ET DISPOSITIF CORRESPONDANT

DOMAINE DE L'INVENTION

La présente invention se rapporte à un procédé pour déterminer la quantité d'un apport contenu dans une ration alimentaire consommée par un ruminant, un programme, une mémoire et un dispositif correspondant. Cet apport a pour but de réduire la quantité de méthane entérique.

ARRIERE PLAN TECHNOLOGIQUE DE L'INVENTION Dans les pays émergents, la consommation de produits animaux est en plein essor. En effet, depuis 1960, la consommation de produits laitiers, de viande et d'œufs a été multipliée par 2, 3 et 5 respectivement, dans les pays en développement. En outre, les projections indiquent que la production agricole mondiale devra croître de 60% pour satisfaire les besoins dans les quarante prochaines années (FAO, 2009).

Parallèlement aux enjeux de production, l'agriculture doit désormais intégrer l'enjeu environnemental. En effet, l'agriculture est l'un des principaux secteurs émetteurs de gaz à effet de serre (en abrégé "GES"), que ce soit au niveau national (19% du total des GES émis en France, avec une répartition égale entre filières animales et végétales (Centre Interprofessionnel Technique d'Etudes de la Pollution Atmosphérique (CITEPA), 2009)) ou au niveau mondial (13% du total des émissions anthropiques : "Intergovernmental Panel on Climate Change" (IPPC), 2007)).

Même si les émissions agricoles ont diminué d'environ 12% entre 1990 et 2007, des marges de progrès sont encore possibles.

Le principal gaz contributeur aux émissions de GES en élevage est le méthane (CH ₄ ) et notamment le méthane entérique. Ce dernier provient directement de la digestion des ruminants et les solutions économiquement viables et applicables visant à le réduire sont particulièrement recherchées. Des leviers d'action permettant de réduire les émissions de méthane des bovins existent avec des efficacités plus ou moins grandes et avérées (voir notamment Doreau et al., 2011 ; Doreau et al., 2014; Martin et al., 2016). De nombreuses stratégies de réduction des émissions de méthane ont été proposées (Doreau et al. 2011 ; Doreau et al. 2014). Ces stratégies peuvent être regroupées en trois catégories, chacune d'elles aboutissant à des performances animales similaires, voire meilleures pour certaines :

1 / Celles qui visent à augmenter le contenu en amidon des rations et à ajouter des supplémentations lipidiques ;

21 Celles qui visent à apporter ou à stimuler les voies qui vont générer des précurseurs des substances consommatrices de dihydrogène (acides organiques, précurseurs du propionate, levures, bactéries acétogènes) afin de détourner le dihydrogène (H2) qui a été produit, des voies de la méthanogenèse ;

3/ Celles qui utilisent les métabolites secondaires des plantes.

La plupart des solutions qui ont montré in vitro des intérêts potentiels sur la limitation des émissions de GES n'ont pas pu être validées in vivo.

Toutefois, lorsque des effets in vivo ont été néanmoins obtenus, ces résultats ont été contrebalancés par des réductions de l'ingéré, de la digestibilité, voire par une baisse de productivité.

Par ailleurs, les bactéries du rumen ont tendance à s'adapter à ces solutions, réduisant ainsi l'efficacité de ces solutions sur le long terme.

Nonobstant ces constatations, l'analyse de la bibliographie fait ressortir un certain nombre de solutions prometteuses : 1 / Ajout des levures :

La comparaison inter-études est très délicate car les réponses des animaux varient en fonction du type de levures utilisé (levures vivantes, levure avec milieu de culture, souche de levure utilisée), mais également en fonction du type de régime alimentaire (Newbold et al. , 2006). Ainsi, malgré le potentiel théorique très élevé que représente les levures, Chaucheyras-Durand et al. (2008) relèvent que des précautions doivent être prises dans leur utilisation. En effet, toutes les souches de levures ne donnent pas les mêmes résultats et les résultats obtenus in vitro ne sont parfois pas retrouvés dans les études in vivo. Il Ajout d'enzymes :

Les résultats des études in vivo montrent une grande variabilité dans les réponses obtenues selon le type d'enzyme utilisé, les aliments distribués et les conditions expérimentales elles-mêmes. Bien qu'il existe un certain potentiel de réduction des émissions de substances ayant un impact sur l'environnement (GES, Phosphore,...) avec ces enzymes alimentaires, peu d'études ont été publiées pour confirmer ces effets sur le ruminant.

