L'invention concerne un extrait flavonoïdique de ginkgo biloba, et plus spécifiquement un extrait soit subtantiellement dépourvu de terpènes, soit à forte teneur en hétérosides flavonoïdiques ou soit dépourvu de terpènes et à forte teneur en hétérosides flavonoïdiques. Cet extrait peut avantageusement être utilisé en tant qu'agent aromatisant L'invention concerne également une composition aromatisante contenant un tel extrait et l'utilisation de cet extrait en tant qu'ingrédient aromatisant.

Les applications des extraits de feuilles de ginkgo biloba dans les domaines médical et cosmétique, sont bien connues. L'extrait EGb 761 est peut-être le plus connu dans le domaine médical (L'extrait de ginkgo biloba (EGb 761), La Presse Médicale, 1986, vol. 31, numéro spécial, Editions Masson). Cet extrait comprend principalement deux familles de substances : les substances flavonoïdiques et terpéniques . De nouveaux extraits ont été définis qui, de façon inattendue, modifient les propriétés organoleptiques de certains aliments tels que les boissons, les produits laitiers, les produits sucrés.

Un des aspects de la présente invention a donc pour objet des extraits qui ne contienent pas, ou très peu, de terpènes (ginkgolides et bilobalides) qui possèdent une grande activité thérapeutique. Par ailleurs, il est apparu intéressant d'obtenir des extraits enrichis en substances flavonoïdiques : ce sont essentiellement des mono, di et tri glucosides de Kaempférol, de Quercétine et d'Isorhamnétine avec du glucose et du rhamnose.

L'invention a ainsi pour objet un extrait flavonoïdique de feuilles de ginkgo biloba dépourvu de terpènes. Cela signifie que l'extrait comprend des hétérosides flavonoïdiques et peu ou pas de terpènes. Lorsque l'extrait contient des terpènes, le taux de te ènes est de 1 % au maximum, et de préférence de 0,5 % au maximum.

L'invention a également pour objet un extrait flavonoïdique à forte teneur en hétérosides flavonoïdiques. Cela signifie que l'extrait contient de 28 à 35 % d'hétérosides

flavonoïdiques, et de préférence 28 à 32 %. De tels extraits sont obtenus de préférence à partir de feuilles de jeunes arbres de ginkgo biloba taillés.

L'invention a également pour objet un extrait flavonoïdique dépourvu de terpènes et à forte teneur en hétérosides flavonoïdiques. Cela signifie que l'extrait est dépourvu de terpènes et contient de 28 à 35 % d'hétérosides flavonoïdiques et de préférence 28 à 32 %.

Plus particulièrement, l'invention a pour objet un extrait flavonoïdique comprenant au maximum 1 % de terpènes et de 28 à 35 % d'hétérosides flavonoïdiques. De façon préférentielle, l'extrait comprend au maximum 0,5 % de terpènes et de 28 à 32 % d'hétérosides flavonoïdiques.

Un extrait flavonoïdique à forte teneur en hétérosides flavonoïdiques peut être obtenu par extraction sous vide partiel, par un mélange acétone-eau. Après des étapes de délipidation, d'élimination des substances indésirables par différents solvants et par précipitation, la solution extractive est concentrée et l'extrait est séché sous vide.

L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'un extrait dépourvu de terpènes tel que défini ci-dessus. Ce procédé comprend plusieurs étapes d'extraction d'extrait de feuilles de ginkgo biloba par des solvants, caractérisé en ce qu'une des étapes d'extraction est une étape de déterpénation et le solvant utilisé est un composé de formule RC(O)OR' dans laquelle R et R' représentent, indépendamment, un alkyl inférieur, seul ou mélangé avec un hydrocarbure aliphatique saturé contenant au moins 5 atomes de carbone. L'étape d'extraction peut être effectuée à n'importe quel stade du procédé. De préférence, le solvant utilisé lors de l'étape de déterpénation, comprend de 0 à 20 % d'hydrocarbure aliphatique saturé.

Des étapes d'extraction autres que l'étape de déterpénation, sont connues dans la littérature notamment dans les brevets EP431535, EP 431536, EP 360556 et EP324197. Ces brevets sont incorporés par référence dans la présente demande.

Dans les définitions indiquées ci-dessus, l'expression alkyle inférieure représente de préférence un radical alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone linéaire ou ramifié et en particulier un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone tels que les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle et tert-butyle. Les solvants de formule RC(O)OR'dans laquelle les radicaux R et R' représentent méthyle, éthyle ou propyle, et notamment l'acétate d'éthyle, sont préférentiellement utilisés.

L'hydrocarbure aliphatique saturé peut être choisi parmi l'hexane, l'heptane, l'octane. De préférence, l'heptane est utilisé.

