本发明属于动物水产养殖技术中的一种维生紊 添加剂， 尤其是一种维生系水剂及 其制备方法。 背景技术

维生衮是机体维持正常功能所必^- -种有机物质， 但其在体内不能合成， 或合成的 ft 很少， '要通过食物摄取。 维生素在调节机体物质代谢和维持生理功能等 方面发挥着重要 作用， 它主耍以辅酶和催化剂的形式广泛地参与体内 代谢中的多种化^反应， 从而保证机 体组织器官的细胞结构和功能的 if.常， 维持动物日常 jF.常健康以及各种活动， 维生素的缺 乏 I |J引起机体代谢紊乱， ^响动物健康和 Οί常生物活动。 维生索按其溶解度可分为：脂溶性维牛.素和� �溶性维生素。 脂溶性维牛.素的作 ffl 多样， 除了直接参与和影响特异的代谢过程外， 还与细胞内' 体结合， 影响特定的基 闵表达。 水溶忭维^素顾名思义可以溶于水， 不溶于脂肪及冇机溶剂， 人量食入一般 不会产生蓄积和毒害作川， 绝大多数以辅酶或辅基形式参加各种酶系统工 作， 在屮间 代谢的许多环节中都起着极重要的作用。 可见脂溶性维生素和水溶性维生素对动物身 体的健康有极大的作用， 但由于脂溶性维生.素只能溶解子脂溶性物质� �， 所以脂溶性 维生索在实际使 ffl时的利用' 较低， 尤其是如何将脂溶性维生紊和水溶性维生紊制 成 一种均质、 稳定的水剂， 一: R是养殖业有待攻克的难题。 目前已知的方法存在水剂中 的有效成分较少、 水剂不稳定以及工艺复杂的缺点。 发明内容

本发明的 Π的在于克服现冇技术的不足， 提供 '均质、 稳定的维生素水剂， 该水剂 的原料重¾组成包括： 胎质体、 1. 89〜5. 85 份的维生素 A、 2〜4 份的维生素 D、 1〜3 份 的维 素£、 1〜2 份的维 素 K、 4〜6 份的维牛素 Bl、 2〜4 份的维生素 Β2、 2〜6份的 维生素 Ββ、 1〜2 份的维生素 Β12、 1〜6 份的维生素 C、 2〜4份的维生素 H、 1~2 份的叶 酸和增溶剂。

脂质体的原料 S:量组成 i括： 0〜10份的大豆卵磷脂、 0〜15 份的二硬脂酰磷脂酰胆 碱、 0〜40份的山梨醇和 5份的胆 |ά1醇。

更正页 （细则第 91条) 增溶剂为按重 S比 2: 1混合的聚乙二醇 6000和聚乙烯吡咯垸酮。

木发明的另 -个 S的是提供 -种维牛.素水剂的制备方法， 该方法包括以卜少骤：

(1)制备脂质体

将大 ώ卵磷脂、 二硬脂酰磷 )11酰胆碱或山梨醇中的一种或儿种以及胆固醇 混合后加入 反应釜中， 反应时间为 30- 45min , 反应温度为 20〜65'C ;

(2)制各脂溶性维生素溶液

将维 紊 Λ、 维生素 1)、 维生尜 R、 维生素 K和增溶剂溶解在有机溶剂三氯甲垸和乙醇 的混合溶液中， 制得脂溶性维生素溶液；

(3)制备水溶性维生素溶液

将维牛素 131、 维生素 B2、 维生素 B6、 维生岽 B12、 维生素 C、 维生素 Π、 叶酸溶解于

PBS缓冲液， 制得水溶性维 .素溶液；

01)制备维生紊水剂

将脂溶性维生素溶液溶解在脂质体中， 真 蒸发去除有机溶剂， 再加入水溶性维 ΐ索 溶液， 常温静赏 2〜4小时；

(5)绯.生素水剂均质处现

将静置后的维生素水剂用胶体磨处理后制得成 品。

而且， 歩骤 (5)处现后的成品还经过 0. 45um微孔滤膜过滤。

而且， 步骤 U)屮所述的大豆卵磷脂为 0〜10份、 —硬脂酰磷脂 ¾胆碱为 0〜15份、 山 梨醇为 0〜40份、 胆同醇为 5份， 以 I：为重呈份数。

而且， 少骤 (2)中所述的增溶剂为按宽量比 2: 〗混合的聚乙二醉 6000和聚乙烯吡咯烷 而且， 歩骤 (2)中所述的 氯屮烷和乙醇的体枳比为 2 : 1。

而 H, 步骤 (3)中所述的 PBS缓冲液的 pH值为 6. 0-7. 4, 缓冲液温度为 30~45° (：。 而且， 步骤 (·《中所述的真'仝'蒸发条件是 50Γ以下 S'仝蒸发去除有机溶剂。

