CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a uma composição cosmética contendo alfa-hidróxiácidos (AHAs) e seu uso. A referida composição apresenta ação calmante e desempenha a função de renovação celular, sem apresentar os efeitos adversos relativos à irritação cutânea. Particularmente, a formulação desempenha a função de prevenção/inibição da síntese de histamina por meio da combinação de polihidróxiácido com compostos alfa-hidróxiácidos , evitando o aparecimento de reações de irritação, prurido e eritema. Mais especificamente, os compostos alfa-hidróxiácidos compreendem ácido glicólico, ácido lático, ácido málico e ácido mandélico e o polihidróxiácido compreende ácido lactobiônico .

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Por ser o maior órgão do corpo humano, a pele é continuamente exposta a uma variedade de agentes, que podem resultar em alterações em nível molecular, por exemplo, flacidez e rugas. Tais agentes podem ser originados pelo ambiente externo, incluindo radiação solar e poluentes atmosféricos, e pelo ambiente interno, incluindo compostos reativos originados durante o metabolismo normal do organismo ou em decorrência de um distúrbio externo.

A renovação celular é vital para a saúde da pele, pois é responsável pela redução do espessamento da camada córnea, deixando a pele mais lisa e uniforme. Com o passar dos anos, esse processo de renovação celular se torna menos eficiente, resultando na perda de elasticidade da pele e no consequente envelhecimento cutâneo. Por esse motivo, formulações cosméticas com propriedades antienvelhecimento têm sido amplamente estudadas e desenvolvidas recentemente.

Composições contendo alfa-hidróxiácidos (AHAs) têm se mostrado bastante eficazes no combate ao envelhecimento cutâneo. Esses compostos são utilizados em tratamentos dermatológicos, onde sua aplicação tópica estimula o processo de renovação celular, garantindo a revitalização de peles com perda de luminosidade, desvitalizadas e fotoenvelhecidas .

No entanto, ainda há dificuldades no tratamento de distúrbios dermatológicos, pois apesar de apresentarem benefícios cosméticos, tais como melhoria no tratamento de marcas relacionadas à idade, rugas e outros sinais de envelhecimento, os AHAs podem apresentar efeitos adversos relativos à irritação cutânea quando utilizados em altas concentrações (até 10% do peso de uma formulação cosmética destinada a uso doméstico) .

Nardin & Guterres (1999) revelam que produtos contendo AHAs são amplamente utilizados para o tratamento antienvelhecimento cutâneo. Além disso, ainda que se realize um ajuste do pH da formulação para que o tratamento fique compatível com o pH da pele (4,2-5,6), muitos produtos contendo AHAs são irritantes à pele sensível ou atópica. As principais reações adversas causadas pelos AHAs incluem eritema severo, inchaço, queimação, coceira, entre outros .

0 documento WO0015179 revela o uso de composições contendo alfa-hidróxiácidos e, adicionalmente, ácido petroselínico . Já os poli-hidroxiácidos (PHAs) são alfa-hidroxiácidos que além da renovação celular, promovem uma ação umectante e antioxidante .

Os principais compostos poli-hidróxiácidos são o ácido lactobiônico , ácido glucônico e a gluconolactona .

0 ácido lactobiônico pode ser encontrado no leite. Esse composto possui forte atividade antioxidante, sendo bastante usado comercialmente em soluções para a preservação de órgãos transplantados.

Embora a utilização de composições contendo alfa- hidróxiácidos em tratamentos dermatológicos que promovam a renovação celular seja conhecida do estado da técnica, mostra-se premente o desenvolvimento de uma formulação cosmética que evite o aparecimento de reações de irritação cutânea, mantendo a eficácia no tratamento.

SUMARIO DA INVENÇÃO

A presente invenção objetiva prover uma formulação cosmética contendo uma combinação de poli-hidroxiácido (PHA) com alfa-hidróxiácidos (AHAs) e seu uso para redução de distúrbios dermatológicos decorrentes do uso de AHAs, mantendo a sua eficácia no processo de renovação celular.

