Das allgemein anerkannte Mehrschrittmodell der Krebsentstehung geht davon aus, daß durch Anhäufung von mehreren Mutationen in einer einzelnen Zelle diese so in ihrem Proliferations-und Differenzierungs-verhalten geändert wird, daß letztendlich über benigne Zwischenstufen ein maligner Zustand mit Metastasierung erreicht wird.

Hinter dem Begriff Krebs oder Tumor verbirgt sich ein Krankheitsbild mit mehr als 200 verschiedenen Einzelerkrankungen. Tumorerkrankungen können gutartig oder bösartig verlaufen. Die wichtigsten Tumoren sind die der Lunge, der Brust, des Magens, des Gebärmutterhalses, der Prostata, des Kopfes und Halses, des Dick- und Enddarmes, der Leber und des Blutsystems. Hinsichtlich Verlauf, Prognose und Therapieverhalten gibt es große Unterschiede. Mehr als 90% der erkannten Fälle betreffen solide Tumoren, die insbesondere in fortgeschrittenem Stadium bzw. bei Metastasierung schwer oder nicht therapierbar sind. Die drei Säulen der Krebsbekämpfung sind nach wie vor operative Entfernung, Bestrahlung und Chemotherapie. Trotz großer Fortschritte ist es bisher nicht gelungen, Medikamente zu entwickeln, die bei den weitverbreiteten soliden Tumoren eine deutliche Verlängerung der Überlebenszeit oder gar komplette Heilung bewirken. Es ist deshalb sinnvoll, neue Arzneimittel zur Bekämpfung der Krebserkrankung zu erfinden.

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Aryl-und Heteroaryl-substituierte Piperazinylcarbonyle und deren Homologe, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel, insbesondere zur Behandlung von gutartigen und bösartigen Tumoren am Menschen und Säugetier.

Beispielsweise werden in den Patentschriften W02002008194, W02002008192 und W02002008190 von der Firma Zentaris AG substituierte und unsubstituierte Acridin- , Chinolin-oder Pyridincarbonylpiperazide mit anticancerogenen Eigenschaften beschrieben.

In den Patentschriften DE1102747 und US3843657 werden Fluoren-derivate mit antispasmolytischer bzw. mit antibakteriellen und Fungiziden-Eigenschaften beschrieben. Eine Tumorwirkung wird weder beschrieben noch nahegelegt.

Xanthenderivate sind in der Literatur als Antispasmolytika (US 2742472) und Anti- Ulcera (US3284449) beschrieben. Eine Tumorwirkung wird weder beschrieben noch nahegelegt. Cinnolinderivate des o. g. Substanztypes sind in der Literatur mit unterschiedlichen biologischen Eigenschaften, beispielsweise als Entzündungshemmer (J. Med. Chem. 1966,9, 664) oder mit ZNS-Aktivitäten erwähnt (A. Stanczak et al. Pharmazie 1997,521, 91-97 ; US3299070). Eine Tumorwirkung wird weder beschrieben noch nahegelegt.

Isochinolinderivate und ihre Verwendung als Lokalanasthetika werden von F. Duro et al. in Farmaco, 1981,36 (6), 400-411 beschrieben. Darüber hinaus finden Isochinoline des o. g. Strukturtyps Verwendung als Antipyretika, Antiarrhythmika und Sedativa (DE2811312, DE2818423). Eine Tumoraktivität ist weder beschrieben noch nahegelegt.

Isoxazole und Isothiazole werden in der Patentschrift US4001237 und von A. Carenzi et al. Arneimittel Forsch. 1989, 39,642 als potentielle Antihypertensiva beschrieben.

Desweiteren werden Isoxazole als Fungizide beschrieben (J. Heindl et al. Eur. J. of Med. Chem. 1975,10, 591). Isoxazole werden ausserdem als Analgetika (DE2065430), Muscarin-Rezeptor Antagonisten (H. g. Striegel et al. European J. of Med. Chem. 1995,30, 839), mit antibakteriellen Eigenschaften (A. Pae et al. Biorg.

Med. Chem. Lett. 1999,18, 2679) in der Literatur belegt. Eine Tumoraktivität ist weder beschrieben noch nahegelegt.

Pyrazol werden in der Literatur als Verbindungen mit antiinflammatorischen und hypnotischen Eigenschaften (S. Sugiura et al. J. Med. Chem. 1977,20, 80), als Anxiolytika (J. K. Chakrabarti et al. J. Med. Chem. 1989,32, 2573), mit antibakteriellen Eigenschaften (G. Palazzino et al. Farmaco Ed. Sci. 1986,41, 566), als Cannabinoid Rezeptor Antagonisten (R. Lau et al. J. Med. Chem. 1999,42, 769 ; R. Pertwee et al.

Eur. J. Pharmacol. 1996,296, 169), als alpha Adrenoceptor Antagonisten (G.

Ermandi et al. Farmaco Ed. Sci. 1998,53, 519), als Histamin H3-Antagonisten (W02003004480), als Faktor Xa Inhibitoren (W001/19798), als Sedativa und Analgetika (EP1006110), als Cholinesterase Inhibitoren (W098/39000) und als CRF Rezeptor Antagonisten (US9720835) erwähnt. Eine Tumorwirkung wird weder beschrieben noch nahegelegt.

Es wurde jetzt überraschend gefunden, daß neue Verbindungen aus der Reihe der Aryl-und Heteroaryl-substituierten Piperazinylcarbonyl-Aromaten zur Herstellung von Arzneimitteln und diese insbesondere zur Behandlung von gutartigen und bösartigen Tumoren geeignet sind. Gemäß diesem Aspekt werden in der vorliegenden Anmeldung neue Verbindungen aus der Reihe der Aryl-und Heteroaryl-substituierten Piperazinylcarbonyl-Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1 beansprucht, wobei die Substituenten folgende Bedeutung haben : R1 : Fluoren-9-on, Isoxazol, Cinnolin, Isothiazol, Isochinolin, 9H-Fluoren, 9H- Xanthen und 1 H-Pyrazol,

wobei die Bindung über jedes beliebige und mögliche Ringglied des Heteroaryl-oder Arylrestes erfolgen kann und die Aromaten und Heteroaromaten ein-oder mehrfach substituiert oder unsubstituiert sein können, R2 : O, S ; R3 : repräsentiert einen oder bis zu 16 Substituenten ausgewählt aus der Gruppe : H, unsubstituiertes oder substituiertes Alkyl, Halogen, COOH, CONH2, wobei die Substituenten vicinal oder geminal am Heterocyclus angeordnet sein können ; R4 : unsubstituiertes oder substituiertes Aryl, unsubstituiertes oder substituiertes Heteroaryl, unsubstituiertes oder substituiertes Alkylaryl, unsubstituiertes oder substituiertes Alkylhetaryl ; m, n : 0-3 Der Ausdruck"Halogen"umfasst im Sinne dieser Erfindung die Halogenatome Fluor, Chlor, Brom und lod.

Der Ausdruck"Metall"umfasst in diesem Sinne dieser Erfindung Metallionen wie Natrium-, Kalium-, Lithium-, Magnesium-, Calcium-, Zink-und Mangan-lonen.

Der Ausdruck"Alkyl"umfasst im Sinne dieser Erfindung acyclische gesättigte oder ungesättigte Kohlenwasserstoffreste, die verzweigt oder geradkettig sowie unsubstituiert oder ein-oder mehrfach substituiert sein können, mit 1 bis 20 C- Atomen, d. h. C1-20-Alkanyle, C2-2o-Alkenyle und C2-20-Alkinyle. Dabei weisen Alkenyle mindestens eine C-C-Doppelbindung und Alkinyle mindestens eine C-C- Dreifachbindung auf. Vorteilhaft ist Alkyl aus der Gruppe ausgewählt, die Methyl, Ethyl, n-Propyl, 2-Propyl, n-Butyl, sec.-Butyl, tert.-Butyl, n-Pentyl, iso-Pentyl, neo- Pentyl, n-Hexyl, 2-Hexyl, n-Octyl, Ethylenyl (Vinyl), Ethinyl, Propenyl (-CH2CH=CH2 ;-

CH=CH-CH3,-C (=CH2)- CH3), Propinyl (-CH2-C=CH,-C=C-CH3), Butenyl, Butinyl, Pentenyl, Pentinyl, Hexenyl, Hexinyl, Octenyl und Octinyl umfasst.

