Die Kryospeicherung biologischer Proben besitzt zahlreiche An- wendungen, die auf eine andauernde Lagerung der Proben unter Er- haltung von deren Vitalitätszustand gerichtet sind. Die hierzu verwendeten Vorrichtungen sind an die jeweiligen Proben und die Anforderungen bei der Probenhandhabung angepasst. Bei tiefen Temperaturen können beispielsweise in der Transplantationsmedi- zin Organe oder in der Transfusionsmedizin Blutspenden gelagert werden. Bei diesen herkömmlichen Anwendungen der Kryospeicherung geht es in der Regel darum, möglichst große Probenvolumen auf möglichst engem Raum anzuordnen. Beispielsweise werden Blutspen- den in Blutbeuteln aufbewahrt, die sich in einer Blutbank dicht packen lassen. Die Blutbeutel sind mit einer Markierung (z. B.

Strichcode) versehen, um eine gezielte und fehlerfreie Entnahme aus der Blutbank zu ermöglichen. Diese Techniken sind auf die Anwendung mit relativ großen Proben (ml-bis 1-Bereich) be- schränkt.

In der Zellbiologie und zunehmend in der molekularen Biotechno- logie besteht jedoch die Aufgabe, kleinste biologische Proben (Einzelzellen, Zellgruppen oder Zellbestandteile) im tiefgefro- renen Zustand zu speichern und ggf. zu bearbeiten. Beispielswei- se in EP 804 073 wird die Kryobearbeitung von einzelnen Zellen beschrieben. Zellen werden tiefgekühlt auf einem Substrat fi- xiert, gelagert und ggf. bearbeitet. Diese Technik besitzt den Nachteil, dass die Lagerung der auf Substraten fixierten Zellen relativ platzaufwendig sein kann, so dass der Aufbau einer Kryo- Zellbank erschwert ist. Des Weiteren müssen zur Vermeidung von Kontaminationen die Proben mit einer Schutzschicht versehen wer- den, was die Handhabung der Proben erschwert.

In DE 199 21 236 ist beschrieben, tropfenförmige Suspensionspro- ben zur Kryokonservierung auf strukturierten Substraten abzule- gen, mit denen die Handhabbarkeit der gefrorenen Proben erleich- tert wird. Die strukturierten Substrate können jedoch Nachteile in Bezug auf die Probenbeschickung und die Probenentnahme besit- zen. Zur Probenbeschickung müssen alle Probenaufnahmen mit einer Dispensiervorrichtung befüllt werden, deren Betrieb sehr aufwen- dig sein kann. Zur Probenentnahme muss der in einer Probenauf- nahme gespeicherte Tropfen vollständig aufgetaut werden, auch wenn nur ein Teil des Tropfens benötigt wird.

Alternativ zur Probenablage auf Substraten ist die Verwendung von Kryo-Probenkammern (z. B. in Form von Kapillaren oder dünn- wandigen Rohren) bekannt. Die Probenkammern bilden ein zumindest teilweise abgeschlossenes Behältnis und bieten daher einen ver- besserten Schutz für die Proben. Ein genereller Nachteil der Kryo-Probenkammern ist jedoch, dass ein zwischenzeitliches, ggf. unbeabsichtigtes Auftauen der Probe in der Kryokammer nicht festgestellt werden kann. Die miniaturisierten Probenkammern oder die in ihnen befindlichen Proben zeigen beim Auftauen keine wesentliche Formänderung, wie dies bspw. bei einem Blutbeutel in einer Blutbank. der Fall wäre. Die Qualität der Kryokonservierung in Probenkammern kann daher in der Regel nur mit aufwendigen technischen Hilfsmitteln überwacht werden.

Aus WO 02/46719 ist eine Kryospeichervorrichtung mit mindestens einer schlauch-oder kissenförmigen Probenkammer bekannt, die an einem Datenspeicher befestigt ist. Die Befestigung kann insbe- sondere mit einem Halterahmen auf einer Verkapselung des Daten- speichers erfolgen. Eine schematische, vergrößerte Seitenansicht eines herkömmlich verwendeten Halterahmens (z. B. gemäß WO 02/46719) ist in Figur 14 gezeigt. Der Halterahmen 20'bildet einen Träger 10'für schlauchförmige Probenkammern 11'mit kreisrundem Querschnitt, die in Aufnahmeelementen 21'gehaltert werden. Die Aufnahmeelemente 21'sind als Durchgangslöcher mit ebenfalls kreisförmigem Querschnitt im Halterahmen 20'gebildet.

