技术领域

[0001] 本发明具体涉及一种抑制近视的方法及制备药 物的应用。

背景技术

[0002] 人类近视普遍表现为眼轴的过度延长， 是为了取得清晰视网膜成像造成眼轴过 度延长而引起的屈光不正。 眼轴延长主要表现为后极部的延展。 通过动物实验 研究发现， 小鸡、 树^、 猴子、 豚鼠等的近视动物模型中均发现巩膜变薄和后 极部巩膜扩张等病理学改变。 以上证据提示， 在近视发生发展过程中巩膜组织 发生了重塑。

[0003] 巩膜由细胞外基质和和分泌基质的成纤维细胞 组成。 哺乳动物近视模型研究发 现近视眼巩膜病理改变主要是由于胶原数量的 改变， 包括胶原合成减少和降解 增加。

技术问题

[0004] 巩膜胶原的异常重塑将会改变巩膜的生化性质 ， 使其变薄， 继而使巩膜蠕变率 增加、 抗张能力降低， 变薄的巩膜不能承受正常眼内压从而促使眼轴 延长， 形 成近视。 因此， 巩膜是近视发生发展的一个重要靶点。

问题的解决方案

技术解决方案

[0005] 为了解决现有技术的不足， 本发明在单细胞转录组分析发现在肌成纤维细 胞中 异常激活了与组织缺氧相关的 _e i _F2a 和 Nrf2等通路， 提示组织缺氧可能在巩膜 细胞外基质重塑中起重要作用。 我们进一步研究发现， 近视诱导吋可特异性引 起巩膜缺氧诱导因子 lot (HIFla) 表达上调， 并在近视恢复期回复正常， 提示 近视发生吋巩膜组织出现缺氧状态， 而缺氧也诱导近视形成的一个关键， 本发 明的提供了一种抑制近视的方法及制备药物的 应用， 通过抑制 HIF-la的表达抑 制眼内缺氧的作用对近视进行干预， 找到一种抑制近视的方法。

[0006] 本发明采用的技术解决方案是： 一种抑制近视的方法， 通过抑制眼内巩膜组织 缺氧抑制近视。

[0007] 所述的方法包括： 通过抑制巩膜缺氧诱导因子 -la (HIF-la) 的表达起到抑制 眼内巩膜组织缺氧从而抑制近视。

[0008] 巩膜缺氧诱导因子 -la的抑制剂在制备抑制近视药物上的应用。

[0009] 所述的巩膜缺氧诱导因子 -la的抑制剂为红景天苷或芒柄花黄素。

[0010] 红景天苷或芒柄花黄素在制备抑制眼内巩膜组 织缺氧药物上的应用。

发明的有益效果

有益效果

[0011] 本发明的有益效果是： 本发明提供了了一种抑制近视的方法及制备药 物的应用 ， 通过抑制眼内 HIF-lot的表达起到抗缺氧作用而抑制近视， 通过抑制眼内 HIF-1 a的作用起到抗缺氧的作用， 可以有效地延缓、 抑制近视， 本发明利用 HIF-la抑 制剂红景天苷和芒柄花黄素抑制 HIF-la活性起到抗缺氧作用， 可明显起到延缓 近视的作用。

对附图的简要说明

附图说明

[0012] 图 1是正常对照眼、 形觉剥夺 1周实验眼和对侧眼、 形觉剥夺 1周恢复 2天实验眼 和对侧眼巩膜 HIF-lot蛋白表达量。

[0013] 图 2是红景天苷 （SDS) 注射实验眼和对侧眼屈光度差值图。

[0014] 图 3是红景天苷 （SDS) 注射实验眼和对侧眼玻璃体腔深度差值图。

[0015] 图 4是红景天苷 （SDS) 注射实验眼和对侧眼眼轴长度差值图。

[0016] 图 5是芒柄花黄素 （FMN) 注射实验眼和对侧眼屈光度差值图。

[0017] 图 6是芒柄花黄素 （FMN) 注射实验眼和对侧眼眼轴长度差值图。

[0018] 图 7是红景天苷 （SDS) 注射后巩膜 HIF-lot和胶原表达改变。

[0019] 图 8是芒柄花黄素 （FMN) 注射后巩膜 HIF-lot和胶原表达改变。

[0020] 图中， "差值 "指实验眼与对侧眼屈光度或眼轴参数的差值� � 红景天苷注射溶剂 组和给药组之间比较采用重复测量的双因素方 差分析： "*"表示 P< 0.05， "**"表 j P< 0.01 , "***"表示 P< 0.001。 芒柄花黄素注射溶剂组和给药组之间比较采用 单因素方差分析： "*"表示 P< 0.05。 本发明的实施方式

[0021] 本实验采用的实验动物均为为 3周齢英国种短毛三色豚鼠。 采用面罩法作为单 眼形觉剥夺 （FD) 近视模型。 近视眼巩膜 HIF-lot表达实验将动物随机分为 3组： 正常对照组， FD1周组， FD1周恢复 2天组。 模型构建结束后取巩膜， Western Blot检测 HIF-lot表达水平， 说明巩膜存在缺氧； 而恢复期 HIF-lot表达恢复正常水 平， 说明缺氧是和近视存在密切相关。

