【발명의 명칭】

감미료 알를로스를 제조하는 방법 【기술분야】

본 발명은 알를로스 제조하는 방법에서, 특히 알를로스 함유 용액을 저온에서 농축하여 프 ¾]토오스와 환원당과 같은 불순물의 함량을 감소시키고 알롤로스 함량을 증가시키고, 높은 수율로 안정성이 있는 알롤로스 농축물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

【배경기술】

알를로스 (D-al lulose)는 과당 (D-f ructose)의 에피머로서 희소당으로 알려진 기능성 당류의 일종으로, 설탕의 약 60 내지 70%의 높은 감미도를 나타내면서도 열량은 거의 제로 칼로리에 가까워 당뇨병의 예방 및 개선에 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 또한 알를로스는 용해성도 우수한 것으로 알려져 있어, 식품에의 활용이 주목되고 있는 소재 중 하나이다.

알를로스를 제조하는 방법은 화학적 방법 및 생물학적 방법이 있으며 최근 생물학적 방법으로 알를로스를 제조하는 방법은， 과당 -함유 기질 용액과 알롤로스 에피머화 효소 또는 상기 효소를 생산하는 균체와 접촉하여 알를로스 전환반응올 수행한다. 알롤로스 전환 공정에 사용되는 반응 원료인 과당 함유 용액이 전분 등의 분해로부터 얻어지는 포도당을 이성화 반응으로 얻어진 과당 이성화 반응생성물일 수 있다.

그러나, D-알를로스를 포함하는 반응액은 저순도 제품이기 때문에 고순도로 알롤로스를 분리하는 것이 요구된다. 실제로 산업적으로 생산되는 소재들은 고순도로 분리하기 위해 다양한 방법들이 적용되고 있으며， 당의 경우 주로 크로마토그래피를 사용하여 고순도액을 만든 후， 결정화하여 제품을 생산하고 있다.

상기 알를로스 전환 반응생성액으로부터 고순도 알를로스 제품을 얻기 위해서는 고순도 분리공정을 수행하며, 또한 알를로스 결정을 얻기 위해서는 고순도의 알롤로스 시럽을 이용하여 알를로스 결정화 공정을 수행할 수 있다ᅳ 상기 알롤로스 분리공정에서 얻어진 알를로스 분획으로부터 알롤로스로부터 불순물로 전환하는 것을 최소화하고 알를로스 함량을 증가시켜 고수율로 알롤로스를 농축하는 방법 및 원료의 이용률을 높이고, 알를로스 농축액이 보관 기간 동안 저장 안정성을 갖는 농축방법이 필요한 실정이다.

【발명의 상세한 설명】

【기술적 과제】

이에， 본 발명의 일 예는 알를로스 수용액으로부터 알를로스를 농축하는 방법으로서, 알를로스로부터 불순물로 전환하는 것을 최소화하고 알를로스 함량을 증가시켜, 고수율 및 저장안정성이 높은 알롤로스를 농축하는 방법 및 이에 사용되는 장치에 관한 것이다.

본 발명의 추가 목적은, 알를로스로부터 불순물로 전환하는 것을 최소화하고 알롤로스 함량을 증가시켜 고수율로 알를로스를 농축하는 방법을 포함하는 알를로스 제조방법 및 이에 사용되는 장치에 관한 것이다.

【기술적 해결방법】

본 발명은 알를로스 수용액을 저온 농축하여, 프릭토오스와 환원당과 같은 블순물의 함량을 감소시키면서 알롤로스 함량을 증가시키고, 고수율 및 저장안정성이 높은 알를로스를 농축하는 방법에 관한 것이다ᅳ 상기 알롤로스 수용액은 알를로스 분리공정에서 얻어진 알를로스 분획으로부터 얻어지는 것일 수 있다.

알롤로스의 농축 공정을 통해 높은 브릭스까지 한번에 고형분 함량을 증가시킬 경우, 프럭토오스와 환원당과 같은 블순물 또는 알를로스 전환물의 함량이 증가하여 알롤로스 순도가 낮아져 최종 생산 수율 및 제품의 품질이 떨어지며, 또한 보관기간 동안 저장 안정성이 낮은 문제가 있다. 따라서, 생산 수율， 제품 품질 및 보관 안정성을 고려하여 기존 전분당 제조 방식과 다른 농축 방법을 필요로 할 수 있다.

이에， 본 발명은 알를로스 수용액을 저온에서 농축하는 방법， 바람직하게는농축 공정을 적어도 2 이상의 증류 공정으로 수행하는 방법을 채택함으로써, 농축과정에서 알를로스가 불순물로 전환하는 것을 최소화하고 알를로스 함량을 증가시켜， 고수율로 알를로스를 얻을 수 있어 원료의 이용률을 높이고， 알를로스 농축액의 이 저장 안정성이 증가하는 장점이 있다. 상기 저온 농축 공정은 박막진공 농축기 또는 다중효용관 농축기를 이용하여 적어도 2단계 이상으로 나누어 단계적으로 농축하는 것으로 수행될 수 있다. 본 발명에 따른 알롤로스 용액의 농축방법에 따라 얻어진 알롤로스 농축물은, 농축전 알를로스 함량 100중량 %를 기준으로， 35 ^° C에서 5주간 보관 조건에서， 알를로스 함량 감소폭이 3. 5중.량¾)이하, 3 , 0중량 %이하, 2 , 5 중량%이하, 또는 1 . 5중량 %이하인 보관 안정성이 우수한 알를로스 농축액을 얻을 수 있다. _, 이에, 본 발명은 비교적 저온에서 알롤로스 수용액을 농축 시 함량 변화 없이 제품을 생산할 수 있으며， 농축 시 알를로스의 함량 감소가 없고， 제품 품질이 안정적으로 생산 가능한 것을 확인하였다ᅳ 이하, 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다ᅳ

본 발명은 알를로스를 포함하는 알를로스 수용액을 얻는 단계; 및 상기 알롤로스 수용액을 증류하는 단계를 포함하며， 상기 증류하는 단계는 농축 용액의 온도가 85 ^° C 이하, 예를 들면 알뽈로스 용액의 온도가 40 내지 85 ^° C인 범위에서 수행되며, 고형분 함량이 60 이상， 예를 들면 60브릭스 이상 내지 85 브릭스 이하인 알를로스 농축액을 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 명세서에서 '브릭스' 용어는 시료 용액 100g에 포함된 당류의 질량 (g)으로 정의된다.

