【발명의 명칭】

수국 발효물을 함유하는 피부자극 완화 및 피부염증 완화용 화장료 조성물 【기술분야】

본 발명은 피부염증 완화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 수국 발효물을 함유하는 피부자극 완화 및 피부염증 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.

【배경기술】

피부의 가장 중요한 기능 중 하나는 장벽으로서의 보호기능이다. 외부 환경에 직접 노출되는 피부는 체액의 손실을 막고 유해한 환경으로부터 신체를 보호하는 가장 중요한 일차 방어선이다. 또한， 독성 물질이나 미생물， 물리적인 자극이나 자외선에 대한 장벽기능을 수행한다. 그러나 이러한 피부장벽기능이 피부 외 · 내부의 다양한 자극들을 받게 되면， 피부장벽이 손상되어 피부가 건초해지거나 피부에 염증반웅을 일으키게 된다. 아울러 이때 발생되는 초기 염증반웅을 효과적으로 제어하지 못하면 심한 피부염으로 악화 될 수 있다.

그런데 인구증가 , 도시화， 산업화 및 자동차 증가 등의 영향으로 대기오염이 심화되고 있으며， 이에 따라 오염물질의 종류가 다양해지고 있다. 특히 우리나라의 위치적인 요인으로 중국에서 배출되는 대기오염 물질의 이동으로 인한 황사와 미세먼지 등의 피해에 직면하고 그 심각성도 높아지고 있다. 미세먼지 (part i culate matter )는 입자의 크기에 따라 지름이 10 이하인 미세먼지 (PM10) , 2.5 이하인 초미세먼지 (PM2.5)로 분류된다. 우리나라 환경부는 PM10을 대기오염물질로 규제하고 있다. 이런 미세먼지 등 대기오염물질은 호흡기질환과 심장질환을 유발한다고 알려져 있으며 이와 함께 신체에 넓은 면적을 차지하고 있는 피부에 미치는 영향 또한 그 관심이 점차 확대되고 있다. 특히 대기오염물질 중 미세먼지는 표피장벽기능을 손상시키고 아토피피부염을 악화시킨다는 보고가 있다. 또한 민감성 피부는 외부의 자극이나 환경의 변화에 대하여 일반적인 피부보다 민감하게 반웅하여 자극이나 피부염 증상을 보인다. 이러한 민감성 피부를 가진 사람은 정상적인 사람에 비해 미세먼지에 자극을 느끼는 정도도 더 민감하여 3배 이상의 자극감을 느낀 연구가 있었다. 따라서 미세먼지 등의 공해 물질은 특히 민감성 피부를 가진 사람들에게 피부 문제를 일으킬 가능성이 높다. 이는 피부노화에도 영향을 미치는데 최근 역학적 연구에서 미세먼지에 노출된 피부가 주름과 색소반점이 증가되어 노화와 직접적인 관련이 있다고 밝혔다. 미세먼지는 활성산소를 생산하여 콜라겐 합성을 저해하고 분해를 활성화시킬 수 있고 미세먼지 표면에 흡착된 P polycycl i c aromat i c hydrocarbon) 가 AhR을 통하여 생체 이물 대사를 활성화하여 콜라겐 분해를 증가하여 피부노화가 발생한다. 이에 따라 미세먼지와 피부의 직접적인 접촉을 줄이는 방법과 분자학적 기전에 대한 연구를 통한 새로운 치료법을 모색해야한다.

피부에서의 염증반웅 ( inf lammatory response)은 물리적 자극이나 화학물질 세균 등에 의해 피부손상이 유발될 때 이를 방어하기 위한 작용으로서 시작되며 다양한 면역세포와 염증 유도사이토카인이 관여한다. IL-6( inter leukin-6) , IL- 8( inter leukin-8) , IL-Ιβ ( inter leukin- β ) 등이 대표적인 염증 유도 사이토카인이다. IL-Ι β는 활성화된 단핵식균세포, 상피세포， 혈관내피세포에 의해 만들어져 염증 반웅을 매개하는 전형적인 사이토카인이고， IL-6는 T 세포 및 대식세포에 의해 분비되어 면역 반웅을 자극하며 염증 반웅을 조절하는 사이토카인이다. 또한 활성화된 대식세포 (macrophage)는 염증 유도 사이토카인뿐만 아니라 일산화질소 (ni tr i c oxide : NO)나 프로스타글란딘 (prostagladin) E2(PGE2)를 과도하게 생성하여 염증 과정을 더욱 활성화시킨다. 촉진 및 항염증 미세먼지 입자는 사람 각질형성세포에서 이러한 염증유도사이토카인의 발현을 증가시킨다는보고가 있다.

