SUZUKI MASAAKI
TSUKADA HIDEO
HAMAMATSU PHOTONICS KK (JP)
DOI HISASHI
SUZUKI MASAAKI
TSUKADA HIDEO
| WO2003082185A2 | 2003-10-09 | |||
| WO2006092902A1 | 2006-09-08 | |||
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See also references of EP 2228363A4
| 式(I): [前記式(I)中、X 1 は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基であり、nは、1~8の整数である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。] [前記式(II)中、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか他方は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。] [前記式(III)中、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一つは、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。] |
| 式(I)で表わされる化合物またはその塩。 前記式(I)中、X 1 は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基であり、nは、1~8の整数である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。 |
| 式(II)で表わされる化合物またはその塩。 前記式(II)中、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか他方は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。 |
| 式(III)で表わされる化合物またはその塩。 前記式(III)中、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一つは、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わされる基である。 前記式(i)中、R 1 は、同一または異なって、C 1-6 アルキル基である。 前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基のいずれか一つである。 |
| 式(I)で表わされる化合物またはその塩を製造するための式(IV)で表わされる化合物またはその塩。 |
| 式(II)で表わされる化合物またはその塩を製造するための式(V)で表わされる化合物またはその塩。 |
| 式(III)で表わされる化合物またはその塩を製造するための式(VI)で表わされる化合物またはその塩。 |
| (i)標識ヨウ化メチルと有機スズ化合物とをパラジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩とハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属との存在下でDMF中で反応させ、標識されたメチルを有する化合物を得る工程、または 標識ヨウ化メチルと有機ホウ素化合物とを、パラジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩の存在下でDMF中で反応させ、標識されたメチルを有する化合物を得る工程と、 (ii)前記標識されたメチルを有する化合物を、ヒトまたはヒトを除く哺乳類に投与する工程と、 (iii)前記ヒトまたはヒトを除く哺乳類における前記標識されたメチルを有する化合物の挙動をPETを用いてモニターする工程とを含む 創薬のためのPETを用いるスクリーニング方法。 |
| 前記有機スズ化合物が、X 1 が式(ii)で表わされる基である請求項2に記載の化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか他方は、式(ii)で表わされる基で表わされる基である請求項3に記載の化合物、ならびに、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一つは、式(ii)で表わされる基である請求項4に記載の化合物からなる群から選択される1以上である請求項8に記載のスクリーニング方法。 |
| 前記有機ホウ素化合物が、X 1 が式(i)で表わされる基である請求項2に記載の化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか他方は、式(i)で表わされる基で表わされる基である請求項3に記載の化合物、ならびに、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一つは、式(i)で表わされる基である請求項4に記載の化合物からなる群から選択される1以上である請求項8に記載のスクリーニング方法。 |
| 式(VII): で表わされる化合物およびその塩、式(VIII): で表わされる化合物およびその塩、ならびに式(IX): で表わされる化合物およびその塩からなる群から選択される1以上を含む創薬のためのPETスクリーニング用分子プローブ。 |
| 式(VII)で表わされる化合物またはその塩。 |
| 式(VIII)で表わされる化合物またはその塩。 |
| 式(IX)で表わされる化合物またはその塩。 |
| (i)請求項11に記載のPETスクリーニング用分子プローブを、ヒトまたはヒトを除く哺乳類に投与する工程と、 (ii)前記ヒトまたはヒトを除く哺乳類における前記化合物の挙動をPETを用いてモニターする工程とを含む 創薬のためのPETを用いるスクリーニング方法。 |
本発明は、創薬のためのPETスクリーニン 用分子プローブを製造するためのキットに するものである。詳細には、放射性同位元 標識化合物を製造するための化合物を含む 創薬のためのPETスクリーニング用分子プロ ブを製造するためのキット、前記標識化合 を製造するための化合物、前記標識化合物 製造するための化合物を製造するための中 体、前記標識化合物を製造するための化合 を用いる、創薬のためのPETを用いるスクリ ニング方法に関する。
医薬品の開発には、現在でも膨大な数の 合物の製造、インビトロ試験、インビボ試 等が必要で、通常、10年以上の長い時間と 大な開発費が必要である。この開発にかか 時間と費用を削減するため、最近、陽電子 射断層画像撮影法(PET)等の分子イメージング 技術を導入することが検討されている。この PETは、哺乳類などの生体に短寿命放射核種を 含む化合物を投与し、その化合物(核種)を追 することにより、標的臓器や標的分子への 記化合物の到達度などの薬剤動態を、高精 かつ定量的に画像化できる唯一の方法であ 。このPETでは、極微量の化合物を用いて短 間に薬物動態を知ることができるため、前 医薬品の開発において、薬物候補化合物を クリーニングする方法として、有用である また、PETでは生体内での薬物動態を観察し いるため、インビトロ試験では有効な活性 あったにもかかわらず、インビボ試験では 性が見られない、薬物動態に問題がある等 問題点も低減することができる。以上より 医薬品の開発の早い段階でPETを用いること 可能であれば、医薬品の開発にかかる時間 よび費用を低減することが期待できる。
医薬品の開発にPETを用いるには、PET用の短 命放射核種を含む化合物の開発が必要であ 。例えば、下記式の化合物([ 11 C]DAA1106)は、分子中の酸素原子と結合するメ ル基の炭素原子が短寿命放射核種 11 Cに置き換えられている(例えば、特許文献1参 照)。また、下記式の化合物([ 11 C]PK11195)は、分子中の窒素原子と結合するメ ル基の炭素原子が、短寿命放射核種 11 Cに置き換えられている(例えば、非特許文献1 参照)。前記2つの化合物の非標識体は、それ れDAA1106およびPK11195と呼ばれ、末梢型ベン ジアゼピン受容体リガンドとして作用する とが知られている。末梢型ベンゾジアゼピ 受容体は、末梢細胞、血液細胞、脳内のグ ア細胞などに見られ、主にミトコンドリア 膜に存在している。末梢型ベンゾジアゼピ 受容体は、虚血、薬物依存、外的要因など よる脳の損傷部位に多く発現していること 報告されているが、未解明な点が多い。
また、下記式の化合物[ 18 F]-(30)は、ギンコライドBの水素原子の1つを 18 Fに置き換えられている(例えば、非特許文献2 および非特許文献3参照)。なお、ギンコライ Bは、血小板活性化因子(PAF)受容体アンタゴ ストとして作用することにより血小板凝集 害が引き起こされ、その結果、脳血液循環 善作用を有することが知られている。PAF受 体については、アルツハイマー病、多発性 梗塞性痴呆症患者の血小板上におけるPAF受 体の数が健常者に比べて減少していること アルツハイマー病患者の血小板上におけるP AF受容体の数と認知機能が比例している点な から、PAFおよびPAF受容体の脳内での役割や 脳機能疾患との関連を解明することが待ち まれている。
しかしながら、前記のようなPET用の短寿 放射核種を含む化合物を用いてPETを用いて 体内での薬物動態を観察すると、これらの 合物が代謝に不安定であるため、代謝され 分解した化合物(核種)を追跡している恐れ あることを本発明者らは見出した。また、 合物によっては脳血液関門を透過する能力 低下し、脳内での役割等を研究するには適 ない恐れがあることも本発明者らは見出し 。そのような分解化合物の誤った追跡や不 切な化合物を追跡することを避けるため、PE T用の短寿命放射核種を含む化合物を製造す ための、創薬のためのPETスクリーニング用 子プローブを製造するためのキットの提供 目的とする。
本発明は、式(I):
[前記式(I)中、X 1
は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わ
れる基であり、nは、1~8の整数である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。]
で表わされる化合物およびその塩、式(II):
[前記式(II)中、X 2
およびX 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(i)で表わされる基または式(ii)で
わされる基である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。]
で表わされる化合物およびその塩、ならび
式(III):
[前記式(III)中、X 4
、X 5
およびX 6
のいずれか二つは水素原子であり、残りの一
つは、式(i)で表わされる基または式(ii)で表
される基である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。]
で表わされる化合物およびその塩からな 群から選択される1以上含む創薬のためのPET スクリーニング用分子プローブを製造するた めのキットである。
本発明は、創薬のためのPETスクリーニン 用分子プローブを製造するためのキットを 供することができる。
本発明の創薬のためのPETスクリーニング用
子プローブを製造するためのキットは、非
に短時間で完了するメチル化反応を利用す
ことにより、実現したものである。このよ
なプローブにより、PET用の寿命が短い放射
核種を含む化合物をスクリーニングの場で
便に製造することが可能になった。前記キ
トの有用性を、以下の実施形態において実
する。例えば、PETスクリーニング用分子プ
ーブとして、前記のような様々な活性が知
れている化合物DAA1106およびPK11195、ギンコ
イドBのベンジル誘導体[29]について例示する
。なお、ギンコライドBのベンジル誘導体[29]
、天然のギンコライドBと比較してPAF受容体
に約10倍強く結合することが知られていた。
本発明のキットに、標識ヨウ化メチルと パラジウム(0)錯体、配位子、炭酸塩、任意 ハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金 の存在下に短時間で反応させると、以下の うなPETスクリーニング用分子プローブを製 することが可能である。なお、前記のよう 非常に短時間で完了するメチル化反応とし は、例えば有機スズ化合物とヨウ化メチル をパラジウム錯体存在下に反応させ、有機 合物にメチル基を導入する方法が知られて る(例えば、Massaaki Suzukiら、Chem Eur. J.、199 7年、第12号、p.2039-2042参照)。
本発明において、C 1-6 アルキル基とは、炭素数1~6のアルキル基を意 味し、例えば、メチル、エチル、n-プロピル i-プロピル、n-ブチル、i-ブチル、sec-ブチル 、t-ブチル、n-ペンチル、i-ペンチル、sec-ペ チル、t-ペンチル、2-メチルブチル、n-ヘキ ル、1-メチルペンチル、2-メチルペンチル、3 -メチルペンチル、4-メチルペンチル、1-エチ ブチル、2-エチルブチル、1,1-ジメチルブチ 、2,2-ジメチルブチル、3,3-ジメチルブチル および1-エチル-1-メチルプロピル等を挙げる ことができる。前記C 1-6 アルキル基は、炭素数4~6のアルキル基が好ま しい。
また、本発明において塩とは、例えばナ リウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、 ルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土 金属塩、アンモニウム塩などの無機塩基と 塩、及びトリエチルアミン、ピリジン、ピ リン、エタノールアミン、トリエタノール ミン、ジシクロヘキシルアミン、N,N'-ジベ ジルエチレンアミンなどの有機アミン塩、 び塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸などの 機酸塩、及びギ酸、酢酸、トリフルオロ酢 、マレイン酸、酒石酸などの有機カルボン 塩、及びメタンスルホン酸、ベンゼンスル ン酸、p-トルエンスルホン酸などのスルホン 酸付加塩、及びアルギニン、アスパラギン酸 、グルタミン酸などの塩基性又は酸性アミノ 酸といった塩基との塩又は酸付加塩が挙げら れる。
また、本発明における化合物及びその塩 、溶媒和物の形をとることもありうるが、 れも本発明の範囲に含まれる。溶媒和物と ては、好ましくは、水和物及びエタノール 物が挙げられる。
本発明のキットでは、さらに標識ヨウ化メ ルを含むのが好ましい。前記標識ヨウ化メ ルとしては、ヨウ化メチルのメチル基のい れか1以上の原子が標識原子で置き換えられ たものが挙げられる。具体的には、前記標識 ヨウ化メチルの例としては、ポジトロン放出 核種で標識されたものとして 11 CH 3 I、 18 FCH 2 I、 76 BrCH 2 I、その他の炭素同位体で標識されたものと て 13 CH 3 I、 14 CH 3 I等が挙げられる。とくにポジトロン放出核 で標識された前記標識ヨウ化メチルの使用 はナノグラムレベル(ナノモルレベル)である ため、本発明のキットに含まれる前記式(I)で 表わされる化合物、式(II)で表わされる化合 、式(III)で表わされる化合物およびこれらの 化合物の塩からなる化合物の通常の使用量は 、1当量以上、好ましくは過剰量である。
本発明のキットでは、さらにパラジウム(0) 体を含むのが好ましい。前記パラジウム(0) 体としては、本発明のキットに含まれる前 式(I)で表わされる化合物、式(II)で表わされ る化合物、式(III)で表わされる化合物および れらの化合物の塩と、標識ヨウ化メチルと カップリング反応を触媒するものであれば 定されず、どのようなパラジウム(0)錯体で ってもよい。そのようなパラジウム(0)錯体 しては、例えば、X 1 が式(i)で表わされる基である式(I)で表わされ る化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(i)で表わされる基で表わされる基 である式(II)で表わされる化合物、ならびに X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(i)で表わされる基である式(III)で表 される化合物からなる群から選択される1以 上を含むキットの場合、Pd 2 (dba) 3 、Pd 2 (dba) 3 CHCl 3 、Pd[P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 ] 2 、Pd[P(tert-C 4 H 9 ) 3 ] 2 等が挙げられる。また、そのようなパラジウ ム(0)錯体としては、例えば、X 1 が式(ii)で表わされる基である式(I)で表わさ る化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(ii)で表わされる基で表わされる である式(II)で表わされる化合物、ならびに X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(ii)で表わされる基である式(III)で表 わされる化合物からなる群から選択される1 上を含むキットの場合、Pd 2 (dba) 3 、Pd 2 (dba) 3 CHCl 3 、Pd[P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 ] 2 、Pd[P(tert-C 4 H 9 ) 3 ] 2 等が挙げられる。ポジトロン放出核種で標識 された前記標識ヨウ化メチルの使用量はナノ グラムレベル(ナノモルレベル)である場合、 記パラジウム(0)錯体の使用量、および、本 明のキットに含まれる前記式(I)で表わされ 化合物、式(II)で表わされる化合物、式(III) 表わされる化合物およびこれらの化合物の からなる化合物の使用量は、前記標識ヨウ メチルに対して1当量以上、例えば過剰量で あってもよい。
