CASTEDO EXPOSITO LUIS (ES)
GARCIA FANDINO REBECA (ES)
GRANJA GUILLAN JUAN (ES)
CASTEDO EXPOSITO LUIS (ES)
GARCIA FANDINO REBECA (ES)
LIU C. ET AL.: 'Design, synthesis and bioactivities of steroid-linked Taxol analogues as potential targeted drugs for prostate and breast cancer' J. NAT. PROD. vol. 67, no. 2, 2004, pages 152 - 159, XP002995410
VERDIER-PINARD P. ET AL.: 'A steroid derivative with Paclitaxel-like effects on tubulin polymerization' MOLECULAR PHARMACOLOGY vol. 57, 2000, pages 568 - 575, XP000989650
VILLALVA-SERVIN N.P. ET AL.: 'A direct carbometallation-stereoselective cycloaddition-ring closing metathesis route to the triciclic ABC core of taxoids' SYNLETT vol. 9, 11 July 2003, pages 1263 - 1266, XP002994683
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| 1. | 10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono o bicicloalquilico de 7 a 10 átomos de carbono, estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que contienen de 1 at 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo. 1 (eventualmente substituido en 4 por un radical alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilos de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado de 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquilos que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilos, cicloalquenilos o bicicloalquilos pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos de 1 a 4 átomos de carbono; y . Sc es la cadena lateral característica de los esteroides o un radical alquílico lineal o ramificado de 1. 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 12 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, o bicicloalquílico de 7 a 10 átomos de carbono, estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo. 1 (eventualmente substituido en 4 por un radical alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado que contiene 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilo, cicloalquenilo o bicicloalquilo pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos de 1 a 4 átomos de carbono; y . Sk es una cadena aminoacídica análoga a la de los taxanos, en la que P representa a un grupo fenílico o un radical alcoxi con cadenas alquílicas de 1 a 10 carbonos, alquenílicas y alquinílicas de 3 a 10 carbonos, cicloalquílicas y cicloalquenílicas de 4 a 7 átomos en el anillo, fenilo o un compuesto heterocíclico, y Ar es un compuesto aromático. |
| 2. | Compuestos de formula (2) caracterizados por : . Rl, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo pueden ser un átomo de hidrógeno, un grupo aciloxi, alquiloxi, ariloxi, alquiltio, ariltio o alquílico con cadenas de Cl. Clo, en los que el radical puede ser alquílico lineal o ramificado de 1. 10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono o bicicloalquilico de 7 a 10 átomos de carbono, estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo. 1 (eventualmente substituido en 4 por un radical alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilos de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado de 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquilos que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilos, cicloalquenilos o bicicloalquilos pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos de 1 a 4 átomos de carbono; y . Sc es la cadena lateral característica de los esteroides o un radical alquílico lineal o ramificado de 1. 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 12 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, o bicicloalquílico de 7 a 10 átomos de carbono, estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo. 1 (eventualmente substituido en 4 por un radical alquilo que contiene de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado que contiene 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilo, cicloalquenilo o bicicloalquilo pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos de 1 a 4 átomos de carbono; y . Sk es una cadena aminoacídica análoga a la de los taxanos, en la que P representa a un grupo fenílico o un radical alcoxi con cadenas alquílicas de 1 a 10 carbonos, alquenílicas y alquinílicas de 3 a 10 carbonos, cicloalquílicas y cicloalquenílicas de 4 a 7 átomos en el anillo, fenilo o un compuesto heterocíclico, y Ar es un compuesto aromático. |
| 3. | Un procedimiento para la preparación de los compuestos de formula (1), caracterizado, como transformaciones sintéticas más destacadas, por las siguientes etapas : a) La alquilación del enolato cinético de las cetonas portadoras del anillo CD de los esteroides, de fórmula general (3), con los apropiados agentes alquilantes de fórmula general (4), obteniéndose como producto de reacción compuestos de fórmula general (5), en los que los grupos Se, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo presentan las características estructurales indicadas en la reivindicación 1, el grupo X puede ser un halógeno, un grupo sulfonato, cualquier otro buen grupo saliente o un grupo carbonilo, y el grupo Y puede ser un grupo metílo, propilo, etilo o isopropilo; : b) Alilación de los compuestos de fórmula general (5), de la anterior etapa a), en un disolvente inerte, para obtener los alcoholes correspondientes de fórmula general (6), en los que los grupos Sc, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, Rl° e Y tienen las características descritas anteriormente, y el grupo R 1 presenta las características estructurales indicadas en la reivindicación 1. c) Reacción de ciclación de metátesis de los dieninos de fórmula general (6) de la anterior etapa b), catalizada por los catalizadores metalocarbénicos característicos para este tipo de procesos y en un disolvente adecuado, obteniéndose productos de formula general (7), en los que los grupos Sc, R1, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo tienen el significado dado anteriormente. d) Las posteriores modificaciones de grupos funcionales, tales como, oxidaciones, reducciones, esterificaciones, alquilaciones, isomerizaciones, etc., para dar lugar a los compuestos de fórmula general (1), en los que los grupos Sc, P, Ar, Rl, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo tienen el significado dado anteriormente en la reivindicación 1. |
| 4. | Un procedimiento para la preparación de los compuestos de formula (2), caracterizado, como transformaciones sintéticas más destacadas, por las siguientes etapas : a) La alquilación del enolato cinético de cetonas portadoras del anillo CD de los esteroides, de fórmula general (3), con los apropiados agentes alquilantes de fórmula general (8), obteniéndose, como producto de reacción, compuestos de fórmula general (9), en los que los grupos Sc, Rl, R5, R6, y R presentan las características estructurales indicadas en la reivindicación 2, el grupo X puede ser un halógeno, grupo sulfonato o cualquier otro buen grupo saliente. b) Alquilación del grupo carbonilo de los compuestos de fórmula general (9), de la anterior etapa a), en un solvente inerte, con los correspondientes compuestos organometálicos de fórmula general (10), en los que los grupos R3, R4, R8, R9 y R10 presentan las características estructurales indicadas en la reivindicación 2, M puede ser un metal de las características de Mg, Li, Na, etc., y el grupo Y puede ser un grupo metilo, propilo, etilo o isopropilo, para obtener los alcoholes correspondientes de fórmula general (11), en los que los grupos Sc, Rl, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R' () e Y tienen el significado dado anteriormente. c) Reacción de ciclación por metátesis de los dieninos de formula general (11), de la anterior etapa b), catalizada por los catalizadores metalocarbénicos característicos para este tipo de procesos y en un disolvente adecuado, obteniéndose productos de fórmula general (12), en los que los grupos Sc, R', R3, R4, R5, R, R7, R8, R9 y Rlo tienen el significado anterior. d) Las posteriores modificaciones de grupos funcionales, tales como oxidaciones, reducciones, esterificaciones, alquilaciones, isomerizaciones, etc., para dar lugar a los compuestos de fórmula general (2), en los que los grupos Sc, P, Ar, Rl, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo tienen el significado dado anteriormente en la reivindicación 2. |
| 5. | Una composición farmacéutica, caracterizada porque contiene como ingrediente activo un compuesto de las reivindicaciones 1,2, 3 y 4, en una mezcla con el apropiado vehículo o transportador. |
| 6. | Uso de los compuestos de fórmula general 1 y 2, en la fabricación de una composición farmacéutica antitumoral. |
| 7. | Uso de los compuestos de fórmula general 1 y 2, en la fabricación de una composición farmacéutica antifángica. |
| 8. | Uso de los compuestos de fórmula general 1 y 2, en la fabricación de una composición farmacéutica antimicrobiana. |
| 9. | Uso de los compuestos de fónnula general 1 y 2, en la fabricación de una composición farmacéutica antivírica. |
| 10. | Uso de los compuestos de fórmula general 1 y 2, en la fabricación de una composición farmacéutica inmunosupresora. |
DESCRIPCIÓN La presente invención se refiere al procedimiento de obtención de taxoesteroides, que poseen una estructura híbrida de steroide y taxano; y la obtención de los intermedios precursores de dichos taxoesteroides. Los compuestos son preparados a partir de biciclos hidrindánicos característicos de los esteroides.