종래， 천연추출물을 이용하여 피부에 항염 기능을 부여할 수 있는 화장료를 개발하기 위한 다양한 시도가 있어왔으며， 그 전형적인 예로서는 한국공개특허 제 2007-0011939호는 동백꽃 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제안하고 있고， 한국공개특허 제 2010-0086698호는 녹두 발효 -효소 추출액을 포함하는 피부진정 및 자극완화용 화장료 조성물을 제안하고 있으며， 한국공개특허 제 2013-0016930호는 세이지， 레몬밤， 우뭇가사리 및 양파 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부 및 피부 자극 완화용 화장료 조성물을 언급하고 았다. 또한 한국공개특허 제 2015-0078948호는 겨우살이， 소나무 ¾질 및 바위솔 흔합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부염증 개선 또는 피부 자극 완화용 화장료 조성물을 제안하고 있고， 한국공개특허 제 2009-0091547호는 한련초와 사상자의 흔합추출물을 함유하는 항염 및 피부자극 완화용 화장료 조성물을 제안하고 있다. 그러나 상기한 화장료 조성물 어느 것도 본 발명과 같은 수국 발효 추출물의 피부자극 완화 및 피부염증완화 효과에 대해서는 기재하고 있지 않다 .

이에， 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점을 극복하기 위하여 연구 노력한 결과, 다양한 자극, 특히 미세먼지 자극에 의해 증가된 염증 사이토카인이 피부 자극 및 피부염증과 관련이 있음을 인지하고 이를 개선하는 물질을 발굴하고자 염증 사이토카인의 발현을 억제하는 식물 추출물을 스크리닝하여 비교 선별하였으며, 그 중 수국추출물을 발효한 발효물의 경우， 염증 유도 사이토카인인 IL-6 , IL-8 및 IL-Ιβ의 발현을 억제함으로써 피부자극 및 피부염증을 완화시키는 효능이 있음을 확인함으로써， 본 발명을 완성하게 되었다.

【발명의 상세한설명】

[기술적 과제】

따라서， 본 발명의 주된 목적은 다양한 자극， 특히 미세먼지 자극에 의해 증가된 염증 유도 사이토카인인 IL-6 , IL-8 및 IL-Ιβ의 발현을 억제함으로써 피부자극 및 피부염증을 완화시카는 효능을 갖는 수국 발효물을 함유하는 피부염증 완화용 화장료조성물을 제공하는 데 있다.

또한 본 발명의 또다른 목적은 본원발명의 수국 발효물은 기능성 화장료 조성물의 베이스 제형으로 적용되어 피부자극 완화 및 피부염증완화 효과를 부여함으로써 피부 트러블 예방 및 개선， 흥조 개선， 피부염 예방 및 개선을 도모할수가 있는 화장료조성물을 제공하는 데 있다. 【기술적 해결방법】

본 발명의 한 양태에 따르면 , 본 발명은 수국 발효물을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화 및 피부염증 완화용 화장료조성물을 제공한다.

수국 Ulydrangea macrophyUa은 장미목 범의귀과의 낙엽관목으로 꽃은 6~7월에 피고 처음에는 연한 자주색이던 것이 하늘색으로 되었다가 다시 연한흥색이 된다. 꽃 색이 토양에 따라 중성이면 흰색， 산성이면 청색, 알칼리성이면 분홍색으로 변한다. 갈잎떨기나무로 달갈형인 잎은 마주나기를 하고 가장자리에는 톱니가 있으며 길이가 10~15cm나 되며 잎 끝이 갑자기 뾰족해 진다. 초여름 풍성하게 꽃이 피어 정원수로 더 많이 알려져 왔으나 심장질환을 치료하는 한약재 및 해열제로서도 효능이 알려져 있다. 주로 뿌리를 포함한 전초를 사용한다. 이외 미백효과 (한국공개특허 제 2014-0082555호)， 피부 노화 현상 개선효과 (한국공개특허 제 2009-0081178호)등이 알려져 있다. 그러나 본 발명과 같이 이화발효를 통한수국 발효추출물의 외부 자극에 대한 피부염증개선 효과에 대해서는 언급하고 있지 않다.

