PROCEDE DE TRAITEMENT D'INSECTES COMPRENANT LA SEPARATION DES CUTICULES DE LA PARTIE MOLLE DES INSECTES A L'AIDE D'UN SEPARATEUR A

BANDE

La présente invention se rapporte à un procédé de traitement d'insectes. L'invention vise également des poudres, en particulier une poudre susceptible d'être obtenue par le procédé de traitement d'insectes selon l'invention, et l'utilisation de ces poudres dans l'alimentation, notamment dans l'alimentation animale.

Les poudres préparées à partir d'animaux sont depuis longtemps utilisées dans l'alimentation animale.

L'une des poudres les plus utilisée est la farine de poisson, qui représente une des principales sources de protéines dans l'alimentation animale. La farine de poisson est très riche en protéines animales (riche en acides aminés type lysine et méthionine) faciles à digérer. Une demande croissante accompagnée d'une offre limitée a eu pour conséquence, notamment, d'en augmenter significativement son prix. Ainsi, il y a une forte demande pour des sources alternatives de protéines de qualité élevée et, dans la mesure du possible, renouvelables, qui seraient utilisables dans l'alimentation animale.

Au cours de ces dernières années, il a été proposé d'utiliser des farines préparées à partir d'insectes comme substituant à la farine de poisson.

Les farines d'insectes proposent des sources protéiques naturelles de remplacement et la possibilité d'être produites en masse avec une empreinte écologique minimale. En particulier, certains coléoptères tels que Tenebrio molitor, présentent l'intérêt de pouvoir être adaptés à une production en masse intensive.

A titre d'exemple, la demande WO2016/108037 décrit notamment une poudre de coléoptères comportant au moins 67% en poids de protéines et au moins 5% en poids de chitine, pouvant être utilisée dans l'alimentation animale.

Dans le cadre de la présente demande, par « chitine », on entend tout type de dérivé chitinique, c'est-à-dire de dérivé de polysaccharides comportant des unités N- acétyl-glucosamine et des unités D-glucosamines, en particulier les copolymères chitine-polypeptides (parfois désignés sous l'appellation « composite chitine- polypeptides »). Ces copolymères peuvent également être associés à des pigments, souvent de type mélanine.

La chitine serait le deuxième polymère le plus synthétisé dans le monde vivant après la cellulose. En effet, la chitine est synthétisée par de nombreuses espèces du monde vivant: elle constitue en partie l'exosquelette des crustacés et des insectes et la paroi latérale qui entoure et protège les champignons. Plus particulièrement, chez les insectes, la chitine constitue ainsi 3 à 60% de leur exosquelette.

Cependant, la chitine est généralement considérée comme un composé difficile à digérer par certains animaux.

Il existe donc un besoin pour des poudres préparées à partir d'insectes qui auraient une teneur réduite en chitine.

Le travail des inventeurs a permis de mettre en évidence qu'il était possible d'obtenir de tels poudres, lorsque les insectes à partir desquels sont préparées ces poudres subissaient un traitement spécifique.

Le travail des inventeurs a permis de mettre en évidence qu'il était possible d'obtenir de tels poudres, lorsque les insectes à partir desquels sont préparées ces poudres subissaient un traitement spécifique.

L'invention concerne donc un procédé de traitement d'insectes comprenant la séparation des cuticules de la partie molle des insectes, dans lequel la séparation est effectuée à l'aide d'un séparateur à bande.

Par « insectes », on entend des insectes à n'importe quel stade de développement, tel qu'un stade adulte, larvaire ou un stade de nymphe.

La cuticule est la couche externe (ou exosquelette) sécrétée par l'épiderme des insectes. Elle est en général formée de trois couches : l'épicuticule, l'exocuticule et l'endocuticule.

Par « partie molle », on vise la chair (comportant notamment les muscles et les viscères) et le jus (comportant notamment les liquides biologiques, l'eau et l'hémolymphe) des insectes. En particulier, la partie molle ne consiste pas en le jus des insectes.

Avantageusement, les insectes mis en œuvre dans le procédé selon l'invention sont à un stade larvaire.

De préférence, les insectes mis en œuvre dans le procédé selon l'invention sont comestibles.

Avantageusement, les insectes préférés pour la mise en œuvre du procédé selon l'invention sont par exemple les coléoptères, les diptères, les lépidoptères, les isoptères, les orthoptères, les hyménoptères, les blattoptères, les hémyptères, les hétéroptères, les éphéméroptères et les mécoptères, de préférence, les coléoptères, les diptères, les orthoptères, les lépidoptères ou leurs mélanges, encore plus préférentiellement les coléoptères.

Les coléoptères préférentiellement mis en œuvre dans le procédé selon l'invention appartiennent aux familles des Tenebrionidae, Melolonthidae , Dermestidae, Coccinellidae, Cerambycidae, Carabidae, Buprestidae, Cetoniidae, Dryophthoridae, ou leurs mélanges.

Plus préférentiellement, il s'agit des coléoptères suivants : Tenebrio molitor, Alphitobius diaperinus, Zophobas morio, Tenebrio obscurus, Tribolium castaneum et Rhynchophorus ferrugineus, ou leurs mélanges.

Par « séparateur à bande », on vise un dispositif permettant la séparation de la partie solide de la partie molle d'un produit, et qui comporte une bande de serrage (ou bande presseuse) et un tambour perforé.

