La présente invention concerne un procédé de préparation de dérivés du taxane de formule générale :

OCOCg Hς qui sont des intermédiaires particulièrement intéressants pour préparer le taxol, le Taxotère et leurs analogues qui présentent des propriétés antitumorales et antileucémiques remarquables.

Dans la formule générale (I), Ar représente un radical aryle, R représente le radical phényle ou un radical R5-O- dans lequel R5 représente

- un radical alcoyle droit ou ramifié contenant 1 à 8 atomes de carbone, alcényle contenant 2 à 8 atomes de carbone, alcynyle contenant 3 à 8 atomes de carbone, cycloalcoyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, cycloalcényle contenant 4 à 6 atomes de carbone ou bicycloalcoyle contenant 7 à 11 atomes de carbone, ces radicaux étant éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxy, alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, dialcoylamino dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, pipéridino, morpholino, pipérazinyl-1 (éventuellement substitué en -4 par un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone ou par un radical phénylalcoyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone), cycloalcoyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, cycloalcényle contenant 4 à 6 atomes de carbone, phényle cyano, carboxy ou alcoxycarbonyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone,

- ou un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes ou radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone ou alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone,

- un radical hétérocyclyle azoté saturé ou non saturé contenant 4 à 6 chaînons et éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone, étant entendu que les radicaux cycloalcoyles, cycloalcényles ou

bicycloalcoyles peuvent être éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone,

Rj et R2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un radical alcoyle, phénylalcoyle, phényle, alcoxyphényle ou dialcoxyphényle, ou bien Rj et R2 forment ensemble avec l'atome de carbone auquel ils sont liés un cycle ayant de 4 à 7 chaînons,

R3 représente un radical acétyle ou un groupement protecteur de la fonction hydroxy et R4 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy. Plus particulièrement, Ar représente un radical phényle ou α- ou β-naphtyle éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes ou radicaux, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogène (fluor, chlore, brome, iode) et les radicaux alcoyles, alcényles, alcynyles, aryles, aralcoyles, alcoxy, alcoylthio, aryloxy, arylthio, hydroxy, hydroxyalcoyle, mercapto, formyle, acyle, acylamino, aroylamino, alcoxycarbonylamino, amino, alcoylamino, dialcoylamino, carboxy, alcoxycarbonyle, carbamoyle, dialcoylcarbamoyle, cyano, nitro et trifluorométhyle, étant entendu que les radicaux alcoyles et les portions alcoyles des autres radicaux contiennent 1 à 4 atomes de carbone, que les radicaux alcényles et alcynyles contiennent 3 à 8 atomes de carbone et que les radicaux aryles sont des radicaux phényles ou α- ou β-naphtyles, ou bien Ar représente un radical hétérocyclique aromatique ayant 5 chaînons et contenant un ou plusieurs atomes, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre, éventuellement substitué par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogène (fluor, chlore, brome, iode) et les radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone, aryles contenant 6 à 10 atomes de carbone, alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, aryloxy contenant 6 à 10 atomes de carbone, amino, alcoylamino contenant 1 à 4 atomes de carbone, dialcoylamino dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, acylamino dont la partie acyle contient 1 à 4 atomes de carbone, alcoxycarbonylamino contenant 1 à 4 atomes de carbone, acyle contenant 1 à 4 atomes de carbone, arylcarbonyle dont la partie aryle contient 6 à 10 atomes de carbone, cyano, carboxy, carbamoyle, alcoylcarbamoyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, dialcoylcarbamoyle dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone ou alcoxycarbonyle dont la partie alcoxy contient 1 à 4 atomes de carbone.

Plus particulièrement, Ar représente un radical phényle, thiényl-2 ou -3 ou furyle-2 ou -3 éventuellement substitué par un ou plusieurs atomes ou radicaux, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alcoyles, alcoxy, amino, dialcoylamino, acylamino, alcoxycarbonylamino et trifluorométhyle. Plus particulièrement encore, Ar représente un radical phényle éventuellement substitué par un atome de chlore ou de fluor, ou par un radical alcoyle (méthyle), alcoxy (méthoxy), dialcoylamino (diméthylamino), acylamino (acéty- lamino) ou alcoxycarbonylamino (t.butoxycarbonylamino) ou thiényle-2 ou -3 ou furyle-2 ou -3. Plus particulièrement, R3 représente un radical acétyle ou un groupement protecteur de la fonction hydroxy choisi parmi les radicaux (2,2,2-trichloroéthoxy) carbonyle, (2-trichlorométhylisopropoxy) carbonyle, trialcoylsilyles, dialcoylarylsi- lyles, alcoyldiarylsilyles ou triarylsilyles dans lesquels les radicaux alcoyles contiennent 1 à 4 atomes de carbone et les radicaux aryles sont, de préférence, des radicaux phényles et R4 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy choisi parmi les radicaux (2,2,2-trichloroéthoxy) carbonyle, (2-trichlorométhyliso- propoxy) carbonyle, benzyle, 4-méthoxybenzyle, 2,4-diméthoxybenzyle, trialcoyl¬ silyles, dialcoylarylsilyles, alcoyldiarylsilyles ou triarylsilyles dans lesquels les radicaux alcoyles contiennent 1 à 4 atomes de carbone et les radicaux aryles sont, de préférence, des radicaux phényles.

Dans la demande internationale PCT WO 9209589 est décrite la préparation des produits de formule générale (I) par estérification de la baccatine III protégée ou de la 10-désacétylbaccatine m protégée de formule générale :

dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précédemment, au moyen d'un acide de formule générale :

dans laquelle Ar, R _j et R2 sont définis comme précédemment et Boc. représente le radical t.butoxycarbonyle, et leur transformation en taxol, Taxotère ou leurs dérivés de formule générale :

dans laquelle Ar est défini comme .précédemment, R$ représente un atome d'hydrogène ou le radical acétyle et R représente le radical phényle ou un radical R5-O- dans lequel R5 est défini comme précédemment, en passant intermédiairement par un produit de formule générale :

dans laquelle R3 et R4 sont définis comme précédemment.

Selon les procédés antérieurement connus, il était nécessaire, pour obtenir les produits de formule générale (IV) dont la configuration absolue de la chaîne latérale est nécessaire à l'activité antitumorale, d'utiliser l'acide de formule générale (III) dont les atomes de carbone en -4 et -5 ont respectivement les configurations S et R.

Il a maintenant été trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention que les produits de formule générale (I) peuvent être obtenus, avec une

stéréosélectivité voisine de 100 %, par estérification de la baccatine III protégée ou de la 10-désacétylbaccatine III protégée au moyen d'un acide de formule générale :

dans laquelle Ar, R, Rj et R2 sont définis comme précédemment, et dont les atomes de carbone en position -4 et -5 ont chacun la configuration S, ou d'un dérivé activé de cet acide.

