SOLUTION INJECTABLE A PH 7 COMPRENANT AU MOINS UNE INSULINE BASALE DONT LE PI EST COM PRIS DE 5,8 A 8,5 ET UN CO-POLYAMINOACIDE PORTEUR DE CHARGES

CARBOXYLATES ET DE RADICAUX HYDROPHOBES

[0001 ] L'invention concerne les thérapies par injection d'insuline(s) pour traiter le diabète.

[0002] L'invention concerne des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris de 6,0 à 8,0, comprenant au moins une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris de 5,8 à 8,5 et un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes.

[0003] L'insulinothérapie, ou thérapie du diabète par injection d'insuline, a connu ces dernières années des progrès remarquables grâce notamment à la mise au point de nouvelles insulines offrant une meilleure correction de la glycémie des patients en comparaison de l'insuline humaine et qui permettent de mieux simuler l'activité physiologique du pancréas.

[0004] Lorsqu'un diabète de type II est diagnostiqué chez un patient, un traitement graduel est mis en place. Le patient prend en premier lieu des antidiabétiques oraux (OAD) comme la Metformine. Lorsque les OAD seuls ne suffisent plus à réguler le niveau de glucose dans le sang, un changement dans le traitement doit être fait et, en fonction des spécificités des patients, différentes associations de traitements peuvent être mises en place. Le patient peut par exemple avoir un traitement à base d'une insuline basale de type insuline glargine ou insuline detemir en complément des OAD, puis ensuite en fonction de l'évolution de la pathologie un traitement à base d'insuline basale et d'insuline prandiale.

[0005] Par ailleurs, aujourd'hui, pour assurer la transition des traitements par les OAD, lorsque ceux-ci ne sont plus en mesure de contrôler le niveau de glucose dans le sang, vers un traitement insuline basale/insuline prandiale, l'injection d'analogues de GLP- 1 RA est préconisée.

[0006] Les GLP- 1 RA, pour agonistes du récepteur Glucagon-Like Peptide- 1, sont des peptides i nsulinotropiques ou incrétines, et appartiennent à la famille des hormones gastro-intestinales (ou Gut Hormones) qui stimulent la sécrétion d'insuline lorsque la glycémie est trop élevée, par exemple après un repas.

[0007] Les hormones gastro-intestinales (Gut hormones) sont aussi appelées hormones de satiété. Elles comprennent notamment le GLP- 1 RA (Glucagon like peptide- 1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), l'oxyntomoduline (un dérivé du proglucagon), le peptide YY, l 'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et l'entérostatine, qui ont des structures peptidiques ou protéiques. Elles stimulent également la sécrétion d'insuline, en réponse au glucose et aux acides gras et sont donc à ce titre des candidats potentiels pour le traitement du diabète.

[0008] Parmi celles-ci, les GLP- 1 RA sont celles qui ont apporté à ce jour les meilleurs résultats dans le développement de médicaments. Elles ont permis à des patients atteints de diabète de type II de perdre du poids tout en ayant un meilleur contrôle de leur glycémie.

[0009] Des analogues ou des dérivés de GLP-1 RA ont ainsi été développés notamment pour améliorer leur stabilité.

[00010] D'autre part, pour couvrir ses besoins journaliers en insuline, un patient diabétique dispose, actuellement, de façon schématisée, de deux types d'insulines ayant des actions complémentaires : les insulines prandiales (ou insulines dites à action rapide) et les insulines basales (ou insulines dites à action lente).

[00011] Les insulines prandiales permettent une prise en cha rge rapide (métabolisation et/ou stockage) du glucose apporté lors des repas et collations. Le patient doit s'injecter une insuline prandiale avant chaque prise alimentaire, soit environ 2 à 3 injections par jour. Les insulines prandiales les plus uti lisées sont : l'insuline humaine recombinante, NovoLog® (insuline aspart de NOVO NORDISK), Humalog® (insuline lispro de ELI LILLY) et Apidra® (insuline glulisine de SAIMOFI) .

[00012] Les insulines basales assurent le maintien de l'homéostasie glycémique du patient, en dehors des périodes de prise alimentaire. Elles agissent essentiellement pour bloquer la production endogène de glucose (glucose hépatique). La dose journalière d'insuline basale correspond généralement à 40-50 % des besoins totaux journaliers en insuline. Selon l'insuline basale utilisée, cette dose est dispensée en 1 ou 2 injections, régulièrement réparties au cours de la journée. Les insulines basales les plus utilisées sont Levemir® (insuline detemir de NOVO NORDISK) et Lan tu s*' (insuline glargine de SANOFI).

[00013] On notera pour être exhaustif que la NPH (insuline NPH pour Neutral Protamine Hagedorn ; Humuline NPH®, Insulatard®) est la plus ancienne insuline basale. Cette formulation est le résultat d'une précipitation de l'insuline humaine (anionique à pH neutre) par une protéine cationique, la protamine. Les microcristaux ainsi formés sont dispersés dans une suspension aqueuse et se dissolvent lentement après injection sous-cutanée. Cette dissolution lente assure une libération prolongée de l'insuline. Cependant cette libération n'assure pas une concentration constante d'insuline au cours du temps. Le profil de libération est en forme de cloche et dure seulement entre 12 et 16 heures. Elle est donc injectée deux fois par jour. Cette insuline basale NPH est bien moins performante que les insulines basales modernes, Levemir® et Lantus®. La NPH est une insuline basale à action intermédiaire.

[00014] Le principe de la NPH a évolué avec l'apparition des insulines analogues rapides pour donner des produits appelés « Premix » offrant à la fois une action rapide et une action intermédiaire. NovoLog Mix® (NOVO NO DISK) et Humalog Mix® (ELI LILLY) sont des formulations comprenant une insuline analogue rapide, Novolog* et Humalog®, complexée partiellement par la protamine. Ces formulations contiennent ainsi des microcristaux d'insuline analogue dont l'action est dite intermédiaire et une partie d'insuline restée soluble dont l'action est rapide. Ces formulations offrent bien l'avantage d'une insuline rapide mais elles ont aussi le défaut de la NPH, c'est à dire une durée d'action limitée entre 12 et 16 heures et une insuline libérée en « cloche ». Cependant, ces produits permettent au patient de s'injecter en une seule fois une insuline basale à action intermédiaire avec une insuline prandiale à action rapide. Or nombreux sont les patients soucieux de réduire leur nombre d'injections.

[00015] Les insulines basales actuellement commercialisées peuvent être classées en fonction de la solution technique qui permet d'obtenir l'action prolongée et à ce jour deux approches sont utilisées.

[00016] La première, celle de l'insuline detemir est la liaison à l'al bumine in vivo. Il s'agit d'un analogue, soluble à pH 7, qui comprend une chaîne latérale d'acide gras (tetradecanoyl) fixée à la position B29 qui , in vivo, permet à cette insuline de s'associer à l'albumine. Son action prolongée est principalement due à cette affinité pour l'albumine après injection sous-cutanée.

[00017] Cependant son profil pharmacocinétique ne permet pas de couvrir une journée, ce qui fait qu'elle est le plus souvent utilisée en deux injections par jour.

[00018] Une autre insuline soluble à pH 7, est l'insuline degludec commercialisée sous le nom de Tresiba®. Elle comprend également une chaîne latérale d'acide gras fixée sur l'insuline (hexadecand ioyl -y-L-Glu).

[00019] La seconde, celle de l'insuline glargine, est la précipitation à pH physiologique. L'insuline glargine est un analogue de l 'insuline humaine obtenu par élongation de la partie C-terminale de la chaîne B de l'insuline humaine par deux résidus arginine, et par substitution du résidu d'asparagine A21, par un résidu de glycine (US 5,656,722). L'addition de deux résidus d'arginine a été pensée pour ajuster le pl (point isoélectrique) d'insuline glargine au pH physiologique, et ainsi rendre cet analogue de l'insuline humaine insoluble en milieu physiologique.

[00020] Aussi, la substitution de ΓΑ21 a été pensée afin de rendre l'insuline glargine stable à pH acide et pouvoir ainsi la formuler sous forme de solution injectable à pH acide. Lors de l'injection sous-cutanée, le passage de l'insuline glargine d'un pH acide (pH 4-4,5) à un pH physiologique (pH neutre) provoque sa précipitation sous la peau. La redissolution lente des micro-particules d'insuline glargine assure une action lente et prolongée.

[00021] L'effet hypoglycémiant de l'insuline glargine est quasi-constant sur une durée de 24 heures ce qui permet à la plupart des patients de se limiter à une seule injection par jour.

[00022] L'insuline glargine est considérée aujourd'hui comme l'insuline basale la plus utilisée.

[00023] Cependant le pH nécessairement acide des formulations d'insulines basales, dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, de type insuline glargine, peut être un réel inconvénient, car ce pH acide de la formulation d'insuline glargine entraîne parfois chez les patients des douleurs à l'injection et surtout empêche toute formulation avec d'autres protéines et en particulier avec les insulines prandiales car ces dern ières ne sont pas stables à pH acide. L'impossibilité de formuler une insuline prandiale, à pH acide, tient notamment au fait qu'une insuline prandiale subit, dans ces conditions, une réaction secondaire de déamidation en position A21 , ce qui ne permet pas de répondre aux exigences de stabilité applicables aux médicaments injectables.

[00024] A ce jour, dans les demandes WO 2013/021143 Al, WO 2013/104861 Al, WO 2014/124994 Al et WO 2014/124993 Al il a été démontré qu'il était possible de solubiliser ces insulines basales, de type insuline glargine dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, à pH neutre, tout en maintenant une différence de solubilité entre le milieu in -vitro (le contenant) et le milieu in -vivo (sous la peau), indépendamment du pH .

[00025] La demande WO 2013/104861 Al, en particulier, décrit des compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris de 6,0 à 8,0, comprenant au moins (a) une insuline basale dont le point isoélectrique pi est compris de 5,8 à 8,5 et (b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates substitué par des radicaux hydrophobes.

[00026] Ces compositions de l'art antérieur ont l'inconvénient majeur de ne pas être suffisamment stables pour répondre aux cahiers des charges applicables aux formulations pharmaceutiques.

[00027] Il existe donc un besoin de trouver une solution qui permet de solubiliser une insuline basale dont le point isoélectrique (pi) est compris de 5,8 à 8,5 tout en conservant son profil basai après injection mais qui permettent également de satisfaire à des conditions de stabilité physique standard pour les produits pharmaceutiques à base d'insuline.

[00028] De manière surprenante, la demanderesse a trouvé que les co- polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes selon l'invention permettent d'obtenir des compositions sous forme de solutions qui non seulement répondent aux exigences décrites dans WO 2013/104861 Al mais qui de plus sont en mesure de conférer une stabilité physique améliorée auxdites compositions sans avoir à augmenter la quantité d'excipients utilisée.

[00029] Ces performances a priori jamais atteintes sont de plus conservées lorsque l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 est associée dans la composition avec une insuline prandiale et/ou une hormone gastro-intestinale.

[00030] Ainsi, de façon su rprenante, les co-polyaminoacides selon l'invention permettent d'obten ir une solubilisation et une stabilisation des solutions d'insuline glargine à un ratio [Hy]/[insuline basale] inférieur à celui de l'art antérieur ; ces résultats sont de plus obtenus sans altérer, voi re en améliorant, la propension de l'insuline glargine à précipiter comme cela est démontré dans la partie expérimentale.

[00031] L'amélioration de ce ratio permet en outre dans le cadre de traitements chroniques de li miter le niveau d'exposition auxdits exci pients.

[00032] Les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy selon l'invention présentent u ne excellente résistance à l'hydrolyse. Ceci peut notamment être vérifié en conditions accélérées, par exemple par des tests d'hydrolyse à pH basique (pH 12) .

[00033] En outre des tests d'oxydation forcée, par exemple du type oxydation de Fenton, montrent que les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy présentent une bonne résistance à l'oxydation .

[00034] L'invention concerne ainsi des compositions stables physiquement sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris de 6,0 à 8,0, comprenant au moins :

a) une insuline basale dont le point isoélectrique ( pi) est compris de 5,8 à 8,5 et

b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe de formule I.