3/ Ajout d'extraits de plantes :

II existe de très nombreux extraits de plantes contenant plus de 20

000 métabolites secondaires. Parmi ces extraits de plantes, il est possible de citer les saponines, les tanins, les huiles essentielles. Comme pour les levures, la plupart des effets ont été obtenus lors d'essais in vitro, et restent à valider de manière beaucoup plus large in vivo (Patra et al, 2009; Patra et al., 2010).

II est donc évident qu'un travail de screening est à effectuer in vitro, avant de pouvoir valider ces effets in vivo et envisager un déploiement de cette solution sur le terrain. Par ailleurs, des synergies entre levures et d'autres additifs alimentaires comme les extraits de plantes pourraient être à explorer également.

Al Ajout de composés chimiques ou médicamenteux : Parmi ces solutions, il est possible de citer l'ajout de nitrate ou de sulfate dans les rations, ou encore les acides organiques (Ungerfeld et al., 2011 ) ou le 3-nitroxypropanol (NOP) (Hristov et al., 2015).

A titre d'exemple, l'ajout de nitrate dans les régimes de vaches laitières entraine une baisse de 16% des émissions de méthane sans améliorer le rendement laitier (van Zijderveld et al., 2011 ). Chez le mouton, cette baisse atteint 32% avec du nitrate et 16% avec du sulfate (van Zijderveld et al., 2010). Cependant, comme le précise les auteurs cités ci-dessus, l'ajout de telles substances peut, si les doses et les modes d'apports sont mal connus, engendrer des phénomènes graves d'anoxie.

L'ajout de composés halogénés dans les rations (qui jouent le rôle de capteurs d'électrons), tels que le bromochlorométhane ou le chloroforme, rentre dans cette catégorie mais son efficacité n'est que transitoire (Eckard et al., 2010). Dans la littérature, des travaux concernent également le recours à la vaccination pour réduire les émissions de GES. Cependant, les résultats de ces travaux sont pour l'instant peu concluants (Martin et al. , 2010) et cette stratégie pose également des problèmes législatifs importants.

Par ailleurs, les antibiotiques ionophores (monensine et lasalocide) ont la capacité de réduire les émissions de CH4 dans le rumen (Martin et al. , 2010).

5/ Choix des fourrages :

Les fourrages intègrent dans leur structure un très grand nombre de composés (tanins, saponines, lipides, sucres, fibres, etc.) qui, pris un à un, présentent des effets sur les performances de croissance et/ou sur les émissions de GES (Waghorn, 2008).

Parmi les fourrages les plus prometteurs, il est possible de citer la chicorée, le sainfoin ("Hedysarum coronarium"), le lotier ("Lotus corniculatus") ou le trèfle ("Trifolium sp.").

Intégrés dans les rations des ruminants, ils pourraient constituer des solutions qui permettraient à la fois d'optimiser les performances de croissance tout en diminuant les émissions de méthane entérique. Ainsi, selon Ramirez-Restrepo et al. (2005), les points clés pour des fourrages utilisés pour une production optimisée et ayant peu d'impact sur les GES sont leurs teneurs en sucres digestibles, ainsi que la présence de tanins et de certains métabolites secondaires. 6/ Supplémentation lipidique des rations :

A l'heure actuelle, la supplémentation lipidique des rations, c'est à dire l'ajout de lipides à la ration alimentaire, semble la solution la plus aboutie et qui donne globalement des résultats concordants dans la littérature. D'autre part, contrairement à la plupart des autres solutions proposées, l'effet des lipides semble rémanent (Eugène et al., 201 1 ; Doreau et al. , 201 ). a/ Effet de la quantité de lipides ingérés

Les lipides constituent un substrat énergétique important pour les animaux, mais ont également la capacité à faire baisser les émissions de méthane. En effet, l'ajout de matière grasse (MG) dans la ration diminue l'activité des bactéries méthanogènes, diminue le nombre de protozoaires et, pour ce qui concerne les matières grasses polyinsaturées, permet d'accroître les voies de biohydrogénation des acides gras (Beauchemin et al. , 2009; Eckard et al. , 2010).

