Elle concerne plus particulièrement la préparation de la camptothécine, du topotécan et de l'irinotécan.

Il est connu selon le brevet européen EP 137145, cité ici à titre de référence, des dérivés de camptothécine de formule générale : dans laquelle notamment R1 est hydrogène, halogène ou alcoyle, X est un atome de chlore ou NR2R3 pour lequel R2 et R3 identiques ou différents peuvent représenter un atome d'hydrogène, un radical alcoyle éventuellement substitué, un carbocycle ou un hétérocycle éventuellement substitués, ou des radicaux alcoyle (éventuellement substitués) formant avec l'atome d'azote auquel ils sont attachés, un hétérocycle contenant éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O, S et/ou NR4, R4 étant un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle et dans laquelle le groupement X-CO-O- est situé en position 9,10 ou 11 du cycle A. Ces dérivés de camptothécine sont des agents anticancéreux, inhibiteurs de topoisomérase I, parmi lesquels l'irinotécan, pour lequel X-CO-O-est [4- (l-pipéridino)-l-pipéridino] carbonyloxy, est un principe actif particulièrement efficace sur les tumeurs solides et notamment le cancer colorectal.

Il est encore connu selon la demande de brevet EP 74256, citée ici à titre de référence, d'autres dérivés de camptothécine qui sont mentionnés comme agents anticancéreux, notamment des dérivés de structure analogue à la structure donnée ci-dessus et dans laquelle X-CO-O-est remplacé par un radical-X'R'pour lequel X' est O ou S et R'est un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ou acyle.

D'autres dérivés de camptothécine ont aussi été décrits par exemple dans les brevets ou demandes de brevets, cités ici à titre de référence, EP 56692, EP 88642, EP 296612, EP 321122, EP 325247, EP 540099, EP 737686, WO 9003169, WO 9637496, WO 9638146, WO 9638449, WO 9700876, US 7104894, JP 57 116015, JP 57 116074, JP 59 005188, JP 60 019790, JP 01 249777, JP 01246287, JP 91 012070 ou dans Canc. Res., 38 (1997) Abst. 1526 ou 95 (San Diego-12-16 avril), Canc. Res., 55 (3), 603-609 (1995) ou AFMC Int. Med. Chem.

Symp. (1997) Abst. PB-55 (Séoul-27 juillet-l août).

L'irinotécan (CPT-11) et ses dérivés sont habituellement préparés à partir de la camptothécine naturelle (US 4604463 ; S. SAWADA et coll., Chem. Pharm. Bull., 39,2574-80 (1991), Chem. Pharm. Bull., 39,1446-54 (1991), Chem. Pharm. Bull., 39,3183-88 (1991) et Ann. N. Y. Acad. Sci., 803,13-28 (1996). Les étapes comportent l'introduction d'une fonction hydroxyle en 9, une alcoylation en 11 et l'introduction du radical en position 9.

Dans la demande de brevet international WO 96/31513 a été décrite la préparation de dérivés de camptothécine et de mappicine par synthèse totale par préparation en premier lieu de l'enchaînement cyclique C-D ou C-D-E.

Tetrahedron, 53 (32), 11049-60 (1997) décrit également les synthèses totales de dérivés de camptothécine dans lesquelles les cycles A-B et D-E sont préparés préalablement, ou selon un autre aspect, les enchaînements C-D-E ou A-B-C.

Il a maintenant été trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention, que la camptothecine ou les dérivés de camptothécine de formule (I) suivante : dans laquelle Rl, R2, R3 représentent chacun un groupe identique ou différent choisi parmi :

# l'hydrogène, 'un groupe hydroxy, 'un atome d'halogène choisi parmi le fluor, le chlore, le brome ou l'iode, les groupes alkoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone linéaire ou ramifié, 'les groupes alkylthio contenant 1 à 4 atomes de carbone linéaire ou ramifié, 'les groupes alkyl (Cl-C4) amino éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes alkyl en C1-C4, # les groupes aralkyles éventuellement substitués par un groupe alkyle en C1-C4, lesdits groupes aryles étant aussi éventuellement des hétérocycles contenant 1 à 3 hétéroatomes choisis parmi l'oxygène le soufre et l'azote 'les groupes arylcarbonyloxy, lesdits groupes aryles étant aussi éventuellement des hétérocycles mono ou polycycliques contenant 1 à 3 hétéroatomes choisis parmi l'oxygène, le soufre et l'azote, pouvaient être obtenus par une synthèse convergente à partir d'un dérivé de la 3-aminométhyl quinoléine et de l'acide 5-hydroxy 5-éthyl 6-oxo 5,6-dihydro pyrane carboxylique avec des résultats particulièrement intéressants.

Les composés préférés et commerciaux synthétisés par le procédé de l'invention sont la camptothécine pour laquelle Rl, R2 et R3 représentent l'hydrogène le topotécan ou Hycamtin@ pour lequel R1 est l'hydrogène, R2 représente un groupe diméthylaminométhyl et R3 un groupe hydroxyl l'irinotécan ou Campto@ pour lequel Ri représente un groupe éthyle, R2 représente un groupe pipéridino piperidino carbonyloxy et R3 un hydrogène.

Le procédé selon l'invention consiste à condenser un dérivé de la 3-aminométhyl quinoléine et de l'acide 5-hydroxy 5-éthyl 6-oxo 5,6-dihydro pyrane carboxylique,

suivi d'une étape d'éthynylation, éventuellement d'une étape d'hydrolyse, d'une double étape de cyclisation, d'une déhydrogénation et d'une étape de déprotection/décarbalkoxylation.

Selon l'invention, l'acide 5-hydroxy 5-éthyl 6-oxo 5,6-dihydro pyrane carboxylique de structure :

dans laquelle G1 représente l'hydrogène ou un groupe protecteur de la fonction hydroxyle notamment choisi parmi les groupes benzyle, para méthoxybenzyle, méthoxyméthyle, terbutyle et trialkylsilyle dont au moins un groupe alkyle a plus de deux atomes de carbone est condensé sur un dérivé de la 3-aminométhyl quinoléine de formule générale :

dans laquelle Ri, R2 et R3 ont la même signification que dans la formule (I) ou représentent des radicaux protégés ou facilement convertibles en radicaux Ri, R2 et R3 cités ci-avant, Y représente un groupe partant notamment choisi parmi les atomes d'halogène, un radical OS02R où R représente un groupe alkyle, tolyl, naphtyl, trifluorométhyl pour obtenir le dérivé de quinoléine de formule générale : dans laquelle Gl, Ri, R2, R3 et Y sont définis comme précédemment.

On préfère parmi les groupements Gl, le groupe benzyle. On préfère parmi les groupes Y les halogènes choisis parmi le brome ou l'iode, parmi les groupes OS02R, letrifluorométhylsulfonate.

La réaction s'effectue généralement selon les méthodes habituelles de condensation des acides sur les amines, notamment par action de l'acide ou d'un dérivé réactif ou activé de l'acide.

Lorsque l'on effectue la condensation d'un dérivé réactif de l'acide de formule générale (II), on opère avantageusement au moyen du chlorure d'acide, de l'anhydride, d'un anhydride mixte ou d'un ester réactif, ou d'un intermédaire acyle ammonium ou pyridinium.

Parmi les conditions réactionnelles on préfère utiliser une température comprise entre -40 et +40°C. Parmi les solvants inertes utilisables, on préfère utiliser un solvant organique tel que notamment un solvant chloré (dichlorométhane, dichloroéthane, chloroforme par exemple). On peut éventuellement opérer en présence d'un accepteur d'acide tel qu'une base organique azotée comme par exemple la pyridine, la diméthylaminopyridine, la N-méthylmorpholine ou une trialcoylamine (notamment triéthylamine, diisopropyléthylamine). Il est également préférable d'opérer en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide, [par exemple dicyclohexyl-carbodiimide ou (diméthylamino-3 propyl)-l éthyl-3 carbodiimide], le N, N'-carbonyl-diimidazole ou l'éthoxy-2 éthoxycarbonyl-1 dihydro-1,2 quinoléine.

