以下に本発明を詳細に説明する。
 本発明の抗体の安定化方法は、抗体を、セ� ��シンおよび/またはその加水分解物、もしく はその同等物と共存させることを要旨とする ものである。

 本発明において、抗体は液体状態または� ��燥状態にいずれであってもよい。また、抗� ��は担体に固定化されていてもよい。本明細� ��において、「液体状態」とは、抗体が液体� ��に存在することをいい、抗体が液体に完全� ��溶解している状態、懸濁液のように液体に� ��散している状態、担体に固定化され、液体� ��浸漬された状態も包含するものとする。

 本発明において「安定化」とは、抗体があ� ��物質と共存した場合(a)と共存していない場� ��(b)において、抗体を一定期間保存した後の� ��抗体の保持する残存機能が(a)>(b)となるよ うな状態をいう。
 例えば、抗体が液体状態で、ある物質を共� ��させた場合(a)と、共存させない場合(b)で、� ��当な温度で一定時間保存した後の残存活性� ��比率が、(a)>(b)となる状態をいう。
 また、抗体が乾燥状態で、ある物質を共存� ��せた場合(a)と、共存させない場合(b)で、適� ��な温度で一定時間保存した後の残存活性の� ��率が、(a)>(b)となる状態をいう。
 さらに、抗体が担体に固定化され、かつ、� ��体に浸漬状態で、ある物質を共存させた場� ��(a)と、共存させない場合(b)で、適当な温度� ��一定時間保存した後の残存活性の比率が、( a)>(b)となる状態をいう。
 さらにまた、抗体が担体に固定化され、か� ��、乾燥状態で、ある物質を共存させた場合( a)と、共存させない場合(b)で、適当な温度で� ��定時間保存した後の残存活性の比率が、(a)& gt;(b)となる状態をいう。

 安定化の評価は、例えば、ある物質を共存� ��せた場合(a)と、共存させない場合(b)につい� ��それぞれ残存活性を経時的に測定し、半減� ��を比較することによって行うことができる� ��
 「適当な温度で一定時間保存」の条件は、� ��記(a)と(b)で残存活性に差があらわれる条件� ��あれば特に限定されないが、好ましくは、� ��断薬などでの長期保存安定性を念頭に置い� ��加速(苛酷)試験の条件が選択される。具体� �には、「40℃で2週間保存」、「50℃で1週間� �存」などが挙げられる。時間が許せば、抗� �を含む診断薬などが実際に長期保存される� �度として汎用される2℃~10℃の冷蔵条件下で6 ヶ月間以上の保存を選択してもよい。

 本発明の一実施態様としては、リン酸緩衝� ��理食塩水(pH7.2~7.5)中で、抗体を50℃で6日間� �存した後の残存活性率を、セリシンを共存� �せることによって、セリシンを共存させな� �場合に比べて向上させる方法である。
 本発明の別の実施態様としては、抗体をポ� ��塩化ビニル製のアッセイプレートに固定化� ��、乾燥した状態で、50℃で8日間保存した後� ��残存活性率を、セリシンを共存させること� ��よって、セリシンを共存させない場合に比� ��て向上させる方法である。
 上記実施態様において、セリシンに替えて� ��リシン加水分解物またはセリシン同等物を
用いても良い。また、本発明が上記実施態様 に限定されないことは言うまでもない。

 ここでセリシンとは、繭糸または生糸に存� ��する非結晶性の天然タンパク質であり、本� ��細書においては特に、繭糸または生糸から� ��加水分解物の状態で抽出されたものをいう� ��のとする。セリシンは、国際公開第2002/08613 3号パンフレットに開示されるアミノ酸配列� �有し、38アミノ酸からなる機能性ペプチドを 反復配列として含んでなる。加水分解物とは 、該機能性ペプチドを含む天然物由来セリシ ンを、酸やアルカリなどにより加水分解した ものである。また、同等物とは、少なくとも 1以上の機能性ペプチドを含むように化学合� �されたものや、遺伝子工学的手法により得� �れたものをいう。さらに、これらにおいて� �、本発明の安定化作用を損なわない範囲内� �、あるいはその特性を改善する目的で、天� �型アミノ酸配列に対して、アミノ酸残基が� �失、置換、挿入、付加されたものであって� �よい。本発明に用いるセリシンやその加水� �解物、その同等物は、国際公開第2002/086133号 パンフレットに開示される公知の方法に従っ て得ることができる。
 本発明の実施例においては、入手が容易な� ��水分解物を用いている。なお、加水分解物� ��分子量は、安定化作用を有する限り特に限� ��されないが、取扱い性の点から、重量平均� ��子量が5,000~100,000、特には10,000~50,000の範囲� �あるものが好ましく用いられる。

