环己垸胺类化合物及其作为抗精神分裂症药物 的应川 技术领域

本发明涉及 Λ存抗精神病活性的环己烷胺类化合物及其作� ��抗精神分裂症药物的 应用。

¾景技术

精神分裂疝是一种严 S影响人类健康的疾病， E1前约影响世界 〗％人口的止常生 活， 为患者及其家 带来了严重的后果， 它是社会负担第 7 人的疾病。 由丁 · β杀、 缺 乏医疗照顾、 较高的并发疝风险 （如营养不良、 缺乏锻炼、 肥胖和吸烟） ， 导致患 者平均寿命縮短 年。 人¾研究表明， 精神疾病 中枢多种神经递质及受体功能异常相关， 脑内 胺递 质， 尤其 ¾多巴胺 (DA)系统和 5-羟基色胺 (5-ΗΤ)系统 人体止常精神活动密切相关。

DA和 5-HT系统功能紊乱易导致多种神经精神类疾病� �精神分裂症、 抑郁症、 祌经性 疼痛、 躁狂症、 焦虑症、 帕金森氏病等的发生。 抗精神病药物土耍分为典型抗精神病药物和非 典 抗精神病药物， B前临床一线 W药以非典 _ 抗精神病药物 （如 D ₂ /5-HT _2a 双重拮抗剂） 为主， 典 抗精神病药 （多巴 胺 D ₂ 受体拮抗剂） 逐步退出市场， 闪其虽对精神分裂症患者的 Π性症状有效， 但由丁- 同时作用亍黑质-紋状体 D ₂ 受体， 引起 Λ)药患者严 S的 EPS副反应。 而 Θ前临床常川 的非经典抗精神分裂症药物如利培酮、 阿立哌唑、 齐拉两酮、 喹硫平^在治疗 性症 状的同时， 对阴性症状亦冇一定改善， 但均 A.有各 ΰ特征的副作 I J， 如椎体外系副作 W(EPS)概率偏高， 静坐不能， 火眠， 焦虑， 心脏 ¾性^ , 尚无一个药物在改 精神分 裂症整体谱系的同时， 有效降低上述副作用。 闪此寻找¾副作用低， 起效快， '冶疗 i 宽的新 抗精神分裂药一直是世界精神制药业的研究焦 点。 脑内多巴胺受体 Λ有多种亚^ , 分为 样受体和 样受体， D ₂ 样受体包括 D ₂ 、 D ₃ 和 D ₄ 受体亚^。 人 研究表明 0 ₂ 拮抗剂可有效治疗精神分裂症 ΡΠ性症状， ill D ₂ 受体在脑内分布 Τ·中脑皮层、 中脑边缘、 黑质和纹状体. 中脑边缘和中脑皮^ DA 受 体 精神分裂疝相关， 而黑质和紋状体 DA通路与精神分裂症无关， 且阻断这两个 DA 通路易引起椎体外系副作 W(EPS)、 髙催乳素症、 静坐不能和迟发性运动障 i (TD)。 , 受体和 D ₂ 受体 有高度同源性， 作用于 D ₃ 受体能够产生 ¾作川于 D ₂ 受体相似的生现 功能， 如改善 PII性症状。 脑内 D ₃ 受体主耍分布于中脑皮层和边缘系统， 阻断 D ₃ 受体 不会产生如锥体外系 (EPS) 副反应， 闪此选择性 D ₃ 受体拮抗剂作为抗精祌分裂疝药 物 Α ίΤ良好的应 W前景。 此外， 动物模型证明， 5-HT _1A 激动作 W (或部分激动作川） 可以冇效地减少冈 DA过度阻断引起的 EPS ^副作 。 临床前研究结果亦显示 5-HT _{I A} 受体激动剂 部分激动剂可改善精神分裂症患者的阴性症状 、 认知功能禾 11情绪 ^ » 5-HT _{I A} 的部分激动作川 D ₃ 的协同作用可在治疗剂 ¾下将 EPS降低到观测水平以下。 国际权威^ Current Pharmaceutical Design, 2010, 1 6(3):308将该类靶点列为近朋抗 M 神分裂症药物研发的 耍靶点， 闪此' 作 丁 · D ₃ 和 5HT _{1 A} 受体' jt.jl.¾" D ₃ 受休选 性 （¾"报道对 0 ₃ 的亲和力强丁-对 D ₂ 受体亲和力的 10倍或以上） 的新 ^抗精神分裂药 物是目前抗精神分裂症药物研发的重耍方向。 国际上由 Forest Laboratories和 Gedeon Richter 共同开发的 D ₂ /D ₃ 拮抗剂 / 5-ΗΤ, _Λ 部分激动剂 Cariprazine (RGH-188)目前正处丁 ·ΙΠ期临床实验中， 丁-精神分裂症和跺狂 症及抑郁症的治疗。 研究表明 Cariprazine对脑内 DA水平 A.有稳定作用， 体内实验 明其对粘神分裂症、 抗抑郁疝和躁狂症的良好治疗作用， 临床研究表明： 精神分裂症 患者中， 冇约 30%的患者病情转化为更难治愈的情感双极障 fti (躁狂抑郁症， 简称跺 郁疝） ， 目前的治疗方案为抗精神分裂症药物与抗抑郁 药物联合治疗。 而 Cariprazine (RGH- 188)的临床研究结果显示， 其对跺郁症有很好的疗效， 若能成功上市， 将首次实 现跺郁症的单一药物治疗， 极人地提髙患者用药的方便程度。 其抗抑郁的起效时间亦 早丁 ·临床常用的抗抑郁药物。

Cariprazine的化学结构

该药物对 D ₂ 、D ₃ /和 5-HT _1A 的亲和力（Ki值)分别为 0.72nmol，0.08nmol和 3.42 1， 其对 D ₃ /D ₂ 受体 S然有一定的选择性， 但仍不够理想. 此可能为该药物在临床上仍 J1. 有低概率 (3mg剂 it下有近 5%的概率)的静坐不能、 椎体外系反应的原 ， 闪为这些副 作 都跟 D ₂ 受体的过度阻断有关。 发明内容

本发明需耍解决的技术 M题之一是提供一种环己烷胺类化合物， 以降低现冇药物 静坐不能、 椎体外系反应概率高 ¾副作用， 提高安全性， 以解决临床难题和满足临 床 ffl药需求；

本发明需耍解决的技术问题之二是提供上述化 合物作为在制备治疗精祌分裂疝及 相关的神经精神类疾病药物中的应用。 本发明所述的环己垸胺类化合物， 为具有如结构通式 （ I 所示的化合物 其儿 何异

( I )

其中

R, , R ₂ ， R ₃ 分别代表氢、 二氟甲基、 （^~(： ₄ 的垸基及取代烷基、 C ₃ ~C ₆ 的环烷基 及取代环烷基、 C ₅ 〜(： ₇ 的¾环烷基及取代 环垸基、 苯基及取代苯基、 吡啶基及取代吡 啶基或卤素；

R ₄ 和 R ₅ 独立地代表氢、 C^ 的烷基及取代烷基、 C ₃ 〜C ₆ 的环垸基及取代环烷基、 < ₅ ~(： ₇ 的¾环烷基及取代^环烷基、 R ₄ 和 R ₅ 与相邻氮原子形成的吡咯烷环、 未被収代 或被取代的哌嗉、 吗啉 未被取代或被取代的哌啶；

1 ₆ 和 R ₇ 独立地代表氢、 C^ ^的烷基及取代垸基、 C ₃ ~C ₆ 的环垸基及取代环烷基、 C ₅ ~C ₇ 的杂环垸基及取代杂环烷基、 R ₄ 和 R ₅ 与相邻氮原于形成的吡咯烷环、 被取代 或被収代的哌嚓、 吗啉或未被取代成被取代的哌啶；

R ₈ 和 ^独立地代表氢、 ~C ₄ 的垸基及取代垸基、 C ₃ ~C ₆ 的环烷基及収代环烷 ^、 C ₅ ~C ₇ 的 环烷基及取代^环烷基、 和 R ₅ 与相邻氮原于形成的吡咯烷环、 被取代 或被取代的哌嗦、 吗啉^未被取代或被取代的哌啶；

所述的 的烷基可被 1 ~3个氟原子取代；

所述的取代环烷基上的取代基包括鼠原子或 C ,〜 C ₂ 的烷基；

所述的（： ₅ ~(： ₇ 的 环垸基包括 0、 S、 N杂环；

所述的 C ₅ ~C ₇ 的収代杂环烷基上的取代基包括氟原子成 C,~C ₂ 的烷基： 所述的取代苯基包括卤素、 CrC ₄ 烷氧基、 氨基、 的烷基取代的苯基； 所述的取代吡啶包括卤紊、 C C ₄ 垸氧基、 氨基、 Ci~C ₃ 的烷基取代的吡啶; 所述的取代的哌唼包括氟原子、 C,~C ₂ 的垸基取代的哌嗨；

所述的取代的哌啶包括 原子、 CrCs的烷基取代的哌啶；

所述的水合物包括含 0.5~3分于的水合物；

所述的盐为含有药物上可接受的阴离子的盐， 诸如盐酸盐、氢漠酸盐、氢碘酸盐、 硝酸盐、 硫酸盐成硫酸氢盐、 磷酸盐成酸式磷酸盐、 乙酸盐、 乳酸盐、 柠檬酸盐、 酒 ^酸盐、 马来酸盐、 富马酸盐、 葡糖酸盐、 糖二酸盐、 苯甲酸盐、 甲磺酸盐、 乙磺酸 盐、 苯磺酸盐、 对甲苯磺酸盐， 其中优选盐酸盐、 氢溴酸盐、 硫酸盐、 三氟 gft酸盐、 酒 ^酸盐成甲磺酸盐，所说的盐优选含 0.5~6分于的结品水，优选为盐酸盐、没氢酸盐� �� 硫酸盐、 二氟醋酸盐成甲磺酸盐；

优选的， 所述的环己烷胺类化合物为如下化合物或其儿 何异构体、 游离碱、 水合 物或盐：

1-1 反式 -N-4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗦- 1 -基)乙基)环己基乙酰胺、

1-2 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌^ - 1 -基)乙基)环己基)止戊酰胺、

1-3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嚓小基）乙基)环己基 )-2，2，2-二 乙酰 胺、

1-4反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基)乙基)环己基)环己基甲酰胺、

1-5反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基)乙基)环己基)哌啶 -4-甲酖胺、

1-6反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌噪 -1 -基)乙基)环己基)苯甲酰胺、

1-7反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)呢嗪 - 1 -基)乙基)环己基)烟酖胺、

1-8 顺式 -N-4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基）乙基)环己基乙酰胺、

1-9顺式 -Ν-(4- (2-(4- (苯并 Μ异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基)乙基)环己基)止戊酰胺、

1-10顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基 )-2，2,2-二 乙酰 胺、

1-11顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1 -基）乙基)环己基)环己基甲酰胺、 1-12顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌噪 -1 -基）乙基)环己基)哌啶 -4-甲酰胺、 1-13顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 Μ异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基)乙基)环己基)苯甲酰胺、 I- 14顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)呃嗪 -1-基）乙基)环己基)烟酰胺、

II - 1反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌噪-卜基）乙基)环己基)硫代乙酰胺、 II -2反式- N-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌唼 -1 -基）乙基)环己基)硫代正戊酖胺、

II -3反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [c ]异噻唑 -3-基)哌唉-卜基)乙基)环己基 )-2，2,2-二 硫代 乙酰胺、

II -4 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [c/]异噻唑 -3-基)哌嗉 -1 -基）乙基)环己基)环己基硫代甲 酰胺、

II -5 反式 -N-( ⁴ -(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基)哌啶 -3-硫代甲 酰胺、

Π -6 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 Μ异噻唑 -3-基)哌嗪 -1 -基）乙基)环己基)苯基硫代甲酰 胺、

II -7顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗉 -1 -基）乙基)环己基)硫代乙酰胺、 II -8顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌唉 -1 -基）乙基)环己基)硫代止戊酰胺、 Π -9顺式 -Ν-(4- (2-(4- (苯并 [c/]异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基 )-2,2,2-二 硫代 乙酰胺、

Π -10 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1 -基）乙基)环己基)环己基硫代屮 酰胺、

11 -11顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌 卜基）乙基)环己基)哌啶 -3-硫代屮 酰胺、

11 -12 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基）乙基)环己基)苯基硫代甲 ft 胺、

11 -13反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌^ -1-基）乙基)环己基)吡啶 -3-硫代屮 酰胺、

11 -14顺式-> -(4-(2-(4-(苯并[ 异噻唑-3-基)哌嗉-】-基)乙基)环己基)吡啶-3-硫 代 ^| 酰胺、

ffl-1反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基）甲磺酰胺、 ΙΠ-2反式 -N-(4-(2-(4- (苯丼 .[ 异噻唑 -3-基)哌嗪- 基）乙基)环己基)丁基 -1 -磺酰胺、 ΙΠ-3反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗨 -1 -基）乙基)环己基 )-1，1， 二 甲硗 酰胺、

ΙΠ-4反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [£/]异噻唑 -3-基)哌嗉小基)乙基)环己基)环己基磺酰胺、 ΙΠ-5反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 f 异噻唑 -3-基)哌嗨 - 1 -基）乙基)环己基)吡啶 -3-硗酖胺、 ΙΠ-6反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗦 -1 -基）乙基)环己基)苯磺酰胺、 ΙΠ-7反式 -N-(4-(2-( ⁴ - (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗉 - 1-基）乙基)环己基)哌啶 -4-磺酰胺、 ΙΠ-8顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基）甲磺酰胺、 ΙΠ-9顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌嗉小基）乙基)环己基)丁基 -1-磺酰胺、 ΙΠ-10 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ /]异噻唑 -3-基)哌 卜基）乙基)环己基 )- 1 , 1，1 -二 Ψ 磺酰胺、

