La présente invention concerne un procédé de préparation de taxoïdes de formule générale :

OCOC ₆ H ₅ dans laquelle :

- Ri représente un atome d'hydrogène ou un radical de formule générale :

ÔH dans laquelle

Ar représente un radical aryle, et R2 représente un radical benzoyle éventuellement substitué, furoyle ou thénoyle, ou un radical R3-O-CO dans lequel R3 représente un radical alcoyle, alcényle, alcynyle, cycloalcoyle, cycloalcényle, bicycloalcoyle, phényle ou hétérocyclyle.

Plus particulièrement la présente invention concerne la préparation des produits de formule générale (I) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical de formule générale (II) dans laquelle : Ar représente un radical aryle,

R2 représente un radical benzoyle éventuellement substitué, furoyle ou thénoyle, ou un radical R3-O-CO- dans lequel R3 représente : - un radical alcoyle droit ou ramifié contenant 1 à 8 atomes de carbone, alcényle contenant 2 à 8 atomes de carbone, alcynyle contenant 3 à 8 atomes de carbone, cycloalcoyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, cycloalcényle contenant 4 à 6 atomes de carbone ou bicycloalcoyle contenant 7 à 10 atomes de carbone, ces radicaux étant éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi les atomes de fluor ou de chlore et les radicaux hydroxy, alcoxy contenant 1 à

4 atomes de carbone, dialcoylamino dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, pipéridino, morpholino, pipérazinyl-1 (éventuellement substitué en -4 par un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone ou par un radical phénylalcoyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone), cycloalcoyle contenant 3 à 6 atomes de carbone, cycloalcényle contenant 4 à 6 atomes de carbone, phényle, cyano, carboxy ou alcoxycarbonyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, - un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone et alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, - ou un radical hétérocyclyle azoté saturé contenant 4 à 6 chaînons éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone, étant entendu que les radicaux cycloalcoyles, cycloalcényles ou bicycloalcoyles peuvent être éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone. De préférence, les radicaux aryles représentés par Ar sont des radicaux phényles ou α- ou β-naphtyles éventuellement substitués par un ou plusieurs atomes ou radicaux choisis parmi les atomes d'halogène (fluor, chlore, brome, iode) et les radicaux alcoyles, alcényles, alcynyles, aryles, aralcoyles, alcoxy, alcoylthio, aryloxy, arylthio, hydroxy, hydroxyalcoyle, mercapto, formyle, acyle, acylamino, aroylamino, alcoxycarbonylamino, amino, alcoylamino, dialcoylamino, carboxy, alcoxycarbonyle, carbamoyle, dialcoylcarbamoyle, cyano, nitro et trifluorométhyle, étant entendu que les radicaux alcoyles et les portions alcoyles des autres radicaux contiennent 1 à 4 atomes de carbone et que les radicaux alcényles et alcynyles contiennent 2 à 8 atomes de carbone et que les radicaux aryles sont des radicaux phényles ou α- ou β- naphtyles.

De préférence, les radicaux hétérocycliques représentés par Ar sont des radicaux hétérocycliques aromatiques ayant 5 chaînons et contenant 1 ou plusieurs atomes, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'azote, d'oxygène ou de soufre, éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'halogène (chlore, fluor, brome, iode) et les radicaux alcoyles contenant 1 à 4 atomes de carbone, aryles contenant 6 à 10 atomes de carbone, amino, alcoylamino contenant 1 à 4 atomes de carbone, dialcoylamino dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, alcoxy-carbonylamino dont la partie alcoxy contient 1 à 4 atomes de carbone, acyle contenant 1 à 4 atomes de carbone, arylcarbonyle dont la partie aryle contient 6 à 10 atomes de carbone,

cyano, carboxy, carbamoyle, alcoylcarbamoyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone, dialcoylcarbamoyle dont chaque partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone ou alcoyloxycarbonyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone.

Plus particulièrement encore, la présente invention concerne la préparation des produits de formule générale (I) dans laquelle R représente un radical de formule générale (II) dans laquelle Ar représente un radical phényle éventuellement substitué par un atome de fluor ou de chlore ou par un radical alcoyle (mêthyle), alcoxy (méthoxy), dialcoylamino (diméthylamino), acylamino (acétylamino), alcoxycarbonylamino (tert-butoxycarbonylamino) ou trifluorométhyle ou un radical fhiényle-2 ou -3 ou furyle-2 ou -3, et R2 représente un radical benzoyle ou un radical R3-O-CO- pour lequel R3 représente un radical t.butyle

Les produits de formule générale (I) dans laquelle R représente un radical de formule générale (II) présentent des propriétés antitumorales et antileucémiques remarquables.

Selon la présente invention, les produits de formule générale (I) peuvent être obtenus par réduction électrolytique d'un produit de formule générale :

0C0C ₆ H ₅ dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical acétyle, alcoxyacétyle dont la partie alcoxy contient 1 à 4 atomes de carbone tel que méthoxyacetyle, alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone tel que méthyle ou alcoxycarbonyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone.tel que méthoxycarbonyle et Z représente un atome d'hydrogène ou un radical de formule générale :

0- R _t

dans laquelle Ar et R2 sont définis comme précédemment, ou bien R4 représente un atome d'hydrogène et R5 représente un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur de la fonction hydroxy ou bien R4 et R5 forment ensemble un hétérocycle saturé à 5 ou 6 chaînons, pour obtenir le produit de formule générale :

OCOC g H ₅ dans lesquelles Zj est défini comme précédemment suivie, si nécessaire, lorsque Zj représente un radical de formule générale (IV) du remplacement des groupements protecteurs représentés par R4 et/ou R4 et R5 par des atomes d'hydrogène, étant entendu que lorsque R4 et R5 représentent chacun un atome d'hydrogène, le produit de formule générale (V) est identique au produit de formule générale (I) dans laquelle Ri représente un radical de formule générale (II).

