La presente invención se refiere a un procedimiento nuevo de síntesis de intermedios de crambescidinas y de la cimipronidina, además de los posibles derivados de la misma.

Además la presente invención se refiere a unos intermedios de reacción para la síntesis de las crambescidinas y de la cimipronidina o de cualquiera de sus derivados.

ESTADO DE LA TÉCNICA La familia de las crambescidinas presenta un gran número de alcaloides que se caracterizan por presentar un ion guanidinio pentacíclíco en su estructura. Esta familia de alcaloides posee una gran importancia debido a que muchos de sus miembros presentan notables propiedades biológicas, tales como actividades anticancerígena, antifúngica, antivírica y bloqueadora de canales de Ca ²⁺ .

La cimipronidina es un producto natural guanidínico que en la actualidad se puede considerar el producto natural que presenta el núcleo básico de las crambescidinas. El extracto butanólico de la planta Cimicifuga racemosa (compuesto por cimipronidina; ácidos cimicifúgicos A, B y F; ácido fukinólico, ácido ferúlíco y ácido ísoferúlíco) ha mostrado afinidad por el receptor 5-HT ₇ (J. Nat. Prod. 2005, 68, 1266-1270).

Los antagonistas de los canales de calcio son medicamentos usados en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares como angina, arritmias (ritmos irregulares) e hipertensión. El calcio es necesario para la contracción de las células del músculo liso, del músculo esquelético y del músculo cardiaco. En el caso del músculo cardiaco, la contracción se produce por la alteración del movimiento del calcio a través de los canales en las células cardiacas. Los antagonistas de los canales de calcio ayudan a suprimir irregularidades en el ritmo cardiaco. El calcio es importante también para los vasos sanguíneos, ayudando al control de la presión arterial. Los antagonistas de los canales de calcio provocan la relajación de la musculatura lisa arterial, siendo usados en el tratamiento de la hipertensión. El verapamilo, el nifedipina y el diltiazem son antagonistas de los canales de calcio con similares, aunque no idénticos, sitios de acción. Como el músculo cardiaco depende de la entrada de calcio a sus células para funcionar adecuadamente, los antagonistas de los canales de calcio pueden afectar al funcionamiento normal del corazón. Efectos colaterales peligrosos incluyen supresión de la función cardiaca, llevando a insuficiencia cardiaca congestiva, frecuencias cardiacas bajas y disminución de la tensión arterial.

Debido a lo anterior, se hace necesario el poder obtener nuevos compuestos que ejerzan un papel antagonista sobre los canales de calcio y que no tengan efectos negativos sobre el funcionamiento del corazón. Los océanos y los mares son una fuente de un extenso grupo de productos naturales con estructura única, que son principalmente acumulados en invertebrados como las esponjas y los moluscos (Burkhard et al. Drug. Dis. Today 2003, 8(2), 536-544). Varios de estos compuestos muestran una pronunciada actividad farmacológica y son candidatos interesantes para nuevos medicamentos en varías áreas de tratamiento (Newman et al. J. Nal Prod. 2003, 66, 1022-1037). Las esponjas han provisto más productos naturales que cualquier otro organismo, debido en parte a su propensión a producir metabolitos bioactivos {Faulkner et al. Nal Prod. Rep. 2002, 19, 1 -48). Por lo tanto existe la necesidad de obtener nuevos compuestos capaces de modular los canales de calcio (VDCC), los cuales puedan ser útiles en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares. En este mismo sentido unos productos naturales que se postulan como antagonistas de los canales de calcio son las crambescidinas, procedentes principalmente de la esponja Crambe crambe. Dentro de este tipo de productos naturales está la crambescidina 800, conocida por su efecto protector frente al estrés oxidativo en células neuronales (J. Nal Med. 2007, 67(3), 288-295), como agente antimalárico (J. Antibiot 2006, 59{9), 583-590) o al igual que la crambescidina 816, como modulador de los canales de calcio (J. Nal Prod. 1993, 56(7), 1007-1015). Sin embargo la extracción de este tipo de productos naturales supone llevar a cabo procedimientos complicados, mediante los cuales no se llegan a obtener grandes rendimientos y en la mayoría de los casos el poder purificar el extracto de dicha esponja se hace complicado. La obtención de las crambescidinas de fuentes naturales por extracción y purificación es un proceso arduo y largo debido a la complejidad estructural de estos alcaloides y a la mezcla de compuestos similares (p.ej. otras crambescidinas, crambescinas, crambidina y ptilomicalina A) que suelen presentar las esponjas y estrellas de mar que las contienen. Las principales características estructurales que presentan las crambescidinas son grupos polares (un catión guanídínio, alcoholes y aminas) y, a la vez, una cadena hidrocarbonada apolar larga.