Mit diesem Aufbau können die Probenkammern 11'zwar leicht in die Halterahmen 20'eingefädelt werden. Nachteilig ist jedoch die geringe Stabilität der Halterung. Die Probenkammern können im Halterahmen rutschen oder durchhängen. Zur Fixierung müssen gesonderte Vorkehrungen getroffen werden. Des weiteren ist es erforderlich, die Probenkammern an ihren freien Enden zu ver- schließen. Kapillarförmige Probenkammern für die Kryospeicherung werden auch in WO 99/20104 beschrieben. Die Probenkammern sind auf einen Kühlkörper aufgelegt, wobei sich die gleichen Nachtei- le wie bei der Technik gemäß WO 02/46719 ergeben.

Die Aufgabe der Erfindung ist es, eine verbesserte Kryospeicher- vorrichtung bereitzustellen, mit der die Nachteile herkömmlicher Kryospeichervorrichtungen überwunden werden und die insbesondere eine stabile und zuverlässige Halterung von Probenkammern (z. B. für eine Vielzahl suspendierter Zellen, Zellgruppen oder Zellbe- standteile) und eine selektive, teilweise Entnahme von Probenbe- standteilen ermöglichen soll. Die Aufgabe der Erfindung ist es auch, ein verbessertes Verfahren zur Kryospeicherung anzugeben.

Diese Aufgaben werden durch Vorrichtungen und Verfahren mit den Merkmalen gemäß den Patentansprüchen 1, 13 oder 15 gelöst. Vor- teilhafte Ausführungsformen und Anwendungen der Erfindung erge- ben sich aus den abhängigen Ansprüchen.

Eine Grundidee der Erfindung ist es, einen Träger für mindestens eine Probenkammer in Form eines Halterahmens bereitzustellen, der mindestens zwei, sich im zusammengesetzten Zustand seitlich berührende Rahmenteile aufweist, zwischen denen eine eingesetzte Probenkammer relativ zum Halterahmen unbeweglich fixierbar ist.

Die Rahmenteile können mit Verbindungselementen entlang ihren Seitenflächen lösbar zusammengesetzt werden. Vorteilhafterweise wird damit ein stabiles Aufspannen von vorzugsweise schlauch-, halm-, rohr-oder kapillarförmigen Probenkammern im Halterahmen ermöglicht. Durch ein Einklemmen der Probenkammern können deren Enden automatisch verschlossen werden.

Durch eine Profilierung an mindestens einer der Seitenflächen werden Aufnahmeelemente gebildet, die im zusammengesetzten Zu- stand der Rahmenteile einen minimalen Freiraum zur Aufnahme des Wandmaterials der Probenkammer, z. B. in Form eines Schlitzes, lassen. Gemäß einer ersten Ausführungsform der Erfindung ist ei- ne der sich berührenden Seitenflächen der Rahmenteile eben, wäh- rend die andere Seitenfläche die Profilierung zur Bildung der Aufnahmeelemente aufweist. Diese Gestaltung kann Vorteile in Be- zug auf einem vereinfachten Aufbau des Halterahmens besitzen.

Alternativ weisen beide Seitenflächen zueinander ausgerichtete Ausnehmungen auf, die im zusammengesetzten Zustand der Rahmen- teile die Aufnahmeelemente bilden. Diese Gestaltung kann für ein fehlerfreies Zusammensetzen der Rahmenteile von Vorteil sein.

Wenn der Träger so gebildet ist, dass die Durchgangslöcher einen ovalen oder schlitzförmigen Querschnitt besitzen, kann die ein- gesetzte Probenkammer, die in der Regel einen kreisrunden Quer- schnitt besitzt, zusammengedrückt oder zusammengequetscht wer- den. Durch die Verformung der Probenkammer an den Aufnahmeele- menten werden verjüngte Kammerbereiche gebildet, die Sollbruch- stellen zur vereinfachten Entnahme von Probenabschnitten dar- stellen. Vorteilhafterweise kann die Einhaltung von Kryobedin- gungen für selektiv entnommene Kammerabschnitte einfach dadurch überwacht werden, dass die zusammengedrückten Enden der Proben- kammerabschnitte bei einem zwischenzeitlichen, ggf. unbeabsich- tigten Auftauen sich deformieren würden.

