POLYPHENOLS ET COMPOSITION LE COMPRENANT

L'invention se rapporte à un extrait de parties aériennes de Maca (Lepidium meyenii), avantageusement un extrait de feuilles de Maca, riche en polyphénols, et plus particulièrement riche en flavonoïdes, ainsi qu'à une composition comprenant un tel extrait. La composition est avantageusement cosmétique, pharmaceutique, dermatologique ou nutraceutique.

L'invention a également pour objet un procédé d'extraction d'un extrait de parties aériennes de Maca riche en polyphénols et plus particulièrement en flavonoïdes, ainsi que l'extrait susceptible d'être obtenu par ledit procédé.

L'invention concerne également une telle composition ou un tel extrait pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des troubles ou pathologies de la peau, des muqueuses ou des phanères, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des troubles vasculaires, des réactions ou pathologies inflammatoires, ou encore pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des régulations du tissu adipeux ou encore dans la prévention ou le traitement des altérations du tissu dermique. L'invention concerne enfin un procédé de soin cosmétique de la peau, des phanères ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état ou leur aspect, comprenant l'administration d'une telle composition ou d'un tel extrait.

La plante Maca (Lepidium meyenii)

Aspects botaniques et agronomiques

La Maca, Lepidium meyenii Walp, de la famille des Brassicaceae (Cruciferae) est une petite plante herbacée de 12 à 20 cm de haut. Sa partie souterraine mesure de 2 à 5 cm. Elle comprend une racine pivot surmontée de la partie basse d'un hypocotyle élargi et charnu. A l'état sec, l'ensemble rappelle la forme d'un petit navet. Selon les cultivars, les hypocotyles présentent une grande diversité de couleur allant du pourpre au jaune clair.

Les feuilles pennatifides forment une rosette et se renouvellent depuis son centre. Les petites fleurs sont autogames. Le fruit est une petite silique (4 à 5 mm) à deux valves comprenant chacune une graine.

Composants chimiques de la graine et parties aériennes

La littérature ne signale aucune donnée chimique concernant ces organes de la Maca. Notons que les graines de plusieurs espèces de Lepidium cultivées aux Etats- Unis contiennent des quantités significatives de lipides (16 à 31 %). Propriétés biologiques

Les travaux publiés relatifs aux propriétés pharmacologiques de la Maca sont très rares.

La réputation de l'effet du tubercule de la Maca sur la fertilité a été confirmée par une étude pharmacologique menée chez le rat. Cette étude a permis de mettre en évidence un accroissement de la fertilité probablement due à l' augmentation du développement des follicules de Graaf. Les articles généraux qui rapportent cette information se réfèrent à des données d'accès difficiles dont une thèse péruvienne soutenue en 1961. Utilisations

Le tubercule de la Maca ou encore les hypocotyles ou racines de la Maca qui poussent sous terre ont déjà été utilisés dans l'art antérieur.

En particulier, la valeur nutritive du tubercule de la Maca, proche de céréales classiquement utilisées en alimentation, en fait un aliment de choix d'intérêt majeur pour les populations de haut plateaux péruviens. Il est consommé frais (sous forme de boisson fermentée, cuit sous la cendre), cuit (à l'état de confiture ou gâteau) ou bien sec (mélangé et bouilli avec de l'eau ou du lait sous forme de porridge, purée).

Le tubercule de la Maca est employé depuis des centaines d'années en usage populaire à des fins médicinales pour augmenter la fertilité des animaux et des êtres humains. Ainsi, les conquistadores espagnols auraient fortement accru la faible reproduction de leur cheptel grâce à la Maca.

Les Kallawaya, guérisseurs itinérants des Andes, prescrivaient aux femmes stériles désirant être fécondées, le tubercule frais découpé en fines rondelles, en décoction, trois ou quatre jours après les dernières règles.

Le tubercule est aussi utilisé frais, bouilli et réduit en purée en cataplasme abdominal pour provoquer les règles.

De nos jours, la popularité de la Maca s' accroît en raison des propriétés stimulantes et aphrodisiaques qui lui sont attribuées. Le tubercule de la Maca est apparenté (abusivement en raison d'un marché potentiel prometteur) au ginseng (Panax ginseng), d'où son nom de ginseng péruvien. Le pouvoir aphrodisiaque du tubercule serait du à la présence de prostaglandines et de stérols.

Parmi les autres utilisations du tubercule, figure son intérêt en cas de troubles respiratoires (tuberculose), fatigue chronique, troubles de la mémoire, symptômes de la ménopause, en cures lors de crises rhumatismales, ou encore pour son effet laxatif. Cependant, aucune de ces indications n' a été obj ectivée par des recherches scientifiques.

Par ailleurs, les parties aériennes de Maca sont habituellement considérées comme des déchets, et n' ont donc j amais été utilisées ou valorisées à des fins cosmétiques, dermatologiques, pharmaceutiques ou nutraceutiques.

DESCRIPTION DE L'INVENTION

Les inventeurs ont découvert que les extraits de parties aériennes de Maca (Lepidium meyenii), notamment les extraits de feuilles, tiges, fleurs, ou graines, et avantageusement des extraits de feuilles, présentent des propriétés cosmétiques, dermatologiques ou pharmaceutiques jamais décrites jusqu'à présent.

En particulier, c'est la première fois que des extraits de parties aériennes de

Maca sont utilisés en tant que tels, pour leurs propriétés spécifiques, notamment en vue d'améliorer la fermeté ou la tonicité de la peau, ou encore comme agents anti-âge.

L'invention a pour objet un extrait de parties aériennes de Maca riche en polyphénols, typiquement contenant au moins 1% en poids de polyphénols, exprimé en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. Avantageusement, l'extrait de parties aériennes de Maca contient au moins 3%, avantageusement au moins 5%, en poids de polyphénols, exprimé en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids total de l'extrait sec.

On entend par extrait de parties aériennes de Maca riche en polyphénols, un extrait obtenu par des procédés permettant de concentrer les polyphénol s potentiellement présents dans les parties aériennes de Maca de manière à ce que cet extrait contienne au moins 1% en poids de polyphénols, de préférence au moins 3% en poids et plus avantageusement au moins 5% en poids exprimé en équivalent d'acide gallique par rapport au poids total de l'extrait sec, typiquement par dosage de Folin- Ciocalteu.

Selon une variante avantageuse de l'invention, l'extrait contient, exprimé en équivalent d'acide gallique par rapport à l'extrait sec obtenu, de 1% à 30% en poids de polyphénols, avantageusement 3% à 20% en poids de polyphénols, plus avantageusement 5% à 10% en poids de polyphénols.

La teneur en extrait sec dans l'extrait selon l'invention varie de 0,01 à 90%, avantageusement de 0,5 à 50%, plus avantageusement de 0,5 à 15%, encore plus avantageusement de 0,5 à 5%, en poids par rapport au poids total de l'extrait.

