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Title:
BAICALIN METAL COMPLEX AND PREPARATION METHOD AND APPLICATION THEREOF
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2013/071724
Kind Code:
A1
Abstract:
Disclosed is a baicalin metal complex, having a molecular formula of (C2H17O11)xM(H2O)y, wherein M is Cu(II) or zinc (II), x is 1, and y is 2; or M is Fe(III), x is 2, and y is 0; or M is La(III) or Y(III), x is 3, and y is 0. The preparation method comprises: dissolving baicalin in a sodium bicarbonate solution, the pH value of the solution being controlled to be 6.5 to 7.5, and then adding metal salt (copper salt, zinc salt, ferric salt, lanthanum salt or yttrium salt) for reaction, to obtain the baicalin metal complex. The baicalin metal complex of the present invention has obviously stronger antibacterial and antitumor activities than the baicalin, has been proved to be non-toxic through acute toxicity experiment of mice, can be used for preparing antibacterial agents and antitumor agents, and has good development and application prospects. The preparation method of the baicalin metal complex of the present invention uses no organic solvents, requires no strong bases, is simple and environmentally-friendly and has the advantages of low cost, high product purity and high yield.

Inventors:
LI, Zhubo (89-3-2 Hongshi Village, Tiansheng Road Beibei District, Chongqing 6, 400716, CN)
李逐波 (中国重庆市北碚区天生路红石村89-3-2, Chongqing 6, 400716, CN)
SHI, Jianhua (Room 0716, Building 5 in 1st Courtyard Huihuang International Center,10th Street of Shangdi, Haidian District, Beijing 5, 100085, CN)
石建华 (中国北京市海淀区上地十街辉煌国际中心1号院5号楼0716室, Beijing 5, 100085, CN)
Application Number:
CN2012/072601
Publication Date:
May 23, 2013
Filing Date:
March 20, 2012
Export Citation:
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Assignee:
LI, Zhubo (89-3-2 Hongshi Village, Tiansheng Road Beibei District, Chongqing 6, 400716, CN)
李逐波 (中国重庆市北碚区天生路红石村89-3-2, Chongqing 6, 400716, CN)
SHI, Jianhua (Room 0716, Building 5 in 1st Courtyard Huihuang International Center,10th Street of Shangdi, Haidian District, Beijing 5, 100085, CN)
石建华 (中国北京市海淀区上地十街辉煌国际中心1号院5号楼0716室, Beijing 5, 100085, CN)
International Classes:
C07F1/08; A61K31/7135; A61P31/04; A61P31/10; A61P35/00; C07F3/06; C07F5/00; C07F15/02
Foreign References:
CN1634952A
CN1462754A
CN102336773A
Other References:
LI, SIRUI ET AL.: 'Synthesis and characterization of baicalin-iron (II) complex' JOURNAL OF BEIJING UNIVERSITY OF CHEMICAL TECHNOLOGY vol. 33, no. 2, 2006, pages 97 - 101
Attorney, Agent or Firm:
HAIHONG JIACHENG INTELLECTUAL PROPERTY & PARTNERS (9th Floor, Tower BZhongguancun Intellectual Property Mansion,No.21, South Road Haidian, Haidian, Beijing 0, 100080, CN)
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Claims:
权利要求书

1、 黄芩苷金属配合物, 其特征在于, 式中 M 为 Cu(II) 或 Zn(II), X为 1, y为 2, 其结构式如 I所示; 或者, M为 Fe(III), x 为 2, y为 0, 其结构式如 II所示; 或者, Μ为 La(III)或 Υ(ΠΙ), χ为 3, y为 0, 其结构式如 III或 IV所示:

rv

2、 权利要求 1所述黄芩苷金属配合物的制备方法, 其特征在于, 将黄芩苷用碳 酸氢钠水溶液溶解, 控制溶液 pH为 6.5~7.5, 再加入金属盐进行反应, 所述金属 盐为铜盐、锌盐、 铁盐、 镧盐或钇盐, 固液分离, 所得固体即为黄芩苷金属配合 物。