本发明的优点和积极效¾是：

本发明中利用脂质体的微襄结构， 将脂溶性维生茶包裹在内部并与水溶性维生素 形成 均质、稳定的水剂。 该水剂长时间内存放性状稳 ， 其成分粒径较小且具有类细胞的结构， 进入动物体内 " 以激活机体的自身免疫功能使机体免疫水平维 持较 的状态， 1 时使多种 维生素能有效的存储于机体内， 避免了维生素在代谢过程中的损失和利用率不 足的问题， 明显提高了饲料的利用率和转化率， 提高动物机体的抗体水平、 增强了抗病能力。

更正页 （细则第 91条) 具体实施方式

下面结合实施例， 对本发明进一步说明， 下述实施例是说明性的， 不是限定性的' 不 能以下述实施例来限 本发明的保护范围。

本发明提供了一种均质、 稳定的维生素水剂， 该水剂的原料重量组成包括： 脂质体、

1. 89〜5. 85 份的维生素 A、 2〜4 份的维生素 D、 1〜3 份的维生素 E、 1〜2 份的维生素 K、 4〜6份的维生素 Bl、 2〜4 份的维生索 1¾、 2〜6 份的维生素 Β6、 1〜2 份的维生素 Β12、 1〜6份的维生紊（；、 2〜4份的维生素 H、 1〜2 份的叶酸和增溶剂。

脂质体的原料 i 量组成包括： 0〜10份的大豆卵磷脂、 0〜15 份的二硬脂酰磷脂酰胆 碱、 0〜40份的山梨醉和 5份的胆固^。 增溶剂为按. 量比 2: 1混合的聚乙—醇 6000和 聚乙焫吡咯烷酮。

实施例 1

一种维生素水剂的制备方法包括以 步骤：

(1)制备脂质体

将 10g大 :卵磷脂和 5g胆固醇混合 加入反应釜中， 反应时间为 30- 45min, 反应温 度为 2(TC _;

(2)制备脂溶性维生素溶液

将 11000000TU ( 3. 78g) 维牛素 Λ、 1600000001L (4g ) 维牛.素 D、 2000IU (2g) 维牛 素 E、 1000TU ( lg)维生紊 K、 10g聚乙二醇 6000和 5g聚乙烯吡咯烷酮溶解在有机溶剂三 氯甲垸和乙醇（三氯甲垸和乙醇的重 ½比为 2: 1 )的混合溶液中， 制得脂溶性维生素溶液；

(3)制备水溶性维生素溶液

将 4g维生素 Bl、 4g维生素 B2、 2g维生素 B6、 2g维生素 BI2、 4g维生素（：、 2g维 生素 H、 2g叶酸溶解于 pH值为 6. 0的 PBS缓冲液， 缓冲液温度为 30'C， 制得水溶性维生 素溶液；

制备维生素水剂

将脂溶性维生素溶液溶解在脂质休中， 在 O. OSMpa, 50'C以 F的条件下真 '今:蒸发去除 冇机溶剂 氯屮烷和乙醇）， 再加入水溶性维生素溶液， 常温静置 2小时；

(5)维生素水剂均质处理

将静 S后的维生素水剂用胶体磨处理后制得成品， 成品屮的固休颗粒的粒径为 0. lun！〜 0. 4 urn 。

更正页 （细则第 91条) (6)经过 0.4oum微孔滤膜过滤以出 冇 ^菌， 装罐。 实施例 2

- 种维生素水剂的制备方法包括以下歩骤：

ω制备脂质体

将 10g 大 Ai卵磷胎、 20g 山梨 和 5g 职固醇混介后加入反应釜中， 反应时间为 3()-45min, 反应温度为 65°C;