[00035] Dans un mode de réal isation, l'invention concerne une composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris de 6,0 à 8,0, comprenant au moins :

a) une insuline basale dont le point isoélectrique pi est compris de 5,8 à 8,5 ;

b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante :

^* - GpR ^-GpA— ( GpC)

Formule I

dans laquelle

GpR est un radical de formule II ou ΙΓ

*-CO-R-CO-*

ou

*-NH-R-CO-*

GpA est un radical de formule III ou ΙΙΓ

A-N _al

*— N

A'-N„ ₂ H

III ou

GpC est un radical de formule IV

les— * indiquent les sites de rattachement des différents groupes, c'est-à-dire co-polyaminoacide, GpR, GpA et GpC, liés par des fonctions amides ;

b est un entier égal à 0 ou à 1 ;

p est un entier égal à 2 ou à 3 et o si p est égal à 2 alors GpA est un radical de formule III et,

o si p est égal à 3 alors GpA est un radical de formule ΙΙ ;

- c est un entier égal à 0 ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2 ;

- d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2 ;

r est un entier égal à 0 ou à 1, et

o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du co- polyaminoacide et un des atomes d'azote du radical GpA, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une des fonctions aminés, soit aminé primaire, soit aminé secondaire du précurseur de GpA et une fonction acide portée par le précurseur du co-polyaminoacide , et

o si r est égal à 1 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- polyaminoacide :

■ via une liaison covalente entre l'atome d'azote du radical GpR et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction de la fonction aminé du précurseur de GpR et une fonction acide portée par le précurseur du co- polyaminoacide ou

^■ via une liaison covalente entre un carbonyl de GpR et un atome d'azote en position N-terminale du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur de GpR et une fonction aminé en position IM- terminale portée par le précurseur du co-polyaminoacide ;

- R est un radical choisi dans le groupe constitué par :

o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 11 atomes de carbone ;et

o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ;

- A, A' et A" sont identiques ou différents et sont des radicaux alkyles linéaires ou ramifiés comprenant de 2 à 6 atomes de carbone;

- B est un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone ;

- Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et :

o si p est égal à 2, x est compris de 9 à 15 (9≤ x < 15),

o si p est égal à 3, x est compris de 7 à 15 (7 < x < 15),

le ratio I entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris de 0 à 0,5 (0 < i < 0,5) ; lorsque plusieurs radicaux hydrophobes sont portés par un co-polyaminoacide alors ils sont identiques ou différents,

le degré de polymérisation DP en unités glutamiques ou aspartiques est compris de 5 à 250 ;

les fonctions acides libres étant sous forme de sel de cation alkalin choisi dans le groupe constitué par IMa ⁺ et K* .

[00036] Dans un mode de réalisation, si GpA est un radical de formule III et r= l, alors :

les GpC sont liés à IN" ¹ et N" ² et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N ^pl , ou

- les GpC sont liés à N ^al et N ^{1! i} , et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N" ² ; ou

- les GpC sont liés à N" ² et N ^pl , et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N" ¹ .

[00037] Dans un mode de réalisation, si GpA est un radical de formule III et r=0, alors :

les GpC sont liés à N" ¹ et N" ² et le co-polyaminoacide est lié à N ^pl ; ou les GpC sont liés à N ^rtl et N ^pl , et le co-polyaminoacide est lié à N" ² ; ou

- les GpC sont liés à N"' et N ^pl , et le co-polyaminoacide est lié à N ^al .

[00038] Dans un mode de réalisation, si GpA est un radical de formule ΙΙ et r= l, alors

- les GpC sont liés à N ^a \ N" ² et N ^pl et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N" ² ou

- les GpC sont liés à Ν ^α1 , N ^a2 et N ^p2 et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N ^pl ou

- les GpC sont liés à IM ^al , N ^pl et N ^p2 et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N ^! ' ² ou

- les GpC sont liés à N" ² , N ^{p i} et N ^p2 et le co-polyaminoacide est lié via GpR à N ^al . [00039] Dans un mode de réalisation, si GpA est un radical de formule ΙΙΓ et r=0, alors

- les GpC sont liés à N ^al , N" ² et N ^pi et le co-polyaminoacide est lié à IM ^p2 ; ou

- les GpC sont liés à IM ^al , N" ² et N ^p2 et le co-polyaminoacide est lié à N ^pl ; ou

- les GpC sont liés à N ^* ' ¹ , N ^pl et N ^p2 et le co-polyaminoacide est lié à N ' ² ; ou - les GpC sont liés à N" ² , IM ⁱ et l\ et le co-polyaminoacide est lié à ΙΜ ^α1

[00040] Le pH des compositions selon l'invention est compris de 6,0 à 8,0, de préférence compris de 6,6 à 7,8 ou encore plus préférentieilement de 6,8 à 7,6. [00041] Ledit co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes -Hy est solubie en solution aqueuse à pH compris de 6 à 8, à une température de 25°C et à une concentration inférieure à 60 mg/ml .

[00042] On entend par « composition stable physiquement » des compositions qui satisfont aux critères de l'inspection visuelle décrite dans la pharmacopée européenne, américaine et internationale, c'est-à-dire des compositions qui sont claires et qui ne contiennent pas de particules visibles, mais également incolores.

[00043] On entend par « solution aqueuse injectable » des solutions à base d'eau qui répondent aux conditions des pharmacopées EP et US .

[00044] On entend par « co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques » des enchaînements linéaires non cycliques d'unités acide gl utamique ou acide aspartique liées entre elles par des liaisons peptidiques, lesdits enchaînements présentant une partie C-terminale, correspondant à l'acide carboxylique d'une extrémité, et une partie N -terminale, correspondant à l'amine de l'autre extrémité de l'enchaînement.

[00045] On entend par « solubie », susceptible de permettre de préparer une solution limpide et dépourvue de particules à une concentration inférieure à 60 mg/ml dans de l'eau distillée à 25°C.

[00046] On entend par « radical alkyl » une chaîne carbonée, linéaire ou ramifiée, qui ne comprend pas d'hétéroatome.

[00047] Le co-polyaminoacide est un co-polyaminoacide statistique dans l'enchaînement des unités glutamiques et/ou aspartiques.

[00048] Dans les formules les *— indiquent les sites de rattachements des différents éléments représentés.

[00049] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Hy comprend de 34 à 70 atomes de carbone.

[00050] Dans un mode de réalisation, lorsque p = 2, x est compris de 9 à 15 (9 < x≤ 15).

[00051] Dans un mode de réalisation, lorsque p = 3, x est compris de 7 à 15 (7 < x < 15). [00052] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes de formule I sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p = 2, représentée par la formule VI suivante : Formule VI dans laquelle GpR, GpA, GpC et r ont les définitions données précédemment.

[00053] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle r est égal à 0 (r= 0) .

[00054] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle r est égal à 1 (r= l ).

[00055] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II.

[00056] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans lequel R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 11 atomes de carbone.

[00057] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.

[00058] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 6 atomes de ca rbone.

[00059] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle au moins comprenant de 2 à 4 atomes de carbone.

[00060] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical al kyle linéaire divalent comprenant de 2 à 4 atomes de carbone. [00061] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est ca ractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant 2 atomes de carbone.

[00062] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule ΙΓ.

[00063] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule Ι dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 1 1 atomes de carbone.

[00064] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule ΙΓ dans laquelle R est un radical alkyle divalent comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.

[00065] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou Ι , dans laquelle R est un radical linéaire éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène.

[00066] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou ΙΓ dans laquelle R est un radical éther.

[00067] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical éther R est un radical comprenant de 4 à 6 atomes de carbone.

[00068] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical éther R est * ^/ ^ ^s ^ ^/ ^^^ ^* ^ ^* ^*,

[00069] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou ΙΓ, dans laquelle R est un radical polyéther.

[00070] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou Ι , dans laquelle R est un radical linéaire polyéther comprenant de 6 à 10 atomes de carbone et de 2 à 3 atomes d'oxygène.

[00071] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical linéaire polyéther choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci- dessous :

[00072] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A, A' et A", identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires.

[00073] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formules III est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A et A', identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant de 3 à 4 atomes de carbone.

[00074] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A et A', identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant de 3 à 4 atomes de carbone.

[00075] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A est choisi parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant 3 atomes de carbone et A' est choisi parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant 4 atomes de carbone.

[00076] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A et A', identiques sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant 3 atomes de carbone.

[00077] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué des radicaux Illa et

[00078] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est un radical de formule Illa .

[00079] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III est un radical de formule Illb :

[00080] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le précurseur du radical GpA de formule III est choisi dans le groupe constitué triamines que sont la spermidine et la norspermidine.

[00081] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le précurseur du radical GpA de formule III est la spermidine.

[00082] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le

[00083] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb et IVc ci-après représentées :

[00084] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC est de formule IVa.

[00085] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb ou IVc dans lesquels b est égal à 0, répondant respectivement aux formules IVd IVe et IVf ci-a rès re résentées :

le radical GpC répond à la formule IV ou IVa dans lesquelles b = 0, et répond à la formule IVd.

[00087] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles linéaires comprenant de 9 à 15 atomes de carbone.

[00088] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles ramifiés comprenant de 9 à 15 atomes de carbone.

[00089] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant 9 ou 10 atomes de carbone.

[00090] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés pa r les formules ci-des

[00091] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant de 11 à 15 atomes de carbone.

[00092] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprena nt de 11 à 13 atomes de carbone.

[00093] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous : [00094] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles com prenant 14 ou 15 atomes de carbone.

[00095] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :

x= 15 [00096] Dans les formules I et VI, les— * indiquent les sites de rattachement des radicaux hydrophobes au co-polyaminoacide. Les radicaux Hy sont rattachés au co- polyaminoacide via des fonctions amides.

[00097] Dans les formules II et IV, les— * indiquent les sites de rattachement de GpR :

au co-polyaminoacide et

- à GpA.

[00098] Dans la formule III, les— * indiquent les sites de rattachement de GpA : à GpR si r = 1 ou au co-polyaminoacide si r = 0 et

- à GpC.

[00099] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par une aminé primaire du radical de formule III.

[000100] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'aminé primaire N ^al du radical de formule III.

[000101] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'amine primaire N" ^? du radical de formule III.

[000102] Dans un mode de réalisation , quand r = 0, GpA est lié au co-polyaminoacide par une aminé secondaire du radical de formule III.

[000103] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'amine secondaire Ν ^β1 du radical de formule III.

[000104] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par une aminé primaire du radical de formule III.

[000105] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'amine primaire N ^l du radical de formule III.

[000106] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'amine primaire N" ² du radical de formule III.

[000107] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par une aminé secondaire du radical de formule III.

[000108] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'amine secondaire Ν ^β1 du radical de formule III.

[000109] Dans la formule IV, le— * indique le site de rattachement de GpC à GpA.

[000110] Tous les rattachements entre les différents groupes GpR, GpA et GpC sont des fonctions amides. [00011 1] Les radicaux Hy, GpR, GpA, GpC, et D sont chacun indépendamment identiques ou différents d'un résidu à l 'autre.

[000112] Lorsque le co-polyaminoacide comprend une ou plusieurs d'unité(s) aspartique(s), celle(s)-ci peu(ven)t subir des réarrangements structuraux.

[000113] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes de formule I sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p = 3, représentée par la formule IX suivante :

dans laquelle GpA est de Formule ΙΙΓ et GpR, GpC, r ont les définitions données précédemment.

[000114] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle r est égal à 0 (r= 0).

[000115] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou 11'.

[000116] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IF dans lequel R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 11 atomes de carbone.

[000117] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical al kyle divalent comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.

[0001 18] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.

[000119] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical alkyle au moins comprenant de 2 à 4 atomes de carbone. [000120] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant de 2 à 4 atomes de carbone.

[000121] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou II' dans laquelle R est un radical alkyle linéaire divalent comprenant 2 atomes de carbone. [000122] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV , dans laquelle R est un radical linéaire éther ou polyether non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène.

[000123] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou II' dans laquelle R est un radical éther.

[000124] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical éther R est un radical comprenant de 4 à 6 atomes de carbone.

[000125] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical éther

[000126] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV, dans laquelle R est un radical polyéther.

