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Title:
COSTUNOLIDE DERIVATIVE, PHARMACEUTICAL COMPOSITION THEREOF AS WELL AS PREPARATION METHOD AND USE THEREOF
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2013/170694
Kind Code:
A1
Abstract:
The present invention relates to a compound as represented by formula (I), pharmaceutical composition thereof as well as preparation method and uses thereof, in particular to the uses of the compound as represented by formula (I) for treating rheumatoid arthritis and cancers.

Inventors:
CHEN YUE (CN)
ZHANG QUAN (CN)
LONG JING (CN)
HAN BIN (CN)
MA XIAOYAN (CN)
Application Number:
PCT/CN2013/074717
Publication Date:
November 21, 2013
Filing Date:
April 25, 2013
Export Citation:
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Assignee:
ACCENDATECH (CN)
UNIV NANKAI (CN)
International Classes:
C07D307/93; A61K31/365; A61P19/02; A61P25/00
Domestic Patent References:
WO2005007103A22005-01-27
WO2008022104A12008-02-21
Foreign References:
CN101270102A2008-09-24
Attorney, Agent or Firm:
TIANJIN BINHAI KEWEI INTELLECTUAL PROPERTY AGENCY LTD. (CN)
天津滨海科纬知识产权代理有限公司 (CN)
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Claims:
权 利 要 求 书

1、 一种如下式 (I)的化合物,

或者 为 H或 D, 为 CH2N(CH3)2及其与有机酸形成的在药学上可 接受的盐, 其中有机酸鶴为甲磺酸、 富马酸、 二氯乙酸。

2、根据权利要求 1所述的化合物, «为化合物式 Π至化合物 X, 如

VIII IX X

3、一种制备式 Π化合物的方法, 该方 ¾ ^括如下步骤: 原料为木香烃内 酯, 还原得到开环化合物二醇 1; 1中的伯羟基选择附呆护后, 选择性环丙 垸 又键再脱 ί¾ί户得到化合物 2; 2氧化得到化合物 Π;所述反应步骤如下:

costunolide 化合物为原料, 与 (C¾)2丽或 (C¾)2 D反应制备得到式 III、 IV, 如下图

IV

5、 一种制备木香经内酯衍生物盐的方法, 该方 ¾ ^括如下步骤: 原料 为式 III的木香经内酯衍生物, 加入有机酸, 反应制备得到木香烃内酯衍生 物盐 V、 VI、 VII; 原料为式 IV的木香经内酯衍生物, 加入有机酸, 反应 制备得到木香经内酯衍生物盐 Vffl、 IX、 X,化合物结构式如下图所示:

VIII IX X 6、权利要求 1至 2任一项所述的化合物在制备治疗癌症的药物或治疗 癌症的辅助药物中的用途, 其中癌症«为白血病、 乳腺癌、 前列腺癌、 鼻咽癌、 大肠癌、 肺癌、 肝癌、 食道癌、 胃癌、 肠道癌、 肾癌、 口腔癌、 何杰金淋巴癌、 胰腺癌、 鶴结肠癌、 子官颈癌、 非何杰金淋巴癌、 神经 胶质瘤、 黑瘤、 膀胱癌、 卵巢癌、 甲状腺癌或卡波西肉瘤。

7、 一种用于治疗癌症的药物组合物, 所述药物组合物含 效量的权 利要求 1至 2任一项所述的化合物和药学上可接受的载体或其他抗癌药物, 其中癌症雌白血病、乳腺癌、前列腺癌、鼻咽癌、大肠癌、肺癌、肝癌、 食道癌、 胃癌、 肠道癌、 肾癌、 口腔癌、 何杰金淋巴癌、 胰腺癌、 鶴结 肠癌、子官颈癌、非何杰金淋巴癌、神刭交质瘤、黑瘤、膀胱癌、卵巢癌、 甲状腺癌或卡波西肉瘤。

8、权利要求 1至 2任一权利要求的化合物在制备治疗类风湿性关节炎 药物或在制备治疗类风湿性关节炎辅助药物中的用途。

9、 一种用于治疗类风湿性关节炎的药物组合物, 所述药物组合物含有 有效量的权利要求 1至 2任一项所述的化合物和药学上可接受的载体或其 他治疗类风湿性关节炎的药物。