Selon l'invention, le remplacement du groupement R-O- par un atome d'hydrogène est effectué par voie électrochimique selon la réaction suivante :

O COC ₆ H ₅ La réduction électrolytique à partir d'un produit de formule générale (III) est réalisée dans un électrolyseur contenant un catholyte constitué d'un électrolyte support contenant des ions cérium (Ce^ ⁺ ), Ca2 ⁺ > Mg2 ⁺ ou NH-4+ et d'un solvant ou mélange de solvants dans lequel est dissous le produit de formule générale (III) à une concentration comprise entre 0,1 g 1 et la saturation de la solution. De préférence, lorsque R représente un radical hydroxy, l'électolyte contient des ions Ce^ ⁺ , et, lorsque R représente un radical acétyle ou alcoxyacétyle, l'électrolyte contient des ions NH4+-

La quantité d'électricité théorique nécessaire pour effectuer la réduction d'un produit de formule générale (III) en produit de formule générale (I) est de 2 Faradays (ou 193.000 coulombs) par mole.

Préférentiellement, la réduction s'effectue dans un électrolyseur à diaphragme.

Selon un mode de mise en oeuvre du procédé selon l'invention, la réduction électrolytique est effectuée dans un électrolyseur comportant une cathode, un compartiment cathodique, un diaphragme séparateur, un compartiment anodique et une anode dont les caractéristiques sont les suivantes :

a) la cathode est constituée d'un matériau conducteur de l'électricité sur lequel la réduction a lieu à un potentiel supérieur à celui de la réduction du solvant ou de l'un des constituants de l'électrolyte support, ou à un potentiel tel que la réduction du solvant ou de l'un des constituants de l'électrolyte support n'est pas suffisamment importante pour gêner la réduction du produit,

b) le compartiment cathodique contient le catholyte qui est constitué d'une solution du produit de formule générale (III) dans un milieu organique ou hydroorganique et d'un électrolyte contenant des ions cérium (Ce^ ⁺ ) calcium ou magnésium.

c) le diaphragme séparateur est constitué d'un matériau poreux tel qu'une plaque, un manchon ou une bougie de verre fritte ou de porcelaine ou par une membrane échangeuse d'ions, de préférence une membrane échangeuse de cations,

d) le compartiment anodique contient l'anolyte constitué de préférence par le même solvant ou mélange de solvants et le même électrolyte support que celui qui est utilisé dans le compartiment cathodique. L'anolyte peut aussi être constitué d'une solution acide qui, par l'intermédiaire d'une membrane échangeuse de cations, permet de maintenir le pH dans le catholyte au cours de l'électrolyse. De préférence on utilise de l'acide chlorhydrique dilué dans du méthanol.

e) l'anode est constituée d'un matériau conducteur de l'électricité dont la nature n'est pas essentielle à la mise en oeuvre du procédé.

Généralement, l'anode est constituée par un matériau conducteur de l'électricité inattaquable dans les conditions de l'électrolyse, tel que par exemple le platine poli, massif ou sur support conducteur, le graphite ou le carbone vitreux. De préférence, la cathode est constituée par une nappe de mercure.

L'électrolyte support est constitué d'un sel de cérium, de calcium, de magnésium ou d'ammonium tel que le chlorure de cérium, le chlorure de calcium, le chlorure de magnésium ou le chlorure d'ammonium, soluble dans le solvant ou le mélange de solvants. Généralement, on utilise des solvants protiques qui solubilisent facilement les produits de formule générale (I), (III) et (V) et qui permettent un isolement facile des produits de formule générale (I) et/ou (V). De préférence, les solvants seront choisis parmi les alcools aliphatiques contenant 1 à 4 atomes de carbone tels que le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol ou le t.butanol.

Le pH doit être compatible avec la stabilité du substrat. Il est maintenu constant par migration des ions H ⁺ de l'anolyte vers le catholyte à travers la membrane échangeuse de cations.

La nature du diaphragme séparant l'anolyte du catholyte n'est pas une caractéristique essentielle de l'invention. C'est ainsi qu'on peut utiliser tout diaphragme de type connu, constitué par un matériau poreux comme le verre fritte, la porcelaine avec ou sans gel conducteur limitant la diffusion des réactifs ou par des membranes échangeuses d'ions de préférence échangeuses de cations. Les membranes peuvent être de type homogène ou hétérogène et elles peuvent éventuellement être renforcées par une trame. De préférence sont utilisées des membranes qui ne gonflent pas, qui ne gaufrent pas et qui sont stables en présence des divers constituants de l'anolyte et du catholyte.

Selon un mode de mise en oeuvre préféré de l'invention, l'anode, la cathode et le diaphragme séparateur sont disposés selon des plans parallèles de préférence horizontaux dans le cas d'une cathode constituée par une nappe de mercure.