Le procédé selon l'invention permet d'obtenir stéréosélectivement le produit de formule générale (I) à partir d'un acide de formule générale (VI) éventuellement en mélange avec un acide de formule générale (III). Selon la présente invention, l'estérification de la baccatine III protégée ou de la 10-désacétylbaccatine m protégée par l'acide de formule générale (VI) est effectuée en présence d'un agent de' condensation tel qu'un imide comme le dicyclohexylcarbodiimide ou un carbonate réactif comme le 2-diρyridylcarbonate et d'un agent d'activation tel qu'une aminopyridine comme la 4-diméthylaminopyridine ou la 4-pyrrolidinopyridine en opérant dans un solvant organique choisi parmi les éthers tels que le tétrahydrofuranne, le diisopropyléther, le méthyl butyléther ou le dioxanne, les cétones telles que la méthylisobutylcétone, les esters tels que l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle ou l'acétate de n.butyle, les nitriles, les hydrocarbures aliphatiques tels que le pentane,.l'hexane ou l'heptane, les hydrocarbures aliphatiques halogènes tels que le dichlorométhane ou le 1,2-dichloroéthane et les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène, à une température comprise entre 0 et 90°C.

L'estérification peut aussi être réalisée en utilisant l'acide de formule générale (VI) sous forme d'anhydride de formule générale :

(VII)

dans laquelle Ar, R, Rj et R2 sont définis comme précédemment, en présence d'un agent d'activation tel qu'une aminopyridine comme la 4-diméthylaminopyridine ou la 4-pyrrolidinopyridine en opérant dans un solvant organique choisi parmi les éthers tels que le tétrahydrofuranne, le diisopropyléther, le méthyl butyléther ou le dioxanne, les cétones telles que la méthylisobutylcétone, les esters tels, que l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle ou l'acétate de n.butyle, les nitriles tels que l'acétonitrile, les hydrocarbures aliphatiques tels que le pentane, l'hexane ou l'heptane, les hydrocarbures aliphatiques halogènes tels que le dichlorométhane ou le 1,2- dichloroéthane et les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène à une température comprise entre 0 et 90°C.

L'estérification peut aussi être réalisée en utilisant l'acide de formule générale (VI) sous forme d'halogénure ou d'anhydride mixte de formule générale :

dans laquelle Ar, R, Rj et R2 sont définis comme précédemment et X représente un atome d'halogène ou un radical acyloxy ou aroyloxy, éventuellement prépi en présence d'une base qui est de préférence une base organique azotée t aminé aliphatique tertiaire, une pyridine ou une aminopyridine diméthylamino-4 pyridine ou la pyrrolidino-4 pyridine en opérant dans un organique inerte choisi parmi les éthers tels que le tétrahydrofuranne, le diisopropyléther, le méthyl tbutyléther ou le dioxanne, les cétones comme la méthyl tbutylcétone, les esters comme l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle ou l'acétate de n.butyle, les nitriles tels que l'acétonitrile, les hydrocarbures aliphatiques tels que le pentane, l'hexane ou l'heptane, les hydrocarbures aliphatiques halogènes tels que le dichlorométhane ou le 1,2-dichloroéthane et les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène à une température comprise entre 0 et 90°C.

L'acide de formule générale (VI) peut être obtenu par saponification de l'ester de formule générale :

dans laquelle Ar, R, Rj et R2 sont définis comme précédemment et R7 représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux phényles. Généralement, la saponification est effectuée en milieu aqueux, éventuellement en présence d'un alcool aliphatique contenant 1 à 4 atomes de carbone (méthanol, éthanol, isopropanol, tbutanol), en présence d'une base minérale choisie parmi les hydroxydes, les carbonates ou les bicarbonates de métaux alcalins ou alcalino-terreux, à une température comprise entre 0 et 50°C, de préférence voisine de 20°C.

L'ester de formule générale (IX) peut être obtenu par action d'un aldéhyde ou d'une cétone de formule générale :

dans laquelle R et R2 sont définis comme précédemment, éventuellement sous forme d'un dialcoylacétal ou d'un alcoyléther d'énol, sur un ester de formule générale :

R-C

dans laquelle Ar, R et R7 sont définis comme précédemment, en opérant dans un solvant organique inerte en présence d'un acide fort minéral, tel que l'acide sulfurique, ou organique, tel que l'acide p.toluènesulfonique éventuellement sous forme de sel de pyridinium à une température comprise entre 0° et la température d'ébullition du mélange réactionnel. Les solvants qui conviennent particulièrement bien sont les hydrocarbures aromatiques tels que le toluène.

L'ester de formule générale (XI) peut être obtenu par action du chlorure de benzoyle ou d'un produit de formule générale R5-O-CO- Y dans laquelle R5 est défini

comme précédemment et Y représente un atome d'halogène ou un radical -O-R5 ou -O-CO-R5 sur un ester de formule générale :

dans laquelle Ar et R7 sont définis comme précédemment, en opérant dans un solvant organique tel qu'un ester aliphatique comme l'acétate d'éthyle ou un hydrocarbure aliphatique halogène comme le dichlorométhane éventuellement en présence d'une base minérale telle que le bicarbonate de sodium ou organique telle que la triéthylamine. Généralement, la réaction est effectuée à une température comprise entre 0 et 50°C, de préférence voisine de 20°C. L'ester de formule générale (XII) peut être obtenu selon le procédé décrit par

E. Kamandi et coll., Arch. Pharmaz., 3Q& 135-141 (1975).

L'anhydride de formule générale (VII) peut être obtenu en faisant réagir un agent de déshydratation tel que le dicyclohexylcarbodiimide sur l'acide de formule générale (VI) en opérant dans un solvant organique choisi parmi les éthers tels que le tétrahydrofuranne, le diisopropyléther, le méthyl tbutyléther ou le dioxanne, les cétones telles que la méthylisobutylcétone, les esters tels que l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle ou l'acétate de n.butyle, les nitriles tels que l'acétonitrile, les hydrocarbures aliphatiques tels que le pentane, l'hexane ou l'heptane, les hydrocarbures aliphatiques halogènes tels que le dichlorométhane ou le dichloro-1,2 éthane et les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène, les xylènes, l'éthylbenzène, l'isopropylbenzène ou le chlorobenzène à une température comprise entre 0 et 30°C.

L'acide activé de formule générale (VIII) peut être obtenu par action d'un halogénure de sulfuryle, de préférence le chlorure, ou d'un produit de formule générale :

R ₈ -CO-Z (XIII)

dans laquelle Rg représente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone ou un radical phényle éventuellement substitué par 1 à 5 atomes ou radicaux, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux nitro, méthyle ou méthoxy et Z représente un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore, sur un acide de formule générale (VI) en opérant dans un solvant organique convenable

tel que le tétrahydrofuranne en présence d'une base organique telle qu'une aminé tertiaire comme la triéthylamine à une température comprise entre 0 et 30°C.