Los taxoesteroides presentan la siguiente fórmula : RS, RsR7 SC 5 RgR7 C R., R4 C D R, C D O = , II Sk, R 8 8 B p JNH 0 Ar (1) H R,,, R Sk0 A OH Su0 Taxoesteroides
donde R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y R10 pueden ser hidrógeno o un grupo aciloxi, alquiloxi o alquílico con cadenas de C1-C10; Sc es la cadena lateral característica de los esteroides ; y Sk es una cadena aminoacídica análoga a la de los taxanos, en la cual Ar puede ser cualquier compuesto aromático, y P un radical alquiloxi con cadenas de Cl-Clo.
El taxol (NSC 125973 ; paclitaxel; plaxicel ; yewtaxan), Registry Number : [33069-62- 4]; de fórmula molecular : C47 H51 N 014, y estereoquímica absoluta, Rotación (-) :
Taxol es un derivado taxano-terpénico, que se aisló en 1971 de la corteza del Taxus brevifolia y que desde 1992 se utiliza (aprobada por la FDA, US Food and Drug Administration) en el tratamiento de metástasis del cáncer de ovario y posteriormente para el tratamiento del cáncer de pecho (revisión sobre este tema véase Taxol : Science and Applications ; Suffness, M., Ed.; CRC : Boca Raton, FL, 1995. Taxane Anticancer Agents : Basic Science and Current Status;
Georg, G. I., Chen, T. T., Ojima, I., Vyaqs, D. M. Eds.; ACS Symposium Series 583; American Chemical Society : Washington, DC, 1995). El mecanismo de acción se cree que implica la formación e hiperestabilización de los microtúbulos, y de esta forma no se produce la disociación de los microtúbulos, etapa esencial para completar el ciclo de la división celular. También se ha publicado que el taxol induce la expresión de citoxinas, y que afecta la actividad de las quinasas, bloqueando procesos esenciales de la metástasis mediante un mecanismo aún no determinado.
Por todo ello, el taxol ha atraído la atención de los científicos, no solo por su inusual mecanismo de acción, sino también por su actividad contra todo tipo de cánceres que se ha probado, y porque es miembro de una familia de sustancias naturales, los taxanos, que poseen en común los tres anillos básicos (ABC), diferenciándose en los diversos sustituyentes que poseen en las distintas posiciones del esqueleto carbocíclico :
Los análogos más interesantes de todos ellos son el taxotere y el IDN 5109.
El taxotere (docetaxel), Registry Number : [114977-28-5]; de fórmula molecular : C43 H53 N 014, y estereoquímica absoluta, presenta una mayor solubilidad y actividad. 0 HO 0 OH X t-Bu0 NH O . S s Ph s-S S_ : S - 1 OH = H _ O Oh _ M AcO Taxotere IDN 5109 El IDN 5109 (ortataxel), Registry Number : [186348-23-2] ; de fórmula molecular :
C44 H57 N 017, y estereoquímica absoluta representada anteriormente, es el primero con una buena biodisponibilidad oral y potente actividad antitumoral (Nicoletti, M. I. y col.
Cancer Research, 2000,60, 842). Estos compuestos son hoy en día reconocidos como una nueva clase de compuestos anticancerosos.
Un agente anticanceroso ideal tiene que ser selectivo hacia un determinado tejido, ya que reduce los efectos secundarios no deseados sobre las células normales. De esta forma son necesarios análogos con una mayor especificidad por los tejidos, ya que ello, junto con su baja solubilidad, es uno de los inconvenientes que presenta el taxol. Para remediar el problema de la baja solubilidad, el taxol se suele administrar disuelto en una mezcla que incluye cremophor, mezcla que puede causar hipersensibilidad inmunológica.
En los últimos años se han sintetizado más de 200 taxanos y estudiado su actividad anticancerosa, tanto en vivo como en vitro, aunque los estudios no han dado lugar a análogos ni más potentes, selectivos, o solubles, ni con mejor índice terapéutico, no encontrándose claramente ningún patrón que permita extraer una regla sobre su actividad. En general, aquellos compuestos que presentan una mayor actividad, tienen un espectro de acción tan amplio como el del propio taxol. Por tanto, no se ha podido sacar ningún patrón que permita predecir las posiciones que se pueden modificar para mejorar su actividad.
Para revisiones sobre la química y farmacología del taxol véanse las siguientes revisiones (Kingston, D. G. I.; Jagtap, P. G.; Yuan, H.; Samala, L. Progress in the Chemistry of Organic Products 2002,84, 53-225. Mekhail, T. M.; Markman, M. Expert Opinion on Pharmacotherapy 2002, 3,755-766. Miller, M. L. Ojima, 1. Chemical Record, 2001,195-211.
Kingston, D. G. I. Chem. Com7nun. 2001,867. Nicolaou, K. C.; Guy, R. K. Angew. Chem.
Int. Ed. 1995,34, 2079. Rowinsky, E. K.; Cazenave, L. A.; Donebower, R. C. J. Natl. Cancer Inst. 1990,82, 1247. Chabner, B. A. Princ. Prac. Oncol. 1991,5, 1).
Recientemente, se han estudiado extensamente distintos métodos para la preparación tanto total como parcial del taxol y sus derivados, así como de otros taxanos.
Las primeras síntesis totales fueron descritas por Nicolaou (Nature 1994,367, 630) y Holton (J. Am. Chem. Soc. 1994,116, 1597 and 1599) de forma casi simultánea. La ruta de Nicolaou se basa en una estrategia convergente en la que se construyen por separado los anillos A y C, que posteriormente se unen por la parte inferior del esqueleto mediante una reacción de Shapiro. Posteriormente, el anillo B se completa mediante una reacción de McMurry, quedando las últimas etapas para la construcción del anillo D e introducción de la cadena aminoacídica. OBn OTBS OTBS »-+ TIPSO 1 H NNHSO2Ar Li O \\/ 0 TBSO H OH OBn TIPSO OBn q"to"J"J, _ /O : HO 0 oh'owl O 0
La síntesis de Holton utiliza una estrategia lineal en la que se van construyendo paulatinamente los anillos ABCD. La sustancia de partida empleada en esta síntesis es el borneol, que se transforma en una cetona tricíclica insaturada, que posteriormente se convierte en el óxido de B-patchouleno. A partir del mismo se obtiene un derivado carbocíclico insaturado que contiene un alcohol terciario. La subsiguiente epoxidación de este compuesto y el posterior tratamiento del epóxido resultante con un ácido de Lewis induce una fragmentación para generar los anillos A y B del taxol. El anillo C se introduce finalmente sobre el fragmento bicíclico anterior, empleándose una metodología muy laboriosa de tipo Robinson-Stork. 0 OH 29\, OTES ; SQ"86q a O OBOM OYES 0 ES OTES OTES X ° < Y HOX HO » Taxol o 0 O
La tercera síntesis total la realizó el grupo del Prof. Danishefsky (J. Am. Chem. Soc.