De préférence on opère sous argon ou azote.

Il est entendu que, les radicaux amino, alcoylamino ou carboxy contenus dans Rl, R2 et R3 comme la fonction hydroxy portée par le cycle pyrane sont de préférence préalablement protégés. Notamment, on protège selon les méthodes décrites par T. W.

Greene et P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (3ème éd.), A. Wiley- Interscience Publication (1999).

Ensuite le dérivé de quinoléine de formule générale (IV) et l'ortho propiolate de trialkyle (C1-C4 éventuellement substitué) ou le propiolate d'alkyle (C1-C4 éventuellement substitué) sont mis en réaction en présence d'un complexe de palladium [comme par exemple le tris (dibenzylidèneacétone) dipalladium, le chlorure de bis (benzonitrile) palladium ou le dichloro bistriphénylphosphine palladium] et d'iodure de cuivre et d'une base telle qu'une amine tertiaire (trialkylamine) ou d'un carbonate alcalin pour donner le dérivé de quinoléine de formule générale :

dans laquelle R"R2, R3 et G, sont définis comme précédemment, et Alk représente un groupe alkyle en C1-C4, éventuellement substitué par un groupe aryle ou hétéroaryle.

Lorsque la condensation est réalisée en présence d'ortho propiolate de trialkyle (Cl- C4 éventuellement substitué) on réalise après l'étape de condensation une étape d'hydrolyse.

La réaction de condensation s'effectue de préférence dans un solvant organique inerte tel qu'un éther (dioxane par exemple) ou dans un amide tel que l'acétamide ou le diméthylformamide à une température comprise entre 20 et 110°C. De préférence cette température est comprise entre 20 et 80°C et on opère sous argon ou azote.

Le dérivé de la quinoléine de formule générale (V) est ensuite cyclisé par addition d'une base de préférence en présence de DBU (1, 8-diazabicyclo [5,4 0]-7 undecene) ou de DBN (1, 5-diazabicyclo [5,4,0]-5 nonene ou de DABCO (1, 4-diazabicyclo [2,2,2] octane pour donner le dérivé tétracyclique de formule générale (VI) : dans laquelle Alk, Rl, R2, R3 et Gl sont définis comme précédemment.

En ce qui concerne les conditions réactionelles, la réaction est de préférence mise en oeuvre en milieu anhydre, dans un solvant organique inerte tel qu'un solvant aromatique (toluène par exemple), à une température comprise entre-30 et +30°C. De préférence on opère sous argon ou sous azote.

Ce dérivé est soumis ensuite à une cyclisation pour donner 1'ester de la camptothécine protégée et/ou de ses dérivés de formule générale :

dans laquelle RI, R2, R3, Alk et G, sont définis comme précédemment.

La cyclisation est de préférence réalisée par irradiation. L'irradiation est réalisée seule, en présence d'un agent oxydant tel que l'iode ou avec un agent réducteur tel qu'un borohydrure.

L'irradiation est généralement mise en oeuvre dans un solvant organique choisi notamment parmi les solvants aliphatiques halogénés (par exemple dichlorométhane ou chloroforme) dans les deux premiers cas cités ci-dessus ou un alcool (par exemple méthanol) pour le dernier cas cité ci-dessus à une température comprise de préférence entre-30°C et 50°C.

Le dérivé de formule (VII) ci-dessus qui ne possède pas de double liaison ni sur la lactone, ni sur la piperidone et où Alk est un groupe méthyle substitué par un groupe aryle ou hétéroaryle, est ensuite hydrogéné en présence d'un catalyseur de palladium pour donner l'acide qui est transformé en camptothécine et/ou ses dérivés par l'action de palladium et de cymène à haute température, éventuellement suivie d'une déprotection du groupement hydroxyle sur la lactone.

Le dérivé de formule (VII) ci-dessus qui possède une double liaison ou éventuellement aucune sur la piperidone peut être traité par le DDQ (dichlorodicyanobenzoquinone) pour donner le composé de formule (VII) avec les deux doubles liaisons.

Le dérivé de formule générale (VII) possédant deux doubles liaisons sur la lactone et sur le cycle pipéridone est enfin déprotégé et décarbalkoxylé par action de l'acide bromhydrique à une température comprise entre 50 et 140°C pour donner la camptothécine ou ses dérivés de formule générale (I) :

Le dérivé de 3-aminométhyl quinoléine de formule générale (III) dans laquelle Rl, R2, R3 et Y sont définis comme précédemment peut être préparée par réduction du dérivé correspondant de la 3-azidométhyl quinoléine de formule générale :

dans laquelle R1, R2, R3 et Y sont définis comme précédemment.

La réduction est mise en oeuvre par exemple par hydrogénation catalytique en présence d'oxyde de platine en milieu alcoolique (éthanol, méthanol par exemple) à une température comprise entre 0 et 30°C.

Le dérivé de 3-azidométhyl quinoléine de formule générale (VIII) est préparé à partir du dérivé de la 3-méthyl quinoléine de formule générale :

dans laquelle Rl, R2, R3 et Y sont définis comme précédemment, les groupements Y étant identiques ou différents.

La réaction s'effectue généralement par action de l'azoture de sodium dans un solvant organique comme un amide (diméthylformamide par exemple) à une température voisine de 20°C. De préférence on opère sous argon ou sous azote.

L'acide 5-hydroxy 5-éthyl 6-oxo 5,6-dihydropyranecarboxylique de formule (II) est préparé à partir de 1'ester alkylique en Cl-C4 (Alk) de l'acide 2-hydroxy butyrique dont la fonction hydroxyle est protégée, par condensation sur un composé de formule (XI) dans lequel Alk2 représente un groupe alkyl en C1-C4

pour donner le compose de formule (XI) suivante

en présence d'une base forte telle qu'un alkyllithium, le LDA, l'hexaméthyldisilazide alcalin (par exemple lithié) ou le tetramethyl piperidide alcalin (par exemple lithié) dans un solvant inerte (par exemple un éther comme le tétrahydrofurane).

La réaction est notamment maintenue entre-80 et-40°C.

La cyclisation du composé de formule (XI) est notamment effectuée en composé de formule (XII) suivante :

dans laquelle Gl représente un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur de la fonction alcool, en présence d'une base telle qu'un hydroxyde alcalin ou un alcoolate alcalin (par exemple l'hydroxyde de lithium ou l'éthanolate de sodium) dans un solvant inerte tel qu'un éther ou un alcool à une température comprise notamment entre 0 et 40°C. Lorsque la base utilisée est un hydroxyde alcalin la saponification de 1'ester est effectuée simultanément, lorsque la base utilisée est un alcoolate alcalin la saponification de 1'ester est effectuée ultérieurement notamment en présence d'un hydroxyde alcalin. Le composé est enfin dédoublé selon les méthodes connues de l'homme de l'art.

Le composé de formule (X) est préparée selon par exemple le protocole décrit par Ben Ayed, Amri et El Gaied dans Tetrahedron, 1991,47, p. 9621-9628.

Les produits obtenus selon le procédé, camptothécine et ses dérivés peuvent être purifiés selon les méthodes habituelles utilisées par l'homme de métier. Par exemple par chromatographie.

Les dérivés de la camptothécine sont habituellement administrés par voie injectable, plus particulièrement par voie intraveineuse sous forme de solution stérile ou d'une émulsion. Les dérivés de la camptothécine peuvent être également administrés par voie orale, sous forme de compositions solides ou liquides.

Lorsque le dérivé de camptothécine est administré par voie intraveineuse, ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants. L'irinotécan (CPT-11) est notamment administré en solution dans un milieu pour injection intraveineuse, à des doses comprises entre 175 à 500 mg/m2.

A titre d'intermédiaires nouveaux sont revendiqués individuellement les produits de formule III, IV, V, VI, VII, VRAI, XI et XII.