L'acide de formule générale (VI) peut aussi être obtenu par oxydation d'un produit de formule générale :

dans laquelle Ar, R, Rj et R2 sont définis comme précédemment

Généralement, l'oxydation est effectuée au moyen d'un periodate alcalin

(periodate de sodium) en présence d'une quantité catalytique d'un sel de ruthénium

(RUCI3) et de bicarbonate de sodium en opérant en milieu hydro-organique tel que par exemple un mélange acétonitrile-tétrachlorure de carbone-eau. Généralement, la réaction est effectuée à une température voisine de 20°C.

Le produit de formule générale (XTV) peut être obtenu par action d'un aldéhyde ou d'une cétone de formule générale (X), éventuellement sous forme d'un dialcoylacétal ou d'un ester d'énol, sur unproduit de formule générale :

NH-CO-R

^0H dans laquelle Ar et R sont définis comme précédemment, en opérant dans un solvant organique inerte en présence d'un acide fort minéral, tel que l'acide sulfurique, ou organique, tel que l'acide p.toluènesulfonique éventuellement sous forme de sel de pyridinium, à une température comprise entre 0°C et la température d'ébullition du mélange réactionnel. Les solvants qui conviennent particulièrement bien sont les hydrocarbures aromatiques.

Le produit de formule générale (XV) peut être obtenu dans les conditions décrites dans EP-A- 0 530 385.

L'ester de formule générale (IX) dans laquelle Ar et R7 sont définis comme précédemment, Rj représente un atome d'hydrogène et, R2 représente un radical phényle, alcoxyphényle ou dialcoxyphényle, peut aussi être obtenu par cyclisation d'un produit de formule générale :

dans laquelle Ar, R et R7 sont définis comme précédemment et Ph représente un radical phényle, alcoxyphényle ou dialcoxyphényle, en opérant de préférence en milieu anhydre, dans un solvant organique choisi parmi les éthers, les esters, les cétones, les nitriles, les hydrocarbures aliphatiques éventuellement halogènes et les hydrocarbures aromatiques éventuellement halogènes en présence d'un agent d'oxydation tel que la dichlorodicyanobenzoquinone à une température comprise entre 0°C et la température d'ébulϋtion du mélange réactionnel. De préférence, on opère dans un hydrocarbure aliphatique halogène, tel que le dichlorométhane, ou l'acétonitrile à une température voisine de 20 ^β C.

La cyclisation conduit à la formation d'un mélange des épimères 2R et 2S du produit de formule générale (IX) qui peuvent être séparés selon les méthodes habituelles. Il est particulièrement avantageux d'obtenir préférentiellement l'épimère 2R pour préparer le taxol, le Taxotère ou leurs dérivés à partir d'un produit de formule générale (I).

L'invention concerne également les acides de formule générale (VI) éventuellement so s forme de sel, d'ester, d'anhydride, d'anhydride mixte ou d'halogénure.

Les dérivés du taxane de formule générale (I) obtenus par la mise en oeuvre du procédé selon l'invention peuvent être transformés en taxol, en Taxotère ou en leurs analogues selon les procédés décrits dans la demande internationale PCT WO 9209589, lorsque Rj et R2 représentent chacun un radical alcoyle ou phénylalcoyle en passant intermédiairement par le produit de formule générale (V) ou bien par traitement en milieu acide (acide chlorhydrique, acide sulfurique, acide acétique, acide méthanesulfonique, acide trifluorométhanesulfonique, acide p.toluènesulfonique) en opérant dans un solvant organique (alcool, éther, ester, hydrocarbure aliphatique, hydrocarbure aliphatique halogène, hydrocarbure aromatique, nitrile) à une température comprise entre -10 et 60°C, lorsque Rj représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical phényle, alcoxyphényle ou dialcoxyphényle en passant intermédiairement par un produit de formule générale

dans laquelle Ar, R et Ph sont définis comme précédemment et R' représente un atome d'hydrogène ou le radical acétyle, après remplacement des groupements protecteurs R et éventuellement R3 par des atomes d'hydrogène selon les méthodes connues.

Les exemples suivants illustrent la présente invention.

EXEMPLE 1

Dans un ballon de 10 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique, on met, sous atmosphère d'argon, 28 mg (0,087 mmole) d'acide t.butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5-(4S,5S) en solution dans 1,5 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 18 mg (0,087 mmole) de dicyclohexylcarbodiimide distillé. On laisse réagir pendant 5 minutes à une température voisine de 20°C puis on ajoute, en une seule fois, un mélange de 3,5 mg (0,029 mmole) de N,N-diméthylamino-4 pyridine et 26 mg (0,029 mmole) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-l,13α oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyloxy)-7β,10β taxène-11. On laisse réagir pendant 5 minutes à une température voisine de 20°C puis on chauffe pendant 16 heures à 72°C. Après refroidissement à une température voisine de 20°C, on ajoute 40 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée avec 5 cm3 d'eau distillée, 2 fois 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis avec 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, et enfin séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et évaporation des solvants sous pression réduite, on obtient un résidu (solide) qui est purifié par chromatographie préparative sur couche mince de silice en éluant avec un mélange éther-hexane-dichlorométhane (5-20-75 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 86 %, 30 mg (0,025 mmole) de t.butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 hydroxy-1 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2

éthoxycarbonyl)oxy-7β,10β taxène-11 yle-13α dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3450, 2970, 2910, 1760, 1720, 1700, 1600, 1580, 1450, 1375, 1360, 1245, 1170, 1135, 1100, 1080, 1060, 1020, 995, 975, 960, 900, 820, 765 et 720 cm" ¹

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz' ; CDCI3 ;: déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,18 (s, 12H) ; 1,27 (s, 3H) ; 1,6-2,0 (m, 1H) ; 1,76 (s, 3H) ; 1,81 (s, 3H) ; 1,83 (s, 3H) ; 1,95 (s, 3H) ; 2,05 (s, 3H) ; 2,20 (d, J = 9, 2H) ; 2,55-2,65 (m, 1H) ; 3,90 (d, J = 7, 1H) ; 4,20 (AB _q , JAB = 8,5, δ _A -δ _B = 47,2, 2H) ; 4,47 (d, J = 6,4, 1H) ; 4,75 (AB _qj JAB = 12, δA-δβ = 92,2, 2H) ; 4,78 (s, 2H) ; 4,91 (d, J = 12, 1H) ; 5,12 (s large, 1H) ; 5,58 (dd, J = 7,1 et 10,6, 1H) ; 5,67 (d, J = 7, 1H) ; 6,25 (s, 1H) ; 6,28 (t, J = 9, 1H) ; 7,2-7,4 (m, 5H aromatiques) ; 7,47-7,52 (m, 2H aromatiques) ; 7,61-7,66 (m, 1H aromatique) ; 8,03-8,05 (m, 2H aromatiques) - spectre de masse (FAB (+)-matrice NBA) : ion moléculaire (massif) : M ⁺ (1198).