[000127] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV, dans laquelle R est un radical linéaire polyéther comprenant de 6 à 10 atomes de carbone et de 2 à 3 atomes d'oxygène.

[000128] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle GpR est un radical de formule II ou IV dans laquelle R est un radical linéaire polyéther choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous

[000129] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formu le IX lesquels A, A' et A", identiques ou différents, sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant de 3 à 4 atomes de carbone.

[000130] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpA de formule III' est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels A et A" identiques sont choisis parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant 3 atomes de carbone et A' est choisi parmi les radicaux alkyles linéaires comprenant 4 atomes de carbone.

[000131] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le radical GpA de formule III' est un radical de formule IU'a :

[000132] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule VI dans laquelle le précu rseur du radical GpA de formule III' est la spermine : spermine [000133] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb et IVc ci-après représentées :

[000134] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC est de formule IVa.

[000135] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux de formules IVa, IVb ou IVc dans lesquels b est égal à 0, répondant respectivement aux formules IVd, IVe, et IVf ci-après représentées :

[000136] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC répond à la formule IV ou IVa dans lesquelles b = 0, et répond à la formule IVd.

[000137] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles linéaires comprenant de 7 à 15 atomes de carbone.

[000138] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles ramifiés comprenant de 7 à 15 atomes de carbone.

[000139] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant 9 ou 10 atomes de ca rbone.

[000140] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les

[000141] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant de 11 à 15 atomes de ca rbone.

[000142] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux al kyles comprenant de 11 à 13 atomes de carbone.

[000143] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous : [000144] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux alkyles comprenant 14 ou 15 atomes de carbone.

[000145] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe est un radical de formule IX dans laquelle le radical GpC de formule IV est choisi dans le groupe constitué des radicaux dans lesquels Cx est choisi dans le groupe constitué par les radicaux représentés par les formules ci-dessous :

[000146] Dans les formules I et IX, les— * indiquent les sites de rattachement des radicaux hydrophobes au co-polyaminoacide. [000147] Les radicaux Hy sont rattachés au co-po!yaminoacide via des fonctions amides.

[000148] Dans les formules II et ΙΓ, les— * indiquent les sites de rattachement de GpR :

au co-polyaminoacide et

- à GpA.

[000149] Dans les formules III', les— * indiquent les sites de rattachement de GpA : à GpR si r = 1 ou au co-polyaminoacide si r = 0 et

- à GpC.

[000150] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par une aminé primaire du radical de formule ΙΙ .

[000151] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'aminé primaire N ^al du radical de formule III'.

[000152] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'aminé primaire N" ² du radical de formule III'.

[000153] Dans un mode de réalisation, quand r = 0, GpA est lié au co-polyaminoacide par une aminé secondaire du radical de formule ΙΙ .

[000154] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'aminé secondaire N" ¹ du radical de formule ΙΙΓ.

[000155] Dans un mode de réalisation, quand r=0, GpA est lié au co-polyaminoacide par l'aminé secondaire N ^p2 du radical de formule ΙΙΓ. [000156] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par une aminé primaire du radical de formule ΙΙΓ.

[000157] Dans un mode de réalisation, quand r = 1 , GpA est lié à GpR par l'aminé primaire N" ¹ du radical de formule III'.

[000158] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'aminé primaire N ^a2 du radical de formule ΙΙΓ.

[000159] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par une aminé secondaire du radical de formule ΙΙ .

[000160] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'aminé secondaire N ^pl du radical de formule III'.

[000161 ] Dans un mode de réalisation, quand r = 1, GpA est lié à GpR par l'aminé secondaire N ^!<2 du radical de formule ΙΙΓ. [000162] Dans la formule IV, le— * indique le site de rattachement de GpC à GpA.

[000163] Tous les rattachements entre les différents g roupes GpR, GpA et GpC sont des fonctions amides.

[000164] Les radicaux Hy, GpR, GpA, GpC, et D sont chacun indépendamment identiques ou différents d'un résidu à l'autre.

[000165] Lorsque le co-polyaminoacide comprend une ou plusieurs d'unité(s) aspartique(s), celle(s)-ci peu(ven)t subir des réarrangements structuraux.

[000166] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hyd rophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII suivante :

formule VII dans laquelle

D représente, indépendamment, soit un groupe -CH2- (unité aspartique) soit un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique),

Hy est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, VI ou IX,

Ri est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, VI ou IX dans lesquelles r = 0 ou r = 1 et GpR est un radical de Formule II, ou un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate,

R2 est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, VI ou IX dans lesquelles r = 0 ou r = 1 et GpR est un radical de Formule ΙΓ, ou un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble u n ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S ;

• X représente une entité cationique choisie dans le groupe comprenant les cations alcalins ;

• n + m représente le degré de polymérisation DP du co-polyaminoacide, c'est-à-di re le nombre moyen d'unités monomériques par chaîne de co- polyaminoacide et 5 < n + m < 250 ;

[000167] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que lorsque le co-polyaminoacides comprend des unités aspartate, alors le co-polyaminoacide peut en outre comprendre des unités monomériques de formule VII

Formule VIII Formule VIII'

[000168] On appelle « co-polyaminoacide à greffage statistique » un co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe, un co-polyaminoacide de formule Vlla .

[000169] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, dans laquelle Ri = R'i et R2 = R'2, de formule Vlla suivante :

"y Formule Vlla

dans laquelle,

- m, n, X, D et Hy ont les définitions données précédemment,

- R'i est un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate,

- R'2 est un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par O, N et S.

[000170] On appelle « co-polyaminoacide à greffage défini » un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d 'au moins un radical hydrophobe, un co- polyaminoacide de formule Vllb.

[000171] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = 0 de formule Vllb suivante :

Formule Vllb dans laquelle m, X, D, Ri et R2 ont les définitions données précédemment et au moins Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, VI ou IX.

[000172] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'i nvention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = 0 de formule Vllb et Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, VI ou IX.

[000173] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule Vllb dans laquelle Ri est un radical hydrophobe de formule I, VI ou IX dans lesquelles r = 1 et GpR est de Formule II.

[000174] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules Vllb dans laquelle R2 est un radical hydrophobe de formule I, VI ou IX dans lesquelles r = 0 ou r = 1 et GpR est de Formule II'. [000175] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Ri est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate.

[000176] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que Ri est un radical choisi dans le groupe constitué par un groupe acyle linéaire en C2 à C10 ou un groupe acyle ramifié en C3 à C10.

[000177] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, Vlla ou Vllb dans lesquels le co-polyaminoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2- (unité aspartique) .

[000178] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, Vlla ou Vllb dans lesquels le co-polyaminoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique). [000179] On définit par le ratio radical hydrophobe par insuline basale comme étant le ratio de leurs concentrations molaires respectives : [Hy]/[insuline basale] (mol/mol) pour obtenir les performances attendues, à savoir la solubilisation de l'insuline basale à pH compris de 6,0 à 8,0, la précipitation de l'insuline basale et la stabilité des compositions selon l'invention.

[000180] La valeur minimale du ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale], mesurée est la valeur à laquelle l'insuline basale est solubilisée, car la solubilisation est l'effet minimum à obtenir ; cette solubilisation conditionne tous les autres effets techniques qui ne peuvent être observés que si l'insuline basale est solubilisée à pH compris de 6,0 à 8,0.

[000181] Dans les compositions selon l'invention, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] peut être supérieur à la valeur minimale déterminée par la limite de solubilisation.

[000182] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuli ne basale] <2.

[000183] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] < 1,75.

[000184] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] ≤ 1,5.

[000185] Dans u n mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] < 1,25.

[000186] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale

[Hy]/[insuline basale] < 1,00.

[000187] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] < 0,75.

[000188] Dans un mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] < 0,5.

[000189] Dans u n mode de réalisation, le ratio radical hydrophobe par insuline basale [Hy]/[insuline basale] < 0,25.

[000190] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspa rtiques est compris de 0,007 à 0,3.

[000191 ] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspa rtiques est compris de 0,01 à 0,3. [000192] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,02 à 0,2. [000193] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,007 à 0, 15.

[000194] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à 0, 1.

[000195] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,02 à 0,08.

[000196] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend de 9 à 10 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,03 à 0, 15.

[000197] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend de 11 à 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,015 à

0, 1.

[000198] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend de 11 à 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,02 à 0,08.

[000199] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend de 13 à 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à

0, 1.

[000200] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule VI dans laquelle le radical Cx comprend de 13 à 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à 0,06. [000201 ] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,007 à 0,15.

[000202] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à 0, 1.

[000203] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formu le IX et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,02 à 0,08.

[000204] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX dans laquelle le radical Cx comprend entre 7 et 10 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspa rtiques est compris de 0,03 à 0, 15.

[000205] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX dans laquelle le radical Cx comprend de 11 à 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,015 à

0, 1.

[000206] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX dans laquelle le radical Cx comprend de 11 à 12 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,02 à 0,08.

[000207] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'invention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX dans laquelle le radical Cx comprend de 13 à 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'un ités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à 0, 1.

[000208] Dans un mode de réalisation, la composition selon l 'i nvention est caractérisée en ce que le radical hydrophobe répond à la formule IX dans laquelle le radical Cx comprend de 13 à 15 atomes de carbone et le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques est compris de 0,01 à 0,06. [000209] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 10 à 200.

[000210] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 15 à 150.

[000211] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris ede 15 à 100.

[000212] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 15 à 80.

[000213] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 15 à 65.

[000214] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 20 à 60.

[000215] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 20 à 50.

[000216] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que n + m est compris de 20 à 40.

[000217] L'invention concerne également lesdits co-poiyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes de formule I, VI ou IX. [000218] Dans un mode de réalisation, l'invention concerne aussi les précurseurs desdits radicaux hydrophobes de formule Γ, VI' et IX':

H-(GpR)r-GpA-(GpC) _P Formule I' H-(GpR) _r -GpA-(GpC) ₂ Formule VI'

H-(GpR) _r -GpA-(GpC) ₃ Formule IX'

GpR, GpA, GpC, r et p ont les définitions données précédemment.

[000219] L'invention réside en outre en une méthode de préparation de compositions injectables stables.

[000220] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou Vllb, dans laquelle DP = 27, 0,028 < i ≤ 0,045 et le au moins un radical hydrop obe est de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r=0, p=2, GpA répond à la formule Illa, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est

XH ₃

[000221] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou Vlla, dans laquelle DP = 22, 0,023 < i≤ 0,04 et le au moins un radical hydrophobe est de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r=0, p=2, GpA répond à la formule Illa, R2 ou R'2 est l'hexylamine, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est

[000222] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou Vlla, dans laquelle DP = 22, 0,036 < i ≤ 0,046 et le au moins un radical hydrophobe est de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r=0, p= 2, GpA répond à la formu le Illa, R2 ou R'2 est l'hexylamine, GpC répond à la formule IVd dans

H ₃ laquelle x = 11 et Cx est * ^*

[000223] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou Vllb, dans laquelle DP = 22, 0,040 < i < 0,050 et le au moins un radical hydrophobe est de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle r=0, p=2, GpA répond à la formule Illb, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est

,CH ₃

[000224] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation.

[000225] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation par ouverture de cycle d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique.

[000226] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique comme décrit dans l'article de revue Adv. Polym. Sci . 2006, 202, 1 - 18 (Deming, T.J. ).

[000227] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d 'acide glutamique.

[000228] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique choisi dans le groupe constitué par le N-carboxyanhydride poly-glutamate de méthyle (GluOMe-NCA) , le N-carboxyanhydride poly-glutamate de benzyle (GluOBzl -NCA) et le N- carboxyanhydride poly glutamate de t-butyle (GluOtBu-NCA) .

[000229] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d ^' acide glutamique est le N-carboxyanhydride poly-L-glutamate de méthyle (L-GluOMe-NCA) .

[000230] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique est le N-carboxyanhydride poly-L-glutamate de benzyle (L-GluOBzl-NCA) .

[000231 ] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu pa r polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur un complexe organométallique d'un métal de transition comme décrit dans la publication Nature 1997, 390, 386-389 (Deming, T.J .).

[000232] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'ammoniaque ou une aminé primaire comme décrit dans le brevet F 2,801,226 (Tou raud, F. ; et al . ) et les références citées par ce brevet.

