI) : m/z = 592 0 H2N (M+H) + x 2 HCI OH OH HO <OH HO OU H 22 H2NS NHS MS (EI) : m/z = 587 O H t /- OH x 2 HCI NS OH OH H LC-MS XNa 2 LC-MS (Methode 18) : 23 H N-, N ~ Rt = 1. 21 min. HN MS (EI) : m/z = 568 x 2 HCI OH (M+H) + Han Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. HO OH NUI o LC-MS (Methode 18) : N 24 Rt = 1. 27 min. (/" N MS (EI) : m/z = 603 H2N NW (M+H) N x4HO/\ In Analogie zu Beispiel 15 können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Beispiele 25 und 26 hergestellt werden. Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 22) : oh 25 H l Rt = 0. 30 min 25 NI-1'yN N \1 (M+H) + x2HCI NH Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 15) : 0 0 26 N Rt = 0. 88 min 26 H H 'n E H ! ! i"'MS (EI) : m/z = 544 2 x 2 HCI NH

Ausgehend von (8S, 11S,14S)-14-[(tert-Butoxycarbonyl)-amino-11-[3-[(tert-butoxy - carbonyl) amino] propyl3-5, 17-dihydroxy-10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo [14. 3.1. 12'6]- henicosa-1 (20), 2 (21), 3,5, 16,18-hexaen-8-carbonsäure (Beispiel 83A) können die in der folgenden Tabelle aufgeführten L-Ornithin-haltigen Amide hergestellt werden (Beispiele 27 bis 33). Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 27 HO OH LC-MS (Methode 15) : Rt = 0. 72 min. H2NC vNeO x 2 HCI MS (EI) : m/z = 584 g HNo (N (MAH) NH H2N 0 OH 28 HOOH LC-MS (Methode 15) : Rt = 0. 69 min NU2 N 0 MS (EI) : m/z 583 HzN H 0 o HN ++ x 2 HCI H2N H2N 0 Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 29/\/\ oH LC-MS (Methode 15) : HO 0 Rt = 0. 72 min. o MS (EI) : m/z = 543 HzN H I O O HN Y'OH (M+H) + x 2 Hz x2HC ! \ H2N HO H2N 30 HO OH LC-MS (Methode 15) : ;/\4 Rt= 0. 83 min. o MS (EI) : m/z = 585 N HzN o H ! 1W--H) + ,. O x 2 HCI OH OH 31 HO OH LC-MS (Methode 23) : Ho---<y y-OH rut =1. 04 min. 0 o o MS (EI) : m/z = 571 HzN H OH + O HN +H) x 2 HCI HO HzN O 32 HO OH LC-MS (Methode 23) : C Rt Rt = 1. 00 min. 0 H MS (EI) : m/z = 570 N 0 '2N =n NH ffl+H) o HN Ho Holz Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 33 HO-OH LC-MS (Methode 24) : \lHj \ Rt = 0. 27 min. 0 o MS (EI) : m/z = 541 H N N + H N- (M+H) HAN zu HAN HN \ ou H2 N o

Beispiel 34 (8S, llS, 14S)-14-Amino-11-[(2R)-3-amino-2-hydroxypropyl]-5, 17-dihydroxy-9- methyl-10, 13-dioxo-9, 12-diazatricyclo (14. 3.1. 12'6] henicosa-1 (20), 2 (21), 3,15, 16,18- hexaen-carbonsäureamid-Dihydrochlorid

11 mg (0.01 mmol) der Verbindung aus Beispiel 122A werden in 10 ml Eis- essig/Ethanol/Wasser (4/1/1) gelöst, mit 6 mg Pd-C (10%-ig) -Katalysator versetzt und bei Raumtemperatur über Nacht hydriert. Nach Abfiltrieren des Katalysators dampft man den Rückstand im Vakuum zur Trockne ein, versetzt mit 0.1 N Salzsäure und dampft erneut zur Trockne ein.