 セリシンおよび/またはその加水分解物、 もしくはその同等物の使用量は、使用する抗 体の種類、抗体の濃度、抗体を含む組成物の 形態などによって適宜設定すればよい。例え ば、組成物が液体状態である場合、0.1~200g/L� �好ましくは0.1~100g/L、より好ましくは0.2~20g/L� ��濃度で添加することができる。このとき、� ��体と、セリシンおよび/またはその加水分解 物、もしくはその同等物の重量比は、1:1~1:10, 000,000、好ましくは1:10~1:1,000,000、より好まし� ��は1:100~1:100,000とすることができる。

 本発明の対象となる抗体は特に限定される� ��のではないが、典型的には臨床診断に用い� ��れる抗体である。具体的には例えば、マウ� ��IgGや免疫グロブリン(IgG、IgA、IgM、IgD、IgE)� �また、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、 HTLV(成人T細胞白血病ウイルス)、HIV(エイズウ� ��ルス)、インフルエンザウイルス、クラミジ ア、梅毒トレポネーマ、トキソプラズマ等の 各種感染症の病原体を抗原とする抗体などを 挙げることができる。抗体はポリクローナル 抗体であっても、モノクローナル抗体であっ てもよく、モノクローナル抗体の混合物であ ってもよい。また、酵素処理や遺伝子工学的 に断片化されたF(ab’)2、Fab’、Fab等の抗体フ ラグメントであってもよい。
 さらに抗体は、ペルオキシダーゼ、アミラ� ��ゼ、カタラーゼ、グルコースオキシダーゼ� ��グルコースデヒドロゲナーゼ、アルカリフ� ��スファターゼ、β-ガラクトシダーゼ等の各� ��酵素や、蛍光色素、金属コロイド、着色ラ� ��ックス粒子などで標識されていてもよい。
 本発明の対象となる抗体の保存状態は特に� ��定されるものではなく、液体状態であって� ��、凍結状態であっても、乾燥状態であって� ��よく、任意の状態で保存されたものが使用� ��き、一度乾燥したものを液体に再溶解また� ��再懸濁させたものを包含するものとする。

 本発明の抗体の安定化方法によれば、安定� ��された抗体を含む組成物が提供される。組� ��物の存在状態は、液体状態であっても、乾� ��状態であってもよく、特に限定されない。� ��た、抗体が担体に固定化されていてもよく� ��この状態で液体に浸漬した状態であっても� ��乾燥した状態であってもよい。なお、組成� ��が液体状態である場合、抗体が液体に完全� ��溶解している状態のみならず、懸濁液のよ� ��に液体に分散している状態も包含するもの� ��する。
 このような組成物は、チップ状、スリット� ��などの形態に加工される場合もある。そし� ��、適当な容器に入れられたり、適当なデバ� ��スに搭載されたりして、例えば、分子生物� ��用途の分析試薬、生化学用途の分析試薬、� ��外診断薬、バイオセンサー、医薬品などと� ��て、またこれらを含むキットとして提供さ� ��る。

 組成物は、安定化、形状改善などの目的で� ��さらに他の物質を含んでいてもよい。
 液体状態の組成物は、少なくとも、目的と� ��る抗体と、セリシンおよび/またはその加水 分解物、もしくはその同等物を、水、生理食 塩水、各種水性緩衝液などの液体に溶解また は懸濁することによって調製することができ る。このとき、抗体の濃度は特に限定される ものではないが、通常、0.001~100mg/mL、好まし� ��は0.01~10mg/mLである。また、水性緩衝液とし� ��具体的には、PIPES、MES、TES、MOPS、HEPES等のGo od緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ� ��緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス緩衝液な� ��、分子生物学あるいは生化学の分野で公知� ��緩衝液を挙げることができる。このような� ��成物は硫安、燐安、食塩、塩化カリウム等� ��塩類を含んでいてもよい。また、グリセロ� ��ル、エチレングリコール等の多価アルコー� ��類、アルキルグルコシド、ポリエチレング� ��コールアルキルエーテル、脂肪酸アルコー� ��エステル等の界面活性剤を含んでいてもよ� ��。さらに、アジ化物、1,1‘-Methylen-bis[3-(1-hyd roxymethyl-2,4-dioximidazolidin-5-yl)-urea]、2-Methyl-3(2H) -isothiazolone-hydrochloride、5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane� �2-Hydroxypyridine-N-oxide、2-Chloroacetamide等の防腐� �を含んでいてもよい。