[000233] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N -carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'hexaméthyldisilazane comme décrit dans la publication J. Am. Chem . Soc. 2007, 129, 14114- 14115 (Lu H . ; et al .) ou une aminé silylée comme décrit dans la publication J. Am. Chem . Soc. 2008, 130, 12562- 12563 (Lu H . ; et al . ).

[000234] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le procédé de synthèse du polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxy anhydride d'acide aspartique dont est issu le co-polyaminoacide comprend une étape d'hydrolyse de fonctions ester.

[000235] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de fonctions ester peut consister en une hydrolyse en milieu acide ou une hydrolyse en milieu basique ou être effectuée par hydrogénation.

[000236] Dans u n mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est une hydrolyse en milieu acide.

[000237] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est effectuée par hydrogénation .

[000238] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de pl us haut poids moléculaire.

[000239] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.

[000240] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.

[000241 ] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d 'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique et chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire.

[000242] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire choisi dans le groupe constitué par le polyglutamate de sodium et le polyaspartate de sodium .

[000243] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyglutamate de sodium de plus haut poids moléculaire.

[000244] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaspartate de sodium de plus haut poids moléculaire.

[000245] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur u n poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide bien connus de l'homme de l'art.

[000246] Dans un mode de réalisation , la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide utilisés pour la synthèse peptidique.

[000247] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide comme décrit dans le brevet F 2,840,614 (Chan, Y. P. ; et al. ) .

[000248] Dans la suite, les unités utilisées sont pour les insulines celles recommandées par les pharmacopées dont les correspondances en mg/ml sont données dans le tableau ci -après :

[000249] On entend par insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 une insuline insoluble à pH 7 et dont la durée d'action est comprise de 8 à 24 heures ou supérieu re dans les modèles standards de diabète.

[000250] Ces insulines basales dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 sont des insulines recombinantes dont la structure pri maire a été modifiée princi palement par i ntroduction d'aminoacides basiques comme l'Arginine ou la Lysine. Elles sont décrites par exemple dans les brevets, demandes de brevets ou publications suivants VVO 2003/053339, WO 2004/096854, US 5,656,722 et US 6, 100,376 dont le contenu est incorporé par référence.

[000251 ] Dans u n mode de réalisation, l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 est l'insuline glargine. L'insuline glargine est commercialisée sous la marque Lantus® ( 100 U/ml) ou Toujeo® (300 U/ml) par SANOFI.

[000252] Dans u n mode de réalisation, l 'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 est une insuline glargine biosimilaire. [000253] Une insuline glargine biosimilaire est en voie de commercialisation sous la marque Abasagiar® ou Basaglar® par ELI LILLY.

[000254] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent de 40 à 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000255] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000256] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000257] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'i nvention comprennent 150 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000258] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention compren nent 200 U/m L d'i nsuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000259] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectriq ue est compris de 5,8 à 8, 5.

[000260] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 250 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000261 ] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000262] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5.

[000263] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention compren nent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000264] Dans un mode de réalisation, le ratio massique entre l 'insuline basale, dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, et le co-polyaminoacide, soit co- polyaminoacide /insuline basale, est compris de 0,2 à 8.

[000265] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 6.

[000266] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 5. [000267] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 4.

[000268] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 3.

[000269] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 2.

[000270] Dans un mode de réalisation, le ratio massique est compris de 0,2 à 1 ,

[000271] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 60 mg/mL.

[000272] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL.

[000273] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 20 mg/mL.

[000274] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 10 mg/mL.

[000275] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus 5 mg/ml.

[000276] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus 2,5 mg/ml .

[000277] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre une insuline prandiale. Les insulines prandiales sont solubles à pH 7.

[000278] On entend par insuline prandiale une insuline dite rapide ou « regular ».

[000279] Les insulines prandiales dites rapides sont des insulines qui doivent répondre aux besoins provoqués par l'ingestion des protéines et des glucides durant un repas, elles doivent agir en moins de 30 minutes.

[000280] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale dite « regular » est de l'insuline humaine.

[000281] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est une insuline humaine recombinante telle que décrite dans la Pharmacopée Européenne et la Pharmacopée américaine.

[000282] L'insuline humaine est par exemple commercialisée sous les marq ues Humulin® (ELI LILLY) et Novolin® (NOVO NORDISK).

[000283] Les insulines prandiales dites très rapides (fast acting) sont des insulines qui sont obtenues par recombinaison et dont la structure primaire a été modifiée pour diminuer leur temps d'action. [000284] Dans un mode de réalisation, les insulines prandiales dites très rapides (fast acting) sont choisies dans le groupe comprenant l'i nsuline lispro (Humalog *· ), l'insuline glulisine (Apidra®) et l'insuline aspart (NovoLog®) .

[000285] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline lispro.

[000286] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline glulisine.

[000287] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline aspart.

[000288] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total de 60 à 800 U/mL d'insuline avec une combi naison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000289] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total de 100 à 500 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000290] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'i nvention comprennent au total 800 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000291 ] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 700 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000292] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 600 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000293] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 500 U/mL d'insuline avec u ne combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000294] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 400 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000295] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent au total 300 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000296] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 266 U/mL d'insuline avec une combi naison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000297] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'i nvention compren nent au total 200 U/mL d'insuline avec u ne combinaison d'insuline prandiale et d'insuli ne basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5. [000298] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent au total 100 U/mL d'insuline avec une combinaison d'insuline prandiale et d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5. [000299] Les proportions entre l'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et l'insuline prandiale sont par exemple en pourcentage de 25/75, 30/70, 40/60, 50/50, 60/40, 63/37, 70/30, 75/25, 80/20, 83/17, 90/10 pour des formulations telles que décrites ci-dessus comprenant de 60 à 800 U/mL. Cependant toute autre proportion peut être réalisée.

[000300] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention compren nent en outre une hormone gastrointestinale.

[000301] On entend par « hormones gastrointestinales », les hormones choisies dans le groupe constitué par le GLP- 1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), l'oxyntomoduline (un dérivé du proglucagon), le peptide YY, I'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et i'entérostatine, leurs analogues ou dérivés et/ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000302] Dans un mode de réalisation, les hormones gastro-intestinales sont des analogues ou dérivés de GLP- 1 RA choisis dans le groupe constitué par I'exenatide ou Byetta®(ASTRA-ZENECA) , le liraglutide ou Victoza® ( NOVO NORDISK), le lixisenatide ou Lyxumia® (SANOFI), l'albiglutide ou Tanzeu m® (GSK) ou le dulaglutide ou Trulicity® (ELI LILLY & CO), leurs analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000303] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastro-intestinale est le pramlintide ou Symlin ^¾ (ASTRA-ZENECA) .

[000304] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est I'exenatide ou Byetta®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000305] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le liraglutide ou Victoza®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000306] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide ou Lyxumia"*, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000307] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide ou Tanzeum'"', ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000308] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide ou Trulicity®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

[000309] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointesti nale est le pramlintide ou Symlin®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000310] On entend par « analogue », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine, dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été substitués par d'autres résidus d'acides aminés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été supprimés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été ajoutés. Le pourcentage d'homologie admis pour la présente définition d'un analogue est de 50 %.

[000311 ] On entend par « dérivé », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine ou un analogue chimiquement modifié par un substituant qui n'est pas présent dans le peptide ou la protéine ou l'analogue de référence, c'est-à-dire un peptide ou une protéine qui a été modifié par création de liaisons covalentes, pour introduire des substituants.

[000312] Dans un mode de réalisation, le substituant est choisi dans le groupe constitué des chaînes grasses.

[000313] Dans un mode de réalisation, la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un intervalle de 0,01 à 100 mg/mL.

[000314] Dans un mode de réalisation, la concentration en exenatide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,04 à 0,5 mg/mL.

[000315] Dans un mode de réalisation, la concentration en liraglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 1 à 10 mg/mL.

[000316] Dans un mode de réalisation, la concentration en lixisenatide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,01 à 1 mg/mL.

[000317] Dans un mode de réalisation, la concentration en albiglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise de 5 à 100 mg/mL.

[000318] Dans un mode de réalisation, la concentration en dulaglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise de 0, 1 à 10 mg/mL.

[000319] Dans un mode de réalisation, la concentration en pramlintide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise de 0, 1 à 5 mg/mL.

[000320] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention sont réalisées par mélange de solutions commerciales d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et de solutions commerciales de GLP- 1 RA, d'analogue ou de dérivé de GLP-1 RA en ratios volumiques compris dans un intervalle de 10/90 à 90/10.

[000321] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention sont réal isées à partir d'insuline basale dont le point isoélectrique est com pris de 5,8 à 8,5 se présentant sous forme de poudre.

[000322] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention sont réalisées par mélange de solutions concentrées d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et d'insuline prandiale préparées à partir desdites insulines se présentant sous forme de poudre.

[000323] Dans un mode de réalisation, l 'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 se présentant sous forme de poudre est l'insuline glargine biosimilaire (Gan & Lee Pharmaceutical) .

[000324] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale se présentant sous forme de poudre est l'insuline lispro (Gan & Lee Pharmaceutical ).

[000325] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend une dose journalière d 'i nsuline basale et une dose journalière d'hormone gastrointestinale.

[000326] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent de 40 U/mL à 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,05 à 0,5 mg/mL d 'exenatide.

[000327] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent de 40 U/mL à 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000328] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent de 40 U/mL à 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000329] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent de 40 U/mL à 500 U/m L d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000330] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent de 40 U/mL à 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 0,1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000331 ] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 500 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0, 5 mg/mL d'exenatide. [000332] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention compren nent 500 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 1 à 10 mg/mL de liragl utide.

[000333] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention comprennent 500 U/m L d'insuline basa le dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000334] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention compren nent 500 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000335] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 500 U/m L d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000336] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.

[000337] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention compren nent 400 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000338] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention compren nent 400 U/m L d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000339] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'i nvention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d 'albiglutide.

[000340] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 400 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000341] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention compren nent 300 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0, 5 mg/mL d'exenatide.

[000342] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'i nvention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000343] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 300 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide. [000344] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 300 U/m L d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000345] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention compren nent 300 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000346] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.

[000347] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000348] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000349] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000350] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 225 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000351] Dans un mode de réalisation les compositions selon l 'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.

[000352] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000353] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 200 U/m L d'insuline basale dont ; point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000354] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention comprennent 200 U/mL d'insuline basale dont point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000355] Dans un mode de réalisation les compositions selon l'invention compren nent 200 U/mL d'insuline basale dont ; point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide. [000356] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et, de 0,04 à 0,5 mg/m L d'exenatide.

[000357] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'i nsuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000358] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL (soit environ 3,6 mg/mL) d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000359] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000360] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 100 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000361 ] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuli ne basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0,04 à 0,5 mg/mL d'exenatide.

[000362] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d 'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 1 à 10 mg/mL de liraglutide.

[000363] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est com ris de 5,8 à 8,5 et, de 0,01 à 1 mg/mL de lixisenatide.

[000364] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 5 à 100 mg/mL d'albiglutide.

[000365] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'invention comprennent 40 U/mL d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et, de 0, 1 à 10 mg/mL de dulaglutide.

[000366] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention compren nent en outre des sels de zinc à u ne concentration comprise de 0 à 5000 μΜ .

[000367] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 0 à 4000 μΜ .

[000368] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 0 à 3000 μΜ .

[000369] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 0 à 2000 μΜ , [000370] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 0 à 1000 μΜ .

[000371 ] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 50 à 600 μΜ .

[000372] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à une concentration comprise de 100 à 500 μΜ.

[000373] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des sels de zinc à u ne concentration comprise de 200 à 500 μΜ .

[000374] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des tampons.

[000375] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises de 0 à 100 mM .

[000376] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises de 15 à 50 mM .

[000377] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent un tampon choisi dans le groupe constitué par un tampon phosphate, le

Tris (trishydroxyméthylaminométhane) et le citrate de sodium.

[000378] Dans un mode de réalisation, le tampon est le phosphate de sodium.

[000379] Dans un mode de réalisation, le tampon est le Tris (trishydroxyméthylaminométhane) .