Ausbeute : 7 mg (96% d. Th.) MS (EI) : m/z = 485 (M+H) + Analog der Vorschrift des Beispiels 34 kann das in der folgenden Tabelle aufgeführte Beispiel 35 hergestellt werden :

Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. 35 HO OH LC-MS (Methode 22) : HO- y \OH'' rut = 1. 46 min. 0 zu MS (EI) : m/z = 469 = l N 0 Hz 1 (M+H x 2 HCI H2N In Analogie zu Beispiel 1 können die in der folgenden Tabelle aufgefiihrten Beispiele 36 und 37 hergestellt werden. Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. Ho OH LC-MS (Methode 15) : 36 r o Rt=1. 52 min N 2 N 3 MS (EI) : m/z= 558 H O CH3 oH (++) + x 2 HCI NH Beispiel-Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 24) : 37 H o H o Rt= 0. 42 min N, . L N . AN. A -N.. A O OH (M+H) + x 2 HCI NH In Analogie zu Beispiel 15 können die in der folgenden Tabelle aufgeführten Bei- spiele 38 bis 40 hergestellt werden. Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 23) : ZNH 38 N N Rt = 0. 95 min. H2 N N N N"OH 0 OH ° CH3 MS (EI) : m/z = 586 IO'OH O = CH3 cl3 c3 NH HO OH LC-MS (Methode 24) : oh 39 J ; ° Rt= 0. 80 min. N O H O °-OH H3C CH3 MS (EI) : m/z = 572 x 2 HCi X (M+H) + NH2 Beispiel- Struktur Analytische Daten Nr. HO OH LC-MS (Methode 24) : ihn H2NA N/Y tOH Rt = 0. 94 min. 2 zon SOH o 0"H3c MS (EI) : m/z = 586 . OH c j CHg (M+H)'' NH2 NH A. Bewertung der physiologischen Wirksamkeit Die in vitro-Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden : In vitro Transkription-Translation mit E. coli Extrakten Zur Herstellung eines S30-Extraktes werden logarithmisch wachsende Escherichia coli MRE 600 (M. Müller ; University Freiburg) geerntet, gewaschen und wie beschrieben für den in vitro Transkriptions-Translations-Test eingesetzt (Müller, M. and Blobel, G. Proc Natl Acad Sci U S A (1984) 81, pp. 7421-7425).

Dem Reaktionsmix des in vitro Transkriptions-Translations-Tests werden zusätzlich 1 µl cAMP (11,25 mg/ml) je 50 ul Reaktionsmix zugegeben. Der Testansatz beträgt 105 gl, wobei 5 1ll der zu testenden Substanz in 5%igem DMSO vorgelegt werden.

Als Transkriptionsmatrize werden 1, ug/100Z1 Ansatz des Plasmides pBESTLuc (Promega, Deutschland) verwendet. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 ul Luziferinlösung (20 mM Tricine, 2,67 mM MgS04,0, 1 mM EDTA, 33,3 mM DTT pH 7, 8, 270 jiM CoA, 470 RM Luziferin, 530 uM ATP) zugegeben und die entstehende Biolumineszenz für 1 Minute in einem Luminometer gemessen. Als ICso

wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50% igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt.