Uma primeira concretização da presente invenção refere-se a uma composição cosmética contendo alfa-hidróxiácidos (AHAs) com ação calmante. A nova composição aqui apresentada é formulada com um ou mais compostos AHAs e um ou mais compostos poli-hidróxiácidos. Mais preferencialmente, a composição da presente invenção é formulada com pelo menos quatro compostos AHAs e pelo menos um composto poli-hidroxiácido .

Em uma modalidade preferida, os alfa-hidróxiácidos utilizados na formulação da composição são ácido glicólico, ácido lático, ácido mandélico e ácido málico, sendo que esses compostos estão presentes em uma concentração de 0,1 a 10,0% baseado no peso final da composição. E ainda, o poli-hidroxiácido é o ácido lactobiônico, sendo que sua concentração varia entre 2,0 e 10,0% baseado no peso total da composição final.

Uma segunda concretização da invenção refere-se à formulação cosmética contendo a composição contendo AHAs e um PHA.

Uma terceira concretização da presente invenção está relacionada ao uso da referida composição cosmética em tratamentos dermatológicos antienvelhecimento com o objetivo de promover a renovação celular e prevenir o surgimento de efeitos adversos relativos à irritação cutânea .

Estas características da invenção serão descritas em mais detalhes a seguir.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

A Figura 1 representa a curva concentração-viabilidade celular da formulação cosmética de AHAs.

A Figura 2 mostra o efeito da formulação cosmética de AHAs sobre a produção de histamina em cultura de queratinócitos humanos incubados concomitantemente com interleucina-lalfa (IL-la) .

A Figura 3 ilustra os valores médios obtidos de ITA° (Individual Typology Angle) em cada tempo de avaliação, para a formulação cosmética de AHAs e para o controle.

A Figura 4 ilustra os valores médios obtidos de IRC (índice de Renovação Celular) após 7, 14 e 28 dias para a formulação cosmética de AHAs e para o controle.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

É apresentada, nesta descrição, uma composição cosmética e seu uso como agente promotor de renovação celular. A referida composição compreende a combinação de um ou mais PHAs com um ou mais AHAs com o objetivo de reduzir os sintomas de distúrbios dermatológicos decorrentes do uso de AHAs. Adicionalmente, a referida composição pode compreender o uso de diversos ingredientes cosmeticamente ativos com ação calmante conhecida.

Surpreendentemente, os inventores da presente invenção notaram que a referida composição promove a renovação celular do estrato córneo da pele e desempenha uma ação de prevenção/inibição da síntese de histamina frente a uma concentração alta de alfa-hidróxiácidos .

A formulação da composição é realizada por meio da combinação de um ou mais poli-hidroxiácidos com um ou mais compostos alfa-hidróxiácidos (AHAs), que desempenham a função de agentes queratolíticos .

Exemplos de compostos alfa-hidróxiácidos que podem ser empregados são o ácido benzílico, ácido cítrico, ácido glicólico, ácido lático, ácido málico, ácido mandélico, ácido tartárico, ou uma mistura deles.

Exemplos de compostos poli-hidróxiácidos que podem ser empregados são o ácido glucônico, ácido lactobiônico e a gluconolactona.

Preferencialmente, a formulação da composição é realizada por meio da combinação de pelo menos um poli-hidroxiácido com pelo menos quatro compostos alfa-hidróxiácidos (AHAs)

Mais especificamente, o PHA é o ácido lactobiônico e os compostos alfa-hidróxiácidos (AHAs) são empregados como uma mistura de ácido glicólico, ácido lático, ácido mandélico e ácido málico.

Além dos compostos alfa-hidróxiácidos , podem ser adicionalmente utilizados outros ingredientes ativos na formulação, tais como ácido glicirrizico ou um de seus derivados cosmeticamente aceitáveis, alfa-bisabolol e rhamnosoft (goma biossacaridica) . Esses ativos possuem ação calmante conhecida do estado da técnica.