La séparation des cuticules de la partie molle des insectes est plus amplement décrite dans l'étape 2 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci- après.

Cette séparation des cuticules de la partie molle de l'insecte permet notamment de séparer la chitine de la partie molle. En effet, les cuticules obtenues à l'issue de cette étape de séparation présente une teneur en chitine élevée de l'ordre de 10 à 30% en poids sur le poids total de cuticules, comme indiqué ci-après.

En particulier, l'étape de séparation des cuticules de la partie molle s'effectue sans qu'aucune étape préalable de broyage des insectes, notamment sous forme de particules, n'ait été effectuée.

Le procédé de traitement d'insectes selon l'invention peut comprendre en outre une étape de maturation de la partie molle des insectes.

Par « étape de maturation de la partie molle des insectes », on vise plus particulièrement une étape pendant laquelle la partie molle des insectes est soumise à agitation.

Cette étape est plus amplement décrite dans l'étape 3 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Le procédé de traitement d'insectes selon l'invention peut donc comprendre :

- une étape de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, dans lequel la séparation est effectuée à l'aide d'un séparateur à bande, et

- une étape de maturation de la partie molle des insectes, ladite étape étant effectuée sans aucune dilution de la partie molle des insectes dans un solvant. De préférence, le procédé de traitement d'insectes selon l'invention comprend une étape de séparation de la partie molle des insectes en une fraction huileuse, une fraction solide et une fraction aqueuse.

La fraction huileuse a une teneur en lipides supérieure ou égale à 90%, préférentiellement supérieure ou égale à 95%, encore plus préférentiellement supérieure ou égale à 99% en poids sur le poids total de fraction huileuse.

On notera que dans le cadre de la présente demande, et sauf stipulation contraire, les gammes de valeurs indiquées s'entendent bornes incluses.

La fraction solide a une teneur en matière sèche comprise entre 45 et 65% en poids sur le poids total de fraction solide.

La fraction aqueuse a une teneur en glucides comprise entre 15 et 40% en poids, de préférence entre 20 et 30% en poids, sur le poids sec total de fraction aqueuse.

A l'issue de l'étape de séparation de la partie molle, et avant une concentration éventuelle de celle-ci, la fraction aqueuse a une teneur en matière sèche inférieure ou égale à 20% en poids, de préférence inférieure ou égale à 15% en poids sur le poids total de fraction aqueuse.

De même, la séparation de la partie molle des insectes en une fraction huileuse, une fraction solide et une fraction aqueuse est plus amplement décrite dans l'étape 4 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Le procédé de traitement d'insectes selon l'invention peut comprendre une étape d'abattage préalable à l'étape de séparation des cuticules de la partie molle.

Avantageusement, suite à l'étape 1 d'abattage, les insectes sont directement utilisés pour la mise en œuvre de l'étape 2 de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, c'est-à-dire que les insectes ne sont soumis à aucun traitement, tel qu'un broyage, une congélation ou une déshydratation entre l'étape 1 et l'étape 2.

Cette étape d'abattage est plus amplement décrite dans l'étape 1 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Optionnellement, le procédé de traitement d'insectes selon l'invention comprend, à l'issue de la séparation de la partie molle en une fraction huileuse, une fraction solide et une fraction aqueuse, une étape de concentration de la fraction aqueuse, pour obtenir une fraction aqueuse concentrée.

Cette étape est plus amplement décrite dans l'étape 5 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Optionnellement, le procédé de traitement d'insectes selon l'invention comprend en outre une étape de mélangeage de la fraction solide :

- avec tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée ; et/ou

- tout ou partie des cuticules,

pour obtenir un mélange.

Cette étape est plus amplement décrite dans l'étape 6 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

De préférence, le procédé de traitement d'insectes selon l'invention comprend une étape de séchage de la fraction solide ou du mélange pour obtenir une fraction solide sèche ou un mélange sec.

Cette étape est plus amplement décrite dans l'étape 7 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Préférentiellement, le procédé de traitement d'insectes selon l'invention comprend en outre une étape de broyage de la fraction solide sèche ou du mélange sec.

Cette étape est plus amplement décrite dans l'étape 8 du procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ci-après.

Plus particulièrement, le procédé selon l'invention est réalisé sans qu'il ne soit nécessaire d'ajouter un solvant, tel que de l'eau. En particulier, aucune dilution de la partie molle n'est effectuée au cours du procédé selon l'invention.

Selon un mode de réalisation préféré du procédé de traitement d'insectes selon l'invention, celui-ci est un procédé de préparation d'une poudre, et notamment d'une poudre d'insectes, et comporte les étapes suivantes :

i) l'abattage des insectes ;

ii) la séparation des cuticules de la partie molle des insectes ;

iii) optionnellement, la maturation de la partie molle des insectes ;

iv) la séparation de la partie molle des insectes en une fraction solide, une fraction aqueuse et une fraction huileuse ;

v) optionnellement, la concentration de la fraction aqueuse pour obtenir une fraction aqueuse concentrée ;

vi) optionnellement, le mélangeage de la fraction aqueuse concentrée et/ou des cuticules avec la fraction solide pour obtenir un mélange ; vii) le séchage de la fraction solide obtenue à l'étape iv) ou du mélange obtenu à l'étape vi) pour obtenir une fraction solide sèche ou un mélange sec ; et

viii) le broyage de la fraction solide sèche ou du mélange sec obtenu à l'étape vii).

Procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention

• Etape 1 : Abattage des insectes

Cette étape 1 d'abattage peut avantageusement s'effectuer par choc thermique, tel que par ébouillantage ou par blanchiment. Cette étape 1 permet d'abattre les insectes tout en abaissant la charge microbienne (réduction du risque d'altération et sanitaire) et en inactivant les enzymes internes des insectes pouvant déclencher une autolyse, et ainsi un brunissement rapide de ceux-ci.

Pour l'ébouillantage, les insectes, de préférence des larves, sont ainsi ébouillantés à l'eau pendant 2 à 20 min, préférentiellement, 5 à 15 min. De préférence, l'eau est à une température comprise entre 87 à 100°C, préférentiellement 92 à 95°C.

La quantité d'eau introduite lors de l'ébouillantage est déterminée de la façon suivante : le ratio du volume d'eau en ml sur le poids en g d'insecte est de préférence compris entre 0,3 et 10, plus préférentiellement entre 0,5 et 5, encore plus préférentiellement entre 0,7 et 3, encore plus préférentiellement de l'ordre de 1 .

Pour le blanchiment, les insectes, de préférence des larves, sont blanchis à l'eau ou à la vapeur (buses ou lit de vapeur) à une température comprise entre 80 et 105°C, de préférence entre 87 et l Oô'C, plus préférentiellement entre 95 et 100 °C, encore plus préférentiellement 98°C ou bien à l'eau à une température comprise entre 90 et l OO 'C, préférentiellement entre 92 et 95°C (par buses d'aspersion) ou en mode mixte (eau + vapeur) à une température comprise entre 80 et 130 ^, de préférence entre 90 et 120°C, plus préférentiellement entre 95 et l Oô'C, encore plus préférentiellement 98 °C. Lorsque les insectes sont blanchis uniquement à la vapeur, le blanchiment est avantageusement réalisé dans des blancheurs à vapeur à circulation forcée (« forced steaming »). Le temps de séjour dans la chambre de blanchiment est compris entre 5 secondes et 15 minutes, préférentiellement entre 1 et 7 min.

Avantageusement, suite à l'étape 1 d'abattage, les insectes sont directement utilisés pour la mise en œuvre de l'étape 2 de séparation des cuticules de la partie molle des insectes, c'est-à-dire que les insectes ne sont soumis à aucun traitement, tel qu'un broyage, une congélation ou une déshydratation entre l'étape 1 et l'étape 2.

• Etape 2 : Séparation des cuticules de la partie molle des insectes Cette étape s'effectue à l'aide d'un séparateur à bande et a pour objectif de séparer les cuticules de la partie molle des insectes.

A titre d'exemple, un séparateur à bande peut comprendre une bande de serrage et un tambour perforé, la bande de serrage entourant au moins une partie du tambour perforé.

La bande de serrage permet l'apport et l'application des insectes contre le tambour perforé de sorte à faire passer, par pression, la partie molle des insectes à travers les perforations du tambour, tandis que les cuticules restent à l'extérieur du tambour.

Les cuticules peuvent ensuite être récupérées à l'aide d'un couteau racleur. A titre d'exemple, on peut citer les séparateurs à bande provenant de la société Baader, tels que les séparateurs à bande 601 à 607 (« soft separator 601 to 607 »), ou encore les séparateurs à bande SEPAmatic® de BFD Corporation (gamme 410 à 4000V). Avantageusement, le diamètre des perforations du tambour est compris entre 0,5 et 3 mm, de préférence entre 1 et 2 mm.

Concernant la pression, l'homme du métier est à même de déterminer la pression à exercer permettant la séparation des cuticules de la partie molle des insectes.

Cette étape de séparation des insectes se distingue d'un pressage classique pouvant être réalisé par exemple avec une presse mono-vis ou bi-vis en ce qu'elle permet une séparation (nette) de la partie molle et des cuticules des insectes et non une séparation d'un jus d'une fraction solide.

Les cuticules obtenues dans l'étape 2 comportent entre 10 et 30%, de préférence entre 15 et 25% en poids de chitine, sur le poids sec total de cuticules.

La détermination du taux de chitine est effectuée par extraction de celle-ci.

La détermination du taux de chitine est effectuée par extraction de celle-ci. A titre d'exemple, une méthode de détermination du taux de chitine pouvant être utilisée est la méthode ADAC 991 .43.

Par ailleurs, les cuticules comportent moins de 25%, de préférence moins de 10%, plus préférentiellement moins de 5%, encore plus préférentiellement moins de 3% en poids de lipides sur le poids sec total des cuticules.

Les méthodes de détermination de la teneur en matière grasse (lipides) sont bien connues de l'homme du métier. A titre d'exemple et de manière préférée, la détermination de cette teneur sera effectuée en suivant la méthode du règlement CE 152/2009.

Dans toute la demande, lorsqu'aucune date n'est précisée pour un règlement, une norme ou une directive, il s'agit du règlement, de la norme ou de la directive en vigueur à la date de dépôt.

En outre, les cuticules comportent entre 55 et 90%, avantageusement entre 60 et 85%, de préférence entre 65 et 80% en poids de protéines sur le poids sec total de cuticules.

Dans le cadre de la présente demande, par « protéines », on vise la quantité de protéines brutes. La quantification des protéines brutes est bien connue de l'homme du métier. A titre d'exemple, on peut citer la méthode Dumas ou la méthode Kjeldhal. De préférence, la méthode Kjeldhal est utilisée.