[000380] Dans un mode de réalisation, le tampon est le citrate de sodium.

[000381] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l 'i nvention comprennent en outre des conservateurs.

[000382] Dans un mode de réalisation, les conservateurs sont choisis dans le groupe constitué par le m-crésol et le phénol, seuls ou en mélange.

[000383] Dans un mode de réalisation , la concentration des conservateurs est comprise de 10 à 50 mM .

[000384] Dans un mode de réalisation , la concentration des conservateurs est comprise de 10 à 40 mM .

[000385] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'i nvention comprennent en outre un tensioactif.

[000386] Dans un mode de réalisation, le tensioactif est choisi dans le groupe constitué par le propylène glycol et le polysorbate.

[000387] Les compositions selon l'invention peuvent en outre comprendre des additifs tels que des agents de tonicité.

[000388] Dans un mode de réalisation, les agents de tonicité sont choisis dans le groupe constitué par la glycérine, le chlorure de sodium , le mannitol et la glycine. [000389] Les compositions selon l'invention peuvent comprendre en outre tous les excipients conformes aux pharmacopées et compatibles avec les insulines utilisées aux concentrations d'usage.

[000390] L'invention concerne également une formulation pharmaceutique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle est obtenue par séchage et/ou lyophilisation .

[000391] Dans le cas des libérations locale et systémique, les modes d'administration envisagés sont par voie intraveineuse, sous-cutanée, intradermique ou intramusculaire.

[000392] Les voies d'administration transdermique, orale, nasale, vagi nale, oculaire, buccale, pulmonaire sont également envisagées.

[000393] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,0 à 8,0 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000394] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,0 à 8,0 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et une insuline prandiale.

[000395] L'invention concerne également des formulations un idoses à pH compris de 6,0 à 8,0 com prenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.

[000396] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,0 à 8,0 comprenant une i nsuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.

[000397] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5.

[000398] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et une insuline prandiale.

[000399] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5 et une hormone gastrointestinale, tel le que définie précédemment.

[000400] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,8 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment. [000401] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8, 5.

[000402] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et une insuline prandiale.

[000403] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,6 comprenant une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.

[000404] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris de 6,6 à 7,6 comprenant u ne i nsuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 , une insuline prandiale et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment.

[000405] Dans un mode de réalisation, les formulations unidoses comprennent en outre un co-polyaminoacide tel que défini précédemment.

[000406] Dans un mode de réalisation, les formulations sont sous forme d'une solution injectable.

[000407] Dans u n mode de réalisation, l 'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5 est l'insuline glargine.

[000408] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline humaine.

[000409] Dans un mode de réalisation, l'insuline est une insuline humaine recombinante telle que décrite dans la Pharmacopée Européenne et la Pharmacopée américaine. [000410] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est choisie dans le groupe comprenant l'insuline lispro (Humalog®), l'insuline glulisine (Apidra®) et l'insuline aspart

(NovoLog®) .

[000411] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline lispro.

[000412] Dans un mode de réalisation, l'i nsuline prandiale est l'insuline glulisine.

[000413] Dans un mode de réalisation, l'insuline prandiale est l'insuline aspart.

[000414] Dans un mode de réalisation, le GLP- 1 RA, analogue ou dérivé de GLP- 1 RA est choisi dans le groupe comprenant exenatide (Byetta®), liraglutide (Victoza®), lixisenatide (Lyxumia®), albiglutide (Tanzeum *), dulaglutide (Trulicity®) ou l'un de leurs dérivés.

[000415] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'exenatide.

[000416] Dans un mode de réalisation, l 'hormone gastrointestinale est le liraglutide.

[000417] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide.

[000418] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide. [000419] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide.

[000420] La solubilisation à pH compris de 6,0 à 8,0 des insulines basales dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, par les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, peut être constatée et contrôlée de manière si mple, à l'œil nu, grâce à un changement d'aspect de la solution .

[000421 ] La solubilisation à pH compris de 6,6 à 7,8 des insulines basales dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, par les co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, peut être constatée et contrôlée de manière simple, à l'œil nu, grâce à un changement d'aspect de la solution .

[000422] Par ailleurs et de façon toute aussi importante, la demanderesse a pu vérifier qu'une insuli ne basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, solubilisée à pH compris de 6,0 à 8,0 en présence d 'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention conserve son action d'insuline lente que ce soit seule ou en combinaison avec une insuline prandiale ou une hormone gastrointestinale.

[000423] La demanderesse a également pu vérifier qu'une insuline prandiale mélangée à pH compris de 6,0 à 8,0 en présence d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention et d'une insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, conserve son action d'insuline rapide.

[000424] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention , en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris de 6 à 8.

[000425] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insu line basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, d'une solution d'insuline prandiale, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophi lisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris de 6 à 8.

[000426] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, d'une solution de GLP- 1 RA, un analogue ou un dérivé de GLP- 1 RA, et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris de 6 à 8.

[000427] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution aqueuse d'insuline basale dont le point isoélectrique est compris de 5,8 à 8,5, d'une solution d'insuline prandiale, d'une solution de GLP-1 RA ou d'un analogue ou dérivé de GLP-1 RA et d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention , en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris de 6 à 8.

[000428] Dans un mode de réalisation, le mélange d'insuline basale et de co- polyaminoacide est concentré par ultrafiltration avant le mélange avec l'insuline prandiale en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée.

[000429] Si nécessaire, la composition du mélange est ajustée en excipients tels que glycérine, m-crésol, chlorure de zinc, et polysorbate (Tween®) par ajout de solutions concentrées de ces excipients au sein du mélange. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à pH compris de 6 à 8.

Figure 1 : la figure 1 représente les courbes moyennes de glycémie en pourcents de déviation du niveau basai ± erreur standard de la moyenne après les administrations simultanées et séparées d'insuline lispro (Humalog® - exemple Cl) ( 100 IU/mL, 0,17 IU/kg) et d'insuline glargine ( Lantus® - exemple C4) ( 100 IU/mL, 0,50 U/kg) (cercles pleins) et de la composition CB3-1 (266 U/ml, 0,67 U/kg ) (carrés vides) ; les administrations ayant été réalisées sur le chien (n = 10), par injection sous-cutanée, avec en abscisse le temps post-injection (en heures) et en ordonnée le taux de glucose (en % déviation du niveau basai ).

Exemples

L'invention est décrite plus en détails au travers des exemples suivants de manière non- limitative. Partie A - Synthèse deijnflléSMiaJiiahyBbP g»

[000430] Les structures des molécules hydrophobes sont représentées dans le Tableau 1.

Tableau 1 : Liste des molécules hydrophobes Hy.

Exemple Al : Molécule Al

Molécule 1

Produit obtenu par couplage entre l'acide iaurique et la L-Proline

[000431] A une solution d'acide dodécanoïque (19,77 g, 98,70 mmol) dans le THF ( 1 L) sont ajoutés successivement du dicyclohexyl carbodiimide (DCC) (20,77 g, 100,68 mmol ) et du N-hydroxysuccinimide (NHS) ( 11,59 g, 100,68 mmol) . Après 24 h d'agitation à température ambiante, le milieu est refroidi à 0 °C et filtré sur verre fritté. De la L-proline ( 12,50 g, 108,57 mmol), de la diisopropyléthylamine (DIPEA) (63,78 g, 493,51 mmol ) et de l'eau (90 mL) sont ajoutés au filtrat. Après 24 h d'agitation à température ambiante, le milieu est concentré sous pression réduite, puis dilué avec de l'eau (300 m L). La phase aqueuse est lavée avec de l'acétate d'éthyle (2 x 400 mL), acidifiée jusqu'à pH ~ 1 avec une solution aqueuse d'HCI 1 N puis extraite avec du dichlorométhane (3 x 250 mL). Les phases organiques combinées sont séchées sur Na2S04, filtrées, et concentrées sous pression réduite. Après purification par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle), une huile incolore de molécule 1 est obtenue.

Rendement : 20,53 g (70 %)

RM *H (CDCI3, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,26 ( 16H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2, 10 (3H) ; 2,35 (2H) ; 2,49 ( 1H) ; 3,48 ( 1 H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,60 (1 H)

LC/ S (ESI) : 298,2 ; (calculé ([M + H] * ) : 298,3)

Molécule 2

Produit obtenu par couplage entre la molécule 1 et la spermidine

[000432] A une solution de molécule 1 (20,48 g, 68,85 mmol) à 0 °C dans le dichlorométhane (DC , 340 mL) est ajouté du Ι, Ι '-carbonyldiimidazole (CDI) ( 11 ,05 g, 68, 16 mmol) et le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 1,5 h. La spermidine (5,41 mL, 34,42 mmol) est ajoutée et le mélange est agité pendant 20 h . La solution est introduite dans de l'eau, les phases sont séparées puis la phase aqueuse est extraite 2 fois par du dichlorométhane. Les phases organiques combinées sont séchées sur Na2S04, filtrées, concentrées sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane, ammoniaque 7 N dans le méthanol). Le produit obtenu, contaminé par de l'imidazole, est solubilisé dans du dichlorométhane et lavé successivement avec une solution aqueuse saturée de NaHC03 (2 fois) puis de l'eau (2 fois). La phase organique est séchée su r Na2S04, filtrée, et concentrée sous vide pour donner une huile jaunâtre. Rendement : 17,0 g (70 %)

RMN ^J H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1, 10- 1,55 (42H) ; 1,71-2,03 (8H) ; 2,08-2,29 (4H) ; 2,43-2,52 (4H) ; 2,97-3, 16 (4H) ; 3,20-3,57 (5H) ; 4, 16-4,28 (2H) ; 7,62-8,09 (2H)

LC/MS (ESI) : 704,7 ; (calculé ([M + H] ⁺ ) : 704,6)

Molécule Al

[000433] A une solution de molécule 2 ( 17,0 g, 24, 14 mmol ) dans le dichlorométhane ( 120 mL) est ajoutée à 0 °C u ne solution d'acide chlorhydrique 4 N dans le dioxane ( 12,07 mmol, 48,29 mmol) . Le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 1 h, puis concentré sous pression réduite. Le résidu est dissous dans le méthanol et concentré sous vide. Le résidu est trituré dans l'acétonitrile, filtré, lavé à l'acétonitrile et séché sous pression réduite à 50 °C. La molécule Al est obtenue sous forme d'un solide blanc.

Rendement : 12,39 g (69 %)

R N ^: H (DMSO, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,08- 1,63 (40H ) ; 1,70-2,33 ( 14H) ; 2,78-2,88 (4H) ; 3,00-3, 18 (4H) ; 3,31-3,59 (4H) ; 4, 12-4,34 (2H) ; 7,77-8,32 (2H ) ; 8,60-8,90 (2H) LC/MS (ESI) : 704,8 ; (calculé ( [M + H] ' ) : 704,6)

Exemple A2 : molécule A2

Molécule 3

Produit obtenu par couplage entre l'acide myristique et la L-Proline

[000434] Par un procédé similai re à celui utilisé pour la préparation de la molécule 1 appliqué à l'acide myristique ( 18,03 g, 78,96 mmol) et à la L-proline ( 10,00 g, 86,86 mmol ), une huile incolore de molécule 3 est obtenue.

Rendement : 17,66 g (69 %)

RMN ⁵ H (CDC , ppm ) : 0,88 (3H) ; 1 ,28 (20H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2, 10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,51 ( 1H) ; 3,47 ( 1 H) ; 3,56 ( 1H) ; 4,61 ( 1H)

LC/MS (ESI) : 326,4 ; (calculé ( [M+H] ⁺ ) : 326, 3)

Molécule 4

Produit obtenu par couplage entre la molécule 3 et la spermidine

[000435] A une solution de molécule 3 ( 17,41 g, 53,50 mmol) à 0 °C dans le dichlorométhane (260 m L) est ajouté du Ι, Ι'-carbonyldiimidazole (CDI) (8,67 g, 53,50 mmol) et le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 1 ,5 h . La spermidine (4,20 mL, 26,75 mmol) est ajoutée et le mélange est agité pendant 20 h .