L'acide tbutoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxy- lique-5-(4S,5S) peut être préparé de la manière suivante :

Dans un ballon de 25 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique, on introduit successivement 40 mg (0,12 mmole) de tbutoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(4S,5S), 5 cm3 de méthanol, 2 cm3 d'eau distillée et 50 mg (0,36 mmole) de carbonate de potassium solide. Le mélange réactionnel est agité pendant 40 heures à une température voisine de 20°C puis on évapore le méthanol sous pression réduite. On ajoute 13 cm3 d'eau puis lave la phase aqueuse obtenue 3 fois avec 20 cm3 d'éther éthylique. La phase aqueuse basique est refroidie à 0°C puis est acidifiée, en présence de 20 cm3 de dichlorométhane et sous forte agitation, par addition d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2M. La phase organique est séparée par décantation puis la phase aqueuse est extraite 6 fois avec 30 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec 5 cm3 d'eau distillée puis 1 fois avec 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium puis enfin séchées sur sulfate de magnésium anhydre. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite, on obtient, avec un rendement de 99 %, 38 mg (0,12 mmole) d'acide tbutoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5-(4S,5S) dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3650- 2200, 2970, 2920, 1760, 1740, 1700, 1470, 1450, 1370, 1250, 1215, 1165, 1135, 1110, 1065, 875 et 690 cm' ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (200 MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,20 (maj) et

1,43 (min) (2s larges, 9H) ; 1,64 (s, 3H) ; 1,94 (s, 3H) ; 3,0 (s très large. lH) ; 4,97 (d déformé, J = 7, 1H) ; 5-5,25 (m, 1H) ; 7,2-7,4 (m, 5H aromatiques).

- spectre de masse (i.c, NH3 + isobutane) : 339 (MH+), 322 (MH+-OH), 283, 266, 222, 206, 158, 124, 110.

Le tbutoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazoli- dine-l,3-(4S,5S) peut être préparé de la manière suivante :

Dans un ballon de 10 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 147,5 mg (0,50 mmole) de tbutoxycarbo- nylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle et 2,5 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite à la suspension obtenue 10 grains de tamis moléculaire 4Â, 188,5 μl (144,2 mg, 2,0 mmoles) de méthoxy-2 propène et 12,5 mg (0,05 mmole) de p.toluènesulfonate de pyridinium. On laisse réagir pendant 1 heure à une température voisine de 20°C puis on chauffe à 120°C et laisse réagir à cette température pendant 2 heures. Le mélange réactionnel brun foncé résultant est refroidi à une température voisine de 20°C. On ajoute 60 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est lavée avec 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium, 3 fois avec 5 cm3 d'eau puis 1 fois avec 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite, on obtient un résidu qui est chromatographié sur une colonne de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (15-85 en volumes). On obtient, avec un rendement de 36 , 60 mg (0,18 mmole) de tbutoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(4S,5S) dont les caractéristiques sont les suivantes : - spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3060, 3025, 2975, 2920, 1775, 1740, 1700, 1490, 1480, 1450, 1440, 1365, 1250, 1210, 1165, 1110, 1070, 1050, 1030, 890, 760, 720 et 695 cnr ¹ -

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (200 MHz ; CDCI3 • déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,20 (maj) et 1,43 (min) (2s larges, 9H) ; 1,63 (s, 3H) ; 1,90 (min) et 1,95 (maj) (2s larges, 3H) ;

3,32 (s, 3H) ; 4,95-5,20 (m, 1H) ; 4,97 (d déformé, 5 = 7, 1H) ; 7,15-7,40 (m, 5H aromatiques).

- spectre de masse (I.C., NH3 + isobutane) : 353 (M+NH +) ; 336 (MH+) ; 320 (M ⁺ - CH3) ; 297 ; 280 ; 239 ; 236 ; 222 ; 220.

Le tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionat£-(2S,3S) de méthyle peut être préparé de la manière suivante :

A une suspension de 6,5 g de phénylglycidate-(2S,3R) d'α-méthylbenzyl- amine dans 20 cm3 de toluène et 10 cm3 d'eau, on ajoute, en 5 minutes, une solution aqueuse de soude 4N. Après 2 heures d'agitation à une température voisine de 20°C, on extrait la phase aqueuse séparée par 2 fois 7 cm3 de toluène. La phase aqueuse est introduite dans un autoclave. Après avoir ajouté 97,5 cm3 d'une solution aqueuse d'ammoniaque à 32 % (p/v) et 1,22 g de chlorure d'ammonium, l'autoclave est fermé puis chauffé, sous agitation, pendant 6 heures à 60°C (pression autogène de 3 bars). Après refroidissement à une température voisine de 20°C, on ajoute 6 cm3 d'une solution aqueuse de soude 4N. On agite pendant 30 minutes, puis on élimine l'ammoniac sous pression réduite puis' on concentre à sec sous pression réduite (45 mm de mercure ; 6 kPa) à 45°C. Le résidu obtenu est repris par 75 cm3 de méthanol. A la suspension obtenue, on ajoute en 35 minutes, à 20°C, une solution méthanolique d'acide sulfurique constituée de 4,83 g d'acide sulfurique concentré dans 20 cm3 de méthanol. Le mélange réactionnel est chauffé à 50°C pendant 3 heures 30 minutes. Après refroidissement à 0°C, on ajoute une solution de 27 g de carbonate de sodium dans 20 cm3 d'eau. Après cessation du dégagement de gaz carbonique, le mélange réactionnel est refroidi à 23°C en 30 minutes. On ajoute alors, en 30 minutes, une solution de 6,1 g de dicarbonate de di-tbutyle dans 7 cm3 de méthanol. On agite pendant 4 heures puis, après évaporation de 50 cm3 de méthanol, on ajoute 60 cm3 d'eau puis évapore la totalité du méthanol. Le produit qui précipite est séparé par filtration, lavé avec 2 fois 25 cm3 d'eau et séché à poids constant. On obtient ainsi, avec un rendement de 30 %, 2 g de tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes : - point de fusion : 135,5-136°C.