本発明のキットで、さらにパラジウム(0)錯 を含む場合、配位子をさらに含むのが好ま い。前記配位子としては、本発明のキット 含まれる前記式(I)で表わされる化合物、式( II)で表わされる化合物、式(III)で表わされる 合物およびこれらの化合物の塩と、標識ヨ 化メチルとのカップリング反応を触媒する ラジウム(0)錯体と共に用いられるものであ ば限定されず、どのような配位子であって よい。そのような配位子としては、例えば パラジウム(0)錯体がPd 2 (dba) 3 である場合、P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 等が挙げられる。また、前記配位子の量は、 前記パラジウム(0)錯体1当量に対し、例えば 剰であり、2~8当量が好ましく、4当量がより ましい。
本発明のキットで、さらにパラジウム(0) 体を含む場合、ハロゲン化銅またはハロゲ 化アルカリ金属をさらに含むのが好ましい 前記ハロゲン化銅としては、CuCl、CuBr等が げられる。また、前記ハロゲン化銅の量は 前記パラジウム(0)錯体に含まれるパラジウ 原子に対し、例えば2当量以上に相当する量 ある。前記ハロゲン化アルカリ金属として 、CsF等が挙げられる。また、前記ハロゲン アルカリ金属の量は、前記パラジウム(0)錯 に含まれるパラジウム原子に対し、例えば2 当量以上に相当する量である。
本発明のキットで、さらにパラジウム(0) 体を含む場合、炭酸塩をさらに含むのが好 しい。前記炭酸塩としては、炭酸カリウム 炭酸セシウム、リン酸カリウム等が挙げら 、中でも炭酸カリウムが好ましい。また、 記炭酸カリウムの量は、前記パラジウム(0) 体に含まれるパラジウム原子に対し、例え 2当量以上に相当する量である。
本発明のキットは、例えば、前記式(I)で わされる化合物、式(II)で表わされる化合物 、式(III)で表わされる化合物およびこれらの 合物の塩からなる群から選択される1以上と 、標識ヨウ化メチルと、パラジウム(0)錯体と 、配位子と、任意にハロゲン化銅またはハロ ゲン化アルカリ金属と、炭酸塩と、さらに溶 剤とを含んでもよい。前記溶剤としては、例 えばDMF、DMFおよび水との混合物等が挙げられ る。
また、本発明は、式(I)で表わされる化合物
たはその塩である。
前記式(I)中、X 1
は、式(i)で表わされる基または式(ii)で表わ
れる基であり、nは、1~8の整数である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。
このような式(I)で表わされる化合物また の塩は、血液脳関門通過能に優れ、かつ短 命放射核種を有する化合物に変換されるこ ができる。
また、本発明は、式(II)で表わされる化合物
またはその塩である。
前記式(II)中、X 2
およびX 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(i)で表わされる基または式(ii)で
わされる基である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。
このような式(II)で表わされる化合物また その塩は、代謝に安定な部位に短寿命放射核 種を有する化合物に変換されることができる 。
また、本発明は、式(III)で表わされる化合
またはその塩である。
前記式(III)中、X 4
、X 5
およびX 6
のいずれか二つは水素原子であり、残りの一
つは、式(i)で表わされる基または式(ii)で表
される基である。
前記式(i)中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。
このような式(III)で表わされる化合物ま その塩は、代謝に安定な部位に短寿命放射 種を有する化合物に変換されることができ 。
また、本発明は、式(I)で表わされる化合物
たはその塩を製造するための式(IV)で表わさ
れる化合物またはその塩である。
前記式(IV)中、Y 1 は、ハロゲン原子であり、nは、1~8の整数で る。
前記式(I)中、X 1 が式(i)で表わされる化合物は、式(I-i)で表わ れる。そして、前記式(I-i)で表わされる化 物またはその塩は、前記式(IV)で表わされる 合物またはその塩を用いて、例えば(SnR 1 3 ) 2 およびPd(PPh 3 ) 4 存在下、以下のようにして製造される。
前記式(IV)中、Y 1
は、ハロゲン原子であり、nは、1~8の整数で
る。
前記式(I-i)中、X 1’
は、式(i)で表わされる基である。
前記式(I)中、X 1 が式(ii)で表わされる化合物は、式(I-ii)で表 される。そして、前記式(I-ii)で表わされる 合物またはその塩は、前記式(IV)で表わされ 化合物またはその塩を用いて、例えばイシ マらの文献(Ishiyama. T. et al. J. Org. Chem. 6 0, pp 7508, 1995.)に記載されているように、ア ルコキシジボラン、PdCl 2 (dppf)、および酢酸カリウムの存在下、以下の ようにして製造される。
前記式(IV)中、Y 1
は、ハロゲン原子であり、nは、1~8の整数で
る。
前記式(I-ii)中、X 1’’
は、式(ii)で表わされる基である。
また、本発明は、式(II)で表わされる化合物
またはその塩を製造するための式(V)で表わさ
れる化合物またはその塩である。
前記式(V)中、Y 2 およびY 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、ハロゲン原子である。
前記式(II)中、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は式(i)で表わされる基である化合物は、 前記式(II-i)で表わされる。そして式(II-i)で表 わされる化合物またはその塩は、前記式(V)で 表わされる化合物またはその塩を用いて、例 えば(SnR 1 3 ) 2 およびPd(PPh 3 ) 4 存在下、以下のようにして製造される。
前記式(V)中、Y 2
およびY 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、ハロゲン原子である。
前記式(II-i)中、X 2’
およびX 3’
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(i)で表わされる基である。
前記式(i)および(SnR 1 3
) 2
で表わされる化合物中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(II)中、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は式(ii)で表わされる基である化合物は 前記式(II-i)で表わされる。そして式(II-ii)で わされる化合物またはその塩は、前記式(V) 表わされる化合物またはその塩を用いて、 えばイシヤマらの文献(Ishiyama. T. et al. J. Org. Chem. 60, pp 7508, 1995.)に記載されている ように、アルコキシジボラン、PdCl 2 (dppf)、および酢酸カリウムの存在下、以下の ようにして製造される。
前記式(V)中、Y 2
およびY 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、ハロゲン原子である。
前記式(II-ii)中、X 2’’
およびX 3’’
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(ii)で表わされる基である。
前記式(ii)中、-A-は、以下に表わされる基の
ずれか一つである。
また、本発明は、式(III)で表わされる化合
またはその塩を製造するための式(VI)で表わ
れる化合物またはその塩である。
前記式(VI)中、Y 4 、Y 5 およびY 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、ハロゲン原子である。
前記式(III)中、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは式(i)で表わされる基である化合物は、前 記式(III-i)で表わされる。そして式(III-i)で表 される化合物またはその塩は、前記式(VI)で 表わされる化合物またはその塩を用いて、例 えば(SnR 1 3 ) 2 およびPd(PPh 3 ) 4 存在下、以下のようにして製造される。
前記式(VI)中、Y 4
、Y 5
およびY 6
のいずれか二つは水素原子であり、残り一つ
は、ハロゲン原子である。
前記式(III-i)中、X 4’
、X 5’
およびX 6’
のいずれか二つは水素原子であり、残りの一
つは、式(i)で表わされる基である。
前記式(i)および(SnR 1 3
) 2
で表わされる化合物中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(III)中、X、X 5 およびX 6 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は式(ii)で表わされる基である化合物は 前記式(III-i)で表わされる。そして式(III-ii) 表わされる化合物またはその塩は、前記式(V I)で表わされる化合物またはその塩を用いて 例えばイシヤマらの文献(Ishiyama. T. et al. J. Org. Chem. 60, pp 7508, 1995.)に記載されてい るように、アルコキシジボラン、PdCl 2 (dppf)、および酢酸カリウムの存在下、以下の ようにして製造される。
前記式(VI)中、Y 4
、Y 5
およびY 6
のいずれか二つは水素原子であり、残り一つ
は、ハロゲン原子である。前記式(ii)および(S
R 1 3
) 2
で表わされる化合物中、R 1
は、同一または異なって、C 1-6
アルキル基である。
前記式(ii)、-A-は、以下に表わされる基のい
れか一つである。
また、本発明は、創薬のためのPETを用いる
クリーニング方法であって、前記方法は、
(i)標識ヨウ化メチルと有機スズ化合物とを
パラジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭
塩とハロゲン化銅またはハロゲン化アルカ
金属との存在下でDMF中で反応させ、標識さ
たメチルを有する化合物を得る工程、また
標識ヨウ化メチルと有機ホウ素化合物とを
パラジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭
塩の存在下でDMF中で反応させ、標識された
チルを有する化合物を得る工程と、
(ii)前記標識されたメチルを有する化合物を
、ヒトまたはヒトを除く哺乳類に投与する工
程と、
(iii)前記ヒトまたはヒトを除く哺乳類にお
る前記標識されたメチルを有する化合物の
動をPETを用いてモニターする工程とを含む
前記スクリーニング方法において、前記 機ホウ素化合物は、特に限定されないが、 えば薬物活性がある化合物、薬物活性が期 される化合物、薬物活性がある化合物から チル基を除去した化合物、薬物活性が期待 れる化合物からメチル基を除去した化合物 であり、かつ、ホウ素と結合する有機化合 部分に、二重結合、三重結合、芳香族炭化 素等の構造を有するものが挙げられる。こ ような有機ホウ素化合物であれば、標識ヨ 化メチルと、パラジウム(0)錯体およびホス ィン配位子および炭酸塩の存在下にDMF溶媒 で反応し、標識されたメチル基を有する化 物を得ることができるからである。
前記スクリーニング方法において、前記 機スズ化合物は、特に限定されないが、例 ば薬物活性がある化合物、薬物活性が期待 れる化合物、薬物活性がある化合物からメ ル基を除去した化合物、薬物活性が期待さ る化合物からメチル基を除去した化合物等 あり、かつ、スズと結合する有機化合物部 に、二重結合、三重結合、芳香族炭化水素 の構造を有するものが挙げられる。このよ な有機スズ化合物であれば、標識ヨウ化メ ルと、パラジウム(0)錯体およびホスフィン 位子、炭酸塩およびハロゲン化銅またはハ ゲン化アルカリ金属の存在下にDMF溶媒中で 応し、標識されたメチル基を有する化合物 得ることができるからである。
前記スクリーニング方法において、前記有 スズ化合物としては、X 1 が式(i)で表わされる基である式(I)で表わされ る化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(i)で表わされる基で表わされる基 である式(II)で表わされる化合物、または、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(i)で表わされる基である式(III)で表 される化合物が好ましい。
前記スクリーニング方法において、前記有 ホウ素化合物としては、X 1 が式(ii)で表わされる基である式(I)で表わさ る化合物、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(ii)で表わされる基で表わされる である式(II)で表わされる化合物、または、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(ii)で表わされる基である式(III)で表 わされる化合物が好ましい。
前記スクリーニング方法における、標識 ウ化メチル、パラジウム(0)錯体、ホスフィ 配位子、ハロゲン化銅またはハロゲン化ア カリ金属については、前記のとおりである
前記スクリーニング方法において、まず (i)標識ヨウ化メチルと有機スズ化合物とパ ジウム(0)錯体とホスフィン配位子を炭酸塩 存在下で反応させ、標識されたメチルを有 る化合物を得る工程は、例えば、パラジウ (0)錯体とホスフィン配位子とのDMF溶液に、 識ヨウ化メチルを加え、その反応液を、有 スズ化合物と炭酸塩とハロゲン化銅または ロゲン化アルカリ金属とのDMF溶液に加える 得られた反応混合物を60~65℃で攪拌すると 標識されたメチルを有する化合物が得られ 。
これらの試薬の配合比としては、例えば、P d 2 (dba) 3 (1当量)、P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 (4当量)、CuCl(4~40当量)およびK 2 CO 3 (4~40当量)の割合で用いるのが好ましく、Pd 2 (dba) 3 (1当量)、P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 (4当量)、CuCl(20当量)およびK 2 CO 3 (20当量)の割合で用いるのがより好ましい。 お、これらのパラジウム錯体、ホスフィン 体、ハロゲン化銅またはハロゲン化アルカ 金属、炭酸塩の比は、適宜調節して用いて よい。
また、前記スクリーニング方法において (i)標識ヨウ化メチルと有機ホウ素化合物と ラジウム(0)錯体とホスフィン配位子を炭酸 の存在下で反応させ、標識されたメチルを する化合物を得る工程は、例えば、パラジ ム(0)錯体とホスフィン配位子とのDMF溶液に 標識ヨウ化メチルを加え、その反応液を、 機ホウ素化合物と炭酸塩のDMF溶液に加える 得られた反応混合物を60~65℃で攪拌すると 標識されたメチルを有する化合物が得られ 。
これらの試薬の配合比としては、例えば、P d 2 (dba) 3 (1当量)、P(o-CH 3 C 6 H 4 ) 3 (4当量)およびK 2 CO 3 (4~40当量)の割合で用いるのが好ましい。なお 、これらのパラジウム錯体、ホスフィン錯体 、炭酸塩の比は、適宜調節して用いてもよい 。
前記スクリーニング方法において、次に (ii)前記標識されたメチルを有する化合物を 、ヒトまたはヒトを除く哺乳類に投与する工 程は、例えば、前記化合物を、皮下注射、筋 肉注射、経皮投与等の方法により行ってもよ い。
前記スクリーニング方法において、次に (iii)前記ヒトまたはヒトを除く哺乳類にお る前記標識されたメチルを有する化合物の 動をPETを用いてモニターする工程は、ヒト たはヒトを除く哺乳類の全身または臓器に いて、PETでスキャンして行ってもよい。
本発明のスクリーニング方法によれば、 物活性がある化合物、薬物活性が期待され 化合物等のヒトまたはヒトを除く哺乳類に ける動態に関する情報を得ることができる この情報は、生体における動態であるため インビトロ試験を省略して、薬物開発を進 ることができ、薬物開発にかかる時間を削 することが可能になる。
また、本発明は 式(VII):
で表わされる化合物およびその塩、式(VIII):
で表わされる化合物およびその塩、ならびに
式(IX):
で表わされる化合物およびその塩からなる群
から選択される1以上を含む創薬のためのPET
クリーニング用分子プローブである。
前記PETスクリーニング用分子プローブは、
発明のPETスクリーニング用分子プローブを
造するためのキットを用いて、
X 1
が式(ii)で表わされる基である式(I)で表わさ
る化合物、X 2
およびX 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(ii)で表わされる基で表わされる
である式(II)で表わされる化合物、ならびに
X 4
、X 5
およびX 6
のいずれか二つは水素原子であり、残りの一
つは、式(ii)で表わされる基である式(III)で表
わされる化合物からなる群から選択される1
上と、標識ヨウ化メチルとをパラジウム(0)
体とホスフィン配位子と炭酸塩との存在下
DMF中で反応させるか、または
X 1
が式(i)で表わされる基である式(I)で表わされ
る化合物、X 2
およびX 3
のいずれか一方は水素原子であり、いずれか
他方は、式(i)で表わされる基で表わされる基
である式(II)で表わされる化合物、ならびに
X 4
、X 5
およびX 6
のいずれか二つは水素原子であり、残りの一
つは、式(i)で表わされる基である式(III)で表
される化合物からなる群から選択される1以
上と標識ヨウ化メチルとを、パラジウム(0)錯
体とホスフィン配位子と炭酸塩とハロゲン化
銅またはハロゲン化アルカリ金属との存在下
でDMF中で反応させることにより、
式(VII)で表わされる化合物またはその塩、
(VIII)で表わされる化合物またはその塩、式(I
X)で表わされる化合物またはその塩を得るこ
により、製造することができる。
また、本発明は、式(VII)で表わされる化合
またはその塩である。この化合物またはそ
塩は、血液脳関門通過能に優れ、かつ短寿
放射核種を有する。