ΙΠ-ίΙ 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪-】 -基）乙基)环己基)环己基磺酰 胺、

ΙΠ-12 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗨 - 1 -基）乙基)环己基)吡啶 -3-磺酰 胺、

ΙΠ-13顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [c ]异噻唑 -3-基)哌嗉小基）乙基)环己基)苯磺酰胺、 ffl-1 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3-基)哌嗪 -1 -基）乙基)环己基)哌啶 -4-硗酰 胺、 ΙΠ-15反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基 )-4-甲基苯磺酰 胺、

ΙΠ-16顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗨-卜基）乙基)环己基 )-4-甲基苯硗酖 胺、

IV-1 反式小 (4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗦 - 1 -基）乙基)环己基 )-3-甲基脲、 IV -2 反式 -3-(4-(2-(4- (苯并 W]异噻唑 -3-基)哌噪- 基）乙基)环己基 甲基脲、 IV -3 反式 -Ν-(4-(2-( ⁴ - (苯并 [c ]异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基)吡咯烷- 甲酰 胺、

IV -4 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3 -基)哌嚓-卜基）乙基）环己基）哌啶 - 1 -甲酰 胺、

IV -5 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [J]异噻唑 -3-基）哌噪小基）乙基）环己基）吗啉— ⁴ -甲酰 胺、

IV -6 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并^]异噻唑 -3-基）哌嗪 - 1 -基）乙基）环己基）哌 - 1 - f ffi 胺、

IV-7 顺式小 (4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1 -基)乙基)环己基 )-3-甲基脲、 IV -8 顺式 -3-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基) 二甲基脲、 IV -9 顺式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基)吡咯垸 -卜甲 ft 胺、

IV-10 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗦小基）乙基)环己基）哌啶小甲酖 胺、

IV -11 顺式 -Ν-(4-(2-(4-(苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 - 1 -基）乙基）环己基）吗啉 -4- ψ ffit 胺、

IV - 12 顺式 -N-(4-(2-(4-(苯并 [ 异噻唑 -3 -基）哌噪 - 1 -基）乙基)环己基）哌咴 - 1 -甲 St 胺、

V- 1 反式小 (4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-3-甲基硫脲、 V -2 反式 -3-(4-(2-(4-(*并 M异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基 )- 1 , 1 -—甲基硫 脲、

V -3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基)吡咯烷小硫代 甲酰胺、

V -4 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 - 1 -基）乙基)环己基)哌啶小硫代 Ψ 酰胺、

V -5 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3 -基)哌嗪-】 -基）乙基)环己基)吗啉 -4-硫代 ' 酖胺、

V -6 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基)哌嗪 -1 -硫代甲 酰胺、

V -7 顺式-卜 (4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌唉小基）乙基)环己基 )-3-甲基硫脲、 V -8 顺式 -3-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 -3-基)哌嗦 -1 -基）乙基)环己基 )-1，1 -二甲基硫 脲、

V -9 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3 -基)哌嗉 - 1 -基）乙基)环己基)吡咯烷 -卜硫代 甲酰胺、

V -10 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 M异噻唑 -3-基）哌嚓-卜甚）乙基)环己基)哌啶小硫代 甲酰胺、

V -11 顺式 -N-(4-(2- (4- (苯并^]异噻唑 -3-基)哌^ -卜基）乙基)环己基）吗啉 -4-硫代 甲酰胺、 V - 12 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗦 -1-基）乙基)环己基)哌嗪 -1-硫代 甲酰胺、

VI- 1 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗦-卜基）乙基)环己基)吡咯垸 -卜硗酰 胺、

VI -2 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌噪 -1-基）乙基 )环己基）哌啶小磺酖 胺、

VI -3 反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί ]异噻唑 -3-基)哌嗨 - 1 -基）乙基)环己基）吗啉 -4-磺酰 胺、

VI -4 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基）哌嗪 -1-磺酰 胺、

VI-5 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌唉-卜 ®)乙基)环己基 )-4-甲基哌噪小 磺酰胺、

VI-6 反式 -Ν-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗦 -1-基）乙基)环己基) -Ν',Ν'-—：甲 氨基磺酰胺、

VI -7 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基)吡咯烷 -I -磺酰 胺、

VI -8 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌唉 -1-基）乙基）环己基）哌啶小磺酰 胺、

VI -9 顺式 -N-(4-(2-(4-(苯并 [rf]异噻唑 -3 -基）哌嗪 - 1 -基）乙基）环己基）吗啉 -4-磺酰 胺、

VI -10 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3 -基)哌嗥 - 1 -基）乙基)环己基)哌嗥 - 1 -硕酰 胺、

VI-11 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-4- 基哌唼 -1-磺酰胺成

VI-12 顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基）哌嗦 -1-基）乙基)环己基) -Ν',Ν' -」屮 基氨基磺酰胺；

Μ00/£Ϊ0ΖΝ3/Χ3<1 860980/WOZ OAV ΐ76«00/εΐ0ί 3/Χ3<Ι 860980/1-ΤΟί OAV

i iis/DdosIlo

本发明还涉及一种 HJ P治疗精神分裂症的组合物， 所述组合物包括治疗冇效 tt的 结构通式 (1 )所示的化合物 该化合物的游离碱或盐或水合物和医学上可接 受的载体； 所述的载体是指药学领域常规的药物载体， 如： 稀释剂、 赋形剂如水 ， 填充剂 如淀粉、 蔗糖^， 粘合剂如纤维素衍生物、 明胶和聚乙烯吡咯烷酮 ， 润湿剂如甘油 ίί , 表面活性剂如十六垸醇 ， 崩解剂如碳酸钙等， 润滑剂如滑 W粉、 硬脂酸钙和镁 等.

可采 本领域公知的方法， 将治疗有效量的本发明的化合物 一种成多种药学 I .. 可接受的载体相混合， 制备成常规的 体制剂如片剂、 粉剂、 胶獎 针剂 。 其中活 性成分的含 为 0. 1 %〜99.5% ( S t比） 。 本发明的化合物可采 如下两种合成通法进行合成' 通法一适 反式化合物 成， 通法二则适 T.顺式化合物的合成。 此外' 本发明还参照 WO20 10070370报道的 方法合成盐酸 Carip _ra zi _ne (RGH- 1 88)， 用于体内外筛选对照研究 W样品。

" Γ顺式化合物的合成

起始原料 6参照文献 Journal of Medicinal Chemistry, 1977, 20(2): 279〜290方法制 备， 通过保护基变换得化合物 7， 7以后的反应与方法一相同。 通过顺式化合物 11 Lj 相应的酰氯成磷酰氯反应亦可制备相应 S标产物， Λ体合成方法见各化合物制备实施 例。 本发明所述环己垸胺类化合物（I )是根据药效团融合药物设计原理， 将 Λ有潜在 对多巴胺 作 的药效团和 有潜在 5-^八作用的药效团进行有机融合， 经过对先 导化合物的合成， 衍生物体外活性试验、 构效关系研究及结构再优化而得到的新结构 系列化合物。 药理研究结 ¾表明： 该系列化合物不仅 A.有强的 D ₃ 、 5-HT _{1 A} *和力， 且对 0 ₂ 受 体亲和力低， ΑίΤ对 D ₃ /D ₂ 受体的高选择性， 起到了意想不到的效果。 体外受体结合试验表明： 本发明所涉及的大多数化合物对多巴胺 D ₃ 、 5-HT _{I A} 受体 Λ有强亲和力 (Ki<10nmol)， 对多巴胺 D ₂ 受体具有中 强度 u弱亲和力 (Ki>50 ol 体现山良好的 D;/D ₂ 受体选抒性， 代表化合物如 1-1对 D ₃ /D ₂ 受体选择性达 1000倍， 优丁 -阳性药 RGH- 188 (选抒性为 10倍） ， 具有深入研究价值。 构效关系研究表明， 该类化合物对多巴胺 D ₃ 、 5-HT _{1 A} 受体的强亲和力及对 D /D ₂ 受体的高选抒性， 结构中含苯并 [ ]异噻唑环及环己烷胺上取代基变化所致化合� �结 构的整体效应密切相关。 动物试验结果亦显示： 上述代表化合物能显著改善阿朴吗啡模 、 MK-801 模 小鼠的相关症状。 由于这些体外作^靶点和体内药理模型 多巴胺功能紊乱导致的神 经系统疾病， 特别是精神分裂症密切相关， 提示本发明所述化合物对粽神分裂症 Π.冇 治疗作 。 化合物体内外研究结 表明： 权利耍求中所述化合物均 存显 ¾抗精神分裂症作 HJ , 口服吸收良好， 急性 ¾性、 亚急性毒性低丁 - RGH-188 , '冶疗窗口较宽， 药代动力 学性质符合成药性耍求， Λ.备作为新型抗精神分裂症开发的潜在价值。 该类化合物 Λ冇高度的 D ₃ /D ₂ 受体选择性， 预示可克服 Θ前同类研究药物对 D ₂ 过度阻断所致的副作 w， 从而将抗精神分裂症药物的副作 W降到低水平。 闪此， 本发 明所述环己烷胺类化合物相对了 · 0前上巿的抗精神分裂症药物及在研的临床朋� �合 物， Λ冇新颖性和创造性的特点及显 ^: 的科学进步。 本发明涉及所述环己烷胺类化合物可能对多种 神经精神类疾病 I 冇改 和治疗作 }¼ , 可 丁精神分裂症、 抑郁疝、 神经性疼痫、 跺狂症、 焦虑症、 帕金森氏病， 尤 K 是精神分裂疝的治疔。 本发明的化合物可以通过口服、 注射等方式施用丁' ¾耍这种治疗的患者。 川丁-口 服时， 可将其制备成常规的 W体制剂如片剂、 粉剂或胶囊 ΐ ; ¾ Τ·注射时， 可将其制 备成注射液。 本发明的施用 ¾可根据用药途径、 患者的年龄、 体 、 所治疗的疚病的 类 和严重程度 进行变化， 其剂 可以 ¾ 10-600mg/kg体重 /大。 综上所述. 本发明的环己烷胺类化合物对多巴胺 D ₃ 受体; 1.有较髙的 和力， J:i 代表化合物 冇 D^Di受体高度选杼性， 表明该类化合物不会产生静坐不能、 椎体外 系反应、 高催乳素症 ¾副作 W (这些副作用均由 D ₂ 受体过度阻断引起） 。 体内试验 表明， 1-1 代表化合物能显 改善阿朴吗啡模型、 MK-801投型小鼠的相关症状。 由 丁 -这些体外作 W粑点禾 11体内药理投型与精神分裂症密切相关， 提示本发明涉及的化合 物 A冇良好的抗精神分裂症作川。 另外该系列化合物口服吸收较好， 其急性 ¾性较低 ( LD ₅ o> 1200mg/Kg ) , 远优丁- RGH-188 ( LD ₅₀ =75.3mg/Kg ) ， Λ备作为一类新 抗 精神神经性疾病研发的价值。

Λ.体实施方式

实施例 1

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [«异噻唑 -3-基)哌嗉 - 1 -基）乙基)环己基）乙酰胺 (1-1 )的制备 (1)、 反式- N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)的制备

将反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙酸 (25.7g， 0.1mol 200mL二氯甲烷加入到 lOOOmL 四口瓶中， 冰浴冷却到 0°C, 滴入三乙胺 (0.25mol), 缓慢滴加氯甲酸异闪酯 (0.15mol), 控温不超过 10°C， 加毕， 室温搅拌 2h, 冷至 5Ό， 加入 200mL冷水搅拌， 分液， 有机层以饱和食盐水洗涤 (200mLxl)， 蒸干， N ₂ 保护下， 向残余物中加入 200mL 无水四氢呋喃， 降温至 0°C， 分批缓慢加入 KBH ₄ (0.1mol)， 控温不超过 5°C， 加毕， ： ί( 温搅拌 2h， 冷却至 5°C以 卜'， 缓慢滴加饱和氯化铰溶液至无气泡溢山， 体系减压浓缩 近干， 加入水 (200mL)、 二氯甲烷 (200mL)分配， 有机层依次以水、 饱和食盐水洗涤， 蒸千， 得中间体反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)， 接; 下一步反应。

(2) 甲磺酸 (反式 -N-叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇)酯 (3)的制备

将反式 叔丁氧羰基 -4-氨基环己基乙醇 (2)(18.225g， 75mmol)、 二乙胺（150mmol) 和二氯甲烷 (250mL)加入到 1L 四口瓶中， 冰浴冷却至 O'C , 缓慢滴加甲烷磺酰 ^ (iOOmmol)的一氯甲烷溶液（150mL), 加毕， 室温搅拌 2h， 反应液依次以水 (200mLx 1)、 1%的氢氧化钠溶液 (200mLx2)、 水 (200mLxl)、 饱和食盐水 (200mLx 1)洗涤， T, 以 95%的乙醇重结晶， 得白色粉末状 体， 收率 73.4%。

(3) 中间体反式 -N-4-(2-(4-(苯并 [d]异噻唑 -3-基)哌嗪小基）乙基)环己基氨基甲酸 叔 T酯 (4)的制备

将中间体 (3)(40mmol 3- (哌嗉 -1-基)苯并 [d]异噻唑 (35mmol)、无水碳酸钾 (70mmoi) 和 DMF(200mL)加入到 500mL 单口瓶中， 60°C反应过夜， 过滤， 滤饼以 DMF 洗涤 (50mLxl), 合并滤液， 蒸干， 残余物以无水乙醇 IE结晶， 得中间体 4。

