Titre : Composition pour injection comprenant un conjugué peptidique

[0001] La présente invention concerne une composition comprenant au moins un conjugué peptidique de formule (I) et au moins un vecteur, son utilisation pour restructurer ou préserver l’aspect de la peau, son procédé d’application, ainsi que son kit.

Domaine technique

[0002] Le vieillissement de la peau est un phénomène complexe ayant des origines diverses, qui peuvent être extérieures (exposition au soleil, au froid, agents oxydants, etc.) ou intrinsèques (génétique, protéiques, etc.).

[0003] La peau est un tissu, constitué de couches (épiderme, derme, et hypoderme, derme et épiderme étant liés par la jonction dermo-épidermique « JDE »), ayant le rôle de barrière de protection entre le milieu intérieur et extérieur.

[0004] Le vieillissement de la peau se traduit en surface par l’apparition de rides et ridules. Ceci est dû en partie par un relâchement et une perte de densité et épaisseur des tissus cutanés et sous cutanés et à une perte d’élasticité de ces derniers. Ainsi, le derme assure la fonction fondamentale de cohésion de la peau et constitue une cible privilégiée du traitement antirides.

[0005] La perte d’élasticité du derme/épiderme s’explique par la conjoncture de plusieurs phénomènes. Elle est due en partie à la diminution de la quantité de collagène et la réduction du taux de fibronectine dans le derme. De plus, les fibroblastes se transforment en fibrocytes ou disparaissent. A ceci, s’ajoute un aplatissement de la JDE qui perd ainsi progressivement ses ondulations caractéristiques diminuant en conséquence l’interface épiderme-derme. Les réseaux moléculaires de la peau se déstructurent : le squelette protéique se fragilise, les kératinocytes basaux montrent une adhérence moindre, ce qui a pour conséquence une altération des fonctions biologiques et de soutien de la JDE. [0006] Des moyens variés ont été proposés contre le vieillissement cutané, allant de la composition cosmétique anti-rides aux injections pour le comblement de rides.

[0007] La molécule Ac-SDKP-OH est un tétrapeptide naturel (Acétyl- Sérine-Acide aspartique-Lysine-Proline-OH) identifiée pour ses propriétés cosmétiques au niveau de la peau lors d’un usage topique (EP 1 786 386, Bakala et al.). Toutefois, cette molécule s’hydrolyse très facilement, ce qui rend son exploitation commerciale délicate en particulier pour des compositions cosmétiques d’usage commun (i.e. stockées à température ambiante, ouvertes et refermées à la convenance du patient). La molécule est en outre très sensible à l’hydrolyse enzymatique. Il en est de même pour ses analogues couverts par EP 1 786 386. Ainsi, de par sa fragilité, l’accès aux couches les plus profondes de la peau par cette molécule est limité, restreignant ainsi l’effet du traitement. Une solution proposée par EP3416730, est une formulation de type émulsion/nanoémulsion pour surmonter ces difficultés. Cependant, l’effet anti-rides n’est pas instantané et la composition anti-ride nécessite d’être appliquée pendant plusieurs jours, semaines ou mois afin d’obtenir l’effet et de l’entretenir.

[0008] Parmi les méthodes d'élimination des rides par injection, la méthode consistant à paralyser les muscles qui provoquent les rides avec le Botox est largement utilisée, mais elle crée une expression non naturelle et est difficile à utiliser sous les yeux, la lèvre inférieure, les plis nasogéniens, etc. Le problème est que l'effet n'est que de 3 à 6 mois et nécessite de répéter les injections. Une autre méthode consiste à utiliser un produit de comblement tel que l’acide hyaluronique ou le collagène. Cependant, la résorption de ce type de produit, de 3 à 6 mois chez la plupart des sujets, est telle que les injections doivent être répétées à intervalles proches et réguliers pour préserver les effets.

[0009] Les demandeurs ont découvert qu’en associant un vecteur avec un conjugué peptidique il était possible d’obtenir un effet antirides immédiat qui se prolonge dans le temps réduisant donc la fréquence des injections.

Résumé de l’invention [0010] En conséquence, dans un premier aspect de l'invention, il est fourni une composition comprenant : a. au moins un conjugué peptidique de formule (I) suivante :

R1 -X1 -X2-X3-X4-A1 -R2 (I) dans laquelle :

R1 , étant du côté N-terminal, est un atome d’hydrogène, ou un groupement alkyle en C1-C50 linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué,

X1 est un condensât de (L)-sérine,

X2 est un condensât de (L) et/ou (D) acide aspartique,

X3 est un condensât de (L) et/ou (D) lysine, ,

X4 est un condensât de (L) et/ou (D) proline,

X4, ou X3 et X4, étant optionnellement absents, les liaisons reliant X1 à X2, X2 à X3 le cas échéant, et X3 à X4 le cas échéant, pouvant être des liaisons peptidiques ou pseudopeptidiques,

A1 est une liaison covalente, un groupement NH ou un atome d’oxygène,

R2, étant du côté C-terminal, est un atome d’hydrogène, ou un groupement alkyle en C1-C50 linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué,

R1 et R2 ne pouvant être conjointement des atomes d’hydrogène, ou l’un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, et b. au moins un vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement.

[0011] Dans un second aspect, l’invention concerne l’utilisation non thérapeutique de la composition selon la présente invention pour restructurer ou préserver l’aspect de la peau, en particulier en profondeur au niveau dermique.

[0012] Dans un troisième aspect, l’invention concerne un kit comprenant la composition selon la présente invention et un dispositif d’administration de ladite composition.

[0013] Dans un dernier aspect, l’invention porte sur un procédé de traitement non thérapeutique de restructuration ou de préservation de l’aspect de la peau, en particulier en profondeur au niveau dermique, ledit procédé comprenant :

- la fourniture de la composition ou du kit selon l’invention, - le prélèvement d’une quantité de la composition selon l’invention, et

- l’administration par injection de manière séparée ou séquentielle ou simultanée, de préférence simultanée, de la dite composition.