상기 증류하는 단계는, 상기 증류하는 단계는 2회 이상 반복하여 수행될 수 있다. 상기 증류하는 단계는, 적어도 2 이상의 증류 공정으로 수행될 수 있다.

상기 증류 농축 단계를 적어도 2이상의 구성 증류공정으로 수행하는 경우， 각 구성 공정은, 증류 온도， 증류 시간， 증류 방식, 농축액의 고형분 함량 (브릭스) , 농축액에 포함된 알를로스 순도 등을 고려하여 적어도 하나의 증류 공정의 조건을 상이하게 설정하여 나누어 수행할 수 있다.

구체적으로, 본 발명에 따른 증류단계를 2 공정을 수행하는 경우에는, 알를로스 수용액을 증류하여 전체 고형분 함량 10 브릭스 이상 내지 60 브릭스 이하로 저농축액을 제조하는 공정 및 상기 저농축액을 증류하여 전체 고형분 함량 60 브릭스 초과 내지 85 브릭스 이하의 고농축액을 제조하는 공정을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 제조방법으로 얻어진 알를로스 농축액의 최종 고형분 함량의 하한치는 60브릭스 이상 또는 초과， 65브릭스 이상 또는 초과, 70브릭스 이상 75 브릭스 이상, 78 브릭스 이상, 79 브릭스 이상, 80 브릭스 이상, 81 브릭스 이상, 82 브릭스 이상, 83 브릭스 이하， 또는 84브릭스 이상일 수 있으며 , 최종 고형분 함량의 상한치는 85.브릭스 이하， 84 브릭스 이하， 82 브릭스 이하, 81 브릭스 이하， 80 브릭스 이하， 79 브릭스 이하， 78 브릭스 이하， 75 브릭스 이하 또는 70 브릭스 이하일 수 있다. 또한, 알를로스 농축액의 최종 고형분 함량은 상기 기재된 함량의 하한치에서 선택된 하나와 상한치에서 선택한 하나의 수치를 조합한 범위일 수 있으며， 예를 들면 60 브릭스 이상 내지 80 브릭스, 60 브릭스 초과 내지 80 브릭스, 65 내지 85 브릭스， 65 내지 80브릭스， 또는 68 내지 85브릭스 둥일 수 있다.

또한， 농축은 초기 전체 고형분 함량 (brix) 5 내지 15 브릭스에서 10 브릭스 이상 내지 60 브릭스 이하까지， 예를 들면 10 내지 55브릭스, 10 내지 60브릭스, 15 내지 55 브릭스, 15 내지 60브릭스， 10 내지 19브릭스， 20 내지 29브릭스 30 내지 39 브릭스, 40 내지 49브릭스 또는 50 내지 60브릭스 이하까지 1차 농축하고, 상기 1차 농축액을 60 브릭스 초과 내지 85브릭스 이하， 예를 들면 60 브릭스 초과 내지 80 브릭스， 65 내지 85 브릭스, 65 내지 80브릭스， 또는 68 내지 85브릭스까지 2차 농축하는 적어도 2단계로 구분된 농축 공정으로 수행할 수 있으며, 이에 따라 알를로스의 함량이 고순도 분리 후부터 안정적으로 유지될 수 있다.

상기 고농축액을 제조하는 공정의 용액 온도와 저농축액을 제조하는 공정의 용액 온도와의 차이는 0°C 내지 35 ^° C , 예를 들면 0°C 내지 25°C , 5 내지 25T：， 10 내지 25°C , 5°C 내지 35°C， 10 °C 내지 35°C , 0°C 내지 20°C , 5°C 내지 20°C , 또는 10°C 내지 20°C일 수 있다.

예를 들면， 상기 증류 농축 공정은， 알를로스 용액의 은도가 40°C 내지 85°C인 범위에서 수행할 수 있으며, 농축단계를 2개 공정으로 수행하는 경우 1차 농축 시 용액 온도가 4()°C 내지 75°C인 범위이고， 2차 농축 시 용액 온도가 50°C 내지 85°C일 수 있다.

구체적인 예로서 , 다중효용관 농축기를 이용하는 2단 농축 공정은, 알를로스 용액의 온도가 40°C내지 60°C인 범위에서 1차 농축하여 얻어지는 농축물의 브릭스가 20 내지 29이고， 용액의 온도가 60 °C 내지 85°C인 범위에서 2차 농축을 수행하거나, 알를로스 용액의 온도가 45°C 내지 70°C인 범위에서 1차 농축하여 얻어지는 농축물의 브릭스가 30 내지 39이고， 용액의 온도가 50°C 내지 75°C인 범위에서 2차 농축을 수행할 수 있다.

또한, 박막진공 농축기를 이용하는 2단 농축 공정은， 알를로스 용액의 온도가 40°C 내지 55°C인 범위에서 1차 농축하여 얻어지는 농축물의 브릭스가 10 내지 60브릭스이고, 용액의 온도가 45 ^° C 내지 75 ^° C인 범위에서

2차 농축을 수행할 수 있다.

본 발명에 따른 증류하는 단계에서 압력조건 (증류기 내부)은 10 瞧 Hg 이하 (예컨대, 0.0001~10腿 Hg, 보다 구체적으로는 0.0001 8 隱 ¾)인 것이 바람직하고， 5 mmHg 이하 (예컨대 0.001-5 瞧¾)인 것이 더 바람직하며, 1 mmHg 이하 (예컨대, 0.이〜 1 mmHg, 보다 구체적으로는 0.01-0.8 隱 Hg)인 것이 보다 바람직하다. 이러한 압력조건을 달성하고자 감압펌프를 사용할 수 있다. 상기 증류하는 단계에서, 상기 감압조건을 벗어나.거나, 예를 들면 감압펌프를 중단하여 공정을， 저농축액올 제조하는 공정과 고농축액을 제조하는 공정 사이에 추가로 포함할 수 있으며， 예를 들면 저농축액을 제조하는 농축장치와 고농축액을 제조하는 농축 장치로 이송하는 것으로 수행될 수 있다.

상기 증류 압력이 10 mmHg 보다 높으면 무수당 알코올을 증류해 내기 위해서는 증류 온도를 높여야 하고, 그럴 경우 상기한 바와 같은 문제점이 발생할 수 있다. 반면 증류 압력을 낮추기 위해서는 고진공 장치비용이 추가로 소요되므로 지나치게 낮은 증류 압력은 바람직하지 않다 . 본 발명의 바람직한 일 구체예에 따르면，. 증류 단계의 수행시 증류기 내부를 진공 라인을 통해 감압하는 것에 더하여, 증류 잔여물 배출 라인을 통하여 추가로 감압할 수 있다.