Os AHAs são ácidos carboxilicos pertencentes à família de ácidos orgânicos. Esses compostos apresentam um grupo carboxila terminal, um ou dois grupamentos hidroxila ligados ao primeiro carbono (posição alfa) e uma cadeia carbónica de comprimento variável. Podem ser obtidos a partir de fontes naturais, tais como frutas, cana de açúcar e mel, ou podem ser sintetizados em laboratório.

0 ácido glicólico é o AHA mais utilizado em cosméticos. É derivado da cana-de-açúcar e possui grande capacidade de penetração na epiderme, atuando na diminuição da espessura da camada córnea hiperqueratínica e promovendo a redução da coesão entre os corneócitos e suas camadas. Além disso, apresenta efeito esfoliativo na pele, proporcionando clareamento e estimulando a síntese de colágeno na derme. Dessa forma, o ácido glicólico age na reversão e prevenção do envelhecimento cutâneo, na melhoria de manchas senis, estrias, cicatrizes de acne, além da aplicação terapêutica de verrugas e em peelings .

0 ácido lático pode ser obtido através da fermentação bacteriana da lactose, que é o açúcar do leite. Além disso, também é produzido pelo corpo humano e faz parte do sistema de hidratação natural da pele, favorecendo a elasticidade das fibras, proporcionando a renovação celular e atuando como rejuvenescedor e clareador.

0 ácido mandélico é derivado da hidrólise do extrato de amêndoas amargas. É o AHA com maior peso molecular, o que faz com que sua absorção cutânea seja mais lenta e homogénea. Essa ação mais homogénea resulta em um efeito menos irritativo do que os outros AHAs . Além disso, o ácido mandélico ajuda a reverter a degeneração do colágeno causada pela radiação solar, sendo bastante utilizado em cosméticos que objetivam o rejuvenescimento cutâneo.

0 ácido málico é uma das fontes naturais de alfa- hidróxiácidos . É encontrado naturalmente em frutas como maçã e pera. Na indústria farmacêutica, é utilizado na higienização e regeneração de ferimentos e queimaduras. Além disso, também pode aumentar a produção de colágeno e combater o envelhecimento da pele provocado pela radiação solar . Os compostos alfa-hidróxiácidos apresentam moléculas de baixo peso molecular e, portanto, caracterizam-se por penetrar rapidamente na pele, o que pode provocar ardência e queimação cutânea.

Diferentemente dos alfa-hidróxiácidos (AHAs), os poli- hidróxiácidos (PHAs) apresentam dois ou mais grupamentos hidroxilas, não necessariamente na posição alfa, formando uma estrutura molecular alifática ou aliciclica (Yu & Van Scott, 1996) . Por apresentarem estruturas moleculares maiores, os PHAs penetram na pele de modo mais suave e gradual do que os AHAs, contornando os efeitos adversos relativos à irritação cutânea.

Apesar de essa ação ser esperada, é totalmente inesperado o fato de que a adição de um composto PHA em uma formulação cosmética contendo AHAs possa apresentar inibição dos efeitos de irritação cutânea normalmente apresentados pelos compostos AHAs, especialmente quando estes estão em altas concentrações .

De acordo com a presente invenção, os termos "ingrediente cosmeticamente ativo", "ingrediente ativo" e "ativo" são usados intercambiavelmente e referem-se aos compostos em uma composição que promovem um efeito cosmético desejado.

De acordo com a presente invenção, o termo "cosmeticamente aceitável", refere-se a compostos que são comumente usados na técnica cosmética em conjunto com ingredientes ativos. Particularmente, "cosmeticamente aceitável" refere-se a compostos os quais confiram, sem limitações, forma, aroma, estabilidade e coloração à composição final, de forma segura e tolerável para um usuário do produto final. Em algumas modalidades, um componente "cosmeticamente aceitável" pode facilitar a absorção de um ou mais ingredientes ativos sob aplicação.