De manière particulièrement avantageuse selon l'invention, les polyphénols sont des flavonoïdes, tels que des flavonols.

Selon une caractéristique particulière de la présente invention, l'extrait selon la présente invention contient au moins 0,2%, avantageusement au moins 0,5%, en poids de flavonoïdes, exprimé en équivalent rutine, par rapport au poids total de l'extrait sec, typiquement par dosage au chlorure d'aluminium.

Avantageusement, l'extrait de parties aériennes de Maca contient au moins 1%, avantageusement au moins 2%, en poids de flavonoïdes, en particulier entre 1 et 5 %, tout particulièrement entre 2 et 4 %, en poids, exprimé en équivalent rutine, par rapport au poids total de l'extrait sec.

Typiquement, les flavonoïdes de l'extrait selon la présente invention sont des flavonols, avantageusement choisis dans le groupe constitué par la quercétine, le kaempférol, leurs dérivés tels que leurs dérivés glycosylés, et leurs mélanges.

Dans un mode de réalisation particulier de la présente invention, les flavonoïdes contiennent la quercétine et le kaempférol, leurs dérivés tels que leurs dérivés glycosylés, ou leurs mélanges avantageusement à une concentration d'au moins 30%, typiquement d'au moins 50%, en poids, en particuli er d ' au moins 70%, avantageusement au moins 80%, plus avantageusement au moins 90%, exprimé en équivalent rutine, par rapport au poids total des flavonoïdes.

Selon une variante avantageuse de l'invention, l'extrait contient en outre de 0% à 70%), avantageusement de 10 à 60%, plus avantageusement de 20 à 50%, plus avantageusement de 30 à 40%, en poids de sucres, les % étant exprimés en poids par rapport au poids total de l'extrait sec, typiquement par dosage HPLC.

L'extrait selon l'invention contient par ailleurs avantageusement 0 à 50% en poids, plus avantageusement 0 à 20% en poids, encore plus avantageusement 0 à 10% en poids de lipides, les % étant exprimés en poids par rapport au poids total de l'extrait sec.

L'extrait selon l'invention contient par ailleurs avantageusement 0 à 60% en poids, plus avantageusement 0,5 à 30% en poids, encore plus avantageusement 0,5 à 10%), en poids de protéines, les % étant exprimés en poids par rapport au poids total de l'extrait sec, typiquement par dosage de Bradford.

Dans le cadre de la présente invention, les parties aériennes de Maca sont choisies dans le groupe constitué par les feuilles, les tiges, les fleurs, les graines, ou leurs mélanges.

Les tubercules de Maca, les hypocotyles de Maca, et les racines de Maca, qui poussent sous terre, ne font donc pas partie des parties aériennes de Maca au sens de la présente invention.

De manière particulièrement avantageuse, les parties aériennes sont des feuilles de Maca.

Cet extrait est avantageusement obtenu par extraction solide-liquide des parties aériennes, fraîches ou sèches, de Maca dans un solvant choisi dans le groupe constitué par l'eau, les alcools tels que l'éthanol, les glycérols, les glycols tels que le propanediol, et leurs mélanges tel que des mélanges binaires, dans des proportions comprises entre 0% et 100%) d'eau par rapport aux autres solvants, plus avantageusement dans des proportions comprises entre 0% et 90% d'eau par rapport aux autres solvants.

Majoritairement, on utilise des mélanges binaires de solvant du type eau et un solvant choisi parmi l'éthanol, le glycérol ou le propanediol.

Dans un mode de réalisation particulier, le solvant d'extraction est un solvant hydro-alcoolique, tel qu'un mélange eau-éthanol, hydro-glycérolique, et/ou hydro- glycolique, tel qu'un mélange eau-propanediol, avantageusement dans une proportion comprise entre 30 et 90% d'alcool, de glycérol, et/ou de glycol dans l'eau.

Plus particulièrement, dans le cadre de l'extraction solide-liquide des parties aériennes, fraîches ou sèches, de Maca, on introduit entre 0, 1 et 50% en poids (en équivalent de matière sèche) de parties de plante souhaitées dans le solvant d'extraction, et préférentiellement entre 1 et 10%> en poids, typiquement 5% en poids (les %> étant exprimés en poids de la matière sèche par rapport au poids total mis en œuvre). La partie sèche de Maca peut être les feuilles, les tiges, les fleurs, les graines, seules ou associées, et préférentiellement les feuilles. En particulier, en présence d'éthanol, on choisit une proportion comprise entre 0 et 100%) d' éthanol dans l ' eau, préférentiellement entre 1 0 et 80%> d' éthanol, et avantageusement entre 70 et 90% (les %> sont exprimés en poids de l'éthanol par rapport au poids total eau+éthanol).

En particulier, en présence de glycérol, on choisit une proportion comprise entre 0 et 100%) de glycérol dans l'eau, préférentiellement entre 30 et 80%>, et avantageusement 50%> (les %> sont exprimés en poids de glycérol par rapport au poids total eau+glycérol).

En particulier, en présence de glycol et plus particulièrement de propanediol, on choisit une proportion comprise entre 0 et 100% de propanediol dans l'eau, préférentiellement entre 10 et 80%>, et avantageusement 80%> (les %> sont exprimés en poids de propanediol par rapport au poids total eau+propanediol).

La température d'extraction est avantageusement comprise entre 4°C et 100°C, et préférentiellement entre 10°C et 60°C, et plus particulièrement entre 15°C et 30°C.

La durée d'extraction varie avantageusement de 30 minutes à 4h, et préférentiellement de 30 minutes à 2h, et plus avantageusement elle est d'environ lh.

A l'issue de l'extraction, la matière sèche résiduelle est avantageusement séparée de la phase liquide, par exemple par filtration, décantation ou centrifugation. La phase liquide ainsi obtenue peut être filtrée à l'aide de filtres de porosité adaptée afin d'obtenir une solution limpide.

Ces premières étapes de séparation peuvent être suivies d'étapes de purification, par exemple par ultrafiltration et/ou nanofiltration, permettant de concentrer les molécules d'intérêt potentielles au dépend d'autres.

L'extrait obtenu pourra se présenter sous forme liquide mais également pourra être séché selon les méthodes connues de l'Homme de l'art, l'atomisation ou la lyophilisation par exemple avec, ou sans support telle la maltodextrine. L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'un extrait de parties aériennes de Maca, avantageusement des feuilles de Maca, comprenant au moins une étape d'extraction solide-liquide des parties aériennes de Maca dans un solvant choisi dans le groupe constitué par l'eau, les alcools tels que l'éthanol, les glycérols, les glycols tels que le propanediol, et leurs mélanges.