A pesar de que este tipo de compuestos se postulan como buenos inhibidores de los canales de calcio o como agentes para la elaboración de medicamentos para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, o neurodegenerativas o en el tratamiento de tumores, presentan la limitación de que su extracción del medio natural es escasa. Por lo tanto es necesario el poder desarrollar nuevos procedimientos de síntesis química mediante los cuales se puedan obtener dichas crambescidinas.

Dada la escasez natural de las crambescidinas, la única forma de obtener cantidades sustanciales de estos compuestos es mediante síntesis química. La síntesis de algunos miembros de la familia de las crambescidinas se ha llevado a cabo por los siguientes cinco grupos de investigación: - Snider (J. Am. Chem. Soc. 1994, 1 16, 549-557).

- Murphy { Tetrahedron 1996, 52, 8315-8332; Tetrahedron Lett. 2003, 44, 251 - 254; Tetrahedron 2007, 63, 1 1771 -1 1780). El principal problema de los dos métodos anteriores de síntesis es la diastereoselección inexistente de la adición de guanidina (o su precursor) en la formación de la pirrolídína, con la consecuente pérdida de al menos el 50% del sustrato de cadena carbonada acíclica en las últimas etapas de síntesis. Otro inconveniente que presenta este método es la inaccesibilidad de los miembros de la familia de las crambescidinas que presentan un hidroxilo en la posición 13 (como las crambescidinas 673, 687, 816, 830, 834 y 844). Además, el método de síntesis del grupo del Dr. Murphy carece de la cadena carbonada lateral que da lugar a los miembros de mayor peso molecular de la familia de las crambescidinas, como las crambescidinas 800 y 816.

- Nagasawa (Org. Lett. 2002, 4, 177-180; Chem. Record 2003, 3, 201 -21 1 ; YakugakuZasshi 2003, 123, 387-398).

Con este método de síntesis no se pueden sintetizar los miembros de mayor peso molecular de la familia de las crambescidinas por carecer de la cadena lateral. Este método tampoco permite la síntesis de los miembros hidroxilados en la posición 13 (como las crambescidinas 673, 687, 816, 830, 834 y 844).

- Overman (J. Am. Chem. Soc. 1995, 1 17, 2657-2658; J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 6944-6945; J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 4893-4903; J. Am.

Chem. Soc. 2000, 122, 4904-4914; WO 01 /00626; US 2003/0176697; WO 2004/028452; Bioorg. Med. Chem. 2004, 14, 3445-3449; US 2005/0239804; J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 3380-3390; J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 15652- 15658).

Con el método de síntesis desarrollado por el grupo del Dr. Overman se han sintetizado ptilomicalina A; crambescidinas 359, 431 , 657 y 800; 13,14, 15- isocrambescidinas 657 y 800; ácido crambescidina y neofolitispate 2, pero no se ha podido sintetizar ningún miembro hidroxilado en la posición 13 (crambescidinas 673, 687, 816, 830, 834 y 844). - Gin (J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 1802-1803).