Exposé de l’invention

[0014] Définitions

[0015] Par « Conjugué peptidique », il est fait référence à un brin peptidique conjugué, i.e. lié, à un fragment moléculaire d’une autre nature, par exemple un groupement alkyle linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué en C1 à C50, de préférence en C2, en C12 ou en C16. Il est admis dans l’art qu’un peptide comprend un nombre X d’acides aminés, il s’agit en réalité d’un nombre X d’acides aminés condensés, i.e. ayant chacun perdu une molécule d’eau (s’ils sont reliés les uns aux autres par une liaison peptidique, typiquement).

[0016] Par « brin peptidique » il est fait référence à un polymère d'acides aminés, lesquels acides aminés sont reliés entre eux par au moins une liaison peptidique ou pseudopeptidique. Ainsi, un peptide comprenant deux résidus d’acides aminés est un dipeptide ; un peptide comprenant trois résidus d’acides aminés est un tri peptide; un peptide comprenant quatre résidus d’acides aminés est un tétrapeptide ; et ainsi de suite.

[0017] Par « liaison peptidique » il est fait référence à un groupement carbonyle CO et un groupement aminé NH dans un peptide. La liaison peptidique est donc une liaison amide reliant deux acides aminés entre eux. Ainsi les acides aminés sont dits « condensés » car ils ont perdu au moins une molécule d'eau pour former la ou les liaisons peptidiques dans lesquels ils sont impliqués.

[0018] Par « liaison pseudo peptidique » il est fait référence à une liaisons qui s’engage entre le groupement carbonyle CO ou le groupement aminé NH du carbone alpha du peptide et un autre groupement méthyle CH3, carbonyle CO ou groupement aminé NH d’une autre molécule qui n’est pas un peptide, par exemple une chaîne hydrocarbonée de C1 à C50. [0019] Par « SDKP »il est fait référence à un brin peptidique de structure :

Avantageusement les acides aminés sont de configuration L : Les groupements fonctionnels (e.g. NH2, OH, COOH) peuvent être sous forme protonée ou déprotonée selon le pH environnant. Ces groupements peuvent également être protégés par des groupements protecteur classiques tels que trouvés dans les ouvrages "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 2007 4e édition et/ou Harrison et al. "Compendium of Synthetic Organic Methods", Vol. 1 à 8 (J. Wiley & sons, 1971 to 1996). Ainsi typiquement, les fonctions COOH peuvent être protégées par un groupement ester tel que O-tert- Butyle (OtBu), O-Méthyle (OMe), O-Ethyle (OEt), ou encore O-benzyle, la fonction OH par un éther de tert-Butyle, Méthyle, Ethyle, ou benzyle, et NH2 par un groupement acido-labile tel que Boc ou baso-labile tel que Fmoc. [0020] L'expression « alkyle en C1-C50 linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué», représente une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 50 atomes de carbone, comme par exemple un méthyle (C1), éthyle (C2), propyle ou isopropyle (C3), butyle, isobutyle ou tertbutyle (C4), pentyle (C5), hexyle (C6), heptyle (C7), octyle C8), nonyle (C9), décyle (C10), undécyle (C11), dodécyle ou lauroyle (C12), n-tridécyle (C13), n-tétradécyle (C14), n- pentadécyle (C15), n-hexadécyle (16), n-heptadécyle (C17), n-octadécyle (C18), n- nonadécyle (C19), n-eicosyle (C20), 1-méthyl-dodécyle (C13), 2-méthyl-dodécyle (C13), 1 -éthyl-undécyle (C13), 2-éthyl-undécyle (C13), etc. Les alkyles peuvent être substitués ou non. Préférentiellement les alkyles peuvent être substitués par un ou plusieurs halogènes tels que F, Cl, Br, I, ou par d’autres fragments tels que OH, SH, N02, NH2, COOH.

[0021] Par le terme « de sel physiologiquement acceptable », on entend au sens de la présente invention tout sel préparé à partir de tout acide non toxique physiologiquement acceptable, y compris les acides organiques et inorganiques. De tels acides incluent l'acide acétique, benzènesulfonique, benzoïque, citrique, éthanesulfonique, fumarique, gluconique, glutamique, bromhydrique, chlorhydrique, lactique, maléique, malique, mandélique, méthanesulfonique, mucique, nitrique, pamoique, pantothénique, phosphorique, succinique, tartarique et paratoluènesulfonique. Avantageusement, on utilise l'acide chlorhydrique.

[0022] Par « biocompatible », on entend selon l’invention compatible avec le corps humain ou animal. En particulier un biomatériau biocompatible est, selon l’invention, un matériau répondant aux critères donnés par la norme ISO 10993 relative aux dispositifs médicaux.

[0023] Par « tissu fibreux », on entend selon l’invention un espace sous-cutané de nature essentiellement fibreuse, et apte à être rempli par des produits de comblement.

[0024] Par « sous-cutanée », on entend selon l’invention hypodermique, donc sous le derme.

[0025] Par « intradermique », on entend selon l’invention dans l’épaisseur du derme.

[0026] Par « gel », on entend une structure physique tridimensionnelle ayant des propriétés viscosifiantes, rhéologiques et thixotropiques.

[0027] On entend par « fluide vecteur » selon l’invention un composé sous forme fluide qui peut véhiculer le conjugué peptidique, notamment si celui-ci est sous forme lyophilisée, et/ou un biomatériau biocompatible de comblement se présentant naturellement sous forme de poudre solide. [0028] On entend par « hydrogel » un gel obtenu par solubilisation de l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement dans de l’eau (par exemple par l’intermédiaire d’un solvant aqueux).

[0029] Par « injection » au sens de la présente invention, on entend une injection effectuée avec aiguille, comme par exemple avec une seringue adaptée en fonction du type d’administration ou effectuée sans aiguille, comme par exemple à l’aide de tout dispositif ou technique capable de faire franchir la barrière épidermique tel que la barophorèse.