Typiquement, le procédé comprend les étapes successives suivantes :

(a) dispersion et extraction dans un solvant adapté de parties aériennes de Maca et avantageusement des feuilles, le solvant étant avantageusement un solvant aqueux et/ou alcoolique et/ou glycérolique et/ou glycolique,

(b) centrifugation et/ou filtration de l'extrait obtenu suite à l'étape (a) ; (c) le cas échéant, ultrafiltration et/ou diafiltration et/ou nanofiltration de l'extrait obtenu suite à l'étape (b); puis

(d) récupération de l'extrait de parties aériennes de Maca ; et

(e) séchage éventuel de l'extrait obtenu à l'étape (d) sur un support ou non.

Lors de l'étape (a), on utilise avantageusement les parties aériennes, en particulier les feuilles, dans les proportions suivantes : entre 0,1 et 50% de matière sèche de feuilles, et préférentiellement entre 5 et 20%, et typiquement 5%, les pourcentages étant exprimés en poids de la matière sèche par rapport au poids total mis en œuvre (parties aériennes + solvant).

L' extraction de l'étape (a) se fait avantageusement sous agitation. Aucune enzyme n'est ajoutée. Lors de l'étape (a), on utilise avantageusement les solvants suivants seuls ou en mélange avec l ' eau : éthanol, glycérol ou propanediol, dans une proportion avantageusement comprise entre 30 et 90% de ces solvants dans l' eau et plus avantageusement entre 50 et 80% (les % sont exprimés en poids du solvant par rapport au poids total solvant+eau).

L'invention a également pour objet une composition comprenant en tant qu'actif un extrait de parties aériennes de Maca, éventuellement en association avec un excipient approprié.

L a c omp o si ti on e st avantageu s em ent c o smétique, pharmaceutique, dermatologique ou nutraceutique.

Ladite composition est de préférence formulée pour être administrée par voie topique externe ou orale.

Selon une variante avantageuse de l'invention, la composition contient 0,001 à 10 %, typiquement 0,01 à 5 %, avantageusement entre 1 et 5%, en poids d'extrait, exprimé en pourcentage d'extrait sec.

Selon un autre aspect de l'invention, la composition comprend en outre au moins un autre composé actif en plus de l'extrait de parties aériennes de Maca.

Cet autre composé peut être choisi parmi tous les composés et leurs équivalents fonctionnels, énoncés ci-dessous.

Cet autre composé peut être en particulier choisi parmi des actifs classiquement utilisés en dermatologie, en pharmaceutique ou en cosmétique et connus de l'Homme de l'art, tels que les émollients, les actifs hydratants, les kératorégulateurs, les kératolytiques, les agents cicatrisant et/ou restructurant de la barrière cutanée, les agonistes PPAR, RXR ou LXR, les agents sébo-régulateurs, les agents anti-irritants et/ou anti-inflammatoires et/ou apaisants, les agents anti-oxydants, les agents anti-âge, les agents dépigmentants ou hypopigmentants, les agents pigmentants, les agents lipolytiques ou inhibiteurs de la lipogénèse ou encore les agents anti-cellulite ou amincissants, les filtres et écrans solaires minéraux ou organiques (pigmentaires ou ultrafins), les composés antifongiques, les conservateurs, les agents anti-bactériens, les pré et probiotiques, les antibiotiques, les immnumodulateurs. Plus particulièrement, les agents cicatrisants et/ou restructurants de la barrière cutanée pouvant être utilisés en association sont avantageusement le panthénol (vitamine B5), l'arabinogalactane, l'oxyde de zinc, les céramides, le cholestérol, le squalane et les phospholipides.

Les agents séb o-régulateurs pouvant être utilisés en association sont avantageusement choisis dans le groupe constitué par les inhibiteurs de 5-alpha réductase. Le zinc (et les dérivés du zinc tel que ses sels gluconate, salicylate et acide pyroglutamique) et la spironolactone, présentent aussi une activité sébo-suppresseur. D'autres séborégulateurs d'origine lipidique agissant sur la qualité du sébum, comme l'acide linoléique présentent un intérêt.

L'agent anti-inflammatoire et/ou anti-irritant et/ou apaisant peut être arabinogalactane.

Parmi les agents hypopigmentants ou dépigmentants, on peut notamment citer la N-undecylenoyl-L-phénylalanine (Sepiwhite ^® ).

Les actifs protecteurs solaires pouvant être utilisés en association sont avantageusement des filtres ou écrans solaires UVB et/ou UVA ; tels les écrans ou filtres minéraux et/ou organiques connus de l'homme du métier qui adaptera leur choix et leurs concentrations en fonction du degré de protection recherché.

Les conservateurs pouvant être utilisés en association sont par exemple ceux généralement utilisés en cosmétique et en nutraceutique, les molécules à activité antibactérienne (pseudo-conservateurs) tels que les dérivés capryliques comme par exemple le capryloyl glycine et le glycéryl caprylate ; l'hexanediol, le sodium levulinate, et les dérivés de zinc et de cuivre (gluconate et PC A).

Parmi les actifs recommandés en association avec l'extrait selon l'invention, on peut citer les extraits végétaux, en particulier :

- Les huiles végétales telles que les huiles de Soj a et/ou l'huile de Colza, l'huile d'avocat (WO2004/012496, WO2004/012752, WO2004/016106, WO2007/057439), l'huile de Lupin, avantageusement l'huile de Lupin blanc doux (WO 98/47479), ou un mélange de ces huiles ; l'oléodistillat ou les concentrats d'huile végétale ou animale, notamment de tournesol, plus avantageusement des concentrats de Tournesol linoléiques, tels que l'huile de tournesol concentrée en insaponifiables (Soline ^® )(cf. la demande internationale WO 01/21150) commercialisée par les Laboratoires Expanscience, les huiles concentrées en insaponifiable du type huile d'avocat, de colza, de maïs ou de palme, utiles notamment pour leur activité hydratante et/ou émolliente, cicatrisante et/ou restructurante de la barrière cutanée, anti-inflammatoire et/ou anti-irritante et/ou apaisante ;

les insaponifiables de végétaux ou d'huile végétale, avantageusement des furanes d'avocat (Avocadofurane ^® ), pouvant être obtenus par le procédé décrit dans la demande internationale WO 01/21605, les insaponifiables d'Avocat et/ou de Soja, plus particulièrement un mélange d' insaponifiables d'Avocat furaniques et d' insaponifiables de Soja, avantageusement dans un rapport respectif d'environ 1/3-2/3 (tel que Piasclédine ^® ), les insaponifiables de soja (tels qu'obtenus selon le procédé décrit dans la demande internationale WO01/51596), les insaponifiables stéroliques (typiquement des insaponifiables dont la teneur en stérols, en méthylstérols et en alcools triterpèniques est comprise entre 20 et 95 % en poids, de préférence 45-65 % en poids, par rapport au poids total de Γ insaponifiable), les phytostérols, les esters de stérols et les dérivés vitaminiques, utiles notamment pour leur activité cicatrisante et/ou restructurante de la barrière cutanée, anti-âge, antiinflammatoire ;