Le milieu réactionnel est lavé 4 fois avec une solution aqueuse de NaHCOi 0,2 M, séché sur Na^SCu, filtrée, et concentrée sous vide pour donner un solide jaunâtre.

Rendement : 20,2 g (99 %)

RMN ^J H ( DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,09-2,30 (62H) ; 2,45-2,56 (4H) ; 2,96-3,56

(8H) ; 3,98-4,28 (2H ) ; 7,69-8, 14 (2H )

LC/MS (ESI) : 761 ,0 ; (calculé ([M + H ] ⁺ ) : 760,7) Molécule A2

[000436] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule Al appliqué à la molécule 4 (20,21 g, 26,59 mmol), un solide blanc est obtenu après recristallisation dans l'acétonitrile. Rendement : 16,3 g (77 %)

RMN ^l ( DMSO-d6, ppm) : 0,86 (6H) ; 1,08-2,36 (62H) ; 2,78-2,89 (4H) ; 3,02-3,18 (4H) ; 3,34-3,61 (4H) ; 4, 14-4,32 (2H ) ; 7,80-8,31 (2H ) ; 8,60-8.88 (2H)

LC/MS ( ESI) : 760,9 ; (calculé ( [ +H] ⁺ ) : 760, 7)

Exemple A4 : molécule A4

Molécule 6

Produit obtenu par réaction entre la norspermidine et le dicarbonate de di-tert-butyle [000437] A une solution de norspermidine (99,2 g, 0,756 mol) dans le THF ( 1, 1 L) à 0 °C est ajoutée une solution de dicarbonate de di -tert-butyle (55,0 g, 0,252 mol) dans le THF (715 mL) au goutte-à-goutte sur une période de 2,5 h . Après 24 h d'agitation à 0 °C, le solvant est évaporé sous pression réduite, le résidu est repris dans l'eau (600 mL) et le produit est extrait au dichlorométhane (7 x 500 mL) . Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution aqueuse saturée en NaCI (500 mL), séchées sur Na2S04 et concentrées sous pression réduite. La molécule 6 est obtenue sous forme d'une huile incolore et utilisée sans autre purification.

Molécule 7

Produit obtenu par couplage entre la molécule 3 et la molécule 6

[000438] A une solution de molécule 3 (20,68 g, 63,50 mmol) et de molécule 6 (7,0 g, 30,30 mmol) dans le DMF (70 mL) à 0 °C sont ajoutés successivement de la DIPEA ( 15,64 g, 121 mmol) et de l'hexafluorophosphate de (diméthylamino)-/V,/V- diméthyl( 3H- [ l,2,3]triazolo[4,5-b]pyridin-3-yloxy)méthaniminium (HATU, 25,31 g, 66,60 mmol) . Le mélange réactionnel est agité pendant 24 h tout en remontant la température jusqu'à 25 °C, puis introduit dans de l'eau glacée (700 mL) . Le produit est extrait à l'acétate d'éthyle (300 mL), la phase organique est lavée avec une solution aqueuse de HCI 1 N (300 mL), une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (300 mL), une solution aqueuse saturée en NaCI (500 mL), séchée sur Na2≤04 et concentrée sous pression réduite. Une huile jaune pâle de molécule 7 est obtenue après trois purifications successives par chromatographie flash (éluants : DCM / MeOH, AcOEt / 3 % MeOH dans le DCM, DCM / MeOH) .

Rendement : 18,9 g (74 %)

RMN ^l H (CDCb, ppm) : 0,87 (6H ) ; 1, 15-2,42 (69H) ; 2,79-3,83 ( 12H) ; 4, 17-4,31 (0,5H) ; 4,46-4,65 (0,5H) ; 4,69-4,83 (0,5H) ; 5,19-5,30 (0, 5H ) ; 5,32-5,42 (0, 5H) ; 5,95-6,08 (0,5H) ; 7,59-7,76 (0,5H) ; 7,98-8,14 (0,5H)

LC/MS (ESI) : 746,53, 846,60 ; (calculé ([M + H-Boc] ⁺ ) : 746,65 ([M + H] ⁺ ) : 846,70)

Molécule A4 [000439] A une solution de molécule 7 ( 15,82 g, 18,70 mmol) dans le dichlorométhane

(52 mL) à 0 °C est ajoutée une solution de HCl à 5,7 N dans le dioxane ( 16,4 mL, 93,50 mmol). Après 48 h à 0 °C, le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite.

Le résidu est dilué dans le dichlorométhane (90 mL), refroidi à 0 °C et lavé avec une solution glacée de soude 1 N (2 x 75 mL) puis une solution aqueuse saturée en NaCI

(50 mL). Après séchage sur Na^SCU, une spatule de charbon actif est introduite, le milieu est agité pendant 30 minutes puis filtré sur célite. La molécule A4 est obtenue après évaporation du solvant sous pression réduite.

Rendement : 12,40 g (89 %).

RMN Ή (CDCb, ppm ) : 0,87 (6H) ; 1,08-2,47 (62H) ; 2,50-3,92 ( 12H) ; 4, 16-4,33

(0,5H) ; 4,40-4,62 (0, 5H) ; 4,70-4,88 (0,5H) ; 5,25-5,39 (0,5H ) ; 7,53-7,77 (0,5H) ;

7,98-8,28 (0,5H)

LC/ S (ESI) : 746,55 ; (calculé ( [ + H] ⁺ ) : 746,65)

Partie B - Synthèse, lies co-po|famit oacides greffes avec molécules

ji drophobes

[000440] Les structures des co-polyaminoacides hydrophobes sont représentées da le Tableau 2.

Ri = H ou pyroglutamate

Tableau 2 : liste et structures des co-polyaminoacides greffés avec des molécules hydrophobes Hy.

Exemple Bl : Co-polyaminoacide Bl - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule A2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3650 g/mol

Molécule 5 :

Produit obtenu par couplage entre la molécule A2 est l'ester / -hydroxysuccinimidique de /V-Boc-y-tert-butyl-L-glutamate (BocGlu(OtBu)OSu)

[000441] A une solution de BocG!u(OtBu)OSu ( 1,81 g, 4,52 mmol) dans 30 mL de chloroforme est ajoutée une solution de la molécule A2 (3 g, 3,77 mmol ) et de

Λ/,/V-diisopropyléthy lamine ( DIPEA, 0,49 g, 3,77 mmol ) dans 8 mL de chloroforme.

Après 18 h d'agitation à température ambiante, la phase organique est lavée à l'eau (75 mL) puis avec une solution aqueuse saturée en NaCI (5 x 80 mL), séchée sur a^SC , filtrée et concentrée sous pression réduite. La molécule 5 est obtenue après purification par chromatographie flash (éluant : AcOEt / MeOH).

Rendement : 0,92 g (23 %)

RMIM Ή (CDCh, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,15-2,44 (84H) ; 2,91-3,85 ( 12H) ; 4,25-4,75 (3H) ; 5, 16-5,39 ( 1H ) ; 7,28-7,72 (2H)

LC/MS (ESI) : 1046,0 ; (calculé ( [ +H] ^* ) : 1045,8) Molécule 6 :

[000442] A une solution de molécule 5 (0,92 g, 0,88 mmol) dans 10 m L de dichlorométhane est ajoutée une solution de HCI à 4 N dans le dioxane (2,2 mL, 8, 76 mmol) et le mélange réactionnel est agité pendant 18 h à température ambiante. Le milieu est concentré sous pression réduite, le résidu est repris dans 10 mL d'eau, le pH est ajusté à 8,0 par ajout d'une solution aqueuse de NaOH 1 N puis 10 mL d'eau sont ajoutés. La solution est lyophilisée, le solide blanc obtenu est ensuite solubilisé dans le chloroforme ( 10 mL), concentré sous pression réduite, du toluène ( 10 mL) est ajouté et le produit est à nouveau concentré sous vide, cette opération étant répétée deux fois. Rendement : 0,748 g (97 %)

R N Ή (CDCI Î, ppm) : 0,87 (6H ) ; 1,05-2,88 (66H) ; 3,04-3,83 ( 12 H ) ; 4,41-4,83 (3H) ; 7,74-8,63 (5H )

LC/ S (ESI) : 889,8 ; (calculé ( [M + H] ⁺ ) : 889,7)

Co-polyaminoacide Bl :

[000443] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du γ-benzyl-L-glutamate N- ca rboxyanhydride (29,3 g, 111 mmol ) est solubilisé dans du DMF anhydre ( 116 mL) . Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la molécule 6 (4, 50 g, 5 mmol) en solution dans le chloroforme ( 15 mL) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 17 h, et chauffé à 65 °C pendant 2 h . Le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite jusqu'à une réduction par deux du volume de solvant, puis versé au goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (820 mL) sous agitation. Après 1 h, le précipité blanc est récupéré par filtration, trituré avec du diisopropyléther jusqu'à obtention d'u ne poudre blanche puis séché sous vide à 30 °C pour obtenir un solide blanc. Le solide (24,50 g) est dilué dans du TFA (95 mL), et une solution de HBr à 33 % dans de l'acide acétique (67 mL, 385 mmol) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C. La solution est agitée pendant 2,5 à température ambiante puis coulée goutte-à-goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation (1,2 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, puis lavé deux fois au diisopropyléther (100 mL) et deux fois à l'eau (100 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (600 mL) en ajustant le pH à 7,2 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 900 mL. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, une solution aqueuse de soude 0,1 N, une solution de NaCI 0,9 %, une solution de tampon phosphate, une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 25 g/L théorique, le pH est ajusté à 7,2 et la solution est filtrée sur 0,2 pm. La solution est ensuite filtrée sur filtre 0,45 pm et purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 25 g/L théorique, filtrée sur 0,2 pm et conservée à 2-8 °C.

Extrait sec : 15,5 mg/g

DP (estimé par R ^X H) = 27 donc i = 0,037

La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide Bl est de 4800 g/mol HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : n = 3650 g/mol

Exemple B2 : co-polyaminoacide B2 : poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule A2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3320 g/mol

Co-polyaminoacide B2-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3480 g/mol et de DP 22 issu de la polymérisation du y-benzyl-L- glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine et cappé à l'une de ses extrémités par un groupement acétyle.

[000444] Dans un ballon de 1 L est placé du γ-benzyl-L-glutamate N- carboxyanhydride (Glu(OBzl)-NCA, 189 g, 716 mmol), puis du DMF (425 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (3,29 g, 32,55 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 19 h puis coulé lentement dans du diisopropyléther (6,3 L) sous agitation. Après 3 h d'agitation, le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (420 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissous dans 850 mL de THF. A cette solution sont ajoutés successivement de la DIPEA (42 g, 325 mmol) et de l'anhydride acétique (33 g, 325 mmol ). Après une nuit d'agitation à températu re ambiante, la solution est versée lentement en 1 h dans du diisopropyléther (5 L) sous agitation. Après 1, 5 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (420 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle.

[000445] A une solution du co-polyaminoacide ainsi obtenu (72 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 320 mL) à 4 °C, une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33 % dans l'acide acétique (225 m L, 1,28 mol) est ajoutée goutte à goutte sur une période de 1 h . Le mélange est agité à température am biante pendant 2,5 h, puis coulé au goutte à goutte en 1 h sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (320 mL) puis avec de l'eau (320 mL) .

[000446] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'ea u ( 1 ,4 L) en ajustant le pH à 7,5 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la solution est diluée par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2, 1 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultra filtration contre une solution de NaCl 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout d'une solution d'acide chlorhydrique à 37 % sous agitation jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (320 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn ) 3480 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG), et de degré moyen de polymérisation 22. co-polyaminoacide B2 :

[000447] Le co-polyaminoacide B2-1 de masse molaire moyenne en nombre ( Mn) 3480 g/mol (5,0 g ) est solubilisé dans le DMF (60 mL) à 40°C puis maintenu à cette température. En parallèle, le sel de chlorhydrate de la molécule A2 (881 mg, 1, 11 mmol) est mis en suspension dans du DMF (5,5 mL) et de la triéthylamine (0, 1 g, 1, 11 mmol ) est ajoutée, puis le mélange est agité jusqu'à complète dissolution. A la solution de co- polyaminoacide B2- 1 dans le DM F, de la W-méthyl morpholine (IMMM, 3,73 g, 37 mmol), la solution de molécule A2 puis de la /V-oxyde de 2-hydroxypyridine (HOPO, 410 mg, 3,69 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0°C, puis du /V-(3-diméthylaminopropyl)-/V'-ethylcarbodiimide (EDC, 707 mg, 3,69 mmol) est ajouté et le milieu est remonté à température ambiante durant 4 h . Le milieu réactionnel est filtré sur filtre tissé 0,2 mm, coulé au goutte-à-goutte sur 625 mL d'eau contenant du NaCl à 15 % massique et du HCI (pH 2) sous agitation et à 10 °C, puis la suspension est laissée reposer une nuit à température am biante. Le précipité est collecté par filtration, solubilisé dans 300 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation, puis la solution est filtrée su r filtre 0,45 m. La solution limpide obtenue est pu rifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, une solution de tampon carbonate, une solution de NaCI 0,9 %, une solution de tampon phosphate, une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 S/cm. La solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C.