La température du bain d'électrolyse est généralement comprise entre 0 et 30°C.

L'électrolyse est effectuée à potentiel contrôlé, celui-ci peut être fixé environ entre -1,60 et -1,85 volt par rapport à une électrode de référence au calomel, de préférence à -1,75 volt.

La quantité théorique d'électricité mise en oeuvre est de 2 Faradays (ou 193.000 coulombs) par mole d'un produit de formule générale (III). Pratiquement la quantité d'électricité utilisée peut êtrejusqu'à 20 fois la quantité théorique.

Le catholyte peut être mis en circulation par exemple sous l'action d'une pompe. Le circuit peut en outre comprendre des dispositifs annexes tels qu'échangeurs de température ou vases d'expansion ; un tel vase d'expansion permet en particulier d'alimenter le catholyte en produit de formule générale (III) et permet

également d'effectuer un soutirage pour l'extraction des produits de formule générale (I) et/ou (V).

L'anolyte peut également être soumis à une circulation. Selon un mode préférentiel de réalisation de l'invention, le circuit du catholyte est similaire à celui de l'anolyte, ce qui permet d'équilibrer les pressions de part et d'autre du diaphragme séparateur.

Selon un autre mode de mise en oeuvre particulier de l'invention, on dispose des intercalaires dans les compartiments anodique et cathodique. Ces intercalaires servent à éviter, d'une part, les déformations de la membrane échangeuse d'ions et, d'autre part, les contacts de cette membrane avec les électrodes. Ils servent également à améliorer l'homogénéité de concentration du catholyte.

En l'absence d'intercalaire, la vitesse de circulation du catholyte dans le compartiment cathodique est habituellement supérieure à 10 cm/s, de préférence supérieure à 50 cm/s. Lorsque l'on utilise un intercalaire, la vitesse apparente du catholyte (vitesse dans le compartiment cathodique supposé sans intercalaire) est habituellement supérieure à 1 cm/s, de préférence supérieure à 10 cm/s.

Selon un autre mode de mise en oeuvre de l'invention, la cellule peut être constituée simplement d'un récipient, parallélépipédique ou cylindrique, en une matière inerte vis-à-vis des constituants des électrolytes. Ce récipient contient l'électrode de travail dont la nature est la même que celle définie pour le premier genre de cellule. La forme de cette électrode de travail est adaptée à la forme du récipient.

D'une façon générale, toute cellule électrolytique comportant une anode et une cathode séparées par un ou plusieurs diaphragmes assurant la conductibilité ionique est susceptible d'être employée, la disposition des éléments n'étant pas essentielle à la mise en oeuvre du procédé.

Les produits de formule générale (I) obtenus par la mise en oeuvre du procédé selon l'invention sont séparés et purifiés par application des méthodes habituelles.

Lorsque, dans les produits de formules générales (V), Z\ représente un radical de formule générale (IV) dans laquelle les symboles R5 et/ou R4 et R5 représentent des groupements protecteurs de la fonction hydroxy, leur remplacement par des atomes d'hydrogène peut être effectué, selon leur nature, de la manière suivante :

1) lorsque R4 représente un atome d'hydrogène et R5 représente un groupement protecteur de la fonction hydroxy choisi, de préférence, parmi les radicaux, méthoxyméthyle, éthoxy-1 éthyle, benzyloxyméthyle, triméthylsilyle, triéthylsilyle, (β-triméthylsilyléthoxy) méthyle ou tétrahydropyrannyle, son remplacement par un atome d'hydrogène peut être effectué en traitant le produit de formule générale (V) par un acide minéral (acide chlorhydrique, sulfurique, fluorhydrique) ou organique (acide formique, acétique, méthanesulfonique, trifluorométhanesulfonique, p.toluène- sulfonique) utilisé seul ou en mélange en opérant dans un solvant organique choisi parmi les alcools, les éthers, les hydrocarbures aliphatiques, les hydrocarbures aliphatiques halogènes, les hydrocarbures aromatiques ou les nitriles à une température comprise entre -10 et 60°C.

2) lorsque R4 et R5 forment ensemble un hétérocycle saturé à 5 ou 6 chaînons et plus particulièrement un cycle oxazolidine de formule générale :

dans laquelle Ar et R2 sont définis comme précédemment, R6 et R7, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone, ou un radical aralcoyle dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atomes de carbone et la partie aryle représente, de préférence, un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, ou un radical aryle représentant, de préférence un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone, ou bien R5 représente un radical alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ou un radical trihalométhyle tel que trichlorométhyle ou un radical phényle substitué par un radical trihalométhyle tel que trichlorométhyle et R7 représente un atome d'hydrogène, ou bien R5 et R7 forment ensemble avec l'atome de carbone auquel ils sont liés un cycle ayant 4 à 7 chaînons, le remplacement des groupements protecteurs par des atomes d'hydrogène peut être effectué, selon les significations de R2, Rό et R7, de la manière suivante : a) lorsque R2 représente un radical t.butoxycarbonyle, R6 et R7, identiques ou différents, représentent un radical alcoyle ou un radical aralcoyle (benzyle) ou

aryle (phényle), ou bien R5 représente un radical trihalométhyle ou un radical phényle substitué par un radical trihalométhyle et R7 représente un atome d'hydrogène, ou bien R6 et R7 forment ensemble un cycle ayant de 4 à 7 chaînons, le traitement d'un produit de formule générale (V) par un acide minéral ou organique éventuellement dans un solvant organique tel qu'un alcool conduit au produit de formule générale :

0C0C ₆ H ₅ dans laquelle Ar est défini comme précédemment, qui est acylé au moyen de chlorure de benzoyle éventuellement, de furoyle ou de thénoyle ou d'un produit de formule générale :

R3-O-CO-X (VIII)

dans laquelle R3 est défini comme précédemment et X représente un atome d'halogène (fluor, chlore) ou un reste -O-R3 ou -O-CO-O-R3 pour fournir un produit de formule générale (I). De préférence, le produit de formule générale (V) est traité par l'acide formique à une température voisine de 20°C.