Les exemples suivants donnés à titre non limitatif illustre la présente invention.

Exemples 2-Bromo-quinolin-3-yl-methylazide (IX) :

A un mélange de 803 mg (2.67 mMoles) de dibromure et de 11 ml de DMF est additionné sous atmosphère d'argon 1.363 g (21 mMoles) de NaN3. Le mélange est agité durant 12 heures à température ambiante et ensuite hydrolyse avec une solution aqueuse saturée de NaCl.

La phase aqueuse est extraite au CH2Cl2 et les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec de l'eau. Après séchage sur Na2SO4 et évaporation sous pression réduite la chromatographie sur gel de silice (éluant : pentane/Et2O 10 %-15 %) permet d'obtenir 597 mg (2.27 mMoles, 85 %) de produit (IX) sous forme d'un solide blanchâtre.

IR (CH2Cl2) : v = 2104 (N3) cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDCl3) : 6 = 4.60 (s, 2H, CH2), 7.55 (ddd, 1H, H aromat., 3J= 7. 9,7.0 Hz, 4J= 1.4 Hz), 7.68 (ddd, 1H, H aromat., 3J= 8.2,7.0 Hz, 4J= 1.4 Hz), 7.78 (dd, 1H, H aromat., 3J= 7.9 Hz, 4J= 1.4 Hz), 7.99 (dd, 1H, H aromat., 3J= 8.2 Hz, 4J = 1.4 Hz), 8.06 (s, 1H, H aromat.).

RMN"C (200 MHz, CDCl3) : 8 = 53.7 (CH2), 127.0 (C), 127.5 (CH), 127.6 (CH), 128.3 (CH), 129.4 (C), 130.7 (CH), 136.8 (CH), 142.2 (C), 147.7 (C).

SM (EI, haute résolution) : Calculée : 261.9854 Trouvée : 261.9860 Point de fusion : 54-56°C Analyse élémentaire : Calculée : C 45.65 %, H 2.68 %, N 21.30 % Trouvée : C 45.75 %, H 2.70 %, N 20.96 % C- (2-Bromo-quinolin-3-yl)-methylamine (HI) : A une solution de 1.015 g (3.86 mMoles) de produit (IX) dans 110 ml d'éthanol est ajouté sous atmosphère d'argon 30 mg (0.13 mMole, 3 %) de PtO2. Le milieu réactionnel est mis sous atmosphère d'hydrogène et l'agitation est maintenue pendant 2 heures à température ambiante. Après filtration sur célite et évaporation sous

pression réduite, on obtient 863 mg (3.64 mMoles, 99 %) d'un solide légèrement jaune. Le résidu est utilisé directement pour la réaction suivante.

IR (KBr) : v = 3338 (NH), 1614 (C=C), 1586,1556 cm-1 RMN'H (200 MHz, DMSO) : 6 = 3.92 (s, 2H, CH2), 7.70 (m, 2H, H aromat.), 7.98 (m, 2H, H aromat.), 8.43 (s, 1H, H aromat.).

RMN 13c (200 MHz, DMSO) : 6 = 44.9 (CH2), 127.3 (CH), 127.5 (CH), 127.8 (CH), 129.9 (CH), 135.9 (CH), 137.0 (C), 143.3 (C), 146.5 (C).

SM (EI, haute résolution) : Calculée : 235.9949 Trouvée : 235.9954 Point de fusion : 131°C Ester éthylique 2-hydroxymethyl-acrylic acid (XI) :

Le produit (XIV) est préparé à partir de 18.5 g (82.2 mMoles) de triéthyl phosphono- acétate, de 30 ml d'une solution aqueuse 37 % de formaldéhyde et de 19.5 g de carbonate de potassium dissous dans 20 ml d'eau selon le protocole de Villiéras et collaborateurs [J. Villiéras, M. Rambaud, Synthesis, 1982,924]. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/Et2O 10-100 %) permet d'obtenir 6.2 g (47.7 mMoles, 58 %) de produit attendu. Les données spectroscopiques correspondent à celles décrites dans la référence.

Ester éthylique de 2-acetoxymethyl-acrylic acid (XV) :

Le produit est préparé à partir de 2.0 g (15.4 mMoles) de produit (XIV), 9.3 ml de diéthyléther, 5.83 ml (6.3 g, 62 mMoles) d'acide anhydride et une goutte d'acide sulfurique concentré selon le protocole d'Amri et collaborateurs [H. Amri, M.

Rambaud et J. Villiéras, J Org. Chem., 1990,384,1-11.]. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/Et2O 10 %) permet d'obtenir 2.4 g (12.8 mMoles, 83 %) de produit.

IR (Film) : v = 1750 (C=O), 1727 (C=O), 1647 (C=C), 1233 (Ac) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 1.24 (t, 3H, CH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 2.04 (s, 3H, C=OCH3), 4.18 (q, 2H, CH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 4.74 (s, 2H, CH2C=C), 5.77 (m, 1H, C=CH), 6.29 (m, 1H, C=CH).

Ester éthylique de 2-acetoxymethyl-2,3-dibromo-propionic acid (XVI)

Le produit ci-dessus est préparé à partir de 1.0 g (5.8 mMoles) de produit (XV), 15 ml de tétrachlorométhane et 0.31 ml (0.967 g, 6.04 mMoles) de brome selon le protocole d'Amri et collaborateurs [T. Ben Ayed, H. Amri, M. M. El Gaied, Tetrahedron, 1991,47,9621-9628]. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/EtO 10 %) permet d'obtenir 1.6 g (4.82 mMoles, 83 %) de produit attendu.

En utilisant du CH2Cl2 comme solvant, on atteint un rendement de 94 %.

IR (Film) : v = 2991,2941,2907,2876,1749 (C=O), 1620 (C=C), 1225 (Ac) cm-'.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 6 = 1.32 (t, 3H, CH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 2.12 (s, 3H, C=OCH3), 3.99 (ABq, 2H, CH2Br, 8a-8b = 0. 176, aa = 4.08, #b = 3. 90, JAB = 10.28 Hz), 4.31 (q, 2H, CH2CH3, 3J= 7.2 Hz), 4.65 (ABq, 2H, CHO-COCH3= 0.131,5a = 4.53, #b = 4. 40, JAB AB = 12. 7 Hz).

RMN 13C (200 MHz, CDC13) : 8 = 14.8 (CH3), 21.6 (CH3), 34.0 (CH2), 57.5 (C), 63.9 (CH2), 65.7 (CH2), 167.6 (C=O), 170.8 (C=O).

Ester éthylique de (E)-2-acetoxymethyl-3-bromo-acrylic acid (XI):

Le produit (XI) est préparé à partir de 10.0 g (30 mMoles) de produit de formule (XVI) obtenu à l'étape précédente, 13.4 g (45 mMoles) de fluorure de tétrabutylammonium et de 20 ml d'HMPA selon le protocole d'Amri et collaborateurs [T. Ben Ayed, H. Amri, M. M. El Gaied, Tetrahedron., 1991,47,9621-9628]. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/Et2O 10 %) permet d'obtenir 4.14 g (16.5 mMoles, 55 %) de produit attendu.