前記式(VII)で表わされる化合物またはその は、X 1 が式(ii)で表わされる基である式(I)で表わさ る化合物と、標識ヨウ化メチルとをパラジ ム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩との 在下でDMF中で反応させるか、または、X 1 が式(i)で表わされる基である式(I)で表わされ る化合物と標識ヨウ化メチルとを、パラジウ ム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩とハロ ゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属との 存在下でDMF中で反応させることにより、製造 することができる。
また、本発明は、式(VIII)で表わされる化合
またはその塩である。この化合物またはそ
塩は、代謝に安定な部位に短寿命放射核種
有する化合物である。
前記式(VIII)で表わされる化合物またはその は、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(ii)で表わされる基で表わされる である式(II)で表わされる化合物と、標識ヨ 化メチルとをパラジウム(0)錯体とホスフィ 配位子と炭酸塩との存在下でDMF中で反応さ るか、または、X 2 およびX 3 のいずれか一方は水素原子であり、いずれか 他方は、式(i)で表わされる基で表わされる基 である式(II)で表わされる化合物と標識ヨウ メチルとを、パラジウム(0)錯体とホスフィ 配位子と炭酸塩とハロゲン化銅またはハロ ン化アルカリ金属との存在下でDMF中で反応 せることにより、製造することができる。
また、本発明は、式(IX)で表わされる化合物
またはその塩である。この化合物またはその
塩は、代謝に安定な部位に短寿命放射核種を
有する化合物である。
前記式(IX)で表わされる化合物またはその塩 は、X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(ii)で表わされる基である式(III)で表 わされる化合物と、標識ヨウ化メチルとをパ ラジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩 との存在下でDMF中で反応させるか、または、 X 4 、X 5 およびX 6 のいずれか二つは水素原子であり、残りの一 つは、式(i)で表わされる基である式(III)で表 される化合物と標識ヨウ化メチルとを、パ ジウム(0)錯体とホスフィン配位子と炭酸塩 ハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金 との存在下でDMF中で反応させることにより 製造することができる。
また、本発明は、(i)本発明のPETスクリーニ
グ用分子プローブを、ヒトまたはヒトを除
哺乳類に投与する工程と、
(ii)前記ヒトまたはヒトを除く哺乳類におけ
る前記化合物の挙動をPETを用いてモニターす
る工程とを含む
創薬のためのPETを用いるスクリーニング方法
である。
前記スクリーニング方法において、本発 のPETスクリーニング用分子プローブを投与 る工程は、例えば、前記プローブを、皮下 射、筋肉注射、経皮投与等の方法により行 てもよい。
前記スクリーニング方法において、前記 合物の挙動をPETを用いてモニターする方法 、ヒトまたはヒトを除く哺乳類の全身また 臓器について、PETでスキャンして行っても い。
[分光計]
1
H-NMRおよび 13
C-NMRスペクトルは、内部標準物質としてテト
メチルシラン(TMS)を用い、JEOL JNM-AL-400(400MHz
)FT-NMR(日本電子株式会社製)を用いて測定した
。化学シフトδ値は、ppmで表示した。化学結
定数(J)はHzで示し、シグナルの分裂様式は
一重線をs、二重線をd、三重線をt、四重線
q、多重線をm、幅広線をbrと略記した。
[赤外分光法 (IR)]
赤外分光法(IR)は、SHIMADZU FTIR-8100A(株式会社
島津製作所製)を使用し、吸収波長値をcm -1
で表記した。
[元素分析]
有機微量元素分析装置は、Yanaco CHNコーダ/M
T-6(ヤナコ分析工業製)を用いて測定した。標
試料としてはアンチピリン(キシダ化学,LotNo
.F87190 K)を用いた。
[クロマトグラフィー]
分析用薄層クロマトグラフィー(TLC)は、ガ
ス板上に固定した、順相(E.MERCK Kieselgel 60 F
254
, 0.25mm Art.5715)および逆相(E.MERCK Kieselgel RP-1
8 F 254s
)シリカゲルの薄層を使用した。
クロマトグラフィーにおいて、化合物の ポットは、紫外線、ヨウ素、および/または リンモリブデン酸で検出した。
リンモリブデン酸で検出する際、TLCプレ トを、リンモリブデン酸ナトリウム(11g)、 硫酸(23mL)、85%オルトリン酸水溶液(6.8mL)、お び蒸留水(455mL)を含むリンモリブデン酸ナト リウム溶液の中に浸し、熱した鉄板上でスポ ットが鮮明に見えるまで加熱した。
カラムクロマトグラフィーは、順相(Cica 60N Cat. No.37572-84, 70-230メッシュ ASTM: Cica 60 N Cat. No.37571-84, 230-400メッシュ ASTM)および 相(富士シリア化学株式会社製、Cat. No. DM102 0T ODS 100-200メッシュ)のいずれかのシリカゲ を使用して行った。
[溶媒]
すべての化学試薬は特に記さない限り、市
品をそのまま用いた。NMRスペクトルの測定
媒としては、重クロロホルム(CIL)、重メタ
ール(CIL)、重ジメチルスルホキシド(CIL)を使
した。抽出およびクロマトグラフィーの溶
用溶媒としては、酢酸エチル、ヘキサン、
クロロメタン、メタノールおよびクロロホ
ムの市販品をそのまま用いた。1,4-ジオキサ
ン、ジメトキシエタンは、ナトリウムベンゾ
フェノン上からアルゴン気流下蒸留したもの
を用いた。
[化合物]
有機金属を用いる反応については、まず真
下ヒートガンで加熱しガラス表面の水を除
、反応容器内をアルゴンで充填したのち、
応操作を遂行した。
N-(2,5-ジメトキシベンジル)-N-[5-フルオロ-2-(4
-ブロモフェノキシ)フェニル]アセトアミド(7)
の製造
標題化合物を、以下のスキーム1に従い製造
した。
(i)2-(4-ブロモフェノキシ)-5-フルオロニトロ
ンゼン(2-(4-bromophenoxy)-5-fluoronitrobenzene)(2)の
造
p-ブロモフェノール(5.43g,31.4mmol)のN,N-ジメチ
ルホルムアミド溶液(100mL)に炭酸カリウム(5.64
g,40.8mmol)を加え、そこへさらに2,5-ジフルオロ
ニトロベンゼン1(5.00g,31.4mmol)を加えた。得ら
た混合物を75℃で6時間撹拌した。得られた
応液に蒸留水を加え、その後酢酸エチル(×3
)で抽出した。合わせた有機層を1規定塩酸、2
規定水酸化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素
ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し
た。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した
後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲ
ルクロマトグラフフィー(シリカゲル200g,展開
溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=15/1)で精製し、オ
ンジ色結晶の標題化合物(9.87g,定量的)を得
。
TLC Rf 0.4 2 (ヘキサン/酢酸エチル = 15/1).
1
H-NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 7.05-7.10 (dd, 1H, 芳香族, J =,
9.1, 4.6 Hz) , 7.26-7.32 (ddd, 1H, 芳香族, J= 9.
2, 7.2, 3.2 Hz) , 7.46 (d, 1H, 芳香族, J = 2.2
Hz) , 7.48 (d, 1H, 芳香族, J = 2.1 Hz) , 7.7
0-7.74 (dd, 1H, 芳香族, J = 7.5, 3.2 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 113 (d, 2
J C-F
= 27.3 Hz) , 116.8, 121.3, 121.6 (d, 2
J C-F
= 27.2 Hz) , 123.2, 123.5 (d, 3
J C-F
= 2.8 Hz) , 127.4, 131.1, 145.6 (d, 3
J C-F
= 3.3 Hz) , 156.4 (d, 1
J C-F
= 249.1 Hz) , 157.2 .
IR (KBr, cm -1
) : 504, 556, 772, 812, 876, 945, 1009, 1069, 1129
, 1165, 1208, 1256, 1347, 1415, 1482, 1538, 2584, 3
094。
(ii)2-(4-ブロモフェノキシ)-5-フルオロアニリ
ン(2-(4-bromophenoxy)-5-fluoroaniline)(3)の製造
アルゴン雰囲気下、2-(4-ブロモフェノキシ)-
5-フルオロニトロベンゼン(2)(312mg,1.00mmol)のメ
タノール溶液(2.0mL)に、酸化白金(II)(1.92mg,8.4μ
mol)を加えた。得られた混合物を水素雰囲気
4時間室温で撹拌した。得られた反応液をセ
イトろ過し、ろ液を減圧濃縮した。得られ
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(シリ
カゲル25g,展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=30/1)
で精製し、褐色結晶(233mg,83%、TLCRf0.27(ヘキサ
/酢酸エチル=15/1)を得た。この褐色結晶を、
2度再結晶(酢酸エチル/ヘキサン)して標題化
物を得た。
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 3.85 (brs, 2H, NH 2
) , 6.37-6.45 (ddd, 1H, 芳香族, J = 12, 8.4, 2.
9 Hz) , 6.50-6.55 (dd, 1H, 芳香族, J = 9.9, 2.9
) , 6.80-6.85 (complex, 3H, 芳香族) , 7.37-7.43 (
dd, 2H, 芳香族, J = 6.7, 2.0).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 103.0 (d, 2
J C-F
= 26.5 Hz) , 104.7 (d, 2
J C-F
= 23.1 Hz) , 114.9, 118.2 (2C) , 121.6 (d, 3
J C-F
= 10.7 Hz) , 132.6 (2C) , 138.1 (d, 4
J C-F
= 2.4 Hz) , 140.1 (d, 3
J C-F
= 11.6 Hz) , 156.9, 159.1 (d, 1
J C-F
= 241.6 Hz).
IR (KBr, cm -1
), 455, 498, 538, 828, 841, 972, 1007, 1069, 1159,
1190, 1223, 1279, 1307, 1447, 1482, 1507, 1580, 162
6, 3389, 3463。
(iii)N-(2-ヒドロキシ-5-メトキシベンジル)-N-[5
-フルオロ-(4-ブロモフェノキシ)フェニル]ア
ン(N-(2-hydroxy-5-methoxybenzyl)-N-[5-fluoro-(4-bromopheno
xy)phenyl]amine )(4)の製造
アルゴン雰囲気下、2-(4-ブロモフェノキシ)-
5-フルオロアニリン(3)(586mg,2.07mmol)の脱水ベン
ゼン溶液(23mL)に、1-ヒドロキシ-4-メトキシベ
ズアルデヒド(315mg,2.07mmol)の脱水ベンゼン溶
液(4mL)を加え、得られた混合物をディーンス
ーク管を用いて110℃で一晩還流した。得ら
た反応液を減圧濃縮し、残渣を室温で脱水
タノール(25mL)に溶かした。得られた溶液に0
℃で水素化ホウ素ナトリウム(157mg,4.14mmol)を30
分かけて加えた。得られた混合物を室温に戻
し、2時間半撹拌した。得られた反応液に蒸
水を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わ
せた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得
られた残渣をシリカゲルクロマトグラフフィ
ー(シリカゲル50g,展開溶媒;ヘキサン/酢酸エ
ル=6/1)で精製し、褐色油状物質の標題化合物
(690mg,80%)を得た。
TLC Rf 0.43 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 3.75, (s, 3H, OCH 3
) , 4.34 (d, 2H, 芳香族, J = 5.1 Hz) , 4.58 (
brs, 1H, NH) , 6.42-6.50 (ddd, 1H, 芳香族, J =
8.3, 8.3, 2.8 Hz) , 6.55 (brs, 1H, OH) 6.59-6.64 (
dd, 1H, 芳香族, J = 10, 2.8 Hz) , 6.72-6.76 (co
mplex, 3H, 芳香族) , 6.77-6.83 (complex, 3H, 芳
族) , 7.40 (d, 2H, 芳香族, J = 9.1 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 46.5, 55.7, 101.3 (d, 2
J C-F
= 27.3 Hz) , 105.0 (d, 2
J C-F
= 24.1 Hz) , 113.9, 114.4, 115.4, 116.9, 118.6 (2C)
, 120.3 (d, 3
J C-F
= 10.8 Hz) , 123.7, 132.7 (2C) , 139.5 (d, 4
J C-F
= 2.4 Hz) , 141.0 (d, 3
J C-F
= 10.7 Hz) , 149.3, 153.4, 156.6, 159.1 (d, 1
J C-F
= 241.6 Hz).
IR (KBr, cm -1
) , 716, 772, 826, 1007, 1040, 1069, 1098, 1171, 1
221, 1279, 1329, 1356, 1433, 1460, 1483, 1510, 1597,
1620, 2836, 2938, 3384。
(iv)N-(2-アセトキシ-5-メトキシベンジル)-N-[5-
フルオロ-2-(4-ブロモフェノキシ)フェニル]ア
トアミド(N-(2-acetoxy-5-methoxybenzyl)-N-[5-fluoro-2-(
4-bromophenoxy) phenyl]acetamide)(5)の製造
アルゴン雰囲気下、N-(2-ヒドロキシ-5-メト
シベンジル)-N-[5-フルオロ-(4-ブロモフェノキ
シ)フェニル]アミン(4)(690mg,1.65mmol)のピリジン
溶液(2.0mL)に、無水酢酸(779mL,8.25mmol)を加え、
温で一晩撹拌した。得られた反応液に1規定
塩酸を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合
せた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶
(×2)、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫
水素ナトリウムで乾燥した。有機層を減圧
縮して得られた残渣をシリカゲルクロマト
ラフフィー(シリカゲル50g展開溶媒;ヘキサン
/酢酸エチル=4/1)で精製し、白色結晶の標題化
合物(694mg,84%)を得た。
TLC Rf 0.25 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 1.90 (s, 3H, COCH 3
) 2.2 (s, 3H, COCH 3
) , 3.63 (s, 3H, OCH 3
) , 4.51 (d, 1H, NCH 3
, J = 15 Hz) , 5.06 (d, 1H, NCH 3
J = 15 Hz) , 6.65-6.72 (complex, 3H, 芳香族) ,
6.72-6.75 (dd, 1H, 芳香族 d, 1H, J = 8.7, 3.1
Hz) , 6.80-6.92 (complex, 3H, 芳香族) , 6.94-7.01
(m, 1H, 芳香族) , 7.35-7.40 (dd, 2H, 芳香族,
J = 9.1, 2.3 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 20.8, 22.0, 45.8, 55.5, 114.0, 116.2
(d, 2
J C-F
= 23.2 Hz) , 116.3, 116.5, 117.4 (d, 2
J C-F
= 23.1 Hz) , 119.8 (2C) , 120.5 (d, 3
J C-F
= 9.1 Hz) , 123.2, 129.6, 132.8 (2C) , 133.8 (d,
3
J C-F
= 9.9 Hz) , 142.7, 148.9 (d, 4
J C-F
= 2.5 Hz) , 155.5, 157.0 (d, 1
J C-F
= 245.8 Hz) , 157.1, 169.8, 170.2.
IR (KBr, cm -1
) , 509, 554, 752, 822, 870, 899, 939, 980, 1009,
1042, 1069, 1115, 1181, 1196, 1219, 1252, 1282, 137
0, 1385, 1435, 1485, 1499, 1283, 1385, 1435, 1485,
1494, 1609, 1669, 1759, 2838, 2938, 3069.