(2)制各脂溶性维生素溶液

将 5500000IU (1.89g) 维生素 Λ、 1600000001U (4g) 维生素 D、 2000TU (2g) 维 生素 E、 lOOOTU Clg) 维生素 K、 10g聚乙一醇 6000和 5g 聚乙烯吡咯烷酮溶解在有机溶 剂 铽甲烷和乙醇（ ^甲垸和乙醇的重量比为 2: 1) 的混合溶液中， 制得脂溶性维生素 溶液；

(3)制备水溶性维 尜溶液

将 4g维生素 Bl、 2g 维 ·:紊 B2、 2g 维生紊 B6、 lg维生尜 B12、 6g 维生紊 C、 2g 维 生素 H、 2g 叶酸溶解 Τ· _Ρ Η值为 7.4的 PBS缓冲液， 缓冲液温度为 45'C, 制得水溶性维生 素溶液：

(4)制备维生素水剂

将脂溶性维生素溶液溶解 i:脂质体屮， 在 0.08〜0. IMpa, 50'C以下的条件下真¾蒸发 去除有机溶剂 （ 甲烷和乙醇）， 再加入水溶性维生素溶液， 常温静置 4小时； (5)维牛素水剂均质处理

将静置 )ΰ·的维生索水剂用胶体磨处理 制得成品， 成品屮的固体颗粒的粒径为 0. lum~0.4 um 。

(6)经过 0.45um微孔滤膜过滤以出去有害菌， 装罐。 实施例 3

一种维 素水剂的制备方法包括以卜'歩骤：

0)制备脂质体

将 5g大 W.卵磷脂、 5g二硬脂酰磷脂酰胆碱、 20g i 梨醇和 5g胆固醇混合后加入反应 釜中, 反应时间为 30-45min, 反应温度为 55'C;

(2)制备脂溶性维生素溶液

更正页 （细则第 91条) 将 ΠΟΟΟΟϋΟΙΙΙ ( 3. 78g 维牛素 Λ、 160000000IU (4g ) 维牛素 D、 2000TU ( 2g) 维牛. ¾· E、 200(HU (2g)维生素 K、 〗0g聚乙二醇 6000和 5 _g 聚乙烯吡咯烷酮溶解在有机溶剂三 氯甲烷和乙醇（三氯甲垸和乙醉的重: 1：比为 2: 1 )的混合溶液中， 制得脂溶性维牛素溶液；

(3)制备水溶性维生素溶液

将 4g 维牛.素 Bl、 2g维牛素 B2、 6g维牛素 B6、 2g维生素 B12、 4g维生素 C、 2g维牛. 素 11、 2g叶酸溶解 Τ ρΠ值为 7. 0的 PBS缓沖液， 缓冲液温度为 32Ό , 制得水溶性维生素 溶液；

(4)制各维生尜水剂

将脂溶性维生素溶液溶解在脂质体中， 在 0. 08〜0. 09Mpa， 50'C以下的条件下真空蒸 发力除 '机溶剂 （ i氯 和乙醇）， 再加入水溶性维生素溶液， 常温静置 3. 5小时；

(5)维生索水剂均质处理

将静 S后的维生 M水剂用胶休磨处理后制得成品， 成品中的同体颗粒的粒径为 0. lum〜 0. 4 urn 。

(6)经过 0. 45um微孔滤膜过滤以出去冇害菌， 装罐。 实施例 4

一种维生素水剂的制备方法包括以下步骤：

(1)制备脂质体

将 10g二硬胎酰磷脂酰胆碱、 40g 山梨醇和 5g胆 !¾醇混合后加入反应釜中， 反应时 间为 30- 45min， 反应温度为 45 ；

(2)制备脂溶性维生素溶液

将 11000000IU ( 3. 78g) 维牛.素 A、 80000000 ( )维牛素 D、 2000IU (2g)维生素 E、 200()TU (2g)维生素 K、 10g聚乙二醇 6000和 5g 聚乙烯吡咯烷酮溶解在有机溶剂三氯甲垸 和乙醇 （三氯甲烷和乙醇的重蜇比为 2: 1 ) 的混合溶液中， 制得脂溶性维牛素溶液： ( 制备水溶性维生素溶液