IR (Film) : v = 1747 (C=O), 1722 (C=O), 1616 (C=C), 1227 (Ac) cm' 1 RMN 1H (200 MHz, CDCl3) : 8 = 1.25 (t, 3H, CH2CH, 3J= 7.2 Hz), 2.00 (s, 3H, COCH3), 4.19 (q, 2H, CH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 4.90 (s, 2H, CH2C=C), 7.75 (s, 1H, C=CH) Acide2-benzyloxy-butyrique

A un mélange de 12 g (300 mMoles) de NaH dans 300 ml de THF sont ajoutés 9 ml (9.72 g, 90 mMoles) d'alcool benzylique et 10.02 g (60 mMoles) d'acide a-bromobutyrique (191). L'agitation est maintenue pendant 30 minutes à température ambiante et la suspension est ensuite portée à 50°C durant 15 heures. Le mélange est versé sur de la glace et extrait avec Et2O. La phase éthérée est lavée avec un mélange d'eau et un peu de NaHCO3 solide. Les phases aqueuses réunies sont acidifies avec HC1 aqueux (5 %) et extraites à l'Et2O. Après séchage sur Na2SO4, on évapore le solvant sous pression réduite. On obtient 12 g de produit brut qui est utilisé sans purification pour la réaction suivante et qui contient encore un peu d'acide a-bromobutyrique.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 1. 0 (t, 3H, CHCH2CH3, 3J = 7.54 Hz), 1.87 (m, 2H, CHCH2CH3), 3.95 (m, 1H, CHCH2CH3), 4.60 (Abq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 11. 3 Hz, 5.

4.71, #b = 4. 49, #a-#b = 0.22), 7.34 (m, 5H, H aromatique) Ester méthylique de l'acide 2-benzyloxy-butyrique :

Le brut de 2-benzyloxy-butyric acid (12 g) est dissous dans de l'Et2O et le diazométhane dans l'éther est ensuite ajouté goutte à goutte jusqu'à la persistance de la couleur jaune. Après addition de l'acide acétique, la solution est lavée avec de 1'eau, séchée sur Na2SO4 et évaporée sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/Et2O 10 %) permet d'isoler 5.9 g

(28.5 mMole, 48 % sur 2 étapes) de produit attendu. Les données des spectres correspondent à celles décrites dans la référence [K. Horita, T. Inoue, K. Tanaka et O.

Yonemitsu, Tetrahedron, 1996,52,531-550.].

Le produit peut être synthétisé selon le protocole de Satoh et collaborateurs [H.

Iwamura, Y. Imahashi, K. Kushida, K. Aoki et S. Satoh, Bull. Chem. Soc. Jpn., (1976), 49, 1690-1696].

Ester éthylique de l'acide 2-benzyloxy-butyrique :

A une solution de 12 g de 2-benzyloxy-butyric acid de brut dans 50 ml d'éthanol sec est ajouté sous atmosphère d'argon, 1 ml de H2SO4 concentré suivi par du tamis moléculaire flambé. Le mélange est porté à reflux et l'agitation est maintenue durant 18 heures. La suspension est ensuite filtrée sur fritte, diluée avec 100 ml d'acétate d'éthyle et lavée 3 fois avec une solution aqueuse saturée en NaCl. La phase organique est séchée sur Na2SO4, évaporée sous pression réduite et purifiée par chromatographie sur gel de silice (éluant : Pentane/Et2O 10 %). On obtient 7.5 g (33. 8 mMoles, 56 % sur 2 étapes) de produit.

IR (Film) : v = 1746 (C=O) cm-'.

RMN 1H (200 MHz, CDCl3) : 5 = 0.97 (t, 3H, CHCH2CH, 3J= 7.2 Hz), 1.28 (t, 3H, OCH2CH3, 3J = 7.2 Hz), 1.79 (m, 2H, CHCH2CH3), 3.86 (m, 1H, CHCH2CH3), 4.20 (m, 2H, OCH2CH3), 4.55 (ABq, 2H, PhCH, 2JAB = 12 Hz, #a = 4.70, #b = 4.41, #a-#b = 0.29), 7.32 (m, 5H, H aromat.).

RMN 13C (200 MHz, CDCl3) : 8 = 9.6 (CH3), 14.2 (CH3), 26.1 (CH2), 60.6 (CH2), 72.1 (CH2), 79.2 (CH), 127.7 (CH), 127.9 (CH), 128.2 (CH), 137.6 (C), 172.7 (C).

SM (DCI, NH3+isobutane, 90 eV), m/z (%) : 240 (79) [M+NH4], 223 (100) [M++H].

Ester 5-méthylique et 1-éthylique d'e l'acide (E)-2-acetoxymethyl-4-benzyloxy-4- ethyl-pent-2-enedioique (XII) :

A une solution de 0.72 ml (556 mg, 5.50 mMole) de diisopropylamine dans 10 ml de THF est ajouté 2.16 ml (4.95 mMole, 2.3 M dans l'hexane) de n-BuLi à-30°C. La température du mélange est laissée remonter à 0°C et l'agitation est maintenue pendant 15 minutes. Le milieu réactionnel est ensuite refroidi à -80°C et on ajoute 936 mg (4.5 mMole) d'ester méthylique de l'acide 2-benzyloxybutyrique dissous dans 4 ml de THF. Après 15 minutes on additionne 1.13 g (4.5 mMole) d'acrylate de bromure dissous dans 6 ml de THF et l'agitation est maintenue durant une nuit à -80°C. On laisse remonter la température à -40°C et la réaction est hydrolysée avec de l'eau. Après extraction à l'Et2O et séchage sur Na2SO4, on évapore sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : pentane/Et2O 30 %) permet d'obtenir 1.17 g (3.10 mMole, 69 %) de produit huileux.

IR (Film) : v = 1740 (C=O), 1722 (C=O), 1657 (C=C), 1236 (Ac) cm''.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 0.90 (CCH2CH3, 3J = 7. 54 Hz), 1.27 (t, 3H, OCH2CH3, 3J = 7.2 Hz), 1.83 (s, 3H, (C=O) CH3), 2.04 (m, 2h, cch2ch3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 4.22 (q, 2H, OCH2CH3, 3J= 7.2 Hz), 4.40 (ABq, 2H, PhCH2, 2JAB = 10.6 Hz, 8a= 4.42, #b = 4. 38, #a - #b = 0, 05), 5.03 (s, 2H, CH20 (C=O) CH3), 7.28 (m, 6H, H aromat. + C=OC=CH).

RMN 13C (200 MHz, CDC13) : 8 = 7.9 (CH3), 14.1 (CH3), 20.5 (CH3), 33.1 (CH2), 52.6 (CH3), 58.0 (CH2), 61.2 (CH2), 67.2 (CH2) 83.6 (C), 127.1 (CH), 127.5 (CH), 127.5 (CH), 128.0 (CH), 128.3 (CH), 131.2 (C), 137.6 (C), 143.3 (CH), 165.9 (C=O), 170.2 (C=O).

SM (haute résoluton, FAB+) : Calculée : 379.1757 (M+ + H) Trouvée : 379.1783 Ester diéthylique de l'acide (E)-2-acetoxymethyl-4-benzyloxy-4-ethyl-pent-2- enedioique (XII) :

A une solution de 1.65 ml (1.27 g, 12. 60 mMole) de diisopropylamine dans 20 ml de THF est ajouté 5.0 ml (11.5 mMole, 2.3 M dans l'hexane) de n-BuLi à-30°C. La température du mélange est laissée remonter à 0°C et l'agitation est maintenue pendant 15 minutes. Le milieu réactionnel est ensuite refroidi à -80°C et on ajoute 2.32 g (10.43 mMole) d'ester éthylique de l'acide 2-benzyloxybutyrique dissous dans 9 ml de THF. Après 30 minutes on additionne 2.62 g (10.43 mMole) d'acrylate de bromure dissous dans 13 ml de THF et maintient l'agitation durant une nuit à-80°C.

On laisse remonter la température à -40°C et la réaction est hydrolysée avec de 1'eau.

Après extraction à l'Et2O et séchage sur Na2SO4, on évapore sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : pentane/Et2O 20 %) permet d'obtenir 2.33 g (5.94 mMole, 57 %) de produit huileux.

IR (Film) : v = 1738 (C=O), 1656 (C=C), 1232 (Ac) cm-'.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 6 = 0.91 (CCH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 1.29 (m, 6H, 2.

