技术领域

本发明涉及天然药物化学领域和化妆品领域， 具体涉及化妆品中一种用 于保湿的中草药石斛。 背景技术

皮肤由表皮、 真皮和皮下脂肪组织所构成， 每层都含有水分。 皮肤含水 量的多少是皮肤稚嫩、 丰满、 亮泽与柔软与否的关键。 婴幼儿皮肤含水量高 就显得细嫩光泽， 老年人皮肤因为含水量较低，所以显得干燥、 萎瘪、脱屑， 甚至于发生皱纹。 保湿是保证皮肤健康、 延緩衰老的重要条件， 开发研究性 能优异的保湿剂是人们孜孜以求的目标。

一方面随着年龄增长， 皮肤保湿机构受到损伤， 皮肤组织细胞和细胞间 的水分含量减少， 当角质层水分下降到 10%以下时， 皮肤就会显得干燥、 失 去弹性、 起皱、 加速皮肤老化。 另一方面皮肤遭受炎热、 寒冷、 风吹、 清洁 剂、 紫外线辐射等侵害， 表层会变得更加干燥。 因此如何保持皮肤的水分， 减少水分散失十分重要。 目前市场上皮肤保湿剂主要包括封闭剂、 吸湿剂、 亲水基盾、 防光剂和一些特殊添加成分。

传统医学认为， 皮肤干燥在于肺腎功能失调， 水液代谢失衡， 津液不荣 肌肤， 故润肤之道在于补肺益肾， 滋补津液。 在中医学文献中也有保湿润肤 的记载， 并辑录有中药美容方剂， 从理论到实践都有阐述。 近年来一些现代 研究对多糖成分的作用有所阐述， 多糖的高度吸水性和良好的成膜性完美的 结合能够达到很好的保湿效果， 植物多糖也正逐渐被应用于皮肤保湿， 而多 糖是大多中草药所含有的主要成分，这些都为 寻找安全有效的皮肤保湿剂指 明了方向。 发明内容

本发明目的在于提供一种石斛提取物的制备方 法， 所述方法包括：

(1)溶剂提取， 所述溶剂选自氷、 甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 乙二 醇、 1，2-丙二醇、 1，3-丙二醇、 1,3-丁二醇、 丙酮、 乙酸乙酯或其组合。 优选地， 其中步骤 (1)的提取选自浸泡、 煎煮、 回流、 渗漉或其组合。 优选地， 所述制备方法还包括：

(2)分离提取液和残渣， 获得提取液；

(3)可选的溶剂回收；

(4)可选的溶解或稀释。

优选地， 其中步骤 (4)中所用的溶剂选自水、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 乙 二醇、 1，2-丙二醇、 1，3-丙二醇、 1，3-丁二醇、 丙酮、 乙酸乙酯或其组合。

本发明另一目的在于提供另一种石斛提取物的 制备方法， 所述方法包 括：

(1)溶剂提取， 所述溶剂选自曱醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 乙二醇、 1，2-丙二醇、 1,3-丙二醇、 1,3-丁二醇、 丙酮、 乙酸乙酯或其组合；

(2)分离提取液和残渣， 获得残渣；

(3)用水提取步骤 (2)的残渣。

优选地， 其中步骤 (1)和 (3)的提取独立地选自浸泡、 煎煮、 回流、 渗漉 或其组合。

优选地， 所述制备方法还包括：

(4)分离水提取液和残渣， 获得水提取液；

(5)浓缩， 乙醇醇沉， 分离获得沉淀；

(6)可选地， 将步骤 (5)的沉淀溶解配制成溶液。

优选地，其中步骤 (6)中所用的溶剂选自乙醇、异丙醇、正丁醇、 乙二醇、 1，2-丙二醇、 1,3-丙二醇、 1,3-丁二醇、 丙酮、 乙酸乙酯或其组合。

本发明的又一个 ϋ的是提供根据上述本发明的制备方法获得的� ��斛提 取物。

优选地， 所述石斛提取物的形式选自溶液剂、 粉剂、 软膏剂、 膜剂或膏 m。

根据本发明的方法获得的石斛提取物可直接用 于皮肤保湿，也可作为功 效添加剂加入到化妆品中使用。

本发明再一个目的是提供石斛提取物在制备保 湿的化妆品中的用途。 优选地， 所述化妆品自美容护肤霜、 眼霜、 面膜、 洗面奶、 柔肤水、 润 体露或精华素。

优选地， 所述石斛提取物是上述根据本发明的方法制得 的石斛提取物。 本发明再一个目的是提供一种保湿的化妆品， 其中含有石斛提取物。 优选地， 所述化妆品美容护肤霜、 眼霜、 面膜、 洗面奶、 柔肤水、 润体 露或精华素。

优选地， 所述石斛提取物是上述根据本发明的方法制得 的石斛提取物。 在本发明中， 石斛 ( Caidis Dendrobii 是指植物石斛的新鲜或干燥茎这 个药用部位， 石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物， 主要包括金钗石斛 Dendrobium noMe、 Dendrobium candidum、 马鞭石斛 De"drab 画 fimbriatum var.oculatum、 环草石斛 Dendrobium loddigesii、 黄草石斛 Dendrobium z^aw w 及其近似种的新鲜或千燥茎。主要分布于我国 云南、 四川、 贵州以及亚洲热带地区。 全年均可采取， 以秋季采收为佳。 烘干或晒 干， 切段， 生用。