将 4g 维生素 B】、 4g维生素 B2、 6g维生素 B6、 2g维生素 B12、 lg维生素 (：、 4g维生 素11、 lg叶酸溶解于 pH值为 6. 5的 PBS缓冲液， 缓冲液温度为 41 °C， 制得水溶性维生素 溶液；

(4)制备维牛索水剂

将脂溶性维生素溶液溶解在脂质休巾， 在 0. 09MPa ， 50'C以下的条件下真 ：蒸发去除

更正页 （细则第 91条) 有机溶剂 （三氯甲烷和乙醇）， 冉加入水溶性维牛素溶液， 常温静 2. 5小时；

(5)维生素水剂均质处理

将静置后的维生素水剂用胶体磨处理后制得成 品， 成品屮的 I 体颗粒的粒径为 0. lun！〜 0. 4 um 。

(6)经过 0. 45um微孔滤膜过滤以出去有 *菌， 装罐。 实施例 5

一种维生索水剂的制备方法包括以下步骤-

(1 )制备脂质体

将 15g ―.硬脂酰磷脂酰胆碱和 5g胆 I 醇混合后加入反应釜中，反应时间为 30-45mi n, 反应温度为

(2)制备脂溶性维生 溶液

将 17000000 (5. 85g)维生素 A、 160000000IL (4g)维生素 D、 2000IU (2g)维生素 E、 1000TU (lg)维生紊 K、 10g 聚乙一醉 6000和 5g聚乙烯吡咯烷酮溶解在冇机溶剂三氯甲垸 和乙醇 （三氯甲烷和乙醇的重 ft比为 2: 1 ) 的混合溶液中， 制得脂溶性维生素溶液；

(3)制备水溶性维生素溶液

将 6g 维生素 Bl、 4g 维生素 B2、 6g 维生素 B6、 2g维生素 B12、 4g维生素 (：、 2g 维 生素 H、 2g 叶酸溶解亍 pH值为 6. 8的 PBS缓冲液， 缓冲液温度为 37'C , 制得水溶性维生 衮溶液；

(4)制备维^素水剂

将脂溶性维生素溶液溶解在胎质体中， 在 0. 08Mpa. 50'C以下的条件下 ¾空蒸发去除 有机溶剂 Γ二.氯甲垸和乙醇）， 冉加入水溶性维牛素溶液， 常温静置 4小时：

(5)维生素水剂均质处理

将静置后的维生素水剂 ffl胶体磨处现后制得成品， 成品中的 I古 I体颗粒的粒径为 0. lum〜0. 4 urn 。

(6)经过 0. 45um微孔滤脱过滤以出去有害蔺， 装罐。

实施例 1〜5的维生素水剂稳定性分析， 结果见表 1、 表' 2及表 3：

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更正页 （细则第 91条) 实施例 2 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 均一稳定 均- .稳定 均一稳定 均一稳定 均一稳定 实施例 3 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 均一稳定 均一稳定 均一稳定 均 -稳定 均一稳定 实施例 4 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 谈黄 液体 均一稳定 均 -稳定 均一稳定 均一稳定 均一稳定 实施例 5 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 淡黄色液体 均一稳定 均一稳定 均- ·稳定 均一稳定 均一稳定 表 1 : 水剂长期存放的稳^性分析

从表 1的结果可知， 该维生素水剂经长期存放后， 性状稳定。

表 2 : 水剂长期存放的脂溶性成分平均含量分析 从表 2的结果可知， 该维牛素水剂经长期存放后， 脂溶性成分含量充足。

表 3: 使用该维生素水剂后的动物休征分析 从表 3的结 ¾可知， 动物家禽和家 ^使用该维生素水剂后， 其饲料利用率、 增重指标 及免疫水平均大幅提高， f¾'且直接使川， 操作简便。

综 h所述， 木发明存放较长时间 性状稳定、 效成分含量充足、 明显提高饲料利用 率和转化率、 提^机体抗体水平增强抗病能力， 产品使用方便， 解决了脂溶性维生素的吸 收、 利 ffl低下、 使用不便的问题。

更正页 （细则第 91条)