OCH2CH3), 1.84 (s, 3H, (C=O) CH3), 2.05 (m, 2H, CCH2CH3), 4.24 (m, 4H, 2 OCH2CH3), 4.41 (ABq, 2H, PhCH2, 2JAB = 01. 96 Hz, #a = 4. 43, #b = 4. 39,8a-86 = 0.04), 5.04 (s, 2H, CH20 (C=O) CH3), 7.29 (m, 6H, H aromat. + C=OC=CH).

RMN 13C (200 MHz, CDC13) : 8 = 8. 0 (CH3), 14.2 (CH3), 20.6 (CH3), 32.2 (CH2), 58.1 (CH2), 61.2 (CH2), 61.8 (CH2), 67.2 (CH2), 83. 6 (C), 127.2 (CH), 127.5 (CH), 128.3 (CH), 131. 1 (C), 143.5 (CH), 166.0 (C=O), 171.4 (C=O).

SM (haute résolution, FAB+) : calculée : 399.1995 (M"+ Li) trouvée : 399. 1995 Ester éthylique de l'acide 5-benzyloxy-5-ethyl-6-oxo-5,6-dihydro-2H-pyran-3- carboxylique (XIII) :

A une solution de 1.19 g (3.16 mMoles) de (E)-2-acetoxymethyl-4-benzyloxy-4- ethyl-pent-2-enedioic acid 1-ethyl ester 5-methyl ester dissous dans 30 ml d'éthanol est ajouté 1.26 ml (1.26 mMole, 40 mol %, 1 M dans l'éthanol) d'éthanolate de sodium à température ambiante. L'agitation est maintenue pendant 3 heures et le mélange est hydrolyse avec de l'eau. On extrait à l'Et2O, les phases éthérées réunies sont séchées sur Na2SO4 et concentrées sous pression réduite. La chromatographie sur gel de silice (éluant : pentane/Et2O 30 %) permet d'obtenir 737 mg (2.42 mMole, 77 %) de produit attendu.

IR (Film) : v = 3089,3066,3030,2985,2939,2880,1754 (C=O), 1721 (C=O), 1675 (C=C) cm\ RMN IH (200 MHz, CDCl3) : 8 = 0.96 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7, 54 Hz), 1.32 (t@, 3H, OCH2CH3, 3J=7.2 Hz), 1.93 (m, 2H, CCH2CH3), 4.26 (q, 2H, OCH2CH3, 3J=7.2 Hz), 4.43 (ABq, 2H, PhCH2, 2JAB = 10. 6 Hz, #a = 4.48, #b = 4.38, #a - #b = 0.10), 5. 09 (AB du ABX, 2H, CH2 C=C), #a = 5.17, #b = 5. 01, #a - #b = 0.17, 2JAB = 17. 3 Hz, JAX = 1 Hz, 4JBX = 2 Hz), 6.94 (X du ABX, 1H, (C=O) C=CH, 4Jx = 1 Hz, 4JBX = 2 Hz), 7.31 (m, 5H, H aromat.).

RMN 13C (200 MHz, CDCl3) : 8 = 7.7 (CH3), 14.0 (CH3), 31.9 (CH2), 61.6 (CH2), 67.4 (CH2), 68.5 (CH2), 76.6 (CH2), 127.8 (CH), 128.3 (CH), 129.5 (C), 137.4 (C), 138. 8 (CH), 162.5 (C=O), 169.0 (C=O).

SM (DCI, NH3+isobutane, 90 eV), tnlz (%) : 322 (100) [M++NH4], 305 (29) [M++H], 214 (25) [M++H-CH2C6H5].

SM (FAB+, haute résolution) : Calculée : 305.1389 (MF + H) Trouvée : 305.1409 Acide 5-benzyloxy-5-éthyl-6-oxo-5, 6-dihydro-2H-pyran-3-carboxylique :

Méthode A : Une solution de 1.45 g (4.77 mMole) du produit précédent de formule (XIII) et 1.26 mg (53 mMoles, 11 équiv.) d'hydroxyde de lithium dans 100 ml de THF/H2O (80/20) est mise sous agitation à température ambiante durant 1 nuit. Le THF est enlevé sous pression réduite et le résidu est extrait au diéthyl éther. La phase aqueuse est ensuite acidifiée à pH 4 avec une solution aqueuse IN d'HCl. Après extraction au CH2Cl2 (3 fois), séchage sur Na2SO4 et évaporation sous pression réduite, on obtient 1.28 g (4.64 mMole, 97 %) de produit. Il est assez pur pour être utilisé directement pour la réaction suivante.

Méthode : Une solution de 800 mg (2.04 mMoles) du produit précédent de formule (XIII) et 540 mg (22.4 mMoles, 11 équiv.) d'hydroxyde de lithium dans 64 ml de THF/H2O (80/20) est mise sous agitation à température ambiante durant 1 nuit. Le THF est enlevé sous pression réduite et la phase aqueuse est extraite au diéthyl éther. On acidifie ensuite la phase aqueuse à pH 4 avec une solution aqueuse IN d'HCl. Après extraction au CH2CI2 (3 fois), séchage sur Na2SO4 et évaporation sous pression réduite, on obtient 405 mg (1.47 mMole, 72 %) de produit. Il est assez pur pour être utilisé directement pour la réaction suivante.

IR (Film) : v = 3437 (OH), 1728 (C=O) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDCl3) : 6 = 0.99 (t, 3H, CCH2CH3, 3J= 7.54 Hz), 1.96 (m, 2H, CCH2CH3), 4.45 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10. 62 Hz, 5. = 4.51, ab = 4. 39, #a - #b = 0.12), 5.10 (AB du ABX, 2H, CH2OC=O, 2JAB = 17. 48 Hz, 4JAX = 1.04 Hz, 4JBX = 2. 06 Hz, 8, =5. 18,8b = 5.02, ba-ab = 0. 16), 7.11 (X du ABX, 1H, (C=O) C=CH, 4JAX = 1.04 Hz), 7.31 (m, 5H, H aromat.phenyl), 10.91 (s, 1H, CO2H).

RMN"C (200 MHz, CDC13) : 8 = 7.6 (CH3), 31.8 (CH2), 67.1 (CH2), 68.7 9CH2) 77.6 (C), 127.8 (CH), 127.9 (CH), 128.3 (CH), 128.7 (C), 137.1 (C), 141.6 (CH), 167.1 (C=O), 169.1 (C=O).

SM (DCI, NH3+Isobutane, 90eV), m/z(%): 294 (100) [M++NH3], 277 (12) [M++H].

SM (FAB+, haute résolution) : Calculée : 277.1076 (M+ + H) Trouvée : 277.1063 Analyse élémentaire : Calculée : C : 65.21 H : 5.84 Trouvée : C : 65.26 H : 5.75 Point de fusion : 134°C Amide 2-bromoquinolin-3-yl méthylique de l'acide 5-benzyloxy-5-ethyl-6-oxo-5,6- dihydro-2H-pyran-3-carboxylique (IV) : A une solution de 401 mg (1.69 mmoles) duproduit (III) dissous dans 4 ml de CH2CI2 sont ajoutés sous atmosphère d'argon 17 mg (0. 14 4 mMole, 9 %) de DMAP. Le mélange est refroidi à 0°C et 351 mg (1.70 mMoles) de DCC sont additionnés. On ajoute ensuite 426 mg (1.54 mMoles) d'acide obtenu à l'étape précédente dissous dans 12 ml de CH2Cl2. L'agitation est maintenue pendant 3 jours à température ambiante. A la fin de la réaction, le mélange est dilué avec de l'Et2O, puis filtré sur célite et concentré sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 20 %) permet d'obtenir 714 mg (1.44 mMoles, 94 %) d'un solide blanchâtre.