Der erfindungsgemäß verwendete Halterahmen besteht vorzugsweise aus Kunststoff, der bei Raumtemperatur elastisch deformierbar ist, z. B. aus PE, TPX, Polysulfon. Die Elastizität des Rahmen- materials kann ebenfalls das Zusammensetzen der Rahmenteile mit der mindestens einen Probenkammer vereinfachen.

Gemäß einer weiteren vorteilhaften Gestaltung sind die Rahmen- teile mit Verbindungselementen ausgestattet, mit denen die Rah- menteile entlang der profilierten Seitenflächen lösbar miteinan- der verbunden werden können. Die Verbindungselemente bieten den Vorteil, dass die Rahmenteile ohne zusätzliche Justierhilfen zu- sammengefügt werden können und im zusammengesetzten Zustand ein autarkes Bauteil bilden. Werden die Verbindungselemente durch Kombinationen aus Stegen und Nuten, ggf. mit Einrastprofilen, gebildet, so kann die Probenkammer am Aufnahmeelement vorteilhafterweise zusätzlich geknickt werden.

Wenn gemäß einer weiteren Ausführungsform der Erfindung mindes- tens eines der Rahmenteile, Spannstifte an einander entgegenge- setzt liegenden Seitenflächen aufweist, können sich Vorteile für die Anbringung der Probenkammern am Halterahmen ergeben. Die Spannstifte können insbesondere durch die Verbindungselemente zwischen den Rahmenteilen gebildet werden.

Weitere Vorteile für die Handhabung des Trägers können sich er- geben, wenn beide Rahmenteile an einer Seite verschwenkbar mit- einander verbunden sind. Die Schwenkverbindung umfasst bspw. ei- ne Scharnier oder eine umschlagbare Lasche.

Gemäß einer besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist der Halterahmen mit einer Datenspeichereinrichtung mit min- destens einem Datenspeicher verbunden. Dies ermöglicht die Abla- ge von Daten, die die Proben in den Probenkammern charakterisie- ren.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist eine Kryospeichervor- richtung, die mindestens einen erfindungsgemäßen Träger und min- destens eine Probenkammer aus einem flexiblen, elastisch defor- mierbaren Material umfasst. Als Probenkammern werden vorzugswei- se langgestreckte, halmartige oder hohlzylinderförmige Proben- kammern (z. B. als Schlauch, Rohr oder Kapillare gebildet) ver- wendet.

Durch die Verwendung von mindestens einer langgestreckten Pro- benkammer werden eine Reihe von Vorteilen erzielt, die sich bei der Probenbeschickung, der Überwachung des kryogespeicherten Zu- stands und der Entnahme von Proben auswirken. So können erfin- dungsgemäß verwendete Probenkammern schnell befüllt oder geleert werden. Der Flüssigkeitstransport in der Probenkammer kann unter der Wirkung von Kapillarkräften oder eines äußeren Über-oder Unterdruckes erfolgen. Die Probenkammern sind miniaturisierbar und flexibel an die Einsatzbedingungen anzupassen. Die Einlas- senden einer Vielzahl von gleichzeitig verwendeten Probenkammern können problemlos an beliebige Anordnungen von Probenreservoiren angepasst werden, aus denen Proben entnommen werdensollen. Die Probenkammern ermöglichen einen Abschluss der Proben gegenüber der Umgebung. Eine Kontamination aus der umgebenden Gas-oder Flüssigkeitsphase (z. B. aus einem Kühlmedium) ist ausgeschlos- sen. Aus einer erfindungsgemäß vorgesehenen Probenkammer können Proben durch Auftauen der gesamten Probenkammer oder Teilproben durch mechanisches Abtrennen vorzugsweise unmittelbar an die Aufnahmeelemente des Halterahmens angrenzend entnommen werden, ohne dass die gesamte Probenkammer aufgetaut wird. Das mechani- sche Abtrennen kann sogar unter Wirkung einer lokalen Erwärmung erfolgen, ohne dass ein Verlust der in der übrigen Probenkammer vorgesehenen Probe entsteht.

