"COMPOSIÇÃO PARA A MODULAÇÃO DE GENES RESPONSÁVEIS PELAS FUNÇÕES GERAIS DA PELE, MÉTODO PARA A MODULAÇÃO DA EXPRESSÃO DE GENES RESPONSÁVEIS PELAS FUNÇÕES GERAIS DA PELE E USO DE UM EXTRATO VEGETAL".

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001 ] A presente invenção refere-se a composições para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele compreendendo pelo menos um extrato vegetal e pelo menos um veículo cos- meticamente aceitável, bem como a um método para a modulação da expressão de genes responsáveis pelas funções gerais da pele, e ao uso de ditos extratos vegetais na preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele. FUNDAMENTO DA INVENÇÃO

[0002] Considerada o maior órgão do corpo humano, a pele é sede de muitos processos complexos e dinâmicos. Entre esses processos estão funções de barreira e imunológicas, produção de melanina, síntese de vitamina D, sensações, regulação térmica, proteção contra lesões por radiação ultravioleta e estética.

[0003] O bom funcionamento das funções gerais da pele pode ser associado a um grupo de genes que, uma vez modulados, pode ser estratégia interessante para o desenvolvimento de produtos com finalidade cosmética.

[0004] Entretanto, há um número limitado de compostos que efeti- vamente atuem na modulação de genes associados às funções gerais da pele.

[0005] Portanto, existe a necessidade de uma composição cosmética que atue na modulação de tais genes, fornecendo um tratamento efetivo para cuidados da pele.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0006] As figuras 1A e 1 B apresentam um aumento da proteína in- volucrina relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[0007] As figuras 2A e 2B apresentam um aumento da proteína ki- 67 relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[0008] As figuras 3A e 3B apresentam um aumento da proteína co- lágeno relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[0009] As figuras 4A e 4B apresentam um aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00010] As figuras 5A e 5B apresentam um aumento da proteína ácido hialurônico relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[0001 1 ] As figuras 6A e 6B apresentam um aumento da proteína co- lágeno I relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00012] As figuras 7A e 7B apresentam um aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00013] As figuras 8A e 8B apresentam um aumento da proteína ácido hialurônico relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00014] As figuras 9A e 9B apresentam um aumento da proteína in- volucrina relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00015] As figuras 10A e 10B apresentam um aumento da proteína Claudina I relativo à amostra controle não tratada, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00016] As figuras 1 1A e 1 1 B apresentam um aumento da proteína colágeno I relativo à amostra controle não tratada após 3 (três) dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00017] As figuras 12A e 12B apresentam um aumento da proteína colágeno I relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00018] As figuras 13A e 13B apresentam um aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00019] As figuras 14A e 14B apresentam um aumento da proteína colágeno I relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00020] As figuras 15A e 15B apresentam um aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00021 ] As figuras 16A e 16B apresentam um aumento da proteína ki-67 relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00022] As figuras 17A e 17B apresentam aumento da proteína in- volucrina relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00023] As figuras 18A e 18B apresentam um aumento da proteína colágeno I relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

[00024] As figuras 19A e 19B apresentam um aumento da proteína elastina relativo à amostra controle não tratada após 3 dias de tratamento, dado em medidas de fluorescência e porcentagem.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[00025] A presente invenção trata de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele compreendendo pelo menos um extrato vegetal e pelo menos um veículo cosmeticamente aceitável.

[00026] As composições da presente invenção são apropriadas para serem utilizadas em diversas faixas etárias. De modo preferido, as faixas etárias compreendem as idades de acima de 30 anos, particularmente acima de 45 anos, acima de 60 anos e acima de 70 anos.

[00027] Para facilidade de referência, quando aplicável, as composições específicas para faixas etárias distintas serão designadas como: composições (30+), referentes a idades acima de 30 anos; composições (45+), referentes a idades acima de 45 anos; composições (60+), referentes a idades acima de 60 anos; e composições (75+), referentes a idades acima de 60 anos.

[00028] Por extrato vegetal entende-se qualquer f ração, extrato ou princípio ativo extraído de plantas, ervas, flores, árvores, frutos, sementes, raízes ou folhas.

[00029] Dito vegetal é selecionado a partir do grupo que compreende Acmella oleracea (jambu), Avena sativa, Camellia sinensis (chá verde), Casearia sylvestris (guaçatonga), Cichorium intybus chicória), Hymenaea courbaril (jatobá), Paeonia albiflora peônia), Passiflorace- ae (maracujá), Schinus terebinthifolius (aroeira) e Secale cereale, sozinhos ou em combinação.

[00030] Acmella oleracea, também conhecida como Spilanthes acmella, é uma erva também conhecida como jambu ou agrião-do-pará. Causa uma ação anestésica na mucosa bucal. A substância responsável por essa ação é uma isobutilamida denominada espilantol. Na sua composição química, além de espilantol, podem ser citados a es- pilantina, afinina, colina e fitosterina. O espilantol, que é um princípio ativo presente na Acmella oleracea, também é comercializado como Spilol.

[00031 ] Avena sativa, também conhecida como aveia-branca, ou simplesmente aveia, é uma espécie botânica pertencente à família das poáceas. Pode ser obtida do ingrediente comercial Osilift®.

[00032] Camellia sinensis é uma espécie da família Theaceae, popularmente conhecida como chá-verde a depender de sua forma de cultivo. Por Camellia sinensis entende-se qualquer fração proveniente da mesma, particularmente extratos.