Dans les pratiques d'élevage, il est classiquement conseillé de ne pas dépasser 5% de MG dans les rations. A ces doses, les performances sont généralement conservées. En effet, l'ajout de lipides dans la ration permet d'accroître la densité énergétique de celle-ci. Au-delà de ces doses, une baisse de la digestibilité des rations est observée.

Chez les ruminants (ovins et bovins confondus), Martin et al. (2010) ont estimé une baisse moyenne des émissions de CH4 par kg/matière sèche (MS) de 3.8% pour 1 % de supplémentation lipidique dans les rations.

Dans une méta-analyse réalisée par Grainger et al. (201 1 ), pour les bovins (laitiers et à viandes), une augmentation de MG de 10g/kg de matière sèche fait baisser le méthane entérique d'environ 5%. Chez les ovins, cette réduction atteint 10%.

Selon Moate et al. (201 1 ), cette baisse atteint globalement 3.5% pour chaque supplémentation lipidique de 10g/kg de MS et ce, dans une plage de teneurs en lipides dans les rations variant de 10 à 1 10g/kg MS et sans différence entre bovins laitiers et bovins à viande. b/ Effet du type de lipides ajouté

L'ajout de lipides constitue un moyen efficace de réduction des émissions de méthane chez les bovins. Néanmoins, le type de lipides a également un rôle important à jouer.

En effet, selon Martin et al. (2010), il apparaît clairement que la nature des acides gras ajoutés a une influence sur le niveau de réduction des émissions, comme le montre le Tableau 1 ci-dessous provenant de cette publication.

Tableau 1 : Evaluation de la baisse des émissions de CH4 entérique (g/kg MSI) par 1 % de matière grasse ajouté (Martin et al., 2010). Type de Matière Grasse C12-C14 C16:0 C18:1 C18:2n-6 C18:3n-3

Exemple de source Huile de Huile de Huile Huile de Graine/Huile d'apport coco palme d'olive tournesol de lin

Baisse des émissions de -7.3% -3.5% -2.5% -4.1% -4.8% méthane

De plus, contrairement à d'autres additifs alimentaires, tels que les saponines ou les tanins, l'effet des lipides apparaît comme persistant (Eugène et al., 2011 ; Grainger et al., 2011 ; Moate et al., 201 1 ). cl Effet de la forme d'apport

Outre la qualité des lipides apportés par l'alimentation, la forme de l'apport de ces acides gras est importante.

Chez le bovin laitier, les travaux de Martin et al. (2008) ont montré un effet plus fort des lipides apportés sous forme de lin extrudé comparativement à de la graine crue (ainsi que le montre le Tableau 2 ci-dessous également extrait de cette publication) sur les émissions de méthane entérique. Un apport sous forme d'huile, bien qu'elle agisse de manière plus significative, n'est pas effectué en raison des risques zootechniques et de santé encourus par son utilisation.

Tableau 2 : Emissions de méthane chez la vache laitière en fonction de la forme d'apport du lin (CLS = lin cru ; ELS = graines de lin extrudées ; LSO = huile de lin) (Martin et al., 2008).

Die»

lu» C CLS ELS LSO SE 1 P

Ces différences d'effet selon la forme d'apport des lipides sont à mettre en relation avec : a/ La disponibilité de la matière grasse dans le rumen.

En effet, l'extrusion a pour effet de libérer la matière grasse des cellules de la graine et d'agir plus efficacement sur l'écosystème bactérien, notamment en diminuant le ratio C2/C3 et ainsi en limitant l'excédent d'hydrogène, ce dernier constituant le substrat pour la synthèse de CH4 (Peyraud et al., 2011 ). b/ La digestibilité de la matière grasse.

En effet, le coefficient de digestibilité de l'énergie de la graine de lin broyée (51%) est très inférieur à celui des graines extrudées à destination du porc (76% et 84%). Cette moindre digestibilité est essentiellement liée à une faible digestibilité des matières grasses de la graine broyée (51% vs 81% et 90% pour les graines extrudées) (Noblet et al., 2008).