 乾燥状態の組成物は、前記液体状態の組� ��物を、定法により乾燥、例えば凍結乾燥、� ��霧乾燥することによって調製することがで� ��る。このような組成物は、一般的な安定剤� ��形状改善剤として、グルコース、フルクト� ��ス、ガラクトース、マンノース、キシロー� ��、ラクトース、シュークロース、ラフィノ� ��ス、トレハロース、シクロデキストリン、� ��ルラン、イヌリン、可溶性デンプン等の糖� ��、グルシトール、マンニトール、イノシト� ��ル、キシリトール等の糖アルコール類、グ� ��シン、アラニン、セリン、トレオニン、グ� ��タミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、� ��スパラギン、リジン、ヒスチジン等のアミ� ��酸およびアミノ酸塩、グリシルグリシン、� ��リシルグリシルグリシン等のペプチド類、� ��ン酸塩、ホウ酸塩、硫酸塩、トリス塩等の� ��機塩類、ゼラチン、カゼイン、アルブミン� ��のタンパク質、ポリオキシエチレンアルキ� ��エーテル、ポリエチレングリコールアルキ� ��エーテル等の界面活性剤などを含んでいて� ��よく、乾燥前の液体状態の段階で添加して� ��けばよい。

 前記液体状態および乾燥状態の組成物に� ��いて、抗体が特に酵素標識されている場合� ��あっては、標識した酵素を安定化させる目� ��で、NAD+、NADH、NADP+、NADPH、ATP、ADP、AMP、GTP� ��GMP、FADやFMN、ビオチン、ナイアシン、コバ� ��ミン、PQQ等の補酵素類、ナトリウム、カリ� ��ム、亜鉛、マグネシウム、カルシウム、リ� ��ウム、銅、鉄、マンガン等の金属塩、硝酸� ��、リン酸塩、硫酸塩、ホウ酸塩、トリス塩� ��の塩類、チオール化合物、セレン化合物、� ��ミノ酸及びアミノ酸塩、糖および配糖体を� ��んでいてもよい。また、フェノール系およ� ��アニリン系の各種トリンダー試薬、カプラ� ��である4-アミノアンチピリン、テトラゾリ� �ム塩類、フエナジンメトサルフェート等の� �子キャリヤー、ロイコ系試薬等の色素類、� �質類を含んでいてもよい。さらに、非特異� �応防止剤を含んでいてもよい。非特異反応� �止剤としては、特に限定されるものではな� �が、標識抗体と同種の抗体、標識抗体と同� �の酵素を含むことができる。同種の抗体と� �ては、マウスIgG、マウスIgM、高分子量化さ� �たマウスIgG重合体、ヤギIgG、ヒツジIgG、ウ� �IgG、ラットIgG、ウサギIgG等を挙げることが� �きる。これらは、動物血清、腹水など体液� �まま添加することもできるが、ウイルス不� �化処理、補体非働化処理、脱脂処理などを� �って添加することが望ましい。同種の酵素� �しては、ペルオキシダーゼ、アミラーゼ、� �タラーゼ、グルコースオキシダーゼ、グル� �ースデヒドロゲナーゼ、アルカリフォスフ� �ターゼ、β-ガラクトシダーゼ等を挙げるこ� �ができる。

 抗体が担体に固定されている場合において� ��用いられる担体は特に限定されるものでは� ��く、免疫測定用として用いられているもの� ��ら適宜選択すればよい。例えば、ポリスチ� ��ン、ポリエチレン、ポリプロピレン等の合� ��高分子化合物、多孔性ガラス、ガラスビー� ��、磁性粒子等の無機物質などを挙げること� ��できる。またその形態としては、チューブ� ��プレート、マイクロタイタープレート、微� ��子等を挙げることができる。
 担体への抗体の固定化は、公知の方法に従� ��て行うことができる。例えば、グルタルア� ��デヒド、ビスジアゾベンジジン、トリレン� ��イソシアネート、ジフロロニトロベンゼン� ��カルボジイミド類、キノン類、塩化クロム� ��タンニン酸等のいわゆるカップリング剤を� ��いた化学的結合法、抗体と担体を水、生理� ��塩水、各種水性緩衝液などの液体中で接触� ��せる物理的吸着法などを挙げることができ� ��。いずれの方法においても、抗体を担体に� ��定化した後、セリシンおよび/またはその加 水分解物、もしくはその同等物を共存させる 。
 組成物は、抗体が担体に固定化されていな� ��組成物同様、各種添加剤を含んでいてもよ� ��。
 かくして、抗体が担体に固定化され、かつ� ��液体に浸漬状態の組成物を調製することが� ��きる。

 抗体が担体に固定化され、かつ、乾燥状態� ��組成物は、前記液体に浸漬状態の組成物を� ��定法により乾燥、例えば自然乾燥、通気乾� ��、真空乾燥、凍結乾燥することによって調� ��することができる。このとき、セリシンお� ��び/またはその加水分解物、もしくはその同 等物による安定化効果を有効に発揮させるた め、乾燥前に、4℃で6~24時間、好ましくは10~2 0時間、または25℃で2~8時間、好ましくは4~6時 間、さらにまたは37℃で10分間~3時間、好まし くは30分間~2時間の浸漬時間をとることが望� �しい。
 組成物は、抗体が担体に固定化されていな� ��組成物同様、各種添加剤を含んでいてもよ� ��。