- pouvoir rotatoire : [α]χ)25 ₌ + 29,6° (c = 0,5 ; chloroforme)

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3380, 3350, 3000, 2970, 2930, 1720, 1690, 1510, 1435, 1385, 1360, 1310, 1285, 1230, 1205, 1170, 1105, 1005, 860, 770, 750, 730 et 690 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (200MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,43 (s, 9H) ; 2,84 (d, J = 7, 1H) ; 3,71 (s, 3H) ; 4,60 (dd, J = 3,5 et 7, 1H) ; 5,10 (d déformé, J = 8, 1H) ; 7,20-7,37 (m, 5H aromatiques). - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (360 MHz ; . DMSO d^ ; 298°K ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplages J enΗz) : 1,31 (s large, 9H) ; 3,55 (s, 3H) ; 4,14 (d, J = 7,7, 1H) ; 4,71 (dd, 1H) ; 5,65 (s large, 1H) ; 7,18 (d, J = 7, 1H) ; 7,15-7,3 (m, 5H).

EXEMPLE 2 Dans un ballon monocol de 5 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met 9 mg (0,028 mmole) d'acide benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5-(4S,5S) en solution dans 0,46 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 5,7 mg (0,028 mmole) de dicyclohexylcarbodiimide. On laisse réagir le mélange réactionnel devenu trouble pendant 5 minutes à une température voisine de 20°C puis on ajoute un mélange de 6,4 mg (0,009 mmole) de de diacétoxy-4,10β benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-l,13α oxo-9 triéthyl- silyloxy-7β taxène-11 et de 1,1 mg (0,009 mmole) de N,N-diméthylamino-4 pyridine. On laisse réagir le mélange réactionnel pendant 5 minutes à une température voisine de 20°C puis on le chauffe pendant 16 heures à 72°C. Après refroidissement à une température voisine de 20°C, on dilue le mélange réactionnel par addition de 40 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par 2 fois 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, 3 fois 5 cm3 d'eau puis 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et enfin séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et élimination des solvants sous pression réduite, le résidu obtenu (21 mg) est purifié par chromatographié sur couche mince de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-dichlorométhane (8-92 en volumes) en effectuant deux passages. On obtient ainsi, avec un rendement de 91 %, 8,4 mg (0,008 mmole) de benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(4S,5R) de diacétoxy-4,10β benzoyloxy-2α époxy-5β,20 hydroxy-1 oxo-9 triéthylsilyloxy-7β taxène-11 yle-13α dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3400, 2930, 2850, 1730, 1720, 1630, 1590, 1570, 1440, 1360, 1340, 1230, 1195, 1065, 1015, 1005, 980 et 810 cm" ¹ .

- spectre de résonnance magnétique nucléaire du proton (400 MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 0,54-0,61 (m, 6H) ; 0,92 (t, J = 8, 9H) ; 1,20 (s, 3H) ; 1,22 (s, 3H) ;1,65 (s, 3H) ; 1,86 (s, 3H) ; 1,93 (s large, 3H) ; 2,00 (s, 3H) ; 2,08 (s, 3H) ; 2,19 (s, 3H) ; 1,82-2,15 (m, 3H) ; 2,46- 2,54 (m, 1H) ; 3,77 (d, J = 7,2, 1H) ; 4,16 (AB _q , JAB = 8,4, δ _A -δ _B ? 59,4, 2H) ; 4,46 (dd, J = 6,6 et 10,5, 1H) ; 4,56 (d, J = 6,8, 1H) ; 4,88 (d, J = 8, 1H) •'; 5,27 (d, J = 6, 1H) ; 5,64 (d, J = 7,2, 1H) ; 6,24 (t, J ≈ 9, 1H) ; 6,45 (s, 2H) ; 6,94 (s large, 2H aromatiques) ; 7,11-7,26 (m, 8H aromatiques) ; 7,44-7,48 (m, 2H aromatiques) ; 7,59-7,61 (m, 1H aromatique) ; 8,00-8,02 (m, 2H aromatiques)

- spectre de résonance magnétique du ¹³ C (100 MHz ; CDCI3) : 5,20 ; 6,69 ; 9,99 14,26 ; 20,82 ; 21,07 ; 21,62 ; 26,42 ; 35,27 ; 37,04 ; 43,18 ; 46,69 ; 58,28 ; 65,97 71,68 ; 72,06 ; 74,79 ; 74,85 ; 76,32 ; 78,93 ; 80,74 ; 84,09 ; 93,43 ; 102,65 ; 126,11 126,86 ; 127,83 ; 128,02 ; 128,50 ; 128,69 ; 129,14 ; 129,43 ; 130,00 ; 133,67 133,82 ; 138,81 ; 139,90 ; 166,93 ; 169,13 ; 169,85 ; 201,60 - spectre de masse (FAB(+) -matrice NBA+KC1) : 1046 , 1008 (MH+) , 948 , 930.

L'acide benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5- (4S.5S) peut être préparé de la manière suivante :

Dans un ballon monocol de 2 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met 12,5 mg (0,04 mmole) de vinyl-5 benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-l,3-(4S,5R) en solution dans 80 μl d'acétonitrile. On ajoute ensuite successivement 80 μl de tétrachlorure de carbone, 120 μl d'eau et 22 mg (0,26 mmole) de bicarbonate de sodium pur. On ajoute ensuite, sous agitation vigoureuse et par petites portions, 47 mg (0,22 mmole) de periodate de sodium. On laisse réagir pendant 5 minutes à une température voisine de 20°C, puis on ajoute, en une seule fois, 2,4 mg de trichlorure de ruthénium. Le mélange hétérogène noir résultant est agité vigoureusement à 20°C pendant 72 heures.

Le mélange réactionnel est dilué dans 10 cm3 d'eau. La phase organique basique obtenue est lavée par 3 fois 10 cm3 d'éther. La phase aqueuse basique est refroidie à 0°C, puis elle est acidifiée, sous agitation vigoureuse et en présence de 20 cm3 de dichlorométhane, par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2M jusqu'à pH = 1. Après décantation, la phase aqueuse acide est extraite par 6 fois 15 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques réunies sont lavées 3 fois avec 5 cm3 d'eau puis 1 fois avec 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium anhydre et filtration, la phase organique

est concentrée à sec sous pression réduite. On obtient ainsi, avec un rendement de 77 %, 10,0 mg (0,031 mmole) d"acide benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine- 1,3 carboxylique-5-(4S,5S) dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3700- 2300, 2970, 2940, 2930, 2900, 2825, 1740, 1600, 1590, 1570, 1420-1.400, 1370,

1360, 1190, 1180, 1150, 1120, 1090 et 855 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton : (200 MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm) : 1,81 (s,3H) ; 2,11 (s, 3H) ; 4,90-5,06 (m, 2H) ; 6,78-6,93 (m, 4H aromatiques) ; 7,07-7,30 (m, 6H aromatiques)

Le vinyl-5 benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-l,3-(4S,5R) peut être préparée de la manière suivante :