[0030] Par « barophorèse » ou « injection sans aiguille », on entend la propulsion à une vitesse supersonique d’un mélange d’air et de composés par l’intermédiaire d’une pièce à main. Ce mélange, soumis à une haute pression, arrive sur la peau sous forme de gouttelettes microscopiques. Les pores vont alors s’ouvrir, permettant la pénétration dudit/desdits composé(s). Préférentiellement, le mélange est un mélange d’air et de la composition selon la présente invention.

[0031] Par « environ » il est désigné une teneur exprimée en % ou en mol/L ou en ml ou en mm, avec une marge de +/- 20%, de préférence +/- 10%, plus préférentiellement +/- 5%.

[0032] Ainsi, la composition selon la présente invention comprend : a. au moins un conjugué peptidique de formule (I) suivante :

R1 -X1 -X2-X3-X4-A1 -R2 (I) dans laquelle :

R1 , étant du côté N-terminal, est un atome d’hydrogène, ou un groupement alkyle en C1-C50 linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué,

X1 est un condensât de (L)-sérine,

X2 est un condensât de (L) et/ou (D) acide aspartique,

X3 est un condensât de (L) et/ou (D) lysine, ,

X4 est un condensât de (L) et/ou (D) proline,

X4, ou X3 et X4, étant optionnellement absents, les liaisons reliant X1 à X2, X2 à X3 le cas échéant, et X3 à X4 le cas échéant, pouvant être des liaisons peptidiques ou pseudopeptidiques,

A1 est une liaison covalente, un groupement NH ou un atome d’oxygène, R2, étant du côté C-terminal, est un atome d’hydrogène, ou un groupement alkyle en C1-C50 linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué,

R1 et R2 ne pouvant être conjointement des atomes d’hydrogène, ou l’un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, et b. au moins un vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement.

[0033] Conjugué peptidique de formule (I)

[0034] Parmi les groupements alkyles particulièrement adaptés à la mise en œuvre de la présente invention, on préférera les groupements alkyles C1 -C12 linéaires ou ramifiés et plus particulièrement les groupements alkyles en C2 tel que l’acétyle et en C12 tel que le lauroyle.

[0035] Plus précisément, l’objet de la présente invention concerne une composition dans laquelle la séquence X1 -X2-X3-X4 du conjugué peptidique peut être (L)sérine- (L)acide aspartique (SD), (L)sérine-(L)acide aspartique-(L)lysine (SDK) ou (L)sérine-(L)acide aspartique-(L)lysine-(L)proline (SDKP). De manière préférée, la séquence X1 -X2-X3-X4 du conjugué peptidique est SDKP.

[0036] Un exemple de conjugué peptidique de formule (I) convenant particulièrement bien à la mise en œuvre de la présente invention est le tétrapeptide naturel CH3CO-Ser-Asp-Lys-Pro, aussi appelé acétyle-SDKP (AcSDKP). Le tétrapeptide naturel AcSDKP a été isolé de la moelle osseuse de veau foetal (WO- 88/00594). Il peut également être obtenu par une synthèse de type peptidique classique. Les peptides ou pseudopeptides de formule (I) apparentés au composé AcSDKP peuvent également être obtenus par une synthèse peptidique ou pseudopeptidique, comme décrit dans le document WO-97/28183.

[0037] Un autre exemple de conjugué peptidique de formule (I) convenant particulièrement bien à la mise en œuvre de la présente invention est le lauroyl- SDKP, comme décrit dans le document EP3416730.

[0038] L’au moins un conjugué peptidique de formule (I) est présent dans la composition à une concentration comprise entre 10 ¹¹ mol/l et 10 ³ mol/l, de préférence entre 10 ⁹ mol/l et 10 ⁵ mol/l, et plus particulièrement d’environ 10 ⁸ mol/L. Préférentiellement lorsque le conjugué peptidique de formule (I) est le AcSDKP, la quantité de ce dernier est comprise entre 5.10 ^-1 °% et 5.10 ^_4 % en poids, de préférence entre 5.10 ^_9 % et 5.10 ^_6 % en poids, plus préférentiellement d’environ 5.10 ^_7 % en poids par rapport au poids total de la composition. Lorsque le conjugué peptidique de formule (I) est le lauroyl-SDKP, la quantité de ce dernier est comprise entre 6.10 ^-1 °% et 6.10 ^_4 % en poids, de préférence entre 6.10 ^_9 % et 6.10 ^_6 % en poids, plus préférentiellement d’environ 6.10 ^_7 % en poids par rapport au poids total de la composition.

[0039] L’au moins un conjugué peptidique de formule (I) est présent dans la composition sous forme lyophilisée ou sous forme liquide telle qu’une solution, de préférence une solution aqueuse, ou sous forme de nanoparticules lipidiques tel que décrit dans EP3416730. De préférence, l’au moins un conjugué peptidique de formule (I) est présent sous une forme compatible avec une administration par injection.

[0040] Dans un mode de réalisation, l’au moins un conjugué peptidique est présent sous forme liquide.

[0041] Dans un autre mode de réalisation, l’au moins un conjugué peptidique est présent sous forme de nanoparticules et est présent à une teneur comprise entre 1 .10 ⁹ % et 10% en poids relatif à la quantité totale de ladite composition. Préférentiellement, la composition selon la présente invention contient le conjugué peptidique à une teneur comprise entre 1.10 ^_7 % et 1 % en poids, plus avantageusement à une teneur comprise entre 1.10 ^_6 % et 0.1 % en poids, voire à une teneur comprise entre 2.10 ^_6 % et 0.01 % en poids. De manière toute préférée, la teneur en conjugué peptidique selon la présente invention est d’environ 5.10 ^_6 % en poids.