[00033] Casearia sylvestris pertence à família das Flacourtiaceae, também conhecida por guaçatonga. Por Casearia sylvestris entende- se qualquer fração proveniente da mesma, particularmente extratos.

[00034] Cichorium intybus é uma espécie da família das Composi- tae, popularmente conhecida como chicória. Por Cichorium intybus entende-se qualquer fração proveniente da mesma, particularmente extratos e ativos, como aquele comercializado como Vederine® por Galena.

[00035] Hymenaea courbaril é uma árvore da família das fabáceas, também conhecida como jatobá-verdadeiro, jatobazeiro ou apenas jatobá. Xiloglucano é um princípio ativo presente na Hymenaea courbaril, também conhecido xiloglucano de jatobá.

[00036] Paeonia albifíora pertence à família das Paeoniaceae, uma espécie de flores. Por Paeonia albifíora entende-se qualquer fração proveniente da mesma, particularmente extratos de suas raízes. Sem qualquer caráter limitativo, em realização particular Paeonia albifíora pode ser obtido do ingrediente comercial Volunage®, constituído de água / extrato de Paeonia albifíora I fenoxietanol / etilhexil glicerina.

[00037] Passifloraceae é uma família de angiospermas. Os frutos de algumas espécies do género Passifíora são comestíveis e conhecidos como o maracujá. O Maracujá (do tupi mara kuya, "fruto que se serve" ou "alimento na cuia") é um fruto produzido pelas plantas da espécie Passifíora edulis. O nome da árvore é também conhecido como Maracujazeiro. As ceramidas de maracujá são de interesse particular na presente invenção. [00038] Schinus terebinthifolius é uma espécie da família das Ana- cardiaceae, também conhecida como aroeira ou aroeira-vermeiha. Por Schinus terebinthifolius entende-se qualquer fração proveniente da mesma, particularmente extratos.

[00039] Secale cereale é uma espécie de planta com flor pertencente à família Poaceae. O seu nome comum é centeio. Secale cereale pode ser obtido do ingrediente comercial Coheliss®, constituído de água / extrato de Secale Cereale /Pentileno Glicol.

[00040] A composição da presente invenção pode compreender, adicionalmente, ácido hialuronico, cafeína e/ou mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio,

[00041 ] O ácido hialuronico é um é um biopolímero formado pelo ácido glicurônico e a N-acetilglicosamina. É uma glicosaminoglicana, que pode ser obtido de fonte natural ou sintética.

[00042] Por cafeína também se entende qualquer matéria prima contendo a mesma, particularmente aquela comercializada como

Ecoslim® por Lucas Meyer, constituído de um extrato de chá verde contendo cafeína como seu ingrediente ativo.

[00043] A mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio é comercializada como Se- picalm S por Seppic.

[00044] Para compor as composições da presente invenção, são particularmente preferidos, os extratos ou princípios ativos extraídos de Camellia sinensis, Casearia sylvestris, Schinus terebinthifolius, Paeonia albiflora, Cichorium intybus, Hymenaea courbaril, Avena sati- va, Secale cereale; ceramidas de maracujá; os princípios ativos espi- lantol e xiloglucano extraídos de Ac mel la oleracea e Hymenaea courbaril, respectivamente; ácido hialuronico, cafeína, mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio; sozinhos ou em combinação.

[00045] De maneira individualizada, os efeitos terapêuticos e cosméticos dos componentes mencionados acima têm sido estudados.

[00046] Entretanto, de maneira surpreendente, a Depositante verificou que combinando os componentes citados acima em uma composição, estas apresentam efeito na modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.

[00047] Composições preferidas da presente invenção compreendem as seguintes combinações:

- extrato de Camellia sinensis e espilantol - são preferencialmente composições (30+);

- xiloglucano de jatobá e uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio - são preferencialmente composições (45+);

- extratos de Casearia sylvestris, Schinus terebinthifolius, e Paeonia albiflora - são preferencialmente composições (60+);

- ceramidas de maracujá e extrato de Cichorium intybus - são preferencialmente composições (70+);

- espilantol e ácido hialurônico - são preferencialmente composições na forma de elixir;

- extratos de Hymenaea courbaril, Paeonia albiflora, Secale cereale e Avena sativa - são preferencialmente composições na forma de sérum;

- extratos de Casearia sylvestris, Schinus terebinthfolius e ácido hialurônico - são preferencialmente composições na forma de preenchedor; e

- extrato de Schinus terebinthfolius e cafeína - são preferencialmente composições na forma de gel.

[00048] Tais genes incluem pelo menos um dos genes CAT, GPX1 , SRA, NOX1 , PRDX6, SOD2, DSC2, IGF1 R, ITGA1 , ITGB1 , LAMB1 , LAMB3, DEFB4A, CDH1, CAMP, CLDN1, CLDN4, CLDN7, CDSN, DSG4, DSP, ELOVL3, GBA, ITGA6, ITGB4, KRT19, KRT10, KRT14, KRT16, KRT17, KRT1, KRT6A, OR2AT4, LA A5, OCLN, PKP1, PLEC, TGM5, TGM1 , RNASE7, SMPD1 , SDC1, TJP1 , VCL, BTC, FLT1, PDGFRA, HAS1 , HAS2, SIRT1, SRD5A1, PRLR, HSD17B2, TPH1 , AANAT, ASMT, TNR1A, AR, ESR2, CYP19A1 , HTR2A, HTR2B, MTOR, AQP3, CTSB, CTSE, CTSL, CD44, HAL,PADI3, PA- DI1, CASP14, FLG, ST14, IL13, IL18, IL19, ITGA2, IL1A, IL1B, IL22, IL17A, IL1R1, IL10, IL6, F2RL1, TRPV1, CALCA, ACACA, ASAH1, UGCG, SPTLC1, SREBF2, GLB1, ADA 9, MMP1, M P10, MP2, MP3, MMP9, SERPINE1, TIMP1, TIMP2, T PRSS6, FBLN5, FBN1, MMP12, MMP13, MMP14, TYR, GPNMB, AP1LC3B, PO C, OPRM1, MC1R, MITF, CANX, HSPB1, HSPA1A, EGFR, TGFB1, TGFBR1, NGF, PDGFA, VEGFA, VEGFB, FGFR1, FGFR2, FGF1, FGF2, MMP11, HYAL1, HYAL2, ELN, LOX, COL1A1, COL1A2, AC02, ANXA5.