(1996) 118,2843) en la que empleaba como sustancia de partida la cetona Wieland- Miescher, que tras una compleja estrategia sintética se transforma en un enol triflato que contiene el anillo C funcionalizado adecuadamente. El anillo B del taxol se forma eficientemente mediante una ciclación de Heck. Posteriores modificaciones permiten introducir la cadena lateral aminoacídica y la dihidroxilación del anillo B.
0 X <0 » < w Taxo Tf0 OTBS Bn zu O / : O 1 O-- ÓBn O p H OBn O O Posteriormente aparecieron otras aproximaciones a la síntesis tanto del taxol como del esqueleto policíclico de los taxanos. Entre las numerosas estrategias (véanse, Kingston, D. G.
I. ; Jagtap, P. G.; Yuan, H.; Samala, L. Progress in the Chemistry of Organic Products 2002, 84, 53. Mekhail, T. M.; Markman, M. Expert Opinion on Pharmacotherapy 2002,3, 755.
Miller, M. L. Ojima, I. Chemical Record, 2001,195-211. Kingston, D. G. 1. Chez. Commua.
2001, 867. Nicolau, K. C.; Guy, R. K. Angew. Chez. Int. Ed. 1995,34, 2079. Rowinsky, E.
K. ; Cazenave, L. A.; Donebower, R. C. J. Natl. Cancer Inst. 1990,82, 1247. Chabner, B. A.
Princ. Prac. Oncol. 1991,5, 1), caben destacar la basada en una cicloadición tándem de Diels-Alder (Jeffrey D. Winkler y otros J. Org. Chem. 1997,62, 2957-2962), en la que se genera directamente el sistema B/C del núcleo taxánico en dos etapas, y la que incluye reacciones de metátesis (Prunet, J.; Bourgeois, D. ; Mahuteau, J.; Pancrazi, A.; Nolan, S. P.; Synthesis 2000, 6,869).
Además de estas múltiples síntesis, la forma más apropiada de acceder, tanto al taxol como a sus análogos, es a través de la síntesis parcial mediante la modificación de los derivados naturales más abundantes, como la baccatina III y la 10-deacetilbaccatina III (véase ejemplos : Journal of Organic Chemistry : 1986, 51, 46; 1990,55, 1957; 1991,56, 1681; 1991,56, 6939; 1992,57, 4320; 1992,57, 6387; y 1993,58, 255). AcO O pH HO O pu R R i SS i SS s s Hp", _ HO S R= SR S S R_ SR hall, sus OHOBz-OHOBz-- AcO AcO Baccatina 111 10-deacetilbaccatina III (10-DAB)
La 10-deacetilbaccatina III (10-DAB) es un taxano natural que se convierte en taxol en elevado rendimiento mediante la selectiva acetilación en C-10, sililación en C-7 y posterior introducción de la cadena lateral por reacción con la correspondiente N-benzoil-P- lactama. El 10-DAB se extrae principalmente de las acículas del tejo europeo, Taxus baccata, y su aislamiento presenta varias ventajas respecto a la del taxol : por un lado se encuentra en concentraciones mucho más altas que el taxol en la corteza del tronco y, por otro, dado que las acículas se regeneran, a través de una recolección prudente, se pueden obtener cantidades elevadas de 10-DAB sin mermar la población del tejo. El rendimiento de 10-DAB obtenido a partir de esta fuente era aproximadamente de seis a diez veces mayor que el del taxol a partir de la corteza del Taxus brevifolia. Además, el aislamiento de la 10-DAB, un tetraol, era sígnificativamente más simple y más económico que el aislamiento del taxol. La separación del taxol de un análogo estructural, la cefalomanina (cephalomannine), era diBcil y, mientras que el taxol debe aislarse en una forma completamente pura para su incorporación directa al medicamento, la 10-DAB sólo debe purificarse lo suficiente para utilizarse como material de partida en la semisíntesis.
Otras sustancias naturales comparten con los taxanos el mecanismo de acción, tal como las epotilonas A y B (Hofle, G. et al. Angew. Chem. Int. Ed. Eng. 1996,35, 1569), eleuterobina (Long, B. H. et al. Cancer Research, 1998, 58, 1111), sarcodictinas (Hamel, E. et al. BiochemistBy, 1999, 38, 5490), etc. Recientemente, se han descubierto análogos esteroidales que se asemejan al paclitaxel en su habilidad para aumentar la estabilidad de los microtúbulos, tal como los dos análogos del 2-etoxiestradiol (Wang, Z. Q. et al. J. Med.
Chez. 2000,43, 2419), o el NSC 12983 (Wu, J. H. et al. Aizti-Cancer Drug Design 2001,16, 129), lo que confirma que este mecanismo de acción no está restringido a compuestos con estructuras taxánicas y, por tanto, la necesidad de seguir investigando en esta área (véase revisión Jordan, M. A. Current Med. Chem : Anti-Ca7lcerAgents 2002,2, 1).
En la presente invención describimos una clase de compuestos, los taxoesteroides, que se caracterizan por poseer un novedoso sistema policíclico como resultado de combinar los esqueletos carbocíclicos de los esteroides y de los taxanos. Como se muestra a continuación, los taxoesteroides poseen las características estructurales de los taxanos, como son el sistema biciclo [5.3. 1]-undecano (ciclos A y B) unido a un anillo de seis miembros (C), y las de los esteroides, como el biciclo CD, el anillo A y su cadena lateral. Dos posibles tipos de análogos, fórmulas (1) y (2), atendiendo a la orientación relativa entre ambos componentes (esteroidal y taxánico), son objetivos de esta invención, en los que los grupos Ru, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 y Rlo pueden ser un átomo de hidrógeno, o un grupo aciloxi, alquiloxi, ariloxi, alquiltio, ariltio o alquílico con cadenas de Cl-Clo. ace. Ace, Ace HO B 4H _ A B Ñ A O HO \ Sk HO Esteroides Taxol Taxanos f R@ R6R7Sc R, R6w Sc R4 C D Rl C D 0 Rs < Rs =, P O B H R R R Sk Ar'v Sk01 l óH A R2 A"'R3 Ar Su0 i Sk0 Taxoesteroides
En todos ellos, los distintos sustituyentes son radicales del tipo : alquilo lineal o ramificado de 1-10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, o bicicloalquílico de 7 a 10 átomos de carbono; estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que
contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo-1 (eventualmente sustituido en-4 por un radical alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado que contiene 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilo, cicloalquenilo o bicicloalquilo pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos que contienen de 1 a 4 átomos de carbono.