Extrait sec : 18,7 mg/g

DP (estimé d'après la RMN : 22

D'après la RMN ^ : i = 0,032

La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide B2 est de 3974 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3320 g/mol

Exemple 33 : co-polyaminoacide B3 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule Al et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3100 g/mol

Co-polyami noacide B3- 1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn ) relative 3390 g/mol et de DP 22 issu de la polymérisation du y-benzyl-L- glutamate /V-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine.

[000448] Dans un ballon de 1 L est placé du γ-benzyl -L-glutamate N- carboxyanhydride (Glu(OBzl)-NCA, 200 g, 760 mmol), puis du DMF (450 mL) est introduit. Le mélange est alors agité jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (3,94 g, 34,53 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4° C et température ambiante pendant 3 jours puis chauffé à 80 °C pendant 2 h. La solution est coulée lentement dans du diisopropyléther (6 L) sous agitation. Après 1 h d'agitation, le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (900 mL) puis séché sous pression réduite.

[000449] A une solution du co-polyaminoacide ainsi obtenu (78 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 360 mL) à 4 °C, une solution de HBr à 33 % dans l'acide acétique (250 mL, 1,42 mol ) est ajoutée goutte-à-goutte sur une période de 40 minutes. Le mélange est agité à température am biante pendant 2,5 h, puis coulé au goutte à goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4,2 L) . Après 2 h d'agitation, le mélange est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (350 mL).

[000450] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau ( 1 ,5 L) en ajustant le pH à 7,2 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la solution est diluée par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,4 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 S/cm . La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique à 37 % sous agitation jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 18 h, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (350 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L- glutamique de masse molaire moyenne en nombre (M n) 3390 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG), et de degré moyen de polymérisation 22.

Co-polyaminoacide B3

[000451] Par un procédé similaire à celui utilisé pou r la préparation du co- polyaminoacide B2 et appliqué au co-polyaminoacide B3-1 (5 g) et à la molécule Al ( 1, 11 g, 1 ,50 mmol), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule Al est obtenu .

Extrait sec : 22 mg/g

DP (estimé d'après la RMN ^ ) : 22

D'après la RM N ^J H : i = 0,041

La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide B3 est de 3986 g/mol HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3100 g/mol Exemple B4 : co-polyaminoacide B4 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule A4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3250 g/mol

[000452] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du γ-benzyl-L-glutamate /V-carboxyanhydride (25 g, 95 mmol) est solubilisé dans du DMF anhydre (50 mL). Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la molécule A4 (3,22 g , 4,32 mmol ) en solution dans le DMF ( 10 mL) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours, chauffé à 65 °C pendant 2 h, puis refroidi à température ambiante avant d'être versé au goutte-à-goutte dans du diisopropyléther (850 mL) sous agitation. Après 1 h, le précipité est récupéré par filtration, trituré avec du diisopropyléther jusqu'à obtention d'une poudre puis séché sous vide à 30 °C. Le solide (22 g) est dilué dans du TFA (89 mL), et une solution de H Br à 33 % dans de l'acide acétique (62 mL, 354 mmol ) est alors ajoutée goutte-à-goutte et à 0 °C. La solution est agitée pendant 3,5 h à température ambiante puis coulée goutte à goutte sur un mélange 1 : 1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation ( 1,8 L). A rès 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, puis lavé deux fois au diisopropyléther (90 mL) et deux fois à l'eau (90 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (540 mL) en ajustant le pH à 7,2 par ajout d'une solution aqueuse de soude 1 N . Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pou r obtenir un volume final de 810 ml_. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 μιτι puis est purifié par ultrafiltration con re une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm . La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 25 g/L théorique et filtrée sur 0,2 pm puis stockée à 2-8 °C.

Extrait sec : 23,6 mg/g

DP (esti mé d'après la RMN ^J H) : 22 donc i = 0,045

La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide B4 est de 4030 g/mol HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3250 g/moi

Partie C - Compositions comprenant insuline gtargine, ou insuline qlargine et insuline prandtale, Exemple Cl : Solution d'insuline analogue rapide (Humalog®) à 100 U/mL

[000453] Cette solution est une solution commerciale d'insuline lispro commercialisée par la société ELI LILLY sous le nom de Humalog®. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les excipients dans Humalog'"' sont le méta-crésol (3, 15 mg/mL), le glycérol ( 16 mg/mL), le phosphate de disodium ( 1,88 mg/mL), l'oxide de zinc (pour avoir 0,0197 mg d'ion zinc/mL), I 'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7-7,8) et de l'eau .

Exemple C2 : Solution d'insuline analogue rapide (NovoLog®) à 100 U/mL

[000454] Cette solution est une solution commerciale d'insuline aspart commercialisée par la société NOVO NORDISK sous le nom de NovoLog® aux Etats-Unis d'Amérique et Novorapid® en Europe. Ce produit est une insuline analogue rapide. Les exci pients de Novolog® sont la glycérine ( 16 mg), le phénol ( 1,50 mg/mL), le méta-crésol (1,72 mg/mL, du zinc ( 19,6 pg/mL), le phosphate de disodiu m dihydrate ( 1,25 mg/mL), le chlorure de sodium (0,5 mg/mL), I'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7,2-7,6) et de l'eau .

Exemple C3 : Solution d'insuline analogue rapide (Apidra "') à 100 U/mL

[000455] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glulisine commercialisée par la société SANOFI sous le nom d 'Apidra'"'. Ce produit est une i nsuline analogue rapide. Les excipients d'Apidra"" sont le méta-crésol (3, 15 mg/mL), la trométhamine (6 mg/mL), le chlorure de sodium (5 mg/m L), le polysorbate 20 (0,01 mg/mL), I'hydroxyde de sodium et l 'acide chlorhydrique pour l 'ajustement du pH (pH 7,3) et de l'eau . Exemple C4 : Solution d'insuline analogue lente (Lantus®) à 100 U/mL

[000456] Cette solution est une solution commerciale d'insuline glargine commercialisée par la société SANOFI sous le nom de Lantus " . Ce produit est une insuline analogue lente. Les excipients dans Lantus® sont le chlorure de zinc (30 pg/mL), le méta-crésol (2,7 mg/mL), le glycérol (85%) (20 mg/mL), l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 4) et de l'eau.

Exemple C5 : Solution d'insuline humaine (ActRapid®) à 100 UI/mL

[000457] Cette solution est une solution commerciale d'insuline humaine de NOVO NORDISK vendue sous le nom d 'ActRapid*. Ce produit est une insuline humaine. Les excipients d'ActRapid® sont le chlorure de zinc, le glycérol le méta -crésol, l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 6,9-7,8) et de l'eau. Exemple C6 : Solution d'insuline humaine (Umuline rapide *) à 100 UI/mL

[000458] Cette solution est une solution commerciale d'insuline humaine de ELI LILLY vendue sous le nom d 'Umuline rapide *. Ce produit est une insuline humaine. Les excipients d 'Umuline Rapide® sont le glycérol, le méta-crésol, l'hydroxyde de sodium et l'acide chlorhydrique pour l'ajustement du pH (pH 7,0-7,8) et de l'eau.

Exemple C7 : Solution de GLP- 1 RA dulaglutide (Tmlicity®) à 3 mg/mL

[000459] Cette solution est une solution de dulaglutide commercialisée par la société ELI LILLY sous le nom de Trulicity*. Les excipients dans Tmlicity® sont l'acide citrique anhydre (0,14 mg/mL), le mannitol (46,4 mg/mL), le polysorbate 80 ( 0,20 mg/mL), le citrate trisodique dihydrate (2,74 mg/m L) et l 'eau .

Exemple C8 : Solution de GLP- 1 RA exenatide (Byetta®) à 0,25 mg/mL

[000460] Cette solution est u ne solution d'exenatide commercialisée par la société ELI LILLY sous le nom de Byetta®. Les excipients dans Byetta® sont le méta-crésol (20 mM), le mannitol, l'acide acétique glacial, l 'acétate sodique trihydrate et de l 'eau . a) Compositions comprenant de l 'insuline glargine

Procédé de préparation CA1 : Préparation d'une composition diluée co-polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL à pH 7, 1, suivant un procédé utilisant l'insuline glargine sous forme liquide (en solution) et un co-polyaminoacide sous forme liquide (en solution) .

[000461 ] A u ne solution mère de co-polyaminoacide à pH 7, 1 sont ajoutées des solutions concentrées de m-crésol et de glycéri ne de manière à obtenir une solution de co-polyaminoacide de concentration Cmère co-poiyaminoacide/excipients (mg/mL). La quantité d'excipients ajoutée est ajustée de manière à obtenir une concentration de m-crésol de 35 m M et glycérine de 184 mM dans la composition co-polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL à pH 7, 1.

[000462] Dans un pot stérile, un volume Vmsuime glargine d'une solution commerciale d'insuline glargine commercialisée sous le nom de Lantus® à une concentration de 100 U/mL est ajouté à un volume Vmère co-poiyamin∞cide excipients d'une solution de co- polyaminoacide à la concentration Cmère co- oiyaminoacide /excipients (mg/m L) de manière à obtenir une composition diluée co-polyaminoacide Cco-poiyaminoacide dilué (mg/mL)/insuline glargine 50 U/mL à pH 7, 1. Un trouble apparaît. Le pH est ajusté à pH 7, 1 par ajout de IMaOH concentrée et la solution est placée en statique dans une étuve à 40°C pendant 2h jusqu'à solubilisation complète. Cette solution visuellement limpide est placée à

+4°C. Procédé de préparation CA2 : Préparation d'une composition co-polyaminoacide/insuline glargine concentrée à pH 7, 1 à l'aide d'un co-polyaminoacide, suivant un procédé de concentration d'une composition diluée.

[000463] Une composition co-polyaminoacide/insuline glargine 50 U/mL à pH 7, 1 décrite dans l'exemple CAl est concentrée par ultrafiltration sur une membrane 3 kDa en cellulose régénérée (Amicon® Ultra- 15 commercialisée par la société illipore) . A l'issue de cette étape d'ultrafiltration, le rétentat est limpide et la concentration en insuline glargine dans la composition est déterminée par chromatographie en phase inverse ( RP-HPLC). La concentration en insuline glargine dans la composition est ensuite ajustée à la valeur souhaitée par dilution dans une solution d'excipients m- crésol/giycérine de manière à obtenir une concentration finale en m-crésol de 35 mM et une osmolarité de 300 mOsm/kg . Le pH est mesuré et ajusté à pH 7, 1 par ajout de NaOH et HCI concentré. Cette solution à pH 7, 1, visuellement limpide, présente une concentration en insuline glargine Cmsuiine glargine (U/mL) et une concentration en co- polyaminoacide Cco-polyaminoacide (mg/mL) = Cco-polyamlnoacide dilué (mg/mL) C insuline glargine (U/mL) / 50 (U/mL).

[000464] Selon ce procédé de préparation CA2, des compositions co- polyaminoacide/insuline glargine ont été préparées par exemple avec des concentrations en insuline glargine de 200 U/mL et 400 U/mL. Exemple CA3 : Préparation de compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL à pH 7, 1.

[000465] Des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL sont préparées selon le procédé décrit dans l 'exemple CA2 de manière à obtenir une concentration en insuline glargine Cinsuiine glargine = 200 U/mL et une concentration en co- polyaminoacide Cco-poiyammoacide (mg/mL). Ces compositions sont présentées dans le Tableau 3.