[0042] Vecteur

[0043] Au sens de la présente invention, la composition comprend au moins un vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement. [0044] Les solutions aqueuses selon la présentation comprennent de l’eau, de préférence de l’eau présentant une pression osmotique acceptable pour injection de type sérum physiologique ou de l’eau pour préparation injectable (EPPI), ou de l’eau tamponnée, de préférence de l’eau tamponnée phosphate à un pH physiologiquement acceptable.

[0045] L’au moins un biomatériau biocompatible de comblement selon la présente invention permet, par exemple, de combler les rides, ridules, citatrices ou dépressions cutanées par au moins un biomatériau biocompatible de comblement, simple et efficace, à biorésorbabilité pratiquement totale, et ce sans libération de produits secondaires toxiques. En effet, les produits de dégradation d’un tel biomatériau biocompatible de comblement in vivo doivent êtres biocompatibles et atoxiques. En conséquence, un biomatériau biocompatible de comblement non résorbable n’est pas souhaitable.

[0046] Ainsi, avantageusement selon l’invention, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement conforme à l’invention se dégrade ou se solubilise pratiquement totalement après administration, puis est pratiquement totalement éliminé de l’organisme par les processus naturels tels que l’hydrolyse enzymatique.

[0047] L’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est un polymère naturel choisi dans la liste comprenant les polysaccharides et les polymères d’origine protéique. Les polysaccharides comprennent les glycosaminoglycannes tels qu’un acide hyaluronique ou un de ses sels ou un dérivé d’un de ses sels ; les dérivés cellulosiques tels que la Carboxy Méthyl Cellulose, l’HPMC (Hydroxy Propyl Méthyl Cellulose) et l’HPC (Hydroxy Propyl Cellulose) ; et le chitosan. Les polymères d’origine protéique comprennent notamment le collagène. De préférence l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est l’acide hyaluronique plus ou moins visqueux, réticulé ou non et plus particulièrement l’acide hyaluronique réticulé.

[0048] Le chitosan est un polysaccharide composé de la distribution aléatoire de D-glucosamine liée en b-(1 -4) (unité désacétylée) et de N-acétyl-D-glucosamine (unité acétylée). Il est produit par désacétylation chimique (en milieu alcalin) ou enzymatique de la chitine, le composant de l'exosquelette des arthropodes (crustacés) ou de l'endosquelette des céphalopodes (calmars...) ou encore de la paroi des champignons. Il a été montré que le chitosane est biologiquement renouvelable, biodégradable, biocompatible, non-antigénique, non-toxique et biofonctionnel. Le chitosane peut être formulé sous forme d’hydrogels.

[0049] L’acide hyaluronique est un glycosaminoglycane (GAG) non-sulfaté et l’un des composants majeurs de la matrice extracellulaire de la plupart des tissus conjonctifs tels que le cartilage, l’humeur vitrée de l’œil, le liquide synovial ou le cordon ombilical. C’est un polysaccharide qui présente l’avantage de se trouver sous la même forme chimique quelle que soit sa source. Il est constitué d’une alternance d’unités de monosaccharides d'acide D-glucuronique et de D-N- acétylglucosamine reliées par des liaisons glycosidiques b 1 -3. L’acide hyaluronique se rencontre habituellement sous la forme d’un gel de hyaluronate de sodium. De plus, il peut être modifié chimiquement de façon covalente sur ses fonctions hydroxyle ou carboxylate afin notamment d’améliorer ses propriétés mécaniques par réticulation et de diminuer sa vitesse de dégradation, celui-ci étant dégradable de façon enzymatique par la hyaluronidase et résorbable à travers de multiples voies métaboliques. L’acide hyaluronique a été utilisé dans diverses applications médicales et cosmétiques parce qu’il s’agit d’un composant majeur de la matrice extracellulaire. En effet, sa facilité d’injection et sa sécurité d’emploi, mais surtout sa biocompatibilité et son absence de toxicité, ainsi que ses propriétés physico-chimiques, en font un composé de choix dans diverses applications biomédicales. Ces mêmes gels sont utilisés en dermatologie et chirurgie plastique dans le traitement du vieillissement cutané comme produit de comblement, mais présentent l’inconvénient de se dégrader rapidement, d’où la nécessité de remédier à des injections répétées.

[0050] La carboxy méthyl cellulose (CMC), l’hydroxy propyl méthyl cellulose (HPMC) et l’hydroxy propyl cellulose (HPC) sont des dérivés de la cellulose. La cellulose est le principal constituant des parois cellulaires des plantes, la cellulose est la principale composante du bois et des végétaux en général. Ainsi, la cellulose représente 50% de la biomasse, ce qui en fait la matière organique la plus abondante sur la Terre. Il s’agit d’un homopolymère linéaire de formule brute (C6Hio05)n constitué d’unités D-anhydroglucopyranose (forme cyclique du glucose) liées entre elles par des liaisons glycosidiques b1 -4. Le motif répétitif est la cellobiose, constituée de deux unités anhydroglucopyranoses. Les groupements hydroxyles de la cellulose peuvent réagir partiellement ou totalement avec différents réactifs pour donner divers dérivés cellulosiques, et notamment des éthers de cellulose tels que décrits ci-dessus. Les dérivés cellulosiques sont notamment connus pour leurs utilisations sous forme d’hydrogels comme gel de remplissage non toxique, visco-élastique, biodégradable et stable à long terme des implants mammaires.

[0051] Le collagène est la protéine majeure composant la matrice extracellulaire de l’os. Dans son milieu d'origine, le collagène interagit avec les cellules dans les tissus conjonctifs et permet la transduction de signaux essentiels pour la régulation de l'ancrage des cellules, leur migration, prolifération, différenciation et survie. Il en existe 27 sortes mais le collagène de type 1 étant le plus abondant, il est aussi le plus étudié. Sa structure est composée de trois chaînes polypeptidiques agencées en triple hélice. Il confère aux tissus leur résistance mécanique à l’étirement. Il peut être dégradé par l’action d’enzymes spécifiques telles que les collagénases ou métalloprotéinases. Grâce à ses propriétés physico-chimiques, mécaniques et biologiques, il a été utilisé dans de nombreuses applications biomédicales.