이에， 본 발명자들은 수국 발효물이 염증 유도 사이토카인의 발현을 억제함으로써 피부자극 및 피부염증을 완화시킬 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본ᅳ발명^ 1 있^서，ᅳ상기—ᅳ슷국ᅳ발효물은숟국후출� �을 이화곡을 이-용하여— 발효시켜 얻는 것을특징으로 한다.

상기 '이화곡을 이용하여 발효' 시키는 것이란， 이화곡과 물을 흔합하여 배양하는 것을 의미하며, 구체적으로 이화곡 10%， 수국 추출물 1¾， 남은 중량부는 물 89% 비율로 흔합하여 25t；， 4일간 혐기배양하여 제조하는 것을 의미한다.

본 발명에 있어서， 상기 이화곡은 쌀로 빚은 누룩을 의미하며， 바람직하게는 쌀로 빚은 떡에 코지 배양물 및 효모 액상 배양물을 접종하여 제조한 것을특징으로 한다.

상기 코지 배양물은 구체적으로， 수분 38~42%로 보정한 쌀을 121 ^° C , 30분간 멸균한후， 황국균을 (Aspergi l lus oryzae) 접종하여 배양 및 건조한고체 배양물 (Koj i )이다. 또한， 효모 액상배양물 (Saccharomyces cerevi s i ae)은 효모를 potato dextrose 액상배지에서 배양한 배양물을 말한다.

본 발명에 있어서， 상기 수국 추출물은 종래에 사용된 어떠한 용매로도 추출될 수 있으며， 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올， 부틸렌글리콜， 프로필렌글리콜， 글리세린 또는 이들의 흔합용매로 추출하는 것을 특징으로 한다.

상기 추출용매를 이용한 추출방법으로는 통상적인 식물의 추출방법 예를 들면， 열수 추출， 환류넁각추출， 초음파추출， 초임계 추출 등의 방법을사용할 수 있으며, 구체적으로는 수국을 파쇄하여 분말을 만들고, 상기 전술한 추출 용매 중에 침적하여 24내지 72시간동안실온추출하였다.

본 발명에 있어서， 상기 수국 발효물은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.001 내지 30 중량 %함유하는 것을 특징으로 한다. 수국 발효물이 0.001 중량 ¾미만일 경우 피부염증완화 효과가 미약하게 될 우려가 있어 바람직하지 못하며, 역으로 30중량 ¾>를 초과하는 것은 경제성 측면에서 바람직하지 못할수 있다.

본 발명에 있어서， 상기 수국 발효물은 염증 사이토카인을 억제함으로써 피부자극 및 피부염증을완화시키는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 실험예에 따르면， 미세먼지로 인해 증가된 염증 사이토카인의 억제 효과를 확인한 결과， 본원발명의 수국 발효물의 경우 우수한 억제 효과를 보였으며, 특히 발효하지 않은 수국 추출물보다 피부염증 억제효과가 더 우수한 것을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때， 본원발명의 수국 발효물은 염증 유도 사이토카인들을 억제함으로써 피부염증을 완화시킬 수 있을 뿐만 아니라 미세먼지와 같은 피부자극도 완화시킬 수 있음을 알수 있다.

또한， 미세먼지에 의한 표피층의 자극완화 효과를 확인한 결과， 본원발명의 수국 발효물의 경우 자극에 의해 손상된 표피층과 표피 세포가 회복됨을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때 수국 발효물은 미세먼지에 의한 자극에 의한표피층손상을 완화 시킬 수 있음을 알수 있다.

본 발명에 있어서， 상기 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수， 영양 에센스， 영양 오일， 보습.오일， 영양 크림， 파우더， 팩， 파운데이션, 메이크업 베이스， 클렌징, 샴푸, 로션 맟연고로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형인 것을특징으로 한다.