Tableau 3 : Composition d'insuline glargine (200 U/mL) en présence de co- polyaminoacide. b) Compositions comprenant de l'insuline glargine et de l'insuline lispro Procédé de préparation CB1 : Préparation d'une composition diluée co-polyaminoacide / insuline glargine 43 ( U/mL) / insuline lispro 13,5 (U/mL)

[000466] A U n VOl ume Vco-polyaminoaclde / insuline glargine dilué de la Composition diluée CO- polyaminoacide / insuline glargine 50 U/mL à pH 7, 1 décrite dans l'exemple CA1 est ajoutée un volu me Vinsuime ns o d'une solution commerciale d'insuline lispro Humalog® à 100 U/mL et de l'eau de manière à obtenir une composition co-polyaminoacide / insuline glargine 43 (U/mL) / insuline lispro 13,5 (U/mL).

Procédé de préparation CB2 : Préparation d'une composition co-polyaminoacide / insuline glargine / insuline lispro concentrée à pH 7,1

[000467] Une composition co-polyaminoacide / insuline glargine 43 (U/mL) / insuline lispro 13,5 (U/mL) décrite dans l'exemple CB1 est concentrée par ultra filtration sur une membrane 3 kDa en cellulose régénérée (Amicon® Ultra-15 commercialisée par la société ILLIPORE) . A l'issue de cette étape d'ultrafiltration, le retentât est limpide et la concentration en insuline glargine dans la composition est déterminée par chromatographie en phase inverse (RP-HPLC). Les concentrations en insuline glargine et insuli ne lispro dans la composition sont ensuite ajustées à la valeur souhaitée par dilution dans une solution d'excipients m -crésol/glycérine de manière à obtenir une concentration finale en m-crésol de 35 mM et une osmolarité de 300 mOsm/kg . Le pH est mesuré et ajusté si nécessaire à pH 7, 1 par ajout de NaOH et HCI concentré. Cette solution à pH 7, 1 , visuellement limpide, présente une concentration en insuline glargine Cinsu!ine glargine (U/mL), ΙΙΠΘ Concentration en insuline lisprO Cinsuline ilspro = Cinsullrte glargine X

0,33 et une concentration en co-polyaminoacide Cco- otyaminoacide (mg/mL) = Cco-poiyaminoacide dilué (mg/mL) X Cinsullrte glargine (U/mL) / 50 (U/mL) .

Exemple CB3 : Préparation de compositions co-polyaminoacide / insuline glargine 200 U/mL / insuli ne lispro 66 U/mL à pH 7, 1

[000468] Des compositions co-polyaminoacide / insuline glargine 200 U/mL / insuline lispro 66 U/mL sont préparées selon le procédé décrit dans l'exemple CB2 de manière à obtenir une concentration en insuli ne glargine Cmsuiine giargme = 200 U/mL, une concentration en insuline lispro Cmsuiine ns ro = 66 U/mL et une concentration en co- polyaminoacide Cco-poiyaminoacide (mg/mL) . Ces compositions sont présentées dans le Tableau 4.

Tableau 4 : Composition d'insuline glargine (200U/mL) et d'insuline lispro (66U/mL) en présence de co-polyaminoacide.

Partie P - Résyltats,

Mise en évidence de la stabilité physique des compositions selon l'invention par l'étude de compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL et de compositions co-polyaminoacide/insuline glargine 200 U/mL / lispro 66 U/mL.

Exemple Dl : Stabilité accélérée à 25°C en dynamique.

[000469] 3 vials de 3 mL remplis avec 1 mL de composition co-polyaminoacide/ insuline glargine ou co-polyaminoacide/insuline glargine/insuline lispro sont placés verticalement sur un agitateur orbital. L'agitateur est placé dans une étuve à 25°C et les vials sont soumis à une agitation de 250 rpm . Les vials sont inspectés visuellement de manière quotidienne/hebdomadaire afin de détecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidité. Cette inspection est réalisée selon les recommandations de la Pharmacopée Européenne ( EP 2.9.20) : les vials sont soumis à un éclairage d'au moins 2000 Lux et sont observés face à un fond blanc et un fond noir. Le nombre de jou rs de stabilité correspond à la durée à partir de laquelle au moins 2 vials présentent des particules visibles ou sont turbides.

[000470] Ces résultats sont en accord avec la pharmacopée US (USP < 790 >).

[000471 ] Les résultats de stabilité accélérée (obtenus avec différentes compositions) sont présentés dans le Tableau 5 et le Tableau 6.

Tableau 6 : résultats des stabilités des compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) à 25°C en dynamique (sous agitation à 250 rpm) .

Exemple p2 : Solubilisation/précipitation,

Exemple CA4 : Précipitation de l'insuline glaroine dans des compositions co- polyaminoacide / insuline glargine à 200 U/mL

[000472] 1 m L de solution de co-polyaminoacide/insuline glargi ne préparée à l'exemple CA3 est ajouté dans 2 mL d'une solution de PBS contenant 20 mg/mL de BSA (bovine sérum albumin ). Le mélange PBS/BSA simule la composition du milieu sous- cutané. Un précipité apparaît.

[000473] Une centrifugation à 4000 trs/min est effectuée pour séparer le précipité du surnageant. Ensuite l'insuline glargine est dosée dans le surnageant par RP-HPLC. Il en résulte que l'insuline glargine se retrouve majoritairement sous une forme précipitée. 000474 Les résultats sont présentés dans le Tableau 7

Tableau 7 : Compositions co-polyaminoacide /insuline glargine (200 U/mL) ; solubilisation/précipitation de l'insuline glargine.

Exemple CB4 : Précipitation de l'insuline glargine dans les compositions co- polyaminoacide / insuline glargine / insuline lispro à 200/66 U/mL

[000475] 1 mL de solution de co-polyaminoacide /insuline glargine/insuline lispro préparée à l'exemple CB3 est ajouté dans 2 mL d'une solution de PBS contenant 20 mg/mL de BSA (bovine sérum albumin). Le mélange PBS/BSA simule la composition du milieu sous-cutané. Un précipité apparaît.

[000476] Une centrifugation à 4000 trs/min est effectuée pour séparer le précipité du surnageant. Ensuite l'insuline glargine est dosée dans le surnageant par RP-HPLC. Il en résulte que l'insuline glargine se retrouve majoritairement sous une forme précipitée. Les résultats sont présentés dans le Tableau .

Tableau 8 : Compositions co-polyaminoacide/insuline glargine (200 U/mL) / insuline lispro (66 U/mL) ; solubilisation et précipitation d'insuline glargine. Exempte D3 : Préparation d'une composition diluée co-polyaminoacide / insuline glargine 65 U/mL à pH 7,1. [000477] A une solution mère de co-polyaminoacide à pH 7 sont ajoutées des solutions concentrées de m-crésol et de glycérine de manière à obtenir une solution de co- polyaminoacide de concentration Guère co-polyaminoacide /excipients (mg/mL). La quantité d'excipients ajoutée est ajustée de manière à obtenir une concentration de m-crésol de 35 mM et glycérine de 184 mM dans la composition co-polyaminoacide / insuline glargine 65 U/mL à pH 7,1.

[000478] Dans un pot stérile, un volume Vinsuime glargine d'une solution commerciale d'insuline glargine commercialisée sous le nom de Lantus® à une concentration de 100 U/mL est ajouté à un volume Vmère co-poiyaminoacide /excipients d'une solution de co- polyaminoacide à la concentration Cmère co-poiyaminoacide /excipients (mg/mL) de manière à obtenir une composition diluée co-polyaminoacide C _œ -polyaminoacide dilué (mg/mL) / insuline glargine 65 U/mL à pH 7,1. Un trouble apparaît. Le pH est ajusté à pH 7,1 par ajout de NaOH concentrée et la solution est placée en statique dans une étuve à 40°C pendant 2h jusqu'à solubilisation complète. Cette solution visuellement limpide est placée à +4°C.

Exemple D4 : Précipitation d'une composition co-polyaminoacide / insuline glargine 65 U/mL à pH 7,1, en faisant varier la concentration d'albumine

[000479] Dans une cuve UV jetable sont introduits respectivement 0,3 mL d'une solution de BSA (Bovine sérum Albumine, sérum albumine bovine) dans un tampon PBS à pH 7,4 (Phosphate Buffer Saline, tampon phosphate salin) et 1 mL de composition diluée co-polyaminoacide / insuline glargine 65 U/mL pH 7,1 de manière à obtenir un mélange contenant 50 U/mL d'insuline glargine, une concentration d'albumine CBSA (mg/mL) dans un tampon PBS. Plusieurs solutions de BSA dans un tampon PBS de concentrations variables sont préparées de manière à faire varier la concentration d'albumine dans le mélange final entre 1 et 12,7 mg/mL (1 ; 2,9 ; 3,9 ; 6,8 ; 9,7 ; 12,7 mg/mL) et une concentration de sel physiologique par l'intermédiaire du tampon PBS.

[000480] Après ajout de la solution de BSA dans le tampon PBS le mélange est rapidement homogénéisé par quelques allez-retour de pipette. Une heure après le mélange, une mesure d'absorbance à 500 nm est réalisée à l'aide d'un spectrophotomètre UV visible JASCO V-530. [000481 ] La mesure d'absorbance à 500 nm permet d 'évaluer la turbité du mélange émanant de la précipitation de l'insuline glargine. La turbidité augmente en fonction de la concentration d'albumine pour atteindre un plateau traduisant la précipitation complète de l'insuli ne glargine.

[000482] La concentration critique d'albumine permettant u ne précipitation quantitative est définie comme la concentration d'albumine pour laquelle la valeur d'absorbance à 500 nm atteint 80% de l'absorbance mesurée au plateau .

[000483] On constate que dans les compositions de l'invention, la quantité de BSA critique est inférieure.

[000484] Les résultats sont reportés dans le Tableau .

Tableau 9 : concentration d'albumine critique (mg/ml ) pour 80% de précipitation à lh (insuline glargine à 50 U/ml). Exemple D5 : Exemple d'étude de la pharmacodynamie chez le chien

[000485] Des études chez le chien ont été conduites dans l'objectif d'évaluer la pharmacodynamie de l'insuline après administration de la composition de co- polyaminoacide Bl et d'insulines (composition CB3-1).

[000486] Les effets hypoglycémiants de cette composition ont été comparés à ceux d'injections simultanées, mais séparées, d'insuline glargine ( Lantus®) (pH 4) et d'insuline lispro (Humalog®) dans les proportions 75% de glargine / 25% de lispro (dose/dose) .

[000487] Dix animaux, qui ont été mis à jeun depuis 18 heures environ, ont été injectés au niveau du cou, au-dessus de la région interscapulaire, à la dose de 0,67 U/kg . Dans l'heure précédant l 'injection 3 prélèvements sont réalisés afin de déterminer le niveau basai de glucose. La glycémie est ensuite déterminée pendant 24 h au moyen d'un glucomètre. [000488] Les courbes de pharmacodynamie moyenne du glucose exprimée en pourcents de déviation du niveau basai sont représentées dans la Figure 1.

[000489] Les résultats de pharmacodynamie obtenus avec les administrations simultanées et séparées de l'insuline lispro (Humalog® - exemple Cl ) et l'insuline glargine (Lantus® ^~ exemple C4) en comparaison avec la composition CB3-1 sont présentés sur la figu re 1. L'activité hypoglycémiante de la composition CB3- 1 est biphasique. La première phase rapide est définie par une décroissance marquée de la glycémie durant environ 60 minutes caractéristique de l'effet rapide de l'insuline lispro. Cette première phase est également visible sur la double injection glargine / lispro, indiquant que la composition CB3- 1 selon l'invention ne modifie pas le ca ractère rapide de l'insuline lispro. Après environ 60 minutes, la glycémie remonte jusqu'à 3 heures avant une seconde phase plus lente, caractérisée par une activité hypoglycémiante moins marquée et prolongée jusqu'à 18-20 heures post-injection . Cette seconde phase basale est caractéristique de l'effet basai de l'insuline glargine, également visible sur la double injection, indiquant que cet effet basai est bien conservé avec la composition CB3- 1.