On notera toutefois que cette méthode se base sur la mesure de la teneur en azote. Or, la chitine contient de l'azote à une teneur de l'ordre de 8%. Par conséquent, la teneur en azote de la chitine a été déduite de la teneur en azote mesurée avant d'effectuer la conversion permettant d'obtenir la teneur en protéines. Les cuticules comportent entre 0,5 et 30%, avantageusement entre 1 et 20%, de préférence entre 5 et 15% en poids de glucides sur le poids sec total de cuticules.

La teneur en glucides a été calculée par mesure de différence des glucides. Selon cette méthode, la teneur en glucides est égale à la teneur en matière sèche à laquelle on soustrait la teneur en cendres, en protéines et en lipides.

En outre, les cuticules comportent de préférence au moins 0,08% en poids, plus préférentiellement au moins 0,1 % en poids, encore plus préférentiellement au moins 0,12% en poids de tréhalose sur le poids sec total de cuticules.

La quantité de tréhalose est déterminée par analyse par GC-MS. Une telle analyse est plus amplement décrite à l'Exemple 1 ci-après.

La partie molle obtenue dans l'étape 2 comporte entre 20 et 50% en poids de lipides, de préférence entre 30 et 40% en poids de lipides sur le poids sec total de la partie molle.

En outre, la partie molle comporte au moins 45%, de préférence au moins 48%, plus préférentiellement au moins 50% en poids de protéines sur le poids sec total de la partie molle.

• Etape 3 : Maturation de la partie molle des insectes

La partie molle des insectes est ensuite, optionnellement, soumise à agitation dans une cuve.

Avantageusement, la maturation est réalisée pendant une durée comprise entre

15 minutes et 3 heures, de préférence pendant 1 h.

Avantageusement, la maturation est réalisée à une température comprise entre 65 et Ι ΟΟ 'Ό, de préférence entre 85 et 100 °C, plus préférentiellement à une température d'environ 90°C.

Cette étape permet de faciliter la séparation de la partie molle des insectes dans l'étape 4 ci-après.

De préférence, le procédé selon l'invention comprend une telle étape.

En particulier, aucune dilution de la partie molle des insectes dans un solvant tel que l'eau n'est nécessaire dans cette étape.

Avantageusement, cette étape de maturation est immédiatement suivie de l'étape de séparation de la partie molle en une fraction solide, une fraction aqueuse et une fraction huileuse.

En particulier, aucune étape supplémentaire de dilution dans un solvant tel que l'eau et/ou de chauffage n'est nécessaire pour effectuer la séparation en trois fractions.

Au contraire, comme cela est montré à l'Exemple 3, une telle étape de dilution a pour effet : d'empêcher une bonne séparation des trois fractions (solide, aqueuse et huileuse),

- de dégrader les propriétés des trois fractions, et

d'engendrer des coûts notablement plus importants.

· Etape 4 : Séparation de la partie molle en une fraction solide, une fraction aqueuse et une fraction huileuse

Cette étape a pour objectif de récupérer trois fractions à partir de la partie molle des insectes obtenue à l'étape 2 ou 3, à savoir une fraction solide, une fraction aqueuse, et une fraction huileuse.

Selon un premier mode de réalisation, cette étape de séparation de la partie molle est réalisée en deux sous-étapes.

Dans la première sous-étape, la partie molle des insectes est soumise à une décantation à l'aide d'un décanteur 2 phases, de sorte à obtenir une fraction solide et une fraction liquide.

Dans la deuxième sous-étape, la fraction liquide est soumise à une centrifugation, de sorte à récupérer une fraction huileuse et une fraction aqueuse.

Avantageusement, dans cette deuxième sous-étape, une centrifugeuse à assiettes est utilisée.

Selon un second mode de réalisation de l'étape 4, la partie molle des insectes est soumise à une décantation à l'aide d'un décanteur 3 phases, de sorte à obtenir directement une fraction aqueuse, une fraction huileuse et une fraction solide.

Des décanteurs 3 phases adaptés sont, par exemple, le Tricanter® de la société Flottweg, ou les décanteurs 3 phases de la société GEA, tel que le décanteur CA 225-03-33.

Avantageusement, la séparation de la partie molle est réalisée selon le second mode de réalisation.

En effet, l'utilisation d'un décanteur 3 phases permet d'obtenir une séparation des phases particulièrement efficace. Plus particulièrement, la fraction solide obtenue présente une haute teneur en matière sèche, la fraction aqueuse comporte peu de sédiments insolubles (provenant de la fraction solide) et d'huile, et la fraction huileuse comporte peu de sédiments insolubles (provenant de la fraction solide) et d'eau.

• Etape 5 : Concentration de la fraction aqueuse

La fraction aqueuse obtenue à l'étape 4 est ensuite optionnellement concentrée, pour obtenir une fraction aqueuse concentrée.

Avantageusement, la concentration est réalisée par évaporation.

Avantageusement, l'évaporation est réalisée à une température comprise entre 30 et 100°C, de préférence entre 60 et 80 °C.

De préférence, l'évaporation est réalisée à une pression comprise entre 50 et 1013 mbars, de préférence à 1013mbars.

L'évaporation est de préférence réalisée pendant une durée comprise entre 5 et 20 minutes.

La concentration est de préférence réalisée à l'aide d'un évaporateur à film tombant, d'un évaporateur à plaque à flot montant, ou d'un évaporateur à couche mince.