[00049] De maneira ainda mais surpreendente, a Depositante verificou que:

- Em quantidades de cerca de 0,025% de Camellia sinensis e cerca de 0,125% de espilantol, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão de pelo menos uma das proteínas involucrina e ki-67;

- Em quantidades de cerca de 0,25% de xiloglucano de jatobá e cerca de 1,5% de uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão de colágeno, da proteína elastina e/ou da expressão da proteína ácido hialurônico, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral;

- Em quantidades de cerca de 0,05% de Casearia sylves- íris, cerca de 0,0125 de Schinus terebinthifolius e cerca de 2% Paeo- nia albiflora, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão de pelo menos uma das proteínas colágeno, elastina e ácido hialurônico;

- Em quantidades de cerca de 0,3% de ceramidas de maracujá e cerca de 3% de Cichorium intybus, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão de da proteína involucrina e da proteína Claudina I, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral;

- Em quantidades de cerca de 0,25% de espilantol e cerca de 5% de ácido hialurônico, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão da proteína colágeno I, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral;

- Em quantidades de cerca de 0,5% Hymenaea courbaril, cerca de 2% de Paeonia ai bi flora, cerca de 4% de Secale cereale e cerca de 4% de Avena sativa, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão da proteína colágeno I e da proteína elastina, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral;

- Em quantidades de cerca de 0,1 % de Casearia sylvestris, cerca de 0,025% de Schinus terebinthfolius e cerca de 5% de ácido hialurônico, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão das proteínas colágeno I, elastina, ki-67 e involucrina, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral; e

- Em quantidades de cerca de 0,35% de Schinus terebinthfolius e cerca de 1 % de cafeína ou de uma matéria prima que a contenha, há modulação sinérgica em tais genes, particularmente na modulação da expressão da proteína colágeno I e da proteína elastina, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral. [00050] Assim, as composições de acordo com a presente invenção atuam de maneira eficiente na diferenciação e proliferação celular, propiciando seu uso em aplicações cosméticas na pele em geral.

[00051 ] As composições da presente invenção são preferencialmente composições antissinais e podem ter a forma de gel, gel creme, elixir, sérum, entre outras de conhecimento do técnico no assunto a partir dos veículos cosméticos utilizados.

[00052] A presente invenção também está relacionada a um método para a modulação da expressão de tais genes responsáveis pelas funções gerais da pele, o qual compreende a etapa de administrar uma composição de acordo com a presente invenção à pele de um indivíduo.

[00053] Por pele no contexto da presente invenção entende-se pele do pescoço, rosto, braço, antebraço, colo e mãos.

[00054] A presente invenção trata, ainda, do uso de pelo menos um extrato vegetal na preparação de uma composição para a modulação de genes responsáveis pelas funções gerais da pele.

[00055] A presente invenção trata, particularmente, do uso das seguintes combinações na preparação de uma composição:

- extrato de Camellia sinensis e espilantol;

- xiloglucano de jatobá e uma mistura de sódio cocoil aminoácidos e sarcosina e aspartato de potássio e aspartato de magnésio;

- extratos de Casearia sylvestris, Schinus terebinthifolius e Paeonia albiflora;

- ceramidas de maracujá e extrato de Cichorium intybus;

- espilantol e ácido hialurônico;

- extratos de Hymenaea courbaril, Paeonia albiflora, Secale cereale e Avena sativa;

- extratos de Casearia sylvestris, Schinus terebinthfolius e ácido hialurônico; e

- extrato de Schinus terebinthfolius e cafeína.

[00056] Os genes de acordo com a presente invenção e sua correlação com as funções gerais da pele estão definidos na tabela a seguir.

Tabela 1. Definição de genes e correlação com a função geral da pele.

Nome do gene Símbolo Função geral

Catalase CAT Defesa antioxidante

Glutathione peroxidase 1 GPX1 Defesa antioxidante

methionine sulfoxide reductase A MSRA Defesa antioxidante

NADPH oxidase 1 NOX1 Defesa antioxidante

peroxiredoxin 6 PRDX6 Defesa antioxidante

Superoxide dismutase 2, mitochondrial SOD2 Defesa antioxidante

desmocollin 2 DSC2 Adesão / ancoramento

Insulin like growth factor 1 receptor IGF1 R Adesão / ancoramento integrin, alpha 1 ITGA1 Adesão / ancoramento integrin, betai ITGB1 Adesão / ancoramento laminin, beta 1 LAMB1 Adesão / ancoramento laminin, beta 3 LAMB3 Adesão / ancoramento b-defensin 2, beta 4 DEFB4A Atividade bactericida