les peptides ou complexes d'acides aminés végétaux, en particulier les peptides d'avocat (tel que ceux décrits dans la demande internationale WO2005/105123), les peptides de lupin (tels que ceux obtenus selon le procédé décrit dans la demande WO2005/102259), les peptides de quinoa (tel que ceux décrits dans la demande internationale WO2008/080974), les peptides de Maca tel que ceux décrits dans la demande internationale WO2004/1 12742), les peptides de soja fermenté ou non, les peptides de riz (tel que ceux décrits dans la demande internationale WO 2008/009709), utiles notamment pour leur activité hydratante et/ou émolliente (avocat), kératorégulatrice (lupin, quinoa), cicatrisante et/ou restructurante de la barrière cutanée (maca, quinoa, soja), anti-inflammatoire et/ou anti-irritante et/ou apaisante (lupin, quinoa), antioxydante (avocat), anti-âge (lupin, maca), pigmentante (riz) ;

les sucres de végétaux, en particulier les sucres d'avocat (tel que ceux décrits dans la demande WO2005/115421), utiles notamment pour leur activité kératorégulatrice, cicatrisante et/ou restructurante de la barrière cutanée, anti-inflammatoire et/ou anti-irritante et/ou apaisante ;

le butyle avocadate (5 alpha Avocuta ^® ), inhibiteur de la 5-alpha réductase (voir WO 01/52837 et WO 02/06205), typiquement régulateur de la sécrétion séborrhée se trouvant augmentée dans l'acné ou les pellicules ; les extraits riches en polyphénols, et plus particulièrement les extraits de fruits d'avocat (tel que celui décrit dans la demande FR 1 061 047) et un extrait de parties aériennes de Gynandropsis gynandra (FR 1061051);

- le lupéol (FR 2 822 821, FR 2 857 596) utile notamment pour favoriser la cicatrisation,

- un extrait total de lupin (tel que ceux décrits dans la demande internationale WO2005/102259), particulièrement adapté pour le traitement des irritations ;

- un beurre de Cupuaçu, particulièrement apprécié pour ses propriétés hydratantes ;

- un extrait de graines d'Acacia macrostachya (FR 0958525), de graines de

Schizandra sphenanthera (FR 0955343 et FR 0955344), et de graines de Vigna unguiculata (FR 0958529).

Parmi les actifs recommandés en association avec l'extrait selon l'invention, on peut citer les oxazolines, en particulier celles choisies dans le groupe constitué par la 2- undécyl-4-hydroxyméthyl-4-méthyl-l,3-oxazoline, la 2-undécyl-4,4-diméthyl-l,3- oxazoline, la (E)-4,4-diméthyl-2-heptadéc-8-ényl-l,3-oxazoline, la 4-hydroxyméthyl-4- méthyl-2-heptadécyl-l,3-oxazoline, la (E)-4-hydroxyméthyl-4-méthyl-2-heptadéc-8- ényl-l,3-oxazoline, la 2-undécyl-4-éthyl-4-hydroxyméthyl-l,3-oxazoline, de préférence la 2-undécyl-4,4-diméthyl-l,3-oxazoline (OX-100 ou Cyclocéramide ^® ; WO2004050052, WO2004050079, et WO20041 12741). Elles sont particulièrement utiles pour leur activité anti-inflammatoire et/ou anti-irritante et/ou apaisante, antioxydante, dépigmentant, immunomodulatrice. Parmi les actifs recommandés en association avec l'extrait selon l'invention, on peut citer les inhibiteurs de 5-alpha réductase, tels que le butyle avocadate (5 alpha Avocuta ^® ).

Toutes ces associations comprennent au moins un autre composé actif, en plus de l'extrait de parties aériennes de Maca, et peuvent comprendre deux, trois, quatre ou plus de composés actifs tels que décrits précédemment.

La composition selon l'invention peut être formulée sous la forme de différentes préparations adaptées à une administration topique, à une administration orale, rectale, vaginale, nasale, auriculaire ou bronchique, ainsi qu'à une administration parentérale.

La composition selon l'invention est avantageusement formulée sous la forme de différentes préparations adaptées à une administration topique, plus particulièrement pour application sur la peau, et/ou les phanères et/ou les muqueuses.

Selon une première variante, les différentes préparations sont adaptées à l'administration topique et incluent notamment les crèmes, les émulsions, les laits, les pommades, les lotions, les huiles, les solutions aqueuses ou hydro-alcooliques ou glycoliques, les poudres, les patchs, les sprays, les shampooings, les vernis ou tout autre produit pour application externe.

Selon une deuxième variante, les différentes préparations sont adaptées à une administration orale ; l'extrait de parties aériennes de Maca pouvant entrer soit dans un complément alimentaire soit dans une composition nutraceutique. Le complément alimentaire peut se présenter sous forme de l'extrait de parties aériennes de Maca en tant que tel ou bien sous forme de gélules ou de capsules molles de gélatine ou végétales dans le cadre de la présente invention. Ledit complément alimentaire peut alors contenir de 10 à 100% en poids de parties aériennes de Maca.

Les modes d'administration, les posologies et les formes galéniques optimales des composés et compositions selon l'invention peuvent être déterminés selon les critères généralement pri s en compte dans l ' établi ssement d' un traitement pharmaceutique, en particulier dermatologique, cosmétique ou vétérinaire adapté à un patient ou à un animal, comme par exemple l'âge ou le poids corporel du patient ou de l'animal, la gravité de son état général, la tolérance au traitement, les effets secondaires constatés, le type de peau. En fonction du type d' administration souhaitée, la composition et/ou les composés actifs selon l'invention peuvent en outre comprendre au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable, notamment dermatologiquement acceptable, ou un excipient cosmétiquement acceptable. Selon la première variante, on utilise un excipient adapté pour une administration par voie topique externe. La composition selon la présente invention peut en outre comprendre au moins un adjuvant pharmaceutique ou cosmétique connu de l'homme du métier, choisi parmi les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, des filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, etc.

La composition comprenant un extrait de parties aériennes de Maca ayant les spécifications indiquées est particulièrement destinée à une utilisation cosmétique, pharmaceutique, dermatologique ou nutraceutique.

Dans le cadre d'une utilisation cosmétique, pharmaceutique, ou dermatologique, la composition sera avantageusement formulée sous la forme d'une préparation adaptée à une administration topique.

Dans le cadre d'une utilisation à visée nutraceutique ou cosmétique («cosmet- food »), la composition sera avantageusement formulée sous la forme d'une préparation adaptée à une administration orale. L'invention a également pour objet l'utilisation d'un extrait de parties aériennes de Maca pour la fabrication d'une composition cosmétique, pharmaceutique, dermatologique ou d'une composition nutraceutique.

Avantageusement, la composition ou l'extrait selon la présente invention est utilisée dans la prévention et/ou le traitement des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères.