L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'un extrait enrichi en hétérosides flavonoïdiques tel que défini ci-dessus. Ce procédé comprend plusieurs étapes d'extraction d'extrait de feuilles de ginkgo biloba par des solvants, caractérisé en ce qu'une des étapes d'extraction est une étape d'enrichissement en hétérosides flavonoïdiques et que le solvant utilisé, en quantité minimum, est un alcool, seul ou mélangé avec une cétone, de préférence l'acétone. L'étape d'extraction peut être effectuée à n'importe quel stade du procédé. De préférence, l'alcool utilisé est un alcool inférieur tel que le méthanol, l'éthanol, le propanol, le butanol, et de préférence le butanol. La quantité de solvant utilisée peut être de 3 à 12 parties, et de préférence dans la partie inférieure de cette fourchette.

Un exemple est décrit ci-après dans la partie expérimentale ; l'ordre des étapes d'extraction par le mélange acétate d'édiyl/heptane et le mélange acétone butanol peut être inversé.

Un extrait selon l'invention modifie simultanément le profil olfactif et le profil gustatif du produit testé. De par ses propriétés organoleptiques, cet extrait peut être utilisé pour la préparation de compositions aromatiques de type varié. Il peut être utilisé seul ou en association avec d'autres ingrédients aromatisants couramment employés. Ainsi, l'utilisation d'un tel extrait flavonoïdique est envisagé dans les produits alimentaires. Par produits alimentaires, on peut citer les produits laitiers comme par exemple les yaourts, les boissons rafraîchissantes ou nutritives, et plus particulièrement les boissons rafraîchissantes sans alcool telles que les boissons orangées ou toniques à base de quinine, mais également les produits sucrés comme par exemple les chewing-gums.

La quantité utilisée dans une composition aromatisante ou un produit aromatisé, peut varier dans une gamme étendue de valeurs ; cette valeur dépend bien entendu du produit dans lequel l'arôme ou la composition aromatique est incorporée, mais également de la nature et de la quantité des autres constituants de la composition aromatique et de l'effet désiré.

L'extrait flavonoïdique selon l'invention est utilisé à des concentrations comprises entre 0,001 et 0,1 % en poids par rapport au poids total du produit aromatisé, de préférence entre 0,001 et 0,05 %. Dans le cas de produits laitiers, la concentration d'extrait

flavonoïdique peut être comprise entre 0,005 et 0,045 %. Dans le cas de produits tels que les chewing-gums, la concentration d'extrait flavonoïdique peut être comprise entre 0,01 et 0,04 %. Dans le cas de produits alimentaires tels que les boissons rafraîchissantes ou nutritives, la concentration d'extrait flavonoïdique peut être comprise entre 0,002 et 0,02 %.

Les exemples suivants sont présentés pour illustrer l'invention et ne doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de l'invention.

Exemple 1 : Procédé d'obtention d'un extrait flavonoïdique

Les feuilles de ginkgo biloba sont extraites avec de 6 à 12 parties (de préférence 8) d'eau contenant 60 % d'acétone à 50-60° C et la solution est concentrée de manière à réduire le pourcentage en acétone à moins de 3 %. Cette solution est refroidie et les lipides sont éliminés par décantation. La solution aqueuse est extraite avec de 2 à 5 parties d'acétate d'éthyl contenant de 0 à 20 % d'heptane. La solution résultante est extraite avec une quantité minimum d'un mélange acétone / butanol (pourcentage d'acétone 0 à 15 %) en présence de sulfate d'ammonium. La phase organique est concentrée ; après ajout d'éthanol, la solution est concentrée de nouveau. Après une nouvelle dilution à l'éthanol, la solution est refroidie et des précipités insolubles sont filtrés. La solution résultante est concentrée, séchée et enfin broyée pour récupérer l'extrait flavonoïdique sous forme d'une poudre homogène.

Exemple 2 : Analyse sensorielle

Une analyse sensorielle d'un extrait flavonoïdique tel qu'obtenu dans l'exemple 1, a été menée pour un certain nombre de produits alimentaires (produits laitiers, boissons rafraîchissantes et chewing-gums), avec ou sans extrait flavonoïdique.

60 dégustateurs ont participé à cette analyse. Pour chaque item sensoriel (acide, amer, sucré, salé), chaque dégustateur indique une note d'intensité de 0 à 5, correspondant à un degré croissant d'appréciation du produit testé.

Exemple 2a : Produits laitiers

Q = quantité d'extrait

L'astringence naturelle de l'extrait équilibre bien les saveurs fondamentales des produits laitiers en atténuant l'acidité des produits traditionnels. L'extrait apparaît très complémentaire des notes laitières et fruitées.

Exemple 2b : Boissons rafraîchissantes

L'astringence de l'extrait se marie harmonieusement avec celle des boissons ; et plus particulièrement avec celle des boissons à note quinine et / ou écorces amères telles que l'Indian Tonic ^® .