Cadherin-1 CDH1 Função de barreira / coesão

Cathelicidin antimicrobial peptide CA P Função de barreira / coesão

Claudin-1 CLDN1 Função de barreira / coesão

Claudin-4 CLDN4 Função de barreira / coesão

Claudin-7 CLDN7 Função de barreira / coesão

Corneodesmosin CDSN Função de barreira / coesão

Desmoglein-4 DSG4 Função de barreira / coesão

Desmoplakin DSP Função de barreira /coesão elongation of very long chain fatty acids ELOVL3 Função de barreira / coesão (FEN1 /Elo2, SUR4/EÍ03, yeast)-like 3

Glucosylceramidase GBA Função de barreira /coesão

Integrin alpha-6 ITGA6 Função de barreira / coesão

Integrin beta-4 ITGB4 Função de barreira / coesão

Keratin 19 KRT19 Função de barreira / coesão

Keratin-10 KRT10 Função de barreira / coesão

Keratin-14 KRT14 Função de barreira / Coesão Nome do gene Símbolo Função geral

Keratin-16 KRT16 Função de barreira / Coesão

Keratin-17 KRT17 Função de barreira / Coesão

Keratin-1 KRT1 Função de barreira / coesão

Keratin-6 KRT6A Função de barreira / Coesão

Olfactory receptor, family 2, subfamily AT, OR2AT4 Cicatrização de feridas member 4

Laminin subunit alpha-5 LAMAS Função de barreira / Coesão

Occludin OCLN Função de barreira / Coesão

Plakophilin 1 PKP1 Função de barreira / coesão

Piectin-1 PLEO Função de barreira / Coesão

Transglutaminase-5 TGM5 Função de barreira / coesão

Transglutaminase 1 TGM1 Função de barreira / coesão

RNase A family, 7 RNASE7 Função de barreira / coesão

Acid sphingomyelinase SMPD1 Função de barreira / coesão

Syndecan 1 SDC1 Função de barreira / coesão

Tight junction protein 1 TJP1 Função de barreira / coesão

Vinculin VCL Função de barreira / coesão

Betacellulin BTC Crescimento celular

Vascular permeability factor receptor FLT1 Crescimento celular

Platelet-derived growth factor (PDGF) rePDGFRA Proliferação celular ceptor A

Hyaluronan synthase 1 HAS1 Adesão da matriz celular

Hyaluronan synthase 2 HAS2 Adesão da matriz celular

Sirtuin 1 SIRT1 histone deacetylase

Steroid-5-alpha- reductase SRD5A1 Metabolismo hormonal

Prolactin receptor PRLR Metabolismo hormonal

Hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 2 HSD17B2 Metabolismo hormonal

Tryptophan hydroxilase 1 TPH1 Metabolismo hormonal

Aralkylamine N- acetyltransferase AANAT Metabolismo hormonal

Hydroxyindole O- methyltransferase ASMT Metabolismo hormonal

Melatonin receptor 1 ^a MTNR1A Metabolismo hormonal

Androgen receptor AR Metabolismo hormonal

Estrogen receptor ESR2 Metabolismo hormonal

Cytochrome P450, family CYP19A1 Metabolismo hormonal

19, subfamily A, polypeptide 1 / Aromatase

5-hydroxytryptamine HTR2A Metabolismo hormonal (serotonin) receptor 2 ^a Nome do gene Símbolo Função geral

5-hydroxytryptamine HTR2B Metabolismo hormonal

(serotonin) receptor 2B

Mechanistic target of rapamycin MTOR

Aquaporin-3 AQP3 Hidratação

Cathepsin B CTSB Hidratação

Cathepsin E CTSE Hidratação

Cathepsin L1 CTSL Hidratação

CD44 antigen CD44 Hidratação

Histidine ammonia-iyase HAL Hidratação

Protein-arginine deiminase type-3 PADI3 Hidratação

Peptidyl-arginine deiminase, type I PADI1 Hidratação

Caspase-14 CASP14 Hidratação/diferenciação/formação de barreira

Filaggrin FLG Hidrataçâo/diferenciação/formação de barreira

Serine protease ST14 Hidratação/diferenciaçã o/fo rmação 14/Matriptase de barreira

lnterleukin-13 IL13 Resposta imune

lnterleukin-18 IL18 Resposta imune

lnterleukin-19 IL19 Resposta imune

Integrin, alpha 2 ITGA2 Inflamação

Interleukin 1 , alpha IL1A Inflamação

Interleukin 1 , beta IL1 B Inflamação

Interleukin 22 IL22 Inflamação

Interleukin 17 ^a IL17A Inflamação

lnterleukin-1 receptor type I IL1 R1 Inflamação

lnterleukin-10 IL10 Inflamação

interleukin 6 IL6 Inflamação

Protease-activated receptor 2 (kallikrein F2RL1 Descamação

receptor)

Activation of vanilloid receptor- 1 TRPV1 Prurido

Calcitonin gene-related peptide CALCA Prurido

Acetyl-CoA carboxylase 1 ACACA Síntese de lipídeo

Acid ceramidase ASAH1 Síntese de lipídeo

Ceramide glucosyltransferase UGCG Síntese de lipídeo

Serine palmitoyltransferase 1 SPTLC1 Síntese de lipídeo

Sterol regulatory element-binding protein 2 SREBF2 Síntese de lipídeo Nome do gene Símbolo Função geral