De manière particulièrement avantageuse, l'extrait ou la composition selon l'invention est utilisé dans des applications cosmétiques, avantageusement par voie topique, notamment pour le soin ou l'hygiène de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères tels que les cheveux, ou encore pour la prévention et/ou le traitement des troubles de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères tels que les cheveux. La composition ou l'extrait selon la présente invention peut également être avantageusement utilisée dans la prévention et/ou le traitement des troubles vasculaires.

La composition ou l'extrait selon l'invention est particulièrement utile pour le renforcement des vaisseaux sanguins, des parois et du tonus vasculaire et/ou pour agir sur la stimulation de la circulation sanguine, et/ou pour agir sur les cellules endothéliales, et ainsi contribuer à un effet drainant pour lutter contre les jambes lourdes, les cernes, la cellulite, le relâchement cutané.

Le renforcement du tonus vasculaire favorise la vasoconstriction et le maintien de l'homéostasie des parois vasculaires.

La composition ou l'extrait selon la présente invention peut également être avantageusement utilisée dans la prévention et/ou le traitement des altérations du tissu dermique.

On peut citer comme exemple d'altération du tissu dermique les déséquilibres de la matrice dermique tels les rides, les problèmes de cicatrisation, la fermeté ou l'élasticité de la peau.

Ainsi, la composition ou l'extrait selon l'invention est également avantageusement utilisée dans la prévention du vieillissement, en particulier du vieillissement intrinsèque ou encore du vieillissement photo-induit et la peau vergeturée.

La composition ou l' extrait selon la présente invention peut également être avantageusement utilisée dans la prévention et/ou le traitement des régulations du tissu adipeux, et plus particulièrement pour la lutte contre l'accumulation du tissu adipeux et la peau avec cellulite.

En particulier, la composition ou l'extrait selon l'invention est destiné à la prévention et/ou au traitement des réactions ou pathologies allergiques, inflammatoires, irritatives ou des troubles de la barrière ou de l'homéostasie de la peau, des phanères (cheveux et ongles) et/ou des muqueuses (gencives, parodontes, muqueuses génitales) immature(s), normale(s) ou mature(s)/âgée(s).

On entend par troubles de la barrière de la peau, des phanères et/ou des muqueuses les troubles intervenant au niveau de la couche extérieure de l'épiderme. On entend par troubles de l'homéostasie de la peau, des phanères et/ou des muqueuses les troubles résultant des processus de renouvellement et d'équilibre des cellules telles que le psoriasis, la dermite du siège, la dermatite atopique, la peau sèche (xérose), la peau déshydratée et la peau photosensibilisée.

Avantageusement, la composition ou l'extrait selon l'invention peut être utilisé(e) pour la prévention et/ou le traitement des réactions, troubles ou pathologies :

de la peau, telles que l'acné, la rosacée ou érythrocouperose, le psoriasis, la dermite du siège, la dermatite atopique, l'eczéma, la dermatite de contact, la dermatite irritative, la dermatite allergique, la dermite séborrhéique (croûte de lait), la peau sensible, la peau réactive, la peau sèche (xérose), la peau déshydratée, la peau avec rougeur, l'érythème cutanée, la peau photosensibilisée, la peau pigmentée (mélasma, pigmentation post-inflammatoire...), la peau dépigmentée (vitiligo), les dartres, les gerçures, les piqûres, les crevasses en particulier des seins, les coups de soleil, les inflammations dus aux rayons de toutes sortes, les irritations par agents chimiques, physiques (par exemple contrainte de tension pour les femmes enceintes), bactériologiques, fongiques ou viraux, parasitaires (poux, gale, teigne, acariens, dermatophytes), radiologiques ou par déficit de l'immunité innée (peptides antimicrobiens) ou acquise (cellulaire, humorales, cytokines), et/ou

- des muqueuses telles que les gencives et parodontes pouvant présenter des gingivites (gencives sensibles des nouveaux nés, problèmes d'hygiène, dus au tabagisme ou autres), des parodontopathies, ou des muqueuses génitales pouvant présenter des irritations des sphères génitales maies ou femelles externes ou internes et/ou

- des phanères tels que les ongles (ongles cassants, fragiles ...) et des cheveux (alopécie, pellicules, hirsutismes, dermites séborrhéiques, folliculites) immatures, normaux ou matures, présentant en particulier des troubles du cuir chevelu tels que les alopécies (ou pelade) androgénétiques, aiguës, localisées, cicatricielles, congénitales, occipitales du nourrisson, aerata, dues à la chimiothérapie/radiothérapie ou encore l'effluvium télogène, l'effluvium anagène, la dystrophie pilaire, la trichotillomanie, la teigne ou les pellicules grasses ou sèches. L'invention concerne également un procédé de soin cosmétique de la peau et/ou des phanères et/ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état et/ou leur aspect, comprenant l'administration ou consistant à administrer une composition cosmétique ou un extrait selon la présente invention.

Dans un mode de réalisation du procédé cosmétique selon l'invention, la composition ou l'extrait selon l'invention est utilisé en vue d'améliorer la fermeté, l'élasticité ou la tonicité de la peau, ou de prévenir le manque de fermeté ou de tonicité ou d'élasticité de la peau, on encore pour synthétiser et/ou protéger la matrice extracellulaire, ou encore pour prévenir et/ou traiter les altérations du tissu dermique.

Dans un autre mode de réalisation du procédé cosmétique selon l'invention, la composition ou l'extrait selon l'invention est utilisé comme agent antivieillissement ou anti-âge de la peau, des phanères ou des muqueuses, en particulier contre le vieillissement intrinsèque ou extrinsèque, notamment comme agent photo-vieillissement ou agent anti-UV, ou encore comme agent pour lutter contre l'accumulation du tissu adipeux et la peau avec cellulite.

Dans un autre mode de réalisation du procédé cosmétique selon l'invention, la peau et/ou les phanères et/ou les muqueuses visées sont avantageusement celles qui présentent un trouble de la circulation et du tonus vasculaire.

Exemple 1

Les tiges feuillées de Maca séchées et broyées sont mises en suspension sous agitation à 5% dans un mélange éthanol/eau 10/90 p/p pendant 1 h à température ambiante. La matière sèche résiduelle est séparée de la phase liquide soit par filtration, décantation ou centrifugation et la phase liquide ainsi obtenue peut être filtrée à l'aide de filtres de porosité adaptée afin d'obtenir une solution limpide. L'extrait obtenu présente les caractéristiques suivantes :

■ Extrait sec : 1,8%

Sucres totaux (HPLC) : 32% /sec

■ Polyphénols totaux (Folin - Ciocalteu) : 5,7% / sec Flavonoïdes totaux (A1C13) : 1,7%

Cet extrait présente une activité anti-radicalaire, anti-DPPH « in tubo », pour laquelle la concentration inhibitrice 50 (IC50) a pu être déterminée et est de 0,29 mg d'extrait sec, ce qui représente 20 μg de polyphénols dans le milieu réactionnel.