替换页 (细则第 26条) 3、 根据权利要求 2所述黄芩苷金属配合物的制备方法, 其特征在于, 所述黄芩 苷与碳酸氢钠的摩尔比为 1:1, 黄芩苷与金属盐的摩尔比为 1:1/3~2。

4、 根据权利要求 2或 3所述黄芩苷金属配合物的制备方法, 其特征在于, 所述 金属盐为铜、 锌、 铁、 镧或钇的硫酸盐、 硝酸盐或氯化物。

5、 根据权利要求 2或 3所述黄芩苷金属配合物的制备方法, 其特征在于, 所述 黄芩苷与铜盐、 锌盐或铁盐的反应温度为 20~70°C, 黄芩苷与镧盐或钇盐的反应 温度为 20~35°C。

6、 权利要求 1所述黄芩苷金属配合物在制备抗菌药物或抗肿瘤药物中的应用。

7、 根据权利要求 6所述黄芩苷金属配合物在制备抗菌药物中的应用, 其特征在 于, 所述抗菌药物为抗金黄色葡萄球菌、 枯草杆菌、 大肠杆菌、 沙门氏菌和白色 念珠菌中任一种或多种的药物。

8、 根据权利要求 6所述黄芩苷金属配合物在制备抗肿瘤药物中的应用, 其特征 在于, 所述抗肿瘤药物为抗肺癌或肝癌的药物。

9、 一种抗菌药物, 其特征在于其抗菌活性物质包括权利要求 1所述的黄芩苷金 属配合物。

10、根据权利要求 9所述的抗菌药物, 还包括与所述黄芩苷金属配合物可配伍的 抗生素或抗菌类中药有效成分。

11、 根据权利要求 9或 10所述的抗菌药物, 还包括用于制药上可接受的辅助成 分。

12、 根据权利要求 11所述的抗菌药物, 其剂型为胶囊、 注射剂、 片剂、 颗粒剂、 口服液、 膏剂、 粉剂或悬浮剂。

13、 一种抗肿瘤药物, 其特征在于: 其抗肿瘤活性物质包括权利要求 1所述的黄 芩苷金属配合物。

14、 根据权利要求 13所述的抗菌药物, 还包括与所述黄芩苷金属配合物可配伍 的抗肿瘤西药、 中药、 或中药中提取的有效成分。

15、根据权利要求 13或 14所述的抗菌药物, 还包括用于制药上可接受的辅助成 分。

16、 根据权利要求 15所述的抗菌药物, 其剂型为胶囊、 注射剂、 片剂、 颗粒剂、 口服液、 膏剂、 粉剂或悬浮剂。 17、 黄芩素金属配合物, 是权利要求 1所述的黄岑苷金属配合物溶于 10%的盐 酸溶液中进行水解, 水解产物经柱层析分离纯化得到的产物。

Description:
说明书 黄芩苷金属配合物及其制备方法和应用 技术领域 本发明属于化学制药领域, 涉及一种金属配合物, 还涉及该金属配合物的制 备方法及其医药用途。

背景技术 黄芩苷是中药黄芩的主要有效成分, 有抑菌抗炎、 降压利尿、 清除自由基、 抑制脂肪酶等药理作用。近年来研究表明,某 些微量金属本身有一定的生理活性, 而黄芩苷分子中的氧原子具有强配位能力,其 空间结构也有利于金属配合物的形 成, 因此, 将黄芩苷转化为金属配合物有可能增强其疗效 , 甚至产生新的药理作 用。 目前, 已有文献报道某些黄芩苷金属配合物具有清除 自由基、增强免疫功能、 抗菌、 抗病毒、 抑制脂加氧酶、 抗炎抗变态反应等作用, 且作用强于黄芩苷。 因 此, 加强对黄芩苷金属配合物的研究, 将有助于黄芩苷的开发利用及寻找新药, 也为传统中药的应用寻找新的方向。