Galactosidase, beta 1 GLB1 Hidrolase lipossomal

ADAM metailopeptidase domain 9 ADAM9 Remodelagem de matriz

Matrix metailopeptidase 1 (interstitiai colla- MMP1 Remodelagem de matriz genase)

Matrix metailopeptidase 10 (stromelysin 2) MMP10 Remodelagem de matriz

Matrix metailopeptidase 2 (gelatinase A, MMP2 Remodelagem de matriz type IV collagenase)

Matrix metailopeptidase 3 (stromelysin 1 , MMP3 Remodelagem de matriz progelatinase)

Matrix metailopeptidase 9 (gelatinase B, MMP9 Remodelagem de matriz type IV collagenase)

Serpin peptidase inhibitor SERPINE1 Remodelagem de matriz

TIMP metailopeptidase inhibitor 1 ΤΊΜΡ1 Remodelagem de matriz

TIMP metailopeptidase inhibitor 2 TÍMP2 Remodelagem de matriz

Transmembrane protease, serine 6 TMPRSS6 Remodelagem de matriz

Fibuíin 5 FBLN5 Remodelagem de Matriz

Fibrilin 1 FBN1 Remodelagem de matriz

Matrix metailopeptidase 12 MMP12 Remodelagem de matriz/ cicatrização de feridas

Matrix metailopeptidase 13 MMP13 Remodelagem de matriz/cicatrização de feridas

Matrix metailopeptidase 14 MMP14 Remodelagem de matriz/ cicatrização de feridas

Tyrosinase TYR Síntese de melanina

Glycoprotein (transmembrane) nmb GPNMB Adesão de melanócitos a querati- nócitos

MAP1 LC3B microtubule- associated protein MAP1 LC3B Autofagia

1 light chain 3 beta

Proopiomelanocortin POMC Metabolisto de neuropeptídeo

Opioid receptor OPRM1 Metabolisto de neuropeptídeo

Melanocortin 1 receptor MC1 R Metabolisto de neuropeptídeo

Microphthalmia- associated transcription MITF Regulador de melanócitos factor

Cainexin CANX Folding de proteínas

Heat shock 27kDa HSPB1 Folding de proteínas

Heat shock 72kDa HSPA1 A Folding de proteínas

Epidermal growth factor receptor EGFR Transdução de sinal Nome do gene Símbolo Função geral

Transforming growíh factor, beta 1 TGFB1 Transdução de sinal

Transforming growth factor, beta receptor I TGFBR1 Transdução de sinal

Nerve Growth Factor NGF Cicatrização de feridas

Platelet-derived Growth Factor A PDGFA Cicatrização de feridas

Vascular Endothelial Growth Factor A VEGFA Cicatrização de feridas

Vascular Endothelial Growth Factor B VEGFB Cicatrização de feridas

Fibroblast growth factor receptor 1 FGFR1 Cicatrização de feridas

Fibroblast growth factor receptor 2 FGFR2 Cicatrização de feridas

Fibroblast growth factor 1 (acidic) FGF1 Cicatrização de feridas

Fibroblast growth factor 2 (basic) FGF2 Cicatrização de feridas

Matrix metallopeptidase 1 1 MMP1 1 Cicatrização de feridas

Hyaluronidase 1 HYAL1 Hidratação

Hyaluronidase 2 HYAL2 Hidratação

Elastin ELN Remodelação de matriz

Lysyl oxidase LOX Remodelação de matriz

Collagen, type I, alpha 1 COL1A1 Remodelação de matriz

Collagen, type I, alpha 2 COL1A2 Remodelação de matriz

Aconitase 2, mitochondrial AC02 Defesa antioxidante

Annexin A5 ANXA5 Crescimento celular/diferenciação

[00057] Os veículos cosmeticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção incluem, sem qualquer limitação, aqueles conhecidos da técnica.

[00058] Como exemplos não limitativos de veículos podem ser citados: conservantes, perfumes/fragrâncias, neutralizadores de polímeros, agentes quelantes, ajustadores de pH, entre outros. São utilizados, particularmente, EDTA dissódico (agente quelante), iodopropinil butilcarbamato (conservante), fenoxietanol (conservante), óleo essencial de pataqueira (perfume) e trietanolamina (ajustador de pH).

[00059] Os exemplos a seguir, sem impor qualquer limitação, ilustram a presente invenção, particularmente no que diz respeito aos efeitos na modulação de genes associados às funções gerais da pele. Exemplo 1. Preparo de composições cosméticas

[00060] Composições cosméticas foram produzidas na forma de emulsões gel creme do tipo óleo em água, na qual o óleo é a fase dispersa e a água é a fase contínua. Ambas as fases foram aquecidas à temperatura de 75-80 , vertendo-se posteriormente a fase oleosa, onde estão os filtros solares, na fase aquosa, sob agitação por cerca de 10 minutos. Posteriormente, iniciou- se a fase de resfriamento do processo, com adição de uma fase aquosa com neutralizador dos polímeros. Quando a temperatura atingiu cerca de 60 , adicionou-se a fase dos modificadores de sensorial (silicones) e quando a temperatura atingiu 40Ό, adicionaram-se os conservantes, fr agrância, modificadores de sensorial (partículas) e os ativos sensíveis a altas temperaturas.