Exemple 2

Les tiges feuillées de Maca séchées et broyées sont mises en suspension sous agitation à 5% dans un mélange glycérol/eau 50/50 p/p pendant 1 h à température ambiante. La matière sèche résiduelle est séparée de la phase liquide soit par filtration, décantation ou centrifugation et la phase liquide ainsi obtenue peut être filtrée à l'aide de filtres de porosité adaptée afin d'obtenir une solution limpide. L'extrait obtenu présente les caractéristiques suivantes :

Extrait sec : 1,8%

■ Sucres totaux (HPLC) : 37% /sec

^■ Polyphénols totaux (Folin - Ciocalteu) : 6,4% I sec

Flavonoïdes totaux (A1C13) : 2,2 %/sec

Cet extrait présente une activité anti-radicalaire, anti-DPPH « in tubo », pour laquelle la concentration inhibitrice 50 (IC50) a pu être déterminée et est de 0,26 mg d'extrait sec, ce qui représente 16,5 μg de polyphénols dans le milieu réactionnel.

Exemple 3

Les tiges feuillées de Maca séchées et broyées sont mises en suspension sous agitation à 5% dans un mélange propanediol/eau 80/20 p/p pendant 1 h à température ambiante. La matière sèche résiduelle est séparée de la phase liquide soit par filtration, décantation ou centrifugation et la phase liquide ainsi obtenue peut être filtrée à l'aide de filtres de porosité adaptée afin d' obtenir une solution limpide. L'extrait obtenu présente les caractéristiques suivantes :

■ Extrait sec : 1, 1%

Sucres totaux (HPLC) : 40% /sec

^■ Polyphénols totaux (Folin - Ciocalteu) : 7,6% / sec Flavonoïdes totaux (A1C13) : 3,6%

Cet extrait présente une activité anti-radicalaire, anti-DPPH « in tubo », pour laquelle la concentration inhibitrice 50 (IC50) a pu être déterminée et est de 0,28 mg d'extrait sec, ce qui représente 22,5 μg de polyphénols dans le milieu réactionnel.

Exemple 4 : Compositions pour application par voie topique

Les inventeurs présentent ci-dessous plusieurs compositions pour application par voie topique. Les extraits de parties aériennes de Maca (PA Maca) peuvent être incorporés à divers produits cosmétiques, tels que des eaux nettoyantes, des émulsions huile dans eau, des émulsions eau dans huile, des huiles, des laits, des lotions, des shampooings, des produits moussants et sprays, dont les compositions sont présentées ci-dessous. Les pourcentages représentent le poids du produit par rapport au poids total de la composition.

EAU NETTOYANTE PEAU SENSIBLE

EMULSION ANTI-AGE

EMULSION RESTRUCTURANTE

Matière première / Nom

% commercial ou INCI

HYDROGENATED

De 5 à 20 % POLYDECENE

L AURYLGLUCO SIDE-

De 1 à 5 % GLYSTEARATE

DICAPRYLYL CARBONATE De 1 à 5 %

GLYCEROL De 5 à 20 %

CARBOPOL De 0 n 1 " o

GOMME XANTHANE De 0 n 1 " o

ACIDE ASIATIQUE De O n 1 "o

VITAMINE B5 De O n 5"»

Extrait de feuilles de maca De 0,01 à 10%

LESSIVE SOUDE De O n 1 "o

CONSERVATEURS De O n 1 "o

ACIDE CITRIQUE De 0 à 1 %

EAU PURIFIÉE QSP 100 % LAIT pour PEAU SECHE, ATOPIQUE

SPRAY APAISANT

Matière première / Nom

% commercial ou INCI

EAU PURIFIÉE QSP 100 %

TRILAURETH-4 PHOSPHATE De 1 n5"„

DICAPRYLYL CARBONATE De 1 n 5 %

BUTYLENE GLYCOL De 1 à 5 %

ERYTHRITYL ESTER De 1 à 5 %

HUILE VASELINE FLUIDI De 1 n5"„

BEURRE DE KARITE De O n 1 "»

HUILE VEGETAL.1 De O n 1 "»

CONSERVATEURS De O n 1 "»

LYCOPENE De O n 5"»

Extrait de feuilles de maca De 0,01 à 10%

LESSIVE SOUDE De 0 n 1 % PARFUM De 0 à 1 %

GOMME XANTHANE De 0 n 1 %

CARBOPOL De 0 n 1 %

SEQUESTRANT De 0 n 1 %

ACIDE CITRIQUE De 0 n 1 %

SHAMPOOING ANTIPELLICULAIRE

Exemple 5 : Compositions pour administration par voie orale Les extraits de feuilles de maca sont intégrés à des compositions orales, dans des compositions permettant l'administration de 50 mg à 200 mg d'extrait de feuilles de maca par jour.

1/ Composition anti-vergetures sous forme de capsules molles

- Extrait de parties aériennes de maca 30 mg

- Huile d' Awara 60 mg

- Huile de colza riche en insaponifiable 300 mg

- Vitamine du groupe B (Bl, B2, B3, B5, B6, B9, B12), QSP 100% des AIR

- Tocotriénols QSP 50 % AIR

- Vitamine E

- Cire d'abeille

- Lécithine de soja - Gélatine alimentaire

- Glycérine QSP 1 capsule molle

Cette composition est administrée de 4 à 6 capsules de 500 mg par jour.

2/ Comprimés anti-chute cheveux

- Extrait de parties aériennes de maca 25 mg

- Extraits de céréales (blé, sarrasin, millet, épeautre)

riche en acides aminés soufrés 200 mg

- Vitamine C QSP 50 % des AJR

- Glycosaminoglycanes issus de cartilages de poissons 200 mg

- Glucidex IT 19 (agent de compression) QSP

1 comprimé de 800 mg.

Cette composition est administrée de 5 à 8 comprimés par jour.

3/ Exemples en stick poudre amincissant

- Extrait de parties aériennes de maca 100 mg

Extrait de thé riche en polyphénols 100 mg

Extrait de raisin riche en OPC 50 mg

Bétaglucanes d'origine végétale 100 mg

Gomme xanthane 1 mg

- ascorbate de sodium 0,3 mg

- maltodextrine QSP 5 g.

Cette composition est administrée 2 fois par jour.

Exemple 6 : Activités biologiques

1. Renforcement des parois vasculaires a. Activité sur cellules endothéliales L'effet de l'extrait de feuilles de maca sur des cellules endothéliales dermiques a été étudié par un screening en PCR array.

Les cellules endothéliales sont les cellules constitutives de la paroi vasculaire, elles jouent donc un rôle prépondérant pour le maintien de l'équilibre vasculaire et régulent les interactions entre le vaisseau sanguin et les tissus environnants (le derme).