Description:
木香 is内酉 ϊ生物, 其药物组^及其制备 法和用途 技术领域 本发明属于药物技术领域,具体地说,涉及木 香经内酯衍生物或其盐, 以其为有效成分的治疗癌症或辅助治疗肿瘤的 药物组合物, 其制备方法, 以及该药物化合物和组合物在制 «癌、 辅助抗癌或制备类风湿性关节炎 或辅助治疗类风湿性关节炎的药物中的应用。 背景技术 倍半萜内酯类化合物小白菊内酯(Parthenolide) 是从小白菊中提取的 化合物, 最初被用来治疗皮肤感染、 风湿病以及偏头痛。 近期研究表明, 小白菊内酯可抑制前列腺癌、 乳腺癌、 胃癌、 白血病癌、 肾癌、 肺癌、 结 肠腺癌、 成神经管细胞瘤等癌细胞的生长, 在动物模型上小白菊内酯还能 治疗紫外线弓 I起的皮肤癌。 对其作用机理研究发现, 小白菊内酯能抑制转 录因子 F-κΒ的歡活,其活性可會注要来源于 p65/NF-KB亚基的 Cys38上 的巯基与小白菊内酯发生了 Michael加成反应, 由于 F-κΒ是调控肿瘤侵 袭、 转移、 药物抗性的重要基因, 抑制 F-κΒ的歡活有可能提高肿瘤对于 抑瘤剂所引起的细胞凋亡的敏感性。 最近, 纽约罗切斯特大学医学院的 Jordan, C. T.博士及其同事发现小白菊内酯能够在基本不 伤正常干细胞的 情况下, 针对性地消灭引发急性和慢性骨髓性白血病的 干细胞, 从而有可 能根本上遏制白血病复发, 小白菊内酯这一独特的作用机制, 已引起人们 的广泛关注。

类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis, RA)是一种进行性、 多关节炎 症为主要表现的全身性自身免疫疾病, 主要表现为滑膜炎性增生、 单核细 胞浸润和新生血管形成。 目前尚无根治本病的方案和预防措施, 临床上主 要治疗药物包括非甾体抗炎药、 肾上腺皮质激素等。 由于药物的副作用严 重, 弓 I起的肝肾损害、 肺纤维化等使病 隹以坚持长期服药。 寻求一种有 效、 安全的治疗药物是我们的目的。

木香烃内酯也属于倍半萜内酯类化合物, 为吉马垸型倍半萜内酯类化 合物, 已报道木香烃内酯具有抗肿瘤活性, 但木香烃内酯不稳定、 水溶性 差。 本发明在已有发现的基础上, 合成了木香烃内酯的衍生物或其盐, 其 药物组合物, 及¾制备药物中的用途, 特别是在制备治疗类风湿性关节 炎、 治疗癌症的药物中的用途。

目前未见关于式 ( I )化合物, 其药物组合物, 及其制备方法, 及在 制备药物中的用途, 特别是在制备治疗类风湿性关节炎、 治疗癌症的药物 中的用途的报道。 发明内容 本发明提供了式(I )化合物, 其药物组合物及其制备方法和用途, 特 别是式 (I)化合物用于治疗类风湿性关节炎和治疗癌症 的用途。

为了实现本发明的上述目的, 本发明提供如下的技术方案:

一种木香烃内酯的衍生物或其盐, 具体地说, 一种如下式 (I ) 的化合 物,

其中 = 为双键, 结构为

或者 为 H或 D, 为 CH 2 N(CH 3 ) 2 及其与有机酸形成的在药学上可 接受的盐, 有机酸鶴为甲磺酸、 富马酸、 二氯乙酸。

如式 (I)化合物所述的木香烃内酯衍生物或其盐, 为化合物式 Π-Χ 如下图所示:

VIII IX X

一种制备式 π化合物的方法,该方法包括如下步骤:原料 木香烃内酯, 还原得到开环化合物二醇 1; 1中的伯羟基选择瞧户后, 选择性环丙院化 双键再脱保护得到化合物 2; 2氧化得到化合物 Π; 所述反应步骤如下:

物为原料,与CH 3 ) 2 H或 (CH 3 ) 2 D反应制备得到式 III、 IV,如下图所示:

IV

一种制备木香经内酯衍生物盐的方法,该方 ¾ ^括如下步骤:原料为式 III、 IV的木香经内酯衍生物, 加入到有机酸中, 反应制备得到木香烃内酯 衍生物 V、 VI、 VII、 環、 IX、 X,化合物结构式如下图所示:

VIII IX X

本发明还提供了上述式 (I) 的木香经内酯衍生物或其盐在制备治疗类 风湿性关节炎药物中的用途。 本发明还提供了上述式 (I) 的木香经内酯衍生物或其盐在制备辅助治 疗类风湿性关节炎药物中的用途。

本发明还提供了上述式 (I) 的木香烃内酯衍生物或其盐治疗癌症的用 途, 其中癌症为白血病、 乳腺癌、 前列腺癌、 鼻咽癌、 大肠癌、 肺癌、 肝 癌、 食道癌、 胃癌、 肠道癌、 肾癌、 口腔癌、 何杰金淋巴癌、 胰腺癌、 直 肠结肠癌、 子官颈癌、 非何杰金淋巴癌、 神经胶质瘤、 黑瘤、 膀胱癌、 卵 巢癌、 甲状腺癌或卡波西肉瘤。

本发明还还提供了上述式 (I ) 的木香烃内酯衍生物或其盐作为辅助治 疗癌症的用途, 其中癌症为白血病、乳腺癌、前列腺癌、鼻咽 癌、大肠癌、 肺癌、 肝癌、 食道癌、 胃癌、 肠道癌、 肾癌、 口腔癌、 何杰金淋巴癌、 胰 腺癌、 直肠结肠癌、 子官颈癌、 非何杰金淋巴癌、 神经胶质瘤、 黑瘤、 膀 胱癌、 卵巢癌、 甲状腺癌或卡波西肉瘤。

本发明还提供了一种用于治疗类风湿性关节炎 的药物组合物,其中含有 有效量的式(I) 的木香经内酯衍生物和药学上可接受的载体或 与其他治疗 类风湿性关节炎药物的组合物。

本发明还提供了一种用于治疗癌症的药物组合 物,其中含有有效量的式 (I) 的木香经内酯衍生物和药学上可接受的载体或 与其他抗癌药物的组合 物。

本发明化合物用作药物时,可以直接删,或者 以药物组合物的形式使 用。 该药物组合物含有 0.1 - 99%, 0.5 - 90%的本发明化合物, 其 余为药物学上可接受的, 对人和动物无毒和惰性的 用载体和 l武形剂 或与其他抗癌药物联合用药。 本发明的组合物可以制备成注射液、 片剂和 胶囊等。

所述的药用载体或赋形剂是一种或多种固体、 半固体和液 释剂、填 料以及药物制品辅剂。 将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形 式使 用。 本发明的药物可经注射和口服两种形式给药, 注射如静脉注射和肌肉 mi, 口服的剂型可以是片剂和胶囊剂。

具体实施 为了理解本发明, 下面以实施例进一步说明本发明, 但不意于限制本 发明的保护范围。 实施例 1:

结构式如下式 II的制备路线:

化合物 1的制备:

氮气保护下, 将木香烃内酯 (2.0g, 8.6 mmol) 用干燥过的二氯甲垸 溶解, 冷却至零度, 缓慢加入 1M 的二异丁基氢化铝二氯甲垸溶液 ( 10.6mL, 10.6mmol), 加完后继续搅拌两小时, TLC检测反应基本 完成后, 用饱和氯化铵溶液 (lOOmL)淬灭, 过滤一层硅藻土, 水相用 二氯甲垸萃取三次, 合并二氯甲垸层, 饱和食盐水洗涤, 无水硫酸钠 干燥。过滤后浓缩柱层析纯化得到半缩醛中间 体 1.37g (68%)。 1.27g 半缩醛溶于 40mL 甲醇, 冷却至零度, 分批加入硼氢化钠 (427mg, 11.3mmol),搅拌四小时, TLC显示反应完全后加入饱和食盐水(80mL) 淬灭反应, 浓缩, 乙酸乙酯 (120mL) 萃取三次, 硫酸钠干燥, 过滤 后浓缩柱层析纯化得到二醇化合物 1 (1.15g , 90%)

¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 5.16 (s, 1Η), 5.01 (s, 1H), 4.79 (br d, J= 10.4 Hz, 1H), 4.68 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 4.24 - 4.09 (m, 3H), 2.52 (br s, 1H), 2.43 - 2.32 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 3H), 2.15-2.06 (m, 2H), 2.00 - 1.88 (m, 2H), 1.80 - 1.69 (m, 2H), 1.67 (s, 3H), 1.40 (s, 3H).; 13 C NMR (100 MHz, CDC1 3 ) δ 152.9 , 137.9 , 134.6, 132.9, 126.7, 111.9, 71.5, 64.8, 55.0, 41.6, 39.5, 32.1, 25.8, 17.0, 16.3. 化合物 3的制备:

氮气保护下, 将化合物 1 ( 115mg, 0.487mmol) , 4-二甲氨基吡 啶 (6mg, 0.0487mmol) , 三乙胺(0.12mL, 0.818mmol)溶于干燥的 二氯甲垸 (2.3mL)中, 冷却至零度, 加入 0.54M三甲基氯硅垸二氯甲 垸溶液 (lmL, 0.54mmol), 搅拌 4小时, 加入饱和食盐水 (2.4mL)终 止反应, 水层用二氯甲垸 (5mL)萃取三次, 硫酸钠干燥, 过滤后浓缩 柱层析纯化得到选择性保护羟基化合物中间体 (159mg, 93%).氮气保 护下,将中间体(175mg, 0.5mmol)溶于干燥的二氯甲垸 (4mL)中,冷 却至 -10度, 加入 1M二乙基锌己垸溶液(lmL, lmmol) , 搅拌 15分 钟, 缓慢加入二碘甲垸(0.16mL, 2mmol), 搅拌 1.5h, 加入饱和氯 化铵溶液 (lmL) 终止反应, 水层用二氯甲垸 (5mL)萃取三次, 硫酸 钠干燥, 过滤后浓缩柱层析纯化得到化合物 3 ( 150mg, 82.4%)。 ¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 5.23 (dd, J= 11.3, 3.2 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.21 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 4.05 (d, J= 13.0 Hz, 1H), 3.27 (s, 1H), 2.70 - 2.31 (m, 3H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 2.10-2.03 (m, 2H), 2.01 - 1.95 (m, 1H), 1.94-1.80 (m, 1H), 1.77 - 1.64 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.85-0.74 (m, 2H), 0.38-0.33 (m, 2H), 0.093 (s, 3H) , 0.091 (s, 3H). ; ESI-HRMS m/z: 387.2685 [M+Na]。

化合物 II的制备:

化合物 2 (3.27 g, 9.0 mmol) 溶于四氢呋喃 (60 mL), 冷却至零度, 加 入 1 M 四正丁基氟化铵四氢呋喃溶液(18 mL,18 mmol),搅拌 1小时, TLC检测完全, 加入饱和氯化铵溶液 (1 mL) 终止反应。 水层用乙 酸乙酯 (7 mL)萃取三次, 硫酸钠干燥, 过滤后浓缩柱层析纯化得到中 间体化合物二醇 (1.98 g , 88%)。 将二醇中间体 (340 mg, 1.36 mmol)溶 于干燥二氯甲垸(6.8 mL),加入二醋酸碘苯(1.42g, 4.42 mmol), 2^,6,6- 四甲基哌啶氧化物 (68 mg, 0.44 mmol),搅拌 10小时,加入冷水 (40 mL) 终止反应, 加入乙醚 (100 mL) , 用 60 mL 0.5 M亚硫鹏内水溶液洗漆, 乙醚萃取三次 (30 mL) , 硫酸钠干燥, 过滤后浓缩柱层析纯化得到化 合物 II (298 mg , 89

分子式: C 16 H 22 0 2

分子量: 246

性状: 白色固体

谱图数据:

Ή NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 6.27 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 5.57 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.20 (br d, J= 11.5 Hz, 1H), 3.83 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 2.80 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.50 - 2.31 (m, 2H), 2.24 (td, J = 13.0, 1.7 Hz, 1H), 2.13 - 1.98 (m, 3H), 1.90 - 1.79 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.90 - 0.77 (m, 2H), 0.61 - 0.51 (m, 2H); 13 C-NMR (100 MHz, CDC1 3 ) δ 169.9, 141.1, 133.0, 127.7, 120.7, 84.7, 50.3, 41.1, 38.2, 33.5, 31.7, 25.2, 19.9, 18.0, 17.6, 16.4.; ESI-HRMS m/z: 247.1694 [M+H]。 实施例 2 化合物 m的合成方法:

取化合物 II (590 mg, 2.4 mmol), 二甲胺盐酸盐 (2.94 g, 36mmol)溶于 120 mL二氯甲垸, 加入 9.95 g碳酸钾, 回流 5小时, 过滤, 旋干, 硅胶柱层析得到加成化合物 111(645 mg)。