贾朝霞等将黄芩苷溶于 50%甲醇溶液中, 在 pH=7.4条件下与 CuCl 2 反应, 制 得了络合比为 2:1的黄芩苷铜配合物。 张素俊等将黄芩苷溶于无水乙醇溶液中, 在碳酸钠碱性条件下分别与 Cu(Ac) 2 、 Ni(Ac) 2 、 0)(八 £ ;) 2 反应, 制得了络合比为 1 :2 的黄芩苷铜、 黄芩苷镍、 黄芩苷钴配合物。 吴巍等将黄芩苷与 A1(N0 3 ) 3 分别用甲 醇溶解后, 反应制得了络合比分别为 2:1、 1 :1的黄芩苷铝配合物。 李思睿等将黄 芩苷溶于 60%乙醇溶液中, 再加入抗坏血酸和 pH=9条件下与 FeS0 4 反应, 制得了 络合比为 2:1的黄芩苷亚铁配合物。邓毅等将黄芩苷溶于 60%乙醇溶液中,在 pH=9 条件下与 CrCl 3 反应,制得了络合比为 2:1的黄芩苷铬配合物。王学军等将黄芩苷、 Y(N0 3 ) 3 或 Ce(N0 3 ) 3 分别用吡啶溶解后, 反应制得了络合比为 1 :1的黄芩苷钇、 黄 芩苷铈配合物。 冯今明等在黄芩苷中加入 Zn(Ac) 2 的甲醇溶液反应, 制得了黄芩 苷锌。 中国专利申请 200410079576.8采用乙醇溶解黄芩苷, 加入 Zn(Ac)^ 溶液, 在 pH=7〜8条件下反应, 制得了络合比为 2:3的黄芩苷锌配合物。 但上述黄芩苷金 属配合物的制备方法均存在 ·定的缺陷, 例如, 反应溶剂均采用甲醇、 乙醇、 吡 啶等有机溶剂, 存在毒性较大, 安全性较差、 环境污染较大等问题; 而且, 由于 黄苓苷不溶于水, 微溶于甲醇和乙醇, 故上述反应均为小量反应, 大规模生产成 本高。 此外, 部分方法还将黄芩苷与金属盐在强碱性条件如 pH=9条件下反应, 一方面, 黄芩苷在强碱性条件下结构易被破坏; 另一方面, 金属盐在强碱性条件 下易生成氢氧化物沉淀, 而难以与生成的黄芩苷金属配合物沉淀分离。

发明内容 有鉴于此,本发明的目的之一在于合成新的黄 芩苷金属配合物, 以期筛选出 活性较黄芩苷明显增强的化合物进行新药幵发 。

为达到上述目的, 本发明提供如下黄芩苷金属配合物, 分子通式为 (C 21 H 17 0„)xM (H 2 0) y , 当 M为 Cu(II)或 Zn(II)、 x为 1、 y为 2时, 其代表络合 比为 1 :1的黄芩苷铜配合物, 分子式为 C^HnOuQ^i^C^, 其代表络合比为 1 :1 的黄芩苷锌配合物, 分子式为 C 21 H 17 O n Zn(H 2 0) 2 , 结构式如 I所示; 当 M为 Fe(IIl), X为 2、 y为 0时, 其代表络合比为 2:1 的黄芩苷铁配合物, 分子式为 (C^HnOuhFe, 结构式如 II所示; 当 M为 La(III)、 x为 3、 y为 0时, 其代表络 合比为 3:1的黄苓苷镧配合物, 分子式为 (C 21 H l7 O u ) 3 L a , 结构式如 ΙΠ所示; 当 M为 Υ(ΙΠ)、 X为 3、 y为 0时, 其代表络合比为 3:1的黄芩苷钇配合物, 分子式 为 (C 21 H 17 0 M ) 3 Y, 结构式如 IV所示。

替换页 (细则第 26条)