IR (Film) : v = 3351 (NH), 1748 (C=O), 1685 (NHCO), 1647 (C=C) cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDCl3) : 6 = 0.90 (t, 3H, CCH2CH3, 3J= 7.54 Hz), 1.88 (m, 2H, CCH2CH3), 4.41 (ABq, 2H, PhCH2, 2JAB = 11. 32 Hz, #a = 4.49, #b = 4. #a - #b = 0.17), 4.60 (d, 2H, CH2N, 3J= 5.82 Hz), 5.09 (AB du ABX, 2H, CH2O(C=O), 2JAB = 17.12 Hz, JAX = 1. 04 Hz, JBX = 2.06 Hz, #a = 5.16, bb = 5.02,6a-5b bb= 0. 14), 6.41 (X de l'ABX, 1H, C=CH), 6.77 (t, 1H, NH, 3J= 5.48 Hz), 7.23 (m, 5H, H aromat. Phenyl) 7.54 (m, 1H, H aromat. quino), 7. 71 (m, 2H, H aromat. quino), 7.95 (m, 1H, H aromat.

Quino) 8. 07 (s, 1H, H aromat. quino).

RMN 13C (200 MHz, CDCl3) : 8 = 7.7 (CH3), 31.9 (CH2), 43.3 (CH2), 67.8 (CH2), 68. 5 (CH2), 76.4 (C), 127.1 (C), 127.6 (CH), 127.7 (CH), 127.8 (CH), 128.2 (CH),

128.4 (CH), 130.5 (C), 130.8 (CH), 132.1 (CH), 132.7 (C), 137.7 (C), 138.6 (CH), 139.1 (CH), 147.1 (C), 147.7 (C), 163.4 (C=O), 169.2 (C=O).

SM (eV), m/z (%) : 497 (40) EM+H], 495 (33) [M++H] (27% de 13C), 451 (12) Lt- CO2], 126 (100).

Analyse élémentaire : C25H23N204Br : Calculée : C 60. 62 %, H 4. 68 %, N 5. 66 % Trouvée : C 60. 43 %, H 4. 70 %, N 5. 74 % 1,1,1-triethoxy-3-trimethylsilylpropyne TMS-C (OEt) 3 Le 1, 1, 1-triéthoxy-3-triméthylsilylpropyne est obtenu à partir de 3.84 g (20 mMoles) de tétraéthyl orthocarbonate dans 20 ml de diéthyl éther, 2.84 g (20 mMoles) borotrifluoride éthérate dans 20 ml de diéthyl éther, 1.96 g (20 mMoles) de triméthylsilylacétylène et 8. 7 ml (21 mMoles) de n-butyllithium (solution 2.4 M dans l'hexane) dans 22 ml de diéthyl éther selon le protocole de Boche et collaborateurs [G.

Boche, J. Bigalke, Tetrahedron. Lett., (1984), 25, 955] avec un rendement de 74 % (3.17 g, 14.8 moles). Les données spectroscopiques correspondent à celles citées dans la référence.

3,3,3-triethoxy-1-propyne #-C(OEt)3 A une solution de 3.0 g (12. 30 mMole) de 1, 1, 1-triéthoxy-3-triméthylsilylpropyne dans 180 ml de méthanol sont ajoutés 1.68 g de carbonate de potassium à température ambiante. Après 1 nuit, 240 ml de pentane sont ajoutés et la phase de méthanol est décantée et extraite 2 fois au pentane. Les phases pentaniques sont lavées avec de 1'eau jusqu'à pH 7. Le séchage sur Na2SO4, l'évaporation sous pression réduite et le filtrage rapide sur gel de silice (éluant : pentane/Et2O 10 %) permet d'obtenir 1.4 g (8. 14 mMoles, 66 %) de produit.

Le spectre'H RMN correspond à celui fourni par J. C. Shattuck (voir J. C. Shattuck, A. Svatos, C. M. Blazey, J. Meinwald, Tetrahedron Lett., 38, (1997), 6803-6806).

Amide (2-triéthoxyprop-1-ynyl-quinolin-3-yl-méthylique de l'acide 5-benzyloxy-5- ethyl-6-oxo-5, 6-dihydro-2H-pyran-3-carboxylique (V) :

260 mg (0.52 mMole) du produit de formule (IV), 15 mg (0.079 mMole, 15 mol %) de Cul, 18 mg (0.026 mMole, 5 mol %) de PdCl2 (PPh3) 2 sont dissous sous atmosphère d'argon dans 3.3 ml de DMF et 2.2 ml de NEt3. Après 5 minutes d'agitation, 109 mg (0.64 mMole, 1.2 équiv.) de 3,3,3-triéthoxy-1-propyne sont ajoutés. Le mélange est chauffé dans un ballon scellé à 80°C pendant 3 heures. Après hydrolyse avec de 1'eau, extraction à l'Et2O, les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec de 1'eau et une fois avec une solution saturée en NaCl. On sèche sur Na2SO4 et élimine ensuite le solvant sous pression réduite. La purification sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 20 %) permet d'obtenir 240 mg (0.41 mMole, 79 %) d'un solide.

IR (Film) : v = 3372 (NH), 2235 (C#C), 1746 (C=O), 1683 (NHCO), 1652 (C=C), 1204-1032 (orthoester) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDCl3) : 8 = 0.90 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7. 54 Hz), 1.22 (t, 9H, 3 -OCH2CH 3J = 7.2 Hz), 1.67 (m, 2H, CCH2CH3), 3.77 (q, 6H, 3#OCH2CH3, 3J = 7.2 Hz), 4.39 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10.98 Hz, 8, = 4.41, ab = 4.37, #a - #b = 0.046), 4.69 (d, 2H, CH2N, 3J= 6.16 Hz), 5.09 (AB de 1'ABX, 2H, CH20C=O, 2JAB = 17.14 Hz, 4JAX = 1. 02 Hz, 4JBX = 2.06 Hz, #a =5.18,8b = 5. 00, ba-bb = 0.18), 6.49 (X du ABX, 1H, (C=O) C=CH), 7.22 (m, 6H, 5-H aromat. phenyl + NH), 7. 53 (m, 1H, H aromat. Quin.), 7.72 (m, 2H, H aromat. Quino) 8.04 (m, 1H, H aromat. Quinto), 8. 17 (s, 1H, H aromat. Quino).

RMN"C (200 MHz, CDC13) : 8 = 7.7 (CH3), 14.9 (CH3), 31.9 (CH2), 42.0 (CH2), 59.5 (CH2), 67.8 (CH2), 68.3 (CH2), 88.4 (C), 109.2 (C), 127.3 (C), 127.7 (C), 127.7 (C), 128.0 (CH), 128.3 (CH), 129.0 (CH), 130.4 (CH), 132.2 (CH), 132.5 (C), 132.7 (C), 136.7 (CH), 137.4 (C), 141.5 (C), 147.3 (C), 163.1 (C=O), 169.1 (C=O).

SM (haute rsoltuion, FAB+) : calculée : 587. 2757 (Mr + H) trouvée : 587.2786 Ester éthylique de l'acide [3-({[1-(5-Benzyloxy-5-ehtyl-6-xo-5,6-dihydro-2H-pyran- 3-yl)-methanoyl]-amino}-methyl)-quinolin-2-yl]-propionique :

A une solution de 528 mg (0.90 mMole) de produit (V) obtenu à l'étape précédente dissous dans 17 ml d'éthanol et 3.5 ml d'eau est ajouté un cristal d'APTS. L'agitation est maintenue à température ambiante pendant 3 heures. Le mélange est ensuite dilué avec de 1'eau et extrait au CH2Cl2. Après séchage des phases organiques réunies sur Na2SO4, on évapore le solvant sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 20 %) permet d'obtenir 455 mg (0.89 mMole, 99 %) de produit.