본 발명에 따른 농축액을 제조하기 위한 알를로스 수용액은， 알를로스를 90중량 % 이상， 예를 들면 95 중량 % 이상 함량으로 포함하는 고순도 알롤로스 용액을 일 수 있다. 상기 알를로스 수용액의 점도는 온도 45 ^° C에서 2 cps 내지 40 cps일 수 있으며， 전기전도도는 0.01 내지 100 uS/cm, 0.1 내지 100 LiS/cm, 바람직하게는 0.01 내지 30 uS/cm, 또는 0.1 내지 30 uS/cm일 수 있다.

상기 농축공정의 대상이 되는 알롤로스 수용액의 일예는, 칼슘 활성기가 부착된 양이온교환수지가 충진된 칼럼 크로마토그래프를 이용하여 모사 이동층 (simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피 분리 공정을 수행하여 얻어지는 알를로스 분획일 수 있으며， 구체적으로 생물학적 촉매를 이용하여 과당 -함유 원료를 알를로스로 전환하는 알를로스 전환 반응생성물을 얻고, 상기 알를로스 전환 반응생성물의 활성탄 처리， 이온정제 및 모사 이동층 (simulated moving bed, SMB) 크로마토그래피 분리 공정을 수행하여 얻어진 알를로스 분획일 수 있다. 상기 알롤로스 분획물은 SMB 크로마토그래프 분리 공정에서 얻어진 그 자체 또는 이온정제 공정을 거쳐 수득한 것일 수 있다. 상기 과당—함유 원료의 과당 함량은 과당 -함유 원료의 고형분 총함량 100중량 %를 기준으로 85중량 %이상이며， 알를로스 전환반응의 알를로스 전환율은 15% 내지 7 인 생물학적 촉매를 사용하는 것일 수 있다. 상기 알롤로스 수용액에서는 하기에서 더욱 자세히 설명하고자 한다 .

본 발명의 농축 방법에 따라 얻어진 알를로스 농축액은 고형분 함량이 60 이상 내지 85 브릭스 이하, 예를 들면 60 브릭스 초과 내지 80브릭스, 65 내지 85 브릭스, 65 내지 80브릭스， 또는 68 내지 85브릭스일 수 있다. 상기 알롤로스 농축액은, 알를로스 순도 90 wt /wt% 이상, 예를 들면 91 wt/wt% 이상， 92 wt/wt% 이상， 93 wt /wt 이상, 94 wt/wt% 이상, 95.5 wt /wt 이상, 96중량 %이상， 97 중량 %이상， 98 중량%이상 또는 99중량 %이상일 수 있다. 상기 알를로스 농축물에 포함된 알롤로스 함량은 상기 SMB 크로마토그래피 분리 공정에서 얻어진 알를로스 분획의 알를로스 함량과 변동이 거의 없으며, 고형분 함량이 증가하여 이후 결정화 공정을 수행할 수 있도록 한다.

본 발명에서 '환원당 (reducing sugar ) ' 은 유리 알데히드기 또는 케톤기를 갖고 환원성을 나타내는 당을 의미한다. 본 발명의 '환원당' 은 알를로스, 글루코스 및 프락토스를 제외한 유리의 단당류와， 알도오스 혹은 케토오스를 환원하여 얻어자는 당알코올류를 포함하며， 더욱 상세하게 본 발명의 환원당 종류는 아라비노오스, 키실로오스, 만노오스， 알트로오스 (Al t rose) 및 알로스 (Al lose)를 포함하는 단당류; 및 글루시를 (Gl uci tol ) , 만나를 (Manni tol ) , 알트리를 (Al tr i tol ) 및 알리를 (Al l i tol )을 표함하는 당알코오류를 포함한다.

상기 알를로스 농축물에 포함된 프럭토오스 및 환원당의 합계 함량이

4.5 중량 %이하， 바람직하게는 4.0중량 %이하, 3.7 중량 %이하, 3.5중량 ¾이하, 3.0중량¾이하, 2.0 중량 %이하， 또는 1.0 중량 ¾)이하일 수 있다. 상기 알롤로스 농축액은 프럭토오스 함량이 3.0 중량 %이하이고, 환원당의 함량이 2.5 중량 %이하일 수 있으며 바람직하게는 상기 프럭토오스와 환원당의 합계 함량은 4.5 중량 % 이하 조건을 만족하는 것이다. 구체적인 예로서, 상기 알를로스 농축액은 프럭토오스 함량이 2.8 중량 %이하이고, 환원당의 함량이 2.0 중량 % 이하, 2.0 중량 % 이하， 1.5 중량 % 이하， 1.3 중량 %이하， 1.0 중량 % 이하, 0.5 중량 % 이하일 수 있다. 본 발명에 따른 알를로스 농축액을 얻는 방법은, 고순도 알를로스 용액의 온도가 85 ^° C 이하, 예를 들면 40 ^° C 내지 85°C의 온도에서 수행될 수 있으며, 구체적으로 박막농축기 또는 다중효용 증발기를 사용하여 _. 수행할 수 있다.

본 발명의 알를로스 제조 방법에서 ^' 사용 가능한 박막진공 농축기 (Thin Fi lm Evaporator )는 내장형 또는 외장형 박막진공농축기를 포함한다. 내장형 박막진공농축기의 구체예는 응축기 내장형 박막진공 농축기로서, 내장형 응축기， 원료 투입라인, 증류 잔여물 배출 라인, 진공형성용 결가지 라인, 진공 라인 및 증류물 배출 라인을 구비하며， 그 외에 가열을 위한 가열 자켓 , 와이퍼 (wiper ) , 응축기 가드 및 넁각수 유입 /유출 라인을 포함한다. 본 발명에서 사용 가능한 응축기 내장형 박막진공 농축기는 상기한 구성요소들 이외에 필요에 따라 추가의 구성요소들을 더 포함할 수 있으며， 그 형태도 다양할 수 있다.