Ein Gegenstand der Erfindung ist auch ein Verfahren zur Kryospeicherung von Suspensionsproben, bei dem diese unter der Wirkung von Kapillar-oder äußeren Druckkräften in mindestens eine Probenkammer aus flexiblem, elastisch deformierbarem Mate- rial aufgenommen, die Probenkammer in dem erfindungsgemäßen Trä- ger festgeklemmt und mit diesem in einen kryokonservierten Zu- stand überführt werden. Die erfindungsgemäße Kryospeicherung er- folgt allgemein bei einer Temperatur unterhalb der Raumtempera- tur, bei der eine vitalitätserhaltende, andauernde Lagerung der Proben möglich ist. Die gewählte Temperatur und die Dauer der Lagerung sind anwendungsabhängig gewählt. Besonders vorteilhaft ist die Erfindung bei Tieftemperaturlagerungen bei Temperaturen unterhalb von minus 100 °Celsius und insbesondere bei der Tempe- ratur von flüssigem Stickstoff, umsetzbar.

Weitere Vorteile und Einzelheiten der Erfindung werden aus der folgenden Beschreibung der beigefügten Zeichnungen ersichtlich.

Es zeigen : Fign. 1 bis 8 : verschiedene Ausführungsformen erfindungsgemä- ßer Träger für Probenkammern, Fig. 9 : eine Illustration der Beschickung des erfin- dungsgemäßen Trägers mit Probenkammern und der Entnahme von Kammerabschnitten, Fign. 11 und 12 : schematische Ansichten weiterer Ausführungs- formen erfindungsgemäßer Träger für Probenkam- mern, Fign. 13 : eine weitere Illustration zur Handhabung einer erfindungsgemäßen Kryospeichervorrichtung, und Fig. 14 : eine schematische Seitenansicht eines herkömm- lichen Halterahmens (Stand der Technik).

Figur 1 zeigt eine Ausführungsform eines erfindungsgemäßen Trä- gers 10 mit verschiedenen Varianten von Aufnahmeelementen für mindestens eine Probenkammer in schematischer Seitenansicht. Der Träger 10 besteht aus einem Halterahmen 20 mit einem ersten Rah- menteil 30 (auch : Bodenteil 30) und einem zweiten Rahmenteil 40 (auch : Deckelteil 40). Die Rahmenteile bilden allgemein eine um- laufende, z. B. rechteckige Form, die aus mehreren rechtwinklig zueinander angeordneten Rahmenelementen gebildet ist und/oder eine Sternform mit radial angeordneten Rahmenelementen (Beispie- le siehe Figuren 7a, b, 8). In Figur 1 ist zu Illustrationszwe- cken schematisch ein Ausschnitt des Halterahmens 20 gezeigt. Je- des Rahmenteil 30,40 besitzt eine Seitenfläche 31,41, von de- nen mindestens eine Seitenfläche 31 und/oder 41 zur Bildung von Aufnahmeelementen 21 bis 25 eine Profilierung aufweisen kann.

Die Profilierung ist jedoch nicht zwingend vorgesehen (siehe z.

B. Figur 6). Die Rahmenteile 30,40 sind mit Verbindungselemen- ten 50, z. B. in Form von Stiften 51 und Buchsen 52 zusammen- setzbar. An einer Seite des Halterahmens können die Rahmenteile 30,40 verschwenkbar miteinander verbunden sein.

Zur Bildung des Aufnahmeelements 21 mit einem ovalförmigem Quer- schnitt tragen beide Seitenfläche 31,41 eine Profilierung mit zueinander ausgerichtete halbovalförmige Ausnehmungen. Alterna- tiv ist bspw. die Seitenfläche 31 des Bodenteils 30 eben ausge- bildet und lediglich die Seitenfläche 41 des Deckelteils 40 mit einer Ausnehmung geformt, so dass das Aufnahmeelement 22 mit halbovalförmigem Querschnitt gebildet wird. Analog können Auf- nahmeelemente 23,24 mit dreieckigem, rechteckigem oder schlitz- förmigem Querschnitt durch ein-oder beidseitige Profilierung der Seitenflächen 31,41 gebildet werden. Eine Besonderheit stellt das Aufnahmeelement 25 dar, bei dem die Profilierung zu- einander komplementäre Vorsprünge und Ausnehmungen in den Sei- tenfläche 31,41 umfasst, die zusätzlich zum Quetschen der ge- halterten Probenkammer auch ein Abknicken ermöglichen.. Das Auf- nahmeelement 25 kann Teil eines Verbindungselements auf der Ba- sis einer Steg-Nut-Kombination sein. Diese in Figur 3 mit weite- ren Einzelheiten gezeigte Ausführungsform der Erfindung besitzt den. Vorteil, dass die Probenkammer an den Aufnahmeelementen ver- schlossen wird.