De préférence, l'acylation du produit de formule générale (VII) au moyen d'un produit de formule générale (VIII) est effectuée dans un solvant organique inerte choisi parmi les esters tels que l'acétate d'éthyle, l'acétate d'isopropyle ou l'acétate de n.butyle et les hydrocarbures aliphatiques halogènes tels que le dichlorométhane ou le dichloro-1,2 éthane en présence d'une base minérale telle que le bicarbonate de sodium ou organique telle que la triéthylamine. La réaction est effectuée à une température comprise entre 0 et 50°C, de préférence voisine de 20°C.

b) lorsque R2 représente un radical benzoyle éventuellement substitué, furoyl ou thénoyle ou un radical R3-O-CO- dans lequel R3 est défini comme précédemment, R^ représente un atome d'hydrogène ou un radical alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone ou un radical phényle substitué par un ou plusieurs radicaux

alcoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone et R7 représente un atome d'hydrogène, le remplacement des groupements protecteurs par des atomes d'hydrogène s'effectue en présence d'un acide minéral (acide chlorhydrique, acide sulfurique) ou organique (acide acétique, acide méthane-sulfonique, acide trifluorométhanesulfonique, acide p.toluènesulfonique) utilisé seul ou en mélange, en opérant dans un solvant organique choisi parmi les alcools, les éthers, les esters, les hydrocarbures aliphatiques, les hydrocarbures aliphatiques halogènes et les hydrocarbures aromatiques à une température comprise entre -10 et 60°C, de préférence entre 15 et 30°C. L'acide peut être utilisé en quantité catalytique ou stoechiométrique. Les produits de formule générale (III) peuvent être obtenus selon les procédés décrits dans la demande internationale PCT WO 94/13654.

Les produits de formule générale (I) obtenus par la mise en oeuvre du procédé selon l'invention peuvent être purifiés selon les méhodes connues telles que la cristallisation ou la chromatographie. Les produits de formule générale (I) dans laquelle Rj représente un radical de formule générale (II) obtenus selon le procédé de la présente invention présentent des propriétés biologiques remarquables

In vitro, la mesure de l'activité biologique est effectuée sur la tubuline extraite de cerveau de porc par la méthode de M.L. Shelanski et coll., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 70, 765-768 (1973). L'étude de la dépolymérisation des microtu- bules en tubuline est effectuée selon la méthode de G. Chauvière et coll., C.R. Acad. Sci., 293. série II, 501-503 (1981). Dans cette étude les produits de formule générale (I) se sont montrés au moins aussi actifs que le Taxol® et le Taxotère®.

Les produits de formule générale (I) dans laquelle Rj représente un radical de formule générale (II) obtenus selon le procédé de la présente invention manifestent une activité inhibitrice significative de la prolifération cellulaire anormale et possèdent des propriétés thérapeutiques permettant le traitement de malades ayant des conditions pathologiques associées à une prolifération cellulaire anormale. Les conditions pathologiques incluent la prolifération cellulaire anormale de cellules malignes ou non malignes de divers tissus et/ou organes, comprenant, de manière non limitative, les tissus musculaires, osseux ou conjonctifs, la peau, le cerveau, les poumons, les organes sexuels, les systèmes lymphatiques ou rénaux, les cellules mammaires ou sanguines, le foie, l'appareil digestif, le pancréas et les glandes thyroïdes ou adrénales. Ces conditions pathologiques peuvent inclure également le psoriasis, les tumeurs solides, les cancers de l'ovaire, du sein, du

cerveau, de la prostate, du colon, de l'estomac, du rein ou des testicules, le sarcome de Kaposi, le cholangiocarcinome, le choriocarcinome, le neuroblastome, la tumeur de Wilms, la maladie de Hodgkin, les mélanomes, les myélomes multiples, les leucémies lymphocytaires chroniques, les lymphomes granulocytaires aigus ou chroniques. Les produits préparés par le nouveau procédé selon l'invention sont particulièrement utiles pour le traitement du cancer de l'ovaire. Les produits selon l'invention peuvent être utilisés pour prévenir ou retarder l'apparition ou la réapparition des conditions pathologiques ou pour traiter ces conditions pathologiques. Les produits obtenus selon le procédé de la présente invention peuvent être administrés à un malade selon différentes formes adaptées à la voie d'administration choisie qui, de préférence, est la voie parentérale. L'administration par voie parentérale comprend les administrations intraveineuse, intrapéritonéale, intramusculaire ou sous-cutanée. Plus particulièrement préférée est l'administration intrapéritonéale ou intraveineuse.