본 발명의 알를로스 제조 방법에서 사용 가능한 다증효용관 농축기 (mul t ip l e ef fect evaporator )는 열원으로 공급되는 증기에 의해 투입된 용액에서 증발된 증기를 다음 단 (ef fect ) 농축기 (증발기 )의 열원 증기로 쓰는 방식으로 에너지 효율을 증진시킨다. 증발기가 여러' 단으로 연결되어 순차적으로 증발이 일어나며 초기에 투입된 용액은 고농도로 농축된다. 다중효용증발시스템의 증발성능을 향상시키는 대표적인 방법으로 순간 증발 ( f l ash evaporat ion) , 증기 재압죽 (vapor ecompress i on) , 증기 분리 (vapor bleeding)등 이 있다. 순간 증발은 고온, 고압의 액체가 f l ash tank에서 감압되어 순간적으로 증발이 일어나는 현상으로 액상과 기상으로 분리된다. 이때 발생된 증기는 높은 에너지를 갖게 되며 증발시스템에 투입되어 전체적인 에너지 효율을 상승시킨다. 증기 분리는 증발시스템에서 분리된 증기로 용액의 온도를 상승시키는 것을 의미한다. 용액의 온도를 상승시키는 대표적인 장치는 예열기 (preheater )이며 증발기에서 분리된 증기를 에너지원으로 이용하여 용액의 온도를 상승시킨다. 증발기에 투입된 용액의 은도가 상승되면 증발기와의 온도차가 커지므로 용액으로부터 증발하는 수분의 양은 증가한다. 증기 재압축은 증발과정 중 발생된 저압의 증기를 고압으로 압축하여 고온의 증기를 증발시스템에 재공급하는 것을 의미한다ᅳ 투입된 증기유량의 증가와 온도의 상승으로 높은 에너지의 증기가 증발시스템에 투입되며 증발성능은 향상된다. 증발기에 증기가 유입되면 용액과의 열 교환으로 증기는 웅축되고 용액 은 방출된 응축열을 흡수하여 증발과정을 거쳐 증기와 농축된 용액으로 분리된다. 분리된 증기는 다음 증발기의 에너지원으로 사용되며 농축된 용액은 증발과정을 거쳐 고농도로 농축된다. 이와 같은 연쇄 반웅으로 증발이 일어나고 용액의 농도는 상승하게 된다.

수증기의 잠열을 회수해서 이용하기 위하여 같은 형의 증발관올 보통

2 내지 7개를 직렬로 연결하여， 최초의 관에 사용한 증기를 다음 관에 순차적으로 공급해서 증발을 행하며， 열원으로서 이용하는 방식을 말한다. 최후의 관에서 발생증기를 응축기로 넁각하고， 진공펌프로 배기시켜 최저압력으로 하고 각 관의 압력 및 비점을 차츰 강하시켜서 가열을 유효하게 하여, 에너지 효율을 높이기 위한 것으로서, 액상 성분의 농축을 위한 용도로 사용된다. 바람직하게는 감압 농축기일 수 있다.

3중 효용 (효용수 N=3)의 증발농축장치에 3중 효용 증발농축장치는 수봉식 수증기 압축기 외에, 주된 기구로서, 제 1 효용증발기, 제 2 효용증발기, 제 3 효용증발기， 웅축기， 응축수 펌프 및 진공 펌프 등으로 이루어진 시스템이며， 필요에 따라 상기 구성요소 이외의 추가의 구성요소들을 더 포함할 수 있으며 , 그 형태도 다양할 수 있다.

본 발명의 또 다른 일예는, 상기 알를로스 농축물을 제조하는 방법을 포함하는 알롤로스의 제조방법에 관한 것이다.

구체적 일예에서， 본 발명의 알를로스 제조방법은 ( 1)과당 -함유 원료로 알를로스의 생물학적 전환 반웅을 수행하여 알를로스 전환 반웅생성물을 제조하는 알를로스 전환 공정; (2)상기 전환 반응생성물을 제 1차 이은정제 및 모사 이동층 (s imul ated movi ng bed , SMB) 크로마토그래피를 이용한 분리를 수행하여 알를로스 분획과 과당 라피네이트를 얻는 알를로스 분리 공정; 및 (3) 상기 알를로스 분획을 농축하는 공정을 포함할 수 있으며, 추가적으로 (4)상기 알를로스 농축물을 이용하여 알를로스 결정을 얻는 공정을 포함할 수 있다.

본 발명의 알를로스 제조 공정은 연속식과 배치식 모두 사용가능하며, 바람직하게는 연속식 공정이다. 본 발명의 일 예에서 알를로스 전환 공정에서 얻어지는 산물은 원료 기질인 과당과 생산물인 알롤로스를 포함하는 흔합물이며， 고순도 분리공정을 거치면서 목적 물질인 알를로스의 함량이 증가된 알를로스 분획과 잔류액을 얻으며， 잔류액에는 알를로스 전환 반응의 기질인 과당이 다량 포함되므로 과량 라피네이트를 의미할 수 있다. 본 명세서에서， 용어 "라피네이트 (raf f inate) "라 함은 추잔액이라고도 하며， 분리공정에 투입된 원료가 분리공정을 통과하여 얻어지는 산물에는 분리공정으로 함량을 높이고자 하는 목적 물질을 포함하는 목적 분획과， 분리공정에서 제거 또는 함량을 감소하고자 하는 물질등을 포함하는 잔류액을 포함하며， 상기 잔류액 라피네이트라고 한다 . 본 발명의 알를로스 제조 공정에서 SMB 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리공정에서 얻어진 알를로스 분획은 알를로스 농축 공정을 거쳐 액상 시럽으로 제품화하거나， 알를로스 결정화 공정을 거쳐 알롤로스 결정으로 제품화할 수 있다. 상기 SMB 크로마토그래프 분리 공정에서 얻어진 알를로스 분획을 이온정제하고 농축하여 얻어진 농축물을 제조하는 단계이다. 상기 농축물은 알를로스 시럽제품으로 사용되거나, 결정화 공정에 투입되어 알를로스 결정으로 제조될 수 있다.

이하, 본 발명에 따라 알를로스 전환 반응의 산물의 고순도 분리 공정에서 얻어지는 알를로스 분획을 농축하는 공정을 이용한 알를로스 제조 공정을 각 단계별로 자세히 기술하고자 한다.

알를로스 전환 공정으로서, .알를로스 전환 반응을 수행하여 과당- 함유 원료로부터 알를로스를 전환하는 공정으로서， 공정의 산물로서 과당으로부터 전환된 알를로스를 함유하는 반응액을 얻는다.

본 발명의 일 구체예에서, 생물학적 방법에 따라 알를로스를 제조하는 방법으로는 알를로스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 알를로스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 배양하고, 이로부터 얻어진 알를로스 에피머화 효소를 과당 -함유 원료와 반웅하여 ^' 생산할 수 있다. 상기 알롤로스 에피머화 효소는 액상 반응 또는 고정화 효소를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다.