(4) 中间体反 -4-(2-(4- (苯并 [d]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基)乙基)环己胺 (5)的制备 将 4(30 ol)、 二 Si甲烷（150mL)加入到 250mL 二口瓶中， 缓慢滴加二鉱醋酸 (20mL), 温搅拌过夜, 体系依次以水（150mLx2 5%碳酸钠溶液（lOOmLxl)洗涤， 蒸 干， 得中间体 5。

(5) 目标化合物 1-1的制各

将化合物 5(10mmol)、二乙胺（10mL)和二氣甲烷（120mL)加入� �� 250mL二口瓶中， 冰浴冷却下， 缓慢滴加乙酖氯（12mmol)的二氯甲垸溶液， 加毕室温搅 2h， 体系以水 (50mLx2)、 饱和食盐水 (50mL> )洗涤， 蒸干， 残余物以 95%乙醇 结品， 得 A色结品 I-l(3.41g), 收率 88.2%。

Ή

NMR(CDCI ₃ ,5:ppm):1.06-1.12(m,3H,A-H),1.21-1.29(m,2H,A-H),l.46-1 .53(m,2H,A-H)J.8 l-].85(m,2H,A-H),2.06-2.10(m,2H,A-H),2.27(s,3H,CH ₃ ),2.46(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.64-2 .67(m,4H,piperazine-C¾),3.50-3.53(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.07-4.09(m,lH,A-H),7.32(d><t ,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.44(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.79 (d,lH,J=8.4Hz,Ar-H),7.9 3(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:387[M+H ⁺ ] (6) S标化合物 1-1盐酸盐的制备

将化合物 Ι-1(5ι 1 5%盐酸 (5mmol)和甲醇 (30mL)加入到 lOOmL单口瓶中， ¾ 温下搅拃 lh, 反应液潦清。 将甲醇蒸干， 得油状物， 加入 lOmL异闪醇搅拌 5h， 析出 白色 M体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇 ΐ£结晶， 得 1.9g A色 体， 收率 90.5%。 元素分析： C ₂₁ H ₃₀ N ₄ OS'HC1 (理论值％ _: C 59.63, H 7.39, N 13.24； 实验值％： C 59.51, H 7.32, N 13.09) 。

(7) Θ标化合物 1-1氢溴酸盐的制备

以化合物 I-l(lmmol 5%氢溴酸（Inimoj)为原料， 按照 1-1 盐酸盐的制备方法， 得 0.41g ft色^体， 收率 87.2%。 元素分析： C ₂₁ H ₃ 。N ₄ OS'HBr (理论值％： C 53.96, H 6.68, N 11.99； 实验值％: C 53.75, H6.84, N 11.81 )

(8) 目标化合物 1-1硫酸盐的制备

以化合物 I-l(lnimol)、 5%硫酸 (0.5mmol)为原料， 按照 1-1盐酸盐的制备方法， W 0.38g白色 体， 收率 87%。

元素分析： C _2l H ₃ 。N ₄ OS'l/2H ₂ S0 ₄ (理论值％： C 57.90, H 7.17, N 12.86； 实验值 %: C 58.12, H 7.32, N 12.69)

(9) B标化合物 1-1二 醋酸盐的制备

以化合物 I-l(lmmol 5%二氟醋酸（lmmol)为原料， 按照 1-1盐酸盐的制^方法， 得 0.47g白色 |古|体， 收率 94%。

元素分析： C _2l H ₃ 。N ₄ OS'CF ₃ COOH (理论值％: C 55.19, H 6.24， N 11.19； 实验 值 ⁰ /。·· C 55.32, H 6.01, N 11.46)

(10) 目标化合物 1-1甲磺酸盐的制备

以化合物 I-l(lmmol)、甲磺酸（lmmol)为原料，按照 1-1盐酸盐的制备方法，得 0.39g 白色 体， 收率 90.7%。

元素分析： C _2I H；。 N ₄ OS'CH ₄ 0 ₃ S (理论值％ _: C 54.75, H 7.10, N 11.61； 实验值％: C 54.58, H 7.31, N 11.49)

(11) Θ标化合物 1-1酒 酸盐的制备

以化合物 I-l(lmmol D (-) -酒石酸 (lmmol)为原料， 按照 1-1盐酸盐的制备方法， 得 0.48g A色 体， 收率 89.5%。

元素分析： C ₂₁ H ₃ 。N ₄ OS'C ₄ H ₆ 0 ₆ (理论值％: C 55.95, H 6.76, N 10.44； 实验值％: C 55.76, H 6.54, N !0.70) 实施例 2

反式 _-N - ₍ 4-(2-(4-(苯并 [(/]异噻唑 -3-基)哌 - 1 -基）乙基)环己基）正戊酰胺 (1-2)的制 备

以中间体 5(10mmol)、 正戊酰氯（】2mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法' 得 0标化合物 1-23.72g, 收率 87%。 Ή

NM (CDCl ₃ ,5:p _P m).0.93(t,3H,J=7.2Hz,CH ₃ ), 1.07-1.11 (ni4HA-H), 1.28- 1.33(m,3H,A-H), 1.39-1.43(m,2H,A-H),l.50-1.55(m,2H,A-H),l.88-1.93(m,2H,A-H), 2.10-2.21(m,4H,A-H),2. 44(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.69-2.73(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.52-3.56(m,4H,piperazine-CH ₂ ) 4.07-4.09

(m,lH,A-H),7.38(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.49(dxt,lH,J=8.4 Hz,0.8Hz.Ar-H),7.85(d,l H,J=8.4Hz,Ar-H),7.89(d, 1 H,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:429[M+H ⁺ ] 化合物 1-2盐酸盐的制备

以化合物 1-2(5 ol)和 5%(5mmol)盐酸为起始原料， 采 HJ化合物 1-1盐酸盐的 成方法， 得 2.0g白色 I古 I体， 收率 86% 元素分析： C ₂₄ H, ₆ N ₄ 0S.HC1 (理论值％： C61.98, H 8.02 N 12.05； 实验值％: C 61.81, H 7.95, N 11.92) 化合物 1-2氢溴酸盐的制备

以化合物 I-2(lmmol)和 5%氢溴酸 (lmmol)为起始原料， 采 W化合物 1-1盐酸盐的 合成方法， 得 0.43g A色 体， 收率 84.3% 元素分析： C ₂₄ H ₃₆ N ₄ OS.HBr (理论值 ⁰ /。: C 56.57, H 7.32, N 11.00； 实验值％: C 56.39, H 7.55, N 11.24) 化合物 1-2甲磺酸盐的制备

以化合物 I-2(linmo!)和甲磺酸（lmmol)为起始原料，采 W化合物 1-1盐酸盐的合成 方法， 得 0.48g A色 W体, 收率 92.3% 元素分析： C24H ₃ 6N ₄ OS-CH40,S (Si fS%: C 57.22, H 7.68, N 10.68； 实验值％ _: C 57.03 H 7.87 N 10.40) 化合物 1-2甲磺酸盐 Φ水合物的制备

将化合物 I-2(lmmol)、 甲磺酸（lmmol)、水 (5mL)和甲醇（30mL)加入到 100mL单 U 瓶中， 室温下搅拌 lh， 反应液澄清。 将反应液蒸干， 得油状物， 加入 lOmL异丙醇搅 拃 51ι, 析出白色 1古 I体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇重结晶， 得 0.49g 白色 体， 收率 91.7% 元素分折: C ₂₄ H-, ₆ N ₄ OS'CH ₄ 0 ₃ S'l/2H ₂ 0 (理论值 ⁰ /。: C 56.26, H 7.74, N 10.50 实验值％： C 56.45, H 7.51, N 10.38) 实施例 3

反式 _-N _(4-(2-(4- (苯并 [c/]异噻唑 -3-基）哌嗉 - 1 -基）乙基)环己基 )-2,2,2-二 I 乙酰胺 (1-3)的制备

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XH) ΓV一 ΓΗ W(H一(90。8 V)囊H £p-£ :dd----..

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元素分析： C ₂₆ H ₃₈ N ₄ 0S'HC1 (理论值％: C 63.58, H8.00, N 11.41-, 实验值％： C .46, H 7.95, N 11.54) 。 化合物 1-4二氟醋酸盐的制备

以化合物 I-4(lmmol)和 5%盐酸 (lmmol)为起始原料， 采/ 化合物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 0.51g白色 | |体， 收率 89.5。/。。 元素分析： C ₂₆ H ₃₈ N ₄ OS'CF ₃ C0 ₂ H (理论值％： C 59.14, H 6.91, N 9.85； 实验值％: C 59.32, H 6.78, N 9.61 ) 。 实施例 5

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί/]异噻唑 -3-基)哌嗪-卜基）乙基)环己基）哌啶 -4-甲酰胺 (1-5) 的制备

将化合物 5(I0mmol)>二乙胺（10mL)和二氯甲烷（120mL)加入 到 250mL二口瓶中， 冰浴冷却下， 缓慢滴加 N-Boc-4-哌啶甲酰氯（Ummol), 加毕: ¾温搅拃 2h, 向体系屮缓 慢滴加二氟乙酸的二氯甲垸溶液 20mL， 室温搅拌过夜， 体系依次以水 (150mLx2)、 5% 碳酸钠溶液（lOOmLxl)洗涤， 蒸千， 残余物以 95%乙醇重结晶， 得白色结品 1-5(4.14g)， 收率 91%。

NMR(CDC ,5:ppm): 1.07- 1.13(m,3H,A-H)， 1.20-1.28(m,2H,A-H), 1.47- 1.55(m,2H,A-H), 1.' 1-1.89(m,6H,A-H),2.09-2.13(m,2H,A-H),2.40(m,lH,

A-H),2.48(t,2H,J=7.6Hz,N-CH2),2.64-2.67(m,4H,piperazine-CH ₂ ),2.82-2.91(m,41I,A-II),3. 50-3.53(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.17-4.19(m,lH,A-H),7.32(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H), 7. 44(dxt,1H,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.79(d,lH,J=8.4Hz,Ar-H),7.93(d ,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESi-MS:4S6[M- H ⁺ ]

Θ标化合物 1-5盐酸盐的制备

将化合物 I-5(5mmol)、 5%盐酸（lOmmol)和甲醇 (30mL)加入到 lOOmL单口瓶中，

¾温下搅拌 lh, 反应液浚清。 将甲醇蒸干， 得油状物， 加入 lOmL异丙醇搅拌 5h， 析 出 A色 M体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇重结晶， 得白色粉末状 M体 2.32g， 收率 88%。 元素分析： C ₂₅ H ₃₇ N ₅ OS.2HC〖 （理论值％： C 56.81, H 7.44， N 13.25-, 实验值％： C 56.69, H 7.55, N 13.51 ) 。 实施例 6

反式 -N-( ⁴ -(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪小基）乙基)环己基）苯甲酰胺 (1-6)的制 备

以中间体 5(10mmol)、 苯甲酰氯（12mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得 目标化合物 i-63.56g， 收率 79.4%。 Ή

NMR(D SO-i ,5:ppm): 1.08-1.12(m,3H,A-H),l.21-1.29(m,2H,A-H),l.46-1.53(m,2H,A-H), !.81-1.85(m,2H,A-H),2.02-2.08(m,2H,A-H),2.49(t,2H,J=7.6Hz,N- CH ₂ ),2.64-2.67(m,4H,pip erazine-CH ₂ ),3.50-3.53(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.17-4.1 (m, ] H,A-H),7.30-7.42(m,3H,Ar-H ),7.48-7.53(m,2H,Ar-H),7.79(d,lH,J=8.4Hz,Ar-H)J.90-7.96(m,2H ,Ar-H)

ESI- S:449[M+H ⁺ ] 化合物 1-6盐酸盐的制备

以化合物 I-6(5mmol)和 5%盐酸 (5mniol)为起始原料， 采 W化合物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 2.18g A色 体， 收率 90.1%。 元素分析： C ₂₆ H ₃₂ N ₄ 0S.HC1 (理论值 ⁰ /。： C 64.38, H 6.86， N 11.55： 实验值％: C 64.60, H 6.75, N 11.41) 。 化合物 1-6氢涣酸盐的制备

以化合物 I-6(lmmol)和 5%氢溴酸 (lmmol)为起始原料， 采 ||j化合物 1-1盐酸盐的 合成方法， 得 0.47g白色 体， 收率 88.5。/。。 元素分析: C ₂₆ H ₃₂ N ₄ OS.HBr (理论值。 / _0: C 58.97， H 6.28, N 10.58； 实验值％： C 58.75， H 6.43, N 10.37) 。 实施例 7

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ί]异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)烟酰胺 (1-7)的制备 将化合物 5(10mmol)、二乙胺（1 OmL)和二氯甲烷（120mL)加入到 250mL二口瓶屮， 加入烟酰氯（1 lmmol), 冋流 2h， 冷至 ¾温， 反应液以依次以水（150mLx2)、 5%碳酸钠 溶液（lOOmLxl)洗涤， 蒸千， 残余物以 95%乙醇重结晶， 得白色结晶 I-7(3.89g)， 收率 87%。