Exemplo 2. Preparo das composições cosméticas

[00061 ] Composições cosméticas foram produzidas na forma de emulsões gel creme do tipo óleo em água, na qual o óleo é a fase dispersa e a água é a fase contínua. Nesse caso, o aquecimento da fase aquosa foi iniciado no recipiente principal até a temperatura de cerca de 75 e cerca de 80 e, sob agitação, adicionou-se a fase oleosa, sob agitação por cerca de 10 minutos. Posteriormente, iniciou-se a fase de resfriamento do processo, com adição de uma fase aquosa com neutralizador dos polímeros. Quando a temperatura atingiu cerca de 60 , adicionou-se a fase dos modificadores de sens orial (silicones) e quando a temperatura atingiu cerca de 40 , adicion aram-se os conservantes, fragrância, modificadores de sensorial (partículas) e os ativos sensíveis a altas temperaturas.

Exemplo 3. Ensaio de atividade molecular

[00062] Foi realizado ensaio em larga escala do perfil de expressão gènica (por PCR array) de 180 genes em explantes de pele obtidas após cirurgia de blefaroplastia e submetidos a tratamentos independentes com a presente invenção.

[00063] Inicialmente, foram obtidos explantes de pele de pálpebras de mulheres com idades entre 45 e 55 anos, sendo 3 (três) doadores diferentes para cada. Os explantes foram divididos em duas porções e inseridos, em triplicata de cada doador, imediatamente em meio de cultura e mantidos por 24 horas (porção 1 ) e 72 horas (porção 2) em atmosfera úmida, 37°C, CO2 5%. Durante esse período, os explantes foram submetidos aos tratamentos com 2mg/cm ² de cada amostra (composições da invenção) aplicados topicamente sobre os explantes, sem qualquer diluição. Além disso, uma condição controle foi realizada pela manutenção dos explantes, em triplicata de cada doador, em meio de cultura somente. Uma análise de viabilidade prévia foi realizada para garantir a integridade dos tecidos durante todo o protocolo do estudo para todas as fórmulas investigadas.

[00064] A porção (1 ) foi coletada e submetida à extração de RNA total. A qualidade do RNA extraído foi validada qualitativa (Bioanalyzer microcapillary electrophoresis) e quantitativamente (Nanodrop spec- trophotometer). A partir do RNA, foi confeccionado o cDNA e este foi submetido à etapa de RT-PCR (Polymerase - Chain Reaction) em tempo real para avaliação da expressão de 180 genes utilizando a plataforma customizada Taqman PCR Array (ThermoFisher). Os genes testados foram aqueles listados na tabela 1 com o auxílio do equipamento StepOne Plus (Life Technologies). O perfil de expressão gênica e seleção dos genes diferencialmente expressos foram realizados com o auxílio do Expression Suite Software v.1.0.3 (Life Technologies). Os valores de ACt para o gene referência GAPDH (glyceraldehyde-3- phosphate dehydrogenase) e o gene alvo foram calculados pela sub- tração dos valores dos grupos experimentais. Posteriormente, o ACt do grupo experimental foi subtraído do grupo controle (explante de pele sem tratamento) para a obtenção do ΔΔΟί. Por fim, a quantificação relativa dos genes alvos foi determinada pela equação: RQ = 2-ΔΔΟΐ. Foram selecionados apenas os genes que apresentaram um threshold de 1 ,3, ou seja, 30% de aumento ou redução em relação ao controle. A significância estatística foi avaliada pelo teste-t acompanhado do método de Benjamini-Hochberg (FDR - false discovery rate), sendo que p-value < 0,05 foram considerados significantes. Os valores detectados como estatisticamente significantes foram carregados no software Ingenuity Pathway Analysis (IPA) (http://www.ingenuity.com). Para investigar as relações funcionais entre os genes identificados. Para cada via/rede estabelecida foi gerado um p-score [p-score = -Iog10 (p- value)] refletindo a probabilidade de esta rede ser gerada ao acaso e onde o p-value foi calculado pelo Fisher's exact test. Isso significa que se uma via tem um p-score de 10, a chance de esta rede ser gerada ao acaso é menos do que 1 em 1010. Esses resultados mostram os genes e funções moduladas pelas composições e métodos da presente invenção.

[00065] A porção (2) foi coletada, fixada em paraformaldeído 4% (pH 7,4) por 24 horas e crioprotegidas em solução de sacarose 30% por 48 horas. Em seguida, cortes seriados de 10 μηι foram coletados diretamente em lâminas silanizadas com o auxílio de Criostato (Leica - CN1850). Ao término da coleta dos cortes, os mesmos foram submetidos a lavagens com PB 0,1 M e incubados overnight com anticorpos referentes a proteínas de interesse selecionadas. Em seguida, as lâminas foram analisadas em Microscópio de Fluorescência (Leica - DM 1000) com auxílio do Software LAS (Leica Application Suite). O parâmetro avaliado foi a intensidade de fluorescência emitida pela marcação com anticorpo específico. Para análise estatística foi utilizada a análise de variância (ANOVA). Em todos os grupos estudados, foram considerados estatisticamente significativos aqueles cujos valores de P foram inferiores a 0,05.

Composição 1 (30+)

[00066] Foram investigados o controle não tratado, uma composi- ção de base cosmética isenta de princípios ativos, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,025% de Camellia sinensis, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,125% de espilantol e uma base cosmética idêntica incluindo 0,025% de Camellia sinensis e 0,125% de espilantol.

[00067] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, foi observado que a composição compreendendo Camellia sinensis foi capaz de modular 95 genes, a composição compreendendo espilantol foi capaz de modular 101 genes e a composição compreendendo combinação 0,025% de Camellia sinensis e 0,125% de espilantol foi capaz de modular 1 10 genes. Os principais mecanismos identificados incluem estímulo ao sistema antioxidante endógeno, estímulo a moléculas de adesão (desmossomos), anti- inflamatório, estímulo de fibras elásticas, formação do envelope corni- ficado / reforço de barreira e estímulo de colágeno.