Se es la cadena lateral característica de los esteroides o un radical alquílico lineal o ramificado de 1-12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 3 a 12 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, o bicicloalquílico de 7 a 10 átomos de carbono; estando sustituidos eventualmente estos radicales por uno o varios sustituyentes, idénticos o diferentes, elegidos entre los átomos de halógeno y los radicales hidroxi, alcoxi que contienen de 1 a 4 átomos de carbono, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo-1 (eventualmente sustituido en-4 por un radical alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o por un radical fenilalquilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono), cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquenilo de 4 a 6 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, carboxi o alcoxicarbonilo, cuya parte alquilo contiene de 1 a 4 átomos de carbono, o un radical fenilo, eventualmente sustituido por uno o varios radicales, idénticos o diferentes, elegidos entre los radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o alcoxi que contiene de 1 a 4 átomos de carbono, un radical heterocíclico nitrogenado saturado o insaturado de 5 ó 6 miembros, eventualmente sustituido por uno o varios radicales alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, entendiéndose que los radicales cicloalquilo, cicloalquenilo o bicicloalquilo pueden estar eventualmente sustituidos por uno o varios radicales alquílicos que contienen de 1 a 4 átomos de carbono.
Sk es una cadena aminoacídica análoga a la de los taxanos, en la que P representa a un grupo fenílico o un radical alcoxi con cadenas alquílicas de 1 a 10 carbonos, alquenílicas y alquinílicas de 3 a 10 carbonos, cicloalquílicas y cicloalquenílicas de 4 a 7 átomos en el anillo, un fenilo o un compuesto heterocíclico, y Ar es un compuesto aromático.
Son también objeto de la presente invención los análogos derivados de la introducción de diversos sustituyentes en el esqueleto carbocíclico mencionado, así como las
propiedades farmacéuticas de los compuestos mencionados anteriormente, incluyendo sus propiedades anticancerosas. Por último, se describe el procedimiento de obtención de dichos compuestos.
El procedimiento de obtención está basado en una reacción de ciclación de metátesis de dieninos, construidos sobre el biciclo CD de los esteroides mediante transformaciones sencillas. Las etapas fundamentales de estas transformaciones consisten en la alquilación del enolato cinético de la cetona que contiene el biciclo CD característico de los esteroides y apropiadamente funcionalizado, junto con la cadena lateral correspondiente; la alilación del carbonilo de la cetona monoalquilada obtenida en la etapa anterior, y por último, la reacción de ciclación de metátesis del resultante dienino (Kim, S. -H. ; Bowden, N.; Grubbs, R. H. J.
Am. Chem. Soc. 1994, 116, 10801-10802; Kim, S. -H. ; Zuercher, W. J.; Bowden, N. B.; Grubbs, R. H. J. Org Chem. 1996, 61, 1073-1081 ; Zuercher, W. J.; Scholl, M.; Grubbs, R.
H. J. Org. Chem. 1998, 63, 4291-4298; Fürstner, A.; Liebl, M.; Hill, A. F.; Wilton-Ely, J. D.
E. T. Chem. Commu7Z. 1999,601-602 ; Codesido, E. M.; Castedo, L.; Granja, J. R. Org. Lett.
2001, 3, 1483-1486).
Esta novedosa ciclación para la obtención de biciclo [5.3. 1] alquenos se basa en una reacción de ciclación de metátesis catalizada por catalizadores metalcarbénicos, entre los que caben destacar como más importantes, los catalizadores de Grubbs (Scholl, M.; Ding, S.; Lee, C. W.; Grubbs, R. H. Org. Lett. 1999, 1, 953-956).
La reacción se basa en una inicial reacción de metátesis entre el catalizador y la olefina menos sustituida, generando el intermedio metalcarbénico II, que posteriormente reacciona con el alquino para formar el ciclo central de 8-miembros mediante una reacción de ciclación de enínos, generando un nuevo intermedio metalcarbénico (III). El resultante intermedio III reacciona con la otra olefina mediante otra ciclación de metátesis para formar el anillo A de los taxoesteroides. Las características estructurales del grupo P permiten gobernar la regioselectividad del proceso, favoreciendo la iniciación del proceso por la olefma menos substituida, lo que a su vez favorece la inicial formación del anillo de ocho miembros. Asimismo, este grupo debe dirigir la ciclación enínica frente a la diénica que daría lugar al compuesto V. R5 RI> R5 RI> R3 4 R5 R6 R7 Sc Ru"==-1 Ph R3 R4Rs R6 R7 Sc R3 R3 Re Ciclación 9 Cross-metátesis R8 R R dnica Rs R Sc P PR \, Ru" Rs R10' 10 R4 10 Ciclación enínica Sc R Sc Rs R R5 R6 Ro R4 Ciclación de 4 R3R metátesis I'3 R9 1 < F23 R R R9 p P EJEMPLO 1 El taxoesteroide (XIII) se preparó siguiendo la mencionada estrategia sintética, empleando como sustancias de partida la cetona derivada del diol de Inhoffen y el correspondiente iododerivado. Los agentes alquilantes se pueden preparar a partir del trietil éster del tricarboximetano mediante alquilaciones con los apropiados derivados alquenílicos y alquinílicos. Así, tras la monopropargilación del trietil éster del tricarboximetano, por tratamiento con etóxido sódico y bromopropino en THF, seguido de tratamiento con etóxido
sódico en presencia del l-bromo-4-metil-2-penteno se obtiene el diéster del malonato VII, mediante un proceso que se basa en la descarboxilación y posterior alquilación del resultante enolato del propargilmalonato con el correspondiente bromuro alílico. La posterior descarboxilación con etóxido sódico en etanol y reducción con hidruro de litio y aluminio y transformación del alcohol resultante en un buen grupo saliente (iodo, mesilato, etc. ) da lugar a los deseados agentes alquilantes. (a) NaOEt BrCH2C_CH, THF, 85 % ; (b) NaOEt, BrCH2CH=CH-R, 77-85 %; (c) NaOEt, EtOH, 60-70 %; (d) LiAIH4, THF, 70-90% ; (e) 12, PPh3, Imidazole, 86 %; (a) i) KHDMS, DMF,-78 °C, ii) 2-propargil-1-yodo-4-hepteno, 75 %; (b) AlilMgBr, THF, 95 %; (c) catalizador de Grubbs, CH2CI2, A, 87 %.
El tratamiento del enolato cinético de la cetona de X, generado por tratamiento de dicha cetona con KHMDS, con el ioduro IX y posterior tratamiento de la cetona monoalquilada resultante con bromuro de alilmagnesio produce el dienino XII. La adición del catalizador de Grubbs sobre una disolución del dienino XII en diclorometano y calentamiento de la mezcla resultante da lugar al taxoesteroide XIII.