石斛： 甘寒， 归胃肾经， 益胃生津， 滋阴清热， 润肺益肾， 用于阴伤津 亏， 口干烦渴； 《神农本草经》： "补五脏虚劳羸瘦， 轻身延年"； 《名医别录》： "石斛长肌肉， 逐皮肤邪热痱气，，； 《本草》云"石斛圆细者为上， 且谓其益精 强阴， 壮筋补虚， 健脚膝， 驱冷痹， 却惊悸， 定心志。 ，，； 徐究仁： "石斛功 能清胃生津， 胃肾虚热者最宜。 如欲清胃救津， 自非用石斛之甘滋轻灵不为 功。 ，，。 现代药理研究表明， 石斛有效成分含有生物碱、 多糖、 微量元素和 氨基酸等成分， 其提取物有优秀的持水效果， 可增加毛细血管的血流量； 并 能显著提高超氧化物歧化酶（SOD )水平，从而起到降低过氧化脂质（LPO ) 的作用； 还从脑单胺类神经介质水平的调节角度， 作为类似单胺氧化酶 ( MAO )的抑制剂而起到抗衰老作用。

本发明的方法制得的石斛提取物和化妆品， 能够帮助皮肤在干燥环境下 抵御干燥， 防止水分散失，保湿美肤，令肌肤光彩润泽， 并且对皮肤无刺激。 附图说明

图 1A和图 1B分别是空白对照组的细胞在 T最初和干燥 15min后的细 胞形态图；

图 2A和图 2B分别是实施例 2中提取物 B(l% , v/v)孵育的细胞在 T最 初和干燥 15min后的细胞形态图；

图 3A和图 3B分别是实施例 4中提取物 D(l%, v/v)孵育的细胞在 T最 初和干燥 15min后的细胞形态图； 图 4A和图 4B分别是实施例 5中提取物 E(l%， v/v)孵育的细胞在 T最 初和干燥 15min后的细胞形态图。 具体实施方式

实施例 1

取黄草石斛 ^Mi/rab ww Chrysanthum 100g,力。 20倍量 (倍量： 指溶剂体 积与石斛重量的比值， 其中溶剂体积的单位是 ml , 石斛重量的单位是 g， 下 同） 75%乙醇 (v/v)冷浸 48小时， 滤过， 滤液回收乙醇， 所得提取物用水溶解， 制成含生药量为 1500mg/ml的溶液， 得到提取液 A。 实施例 2

取环草石斛 Dendrobium loddigesii 100g,加 8倍量甲醇回流提取 2小时， 滤过， 滤液回收曱醇， 所得提取物用水溶解， 制成含生药量为 1000mg/ml 的溶液， 得到提取液 B。 实施例 3

取铁皮石斛 ewdrab M candidum 100g,加 10倍量去离子水煎煮提取两 次， 每次 1 小时， 滤过， 所得提取物用水溶解， 制成含生药量为 500mg/ml 的溶液，得到提取液 C。 实施例 4

取金钗石斛 )6^^0 '；¾ 10(^， 加 6倍量乙醇回流提取， 滤过， 残 渣再用 10倍量水煎煮提取约 2小时， 浓缩， 加两倍量乙醇沉淀， 滤过， 沉 淀用水溶解， 制成含生药量为 1000mg/ml的溶液， 得到提取液 D。 取马鞭石斛 Dendrobium fimbriatum var.oculatum 100g, 力口 8倍量乙 ®|·渗 漉提取，渗漉液回收乙醇，所得提取物用水溶 解，制成含生药量为 1000mg/ml 的溶液， 得到提取液 E。 实施例 6 防止角质细胞失水的体外测试

依据保湿相关机理， 利用细胞平台的体外评价方法， 在表皮细胞处于干 燥环境下， 考察实施例提取物帮助细胞抵御干燥， 防止失水， 维持细胞原有 形态的能力。

取各实施例提取物 0.1ml, 力 p MEM培养液 9.9ml， 抽滤， 配制成 1%的 浓度。 同法， 配制 1%甘油作为阳性对照。 选择人表皮角质细胞 Hacat为实 验细胞，以正常 MEM液培养的细胞为空白对照组，以含 1%浓度甘油的 MEM 液培养的细胞为阳性对照組， 以含 1%浓度的实施例提取物的 MEM液培养 的细胞为加药组。 孵育 24h后， 依次吸干每孔液体， 置于显微镜下观察细胞 从正常到干燥 (状态明显变化)所经历的时间， 并于 15min拍照记录形态。

实验结果：

在外界给予的干燥条件下，未加实施例提取物 孵育的空白组细胞逐渐失 去水分， 能够 4氏御干燥时间为 720秒， 1%甘油孵育的阳性对照组相对于空 白组维持干燥时间有所增加， 为 780秒， 而各实施例提取物孵育的角化细胞 能够帮助皮肤细胞保持水分， 赋予细胞很好的抗干燥能力， 能够抵御干燥时 间为 795秒以上， 比空白组增加了 10%以上， 效杲超过 1%甘油对照， 详见 下表：

在干燥的第 15分钟， 空白组细胞已经皱缩严重失水， 折光率增加， 形 态明显改变， 而各实施例提取物孵育组细胞基本维持原有形 态， 说明各实施 例提取物具有很好的抗干燥保湿作用，其中以 实施例 4提取物 D的抗干燥保 湿效果最好， 抵御干燥时间增加百分比达 13,89%， 详见附图 1A-4B。