^ MR C^O MHz, CDC1 3 ) 5 5.17 (br d, J= 10.2 Hz, IH), 3.76 (t, J= 7.9

Hz, IH), 2.71 (dd, J= 13.0, 5.2 Hz, IH), 2.55 (dd, J= 13.0, 5.2 Hz, IH),

2.46 - 2.36 (m, IH), 2.36-2.29 (m, IH), 2.25 (m, 8H), 2.17-2.10 (m, IH),

2.07 - 1.95 (m, 3H), 1.77 - 1.69 (m, IH), 1.68 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.88

- 0.71 (m, 2H), 0.53-0.49 (m, IH), 0.44 (t, J= 5.4 Hz, IH).; 13 CNMR(100

MHz, CDC1 3 ) δ 177.6, 133.4, 127.7, 85.0, 58.6, 51.3, 47.9, 46.2, 41.2, 38.8, 32.4,

31.9, 25.4, 20.2, 18.2, 18.0, 16.7.

实施例 3 化合物 IV的合成方法:

IV

取化合物 II (167 mg), 氘代二甲胺盐酸盐 (530 mg)溶于 15 mL二氯甲 垸, 加入 1.8 g碳酸钾, 搅拌 24小时, 过滤, 旋干, 过柱得到化合物 IV(150 mg, 76%)

¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 5.15 (br d, J= 11.4 Hz, 1H), 3.74 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 2.69 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 2.53 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 2.45-2.33 (m, 1H), 2.32 - 2.17 (m, 8H), 2.16-2.09 (m, 1H), 2.06 - 1.93 (m, 3H), 1.78 - 1.62 (m, 4H), 0.97 (s, 3H), 0.83-0.73 (m, 2H), 0.50 (dd,J= 9.3, 4.9 Hz, 1H), 0.43 (t,J= 5.3 Hz, 1H).; 13 C NMR (100 MHz, CDC1 3 ) δ 176.6, 132.3, 126.7, 84.0, 57.5, 50.2, 46.9, 45.2, 40.2, 37.8, 31.3, 30.9, 24.4, 19.2, 17.2, 17.0, 15.6. 实施例 4

化合物 V的合成方法:

III

将化合物 111(645 mg)溶于 20 mL 甲醇, 加入 257 mg富马酸,搅拌 10 分钟, 旋干得化合物 V(902 mg)。

lR NMR (400 MHz, MeOD) δ 6.70 (s, 2H), 5.20-5.23 (m, 1H), 4.03 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 3.53 (dd, J= 13.3, 10.0 Hz, 1H), 3.37 - 3.31 (m, 1H), 3.07 (dt, J = 12.9, 5.0 Hz, 1H), 2.94 (s, 6H), 2.54 - 2.39 (m, 1H), 2.31 - 2.10 (m, 3H), 1.98-2.02 (m, 2H), 1.96 - 1.85 (m, 2H), 1.72 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.97 - 0.80 (m, 2H), 0.56 (dd, J = 9.3, 4.7 Hz, 1H), 0.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H).; 13 C NMR (100 MHz, MeOD) δ 177.9, 171.0, 136.2, 134.3, 128.6, 87.9, 57.3, 52.1 , 45.5, 44.3, 41.7, 39.7, 32.5, 32.0, 26.2, 21.5, 18.7

18.5, 16.8.

实施例 5 化合物 VI的合成方法:

III

VI

将化合物 m(28 mg)溶于 5 mL乙酸乙酯中, 加入 9 mg甲磺酸, 搅拌 10分钟, 旋干得化合物 VI(37mg)。

¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 9.76 (s, 1Η), 5.10 (br d, J= 11.5 Hz, 1H), 3.91 (t,

J= 8.1 Hz, 1H), 3.50-3.41 (m, 1H), 3.35-3.28 (m, 1H), 3.09 - 2.91 (m, 6H), 2.74

(s, 3H), 2.41-2.22 (m, 2H), 2.19 - 1.79 (m, 6H), 1.64 (s, 3H), 0.95 (s, 3H),

0.83-0.70 (m, 2H), 0.50 (dd, J= 8.7, 4.3 Hz, 1H), 0.38-0.34 (m, 1H).; 13 C NMR

(100 MHz, CDC1 3 ) δ 175.9, 133.1, 127.6, 86.5, 56.2, 51.3, 45.0, 44.7, 43.9, 40.6,

39.4, 38.6, 31.3, 31.0, 25.2, 20.6, 18.2, 18.1, 16.6.