[0052] L’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est présent dans la composition sous forme de fluide. Le terme fluide comprend ici un gel par exemple viscoélastique. Lorsque l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement n’est pas présent naturellement sous forme de fluide, mais sous forme sèche par exemple, ce dernier peut être ajouté à un fluide dit vecteur tel que l’eau, de préférence de l’eau pour préparation injectable (EPPI), ou de l’eau tamponnée, de préférence de l’eau tamponnée phosphate à un pH et une pression osmotique physiologiquement acceptable, afin de le réhydrater. Après réhydratation, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement se présentera sous forme de gel, par exemple viscoélastique. De préférence, un biomatériau biocompatible de comblement est présent sous une forme compatible avec une administration par injection. Plus particulièrement, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement présente une viscosité intrinsèque suffisante pour être de préférence injecté à travers une aiguille de gauge de 7G à 34G, de préférence de 18G à 32G, plus préférentiellement de 25G à 30G.

[0053] L’au moins un biomatériau biocompatible de comblement selon l’invention est de façon particulièrement préférée un hydrogel biocompatible, soluble dans de l’eau pour préparation injectable additionnée d’un chlorure de sodium ou directement une solution de chlorure de sodium isotonique ou dans une solution tampon de qualité injectable tel que le tampon phosphate. Plus particulièrement, un biomatériau biocompatible de comblement tel que l’hydrogel d’acide hyaluronique réticulé est préféré.

[0054] En outre, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement selon l’invention, lorsqu’il est injectable, allie avantageusement la commodité d’emploi, éventuellement la seringabilité du produit, la résorbabilité en un temps contrôlé.

[0055] Dans un mode de réalisation, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est présent dans la composition à une teneur de 0,2% à 5% en poids relatif à la quantité totale de ladite composition.

[0056] Composition selon la présente invention

[0057] Selon un mode de réalisation particulier, la composition selon l’invention peut comprendre en outre un actif. Les actifs peuvent comprendre notamment tous les actifs connus pour leur activité sur le vieillissement cutané, tels que les agents kératolytiques ou prodesquamants, par exemple les [alpha] -hydroxyacides, tels que les acides glycolique, lactique, malique, citrique, tartrique, mandélique et les leurs dérivés; les [bêta] -hydroxyacides tels que l'acide salicylique et ses dérivés; les [alpha] -acétoacides tels que l'acide ascorbique ou la vitamine C et leurs dérivés; [bêta]-cétoacides; les rétinoïdes tels que le rétinol (vitamine A) et ses esters (palmitate), le rétinien, l'acide rétinoïque et leurs mélanges. Les actifs peuvent aussi comprendre des molécules couramment utilisées en esthétique telles que des anesthésiques locaux par exemple la lidocaïne, des vitamines par exemples A, C, E, des acides aminés, du zinc, des polyols, des antiseptiques par exemple la chlorhexidine, du glycérol et leurs mélanges. [0058] La présence et la quantité de l’actif dépend de l'utilisation finale souhaitée. Lorsque qu’un actif est utilisé, la quantité peut aller par exemple d'environ 0,001 à environ 30% en poids, de préférence d'environ 0,05 à environ 15% en poids et plus préférablement d'environ 0,5 à environ 5% en poids sur la base du poids total de la composition.

[0059] La composition selon la présente invention est particulièrement destinée à une administration par injection. La composition est administrée par voie parentérale. L'administration parentale peut être une administration sous-cutanée, une administration intra-dermique, une administration intra-épidermique, mais n'y est pas limitée. Préférentiellement, la composition est administrée par voir sous- cutanée ou intra-dermique. Lorsque l’administration est intradermique, elle est préférentiellement effectuée dans le tissu fibreux.

[0060] Dans un mode de réalisation l’administration de la composition selon l’invention est effectuée via une seringue adaptée en fonction du type d’administration ou via tout dispositif ou technique capable de faire franchir la barrière épidermique tel que la barophorèse aussi appelée « injection sans aiguille ». L’utilisateur saura adapter le type de seringue conformément à sa pratique professionnelle.

[0061] Dans un mode de réalisation lorsque l’administration est intraépidermique ou intradermique, elle peut être réalisée par mésothérapie consistant en des micro injections intra-épidermiques ou intra-dermiques à l'aide d'une ou d'une multitude d'aiguilles ou d'un pistolet de mésothérapie, par exemple le TechDent Meso Tech Classic. L’utilisateur saura adapter la taille d’aiguille conformément à sa pratique professionnelle.

[0062] L’au moins un conjugué peptidique de formule (I) et le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement peuvent être administrés séparément, simultanément ou séquentiellement.

[0063] Dans un mode de réalisation, lorsque le vecteur est une solution aqueuse, l’actif est présent dans cette dernière. [0064] Au sens de la présente invention « séparément » signifie une application de l’au moins un conjugué peptidique de formule (I) et le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement à des endroits et/ou à des moments séparés.

[0065] Au sens de la présente invention « simultanément » signifie que l’au moins un conjugué peptidique de formule (I) et le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement sont au préalable mélangés avant d’être administrés à un endroit donné, de préférence de manière extemporanée, comme par exemple en prélevant chaque composant dans une et même seringue qui est ensuite agitée ou un prélevant l’un des composant que l’on ajoute dans le contenant de l’autre composant et que l’on mélange par aspiration et refoulement. L’ordre de prélèvement peut se faire dans un premier sens, en prélevant d’abord l’au moins un conjugué peptidique de formule (I) pour l’ajouter dans le contenant du vecteur et ensuite en effectuant le mélange par aspiration et refoulement, ou dans le sens inverse.