El método de síntesis desarrollado por el grupo del Dr. Gin está orientado a la síntesis de crambidína, miembro de la familia de las crambescidinas que presenta un núcleo tetracíclico en vez del núcleo pentacíclico más común {presente en la ptilomicalina A; en las crambescidinas 359, 431 , 657, 673, 687, 800, 816, 818, 826, 830, 834 y 844; en el ácido crambescidina, en los neofolítíspates 1 -3 y en las isocrambescidinas 657 y 800). El problema que presenta este método es que no es posible sintetizar otros miembros de la familia por ciclación de la crambidína (J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 15652- 15658).

Por lo tanto, debido a todos los problemas enunciados anteriormente, se hace necesario desarrollar un procedimiento de síntesis mediante el cual se obtengan buenos rendimientos de las crambescidinas y que además implique el uso reacciones con reactivos comerciales baratos.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

A tenor de todo lo anteriormente expuesto, la presente invención se refiere a un nuevo procedimiento de síntesis de intermedios de crambescidinas y de la címipronidina, incluyendo los derivados de la misma, que supone una mejora frente a las metodologías ya conocidas.

Por lo tanto un primer aspecto de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I):

(I)

donde

X se selecciona entre un átomo de N u O, un grupo -N-R ₃ o un grupo de fórmula general (II):

OI)

Y se selecciona entre un grupo -CO-, un grupo -CH ₂ - o un compuesto de fórmula (III):

(III)

Ri se selecciona es grupo alquilo C _r C ₄ .

R2 se selecciona entre un grupo alquilo C1-C3, H o un compuesto de fórmula general (IV):

(IV)

R3 se selecciona entre un grupo protector de aminas o amidas, (tal cual se describe en Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 4th ed.; Wuts, P. G, M.; Greene, T. W.; John Wiley & Sons: Hoboken, New Yersey, 2007 cuyo contenido se incorpora aquí por referencia), o un grupo -COOR ₅ , PhCH ₂ -, 4- MeOC ₆ H ₄ CH ₂ -, 4-MeOC ₆ H ₄ -, 4-MeC ₆ H ₄ S0 ₂ -, CH ₃ CO-, CF ₃ CO-, PhCO-, - Si(R ₆ ) ₃ o -OR ₇ ;

R ₄ se selecciona entre H o un grupo alquilo C1 -C3, -CH ₂ OH, un grupo alquenílo C ₂ -C-7, un grupo -CF ₃ o un grupo arilo sustituido o sin sustituir;

R ₅ es un grupo hídrocarbilo saturado o insaturado seleccionado entre metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, tere-butilo, alilo, bencilo, 4- metoxibencilo, 9-fluorenilmetilo, un grupo 2,2,2-tricloroetilo o un grupo 2- (trimetilsilil)etilo;

R ₆ se selecciona entre metilo, etilo, isopropilo, tere-butilo o fenilo.

R ₇ se selecciona entre H, PhCH ₂ -, 4-MeOC ₆ H ₄ CH ₂ - o -C0 ₂ R ₅ .

representa los puntos de unión. o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos.

Según una realización preferida X se selecciona entre un átomo de N u -O-.

Según otra realización preferida X es un grupo -NR ₃ .

Según otra realización preferida X es un compuesto de fórmula general (II). Según una realización preferida, Y es un grupo -CO-.

Según otra realización preferida, Y es -CH ₂ -.

Según otra realización preferida, Y es un compuesto de fórmula (III). Según una realización preferida, Ri es un grupo alquilo C1-C2.

Según otra realización preferida, R-i es un metilo.

Según otra realización preferida, R1 es un etilo. Según una realización preferida, R2 es un compuesto de fórmula general (IV). Según otra realización preferida, R ₂ es H.