(v)N-(2-ヒドロキシ-5-メトキシベンジル)-N-[5-
ルオロ-2-(4-ブロモフェノキシ)フェニル]-ア
トアミド(N-(2-hydroxy-5-methoxybenzyl)-N-[5-fluoro-2-(
4-bromophenoxy)phenyl]-acetamide)(6)の製造
N-(2-アセトキシ-5-メトキシベンジル)-N-[5-フ
オロ-2-(4-ブロモフェノキシ)フェニル]アセ
アミド(5)(694mg,1.38mmol)のテトラヒドロフラン
液(8mL)に、0℃で2規定水酸化ナトリウム水溶
液(3.45mL,6.9mmol)を加え、一晩撹拌した。得ら
た反応液に1規定塩酸を加え、酢酸エチル(×3
)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水
洗浄し、無水硫酸水素ナトリウムで乾燥し
後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカ
ルクロマトグラフフィー(シリカゲル50g,展開
溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=4/1)で精製し、白
泡状結晶の標題化合物(669mg,定量的)を得た。
TLC Rf 0.79 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 1.96 (s, 3H, COCH 3
), 3.36 (s, 3H, OCH 3
), 4.60 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz), 4.72 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz), 6.20 (d, 1H, 芳香族, J = 3.0 Hz
), 6.62-6.68 (dd, 2H, 芳香族, J = 6.7, 2.0 Hz),
6.70-6.75 (dd, 1H, 芳香族, J = 8.7, 3.1), 6.76-6
.81 (d, 1H, 芳香族, J = 9.1), 6.90-6.95 (complex,
2H, 芳香族), 7.03-7.10 (ddd, 1H, 芳香族, J =
9.1, 7.5, 3.1), 7.35-7.41 (dd, 2H, 芳香族, J =
6.7, 2.0), 8.87 (s, OH).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 21.7, 50.0, 55.7, 115.0, 116.7 (d,
2
J C-F
= 23.1 Hz) , 116.7 (d, 2
J C-F
= 24.0 Hz) , 116.8, 118.3, 120.2 (d, 3
J C-F
= 8.2 Hz) , 120.2 (2C) , 122.1, 132.9 (2C) , 132.
9, 133.2 (d, 3
J C-F
= 9.9 Hz) , 148.7 (d, 4
J C-F
= 3.4 Hz) , 149.9, 152.3, 154.8, 156.9 (d, 1
J C-F
= 246.7 Hz) , 173.3.
IR (KBr, cm -1
) , 511, 734, 779, 820, 872, 932, 984, 1046, 1069,
1111, 1167, 1210, 1248, 1300, 1399, 1455, 1483, 14
99, 1607, 1636, 2834, 2948, 3185.
(vi)N-(2,5-ジメトキシベンジル)-N-[5-フルオロ-
2-(4-ブロモフェノキシ)フェニル]アセトアミ
(N-(2, 5-dimethoxybenzyl)-N-[5-fluoro-2-(4-bromophenoxy)
phenyl]acetamide)(7)の製造
アルゴン雰囲気下、N-(2-ヒドロキシ-5-メト
シベンジル)-N-[5-フルオロ-2-(4-ブロモフェノ
シ)フェニル]-アセトアミド(6)(669mg,1.45mmol)の
脱水ジメチルホルムアミド溶液(10mL)に、0℃
水素化ナトリウム(116mg,2.90mmol)を加えた。そ
後、混合物を室温に戻し、ヨウ化メチル(412
mg,2.90mmol)をさらに加えた。得られた混合物を
2時間半撹拌後、蒸留水を加え、その後ジエ
ルエーテル(×3)で抽出した。合わせた有機層
を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(×2)、次い
飽和食塩水で洗浄した。前記有機層を無水
酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した
得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィー(シリカゲル50g,展開溶媒;ヘキサン/酢酸
エチル=2/1)で精製し、褐色油状物質の標題化
物(582mg,85%)を得た。
TLC Rf 0.25 (ヘキサン/酢酸エチル = 2/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 1.99 (s, 3H, COCH 3
) , 3.55 (s, 3H, OCH 3
) , 3.66 (s, 3H, OCH 3
) , 4.65 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz) , 5.05 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz) , 6.64-7.00 (complex, 8H, 芳香族)
, 7.38-7.42 (dd, 2H, 芳香族 J = 6.7 , 2.0 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 22.2, 45.9, 55.6, 55.7, 111.3, 113.4
, 115.7 (d, 2
J C-F
= 23.2 Hz) , 116.3, 116.5, 117.2 (d, 2
J C-F
= 23.2 Hz) , 119.4 (d, 3
J C-F
= 4.2 Hz) , 120.1 (2C) , 126.0, 132.8 (2C) , 13
4.6 (d, 3
J C-F
= 9.9 Hz) , 149.0 (d, 4
J C-F
= 2.4 Hz) , 151.7, 153.5, 155.6, 156.9 (d, 1
J C-F
= 245.0 Hz), 170.5.
IR (KBr, cm -1
) , 469, 714, 820, 870, 941, 978, 1009, 1049, 1115
, 1171, 1204, 1250, 1281, 1385, 1433, 1483, 1501, 1
609, 1667, 2834, 2950, 3069。
N-(2,5-ジメトキシベンジル)-N-[5-フルオロ(4-
リ-n-ブチルスタンニルフェノキシ)フェニル]
-アセトアミド(N-(2,5-dimethoxybenzyl)-N-[5-fluoro(4-tr
i-n-butylstannylphenoxy)phenyl]-acetamide)(8)の製造
標題化合物を以下のスキーム2に従い製造し
た。
アルゴン雰囲気下、N-(2,5-ジメトキシベン ジル)-N-[5-フルオロ-2-(4-ブロモフェノキシ)フ ニル]アセトアミド(7)(100mg,217μmol)のジエチ エーテル溶液(11mL)にビストリブチルスタン ン(380mg,654μmol)およびテトラキストリフェニ ホスフィンパラジウム(25.1mg,21.7mmol)を加え 90℃で一晩還流した。得られた反応液に飽和 フッ化カリウム水溶液を加え、3時間撹拌し 。前記混合物をセライトろ過した後、酢酸 チル(×3)で抽出した。合わせた有機層を飽和 食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥 した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリ カゲルクロマトグラフフィー(シリカゲル10g, 開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=6/1)で精製し、 白色油状物質(86.6mg,62%、TLC Rf 0.68(ヘキサン/ 酸エチル=2/1))を得た。その白色油状物質を 逆相シリカゲルクロマトグラフィー(ODS10g, 開溶媒;アセトニトリル)で再度精製し、標題 化合物を得た(70.1mg,50%)。
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 0.85-0.92 (t, 9H, J = 7.1 Hz) , 1
.00-1.08 (m, 6H), 1.28-1.39 (m, 6H), 1.49-1.56 (m, 6
H), 1.96 (s, 3H, COCH 3
) , 3.56 (s, 3H, OCH 3
), 3.67 (s, 3H, OCH 3
), 4.62 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz), 5.12 (d, 1H, NCH 2
, J = 15 Hz) , 6.64-6.95 (complex, 8H, 芳香族),
7.35-7.40 (d, 2H, 芳香族 J = 7.9 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 9.6 (3C) , 13.7 (3C) , 22.2, 27.4
(3C) , 29.1 (3C) , 46.0, 55.7, 55.7, 111.3, 113.5,
115.4 (d, 2
J C-F
= 23.1 Hz) , 116.4, 117.2 (d, 2
J C-F
= 23.1 Hz) , 118.4 (2C) , 119.6 (d, 3
J C-F
= 9.1 Hz) , 126.2, 134.3 (d, 3
J C-F
= 9.9 Hz) , 136.7, 137.8 (2C) , 149.6 (d, 4
J C-F
= 2.5 Hz) , 151.8, 153.5 (d, 1
J C-F
= 297.1 Hz) , 156.5, 158.9, 170.6.
IR (KBr, cm -1
) , 513, 538, 666, 712, 812, 833, 868, 1049, 1169,
1224, 1250, 1383, 1433, 1464, 1501, 1578, 1609, 16
71, 2853, 2928, 2955.
元素分析:C 35
H 48
FNO 4
Snについての計算値: C, 61.42 ; H, 7.07 ; N,
2.05. 測定値 C, 61.61 ; H, 6.98 ; N, 2.02。
[参考例1]
N-(2,5-ジメトキシベンジル)-N-[5-フルオロ(4-
チルフェノキシ)フェニル]アセトアミド(N-(2,
5-dimethoxybenzyl)-N-[5-fluoro(4-methylphenoxy)phenyl]acetam
ide)(9)(非標識体)の製造
標題化合物を前記のスキーム2に従い製造し
た。アルゴン雰囲気下、トリスジベンジリデ
ンアセトンジパラジウム(11.4mg,12.4μmol)を、脱
水ジメチルホルムアミド(8.8mL)に溶解させた
前記溶液にトリ-O-トリルホスフィン(16.1mg,52.
9mmol)を加え、5分間攪拌し、その後ヨウ化メ
ル(0.4M溶液77.5μL,31.0μL)を加え、3分間撹拌し
。その後、前記混合物にN-(2,5-ジメトキシベ
ンジル)-N-[5-フルオロ(4-トリ-n-ブチルスタン
ルフェノキシ)フェニル]-アセトアミド(8)(20.0
mg,31.1μmol)の脱水ジメチルホルムアミド(2.2mL)
液を加えた。前記混合物を50℃で一晩撹拌
た。得られた反応液に蒸留水を加え、次い
ジエチルエーテル(×3)で抽出した。合わせた
有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られ
た残渣をシリカゲルクロマトグラフフィー(
リカゲル10g,展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=6
/1)で精製して、茶色油状物質の標題化合物(7.
2mg,59%)を得た。
TLC Rf 0.25 (ヘキサン/酢酸エチル=2/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:1.96 (s, 3H, COCH 3
), 2.33 (s, 3H, Ar-CH 3
) , 3.56 (s, 3H, OCH 3
), 3.67 (s, 3H, OCH 3
), 4.64 (d, 1H, NCH 2
, J = 14 Hz) , 5.12 (d, 1H, NCH 2
, J = 14 Hz), 6.66-6.95 (complex, 8H, 芳香族), 7
.09-7.14 (d, 2H, 芳香族 J = 8.3 Hz).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 20.7, 22.2, 45.9, 55.7, 55.7, 111.3,
113.5, 115.4 (d, 2
J C-F
= 23.1 Hz) , 116.4, 117.0 (d, 2
J C-F
= 23.2 Hz) , 118.8 (2C) , 119.0 (d, 3
J C-F
= 9.1 Hz) , 126.2, 130.3 (2C) , 133.6, 133.9 (d,
3
J C-F
= 10.0 Hz) , 150.1 (d, 4
J C-F
= 3.3 Hz) , 151.8, 153.5, 153.9, 156.2 (d, 1
J C-F
= 244.1 Hz) , 170.6.
IR (KBr, cm -1
) , 714, 812, 833, 870, 943, 978, 1049, 1171, 1224
, 1250, 1283, 1385, 1433, 1464, 1497, 1609, 1669, 2
836, 2936.
元素分析: C 24
H 24
FNO 4
についての計算値: C, 70.40 ; H, 5.91 ; N,
3.42. 測定値C, 70.74 ; H, 5.96 ; N, 3.25。
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチル-(1-メ
チルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミ
(18)の製造
標題化合物を以下のスキーム3およびスキー
ム4に従い製造した。
(i)2-アミノ-1-フェニル-1-プロパノール(2-amino
-1-phenyl-1-propanol)(11)の製造
アルゴン雰囲気下、1-フェニル-1,2-プロパン
ジオン-2-オキシム(4.00g,24.5mmol)の脱水エタノ
ル溶液(80ml)にパラジウム-炭素(10%,wet)(2.22g,2.0
8mmol)を加えた。前記混合物を水素雰囲気下(3a
tm)で16時間室温で撹拌した。得られた反応液
セライトろ過し、ろ液を減圧濃縮した。得
れた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(
シリカゲル100g、展開溶媒;ジクロロメタン/メ
タノール/アンモニア水=90/10/1)で精製し、白
固体の標題化合物(1.52g,40%)を得た。
TLC Rf 0.05 (ジクロロメタン/メタノール/ア
モニア水 = 90/10/1).
1
H NMR (DMSO-d 6
, 400 MHz) δ: 0.80-0.88 (d, 3H, CHCH 3
, J = 6.3 Hz) , 1.15-1.35 (br, 2H, NH 2
) , 2.82-2.92 (qd, 1H, CHCH 3
, J = 6.3, 4.3 Hz) , 4.22-4.36 (d, 1H, CHOH, J =
4.6 Hz) , 5.06-5.23 (br, 1H, CHOH) , 7.18-7.34 (c
omplex, 5H, 芳香族).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 18.2, 51.9, 77.5, 126.6 (2C) , 127.
4, 128.2 (2C) , 141.5.
IR (KBr, cm -1
) , 537, 702, 752, 930, 1026, 1049, 1201, 1284, 13
77, 1453, 1493, 1578, 2928, 2972, 3001。
(ii)5-ブロモ-2-クロロ-N-(1-ヒドロキシ-1-フェ
ルプロパン-2-イル)ベンズアミド(5-bromo-2-chlo
ro-N-(1-hydroxy-1-phenylpropane-2-yl)benzamide)(12) の製
5-ブロモ-2-クロロ安息香酸(93.5mg,397mmol)のジ
チルホルムアミド溶液(2.0ml)に0℃で、1-ヒド
ロキシベンゾトリアゾール(53.6mg,397μmol)、2-
ミノ-1-フェニル-1-プロパノール(11)(50.0mg,331μ
mol)のジメチルホルムアミド溶液(1.6ml)、1-エ
ル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイ
ミド塩酸塩(127mg,662μmol)、およびトリエチル
ミン(92.3μl,662μl)を順次加えた。得られた混
物を室温で一晩撹拌した。得られた反応液
蒸留水を加え、次いでジエチルエーテル(×3
)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後
減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲル
ロマトグラフィー(シリカゲル5g、展開溶媒;
キサン/酢酸エチル=3/1)にて精製し、白色固
の標題化合物(105mg,86%)を得た。
TLC Rf 0.30 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (DMSO-d 6
, 400 MHz) δ:0.96-1.10 (d×2, 3H, CHCH 3
, J = 6.6 Hz) , 4.00-4.25 (m×2, 1H, CHCH 3
) , 4.55-4.70 (dd×2, 1H, J = 5.1, 5.5 Hz) , 5.43
-5.48 (d×2, 1H, CHOH, J = 5.1 Hz) , 7.20-7.43 (co
mplex, 7H, 芳香族 および NH) , 7.60-7.62 (m, 1
H, 芳香族) , 8.25-8.46 (d×2, 1H, 芳香族).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 14.0 および 17.6 (アイソマー),
51.7 および 52.2, 76.0 および 76.8, 120.7 お
よび 120.8, 126.1, 126.2, 127.7 および128.0, 128.
3, 128.4, 129.6 および 129.7, 131.6 および 131.
7, 132.7 および132.8, 134.1 および 134.2, 136.5
および 136.6, 140.5 および 141.3, 165.2 およ
165.4.
IR (KBr, cm -1
) , 515, 700, 762, 816, 1001, 1049, 1084, 1113, 11
38, 1298, 1333, 1381, 1455, 1547, 1642, 2874, 2934,
2977, 3063, 3287, 3405。
(iii)1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-メチル
ソキノリン(1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-3-methylisoquino
line)(13)の製造
アルゴン雰囲気下、5-ブロモ-2-クロロ-N-(1-
ドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル)ベンズ
ミド(12)(100mg,271μl)をo-ジクロロベンゼン溶
(2.0ml)に溶解した後、6時間真空乾燥した五酸
化二リン(769mg,5.42mmol)を加えた。得られた反
液を160℃で一晩撹拌した。得られた反応液
0℃に冷却し、蒸留水をゆっくり加えた後、
クロロメタン(×3)で抽出した。合わせた有
層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリ
ムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた
渣をシリカゲルクロマトグラフィー(シリカ
ル50g、展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=15/1)
精製し、白色結晶の標題化合物(72.9mg,81%)を
た。
TLC Rf 0.52 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:2.73-2.77 (s, 3H, CH 3
) , 7.38-7.42 (d, 1H, 芳香族, J = 8.4 Hz) , 7.