La présente invention comprend également les compositions pharmaceu¬ tiques qui contiennent au moins un produit de formule générale (I), obtenu selon le procédé de la présente invention, en une quantité suffisante adaptée à l'emploi en thérapeutique humaine ou vétérinaire. Les compositions peuvent être préparées selon les méthodes habituelles en utilisant un ou plusieurs adjuvants, supports ou excipients pharmaceutiquement acceptables. Les supports convenables incluent les diluants, les milieux aqueux stériles et divers solvants non toxiques. De préférence les compositions se présentent sous forme de solutions ou de suspensions aqueuses, de solutions injectables qui peuvent contenir des agents émusifiants, des colorants, des préservatifs ou des stabilisants.

Le choix des adjuvants ou excipients peut être déterminé par la solubilité et les propriétés chimiques du produit, le mode particulier d'administration et les bonnes pratiques pharmaceutiques.

Pour l'administration parentérale, on utilise des solutions ou des suspen- sions stériles aqueuses ou non aqueuses. Pour la préparation de solutions ou de sus¬ pensions non aqueuses peuvent être utilisés des huiles végétales naturelles telle que l'huile d'olive, l'huile de sésame ou l'huile de paraffine ou les esters organiques injectables tel que l'oléate d'éthyle. Les solutions stériles aqueuses peuvent être constituées d'une solution d'un sel pharmaceutiquement acceptable en solution dans de l'eau. Les solutions aqueuses conviennent pour l'administration intraveineuse

dans la mesure où le pH est convenablement ajusté et où l'isotonicité est réalisée, par exemple, par une quantité suffisante de chlorure de sodium ou de glucose. La stérélisation peut être réalisée par chauffage ou par tout autre moyen qui n'altère pas la composition. II est bien entendu que tous les produits entrant dans les compositions selon l'invention doivent être purs et non toxiques pour les quantités utilisées.

Les compositions peuvent contenir au moins 0,01 % de produit thérapeuti- quement actif. La quantité de produit actif dans une composition est telle qu'une posologie convenable puisse être prescrite. De préférence, les compositions sont préparées de telle façon qu'une dose unitaire contienne de 0,01 à 1000 mg environ de produit actif pour l'administration par voie parentérale.

Le traitement thérapeutique peut être effectué concuremment avec d'autres traitements thérapeutiques incluant des médicaments antinéoplastiques , des anti¬ corps monoclonaux, des thérapies immunologiques ou des radiothérapies ou des modificateurs des réponses biologiques. Les modificateurs des réponses incluent, de manière non limitative, les lymphokines et les cytokines telles que les interleu- kines, les interférons (α, β ou δ) et le TNF. D'autres agents chimiothérapeutiques utiles dans le traitement des désordres dus à la prolifération anormale des cellules incluent, de manière non limitative, les agents alkylants tels que les moutardes à l'azote comme la mechloretamine, le cyclophosphamide, le melphalan et le chlorambucil, des sulfonates d'alkyle comme le busulfan, les nitrosourées comme la carmustine, la lomusine, la sémustine et la streptozocine, les triazènes comme la dacarbazine, les antimétabolites comme les analogues de l'acide folique tel que le méthotrexate, les analogues de pyrimidine comme le fluorouracil et la cytarabine, des analogues de purines comme la mercaptopurine et la thioguanine, des produits naturels tels que les alcaloïdes de vinca comme la vinblastine, la vincristine et la vendésine, des épipodophyllotoxines comme l'étoposide et le teniposide, des anti¬ biotiques comme la dactinomycine, la daunorubicine, la doxorubicine, la bléomy- cine, la plicamycine et la mitomycine, des enzymes comme la L-asparaginase, des agents divers comme les complexes de coordination du platine tel que le cisplatine, les urées substituées tel que l'hydroxyurée, les dérivés de méthylhydrazine comme la procarbazine, les suppresseurs adrénocoticoïques comme le mitotane et l'amino- glutéthymide, les hormones et les antagonistes comme les adrénocorticostéroïdes comme la prednisone, les progestines comme le caproate d'hydroxyprogestérone, l'acétate de méthoxyprogestérone et l'acétate de megestrol, les oestrogènes comme

le diéthylstilbestrol et l'éthynylestradiol, les antioestrogène comme le tamoxifène, les androgènes comme le propionate de testostérone et la fluoxymesterone.

Les doses utilisées pour mettre en oeuvre les méthodes selon l'invention sont celles qui permettent un traitement prophylactique ou un maximum de réponse thérapeutique. Les doses varient selon la forme d'administration, le produit particu¬ lier sélectionné et les caractéristiques propres du sujet à traiter. En général, les doses sont celles qui sont thérapeutique ent efficaces pour le traitement des désordres dus à une prolifération cellulaire anormale. Les produits selon l'invention peuvent être administrés aussi souvent que nécessaire pour obtenir l'effet thérapeu- tique désiré. Certains malades peuvent répondre rapidement à des doses relative- mem >rtes ou faibles puis avoir besoin de doses d'entretien faibles ou nulles. Généralement, de faibles doses seront utilisées au début du traitement et, si néces¬ saire, des doses de plus en plus fortes seront administrées jusqu'à l'obtention d'un effet optimum. Pour d'autres malades il peut être nécessaire d'administrer des doses d'entretien 1 à 8 fois par jour, de préférence 1 à 4 fois, selon les besoins physiolo¬ giques du malade considéré. Il est aussi possible que pour certains malades il soit nécessaire de n'utiliser qu'une à deux administrations journalières.