实施例 6 化合物 VII的合成方法:

将化合物 111(26 mg)溶于 5 mL乙酸乙酯中,加入 12 mg二氯乙酸,搅 拌 10分钟, 旋干得化合物 VII(38mg)。

Ή NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 5.89 (s, 1H), 5.10 (br 4 J = 11.6 Hz, 1H), 3.87 (t, J

= 8.1 Hz, 1H),3.31 (dd, J = 13.3, 6.7 Hz, 1H), 3.24-3.18 (m, 1H), 3.06- 2.99 (m,

1H), 2.86 (s, 6H), 2.43 - 2.25 (m, 2H), 2.14 - 2.03 (m, 3H), 2.02 - 1.92 (m, 2H),

1.89 - 1.77 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.82 - 0.70 (m, 2H), 0.52 (dd, J =

9.3, 5.0 Hz, 1H), 0.41 (t,J = 5.3 Hz, 1H).; 13 C NMR (100 MHz, CDC1 3 )5175.8 ,

169.5, 133.1, 127.8, 85.9, 68.4, 55.6, 51.9, 46.0, 43.8, 40.7, 38.7, 31.3, 30.9, 29.7,

25.3,20.6,18.2,16.5.

实施例 7 化合物 VIII的合成方法:

HOO ^ coo ㊀ 取 49mg 化合物 IV, 将其溶于 10 mL 甲醇, 加入 18.7 mg富马 酸, 搅拌 10分钟, 旋干得化合物 VIII (67 mg)。

lR NMR (400 MHz, MeOD) δ 6.70 (s, 2H), 5.22 (br d,J= 11.2 Hz, 1H), 4.03 (t,J= 8.2 Hz, 1H), 3.53 (d,J= 13.3 Hz, 1H), 3.33 (d,J= 13.4 Hz, 1H), 2.94 (s, 6H), 2.54 - 2.40 (m, 1H), 2.34 - 2.10 (m, 3H), 2.05 - 1.96 (m, 2H), 1.94 - 1.86 (m, 2H),1.72 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.96 - 0.80 (m,

2H), 0.56 (dd, J = 9.3, 4.7 Hz, IH), 0.38 (t, J = 5.2 Hz, IH).; 13 C NMR

(100 MHz, MeOD) δ 177.9, 170.9, 136.1, 134.3, 128.6, 87.9, 57.3, 52.0,

45.5, 44.3, 41.7, 39.7, 32.5, 32.0, 26.2, 21.5, 18.7, 18.5, 16.8

实施例 8 化合物 IX的合成方法:

将化合物 IV(32 mg)溶于 5 mL乙酸乙酯中, 加入 14 mg二氯乙酸, 搅拌 10分钟, 旋干得化合物 IX(46mg)。

¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 9.68 (s, IH), 5.96 (s, IH), 5.11 (brd,J= 10.9 Hz,

IH), 3.94 (t, J= 8.1 Hz, IH), 3.50 - 3.39 (m, 2H), 3.01 (s, IH), 2.97 (s, IH), 2.46

-2.32 (m, IH), 2.29-2.25 (m, IH), 2.20 - 1.93 (m, 5H), 1.88-1.79 (m, IH), 1.66 (s :

3H), 0.99 (s, 3H), 0.82-0.74 (m, 2H), 0.56 (dd, J= 9.2, 4.9 Hz, IH), 0.43 (t, J= 5.3

Hz, IH).; 13 C NMR (100 MHz, CDC1 3 ) δ 176.0, 168.2, 133.0, 127.9, 86.6, 66.0,

56.1, 51.5, 45.8, 44.7, 4.0, 40.6, 38.7, 31.2, 31.0, 25.3, 20.8, 18.23, 18.20, 16.5. 实施例 9 化合物 X的合成方法: Θ

IV 将化合物 IV(33 mg)溶于 5 mL乙酸乙酯中,加入 11 mg甲磺酸,搅拌 10分钟, 旋干得化合物 X(44 mg)。

¾ NMR (400 MHz, CDC1 3 ) δ 10.34 (s, 1H), 5.07 (br d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.87 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 3.45-3.41 (m, 1H), 3.31 -3.18 (m, 1H), 2.97-2.92 m 6H), 2.70 (s, 3H), 2.40 - 2.19 (m, 2H), 2.13 - 1.78 (m, 6H), 1.61 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.77-0.672 (m, 2H), 0.47 (dd, J= 9.1, 4.9 Hz, 1H), 0.34 (t, J= 5.2 Hz, 1H). ; 13 C NMR (100 MHz, CDC1 3 ) δ 175.6, 133.0, 127.6, 86.1, 55.9, 51.4, 45.2, 44.2, 44.1, 40.6, 39.3, 38.5, 31.2, 30.9, 25.1, 20.6, 18.0, 16.5. 实施例 10: 木確内酯及其衍生物或其盐的药理作用