Una disolución de etóxido sódico (1.93 g, 28.42 mmol) en etanol (24 mL) se añadió a una disolución del trietil éster del metanotricarboxilato (6.00 g, 25.84 mmol) en éter (20 mL) enfriado en un baño de hielo/agua. La resultante sal sódica, que precipita, se recoge, lava con éter, y se seca a vacío para dar lugar 5. 78g de la deseada sal que se disolvió en una mezcla de tolueno : DMF (1 : 1,50 mL) y se trató con bromuro de propargilo (80 % peso en tolueno, 5.1 mL, 45.5 mmol). La mezcla resultante se calentó a 80°C durante 1.5 h, se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y el residuo se lavó con tolueno. Los filtrados reunidos se
lavaron con agua, se secaron sobre Na2SO4, filtraron y concentraron. El bruto resultante se destiló (97°C a 0.2 rnmHg), resultando 6.03 g del trietil éster de but-3-ino-1, 1, 1-tricarboxilato (VI). 1H-NMR (CDCl3, 300 MHz, 8) : 4.25 (6H, c, J = 7.1 Hz, 3 OCH2-Me), 2.98 (2H, d, J = 2.6 Hz, H-2), 2.01 (1H, t, J = 2.6, H-C=), 1.26 (9H, t, J = 7.1 Hz, OCH2CH3).
13C-NMR (CDCl, 75 MHz, 8) : 165.6 (3 CO), 78.6 (C=), 70.6 (C=), 64.4 (C), 62.4 (3 CH2), 23.1 (CH2), 13.8 (3 CH3). EM-IQ+ (m/z, I) : 271 (MH+, 100), 197 (35), 125 (24); HRMS calcd. para C13H19O6 (MH+) : 271.118164, encontrado 271.118680.
Una disolución del éster trietílico del but-3-ino-1, 1, 1-tricarboxilato (VI) (3.00 g, 11.10 mmol) en THF (3 mL) se añadió vía cánula a una suspensión de etóxido sódico (980 mg, 14.4 mmol) en THF (35 mL). Transcurridas 1.5 h, se añadió el metilsulfonato de (2E)-4- metil-2-pentenilo (3.9 g, 22.20 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Transcurrido este tiempo, la mezcla de reacción se vertió sobre una disolución saturada de NaCI y se extrajo con éter. Las fases orgánicas reunidas se secaron, filtraron y concentraron y el residuo se purificó mediante una cromatografía rápida (4 % EtOAc/hexanos) para dar lugar a 2.6 g de VII [88 %, Rr0. 5 (15% EtOAc/hexanes)] 1H-RMN (CDCI3, 300 MHz, #) : 5.52 (1H, dd, J = 6.9 Hz, J = 15.2 Hz,'Pr-CH=CHR), 5.15 (1 H, m,'Pr-CH=CHR), 4.17 (4H, c, J = 7.1 Hz, 2 CO2CH2), 2.75 (2H, d, J = 2.6 Hz, -CH2-C=), 2.70 (2H, d, J = 7.5 Hz, -CH2-C=), 2.21 (1 H, m, Me2CH), 1. 98 (1 H, t, J = 2.6 Hz, H-C=), 1.23 (6H, t, J = 7.1 Hz, 2 CO2CHCH3), 0.92 (6H, d, J = 6.8 Hz, 2 CH3). 13C-RMN (CDCl3, 75 MHz, 8) : 169.8 (2 CO), 143.2 (CH), 119.7 (CH), 79.1 (C=), 71.2 (C=), 61.5 (2 CH2), 57.0 (C), 35.0 (CH2), 31.1 (CH), 22.0 (2 CH3), 21.7 (CH2), 14.1 (2 CH3). EM-IQ+ (m/z, I) : 281 (MH+, 58), 207 (25), 133 (17). HRMS calcd. para C16H2504 (MH+) : 281.175285, encontrado 281. 175641.
Una disolución del compuesto VII (3. 2 g, 12.01 mmol) se añadió a una disolución de EtONa (1.23 g, 18.07 mmol) en etanol (50 mL). La mezcla de reacción se calentó a reflujo
durante 2 días y transcurrido ese tiempo se vertió sobre NaCI (40 mL). La mezcla se acidificó con 10 % HCl (20 mL) y extrajo con éter. La fase orgánica reunida se secó con Na2S04, filtró, concentró, y el residuo se purificó mediante una cromatograSa rápida en gel de sílice (1 % EtOAc/hexanos) para dar luar a 1.3 g del éster VIII [50 %, Rf=0. 5 (15 % EtOAc/hexanes), aceite amarillo. 1H-RMN (CDCl3, 250 MHz, 8) : 5.47 (1 H, dd, J = 6.3 Hz, J = 15.5 Hz, H-5), 5.26 (1H, m, H-4), 4.15 (2H, c, J = 7.1 Hz, -CO2-CH2-), 2.56 (1H, m, H-6), 2.33 (5H, m, H-3, H-2, CH2 - C=), 1. 98 (1H, t, J = 2.6 Hz, H-C=), 1. 26 (3H, t, J = 7.1 Hz,-C02-CHrCH3), 0.94 (6H, d, J = 6.8 Hz, 2 x Me del'Pr) ; 13C-RMN (CDCl3, 63 MHz, 8) : 173.5 (CO), 140.7 (CH), 122.3 (CH), 81.2 (C=), 69.6 (C=), 60.1 (CH2), 44.3 (CH), 33.8 (CH2), 30.8 (CH), 22.2 (2 CH3), 19.9 (CH2), 14.0 (CH3) ; EM- IQ+ (m/z, I) : 209 (MH+, 29), 136 (MH+-CO2Et, 2); HRMS calcd. para C13H2102 (MH+) : 209.154155, encontrado 209.154326.
Una disolución del éster VIM (290 mg, 1. 49 mmol) en éter (10 mL), enfriada a 0°C, se trató con LiALH4 (113 mg, 2.99 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 1 h, se añadió a continuación 5 % H2SO4 (5 mL) y se extrajo con éter. Las fases etéreas se secaron, filtraron, concentraron y el bruto resultante se purificó mediante una cromatografia rápida en gel de sílice (10 % EtOAc/hexanos) dando lugar a 210 mg de 6-metil-2-prop-2-inil-4-hepten- l-ol [89 %, Rf=0. 3 (15% EtOAc/hexanos)]. 1H-RMN (CDCl3, 300 MHz, 8) : 5.45 (1H, dd, J= 6.4 Hz, J= 15.3 Hz, H-5), 5.30 (1H, dt, J= 7.1 Hz, J= 15. 2 Hz, H-4), 3.62 (2H, m, H-1), 2.24 (1H, m, H-6), 1.96 (1H, t, J = 2.6 Hz, H-C=), 1.76 (1H, m, H-2), 0.95 (6H, d, J = 6.7 Hz, 2 CH3). 13C-NMR (CDCl3, 75 MHz, 5) : 140.3 (CH), 124.0 (CH), 82.6 (C=), 69.7 (C=), 64.8 (CH2), 40.0 (CH), 33.6 (CH2), 31.0 (CH), 22.6 (2 CH3), 19.8 (CH2). EM-IQ+ (m/e, I) : 167 (MH+, 31), 149 (MH+-H20, 51). HRMS calcd. para C11H19O (MH+) : 167.143590, encontrado 167.144312.