Según una realización preferida, R ₃ es un grupo protector de aminas o amidas. Según otra realización preferida, R3 se selecciona entre un grupo -COOR5, PhCH ₂ -, 4-MeOC ₆ H ₄ CH ₂ -, 4-MeOC ₆ H ₄ -, 4-MeC ₆ H ₄ S0 ₂ -, CH ₃ CO-, CF ₃ CO-,

Según otra realización preferida, R ₃ es un grupo -COOR5.

Según una realización preferida, R ₄ se selecciona entre un grupo metilo o H. Según otra realización preferida, R ₄ es un grupo metilo.

Según otra realización preferida, R ₄ es H.

Según una realización preferida, R5 es un grupo hidrocarbilo saturado o insaturado seleccionado entre metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, tere-butilo, alílo, bencilo, 4-metoxíbencílo, 9-fluorenilmetilo, un grupo 2,2,2- tricloroetilo o un grupo 2-(trimetilsilil)etilo. De manera preferida, R5 es terc- butílo.

Según una realización preferida:

- X es un átomo de N u -O-.

- Y es un grupo -CO-.

- R1 es un grupo alquilo CrC ₂ .

- R ₂ es un compuesto de fórmula general (IV).

- R ₄ se selecciona entre H o metilo.

Según otra realización preferida:

- X es un átomo de N u -O-. - Y es un grupo -CO-.

- Ri es un metilo.

- R ₂ es un compuesto de fórmula general (IV).

- R ₄ es H.

Según otra realización preferida:

- X es un átomo de N u -O-.

- Y es un grupo -CO-.

- Ri es un metilo.

- R ₂ es un compuesto de fórmula general (IV).

- R ₄ es metilo.

Según otra realización preferida:

- X es un átomo de N u -O-.

- Y es un grupo -CO-.

- Ri es un etilo.

- R ₂ es un compuesto de fórmula general (IV).

- R ₄ es metilo. Según otra realización preferida:

- X es un átomo de N u -O-.

- Y es un grupo -CO-.

- Ri es un etilo.

- R ₂ es un compuesto de fórmula general (IV). - R ₄ es H.

Según una realización preferida:

- X es un compuesto de fórmula general (II):

- Y es un compuesto de fórmula (III):

- R es un grupo alquilo d-C ₂ .

- R ₂ es H.

- R ₃ es un grupo áster -COOR ₅ . - R ₅ se selecciona entre butilo, isobutilo o tere-butilo.

Según otra realización preferida:

- X es un compuesto de fórmula general {II):

- Y es un compuesto de fórmula (III):

- Ri es un metilo.

- R ₂ es H.

- R ₃ es un grupo áster -COOR ₅ .

- R ₅ es tere-butilo.

Según otra realización preferida:

- X es un compuesto de fórmula general (II):

- Y es un compuesto de fórmula (III):

- Ri es un etilo.

- R ₂ es H.

- R3 es un grupo éster -COORs.

- R5 es tere-butilo.

Según una realización preferida:

- X es un compuesto de fórmula general (II):

- Y es -CH ₂ -:

- R ₁ es un metilo.

- R ₂ es H.

- R3 es un grupo éster -COOR5.

- R ₅ es terc-butílo.

Según una realización preferida el compuesto de fórmula general (I) se selecciona de la siguiente lista: 11



o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos.

Preferiblemente, el compuesto de fórmula general (I) se selecciona de la siguiente lista:

o cualquiera de sus sales, isómeros o solvatos.

Un segundo aspecto de la presente invención se refiere al uso del compuesto de fórmula general (I) como intermedio de reacción para la síntesis de crambescídinas, de la cimipronidina o de cualquiera de sus derivados.

Un tercer aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento de síntesis de un compuesto de fórmula general (I) como intermedio de la síntesis de crambescídinas o de cimipronidina o de cualquiera de sus derivados que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula general (V) con un compuesto de fórmula (VI) o un compuesto de fórmula general (VII):

(VI)

(VII) donde

Ri e Y se definen igual que anteriormente.

R ₈ se selecciona entre H o cualquier halógeno.