발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 발효물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며， 예를 들면， 안정화제， 용해화제 , 비타민， 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

【유리한효과】

이상 설명한 바와 같이， 본원발명의 수국 발효물은 다양한 자극， 특히 미세먼지에 의해 과발현된 염증유도사이토카인 ( ( IL-6, IL-8, IL-Ιβ )의 발현을 효과적으로 억제하여 피부자극 및 피부염증을 완화시킬 수 있다. 【도면의 간단한 설명】

도 1은 염증 유도 사이토카인 중 IL-6 유전자 발현 억계 정도를 나타내는 실험예 1에 대한 결과를 나타내는 도면이다.

도 2는 염증 유도 사이토카인 중 유전자 발현 억제 정도를 나타내는 실험예 1에 대한 결과를 나타내는 도면이다.

도 3은 염증 유도 사이토카인 중 IL— 1β 유전자 발현 억제 정도를 나타내는 실험예 1에 대한 결과를 나타내는 도면이다.

도 4는 미세먼지에 의해 손상된 표피층이 수국 이화발효 추출물 처리 시 회복됨을 측정한 결과에 대한 사진을 나타내는 도면이다.

【발명의 실시를 위한 형태】

이하， 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로， 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다. 실시예 1 : 수국 추출물의 제조

수국을 분말화 한 후 각각 100g씩 취하여 각각 별개의 용기에 넣고， 추출용매로서 70중량 % 에탄올 수용액 1L에 침적하여 24 시간 동안 실온에 방치하여 추출액을 얻었다. 얻어진 추출액을 여과지를 이용하여 여과를 한 다음 여액을 회전식 증발 건조기로 감압 농축하여 추출물을 얻었다. 실시예 2: 수국발효물의 제조

수국 발효물은 상기 실시예 1에서 얻은 수국 추출물을 이화곡을 이용하여 제조하였다. 이화곡은 코지 배양물과 효모 액상 배양물 두 종류의 종균을 사용하는 것을특징으로 한다.

코지 배양물은 수분 38~42%로 보정한 쌀을 121 ^° C , 30분간 멸균한 후， 황국균을 (Aspergi l lus oryzae) 접종하여 배양 및 건조한 고체 배양물 (Koj i )이다. 효모 액상배양물 (Saccharomyces cerevi siae)은 효모를 potato dextrose 액상배지에서 배양한배양물을 말한다.

본 발명의 이화곡은 하기의 방법으로 만들어지는데， 먼저 세척한 쌀 100 중량부를 60°C에서 20~24시간 건조한 후, 분쇄를 한다. 약 40 메쉬의 체를 통과한 분말을 회수하여 수분함량이 40~45%되도록 가수한 후， 등글게 빚어 성형한다. 동그란 쌀을 구멍 떡으로 다시 성형한후 100 ^° C에서 1시간 증자한다. 미리 배양된 2종류의 코지 배양물과 효모 액상 배양물을 각 중량부의 1¾가 되게 접종하여 배합한다. 25 ^° C에서 4일간호기 배양하여 이화곡을 완성한다.

수국 이화발효물은 이화곡 1 , 수국 추출물 1%， 남은 중량부는 물 89% 비율로 혼합하여 25 ^° C , 4일간 혐기배양하여 제조하여 이하의 실험예 1에 사용하였다. 실험예 1 : 항염증 효능의 평가

발효추출물의 항염증 효과를 평가하기 위해 염증 유발 사이토카인인 IL-1 β , IL-6 , IL-8에 대해 미세먼지 (PM10)를 처치하여 그 발현량을 측정하였다. 보다 상세하게는 각질형성세포인 HaCaT 세포에 대해 미세먼지를 처치하고， 실시예 1 및 2에서 만들어진 각 원료를 최종 농도가 가 되도록 하여