Exemple 2c : Chewing-gums

Chewing-gum Chewing-gum Autre chewing-gum mentholé à la chlorophylle mentholé u

(mg/unité) 0 3 6 0 6 12 0 3 6

Fraîcheur 4 2 1 2 3 1 2 3 1 Piquant 4 3 1 2 2 1 2 2 1 Sucré 3 3,5 4 2 3 4 3 4 4 Arôme herbacé 0 2 4 2 3 4 1 2 4

U = unité

Exemple 3 : Test descriptif

Ce test a été mené sur plusieurs variétés de yaourts. 60 dégustateurs, consommateurs de yaourts natures, ont participé au test La méthode utilisée est un test comparatif de profils sensoriels. Le questionnaire comporte 9 ou 10 items descriptifs suivant la variété testée "ferme" ou "brassé". Item après item, chaque dégustateur indique sur une échelle non structurée de 10 cm, l'intensité perçue et ceci successivement pour la totalité des produits. Les résultats obtenus sont les suivants :

Exemple 3a : Produit testé : yaourts fermes 0 % de matière grasse, avec ou sans ajout de 0,04 % d'un extrait flavonoïdique tel qu'obtenu dans l'exemple 1

Variété avec extrait Variété sans extrait

Descripteur Moyenne Ecart-type Moyenne Ecart-type t S

Caractère ferme 6,68 1,35 6,58 1,52 0,81

Intensité odeur globale 5,00 1,72 4.77 1,72 1,42

Caractère lisse en bouche 6,54 2,03 6,34 1,79 1,18

Caractère épais 4,90 1,54 4,73 1,73 0,97

Impression gras en bouche 2,31 1,98 2,04 1,91 1,95

Goût fruité 2,65 2,10 0,70 1,02 8,36 1 %

Goût fermenté 2,99 2,33 3,22 2,13 1,28

Goût acide 2,74 2,07 2,67 1,98 0,33

Goût amer 2,07 1,82 1,42 1,31 3,95 1 %

t = "T" de Student sur séries appariées ; S = Significativité

La variété avec l'extrait flavonoïdique se distingue de façon hautement significative comme ayant un goût fruité plus prononcé et un goût amer plus intense que la variété sans extrait flavonoïdique.

Exemple 3b : Produit testé : yaourts fermes gras, avec ou sans ajout de 0,04 % d'un extrait flavonoïdique tel qu'obtenu dans l'exemple 1

Variété avec extrait Variété sans extrait

Descripteur Moyenne Ecart-type Moyenne Ecart-type t S

Caractère ferme 7,65 1,60 7,38 1,36 2,06 5 %

Intensité odeur globale 4,85 1,85 4,81 1,92 0,27

Caractère lisse en bouche 7,01 1,99 6,87 2,12 0,92

Caractère épais 6,26 2,05 5,46 1,91 4,92 1 %

Impression gras en bouche 4,17 2,08 3,54 1,95 3,59 1 %

Goût fruité 2,25 1,99 0,84 1,19 6,04 1 %

Goût fermenté 2,62 2,06 2,66 2,19 0,24

Goût acide 2,62 1,72 2,61 1,59 0,05

Goût amer 1,69 1,55 1,53 1,49 0,88

t = "T" de Student sur séries appariées ; S = Significativité

La variété avec l'extrait flavonoïdique se distingue de façon hautement significative comme ayant un caractère plus épais en bouche, une impression de gras en bouche plus intense et un goût fruité plus prononcé et, de façon significative, comme ayant un caractère plus ferme à la cuillère que la variété sans extrait flavonoïdique.

Exemple 3c : Produit testé : yaourts brassés gras, avec ou sans ajout de 0,04 % d'un extrait flavonoïdique tel qu'obtenu dans l'exemple 1

Variété avec extrait Variété sans extrait

Descripteur Moyenne Ecart-type Moyenne Ecart-type t S

Caractère épais à la cuillère 5,29 1,71 5,22 1,71 0,56

Caractère filant à la cuillère 3,52 1,91 3,50 1,80 0,20

Intensité odeur globale 4,36 1,69 4,32 1,68 0,27

Caractère lisse en bouche 8,23 1,48 8,17 1,63 0,66

Caractère épais 3,99 1,96 4,06 2,04 0,45

Impression gras en bouche 3,72 2,01 3,42 1,82 1,77

Goût fruité 2,60 1,92 1 ,09 1,31 5,97 1 %

Goût fermenté 3,19 2,20 2,94 2,27 1,11

Goût acide 3,10 2,00 2,47 1,71 2,63 5 %

Goût amer 2,00 1,78 1,53 1,57 2,35 5 %

t = "T" de Student sur séries appariées ; S = Significativité

La variété avec l'extrait flavonoïdique se distingue de façon hautement significative comme ayant un goût fruité plus prononcé et, de façon significative, comme ayant un goût plus acide et un goût plus amer que la variété sans extrait flavonoïdique.