Dans un ballon monocol de 10 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique et d'un réfrigérant, on met, sous atmosphère d'argon, 32 mg (0,12 mmole) de phényl-1 benzoylamino-1 hydroxy-2 butène-3-(lS,2R) en suspension dans 0,64 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 226 μl (173 mg , 2,4 mmoles) de méthoxy-2 propène, 6,0 mg (0,024 mmole) de p.toluènesulfonate de pyridinium et 8 grains de tamis moléculaire 4A. On laisse réagir le mélange réactionnel résultant à une température voisine de 15°C pendant 2,5 heures puis on le chauffe à 100°C pendant 2 heures. Après refroidissement à une température voisine de 15°C, on dilue le mélange réactionnel dans 40 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est lavée 1 fois avec 5 cm3 d'une solution saturée de bicarbonate de sodium, 3 fois avec 5 cm3 d'eau et 1 fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodiumpuis elle est séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite, le résidu obtenu est purifié par chromatographié sur gel de silice en éluant une première fois avec un mélange éther éthylique-dichlorométhane (2-98 en volumes) puis une seconde fois avec un mélange acétate d'éthyle-hexane (10-90 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 38 %, 14 mg (0,0456 mmole) de vinyl-5 benzoyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine-l,3-(4S,5R) dont les caractéristiques sont les suivantes : - spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3050, 3010, 2980, 2920, 1635, 1595, 1570, 1490, 1385, 1370, 1355, 1245, 1215, 1145, 1065, 1030, 1020, 935, 850 et 690 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (400 MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,78 (s, 3H) ;

2,01 (s, 3H) ; 4,59 (d, J = 6,4, 1H) ; 4,79 ( pst, J = 6,4, 1H) ; 4,97-5,10 (m, 2H) ; 5,21-5,26 (m, 1H) ; 6,78-6,94 (m, 4H aromatiques) ; 7,04-7,30 (m, 6H aromatiques).

EXEMPLE 3

Dans un ballon monocol de 5 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique, on introduit, sous atmosphère d'argon, 23 mg (0,058 mmole) d'acide tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5- (2R.4S.5S) dans 1 cm3 de toluène anhydre puis on ajoute 11,9 mg (0,058 mmole) de dicyclohexylcarbodiimide. On laisse réagir pendant 5 minutes à une température voisine de 25°C puis on ajoute un mélange de 2,3 mg (0,019 mmole) de N,N- diméthylamino-4 pyridine et de 17 mg (0,019 mmole) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-l,13α oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyloxy)-7β,10β taxène-11. On laisse réagir pendant 5 minutes à 25°C puis on chauffe pendant 24 heures à 74°C. Après évaporation du toluène sous pression réduite, le résidu obtenu (74 mg) est purifié par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-dichlorométhane (5-95 en volumes). On obtient ainsi 23,4 mg (0,012 mmole) de tbuto^ycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(2R,4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 hydroxy-1 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)oxy -7β,10β taxène-11 yle-13α contaminé par 15 % de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(2R,4S,5S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 hydroxy-1 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)oxy-7β,10β taxène-ll yle-13α.

Le t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-1,3- carboxylate-5-(2R,4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 hydroxy- 1 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyl)oxy-7β,10β taxène-11 yle-13α présente les caractéristiques suivantes :

- point de fusion : 164-167°C.

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3500, 2950, 2900, 1760, 1730, 1720, 1700, 1605, 1580, 1505, 1380, 1375, 1360, 1240, 1140, 1060, 815, 760 et 710 cm" ¹ - spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (500 MHz ; CDCI3 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,05 (s, 9H) ; 1,16 (s, 3H) ; 1,24 (s, 3H) ; 1,64 (s, 3H) ; 1,80 (s, 3H) ; 1,85 (s large, 3H) ; 1,98-2,05 (m, 1H) ; 2,07-2,14 (m, 1H) ; 2,18-2,26 (m, 1H) ; 2,53-2,64 (m, 1H) ; 3,81 (d, J=7,0, 1H) ; 3,82 (s, 3H) ; 4,18 (AB _q> JAB = 8,5, δ _A -δ _B = 80,7, 2H) ; 4,58 (s, 1H) ; 4,74 (AB _q , JAB = 11,8, δ _A -δ _B = 150,6, 2H) ;4,77 (AB _q , JAB = H.8, δ _A -δ _B = 7,7, 2H) ;

4,88 (d déformé, J = 9,3, IH) ; 5,41 (s large, IH) ; 5,50 (dd, J = 7,2 et 10,7, IH) ; 5,64 (d, J = 7,0, IH) ; 6,10 (t, J = 8,8, IH) ; 6,14 (s, IH) ; 6,40 (s large, IH) ; 6,93 (d, J = 8,8, 2H aromatiques) ; 7,26-7,44 (m, 7H aromatiques) ; 7,48-7,52 (m, 2H aromatiques) ; 7,62-7,65 (m, IH aromatique) ; 8,01-8,03 (m, 2H aromatiques).

*> Dans un monocol de 5 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on introduit 13 mg (0,01 mmole) de l'ester obtenu précédemment (mélange des 2 épimères) en solution dans 0,75 cm3 de méthanol puis on ajoute 0,75 cm3 d'acide acétique glacial. On chauffe à 65°C pendant 5 minutes puis on ajoute 65 mg du couple zinc-cuivre (préparé à partir de 20 g de zinc et de 3 g de sulfate de cuivre 0 monohydrate). On agite le mélange hétérogène noir à 65°C pendant 30 minutes. Après refroidissement à une température voisine de 25°C, on dilue le mélange réactionnel dans 30 cm3 de dichlorométhane. On filtre sur célite puis on lave les solides 3 fois avec 10 cm3 de dichlorométhane. On élimine les solvants sous pression réduite. Le résidu obtenu est purifié par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange méthanol-dichlorométhane (5-95 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 60 %, 5,6 mg (0,006 mmole) de tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5- (2R.4S.5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy-l,7β,10β taxène-11 yle-13α contaminé par 15-20 % de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(2R,4S,5S) d'acétoxy-4 benzoyl- oxy-2 époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy-l,7β,10β taxène-11 yle-13α.