Boc es íerc-butoxicarbonilo.

W se selecciona entre -NH, un grupo NR ₃ , u -O-.

R3 se define como anteriormente.

Z se selecciona entre un grupo H cuando se lleva a cabo una reacción de Heck,, SnBu ₃ cuando se lleva a cabo una reacción de acoplamiento de Stílle, MgG cuando se lleva a cabo una reacción de acoplamiento de Kumada, B(R ₉ ) ₂ cuando se lleva a cabo una reacción de acoplamiento de Suzuki, Si(Rio)3 cuando se lleva a cabo una reacción de acoplamiento de Hiyama o ZnG cuando se lleva a cabo una reacción de acoplamiento de Negishi.

B(R ₉ ) ₂ se selecciona entre -BF ₃ K, 9-BBN, -B(OH) ₂ , -B(OMe) ₂ , -B(OEt) _2> o- C ₆ H ₄ (0) ₂ B- o (Me ₂ C-0-) ₂ B-

R ₁₀ se selecciona entre -F, -OMe, -OEt, -Me o -CH ₂ Ph.

G se selecciona entre cualquier halógeno.

Un cuarto aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento de síntesis del compuesto de fórmula general (V) que comprende el siguiente esquema de reacciones:

Ph ₃ P¾^.C0 ₂ e

23 °C, 45 min CO,Bu ^¡ C0 ₂ Bu' CO _? Bu'

Ph3P¾ _t ^C0 ₂ R ₁ CF ₃ C0 ₂ H

PhMe _¾¾/ C0 ₂ R ₁ CH ₂ CI ₂

85 , 60 h WW 23 °C, 4 h*" '

C0 ₂ Bu ^f

donde Y, R1 y W se definen como anteriormente.

Un quinto aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento de síntesis del compuesto de fórmula general (V) que comprende el siguiente esquema de reacciones: Ph ₃ ^C0 ₂ R ₁

0 °C, 30 min

donde

Y, W y R ₁ se definen como anteriormente.

T es cualquier reactivo halogenante, seleccionado del grupo formado por CI2, Br ₂ , I2, /V-clorosuccinimída, W-bromosuccínimida o A/-yodosuccinimida. En la presente invención se entiende por grupo hidrocarbilo a un grupo univalente por eliminación de un hidrógeno de un hidrocarburo.

En la presente invención el término "alquilo" se refiere en la presente invención a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, que tienen de 1 a 4 o de 1 a 3 átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, butilo, tere- butilo etc. Los radicales alquilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes tales como halógeno, hidroxilo, azida, ácido carboxílico o un grupo sustituido o no sustituido seleccionado de entre amino, amido, éster carboxílico, éter, tiol, acílamino o carboxamído, alcóxido, tiol, amino, acilamino, ciano, carboxilato, carboxamida, carboxiéster, arilo o heteroarilo o combinaciones de estos grupos. Cuando el grupo alquilo está sustituido, lo está preferentemente por uno o varios grupos amina, amida o éter, que a su vez pueden estar o no sustituidos por grupos alquilo, amida, cicloalquilo o éteres y estos a su vez, pueden estar igualmente sustituidos o no.

En la presente invención el término "alquenilo" se refiere en la presente invención a cadenas alifáticas, lineales o ramificadas, que tienen de 2 a 7 átomos de carbono Los radicales alquenilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes tales como halógeno, hídroxilo, azida, ácido carboxílico o un grupo sustituido o no sustituido seleccionado de entre amíno, amido, éster carboxílico, éter, tíol, acilamino o carboxamido, alcóxido, tiol, amino, acilamino, ciano, carboxilato, carboxamida, carboxiéster, arilo o heteroarilo o combinaciones de estos grupos. Cuando el grupo alquenilo está sustituido, lo está preferentemente por uno o varios grupos amina, amida o éter, que a su vez pueden estar o no sustituidos por grupos alquilo, amida, cicloalquilo o éteres y estos a su vez, pueden estar igualmente sustituidos o no. El término cicloalquilo se refiere a un radical estable monocíclico o bicíclico de 3 a 10 miembros, que está saturado o parcialmente saturado, y que sólo consiste en átomos de carbono e hidrógeno, tal como ciclohexilo o adamantilo.