[0066] Au sens de la présente invention « séquentiellement » signifie que l’un des composants est administré en premier à un endroit donné et que l’autre composant est administré au même endroit que le premier composant. Selon cet aspect, l’administration du deuxième composant est soit faite directement après le premier, c’est-à-dire sans temps de latence, ou l’administration du deuxième composant peut être faite à distance, c’est-à-dire avec un temps de latence qui peut être de 1 min à 30J, préférentiellement de 5 min à 15J.

[0067] L’au moins un conjugué peptidique de formule (I) et le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement tout deux composants de la composition selon la présente invention, peuvent être conditionnés séparément dans tout moyen apte à son application, tel qu’une seringue, un pot, une fiole, un tube, un flacon, un flacon doseur à pression, un flacon avec pipette intégrée, ou une boite. Par « séparée », il est désigné selon la présente invention, selon des contenants distincts. Dans ce cas, la composition selon la présente invention sera préparée juste avant administration de manière extemporanée. [0068] L’au moins un conjugué peptidique de formule (I) et le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement peuvent aussi être conditionnés sous forme unitaire. Par « unitaire », il est désigné selon la présente invention, sous un même contenant. Dans ce cas, la composition selon la présente invention sera préparée à l’avance avant l’administration et conditionnée dans tout moyen apte à son application, tel qu’une seringue, un pot, une fiole, un tube, un flacon, un flacon doseur à pression, un flacon avec pipette intégrée, ou une boite.

[0069] De préférence les composants de la composition selon la présente invention sont conditionnés sous forme unitaire, de préférence dans une seringue.

[0070] Selon un autre aspect, la présente invention concerne un kit comprenant la composition telle que décrite précédemment. Le kit peut comporter la composition selon la présente invention sous forme unitaire ou séparée, et un dispositif d’administration de ladite composition, par exemple, une seringue adaptée au type d’administration comme une seringue comprenant une aiguille de gauge de 7G à 34G, de préférence de 18G à 32G, plus préférentiellement de 25G à 30G.

[0071] Utilisation de la composition selon la présente invention

[0072] La présente invention concerne également l’utilisation non thérapeutique, par exemple, à visée cosmétique ou esthétique, de la composition selon la présente invention pour restructurer ou préserver l’aspect de la peau. Plus particulièrement, la composition selon la présente invention peut être utilisée pour améliorer l'élasticité et/ou la tonicité de la peau, et/ou pour prévenir, diminuer et/ou supprimer l'apparition des rides et ridules sur la peau. Dans un mode de réalisation, l’utilisation non thérapeutique de la composition est une utilisation antivieillissement et restructurante de la peau.

[0073] Les présents inventeurs ont trouvé que l’utilisation par injection de la composition selon l’invention permet l’obtention de résultats améliorés par rapport à une application topique et que la combinaison de l’au moins un composé de formule (I) et du vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou du biomatériau biocompatible de comblement agit de façon synergique de telle sorte que l’effet des deux composants séparément est moindre que lorsqu’ils sont combinés. [0074] La composition selon l’invention est utilisée en tant que matériau de comblement pour supplémenter une cavité, restructurer un volume non harmonieux. Un tel comblement comprend le comblement des rides, ridules, dépressions cutanées et cicatrices du corps humain, y compris le comblement des défects cutanés secondaires à la prise d’un traitement pouvant entraîner une lipodystrophie se caractérisant le plus souvent par une lipoatrophie faciale.

[0075] Avantageusement, la composition selon l’invention pallie les inconvénients de l’art antérieur puisqu’elle permet d’obtenir une préservation de l’aspect de la peau plus notable et immédiat qu’avec une composition topique. Elle permet également une restructuration et une préservation de l’aspect de la peau qui dure dans le temps au-delà des produits de comblement utilisés seuls. En effet l’association entre le peptide conjugué selon la présente invention et le biomatériau biocompatible de comblement, permet d’avoir un effet quasi instantané par l’injection du biomatériau biocompatible de comblement, cet effet perdurant grâce à l’action du peptide conjugué qui apporte un effet lissant, anti-rides, restructurant, redensifiant, hydratant et tonifiant.

[0076] Les demandeurs ont découvert que l’association des deux composants permet d’obtenir un résultat qui perdure, réduisant la fréquence des injections. En effet, les biomatériaux biocompatibles de comblement se résorbent après un temps donné, allant de 3 à 9 mois selon les sujets. Le sujet doit donc revenir pour au bout de ce temps pour avoir une injection supplémentaire et donc entretenir l’effet esthétique qui reste éphémère.

[0077] Lorsque le conjugué peptidique est utilisé en association avec le biomatériau biocompatible de comblement se présentant sous forme de gel, ce dernier est piégé dans la structure physique tridimensionnelle du gel. Le biomatériau biocompatible de comblement étant résorbable, au fur et à mesure de sa cette résorption, le conjugué peptidique sera relargué provoquant alors une libération prolongée dans le temps de ce dernier. Ce relargage selon une cinétique lente, dite prolongée, permet d’augmenter la T1/2 vie du conjugué peptidique et de maintenir les effets esthétiques du biomatériau biocompatible de comblement tout en l’intensifiant. De par la présence du peptide conjugué dans la structure physique tridimensionnelle du gel, la dégradation biomatériau biocompatible de comblement par les enzymes se trouvera ralenti car moins immédiatement disponible aux enzymes. Ainsi la composition selon l’invention agit tant d’un point de vue mécanique en comblant, mais aussi d’un point de vue biologique en préservant l’aspect de la peau du sujet.

[0078] De préférence, la composition selon la présente invention permet d’obtenir les effets précités pendant au moins 6 mois, de préférence pendant au moins 9 mois, plus préférentiellement pendant au moins 12 mois et encore plus préférentiellement pendant au moins 18 mois. Tout particulièrement, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement ne se dégradera avant 3 mois, de préférence 6 mois, mais sera dégradée au bout de 18 mois. Même si le biomatériau biocompatible de comblement est résorbé au bout de 18 mois, l’effet du conjugué peptidique continuera de perdurer dans le temps en agissant directement sur les tissus.