Chez l'homme, les doses sont généralement comprises entre 0,01 et 200 mg/kg. Par voie intrapéritonéale, les doses seront en général comprises entre 0,1 et 100 mg/kg et, de préférence entre 0,5 et 50 mg/kg et, encore plus spécifiquement entre 1 et 10 mg/kg. Par voie intraveineuse, les doses sont généralement comprises entre 0,1 et 50 mg/kg et, de préférence entre 0,1 et 5 mg/kg et, encore plus spécifiquement entre 1 et 2 mg/kg. Il est entendu que, pour choisir le dosage le plus approprié, devront être pris en compte la voie d'administration, le poids du malade, son état de santé général, son âge et tous les facteurs qui peuvent influer sur l'efficacité du traitement.

Les exemples suivants illustrent la présente invention.

EXEMPLE 1

On procède à la réduction électrolytique du t.butoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2 époxy-5β,20 diihydroxy-l,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13 dans une cellule d'électrolyse possédant les caractéristiques suivantes :

- la cellule est un vase de verre de 25 cm3 divisé en deux compartiments par une membrane échangeuse de cations,

- la cathode est une nappe de mercure dont la surface utile est d'environ 4 cm2,

- l'anode est une grille de platine,

- l'électrode de référence est une électrode au calomel saturée.

Dans le compartiment cathodique, on introduit 10 cm3 d'une solution contenant :

- t.butoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2 époxy-5β,20 dihydroxy-l,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α 31,6 mg

- chlorure de cérium 0.033M - méthanol q.s.p. 10 cm3

Dans le compartiment anodique, on introduit 10 cm3 d'acide chlorhydrique 0,1 M dans du méthanol.

Après désaération de la solution pendant 10 minutes par barbotage d'un courant d'argon, qui est maintenu pendant toute la durée de l'électrolyse, le potentiel de la cathode est fixé à -1,65 volt par rapport à l'électrode de référence au début de l'électrolyse, puis à -1,7 volt après le passage de 15,4 coulombs puis à -1,75 volt après le passage de 38,5 coulombs.

On électrolyse la solution pendant 2 heures 44 minutes c'est-à-dire pendant le temps nécessaire au passage de 171 coulombs. A l'électrolysat, on ajoute 100 μl d'une solution méthanolique 0,1 M d'acétate de sodium pour neutraliser partiellement l'acidité du milieu.

Après élimination du solvant sous pression réduite à une température inférieure à 35°C, on reprend le résidu par 10 cm3 d'acétate d'éthyle et 10 cm3 d'eau permutée. Après décantation, la phase aqueuse est extraite par 2 fois 5 cm3 d'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont lavées par 10 cm3 d'une solution aqueuse 0,1M de tampon phosphate de sodium pH=7 puis séchées sur sulfate de magnésium. Après filtration et concentration à sec sous pression réduite à une température inférieure à 35°C, on obtient 25,4 mg d'un produit brut qui est purifié par chromatographie préparative en couche mince (0,25 mm) sur 4 plaques de silice (kieselgel 60 F 254 ; Merck) en éluant avec un mélange dichlorométhane-acétonitrile- méthanol (85-11-4 en volumes).

On obtient, par élution de la zone correspondant au produit principal par un mélange dichlorométhane-méthanol (90-10 en volumes) puis évaporation du solvant sous pression réduite, avec un rendement de 48 %, 15,0 mg de t.butoxycarbonyl- amino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-

5β,20 hydroxy-lβ méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre de résonance magnétique nucléaire du proton (300MHz ; CDCI3 ; température : 333°K ; déplacements chimiques en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,23 (s, 3H : CH^ enlό ou 17) ; 1,26 (s, 3H : -CH3 en 16 ou 17) ; 1,34 [s, 9H : -C(CH3_) ₃ ] ; de 1,35 à 1,50 (mt, 1H : -H en 7) ; 1,63 [dd, J = 7,5 et 5,5, 1H -(CH)-H du cyclopropane] ; 1,73 (s, 3H : -CH3 en 18) ; 1,84 (s, 1H : -OH en 1) ; 2,11 [d large, J = 17,5, 1H : -(CH)-H en 6] ; 2,19 [dd, J = 10,5 et 5,5, 1H : -(CH)-H du cyclopropane] ; 2,25 [dd, J = 16 et 9, 1H : -(CH)-H en 14] ; de 2,35 à 2,50 (mt, 2H : - (CH)-H en 6 et -(CH)-H en 14] ; 2,36 (s, 3H : -COCH3) ; 3,27 (mf, 1H : -OH en 2') ; 3,43 [d large, J = 17, 1H : -(CH)-H en 10] ; 3,71 (d, J = 17, 1H -(CH)-H en 10] ; 3,99 (d, , = 7, 1H : -H en 3) ; 4,08 et 4,32 (2d, J = 8, 1H chacun : >CU2 en 20) ; 4,33 (d, J.= 7, 1H : -H en 3) ; 4,61 (s large, 1H : -H en 2') ; 4,74 (d large, J = 4,5, lH_en 5) ; 5,27 (d large, J = 10, 1H : -H en 3') ; 5,37 (d, J = 10, 1H : -CONH-) ; 5,71 (d, J = 7, 1H : -H en 2) ; 6,18 (t large, J = 9, 1H : -H en 13) ; de 7,3 à 7,50 (mt, 5H -C^s en 3') ; 7,51 [t, J = 7,5, 2H : -OCOC ₆ H ₅ (-H en 3 et -H en 5)] ; 7,61 [t, J = 7,5, 1H : - OCOC6H5 (-H en 4)] ; 8,15 [d, J = 7,5 : 2H : -OCOC6H5 (-H en 2 et -H en 6)].