Der Halterahmen 10 besteht vorzugsweise aus einem bei Raumtempe- ratur elastisch deformierbaren Kunststoffmaterial, z. B. aus PE, TPX, Polysulfon. Er wird vorzugsweise durch ein Spritzgussver- fahren hergestellt. Die Dimensionen der Rahmenteile 30,40 wer- den anwendungsabhängig gewählt und liegen bspw. im Bereich von einigen cm bis einige dm. Die allgemein rechteckig oder oval ge- bildeten Aufnahmeelemente besitzen typischerweise Dimensionen, die geringfügig kleiner als die Außenmaße der Probenkammern sind.

Die Figuren 2a, b zeigen vergrößert eine konkrete Ausführungs- form des erfindungsgemäße Trägers 10 mit weiteren Einzelheiten.

Beide Rahmenteile 30,40 besitzen auf den Seitenflächen 31,41 eine wellenförmige Profilierung zur Bildung der Aufnahmeelemente 21. Die Verbindungselemente 50 sind in vorbestimmten Abständen an den Seitenflächen 31, 41 vorgesehen und bestehen aus Stift- Buchsen-Kombinationen 51,52 mit Einrastprofilen. Im linken Teil von Figur 2a ist eine Gruppe von Probenkammern 11 jeweils unde- formiert (vor Zusammensetzen der Rahmenteile 30,40) und zusam- mengequetscht (nach der Montage des Haltrahmens) illustriert. In Figur 2b ist der zusammengequetschte Zustand schematisch ohne das obere Rahmenteil 41 gezeigt. Das zwischen den Rahmenteilen zusammengedrückte Material der Probenkammerwände wird vorteil- hafterweise breitgequetscht, so dass sich zusätzlich zur Halte- rung der Probenkammern auch ein lokaler Verschluss und eine Seg- mentierung in Teilkammern ergibt. Figur 2b zeigt ferner, dass an wenigstens einer der Seitenflächen 31,41 eine sich in Längs- richtung der Seitenflächen erstreckende Nut 32 vorgesehen sein kann. Die Nut 32 bildet einen Graben, in den das Wandmaterial der Probenkammern ausweichen kann, wie in weiteren Einzelheiten in den Figuren 3a-c illustriert ist.

In den Figuren 3a bis 3e sind verschiedene Varianten von Verbin- dungselementen 50 illustriert. Die Figuren 3a bis 3c zeigen eine Ausführungsform der Erfindung, bei der als Verbindungselemente 50 an der oberen Seitenfläche 41 des Deckelteils 40 ein Steg 53 mit einem Einrastprofil und am Bodenteil 30 eine Nut 54 mit ei- nem komplementären Einrastprofil vorgesehen sind. Des Weiteren sind an den oberen und unteren Seitenflächen 31,41 in bestimm- ten Abständen Ausnehmungen 26 zur Bildung der Aufnahmeelemente vorgesehen (siehe Figur 3b). Figur 3c zeigt die Verbindungsele- mente 50 im eingerasteten Zustand.

Eine abgewandelte Gestaltung mit steg-und nutförmigen Verbin- dungselementen 50, die jedoch keine Einrastprofile aufweisen, ist in Figur 3d illustriert. Gemäß einer weiteren Alternative können die Verbindungselemente 50 Kombinationen aus Haken 55 und Vorsprüngen 56 an freien Enden der Rahmenteile 30,40 umfassen (Figur 3e).

Figur 4 zeigt in perspektivischer Draufsicht das untere Rahmen- teil 30 eines erfindungsgemäßen Trägers 10 mit einer schlauch- förmigen Probenkammer 11. Das Rahmenteil 30 umfasst neben den äußeren, umlaufenden Rahmenelementen auch innere Rahmenelemente 33, die als Stege ausgebildet sind und ebenfalls obere Seiten- flächen mit einer Profilierung entsprechend den oben erläuterten Prinzipien aufweisen. Auf den äußeren und inneren Rahmenelemen- ten sind Buchsen 52 als Verbindungselemente vorgesehen. Die Pro- benkammer 11 ist mäanderförmig über dem Rahmenteil 30 ausgelegt.