本发明的目的之二在于提供上述黄芩苷金属 配合物的制备方法,不使用有机 溶剂, 不采用强碱性条件, 简便易行, 绿色环保, 低成本, 高产率。

为达到此目的,本发明的黄芩苷金属配合物的 制备方法,是将黄芩苷用碳酸 氢钠水溶液溶解, 控制溶液 pH为 6.5~7.5, 再加入金属盐进行反应, 所述金属盐 为铜盐、锌盐、铁盐、镧盐或钇盐, 固液分离,所得固体即为黄芩苷金属配合物。

优选的, 所述黄芩苷与碳酸氢钠的摩尔比为 1 : 1, 黄芩苷与金属盐的摩尔比 为 1 :1/3~2。

优选的, 所述金属盐为铜、 锌、 铁、 镧或钇的硫酸盐、 硝酸盐或氯化物。 优选的, 所述黄芩苷与铜盐、 锌盐或铁盐的反应温度为 20~70°C, 黄芩苷与 镧盐或钇盐的反应温度为 20~35°C。

本发明的目的之: Ξ在于提供上述黄芩苷金属配合物的医药用途 以期为临床 疾病的治疗提供更多、 更好的药物。

为达到上述目的,本发明提供上述黄芩苷金属 配合物的两个医药用途:一是 在制备抗菌药物中的应用, 例如, 抗金黄色葡萄球菌、 枯草杆菌、 大肠杆菌、 沙 门氏菌和白色念珠菌中任一种或多种的药物; 二是在制备抗肿瘤药物中的应用, 例如, 抗肺癌或肝癌的药物。

具体地:

一种抗菌药物, 其特征在于其抗菌活性物质包括上述的黄芩苷 金属配合物。

替换页 (细则第 26条) 所述抗菌药物还包括与所述黄芩苷金属配合物 可配伍的抗生素、抗菌类中药 或抗菌类中药的有效成分。

所述的抗菌药物, 还包括用于制药上可接受的辅助成分。

所述的抗菌药物, 其剂型为胶囊、 注射剂、 片剂、 颗粒剂、 口服液、 膏剂、 粉剂或悬浮剂。

一种抗肿瘤药物,其特征在于: 其抗肿瘤活性物质包括上述的黄芩苷金属配 合物。

所述抗肿瘤药物,还包括与所述黄芩苷金属配 合物可配伍的抗肿瘤西药、 中 药、 或中药中提取的有效成分。

所述抗肿瘤药物, 还包括用于制药上可接受的辅助成分。

所述抗肿瘤药物, 其剂型为胶囊、 注射剂、 片剂、 颗粒剂、 口服液、 膏剂、 粉剂或悬浮剂。

本发明的有益效果在于: 本发明利用黄芩苷可溶于碱性溶液的特性, 将其用 碳酸氢钠水溶液溶解, 再在近中性条件下与金属盐反应制备黄芩苷金 属配合物, ①不使用有机溶剂, 无毒性, 操作人员和环境安全性好, 环境污染小, 生产成本 低; ②不采用强碱性条件, 避免了黄芩苷遭强碱破坏的可能性, 也避免了产生金 属氢氧化物的可能性, 产品纯度高, 产率 (〉70%, 最高达到 97.75%) 远高于 目前文献报道的黄芩苷金属配合物的产率(20 60%)。本发明的黄芩苷金属配合 物目前尚未见文献报道, 其抗菌、抗肿瘤活性均明显强于黄芩苷, 尤其是络合比 为 1 :1的黄芩苷铜配合物,其抗菌、抗肿瘤活性较 芩苷有大幅度提高,在抗菌、 抗肿瘤药物领域具有良好的开发应用前景。

具体实施方式 为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清 楚, 下面将对本发明的优选实 施例进行详细的描述。

实施例 1、 黄芩苷金属配合物的制备

( 1 ) 黄芩苷铜配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 Cu(N0 3 ) 2 的摩尔比为 1:2加入 Cu(N0 3 ) 2 , 温度 50°C搅拌反应 4小时, 过滤, 所得棕黄色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷铜配 合物, 产率 73.93%。