In vitro Transkription-Translation mit S. aureus Extrakten Konstruktion eines S. aureus Luziferase Reporterplasmids Zur Konstruktion eines Reporterplasmids, welches in einem in vitro Transkriptions- Translations-Assay aus S. aureus verwendet werden kann, wird das Plasmid pBESTluc (Promega Corporation, USA) verwendet. Der in diesem Plasmid vor der Firefly Luziferase vorhandene E. coli tac Promoter wird gegen den capAl Promoter mit entsprechender Shine-Dalgarno Sequence aus S. aureus ausgetauscht. Dazu werden die Primer CAPFor 5'-CGGCC- <BR> <BR> <BR> <BR> AAGCTTACTCGGATCCAGAGTTTGCAAAATATACAGGGGATTATATATAA TGGAAAACAAGAAAGGAAAATAGGAGGTTTATATGGAAGACGCCA-3'und CAPRev 5'-GTCATCGTCGGGAAGACCTG-3'verwendet. Der Primer CAPFor enthält den capAl Promotor, die Ribosomenbindestelle und die 5'-Region des Luziferase Gens. Nach PCR unter Verwendung von pBESTluc als Template kann ein PCR-Produkt isoliert werden, welches das Firefly Luziferase Gen mit dem fusionierten capAl Promotor enthält. Dieses wird nach einer Restriktion mit ClaI und HindIII in den ebenfalls mit ClaI und HindIII verdauten Vektor pBESTluc ligiert.

Das entstandene Plasmid p la kann in E. coli repliziert werden und als Template im S aureus in vitro Transkriptions-Translations-Test verwendet werden.

Herstellung von S30 Extrakten aus S. aureus Sechs Liter BHI Medium werden mit einer 250 ml Übernachtkultur eines S. aureus Stammes inokuliert und bei 37°C bis zu einer OD600nm von 2-4 wachsen gelassen.

Die Zellen werden durch Zentrifugation geerntet und in 500 ml kaltem Puffer A (10 mM Tris-acetat, pH 8,0, 14 mM Mg-acetat, 1 mM DTT, 1 M KC1) gewaschen.

Nach erneutem Abzentrifugieren werden die Zellen in 250 ml kaltem Puffer A mit 50 mM KC1 gewaschen und die erhaltenen Pellets bei-20°C für 60 min eingefroren.

Die Pellets werden in 30 bis 60 min auf Eis aufgetaut und bis zu einem Gesamtvolumen von 99 ml in Puffer B (10 mM Tris-acetat, pH 8,0, 20 mM Mg- acetat, 1 mM DTT, 50 mM KC1) aufgenommen. Je 1,5 ml Lysostaphin (0,8 mg/ml) in Puffer B werden in 3 vorgekühlte Zentrifugenbecher vorgelegt und mit je 33 ml der Zellsuspension vermischt. Die Proben werden für 45 bis 60 min bei 37°C unter gelegentlichem Schütteln inkubiert, bevor 150 zip einer 0,5 M DTT Lösung zugesetzt werden. Die lysierten Zellen werden bei 30.000 x g 30 min bei 4°C abzentrifugiert.

Das Zellpellet wird nach Aufnahme in Puffer B unter den gleichen Bedingungen nochmals zentrifugiert und die gesammelten Überstände werden vereinigt. Die Über- stände werden nochmals unter gleichen Bedingungen zentrifugiert und zu den oberen 2/3 des Überstandes werden 0,25 Volumen Puffer C (670 mM Tris-acetat, pH 8,0, 20 mM Mg-acetat, 7 mM Na3-Phosphoenolpyruvat, 7 mM DTT, 5,5 mM ATP, 70 uM Aminosäuren (complete von Promega), 75 ag Pyruvatkinase (Sigma, Deutschland) /ml gegeben. Die Proben werden für 30 min bei 37°C inkubiert. Die Überstände werden über Nacht bei 4°C gegen 2 1 Dialysepuffer (10 mM Tris-acetat, pH 8, 0,14 mM Mg-acetat, 1 mM DTT, 60 mM K-acetat) mit einem Pufferwechsel in einem Dialyseschlauch mit 3500 Da Ausschluss dialysiert. Das Dialysat wird auf eine Proteinkonzentration von etwa 10 mg/ml konzentriert, indem der Dialyse- schlauch mit kaltem PEG 8000 Pulver (Sigma, Deutschland) bei 4°C bedeckt wird.

Die S30 Extrakte können aliquotiert bei-70°C gelagert werden.