4시간동안배양하였다. 이어 세포 내에 mRNA를 추출하여 cDNA로 합성하고， 타겟 주형 (pr imer )을 사용하여 실시간 (real_t ime) PCR을 실시하여 최종적으로 염증 사이토카인의 유전자발현 정도를 평가하였다. 그 결과를 도 1~3에 나타내었다. 그 결과， 도 1~3에서 나타나는 바와 같이， 미세먼지에 의해 각각와 사이토카인이 유발될 때 수국 추출물과 수국 발효 추출물의 그 억제 정도를 평가할수 있었고， 이화발효추출물이 모든 사이토카인에 대해 가장높고 현저한 유발억제 효과를 나타냈다. 따라서 본 발명에 의한 발효 추출물은 발효 전보다 높은 항염 효과를 갖는 화장료 조성물에 매우 유용한 원료임을 확인 할 수 있었다. 실험예 2 : 표피 자극완화효과의 평가

피부 표피 자극 완화효과를 평가하기 위해 3차원으로 배양된 인공피부조직을 이용하여 미세먼지에 의해 자극 ·손상된 표피층의 완화 효과를 평가하였다. 먼지 미세먼지 (PM10) 을 인공 피부 표면에 도포하고 실시예

1 및 2 에서 얻은 수국 추출물 및 수국 이화발효 추출물을 배지에 10 g/ 농도로 처리하였다. 24시간 추가 배양한 후 포르말린에 고정한 후 paraf f in block을 제조하여 H&E 염색하였다. 이를 통해서 표피층의 각질층과 각질형성세포의 형태를측정하였다. 또한, 측정한 결과를 도 4에 나타내었다. 그 결과， 도 4에서 나타나는 바와 같이， 미세먼지 처리에 의해 손상된 인공피부조직의 각질층이 완화됨을 확인하였다. 또한 기저층의 각질형성세포의 밀도와 모양이 회복됨을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명에 의한 발효 추출물은 자극에 의해 손상된 표피층의 자극완화 효능을 갖는 화장로 조성물에 매우 유용한 원료임을 확인 할수 있었다. 제형예 1 : 화장수 제조

상기 실시예 2에서 얻은 발효추출물을 함유하는 화장수를 하기의 표 1에 나타낸 조성 성분 및 조성비에 따라통상적인 방법으로 제조하였다.

【표 11

제형예 2: 영양에센스의 제조

실시예 2에서 얻은 발효 추출물을 함유하는 수분 크림을 하기의 표 2에 나타낸 바와 같은조성 성분 및 조성비에 따라통상적인 방법으로 제조하였다. 【표 2】

제형예 3 : 보습크림

실시예 2에서 얻은 발효 추출물을 함유하는 보습 크림을 하기의 표 3에 나타낸 바와 같은조성 성분 및 조성비에 따라통상적인 방법으로 제조하였다.

【표 3】 성분 함량 (중량 %)

수국 이화발효 추출물 1 .0

글리세린 7.0 부릴렌글라이콜 5.0

글리세릴스테아레이트 /피이지 -1 00스에아레이트 2.0

풀리솔베이트 60 0.5

소르비탄 스테아레이트 0.5

피토스쿠알란 5.0

호호바 오일 3.0

카프릴릭 /카프릭 트리그리세라이드 1 0.0

알로에버터 3.0

밀납 1 .0

스테아릴 알코올 0.5

베헤릴 알코올 0.5

스테아린산 0.5

카르복실비닐플리머 0.2

잔탄검 0.2

아르기닌 0.3

디메치콘 0.5

베타글루칸 0.2

방부제 , 향료 적량

정제수 잔량

【산업상 이용가능성】

이상 설명한 바와 같이， 본 발명에 따르면 본 발명에 따른 수국 발효물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 염증 유도 사이토카인 ( IL-6 , IL-8 , IL- 1β )의 발현을 억제하여 피부자극 및 피부염증완화를 나타냄으로써， 궁극적으로 피부 트러블 예방 및 개선， 홍조 개선， 피부염 예방 및 개선 등의 용도에 효과적으로 적용할수 있다. 참조문헌

(특허문헌 0001) KR 10-2007-0011939 A (특허문헌 0002) KR 10-2010-0086698 A (특허문헌 0003) KR 10-2013-0016930 A (특허문헌 0004) KR 10-2015-0078948 A (특허문헌 0005) KR 10-2009-0091547 A