[00068] No que diz respeito à expressão proteica, foi observado um efeito sinérgico da combinação de espilantol e Camellia sinensis para a proteína involucrina (marcador de diferenciação celular), uma vez que a composição compreendendo Camellia sinensis (chá verde) e a composição compreendendo espilantol promoveram aumento de 24,7% e 31 ,4%, respectivamente, enquanto a composição compreendendo a combinação promoveu aumento de 78% na expressão dessa proteína (figuras 1A e 1 B).

[00069] Além disso, a combinação espilantol e Camellia sinensis promoveu aumento de 240% na expressão da proteína ki-67, que é um marcador de proliferação celular (figuras 2A e 2B).

Composição 2 (45+)

[00070] Foram investigados o controle não tratado, uma composição de base cosmética isenta de princípios ativos, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,25% de xiloglucano de jatobá, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 1 ,5% de Sepicaim e uma base cosmética idêntica incluindo 0,25% de xiloglucano de jatobá e 1 ,5% de Sepicaim.

[00071 ] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observou-se que a amostra xiloglucano de jatobá foi capaz de modular 1 14 genes, a amostra Sepicaim foi capaz de modular 128 genes e a combinação de xiloglucano de jatobá e Sepicaim foi capaz de modular 153 genes. Os principais mecanismos identificados foram firmeza, estímulo de fibras elásticas, diferenciação celular, preenchimento, hidratação, anti- inflamatório, coesão dermo-epiderme e formação do envelope cornificado / reforço de barreira.

[00072] No que diz respeito à expressão proteica, a combinação xiloglucano de jatobá e Sepicaim promoveu aumentos de 122,4% na expressão da proteína colágeno (Figuras 3A e 3B), 37,2% na expressão da proteína elastina (Figuras 4A e 4B) e de 25,3% na expressão da proteína ácido hialurônico (Figuras 5A e 5B).

Composição 3 (60+)

[00073] Foram investigados o controle não tratado, uma composição de base cosmética isenta de princípios ativos, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,05% de Casearia sylvestris e cerca de 0,0125 de Schinus terebinthifolius, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 2% de Paeonia albiflora e uma base cosmética idêntica incluindo 0,05% de Casearia sylvestris, 0,0125% de Schinus terebinthifolius e 2% de Paeonia albiflora.

[00074] Com relação à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observou-se que a amostra extrato de guaçatonga + extraio de aroeira foi capaz de modular 151 genes, a amostra Volunage foi capaz de modular 1 17 genes e a combinação de extrato de guaçatonga + extrato de aroeira + volunage foi capaz de modular 162 genes. Os principais mecanismos identificados foram firmeza, estímulo de fi- bras elásticas, preenchimento, hidratação, anti-inflamatório, coesão dermo-epiderme, formação do envelope cornificado e reforço de barreira.

[00075] Com relação à expressão proteica, a combinação extrato de guaçatonga e extrato de aroeira e Volunage promoveu aumentos de 140,4% na expressão da proteína colágeno I (figura 6A e 6B), 34,1 % na expressão da proteína elastina (figura 7A e 7B) e de 27,8% na expressão da proteína ácido hialurônico (figura 8A e 8B).

Composição 4 (70+)

[00076] Foram investigados o controle não tratado, uma composição de base cosmética isenta de princípios ativos, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 0,3% de ceramidas de maracujá, uma composição de base cosmética idêntica incluindo 3% de Vederine e uma base cosmética idêntica incluindo 0,3% de ceramidas de maracujá e 3% de Vederine.

[00077] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observamos que a amostra ceramida de maracujá foi capaz de modular 148 genes, a amostra Vederine foi capaz de modular 151 genes e a combinação de ceramida de maracujá e Vederine foi capaz de modular 146 genes.

[00078] Em relação à expressão proteica, a combinação ceramida de maracujá e Vederine promoveu aumentos de 35,5% na expressão da proteína involucrina (Figuras 9A e 9B) e de 27,5% na expressão da proteína Claudina I (Figura 10A e 10B).

Composição 5 (elixir)

[00079] Foram investigados o controle não tratado, placebo, uma composição cosmética contendo a combinação de espilantol e ácido hialurônico (elixir redutor de rugas), espilantol 0,25%, ácido hialurônico 5% e a combinação de espilantol 0,25 e ácido hialurônico 5%.

[00080] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao con- trole não tratado, observou-se que a amostra espilantol foi capaz de modular 163 genes, a amostra Ácido Hialurônico foi capaz de modular 146 genes e a combinação de espilantol e Ácido Hialurônico foi capaz de modular 149 genes. Em relação ao controle não tratado, observou- se um efeito uma vez superior em relação ao colágeno I (mecanismo de firmeza), ácido hialurônico (mecanismo de preenchimento), Claudina I (mecanismo de comunicação célula-célula), duas vezes superior em relação à elastina (estímulo de fibras elásticas), involucrina (mecanismo de diferenciação celular), ki-67 (mecanismo de proliferação - renovação celular), SOD2 (mecanismo antioxidante), integrina B1 ou B4 (mecanismo coesão derme-epiderme) e de cinco vezes superior em relação ao IL-10 (mecanismo anti- inflamatório).