Der Ausdruck"Cycloalkyl"bedeutet für die Zwecke dieser Erfindung cyclische Kohlenwasserstoffe mit 3-12 Kohlenstoffatomen, die gesättigt oder ungesättigt, unsubstituiert oder substituiert sein können. Der Cycloalkyl-Rest kann auch Teil eines bi-oder polycyclischen Systems sein.

Der Ausdruck"Heterocyclyl"steht für einen 3-, 4-, 5-, 6-, 7-oder 8-gliedrigen cyclischen organischen Rest, der mindestens 1, ggf. 2,3, 4 oder 5 Heteroatome enthält, wobei die Heteroatome gleich oder verschieden sind und der cyclische Rest gesättigt oder ungesättigt, aber nicht aromatisch ist und unsubstituiert oder ein-oder mehrfach substituiert sein kann. Der Heterocyclus kann auch Teil eines bi-oder polycyclischen Systems sein. Bevorzugte Heteroatome sind Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel. Es ist bevorzugt, dass der Heterocyclyl-Rest ausgewählt ist aus der Gruppe, die Tetrahydrofuryl, Tetrahydropyranyl, Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Piperazinyl und Morpholinyl enthält, wobei die Bindung an die Verbindung der allgemeinen Formel 1 über jedes beliebige Ringglied des Heterocyclyl-restes erfolgen kann.

Der Ausdruck"Aryl"bedeutet im Sinne dieser Erfindung aromatische Kohlenwasserstoffe, u. a. Phenyl, Naphthyl und Anthracenyle. Die Reste können auch mit weiteren gesättigten, (partiell) ungesättigten oder aromatischen Ringsystemen kondensiert sein. Jeder Aryl-Rest kann unsubstituiert oder einfach oder mehrfach substituiert vorliegen, wobei die Aryl-Substituenten gleich oder verschieden und in jeder beliebigen und möglichen Position des Aryls sein können.

Der Ausdruck"Heteroaryl"steht für einen 5-, 6-oder 7-gliedrigen cyclischen aromatischen Rest, der mindestens 1, ggf. auch 2,3, 4 oder 5 Heteroatome enthält, wobei die Heteroatome gleich oder verschieden sind und der Heterocyclus unsubstituiert oder ein-oder mehrfach substituiert sein kann ; im Falle der Substitution am Heterocyclus können die Heteroarylsubstituenten gleich oder verschieden sein und in jeder beliebigen und möglichen Position des Heteroaryls

sein. Der Heterocyclus kann auch Teil eines bi-oder polycyclischen Systems sein.

Bevorzugte Heteroatome sind Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel. Es ist bevorzugt, dass der Heteroaryl-Rest ausgewählt ist aus der Gruppe, die Pyrrolyl, Furyl, Thienyl, <BR> <BR> <BR> <BR> Thiazolyl, Triazolyl, Tetrazolyl, Oxazolyl, Isothiazolyl"Isoxazolyl, Pyrazolyl,<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Imidazolyl, Pyridinyl, Pyrimidinyl, Pyrazinyl, Triazinyl, Benzthiazolyl, Indolyl,<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Indolizinyl, Chinolinyl, Isochinolinyl, Cinnolinyl, Chinazolinyl, Chinoxalinyl, Phthalazinyl, Carbazolyl, Phenazinyl, Phenothiazinyl, Purinyl, Acridinyl, Phenanthrinyl, enthält, wobei die Bindung an die Verbindungen der allgemeinen Formel 1 über jedes beliebige und mögliche Ringglied des Heteroaryl-Restes erfolgen kann.

Die Ausdrücke"Alkyl-Cycloalkyl","Alkyl-Heterocyclyl","Alkyl-Ary l"oder"Alkyl- Heteroaryl"bedeuten für die Zwecke der vorliegenden Erfindung, dass Alkyl und Cycloalkyl, Heterocyclyl, Aryl und Heteroaryl die oben definierten Bedeutungen haben und der Cycloalkyl-, Heterocyclyl-, Aryl-bzw. Heteroaryl-Rest über eine C1-8 -Alkyl-Gruppe an die Verbindung der allgemeinen Formel 1 gebunden ist.

Im Zusammenhang mit"Alkyl","Alkenyl"und"Alkinyl"versteht man unter dem Begriff substituiert im Sinne dieser Erfindung die Substitution eines Wasserstoffrestes durch F, Cl, Br, I, CN, NH2, NH-Alkyl, NH-Cycloalkyl, NH-Aryl, NH-Heteroaryl, NH-Alkyl- Aryl, NH-Alkyl-Heteroaryl, NH-Heterocyclyl, NH-Alkyl-OH, N (Alkyl) 2, N (Alkyl-Aryl) 2, N (Alkyl-Heteroaryl) 2, N (Heterocyclyl) 2, N (Alkyl-OH) 2, NO, N02, SH, S-Alkyl, S- Cycloalkyl, S-Aryl, S-Heteroaryl, S-Alkyl-Aryl, S-Alkyl-Heteroaryl, S-Heterocyclyl, S- Alkyl-OH, S-Alkyl-SH, S-Alkyl, S-S-Cycloalkyl, S-S-Aryl, S-S-Heteroaryl, S-S-Alkyl- <BR> <BR> <BR> <BR> Aryl, S-S-Alkyl-Heteroaryl, S-S-Heterocyclyl, SS-Alkyl-OH, S-S-Alkyl-SH, S-S-Alkyl- C (O)-NH-Heterocyclyl, OH, O-Alkyl, O-Cycloalkyl, O-Alkylcycloalkyl, O-Aryl, O- Heteroaryl, O-Alkyl-Aryl, O-Alkyl-Heteroaryl, O-Heterocyclyl, O-Alkylheterocyclyl, O- Alkyl-OH, O-Alkyl-O-Alkyl, O-S02-N (Alkyl) 2, O-S02-OH, O-S02-O-Alkyl, O-SO2-O- <BR> <BR> <BR> <BR> Cycloalkyl, O-S02-O-Heterocycloalkyl, O-S02-O-Alkylcycloalkyl, O-SO2-O-<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> Alkylheterocycloalkyl, O-S02-O-Aryl, O-S02-O-Heteroaryl, O-SO2-O-Alkylaryl, O-<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> S02-O-Alkylheteroaryl, O-S02-Alkyl, O-SO2-Cycloalkyl, O-S02-Heterocycloalkyl, O-<BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> S02-Alkylcycloalkyl, O-SO2-Alkylheterocycloalkyl, O-SO2-Aryl, O-S02-Heteroaryl, O- S02-Alkylaryl, O-S02-Alkylheteroaryl, O-C (O)-Alkyl, O-C (O)-Cycloalkyl, O-C (O)-