Die mäanderförmige Anordnung besitzt den Vorteil, dass ein rela- tiv großes Probenvolumen in einer zunächst durchgehenden Proben- kammer aufgenommen und konserviert werden kann. Durch die Halte- rung am Träger 10 wird die Probenkammer 11 in einzelne Teilkam- mern oder Kammerabschnitte unterteilt, durch die eine selektive Entnahme von Teilproben vereinfacht wird (siehe Figur 9). Kam- merabschnitte sind Teilbereiche einer Probenkammer, die im fixierten Zustand zwischen Rahmenelementen frei verlaufen.

Die Probenkammern 11 bestehen jeweils aus einem flexiblen Schlauch oder einer Kapillare mit einem Innendurchmesser, der wesentlich kleiner als die Länge der Probenkammer ist. Der In- nendurchmesser. liegt beispielsweise im Bereich von 5 um bis 4 mm. Die Länge der Probenkammern ist beispielsweise im Bereich von 0.5 cm bis 10 dm gewählt. Der Quotient aus Querschnitts- durchmesser und Länge einer Probenkammer ist vorzugsweise klei- ner als 1/10. Die Probenkammern können aus jedem geeigneten inerten und flexiblen Material, z. B. Kunststoff, Polymer oder Metall bestehen. Vorteilhafterweise können miniaturisierte Pro- benkammern auch aus Materialien mit einer höheren Härte, wie z.

B. Glas, Halbleitermaterialien, Kohlenstoff oder Keramik beste- hen, die bei geringen Wandstärken elastisch deformierbar sind.

Das Wandmaterial der Probenkammern kann je nach den gewünschten Anforderungen für die Kryospeicherung flüssigkeitsdicht oder permeabel ausgebildet sein. Es kann insbesondere ein ionendurch- lässiges Material verwendet werden, wie es von Dialyse-Röhrchen bekannt ist. Im Wandmaterial der Probenkammern oder auf dessen Oberfläche können zusätzlich Sensoren (z. B. Temperatursensoren) vorgesehen sein. Die Probenkammern können mit einem entlang ih- rer Länge konstanten Durchmesser gebildet sein, der dem Durch- messer der Einlass-und Auslassenden (oder Einlass-und Auslass- öffnungen) der Probenkammer entspricht. Bei abgewandelten Aus- führungsformen der Erfindung ist entlang der Länge der Proben- kammern eine Variation des Innendurchmessers vorgesehen.

Gemäß Figur 5 können am Rahmenteil 30 Spannstifte 34 vorgesehen sein. Die Spannstifte 34 ragen von der oberen Seitenfläche 31 des Bodenteils 30 senkrecht nach oben und sind entsprechend der Position der Aufnahmeelemente ausgerichtet. Die Spannstifte 34 vereinfachen das Auslegen der Mäanderform der Probenkammer. Al- ternativ kann erfindungsgemäß eine gesonderte Montagevorrichtung vorgesehen sein, in die das zu beschickende Rahmenteil 30 ein- setzbar ist und die die Spannstifte trägt.

Die Figuren 6a und 6b zeigen einen erfindungsgemäßen Träger 10 mit eingesetzten Probenkammern 11 ausschnittsweise vor und nach Zusammensetzen der Rahmenteile 30,40. Bei dieser Ausführungs- form der Erfindung sind die Seitenfläche 31,41 eben und ohne Profilierungen gebildet. Nach dem Positionieren der Probenkammer 11 (z. B. mit Spannstiften gemäß Figur 5) wird das obere Rahmen- teil 40 auf die Probenkammern 11 aufgesetzt. Durch Zusammendrü- cken der vorher lose getrennten Rahmenteile greifen die Verbin- dungselemente 50 ineinander. Der zusammengesetzte Zustand wird durch die Einrastprofile der Verbindungselemente 50 fixiert, so dass die Probenkammern 11 mit zusammengedrückten Abschnitten re- lativ zum Träger 10 unbeweglich angeordnet sind (Figur 6b).

Eine alternative Ausführungsform des erfindungsgemäßen Trägers 10 mit radial auseinanderlaufenden Rahmenelementen 35 ist in den Figuren 7a, 7b und 8 illustriert. Die Probenkammer 11 ist schne- ckenförmig auf den Rahmenelementen 35 des unteren Rahmenteils 30 ausgelegt (oberes Rahmenteil nicht gezeigt). Zwischen den Rah- menelementen 35 werden mit zunehmendem Abstand von der Mitte je- weils längere Kammerabschnitte 12 gebildet. Die Probenkammer 11 besitzt an einem Ende in der Mitte des Trägers eine trichterför- mige Erweiterung 13, die aus der Rahmenebene nach oben absteht und der Probenbeschickung dient.