Ce type de matériel standard peut être utilisé sans rencontrer de problème d'encrassement, grâce notamment à la faible quantité de sédiments présents dans la fraction aqueuse.

Généralement, les fractions aqueuses ne peuvent être concentrées au-delà de 42% en matière sèche, car celles-ci ont tendance à gélifier (eau de colle) à partir de cette concentration.

Dans le cas de la présente invention, la fraction aqueuse comporte des protéines solubles de petite taille (au moins 45%, préférentiellement au moins 60% des protéines solubles de la fraction aqueuse ont une taille inférieure à 550 g/mol, comme plus amplement décrit ci-après), ce qui permet d'éviter la gélification et ainsi d'obtenir une fraction aqueuse à haute concentration en matière sèche (jusqu'à 70%) et présentant une viscosité inférieure à 30000 cPs (centipoises).

Par « protéines solubles », on entend, parmi les protéines brutes, celles qui sont solubles dans une solution aqueuse dont le pH est compris entre 6 et 8, avantageusement entre 7,2 et 7,6.

Lorsque le terme « protéines » seul est utilisé dans la présente demande, il désigne des protéines brutes.

De préférence, la solution aqueuse est une solution tampon dont le pH est compris entre 6 et 8, avantageusement entre 7,2 et 7,6. Préférentiellement, la solution tampon est une solution tampon phosphate NaCI, dont le pH est égal 7,4 +/- 0,2.

En outre, l'étape de concentration de la fraction aqueuse présente un double intérêt, car elle permet :

- une économie de vapeur : en l'absence de l'étape 5 de concentration, l'eau devrait être évaporée lors de l'étape 7 de séchage décrite ci-après, avec un sécheur dont la consommation spécifique de vapeur est plus importante que celle d'un concentrateur tel que décrit ci-avant ; et

- d'éviter les contaminations microbiologiques, grâce à une réduction du volume et de la pression osmotique due à la forte concentration en matière sèche de la fraction aqueuse concentrée.

• Etape 6 : Mélanqeaqe de la fraction aqueuse concentrée et/ou des cuticules avec la fraction solide

Tout ou partie des cuticules obtenues à l'étape 2 et/ou tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée obtenue à l'étape 5 peuvent/peut être optionnellement mélangée(s) à la fraction solide obtenue à l'étape 4 pour obtenir un mélange.

Avantageusement, le mélange est homogénéisé de sorte à faciliter son traitement ultérieur.

Les mélangeurs pouvant être utilisés sont par exemple des mélangeurs à vis conique, tels que ceux de la société Vrieco-Nauta®, ou des mélangeurs pendulaires, tels que ceux de la société PMS.

On notera qu'en moyenne, pour un kilogramme de fraction solide obtenue, on obtient de 500 à 650g de cuticules, par exemple environ 550g, et de 250 à 350g de fraction aqueuse, par exemple environ 300g.

· Etape 7 : Séchage de la fraction solide obtenue à l'étape 4 ou du mélange obtenu à l'étape 6

La fraction solide obtenue à l'étape 4 ou le mélange obtenu à l'étape 6 peuvent être séchés pour obtenir une fraction solide sèche ou un mélange sec.

Avantageusement, le séchage est réalisé à l'aide d'un sécheur à disques, un sécheur tubulaire, un sécheur à hélices, un sécheur de type flash, un sécheur à couche mince ou un sécheur à atomisation.

De préférence, le séchage est réalisé à l'aide d'un sécheur à disques ou tubulaire.

Des sécheurs tubulaires adaptés sont par exemple ceux de la société Tummers (Simon Dryers Technology).

Des sécheurs à disques adaptés sont par exemple ceux de la société Haarslev. Le séchage peut être réalisé entre 1 et 10 heures, de préférence entre 3 et 5 heures.

Avantageusement, le séchage est réalisé à une température comprise entre 60 et 225 ^< €, de préférence entre 80 et 100 °C.

De préférence, l'évaporation est réalisée à une pression atmosphérique.

• Etape 8 : Broyage de la fraction solide sèche ou du mélange sec obtenu à l'étape 7

Suite au séchage, un broyage peut être réalisé et une poudre est obtenue. Par « poudre », on entend une composition sous forme de particules.

De préférence, la poudre selon l'invention est une poudre d'insectes, c'est-à- dire une poudre préparée uniquement à partir d'insectes et éventuellement d'eau.

Un broyeur tel qu'un broyeur à marteau ou un broyeur conique (tel que les broyeurs coniques (« Kek cone mills ») de la société Kemutec) peut par exemple être utilisé.

Avantageusement, à l'issue de ce broyage, la taille des particules est inférieure à 0,5 cm (plus grande taille de particule observable à l'aide d'un microscope), de préférence de l'ordre de 1 mm. Plus particulièrement, la taille de particules est comprise entre 300 μηι et 1 mm, encore plus préférentiellement entre 500 et 800 μηι.

Lorsque la poudre est broyée à une taille de particules acceptable pour l'alimentation humaine ou animale, celle-ci peut être désignée sous l'appellation « farine » et notamment « farine d'insectes » (« insect meal », en anglais). Par « taille de particules acceptable pour l'alimentation humaine ou animale », on vise une taille de particules comprise entre 100 μηι et 1 ,5 mm, préférentiellement comprise entre 300 μηι et 1 mm, plus préférentiellement entre 500 et 800 μηι.