43-7.49 (dd, 1H, 芳香族, J = 7.5, 7.7 Hz) , 7.5
3-7.58 (complex, 3H, 芳香族) , 7.60-7.62 (s, 1H,
芳香族) , 7.63-7.69 (dd, 1H, 芳香族, J = 7.5,
7.8 Hz) , 7.79-7.83 (d, 1H, 芳香族, J = 8.4 Hz
).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 24.3, 119.1, 120.6, 125.1, 126.4, 12
6.7, 126.8, 130.3, 131.1, 132.5, 132.7, 134.1, 137.0,
140.2, 150.9, 156.7.
IR (KBr, cm -1
) , 472, 627, 752, 814, 885, 992, 1055, 1082, 1134
, 1165, 1327, 1348, 1406, 1462, 1563, 1590, 1622, 2
921, 2979, 3060。
(iv)1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-ブロモメ
チルイソキノリン(1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-3-bromom
ethylisoquinoline)(14)の製造
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-メチルイソ
ノリン(13)(600mg,1.80mmol)の四塩化炭素(63ml)溶
に、N-ブロモスクシンイミド(320mg,1.80mmol)お
び過酸化ベンゾイル(69.7mg,216μmol)を加え、80
で光照射下一晩還流した。得られた反応液
飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和食塩
で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥
た。その反応液を減圧濃縮することにより
粗生成物の標題化合物(787mg,定量的.)を得た
標題化合物は精製を行わずそのまま次の反
に用いた。
(v)1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-イソキノ
ンカルボン酸(1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-3-isoquinoli
ne carboxylic acid)(16)の製造
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-ブロモメチ
イソキノリン(14)(787mg,1.91mmol)をエタノール(1
1ml)およびテトラヒドロフラン(5.3ml)に溶解し
そこへ蒸留水(880μl)に溶かした硝酸銀(811mg
4.78mmol)を加えた。70℃で1時間還流した後、
応液を70℃でろ過し、そのろ液を温めたテト
ロヒドロフランで洗浄した。得られた反応液
を減圧濃縮し、1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)
-3-ホルミルイソキノリン(15)の粗生成物を得
。前記1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-ホル
ルイソキノリン(15)をエタノール(7.8ml)に溶解
し、蒸留水(880μl)に溶かした硝酸銀(843mg,4.96mm
ol)および2規定水酸化ナトリウム水溶液(9.1ml)
加え、室温で2時間撹拌した。反応液を桐山
ろ過した後、ろ液をジエチルエーテル(×2)で
浄した。得られた水層に12規定塩酸を加え
pHを2に調整した後、その水層を酢酸エチル(
3)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。
その後、有機層を減圧濃縮して、黄色結晶の
標題化合物(346mg,50%)を得た。
TLC Rf 0.39 (ジクロロメタン/メタノール/酢
= 90/10/1).
1
H NMR (DMSO-d 6
, 400 MHz) δ:7.22-7.26 (d, 1H, 芳香族, J = 8.2
Hz) , 7.27-7.40 (d, 1H, 芳香族, J = 8.2 Hz) ,
7.40-7.48 (complex, 3H, 芳香族) , 7.52-7.58 (dd,
1H, 芳香族, J = 8.2, 7.6 Hz) , 7.92-7.98 (d, 1H
, 芳香族, J = 8.2 Hz), 8.36-8.38 (s, 1H, 芳香
) , 12.7-13.1 (br, 1H, COOH).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ:120.6, 123.3, 127.4, 128.8, 129.0, 130
.6, 131.4, 131.9, 132.4, 133.6, 134.0, 136.7, 138.4,
138.7, 156.5, 164.8.
IR (KBr, cm -1
) , 451, 507, 535, 637, 683, 722, 739, 754, 774,
806, 884, 911, 994, 1055, 1084, 1142, 1217, 1266, 1
314, 1347, 1404, 1464, 1501, 1566, 1620, 1707, 1755,
3063。
(vi)1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-(1-メチル
プロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド(1-(5
-bromo-2-chlorophenyl)-N-(1-methylpropyl)-3-isoquinolinecarb
oxamide)(17)の製造
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-イソキノリ
カルボン酸(16)(174mg,478μmol)のジメチルホル
アミド溶液(5.1ml)に0℃で、1-ヒドロキシベン
トリアゾール(77.5mg,574μmol)、sec-ブチルアミ
(57.8μl,574μmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミ
プロピル)-カルボジイミド塩酸塩(183mg,956μmol
)およびトリエチルアミン(133μl,956μl)を順次
えた。その後、前記混合物を室温で一晩撹
した。得られた反応液を2規定塩酸(×2)で洗
し、次いでジエチルエーテル(×3)で抽出した
。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し
た。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラ
フィー(シリカゲル15g、展開溶媒;ヘキサン/酢
酸エチル=4/1)で精製し、白色泡状物質の標題
合物(195mg,97%)を得た。
TLC Rf 0.26 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 0.94-1.01 (t×2, 3H, CH 2
CH 3
, J = 6.6 Hz), 1.25-1.35 (d×2, CHCH 3
, J = 6.5 Hz) , 1.55-1.72 (m, 2H, CH 2
CH 3
), 4.08-4.25 (m, 1H, CHCH 3
), 7.44-7.48 (d, 1H, 芳香族, J = 10.7 Hz), 7.60-
7.70 (complex, 4H, 芳香族), 7.74-7.80 (dd, 1H, 芳
香族, J = 7.2, 8.5 Hz), 7.95-8.00 (br, 1H, NH) ,
8.00-8.09 (d, 1H, 芳香族, J = 8.3 Hz) , 8.67-8
.70 (s, 1H, 芳香族).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 10.6 および 10.7, 20.5 および
20.6, 29.7 および 29.8, 46.8, 120.3 および 120.
4, 120.6 および 120.7, 126.9, 127.9, 128.7, 129.0,
130.9, 131.2 および 131.3, 132.5 および 132.6,
133.0, 134.2, 136.6 および 136.7, 139.5 および
139.6, 142.9, 143.0, 155.7 および 155.8, 163.8.
IR (KBr, cm -1
) , 507, 754, 777, 804, 1055, 1084, 1329, 1402, 14
64, 1518, 1622, 1971, 2874, 2930, 2967, 3386。
(vii)1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチル-(
1-メチルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサ
ミド(1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-N-methyl-(1-methylpropyl)-
3-isoquinolinecarboxamide)(18)の製造
アルゴン雰囲気下、1-(5-ブロモ-2-クロロフ
ニル)-N-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリンカ
ルボキサミド(17)(235mg,562μmol)を脱水ジメチル
ルホキシド(1.36ml)および脱水ジメチルホル
アミド(3.31ml)に溶解した後、0℃において水
化ナトリウム(67.4mg,1.69mmol)を5分かけて加え
得られた混合物を一時間撹拌した。前記混
物にヨウ化メチル(71.4μl,1.12mmol)を加え、室
において一晩撹拌した。前記混合物に蒸留
を加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせ
た有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得ら
れた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(
リカゲル20g、展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル
=2/1)で精製し、白色泡状物質の標題化合物(225
mg,93%)を得た。
TLC Rf 0.26 (ヘキサン/酢酸エチル = 2/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-0.82 および 0.96-1.02 (t×2), 3
H, J = 7.4 Hz, CH 2
CH 3
), 1.19-1.25 (m×2, 3H, CHCH 3
) , 1.34-1.71 (m×2, 2H, CH 2
CH 3
) , 2.87-2.91 および 2.97-3.00 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 3.4 Hz) , 3.77-3.91 および 4.74-4.87 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.40-7.46 (m, 1H, 芳香族) , 7.54-7.67 (comple
x, 4H, 芳香族) , 7.72-7.79 (m, 1H, 芳香族) ,
7.94-8.00 (d, 1H, 芳香族, J = 8.0 Hz) , 8.00-8.1
0 (m, 1H, 芳香族) .
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 10.9 および 11.0 および 11.1,
17.2 および 17.3 および 18.4 および 18.5, 26
.3 および 26.3 および 30.4 および 30.5, 26.6
および 27.3 および 27.4, 50.4 および 50.6
および 55.7 および 55.8, 120.4 および 120.5,
120.5 および 120.8, 120.9 および 121.1, 126.7
および, 126.8 および 126.9, 126.8, 127.7 およ
128.5, 130.9 および 131.2, 130.8 および 130.
8 および 130.9 および 131.1, 132.3 および 13
2.4 および 132.5, 133.0, 134.0 および 134.1 お
よび 134.2 および 134.2 および 134.2, 136.6
よび 136.7, 139.5 および 139.6 および 139.7,
148.1 および 148.2 および 148.4, 156.1 およ
156.3 および 156.4, 19.1 および 169.8.
IR (KBr, cm -1
) , 511, 756, 826, 994, 1053, 1084, 1134, 1320, 13
43, 1377, 1404, 1428, 1464, 1563, 1630, 2874, 2934,
2971。
1-(2-クロロ-5-トリ-n-ブチルスタンニルフェ
ル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
ンカルボキサミド(1-(2-chloro-5-tri-n-butylstannylph
enyl)-N-methyl-(1-methylpropyl)-3-isoquinolinecarboxamide)(1
9)の製造
標題化合物を前記スキーム4に従い製造した
。アルゴン雰囲気下、1-(5-ブロモ-2-クロロフ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキ
リンカルボキサミド(18)(30.0mg,69.4μmol)の脱水
ジメトキシエタン(4.0ml)溶液にビストリブチ
スタナン(105μl,208μmol)およびテトラキストリ
フェニルホスフィノパラジウム(8.02mg,6.94μmol)
を加え、90℃で一晩還流した。得られた反応
にフッ化カリウム水溶液を加え、3時間撹拌
した。前記反応液をセライトろ過した後、ろ
液を酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有
層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリ
ムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた
渣をシリカゲルクロマトグラフィー(シリカ
ゲル3g、展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=4/1)で
精製し、黄色油状物質の標題化合物(19,GIF-0809
)(21.6mg,49%)を得た。
TLC Rf 0.53 (ヘキサン/酢酸エチル = 2/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-1.08 (m, 18H), 1.18-1.36 (m, 9H),
1.42-1.70 (m, 8H) 2.89-2.92 および 2.96-2.98 (d×
2, NCH 3
, J = 3.7 Hz) , 3.80-3.94 および 4.74-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.40-7.58 (m, 4H, 芳香族) , 7.60-7.76 (m, 2H
, 芳香族) , 7.90-8.08 (m, 2H, 芳香族).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 9.7 (3C) 10.9 および 11.1, 13.7
(3C) , 17.2 および 17.3 および 18.5 および
18.7, 26.2 および 30.3 および 30.5, 27.3 (3C)
, 27.4 および 17.6 および 28.9 および 29.0
(3C) , 50.4 および 50.6 および 55.6 および
55.7, 119.9 および 120.1, 120.3 および 120.6, 1
27.2 および 127.4 および 127.4, 127.3 および
127.3, 127.6 および 128.1, 128.9 および 129.0,
130.5 および 130.5, 130.6 および 130.6, 133.3
および 133.4, 137.8 および 137.8, 138.8, 140.5,
140.6 および 140.7, 148.2 および 148.3 およ
148.4 および 148.5, 158.4 および 158.5, 170.2
および 170.2.
IR (KBr, cm -1
) , 538, 683, 812, 895, 994, 1044, 1092, 1136, 131
8, 1341, 1375, 1402, 1464, 1495, 1563, 1634, 2856,
2872, 2928, 2959.
元素分析:C 33
H 47
ClN 2
OSnについての計算値: C, 61.75 ; H, 7.38 ; N,
4.36. 測定値C, 61.57 ; H, 7.39 ; N, 4.22。
[参考例2]
1-(2-クロロ-5-メチルフェニル)-N-メチル-(1-メ
ルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド(
1-(2-chloro-5-methylphenyl)-N-methyl-(1-methylpropyl)-3-isoq
uinolinecarboxamide)(20)の製造
標題化合物を前記スキーム4に従い製造した
。アルゴン雰囲気下、1-(2-クロロ-5-トリ-n-ブ
ルスタンニルフェニル)-N-メチル-(1-メチル
ロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド(19)(25
.0mg,57.9μmol)の脱水1,4-ジオキサン溶液(4.0ml)に
炭酸カリウム(24.0mg,174μmol)、テトラキスト
フェニルホスフィノパラジウム(6.69mg,5.79μmol
)、および50%トリメチルボロキシン溶液(14.5mg,
57.9μmol)を順次加え、得られた混合物を110℃
一晩還流した。得られた反応液に蒸留水を
え、セライトろ過し、ろ液を酢酸エチル(×3)
で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、
減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルク
ロマトグラフィー(シリカゲル2g、展開溶媒;
キサン/酢酸エチル=2/1)で精製し、黄色油状
質の標題化合物(20)(16.0mg,75%)を得た。
TLC Rf 0.46 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-0.82 および 0.96-1.02 (m×2 ,
3H, CH 2
CH 3
), 1.17-1.29 (m×2 , 3H, CHCH 3
) , 1.33-1.70 (m×2, , 2H CH 2
CH 3
) , 2.36-2.42 (s×2, 3H, C 6
H 4
CH 3
) , 2.88-2.91 および 2.95-2.99 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 4.9 Hz) , 3.80-3.92 および 4.75-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) ,7.14-7.27 (m, 2H, 芳香族) , 7.38-7.45 (m, 1H,
芳香族) , 7.53-7.60 (m, 1H, 芳香族) , 7.62-7.7
8 (m, 2H, 芳香族) , 7.90-8.06 (m, 2H, 芳香族).
13
C NMR (CDCl 3
, 100 MHz) δ: 10.9 および 11.0 および 11.1,
17.1 および 17.2 および 18.4 および 18.5, 20
.8 および 20.9, 26.3 および 29.6, 26.6 およ
27.4 および 27.4, 50.3 および 50.6 および
55.6 および 55.8, 119.9 および 120.2, 120.4
よび 120.6, 120.4 および 120.6, 127.2 および
127.4, 127.6 および 127.6, 128.1, 129.3 および
129.4, 130.7, 131.8 および 131.9, 136.5 および
136.7, 136.7 および 136.8, 137.5 および 137.6,
148.1 および 148.2, 158.1 および 158.2, 169.4
および 170.1 および 170.2.
IR (KBr, cm -1
) , 569, 627, 687, 754, 801, 814, 899, 994, 1055,
1092, 1138, 1320, 1350, 1377, 1404, 1428, 1464, 147
4, 1563, 1584, 1632, 2874, 2932, 2969, 3058.