Ή

NMR(CDCI ₃ ,6:ppm):l.08-1.14(m,3H,A-H),l.20-1.28(m,2H,A-H),l.44-1 .50(m,2H,A-H),l.7 9-].81(m,2H,A-H),2.01-2.05(m,2H,A-H),2.45(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.66-2.68(m,4H,pipera zine-CH ₂ ),3.56-3.59(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.12(d,2H,J=7.2Hz,N-CH ₂ ),4.17-4.19(m, 1 H,A- H)，7.43(dxt， 1 H,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.51 (d ， I H,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.65(m, 1 H，Ar-H)， 7.79(d,lH,J=8.4Hz,Ar-H),7.89(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H),8.47(m,lH,Ar -H),8.91(d,lH,J=9.2Hz,8 ,4Hz,Ar-H),9.24(d,lH,J=2.0Hz,Ar-H)

ESI-MS:450[M+H ^÷ ] 化合物 1-7盐酸盐的制备

以化合物 I-7(5mmol)和 5%盐酸（lOmmol)为起始原料,采 化合物 1-5盐酸盐的合 成方法， 得 2.1g类!^色 体， 收率 80.6%。 元素分析： C ₂₅ H3,N ₅ OS.2HCI (理论值％: C 57.46, H 6.37, N 13.40； 实验值％ _: C 57.59, H 6.28, N 13.44) 。 实施例 8

顺式 -N-( ⁴ -( ² -( ⁴ - (苯并 W异噻唑 -3-基)哌噪 -1-基)乙基)环己基)乙酰胺 (1-8)的制备

(1)、 中间体 7的制备

将顺式 -4-乙酰氨基环己乙酸 (6)(0.1mol)、 95%乙醇 (200mL)、 浓盐酸 (30mL)加入到 500mL单口瓶中冋流过夜， 蒸干， 残余物中加入 50mL无水乙醇， 蒸干， 加入二乙胺 (30mL)中和， 加入丙酮 200mL， 冷却至 0°C后， 缓慢滴加叔丁氧甲酸酐 (120mmol)的丙 酮溶液， 搅拌 24h, 蒸干， 残余物以 80%乙醇 (25mL)搅拌过滤， 滤饼以水洗涤， 得中 间体 7。

(2) 中间体 11的制备

由中间体 7制备中间体 11, 其方法与通法一中原料 1制备中间体 ₅ 的方法相同。

(3) 1-8的制各

以中间体 n(10mmol)、 乙酰氯（12mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得 目标化合物 1-83.23g, 收率 83.7%。

Ή

NMR(CDCl ₃ ,6:ppm): 1.13-1.19(m,3H,A-H),l.28-1.37(m,2H,A-H),l.40-1.47(m,2H,A-H), l.7 0-1.76(m,2H,A-H),2.13-2.19(m,2H,A-H),2.38(s,3H,CH ₃ ),2.57(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.69-2 .75(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.61-3.64(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.32-4.36(m,lH,A-H),7.42(dxt ， 1 H,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.51 (dxt, 1 H,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.82(d, 1 H,J=8.4Hz,Ar-H),8.0 3(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:387[M+H ⁺ ]

(4) 化合物 1-8盐酸盐的制备

以化合物 I-8(5mmol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采 化仓物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 1.82g A色 M体， 收率 86.1%。 元素分析： C _2l H ₃ 。N ₄ OS.HCI (理论值％： C 59.63, H 7.39, N 13.24； 实验值％： C 59.58, H 7.30, N 13.15) 。 实施例 9

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [rf]异噻唑 -3-基)哌嗉 -1-基）乙基)环己基） £戊酰胺 (1-9)的制 备

以中间体 ll(10mmol)、 ιϋ戊酖氯 (12mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制各方法， 得 S标化合物 I-93.78g， 收率 88.3%。

Ή

NMR(CDCl ₃ ,6:ppm):0.97(t,3H,J=7.2Hz,CH ₃ ),l.l 1-1.15(m,4H,A-H),l.32-1.37(m,3H,A-H), 1.43- 1.47(m，2H，A-H), 1.54- 1.59(m，2H，A-H)， 1.92- 1.97(m,2H,A-H),2.14-2.25(m,4H,A-H),2. 48(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.71 -2.75(m,4H,piperazine-CH ₂ ),

3.57-3.61(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4Jl-4.13(m,lH,A-H),7.44(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H), 7.52(dxt, lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.89(d,】 H，J=8.4Hz,Ar-H),7.93(d，】 H， J=8.0Hz'Ar-H).

ES1-MS:429[ +H ⁺ ] 、(ι麵 ωοι)"

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反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 M异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基)硫代乙酰胺（II-1)的 制备

将化合物 Ι-1(1ι I)和 100乙二醇二甲醚 (DME)加入到 250mL二口瓶中， 加入' ； 森试剂 (Lawesson's reagent, lmmol), 在 90'C条件卜 '反应过夜。 冷至室温， 减 fR蒸除溶 剂， 残留物以硅胶柱层析纯化（洗脱剂： CH ₂ CI ₂ /CH ₃ OH=20:1) , 得淡黄色粉末状 |A1体 0.22g, 收率 56.2%

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NMR(CDCl ₃ ,5:ppm):0.93-1.01(m,3H,A-H),l.08-1.16(m,2H,A-H),l.23-1 .30(m,2H,A-H), 1.6 8- 1.72(m,2H,A-H), 1.93- 1.97(m,2H,A-H),2.14(s,3H,CH ₃ ),2.33(t.2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),2.Sl -2 .54(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.37-3.40(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.94-3.96(m, 1 H,A-H),7.19(d t ,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H).7.31(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.66 (d,lH,J=8.4Hz,Ar-H),7.8 0(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:403[M+H ] 化合物 II -1盐酸盐的制备

以化合物 II-l(0.5mmol)和 5%盐酸 (0.5mmol)为起始原料， 采 W化合物 1-1盐酸盐 的合成方法， 得 0.18g类白色 |古|体， 收率 81.2% 元素分析： C ₂₁ H ₃₀ N ₄ S ₂ .HCI (理论值％: C 57.44 H 7.12, N 12.76； 实验值％: C 57.62, H7.01, N 12.89) 化合物 II -1氢溴酸盐的制各

以化合物 II-l(0.5mmol)和 5%氢溴酸 (0.5mmol)为起始原料， 采川化合物 1-1盐酸 盐的合成方法， 得 0.21g类白色 M体， 收率 87% 元素分析： C ₂₁ H ₃ N ₄ S ₂ .HBr (理论值％·· C 52.16, H6.46, N 11.59； 实验值％ _: C 52.37, H 6.29, N 11.74) 实施例 16

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3 -基)哌嗪 - 1 -基）乙基)环己基 )硫代 ill戊酰胺（ II -2) 的制备

以化合物 I-2(lmmol)为原料， ^; 森试剂（Lawesson's reagent, 1 mmo!), 按照化合物 II-1的制备方法， 得 S标化合物 II-20.32g， 收率 72.1% 9l(!Hz.//vHl£t(H)ie¾)(HvHrs〕£!7sduplz--- .*.-*.*

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以中间体 5( 1 Ommol)、正」 '基磺酰氯（ 12mmol)为原料，按照化合物 1-1的制备方法， 得 Θ标化合物 III-23.79g， 收率 81.6°/ ₀ 。

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N R(CDCl ₃ ,5:ppm):0.92(t,3H,J=6.8,A-H),1.02-1.19(m,4H,A-H),1.20- 1.29(m,5H,A-H),1.4 2- 1.58(m，2H，A-H)， 1.81-1.84(m,2H,A-H),2.05-2.08(m,2H,A-H),2.64-2.66(m,4H,piper azine- CH ₂ ),2.68(t,2H,J=7.8Hz,N-CH ₂ ),3.02(t,2H,J-7.2,A-H),3.23-3.27(m,lH,A-H),3.55-3.57(m ,4 H,piperazine-CH ₂ ),7.33(dxt,lH,J=8Hz,J=0.8Hz,Ar-H),7.43(dxtJH,J=8Hz,J=0 .8Hz,Ar-H),7 .79(d,lH,J=8Hz,Ar-H),7.88(d,lH,J=8Hz,Ar-H).

ESI-MS:465[M+H ⁺ ] 化合物 ΙΠ-2盐酸盐的制备

以化合物 in-2(5mmol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采川化合物 1-1盐酸盐的^ 成方法， 得 2.33g白色 Ι· |体， 收率 93%。 元素分析： C ₂₃ H ₃₆ N ₄ 0 ₂ S ₂ .HC1 (理论值％： C 55.12， H 7.44， N 11.18； 实验值％: C 54.93, H 7.56, N 11.30) 。 实施例 29

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ ]异噻唑 -3-基)哌嗨 -1-基）乙基)环己基 )-1，1,1-二^甲磺酰胺 0Π-3)的制备

以中间体 5(10mmol)、二氟甲磺酰氯（12mmol)为原料，按照� �合物 1-1的制备方法， 得 (3标化合物 ΙΠ-34.03g, 收率 84.6%。

NM (CDCl ₃ ,5:ppm):1.02-1.19(m,2H,A-H),1.20-1.29(m,3H,A-H),1.42-1 .58(m,2H,A-H),1.8 l-1.84(m,2H,A-H),2.05-2.08(m,2H,A-H),2.64-2.66(m,4H,piperazi ne-CH ₂ ),2.68(t,2H,J=7.8 Hz,N-CH ₂ ),3.23-3.27(m,lH,A-H),3.55-3.57(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.33(dxt,lH,J=8Hz,J=0. 8Hz _; Ar-H),7.43(d=<t.1 H,J=8Hz,J=0.8Hz,Ar-H),7.79(d, 1 H,J=8Hz,Ar-H),7.88(d, 1 H,J=8Hz,Ar -H).

ESI-MS:477[M+H ⁺ ] 化合物 ΙΠ-3盐酸盐的制备

以化合物 III-3(5mmol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采川化合物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 2.31g白色 体， 收率 90.1%。 元素分析： C ₂ 。H ₂₇ F ₃ N ₄ 0 ₂ S ₂ .HCI (理论值％: C 46.82， H 5.50, N 10.92； 实验值％： C 46.91, H 5.67, N 10.99) 。 实施例 30

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 - ³ -基)哌嗪小基)乙基)环己基)环己基磺酰胺 (ΙΠ- ⁴ ) 的制备 jsu/uld画 OAV

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化合物 ΙΠ-ll盐酸盐的制备

以化合物 ffl-ll(5 _mm ol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采 化合物 1-1 盐酸盐的 合成方法， 得 2.13g A色 体， 收率 81 %。 元素分析： C ₂₅ H _3S N ₄ 0 ₂ S ₂ .HC1 (理论值％: C 56.96, H 7.46， N 10.63； 实验值％: C 57.12, H 7.59， N 10.88) 。 化合物 m-ii酒 酸盐的制备

以化合物 ΙΠ-ΙΙ(ΙηιπιοΙ)和 D(-)-酒石酸 (lmmol)为起始原料，采川化合物 1-1盐酸盐 的合成方法， 得 0.59g白色 1古 I体， 收率 91.7。/。。 元素分析： (理论值％： C 54.35, H6.92, N 8.74； 实验值％: C 54.08， H 7.13， N 8.52) 。 化合物 ΙΠ-11酒 酸盐三水合物的制备

将化合物 ffl-11 ( mmol), D (-) -酒石酸（lmmol)、 水（3mL)和甲醇 (30mL)加入到 lOOmL单口瓶中， ¾温下搅拌 lh, 反应液澄清。 将反应液蒸干， 得油状物， 加入 lOmL 异丙醇搅拌 6h， 析出白色 |古|体， 过滤， 滤饼烘干， 95%乙醇重结晶， 得 0.61g A色 Ι Ι 体， 收率 87.7%。 元素分析： C ₂₅ H ₃₈ N ₄ 0 ₂ S ₂ 'C ₄ H ₆ 0 ₆ '3H ₂ 0 (理论值 ⁰ /。： C 50.13, H 7.25, N 8.06; $ 验值％： C 50.35, H 7.48, N 7.83) 。 实施例 38

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基)环己基）吡啶 -3-磺酖胺（III -12)的制备

以中间休 ll(10mmol)、 吡啶 -3-磺酰氯 (11 mmol)为原料， 按照化合物 1-7的制各方 法， 得 Θ标化合物 m-124.02g， 收率 82.9%。

Ή

NMR(CDCl ₃ ,5:ppm):l.03-1.20(m,2H,A-H),l.21-1.30(m,3H,A-H),l.43- 1.59(m,2H,A-H), 1.8 l-].84(m,2H,A-H),2.04-2.07(m,2H,A-H),2.62-2.64(m,4H,piperazi ne-CH ₂ ),2.68(t,2H,J=7.8

Hz,N-CH ₂ ),3.24-3.29(m,lH,A-H),3.57-3.58(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.35(dxt,lH,J=8Hz,J=0.

8Hz，Ar-H),7.46(dxt,lH,J=8Hz，J=0.8Hz，Ar-H)，7,66(m� ��lH，Ar-H)，7.81(d，lH,J=8Hz，Ar-H)，7.

89(d,lH,J=8Hz,Ar-H),8.46(m,lH,Ar-H),8.88(d,lH,J=9.2Hz,8.4 Hz,Ar-H),9.21(d,lH,J=2.0H z,Ar-H).

