Arcos Navarrete, Daniel (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Clavel Sainz, Manuel (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Meseguer Olmo, Luis (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Ragel Prudencio, Carmen Victoria (Dpto. Quimica Inorgánica Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria, ES)
Vallet Regi, Maria (Dpto. Quimica Inoregánica Facultad de Farmacia Madrid, E-28040, ES)
Arcos Navarrete, Daniel (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Clavel Sainz, Manuel (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Meseguer Olmo, Luis (Dpto. Quimica Inorgánica y Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria Madrid, E-2804, ES)
Ragel Prudencio, Carmen Victoria (Dpto. Quimica Inorgánica Bioinorgánica Facultad de Farmacia Ciudad Universitaria, ES)
| 1. | Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos, caracterizado por tener lugar en 6 etapas fundamentales (A a F) en las que se lleva a cabo : A) Molienda del vidrio bioactivo hasta conseguir un material en forma de granulado B) Tamización del vidrio granulado recogiendo la fracción comprendida entre 10 y 100 um. C) Mezclado por vía sólida del vidrio con el antibiótico hasta total homogeneización. D) Conformado de la mezcla utilizando una presión uniaxial comprendida entre 50 MPa y 100 MPa y ejercida sobre la mezcla en polvo. E) Impermeabilización de la pieza resultante mediante una o varias envolturas de látex. F) Prensado de la pieza resultante en (D) utilizando una presión isostática comprendida entre 100MPa y 500 MPa. |
| 2. | Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos según reivindicación 1, caracterizado por combinar vidrio bioactivo con un antibiótico. |
| 3. | Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos según reivindicación 2, caracterizado por combinar vidrio bioactivo con un antibiótico del tipo sulfato de gentamicina. |
| 4. | Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos, según reivindicación 1, caracterizado por obtener implantes en forma de piezas compactas. |
| 5. | Método para la obtención de implantes bioactivos, según reivindicaciones anteriores, caracterizado por permitir la liberación del antibiótico cuando es implantado en el tejido óseo. |
| 6. | Método para la obtención de implantes bioactivos, según reivindicaciones anteriores, caracterizado por mantener concentraciones eficaces de antibiótico en hueso durante periodos no inferiores a 12 semanas. |
| 7. | Implante bioactivo obtenido por el método reivindicado en las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque su inserción en el hueso produce la regeneración del tejido óseo y la reabsorción del implante. |
| 8. | Método de acuerdo a las reivindicaciones anteriores para aplicación en cirugía ortopédica y para el tratamiento de infecciones óseas. REIVINDICACIONES MODIFICADAS [recibidas por la Oficina Internacional el 22 de octubre de 2002 (22. 10. 02); reivindicaciones 1 a 8 remplazadas por las reivindicaciones I a 4 (1 página)] 1. Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos, caracterizado por combinar exclusivamente vidrio bioactivo con un antibiótico y cuyo proceso tiene lugar en en 6 etapas fundamentales (A a F) en las que se lleva a cabo : A) Molienda del vidrio bioactivo hasta conseguir un material en forma de granulado B) Tamización del vidrio granulado recogiendo la fracción comprendida entre 10 y 100 um. C) Mezclado por vía sólida del vidrio con el antibiótico hasta total homogeneización. D) Conformado de la mezcla utilizando una presión uniaxial comprendida entre 50 MPa y 100 MPa y ejercida sobre la mezcla en polvo. E) Impermeabilización de la pieza resultante mediante una o varias envolturas de látex. F) Prensado de la pieza resultante en (D) utilizando una presión isostática comprendida entre 100MPa y 500 MPa. |
| 9. | 2 Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos según reivindicación 1, caracterizado por combinar vidrio bioactivo con un antibiótico del tipo sulfato de gentamicina. |
| 10. | 3 Método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos, según reivindicaciones anteriores, caracterizado por obtener implantes en forma de piezas compactas. |
| 11. | 4 Uso del implante bioactivo nara la liberación controlada de antibióticos. |
OBJETO DE LA INVENCIÓN La presente invención se encuadra dentro del campo técnico de fabricación de implantes para cirugía ortopédica. De forma más concreta, la invención se refiere a la obtención de piezas compuestas de vidrio bioactivo y de un antibiótico, que actúen como sistemas de liberación controlada del antibiótico a nivel local. Estos implantes además presentan la capacidad de promover la regeneración del tejido óseo.