Excipientes cosmeticamente aceitáveis compreendem, sem limitações, agentes de ajuste de pH, condicionantes, conservantes, espessantes, emolientes, emulsionantes, absorventes, aglutinantes, fragrâncias, agentes formadores de filme, solventes, umectantes, antioxidantes, agentes controladores de viscosidade, tensoativos, sequestrantes e veículos .

Exemplos de agentes de ajuste de pH incluem, sem limitações, aminometilpropanol (AMP) , bicarbonato de sódio, carbonato de amónio, hidróxido de potássio, hidróxido de sódio, trietanolamina, fosfato de sódio monobásico e fosfato de sódio dibásico.

Exemplos de condicionantes incluem, sem limitações, ácido glicirrí zico, bisabolol, caprilil meticona e goma biossacarídica-2.

Exemplos de conservantes incluem, sem limitações, fenoxietanol , imidazolidinil ureia, etilhexilglicerina, metilisotiazolinona, metilcloroisotiazolinona, benzoato de sódio, ácido benzóico, álcool benzílico, butilparabeno, cloreto de cetilpiridíneo, cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, etilparabeno, metilparabeno, propilparabeno e misturas dos mesmos.

Exemplos de espessantes incluem, sem limitações, ceras, como cera de abelha, cera de carnaúba e cera de candelila e lanolina, polissacarídeos , dentre os quais amido, gomas, como goma arábica, goma guar, goma xantana, tragacanto, ágar-ágar, carragenatos e alginatos, celulose e seus derivados, como celulose microcristalina, acetato de celulose, carboximetilcelulose e hidroxietilcelulose, estearato de glicerila, polietilenoglicol , polivinilpirrolidona, álcool polivinílico, carbopol, ácido poliacrilico, silanos e derivados, poliacrilatos de alquila, polimetacrilatos de alquila e suas misturas.

Exemplos de emolientes incluem, sem limitações, isononaoato de isononila, sebacato de diisopropila, ácido esteárico e gorduras animais, como lanolina.

Exemplos de emulsionantes incluem, sem limitações, ésteres graxos etoxilados, como triberrenil PEG-20, estearato de PEG-100, mono e diésteres de ácidos graxos, como estearato de glicerila, ácido oleico e derivados, álcoois graxos, como álcool cetoestearilico, álcool cetilico, bem como tensoativos aniônicos, como dodecilsulfato de sódio e lauril éter sulfato de sódio.

Exemplos de absorventes incluem, sem limitações, sílica e amido octenilsuccinato de alumínio.

Exemplos de aglutinantes incluem, sem limitações, cloreto de sódio, goma guar, hidroxietilcelulose e PEG-90M.

Exemplos de fragrâncias incluem, sem limitações, fragrâncias naturais, sintéticas e suas misturas.

Exemplos de agentes formadores de filme incluem, sem limitações, polissilicone-11 ; polímeros catiônicos sintéticos ou naturais, como goma guar quaternizada, poliquatérnios e quitosana; acrilatos e polímeros acrílicos, celulose e derivados. Exemplos de solventes incluem, sem limitações, álcoois, como etoxidiglicol , propanodiol, fenilpropanol , butileno glicol e pentileno glicol.

Exemplos de umectantes incluem, sem limitações, etoxidiglicol, glicerina, lactose, ureia e ácido hialurônico hidrolisado.

Exemplos de antioxidantes incluem, sem limitações, ácido lactobiônico , benzotriazolil dodecil p-cresol e di-t-butil- 4-hidroxihidrocinamato de octadecila.

Exemplos de agentes controladores de viscosidade incluem, sem limitações, álcoois, como propileno glicol e butileno glicol; polímeros naturais, como celulose e derivados, carragenina e derivados; ou polímeros sintéticos, como os polímeros e crospolímeros acrílicos.

Exemplos de tensoativos incluem, sem limitações, os não iónicos, como lauret-12, lauret-23; os iónicos, como lauril sulfato de sódio, lauril éter sulfato de sódio, e os anfotéricos, como betaínas e hidróxisultaínas .