^■ S Matériel et méthodes :

Des cellules endothéliales microvasculaires humaines ont été traitées par l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005% et 0,01% (p/v de matière active) pendant 24 heures. Après incubation, l'expression génique de différents marqueurs a été analysée par RT- PCR quantitative en temps réel à l'aide d'un PCR array.

^■ S Résultats et conclusion :

Les résultats du screening sur cellules endothéliales ont permis de montrer que l'extrait de feuilles de maca (tableau 1) :

- stimule l'expression génique de molécules impliquées dans le renforcement des vaisseaux : angiopoietine 1 (rôle dans l'établissement et la stabilisation des vaisseaux), serpine 1 (anti-protéase), cadhérine 5, fibrilline 1, intégrine aV (molécules d'adhésion cellule/cellule ou cellule/matrice jouant un rôle dans la stabilisation des vaisseaux), a SMA ou a smooth muscle actin et troponine 1 (renforcement des vaisseaux / élasticité) ;

- stimule l ' expression génique de molécules impliquées dans le tonus vasculaire : calmoduline (contrôle de la perméabilité vasculaire), endothéline 1 et ECE1 ou Endothelin Converting Enzyme 1 (vasoconstriction) ;

- stimule l'expression génique de molécules de défense : Heme Oxygénase 1 (rôle protecteur en empêchant Thème libre de participer à des réactions pro-oxydantes) et thioredoxine (réparation des dommages oxydatifs aux protéines) ; et - inhibe l'expression génique de molécules impliquées dans l'inflammation : CSF1 ou macrophage colony-stimulating factor 1 (contrôle de la production/différenciation/fonction des macrophages) et sélectine E (molécule d'adhésion, rôle dans le recrutement de cellules inflammatoires).

Ces effets sont en faveur d'une activité stimulatrice du tonus vasculaire et de renforcement des vaisseaux sanguins.

Tableau 1 : Screening d'activité en PCR array sur cellules endotheliales

Expression génique

(Quantité relative en % par rapport aux cellules contrôles)

Cellules contrôles MC 0,005% MC 0,01 %

Renforcement des vaisseaux

Angiopoietine 1 100 142 207

Serpine 1 100 139 157

Cadhérine 5 100 121 198

Fibrilline 1 100 155 199

Intégrine aV 100 145 174 a SMA 100 119 147

Troponine 1 100 116 201

Tonus vasculaire

Calmoduline 100 121 151

Endothéline 1 100 119 144

ECE 1 100 117 162

Réponse au stress

Hème oxygénase 1 100 143 158

Thiorédoxine 100 131 140

Inflammation

CSF 1 100 57 106

Sélectine E 100 49 69 2. Protection et renforcement de la matrice dermique a. Activité sur des marqueurs de la matrice dermique

L'activité de l'extrait de feuilles de maca sur la matrice dermique a été recherchée dans des fibroblastes dermiques en analysant l'expression génique de différents marqueurs :

- le collagène de type L composant majoritaire de la matrice extra-cellulaire dermique, responsable de la fermeté et de la résistance de la peau ; - l'élastine, responsable de l'élasticité de la peau ;

- la M M P I (matrix metalloprotease de type 1), responsable de la dégradation des collagènes de type I et III ;

- la dermatopontine qui j oue un rôle dans l ' assemblage des fibres de collagène, elle est importante pour le maintien de l'architecture de la matrice extra-cellulaire dermique et la flexibilité du tissu ;

- la décorine qui se lie aux fibres de collagène pour en empêcher le clivage par la MMPl ;

- la fibronectine : glycoprotéine de haut poids moléculaire qui joue un rôle dans la structure de la matrice extracellulaire dermique ;

- la hyaluronane synthase 2 : enzyme impliquée dans la formation de l'acide hyaluronique, molécule hygroscopique importante pour l'hydratation et la densité de la peau.

^• S Matériel et méthode :

Des fibroblastes dermiques humains normaux ont été traités pendant 24 heures par l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,002% et 0,005% (p/v de matière active) ou par le TGF i à 5 ng/ml (référence).

A la fin de l'incubation, l'expression génique de différents marqueurs de la matrice dermique a été analysée par RT-PCR en temps réel. Les résultats ont été analaysés statistiquement par une ANOVA à un facteur suivie d'un test de Dunnett.

^• S Résultats et conclusion :

Comme le montre le tableau 2, l ' extrait de feuilles de maca a significativement augmenté l'expression génique du collagène I, de l'élastine, de la dermatopontine, de la décorine, de la fibronectine et de la hyaluronane synthase 2.

D' autre part, l'extrait de feuilles de maca a significativement inhibé l' expression génique de la MMP1.

Ces résultats sont en faveur d'un renforcement de la matrice extra-cellulaire dermique.

Tableau 2 : Expression génique de marqueurs de la matrice dermique

dans des fibroblastes (Quantité Relative)

nd : non déterminé b. Activité sur un marqueur de la matrice dermique dans des fibroblastes vieillis

L'effet de l'extrait de feuilles de maca a été recherché dans des fibroblastes dermiques prématurément vieillis par traitement à ΙΉ ₂ Ο ₂ , par analyse de l'expression génique du biglycane.

Le biglycane est un petit protéoglycane qui influence la fibrillogénèse du collagène. •S Matériel et méthode :

Des fibroblastes dermiques humains normaux ont été prématurément vieillis par de ΙΉ ₂ Ο ₂ à 600 μΜ.

Les fibroblastes ont ensuite été incubés pendant 72 heures en présence de l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005% et 0,01% (p/v de matière active) ou de TGFp à 10 ng/ ml (référence) .

Après incubation, l'expression génique du biglycane a été analysée par RT-PCR quantitative en temps réel.

^• S Résultats et conclusion :

L'induction de la sénescence des fibroblastes par le traitement à ΓΗ ₂ Ο ₂ a inhibé l'expression du biglycane, l'extrait de feuilles de maca a permis de restaurer cette expression (tableau 3).

L'extrait de feuilles de maca protège la matrice dermique dans des conditions de sénescence. Tableau 3 : Expression génique du biglycane dans des fibroblastes dermiques vieillis

Biglycane

(Quantité relative)

Fibroblastes vieillis _{MC %}

Fibroblastes contrôles MC 0,01 %

(n ₂ u ₂

123 100 112 142

c. Inhibition de la production d'élastase

Sous l ' influence de différents stimuli (inflammation, irradiation UV ... ), les polynucléaires neutrophiles humains libèrent des espèces oxygénées et des enzymes telles que Γ élastase.

Un excès d' élastase peut dégrader les protéines matricielles de la peau, telles que l'élastine, les protéogly canes, le collagène, la décorine ...