Cette différence dans la forme d'apport est également perçue au travers de la composition en acides gras Oméga 3 dans la viande bovine. Normand et al. (2006) ont montré que la graine de lin extrudée entraînait un enrichissement en C18:3n-3 de la viande supérieur de 50%, comparativement à la graine de lin aplatie.

PROBLEMATIQUE A LA BASE DE LA PRESENTE INVENTION

Mesurer facilement et à grande échelle les économies de méthane entérique réalisées suite à la mise en place dans la ration animale d'un apport provoquant une réduction avérée de la production de méthane, c'est à dire qui a été déjà démontrée comme ayant des effets de réduction du méthane entérique, est une priorité pour répondre aux exigences environnementales des consommateurs et de la société, et permettre ainsi aux démarches vertueuses pour l'environnement d'être mieux reconnues.

Parmi les méthodes de mesure du méthane entérique, il est possible de citer la "chambre respiratoire", la technique du gaz traceur SF6, ou la solution mobile dite "GreenFeed" (Arbre et al., 2016a, b). Cette dernière technique est la plus apte à être utilisée sur le terrain, mais elle nécessite une maintenance importante et un investissement conséquent.

En outre, même si de nombreuses méthodologies de calcul des émissions de méthane entérique ont été établies sur les ruminants laitiers à partir notamment des acides gras du lait (Chesneau et al. , 2008, 2010; Mohammed et al. , 201 1 ; van Lingen et al. , 2014), en viande bovine, cette quantification est plus complexe.

Le document FR 2961907 se préoccupe de l'évaluation de la quantité de méthane liée à l'élevage de ruminants à viande, en utilisant la composition en acides gras des viandes.

Toutefois, conformément à cette technique, la quantité évaluée ne s'applique qu'à partir d'une mesure sur la viande prélevée de l'animal, et tient compte de la teneur en lipides du morceau de viande.

Or, il existe à ce jour un besoin de quantifier la réduction des émissions de méthane entérique provenant de ruminants producteurs de viande (vaches laitières, de réforme ou bovins à viande), sans avoir à analyser leur viande, pour davantage de simplicité en termes de mise en œuvre.

En d'autres termes, il existe à ce jour pour les opérateurs en aval des filières de production de viande, une demande de quantification rapide de la réduction des émissions de méthane entérique provenant de ruminants nourris avec des apports alimentaires à visée de réduction des émissions de méthane entérique, sans avoir connaissance à l'avance de l'ingestion et/ou de la composition de la ration (à partir desquelles de nombreuses équations ont pu être développées), celles-ci étant difficiles à tracer.

Cette quantification, en plus de permettre la quantification de la réduction de méthane proprement dite, permettrait aussi par exemple, de pouvoir monnayer cette réduction, d'être prise en compte très en amont, dans le cadre d'inventaires nationaux de réduction du méthane, de constituer un moyen de preuve que l'éleveur propriétaire des animaux participe bien à un programme de réduction des G ES, de générer des tonnes de C0 ₂ non émises qui sont négociables sur le marché du Carbone, etc.

La présente invention vise à répondre à cette attente, via une quantification de la quantité d'apport dans la ration alimentaire, qui est à l'origine de cette réduction de méthane entérique.

OBJET DE L'INVENTION Selon un premier aspect de l'invention, celle-ci concerne un procédé pour déterminer a posteriori la quantité QE d'apport AE qui provoque une réduction du méthane entérique, apport AE contenu dans une ration alimentaire RAE consommée par un ruminant appelé "ruminant à évaluer" RE, caractérisé par le fait qu'il comprend la mise en œuvre des étapes ci-dessous qui consistent à : a1 ) A partir, d'une base de données BDD formée des spectres d'absorption SR visible et/ou infrarouge (proche et/ou moyen) d'une même matière biologique MBR provenant de plusieurs animaux de la même espèce, dits "série d'animaux de référence" AR, cette série d'animaux de référence AR ayant consommé une ration alimentaire RAR contenant le même apport AR qui provoque une réduction de méthane entérique, la ration RAR satisfaisant cumulativement aux trois critères suivants :

t-1 ) la ration RAR exclut toute source de matière grasse animale ; t-2) la ration RAR limite l'ingestion d'huile végétale à hauteur de 5% en poids de la matière sèche de la ration ;