Selon que les étapes 5 et/ou 6 optionnelles est/sont mise(s) en œuvre ou non, différentes poudres peuvent être obtenues, à savoir :

- une poudre résultant uniquement de la fraction solide (étape 6 non mise en œuvre) ;

- une poudre résultant du mélange de la fraction solide et de tout ou partie des cuticules ;

- une poudre résultant du mélange de la fraction solide et de tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée ;

- une poudre résultant du mélange de la fraction solide, de tout ou partie des cuticules et de tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée. L'invention vise également les produits issus du procédé selon l'invention.

L'invention concerne en outre une fraction solide susceptible d'être obtenue par le procédé de traitement d'insectes selon l'invention.

L'invention concerne également une fraction solide comprenant au moins 71 % en poids de protéines et entre 0,1 et 2% en poids de chitine, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de la fraction solide.

De préférence, la fraction solide comprend au moins 73% en poids, plus préférentiellement au moins 74% en poids, encore plus préférentiellement au moins 75% en poids de protéines, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de fraction solide.

Avantageusement, la fraction solide comprend entre 0,5 et 1 ,7% en poids de chitine sur le poids sec total de fraction solide. Avantageusement, la fraction solide comprend entre 5 et 17% en poids de lipides, de préférence entre 10 et 15% en poids de lipides, sur le poids sec total de fraction solide.

De préférence, la fraction solide comprend entre 1 et 10% en poids, de préférence entre 2 et 6% en poids de cendres, sur le poids sec total de fraction solide.

La méthode de détermination de la teneur en cendres est bien connue de l'homme du métier. De préférence, les cendres ont été déterminées selon la méthode relevant du règlement CE 152/2009 du 27-01 -2009.

En outre, la fraction solide comporte de préférence entre 5 et 15% en poids, plus préférentiellement entre 7 et 13% en poids de glucides sur le poids sec total de fraction solide.

Plus particulièrement, la fraction solide comporte de préférence au moins 0,2% en poids, plus préférentiellement au moins 0,3% en poids, encore plus préférentiellement au moins 0,35% en poids, encore plus préférentiellement au moins 0,5% en poids et encore plus préférentiellement au moins 0,7% en poids de tréhalose sur le poids sec total de fraction solide.

Par ailleurs, la digestibilité des protéines chez l'homme et les animaux est fortement conditionnée par la taille des protéines. En nutrition animale, il est courant de réduire la taille des protéines, afin de faciliter la digestion des animaux. Cette réduction de la taille des protéines se fait généralement par des procédés d'hydrolyse (par exemple enzymatique), dont la mise en œuvre est particulièrement coûteuse.

La fraction solide comporte des protéines solubles dont la taille est suffisamment réduite pour faciliter la digestion des animaux.

Avantageusement, au moins 75%, préférentiellement au moins 80%, plus préférentiellement au moins 85% des protéines solubles de la fraction solide ont une taille inférieure ou égale à 12400 g/mol.

Plus particulièrement, au moins 55%, de préférence au moins 60%, plus préférentiellement au moins 65% des protéines solubles de la fraction solide ont une taille inférieure à 550 g/mol.

L'invention concerne également une fraction aqueuse susceptible d'être obtenue par le procédé de traitement d'insectes selon l'invention.

L'invention concerne en outre une fraction aqueuse comprenant au moins 48% en poids de protéines, au moins 2% en poids de tréhalose, et présentant une teneur en lipides inférieure à 7% en poids, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de la fraction aqueuse.

De préférence, la fraction aqueuse comporte au moins 55% en poids, plus préférentiellement au moins 60% en poids, encore plus préférentiellement au moins 65% en poids de protéines, sur le poids sec total de la fraction aqueuse.

Avantageusement, la fraction aqueuse comporte au moins 2,5% en poids, plus préférentiellement au moins 3% en poids de tréhalose sur le poids sec total de la fraction aqueuse.

De préférence, la fraction aqueuse présente une teneur en lipides inférieure à 6% en poids, plus préférentiellement inférieure à 4% en poids, encore plus préférentiellement inférieure à 2% en poids, sur le poids sec total de la fraction aqueuse.

Avantageusement, la fraction aqueuse comprend entre 5% et 20% en poids de cendres, de préférence entre 7% et 15% en poids de cendres sur le poids sec total de la fraction aqueuse.

En outre, la fraction aqueuse comporte moins de 2% en poids de sédiments insolubles, de préférence moins de 1 % en poids de sédiments insolubles, préférentiellement moins de 0,5% en poids de sédiments insolubles sur le poids total de la fraction aqueuse.

La fraction aqueuse ne comporte pas de chitine.

Similairement à la fraction solide, la fraction aqueuse comporte des protéines solubles dont la taille est suffisamment réduite pour faciliter la digestion des animaux.

Avantageusement, au moins 90%, préférentiellement au moins 95%, plus préférentiellement au moins 97% des protéines solubles de la fraction aqueuse ont une taille inférieure ou égale à 12400 g/mol.

Plus particulièrement, au moins 45%, de préférence au moins 50%, plus préférentiellement au moins 53%, préférentiellement au moins 60% des protéines solubles de la fraction aqueuse ont une taille inférieure à 550 g/mol.

Plus particulièrement, la fraction aqueuse a une teneur en matière sèche comprise entre 5 et 15% en poids sur le poids total de fraction aqueuse.