[0079] Dans un mode de réalisation particulier, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est l’acide hyaluronique réticulé et l’au moins un conjugué peptidique est l’acétyle-SDKP. Dans ce cas particulier, les enzymes hyaluronidases vont dégrader l’acide hyaluronique réticulé injecté, les produits de dégradation in vivo étant les monomères d’acide hyaluronique biocompatibles et atoxiques. A côté des produits de dégradation de l’acide hyaluronique, l’acétyle- SDKP sera aussi relargué car il sera de moins en moins piégé dans la structure physique tridimensionnelle de l’hydrogel. Ceci lui permet de jouer son action lissante, anti-rides, restructurante, redensifiante, hydratante et tonifiante à l’endroit où la composition est administrée. Dans ce mode particulier, de par la forme réticulée de l’acide hyaluronique, cet hydrogel ne se dégradera pas pendant au moins 6 mois mais sera dégradé au bout de 18 mois.

[0080] Dans un autre mode de réalisation particulier, l’au moins un biomatériau biocompatible de comblement est l’acide hyaluronique réticulé sous forme d’hydrogel et l’au moins un conjugué peptidique est le lauroyle SDKP sous forme de nanoparticule. Dans ce mode particulier, de par la forme du conjugué peptidique sous forme de nanoparticule tel que décrit dans EP3416730 le SDKP aura un effet d’autant plus prolongé dans le temps. Dans ce mode particulier, la forme du conjugué peptidique et la forme réticulée de l’acide hyaluronique, la composition permet d’obtenir les effets précités pendant au moins 6 mois, de préférence pendant au moins 9 mois, plus préférentiellement pendant au moins 12 mois et encore plus préférentiellement pendant au moins 18 mois.

[0081] Procédé de traitement non thérapeutique

[0082] Au sens de la présente invention, le procédé de traitement non thérapeutique de restructuration ou de préservation de l’aspect de la peau, comprend :

- la fourniture de la composition ou du kit selon la présente invention,

- éventuellement, le prélèvement de la quantité de la composition selon l’invention, et

- l’administration par injection de manière séparée, séquentielle ou simultanée, de préférence simultanée, de ladite composition.

[0083] Dans un mode de réalisation, lorsque la composition ou le kit se trouve dans une seringue, de préférence prête à l’emploi, il ne sera pas nécessaire de prélever la quantité de la composition selon l’invention.

[0084] La composition selon la présente invention est administrée en une quantité allant de 0,2mL à 10mL, de préférence de 0,5mL et 3mL, plus préférentiellement 1 mL. L’utilisateur saura adapter cette quantité en fonction de la zone d’administration.

[0085] Dans un mode de réalisation le prélèvement s’effectue à l’aide de tout matériel apte au prélèvement tels qu’une seringue.

[0086] Dans un mode de réalisation lorsque la composition se présente sous un contenant unitaire autre qu’une seringue, la quantité de la composition est directement prélevée dans ce contenant.

[0087] Dans un autre mode de réalisation, lorsque chaque composant de la composition se présente dans des contenants séparés, la composition doit au préalable être préparée de manière extemporanée. Dans ce cas, le premier composant, par exemple le vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement est prélevé de son contenant à l’aide d’un dispositif de prélèvement adapté, par exemple une seringue, puis avec ce même dispositif, le deuxième composant, par exemple le conjugué peptidique est prélevé. Le tout est mélangé par agitation du dispositif de prélèvement ou par aspiration et refoulement. La quantité du vecteur choisi parmi les solutions aqueuses ou les biomatériaux biocompatibles de comblement prélevée est comprise entre 0,1 à 5 mL, de préférence de 0,2 à 3 mL, plus préférentiellement d’environ 0,5mL et la quantité de l’au moins un conjugué peptidique est comprise entre 0,1 à 5 mL, de préférence de 0,2 à 3 mL, plus préférentiellement d’environ 0,5mL. [0088] La description relative au mode d’administration de la composition telle de décrite précédemment est aussi applicable pour le procédé de traitement non thérapeutique.

[0089] Le procédé selon l’invention permet d’améliorer l'élasticité et/ou la tonicité de la peau, et/ou pour prévenir, diminuer et/ou supprimer l'apparition des rides et ridules sur la peau. Dans un mode de réalisation, le procédé de traitement non thérapeutique est un procédé antivieillissement et restructurant de la peau.

[0090] L'invention propose donc également un procédé de traitement non thérapeutique pour tendre et lisser la peau pour atténuer immédiatement les rides et/ou les ridules. [0091] D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront mieux des exemples qui suivent, donnés à titre illustratif et non limitatif.

Exemples

[0092] Exemple 1 : Composition stérile conforme à l’invention pour injection par mésothérapie [0093] [Tableau 1]

Ό094] Préparation de la composition [0095] L’acide hyaluronique est utilisé sous forme de hyaluronate de sodium de grade injectable et de poids moléculaire (Mw) de 1 ,5 MDa.

[0096] Le hyaluronate de sodium de sodium est mis à dissoudre dans la solution d’EPPI, NaCI et AcSDKP si dessus, sous agitation douce, pendant 24 heures. Après agitation, le pH est contrôlé et ajusté si nécessaire à pH 7 par addition de NaOH 0,25N. Le mélange est ensuite stérilisé en autoclave à 121 °C de manière à obtenir une valeur stérilisatrice FO supérieure à 15 et rempli dans une seringue préremplie de 1 ml.

[0097] Utilisation de la composition en mésothérapie

[0098] Cette composition est très intéressante pour les traitements de mésothérapie et permet la redensification du derme, l’amélioration de l’éclat de la peau, la diminution de la profondeur des rides et ridules et l’hydratation de la peau.