Le t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-1,3- carboxylate-5-(2R,4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy- l,7β,10βtaxène-ll yle-13α présente les caractéristiques suivantes : - spectre infra-rouge (film) : bandes d'absorption caractéristiques à 3430, 2960, 2880,

2840, 1730, 1720, 1700, 1685, 1605, 1580, 1505, 1440, 1380, 1360, 1340, 1265,

1240, 1170, 1130, 1060, 1015, 975, 905, 720 et 695 cm" ¹

. spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (400 MHz •

CDCI3 ;déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) :1,05 (s, 9H) ; 1,09 (s, 3H) ; 1,20 (s, 3H) ; 1,57 (s, 3H) ; 1,70 (s, 3H) ; 1,73-1,90 (m, IH) ;

1,85 (s large, 3H) ; 2,02-2,19 (m, 2H) ; 2,47-2,60 (m, IH) ; 3,81 (d, J = 7, IH) ; 3,82 (s, 3H) ; 4,15 (d, J = 1,5, IH) ; 4,18 (ABq, JAB = 8,5, δ _A -ÔB = 55,6, 2H) ; 4,56 (d,

J = 5,0, IH) ; 4,87 (dd déf., J = 8, IH) ; 5,10 (d, J = 1,5, IH) ; 5,42 (s large, IH) ;

5,62 (d, J = 4, IH) ; 6,13 (t, J = 8, IH) ; 6,39 (s large, IH) ; 6,92 (m, 2H

aromatiques) ; 7,30-7,44 (m, 7H aromatiques) ;7,47-7,51 (m, 2H aromatiques) ; 7,59- 7,64 (m, IH aromatique) ; 8,01-8,05 (m, 2H aromatiques)

- spectre de masse (FAB (+) - matrice NBA+KC1) : 1276 (M+)

- analyse élémentaire (C57H61O 9NCI6) :

5 calculé C % 53,62 H % 4,81 N % 1,10 trouvé 53,22 4,82 1,16

Dans un monocol de 5 cm3 muni d'une agitation magnétique, on introduit 4,4 mg (0,0047 mmole) du produit obtenu ci-dessus. On refroidit à 0°C, puis on ajoute 64 μl d'une solution d'acétate d'éthyle contenant 0,28 μl d'acide chlorhydrique

1 à 33 . On laisse réagir le mélange réactionnel homogène résultant pendant 5 minutes à 0°C puis pendant 5 heures à une température voisine de 25°C. Le mélange réactionnel est dilué dans 20 cm3 d'acétate d'éthyle puis on traite la phase organique par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La phase organique séparée par décantation est lavée par 3 fois 5 cm3 d'eau et par 1 fois 5 cm3

15 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium puis est séchée sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite, le résidu obtenu est purifié par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange méthanol-dichlorométhane (5-95 en volumes). On obtient ainsi, avec un rendement de 78 %, 3,0 mg (0,0037 mmole) de

20 t.butoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy-l,7β,10β taxène-11 yle-13α (ou Taxotère) pur qui ne contient aucune trace de tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy-l,7β,10βtaxène-ll yle-13α .

25 On récupère 0,8 mg (0,0009 mmole) de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-l,3-carboxylate-5-(2R,4S,5S) d'acétoxy-4 benzoyl- oxy-2 époxy-5β,20 oxo-9 trihydroxy-l,7β,10β taxène-11 yle-13α qui n'est pas déprotégé dans les conditions utilisées.

Le Taxotère ainsi obtenu présente les caractéristiques suivantes :

^ - spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3450,

3100, 3050, 2950, 2920, 2890, 2850, 1730, 1710, 1600, 1580, 1490, 1450, 1390, 1370, 1315, 1270, 1245, 1160, 1105, 1095, 1070, 1020, 980, 910, 730 et 710 cm" ¹ .

. spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300 MHz ; CDCI3 _; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) :

1,13 (s, 3H) ; 1,24 (s, 3H) ; 1,34 (s, 9H) ; 1,76 (s, 3H) ; 1,85 (s, 3H) ; 1,74-1,85 (m, IH) ; 2,26-2,29 (m, 2H) ; 2,37 (s, 3H) ; 2,54-2,66 (m, IH) ; 3,31 (d déformé, J = 4,4, IH) ; 3,92 (d, J = 7, IH) ; 4,18-4,30 (m, IH) ; 4,18 (s, IH) ; 4,25 (ABq, JAB = 8,3, ÔA-δβ = 35,3, 2H) ; 4,62 (s large, IH) ; 4,94 (d, J = 8,5, IH) ; 5,20 (s, IH) ; 5,26 (s large déformé, IH) ; 5,41 (d déformé, J = 9,4, IH) ; 5,68 (d, J = 7, IH). ; .6,21 (t, J = 8,0 et 8,8, IH) ; 7,31-7,40 (m, 5H aromatiques) ; 7,47-7,52 (m, 2H aromatiques) ; 7,59-7,64 (m, IH aromatique) ; 8,09-8,12 (m, 2H aromatiques)

L'acide tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5-(2R,4S,5S) peut être préparé de la manière suivante : Dans un ballon de 50 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met, sous atmosphère d'argon, 33 mg (0,08 mmole) de tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-

4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) en suspension dans 15 cm3 de méthanol. On ajoute ensuite 5 cm3 d'eau et 33 mg (0,24 mmole) de carbonate de potassium. On laisse réagir pendant 96 heures à une température voisine de 25°C. Le mélange réactionnel devient homogène. Le méthanol est éliminé sous pression réduite. La phase aqueuse basique est diluée dans 10 cm3 d'eau, puis on extrait avec 3 fois 15 cm3 d'éther. La phase aqueuse est refroidie à 0°C puis est acidifiée, sous agitation vigoureuseen présence de 20 cm3 de dichlorométhane, par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 4M jusqu'à un pH inférieur à 1. La phase aqueuse acide est extraite 8 fois avec 20 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques réunies sont lavées avec 3 fois 5 cm3 d'eau puis avec 1 fois 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Les phases organiques sont séchées sur sulfate de sodium anhydre. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite, on obtient, avec un rendement de 94 %, 30,0 mg (0,075 mmole) d'acide t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 oxazolidine-1,3 carboxylique-5- (2R,4S,5S) dont les caractéristiques sont les suivantes :

- point de fusion : 148,5-150,5°C.

- pouvoir rotatoire : [α] _j )25 = + 46,4° (c = 1,0 ; chloroforme)

- spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 3700- 2300, 2950, 2900, 2820, 1755, 1700, 1605, 1580, 1505, 1385, 1360, 1300, 1285,

1240, 1215, 1165, 1130, 1075, 1065, 1020;, 930, 900, 850, 820 et 685 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton sous forme de 2 rota ères (200 MHz ; CDCI3) ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,11 (s, 9H) ; 3,82 (s, 3H) ; 4,2 (s très large, IH) ; 4,99 (d, J = 6,4, IH) ; 5,18

(majo d déformé, J = 6,4 ) et 5,36 (mino,s large) (IH) ; 6,46 (mino) et 6,66 ( ajo) (s, 2H) ; 6,94 (d, J = 8,6, 2H aromatiques) ; 7,20-7,46 (m, 7H aromatiques). - spectre de masse (I.C. ; NH ₃ + isobutane) : 417 (MH++ NH3), 400 (MH+), 361, 344, 300, 264, 225, 192, 177, 137.