또는, 알를로스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 알를로스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 얻고， 균주의 균체 상기 균주의 배양물， 상기 균주의 파쇄물， 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 알를로스 생산용 조성물을， 과당 -함유 원료와 반응하여 제조될 수 있다. 알를로스 에피머화 효소를 생산하는 균주의 균체를 이용하여 알를로스를 제조하는 경우 액상 반응 또는 고정화 균체를 이용한 고상 반웅으로 수행될 수 있다. 본 발명의 일 예에 따른 알를로스 전환 공정은 생물학적 방법으로 수행하며, 상기 알를로스 에피머화 효소를 담체에 고정화시키는 단계는 고정화된 효소를 컬럼에 충진시키는 단계 및 상기 층진된 컬럼에 과당 용액을 공급하는 단계를. 더 포함할 수 있다. 효소나 균체가 고정화된 담체를 충진시킬 컬럼 및 상기 컬럼에 층진시키는 방법은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 사용된 효소나 균체， 또는 고정화 담체에 따라 적합한 것으로 용이하게 선택하여 수행할 수 있다. 본 발명의 일 구체예에서 , 상기 고정화된 효소를 컬럼에 층진시켜 충진상 컬럼 (packed- bed co lumn)을 제조할 수 있다. 층진상 컬럼에 기질인 과당 용액을 공급하는 것에 의해 효소 반응， 즉, 과당의 알롤로스로의 전환이 수행될 수 있다.

알를로스 및 이의 제조방법에 관한 자세한 기술내용은 한국공개특허 제 2014-0021974호， 한국공개특허 제 2014-0054997， 한국공개특허 제 2014- 0080282호， 또는 한국등록특허 제 10-1318422호에 기재되어 있다.

본 발명에 따른 알를로스 전환 공정에 투입되는 과당 원료는 생물학적 방법또는 화학적 방법으로 제조될 수 있으며, 바람직하게는 생물학적 방법이다. 상기 과당 원료는 과당 시럽과 같은 액상 원료， 또는 과당 분말과 같은 분말 원료로 제공될 수 있으며， 상기 과당 시럽의 경우 생물학적 방법 또는 화학적 제조 공정에서 얻어진 산물의 형태이거나, 과당 분말을 물과 같은 용매에 용해하여 제조된 것일 수 있다.

상기 .과당 원료를 생물학적 방법으로 제조하는 일예는， 포도당 -함유 원료를 과당 이성화 효소 또는 상기 효소를 생산하는 균체를 이용하여 이성화하는 과당 이성화 공정을 수행하고， 상기 과당의 분리， 정제 및 농축하는 공정을 통해 분리하여 얻을 수 있다. .

상기 알를로스 생산 방법에 있어서， 효율적인 알를로스 생산을 위하여, 기질로서 사용되는 과당의 농도는 전체 반응생성물 기준으로 85 w/v 이상， 90 w/v% 이상， 또는 95 w/v% 이상일 수 있으며， 예를 들면 85 내지 99 w/v , 88 내지 99 w/v% , 88 내지 99w/v% , 85 내지 87 (w/v) , 88 내지 90 (w/v) , 91 내지 93 (w/v) , 94 내지 99 (w/v) 또는 97 내지 99 ¾(w/v)일 수 있다. 과당의 농도공정의 경제성 및 과당의 용해성을 고려하여, 결정할 수 있으며, 상기 과당은 완충용액 또는 물 (예컨대 증류수)에 용해된 용액 상태로 사용될 수 있다.

본 발명의 일예에서 , 알를로스 제조의 고순도 분리공정에서 얻어지는 과당 라피네이트는 알를로스 제조의 알를로스 전환 반응의 원료로 단독， 또는 신규 과당 원료로 함께 투입될 수 있다. 상기 과당 라피네이트와 신규 과당 원료의 흔합물을 알를로스 전환 반응의 반응 원료로 사용하는 경우, 과당 라피네이트의 활용을 최대화하고 기존 공정에서 얻어지는 알롤로스의 수율을 최대로 유지할 수 있도록, 과당 라피네이트와 신규 과당 원료의 흔합비를 적절히 조절할 수 있다. 본 발명에 따른 알를로스 전환 반응생성물의 분리공정으로서, 본 발명에 따른 알롤로스 제조 공정은， 상기 알를로스 전환 반응생성물을 이온정제 및 모사이동층 (SMB) 크로마토그래프 분리 공정을 포함하는 알를로스 전환 반응생성물의 분리공정을 수행할 수 있다. 구체적인 일예에서, 상기 알를로스 전환 반응생성물을 SMB 크로마토그래피 분리를 수행하여, 전환 반웅생성물보다 알를로스 함량이 높은 알를로스 분획과 과당 라피네이트로 분리하고, 상기 알를로스 분획은 알를로스 농축 공정 또는 결정화 공정으로 투입될 수 있다. 상기 알를로스 분획 내 알를로스의 함량은 85중량 % 이상, 예를 들면 85.중량 % ^' 내지 95 %(w/w) 이상이 되도록 분리 /정제하는 것을 포함할 수 있다.

상기 알를로스 제조 공정에서 이온 정제 공정은 반웅생성물내 포함된 이온을 제거하는 공정으로서， SMB 크로마토그래피 분리 공정 전 및 /또는 이후에 수행할 수 있다. 상기 SMB 크로마토그래피 분리를 수행하기 전에 이온정제 공정을 수행하는 제 1차 이온정제는 하기 알를로스 분획의 제 2차 이온정제와 동일 또는 상이한 방법으로 수행할 수 있으며 , 예를 들면 동일 종류 또는 상이한 종류의 이온교환수지가 충진된 분리탑을 1개 또는 2이상 사용하여 수행할 수 있다. 상기 이온 정제 .공정은 이온정제에 사용되는 수지의 물성 및 이온 정제 효율을 고려하여 35 ^° C 내지 50 ^° C 온도, 또는 38 ^° C 내지 58 ^° C에서 수행될 수 있다.

본 발명의 일예에서， 상기 알를로스 전환 반응생성물의 제 1차 이온 정제 공정을 수행하기 전에, 선택적으로 알를로스 전환 반웅생성물을 활성탄으로 처리하는 공정을 추가로 수행할 수도 있다.