IR (Film) : v = 3359 (NH), 1752 (C=O), 1711 (C=O), 1687 (NHCO), 1649 (C=C) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 0.91 (t, 3H, CCH2CH3, 3J=7. 54 Hz), @1. 26 (t, 3H, OCH2CH3, 3J = 7.2 Hz), 1.90 (m, 2H, CCH2CH3), 4.17 (q, 2H, OCH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 4.40 (ABq, 2H, CH2Ph, 3JAB = 10.96 Hz, ba= 4.45, ab = 4.35, #a - #b = 0.09), 4.72 (d, 2H, CH2N, 3J= 6.16 Hz), 5.14 (AB du ABX, 2H, CH2OC=O, 2JAB = 17.3 Hz, 4JBX = 2.04 Hz, #a = 5.22, #b = 5.06,8a-8b= 0.16), 6.59 (s, 1H, (C=O) C=CH), 7.22 (m, 6H, 5-H aromat. phenyl + NH), 7. 56 (m, 1H, H aromat. Quino), 7.71 (m, 2H, H aromat. Quino) 7.98 (m, 1H, H aromat. Qu no), 8.19 (s, 1H, H aromat. Quino).

RMN13C (200 MHz, CDC13) : 8 = 7.6 (CH3), 13.9 (CH3), 31.9 (CH2), 41.3 (CH2), 62.8 (CH2), 67.9 (CH2), 68.3 (CH2), 82.7 (C), 83.1 (C), 127.6 (CH), 127.7 (CH), 128.2 (CH), 128.8 (CH), 129.0 (CH), 130.7 (CH), 132.3 (CH), 132.8 (C), 133.1 (C), 137.0 (CH), 137.6 (C), 139.9 (C), 147.3 (C=O), 153.3 (C=O), 163.5 (C=O).

SM (FAB, haute résolution) : Calculée : 513. 2025 (M++H) Trouvée : 513.2043 Analyse élémentaire : C28H28N206 : Calculée : C 70.30 %, H 5.51 %, N 5.47 % Trouvée : C 70. 16 %, H 5. 65 %, N 5. 28 % Point de fusion : 68°C Ester éthylique de l'acide {2-fl-(5-benzyloxy-5-ethyl-6-oxo-5,6-dihydro-2-pyran-3- yl)-methanoyll-1, 2-dihydro-pyrrolo[3, 4-b]quinolin-3-ylidene}-acetique (VI) :

A une solution de 1.703 g (3.33 mMole) de produit obtenu à l'étape précédente dans 40 ml de toluène est additionné sous atmosphère d'argon 362 mg (0.353 ml, 2.33 mMole, 0.7 éq.) de DBU. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes. Le mélange est ensuite hydrolyse avec de 1'eau et extrait au CH2C12. Les phases organiques réunies sont lavées avec de 1'eau, séchées sur NaSO4 et évaporées sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 10 %) permet d'obtenir 1.42 g (2.77 mMole, 83 %) de produit dont les isomères A et B sont en mélange 1 : 1. Les isomères, séparés par : A IR (Film) : v = 1753 (C=O), 1699 (C=O), 1644 (C=C) cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDC13) : 5 = 0.94 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7.54 Hz), 1.23 (t, 3H, OCH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 1.83 (m, 2H, CCH2CH3), 4.15 (q, 2H, OCH Hz), 4. 39 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10. 64 Hz, #a = 4. 46, #b = 4.32, #a - #b = 0. 14), 5.10 (s, 2H, CH2N), 5. 31 (AB du ABX, 2H, CH2OC=O, 2JAB = 16. 12 Hz, 4JBX = 2.06 Hz, 8a =5.38,8b = 5.24, #a - #b = 0. 15), 6.19 (X du ABX, 1H, (C=O) C=CH, 4JBX = 2.06 Hz), 6.59 (s, 1H, NC=CH), 7.29 (m, 5H, H aromat. phenylO 7. 62 (m, 1H, H aromat. Quino), 7.82 (m, 2H, H aromat. Quino), 8. 17 (m, 1H, H aromat. Quino) 8. 21 (s, 1H, H aromat. Quino).

RMN 13C (300 MHz, CDCl3) : 8 = 8.2 (CH3), 14.6 (CH3), 31.5 (CH2), 53.2 (CH2), 61. 0 (CH2), 67.5 (CH2), 68.8 (CH2), 77.1 (C), 96.8 (CH), 127.8 (C), 128.0 (CH), 128.3 (CH), 128.6 (CH), 129.2 (C), 130.2 (CH), 130.8 (CH), 130.8 (CH), 131.8 (CH), 132.6 (C), 138.0 (C), 149.0 (C), 149.1 (C), 154.3 (C), 167.3 (C=O), 167.8 (C=O), 169.7 (C=O).

B IR (Film) : v = 1749 (C=O), 1714 (C=O), 1663 (C=C), 1634 (C=C) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 1.06 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7.54 Hz), 1.35 (t, 3H, 3, 3J = 7.2 Hz), 2.03 (m, 2H, CCH2CH3), 4.44 (q, 2H, OCH2CH3, 3J = 7. 2 Hz), 4.56 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10.98 Hz, 8a = 4.64, #b = 4.48, #a - #b = 0. 159),

4.97 (ABq, 2H, CH2OC=O, 2JAB = 15.4 Hz, #a=5. 01, ab = 4.93, #a - #b = 0. 083), 5.14 (s, 2H, CH2N), 6.35 (s, 1H, (C=O) C=CH), 7.11 (s, 1H, NC=CH), 7.32 (m, 5H, H aromat. phenyl), 7. 54 (m, 1H, H aromat. Quino), 7. 69 (m, 2H, H aromat. Quino), 7.96 (m, 1H, H aromat. Quino) 8.15 (s, 1H, H aromat. quino).

RMN 13C (200 MHz, CDCl3) : 8 = 7.9 (CH3), 14.2 (CH3), 31.6 (CH2), 52.6 (CH2), 61.1 (CH2), 67.9 (CH2), 68.5 (CH2), 76.6 (C), 105.7 (CH), 126.4 (C), 127.5 (CH), 127.6 (CH), 127.7 (CH), 127.8 (CH), 128.4 (CH), 129.7 (CH), 129.8 (CH), 130.0 (CH), 131.4 (CH), 133.8 (C), 137.6 (C), 148.2 (C), 152.0 (C), 165.1 (C=O), 167.4 (C=O), 169.0 (C=O).

SM (FAB+, haute résolution A+B) : Calculée : 513.2025 (M+ + H) Trouvée : 513.2006 Ester éthylique de l'acide 4-benzyloxy-4-ethyl-3, 13-dioxo-3,4,12,13,-tetrahydro-lH- 2-oxa-6, 12a-diaza-diaza-dibenzo[6, hlfluorene-5-carboxylique : Une solution de 103 mg (0.2 mMole) de mélange d'isomères de produit (VI) et 26 mg (0.1 mMole) d'iode dans 100 ml de CH2Cl2 est irradiée pendant 41 minutes dans un réacteur avec un filtre en pyrex. La phase organique est lavée avec une solution saturée en thiosulfate de sodium et séchée sur Na2SO4. Le solvant est ensuite enlevé sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 30 %). On obtient 30 mg (0.059 mMole, 30 %) de produit jaunâtre.

IR (Film) : v = 1748 (C=O), 1725 (C=O), 1662 (C=C), 1629 (C=C) cm''.

RMN'H (200 MHz, CDCl3) : 8 = 1.00 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7. 54 Hz), 1.22 (t, 3H, OCH2CH, 3J= 7. 2 Hz), 2.52 (m, 2H, CCH2CH3), 4.51 (m, 4H, OCH2CH3 + CH2Ph), 5.27 (s, 2H, CH2N), 5.46 (ABq, 2H, C=CCH2OC=OC, 2JAB = 17.46 Hz, âa= 5.65, bb = 5.27,8,-8b== 0.39), 7.23 (m, 5H, H aromat. ph, (m, 1H, H aromat. Quino), 7.89 (m, 1H, H aromat. Quino) 8. 05 (d, 1H, H aromat. Quinoa 3J = 7.88 Hz), 8.35 (s, 1H, H aromat. Quino)-

RMN 13C (200 MHz, CDCl3) (200 8 = 8.4 (CH3), 14. (CH3), (CH3), 33. (CH3), (CH2), 50. (CH2), (CH2), 62.8 (CH2), 66.7 (CH2), 68. 4 (CH2), 79.5 (C), 108.6 (C), 122.2 (C), 126.9 (CH), 127.7 (CH), 128.1 (C), 128.3 (CH), 128.4 (CH), 128.5 (C), 128.5 (CH), 128.8 (CH), 130.2 (CH), 130.5 (CH), 130.8 (CH), 131.2 (CH), 137.9 (C), 143.9 (C), 144.3 (C), 149.0 (C), 151.7 (C=O), 156.9 (C=O), 169.0 (C=O).