Exemplos de sequestrantes incluem, sem limitações, EDTA, EDTA dissódico, EDTA tetrassódico e suas misturas.

Exemplos de veículos incluem, sem limitações, água, álcoois, como etanol, fenilpropanol e propanodiol e suas misturas .

A composição cosmética pode ser apresentada em diversas formas, incluindo, sem limitações, aerossol, creme, gel, loção e serum. Uma pessoa versada na técnica reconhecerá que a forma cosmética será definida pela escolha dos excipientes cosmeticamente aceitáveis e que a absorção/ação dos diferentes ingredientes ativos poderá variar de acordo com a forma cosmética selecionada.

São descritas a seguir as concentrações para cada ingrediente ativo da formulação cosmética da presente invenção .

0 ácido glicólico está presente em uma faixa de concentração entre 2,0 - 10,0% baseado no peso total da composição final.

0 ácido lático está presente em uma faixa de concentração entre 0,5 - 3,0% baseado no peso total da composição final.

0 ácido málico está presente em uma faixa de contração entre 2,0 - 4,0% baseado no peso total da composição final.

0 ácido mandélico está presente em uma faixa de concentração entre 2,0 - 10,0% baseado no peso total da composição final.

0 ácido lactobiônico está presente em uma faixa de concentração entre 2,0 - 10,0% baseado no peso total da composição final.

EXEMPLOS

Os exemplos a seguir ilustram as modalidades preferenciais, mas não limitantes da presente invenção. Não se deve entender, contudo, que os mesmos limitam o escopo de proteção da invenção, o qual é exclusivamente definido pelas reivindicações que acompanham esta descrição.

Exemplo 1 : Preparação da formulação da presente invenção

1 - No reator principal (fase aquosa), adicionar a água e solubilizar o EDTA. 2 - Solubilizar o ácido lactobiônico, o ácido hialurônico hidrolisado e o ácido málico.

3 - Adicionar o ácido glicólico 70% e o ácido lático.

4 - Adicionar propanodiol. Aquecer até 35°C, adicionar ácido mandélico.

5 - Ajustar o pH para 3,8 com AMP . Adicionar cloreto de sódio .

6 - Adicionar crospolimero poliacrilato-6, aguardar ca . 40' sob baixa agitação. Adicionar goma xantana, aguardar ca . 30 ' .

7 - Aquecer até 75-80°C.

8 - Em reator auxiliar, adicionar fase oleosa: triberrenil PEG-20, estearato de PEG-100, estearato de glicerila, lauret-23, benzotriazolil dodecil p-cresol, di-t-butil-4- hidroxihidrocinamato de octadecila, isononanoato de isononila, sebacato de diisopropila, caprilil meticona, alfa bisabolol, etoxidiglicol . Aquecer até 75-80°C.

9 - Verter fase oleosa na aquosa. Manter temperatura por ca . 5'. Iniciar resfriamento.

10 - Abaixo de 35°C, adicionar fenoxietanol e metilisotiazolinona .

11 - Adicionar ácido glicirrizico e álcool.

12 - Dispersar o crospolimero HDl/trimetilol hexilactona e sílica, amido octenilsuccinato de alumínio em goma biossacarídica-2 , polissilicone-11 , água, lauret-12, fenoxietanol, etilhexilglicerina e PEG-90M e adicionar a mistura ao reator principal sob agitação. 13 - Adicionar a fragrância, agitar por ca. 5 minutos.

15- Verificar pH final. Deve estar entre 3,5 a 4,0. Caso necessário ajustar pH para 3,8 com AMP .

Os compostos utilizados na formulação da composição cosmética da presente invenção, suas respectivas porcentagens peso/peso e suas respectivas funções encontram-se na Tabela 1.