본 발명의 일 예에서， SMB 크로마토그래피를 이용한 고순도 분리 공정은 분리과정에서 상 변화가 없어 물질의 안정성 확보에 용이한 분리방법이다. 이러한 흡착 분리방법 중에서 액상 흡착 분뫼방법으로는 크로마토그래피 분리방법이 많이 사용되고 있다. 이중， 모사 이동층 흡착 분리 방법 ( s i mul at ed movi ng bed , SMB)은 1961년 미국특허 제 2，985，589호 에서 제안된 분리 기술로, 다수의 컬럼을 이용하여 연속적으로 분리함으로써 기존의 회분식 크로마토그래피에 비해 순도 및 생산성이 우수하고, 적은 용매의 사용이 가능하다는 장점을 지닌다. 상기 모사 이동층 (SMB) 흡착 분리 공정은 분리대상 흔합물의 주입과 라피네이트 및 추출물의 생산이 연속적으로 이루어지는 공정이다.

상기 SMB에서 분리수지로서 단당 분리 공정에도 널리 사용되고 있는 염이 첨가된 강산의 양이온 교환수지를 사용하므로 분리공정을 수행 후 얻어지는 산물에는 금속이온이 포함된다. 상기 강산의 양이온 교환수지의 예는 칼슘 활성기가 부착된 양이온교환수지일 수 있다.

상기 고순도 분리 공정은 45 내지 70 ^° C 온도， 예를 들면 50 내지 65 ^° C에서 수행될 수 있다.

상기 알롤로스 농축물의 제조공정은 상술한 바와 같다.

본 발명에 따른 알를로스 농축물의 결정화를 위한 단계로서, 본 발명의 일 구체예에서, 알롤로스 결정을 제조하는 방법은 SMB 크로마토그래피 분리 공정에서 얻어진 알를로스 분획을 제 2차 이온정제하는 단계， 상기 이온 정제된 알를로스 분획을 농축하는 단계， 상기 농축물로부터 알롤로스를 결정화하여 알를로스 결정과 알롤로스 결정화 모액을 얻는 단계를 포함하며， 선택적으로 알를로스 결정의 회수 공정， 세척 공정 및 건조 공정을 추가로 포함할 수 있다.

상기 알를로스 결정 제조의 구체적인 예는, 제 1차 이온정제， SMB 크로마토그래피 분리, 제 2차 이온정제， 농축 및 결정화 공정을 포함할 수 있으며， 선택적으로 알를로스 전환 반응생성물을 활성탄 처리공정 , 이온정제 공정, 또는 활성탄 처리공정과 이온정제 공정을 모두 수행할 수 있다.

본 발명에 따른 알롤로스 결정을 제조하는 방법은 알를로스 농축물 용액의 온도 및 농도를 조절.하여 결정화할 수 있으며， 구체적으로 결정화를 위해 요구되는 과포화 상태는 알를로스 용액의 온도를 낮추거나 또는 D- 알를로스 용액 중 D-알를로스의 농도를 변화시키는 것에 의해 유지될 수 있다. 본 발명의 일 체예에서， 상기 결정화 단계에서 일정 간격으로 시료를 채취하여 육안이나 현미경으로 관찰하거나 또는 시료의 원심분리로부터 수득된 상층액 중 당 농도를 분석하는 것에 의해 결정화 경과를 모니터링하고 , 그 결과에 따라 온도 또는 D-알롤로스의 농도를 조절할 수 있다. 알를로스 결정을 제조하기 위해, 알를로스 농축 용액을 넁각시켜 결정화하는 경우, 열 교환기를 통하여 10 ^° C 내지 25 ^° C온도 범위로 급속히 냉각시킨 후, 승온과 넁각을 반복적으로 수행하여 결정성장을 유도할 수 있다.

본 발명에 따른 알를로스 결정을 제조하는 방법은 상기 결정화 단계에서 수득된 알를로스 결정을 다양한 고액 분리 방법， 예를 들면 원심분리로 회수하는 단계， 탈이온수로 세척하는 단계, 및 건조하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 건조 단계는 유동층 건조기 또는 진공 건조기에서 수행될 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 상기 알를로스 결정에 포함된 알롤로스는 고형분 총함량 100중량 %를 기준으로 94 중량 %이상, 95 중량 ¾이상, 96 중량 %이상, 97 중량 )이상， 98 중량 %이상 또는 99중량 %이상일 수 있다.

본 발명에 ^' 따른 알를로스 결정화 모액은 결정화 공정에서 알를로스 결정을 제거한 후에 얻어지는 여액일 수 있으며, 또한 결정 세척단계에서 얻어지는 세척수를 추가로 포함할 수 있다. 상기 알를로스 결정화 모액은 고형분 총함량 100중량 %를 기준으로 알를로스 함량이 80중량 %이상， 예를 들면 80중량 % 내지 99 중량 % 또는 85 증량 % 내지 96중량 %일 수 있으며， 고형분 함량은 70브릭스 미만， 예를 들면 60브릭스 내지 70브릭스일 수 있다.

본 발명에 따른 알를로스 결정화 모액의 재순환 공정으로서， 상기 결정화 단계에서 얻어진 알를로스 결정화 모액은 알를로스 전환 반응생성물의 분리 공정으로 투입되어 재활용할 수 ¾다. 구체적으로， 알롤로스 결정화 모액은 알를로스 전환 반응생성물의 활성탄 처리, 이온정제 및 모사 이동층 ( s i mul ated movi ng bed , SMB) 크로마토그래피 분리 공정으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 분리 공정으로 투입되어 알를로스 제조에 재순환될 수 있다. 구체적으로， 상기 분리 공정의 예는, 알를로스 전환 반응생성물을. 1차 이온정제 공정 및 SMB 크로마토그래프 분리공정을 수행, 또는 알를로스 전환 반웅생성물을 활성탄 처리， 1차 이온정제 공정 및 SMB 크로마토그래프 분리공정을 수행할 수 있고， 상기 분리 공정에서 SMB 크로마토그래프 분리 공정을 수행하기 전에, 선택적으로 농축 공정을 추가로 수행할 수 있다. 상기 분리 공정은 알를로스 전환 반웅생성물의 분리공정 항목에서 상술한 바와 동일하다.

일 예에서, 알롤로스 결정화 모액을 상기 1차 이온정제 공정에 투입되어 알를로스 전환 반응생성물과 같이 이온정제 공정을 수행하는 경우， 순차적으로 이온정제 및 SMB 크로마토그래피 분리 공정으로 처리되거나, 또는 순차적으로 활성탄 처리 공정, 이온정제 및 SMB 크로마토그래피 분리 공정으로 처리될 수 있다. 또한 선택적으로 SMB 크로마토그래피 분리 공정 전에 농축 고정을 추가로 수행할 수 있다.