(2) 黄芩苷锌配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 Zn(N0 3 ) 2 的摩尔比为 1:2加入 Zn (N0 3 ) 2 , 温 度 50°C搅拌反应 4小时, 过滤, 所得粉红色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷 锌配合物, 产率 75.82%。

(3) 黄芩苷铝配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 A1 2 (S0 4 ) 3 的摩尔比为 2:1加入 A1 2 (S0 4 ) 3 , 温度 30°C搅拌反应 6小时, 过滤, 所得橙红色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷铝配 合物, 产率 91.08%。

(4) 黄芩苷铁配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 FeCl 3 的摩尔比为 2:1加入 FeCl 3 , 温度 40°C搅 拌反应 2小时, 过滤, 所得黑色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷铁配合物, 产 率 97.75%

(5) 黄芩苷镧配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 La(N0 3 ) 3 的摩尔比为 2:1加入 La(N0 3 ) 3 , 温度 20°C搅拌反应 3小时, 过滤, 所得棕黑色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷镧配 合物, 产率 91.42%。

(6) 黄芩苷钇配合物的制备

将黄芩苷溶于质量百分浓度为 1%的碳酸氢钠水溶液中, 黄芩苷与碳酸氢钠 的摩尔比为 1:1, 再按照黄芩苷与 Y 2 (S0 4 ) 3 的摩尔比为 2:1加入 Y 2 (S0 4 ) 3 , 温度 35°C搅拌反应 2小时, 过滤, 所得棕红色沉淀用水洗涤, 烘干, 即得黄芩苷钇配 合物, 产率 94.27%。

发明人通过大量研究发现: ①关于黄芩苷与碳酸氢钠的投料比, 因黄芩苷分 子中含有一个羧基, 当其与碳酸氢钠的摩尔比为 1 : 1时, 二者刚好完全反应, 溶 液 pH为 6.98, 在 6.5〜7.5范围内, 不需再进行 pH调节, 因此, 该比例为优化比 例。 当然, 黄芩苷与碳酸氢钠的摩尔比也可以是除 1 : 1以外的其它比例。 ②关于 黄芩苷与金属盐的投料比,由于金属种类固定 时不同配比的黄芩苷与金属盐反应 生成的配合物结构是相同的, 因此, 黄芩苷与金属盐的投料比并不局限于上述实 施例中给出的配比, 只是综合考虑产率和成本, 本发明优选黄芩苷与金属盐的摩 尔比为 1 : 1/3~2。 ③关于黄芩苷与金属盐的反应温度, 黄芩苷与铜盐、 锌盐、 铝 盐或铁盐在 20〜70°C反应均可以生成本发明所述的黄芩苷 、 黄芩苷锌、 黄芩苷 铝或黄芩苷铁配合物,而黄芩苷与镧盐或钇盐 的反应则以 20〜35 °C为宜,超过 35 °C可能无法得到目标产物。 ④参照上述实施例, 采用铜、 锌、 铝、 铁、 镧和钇以 外的其它金属的盐与黄芩苷反应, 也可以制备出其它黄芩苷金属配合物。 因此, 本发明的制备方法实际具有普遍适用性。 实施例 2、 黄芩苷金属配合物的结构表征

( 1 ) 紫外表征结果

将实施例 1 制得的六种黄芩苷金属配合物分别溶于质量百 分浓度为 的 NaOH水溶液中, 用紫外分光光度计测定最大吸收波长, 结果见表 1。

表 1 黄芩苷及其金属配合物的紫外吸收波长

由表 1可知, 黄芩苷分别在 275nm、 317nm处有两个吸收峰, 而黄芩苷铜、 黄芩苷锌、黄芩苷铝、黄芩苷铁、黄芩苷镧和 黄芩苷钇配合物仅在 289nm或 277nm 有一个吸收峰, 即黄芩苷原 317nm处的吸收峰消失, 原 277nm处的吸收峰发生 了红移。 由于黄芩苷形成配合物后, 分子中电子的离域程度增大且金属离子有一 定的吸电子能力, 使电子跃迁所需的激发能减小, 可导致吸收峰红移。 因此, 上 述结果说明黄芩苷和金属离子之间发生了反应 。