t-3) la ration RAR contient au moins une source lipidique riche en acide alpha-linolénique n-3 (ALA), c'est à dire dont plus de 30% de la quantité totale des acides gras (AG) est constituée d'ALA ; cette base de données BDD comprenant également, pour chaque spectre SR, la quantité QAR dudit apport AR ainsi que la quantité QT d'un "traceur" T, c'est à dire d'au moins un composé organique ou inorganique présent dans ladite matière biologique MBR qui résulte de la consommation dudit apport AR, cette quantité de traceur T ayant été prédéterminée, b1 ) Déterminer, par des algorithmes mathématiques, pour ladite matière biologique MBR, une équation de calibration EC qui permet de quantifier ledit traceur T, à partir du spectre d'absorption visible et/ou infrarouge SR correspondant de ladite base de données BDD; c1 ) Soumettre une matière biologique MBE d 'un nouveau ruminant, dit "ruminant à évaluer" RE, cette matière biologique MBE étant identique à celle définie en a1 ) et provenant d'un animal de même espèce que ceux de ladite série d'animaux de référence AR, à l'aide d'un spectromètre, à un rayonnement visible et/ou infrarouge pour obtenir un spectre d'absorption correspondant mesuré SM, et obtenir la quantité QTM dudit traceur T à partir dudit spectre correspondant mesuré SM et de ladite équation EC de l'étape b1 ) ; d1 ) En fonction de la quantité QTM dudit traceur T de l'étape Cl ), pour l'animal duquel provient ladite matière biologique MBE de l'étape Cl ), calculer la quantité QE d'apport AE qui provoque une réduction de méthane entérique et la délivrer sur une interface physique, cette quantité QE d'apport AE étant déterminée en mettant en relation la quantité de traceur QTM issue de l'étape Cl ) avec les quantités QAR d'apport contenues dans ladite base de données BDD ;

OU a2) A partir, d'une base de données BDD formée des spectres d'absorption SR visible et/ou infrarouge (proche et/ou moyen) d'une même matière biologique MBR provenant de plusieurs animaux de la même espèce, dits "série d'animaux de référence", cette série d'animaux de référence AR ayant consommé une ration alimentaire RAR contenant le même apport AR qui provoque une réduction de méthane entérique, la ration RAR satisfaisant cumulativement aux trois critères suivants :

t-1 ) la ration RAR exclut toute source de matière grasse animale ; t-2) la ration RAR limite l'ingestion d'huile végétale à hauteur de 5% en poids de la matière sèche de la ration ;

t-3) la ration RAR contient au moins une source lipidique riche en acide alpha-linolénique n-3 (ALA), c'est à dire dont plus de 30% de la quantité totale des acides gras (AG) est constituée d'ALA ; cette base de données BDD comprenant également, pour chaque spectre SR, une information INF selon laquelle l'animal correspondant a consommé une ration alimentaire RAR contenant un apport AR qui provoque une réduction de méthane entérique, ainsi que la quantité QAR de l'apport AR correspondant ; b2) Déterminer, par des algorithmes mathématiques, pour ladite matière biologique MBR, une équation de calibration EC qui permet de déterminer la quantité d'apport QAR contenue dans ladite ration alimentaire RAR ; c2) Soumettre une matière biologique MBE d'un nouveau ruminant, dit "ruminant à évaluer" RE, cette matière biologique MBE étant identique à celle définie en a1 ) et provenant d'un animal de même espèce que ceux de ladite série d'animaux de référence AR, à l'aide d'un spectromètre, à un rayonnement visible et/ou infrarouge et en déduire la quantité QAE de l'apport AE qui provoque une réduction de méthane entérique.

Selon des caractéristiques avantageuses et non limitatives de ce procédé, prises seules ou selon une combinaison quelconque d'au moins deux d'entre elles d'elles :

- entre lesdites étapes b1 ) et Cl ), respectivement b2) et c2), on valide l'emploi de ladite équation de l'étape b1 ), respectivement b2), sur des matières biologiques issues d'animaux extérieurs à ceux de ladite base de données, dès lors que le coefficient de corrélation entre la quantité dudit traceur obtenue par la mise en œuvre de l'étape b1 ), respectivement la quantité d'apport obtenue par la mise en œuvre de l'étape b2), et ladite quantité prédéterminée, est supérieur à 0.7 ;

- à la suite de l'étape d1 ), respectivement c2), on détermine la quantité de méthane entérique non rejeté.