【발명의 효과】

본 발명에 따른 알를로스 농축액의 제조방법은， 특히 저온 조건에서 농축공정을 수행함으로써， 알를로스 제품의 품질 저하를 막고， 알를로스 순도 및 수율을 향상시키고， 원료의 이용률을 높이고, 알를로스의 보관 안정성을 향상시키는 방법이다. 【발명의 실시를 위한 형태】

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며， 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다. 제조예 1. 알를로스 시럽의 제조

한국공개특허 제 2014— 0054997에 기재된 제조방법과 실질적으로 동일한 생물학적 방법으로 과당 기질로부터 알를로스 시럽을 제조하였다. 구체적으로, 크로스트리디움 신댄스 (Clost r i diuim sc indens ATCC 35704)로부터 유래된 알를로스 에피머화 효소의 암호화 유전자 (DPE gene ; Gene bank : EDS06411. 1)를 재조합 백터 (pCES— sodCDPE)에 도입하여， 상기 제조된 재조합 백터 (pCES_sodCDPE) 플라스미드를 전기천공법 (electroporat i on)을 사용하여 코리네박테리움 글루타리쿰을 형질전환시켰다. 상기 형질전환된 코리네박테리움 글루타리쿰 세포를 포함하는 비드를 제조하고 고정화 반응 컬럼에 충진하고, . 40브릭스의 88 중량 % 과당 또는 95 중량 % 과당으로부터 알를로스 시럽을 제조하였다. 즉, 88 중량 % 과당함유 기질로부터 포도당 :과당 :알롤로스 :올리고당 = 41 : 39 : 15 : 5인 21~23(w/w > 알를로스 시럽을 수득하였고 (알를로스 시럽 A)， 과당 함량 95 중량 %로 포함하는 원료로 부터 포도당 :과당 :알를로스 :올리고당 = 6 : 67 : 25 : 2인 24~27(w/w)% 알를로스 시럽을 수득하였다 (알를로스 시럽 B) . 비교예 1

. 제조예 1과 같이 과당 함량 88 중량 % 또는 95 중량 %의 알를로스 시럽을 이용하여 알를로스 함량 95 중량 %의 고형분 10톤을 생산하기 위해， 유량 3 .8 mVhr로 알를로스 전환 공정과 분리 공정을 수행하였다.

구체적으로， 과당 함량 88 중량 % 또는 95 중량 %의 원료 기질용액 (알롤로스 시럽)을 알를로스 전환 공정을 거쳐 수득한 알를로스 시럽의 알를로스 함량은 20 내지 27 중량%이며， 이온정제 및 농축 공정을 수행한 후 45 내지 55 중량 %의 알를로스 농도의 시럽이 얻어졌다. Ca ²⁺ -유형 분리 수지를 이용하여 고순도 크로마토그래피를 수행하여 5 내지 15 중량 %의 알를로스 분획을 수득하였다.

알를로스 분획은 이온정제 공정을 거쳐 전기 전도도를 20uS/cm 이하로 맞춘 뒤 다중효용관 농축기를 이용하여 농축을 하였다. 농축은 시간당 n hr로 진행하였고， 스팀의 온도는 125 ^° C 내지 WO T 이었다. 이때 액의 온도는 86 ^° C 내지 100 ^° C로 농축이 이루어졌다. 해당 스팀 은도 조건은 전분당 산업에서 통상적으로 사용되는 농축 온도이다. 농축은 알를로스 함량을 기준으로 초기 5 내지 15중량 %에서 70 내지 72중량 %까지 한번에 농축을 하였고， 알를로스 분획이 다중효용관 설비에서 농축에 소요되는 시간은 8분에서 15분 사이이다. 농축된 제품은 열교환기를 거쳐 10 내지 30 ^° C 온도로 넁각하여 PE용기에 포장하였다. 각 공정별 함량은 알를로스 시럽 A의 농축공정의 결과를 표 1에 나타내고， 알를로스 시럽 B의 농축공정의 결과를 표 2에 나타내었다. 하기 표 1 및 표 2에서 알를로스， 글루코스, 프락토스 및 환원당의 함량은 HPLC를 사용하여 측정하였다.

표 1 및 표 2와 같이 고순도 알를로스는 농축공정에서 알를로스 함량이 감소되는 것을 확인되었다.

【표 1】

과당 원료 50 0. 1% 3.5% 95.2% 0.0% 1.2% 전환 산물 50 0. 1% 3.5% 68. 1% 27. 1% 1.2% 고순도분리 10-15 0.0% 0.0% 1.5% 97.6% 0.9% 알를로스 분획

이온정제 후 10-15 0.0% 0.0% 1.5% 97.6% 0.9% 농축 후 71. 1 0.0% 0.3% 2.9% 95. 1% 1.7% 최종 용기 71. 1 0.0% 0.3% 2.9% . 95. 1% 1.7% ^' 상기 표 1 및 표 2에서 나타낸 것과 같이, 하당 원료의 과당 함량이 낮을수록 고순도 분리 공정에서 알를로스 분획의 br ix가 낮아지고 그로 인해 농축공정을 거쳤을 때 알를로스 함량이 낮아지는 결과를 확인하였다. 본 농축 공정을 통해 70 중량%까지 한번에 고형분 함량을 증가시킬 경우， 생산 수율 및 제품 품질을 고려하여 알를로스 생산 수율이 유지되도록 기존 전분당 제조 방식과 다른 농축 방법을 필요로 할 수 있다. 실시예 1

비교예 1과 같이 (알를로스 시럽 A)를 얻고, 이를 이용하여 알롤로스 전환 공정과 분리 공정을 수행하였다. 구체적으로， 과당 함량 88 중량 % 의 원료 기질용액 (알를로스 시럽)을 알를로스 전환 공정을 거쳐 수득한 알를로스 시럽의 알롤로스 함량은 20 내지 27 중량 %이며， 이온정제 및 농축 공정을 수행한 후 알를로스 농도 45 내지 55 중량 >의 알롤로스 시럽이 얻어졌다. Ca ²⁺ —유형 분리 수지를 이용하여 고순도 크로마토그래피를 수행하여 5 내지 15 중량 %의 알를로스 분획을 수득하였다.