Heterocycloalkyl, O-C(O)-Alkylcycloalkyl, O-C(O)-Alkylheterocycloalkyl, O-C(O)-Aryl, O-C (O)-Heteroaryl, O-C (O)-Alkylaryl, O-C (O)-Alkylheteroaryl, O-C (O) O-Alkyl, O- C (O) O-Cycloalkyl, O-C (O) O-Heterocycloalkyl, O-C (O) O-Alkylcycloalkyl, O-C (O) O- <BR> <BR> <BR> <BR> Alkylheterocycloalkyl, O-C (O) O-Aryl, O-C (O) O-Heteroaryl, O-C (O) O-Alkylaryl, O- C (O) O-Alkylheteroaryl, O-C (O) NH-Alkyl, O-C (O) NH-Cycloalkyl, O-C (O) NH- Heterocycloalkyl, O-C (O) NH-Alkylcycloalkyl, O-C (O) NH-Alkylheterocycloalkyl, O- C (O) NH-Aryl, O-C (O) NH-Heteroaryl, O-C (0) NH-Alkylaryl, O-C(O)NH-Alkylheteroaryl, O-C (O) N (Alkyl) 2, O-C (O) N (Cycloalkyl) 2, O-C (O) N (Heterocycloalkyl) 2, O- C (O) N (Alkylcycloalkyl) 2, O-C (O) N (Alkylheterocycloalkyl) 2, O-C (O) N (Aryl) 2, O- C (O) N (Heteroaryl) 2, O-C (O) N (Alkylaryl) 2, O-C (O) N (Alkylheteroaryl) 2, O-P (O) (OH) 2, O-P (O) (0-Metall) 2, O-P (O) (0-Alkyl) 2, O-P (O) (0-Cycloalkyl) 2, O-P (O) (O-Aryl) 2, O- P (O) (0-Heteroaryl) 2, O-P (O) (0-Alkylaryl) 2, O-P (O) (O-Alkylheteroaryl) 2,0-P (O) (N- Alkyl)2(N-Alkyl) 2,0-P (O) (N-Cycloalkyl) 2 (N-Cycloalkyl)2, 0-P (O) (N- Heterocycloalkyl) 2 (N-Heterocyclo-alkyl) 2, O-P (O) (N-Aryl) 2 (N-Aryl) 2, O-P (O) (N- Heteroaryl) 2 (N-Heteroaryl) 2, O-P (O) (N-Alkyl-aryl) 2 (N-Alkylaryl) 2, O-P (O) (N- Alkylheteroaryl) 2 (N-Alkylheteroaryl) 2, CHO, C (0)-Alkyl, C (S)-Alkyl, C (O)-Aryl, C (S)- Aryl, C (0)-Alkyl-Aryl, C (S)-Alkyl-Aryl, C (O)-Heterocyclyl, C (0)-Heteroaryl, C (0)-Alkyl- Heteroaryl, C (S)-Heterocyclyl, CO2H, CO2-Alkyl, CO2-Cyclyl, CO2-Heterocyclyl, CO2- Aryl, CO2-Heteroaryl, CO2-Alkyl-Aryl, C (O)-NH2, C (O) NH-Alkyl, C (O) NH-Aryl, C (O) NH-Heterocyclyl, C (O) NH-Alkyl-Heterocyclyl, C (O) N (Alkyl)2, C (O) N (Alkyl-Aryl) 2, C (O) N (Alkyl-Heteroaryl) 2, C (O) N (Heterocyclyl) 2, SO-Alkyl, SO2-Alkyl, SO2-Aryl, SO2- Alkylaryl, SO2-Heteroaryl, SO2-Alkylheteroaryl, SO2NH2, SO3H, CF3, CHO, CHS, Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Alkylaryl, Heteroaryl, Alkylheterocyclyl und/oder Heterocyclyl, wobei unter mehrfach substituierten Resten solche zu verstehen sind, die entweder an verschiedenen oder an gleichen Atomen mehrfach, z. B. zwei-oder dreifach substituiert sind, beispielsweise dreifach am gleichen C-Atom wie im Falle von CF3,- CH2CF3 oder an verschiedenen Stellen wie im Falle von-CH (OH)-CH=CH-CH2Cl2.

Die Mehrfachsubstitution kann mit dem gleichen oder verschiedenen Substituenten erfolgen.

In Bezug auf Aryl, Heterocyclyl, Heteroaryl, Alkyl-Aryl sowie Cycloalkyl versteht man im Sinne dieser Erfindung unter ein-oder mehrfach substituiert die ein-oder mehrfache z. B. zwei-, drei-oder vierfache Substitution eines oder mehrerer

Wasserstoffatome des Ringsystemes durch F, CI, Br, I, CN, NH2, NH-Alkyl, NH-Aryl, NH-Heteroaryl, NH-Alkyl-Aryl, NH-Alkyl-Heteroaryl, NH-Heterocyclyl, NH-Alkyl-OH, N (Alkyl) 2, NC (O) Alkyl, N (Alkyl-Aryl) 2, N (Alkyl-Heteroaryl) 2, N (Heterocyclyl) 2, N (Alkyl- OH) 2, NO, N02, SH, S-Alkyl, S-Aryl, S-Heteroaryl, S-Alkyl-Aryl, S-Alkyl-Heteroaryl, S- Heterocyclyl, S-Alkyl-OH, S-Alkyl-SH, OH, O-Alkyl, O-Cycloalkyl, O-Alkylcycloalkyl, O-Aryl, O-Heteroaryl, O-Alkyl-Aryl, O-Alkyl-Heteroaryl, O-Heterocyclyl, O- <BR> <BR> <BR> <BR> Alkylheterocyclyl, O-Alkyl-OH, O-Alkyl-O-Alkyl, O-SO2-N (Alkyl) 2, O-S02-OH, O-S02- O-Alkyl, O-SO2-O-cycloalkyl, O-SO2-O-Heterocycloalkyl, O-SO2-O-Alkylcycloalkyl, O-SO2-O-Alkylheterocycloalkyl, O-SO2-O-Aryl, O-SO2-O-Heteroaryl, O-SO2-O- Alkylaryl, O-SO2-O-Alkylheteroaryl, O-SO2-Alkyl, O-SO2-Cycloalkyl, O-SO2- Heterocycloalkyl, O-SO2-Alkylcycloalkyl, O-SO2-Alkylheterocycloalkyl, O-SO2-Aryl, O- S02-Heteroaryl, O-S02-Alkylaryl, O-S02-Alkylheteroaryl, O-C (O)-Alkyl, O-C (O)- Cycloalkyl, O-C(O)-Heterocycloalkyl, O-C(O)-Alkylcycloalkyl, O-C(O) Alkylheterocycloalkyl, O-C (O)-Aryl, O-C (O)-Heteroaryl, O-C (0)-Alkylaryl, O-C (O)- Alkylheteroaryl, O-C (O) O-Alkyl, O-C (O) O-Cycloalkyl, O-C (O) O-Heterocycloalkyl, O- C (O) O-Alkylcycloalkyl, O-C (O) O-Alkylheterocycloalkyl, O-C (O) O-Aryl, O-C (O) O- Heteroaryl, O-C (O) O-Alkylaryl, O-C (O) O-Alkylheteroaryl, O-C (O) NH-Alkyl, O- C (O) NH-Cycloalkyl, O-C (O) NH-Heterocycloalkyl, O-C (O) NH-Alkylcycloalkyl, O- C (0) NH-Alkylheterocycloalkyl, O-C (O) NH-Aryl, O-C (O) NH-Heteroaryl, O-C (O) NH- Alkylaryl, O-C(O)NH-Alkylheteroaryl, O-C(O) N (Alkyl) 2, O-C (O) N (Cycloalkyl) 2, O- C (0) N (Heterocycloalkyl) 2, O-C (O) N (Alkylcycloalkyl) 2, 0- C (O) N (Alkylheterocycloalkyl) 2, O-C (O) N (Aryl) 2, O-C (O) N (Heteroaryl) 2, O- C (O) N (Alkylaryl) 2, O-C (O) N (Alkylheteroaryl) 2, O-P (O) (OH) 2, O-P (O) (0-Metall) 2, O- P (O) (0-Alkyl) 2, O-P (O) (0-Cycloalkyl) 2, O-P (O) (O-Aryl) 2, O-P (O) (O-Heteroaryl) 2, O- P (0) (0-Alkylaryl) 2, O-P (O) (O-Alkylheteroaryl) 2,0-P (O) (N-Alkyl)2(N-Alkyl) 2,0-P (O) (N- Cycloalkyl) 2 (N-cycloalkyl)2, O-P(O)(N-Heterocycloalkyl) 2 (N-Hetero-cycloalkyl) 2, O- P (0) (N-Aryl) 2 (N-Aryl)2, O-P(O)(N-Heteroaryl)2(N-Heteroaryl)2, O-P(O) (N- Alkylaryl) 2 (N-Alkylaryl) 2, O-P (O) (N-Alkylheteroaryl) 2 (N-Alkylheteroaryl) 2, CHO, C (O)- Alkyl, C (S)-Alkyl, C (O)-Aryl, C (S)-Aryl, C (O)-Alkyl-Aryl, C (S)-Alkyl-Aryl, C (O)- Heterocyclyl, C (S)-Heterocyclyl, C02H, C02-Alkyl, C02-Alkyl-aryl, C (O)-NH2, C (0) NH-Alkyl, C (O) NH-Aryl, C (O) NH-Heterocyclyl, C (O) N (Alkyl) 2, C (O) N (Alkyl-Aryl) 2, C (0) N (Alkyl-Heteroaryl) 2, C (O) N (Heterocyclyl) 2, SO-Alkyl, S02-Alkyl, S02-Aryl, S02- Alkylaryl, SO2-Heteroaryl, SO2-Alkylheteroaryl, SO2NH2, SO3H, CF3, CHO, CHS,

Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Alkylaryl, Heteroaryl, Alkylheterocyclyl und/oder Heterocyclyl, an einem oder ggf. verschiedenen Atomen (wobei ein Substituent ggf. seinerseits substituiert sein kann). Die Mehrfachsubstitution erfolgt dabei mit dem gleichen oder mit unterschiedlichen Substituenten.

Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel 1 mindestens ein Asymmetriezentrum aufweisen, können sie in Form ihrer Racemate, in Form der reinen Enantiomeren und/oder Diastereomeren oder in Form von Mischungen dieser Enantiomeren und/oder Diastereomeren vorliegen. Die Mischungen können in jedem beliebigen Mischungsverhältnis der Stereoisomeren vorliegen.

Sofern möglich, können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Form der Tautomeren vorliegen.

So lassen sich beispielsweise die erfindungsgemäßen Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1, welche ein oder mehrere Chiralitätszentren aufweisen und die als Racemate auftreten, nach an sich bekannten Methoden in ihre optischen Isomeren, also Enantiomere oder Diastereomere auftrennen. Die Trennung kann durch Säulentrennung an chiralen Phasen oder durch Umkristallisation aus einem optisch aktiven Lösungsmittel oder unter Verwendung einer optisch aktiven Säure oder Base oder durch Derivatisierung mit einem optisch aktiven Reagenz, wie beispielsweise einem optisch aktiven Alkohol, und anschließender Abspaltung des Restes erfolgen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel 1 können, falls sie eine ausreichend basische Gruppe, wie zum Beispiel ein sekundäres oder tertiäres Amin besitzen, mit anorganischen und organischen Säuren in Salze überführt werden. Vorzugsweise werden die pharmazeutisch annehmbaren Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen gemäß der allgemeinen Struktur 1 mit Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, p- Toluolsulfonsäure, Kohlensäure, Ameisensäure, Essigsäure, Sulfoessigsäure, Trifluoressigsäure, Oxalsäure, Malonsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Traubensäure, Äpfelsäure, Embonsäure, Mandelsäure, Fumarsäure, Milchsäure,

Citronensäure, Taurocholinsäure, Glutaminsäure oder Asparaginsäure gebildet. Bei den gebildeten Salzen handelt es sich u. a. um Hydrochloride, Hydrobromide, Sulfate, Phosphate, Methansulfonate, Tosylat, Carbonate, Hydrogencarbonate, Formiate, Acetate, Sulfoacetate, Triflate, Oxalate, Malonate, Maleate, Succinate, Tartrate, Malate, Embonate, Mandelate, Fumarate, Lactate, Citrate und Glutaminate. Die Stöchiometrie der gebildeten Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen kann dabei ganzzahlige oder nicht ganzzahlige Vielfache von eins betragen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel 1 können, falls sie eine ausreichend saure Gruppe, wie zum Beispiel die Carboxygruppe, Sulfonsäure, Phosphorsäure oder eine phenolische Gruppe enthalten, mit anorganischen und organischen Basen in ihre physiologisch verträglichen Salze überführt werden. Als anorganische Basen kommen beispielsweise Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Calciumhydroxid, als organische Basen Ethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Cyclohexylamin, Dibenzylethylendiamin und Lysin in Betracht. Die Stöchiometrie der gebildeten Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen kann dabei ganzzahlige oder nicht ganzzahlige Vielfache von eins betragen.

Ebenfalls bevorzugt sind Solvate und insbesondere Hydrate der erfindungsgemäßen Verbindungen, die z. B. durch Kristallisation aus einem Lösungsmittel oder aus wässriger Lösung erhalten werden können. Es können sich dabei ein, zwei, drei oder beliebig viele Solvat-oder Wasser-Moleküle mit den erfindungsgemäßen Verbindungen zu Solvaten und Hydraten verbinden.

Es ist bekannt, dass chemische Substanzen Festkörper ausbilden, die in verschiedenen Ordnungszuständen vorliegen, die man als polymorphe Formen oder Modifikationen bezeichnet. Die verschiedenen Modifikationen einer polymorphen Substanz können sich in ihren physikalischen Eigenschaften stark unterscheiden.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel 1 können in verschiedenen polymorphen Formen vorliegen, dabei können bestimmte Modifikationen metastabil sein.

Gemäß einer weiteren Ausführungsform werden die erfindungsgemässen Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1 bereitgestellt, dadurch gekennzeichnet, daß RI, R2, R3, n und m die vorstehend genannten Bedeutungen besitzen und R4 für Phenyl steht, welches unsubstituiert oder mit ein bis fünf gleich oder verschiedenen (C1-C6)-Alkoxygruppen substituiert ist, wobei benachbarte Sauerstoffatome auch durch (C1-C2)-Alkylen-Gruppen verknüpft sein können.

Gemäß einer weiteren Ausführungsform werden Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1 bereitgestellt, dadurch gekennzeichnet, daß R, Ri, R2, R3, n und m die vorstehend genannten Bedeutungen besitzen und R4 für 3,5- Dimethoxyphenyl steht.

Gemäß einer weiteren Ausführungsform werden Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1 bereitgestellt, dadurch gekennzeichnet, daß Ri, R2, R3, n und m die vorstehend genannten Bedeutungen besitzen und R4 für 3-Methoxyphenyl steht.

Am meisten bevorzugt sind Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1, die in der folgenden Auswahl getroffen sind : 4- [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (1) 4- [4- (6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-l-carbonyl]-fluoren-9-on (2) 4- [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (3) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (5-methyl-3-phenyl-isoxazol-4-yl)- methanon (4) Cinnolin-4-yl- [4- (3, 5-dimethyl-phenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (5) Cinnolin-4-yl- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-methanon (6) (3, 5-Bis-methylsulfanyl-isothiazol-4-yl)- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]- methanon (7) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-isochinolin-1-yl-methano n (8) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-fluoren-1-yl)-methanon (9) (9H-Fluoren-9-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (10) (9H-Fluoren-1-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (11)

[4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (12) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (13) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (14) [4-(6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-(2-phenyl-2H-pyra zol-3-yl))-methanon (15) [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (16) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- [1- (4-nitrophenyl)-5-trifluormethyl-1 H- pyrazol-4-yl]-methanon (17) Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen beansprucht, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß ein Carbonsäure-Derivat der allgemeinen Formel 2, worin Ri und R2 die vorstehend genannten Bedeutungen besitzen und Y für eine Abgangsgruppe wie Halogen, Hydroxy, (C1-C6)-Alkoxy vorzugsweise Methoxy und Ethoxy,-O-Tosyl,-O- Mesyl, Tetrazolyl oder Imidazolyl steht, R2 R2, i-- (CHZ\ R1Y HN N-R4 ri R1 : Aryl, Heteroaryl Formel 2 Formel 3 mit einem Amin der allgemeinen Formel 3, worin R4, m und n die vorstehend genannten Bedeutungen besitzen, gegebenenfalls unter Verwendung eines Kondensationsmittels und/oder Katalysators sowie von Verdünnungs-und Hilfsmitteln unter Bildung der gewünschten Produktes gemäss der allgemeinen Formel 1 umgesetzt wird.