A una disolución del alcohol (1.5 g, 9.0 mmol) en THF (45 mL), enfriada a 0°C, se añadió sucesivamente trifenilfosfina (2. 85 g, 10. 87 mmol), imidazol (1. 85 g, 27.17 mmol) y
yodo (2.53 g, 9.96 mmol). La mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 30 min y otros 30 min a temperatura ambiente, y posteriormente se vertió sobre agua y se extrajo con éter. Las fase orgánica reunida se secó con Na2S04, filtró y concentró a presión reducida y el residuo resultante se purificó mediante una columna rápida en gel de sílice para dar luagar al yoduro IX con un rendimiento del 85 %. Rf=0. 9 (10 % EtOAc/hexanes), aceite incoloro. 1 H- RMN (CD3, 250 MHz, 8) : 5.55 (1 H, dd, J = 6.6 Hz, J = 15.3 Hz, H-7), 5.26 (1 H, m, H-6), 3.36 (2H, m,-CHrI), 2.00 (1H, t, J = 2.6 Hz, H-C-), 1.50 (1H, m, H-4), 0.89 (6H, d, J = 6.8 Hz, 2 x Me of iPr). 13C-RMN (CDCl3, 63 MHz, #) : 141.1 (CH), 122. 8 (CH), 81.4 (C=), 70.1 (C"), 38.9 (CH), 36.5 (CH2), 31.0 (CH), 23.3 (CH2), 22.5 (CH3 x 2), 13.1 (CH2). EM-IQ (m/e, I) : 277 (MH+, 2), 150 (MH+-I, 2).
Una disolución de la cetona X (0.5 g, 1.54 mmol) en DMF (3 mL) se adicionó lentamente sobre una disolución de KHMDS (0. 5M en tolueno, 9.3 mL, 4.6 mmol) en DMF (4 mL) enfriada a-78°C. La mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 30 min y a continuación se adicionó una disolución del yoduro IX (1.3 mg, 4.6 mmol) en DMF (2 mL).
Transcurridas 2 horas se añadió una disolución saturada de NH4C1 (4 mL) y la fase acuosa se extrajo con éter. Los extractos etéreos reunidos se lavaron con una disolución saturada de NaCl, se secaron sobre Na2S04, y concentraron a presión reducida para dar lugar a un residuo que se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (2 % EtOAc/hexanos), proporcionando el deseado producto XI con un 78 % de rendimiento. 1H-RMN (CDCl3, 250 MHz, zu : 5.41 (1H, dd, J = 6.4 Hz, J = 15.3 Hz, H-5'), 5.22 (1 H, m, H-4'), 3.51 (1H, m,-CHa-OTBS), 3.31 (1H, m, -CHb-OTBS), 2.57 (1H, m, H-6'), 0.87 (9H, s, tBu), 0.62 (3H, s, Me-18), 0.01 (6H, s, Me2Si). 13C-RMN (CD3, 63 MHz, 8) : 214.6 (CO), 140.4 (CH), 124.1 (CH), 82.2 (C=), 69.7 (C=), 67.5 (CH2), 57.6 (CH), 53.2 (CH), 50.3 (C), 47.2 (CH), 38.5 (CH), 36.4 (CH2), 35.7 (CH2), 35.4 (CH2), 34.9 (CH), 31.1 (CH), 29.3 (CH2), 27.0 (CH2), 25.9 (2 CH3), 22.6 (3 CH3), 21.3 (CH2), 19.0 (CH2), 18.3 (C), 17.0 (CH3), 12.8 (CH3),-5. 4 (2 CH3). EM-IQ+ (m/e, 1) : 473 (MH+, 100), 342 (MH+- OTBS, 6), 341 (28), 323 (12). HRMS calcd. para C30H53O2Si (MH+) : 473. 381485, encontrado 473.383792.
Una disolución del bromuro de alilmagnesio (1 M en THF, 4.7 mL, 4.7 mmol) se añadió a una disolución de la cetona XI (520 mg, 1. 1 mmol) en THF (10 mL) a-78°C.
Transcurridas 2 h, se añadió una disolución saturada de NH4C1 (15 mL) y la fase acuosa resultante se extrajo con éter. Los extractos etéreos reunidos se lavaron con una disolución saturada de NaCI, se secó sobre Na2S04, y concentró a presión reducida para dar lugar a un residuo que se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (3 % EtOAc/hexanos), proporcionando el deseado producto XII con un 90 % de rendimiento. Rf= 0.37 (10 % EtOAc/hexanos). 1H-RMN (CDCl3, 500 MHz, 8) : 5.98 (1H, m, H-6), 5.46, 5.29 (2H, m, H-4', H-5'), 5. 15 (2H, m, H-6a), 3.56 (1H, dd, J= 3.2 Hz, J= 9.6 Hz, - CHa-OTBS), 3. 25 (1 H, dd, J = 7.5 Hz J = 9.5 Hz,-CHb-OTBS), 0.88 (9H, s, tBu), 0.02 (6H, s, Me2Si). 13C-RMN (CDCl3, 125 MHz, 8) : 133.6 (CH), 133.3 (CH), 126. 8 (CH), 119.7 (CH2), 82. 5 (C=), 75. 8 (C=), 69.8 (CH2), 67.7 (C), 53.7 (CH), 51.2 (CH), 43.5 (CH2), 43.3 (C), 39. 8 (CH), 38.5 (CH), 34. 8 (CH), 34.6 (CH2), 32.2 (CH2), 30.8 (CH2), 26.7 (CH2), 26.0 (CH3 x 3), 21.1 (CH2), 20.7 (CH2), 20.4 (CH2), 20.3 (CH2), 18. 4 (C), 16.7 (CH3), 14.3 (CH3), 13.5 (CH3),-5. 3 (CH3),-5. 4 (CH3). EM-IQ (m/e, I) : 501 (MH+, 0.05), 352 (MH+-OTBS-H20, 2). HRMS calcd. para C32H5702Si (MH+) : 501.412785, encontrado 501. 413082.
Una disolución del dienino XII (200 mg, 0.35 mmol) en diclorometano (80 mL) se trató con el catalizador de Grubbs (34 mg, 0.04 mmol). La mezcla resultante se calentó a 50°C durante 24 h, que tras su ennfriamiento a temperatura ambiente se concentró a presión reducida. El bruto resultante se purificó mediante una cromatografia en alúmina (3 % EtOAc/hexanos) para dar lugar al compuesto bicíclico deseado XIII, con un rendimiento del
55 %. Rf= 0.27 (10 % EtOAc/hexanos). 1H-RMN (CDCl3, 500 MHz, 8) : 6.18 (1H, d, J = 10.1 Hz, H-4), 5.43 (1H, m, H-3), 5.34 (1H, t, J = 8.1 Hz, H-6), 3.61 (1H, dd, J = 3.5 Hz, J = 9.6 Hz,-CHa-OTBS), 3.20 (1 H, m,-CHb-OTBS), 2.87 (1 H, dd, J = 3.9 Hz, J = 11.4 Hz, H-10), 2.01 (1H, d, J = 11.4 Hz, H-10), 0.91 (9H, s, tBu), 0.05 (3H, s, Me2Si). 13C-RMN (CDCl3, 125 MHz, #) : 139.7 (C), 130.5 (CH), 125.8 (CH), 119.1 (CH), 81.2 (C), 67.8 (CH2), 53.8 (CH), 48.5 (CH), 45.2 (CH), 43.7 (C), 40.5 (CH2), 38.6 (CH), 35.6 (CH2), 35.1 (CH2), 34.9 (CH), 33.3 (CH2), 30.4 (CH2), 29.9 (CH2), 26.5 (CH2), 26.0 (3 CH3), 20.6 (CH2), 18. 4 (C), 16.4 (CH3), 14.0 (CH3),-5. 3 (2 CH3).