Tabela 1

Composto peso/peso Função

Água 53, 95 Veículo

Propanodiol 5, 00 Solvente

Aminomet ilpropanol 4, 75 Ajuste de PH

Triberrenil PEG-20 4,50 Emulsionante

Álcool 3,00 Solvente

Ácido Glicólico 2,80 Queratolítico

Isononanoato de Isononila 2,50 Emoliente

Ácido Lactobiônico 2,00 Antioxidante /Umectante

Ácido Málico 2,00 Queratolítico

Ácido Mandélico 2,00 Queratolítico

Caprilil Meticona 2,00 Condicionante da Pele

Crospolímero HDl/Trimetilol

Hexilactona 1,96 Desaglutinante

Sebacato de Diisopropila 1,80 Emoliente

Ácido Lático 1, 70 Queratolítico Estearato de PEG-100 1,20 Emulsionante

Ácido Glicirrízico 1,00 Condicionante da Pele

Bisabolol 1,00 Calmante da Pele

Controlador de

Crospolímero Poliacrilato-6 1,00 Viscosidade

Estearato de Glicerila 0,88 Emulsionante

Amido Octenilsuccinato de

Alumínio 0,80 Absorvente

Polissilicone-11 0, 73 Formador de Filme

Ácido Hialurônico

Hidrolisado 0,50 Umectante

Cloreto de Sódio 0,50 Aglomerador

Etoxidiglicol 0,50 Solvente

Goma Xantana 0,50 Espessante

Fenoxietanol 0,50 Conservante

Perfume 0,28 Fragrância

Lauret-23 0, 13 Tensoativo

Benzotriazolil Dodecil p- Cresol 0,10 Antioxidante

Di-t-butil-4- Hidroxihidrocinamato de

octadecila 0,10 Antioxidante

EDTA Dissódico 0,10 Sequestrante

Goma Biossacarídica-2 0,10 Condicionante da Pele

Propanodiol 0,06 Veículo Sílica 0,04 Absorvente

Lauret-12 0,01 Tensoat ivo

PEG-90M 0,01 Aglutinante

Met ilisot iazolinona 0, 008315 Conservante

Imidazolidinil Ureia 0, 0015 Conservante

Et ilhexilglicerina 0,0012 Conservante

100, 00

Exemplo 2 : Teste de viabilidade celular

O teste de viabilidade celular foi realizado com o objetivo de determinar as concentrações não citotóxicas da formulação cosmética de AHAs da presente invenção.

A viabilidade celular foi determinada por um método colorimétrico que utiliza o corante XTT, que é convertido em formazan laranja solúvel em água pela enzima succinato desidrogenase mitocondrial nas células viáveis (Xenometrix AG, Suíça) . Os fibroblastos foram semeados na densidade de lxlO ⁴ células por poço e incubados com a formulação cosmética de AHAs em 8 concentrações utilizando uma diluição geométrica decimal. Após 48 horas de incubação, a formulação cosmética da presente invenção foi removida e o meio de cultura foi substituído. O XTT foi então adicionado à cultura e a placa incubada por mais 3 horas. A absorbância (densidade óptica - DO) de cada poço foi determinada a 480 nm em monocromador Multiskan GO {Thermo Scientific, Finlândia) . A porcentagem de viabilidade celular foi calculada conforme a equação: % Viabilidade = (DO _FC / DO _CN ) x 100, onde DO _FC = densidade óptica da formulação cosmética da presente invenção e DO _C N = densidade óptica do controle negativo .

A Figura 1 representa a curva concentração-viabilidade celular da formulação cosmética de AHAs da presente invenção .

Os resultados apresentados na Figura 1 demonstram que a formulação cosmética de AHAs da presente invenção apresentou concentrações não-citotóxicas a partir da diluição de 1,0 mg/mL.

Exemplo 3 : Quantificação de histamina

As culturas de queratinócitos foram incubadas com 4 concentrações não-citotóxicas da formulação cosmética da presente invenção determinadas pelo ensaio de citotoxicidade . As concentrações avaliadas neste estudo foram 1,0; 0,316; 0,100 e 0,0316 mg/mL. O estresse inflamatório foi mimetizado através da adição de IL-l - 10 ng/mL às culturas de queratinócitos concomitantemente ao tratamento com a formulação cosmética da presente invenção. As células foram mantidas em cultura por 48 horas. Após esse período, o sobrenadante da cultura celular foi coletado para quantificação do mediador proposto.