Bestimmung der ICso im S. aureus in vitro Transcriptions-Translations-Assay Die Inhibition der Proteinbiosynthese der Verbindungen kann in einem in vitro Transkriptions-Translations-Assay gezeigt werden. Der Assay beruht auf der zellfreie Transkription und Translation von Firefly Luziferase unter Verwendung des Reporterplasmids pla als Template und aus S. aureus gewonnenen zellfreie S30 Extrakten. Die Aktivität der entstandenen Luziferase kann durch Lumineszenz- messung nachgewiesen werden.

Die Menge an einzusetzenden S30 Extrakt bzw. Plasmid pla muss für jede Präparation erneut ausgetestet werden, um eine optimale Konzentration im Test zu

gewährleisten. 3 Ill der zu testenden Substanz gelöst in 5% DMSO werden in eine MTP vorgelegt. Anschließend werden 10 al einer geeignet konzentrierten Plasmid- lösung pla zugegeben. Anschließend werden 46 l eines Gemisches aus 23 u. l Premix (500 mM K-acetat, 87,5 mM Tris-acetat, pH 8,0, 67,5 mM Ammoniumacetat, 5 mM DTT, 50 pg Folsäure/ml, 87,5 mg PEG 8000/ml, 5 mM ATP, 1,25 mM je NTP, 20 aM je Aminosäure, 50 mM PEP (Na3-Salz), 2,5 mM cAMP, 250 llg je E. coli tRNA/ml) und 23 1 einer geeigneten Menge S. aureus S30 Extrakt zugegeben und vermischt. Nach Inkubation für 60 min bei 30°C werden 50 111 Luziferinlösung (20 mM Tricine, 2,67 mM MGso4, 0,1 mM EDTA, 33,3 mM DTT pH 7,8, 270 uM CoA, 470 uM Luziferin, 530 tlM ATP) und die entstehende Biolumineszenz für 1 min in einem Luminometer gemessen. Als ICso wird die Konzentration eines Inhibitors angegeben, die zu einer 50% igen Inhibition der Translation von Firefly Luziferase führt Bestimmung der Minimalen Hemmkonzentration (MHK) : Die minimale Hemmkonzentration (MHK) ist die minimale Konzentration eines Antibiotikums, mit der ein Testkeim in seinem Wachstum über 18-24 h inhibiert wird. Die Hemmstoffkonzentration kann dabei nach mikrobiologischen Standard- verfahren bestimmt werden (siehe z. B. The National Committee for Clinical Laboratory Standards. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically ; approved standard-fifth edition. NCCLS document M7-A5 [ISBN 1-56238-394-9]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2000). Die MHK der erfindungsgemäßen Ver- bindungen wird im Flüssigdilutionstest im 96er-Mikrotiter-Platten-Maßstab be- stimmt. Die Bakterienkeime wurden in einem Minimalmedium (18,5 mM Na2HPO4, 5,7 mM KH2P04, 9,3 mM NH4C1, 2,8 mM mGso4, 17,1 mM NaCl, 0,033 µg/ml Thiaminhydrochlorid, 1, 2 ug/ml Nicotinsäure, 0, 003 µg/ml Biotin, 1% Glucose, 25 wg/ml von jeder proteinogenen Aminosäure mit Ausnahme von Phenylalanin ; [H.-P.

Kroll ; unveröffentlicht] ) unter Zusatz von 0,4% BH Bouillon kultiviert (Test- medium). Im Fall von Enterococcus faecalis ICB 27159 wird dem Testmedium

hitzeinaktiviertes fötales Kälberserum (FCS ; GibcoBRL, Deutschland) in einer Endkonzentration von 10% zugesetzt. Übernachtkulturen der Testkeime werden auf eine OD578 von 0,001 (im Falle der Enterokokken auf 0,01) in frisches Testmedium verdünnt und 1 : 1 mit Verdünnungen der Testsubstanzen (Verdünnungsstufen 1 : 2) in Testmedium inkubiert (150 Ill Endvolumen). Die Kulturen werden bei 37°C für 18- 24 Stunden inkubiert ; Enterokokken in Gegenwart von 5% CO2.