Lorsqu'elle est concentrée, la fraction aqueuse concentrée a une teneur en matière sèche comprise entre 55 et 75% en poids sur le poids total de fraction aqueuse concentrée.

L'invention concerne également une fraction aqueuse concentrée susceptible d'être obtenue par le procédé de traitement d'insectes selon l'invention, ledit procédé de traitement comportant alors l'étape optionnelle de concentration.

L'invention concerne en outre une fraction huileuse susceptible d'être obtenue par le procédé de traitement d'insectes selon l'invention.

L'invention concerne également une poudre susceptible d'être obtenu par le procédé de traitement d'insectes comprenant les étapes suivantes :

- la séparation des cuticules de la partie molle des insectes,

- la séparation de la partie molle des insectes en une fraction huileuse, une fraction solide et une fraction aqueuse,

- optionnellement, la concentration de la fraction aqueuse,

- optionnellement, le mélangeage de la fraction solide avec :

- tout ou partie la fraction aqueuse concentrée ; et/ou

- tout ou partie des cuticules,

pour obtenir un mélange,

- le séchage de la fraction solide ou du mélange pour obtenir une fraction solide sèche ou un mélange sec, respectivement ;

- le broyage de la fraction solide sèche ou du mélange sec.

Ce procédé de traitement d'insectes peut comporter en outre une ou plusieurs des caractéristiques décrites ci-avant.

L'invention concerne plus particulièrement une poudre susceptible d'être obtenu par le procédé de préparation d'une poudre, et notamment d'une poudre d'insectes, selon l'invention, tel que décrit ci-avant.

Comme indiqué ci-avant, selon que les étapes 5 et/ou 6 optionnelles du procédé de traitement d'insectes selon l'invention, à savoir l'étape de concentration de la fraction aqueuse et l'étape de mélangeage de tout ou partie des cuticules et/ou de tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée, avec la fraction solide, est/sont ou n'est/ne sont pas mise(s) en œuvre, et le cas échéant selon les conditions de leur mise œuvre, différentes poudres peuvent être obtenues.

L'invention concerne en outre une poudre, et notamment une poudre d'insectes, comprenant au moins 71 % en poids de protéines et entre 0,1 et 4% en poids de chitine, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre a une teneur en protéines supérieure ou égale à 72% en poids, plus préférentiellement supérieure ou égale à 74% en poids, encore plus préférentiellement supérieure ou égale à 75% en poids, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre a une teneur en chitine comprise entre 0,5 et 3% en poids, plus préférentiellement comprise entre 0,8 et 2% en poids, encore plus préférentiellement comprise entre 0,8 et 1 ,7% en poids sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre comprend entre 5 et 20% en poids, de préférence entre 7 et 17% en poids de lipides, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comprend entre 1 et 10% en poids, de préférence entre 2 et 6% en poids de cendres, sur le poids sec total de poudre.

En outre, cette poudre comporte de préférence entre 3 et 20% en poids de glucides sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comporte de préférence au moins 0,1 % en poids, plus préférentiellement au moins 0,2% en poids de tréhalose sur le poids sec total de poudre.

Lorsque les étapes 5 et/ou 6 optionnelles n'est/ne sont pas mise(s) en œuvre, une poudre, et notamment une poudre d'insectes, résultant uniquement de la fraction solide est obtenue.

Cette poudre comprend au moins 71 % en poids de protéines et entre 0,1 et 2% en poids de chitine, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre a une teneur en protéines supérieure ou égale à

72% en poids, plus préférentiellement supérieure ou égale à 74% en poids, encore plus préférentiellement supérieure ou égale à 75% en poids, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre a une teneur en chitine comprise entre 0,5 et 1 ,7% en poids de chitine, sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre comprend entre 5 et 17% en poids, de préférence entre 10 et 15% en poids de lipides, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comprend entre 1 et 10% en poids, de préférence entre 2 et 6% en poids de cendres, sur le poids sec total de poudre.

En outre, cette poudre comporte de préférence entre 5 et 15% en poids, plus préférentiellement entre 7 et 13% en poids de glucides sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comporte de préférence au moins 0,2% en poids, plus préférentiellement au moins 0,3% en poids, encore plus préférentiellement au moins 0,35% en poids de tréhalose sur le poids sec total de poudre.

Lorsque les étapes 5 et 6 du procédé selon l'invention sont mises en œuvre, une poudre résultant du mélange de la fraction solide, de tout ou partie des cuticules et de tout ou partie de la fraction aqueuse concentrée peut également être obtenue.

L'invention concerne donc en outre une poudre, et notamment une poudre d'insectes, comprenant au moins 65% en poids de protéines, au moins 10% en poids de glucides et entre 0,1 et 2% en poids de chitine, les pourcentages en poids étant indiqués sur le poids sec total de poudre. De préférence, cette poudre a une teneur en protéines supérieure ou égale à 70% en poids, plus préférentiellement supérieure ou égale à 74% en poids, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre a une teneur en chitine comprise entre 0,2 et 1 ,5% en poids, plus préférentiellement entre 0,5 et 1 ,3% en poids, sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre a une teneur en glucides supérieure ou égale à 12% en poids, plus préférentiellement supérieure ou égale à 14% en poids, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comporte de préférence au moins 0,7% en poids, plus préférentiellement au moins 0,9% en poids, encore plus préférentiellement au moins 1 % en poids, et encore plus préférentiellement au moins 1 ,2% en poids de tréhalose sur le poids sec total de poudre.