A concentração de histamina foi mensurada por meio de ensaio de ELISA competitivo, utilizando um kit adquirido comercialmente {Oxford Biomedical Research, Oxford, MI, Estados Unidos da América) . A leitura da absorbância foi realizada em monocromador Multiskan GO (Thermo Fischer Scientific, Vantaa, Finlândia) .

Na avaliação estatística, utilizou-se o teste de ANOVA que permitiu mensurar a variação dos resultados, comparando os dados entre os grupos, evidenciando ou não as diferenças entre eles. Aplicou-se então o teste não-paramétrico de Tukey, que reforçou e tornou ainda mais preciso o resultado apresentado. Foi utilizado o nível de significância de 5%.

A Figura 2 mostra o efeito da formulação cosmética de AHAs da presente invenção sobre a produção de histamina em cultura de queratinócitos humanos incubados concomitantemente com Interleucina-lalfa (IL-Ι ). Os dados representam a média ± desvio padrão de 3 replicatas (Anova, Tukey) .

A IL-IOÍ promove um aumento estatisticamente significativo (P<0,001) na síntese de histamina, o que é prevenido pela adição concomitante da formulação cosmética da presente invenção nas culturas celulares. Nas concentrações de 1,0 e 0,316 mg/mL, a formulação cosmética de AHAs previne em até 100% o aumento na síntese de histamina induzida pela IL-l , mantendo os níveis semelhantes aos do grupo controle, conforme pode ser observado na linha pontilhada.

Os resultados obtidos indicam que a utilização da formulação cosmética previne a síntese de histamina no microambiente celular após estresse inflamatório induzido pela IL-Ι , evitando, portanto, o aparecimento de reações de irritação, prurido e eritema.

Exemplo 4 : Renovação Celular A capacidade de medir o envelhecimento biológico com base nas alterações estruturais e funcionais da pele, sem utilizar métodos invasivos, sugere um grande avanço da ciência nesta área.

Alguns métodos não invasivos foram desenvolvidos para determinar o tempo de renovação do estrato córneo. Estes métodos utilizam compostos que reagem com estruturas do estrato córneo, gerando subprodutos que, em função de sua coloração ou emissão de fluorescência, podem ser mensurados objetivamente por colorimetria ou espectroscopia de fluorescência in vivo.

A eficácia da formulação cosmética foi avaliada através da variação da cor da pele medida por uma técnica de colorimetria .

A dihidroxiacetona (DHA) é um açúcar redutor com 3 carbonos que reage com os grupamentos amino livres da queratina gerando subprodutos de coloração escura chamados melanoidinas , por escurecimento não enzimático, reação de Maillard (Levy, 2000) . A DHA penetra no estrato córneo atingindo até as camadas superiores do estrato granuloso, forma as melanoidinas e sua eliminação está limitada à descamação natural da pele ou à remoção física dos corneócitos (Forest et al, 2003) .

O colorímetro triestímulo é um instrumento que proporciona medições correlatas à percepção do olho humano através dos valores triestímulos (XYZ, L, a, b, etc) .

O estudo foi baseado na hipótese de que a aplicação da formulação cosmética da presente invenção pudesse conferir aumento da renovação celular do estrato córneo da pele. 0 estímulo à renovação celular foi mensurado indiretamente através da avaliação colorimétrica de uma área tratada pela formulação cosmética da presente invenção em comparação com a área controle (sem qualquer tratamento) .

A avaliação colorimétrica da pele foi realizada no início do estudo (previamente à aplicação da formulação cosmética da presente invenção e escurecimento da pele), após 48 horas da aplicação da dihidroxiacetona (DHA) 10% (para estabilização da cor) e após 7, 14, e 28 dias de uso domiciliar da formulação cosmética da presente invenção.