(2) 红外表征结果

实施例 1制得的六种黄芩苷金属配合物的红外表征结 见表 2。

表 2 黄芩苷及其金属配合物主要基团的红外光谱数 据

由表 2可知,黄芩苷 4位 C=0的伸縮振动吸收峰为 1661.05cm- 1 ,与其相比, 黄芩苷铜、黄芩苷锌、黄芩苷铝、黄芩苷铁、 黄芩苷镧和黄芩苷钇配合物的 C=0 吸收峰分别红移了约 37cm- 38cm- 36cm- 36cm- 53cm- 1 和 53cm- 由于 氧的孤对电子与金属离子的空轨道形成配位键 后会导致 C=0 的电子云密度降 低, 进而使吸收峰发生红移。 因此, 上述结果说明黄芩苷与金属离子的结合部位 之一为 4位 C=0。

黄芩苷 5位 0-H的伸縮振动吸收峰为 3398.45cm- 1 , 与其相比, 黄芩苷铜、 黄芩苷锌、黄芩苷铝和黄芩苷铁配合物的 5位 0-H吸收峰分别蓝移了约 30cm- 12cm- 14cm- 1 和 13cm- 1 ,黄芩苷镧和黄芩苷钇配合物的 5位 0-H吸收峰分别红 移了约 42cm- 1 和 36cm- 1 , 说明黄芩苷的 5位 0-H也与金属离子发生了作用。

黄芩苷 5位 C-0伸縮振动吸收峰为 1201.25cm- 与其相比, 黄芩苷铜、 黄 芩苷锌、 黄芩苷铝、 黄芩苷铁、 黄芩苷镧和黄芩苷钇配合物的 C-0 吸收峰分别 红移了约 10cm— 12cm" 1 13cm" 1 13cm" 1 9cm— 1 禾卩 13cm" 1 由于金属离子对 C-0 中氧的电子离域作用可导致该吸收峰红移, 因此, 上述结果说明 5位 C-0 中的氧与金属离子之间发生了作用。

综上, 黄芩苷的 4位 C=0和 5位 0-H与金属离子发生了配位。

(3 ) 金属含量测定结果

采用 EDTA滴定法分别测定实施例 1制得的五种黄芩苷金属配合物的金属 离子含量, 结果见表 3。 表 3 黄芩苷金属配合物中金属离子的含量

(4) 质谱表征结果

实施例 1制得的黄芩苷金属配合物的质谱表征结果见 4。 表 4 黄芩苷及其金属配合物的分子离子峰

由表 4可知, 黄芩苷铜配合物的分子离子峰为 543.6, 碎片峰 506.5为分子 离子断裂失去两分子水 (18DaX 2)所得,碎片峰 366.5为分子离子断裂失去一分子 葡萄糖醛酸 (176Da)所得, 因此, 推定黄芩苷铜配合物由黄芩苷 +Cu+2H 2 0组成。 另根据红外结果知其在 4位 C=0和 5位 0-H配位, 因此, 推定黄芩苷铜配合物 的结构如 I所示,黄芩苷与 Cu的络合比为 1 :1,与文献报道的络合比为 2:1或 1 :2 的黄芩苷铜配合物结构不同, 为新化合物。

黄芩苷铝配合物的分子离子峰为 918.3, 碎片峰 740.5为分子离子断裂失去 一分子葡萄糖醛酸 (176Da)所得,碎片峰 366.5为分子离子断裂失去两分子葡萄糖 醛酸 (176DaX 2)所得, 因此, 推定黄芩苷铝配合物由黄芩苷 X 2+A1 组成。 另根 据红外结果知其在 4位 C=0和 5位 0-H配位, 因此, 推定黄芩苷铝配合物的结 构如 V所示,黄芩苷与 A1的络合比为 2:1, 与文献报道的络合比为 2:1的黄芩苷 铝配合物结构相同。