ANTECEDENTES La utilización de transportadores o vectores para la liberación local de antibióticos es un aspecto muy interesante tanto en terapéutica como en el campo de la cirugía ortopédica, debido a que la meticulosidad y precisión quirúrgica han demostrado no ser suficientes para el tratamiento de situaciones clínicas donde se ha detectado la presencia de microorganismos infecciosos.
En la bibliografia científica se describe una amplia variedad de sistemas de liberación controlada de fármacos, generalmente constituidos por una matriz polimérica (véase por ejemplo M. F. Yagmurlu et al., J Biomed Mater Res 1999, 46 : 494-503) o por diversos sustratos a los que se les añade el fármaco por impregnación (K. Kawanabeet et al.,. T Bone Joint Surg 1998, 80 : 527 530).
En el campo de la cirugía ortopédica, las formas más habituales de administrar el antibiótico son mezclar el fármaco con el cemento de fijación, en el caso de las prótesis cementadas (M. Takechi et al., JBiomed Mater Res 1998, 39 : 308-316) o bien introducir cuentas de bolas de polimetil metacrilato (PMMA) impregnadas del antibiótico.
Wahlig et al., J Bone Joint Surg Br 1978 ; 60 : 270-275 ; V. Vecsei et al., Clin Orthop 1981 ; 159 : 201-207). En ambos casos, tanto la problemática de alcazar dosis eficaces durante periodos prolongados como la cantidad de fármaco que permanece retenido está
sin resolver en la actualidad. Además, en el caso de las cuentas de PMMA, se requiere de una nueva intervención quirúrgica para retirarlas, lo que implica riesgos y molestias adicionales a los pacientes.
Otros sistemas de liberación controlada implican procedimientos complicados de impregnación (P. B. van Wachem et al., J Biomed Mater Res 1997, 35 : 217-232). Estos consisten en preparar disoluciones saturadas del medicamento en las que se sumergen los sustratos. De este modo, un porcentaje elevado del fármaco queda adsorbido en la superficie del sustrato, lo que conduce en muchos casos a la rápida liberación del fármaco cuando se implanta en el organismo.
Por otra parte, entre los materiales utilizados para relleno y sustitución ósea, los vidrios bioactivos han mostrado poseer excelentes propiedades respecto a su biocompatibilidad y bioactividad, es decir, son capaces de unirse íntimamente al hueso sin interposición de tejido fibroso, promoviendo de este modo la regeneración del mismo (M. Vallet-Reg£ J Chem Soc, Dalton Trans. 2001, 97-108 ; J. Zhon$ D. C. Greenspan US Pat. No 6,171,986). Estos vidrios suelen aplicarse en forma de granulado, lo que en ocasiones dificulta la labor del cirujano por diseminación del material durante la intervención quirúrgica.
Se pueden preparar piezas con estos vidrios y con antibióticos para su liberación controlada si se combinan con polímeros bioestables (CV Ragel et al., J Biomed Mater Res 2000, 51 : 424-429 ; D. Arcos et al., Biomaterials 2001, 22 : 701-708), pero presentan el inconveniente que el componente polimérico tiene que permanecer en el organismo.
La idea de incorporar un fármaco en el seno de un vidrio bioactivo ha sido propuesta por P. Ducheyne et al (US pat. No 5, 874, 109). En dicha patente se describe la incorporación del compuesto farmacológicamente activo en un vidrio obtenido por el método sol-gel. El fármaco se adiciona durante la mezcla de los precursores del sol. Sin embargo, este método no permite la estabilización del gel ya que para ello se requieren temperaturas entre 600-800°C ; dicho tratamiento térmico es inviable cuando se incorporan la mayoría de las sustancias farmacológicamente activas.
Con el fin de superar los inconvenientes mencionados, la presente invención proporciona un método para obtener piezas constituidas exclusivamente por un vidrio bioactivo y un antibiótico, sin presencia de componentes poliméricos. Dichas piezas permiten una liberación controlada de un antibiótico a nivel local durante periodos prolongados, estimulan la regeneración del tejido óseo y no requieren de su posterior retirada, ya que todos sus componentes son reabsorbibles a medio plazo.