SM (FAB', haute résolution) : Calculée : 511.1869 (M+ + H) Trouvée : 511.1862 Point de fusion : 92°C Ester méthylique de l'acide [3-({[1-(5-benzyloxy-5ethyl-6-oxo-5,6-dihydro-2H-pyren- 3-yl) methanoyll-amino f-methyl)-quinolin-2-yll-propionique A une solution de 686 mg (1.20 mMole) de produit (V) dans 34 ml de méthanol est ajouté sous atmosphère d'argon 1 cristal d'APTS. L'agitation est maintenue pendant 2 heures à température ambiante et le milieu réactionnel est ensuite dilué avec de l'eau. Après 30 minutes, la suspension est extraite au CH2Cl2, les phases organiques sont séchées sur NaSO4 et évaporées sous pression réduite. La purification sur gel de silice (éluan t : CH2Cl2/Et2O 10%) permet d'isoler 380 mg (0.76 mMole, 63 %) de produit attendu et 115 mg (0.23 mMole, 19 %) d'ester éthylique.

IR (Film) : v = 3356 (NH), 1756 (C=O), 1718 (C=O), 1693 (NHCO), 1659 (C=C). kiff.

RMN 1H (300 MHz, CDC13) : 8 = 0.87 (t, 3H, CCH2CH, 3J= 7.41 Hz), 1.85 (m, 2H, CCH2CH3), 3.67 (s, 3H, OCH3), 4.36 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10. 98 Hz, #a = 4.41, #b = 4.30, #a - #b = 0.11), 4.66 (d, 2H, CH2N, 3J = 6. 03 Hz), 5.09 (AB du ABX, 2H, <BR> <BR> CH2OC=O, 2JAB = 17.28 Hz, 4JAX = 0.78 Hz, 4JBX = 2.16 Hz, #a = 5.20, #b = 5.04, #a - #b = 0.16), 6.51 (X de l'ABX, 1H, (C=O) C=CH, 4J= 1.41 Hz), 7.15 (m, 6H, 5-H aromat. phenyl + NH), 7. 52 (m, 1H, H aromat.Quino), 7.67 (m, 2H, H aromat. Quino) 7-94 (m, 1H, H aromat. Quino) 8.14 (s, 1h, H aromat. Quino).

RMN 13C (300 MHz, CDC13) : 6 = 8.1 (CH3), 32.4 (CH2), 41.7 (CH2), 53.6 (CH3), 68.3 (CH2), 68.8 (CH2), 76.8 (C), 83.2 (C), 83. 5 (C), 128.1 (CH), 128. 1 (CH), 128.2

(C), 128.7 (CH), 129.3 (CH), 129.5 (CH), 131.2 (CH), 132.8 (CH), 133.3 (C), 133.5 (C), 137.5 (C), 137.5 (CH), 138. 1 (C), 140.2 (C), 147.8 (C), 154.1 (C=O), 164.0 (C=O), 167.6 (C=O).

SM (DCI, NH3+isobutane, 90 eV), m/z (%) : 499 (100) [M++H], 392 (9) [M+- OCH2Ph].

Point de fusion : 75°C Ester méthylique de l'acide 2-[1-(5-benzyloxy-5-ethyl-6-oxo-5, 6-dihydro-2H-pyren- 3-yl)-methanoyll-1, 2 dihydropyrrolo[3, 4-blquinolin-3-ylidene acétique

A une solution de 380 mg (0.76 mMole) du composé obtenu à l'étape précédente dans 8.2 ml de toluène est additionné sous atmosphère d'argon 0.48 ml (0.53 mMole, 0.7 éq.) de DBU. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes. Le mélange est ensuite hydrolyse avec de 1'eau et extrait au CH2Cl2, Les phases organiques réunies sont lavées avec de 1'eau, séchées sur Na2SO4 et évaporées sous pression réduite. La purification par chromatographie sur gel de silice (éluant : CH2Cl2/Et2O 20 %) permet d'obtenir 240 mg (0.48 mMole, 63 %) de produit sous forme de deux isomères A et B dans un rapport 1 : 1. Les isomères, séparés par : A IR (Film) : v = 1755 (C=O), 1696 (C=ON), 1649 (C=C) cm-1.

RMN'H (200 MHz, CDC13) : 8 = 0.94 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7.54 Hz), 1.83 (m, 2H, CCH2CH3), 3.69 (s, 3H, OCH), 4.39 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 10.64 Hz, #a = 4.45, #b = 4. 32, #a - #b = 0. 13), 5.07 (s, 2H, CH2N), 5.31 (AB de 1'ABX, 2H, CH20C=O, 2JAB = 16.1 Hz, JAX = 1.72 Hz, 4JBx = 1. 36 Hz, #a = 5. 37, #b = 5.23,8,,-5b = 0.14), 6.21 (X de l'ABX, 1H, OCH2C=CH), 6.58 (s, 1H, C=CH), 7.25 (m, 5H, H aromat.Ph), 7.61 (m, 1H, H aromat. Quinto), 7.81 (m, 2H, H aromat. Quinto), 8.16 (m, 2H, H aromat. Quinto).

SM (DCI, NH3+isobutane, 90 eV), m/z (%) : 516 (5) [M++ NH4], 499 (100) [M++ H], 407 (5), 392 (28), 241 (14).

B IR (Film) : v = 1754 (C=O), 1717 (C=ON), 1665 (C=C) cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDC13) : 8 = 1.06 (t, 3H, CCH2CH3, 3J = 7.54 Hz), 1.92 (m, 2H, CCH2CH3), 3.92 (s, 3H, OCH3), 4. 55 (ABq, 2H, CH2Ph, 2JAB = 11.3 Hz, tira= 4.63, ab = 4. 48, #a - #B = 0.145), 4.96 (AB de l'ABX, 2H, CH2OC=O, 2JAB = 16. 1 Hz, JAX = 1.72 Hz, #a = 5.00, #b = 4.92,8a-8b 0.079), 5.13 (s, 2H, CH2N), 6.36 (s, 1H, C=CH), 7.11 (s, 1H, C=CH), 7.31 (m, 5H, H aromat.Ph), 7.49 (m, 1H, H aromat. Quin), 7.66 (m, 2H, H aromat. Quino), 7. 93 (m, 2H, H aromate).

SM (DCI, NH3+isobutane, 90 eV), m/z (%): 499 (76) [M"+ H], 392 (12) [M-], 241 (100).

Camptothécine Une solution de 20 mg (0.04 mMole) du produit photochimique précédemment obtenu dans 1 ml de HBr (solution aqueuse, 48 %) est chauffée dans un tube scellé à 40°C pendant 3.5 heures. La solution réactionnelle est neutralisée avec une solution saturée de NaHC03. La phase aqueuse est ensuite extraite 5 fois au CH2C12, les phases organiques réunies sont séchées sur Na2SO4 et évaporées sous pression réduite.

L'analyse par HPLC (p. Bondapak C-18,3.9 x 300 mm, H2O : acétonitrile : acide formique (50 : 50 : 0.5), Tr = 3.95 min) du mélange réactionnel après filtration sur gel de silice a indiqué un rendement approximatif de 3 % en camptothécine. L'identité de la camptothécine, purifiée par chromatographie sur silice et par HPLC (plusieurs expériences réunies) a été confirmée par comparaison du spectre de masse et du spectre de 1H RMN ave ceux de la camptothécine commerciale.