El término arilo se refiere, en la presente invención, a anillos aromáticos sencillos o múltiples, que tienen de entre 5 a 18 eslabones en los que se ha eliminado un protón del anillo. Preferentemente el grupo arilo tiene de 5 a 7 átomos de carbono, aún más preferiblemente es un fenilo. Los grupos arilo son por ejemplo, pero sin limitarse a fenilo, naftílo, difenilo, indenilo, fenantrilo o antracilo. Los radicales arilo pueden estar opcionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes.

A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención.

EJEMPLOS

Eiempio 1 : Síntesis del compuesto de fórmula general (V) (2EM3,6-f A/.Af- b¡s(ferc-butoxicarbonil)carbamimidoinazanoloct-2-enodioato de dimetilo

(VIH) 89%

(V)

Sobre una disolución del compuesto de fórmula (VIII) (28 mg, 0.13 mmol) en DMF (3 ml_) bajo atmósfera de argón se adicionaron A/,/V-bis(ferc- butoxicarbonil)-S-metilisotiourea (42 mg, 0.14 mmol) y trietílamina (0.05 mL, 0.39 mmol, d 0.725 g/cm ³ ). Sobre la mezcla de reacción resultante, se añadió cloruro de mercurio (39 mg, 0.143 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. Transcurrido este tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida, se adicionó agua y se extrajo con Et ₂ 0 (3 x 5 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NH ₄ CI (sat.), se secaron (MgS0 ₄ ), se filtraron y se llevaron a sequedad. El residuo resultante se purificó por columna cromatográfica (hexano/AcOEt, 7:3) obteniéndose el producto (V) como un aceite incoloro (53 mg, R= 89%).

¹ H RMN [300 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ ]: 9.81 (1 H, s, NH), 5.60 (1 H, s, H-2), 4.76- 4.62 (1 H, m, H-6), 3.70 (3H, s, OMe), 3.65 (3H, s, OMe), 3.43-3.28 (1 H, m, H- 7), 3.16-2.93 (2H, m, H-7, H-4), 2.47 (1 H, dd, J = 15.7, 9.4 Hz, H-4), 2.21 (1 H, ddd, J = 12.7, 12.2, 3.2 Hz, H-5), 1 .85 (1 H, ddd, J = 12.7, 7.5, 4.3 Hz, H-5), 1 .50 <18H, s, 2 x C(CH ₃ ) ₃ ). ¹³ C RMN [75 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ ]: 171 .3, 168.1 , 158.8, 151 .2, 94.9, 77.3, 60.0, 51 .8, 50.8, 37.6, 29.9, 28.0, 26.5. EM (ESI); m/z (int. reí.): 494 ([M + K] ⁺ , 25), 478 ([M + Na] ⁺ , 59), 456 ([M + H] ⁺ , 100). HRMS (Cl): Calculado para C ₂ H33 ₃ 0 ₈ [M + H] ⁺ = 456.2346;observado = 456.2347. IR (NaCI) v (crrr ¹ ): 2980, 1797, 1714, 1603, 1369, 1 136. AE:Calculado para C2 ₁ H33N3O8: C 55.37%, H 7.30%, N 9.23%; observado: C 55.67%, H 7.43%, N 9.19%. Rf:0.28 (n-hexano/AcOEt; 7:3). Ejemplo 2: Síntesis dei compuesto de fórmula general (V): (2EV2-(3,4- dihidro-2H-piran-2-iD-6-oxo-3,6-epoxihex-2-enoato de etilo