Synthese der erfindungsgemäßen Verbindungen Die Verbindungen der allgemeinen Formel 1 sind beispielsweise gemäß dem folgenden Schema 1 erhältlich : Schema 1 Variante 1 : Py-BOP Q -R4 + H-R4 > R1 X NU N-Methyl-R1 morpholin X=OH, CI 1 Variante 2 : 0 (X)-DCC/-\ Hty N-R4 N-R4 R1''OH R1 2 3 1 Die Ausgangsverbindungen 2 und 3 sind entweder im Handel erhältlich oder können nach an sich bekannten Verfahrensweisen hergestellt werden. Die Edukte 2 und 3 stellen wertvolle Zwischenverbindungen für die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel 1 dar.

Die gegebenenfalls zu verwendenden Lösungs-und Hilfsmittel und anzuwendenden Reaktionsparameter wie Reaktionstemperatur und-dauer sind dem Fachmann aufgrund seines Fachwissens bekannt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen gemäß der allgemeinen Formel 1 sind als Wirkstoffe in Arzneimitteln, insbesondere als Antitumormittel, zur Behandlung von Menschen und Säugetieren geeignet. Säugetiere können Haustiere wie Pferde, Kühe, Hunde, Katzen, Hasen, Schafe und dergleichen sein.

Die medizinische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann zum Beispiel auf einer Wechselwirkung mit dem Tubulin-System durch Hemmung der Tubulin- Polymerisation beruhen. Daneben sind noch weitere bekannte und unbekannte Wirkmechanismen zur Bekämpfung der Tumorzellen denkbar.

Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung wird ein Verfahren zur Bekämpfung von Tumoren beim Menschen und in Säugetieren bereit gestellt, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß mindestens eine erfindungsgemässe Verbindung gemäß der allgemeinen Formel 1 dem Menschen oder einem Säugetier in einer für die Tumorbehandlung wirksamen Menge verabreicht wird. Die für die Behandlung zu verabreichende therapeutisch effektive Dosis der jeweiligen erfindungsgemäßen Verbindung richtet sich u. a. nach der Art und dem Stadium der Tumorerkrankung, dem Alter und Geschlecht des Patienten, der Art der Verabreichung und der Dauer der Behandlung. Die erfindungsgemäßen Arzneimittel können als flüssige, halbfeste und feste Arzneiformen verabreicht werden. Dies erfolgt in der jeweils geeigneten Weise in Form von Aerosolen, Pulver, Puder und Streupuder, Tabletten, Dragees, Emulsionen, Schäume, Lösungen, Suspensionen, Gele, Salben, Pasten, Pillen, Pastillen, Kapseln oder Suppositorien.

Die Arzneiformen enthalten neben mindestens einem erfindungsgemäßen Bestandteil je nach eingesetzter galenischer Form gegebenenfalls Hilfsstoffe, wie unter anderem Lösungsmittel, Lösungsbeschleuniger, Lösungsvermittler, Emulgatoren, Netzmittel, Antischaummittel, Gelbildner, Verdickungsmittel, Filmbildner, Bindemittel, Puffer, Salzbildner, Trocknungsmittel, Fließregulierungsmittel, Füllstoffe, Konservierungsstoffe, Antioxidatien, Farbstoffe, Formentrennmittel, Gleitmittel, Sprengmittel, Geschmacks-und Geruchskorrigentien.

Die Auswahl der Hilfsstoffe sowie die einzusetzenden Mengen derselben hängt von der gewählten galenischen Form ab und orientiert sich an die dem Fachmann bekannten Rezepturen.

Die erfindungsgemäßen Arzneimittel können in einer geeigneten Darreichungsform auf die Haut, epicutan als Lösung, Suspension, Emulsion, Schaum, Salbe, Paste oder Pflaster ; über die Mund-und Zungenschleimhaut, buccal, lingual oder

sublingual als Tablette, Pastille, Dragees, Linctus oder Gurgelwasser ; über die Magen-und Darmschleimhaut, enteral als Tablette, Dragees, Kapsel, Lösung, Suspension oder Emulsion ; über die Rectumschleimhaut, rectal als Suppositorium, Rectalkapsel oder Salbe ; über die Nasenschleimhaut, nasal als Tropfen, Salben oder Spray ; über das Bronchial-und Alveolarepithel, pulmonal oder per inhalationem als Aerosol oder Inhalat ; über die Conjunctiva, conjunctival als Augentropfen, Augensalbe, Augentabletten, Lamellae oder Augenwasser ; über die Schleimhäute der Genitalorgane, intravaginal als Vaginalkugeln, Salben und Spülung, intrauterin als Uterus-Pessare ; über die ableitenden Harnwege, intraurethral als Spülung, Salbe oder Arzneistäbchen ; in eine Arterie, intraarteriell als Injektion ; in eine Vene, intravenös als Injektion oder Infusion, paravenös als Injektion oder Infusion ; in die Haut, intracutan als Injektion oder Implantat ; unter die Haut, subcutan als Injektion oder Implantat ; in den Muskel, intramusculär als Injektion oder Implantat ; in die Bauchhöhle, intraperitoneal als Injektion oder Infusion verabreicht werden.

Die erfindungsgemässen Verbindungen der allgemeinen Struktur 1 können in Hinblick auf praktische therapeutische Erfordernisse mittels geeigneter Maßnahmen in ihrer Arzneistoffwirkung verlängert werden. Dieses Ziel kann auf chemischem und/oder galenischem Wege erreicht werden. Beispiele für die Erzielung einer Wirkungsverlängerung sind der Einsatz von Implantaten, Liposomen, Retardformen, Nanopartikelsuspensionen und so genannter Prodrugs der erfindungsgemäßen Verbindungen, die Bildung von schwerlöslichen Salzen und Komplexen oder der Einsatz von Kristall-Suspensionen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Struktur 1 können als Einzelsubstanz oder in Kombination mit weiteren cytotoxischen Substanzen, wie z. B.

Cisplatin, Carboplatin, Doxorubicin, Ifosfamid, Cyclophosphamid, 5-FU, Methotrexat bzw. in Kombination mit Immunomodulatoren oder Antikörpern und insbesondere in Kombination mit Hemmstoffen der Signaltransduktion, wie z. B. Herceptin, Glivec oder Iressa eingesetzt werden.

Besonders bevorzugt sind dabei Arzneimittel, die mindestens eine Verbindung aus der nachfolgenden Gruppe der erfindungsgemässen Verbindungen enthalten :

4- [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (1) 4- [4- (6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (2) 4- [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (3) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (5-methyl-3-phenyl-isoxazol-4-yl)- methanon (4) Cinnolin-4-yl- [4- (3, 5-dimethyl-phenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (5) Cinnolin-4-yl- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-methanon (6) (3, 5-Bis-methylsulfanyl-isothiazol-4-yl)- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]- methanon (7) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-isochinolin-1-yl-methano n (8) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-fluoren-1-yl)-methanon (9) (9H-Fluoren-9-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (10) (9H-Fluoren-1-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (11) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (12) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (13) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (14) [4- in-2-yl)-piperazin-1-yl]-(2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methano n (15) [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (16) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- [1- (4-nitrophenyl)-5-trifluormethyl-1 H- pyrazol-4-yl]-methanon (17) und sowohl als freie Base als auch als Salze physiologisch verträglicher Säuren vorliegen können.