化合物 111-12盐酸盐的制^

以化合物 in-12(5mmol)和 5%盐酸（lOmmol)为起始原料， 采 W化合物 1-5盐酸盐的 合成方法， 得 2.2g A色 |古|体> 收率 78.6%。 元素分析： C ₂₄ H ₃₁ N ₅ 0 ₂ S ₂ .2HC1 (理论值°/。 _: C 51.60, H 5.95, N 12.54； 实验值％： C 51.67, H 6.08, N 12.49) 。 实施例 39

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 W异噻唑 -3 -基)哌嗪 - 1 -基）乙基)环己基)苯磺酰胺 (ΙΠ- 13)的 制各

以中间体 ll(]0mmol)、 苯磺酰氯（12mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方法， 得目标化仓物 ΙΠ-134.36g, 收率 87.6%。

Ή

NMR(CDCl ₃ ,5:ppm).0.79-0.87(m,2H,A-H),1.04-1.13(m,3H,A-H),1.22-1 .32(m,3H,A-H),1.5 7-1.64(m,4H,A-H),2.28-2.31(m,lH,A-H),2.33-2.41(m,4H ₇ piperazine-CH ₂ ),2.8]-2.86(m,lH. A-H),3.41-3.43(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.37-7.40(m,2H,Ar-H),7.45(t,lH,J=8Hz,Ar-H),7.56( t,lH,J=8Hz,Ar-H) _? 7.68-7.70(m,2H _! Ar-H),8.05-8.08(m,3H,Ar-H).

ESI- S:499[M+H ⁺ ] 化合物 ΙΠ-13盐酸盐的制备

以化合物 in-13(5mmol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原枓, 采 W化合物 1-1 盐酸盐的 合成方法， 得 2.07g白色 I古 I体， 收率 79.3 %。 元素分析： C ₂₅ H ₃₂ N ₄ 0 ₂ S ₂ .HC1 (理论值％： C 57.62, H 6.38, N 10.75； 实验值％: C 57.70， H 6.45, N 10.71 ) 。 实施例 40

顺式 -N -(4-(2- (4- (苯并 [ί]异噻唑 -3 -基）哌嗪 - 1 -基）乙基）环己基）哌啶 -4-磺酰胺 (111 -14)的制备

以中间体 U(iOnimol)、 N-Boc-4-哌啶磺酰氣（11 mmol)为原料， 按照化合物 1-5的 制备方法， 得 Θ标化合物 IH-l44.!8g， 收率 85.1%。

Ή

NMR(CDCl ₃ ,5:ppm):l.03-1.19(m,2H,A-H),l.21-1.30(m,3H,A-H),l. 3-1.59(m,2H,A-H),l.8 2-1.85(m,2H,A-H),2.06-2.08(m,2H,A-H),2.10-2.35(m,4H,A-H),2.3 8-2.40(m,4H,A-H),2.65- 2.67(m,4H,piperazine-CH ₂ ),2.69(t,2H,J=7.8Hz,N-CH ₂ ),3.l6-3.29(m,2H,A-H),3.57-3.60(m, 4H,piperazine-CH,),7.34(dxt,lH,J=8Hz,J=0.8Hz,Ar-H),7.45(dxt, lH,J=8Hz,J=0.8Hz,Ar-H), 7.80(d, 1 H,J=8Hz,Ar-H).7.89(d,l H,J=8Hz,Ar-H).

ESI-MS:492[ +H^] 化合物 ΙΠ-14盐酸盐的制各

以化合物 ID-14(5mmoi)和 5%盐酸（lOmmo!)为起始原料， 采川化合物 1-5盐酸盐的 合成方法， 得 SJlg ft色^体， 收率 78.4%。 元素分析： C ₂₄ H ₃₇ N ₅ 0 ₂ S ₂ .2HCI (理论值％·· C 51.05, H 6.96, N 12.40： 实验位％ _: C 51.01， H 7.03, N 12.55) 。 6，画醒〕 /13d 86ioi OAV

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以化合物 IV-9(5mm ₀ l)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采 化合物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 2.03g A色 |古|体， 收率 84.9%。 元素分析： C ₂ 4H ₃₅ N ₅ OS'HCl (理论值％: C 60.29, H 7.59, N 14.65： 实验值％： C 60.13, H 7.65, N 14.54) 。 实施例 52

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基）哌嗪 -1-基）乙基）环己基）哌啶小甲酰胺（IV -10)的制备

以中间体 ll(10mniol)、 哌啶 -1-甲酰氯（12mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方 法， 得 13标化合物 IV-104.)3g， 收率 90.7%。

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N RCDMSO-^a.-ppm): 1.18-1.39(m,3H,A-H), 1.43-1.45(m,2H,A-H), 1.61 -1 ,66(m,2H,A-H). 1.78-1.84(m,6H,A-H),l.97-1.88(m,2H,A-H),2.22-2.23(m,2H,A-H), 2.64(t,2H,J=7.6Hz,N-C H ₂ ),2.83-2.85(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.74-3.77(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.82-3.84(m,4H,A-H ),4.28-4.3 l(m,1H,A-H),7.46(dxt,lH,J=8.4Hz,0.8Hz,Ar-H),7.56(dxt,lH,J=8. 4Hz,0.8Hz,Ar- H),7.91(d,lH,J=8.4Hz,Ar-H) _< 8.03(d,lH,J=8.0Hz,Ar-H).

ESI-MS:456[M+H ⁺ ] 化合物 IV-10盐酸盐的制备

以化合物 lV-10(5mmol)和 5°/。盐酸 (5mmol)为起始原料， 采 化合物 1-1 盐酸盐的 合成方法， 得 2.0g白色 体， 收率 81.3%。 元素分析： C ₂₅ H„N ₅ OSHCl (理论值％： C61.02, H 7.78, N 14.23； 实验值％： C 60.89， H 7.65， N ]4.19) 。 化合物 IV-10硫酸盐的制备

以化合物 IV-lO(lmmol)和 5%硫酸 (0.5mmol)为起始原料，采 化合物 1-1盐酸盐的 合成方法， 得 0.43g A色^体， 收率 85.5%。 元素分析： C ₂₅ H ₃₇ N ₅ OS'l/2H ₂ S0 ₄ (理论值％ _: C 59.49, H 7.59, N 13.88； 实验值 %： C 59.65, H 7.42, N 14.03) 。 实施例 53

顺式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3 -基）哌嗦-卜基）乙基)环己基）吗啉 -4-甲酰胺 ( IV -11)的制备

以中间体 ll(10mmol)、 吗啉 -4-甲酰氯（12mmol)为原料' 按照化合物 1-1的制 方 法， 得目标化合物 IV-114.08g, 收率 89.3%。 /3/:/ O20sil£ 860980HOZAV τa8(ΗΗε rsoswίτ(ΗνΗζν (ΗνΉ0)(ε：uldd:εΡ--- -- - S ¾¾ Ss^奪^^^iΙBΛΗ Π％8Ό S6 ώ- 。·

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以中间体 5(10mmol)、 吗啉 -4-磺酰氯 ( mmol)为原料， 按照化合物 1-1的制备方 法， 得 标化合物 -34.5 _§ , 收率 91.3%。

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NMR(D SO- ,5:ppm): 1.23-1.28(m'2H，A-H)， 1.44- 1.54(m，3H，A-H)， 1.93-2.03(m,4H,A-H), 2.22-2.24(m,2H,A-H),3.14-3.17(m,4H,A-H),3.18-3.20(m,lH,A-H), 3.24(t,2H,J=7.6Hz,N-C H ₂ ) -51-3.52(m,4H,piperazine-CH ₂ ),3.82-3.85(m,4H,A-H),4.17-4.19(m,4H,piperazine-CH ₂ ),7.58(d,lH,J=7.4Hz,Ar-H),7.70(d,lH,J=7.4Hz,Ar-H),8.03-8.09( m,2H,Ar-H).

ES1- S:494[M+H ⁺ ] 化合物 VI-3盐酸盐的制备

以化合物 I-3(5mmol)和 5%盐酸 (5mmol)为起始原料， 采 化合物 1-1盐酸盐的合 成方法， 得 2.46g白色 体， 收率 92.8%。 元素分析： C ₂ .,H; ₅ N ₅ 03S ₂ .HC1 (理论值。 /。·· C 52.11， H 6.84, N 13.21； 实验位％ _: C 52.35, H 6.96, N 13.49) 。 化合物 VI-3硫酸盐的制备

以化合物 I-3(lmmol)和 5%硫酸 (0.5mmol)为起始原料， 采 |j化合物 1-1盐酸盐的 合成方法， 得 0.51g A色 W体， 收率 94.3%。 元素分析： C ₂₃ H ₃₅ N ₅ 0 ₃ S ₂ .1/2H ₂ S0 ₄ (理论值％: C 50.90, H 6.69, N 12.90； 实验 值 ⁰ / _0: C 50.73, H 6.85, N 12.67) 。 实施例 70

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [c/]异噻唑 -3-基)哌嗦 -1-基）乙基)环己基)哌嗦 -1-磺酰胺 (VI- ⁴ ) 的制备

将化合物 S(10mmol)、 二乙胺（10mL)和二氣甲垸（120mL)加入到 250mL二口瓶中， 冰浴冷却卜， 缓慢滴加 4-苄基哌唉 -1-磺酰氯（llnmiol), 加毕室温搅拌 5h， 体系依次以 水（】50mLx2)、 5%碳酸钠溶液（lOOmLxl)洗涤， 蒸千， 残余物以 95%乙醇重结品， 4g ^色 体， 收率 69%。 将所得白色 体、 0.2glO%Pd/C加入到甲醇 (50mL)中， 以&气置换体系空气， 再 以氢气置换体系内氮气， 持续通入氢气， 外温 60'C条件下， 搅拃过夜。 过滤， 滤饼以 热甲醇 (30mL)洗涤 3次， 合并滤液， 减压蒸除溶剂， 残余物以 95%乙醇重结晶， 得 1.2g 白色 体， 收率 35%。

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NMR(DMSO- ',5:ppm):1.21-1.26(m,2H,A-H),1.42-1.52(m,3H,A-H),1.91-2.01(m ,4H,A-H), 2.21 -2.23(m,2H,A-H),2.93-2.95(m,4H,A-H),3.13-3.16(m,4H,A-H),3.17 -3.19(m,lH,A-H),3. 23(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),3.50-3.51(m,4H,piperazine-CH ₂ ),4.16-4.18(m,4H,piperazine-CH ₂ ) ,7.57(d, 1 H,J=7.4Hz,Ar-H),7.70(d, 1 H,J=7.4Hz,Ar-H),8.03-8.07(m,2H,Ar-H).

ESI-MS:593[M+H ⁺ ] 化仓物 VI-4盐酸盐的制备

以化合物 I-4(5mmol)和 5°/。盐酸（lOmmol)为起始原料， 采用化合物 1-5盐酸盐的 合成方法， 得 2.58g f ^色 I古 j体， 收率 91.2%。 元素分析： C ₂₄ H _3S N ₆ 0 ₂ S ₂ .2HC1 (理论值 ⁰ /。: C 48.84， H 6.77, N 14.86； 实验 C 48.98， H 6.62, N 15.04) 。 实施例 71

反式 -N-(4-(2-(4- (苯并 [ 异噻唑 -3-基)哌嗪 -1-基）乙基)环己基 )-4-甲基哌嗦 -1-磺酰 胺 (VI-5)的制备

以中间体 5(10mmol)、 4-甲基哌嗉 -1-磺酰氯（12mmol)为原料，按照化合物 1-1的制 备方法， 得！ 3标化合物 I-54.66g, 收率 92.1%。

Ή NMR(DMSO- ,5:ppm): 1.22-1.27(m,2H,A-H), 1.42-1.52(m,3H,A-H), 1.91 -2.01(m,4H,A-H).

2.21-2.23(m,2H,A-H),2.41(s,3H,A-H),2.93-2.95(m,4H,A-H),3. 12-3.15(m,4H,A-H),3.17-3.1 9(m,lH,A-H),3.23(t,2H,J=7.6Hz,N-CH ₂ ),3.50-3.51(m,4H,piperazine-CH ),4.16-4.18(m,4H, piperazine-CH ₂ ),7.57(d,lH.J=7.4Hz,Ar-H),7.70(d,lH,J=7.4Hz,Ar-H),8.03 -8.07(m,2H,Ar-H )·

ESI- S:507[M+H ⁺ ] 化合物 VI-5盐酸盐的制备

以化合物 I-5(5mmol)和 5%盐酸（lOmmol)为起始原料， 采用化合物 1-5盐酸盐的 合成方法， 得 2.62g A色 W体， 收率 90.3%。 元¾分析： C ₂₄ H _3S N _b 0 ₂ S ₂ .2HCI (理论值 ⁰ /。： C 49.73, H 6.96, N 14.50； 实验值％ _: C 49.87, H 6.69, N 14.63) 。 化合物 VI-5甲磺酸盐的制备

以化合物 I-5(lmmol)和甲磺酸 (2mmol)为起始原料， 采 W化合物 1-5 盐酸盐的合 成方法， 得 0.64g白色 Ifl体， 收率 91.7%。 元素分析： C ₂₄ 1½N ₆ 0 ₂ S ₂ .2CH ₄ 0 ₃ S (理论值％： C 44.68, H 6.63, N 12.02； 实验 值 ⁰ / _0: C 44.39, H 6.48, N 11.86) 。 实施例 72

反式 -N-(4-(2-( ⁴ - (苯并 M异噻唑 -3 -基)哌嗪-卜基）乙基)环己基) -N ' ,Ν ' -」 Φ基氨 磺酰胺 (VI-6)的制备

以中间体 5(10mmol)、 Ν',Ν'-一甲基氨基磺酰氯（12 _m mol)为原料 ' 按照化合物 1-1 的制备方法， 得 13标化合物 I-64.18g， 收率 92.7%。 oosu/DId ii OiAV ysa)s〇2z-r Γ 1 ( XHrΙ01一vHr 16VH一 ς0H00ζ 1 νΉ17)dd(H：Pl:p^pε-------···. -