黄芩苷铁配合物的分子离子峰为 944.8, 碎片峰 769.2为分子离子断裂失去 一分子葡萄糖醛酸 (176Da)所得,碎片峰 675.4为分子离子断裂失去一分子黄芩苷 元 (270Da)所得, 碎片峰 498.6为分子离子断裂失去一分子黄芩苷 (446Da)所得, 因此, 推定黄芩苷铁配合物由黄芩苷 X 2+Fe(III)组成。 另根据红外结果知其在 4 位 C=0和 5位 0-H配位, 因此, 推定黄芩苷铁配合物的结构如 II所示, 黄芩苷 与 Fe(m)的络合比为 2:1。 目前仅见文献报道了一种络合比为 2:1 的黄芩苷亚铁 配合物, 还未见文献报道黄芩苷铁配合物, 因此, 该化合物为新化合物。

黄芩苷镧配合物的分子离子峰为 1473.8, 碎片峰 1297.2为分子离子断裂失 去一分子葡萄糖醛酸 (176Da)所得,碎片峰 445.7为分子离子断裂后所得黄芩苷的 峰, 因此, 推定黄芩苷镧配合物由黄芩苷 X 3+La组成。 另根据红外结果知其在 4位 C=0和 5位 0-H配位, 因此, 推定黄芩苷镧配合物的结构如 III所示, 黄苓 苷与 La的络合比为 3:1。 目前尚未见文献报道黄芩苷镧配合物, 因此, 该化合物 为新化合物。

黄芩苷钇配合物的分子离子峰为 1422.9, 碎片峰 1247.9为分子离子断裂失 去一分子葡萄糖醛酸 (176Da)所得,碎片峰 893.6为分子离子断裂失去三分子葡萄 糖醛酸 (176DaX 3)所得, 因此, 推定黄苓苷钇配合物由黄苓苷 X 3+Y组成。 另根 据红外结果知其在 4位 C=0和 5位 0-H配位, 因此, 推定黄芩苷钇配合物的结 构如 IV所示,黄芩苷与 Y的络合比为 3:1,与文献报道的络合比为 1 :1的黄芩苷 钇配合物结构不同, 为新化合物。

替换页 (细则第 26条)

V 实施例 3、 黄芩苷金属配合物的急性毒性

将实施例 1制得的六种黄芩苷金属配合物用质量百分浓 为 1%的 NaOH水 溶液溶解制成质量百分浓度为 10%的溶液,按最大耐受剂量法每只小鼠灌胃给 予 5g/kg, 连续观察两周, 记录小鼠活动及死亡情况。

结果显示, 灌胃给药后, 所有小鼠活动稍有减弱, 但短时间内得到恢复; 两 周内所有小鼠均生长良好, 未观察到有中毒反应, 无小鼠死亡; 说明实施例 1 制得的五种黄芩苷金属配合物对小鼠灌胃的 LD 5G 均大于 5g/kg。 根据急性毒性 (LD 50 ) 剂量分级, 上述五种配合物经口给药属实际无毒范围。 实施例 4、 黄芩苷金属配合物的药理活性 本试验中, 所用菌株金黄色葡萄球菌, 枯草杆菌, 大肠杆菌, 沙门氏菌, 白 色念珠菌, 购于中国兽医药品监察所。

( 1 ) 抑菌活性

将黄芩苷和实施例 1 制得的六种黄芩苷金属配合物分别用质量百分 浓度为 1%的 NaOH水溶液溶解,采用 96孔板法倍比稀释成 5个浓度: 0.125、 0.25、 0.5、 1、2 mg/mL,每个浓度设 5个复孔,每孔中加入等量菌液(菌液浓度为 2>< 10 5 /mL), 置培养箱中 37°C培养 24小时(真菌于 30°C培养 48小时), 测得每种化合物对不 同细菌的最小抑菌浓度 (MIC)。 结果见表 5。