[00081 ] Em relação à expressão proteica, a combinação de espilantol e Ácido Hialurônico promoveu aumento de 56% na expressão da proteína colágeno I (Figuras 1 1 A e 1 1 B).

Composição 6 (sérum)

[00082] Foram investigados o controle não tratado, placebo, uma composição cosmética contendo a combinação de Hymenaea courbaril, Paeonia albiflora, Secale cereale e Avena sativa (sérum firmeza), Hymenaea courbaril (Jatobá 0,5%), Paeonia albiflora, Secale cereale e Avena sativa (Volunage 2% + Osilift 4% + Coheliss 4%) e a combinação de Hymenaea courbaril, Paeonia albiflora, Secale cereale e Avena sativa (Jatobá 0,5% + Volunage 2% + Osilift 4% + Coheliss 4%).

[00083] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observou-se que a amostra Jatobá 0,5% foi capaz de modular 147 genes, a amostra Volunage 2% + Osilift 4% + Coheliss 4 foi capaz de modular 144 genes e a combinação de Jatobá 0,5% + Volunage 2% + Osilift 4% + Coheliss 4% foi capaz de modular 121 genes. Observou-se que a combinação de acordo com a presente invenção apresentou efeito uma vez superior em relação ao controle não tratado no colágeno (mecanismo de firmeza), ácido hialurônico (mecanismo de preenchimento) e integrina B1 ou B4 (mecanismo de coesão der- me-epiderme), bem como duas vezes mais em relação ao controle não tratado de elastina (mecanismo de estímulo de fibras elásticas), invo- lucrina (mecanismo de diferenciação celular), SOD2 (mecanismo do sistema antioxidante endógeno).

[00084] Em relação à expressão proteica, a combinação Jatobá 0,5% + Volunage 2% + Osilift 4% + Coheliss 4% promoveu aumentos de 39% na expressão da proteína colágeno I (Figuras 12A e 12B) e 50% na expressão da proteína elastina (Figuras 13A e 13B).

Composição 7 (preenchedor)

[00085] Foram investigados o controle não tratado, placebo, uma composição cosmética contendo a combinação de Casearia sylvestris, Schinus terebinthfolius e ácido hialurônico (preenchedor), combinação de Casearia sylvestris, Schinus terebinthfolius (guaçatonga 1 % + aroeira 0,025%), ácido hialurônico 5% e a combinação de Casearia sylvestris, Schinus terebinthfolius e ácido hialurônico (guaçatonga 1 % + aroeira 0,025% + ácido hialurônico 5%).

[00086] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, observou-se que a amostra Guaçatonga e Aroeira foi capaz de modular 153 genes, a amostra Ácido Hialurônico foi capaz de modular 162 genes e a combinação de Guaçatonga e Aroeira e Ácido Hialurônico foi capaz de modular 144 genes. Observou-se que a combinação de acordo com a presente invenção apresentou efeito uma vez superior em relação ao controle não tratado na Claudina I (mecanismo de comunicação célula-célula) e no ki-67 (mecanismo de proliferação - renovação celular), duas vezes superiores na elastina (estimulo de fibras elásticas), SOD2 (mecanismo do sistema antioxidante endógeno) e integrina B1 ou B4 (mecanismo de coesão derme- epiderme), quatro vezes superior no IL-10 (mecanismo anti- inflamató- rio) e sete vezes superior em relação à involucrina (mecanismo de diferenciação celular).

[00087] Em relação à expressão proteica, a combinação da presente invenção promoveu aumentos de 31 ,4% na expressão da proteína colágeno I (Figuras 14A e 14B), de 130% na expressão da proteína elastina (Figura 15A e 15B) e de 56% na expressão da proteína ki-67 (Figuras 16A e 16B). Para a proteína involucrina, foi observado que a combinação de acordo com a presente invenção promoveu aumento de 1 1 1 ,3% na expressão da proteína (Figura 17A e 17B).

Composição 8 (gel)

[00088] Foram investigados o controle não tratado, placebo, uma composição cosmética contendo a combinação de Schinus terebinthfolíus e cafeína (clareador), Schinus terebinthfolíus (Aroeira 0,35%), cafeína (Ecoslim 1 %) e mistura de Schinus terebinthfolíus e cafeína (Aroeira 0,35% + Ecoslim 1 %).

[00089] No que diz respeito à expressão gênica, em relação ao controle não tratado, foi observado que a amostra Aroeira foi capaz de modular 157 genes, a amostra Ecoslim foi capaz de modular 162 genes e a combinação de Aroeira e Ecoslim foi capaz de modular 160 genes, particularmente apresentando desempenho três vez vezes superior em relação ao controle não tratado em relação ao colágeno I (mecanismo de firmeza), quatro vezes em relação à elastina (estímulo de fibras elásticas), duas vezes em relação à Claudina I (comunicação célula-célula), quatro vezes em relação à involucrina (diferenciação celular), quatro vezes em relação à SOD2 (coesão derme-epiderme), oito vezes superior em relação à IL-10 (anti-inflamatório). Em relação à expressão proteica, a combinação de Aroeira e Ecoslim promoveu aumentos de 123% na expressão da proteína colágeno I (figura 18A e 18B) e de 212,2% na expressão da proteína elastina (figura 19A e 19B). [00090] O homem da técnica saberá prontamente avaliar, por meio dos ensinamentos contidos no texto e nos exemplos apresentados, vantagens da invenção e propor variações e alternativas equivalentes de realização, sem fugir ao escopo da invenção, conforme definido nas reivindicações anexas.