A una disolución de Pd(PPh ₃ ) ₄ (10.5 mg, 0.01 mmol) en MeCN seco y desgasificado (2 mL) se adicionó el compuesto de fórmula (IX) (50 mg, 0.2 mmol) y el estannano de fórmula (X) (68 mg, 0.18 mmol). La disolución resultante se caliento a reflujo durante 3 h. Transcurrido este tiempo, la mezcla de reacción se diluyó con Et ₂ 0, se filtró sobre tierra de diatomeas y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se separó por columna cromatográfica (hexano/AcOEt, 7:3) obteniéndose el producto (V) (30 mg, 60%).

¹ H RMN [300 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ j: 4.79 (t, J = 3.8 Hz, 1 H, H-5'), 4.22 (q, J = 7.1 , 2 H, OCH ₂ CH ₃ ), 4.07 (t, J = 5.1 Hz, 2 H, H-2'), 3.39 (m, 2 H, H-4), 2.75 (2 H, m, H-5), 2.15 (dt, J = 3.9, 6.8 Hz, 2 H, H-4'), 1 .90 (dt, J= 6.4, 12.7 Hz, 2 H, H- 3'), 0.94 (t, J = 7.2 Hz, 3 H, OCH ₂ CH ₃ ). ¹³ C RMN [75 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ ]: 173.6, 166.4, 163.8, 145.3, 103.2, 66.5, 60.7, 26.7, 26.3, 22.2, 20.5, 13.6. Ejemplo 3: Síntesis dei compuesto de fórmula general (V): (2£)-í3,6-fA/,Af- bis(fe -c-butoxicarbonil)carbamim¡doinazano}hex-2-enoato de metilo (84).

A una disolución del producto del compuesto de fórmula (XI) (175 mg, 1 .24 mmol),A/,/V-bis(terc-butoxicarbonil)-S-metil¡sotiourea (396 mg, 1 .36 mmol) y trietilamina (0.5 ml_, 3.72 mmol, d 0.725 g/cm ³ ) en DMF seca (15 ml_) bajo atmósfera de argón se adicionó cloruro de mercurio (369 mg, 1 .36 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. Transcurrido este tiempo, se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo resultante se redisolvió en Et ₂ 0, se lavó con NH ₄ CI, se secó (MgS0 ₄ ), se filtró y se llevó a sequedad. El residuo resultante se purificó por columna cromatográfica (n-hexano/AcOEt,7:3) obteniéndose el producto (V) como un sólido blanco(370 mg, 78%).

H RMN [500 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ ]:5.81 (1 H, t, J = 1 .8 Hz, H-2), 3.81 (2H, t, J = 7.1 Hz, H-6), 3.64 (3H, s, OMe), 3.20 (2H, td, J = 7.7, 1 .8 Hz, H-4), 1 .92 (2H, p, J = 7.4 Hz, H-5), 1 .49 (18, s, 2 ^χ C(CH ₃ ) ₃ ). ¹³ C RMN [125 MHz, δ (ppm), CDCI ₃ ]:168.3, 158.5, 152.0, 149.2, 95.8, 83.3, 52.3, 50.8, 32.1 , 27.9, 20.9. EM (ESI); m/z (int. reí.): 406 ([M + Naj ⁺ , 33), 384 ([M + H] ⁺ , 100). HRMS (Cl): Calculado para C ₁₈ H ₃₀ N ₃ O6 [M + H] ⁺ = 384.2135; observado = 384.2130. IR (NaCI) v (cm ^"1 ): 2979, 1751 , 1706, 1653, 1596, 1392, 1283, 1 137, 848. AE:Calculado para Ci ₈ H ₂ 9N ₃ 0 ₆ : C 56.38%, H 7.62%, N 10.96%; observado: C 56.90%, H 7.70%, N 1 1 .29%.P.F.: 125-127 ^S C. Rf:0.26 (n-hexano/AcOEt; 4:1 )