- l'on détermine ladite quantité de méthane entérique non rejeté en mettant en œuvre l'équation suivante :

Méthane économisé (g/animal) = Durée d'application de l'apport (jours) * (CRCH4) * CH4 (g/animal/jour), équation dans laquelle :

- CRCH4, exprimé en pourcentage, est un coefficient de réduction de méthane entérique associé à une quantité particulière d'apport, et

- CH4, exprimée en g /animal /jour, est la quantité de méthane entérique moyenne émise par l'animal considéré ; - ladite matière biologique est choisie dans le groupe constitué par le cuir, la carcasse, la viande, un fluide biologique dudit ruminant, ou appartient à une zone anatomique accessible sur ledit ruminant vivant ou sur sa carcasse, telle qu'une oreille ou la langue ;

- ledit fluide biologique consiste en du sang, de l'urine ou de la salive ;

- ledit traceur de l'étape b1 ) est un acide gras tel que l'acide alpha-linolénique ;

- ladite information est issue de la reconnaissance, via lesdits spectres de la base de données d'un apport d'acide alpha-linolénique, à partir de la composition en acides gras de ladite matière biologique ;

- ladite série d'animaux de ladite base de données comporte des animaux de races différentes, et/ou de sexes différents, et/ou d'âges différents et/ou de types génétiques différents, à savoir d'une race à viande, d'une race laitière ou d'une race mixte ;

- ladite quantité prédéterminée de traceur de ladite base de données a été déterminée par l'une des méthodes suivantes : chromatographie en phase gazeuse, chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP), spectrophotométrie, dosage biochimique, immunologique, protéomique ou métabolomique.

Un deuxième aspect de l'invention se rapporte à un programme d'ordinateur comportant des instructions de code pour la mise en œuvre du procédé selon l'une des caractéristiques précédentes, lorsqu'il est exécuté sur un calculateur tel qu'un ordinateur.

Un troisième aspect de l'invention se rapporte à une mémoire d'ordinateur dans laquelle est stocké un programme d'ordinateur, ledit programme d'ordinateur comportant des instructions de code qui permettent à une machine de mettre en œuvre les étapes du procédé selon l'une des caractéristiques précédentes quand ce programme est exécuté par ladite machine.

Enfin, un quatrième aspect de l'invention se rapporte à un dispositif pour la mise en œuvre du procédé selon l'une des caractéristiques précédentes, caractérisé par le fait qu'il comprend une base de données, un calculateur tel qu'un ordinateur contenant une mémoire dans laquelle est stockée ladite équation de ladite étape b1 ), respectivement b2), ainsi qu'un spectromètre d'absorption visible et/ou infrarouge (proche et/ou moyen). DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION

Dans l'ensemble de la présente demande, incluant les revendications et l'abrégé, et sauf stipulations expresses :

- les quantités relatives à des poids sont exprimées en grammes ;

- quand on parle d'une "série d'animaux de référence", on entend que ces animaux sont de la même espèce avec, toutefois, la possibilité d'être de races différentes, de sexes différents, d'âge ou de types génétiques différents. Ainsi, à titre d'exemple, cette série peut être constituée de bovins (même espèce), appartenant aux races "Blonde d'Aquitaine" et "Bretonne Pie noir";

- dans les étapes d ), respectivement c2), la matière biologique est la même que celle utilisée pour la constitution de la base de données ;

- on entend par le terme "carcasse" un animal mort dont les muscles n'ont pas été prélevés ;

- le spectromètre peut aussi bien être un spectromètre non mobile, c'est à dire vers lequel on va approcher la matière biologique pour en obtenir le spectre, qu'un spectromètre conformé pour être déplacé sur site et pour réaliser l'enregistrement via une sonde connectée à ce spectromètre ;

- les spectres sont acquis dans le visible et/ou l'infrarouge proche ou moyen ;

- le calculateur peut aussi bien être intégré dans un ordinateur physique, qu'être intégré au spectromètre. Toutefois, il peut aussi être distant, c'est à dire sous la forme de "cloud Computing". D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée qui va suivre.