Die jeweils niedrigste Substanzkonzentration, bei der kein sichtbares Bakterien- wachstum mehr auftrat, wird als MHK definiert. Die MHK-Werte in uM einiger erfindungsgemäßer Verbindungen gegenüber einer Reihe von Testkeimen sind in der nachstehenden Tabelle beispielhaft aufgeführt. Die Verbindungen zeigen eine abgestufte antibakterielle Wirkung gegen die meisten der Testkeime.

Tabelle A Bsp. MHK A MI IK :,.. MIK.. MHK : ICSÖ rC50 ISO Ä. 5 ; s : ; _, S äasr"eiss S. äureus : S'eiüreüs : E-'ecalis. B.. 'coZi : äu eus'S. _ äu eu Nr , .,, f t' 133 , sind -T-a Ttänsl atlion 1 0, 2 0, 1 6, 25 6, 25 1, 56 0, 15 0, 9 0, 5 l02OJ656, 2516oj500, 5 2 25 12, 5 50 25 25 0, 55 1, 3-4, 5 3, 4 37 081mI110m Alle Konzentrationsangaben in uM.

Systemische Infektion mit S. aureus 133 Die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen kann in verschiedenen Tiermodellen gezeigt werden. Dazu werden die Tiere im allgemeinen mit einem geeigneten virulenten Keim infiziert und anschließend mit der zu testenden Verbindung, die in einer an das jeweilige Therapiemodell angepassten Formulierung vorliegt, behandelt. Speziell kann die Eignung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von bakteriellen

Infektionen in einem Sepsismodell an Mäusen nach Infektion mit S. aureus demonstriert werden.

Dazu werden S. aureus 133 Zellen über Nacht in BH-Bouillon (Oxoid, Deutschland) angezüchtet. Die Übernachtkultur wurde 1 : 100 in frische BH-Bouillon verdünnt und für 3 Stunden hochgedreht. Die in der logarithmischen Wachstumsphase befindlichen Bakterien werden abzentrifugiert und 2 x mit gepufferter, physiologischer Koch- salzlösung gewaschen. Danach wird am Photometer (Dr. Lange LP 2W) eine Zellsuspension in Kochsalzlösung mit einer Extinktion von 50 Einheiten eingestellt.

Nach einem Verdünnungsschritt (1 : 15) wird diese Suspension 1 : 1 mit einer 10 %- igen Mucinsuspension gemischt. Von dieser Infektionslösung wird 0,2 ml/20 g Maus i. p. appliziert. Dies entspricht einer Zellzahl von etwa 1-2 x 10E6 Keimen/Maus. Die i. v. -Therapie erfolgt 30 Minuten nach der Infektion. Für den Infektionsversuch werden weibliche CFWl-Mäuse verwendet. Das Überleben der Tiere wird über 6 Tage protokolliert. Das Tiermodell ist so eingestellt, daß unbehandelte Tiere innerhalb von 24 h nach der Infektion versterben. Für die Beispielverbindung 2 konnte in diesem Modell eine therapeutische Wirkung von ED100 = 1.25 mg/kg demonstriert werden.

B. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden : Tablette : Zusammensetzung : 100 mg der Verbindung von Beispiel 1, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.

Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm.

Herstellung : Die Mischung aus Wirkstoff, Lactose und Stärke wird mit einer 5%-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat für 5 min. gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Pesskraft von 15 kN verwendet.

Oral applizierbare Suspension : Zusammensetzung : 1000 mg der Verbindung von Beispiel 1, 1000 mg Ethanol (96%), 400 mg Rhodigel (Xanthan gum der Fa. FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser.

Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.

Herstellung : Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, der Wirkstoff wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluss der Quellung des Rhodigels wird ca. 6h gerührt