EXPLICACIÓN DE LA VENCIÓN La presente invención se refiere a un procedimiento para la obtención de sistemas de liberación controlada de antibióticos a nivel local en el tejido óseo, que a su vez promueve la regeneración de dicho tejido. El implante obtenido es una pieza compacta que evita las complicaciones técnicas por dispersión del material durante su implantación quirúrgica, garantiza una concentración superior a la concentración mínima inhibitoria (CMT) en el hueso, para la mayoría de microorganismos causantes de la osteomielitis y no requiere de posterior retirada por ser bioactivo y reabsorbible a medio plazo.
El método de obtención comprende las siguientes etapas : A) Molienda del vidrio bioactivo hasta obtener un granulado. Se recomienda llevar a cabo la molienda en un molino de bolas rotatorio.
El tiempo de molienda será de 1 a 3 horas dependiendo de la fragilidad del material.
B) Tamización del vidrio recogiendo la fracción de grano comprendida entre 10 um y 100 um.
C) Mezclado por vía seca del vidrio tamizado con la dosis de antibiótico que se desea incluir. A modo de ejemplo sin carácter limitativo, para el caso del sulfato de gentamicina la proporción en peso vidrio/ antibiótico estará comprendida entre 20/1 y 40/1.
D) Conformado de la mezcla en forma de pieza, aplicando una presión entre 50 MPa y 100 MPa y ejercida uniaxialmente sobre el granulado introducido en un troquel de tamaño y forma variable. La dimensión final de la pieza depende de las dimensiones del troquel utilizado, de la masa de mezcla introducida y de la presión ejercida en este paso. A modo de ejemplo sin carácter limitativo, para la obtención de pequeños implantes cilíndricos de 6 mm de diámetro por 6 mm de altura, se requieren 200 mg de mezcla y presión de 50 MPa.
E) Protección de la pieza envolviéndola al vacío con látex.
F) Prensado isostático de la pieza protegida por el látex. Para ello se introduce la pieza en un fluido sobre el que se aplica la presión mediante una prensa isostática. Las presiones aplicadas estarán comprendidas entre 100MPa y 500MPa.
DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Con el fin de facilitar la explicación de la invención y formando parte integrante de la memoria descriptiva, se acompañan una serie de figuras. Con carácter ilustrativo y no limitativo se ha representado lo siguiente : La figura 1 muestra esquemáticamente los pasos a seguir para la obtención del vidrio granulado y su mezcla con el antibiótico.
En dicha figura se representa con 1 el vidrio bioactivo, con 2 el vidrio granulado tras el proceso de molienda, con 3 el vidrio con tamaño de grano entre 10-100 um tras la tamización, con 5 la mezcla de vidrio con el antibiótico (4), con 6 la pieza resultante de compactar la mezcla (5) por prensado uniaxial, con 8 la pieza envuelta en látex (7) y al vacío, con 9 el producto final tras someter (8) a presión isostática.
La figura 2 esquematiza los dos métodos de presión utilizados para el conformado del material. En la figura 2. a se representan el pistón (10) y el troquel (11) de la prensa uniaxial en la que se introduce la mezcla (5). En la figura 2. b se muestra, además de los componentes 10 (pistón) y 11 (troquel), la mezcla aceite/agua (12) en la que se sumerge el material (8) para el prensado isostático.
La figura 3. a esquematiza el defecto óseo (13) en diferentes localizaciones del hueso (14) antes de la aplicación quirúrgica del implante (9). La figura 3. b esquematiza el hueso (14) después de la inserción del implante (9).
La figura 4 muestra las radiografías obtenidas de fémur de conejo tras diferentes periodos de tiempo de implantación (1,4,8 y 12 semanas) de las piezas en el defecto óseo.
La figura 5 muestra un corte histológico de la zona del implante al cabo de una semana en la región próxima al hueso trabecular.
La figura 6 muestra un corte histológico de la zona del implante al cabo de una semana en la región próxima a la médula ósea trabecular.
La figura 7 muestra un corte histológico de la zona del implante al cabo de 4 semanas de implantación.
La figura 8 muestra un corte histológico de la zona del implante al cabo de 8 semanas de implantación.
La figura 9 representa los niveles de gentamicina encontrados en diferentes órganos en función del tiempo de implantación.
EXPLICACIÓN DE UN MODO DE REALIZACIÓN La presente invención, método para la obtención de implantes bioactivos útiles como sistemas de liberación controlada de antibióticos, se ilustra adicionahnente mediante un ejemplo de aplicación con carácter ilustrativo y no limitativo.
La metodología a seguir para la obtención de este tipo de implantes, toma como punto de partida un vidrio bioactivo, como se muestra en la figura 1.