Cette description sera faite en référence à l'exemple de réalisation suivant.

1/ Hypothèse de départ

Dans le cadre de cet exemple, il est considéré un taurillon de race à viande élevé selon une méthode conventionnelle, qui présente les caractéristiques suivantes :

- Poids vif = 720 kg ; - Durée d'élevage = 199 jours ;

- Emissions de méthane entérique estimée, selon la méthode AGRIBALYSE (marque déposée) et les articles Koch et al. , 2013 et Colomb et al. , 201 )) : CH ₄ = 1 .314 kg C02eq/kg animal vif = 190 g CH4/jour

(avec 1 kg CH4 = 25 kg C02)

21 Mise en place d'un apport alimentaire qui provoque une réduction du méthane entérique

Pour cet animal, la mise en place d'une stratégie alimentaire de réduction du méthane entérique est effectuée sous forme d'un apport à sa ration alimentaire habituelle. Cet apport est réalisé sous la forme d'un apport de 1 .81 % de lipides issus de graines de lin extrudées (40% matière grasse (MG) et 55% d'ALA dans la MG de lin, pour une Matière Sèche Ingérée estimée de 10kg/j), soit un apport d'acide alpha-linolénique (ALA) à hauteur de 100g/jour pendant les 100 jours qui précèdent l'abattage.

L'utilisation d'une telle source lipidique de la famille des acides gras n-3 est une solution décrite dans la littérature scientifique comme étant particulièrement efficace pour réduire les émissions de méthane entérique.

3/ Identification par la spectrométrie dans le proche infrarouge (SPIR) de la mise en œuyre de cet apport alimentaire de réduction du méthane entérique par l'identification d'un traceur

Il existe un lien étroit entre pratiques alimentaires de l'animal et le profil en acides gras des viandes issu de ce même animal.

La mise en œuvre de rations incluant des acides gras insaturés n- 3 (AGPIn-3) comme moyens de réduction du méthane entérique, a des conséquences sur le profil en acides gras des tissus, ainsi que le décrivent les articles : Woods et al. , 2009; ANSES, 201 1 ; Kouba et al. , 201 1 ; Habeanu et al. , 2014; Bernardi et al. , 2015.

Ainsi, la composition en acides gras des viandes peut servir à identifier que la stratégie de réduction des émissions de méthane a bien été mise en place dans l'élevage. Dans le présent exemple, le rapport acide gras saturés/acide alpha linolénique (AGS/ALA) est utilisé comme traceur prouvant que l'animal a consommé l'apport tel que défini plus haut, selon le dosage indiqué précédemment (1 .81 % de lipides riche en ALA en plus dans la ration et pendant 100 jours). Ce rapport doit être inférieur à 100.

3'/ Identification directe par SPIR de l'utilisation de cet apport

Cette identification constitue une alternative à celle qui a été décrite au point 3/ précédent.

Cette identification repose sur la constitution d'une base de données (BDD) de 252 spectres acquis sur des carcasses (la localisation anatomique de la mesure spectrale est au niveau de la bavette de flanchet avec aponévrose) de ruminants à viandes provenant de fermes commerciales, spectres associés au profil en acides gras des bavettes de flanchet (Rectus abdominis) parées et sans aponévrose de ces mêmes animaux.

Le rapport AGS/ALA a permis d'affecter à chaque animal constitutif de la BDD son appartenance à un premier groupe ayant reçu un apport alimentaire réduisant le méthane entérique (supplémentation lipidique) ou à un second groupe qui ne l'a pas reçu.

Les modèles mathématiques (PLS-DA (Acronyme de "Partial Least Square-Discriminant Analysis")) développés ont permis d'aboutir à la matrice de confusion ci-dessous avec des critères de sensibilité de 78%, de spécificité de 80% et d'exactitude de 79%.

L'algorithme développé a ensuite été testé sur un nouveau groupe de 1 12 animaux et a permis d'obtenir la matrice de confusion suivante, validant ainsi la possibilité de reconnaitre par mesure SPIR si l'individu a reçu l'apport lipidique de réduction du méthane entérique. Prédit / (Observé) Avec apport lipidique Sans apport lipidique

Avec apport lipidique 36 (72 %) 22 (35 %)

Sans apport lipidique 14 (28 %) 40 (65 %) Ainsi, la calibration développée ci-dessus peut être appliquée à une nouvelle carcasse d'animal.