Gemäß dieser allgemeinen Vorschrift, denen das Syntheseschema 1 zugrunde liegt, wurden folgende Verbindungen synthetisiert, die unter der Angabe der jeweiligen chemischen Bezeichnung aus der nachfolgenden Übersicht hervorgehen. Die analytische Charakterisierung der erfindungsgemäßen Verbindungen erfolgte durch ihre Schmelzpunkte bzw.'H-NMR-spektroskopisch und/oder massenspektrometrisch.

Die eingesetzten Chemikalien und Lösungsmittel wurden kommerziell bei den herkömmlichen Anbieter erworben (Acros, Avocado, Aldrich, Fluka, Lancaster, Maybridge, Merck, Sigma, TCI etc. ) oder synthetisiert.

Die Erfindung soll anhand der nachfolgenden Beispiele näher erläutert werden, ohne darauf beschränkt zu sein.

Beispiel 1 (Umsetzung gemäß Schema 1, Variante1) : 4- [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (1) Eine Lösung von 1 g (4.12 mMol) 9-Fluorenon-4-carbonylchlorid in 30 ml Dimethylformamid wurde nacheinander mit 0.67g (6.59 mMol) N-Methylmorpholin, 0.92g (4.12 mMol) 1- (3, 5-Dimethoxyphenyl) piperazin und 2.36 g (4.53 mMol) Py- BOP (1-Benzotriazolyl-tripyrrolidinophosphoniumhexafluorphosphat ) versetzt. Man rührte 12 Stunden bei Raumtemperatur, ließ über Nacht bei Raumtemperatur stehen, destillierte Dimethylformamid i. Vak. ab und reinigte den Rückstand über eine Kieselgelsäule (Kieselgel 60, Fa. Merck AG, Darmstadt) unter Anwendung des Elutionsmittels Dichlormethan/Methanol (95 : 5 Vin).

Ausbeute : 1.4 g (79.3% d. Th.) Fp. : 161°C 1H-NMR (DMSO-d6) â= 7.71-7. 4 (m, 7H), 6.08 (s, 2H), 6.0 (s, 1 H), 3.98-3. 85 (m, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.45-2. 9 (m, 6H) ppm.

Beispiel 2 (Umsetzung gemäß Schema 1, Variante1): [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (12)

Eine Lösung von 3g (13.26 mMol) Xanthen-9-carbonsäure in 90 ml Dimethylformamid wurde nacheinander mit 2.15g (21.2 mMol) N-Methylmorpholin, 2.95g (13.26 mMol) 1- (3, 5-Dimethoxyphenyl) piperazin und 7. 59 g (14.59 mMol) Py- BOP (1-Benzotriazolyl-tripyrrolidinophosphoniumhexafluorphosphat ) versetzt. Man rührte 12 Stunden bei Raumtemperatur, ließ über Nacht bei Raumtemperatur stehen, destillierte Dimethylformamid i. Vak. ab und reinigte den Rückstand über eine Kieselgelsäule (Kieselgel 60, Fa. Merck AG, Darmstadt) unter Anwendung des Elutionsmittels Dichlormethan/Methanol (95 : 5 V/V).

Ausbeute : 2.88 g (50.4% d. Th.) Fp. : 155°C 'H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.28 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 7.15 (d, 2H), 7.07 (t, 2H), 6.12 (s, 2H), 6.03 (s, 1 H), 5.72 (s, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.71 (s, 6H), 3.58 (m, 2H), 3.23-3. 06 (m, 4H) ppm.

Beispiel 3 (Umsetzung gemäß Schema 1, Variante2) : [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl) methanon (14) Eine Lösung von 3.03g (16.1 mMol) 1-Phenyl-1H-pyrazol-5-carbonsäure in 40 ml Dimethylformamid wurde mit 13.56g (25.76 mMol) polymergebundenem N-Benzyl-N- cyclohexylcarbodiimid (1.66 mMol/g) versetzt, auf 60°C erwärmt und 30 Minuten miteinander zur Reaktion gebracht. Hierzu gab man 2.48g (12.88 mMol) von 1- (3- Methoxyphenyl) piperazin und ließ für weitere 4 Stunden reagieren. Danach ließ man Abkühlen, trennte vom Harz ab, destillierte das Dimethylformamid i. Vak. ab und reinigte den Rückstand über eine Kieselgelsäule (Kieselgel 60, Fa. Merck AG, Darmstadt) unter Anwendung des Elutionsmittels Dichlormethan/Methanol (95 : 5 VN).

Ausbeute : 0.75 g (12.6% d. Th.)

'H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.82 (s, 1 H), 7.54-7. 46 (m, 4H), 7.4 (t, 1 H), 7.11 (t, 1 H), 6.73 (d, 1H), 6.46 (m, 1H), 6.41-6. 38 (m, 2H), 3.72 (m, 5H), 3.33 (m, 2H), 3.10 (m, 2H), 2.82 (m, 2H) ppm.

Folgende Verbindungen der allgemeinen Formel 1 wurden analog zum Syntheseweg (Variante 1 oder 2) in Schema 1 synthetisiert : Formel 1 Beispiel 4 : 4- [4- (6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (2) 1H-NMR (DMSO-d6) #= 7. 72 (d, 1H), 7.68 (d, 1 H), 7.62 (t, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.51- 7.40 (m, 4-H), 6.6 (d, 1 H), 6.55 (d, 1 H), 3.95 (m, 1 H), 3.87 (m, 1 H), 3.7 (m, 2H), 3.52- 3.25 (m, 4H), 2.28 (s, 3H) ppm.

Beispiel 5 : 4- [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (3) ESI-MS : 385.1 [M+H] Beispiel 6 : [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (5-methyl-3-phenyl-isoxazol-4- yl)-methanon (4) 1H-NMR (DMSO-d6) â= 7.58 (m, 2H), 7.47 (m, 3H), 5.96 (m, 3H), 3.75-3. 63 (m, 8H), 3.26 (m, 4H), 3.15 (m, 2H), 2.48 (s, 3H) ppm.

Beispiel 7 : Cinnolin-4-yl- [4- (3, 5-dimethyl-phenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (5) Fp. : 114°C 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 9.45 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.96 (m, 2H), 6.58 (s, 2H), 6.48 (s, 1 H), 3.95 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 3.28 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.21 (s, 6H) ppm.

Beispiel 8 : Cinnolin-4-yl- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-methanon (6) H-NMR (DMSO-d6) 8= 9.43 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.05 (m, 1H), 7.95 (m, 2H), 7.45 (t, 1 H), 6.63 (d, 1H), 6.54 (d, 1 H), 3.90 (m, 2H), 3.72 (m, 2H), 3.48-3. 2 (m, 4H), 2.3 (s, 3H) ppm.

Beispiel 9 : (3, 5-Bis-methylsulfanyl-isothiazol-4-yl)- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)- piperazin-1-yl]-methanon (7) 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.45 (t, 1H); 6.65 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 3.8-3. 3 (m, 8H), 2.66 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.32 (s, 3H) ppm.

Beispiel 10 : [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-isochinolin-1-yl-methano n (8) 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 8.54 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.83 (t, 1 H), 7.72 (t, 1 H), 6.08 (s, 2H), 5.99 (s, 1 H), 3.95 (m, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.35 (m, 2H), 3.24 (m, 2H), 3.05 (m, 2H) ppm.