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实施例 81

多巴胺 D ₂ 受体结合试验

1、 实验材料：

①、 D ₂ 受体细胞转染：

本实验 含有 D ₂ 受体 A基因的质粒载体转染 HEK293细胞， 使川 fe酸钙转 ¾ 法， 并从转染后的细胞中， 通过含 G418的培养液培养， 以及挑选细胞单克隆和放射性 配基结合实验， 最终获得能稳定表达 D ₂ 受体蛋白的稳定细胞株。

②、 受体结合实验材料：

同位素配基 [ ³ H]Spiperone( U 3.0Ci/mmol) _; 购 ΰ Sigma 公司； (+) spiperone, 购 f J RBI 公 ； GF/B玻璃纤维滤纸， 购 Whatman公司； Tris进口分装； PPO、 POPOP 购 C]上海试剂一厂； 胎溶性闪烁液。 Beckman LS-6500 多功能液体闪烁计数仪。

2、 实验方法：

①、 细胞：

用含以上各种基闪的重组病 ¾分别感染 HEK-293细胞， 48-72小时后受体蛋 [^在 膜上大 ¾表达， 将细胞 1000卬 m离心 5min后弃培液， 收胞体， 保存丁 --201：冰筘内备 HJ。 实验时 W Tris-HCl反应缓冲液 (pH=7.5)S悬。

②、 受体: ¾争结合实验：

将待测化合物丄 -J放射性配基各 20μί及 ] 60nL受体蛋 A加入反应试管中 , 使受试 化合物及 II性药物终浓度均为 10μηιο1/ί， 30°C水浴孵育 50min后， 即刻移至冰浴终 lh 其反应； 在 Millipore细胞样品收集器上， 经过 GF/C玻璃纤维滤纸快速抽滤， 并川洗 脱液 (50mMTris-HCl, pH7.5) 3mLx3次， 續波 5~6min烘干， 将滤纸移入 0.5mL离心 管中， 加入 500μ 胎溶性闪烁液。 避光静置 30min以上， 计数测定放射性强度。 按以 '卜'公式计算各化合物对同位素配基结合的抑� ��率百分率：

抑制率 (1%)=总结合管 cpm-化合物 cpm/总结仓管 cpm-非特异结合管 _C pm>< 100% 化合物每次实验做双复管， 进行两次单独实验。 抑制率高 T 85%的化合物进行一系列浓度的受体结合试验， 确定 Τ·数抑制 ( 1C50 , 抑制 50% [3H]-Spiperone与 D ₂ 受体结合所需化合物浓度） 。 每浓皮测定两 管， 每个化合物进行两次独立试验。

Ki= IC50/(H [L]/^,) ( i : 药物 受体的亲和力， L: 待测化合物浓度， K _iy . 放^ 性配基 受体的 *和力）

结¾表明： 1-1 化合物对 D ₂ 受体均有弱亲和力， -体数据见表 1和表 2。 表 1 粗筛化合物 10umol/L浓度对 'HjSpiperone i-j D ₂ 受体结合的竞争仰制率 (％) 编" 抑制率 (％) 抑制率(％) 编号 抑制率(％)

1-1 86.53 ΙΠ-1 86.37 IV-11 95.09

1-2 89.21 ΙΠ-2 85.45 IV-12 93.85

1-3 88.79 ΙΠ-3 81.28 V -l 85.01

1-4 85.30 ΙΠ-4 86.1 3 V -2 90.34 1-5 90.32 ΙΠ-5 84.67 V-3 93.56

1-6 86.89 m-6 84.46 V-4 84.86

1-7 89.58 ΙΠ-7 88.25 V-5 89.73

1-8 91.63 III-8 80.43 V-6 84.59

1-9 88.54 ΙΠ-9 86.92 V-7 92.03

1-10 83.02 ΙΠ-10 88.10 V-8 85.22

111 85.38 ΙΠ-11 85.39 V-9 88.15

1-12 87.51 ΙΠ-12 85.96 V-10 86.98

1-13 89.05 ΙΠ-13 86.48 V-ll 82.02

1-14 84.78 ΙΠ- 14 89.93 V-12 87.44

II -I 84.23 ΙΠ-15 84.07 VI-1 95.11

II -2 88.79 ΙΠ-16 89.88 VI-2 90.75

II -3 82.97 IV-1 85.51 W-3 79.58

II -4 91.16 IV -2 86.73 VI-4 89.47

II -6 89.65 IV -3 87.28 VI-5 90.36

II -7 84.94 IV -4 85.19 VI-6 85.20

II -8 86.80 IV -5 95.27 VI-7 91.94

II -9 80.35 IV-6 86.49 VI-8 84.591-10 85.69 IV-7 83.06 VI-9 80.611-12 86.27 IV-8 89.13 VI-10 90.911-13 84.87 IV-9 88.94 Vi-11 83.501-14 83.04 IV-10 84.65 VI-12 86.85

I-l ^化合物抑制率高丁- 85%的化合物对 D ₂ 受体亲和力 (Ki: nmol) 编号 D ₂ ¾号 D ₂ 编号 D ₂

1-1 >1000 ΙΠ-2 512.78 V-1 910.64

1-2 >1000 ΙΠ-3 1 V-2 765.35

1-3 >1000 ΙΠ-4 824.11 V-3 438.77

1-4 >1000 ΙΠ-5 / V-4 /

1-5 797.42 IH-6 1 V-5 219.03

1-6 973.37 ΙΠ-7 58.23 V-6 1

1-7 854.21 ΙΠ-8 1 V-7 380.67

1-8 >1000 ΙΠ-9 369.05 V-8 >1000

1-9 763.45 ΙΠ-10 102.67 V-9 931.05

1-10 1 ΙΠ-11 >1000 V-10 415.32

1-11 894.32 ΙΠ-12 10.95 V-11 1

1-12 635.78 ΙΠ-13 >1000 V-12 726.33

M3 30.16 ΙΠ-14 479.88 VI-1 55.38

1-14 1 ΙΠ-15 1 VI-2 283.06

II -1 1 ΙΠ-16 14.71 VI-3 1

II -2 312.67 1V-1 812.50 VI-4 106.71 II -3 1 IV-2 869.33 VI-5 167.02

II -4 348.10 IV -3 587.21 VI-6 907.78

II -6 552.77 IV -4 136.08 W-7 98.21

II -7 1 IV-5 13.34 Vi-8 /

II -8 441.53 IV -6 124.85 VI-9 1

II -9 1 IV -7 1 VI-10 60.43

11-10 543.79 IV-8 964.31 VI-U 1

11-12 496.05 IV-9 418.27 VI-12 >1000

II -13 1 IV-10 1 RGH-188 0.72

II -14 1 IV-11 154.78

ΙΠ-1 765.23 IV-12 78.24 实施例 82

多巴胺 D ₃ 受体结合试验

实验方法参照 Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics2010,333(l): 328进行。 结果表明： 1-1 化合物对 D ₃ 受体均有强亲和力， i^'RI性药 RGH-188相 ， 结 合实施例 11的结 ¾，本系列化合物 Λ有良好的 D ₃ /D ₂ 受体选抒性， Λ体数据见表 3和表 4。 表 3 粗筛化合物 10umol/L浓度对 [ ³ H]-Spiperone D ₃ 受体结合的竞争仰制率 (％) 编号 仰制率 (％) 编号 抑制率(％；) 编号 抑制率 (％)

1-1 99.82 ΙΠ-1 103.73 IV-11 99.26

1-2 97.78 ΙΠ-2 97.55 IV-12 95.84

1-3 102.36 ΙΠ-3 95.27 V-1 89.22

1-4 98.20 ΙΠ-4 99.62 V-2 101.79

1-5 100.23 ΙΠ-5 93.98 V-3 96.56

1-6 99.20 ΙΠ-6 94.88 V-4 86.82

1-7 98.69 ΙΠ-7 90.63 V-5 99.95

1-8 95.85 ΙΠ-8 101.40 V-6 90.53

1-9 96.04 ΙΠ-9 95.61 V-7 95.64

1-10 94.89 ΙΠ-10 99.05 V-8 97.09

1-11 96.51 ΙΠ-11 91.68 V-9 99.12

1-12 98.39 ΙΠ-12 98.46 V-10 86.98

1-13 98.68 ΙΠ-13 92.91 V-11 90.39

1-14 99.17 ΙΠ-14 95.49 V-12 98.17

II -1 98.98 ΙΠ-15 94.01 W-1 96.39

11-2 93.46 ΙΠ-1 89. J 6 VI-2 97.80

II -3 99.89 IV-1 100.09 VI -3 02.79

11 -4 95.78 IV -2 96.37 VI-4 96.24

11 -6 95.20 IV -3 98.81 VI-5 99.65

II -7 96.19 IV -4 90.58 VI -6 99.82

II -8 94.36 IV -5 95.76 VI-7 95.58 II -9 96.58 IV-6 96.45 VI-8 89.07

11-10 99.47 IV-7 103.94 VI -9 85.96

11-12 97.02 IV-8 99.13 Vl-10 99.03

11-13 92.87 IV-9 98.28 VI-11 88.69

11-14 94.41 IV-10 92.69 -12 103.05 表 4 抑制率高丁 · 95%的化合物对 D ₃ 受体亲和力 (Ki: nmol)

编 D ₃ " " ₃ 编号 D ₃

1-1 2.71 ΙΠ-2 27.06 V-1 1

1-2 0.74 ΙΠ-3 5.38 V-2 1.15

1-3 1.49 ΙΠ-4 18.17 V-3 32.33

1-4 2.09 ΙΠ-5 1 V-4 1

1-5 0.09 ΙΠ-6 1 V-5 0.92

1-6 0.07 ΙΠ-7 1 V-6 1

1-7 0.10 ΙΠ-8 0.97 V-7 40.36

1-8 1.04 ΙΠ-9 23.51 V-8 13.45

1-9 10.03 ΙΠ-10 6.09 V-9 0.70

1-10 / ΙΠ-11 1 V-10 /

1-11 13.19 ΙΠ-12 2.15 V-11 1

1-12 0.17 ΙΠ-13 1 V-12 19.30

1-13 29.56 ΙΠ-14 12.06 VI-1 74.56

1-14 7.03 ΠΙ-15 1 VI -2 7.28

II -1 1.09 ΙΠ-16 1 VI -3 1

II -2 1 IV-1 3.21 VI-4 10.93

II -3 1.87 IV -2 ο.π VI-5 14.17

II -4 28.32 IV -3 31.28 VI-6 0.09

II -6 54.96 IV-4 1 VI-7 3.12

11 -7 1.53 IV -5 90.15 VI -8 1

II -8 1 1V-6 10.17 VI-9 1

II -9 3.10 IV-7 2.29 VI -10 0.10

11-10 9.41 IV-8 3.10 VI-11 1

11-12 40.65 IV-9 28.55 VI-12 2.66

11-13 1 IV-10 1 RGH-188 0.08

11-14 1 IV-11 20.83

ΙΠ-1 0.08 IV-12 5.04 实施例 83

5-HT 受体结合试验

1、 实验材料：

5-1丁 ₁ ： ₎ 受体同位素配基 [ ³ H].8-OH-DPAT (购 ΰ ΡΕ公司）， （+)5-hydroxytrptamine (购 Sigma公 ）， GF/B玻璃纤维滤纸 （购自 Whatman公^) ' 脂溶性闪烁液： PPO' POPOP (购 ΰ上海试剂一厂） ， 甲苯 （购 ΰ国药巣团化学试剂有限公^) , Tris 进 Π 分装。 细胞： 川基闪 ^组稳定表达 5-HT _1A 受体的 HEK-293细胞， MJ DMEM+10%血洁的 细胞培养液培养 3-5后， ffl PBS收细胞， 将细胞用 -4皮 3000转离心 10分钟后弃上淸 液， 收胞体， 存丁 '-80度冰筘保存。 实验时 D, Binding Buffer(pH7.4)重悬。

2、 实验方法：

粗筛测定每个化合物 10umol/L浓度对 [ ³ H] 8-OH-DPAT ^ 5-HT _IA 受体结合的竞争 抑制率；

抑制率高 Τ· 95%的化合物进行一系列浓度的受体结合试验， 确定 Τ.数抑制 - : (1C50, 抑制50%[ ³ 8-01 -0?八丁与 5-1^ _1!1 受体结合所需化合物浓度）。 每浓度测定 两副管， 每个化合物进行两次独立试验。 总结合管 [ ³ H].8-OH-DPAT 20μί

D| Binding Buffer 20μL

细胞 160μί

非特异管 [ H].8-OH-DPAT 20μί

5-HT(10- ⁴⁾ ) 20μΙ

细胞 160μί

待测物管 [ H].8-OH-DPAT 20μΙ

待测物 20μL

细胞 160μί 以上反应管混匀后，转移至 30度水浴（1小时），取出立即！丁冰浴中，川 Harvest 抽滤 （冰冷的 Tris淋洗液抽 5次） ， 滤膜川中火 8分钟烘干， 移入 0.5mL离心管中， 加闪烁液， 静置 30分钟后测数据。

1%= (总结合 CPM-待测物 CPM) I (总结合 CPM-非特异 CPM) xl00%

i= lC50/(l+[Z]/¾) ( i: 药物^受体的泶和力， L: 待测化合物浓度， K,y. 放射 性配基 受体的亲和力）

结¾表明： 1-1，化合物对 5-ΗΤ _1Λ 受体均冇强 *和力， ΡΠ性药相当， Λ体数据见 表 5和表 6。 表 5 粗筛化合物 10umol/L浓度对 [ ³ H] 8-OH-DPAT^i ⁵ -HT, _A 受体结合的竞争抑制 率 (％)