알를로스 분획은 이온정제 공정을 거쳐 전도도를 20 uS/cm 이하로 맞춘 뒤, 농축 공정에서 다중효용관 농축기를 이용하여 2단 농축으로 농축을 수행하였다. 농축은 초기 고형분 함량 (br ix) 5 내지 15중량 %에서 20 내지 29중량 %까지 1차 농축하였고, 다시 70 내지 72 중량 %까지 2차 농축하였다. ^'

상기 1차 농축의 경우 스팀의 온도는 80 ^° C 내지 90 ^° C로 주었고， 이때 액의 온도는 45 ^° C 내지 50 ^° C 로 가온되어 농축이 진행되었다. 2차 농축의 경우 스팀 온도는 110 ^° C 내지 120 ^° C로 가온하였고， 알를로스 ^' 용액의 농축 온도 7(rc 내지 8(rc에서 진행하였다. 알를로스 분획이 다중효용관 설비에서 농축에 소요되는 시간은 1차, 2차 농축 모두 8분에서 15분 사이로 진행하였다. 농축된 제품은 열교환기를 거쳐 10 내지 30 ^° C 온도로 넁각하여 PE용기에 포장하였다. 각 공정별 함량은 아래 표 3에 나타내었다.

【표 3】

상기 표 3에 나타낸 것과 같이, 알를로스를 다중효용관 농축 설비를 이용하여 2단계 농축을 할 때 초기 20 내지 30 .중량? ¾로 농축 후 다시 70 내지 72 중량 %로 할 경우 2단계에서 가해지는 스팀의 세기가 높아 알를로스의 함량이 소폭 감소하는 것을 볼 수 있다. . 실시예 2

실시예 1과 동일한 방법으로 진행하되， 농축 공정에서 다중효용관 농축기를 이용하여 2단 농축으로 농축을 수행하였다. 농축은 초기 5 내지

15중량 %에서 30 내지 39중량 %까지 1차 농축을 하였고， 다시 70 내지 72 중량 %까지 2차 농축을 하였다.

알를로스 1차 농축의 경우 스팀의 은도는 9C C 내지 100 ^° C로 주었고， 이때 액의 온도는 50 ^° C 내지 60 ^° C 로 가온되어 농축이 진행되었다. 2차 농축의 경우 스팀 온도는 ioo ^° c 내지 licrc로 가온하였고， 용액의 농축 온도 60 ^° C 내지 70 ^° C에서 진행하였다. 알를로스 분획이 다중효용관 설비에서 농축에 소요되는 시간은 1차， 2차 농축 모두 8분에서 15분 사이로 진행하였다. 농축된 제품은 열교환기를 거쳐 10 ^° C 내지 30 ^° C 은도로 넁각하여 PE용기에 포장하였다. 각 공정별 함량은 아래 표 4에 나타내었다.

【표 4】 고순도분리 5-8 0.0% 0.1% 1.8% 97.6% 0.7% 알를로스 분획

이온정제 후 5-8 0.0% 0.1% 1.8% 97.6% 0.7%

1차 농축 후 30.8 0.0% 0.1% 1.8% 97.6% 0.7%

2차 농축 후 70.3 0.0% 0.1% 1.8% 97.6% 0.7% 최종 용기 70.3 0.0% 0.1% 1.8% 97.6% 0.7% 상기 표 4에 나타낸 바와 같이， 알를로스를 다중효용관 농축 설비를 이용하여 2단계 농축을 할 때 초기 30 내지 40 중량 ¾로 농축 후 다시 70 내지 72 중량 %로 할 경우 알를로스의 함량이 고순도 분리 후부터 안정적으로 유지되는 것을 볼 수 있다. 실시예 3

실시예 1과 동일한 방법으로 진행하되, 농축 공정에서 박막진공 농축기를 이용하여 2단 농축으로 농축을 수행하였다.

알를로스 분획은 이온정제 공정을 거쳐 전도도를 20 uS/cm 이하로 맞춘 뒤 원심식 박막진공농축기를 이용하여 농축하였다. 원심식 박막진공농축기를 이용하여 400 내지 600의 농축 rpm으로, 스팀의 온도

70 r 내지 8(rc로 주었고, 이때 용액의 온도는 4(rc 내지 5(rc로 가온하여， 초기 알롤로스 용액의 알를로스 함량 5 내지 15중량 %에서 50 내지 60중량 %까지 1차 농축을 하였다. 이어서， 2차 농축의 경우 스팀 온도는 80 내지 90 ^° C로 가온하였고, 농축 대상 용액의 온도 50 내지 60 ^° C에서 수행하여, 알를로스 함량 70 내지 72 중량 ¾>까지 2차 농축하였다. 알를로스 분획이 원심박막진공농축기 설비에서 농축에 소요되는 시간은 1차 농축 및 2차 농축은 각각 30분 내지 90분 범위로 진행하였다. 농축액은 열교환기를 거쳐 io°c 내지 3(rc로 넁각하여 폴리에틸렌 용기에 포장하였다. 각 공정별 함량은 아래 표 5에 나타내었다.

【표 5】

1차 농축 후 54.6 0.0% 0.1% 2.2% 96.9% 0.8%

2차 농축 후 70.5 0.0% . 0.1% 2.2% 96.9% 0.8% 최종 용기 70.5 0.0% 0.1% 2.2% 96.9% 0.8% 상기 표 5 에 나타낸 바와 같이, 알를로스를 원심박막진공 농축 설비를 이용하여 2단계 농축을 할 때， 초기 함량의 50 내지 60 중량 %로 농축 후 다시 70 내지 72 중량 %로 할 경우， 알롤로스의 함량이 고순도 분리 후부터 안정적으로 유지되는 것을 볼 수 있었다. 실시예 4

비교예， 실시예 2 및 실시예 3 에서 얻어진 알를로스 시럽을 이용하여 SUS304 재질의 보관용기에 각각 500g씩 담아 25 ^° C , 35 ^° C , 45 ^° C 보관하였고 1주일에 한번씩 알를로스 함량 변화를 측정하였다. 실험은 5주 동안 진행하였다. 각 주차별 알를로스 함량은 아래 표 6에 나타내었다.

【표 6】

상기 표 6 에 나타낸 바와 같이， 알롤로스를 다중효용관 농축기를 사용하여 1단계 농축으로 생산한 비교예 샘플의 경우 저장 안정성이 떨어지는데 반해, 실시예 2 및 3의 제품은 비교예 샘플보다 감소폭이 적은 것을 알 수 있었다. 특히, 35 ^° C 저장 안정성 테스트 결과에서는 함량 감소폭이 각각 비교예 4.1%, 실시예 2의 1.1%， 및 실시예 3의 1.3%을 나타내어 농축 온도를 낮춤으로써 알를로스의 안정성을 향상시키는 효과를 얻었다.