A continuación : - Molienda del vidrio. Se recomienda utilizar para ello un molino de bolas rotatorio así como períodos de molienda de entre 30 minutos y tres horas, sin que esto implique una limitación en el rango de aplicación de la invención.
- Tamizado del granulado, utilizando para ello tamices con luz de malla entre 1 um y 200 um, recogiendo la fracción comprendida entre 10-100 um.
Mezclado con el antibiótico. Se recomienda para esta etapa la utilización de molinos vibratorios de bola, a baja amplitud de vibración durante 1 hora, sin que esto implique una limitación en el rango de aplicación de la invención. A modo de ejemplo ilustrativo y no limitativo, la composición de una mezcla de vidrio con sulfato de gentamicina deberá tener una relación vidrio/antibiótico comprendida entre 20/1 y 40/1.
- Prensado uniaxial de la mezcla, utilizando troqueles con capacidad y forma variable para obtener la geometría deseada (cilindrica, cúbica, paralelepípeda, etc). A modo de ejemplo ilustrativo y no limitativo, para la obtención de implantes cilíndricos de 6 mm de altura se requieren 200 mg de mezcla sobre las que se aplican 70 MPa de presión uniaxial de la forma esquematizada en la figura 2. a, dando lugar a una pieza como la representada en la figura 1 por 5.
- Impermeabilización de la pieza. A modo de ejemplo ilustrativo y no limitativo, puede emplearse una envoltura de látex. Se recomienda que dicho
recubrimiento se lleve a cabo al vacío sin que esto implique una limitación en el rango de aplicación de la invención.
- Prensado isostático de la pieza impermeabilizada. La pieza impermeabilizada se sumerge en un fluido sobre el que se ejerce la presión. El fluido comprime a la pieza isostáticamente sobre toda la superficie aplicando una presión comprendida entre 100 MPa y 500 MPa. A modo de ejemplo, la pieza cilíndrica impermeabilizada que se representa en la figura 1 con 8, se presiona a 355 MPa tras ser sumergida en una mezcla agualaceite en proporción 20/1, sin que esto implique una limitación en el rango de aplicación.
La pieza resultante está diseñada para su aplicación en cirugía ortopédica como relleno de defectos óseos de cualquier etiología y en el tratamiento de infecciones óseas por microorganismos sensibles, aplicación esquematizada de modo ilustrativo y no limitativo en la figura 3.
A modo de ejemplos ilustrativos y no limitativos, en las figuras 4-8 se muestran las respuestas biológicas obtenidas a los implantes descritos introducidos en fémur de conejos de Nueva Zelanda, durante 1, 4,8 y 12 semanas.
La respuesta del hueso al implante es de perfecta osteointegración, crecimiento de tejido óseo cortical y esponjoso que restaura el defecto, disposición de dicho tejido sobre la superficie del implante sin interposición de tejido fibroso y reabsorción parcial del implante a medio plazo (figura 4).
En la primera semana hay reacción inflamatoria en torno al implante con presencia de células gigantes multinucleadas y proliferación fibroblástica en torno al implante (figuras 5 y 6). Al cabo de 4 semanas hay actividad osteogénica manifiesta, caracterizada por la presencia de trabéculas óseas neoformadas con revestimiento continuo de células osteoblásticas (figura 7). Al cabo de 8 semanas el tejido óseo coloniza el implante sin interposición de tejido fibroso (figura 8).
La figura 9 muestra los niveles de gentamicina detectados en diversos órganos así como en hueso distal y proximal al área de implantación frente al tiempo de
implantación. Los niveles locales de gentamicina detectados en tejido óseo son superiores a la concentración mínima inhibitoria (CMT) para la gentamicina y son suficientemente efectivos pues se considerarían tóxicos incluso para la mayor parte de microorganismos resistentes. El descenso progresivo de los valores de gentamicina en tejido óseo con el transcurso del tiempo no impide que se mantengan superiores a la CMI hasta el final del ensayo, lo que proporciona un área local amplia suficiente para inhibir el crecimiento de microorganismos sensibles al antibiótico.
La circulación local a nivel del defecto queda, al menos en parte, restablecida durante la primera semana tal como lo demuestra la presencia de altas concentraciones de antibiótico en órganos como el riñón. La circulación intraósea mejora a partir del segundo mes, cuando se observa una mayor concentración de gentamicina en el hueso distal.