Le t-butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthpxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) peut être préparé selon l'une des méthodes suivantes :

1) Dans un ballon monocol de 2 cm3, muni d'un système d'agitation magnétique, on met, sous atmosphère d'argon, 10 mg (0,034 mmole) de t.butoxycarbonyl-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle en suspension dans 0,5 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 1 mg (0,004 mmole) de p.toluènesulfonate de pyridinium. On chauffe le mélange réactionel résultant à 115°C. Après 5 minutes à cette température, on ajoute 13 μl (13,9 mg , 0,076 mmole) de p.méthoxybenzaldéhyde diméthylacétal. Le mélange réactionnel devenu homogène est chauffé au reflux du solvant pendant 5 minutes. Après refroidissement à une température voisine de 20°C, on dilue le mélange réactionnel dans 30 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est traitée 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, puis lavée par 2 fois 5 cm3 d'eau et 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium anhydre, filtration et concentration à sec sous pression réduite, le résidu est purifié par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (6-4 en volumes). On obtient ainsi 13,9 mg (0,0336 mmole) d'un mélange de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) et de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2S,4S,5S) dans le rapport 40/60. Le rendement global est de 99 %.

Ces esters peuvent être séparés par chromatographié sur colonne de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (2-8 en volumes).

Le t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) présente les caractéristiques suivantes : - point de fusion : 208-208,5°C.

- pouvoir rotatoire [α]χ 25 ₌ + 53° (c = 1,1 ; chloroforme)

- spectre infra-rouge (film) : 2950, 1725, 1680, 1600, 1575, 1500, 1380, 1350, 1280, 1260, 1240, 1200, 1160, 1120, 1065, 1050, 1030 et 1010 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton sous forme de 2 rotamères (200MHz ; CDC13 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,12 (s, 9H) ; 3,32 (s, 3H) ; 3,82 (s, 3H) ; 5,00 (d, J = 6,5, IH) ; 5,16 (majo ; d déformé, J = 5,6) et 5,34 (mino ; s large, IH) ; 6,48 (mino) et 6,68 (majo) (2s, IH) ; 6,93 (d, J = 8,4, 2H aromatiques) ; 7,20-7,50 (m, 7 H aromatiques)

. spectre de masse (D/IC, NH3 + isobutane) : 414 (MH+), 356, 314, 312, 250, 222,

206, 179, 177, 162, 151, 134, 119.

Le t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2S,4S,5S) présente les caractéristiques suivantes : - spectre infra-rouge (film) : principales bandes d'absorption caractéristiques à 2950,

2900, 1760, 1730, 1695, 1600, 1580, 1505, 1450, 1430, 1380, 1360, 1335, 1290,

1240, 1210, 1160, 1150, 1080, 1030, 1020, 920, 810 et 680 cm" ¹ .

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (200 MHz ; CDC13 ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,26 (s, 9H) ; 3,37 (s, 3H) ; 3,82 (s, 3H) ; 5,01 (d, J = 7,1, IH) ; 5,27 (d, J = 7,1, IH) ; 6,05 (s, IH); 6,91 (d, J = 8,4, 2H aromatiques) ; 7,26-7,56 (m, 5H aromatiques) ; 7,49 (d, J ≈ 8,4,

2H aromatiques)

- spectre de masse (D/IC, NH3 + isobutane) : 414 (MH ⁺ ), 356, 339, 314, 312, 296,

250, 224, 222, 206, 177, 162, 151, 135, 121

2) Dans un ballon de 2 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met, sous atmosphère d'argon, 5,0 mg (0,017 mmole) de tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle en suspension dans 0,25 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 10,0 μl (10,7 mg ; 0,059 mmole) de p.méthoxybenzaldéhyde diméthylacétal. On chauffe le mélange réactionnel résultant à 95°C puis on ajoute 1 mg de p.toluènesulfonate de pyridinium-polymère. On poursuit le chauffage pendant 24 heures à 95°C. Après refroidissement à une température voisine de 20°C, on dilue le mélange réactionnel dans 30 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est traitée 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, puis lavée par 3 fois par 5 cm3 d'eau et 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium anhydre, filtration et concentration à sec, on obtient, après purification par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (1-1 en volumes, 2 passages), avec un rendement de 93 %, 6,5 mg (0,016 mmole) d'un mélange de tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-4

phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) et de tbutoxy- carbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-1,3- (2S.4S.5S) dans le rapport 30/70.

3) Dans un ballon monocol de 2 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met sous atmosphère d'argon, 10,0 mg (0,034/ mmole) de tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle en suspension dans 0,5 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 13,0 μl (13,9 mg , 0,076 mmole) de p.méthoxybenzaldéhyde diméthylacétal. On chauffe le mélange réactionnel résultant à 74°C pendant 5 minutes puis on ajoute 2,5 mg d'acide p.toluènesulfonique monohydrate. On poursuit le chauffage à 74°C pendant 17 heures. Après refroidissement, le mélange réactionnel est dilué dans 30 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est traitée 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, puis lavée 2 fois par 5 cm3 d'eau et 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium anhydre, filtration et concentration à sec sous pression réduite, on obtient, après purification par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (1-1 en volumes), avec un rendement de 45%, 6,3 mg (0,015 mmole) d'un mélange de t.butoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2R,4S,5S) et de tbutoxy- carbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-1,3- (2S,4S,5S) dans le rapport 61/39.

4) Dans un ballon monocol de 2 cm3 muni d'un système d'agitation magnétique, on met sous atmosphère d'argon, 5,0 mg (0,017 mmole) de tbutoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2S,3S) de méthyle en suspension dans 0,25 cm3 de toluène anhydre. On ajoute ensuite 6,5 μl (6,95 mg ; 0,038 mmole) de p.méthoxybenzaldéhyde diméthylacétal. On chauffe le mélange réactionnel résultant à 76°C pendant 5 minutes puis on ajoute 0,5 mg (0,002 mmole) d'acide camphorsulfonique. On poursuit le chauffage à 76°C. Après 4 heures de réaction, on ajoute 4,0 μl (2,43 mg , 0,076 mmole) de méthanol et laisse réagir pendant encore 44 heures à 76°C. Après refroidissement, le mélange réactionnel est dilué dans 30 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est traitée 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, puis lavée 2 fois par 5 cm3 d'eau et 1 fois par 5 cm3 d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage sur sulfate de sodium anhydre, filtration et concentration à sec sous

pression réduite, on obtient, après purification par chromatographié sur couche mince de gel de silice en éluant avec un mélange éther éthylique-hexane (3-2 en volumes), avec un rendement de 53 %, 3,7 mg (0,009 mmole) d'un mélange de tbutoxy- carbonyl-3 (méthoxy-4 phényl)-2 phényl-4 méthoxycarbonyl-5 oxazolidine-1,3- (2R,4S,5S) et de tbutoxycarbonyl-3 (méthoxy-4 ρhényl)-2 phényl-4 méthoxy- carbonyl-5 oxazolidine-l,3-(2S,4S,5S) dans le rapport 74/26.