[0022] 给药实验中对形觉剥夺眼给予 HIF-lot抑制剂红景天苷和芒柄花黄素球旁注射� � 从而抑制眼内 HIF-loc活性。 红景天苷注射实验中动物随机分为 3组： 形觉剥夺 + 溶剂对照组 （FD+0.9%生理盐水 (NS)) ， 形觉剥夺 +低浓度药物组 （FD+SDS l g ) ,形觉剥夺 +高浓度药物组 （FD+SDS 10μ _§ ) 。 芒柄花黄素注射实验中动物随 机分为 3组： 形觉剥夺 +溶剂对照组 （FD+DMSO) ， 形觉剥夺 +低浓度药物组 （F D+ FMN 0.5μ _β ) ，形觉剥夺 +高浓度药物组 （FD+ FMN 5 g) 。 每天上午 9点进行 球旁注射药物， 连续注射 4周， 对侧眼不做处理。 分别于实验前、 给药 2周、 给 药 4周用红外偏心摄影验光仪 （EIR) 测量屈光度、 A超 （11MHz) 测量玻璃体腔 深度和眼轴长度等眼轴参数。 给药结束后取巩膜， Western Blot检测 HIF-lot和 I型 胶原表达水平。

[0023] 近视眼巩膜 HIF-la检测发现 FD1周实验眼 （FD T) HIF-la表达水平较其对侧眼

(FD F) 明显升高， FD1周恢复 2天后 （RC) ， HIF-lot表达双眼间的差异消失。 提示近视发生吋巩膜组织出现缺氧状态， 缺氧可能参与调控近视发生发展。

[0024] 比较实验前后测量参数， 发现给药组的形觉剥夺眼， 屈光近视程度和玻璃体腔 及眼轴延长程度均小于形觉剥夺溶剂组， 和溶剂对照组比较具有统计学意义。 因此， 球旁注射 HIF-loc抑制剂红景天苷和芒柄花黄素抑制 HIF-loc活性的作用可 以抑制豚鼠形觉剥夺性近视的形成。

[0025] 给药后检测 HIF-lot和 I型胶原表达水平， 发现球旁注射 HIF-lot抑制剂红景天苷 和芒柄花黄素后 HIF-lot表达上调被抑制， I型胶原表达下调被抑制。 因此， 球旁 注射 HIF-loc抑制剂红景天苷和芒柄花黄素可调控巩� � I型胶原表达。

[0026] 由图 1可知， 形觉剥夺 1周后， 剥夺眼巩膜对侧眼相比 HIF-loc表达明显上调， 而 形觉剥夺恢复两天组双眼 HIF-lot表达无差异， 说明近视发生吋巩膜组织处于缺 氧状态。

[0027] 由图 2可知， 实验 4周后， 形觉剥夺注射红景天苷与形觉剥夺注射溶剂组 相比近 视形成量明显减少， 说明 HIF-loc抑制剂红景天苷能抑制形觉剥夺性近视� �进展

[0028] 由图 3可知， 实验 4周后， 注射红景天苷组玻璃体腔延长与溶剂组相比相 对较小

， 说明 HIF-loc抑制剂红景天苷能抑制形觉剥夺玻璃体� �的延长。

[0029] 由图 4可知， 实验 4周后， 注射红景天苷组眼轴延长与溶剂组相比相对较 小， 说 明 HIF-loc抑制剂红景天苷能抑制形觉剥夺眼轴的� �长。

[0030] 由图 5可知， 实验 4周后， 形觉剥夺注射芒柄花黄素与形觉剥夺注射溶剂 组相比 近视形成量明显减少， 说明 HIF-loc抑制剂芒柄花黄素能抑制形觉剥夺性近� �的 进展。

[0031] 由图 6可知， 实验 4周后， 注射芒柄花黄素组眼轴延长与溶剂组相比相对 较小， 说明 HIF-lot抑制剂芒柄花黄素能抑制形觉剥夺眼轴� �延长。

[0032] 由图 7可知， 红景天苷注射后, FDM眼巩膜 HIF-lot上调被抑制， 胶原表达下调被 抑制。 说明 HIF-loc抑制剂红景天苷可能通过调控巩膜 I型胶原抑制近视进展。

[0033] 由图 8可知， 芒柄花黄素注射后， FDM眼巩膜 HIF-lot上调被抑制， 胶原表达下 调被抑制。 说明 HIF-loc抑制剂芒柄花黄素可能通过调控巩膜 I型胶原抑制近视进 展。

[0034] 上述实验， 证明近视发生吋巩膜组织处于缺氧状态， 利用 HIF-lot抑制剂红景天 苷和芒柄花黄素抑制 HIF-loc活性起到抗缺氧作用， 可明显起到延缓近视的作用 。 红景天苷和芒柄花黄素对近视的抑制作用可能 通过调控巩膜 I型胶原实现。

[0035] 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 本发明的保护范围并不仅局限于上述实 施例， 凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明 的保护范围。 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理前提下的若干改进 和润饰， 这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。