将各种癌细胞配成 2x 10 5 /mL细朧悬液,加入 24孔板圆底细胞培养板内, 分别加 Λτ香经内酯衍生物或其盐, 每一测 i 农度 5孔, 置 37 °C、 5%C0 2 饱和湿度条件下培养 18小时,用 MTT法在酶联检测仪 570議波长测得吸 光度 (A)值, 计算出本发明化合物对测试癌细胞的抑制作用 。 表一 木香经内酯及其衍生物对各种癌细胞的抑制活 f生 (IC 50 , μΜ) 细胞 化合物 Π 化合物 m 化合物 IV 化合物 V

HL-60 3.8 40.6 40.9

48.8

HL-60/A 6.2 50.6 57.2

65.7

Κ562 6.3 50.7 54.8

63.9

MCF-7 14.2 66.7 72.3

76.9 CNE-1 4.8 56.9 61.9

75.7

CNE-2 6.9 64.7 71.3

76.8

Dul45 6.8 58.3 65.4

84.7

HT-29 13.1 66.2 72.8

77.4

A549 10.5 66.7 72.6

76.6

HepG-2 3.6 66.5 71.2

73.4

Ec9706 6.2 59.7 67.6

71.7

SGC7901 18.3 64.5 71.3

74.3

SW1116 10.2 65.5 71.2

76.4

A498 7.1 62.4 65.3

69.8

ASPC-1 5.9 63.9 65.1

69.7

HT-29 5.8 64.8 69.8

71.5

HeLa 5.8 69.4 72.3

77.2

GL15 14.6 62.6 64.3

66.9

B16F1 9.5 63.4 73.2

81.7

T24 14.3 64.2 73.6

82.3

SKOV3 6.6 65.9 69.4

77.2

SW579 14.5 67.3 72.5

79.8

PC-3 8.0 68.7 71.4

76.7

L\

17690.1/C10Z OAV 其中 HL-60、 HL-60/A、 K562、 MCF-7、 C E-1、 C E-2、 Dul45、 HT-29、 A549、 HepG-2, Ec9706、 SGC7901、 SW1116、 A498、 ASPC-1、 HT-29、 HeLa、 GL15、 B16F1、 T24、 SKOV3、 SW579. PC-3分别表示急性白血病 细胞株、耐阿霉素急性白血病细胞株、慢性白 血病细胞株、乳腺癌细胞株、 人高分化鼻咽癌细胞株、 人低分化鼻咽癌细胞株、 前列腺癌细胞株、 大肠 癌细胞株、 肺癌细胞株、 肝癌细胞株、 食管癌细胞株、 胃癌细胞株、 结肠 癌细胞株、肾癌细胞株、胰腺癌细胞株、结肠 癌细胞株、子宫颈癌细胞株、 人胶质母细胞瘤细胞株、 黑素瘤细胞株、 膀胱癌细胞株、 卵巢癌细胞株、 甲状腺癌细胞株、 前列腺癌细胞株。

活性测试结果表明,筛选的化合物对 式细腿示出抑制活性。因此测 试化合物具有用于治疗癌症用途。

实施例 11: 化^ i π、 πι、 ιν、 ν、 νι、 νπ、 vm、 ιχ、 χ的抗类顺 节炎活性测试

在类风湿性关节炎药物领域, 有很多文献报道药物成分对滑膜细胞分泌

TNF- α, PGE2和 IL β 的影响, 用动物实验的数据来考察药物治疗 RA 的效果。这些文献有: [1]鞠大宏,贾红伟,吴皓等,鹿瓜多画飾寸 C II 诱导的免疫性关节炎大鼠血清 TNF- ct , IL-6以及 CII抗体活性的影响, 中 国中医基础医学杂志, 2003, 9 (11 ): 17。 [2]何金华,梁清华,张花生等, 痹肿消汤对实验性关节炎大鼠血浆 TNF- α 的影响, 湖南医科大学学报, 2002, 27 (5) : 524. [3]黄凊春, 张声鹏, 徐秋英, 复方丹参对 II翻交原蛋 白诱导大鼠翻滑膜细胞分泌及肿瘤坏死因子的 影响, 现代康复, 2001, 5 (10) : 54-55。 [4]郑治刚, 细胞因子及其检测方法和临床意义, 陕西医学 检验, 2001, 16 (2) : 59。 [5]周军, 方素萍, 齐云等, 葛根汤对佐剂性关 节炎大鼠关节液炎症介质的影响,中国实验方 剂学杂志, 2001, 7 (3): 29。