Figur 7a zeigt die ausgelegte Probenkammer 11 vor dem Zusammen- setzen des Trägers. Nach dem Zusammensetzen des Trägers und dem Einfriervorgang ergibt sich das Bild gemäß Figur 7b. Zwischen den Kammerabschnitten 12 ist die Probenkammer 11 an den Rahmen- elementen 35 zusammengequetscht. Alternativ zur schneckenförmi- gen Anordnung kann gemäß Figur 8. die Probenkammer 11 in Recht- eckform ausgelegt werden, so dass sich geradlinige Kammerab- schnitte 12 ergeben.

In Figur 9 ist eine vorteilhafte Schrittfolge bei der Handhabung erfindungsgemäßer Kryospeichervorrichtungen schematisch illust- riert. Zunächst erfolgt eine Beschickung der Probenkammer (n).

Suspensionsproben werden durch Ausübung eines Unterdruckes oder unter der Wirkung von Kapillarkräften aus Vorratsbehältern, z.

B. den Wells einer Titerplatte, in die Probenkammern aufgenom- men. Gemäß den Schritten 1 und 2 werden analog zu Figur 6 die gefüllten Probenkammern 11 zwischen den Rahmenteilen ausgelegt und zusammengepresst. Bei dieser Gestaltung bestehen die Verbin- dungselemente 50 aus seitlichen Haken des oberen Rahmenteils 40.

Gemäß Schritt 3 kann eine zusätzliche Versiegelung des Träger- Probenkammern-Verbundes z. B. mit einer Folienumhüllung 14 er- folgen. In diesem Zustand erfolgt der Einfriervorgang und die Lagerung im gefrorenen (kryokonservierten) Zustand. Die Kry- ospeichervorrichtung wird in eine Umgebung mit reduzierter Tem- peratur überführt. Diese Umgebung ist beispielsweise in einem Kryobehälter mit flüssigem Stickstoff oder mit gasförmigem Stickstoff bei T =-120°C gegeben.

Zur Entnahme von Proben durch Abtrennung von Kammerabschnitten 12 nach oder während der Kryokonservierung werden gemäß Schritt 4 die gewünschten Kammerabschnitte mechanisch mit einem Schneid- werkzeug 90 abgetrennt. Das Schneidwerkzeug kann ein-oder zwei- schneidig gebildet sein (siehe Einschub).. Die Kammerabschnitte 12 werden unmittelbar an die Aufnahmeelemente am Halterahmen 20 angrenzend abgeschnitten. Dadurch besitzen die Enden der abge- trennten Kammerabschnitte 12 eine von der kreisrunden Quer- schnittsform abweichende Deformation, wie schematisch bei Schritt 5 gezeigt ist. Die gefrorenen Kammerabschnitte können bspw. in einer Schale'weiter im kryokonservierten Zustand aufbe- wahrt werden. Vorteilhafterweise bleiben die Deformationen an den Enden der Kammerabschnitte erhalten, solange der Kryozustand gegeben ist.

Die Entnahme von Proben kann alternativ derart erfolgen, dass die gesamte Kryospeichervorrichtung aufgetaut und der Inhalt der mindestens einen Probenkammer entnommen wird. Dies erfolgt bei- spielsweise durch Anlagen eines Unterdruckes an eines der Enden der mindestens einen Probenkammer.

Bei Schritt 4 der Figur 9 ist ein weiterer wichtiger Gesichts- punkt der Erfindung illustriert. Vorteilhafterweise kann der Träger 10 mit einer Datenspeichereinrichtung 60 verbunden sein.

Die Datenspeichereinrichtung 60 enthält mindestens einen Daten- speicher 61, der vorzugsweise in einem Gehäuse 62 (siehe Figur 11) angeordnet ist. Der Datenspeicher 61 besitzt eine Schnitt- stelle zur zumindest zeitweiligen Aufnahme einer Steckverbindung 63 mit elektrischen Verbindungsleitungen, über die der Daten- speicher 61 mit einer Steuereinrichtung (nicht dargestellt) ver- bunden werden kann.