Beispiel 11: [4-(3,5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-(9H-fluoren-1-yl)- methanon (9) Fp.: 148°C 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.98 (d, 2H), 7.94 (d, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.4 (t, 1 H), 7.35 (t, 1 H), 7.28 (d, 1 H), 6.10 (s, 2H), 5.99 (s, 1 H), 3.88 (s, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.67 (s, 6H), 3.41 (m, 2H), 3. 28 (m, 2H), 3.08 (m, 2H) ppm.

Beispiel 12 : (9H-Fluoren-9-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (10) Fp. : 162-163°C H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.86 (d, 2H), 7.37 (d, 2H), 7.32 (t, 2H), 7.22 (t, 2H), 7.03 (t, 1 H), 6.46 (m, 1 H), 6.38 (s, 1 H), 6.30 (d, 1H), 5.32 (s, 1 H), 3. 95-3. 42 (m, 7H), 3.25-3. 0 (m, 4H) ppm.

Beispiel 13 : (9H-Fluoren-1-yl)-[4-(3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-metha non (11) Fp. : 124°C 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.99 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.61 (d, 1H9, 7.48 (t, 1H), 7.42 (t, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.54 (m, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.39 (m, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.41 (m, 2H), 3.27 (m, 2H), 3.08 (m, 2H) ppm.

Beispiel 14 : [4-(3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-(9H-xanthen-9-yl)-meth anon (13) Fp. : 110°C 1H-NMR (DMSO-d6) #= 7.30 (t, 2H), 7.22 (t, 2H), 7.15-7. 05 (m, 5H), 6.56 (d, 1H), 6.48 (d, 1 H), 6.4 (d, 1 H), 5.74 (s, 1 H), 4.05 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.2-3. 06 (m, 4H) ppm.

Beispiel 15 : [4-(6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-(2-phenyl-2H-pyra zol-3-yl))- methanon (15) 1 H-NMR (DMSO-d6) 8= 7.83 (s, 1H), 7.55-7. 37 (m, 6H), 6.74 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 6.53 (d, 1H), 3.68 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 3.18 (m, 2H), 2.32 (s, 3H) ppm.

Beispiel 16 : [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))- methanon (16) 1H-NMR (DMSO-d6) 8= 9.2 (s, 1 H), 7.82 (d, 1 H), 7.53-7. 46 (m, 4H), 7.4 (t, 1 H), 6. 98 (t, 1 H), 6.73 (d, 1 H), 6.33 (m, 1 H), 6.23 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.75 (m, 2H) ppm.

Beispiel 17 : [4-(3,5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-[1-(4-nitrophenyl) -5- trifluormethyl-1 H-pyrazol-4-yl]-methanon (17) H-NMR (DMSO-d6) 8= 8.45 (d, 2H), 8.18 (s, 1H), 7. 88 (d, 2H), 6.1 (s, 2H), 6.0 (s, 1 H), 3.77 (m, 2H), 3.69 (s, 6H), 3.53 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 3.12 (m, 2H) ppm.

Die am meisten bevorzugten Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind Substanzen der allgemeinen Formel 1 in Form ihrer Basen oder ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze, die aus der folgenden Gruppe ausgewählt sind : 4-[4-(3,5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9- on (1) 4- [4- (6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (2) 4- [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-carbonyl]-fluoren-9-on (3) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (5-methyl-3-phenyl-isoxazol-4-yl)- methanon (4)

Cinnolin-4-yl- [4- (3, 5-dimethyl-phenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (5) Cinnolin-4-yl- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-methanon (6) (3, 5-Bis-methylsulfanyl-isothiazol-4-yl)- [4- (6-methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]- methanon (7) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]-isochinolin-1-yl-methano n (8) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-fluoren-1-yl)-methanon (9) (9H-Fluoren-9-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (10) (9H-Fluoren-1-yl)- [4- (3-methoxyphenyl)-piperazin-1-yl]-methanon (11) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (12) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (9H-xanthen-9-yl)-methanon (13) [4- (3-Methoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (14) [4-(6-Methyl-pyridin-2-yl)-piperazin-1-yl]-(2-phenyl-2H-pyra zol-3-yl))-methanon (15) [4- (3-Hydroxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- (2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl))-methanon (16) [4- (3, 5-Dimethoxy-phenyl)-piperazin-1-yl]- [1- (4-nitrophenyl)-5-trifluormethyl-1 H- pyrazol-4-yl]-methanon (17) Biologische Wirkungen der erfindungsgemäßen Verbindungen Die in-vitro Testung an ausgewählten Tumormodellen ergab die nachfolgenden pharmakologischen Aktivitäten.

Beispiel 18 : Antiproliferative Wirkung an verschiedenen Tumorzellinien Die erfindungsgemäßen Substanzen wurden in einem Proliferationstest an etablierten Tumorzellinien auf ihre anti-proliferative Aktivität hin untersucht. Der verwendete Test bestimmt die zelluläre Dehydrogenase-Aktivität und ermöglicht eine Bestimmung der Zellvitalität und indirekt der Zellzahl. Bei den verwendeten Zellinie handelt es sich um die humane Cervixkarzinom Zellinie KB/HeLa (ATCC CCL17), die ovariale Adeno-karzinomzellinie SKOV-3 (ATCC HTB77), die humane Glioblastom Zellinie SF-268 (NCI 503138) und die Lungenkarzinom Zellinie NCI-H460 (NCI 503473). Des weiteren wurde zur Untersuchung der Zellzyklus-spezifischen Wirkung der Substanz ein RKOp27 Zellsystem verwendet (M. Schmidt et al.

Oncogene19 (20) : 2423-9,2000). Bei RKO handelt es sich um eine humane

Kolonkarzinomlinie, in der der Zellzyklusinhibitor p27kiP'mittels des Ecdyson Expressionssystems induziert zur Expression gebracht und zu einem Zellzyklusarrest spezifisch in G2 geführt werden kann. Eine unspezifisch wirkende Substanz hemmt die Proliferation unabhängig davon, ob die RKO Zelle in G1 oder G2 arretiert ist oder nicht. Zellzyklus-spezifische Substanzen wie beispielsweise Tubulininhibitoren sind hingegen nur dann zytotoxisch, wenn Zellen nicht arretiert sind und der Zellzyklus durchlaufen wird. In Tabelle 1 sind die zytotoxischen bzw. wachstumshemmenden Aktivitäten der beschriebenen Verbindung mit/ohne Expression von p27kiP1gezeigt.

Die getesteten Verbindungen zeigten im induzierten Zustand von p27kiP1 keine zytotoxischen Aktivitäten. Die Ergebnisse zeigen eine sehr potente Hemmung der Proliferation ausgewählter Tumorzelilinien durch die erfindungsgemässen Verbindungen. Verbindung XTT Proliferationsassay, EC50 in Wg/ml KB/He SKOV3 SF-268 NCI-RKOP27 RKOP27 la H460 ind. 1 0.555 0.400 0.309 0.312 0.208 >3.16 2 2.592 0.585 0.939 0.886 0.326 >3.16 3 4.322 0.397 0.478 0.853 0.726 >3.16 5 1.212 0.496 0.474 0.348 0.250 >3.16 7 2.710 1.010 n. d. 1.540 1.200 >3.16 8 0.929 0.287 0.775 0. 439 0.291 >3.16 9 0.613 0.341 0.692 0.427 0.217 >3.16 10 0.166 0.082 0.094 0. 085 0. 082 >3.16 12 0080 0029 0075 0064 0058 >3.16 13 0. 628 0. 293 0. 408 0. 29 0. 193 >3.16 14 0. 012 0. 008 0. 009 0. 005 0. 006 >3.16 15 0. 040 0. 018 0. 036 0. 024 0. 022 >3.16 16 0. 147 0. 082 0. 100 0. 087 0. 064 >3.16

n. d. : nicht durchgeführt Tabelle 1 : Proliferationshemmung ausgewählter Verbindungen im XTT Zytotoxizitätstest an humanen Tumorzellinien