编号 抑制率 (％) 编号 抑制率(％) 编号 抑制率(％)

1-1 99.22 ΙΠ-1 99.65 IV-11 97.54

1-2 98.71 ΙΠ-2 99.37 N-12 97.32 1-3 95.89 ΙΠ-3 102.45 V-l 90.21

1-4 98.60 ΙΠ-4 98.72 V-2 99.90

I S 96.76 ΙΠ-5 94.84 V-3 92.87

1-6 99.09 ΙΠ-6 92.98 V-4 94.44

1-7 96.63 ΙΠ-7 99.34 V-5 97.05

1-8 97.34 ΙΠ-8 99.78 V-6 89.75

1-9 99.18 ΙΠ-9 95.19 V-7 84.69

1-10 96.05 m-10 96.68 V-8 94.50

Ml 97.36 ΙΠ-11 93.17 V-9 101.42

1-12 95.79 ΙΠ-12 98.73 V-10 88.76

1-13 98.32 ΙΠ-13 91.80 V-ll

1-14 93.22 ΙΠ-14 95.59 V-12 95.06

11 -1 99.03 ΙΠ-15 94.66 vr-i 97.57

II -2 98.94 ΙΠ-16 93.90 VI-2 96.47

II -3 99.16 1V-1 100.07 VI-3 93.68

II -4 97.58 IV -2 98.06 VI-4 95.39

II -6 98.62 IV -3 96.35 VI-5 98.13

11-7 98.51 IV-4 98.27 VI-6 100.25

II -8 95.74 IV-5 97.96 VI-7 95.75

II -9 101.47 Ν-6 102.88 VI-8 90.27 ii-io 91.85 1V-7 99.18 VI-9 85.42

11-12 96.18 IV -8 97.36 VI-10 99.64

11-13 94.89 IV-9 95.12 VI-11 92.78

11-14 93.20 IV-10 99.81 VI-12 98.29 表 6 抑制率髙了 ·95%的化合物对 5-HT , _Α 受体亲和力 (Ki nmol)

编"^ 5-HT _la 5-HT, _a 编号 5-HT

1-1 5.12 ΙΠ-2 54.27 V-l 1

1-2 3.91 ΙΠ-3 1.71 V-2 3.08

1-3 6.51 ΙΠ-4 22.05 V-3 /

1-4 4.2 ΙΠ-5 1 V-4 1

1-5 1.37 ΙΠ-6 1 V-5 2.68

1-6 2.43 ΙΠ-7 10.18 V-6 1

1-7 4.56 ΙΠ-8 8.55 V-7 1

1-8 3.87 ΙΠ-9 38.61 V-8 1

1-9 05.97 ΙΠ-10 10.94 V-9 1.97

1-10 4.06 ΙΠ-11 1 V-10 1

1-11 94.89 ΙΠ-12 11.48 V-ll 1

1-12 5.88 m-i3 / V-12 27.61

1-13 60.72 ΙΠ-14 12.04 VI-1 54.17

1-14 1 ΙΠ-15 1 vr-2 I02.7¾ II -1 5.60 ffl-16 / VI-3 1

II -2 58.39 IV-1 1.03 VI-4 20.66

II -3 4.33 1V-2 0.98 VI-5 12.58

II -4 82.79 IV-3 21.99 VI-6 1.66

II -6 115.08 IV -4 32.08 VI-7 5.03

II -7 2.96 IV-5 166.72 VI-8 1

II -8 47.82 IV -6 102.88 VI-9 1

II -9 3.21 IV -7 1.61 VI-10 3.10

II -10 / IV-8 1.75 VI-11 1

11-12 54.57 IV -9 43.07 VI-12 4.27

II -13 1 IV-10 53.42 RGH-188 3.42

II -14 1 IV-11 30.96

ΙΠ-1 2.90 W-12 97.23 上述体外受体结合实验表明： 1-1 化合物对 5-HT _IA 和 D ₃ 受体 冇强 *和力 (Ki<10nmol), RGH-188相当， 对 0 ₂ 受体儿乎没有亲和力， 多数化合物对 D ₃ /D ₂ 的 选择性超过 1000倍， 远优 Γ RGH-188 (选择性为 10倍） ， 提示该系列化合物的副作 用可能低丁 · RGH-188。 优选化合物对二个受体汆和力的结果总结见表 7。 表 7 1-1 ^化合物及 RGH-188对 D: D ₃ 、 5-HT _la 受体亲和力（Ki: nmol)

D ₂ D 5-HT, _a 編号 D ₂ D ₃ 5-HT _hl

1-1 >1000 2.71 5.12 ΙΠ- 15 1 / 1

1-2 >1000 0.74 3.91 ΙΠ-16 14.71 1 1

1-3 >1000 1.49 6.51 IV-1 812.50 3.21 1.03

1-4 >1000 2.09 4.21 IV -2 869.33 0.11 0.98

1-5 797.42 0.09 1.37 rv-3 587.21 31.28 21.99

1-6 973.37 0.07 2.43 IV -4 136.08 1 32.08

1-7 854.21 0.10 4.56 IV-5 13.34 90.15 166.72

1-8 >1000 1.04 3.87 IV -6 124.85 10.17 ]02.88

1-9 763.45 10.03 105.97 IV-7 / 2.29 1.61

1-10 1 / 4.06 IV-8 964.31 3.10 1.75

Ml 894.32 13.19 94.89 IV-9 418.27 28.55 43.07

1-12 635.78 0.17 5.88 IV-10 1 1 53.42

1-13 30.16 29.56 60.72 IV-11 154.78 20.83 30.96

1-14 1 7.03 1 IV-12 78.24 5.04 97.23

II -1 1 1.09 5.60 V-l 910.64 1 1

11-2 312.67 1 58.39 V-2 1.15 3.08

II -3 1 1.87 4.33 V-3 438.77 32.33 1

II -4 348.10 28.32 82.79 V-4 1 / 1 II -6 552.77 54.96 115.08 V-5 219.03 0.92 2.68

II -7 1 1.53 2.96 V-6 1 / 1

II -8 441.53 1 47.82 V-7 380.67 40.36 1

II -9 1 3.10 3.21 V-8 >Ι000 13.45 1

11-10 543.79 9.41 1 V-9 931.05 0.70 1.97

II -12 496.05 40.65 54.57 V-10 415.32 1 1

II -13 1 1 1 V-11 1 1 1

II -14 1 1 1 V-12 726.33 19.30 27.61

ΙΠ-1 765.23 0.08 2.90 VI-1 55.38 74.56 54.17

ΙΠ-2 512.78 27.06 54.27 VI-2 283.06 7.28 102.79

ΙΠ-3 1 5.38 1.71 VI-3 / 1 1

ΙΠ-4 824.11 18.17 22.05 VI-4 106.71 10.93 20.66

ΙΠ-5 1 1 1 vr-5 167.02 14.17 12.58

ΙΠ-6 1 1 1 VI-6 907.78 0.09 1.66

ΙΠ-7 58.23 1 10.18 VI-7 98.21 3.12 5.03

ΙΠ-8 1 0.97 8.55 VI-8 1 1 1

ΙΠ-9 369.05 23.51 38.61 VI-9 1 1 1

ΙΠ-10 102.67 6.09 10.94 VI-10 60.43 0.10 3.10

ΙΠ-11 >1000 1 1 VI-11 1 1 1

ΙΠ-12 10.95 2.15 11.48 VI-12 >1000 2.66 4.27

ΙΠ-13 >1000 1 1 RGH-188 0.72 0.08 3.42

ΙΠ-14 479.88 12.06 12.04 实施例 84

化合物体内抗桔祌分裂活性试验

1、 阿扑吗啡投型：

( 1 )、 阿扑吗啡诱导小鼠精神分裂症实验投 建立

近交系 C57BL/6小 108只， 雌雄各 ， 按体≤均衡随机分为 8组： ¾ 对照針 1., 模¾对照组， 权利耍求所述化合物梯度剂 组 （0.50、 0.35、 0.25、 0.18、 O.l mg-kg ¹ ) 和利培酮绗 (1.00 mg-kg-') 、 阿立哌唑组 （0.50mg/Kg) , 灌^给药。 投^对照组潲' ^ 给予相同体积的溶剂。给予受 ί式药后 30分钟， 浓度为 10.0 mg'kg- ¹ 的阿扑吗啡溶液 (溶 丁 ·0.1%的抗坏 [ft.酸中） ， 按 10.0 ml'kg— ¹ 小鼠体重进行股腔注射诱导建立小 K桔神分裂 症实验模 ¾。

(2)、 刻板行为学观察

小¾给予阿扑吗啡后， 分别观察记录第 6-10、 11-15、 16-20、 21-25、 26-30、 3卜 35、 36-40、 41-45、 46-50、 51-55、 56-60分钟时的前 30秒内小鼠是否出现竖尾和爬 刻 板行为， 并按以下标准进行评分： 0分， 在 30秒内无上述行为出现 （t<l秒） ； 1分' 在 30秒内出现不迮续的中度的上述行为 U秒 <t<3秒） ； 2分' 在 30秒内出现迕续的 强的上述行为（t > 3秒）。计算 60分钟内小鼠出现竖尾和爬壁 刻板行为的总分。 ED ₅₀ 计算按照公式： 改善^ ^ ^ 给!^ ι^ _χ100% ， 作刚方程, 计 到。

型对照 i刻 te JS动讣分

(3)、 统计方法

全部数据以 f±SD表示， SPSS17.0软件统计包处理， 进行两个样本均数比较的 t 检验及单冈素方差分析， 以 P <0.05为显^性差异。

(4)、 实验结 ¾

Λ体结果见表 8〜表 10。 化合物 I- 1单次口服给药对阿扑吗啡诱导的小 精神分裂症投 总刻板 动 组别 n 刻板运动评分 改善率 （％) 空 A对照组 12 - 0.50 ± 0.80

模 3对照组 12 - 27.83 ± 5.10"

RGH-188绗 12 1.00 5.42 4.01 80.54

1-1纤 1. 12 0.12 24.17 ± 4.65 13.17

1-1组 12 0.18 15.75 ± 4.96 ^## 43.4!

1-1绗 12 0.25 10.58 土 2.84"" 56.38

1-1绗 12 0.35 7.40 士 5.71 72.35

1-1 12 0.50 0.78 士 1.48 ^# " 96.31

丄 j■ A对照 比较： ' PO.05， " P<0.01; 模 对照组比较： ^# P<0.05， P<0.01 表 9化合物 1-1- - 1-4单次口服给药对阿扑吗啡诱导的小 it精神分裂症校 总刻板 动的抑制 (ED ₅₀ )

ϋ 9

化合物 ED ₅₀ (mg/ g)

1-1 0.21

1-2 0.24

1-3 0.45

1-4 0.48 采 W同样的方法， 经过对给药计 ¾的合理设定， 测得其它系列代表化合物 该投 ¾下对小鼠刻板运动的抑制情况。 表 10 其它系列代表化合物在该模 ^ '卜.的 ED ₅₀ 值

化合物 ED ₅₀ (mg/Kg)

II -1 0.34

II -3 0.27

II -7 0.58

II -9 0.62

ΙΠ-1 0.40

ΙΠ-3 0.21

ΙΠ-8 0.36

IV-1 0.28

IV-2 0.19

IV-7 0.56

V-2 0.51

V -5 0.36

V -9 0.27

VI -6 0.19

VI-10 0.30

VI-12 0.14 本试验结果表明：

①、 ¾阴性对照绗小鼠相比， 阿扑吗啡造模组刻板^动分数明显增加， 说明阿扑 吗啡能造成小鼠粘神分裂症。

②、 投 组相比， RGH-188, 权利耍求中所述化合物均能明显减少小 的刻板 运动数， 由 阿扑吗啡诱导的刻板运动模 ¾ 精神分裂症 PI I性疝状密切相关， 说明该 系列化合物有较强的抗精神分裂症 PI I性疝状作川。

③、 化合物 1-1 {± 0.5mg/Kg剂量下对该模型的抑制率优于 RGH- 188在 l mg/ g 剂¾下的抑制率， 表明 1-1的体内活性优于 RGH-188。

2、 M -801麵：

( 1 )、 MK-801诱导小¾精祌分裂症实验模 建立

近交系 C57BL/6小鼠 108只， 雌雄各半， 按性别和体重均衡随机分为 9组： 对 照组， 投 对照组， 阿立哌唑组 ( 0.3mg/Kg ) 、 利培酮 I性对照组 ( 0.3mg/kg ) 、 权 利耍求所述所述化合物梯度剂¾组 （0.07、 0.10、 0.14、 0.20、 0.28mg/kg) 。 毎只动物 丁-实验前一大放入隔咅箱适应 30min， 第二天给予受试物后 30分钟' W浓度为 0.04 mg/mL的 MK-801溶液， 按 10.0 01 [^ _§ 小 ¾体重进行股腔注射诱导建立小 精神分裂 实验模型， 仝 ' A对照组禾 11投 对照组股腔注射同体积受试物溶媒。

(2) 旷场跑动行为学观察

小鼠给予 MK-801后， 立即放入隔音箱' 观察记录 60分钟内小 0主活动的总路 程。 改善率 = (模 对照组活动总路程给药绗活动总路程） I (模 对照组活动总路程） * 100%