表 5 黄芩苷及其金属配合物的抑菌活性

由表 5可知, 实施例 1制得的六种黄芩苷金属配合物对革兰氏阳性 (金黄色葡 萄球菌、 枯草杆菌)、 革兰氏阴性菌 (大肠杆菌、 沙门氏菌) 和真菌 (白色念珠 菌)的抑菌活性较黄芩苷均显著增强,其中, 以黄芩苷铜配合物的抗菌活性最好。 中国专利申请 CN1462619A公开了络合比为 1 : 1的黄芩苷锌配合物对金黄色葡萄 球菌和大肠杆菌的 MIC分别为 0.63、 5.0 mg/mL; CN1634952A公开了络合比为 2:3 的黄芩苷锌配合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆 菌的 MIC 分别为 1、 〉1 mg/mL。本发明的黄芩苷铜配合物对金黄色葡萄 菌的抑制活性明显强于上述文 献报道的黄芩苷锌化合物, 而本发明的黄芩苷铜、 黄芩苷铝、 黄芩苷铁、 黄芩苷 镧和黄芩苷钇配合物对大肠杆菌的抑制效果均 明显强于上述文献报道的黄芩苷 锌化合物。

(2) 抗肿瘤活性

分别取对数生长期的肺癌 A549细胞和肝癌 HepG2细胞, 用含体积百分浓 度为 10%的胎牛血清的 RPMI-1640培养基稀释至菌液浓度为 l x l0 4 /mL, 接种于 96孔板, 每孔 ΙΟΟμΙ^, 置培养箱中于温度为 37°C、 C0 2 体积分数为 5%的条件下 培养 24小时, 弃去培养基, 加入新鲜培养基 ΙΟΟμΙ^, 再加入不同浓度 (20、 40、 80、 160、 320μΜ) 的黄芩苷或其金属配合物溶液, 每孔 100μΙ^, 每个浓度设 5 个复孔, 并设溶剂对照组, 继续于相同条件下培养 48 小时, 再每孔加入 ΜΤΤ 培养 4小时, 弃去上清液, 加入 DMSO振荡, 用酶标仪于 490nm处测定吸光度, 取 5 个复孔的平均值, 计算每种化合物对不同肿瘤细胞的半数有效抑 制浓度 (IC 5Q )。 结果见表 6。

表 6 黄芩苷及其金属配合物的抗肿瘤活性

由表 6可知, 实施例 1制得的六种黄芩苷金属配合物对肺癌 A549细胞和肝 癌 HepG2细胞的抑制活性较黄芩苷均显著增强, 其中黄芩苷铜配合物的抑制活 性最好。 目前尚无文献报道黄芩苷金属配合物的抗肿瘤 作用。

基于以上实验结果,实施例 1制得的六种黄芩苷金属配合物可用于制备抗 药物和抗肿瘤药物。 实施例 5黄岑素金属配合物的制备及用途

分别以实施例 1制备得到的黄岑苷金属配合物为起始原料, 如下工艺制备 得到黄岑素金属配合物:

即黄岑苷金属配合物溶于 10%盐酸中, 发生水解反应, 采用柱层析法分离 纯化水解产物得到主产物。

10%盐酸

柱层析

黄苓苷

水解 分离 经实施例 3、 4的功能实验验证, 在急性毒性及药理实验中与实施例 1制备 得到黄岑苷金属配合物没有区别。

最后说明的是, 以上实施例仅用于说明本发明的技术方案, 并不构成对本发 明内容的限制。尽管通过上述实施例已经对本 发明做了较为详细的例举, 但本领 域技术人员仍然可以根据发明内容部分和实施 例部分所描述的技术内容,在形式 上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏 离所附权利要求书所限定的本发明 的精神和范围。