EM-IQ+ (m/e, I) : 445 (MH+, 4), 313 (4), 295 (83). HRMS calcd para C28H4902Si (MH+) : 445.350185, encontrado 445.351417.
Sobre una disolución de XIII (80 mg, 0.16 mmol) en THF (2 mL) se añadió una disolución de FTBA en THF (1 M, 2.2 mL, 2.2 mmol) y la mezcla resultante se agitó a reflujo durante 1 h. Una vez enfriada a temperatura ambiente se trató con NH4Cl (10 mL) y se extrajo con éter etílico (2 x 10 mL). Las fases orgánicas reunidas se secaron, filtraron y concentraron a presión reducida, y el residuo resultante se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (25 % EtOAc/hexanos), proporcionando 48 mg de XIV, con un rendimiento del 95 %. Rf = 0.36 (30 % EtOAc/hexanos). 1H-NMR (CDCl3, 300 MHz, #) : 5.84, 5.56 (2H, m, H-6, H-5), 3.59 (1H, m, -CHa-OH), 3.33 (1H, m, -CHb- OH), 1.94 (1H, t, J = 2.6 Hz, H- C=), 1.02 (3H, d, J = 6.6 Hz, Me-21), 0.94 (3H, s, Me-18). 13C-NMR (CDCl3, 75 MHz, #) : 131.6 (CH), 127.9 (CH), 83.6 (C=), 78.4 (C), 70.0 (C=), 68.2 (CH2), 53.8 (CH), 52.2 (CH), 43.6 (C), 42.1 (CH), 41.0 (CH2), 40.6 (CH), 38.6 (CH), 37.2 (CH2), 35.5 (CH2), 33.8 (CH2), 30.1 (CH2), 28.4 (CH2), 27. 1 (CH2), 20.4 (CH2), 16.9 (CHs), 13.5 (CH3). EM-IQ' (mle, 1) : 331 (MH+, 9), 313 (MH+- H2O, 75), 295 (MH+-2H20, 100). HRMS calculado para C22H3502 (MH+) : 331.263706, encontrado 331.264789.
EJEMPLO 2 El taxoesteroide (XVIII) se preparó de la forma siguiente :
Una disolución del éster trietílico del but-3-ino-1, 1, 1-tricarboxilato (VI) (5. 0 g, 18. 4 mmol) en THF (5 mL) se añadió vía cánula a una suspensión de etóxido sódico (1.48 g, 23.8 mmol) en THF (50 mL). Transcurridas 1.5 h, se añadió metilsulfonato de (2Z)-2-pentenilo (5.9 g, 36.80 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Transcurrido este tiempo, la mezcla de reacción se vertió sobre una disolución saturada de NaCI y se extrajo con éter. Las fases orgánicas reunidas se secaron, filtraron y concentraron y el residuo se purificó mediante una cromatografia rápida (4 % EtOAc/hexanos) para dar lugar a 1.7 mg de VIIb [35 %, Rf=0. 6 (10 % EtOAc/hexanes)]. 1H-NMR (CDCI3, 250 MHz, 8) : 5.48 (1 H, m, H-C=), 4.97 (1 H, m, H-C=), 4.11 (4H, m, 2 CO2CH2), 2.70 (4H, m, -CH2-C=, -CH2- C=), 2.07 (2H, m, CH3-CH2-C=), 1.94 (1H, t, J = 2.7 Hz, H-C=), 1.18 (6H, t, J = 7. 15 Hz, 2 CO2CH2CH3), 0. 88 (3H, t, J = 7.5 Hz, CH3-CH2-C=). 13C-NMR (CDCI3, 63 MHz, 3) : 169.7 (2 CO), 136.4 (CH), 121.6 (CH), 78. 9 (C-), 71.1 (C=), 61.4 (CH2), 61. 1 (CH2), 56.5 (C), 29.5 (CH2), 22.2 (CH2), 20.5 (CH2), 14.0 (CH3), 13.9 (CH3), 13.6 (CH3) ; EM-IQ+ (m/z, I) : 267 (MH+, 100), 194 (MH+-CO2Et, 5), 121 (MH+-(CO2Et) 2,5) ; HRMS calculado para C15H2304 (MH+) : 267.159634, encontrado 267.160073.
Una disolución del compuesto VIIb (1.5 g, 5.61 mmol) se añadió a una disolución de EtONa (570 mg, 8.4 mmol) en etanol (20 mL). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 días y transcurrido ese tiempo se vertió sobre NaCI (20 mL). La mezcla se acidificó con 10 % HCl (20 mL) y extrajo con éter. La fase orgánica reunida se secó con Na2S04, filtró, concentró y el residuo se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (1 % EtOAc/hexanos), resultando 600 mg del éster VIIIb [55 %, Rf=0. 6 (10 % EtOAc/hexanes), aceite amarillo]. 1H-NMR (CDCl3, 250 MHz, 8) : 5.44 (1H, m, H-C=), 5.19 (1H, m, H-C=), 4.11 (2H, c, J = 7.1 Hz, -CO2-CH2), 2.51 (1H, m, H-2), 2.35 (4H, m, H-3, CH2-C=), 2.01 (3H, m, H-6, H-C=), 1.21 (3H, t, J = 7.1 Hz,-C02-CH2-CHs), 0.90 (3H, t, J = 7.5 Hz, H-7). 13C-NMR (CDCl3, 63 MHz, b) : 173.8 (CO), 134.6 (CH), 124.3 (CH), 81.4 (C=), 69.8 (C-), 60.5 (CH2), 44.4 (CH), 28.5 (CH2), 20.5 (CH2), 20.3 (CH2), 14.2 (CH3), 14.1 (CH3). EM-IQ (m/z, I) : 195 (MH+, 53), 167 (27), 149 (17), 121 (100). HRMS calculado para C12H19O2 (MH+) : 195.138505, encontrado 195.138842.
Una disolución del éster VIIIb (500 mg, 2.56 mmol) en éter (20 mL), enfriada a 0°C, se trató con LiAlH4 (150 mg, 4.0 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 1 h, se añadió a continuación 5 % H2S04 (10 mL) y se extrajo con éter. Las fases etéreas reunidas se secaron, filtraron, concentraron y el bruto resultante se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (10 % EtOAc/hexanos), dando lugar a 352 mg de 2-prop-2-inil-4- hepten-1-ol [90 %, Rf=0. 15 (15 % EtOAc/hexanos)]. 1H-NMR (CDCl3, 250 MHz, 8) : 5.45 (2H, m, H-4, H-5), 3.61 (2H, m, H-1), 2.25 (2H, m, H-6), 2.13 (4H, m, CHC--, H-3), 1.96 (1H, t, J = 2.7 Hz, H-C=), 1.75 (1H, m, H-2), 0.93 (3H, t, J = 7.5 Hz, H-7). 13C- NMR (CDCI3, 63 MHz, 8) : 133.9 (CH), 126.0 (CH), 82.5 (C=), 69.7 (C=), 64.7 (CH2), 40.2 (CH), 28. 0 (CH2), 20.6 (CH2), 19.8 (CH2), 14.2 (CH3). EM-IQ+ (m/e, I) : 153 (MH+, 36), 135 (MH+-H2O, 51). HRMS calculado para C10H17O (MH+) : 153.127940, encontrado 153. 128589.