En effet, à partir d'une nouvelle mesure sur une nouvelle carcasse, on peut identifier si cette carcasse provient d'un animal ayant eu un apport lipidique en AGPIn-3 dans sa ration et permet ainsi de vérifier si, oui ou non, on a eu recours à un apport provoquant une réduction de méthane.

Si tel est le cas, un calcul de la réduction effective de méthane peut être effectué.

4/ Méthodologie de calcul des économies de méthane

4a/ Détermination du Coefficient de réduction des émissions de méthane (CRCH4)

Doreau et al. (201 1 ) ont remis à jour les données recueillies par Martin et al. (2010) et ont obtenu pour les matières grasses riches en C18: 3n-3 (présentes dans le lin extrudé notamment) une baisse moyenne de méthane (exprimée en grammes) par kg de matière sèche ingérée de 5,6% par point de lipides supplémentaire ajouté à la ration de l'animal. En faisant l'hypothèse que :

- l'ajout de lipides en AGPIn-3 ne modifie pas significativement la matière sèche ingérée (MSI ) ;

- l'apport qui engendre la réduction d'émissions de méthane équivaut à 1 .81 % de lipides riches en ALA dans la ration,

d 'où un coefficient de réduction de méthane entérique (CRCH4) de 5.6*1 .81 = 10.4% par rapport à la situation de référence. 4b/ Calcul des économies de méthane liées à la mise en place de l'apport alimentaire

La réduction des émissions de méthane entérique liée à la mise en place de l'apport précité est donnée par la formule suivante :

Méthane économisé (g) = Durée d'application de l'apport alimentaire (jours) * (CRCH4) * CH ₄

Avec CRCH4 = 5.6 * % lipides riche en ALA de l'apport dans la ration.

Soit, pour l'exemple ci-dessus :

-l OO(jours) * [5.6 * 1 .81 / 100] * 190 (gCH4/j ) économises.

Dans un mode de réalisation donnée à simple titre d'illustration non limitative, le procédé selon l'invention peut être mis en œuvre de la manière suivante :

Un logiciel peut ainsi être utilisé. I l comprend préférentiellement deux parties ou "modules".

Le premier module peut être associé à une interface graphique qui permet d'afficher le spectre de la matière biologique à évaluer. I l permet de visualiser le spectre et de détecter des spectres aberrants. I l permet aussi la saisie d'identifiants en relation avec les matières biologiques à évaluer. I l s'agit par exemple d'un numéro alloué à l'animal correspondant, un numéro de tuerie d'abattoir ou toute autre information permettant le traçage de l'animal.

Le second module permet de calculer la quantité d'apport et de méthane entérique non rejeté pour l'animal dont est issu la matière biologique.

Les modèles de calibration (à la fois quantitative ou qualitative) auront été au préalable chargés dans une mémoire dans laquelle sont également stockées les informations constitutives de la base de données.

Ces modèles permettent d 'attribuer pour chaque valeur d 'absorbance mesurée à chaque longueur d 'onde composant le spectre infrarouge et/ou visible, des coefficients. Les résultats obtenus par ces modèles sont de deux types : valeur quantitative du traceur ou bien probabilité d 'appartenance à un groupe (approche qualitative). L'opérateur pourra avoir le choix entre l'une, l'autre ou les deux méthodes de calcul :

-Calcul à partir d'une approche quantitative (première alternative de la revendication 1 annexée) ;

OU

-Calcul à partir de l'approche qualitative (deuxième alternative de la revendication 1 annexée).

Parallèlement, il aura à saisir les informations nécessaires aux calculs, à savoir :

- le type d'animal à partir d'une liste préétablie, liste à laquelle est associée, pour chaque type d'animal la quantité moyenne de méthane émis ;

- la durée de distribution de l'apport ;

- éventuellement le poids vif de l'animal ou le poids de sa carcasse.

Ensuite, il aura à acquérir le spectre de la matière biologique (soit en apportant l'échantillon à proximité du spectromètre, en utilisant une sonde déportée, ou encore en apportant le spectromètre directement sur zone (si le spectromètre est portable).

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