元素分析: C 22
H 23
ClN 2
O についての計算値: C, 72.02 ; H, 6.32 ; N,
7.64. 測定値 C, 71.79 ; H, 6.54 ; N, 7.38。
(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチル-(1-
チルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミ
ド(22)の製造
標題化合物を以下のスキーム5に従い製造し
た。
(i)(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-(1-メチ
ルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド((
R)-1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-N-(1-methylpropyl)-3-isoquinol
inecarboxamide)(21)の製造
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-イソキノリ
カルボン酸(16)(200mg,552μmol)のジメチルホル
アミド溶液(5.9ml)に0℃において、1-ヒドロキ
ベンゾトリアゾール(89.4mg,662μmol)、(R)-sec-ブ
チルアミン(67.2μl,662μmol)、1-エチル-3-(3-ジメ
ルアミノプロピル)-カルボジイミド塩酸塩(2
11mg,1.10μmol)およびトリエチルアミン(153μl,1.10
μl)を順次加えた。その後、前記混合物を室
で一晩撹拌した。得られた反応液を2規定塩
(×2)で洗浄し、ジエチルエーテル(×3)で抽出
した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し
、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃
縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマト
グラフィー(シリカゲル20g、展開溶媒;ヘキサ
/酢酸エチル=3/1)で精製し、白色泡状物質の
題化合物(230mg,100%)を得た。
TLC Rf 0.22 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 0.94-1.01 (t×2, 3H, CH 2
CH 3
, J = 7.3 Hz), 1.25-1.30 (d×2, CHCH 3
, J = 4.8 Hz) , 1.56-1.69 (m, 2H, CH 2
CH 3
) , 4.09-4.24 (m, 1H, CHCH 3
) , 7.44-7.49 (d, 1H, 芳香族, J = 9.1 Hz) , 7.
60-7.70 (complex, 4H, 芳香族) , 7.74-7.80 (dd, 1H,
芳香族, J = 7.4, 7.4 Hz) , 7.94-8.01 (br, 1H,
NH) , 8.04-8.09 (d, 1H, 芳香族, J = 8.4 Hz) ,
8.68-8.71 (s, 1H, 芳香族)。
(ii)(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチ
-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリンカルボキ
サミド((R)-1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-N-methyl-(1-methylp
ropyl)-3-isoquinolinecarboxamide)(22)の製造
アルゴン雰囲気下、(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロ
ェニル)-N-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリ
カルボキサミド(21)(215mg,514μmol)を脱水ジメチ
ルスルホキシド(1.3ml)および脱水ジメチルホ
ムアミド(3.0ml)に溶解した後、0℃で水素化ナ
トリウム(61.7mg,1.54mmol)を5分かけて加え、得ら
れた混合物を一時間撹拌した。得られた混合
物にヨウ化メチル(64.1μl,1.03mmol)を加え、室温
で一晩撹拌した。得られた混合物に蒸留水を
加え、酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた
機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナト
ウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られ
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(シリ
カゲル20g、展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=2/1
)で精製し、白色泡状物質の標題化合物(214mg,9
7%)を得た。
TLC Rf 0.41 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-0.85 および 0.96-1.05 (t×2, 3H
, J = 7.4 Hz, CH 2
CH 3
) , 1.19-1.25 (m×2, 3H, CHCH 3
) , 1.37-1.70 (m×2, 2H, CH 2
CH 3
) , 2.88-2.90 および 2.96-3.00 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 3.9 Hz) , 3.80-3.90 および 4.75-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.40-7.46 (m, 1H, 芳香族) , 7.54-7.66 (comple
x, 4H, 芳香族) , 7.77-7.78 (m, 1H, 芳香族) ,
7.94-7.99 (d, 1H, 芳香族, J = 8.2 Hz) , 8.00-8.0
9 (m, 1H, 芳香族) 。
(R)-1-(2-クロロ-5-トリ-n-ブチルスタンニルフ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキ
リンカルボキサミド((R)-1-(2-chloro-5-tri-n-butyls
tannylphenyl)-N-methyl-(1-methylpropyl)-3-isoquinolinecarbox
amide)(23)の製造
標題化合物をスキーム5に従い製造した。ア
ルゴン雰囲気下、(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
リンカルボキサミド(22)(50.0mg,116μmol)の脱水ジ
メトキシエタン(6.6ml)溶液にビストリブチル
タナン(183μl,347μmol)およびテトラキストリフ
ェニルホスフィノパラジウム(13.4mg,11.6μmol)を
加え、80℃において一晩還流した。反応液に
ッ化カリウム水溶液を加え、一晩撹拌した
セライトろ過した後、ろ液を酢酸エチル(×3
)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水
洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後
減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲル
ロマトグラフィー(シリカゲル5g、展開溶媒;
キサン/酢酸エチル=5/1)で精製した。精製し
化合物をさらに、逆相シリカゲルクロマト
ラフィー(ODS4g,展開溶媒;アセトニトリル)で
度精製し、黄色油状物質の標題化合物(23,GIF
-0842)(39.7mg,53%)を得た。
TLC Rf 0.70 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-1.14 (m, 18H) , 1.18-1.35 (m, 9H
) , 1.40-1.70 (m, 8H) 2.89-2.92 および 2.96-2.99
(d×2, NCH 3
, J = 3.6 Hz) , 3.84-3.95 および 4.75-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.40-7.60 (m, 4H, 芳香族) , 7.62-7.75 (m, 2H
, 芳香族) , 7.93-8.07 (m, 2H, 芳香族)。
[参考例3]
(R)-1-(2-クロロ-5-メチルフェニル)-N-メチル-(1
-メチルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサ
ド((R)-1-(2-chloro-5-methylphenyl)-N-methyl-(1-methylprop
yl)-3-isoquinolinecarboxamide)(24)の製造
標題化合物をスキーム5に従い製造した。ア
ルゴン雰囲気下、(R)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
リンカルボキサミド(22)(50.0mg,116μmol)の脱水1,4
-ジオキサン溶液(9.0ml)に、すり潰した炭酸カ
ウム(48.0mg,347μmol)、テトラキストリフェニ
ホスフィノパラジウム(13.4mg,11.6μmol)、およ
50%トリメチルボロキシン溶液(39.2μl,139μmol)
順次加え、110℃で一晩還流した。得られた
応液に蒸留水を加え、セライトろ過し、ろ
を酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機
層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残
渣をPLC(展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=1/1)で
製し、黄色油状物質の標題化合物(24,GIF-0841)
(41.6mg,99%)を得た。
TLC Rf 0.32 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.74-0.82 および 0.96-1.02 (m×2, 3H
, CH 2
CH 3
) 1.17-1.26 (m×2 , 3H, CHCH 3
) , 1.34-1.70 (m×2, 2H CH 2
CH 3
) , 2.37-2.40 (s×2, 3H, C 6
H 4
CH 3
) , 2.88-2.91 および 2.96-2.99 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 4.7 Hz) , 3.80-3.90 および 4.75-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) ,7.18-7.27 (m, 2H, 芳香族) , 7.38-7.45 (m, 1H,
芳香族) , 7.52-7.59 (m, 1H, 芳香族) , 7.62-7.7
6 (m, 2H, 芳香族) , 7.90-8.06 (m, 2H, 芳香族)
(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチル-(1-
チルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミ
ド(26)の製造
標題化合物をスキーム5に従い製造した。
(i)(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-(1-メチ
プロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド((S)
-1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-N-(1-methylpropyl)-3-isoquinolin
ecarboxamide) (25)の製造
1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-3-イソキノリ
カルボン酸(16)(200mg,552μmol)のジメチルホル
アミド溶液(5.9ml)に0℃で、1-ヒドロキシベン
トリアゾール(89.4mg,662μmol)、(S)-sec-ブチルア
ミン(67.0μl,662μmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルア
ノプロピル)-カルボジイミド塩酸塩(211mg,1.10
μmol)、およびトリエチルアミン(153μl,1.10μl)
順次加えた。その後、前記混合物を室温で
晩撹拌した。得られた反応液を2規定塩酸(×2
)で洗浄し、ジエチルエーテル(×3)で抽出した
。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し
た。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラ
フィー(シリカゲル20g、展開溶媒;ヘキサン/酢
酸エチル=3/1)で精製し、白色泡状物質の標題
合物(234mg,定量的)を得た。
TLC Rf 0.21 (ヘキサン/酢酸エチル = 4/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ: 0.94-1.01 (t×2, 3H, CH 2
CH 3
, J = 7.2 Hz), 1.25-1.31 (d×2, CHCH 3
, J = 4.8 Hz) , 1.56-1.70 (m, 2H, CH 2
CH 3
) , 4.11-4.24 (m, 1H, CHCH 3
) , 7.44-7.49 (d, 1H, 芳香族, J = 9.9 Hz) , 7.
60-7.69 (complex, 4H, 芳香族) , 7.74-7.80 (dd, 1H,
芳香族, J = 7.4, 7.5 Hz) , 7.94-8.01 (br, 1H,
NH) , 8.04-8.10 (d, 1H, 芳香族, J = 8.2 Hz) ,
8.67-8.71 (s, 1H, 芳香族)。
(ii)(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェニル)-N-メチ
-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリンカルボキ
サミド((S)-1-(5-bromo-2-chlorophenyl)-N-methyl-(1-methylp
ropyl)-3-isoquinolinecarboxamide)(26)の製造
アルゴン雰囲気下、(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロ
ェニル)-N-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリ
カルボキサミド(25)(220mg,526μmol)を脱水ジメチ
ルスルホキシド(1.3ml)、脱水ジメチルホルム
ミド(3.1ml)において溶解した後、0℃において
水素化ナトリウム(63.1mg,1.58mmol)を5分かけて加
え、一時間撹拌した。ヨウ化メチル(65.6μl,1.0
5mmol)を加え、室温において一晩撹拌した。蒸
留水を加え、酢酸エチル(×3)において抽出し
。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸
トリウムで乾燥、ろ過した後、減圧濃縮し
。シリカゲルクロマトグラフィー(シリカゲ
ル20g、展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=3/1)に
精製し、白色泡状物質の標題化合物(174mg,77%)
を得た。
TLC Rf 0.42 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:?0.76-0.82 および 0.96-1.02 (t×2, 3
H, J = 7.3 Hz, CH 2
CH 3
) , 1.19-1.25 (m×2, 3H, CHCH 3
) , 1.34-1.70 (m×2, 2H, CH 2
CH 3
) , 2.88-2.90 および 2.97-2.99 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 3.3 Hz) , 3.80-3.90 および 4.75-4.85 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.390-7.45 (m, 1H, 芳香族) , 7.52-7.66 (compl
ex, 4H, 芳香族) , 7.72-7.78 (m, 1H, 芳香族) ,
7.93-7.98 (d, 1H, 芳香族, J = 8.5 Hz) , 8.00-8.
09 (m, 1H, 芳香族) 。
(S)-1-(2-クロロ-5-トリ-n-ブチルスタンニルフ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキ
リンカルボキサミド((S)-1-(2-chloro-5-tri-n-butyls
tannylphenyl)-N-methyl-(1-methylpropyl)-3-isoquinolinecarbox
amide)(27)の製造
標題化合物をスキーム5に従い製造した。ア
ルゴン雰囲気下、(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
リンカルボキサミド(26)(30.0mg,69.4μmol)の脱水
メトキシエタン(4.0ml)溶液にビストリブチル
タナン(105μl,208μmol)およびテトラキストリ
ェニルホスフィノパラジウム(8.02mg,6.94μmol)
加え、90℃で一晩還流した。得られた反応液
にフッ化カリウム水溶液を加え、一晩撹拌し
た。セライトろ過した後、ろ液を酢酸エチル
(×3)で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した
、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲ
クロマトグラフィー(シリカゲル3g、展開溶
;ヘキサン/酢酸エチル=4/1)で精製した。得ら
れた物質を、その後、逆相シリカゲルクロマ
トグラフィー(ODS4g,展開溶媒;アセトニトリル)
で再度精製し、黄色油状物質の標題化合物(35
.4mg,48%)を得た。
TLC Rf 0.64 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.75-1.15 (m, 18H) , 1.18-1.36 (m, 9H
) , 1.38-1.70 (m, 8H) 2.89-2.93 および 2.95-3.00
(d×2, NCH 3
, J = 3.7 Hz) , 3.82-3.96 および 4.75-4.86 (m×2
, 1H, CHCH 3
) , 7.42-7.60 (m, 4H, 芳香族) , 7.62-7.76 (m, 2H
, 芳香族) , 7.92-8.08 (m, 2H, 芳香族)。
[参考例4]
(S)-1-(2-クロロ-5-メチルフェニル)-N-メチル-(1-
チルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミ
ド((S)-1-(2-chloro-5-methylphenyl)-N-methyl-(1-methylpropyl
)-3-isoquinolinecarboxamide)(28)の製造
標題化合物をスキーム5に従い製造した。ア
ルゴン雰囲気下、(S)-1-(5-ブロモ-2-クロロフェ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
リンカルボキサミド(26)(50.0mg,116μmol)の脱水1,4
-ジオキサン溶液(8.0ml)に、すり潰した炭酸カ
ウム(48.0mg,347μmol)、テトラキストリフェニ
ホスフィノパラジウム(13.4mg,11.6μmol)、およ
50%トリメチルボロキシン溶液(39.2μl,139μmol)
順次加え、110℃で一晩還流した。得られた
応液に蒸留水を加え、セライトろ過し、ろ
を酢酸エチル(×3)で抽出した。合わせた有機
層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残
渣をPLC(展開溶媒;ヘキサン/酢酸エチル=1/1)で
製し、黄色油状物質の標題化合物(28)(37.3mg,8
9%)を得た。
TLC Rf 0.39 (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1).