Le t.butoxycarbonylamino-3 phényl-3 hydroxy-2 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2 époxy-5β,20 dihydroxy-l,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α peut être préparé de la manière suivante :

Une solution de 2,01 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α dans 20 cm3 d'acide formique est agitée pendant 4 heures à une température voisine de 20°C puis concentrée à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C. La meringue obtenue est dissoute dans 100 cm3 de dichlorométhane et la solution obtenue est additionnée de 20 cm3 d'une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium. La phase aqueuse est séparée par décantation et extraite par 20 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient 1,95 g d'une meringue blanche que l'on purifie par chromatogra hie sur 200 g de silice (0,063- 0,2 mm) contenus dans une colonne de 7 cm de diamètre en éluant avec un mélange dichlorométhane-méthanol (98-2 en volumes) en recueillant des fractions de 30 cm3. Les fractions ne contenant que le produit cherché sont réunies et concentrées à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C pendant 2 heures. On obtient ainsi 1,57 g

d'amino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate-(2R,3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ.lOβ méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α sous forme d'une meringue blanche.

A une solution de 400 mg d'amino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate- (2R.3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α éρoxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13α dans 1 cm3 de dichlorométhane, maintenue sous atmosphère d'argon, on ajoute 60 mg d'hydrogénocarbonate de sodium puis goutte à goutte, à une température voisine de 20°C, une solution de 0,16 g de dicarbonate de di.tert-butyle dans 1 cm3 de dichlorométhane. La solution obtenue est agitée pendant 64 heures à une température voisine de 20°C puis additionnée d'un mélange de 5 cm3 d'eau distillée et de 10 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est lavée par 3 fois 2 cm3 d'eau distillée. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient ainsi 317 mg d'une meringue blanche que l'on purifie par chromatographie sur 30 g de silice (0,063-0,2 mm) contenus dans une colonne de 3 cm de diamètre en éluant avec un mélange dichlorométhane-méthanol (95-5 en volumes) en recueillant des fractions de 5 cm3. Les fractions ne contenant que le produit cherché sont réunies et concentrées à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C pendant 2 heures. On obtient ainsi 161 mg de tert-butoxycarbonylamino-3 hydroxy-2 phényl-3 propionate- (2R.3S) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13 sous forme d'une meringue blanche dont les caractéristiques sont les suivantes :

- pouvoir rotatoire : = . 17° ( _c = 0,482 ; méthanol)

- spectre de RMN (400 MHz ; CDCI3 ; température de 323 K ; δ en ppm ; constantes de couplage J en Hz) : 1,21 (s, 3H : -CH ₃ 16 ou 17) ; 1,28 (s, 3H : -CH ₃ 16 ou 17) ;

1,34 [s, 9H : -C(CH ₃ ) ₃ ] ; de 1,30 à 1,50 (mt, IH : -H_7) ; 1,80 et 2,36 (2mt, IH chacun : -CH - du cyclopropane) ; 1,88 (s, 3H : -CH3 18) ; 2,13 [mt, IH : -(CH)-H 6] ; 2,26 [dd, IH, J = 15 et 8,5 : -(CH)-H 14] ; 2,35 (s, 3H : -COCH3) ; de 2,35 à 2,50 [mt, 2H : -(CH) -H 14 et -(CH)-H 6] ; 3,21 (d, IH, J = 4 : -OH 2') ; 4,08 [d, IH, J = 8 : -(CH)-H 20] ; 4,16 (d, IH, J = 7 : -H 3) ; 4,18 (s, IH, -OH 10) ; 4,31 [d, IH, J = 8 : -(CH)-H 20] : 4,61 (dd, IH, J = 4 et 2 : -H 2') ; 4,74 (d, IH, J = 4 : -H 5) ; 5,00 (s, IH : -H 10) ; 5,26 (dd, IH, J = 9 et 2 : -H 3') ; 5,33 (d, IH, J = 9 : -NH 3') ; 5,69 (d, IH, J = 7 : -H 2) ; 6,29 (d, IH, J = 8,5 : -H 13) ; de 7,30 à 7,50 [mt, 5H : -C ₆ H ₅ en 3' (-H 2 à -H 6)] ; 7,51 [t, 2H, J = 7,5 : -OCOC ₆ H ₅ (-H 3 et H 5)] ; 7,60 [t, IH, J = 7,5 : -OCOC ₆ H ₅ (-H 4)] ; 8,14 [d, 2H, J = 7,5 : -OCOC ₆ H ₅ (-H 2 et H 6)].