Beispiel 19 : Inhibierung der Polymerisation von Tubulin Ausgewählte Substanzen wurden in einem in-vitro Test auf Hemmung der Polymerisation von Rindertubulin getestet. In diesem Test wird durch Zyklen von Polymerisation und Depolymerisation aufgereinigtes Tubulin eingesetzt, welches durch Zugabe von GTP und Erwärmung zur Polymerisation gebracht wird. In Tabelle 2 sind die EC5o Werte der Polymerisationshemmung von Tubulin mit 30% assoziierten Proteinen (MAPs) und von MAP-freiem Tubulin angegeben. Die Ergebnisse zeigen eine gute bis sehr gute Hemmwirkung der erfindungsgemässen Substanzen auf die Polymerisation von Tubulin. Verbindung Hemmung der Tubulin- Polymerisation, EC50 in Rg/ml mit 30% MAPs ohne MAPs 1 0. 86 1. 36 3 4. 77 n. d. 8 5. 66 n. d. 10 1. 18 n. d. 12 1. 16 1. 71 13 0. 73 n. d. 14 0. 46 n. d. 15 0. 88 n. d. 16 4. 20 n. d. n. d. : nicht durchgeführt Tabelle 2 : Hemmung der Tubulin-Polymerisation. Durchschnittswert aus zwei unabhängigen Versuchen.

Beschreibung der verwendeten Methoden XTT-Test auf zelluläre Dehydrogenase-Aktivität Die adherent wachsenden Tumorzellinien KB/HeLa, SKOV-3, SF-268 und NCI-H460 wurden unter Standardbedingungen im Begasungsbrutschrank bei 37°C, 5% C02 und 95% Luftfeuchtigkeit kultiviert. Am Versuchstag 1 werden die Zellen mit Trypsin/ EDTA abgelöst und durch Zentrifugation pelletiert. Nachfolgend wird das Zellpellet in dem jeweiligen Kulturmedium in der entsprechenden Zellzahl resuspendiert und in eine 96-well Mikrotiterplatte umgesetzt. Die Platten werden dann über Nacht im Begasungsbrutschrank kultiviert. Die Testsubstanzen werden als 1 mg/ml Stammlösungen in DMSO angesetzt und am Versuchstag 2 mit Kulturmedium in den entsprechenden Konzentrationen verdünnt. Die Substanzen in Kulturmedium werden dann zu den Zellen gegeben und für 45h im Begasungsbrutschrank inkubiert. Als Kontrolle dienen Zellen, die nicht mit Testsubstanz behandelt werden. Für das XTT- Assay werden 1mg/ml XTT (Natrium 3'- [1- (phenylaminocarbonyl)-3, 4-tetrazolium]- bis (4-methoxy-6-nitro) benzensulfonsäure) in RPMI-1640 Medium ohne Phenolrot gelöst. Zusätzlich wird eine 0,383 mg/ml PMS (N-Methyl Dibenzopyrazine Methylsulfat) Lösung in Phosphat-gepufferter Salzlösung (PBS) hergestellt. Am Versuchstag 4 wird auf die Zellplatten, die inzwischen 45 h mit den Testsubstanzen inkubiert wurden, 75, u1/well XTT-PMS-Mischung pipettiert. Dazu wird kurz vor Gebrauch die XTT-Lösung mit der PMS-Lösung im Verhältnis 50 : 1 (Vol : Vol) gemischt. Anschließend werden die Zellplatten im Begasungsbrutschrank für weitere 3h inkubiert und im Photometer die optische Dichte (OD49onm) bestimmt. Mittels der bestimmten OD49Onm wird die prozentuale Hemmung relativ zur Kontrolle berechnet und in Form einer Konzentrations-Wirkungskurve halblogarithmisch aufgetragen. Die EC, 50 wird mittels einer Regressionsanalyse aus der Konzentrations-Wirkungskurve mit dem Programm Graphpad Prism berechnet.

Zellzyklusanalyse mittels des RKOp27 Modelles Das Assay wird in 96-well Platten durchgeführt. Durch induzierbare Expression von p27kiP1 werden die Zellen vollständig wachstumsarretiert, sterben aber nicht ab.

Durch Vergleich der Wirksamkeit auf induzierte und nicht induzierte Zellen lassen sich Rückschlüsse auf den Wirkmechanismus (Zellzyklus-Spezifität) der Therapeutika ziehen. Nicht induzierte Zellen werden in etwa dreifach höherer Zellzahl ausgesät, da keine Teilung mehr während des Assays im Vergleich zu uninduzierten Zellen erfolgt (20000 Zellen/Well induziert, 6250 Zellen/Well nicht induziert). Die Kontrollen sind unbehandelte Zellen (+/-Induktion). Die Induktion erfolgt mit 3, uM Muristeron A. Am 1. Tag werden die Zellen ausgesetzt (+/- Muristeron A) und für 24h bei 37°C inkubiert. Am Tag 2 wird die Testsubstanz zugegeben (Kontrolle DMSO) und für weitere 45h bei 37°C inkubiert, bevor ein Standard XTT Assay durchgeführt wird.

Tubulin Polymerisations Assay Das Assay wird basierend auf der Methode von Bollag et. al. durchgeführt.

Lyophylisiertes Rindertubulin (Cytoskeleton, ML 113 Tubulin 30% MAPs, TL238 Tubulin MAP frei) wird in einer Konzentration von 2mg/ml (ML113 in 80 mM PIPES, 0.5 mM EGTA, 2 mM MgCI2, pH6. 9,1 mM GTP). bzw 5mg/ml (TL238 in 80 mM PIPES, 1 mM EGTA, 0.5mM MgCt2, 20% (v : v) Glycerol pH6.9, 1 mM GTP) gelöst.

Die Testsubstanzen werden in 10% DMSO (v : v) verdünnt und 5u1 der Verdünnungen auf eine 96-Well Mikrotiterplatte (Nunc, half area plate) transferiert. Nach Zugabe von 45, u1 der Tubulinlösung wird die Polymerisation bei 340nm in einem Spectramax 190 Mikrotiterplattenreader (Molecular devices) mittels Kinetik Programm in 30sec Intervallen über einen Zeitraum von 20min bestimmt. Die resultierenden area under curve Werte werden zur Berechnung der Inhibition in Bezug auf die unbehandelte Kontrolle verwendet und in Form einer Konzentrations-Wirkungskurve halblogarithmisch aufgetragen. Die EC5o wird mittels einer Regressionsanalyse aus der Konzentrations-Wirkungskurve mit dem Programm Graphpad Prism berechnet.

Beispiele für pharmazeutische Darreichungsformen Beispiel I Tablette mit 50 mg Wirkstoff Zusammensetzung : (1) Wirkstoff 50, 0 mg (2) Milchzucker 98,0 mg (3) Maisstärke 50,0 mg (4) Polyvinylpyrrolidon 15, 0 mg (5) Magnesiumstearat 2,0 mg Summe : 215, 0 mg Herstellung : (1), (2) und (3) werden gemischt und mit einer wäßrigen Lösung von (4) granuliert.

Dem getrockneten Granulat wird (5) zugemischt. Aus dieser Mischung werden Tabletten gepreßt.

Beispiel II Kapsel mit 50 mg Wirkstoff Zusammensetzung : (1) Wirkstoff 50, 0 mg (2) Maisstärke getrocknet 58,0 mg (3) Milchzucker pulverisiert 50,0 mg (4) Magnesiumstearat 2,0 mg Summe : 160, 0 mg

Herstellung : (1) wird mit (3) verrieben. Diese Verreibung wird der Mischung aus (2) und (4) unter intensiver Mischung zugegeben. Diese Pulvermischung wird auf einer Kapselabfüllmaschine in Hartgelatine-Steckkapseln Größe 3 abgefüllt.