L'effet de l'extrait de feuilles de maca a été évalué sur la libération d'élastase par des neutrophiles humains. Matériel et méthode :

Des neutrophiles humains ont été traités pendant 15 minutes par l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005 et 0,01% (p/v de matière active) ou par l'acide boswellique à 10 μg/ml (référence) puis stimulés par le calcium ionophore A23187à 1 μΜ, pendant 10 minutes.

La libération d'élastase a été évaluée par mesure de l'activité élastase par une méthode spectrophotométrique.

Les résultats ont été analysés statistiquement par un test t de Student. ^• S Résultats et conclusion :

L'extrait de feuilles de maca a significativement inhibé la libération d'élastase par des neutrophiles (tableau 4).

Ces résultats montrent un effet protecteur de la matrice dermique.

Tableau 4 : Libération d'élastase par des neutrophiles

Elastase

Inhibition

(libération nette ; %)

Calcium ionophore 100 + 1 ,70

Acide boswellique

50,90 + 7,49 -49% p<0,001

10 Mg/ml

MC 0,005% 81 ,40 + 0,90 -19% p<0,001

MC 0,01 % 60,24 + 5,96 -40% p<0,001

3. Défenses anti-inflammatoires et anti-oxydantes a. Protection contre la peroxy dation lipidique

^• S Matériel et méthodes :

Des cellules de lignée Jurkat ont été pré-incubées pendant 45 minutes en présence de l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005% et 0,01% (p/v de matière active) ou du BHT à 100 μΜ (référence) et en présence de la sonde fluorescente Cl 1 -fluor, spécifique de la peroxydation des lipides.

Les cellules ont ensuite été irradiées par des UVA+B puis incubées pendant 30 minutes en présence de MC ou du BHT.

A la fin de l'incubation, la quantité de peroxydes lipidiques a été évaluée par analyse en cytométrie en flux de l'intensité de fluorescence (inversement proportionnelle à l'oxydation). Les résultats ont été analysés statistiquement par un test t de Student.

Résultats et conclusion : L'extrait de feuilles de maca a significativement protégé les cellules contre la peroxydation lipidique induite par l'irradiation aux UV (tableau 5).

Tableau 5 : Peroxydation des lipides induite par UV

Peroxydes lipidiques

Protection (%)

(% du témoin irradié)

Cellules irradiées (UV) 100

BHT 100 μΜ 64 49% p< 0,01

MC 0,005% 62 52% p<0,01

MC 0,01 % 59 56% p<0,01

b. Inhibition de l'inflammation induite par le PMA Matériel et méthodes :

Des kératinocytes humains (lignée NCTC-2544) ont été pré-incubés ou non (contrôle) par l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005% et 0,01% (p/v de matière active) ou les molécules de référence anti-inflammatoires (dexaméthasone à 10 ^"7 M ; indométhacine à 10 ^"6 M) pendant 24 heures. Les cellules ont ensuite été traitées par le PMA à 0, 1 μg/ml (Phorbol Myristate Acétate) pendant 24 heures, toujours en présence de MC ou des références.

A l'issue du traitement, les quantités d'IL8 (interleukine 8) et de PGE2 (prostaglandine E2) sécrétées ont été mesurées par ELISA dans les surnageants de culture. Les résultats ont été analysés statistiquement par un test t de Student. ^• S Résultats et conclusion :

L'extrait de feuilles de maca a fortement et significativement inhibé la production des médiateurs inflammatoires IL8 et PGE2 stimulée par le PMA dans des kératinocytes (tableau 6).

Ces résultats montrent l'activité anti-inflammatoire de l'extrait de feuilles de maca.

Tableau 6 : Production d'IL8 et de PGE2 par des kératinocytes

IL8

Inhibition

(ng/ml)

Cellules contrôles 0,1 + 0,0

PMA 0,1 Mg/ml 50,1 + 1 ,8

Dexaméthasone 10-7M 7,4 + 0,8 85% p<0,001

MC 0,005% 24,7 + 0,8 51 % p<0,001

MC 0,01 % 19,3 + 0,8 62% p<0,001

PGE2

Inhibition

(ng/ml)

Cellules contrôles 0,039 + 0,0

PMA 0,1 Mg/ml 138,4 + 10,6

Indométhacine 10-6M 0,039 + 0,0 100% p<0,001

MC 0,005% 21 ,8 + 1 ,8 84% p<0,001

MC 0,01 % 9,8 + 0,0 93% p<0,001

c. Inhibition de l'inflammation induite par P. Acnés

L'effet protecteur de l'extrait de feuilles de maca vis-à-vis d'une inflammation induite par le propionibacterium acnés a été étudié sur des kératinocytes colonisés par cette bactérie. ^■ S Matériel et méthodes :

Des kératinocytes humains (lignée HaCaT) ont été pré-incubés pendant 48h en présence de l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,008% et 0,031% (p/v de matière active) ou de l'inhibiteur de référence : nicotinamide.

Les kératinocytes ont alors été stimulés par incubation pendant 18 heures avec une suspension bactérienne de P. acnés (souche ATCC6919).

A la fin de l'incubation, la quantité d'IL8 produite par les kératinocytes a été mesurée dans les surnageants de culture par une technique ELIS A.

Les résultats ont été analysés statistiquement par un test t de Student : ns p>0,05 (non significatif) ; *p<0,05 ; **p<0,01 ; ***p<0,001. V Résultats et conclusion :

La figure 1 représente la production d'IL8, en pg/ml, par des kératinocytes stimulés par P. acnés, avec un temps de pré-incubation de 18h, en fonction de la concentration d'actif en %.

L'extrait de feuilles de maca a significativement inhibé la production d'IL8 induite par P. acnés sur des kératinocytes (figure 1).

L'extrait de feuilles de maca module donc l'inflammation induite par ³ , acnés.

4. Inhibition de la lipogénèse dans des adipocytes Matériel et méthodes :

Des adipocytes humains normaux ont été incubés pendant 1 heure en présence de l'extrait de feuilles de maca (MC) à 0,005% et 0,01% (p/v de matière active) ou de la référence (cérulénine à 20 μΜ). Après incubation, le marqueur radioactif [ ¹⁴ C]-acétate a été ajouté et les échantillons ont été incubés la nuit. A la fin de l'incubation, les lipides ont été extraits et la radioactivité incorporée (correspondant à la lipogénèse) a été mesurée par scintillation liquide.

Les résultats ont été analysés statistiquement par un test t de Student. - Résultats et conclusion :

L'extrait de feuilles de maca a significativement inhibé la néosynthèse des lipides par des adipocytes (tableau 7).

Ainsi, cet extrait présente donc un effet amincissant.

Tableau 7 : Evaluation de la lipogénèse dans des adipocytes

Incorporation d'acétate

Inhibition

(cpm)

Cellules contrôles 32895 + 1358

Référence (Cérulénine) 14934 + 671 55% p<0,001

MC 0,005% 27331 + 700 17% p<0,05

MC 0,01 % 23664 + 960 28% p<0,01