0 estudo consiste na aplicação de DHA em uma área de 2,5 x 4, 0 cm, demarcada em um dos antebraços de diversas voluntárias. A aplicação do DHA promove o escurecimento da área aplicada, a fim de permitir a análise da renovação celular do estrato córneo da pele. 0 outro antebraço não sofreu aplicação e foi denominado área controle.

Previamente à aplicação da DHA, a pele foi limpa com solução hidroalcoólica a 10% para remoção de quaisquer resíduos de sujeira e para remoção dos corneócitos soltos. Em seguida, com o auxílio de uma micropipeta, foram aplicados 30 iL de uma emulsão contendo 10% de DHA. A emulsão foi espalhada homogeneamente dentro dos limites da área demarcada no antebraço das voluntárias.

0 procedimento de aplicação da emulsão foi repetido por mais 2 vezes, com intervalo de 1 hora entre as aplicações. Após as aplicações, as participantes da pesquisa retornaram para casa, e foram orientadas a não se exporem ao sol, aplicar quaisquer produtos ou lavar os antebraços. Após 48 horas da última aplicação da DHA, as participantes retornaram ao laboratório para fazer as medidas de coloração da pele.

As medidas foram realizadas utilizando o colorimetro CR-400 Konica Minolta. A medida da pigmentação da pele foi feita através dos parâmetros L* e b* medidos pelo colorimetro, determinando-se o valor de ITA° (Individual Typology Angle) no inicio do estudo (antes da aplicação da DHA e da formulação cosmética da presente invenção), após 48 horas da última aplicação de DHA, e após 7, 14 e 28 dias de uso da formulação cosmética da presente invenção. Os valores de ITA° podem ser calculados através da seguinte fórmula:

ITA° = [Arco Tangente ( (L-50)/b) ]* 180/n

A Figura 3 ilustra os valores médios obtidos de ITA° em cada tempo de avaliação, para a formulação cosmética de AHAs e para o controle.

A redução dos valores de ITA° indica o escurecimento da pele e, portanto, é esperada uma diminuição dos valores de ITA° após 48 horas da aplicação da DHA e o retorno gradual ao valor basal no decorrer do estudo.

Para avaliar a estimulação da renovação celular proporcionada pela formulação cosmética em função do controle, foi calculado o índice de Renovação Celular (IRC), conforme a seguinte equação:

IRC = ITA° _xti / ITA° _xt0r onde x = formulação cosmética ou controle, ti = tempo de medida e to = inicio do estudo (antes da aplicação da DHA e da formulação cosmética da presente invenção) . A Figura 4 ilustra os valores médios obtidos de IRC após 7, 14 e 28 dias para a formulação cosmética de AHAs e para o controle .

A perda da coloração da pele indica que houve renovação celular. Assim, a eficácia da formulação cosmética é comprovada quando a sua aplicação na pele promove o retorno do valor de ITA° para o seu valor basal mais rapidamente do que no antebraço controle. Com base nos resultados apresentados na Figura 3 e na Figura 4, percebe-se que a aplicação da formulação cosmética da presente invenção acelera o processo de renovação e esfoliação celular, proporcionando a renovação celular da pele logo após 14 dias de uso.

Considerando que o processo natural de renovação celular do estrato córneo é de aproximadamente 28 dias, é possível afirmar que a formulação cosmética da presente invenção apresenta uma taxa de renovação celular da pele 2 vezes mais rápida.

A partir da descrição e exemplos acima, é possível observar uma melhora inesperada na prevenção/inibição da síntese da histamina, mantendo a eficácia terapêutica da formulação cosmética aqui apresentada em relação ao estado da técnica.

Apesar de certas modalidades terem sido descritas de modo específico, elas foram apresentadas somente de forma exemplificativa, e não há intenção de limitar o escopo da invenção. As reivindicações que acompanham esta descrição e suas equivalentes são consideradas como cobrindo tais modalidades . Finalmente, modificações da presente invenção, evidentes para um técnico no assunto, tais como adição ou remoção de elementos não fundamentais a sua concretização, poderão ser realizadas sem que se afaste do escopo e espirito da invenção .