Le tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5- (4S.5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13oc peut être préparé de la manière suivante :

A une solution de 2,5 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β oxo-9 trifluorométhanesulfonyloxy-7β taxène-11 yle-13α dans 25 cm3 d'acétonitrile anhydre et 3 cm3 de tétrahydrofuranne anhydre, maintenue sous atmosphère d'argon, on ajoute 2,5 g d'azoture de sodium. Le mélange réactiormel est chauffé pendant 2 heures sous agitation et sous atmosphère d'argon à une température voisine de 80°C, puis refroidi à une température voisine de 20°C et additionné de 30 cm3 d'eau distillée. La phase aqueuse est séparée par décantation puis extraite par 20 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques rassemblées sont séchées sur sulfate de magnésium, filtrées puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient ainsi 2,44 g d'une meringue jaune que l'on purifie par chromatographie sur 300 g de silice (0,063-0,2 mm) contenus dans une colonne de 8 cm de diamètre en éluant avec un mélange dichlorométhane-acétate d'éthyle (90-10 en volumes) en recueillant des fractions de 60 cm3. Les fractions 47 à 70 sont réunies et concentrées à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C pendant 2 heures. On obtient ainsi 2,01 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine- carboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β méthylène-7β,8β oxo-9 nor-19 taxène-11 yle-13 sous forme d'une meringue blanche.

Le tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5- (4S.5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2 époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β oxo-9 trifluoro- méthanesulfonyloxy-7β taxène-11 yle-13α peut être préparé de la manière suivante :

A une solution de 2,86 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 trihy- droxy-lβ,7β,10β oxo-9 taxène-11 yle-13α dans 29 cm3 de dichlorométhane anhydre, maintenue sous atmosphère d'argon, on ajoute 0,955 cm3 de pyridine et 50 mg de tamis moléculaire 4À activé en poudre. Le mélange réactionnel est refroidi à une température voisine de -35°C, additionné lentement de 0,85 cm3 d'anhydride trifluorométhanesulfonique, agité à une température voisine de -5°C pendant 15 minutes et additionné de 10 cm3 d'eau distillée. Après filtration sur verre fritte garni de célite et rinçage du verre fritte par 3 fois 10 cm3 d'un mélange méthanol- dichlorométhane (10-90 en volumes), la phase aqueuse est séparée par décantation et

extraite par 2 fois 10 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient 3,87 g d'une meringue blanche que l'on purifie par chromatographie sur 400 g de silice (0,063-0,2 mm) contenus dans une colonne de 10 cm de diamètre en éluant avec un gradient de dichlorométhane-acétate d'éthyle (de 97,5-2,5 à 90-10 en volumes) en recueillant des fractions de 80 cm3. Les fractions ne contenant que le produit cherché sont réunies et concentrées à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C pendant 2 heures. On obtient ainsi 3,0 g de tert- butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 dihydroxy-lβ,10β oxo-9 trifluorométhane- sulfonyloxy-7β taxène-11 yle-13α sous forme d'une meringue blanche.

Le tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5- (4S.5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2 éρoxy-5β,20 trihydroxy-lβ,7β,10β oxo-9 taxène-11 yle-13α peut être préparé de la manière suivante : Une solution de 24,35 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyloxy)-7β,10β hydroxy-lβ taxène-11 yle-13α dans un mélange de 130 cm3 d'acétate d'éthyle et de 46,5 cm3 d'acide acétique est chauffée sous agitation et sous atmosphère d'argon jusqu'à une température voisine de 60°C puis additionnée de 40 g de zinc en poudre. Le mélange réactiormel est ensuite agité pendant 30 minutes à 60°C puis refroidi à une température voisine de 20°C et filtré sur verre fritte garni de célite. Le verre fritte est lavé par 100 cm3 d'un mélange méthanol-dichlorométhane (20-80 en volumes) ; les filtrats sont réunis puis concentrés à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à une température voisine de 40°C. Le résidu est additionné de 500 cm3 de dichlorométhane. La phase organique est lavée par 2 fois 50 cm3 d'une solution aqueuse saturée d'hydrogéno- carbonate de sodium puis par 50 cm3 d'eau distillée. Les phases aqueuses obtenues par décantation sont réunies puis extraites par 2 fois 30 cm3 de dichlorométhane. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à 40°C. On obtient 19,7 g d'une meringue blanche que l'on purifie par chromatographie sur 800 g de silice (0,063- 0,2 mm) contenus dans une colonne de 10 cm de diamètre en éluant avec un gradient dichlorométhane-méthanol (de 100-0 à 97-3 en volumes) en recueillant des fractions de 80 cm3. Les fractions ne contenant que le produit cherché sont réunies et concentrées à sec sous pression réduite (0,27 kPa) à 40°C pendant 2 heures. On

obtient ainsi 16,53 g de tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidine- carboxylate-5-(4S,5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α éρoxy-5β,20 trihydroxy- lβ,7β,10β oxo-9 taxène-11 yle-13 sous forme d'une meringue blanche.

Le tert-butoxycarbonyl-3 diméthyl-2,2 phényl-4 oxazolidinecarboxylate-5- (4S.5R) d'acétoxy-4 benzoyloxy-2α époxy-5β,20 oxo-9 bis-(trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyloxy)-7β,10β hydroxy- lβ taxène-11 yle-13α peut être préparé selon la méthode décrite dans la demande internationale PCT WO 9209589.

EXEMPLE 2

On dissout 40 mg du produit obtenu à l'exemple 1 dans 1 cm3 d'Emulphor EL 620 et 1 cm3 d'éthanol, puis la solution est diluée par addition de 18 cm3 de sérum physiologique.

La composition est administrée par perfusion pendant 1 heure par introduction dans du sérum physiologique.