A una disolución del alcohol (350 g, 2. 3 mmol) en THF (15 mL), enfriada a 0°C, se añadió sucesivamente trifenilfosfina (725 mg, 2.76 mmol), imidazol (470 mg, 6.9 mmol) y yodo (648 g, 2.55 mmol). La mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 30 min y otros 30 min a temperatura ambiente, y posteriormente se vertió sobre agua y se extrajo con éter. La fase orgánica reunida se secó con Na2S04, filtró y concentró a presión reducida y el residuo resultante se purificó mediante una columna rápida en gel de sílice, resultando 514 mg del yoduro Fb con un rendimiento del 85 %. Rf=0. 8 (10 % EtOAc/hexanes), aceite incoloro. 1H-NMR (CDCl3, 250 MHz, 8) : 5.49, 5.23 (2H, m, H-6, H-7), 3.34 (2H, m, CHz-)), 2.35 (2H, m, H-8), 2.27 (2H, dd, J= 2.6 Hz, J= 6.7 Hz, H-3), 2.17 (2H, m, H- 5), 2.00 (1 H, t, J = 2.6 Hz, H-1), 1.55 (1 H, m, H-4), 0.96 (3H, t, J = 7.5 Hz, H-9). 13C-
NMR (CDCI3, 63 MHz, 8) : 134.7 (CH), 125.0 (CH), 81.4 (C=), 70. 2 (C-), 39. 3 (CH), 31.3 (CH2), 23.5 (CH2), 20.8 (CH2), 14.1 (CH3), 13.0 (CH2). EM-IQ+ (m/e, I) : 263 (MH+, 0.1), 136 (MH+-I, 11), 121 (15), 107 (55). HRMS calcd for C10H16 (MH+-I) : 136.125201, encontrado 136.124674.
Una disolución de la cetona XV (0.4 g, 1.45 mmol) en DMF (3 mL) se adicionó lentamente sobre una disolución de KHMDS (0.5 M en tolueno, 9.0 mL, 4.5 mmol) en DMF (4 mL), enfriada a-78°C. La mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 30 min y a continuación se adicionó una disolución del yoduro (1.2 g, 4.5 mmol) en DMF (2 mL).
Transcurridas 2 horas se añadió una disolución saturada de NH4Cl (4 mL) y la fase acuosa se extrajo con éter. Los extractos etéreos reunidos se lavaron con una disolución saturada de NaCI, se secaron sobre Na2S04, y concentraron a presión reducida para dar lugar a un residuo que se purificó mediante una cromatografia rápida en gel de sílice (2 % EtOAc/hexanos), proporcionando el deseado producto XVI con un 69 % de rendimiento. Rf=0.6 (10 % EtOAc/hexanes), 1H-NMR (CDCl3, 250 MHz, 8) : 5.43, 5.19 (2H, m, H-4', H-5'), 1.14 (3H, d, J = 5. 7 Hz, CH3-21), 0.87 (6H, d, J = 6.6 Hz, CH3-26 y 27), 0.64 (3H, s, CH3- 18). 13C-NMR (CDCl3, 63 MHz, 8) : 214.9 (CO), 133.9 (CH), 126.1 (CH), 82.0 (C=), 69.7 (C=), 67. 5 (CH2), 57.6 (CH), 53.2 (CH), 50.2 (C), 47.6 (CH), 38.6 (CH), 36.3 (CH2), 35.3 (CH2), 35.1 (CH), 31.05 (CH2), 29.2 (CH2), 27.0 (CH2), 22.7 (CH3), 22.5 (CH3), 21.3 (CH2), 20.6 (CH2), 19.0 (CH2), 17.9 (CH3), 14.2 (CH3), 12.8 (CH3). EM- IQ+ (m/e, I) : 399 (MH+, 80), 381 (MH+-H20, 40). HRMS calculado para C28H470 (MH+) : 399.362692, encontrado 399.361999.
Una disolución del bromuro de alilmagnesio (1 M en THF, 2.2 mL, 2.2 mmol) se añadió a una disolución de la cetona XVI (200 mg, 0.5 mmol) en THF (5 mL) a-78°C.
Transcurridas 2 h, se añadió una disolución saturada de NH4C1 (15 mL) y la fase acuosa resultante se extrajo con éter. Los extractos etéreos reunidos se lavaron con una disolución saturada de NaCI, se secó sobre Na2S04, y concentró a presión reducida para dar lugar a un residuo que se purificó mediante una cromatografía rápida en gel de sílice (3 % EtOAc/hexanos), proporcionando el deseado producto XVII con un 80 % de rendimiento. Rf = 0.37 (10 % EtOAc/hexanos). Rf= 0.5 (10 % EtOAc/hexanes), aceite amarillento. 1H- NMR (CDCl3, 300 MHz, 8) : 5.86 (1H, m, H-6), 5.45, 5.28 (2H, m, H-4', H-5'), 5.16 (2H, m, H-6a), 5.15 (2H, m, H-6a), 0.85 (6H, d, J = 6.6 Hz, Me-26, Me-27), 0.88 (3H, s, Me-18). 13C-NMR (CDCl3, 75 MHz, 8) : 133.3 (C), 133.2 (CH), 121.1 (CH), 119.3 (CH2), 83.5 (C-), 69.2 (C=), 69. 8 (CH2), 67.7 (C), 57.1 (CH), 51.3 (CH), 43.3 (C), 43.4 (CH2), 39.6 (CH), 39.5 (CH2), 35.85 (CH), 35.8 (CH2), 35.2 (CH), 34.6 (CH2), 33.0 (CH2), 31.5 (CH2), 30.25 (CH2), 28.0 (CH), 27.2 (CH2), 23.7 (CH2), 22.8 (CH3), 22.5 (CH3), 20.4 (CH2), 20.0 (CH2), 18.3 (CH3), 17.8 (CH3), 13.4 (CH3). EM-IQ+ (m/e, I) : 441 (MH+, 44), 423 (MH+-H20, 100). HRMS calculado para C32H57O2Si (MH : 441.409642, encontrado 441.409447.
Una disolución del dienino XVII (100 mg, 0.23 mmol) en diclorometano (40 mL) se trató con el catalizador de Grubbs (17 mg, 0.02 mmol). La mezcla resultante se calentó a 50°C durante 24 h, que tras su enfriamiento a temperatura ambiente se concentró a presión reducida. El bruto resultante se purificó mediante una cromatografia en alúmina (3 % EtOAc/hexanos) para dar lugar al compuesto bicíclico deseado XVIII, con un rendimiento del 45 %. Rf= 0.50 (10 % EtOAc/hexanos). 1H-NMR (CDCI3, 500 MHz, S) : 6.19 (1 H, d, J = 9.7 Hz, H-4), 5.43 (1H, m, H-3), 5.34 (1H, m, H-6), 2.86 (1H, dd, J = 4. 2 Hz, J = 11.5 Hz, H-10), 1.99 (1 H, d, J = 11.5 Hz, H-10), 0.852 (6H, d, J = 6.6 Hz, Me-26, Me- 27), 0.850 (3H, s, Me-18). EM-IQ+ (m/e, l) : 385 (MH+, 5), 367 (MH+-H2O, 37). HRMS calculado para C27H450 (MH+) : 385.347041, encontrado 385.346825.