ED ₅ 据上述公式， 作冋 方程， 计算得到。

(3)、 统计方法

全部数据以 f±SD表示， HJSPSS17.0软件统计包处理， 进行两个样本均数比较的 t 检验及单闪素方差分析， 以 P < 0.05为显 ¾性差异。

(4)、 实验结 ¾

Λ体结果见表 11~ 表 13。 表 11 单次口服给予 1-1对 MK-801诱导小鼠精神分裂症模 旷场运动总路程的影 响 ( ±SD)

动物数 剂 ΰ主活动总路程 改善率 组别

(只） (mg/kg) (cm) (%) 正常对照组 12 - 8580.12±3069.84

模^对照组 12 - 25256.73土 7129.47"

RGH-188纽 12 0.40 9837.00±1978.25 60.22

1-1组 12 0.07 26887.03±9334.58 0.41

1-1组 12 0.10 20031.47±9722.36 20.08

12 0.14 I63I2.34±7620.I3 * 35.15

i-l 12 0.20 9730.62±1865.34 61.47

1-1组 12 0.28 7951.01 ±3339.76"* 68.52

正常对照组比较： ' P<0.05， " P<0.01; 模^对照组比较： " Ρ<0.05, P<0.01 表 12

化合物 ED ₅₀ (mg/Kg)

1-1 0.20

1-2 0.18

1-3 0.16

1-4 0.10

it 12 化合物 Ι-1〜Ι-4单次口服给药对 MK-801 诱导小 ί¾精神分裂症投 ^旷场 动总路程的影响 (ED ₅₀ )。 采川同样的方法， 经过对给药计量的合理设定， 测得其它系列代表化合物在该投 ¾下对小 i¾旷场运动的影响。 表 U 其它系列代表化合物在该模型下的 ED

化合物 ED ₅₀ (mg/Kg)

II -1 0.31

II -3 0.24

II -7 0.18

II -9 0.77

ΙΠ-1 0.45

in -3 0.18

ΙΠ-8 0.53

IV-1 0.35

IV-2 0.28

IV-7 0.49

V-2 0.69

V -5 0.44

V -9 0.51

VI-6 0.26

VI-10 0.53

VI-12 0.20 本试验结 ¾表明：

①、 阴性对照组小! ¾相比，^1^80】造模组旷场运动距离明显增加� �说明 能造成小 精祌分裂症。

②、 ^投 .组相比， RGH-188组、 权利耍求中所述化合物均能明显减少小 'I勺旷 场运动距离， 由 T M -801 诱导的旷场运动模 ^ 精神分裂症阴性疝状密切相关， 说 明该系列化合物冇较强的抗精神分裂症阴性症 状作 。

③、化合物 1-1在 0.2mg/Kg剂 下的活性与 GH-188在 0.4mg/Kg下的活性相当， 说明该模 下 1-1的活性优于 RGH-188。 实施例 85

化合物 1-1〜 1-4的急性¾性研究

( 1)、 研究 ΰ的

本试验的目的是评价 ICR小鼠口服给予 RGH-188、 1-1 化合物， 观察其口服给 予后动物出现的¾性征状和死亡情况， ffl Bliss法统计， 比较其急性 性。

(2) , 实验方案

①、 溶媒配制： 称取适 : 吐温 -80, 用去离子水稀释至浓度为 5 % (g/v)吐温 -S0。

②、 给药制剂： 分別称取所需的供试品' W 5%吐温 80溶液配制成浓度为 0.94、 1.88、 3.75、 7.5、 15、 30、 60 mg/mL (分别相当丁 . 18.75、 37.5、 75、 150、 300、 600、 1200 mg/kg ) ¾L 液。 ③、 给药途径： 供试品及溶媒对照组 （0.5%吐温 -80) 的给药途径均为口服。 一般征状观察： 给药当大 Γ第一次给药后约 ]0分钟、 0.5、 2、 4、 6 小时分别观 察〗次： 观察期第 2〜6天， 毎天观察 2次， 上、 卜午各 1次。 观察内容包括但不限制 τ·: 一般状况、 行为活动、 步态姿势、 服、 口、 鼻、 ^肠道、 皮肤被毛、 泌尿生殖道。

(3)、 实验结果见表 14 表 14化合物 1-1〜1-4及阳性对照药单次口服给药急性 ¾性实验结¾

受试物名称成编号 LD ₅ o(mg/Kg)

1-1 950mg/ g

1-2 >1200mg/ g

1-3 >1200mg/Kg

1-4 >1200mg/Kg

RGH-188 75.3mg/ g 结¾表明： 上述受试物中 1-2、 1-3 1-4的 LD ₅ Q均人于 1200mg/kg, 急性 ¾性远远 低丁- RGH-188(75.3mg/kg),I-l的 LD ₅₀ 值为 950mg/Kg，该化合物的急性¾性为 RGH-188 的 1/10, 表明该类化合物安全性良好。 实施例 86

化合物 11-1、 11-3、 11-7、 II-9的急性 ¾性研究

(1)、 采 实施例 81的方法研究化合物 11-1、 11-3、 11-7、 Π-9的急性 性。

(2)、 实验结果见表 15

表 15化台物 11-1、 11 -3、 11-7、 II -9及阳性对照药单次口服给药急性¾性实验结 受试物名称成编号 LD ₅₀ (mg/ g)

II -1 >1200mg/Kg

II -3 1050mg/ g

II -7 800mg/ g

II -9 950mg/ g

RGH-188 75.3mg/Kg 结果表明： 上述受试物中 II -1 的 LD ₅ Q均人于 1200mg/kg, 急性 ¾性远远低丁- RGH-188(75.3mg/kg), 11-3、 11-7、 11 -9 的 LD ₅ 。值分别为 1050mg/Kg、 800mg/Kg、

950mg/Kg急性 ¾性为 RGH-188的 1/】4、 1/1】、 1/13, 表明该类化合物安全性良奵。 实施例 87

化合物 111-1、 ΙΠ-3、 ΙΠ-8的急性 ¾性研究

(1)、 采川实施例 81的方法研究化合物 ΙΠ-1、 ΙΠ-3、 ΙΠ-8的急性¾性。 (2)、 实验结果见表 16

表 16化合物 ΙΠ-1、 ΙΠ-3、 ΙΠ-8及阳性对照药单次口服给药急性 ¾性实验结 ¾

受试物名称^编号 LD ₅₀ (mg/Kg)

ΙΠ-1 600mg/Kg

ΙΠ-3 >1200mg/Kg

ΙΠ -8 200mg/ g

RGH-188 75.3mg/ g 结¾表明： 上述受试物中 ΙΠ-3 的 LD ₅ Q均人 Γ I200mg/kg, 急性毐性远远低 Γ· RGH-188(75.3mg/kg), ΙΠ-1、 ΙΠ-8的 LD ₅ Q值分别为 600mg/Kg、 200mg/Kg, 急性 性 为 RGH-188的】 /8、 1/3, 表明该类化合物安全性良好。 实施例 88

化合物 IV-1、 IV-2、 IV-7的急性 ¾性研究

(1)、 采 实施例 81的方法研究化合物 IV-1、 IV-2、 IV-7的急性¾性。

(2)、 实验结 ¾见表 17 表 17化合物 IV-1、 IV-2、 IV-7及阳性对照药单次口服给药急性 ¾性实验结 ¾ 受试物名称成编号 LD ₅₀ (mg/Kg)

IV-1 750mg/ g

IV-2 >1200mg/ g

IV-7 >1200mg/Kg

RGH-188 75.3mg/Kg 结果 *明： 上述受试物中 IV-2、 IV-7的 LD _5Q 均大于 1200mg/kg， 急性 ¾性远远低 丁 RGH-188(75.3mg/kg), IV-1 的 LD _5{) 值分别为 750mg/Kg, 急性 ¾性为 RGH-188 的 1/10, 表明该类化合物安全性良好。 实施例 89

化合物 V-2、 V-5、 V-9的急性 ¾性研究

(1)、 采川实施例 81的方法研究化合物 V-2、 V-5、 V-9的急性¾性。

(2)、 实验结果见表 18

表 18化合物 V-2、 V-5、 V-9及 性对照药单次口服给药急性毒性实验结

受试物名称成编号 LD ₅₀ (mg/Kg)

V-2 550mg/ g

V-5 800mg/ g

V-9 450mg/ g

RGH-188 75.3mg/ g 结 表明：上述受试物中 V-2、 V-5、 V- 的 LD ₅₀ 值分別为 550mg/Kg、 SOOmg/Kj 450 mg/ g, 急性¾性为 RGH-188的 1/7、 1/12、 1/6, 表明该类化合物安全性良好。 实施例 90

化合物 I-6、 VI-10, VI-12的急性 ¾性研究

(1)、 釆 HJ实施例 81的方法研究化合物 VI-6、 VI-10, VI-12的急性 ¾性。

(2)、 实验结 *见表 19

表 19化合物 VI-6、 VI-10、 VI-12及阳性对照药单次口服给药急性 ¾性实验结

受试物名称成编号 LD ₅₀ (mg/Kg)

VI-6 900mg/ g

VI-10 650mg/Kg

VI-12 >1200mg/ g

RGH-188 75.3mg/ g 结¾表明： 上述受试物中 VI-12 的 LD ₅ Q均大于 I200mg/kg, 急性 ¾性远远低 Γ RGH-188(75.3mg/kg), VI-6, VI-10的 LD ₅₀ 值分别为 900mg/Kg、 650mg/ g, 急性 性 为 RGH-188的 1/12、 1/9, 表明该类化合物安全性良好。 实施例 91

化合物 1-1〜1-4的细 '冋复突变试验

(1)、 试验 EI的

J组氨酸营养缺陷 ¾伤寒沙门氏菌冋复突变试验研究 1-1、 RGH-188 ^化合物 是否引起基闪突变， 以评价其潜在的致突变性。

(2)、 配制方法

临 W前准确称取 0.0304 g的供试品， 在无齒、 超卢的条件卜'使其完全溶解在一定 容 的溶剂 DMSO中， 配制成 23077.0 g/mL的最高浓皮的溶液， 再按 l:2(v/v)的比例 稀籽成 7692.0、 2564.0、 855.0、 285.0、 95.0、 32.0、 11.0及 4.0 g/mL共 9个浓度的溶 液。

(3)、 阴性对照物 DMSO

(4)、 性对照物

无代谢活化系统 （-S9) 冇代谢活化系统 （+S9) 株 名称 厂家 批号 终浓度 名称 厂家 批号 终浓度

TA98 2-硝基芴 Aldrich 09213BA 4 g/孔 2-氨基蔥 Aldrich 15216JA 0.6 igR

TA100 議 Sigma 043議 56 0.4 g/孔 2-氨基蒽 Aldrich 15216JA 0.6 _δ /ΪΙ

(5)、 试验 1 株 ― 鼠伤寒沙门氏 1¾组氨酸营养缺陷 突变株 及 TAI00, 购 β οΙΤοχ公 , 批号分别为 4367D及 4370Do

(6)、 代谢活化系统

代谢活化系统 (S9)购 MolTox公司， 规格为 2 mL/瓶， 批号为 2548, 蛋白含 ¾为 38.5 mg/mL, 是经多氯联苯 (Aroclor 1254)以 500mg/kg诱导的 SD雄性人鼠的肝匀浆。 临 前 S9 辅酶 II、 葡萄糖 -6-磷酸^绗成肝微粒体酶系 （S9混合液） 。

(7)、 止:式试验

丄 ϋ式试验由冇成无代谢活化系统两组平行实验� ��成。采用标准平皿掺入法，将 500 μΐ含有 0.6%琼脂、 0.5 %NaCl、 0.5 mM生物素和 0.5 mM组氨酸的融溶的顶层培养基 下列物质混合：

20 nL供试品溶液 (成阴 /阳性对照物)

25 L过夜培养 L 液

100 S9混合液 0.2M磷酸钠缓冲液 (pH=7.4)

将混合物摇匀后平铺在预先制备好的 V-B底层培养基上， 室温凝 ， a 37°C培养 箱倒置培养 72小时后观察结果。 正式试验中每个 .株均设阴性及 性对照绗， 各纽均 平行培养 2 ?L/绗。

(8)、 实验结 ¾

化合物 1-1〜1-4及 RGH-188所有测试剂量无论在无 S ₉ 成加 S ₉ 实验系统中， 均未 引起任何齒落冋变数明显增加， 所有受试化合物 Ames试验阴性。 实施例 92

化合物 11 -1、 11 -3、 11 -7、 11 -9、 ΙΠ-1、 ΙΠ-3、 ΙΠ-8、 1V-1、 IV -2、 IV-7、 V-2、 V -5、 V-9、 VI-6、 VI-10、 W-12的细齒冋复突变试验

(1)、 采用实施例 87 的方法进行化合物 11 -1、 11 -3、 11 -7、 11 -9、 ΙΠ-1、 111-3, 111 -8、 IV-1、 IV-2、 lV-7、 V -2、 V-5、 V -9、 VI-6、 VI-10、 VI-12的细 !¾·冋复突变实验

(2)、 实验结 ¾

化合物 11 -1、 11 -3, 11 -7、 11 -9、 ΙΠ-1 , ΙΠ-3、 ΙΠ-8、 IV-1 IV -2, IV-7、 V-2, V -5、 V -9、 VI-6、 VI-10、 VI-12及 RGH-188所有测试剂: 无论在无 S ₉ 成加 S _y 实验系统 中， 均未引起任何 ¾落冋变数明显增加， 所有受试化合物 Ames试验阴性。