1
H NMR (CDCl 3
, 400 MHz) δ:0.74-0.82 および 0.96-1.02 (m×2, 3H
, CH 2
CH 3
) 1.18-1.28 (m×2, 3H, CHCH 3
) , 1.32-1.70 (m×2, 2H CH 2
CH 3
) , 2.37-2.41 (s×2, 3H, C 6
H 4
CH 3
) , 2.88-2.91 および 2.96-3.00 (d×2, 3H, NCH 3
, J = 5.3 Hz) , 3.80-3.92 および 4.72-4.86 (m×2
, 1H, CHCH 3
) ,7.18-7.28 (m, 2H, 芳香族) , 7.38-7.44 (m, 1H,
芳香族) , 7.52-7.60 (m, 1H, 芳香族) , 7.62-7.7
6 (m, 2H, 芳香族) , 7.92-8.05 (m, 2H, 芳香族)
標識体であるN-(2,5-ジメトキシベンジル)-N-[5 -フルオロ(4-[ 11 C]メチルフェノキシ)フェニル]アセトアミド([ 11 C]-9)を製造した。
具体的には、トリスジベンジリデンアセト ジパラジウム(1.8mg,1.97μmol)およびトリ-O-ト ルホスフィン(2.4mg,7.9μmol)のDMF溶液(0.27mL)を 応容器(A)中に準備し、室温に設置した。反 容器(A)中の溶液は、[ 11 C]ヨウ化メチルを吹き込む10~20分前に設置し 。
一方、スズ前駆体であるN-(2,5-ジメトキシベ ンジル)-N-[5-フルオロ(4-トリ-n-ブチルスタン ルフェノキシ)フェニル]-アセトアミド(8)(3.1m g,4.5μmol)、CuCl(2.0mg,20μmol)、およびK 2 CO 3 (2.8mg,20μmol)のDMF溶液(0.06mL)を反応容器(B)に準 し、室温に設置した。
続いて反応容器(A)に[ 11 C]ヨウ化メチルを30mL/分のガス流量で吹き込 、その後1分間静置した。得られた溶液を反 容器(B)に添加し、さらに反応容器(A)の内部 0.04mLのDMFで洗浄し、この溶液も反応容器(B) 添加した。
反応容器(B)中の混合溶液を65℃で5分間加熱 、得られた反応溶液を綿栓を用いてろ過し 。さらに反応容器(B)の内部を0.35mLのDMFとH 2 Oの混合溶液(DMF:H 2 O=1:5)で洗浄し、この溶液も綿栓を用いてろ過 した。ろ液をHPLCに供し、標題化合物の分離 製を行なった。目的のフラクションをエバ レーターを用いて減圧下に濃縮し、希釈溶 (生理食塩水(3.6mL)、プロピレングリコール(0. 3mL)、エタノール(0.1mL)およびTween80界面活性剤 (0.1mL))を添加してサルを被験対象とした投与 溶液とした。
標題化合物のHPLCによる分離精製条件、純度
分析条件、および分析収率は下記の通りであ
る。
分離精製条件:GL Science ODS-3 10 x 250 mm, UV
ンジ1.28, UV 254 nm, CH 3
CN:H 2
O=65:35, 流速6.0 mL/分, 保持時間約16.5分。
分析条件(純度測定、比放射能測定):GL Scienc
e ODS-3 4.5 x 150 mm, UVレンジ0.005, UV 254 nm,
CH 3
CN:H 2
O=57:43, 流速2.0 mL/min, 保持時間約9.2分。
分離精製の結果を図1に示す。図1中、上半
が吸光度でのグラフであり、下半分が放射
量でのグラフである。
標題化合物([ 11
C]-9)のHPLC分析収率は85%以上であった(HPLC放射
スペクトルの面積比より算出した)。
前記製造は、実施例2のN-(2,5-ジメトキシ ンジル)-N-[5-フルオロ(4-トリ-n-ブチルスタン ルフェノキシ)フェニル]-アセトアミド(8)か 出発して40分以内で完了した。すなわち、 発明の式(II)で表わされる化合物は、短時間 標識されたメチルを有する化合物に変換す ことを確認できた。また、図1に示すように 、この標識されたメチルを有する化合物への 変換は、放射収量2.5GBq以上で変換されること が確認できた。この放射収量が1GBq以上であ ば、創薬のためのPETを用いるスクリーニン に適切であるため、本発明の式(II)で表わさ る化合物は、例えば、サル、ヒト等を対象 した創薬のためのPETを用いるスクリーニン に利用可能であることが確認できた。
実施例9で製造したN-(2,5-ジメトキシベンジ )-N-[5-フルオロ(4-[ 11 C]メチルフェノキシ)フェニル]アセトアミド([ 11 C]-9)( 11 C-標識体)を、生理食塩水(3.6mL)、プロピレン リコール(0.3mL)、エタノール(0.1mL)およびTween8 0界面活性剤(0.1mL)の混合溶液に希釈し、約900M Bqの放射能を静脈注射によりサルに投与し、 物研究用PET装置である浜松ホトニクス社製S HR-7700を用いて([ 11 C]-20)のサル脳内におけるPET解析を行った。そ の結果を図2に示す。また、その時間放射能 曲線も図2に示す。図2中、(a)はサルに標識体 を投与後0~45分後のPET画像、(b)はサルに標識 を投与後60~90分後のPET画像、(c)はその時間放 射能量曲線である。
[比較例1]
実施例9で製造したN-(2,5-ジメトキシベンジ
)-N-[5-フルオロ(4-[ 11
C]メチルフェノキシ)フェニル]アセトアミド([
11
C]-9)(標識体)の代わりに、下記式で表わされ
[ 11
C]DAA1106を用いる以外は実施例10と同様にして
[ 11
C]DAA1106をサルに投与した。得られたPET画像を
図3(a)および(b)に示す。また、その時間放射
量曲線も図3に示す。図3中、(a)はサルに標識
体を投与後0~45分後のPET画像、(b)はサルに標
体を投与後60~90分後のPET画像、(c)はその時間
放射能量曲線である。なお、[ 11
C]DAA1106は、WO9906353号に従い別途製造した。
図2および図3に示すように、実施例10および 比較例1のPET画像から、本発明のPETスクリー ング用分子プローブを製造するためのキッ を用いて製造された標識化合物は、従来の 識化合物[ 11 C]DAA1106と比較して投与後10分間の脳内初期取 込み量が増大し、かつS/N比が高いPET画像が られることが確認できた。このことから、 施例9で製造したN-(2,5-ジメトキシベンジル)- N-[5-フルオロ(4-メチルフェノキシ)フェニル] セトアミド([ 11 C]-9)は、代謝に安定であることが確認できた また、従来の標識化合物[ 11 C]DAA1106は脳内に取り込まれると、脳外へ排出 されにくいことが確認できた。また、-OCH 3 の炭素を標識している従来の標識化合物に対 し、ベンゼン環上に直接炭素-炭素結合を形 する-CH 3 の炭素を標識している実施例9で製造したN-(2, 5-ジメトキシベンジル)-N-[5-フルオロ(4-メチル フェノキシ)フェニル]アセトアミド([ 11 C]-9)は、脳内への取り込みが増大することが 認できた。
標識体である1-(2-クロロ-5-[ 11 C]メチルフェニル)-N-メチル-(1-メチルプロピ )-3-イソキノリンカルボキサミド([ 11 C]-20)を製造した。
具体的には、トリスジベンジリデンアセト ジパラジウム(1.8mg,1.97μmol)およびトリ-O-ト ルホスフィン(2.4mg,7.9μmol)のDMF溶液(0.27mL)を 応容器(A)中に準備し、室温に設置した。反 容器(A)中の溶液は、[ 11 C]ヨウ化メチルを吹き込む10~20分前に設置し 。
一方、スズ前駆体である1-(2-クロロ-5-トリ-n -ブチルスタンニルフェニル)-N-メチル-(1-メチ ルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド(1 9)(2.9mg,4.5μmol)、CuCl(2.0mg,20μmol)およびK 2 CO 3 (2.8mg,20μmol)のDMF溶液(0.06mL)を反応容器(B)に準 し、室温に設置した。
続いて反応容器(A)に[ 11 C]ヨウ化メチルを30mL/分のガス流量で吹き込 、その後1分間静置した。得られた溶液を反 容器(B)に添加し、さらに反応容器(A)の内部 0.04mLのDMFで洗浄し、この溶液も反応容器(B) 添加した。
反応容器(B)中の混合溶液を65℃で5分間加熱 、得られた反応溶液を綿栓を用いてろ過し 。さらに反応容器(B)の内部を0.35mLのDMFとH 2 Oの混合溶液(DMF:H 2 O=1:5)で洗浄し、この溶液も綿栓を用いてろ過 した。ろ液をHPLCに供し、標題化合物の分離 製を行なった。目的のフラクションをエバ レーターを用いて減圧下に濃縮し、希釈溶 (生理食塩水(3.6mL)、プロピレングリコール(0. 3mL)、エタノール(0.1mL)およびTween80界面活性剤 (0.1mL))を添加してサルを被験対象とした投与 溶液とした。
標題化合物のHPLCによる分離精製条件、純度
分析条件、および分析収率は下記の通りであ
る。
分離精製条件:GL Science ODS-3 10 x 250 mm, UV
ンジ1.28, UV 254 nm, CH 3
CN:H 2
O=65:35, 流速6.0 mL/分, 保持時間約16.5分
分析条件(純度測定、比放射能測定):GL Science
ODS-3 4.5 x 150 分, UVレンジ0.005, UV 240 nm,
CH 3
CN:H 2
O=57:43, 流速2.0 mL/分, 保持時間約9.2分。
分離精製の結果を図4に示す。図4中、上半
が吸光度でのグラフであり、下半分が放射
量でのグラフである。
標題化合物([ 11
C]-20)のHPLC分析収率は85%以上であった(HPLC放射
線スペクトルの面積比より算出した)。
前記製造は、実施例4の1-(2-クロロ-5-トリ- n-ブチルスタンニルフェニル)-N-メチル-(1-メ ルプロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド( 19)から出発して40分以内で完了した。すなわ 、本発明の式(III)で表わされる化合物は、 時間で標識されたメチルを有する化合物に 換することを確認できた。また、図4に示す うに、この標識されたメチルを有する化合 への変換は、放射収量2.5GBq以上で変換され ことが確認できた。この放射収量が1GBq以上 であれば、創薬のためのPETを用いるスクリー ニングに適切であるため、本発明の式(III)で わされる化合物は、例えば、サル、ヒト等 対象とした創薬のためのPETを用いるスクリ ニングに利用可能であることが確認できた
実施例11で製造した1-(2-クロロ-5-メチルフェ ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ リンカルボキサミド([ 11 C]-20)( 11 C-標識体)を、生理食塩水(3.6mL)、プロピレン リコール(0.3mL)、エタノール(0.1mL)およびTween8 0界面活性剤(0.1mL)の混合溶液に希釈し、約900M Bqの放射能を静脈注射によりサルに投与し、 物研究用PET装置である浜松ホトニクス社製S HR-7700を用いて([ 11 C]-20)のサル脳内におけるPET解析を行った。そ の結果を図2に示す。また、その時間放射能 曲線も図2に示す。図2中、(a)はサルに標識体 を投与後0~45分後のPET画像、(b)はサルに標識 を投与後60~90分後のPET画像、(c)はその時間放 射能量曲線である。
[比較例2]
実施例11で製造した1-(2-クロロ-5-メチルフェ
ニル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノ
リンカルボキサミド([ 11
C]-20)(標識体)の代わりに、下記式で表わされ
[ 11
C]PK11195を用いる以外は実施例12と同様にして
[ 11
C]PK11195をサルに投与した。得られたPET画像を
図6(a)および(b)に示す。また、その時間放射
量曲線も図6に示す。図6中、(a)はサルに標識
体を投与後0~45分後のPET画像、(b)はサルに標
体を投与後60~90分後のPET画像、(c)はその時間
放射能量曲線である。なお、[ 11
C]PK11195は、R.Camsonneら, Journal of Labeled Compoun
ds and Radiopharmaceuticals, 1984, 11, p.985-991に従
別途製造した。
図5および図6に示すように、実施例12および 比較例2のPET画像から、本発明のPETスクリー ング用分子プローブを製造するためのキッ を用いて製造された標識化合物は、従来の 識化合物[ 11 C]PK11195と比較して投与後10分間の脳内初期取 込み量が増大し、かつS/N比が高いPET画像が られることが確認できた。このことから、 施例11で製造した1-(2-クロロ-5-メチルフェニ ル)-N-メチル-(1-メチルプロピル)-3-イソキノリ ンカルボキサミド([ 11 C]-20)は、代謝に安定であることが確認できた 。また、従来の標識化合物[ 11 C]PK11195は脳内に取り込まれると脳外へ排出さ れにくいのに対し、実施例11で製造した1-(2- ロロ-5-メチルフェニル)-N-メチル-(1-メチルプ ロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド([ 11 C]-20)(標識体)は時間経過と共に速やかに脳内 ら排出されていることが確認できた。また -NCH 3 の炭素を標識している従来の標識化合物に対 し、ベンゼン環上に直接炭素-炭素結合を形 する-CH 3 の炭素を標識している実施例11で製造した1-(2 -クロロ-5-メチルフェニル)-N-メチル-(1-メチル プロピル)-3-イソキノリンカルボキサミド([ 11 C]-20)は、脳内への取り込みが増大することが 確認できた。
[参考例5]
10-O-p-メチルベンジルギンコライドB(29)の製
ギンコライドB(31)(15.4mg,36.2μmol)のアセトニ
リル(0.5mL)の溶液に、炭酸カリウム(19.8mg,143μ
mol)、4-メチルベンジルブロマイド(24.5mg,132μmo
l)、およびヨウ化カリウム(3.0mg,18.0μmol)を加
、混合溶液を75℃で45分間反応させた。反応
液を室温まで冷却した後、固形物を濾過し
ろ液を減圧下で濃縮した。反応生成物はシ
カゲルカラムクロマトグラフィーにて分離
製し(溶出液としてシクロヘキサン:アセト
=6:1~4:1を用いた)、目的の10-O-p-メチルベンジ
ギンコライドB(29)を白色固体として得た(14.0
mg,26.4μmol,収率72.9%)。
TLC: Rf = 0.50 (シクロヘキサン/アセトン =3
/2).
1
H NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 1.13 (s, 9H, tert-ブチル), 1.22 (
d, J = 7.4 Hz, 3H, CH 3
), 1.88 (dd, J = 3.4, 13.8 Hz, 1H, 8-H), 1.96 (td
, J = 4.2, 13.8 Hz, 1H, 7a-H), 2.22 (dd, J = 3.4
, 13.8 Hz, 1H, 7b-H), 2.34 (s, 3H , CH 3
), 3.01 (q, J = 7.4 Hz, 1H, 14-H), 4.20 (d, J =
7.8 Hz, 1H, 1-H), 4.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H, 2-H),
4.67 (d, J = 10 Hz, 1H, ベンジル位のH, 1H),
5.23 (s, 1H, 10-H), 5.28 (d, J = 4.2 Hz, 1H, 6-H
), 5.38 (d, J = 10 Hz, 1H, ベンジル位のH, 1H)
, 6.11 (s, 1H, 12-H), 7.21 および 7.28 (AA’BB
系, 芳香族, 4H).
13
C NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 7.31, 21.4, 29.3 (3C), 32.3, 37.1,
41.8, 49.1, 68.0, 72.9, 74.1, 74.5, 76.0, 80.2, 83.9
, 90.9, 99.0, 110.7, 129.5 (2C), 130.7 (2C) , 132.2
, 140.4, 171.9, 172.1, 176.4。
10-O-p-ブロモベンジルギンコライドB(32)の製
ギンコライドB(31)(16.4 mg,38.6μmol)のアセトニ
トリル(0.6mL)の溶液に、炭酸カリウム(20.4mg,147
μmol)、4-ブロモベンジルブロマイド(31.7mg,126μ
mol)、およびヨウ化カリウム(3.3mg,19.8μmol)を加
え、混合溶液を70℃で50分間反応させた。反
溶液を室温まで冷却した後、固形物を濾過
、ろ液を減圧下で濃縮した。反応生成物は
リカゲルカラムクロマトグラフィーにて分
精製し(溶出液としてシクロヘキサン:アセト
ン=6:1~4:1を用いた)、目的の10-O-p-ブロモベン
ルギンコライドB(32)を白色固体として得た(14
.8mg,24.9μmol,収率64.5%)。
TLC: Rf = 0.42 (シクロヘキサン/アセトン =3
/2).
1
H NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 1.10 (s, 9H, tert-butyl), 1.22 (d,
J = 7.0 Hz, 3H, CH3), 1.88 (dd, J = 4.0, 13.8 Hz
, 1H, 8-H), 1.98 (td, J = 4.0, 13.8 Hz, 1H, 7a-H)
, 2.23 (dd, J = 4.0, 13.8 Hz, 1H, 7b-H), 3.02 (q,
J = 7.0 Hz, 1H, 14-H), 4.24 (d, J = 7.4 Hz, 1H
, 1-H), 4.51 (d, J = 7.4 Hz, 1H, 2-H), 4.68 (d,
J = 11.0 Hz, 1H, ベンジル位のH, 1H), 5.22 (s,
1H, 10-H), 5.34 (d, J = 4.0 Hz, 1H, 6-H), 5.41 (
d, J = 11.0 Hz, 1H, ベンジル位のH, 1H), 6.11
(s, 1H, 12-H), 7.33 and 7.54 (AA’BB’系, 芳香
, 4H).