Als Datenspeicher 61 kann ein an sich bekannter Speicherchip vorgesehen sein, in dem anwendungsabhängig beliebige Daten elektrisch oder magnetisch gespeichert sind. Es wird beispiels- weise ein sogenannter Flash-Speicher verwendet. In der Daten- speichereinrichtung 60 kann auch ein optischer Speicher vorgese- hen sein. In den Datenspeicher werden Daten zur Charakterisie- rung der aufgenommenen Suspensionsproben eingeschrieben. Diese Daten umfassen beispielsweise bei medizinischen Anwendungen I- dentifizierungsdaten zur Bestimmung des Spenders und der Arten der suspendierten Zellen, weitere Merkmale des Spenders, wie z.

B. die Blutgruppe, ggf. relevante Literaturdaten zu den suspen- dierten Zelltypen und ggf. bereits vorliegende Messdaten und/oder Bilddaten. Die Bilddaten umfassen beispielsweise licht- oder elektronenmikroskopische Abbildungen von suspendierten Zel- len, die der spenderspezifischen Charakterisierung der Zellen und späteren Vergleichen dienen. Die gespeicherten Daten werden während der Kryospeicherung abgerufen und/oder ergänzt.

Alternative Gestaltungen des erfindungsgemäßen Trägers 10 mit dem Halterahmen 20 und der Datenspeichereinrichtung 60 sind in den Figuren 10 bis 12 gezeigt. Das Gehäuse 62 der Datenspei- chereinrichtung 60 ist vorzugsweise einstückig mit dem Material des Halterahmens 10 gebildet. Der Halterahmen 20 ist durch um- laufende Rahmenelemente gemäß Figur 10 geschlossen gebildet. Al- ternativ sind gemäß den Figuren 11 und 12 stabförmige Rahmenele- mente 36 vorgesehen, die sich vom Gehäuse 62 des Datenspeichers erstrecken. Jedes Rahmenelement 36 enthält eine Reihe von Auf- nahmeelementen, in denen die mindestens eine Probenkammer 11 fi- xiert ist. Es kann beispielsweise eine einzige Probenkammer vor- gesehen sein, die mäanderförmig durch alle Rahmenelemente 36 durchgezogen und im ausgelegten oder aufgespannten Zustand fi- xiert wird. Alternativ können auch mehrere, getrennte Probenkam- mern vorgesehen sein, wie es in Figur 12 illustriert ist. Der Halterahmen 20 kann zur Abtrennung von Teilen der Probenkam- mer (n), z. B. in Form von Sollbruchstellen 37, aufweisen.

Figur 13 illustriert eine Ausführungsform der Erfindung, bei der zwei Probenkammern 11 vorgesehen sind, die mit verschiedenen Suspensionsproben beschickt werden. In der Praxis kann die Zahl der zu einer Kryospeichervorrichtung gehörenden Probenkammern erheblich größer und insbesondere in Abhängigkeit von der Ges- talt des Probenreservoirs 70 gewählt sein. Das Probenreservoir 70 wird beispielsweise durch eine Mikro-oder Nanotiterplatte mit einer Vielzahl von Kompartimenten 71 gebildet. Die Einlass- öffnungen der Probenkammern 11 ragen jeweils in eines der Kom- partimente.

Zur Beschickung der Probenkammern sind die schematisch gezeigten Rahmenteile noch nicht zusammengesetzt. Die Suspensionsproben werden in die Probenkammern gesogen. Zur Parallelbeschickung um- fasst die Saugeinrichtung 80 mehrere Flüssigkeitspipetten 81, 82,... entsprechend der Zahl der zu beschickenden Probenkam- mern. Alternativ kann die Beschickung der Probenkammern jedoch auch sequentiell mit einer einzelnen Flüssigkeitspipette 81 erfolgen.

Nach der Beschickung werden die Rahmenteile zusammengesetzt, um die Probenkammer (n) zu fixieren. Die einerseits zum Probenreser- voir 70 und andererseits zur Saugeinrichtung 80 führenden Enden der Probenkammern werden abgeschnitten. Dieser Zustand ist sche- matisch in Figur 13 (unten) illustriert. Die verschlossenen En- den sind ggf. für einen späteren Zugriff auf den Inhalt der Pro- benkammer frei zugänglich.

Die in der vorstehenden Beschreibung, den Ansprüchen und den Zeichnungen offenbarten Merkmale der Erfindung können sowohl einzeln oder auch in Kombination für die Verwirklichung der Er- findung in ihren verschiedenen Ausgestaltungen von Bedeutung sein.