[0099] La composition est utilisée pour le traitement de l’épiderme par la technique d’injection multi points avec une seringue munie d’une aiguille de gauge 30G et à une profondeur d’environ 0,5 mm sous la zone de surface. L’excédent de composition restant à la surface de la peau est éliminé par tamponnage.

[0100] Les volontaires ayant reçu le traitement font tous état d’un très bon effet esthétique par notamment une amélioration significative de l’éclat de la peau et une réduction significative des irrégularités cutanés.

[0101] Les propriétés de la composition ont fait l’objet d’un test versus la même composition mais ne comprenant pas d’Ac-SDKP ( « Composition témoin »).

[0102] L’étude s’est déroulée selon un protocole prévoyant 3 séances d’injection et de contrôle à 3 semaines d’intervalle puis d’une dernière visite 3 semaines après la dernière injection.

[0103] Le nombre de patients inclus a été calculé afin d’obtenir au moins 5 patients traités par zone d’injection et par produit.

[0104] Les objectifs de l’étude sont d’évaluer :

-l’acceptabilité et la sécurité du traitement. Vérification de l’absence d’effets secondaires ; - l’efficacité des compositions au regard de l’indication considérée ; et -la durabilité des effets aux différentes visites.

[0105] Résultats

[0106] La comparaison des deux compositions ci-dessus a permis de démontrer un taux d’amélioration des différents paramètres testés systématiquement en faveur de la composition contenant Ac SDKP.

[0107] Exemple 2 : Composition stérile conforme à l’invention pour injection par mésothérapie

[0108] Dans cet exemple on prépare un flacon de 5ml d’une solution d’Ac-SDKP dé composition :

[0109] [Tableau 2] physiologique par agitation douce durant au moins 30 minutes. Le mélange est ensuite stérilisé par filtration et rempli dans un flacon de 5ml stérile. [0111] D’autre part on prépare une solution d’acide Hyaluronique de composition :

[0112] [Tableau 3]

Ό113] Les fibres d’acide hyaluronique sont dissoutes dans IΈRRI et les autres composants ci-dessus sous agitation douce durant 10 heures puis laissées au repos au réfrigérateur 12 heures. La solution visqueuse ainsi obtenue est ensuite stérilisée par filtration et rempli dans un flacon de 5ml stérile. [0114] Cette composition est très intéressante pour les traitements de mésothérapie et permet la redensification du derme, l’amélioration de l’éclat de la peau, la diminution de la profondeur des rides et ridules et l’hydratation de la peau.

[0115] Mélange extemporané et administration [0116] Le praticien prélève à part égale, à l’aide d’une seringue stérile, 0.5 ml de la solution d’acide hyaluronique et 0.5 ml de la solution d’Ac-SDKP. La seringue de prélèvement est ensuite agitée par retournement puis équipée d’une aiguille 30G / longueur d’environ 0,5 mm pour injection intra-épidermique chez le sujet.

[0117] La composition est utilisée pour le traitement de l’épiderme par la technique d’injection multi points aussi appelée mésothérapie.

[0118] Les volontaires ayant reçu le traitement font tous état d’un très bon effet esthétique par une amélioration significative de la redensification du derme, l’amélioration de l’éclat de la peau, la diminution de la profondeur des rides et ridules et l’hydratation de la peau. [0119] Exemple 3 : Composition stérile conforme à l’invention à base d’acide hyaluronique réticulé

[0120] L’une des compositions des exemples 1 et 2 peut être formée à base d’acide hyaluronique (HA) réticulé.

[0121] L’HA réticulé s’obtient par la mise en présence d’HA et d’un agent réticulant. Cet agent réticulant peut-être choisi parmi l’époxyde, l’aldéhyde, les polyamines, les polyphosphates, le divinyl sulfone, et leurs mélanges. De préférence, l’agent réticulant peut-être choisi parmi l’époxyde et préférentiellement le 1 ,4-butanediol diglycidyl éther (BDDE).

[0122] L’obtention d’un HA réticulé par mise en présence d’HA et de BDDE en milieu basique puis suivi d’une phase de chauffage puis de dialyse est connu de l’homme de l’art.

[0123] [Tableau 4]

Ό124] Après fabrication et avant stérilisation de la composition, le pH est contrôlé et ajusté à 7,2 si nécessaire. La composition est ensuite répartie dans des seringues de 1 ml puis stérilisée à la chaleur humide par autoclavage de manière à obtenir une valeur stérilisatrice FO supérieure à 15. [0125] La composition est notamment indiquée dans le traitement des rides par comblement ainsi que pour la revitalisation du derme et la prévention des processus de vieillissement cutané.

[0126] La composition obtenue est injectable au travers d’aiguilles hypodermique de 27G à 30G. Elle est indiquée pour le comblement, au niveau du derme moyen, des rides et cassures cutanées ainsi que pour la revitalisation à long terme.

[0127] Exemple 4 : Composition stérile conforme à l’invention à base d’acide hyaluronique et de carboxyméthylcelullose

[0128] L’une des compositions des exemples 1 et 2 peut être formée à base d’acide hyaluronique (FIA) et de carboxyméthylcelullose (CMC) selon le tableau suivant :

[0129] [Tableau 5]

Ό130] Après fabrication et avant stérilisation de la composition, le pH est contrôlé et ajusté à 7,2 si nécessaire. La composition est ensuite répartie dans des seringues de 1 ml puis stérilisée à la chaleur humide par autoclavage de manière à obtenir une valeur stérilisatrice FO supérieure à 15. [0131] La composition est notamment indiquée dans le traitement des rides par comblement ainsi que pour la revitalisation du derme et la prévention des processus de vieillissement cutané.

[0132] La composition obtenue est injectable au travers d’aiguilles hypodermique de 27G à 30G. Elle est indiquée pour le comblement, au niveau du derme moyen, des rides et cassures cutanées ainsi que pour la revitalisation à long terme.