13
C NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 7.27, 29.1 (3C), 32.2, 37.0, 41.5,
48.9, 67.7 72.5, 73.2, 74.2, 75.9, 79.7, 83.4, 90.4,
95.5, 110.2, 124.0, 130.5 (2C), 132.6 (2C), 133.4,
170.8, 171.0, 175.3。
10-O-p-ヨードベンジルギンコライドB(33)の製
ギンコライドB(31)(63.5mg,149μmol)のアセトニト
リル(2.0mL)の溶液に、炭酸カリウム(60.9mg,440μm
ol)、4-ヨードベンジルブロマイド(126mg,424μmol)
、およびヨウ化カリウム(11.0mg,66.2μmol)を加え
、混合溶液を70℃で40分間反応させた。反応
液を室温まで冷却した後、固形物を濾過し
ろ液を減圧下で濃縮した。反応生成物はシ
カゲルカラムクロマトグラフィーにて分離
製し(溶出液としてシクロヘキサン:アセトン
=6:1~4:1を用いた)、目的の10-O-p-ヨードベンジ
ギンコライドB(33)を白色固体として得た(69.2m
g,108μmol,収率72.4%)。
TLC: Rf = 0.45 (シクロヘキサン/アセトン =3
/2).
1
H NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 1.10 (s, 9H, tert-ブチル), 1.21 (
d, J = 7.1 Hz, 3H, CH 3
), 1.87 (dd, J = 4.1, 13.7 Hz, 1H, 8-H), 1.98 (td
, J = 3.8, 13.7 Hz, 1H, 7a-H), 2.22 (dd, J = 4.1
, 13.7 Hz, 1H, 7b-H), 3.02 (q, J = 7.1 Hz, 1H, 1
4-H), 4.24 (d, J = 7.4 Hz, 1H, 1-H), 4.51 (d, J
= 7.4 Hz, 1H, 2-H), 4.68 (d, J = 11.0 Hz, 1H,
ンジル位のH, 1H), 5.21 (s, 1H, 10-H), 5.34 (d,
J = 3.8 Hz, 1H, 6-H), 5.40 (d, J = 11.0 Hz, 1H,
ベンジル位のH, 1H), 6.11 (s, 1H, 12-H), 7.19
and 7.75 (AA’BB’系, 芳香族, 4H).
13
C NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 7.29, 29.1 (3C), 32.2, 37.0, 41.6,
48.9, 67.6 72.4, 73.3, 74.1, 75.9, 79.6, 83.4, 90.5,
95.8, 98.6, 110.2, 130.5 (2C), 134.0, 138.6 (2C),
170.9, 171.1, 175.5。
10-O-p-(トリn-ブチルスタニル)ベンジルギン
ライドB(34)の合成
ヨードベンジルギンコライドB(33)(108mg,169μmo
l)のDME溶液に、ビス(トリn-ブチルチン)(250μL,4
94μmol)、テトラキス(トリフェニルホスフィン
)パラジウム(0)(20mg,17.3μmol)を加え、混合溶液
90℃で22時間反応させた。反応溶液を室温ま
で冷却した後、飽和フッ化カリウム水溶液を
加え、析出した固形物を濾過した。ろ液を酢
酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗
い、硫酸ナトリウムで水分を除去した。有機
層を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーにて分離精製し(溶出
としてヘキサン:酢酸エチル=4:1~3:1を用いた)
目的の10-O-p-(トリn-ブチルスタニル)ベンジ
ギンコライドB(34)を白色固体として得た(55.7m
g,6.92μmol,収率40.9%)。
TLC: Rf = 0.50 (シクロヘキサン/アセトン=3/2
).
1
H NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 0.88 (t, J = 7.6 Hz, 9H, 3CH 3
), 1.00-1.16 (m, 15H, tert-ブチル, 3CH 2
), 1.22 (d, J = 7.3 Hz, 3H, CH 3
), 1.29-1.38 (m, 6H, 3CH 2
), 1.49-1.62 (m, 6H, 3CH 2
), 1.88 (dd, J = 4.0, 13.8 Hz, 1H, 8-H), 1.98 (td
, J = 4.0, 13.8 Hz, 1H, 7a-H), 2.22 (dd, J = 4.0
, 13.8 Hz, 1H, 7b-H), 3.02 (q, J = 7.3 Hz, 1H, 1
4-H), 4.24 (d, J = 7.6 Hz, 1H, 1-H), 4.51 (d, J
= 7.6 Hz, 1H, 2-H), 4.71 (d, J = 10.0 Hz, 1H,
ンジル位のH, 1H), 5.22 (s, 1H, 10-H), 5.31 (d,
J = 4.0 Hz, 1H, 6-H), 5.41 (d, J = 10.0 Hz, 1H,
ベンジル位のH, 1H), 6.16 (s, 1H, 12-H), 7.35
および 7.49 (AA’BB’系, 芳香族, 4H).
13
C NMR (CD 3
OD 400 MHz) δ 7.27, 9.63 (t, J sn(119)-C
= 340.8 Hz, J Sn(117)-C
= 324.4 Hz), 13.6, 27.3 (t, J Sn-C
= 55.9 Hz), 29.0, 29.2 (3C), 32.2, 37.0, 41.5, 49
.0, 67.7, 72.5, 74.1, 74.2, 75.8, 79.8, 83.5, 90.5,
98.4, 110.2, 128.0 (t, J Sn-C
= 39.0 Hz, 2C), 133.9, 137.3 (t, J Sn-C
= 29.9 Hz, 2C), 144.5, 170.9, 171.2, 175.3。
標識体である10-O-p-[ 11
C]メチルベンジルギンコライドB([ 11
C]-29)を製造した。
トリスジベンジリデンアセトンジパラジウ
(1.8mg,1.97μmol)および、トリ-O-トリルホスフ
ン(2.4mg,7.9μmol)のDMF溶液(0.27 mL)を反応容器(A)
に準備し、室温に設置した。反応容器(A)中の
溶液は、[ 11
C]ヨウ化メチルを吹き込む10-20分前に設置し
。
一方、スズ前駆体である10-O-p-(トリn-ブチル スタニル)ベンジルギンコライドB(34)(3.6mg,4.5μ mol)、CuCl(2.0mg,20μmol)およびK 2 CO 3 (2.8mg,20μmol)のDMF溶液(0.06mL)を反応容器(B)に準 し、室温に設置した。続いて反応容器(A)に[ 11C]ヨウ化メチルを30mL/minのガス流量で吹き込 み、その後1分間静置した。得られた溶液を 応容器(B)に移送し、さらに反応容器(A)の内 を0.04 mLのDMFで洗浄し、この溶液も反応容器 (B)に添加した。反応容器(B)中の混合溶液を65 で5分間加熱し、得られた反応溶液を綿栓を 用いてろ過した。さらに反応容器(B)の内部を 0.35mLのDMFとH 2 Oの混合溶液(DMF:H 2 O=1:5)で洗浄し、この溶液も綿栓を用いてろ過 した。ろ液をHPLCに供し、標識化合物の分離 製を行なった。目的のフラクションをエバ レーターを用いて減圧下に濃縮し、希釈溶 (生理食塩水(1.8mL)、プロピレングリコール(0. 15mL)、エタノール(0.05mL)、Tween80界面活性剤(0.0 5mL)およびイントラリポス(2.05mL))を添加して ルを被験対象とした投与用溶液とした。
標題化合物のHPLCによる分離精製条件、純度
分析条件、および分析収率は下記の通りであ
る。
分離精製条件:GL Science ODS-3 10 x 250 mm, UV
ンジ1.28, UV 220 nm, CH 3
CN:H 2
O=57:43, 流速6.0 mL/分, 保持時間約16.5分
分析条件(純度測定、比放射能測定):GL Science
ODS-3 4.5 x 150 mm, UVレンジ0.005, UV 220 nm, C
H 3
CN:H 2
O=52:48, 流速2.0 mL/分n, 保持時間約7.5分
分離精製の結果を図7に示す。図7中、上半分
紫外吸光度でのグラフであり、下半分が放
能の検出を示すグラフである。
標識化合物([ 11
C]-29)のHPLC分析収率は85%以上であった(HPLC放射
線スペクトルの面積比より算出した)。
前記製造は、実施例15の10-O-p-(トリn-ブチ スタニル)ベンジルギンコライドB(34)から出 して40分以内で完了した。すなわち、本発 の式(I)で表わされる化合物は、短時間で標 されたメチルを有する化合物に変換するこ を確認できた。また、図7に示すように、こ 標識されたメチルを有する化合物への変換 、放射収量2.5GBq以上で変換されることが確 できた。この放射収量が1GBq以上であれば、 創薬のためのPETを用いるスクリーニングに適 切であるため、本発明の式(I)で表わされる化 合物は、例えば、サル、ヒト等を対象とした 創薬のためのPETを用いるスクリーニングに利 用可能であることが確認できた。
実施例16で製造した10-O-p-[ 11 C]メチルベンジルギンコライドB([ 11 C]-29)( 11 C-標識体)を、生理食塩水(1.8mL)、プロピレン リコール(0.15mL)、エタノール(0.05mL)、Tween80界 面活性剤(0.05mL)およびイントラリポス(2.05mL) 混合溶液に希釈し、約900MBqの放射能を静脈 射によりサルに投与し、動物研究用PET装置 ある浜松ホトニクス社製SHR-7700を用いて([ 11 C]-29)のサル脳内におけるPET解析を行った。そ の結果を図8に示す。また、その時間放射能 曲線を図8に示す。図8中はサルに標識体を投 与後30~60分間の積算PET画像、(b)はサルのPET画 、(c)はその時間放射能量曲線である。
[比較例3]
実施例16で製造した10-O-p-[ 11
C]メチルベンジルギンコライドB([ 11
C]-29)(11C-標識体)の代わりに、下記式で表わさ
れる([ 18
F]-30)を用いる以外は実施例17と同様にして、(
[ 18
F]-30)をサルに投与した。得られたPET画像を図
9に示す。また、その時間放射能量曲線も図9
示す。図9中、(a)はサルに標識体を投与後0~4
5分後のPET画像、(c)はその時間放射能量曲線
ある。なお、([ 18
F]-30)は、Makiko Suehiro, et al. J. Labelled Compd.
Radiopharm.47, pp 485-491, 2004に従い別途製造し
。
図8および図9に示すように、実施例16および 比較例3のPET画像から、本発明のPETスクリー ング用分子プローブを製造するためのキッ を用いて製造された標識化合物は、従来の 識化合物([ 18 F]-30)がほとんど血液脳関門の透過性が無いの に比べ、投与後10分間の脳内初期取り込み量 増大していることが確認できた。このこと ら、実施例16で製造した10-O-p-[ 11 C]メチルベンジルギンコライドB([ 11 C]-29)(11C-標識体)は、代謝に安定であることが 確認できた。また、従来の標識化合物([ 18 F]-30)は脳内にほとんど取り込まれないのに対 し、実施例16で製造した10-O-p-[ 11 C]メチルベンジルギンコライドB([ 11 C]-29)(11C-標識体)は時間経過と共に速やかに脳 内から排出されていることが確認できた。
[P-糖タンパク質の基質であるかどうかに関
る実験]
P-糖タンパク阻害剤であるシクロスポリンA(
CsA)を各トレーサーを投与する30分前にラット
に前投与した。各トレーサーを投与後、30分
に断頭しラットの脳を取り出して、放射能
測定した。その結果を図10に示す。図には
CsAを投与しなかったコントロールと、CsAの
与量を変化させたときの結果をSUV値を用い
表した。本実験のSUV値は4匹のラットの結果
平均化し、標準偏差を用いて表した。前記
レーサーとして、実施例16で製造した10-O-p-[
11
C]メチルベンジルギンコライドB([ 11
C]-29)( 11
C-標識体)、([ 18
F]-30)および[ 11
C]ベラパミルを用いた。図10(a)は([ 11
C]-29)に関する結果を、図10(b)は([ 18
F]-30)に関する結果を、図10(c)は[ 11
C]ベラパミルに関する結果を示す。なお、[ 11
C]ベラパミルはP-糖タンパクの基質であり、Cs
Aの前投与により脳内への取込みが向上する
とがわかっている(文献:Peng Hsiaoら、J. Pharma
col. Exp. Ther., 317, pp.704-710, 2006)ため、標準
質として用いた。
図10に示すように、([ 18 F]-30)はCsAを前投与した場合でも、脳のトレー サー存在量に変化は無かったが、([ 11 C]-29)はCsAの前投与により、容量依存的に脳の 存在量が向上していることが確認できた。こ の結果は、[ 11 C]ベラパミルと同様の傾向があり、[ 11 C]ベラパミルを標準基準とすると、([ 11 C]-29)のSUV値は[ 11 C]ベラパミルの30%程度であった。これらの結 から、CsAあるいはその他の最適なP-糖タン ク阻害剤を用いることにより、([ 11 C]-29)を積極的に脳内へ移行させうる可能性が あることが確認できた。このように、本発明 のPETスクリーニング用分子プローブを持ちい れば、脳機能改善薬を脳に移行させる方法論 を、PETにより解析可能であることが確認でき た。
実施例18と同様にして、P-糖タンパク阻害剤 であるシクロスポリンA(CsA)をラットの体重に 対して25mg/kgの容量で各トレーサーを投与す 30分前に前投与した。各トレーサーを投与後 、30分後に断頭しラットの脳を取り出して、 射能を測定した。その結果を図11および図12 に示す。図は、CsAを投与しなかったcontrolと CsAを25mg/kgの容量で投与した場合の結果を血 のSUV値と脳のSUV値の比率として表したもの ある。なお、本実験のSUV値は2匹のラットの 結果を平均化し、標準偏差を用いて表した。 前記トレーサーとして、実施例16で製造した1 0-O-p-[ 11 C]メチルベンジルギンコライドB([ 11 C]-29)(11C-標識体)および([ 18 F]-30)を用いた。図11(a)は([ 11 C]-29)に関する結果を、図11(b)は([ 18 F]-30)に関する結果を示す。また、図12(a)は([ 11 C]-29)に関する結果を、図12(b)は([ 18 F]-30)に関する結果を示す。図11は、断頭後に り出した脳に含まれる放射能を測定したも であり、図12は断頭前にラットの心臓から 理食塩水を注入・灌流することより脳内の 液を洗い流した後に放射能の測定を行った のである。
図11および図12に示すように、([ 18 F]-30)は脳血液の灌流によりトレーサーが洗い 流されたことが確認できた。一方で、([ 11 C]-29)は脳血液の灌流によってもトレーサーの 存在量に変化はなかった。以上のことから、 ([ 18 F]-30)は血中に存在しただけで、脳実質には取 込まれておらず、一方で、([ 11 C]-29)は脳実質に取込まれていたことが確認で きた。なお、一般に、血中のSUV値と脳のSUV値 の比率が0.04以下であると、そのトレーサー 脳内移行性は無いと考えられている。([ 18 F]-30)は血中のSUV値と脳のSUV値の比率が0.04以 であることから、脳内移行性が無いことが 認できた。このように、本発明のPETスクリ ニング用分子プローブを用いれば、脳機能 善薬を脳に移行させる方法論を、PETにより 析可能であることが確認できた。
本発明の化合物は、例えば、創薬のため キットとして有用である。
Next Patent: STATIONARY BLADE AND STEAM TURBINE