[6]马骥,卢秉久,朱晓明等,痛痹颗粒治疗类 风湿性关节炎的药效学研究, 中医药学刊, 2001, 19 (6) : 734。 [7]朱江, 谢文利, 晋玉璋等, 栀子对类 风湿性关节炎大鼠血清 IL-Ι β和 TNF- α 的影响, 中成药, 2005, 27 (7) : 801。 [8]黄凊春, 张声鹏,黄伟毅等, 复方丹参 a 寸 CIA大鼠滑膜细胞 IL-l i3 mRNA表达的影响, 安徽中医学院学报, 2002, 21 (5) : 39-41。 取本发明方法获得的化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 νπ、 環、 IX、 X, 按文献 [3]提供的方法进行模型制备、 药物分组、 大鼠滑膜细胞培养基上清 的制备。

按文献 [3]提供的方法考察测试化合物对滑膜细胞分泌 TNF- α, PGE2 的影响。 按文献 [8]提供的方法考察测试化合物对滑膜细胞分泌 IL-1 β的影 响。

测试化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 VII、 環、 IX、 X在剂量 30 mg/kg.2d 下与正常对照、 氯化钠组的实验«如下:

表二滑膜细胞培养上清中 TNF- α 的含量(x±s, ng/mL)

化合物環 0.66+0.044 化合物 C 0.68+0.053 化合物 X 0.61 +0.065

¾H滑膜细胞培养上清中 IL-1 β的含量(x± s , ng/mL) 组别 IL-Ι β

正常对照 0.16+0.034

氯化钠 0.49+0.136

化合物 Π 0.32 ±0.042

化合物 m 0.38+0.045

化合物 IV 0.36+0.039 化合物 V 0.42+0.064 化合物 VI 0.44+0.062 化合物 νπ 0.46+0.054 化合物環 0.39+0.058 化合物 0.41 ±0.051 化合物 X 0.45+0.064

表四滑膜细胞培养上清中 PGE2的含量(x±s, ng/mL) 组别 IL-Ι β

正常对照 8.34+ 1.29

氯化钠 32.44± 10.32

化合物 Π 20.24 ± 1.77

化合物 m 26.58+0.98

化合物 IV 26.96± 1.59 化合物 V 29.49 ±2.67 化合物 VI 25.67±4.23

化合物 νπ 26.75 ± 1.69

化合物環 28.82 ±2.67

化合物 C 27.69+ 1.25

化合物 X 27.92 ±2.67 本发明以大鼠为人类 RA动物模型,采用滑膜细胞原代培养的方法, 察了化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 VII、環、 IX、 X对靈细胞分泌 TNF- α, PGE2禾口 IL-Ι β的影响,结果表明,化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 VII、 Vffl、 IX、 X能显著下调 TNF- α, PGE2和 IL-1 β的含量, 从而达到减轻致骨和 软骨的破坏恢复关节¾¾力功能, 发挥治疗 RA效果。 实施例 12: mm

实施例制备的化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 VII、 Vffl、 IX、 X用少量的 DMSO 溶解后, 按常规加 寸用水, 精滤, 灌封灭菌制戯鮒夜。

实施例 13: 片剂

实施例制备的化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 νπ、 環、 IX、 X与赋形剂按照 重量比为 5:1的比例加入赋形剂, 制粒压片, 得片剂。

实施例 14: 藤

实施例制备的化合物 Π、 ΠΙ、 IV、 V、 VI、 νπ、 環、 IX、 X与赋形剂按照 重量比为 5:1的比例加入赋形剂, 制成 囊。 本发明的化合物、用途和方法已经 具体的实施例进行了描述。本领 域技术人员可以借鉴本发明的内容适当改变原 料、 工艺条件等环节来实现 相应的其它目的, 其相关改变都没有脱离本发明的内容, 所有类似的替换 和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的 , 都被视为包括在本发明的 范围之内。