De préférence, cette poudre comprend entre 5 et 15% en poids, de préférence entre 7 et 13% en poids de lipides, sur le poids sec total de poudre.

Plus particulièrement, cette poudre comprend entre 3 et 10% en poids, de préférence entre 4 et 8% en poids de cendres, sur le poids sec total de poudre.

Le taux d'humidité résiduel des poudres selon l'invention est compris entre 2 et 15%, de préférence entre 5 et 10%, plus préférentiellement, entre 4 et 8%. Ce taux d'humidité peut par exemple être déterminé selon la méthode issue du règlement CE 152/2009 du 27-01 -2009 (103 °C I 4 h).

Avantageusement, les protéines des poudres selon l'invention présentent une digestibilité supérieure ou égale à 85% en poids sur le poids total de protéines brutes.

La digestibilité est une digestibilité pepsique mesurée par la méthode décrite dans la directive 72/199/CE.

De préférence, la digestibilité est supérieure ou égale à 88%, plus préférentiellement, supérieure ou égale à 92%.

L'invention concerne en outre l'utilisation d'une fraction aqueuse selon l'invention, d'une fraction aqueuse concentrée selon l'invention, ou de la poudre comprenant au moins 65% de protéines, au moins 10% en poids de glucides et entre 0,1 et 2% en poids de chitine selon l'invention décrite ci-avant, en tant qu'arôme, avantageusement dans l'alimentation animale.

L'invention concerne enfin l'utilisation d'une poudre selon l'invention dans l'alimentation, de préférence dans l'alimentation animale.

D'autres caractéristiques et avantages de l'invention, apparaîtront dans les exemples qui suivent, donnés à titre illustratif, avec référence aux Figures : La Figure 1 est un schéma illustrant le procédé détaillé de traitement d'insectes selon l'invention ;

La Figure 2 comporte deux photographies de la partie molle, d'une part en sortie de réacteur après l'étape de maturation (Fig. A) et d'autre part, après centrifugation pour séparer les phases (Fig. B) ;

La Figure 3 est une courbe étalon utilisée pour effectuer le dosage du tréhalose ;

La Figure 4 est un diagramme illustrant la teneur en humidité de la fraction huileuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction huileuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 5 est un diagramme illustrant la teneur en sédiments de la fraction huileuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction huileuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 6 est un diagramme illustrant l'indice peroxyde de la fraction huileuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction huileuse obtenue par un procédé comparatif ;

La Figure 7 est un diagramme illustrant la teneur en matière sèche de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction aqueuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 8 est un diagramme illustrant la teneur en sédiments de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction aqueuse obtenue par un procédé comparatif ;

La Figure 9 est un diagramme illustrant le pourcentage d'émulsion présente dans la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et dans la fraction aqueuse obtenue par un procédé comparatif ;

La Figure 10 est un diagramme illustrant le pourcentage (en pourcentage de matière sèche) de lipides présents dans la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et dans la fraction aqueuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 1 1 est un diagramme illustrant la digestibilité pepsique des protéines de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et celle des protéines de la fraction aqueuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 12 est un diagramme illustrant la teneur en tréhalose de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction aqueuse obtenue par des procédés comparatifs ; La Figure 13 comporte trois photographies illustrant la couleur de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention et celle de la fraction aqueuse obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 14 est un diagramme illustrant la teneur en tréhalose de la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction solide obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 15 est un diagramme illustrant le pourcentage de partie soluble dans l'eau de la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction solide obtenue par des procédés comparatifs ;

La Figure 16 est un diagramme illustrant le pourcentage de partie soluble dans la phase mobile de la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention et de la fraction solide obtenue par des procédés comparatifs ; et La Figure 17 est un diagramme illustrant la répartition de la taille des protéines dans la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention et dans la fraction solide obtenue par des procédés comparatifs.

EXEMPLE 1 : Procédé de traitement d'insectes selon l'invention

Des larves de Tenebrio molitor ont été utilisées. A réception des larves, ces dernières peuvent être stockées à 4°C pendant 0 à 15 jours dans leurs bacs d'élevages avant l'abattage sans dégradation majeure. Le poids des larves (âge) utilisées est variable et par conséquent leur composition peut varier, comme cela est illustré dans le Tableau 1 ci-après :

^* Les % sont exprimés en poids sec sur le poids humide de larves.

Tableau 1 : Composition biochimique des larves de Tenebrio molitor selon leur poids.

• Etape 1 : Abattage des insectes

Les larves vivantes (+4°C à + 25°C) sont convoyées en couche d'épaisseur comprise entre 2 et 10 cm, sur un tapis à bande perforé (1 mm) jusqu'à une chambre de blanchiment. Les insectes sont ainsi blanchis à la vapeur (buses ou lit de vapeur) à 98 'Ό sous ventilation forcée ou bien à l'eau à 92-95 'Ό (buses d'aspersion) ou en mode mixte (eau + vapeur). Le temps de séjour dans la chambre de blanchiment est compris entre 5 secondes et 15 minutes, idéalement 5 min.

La température des larves en sortie de blanchiment est comprise entre 75^ et

98 ^< €.

• Etape 2 : Séparation de la partie molle des cuticules des insectes Les larves, une fois blanchies, sont convoyées jusqu'à la trémie d'alimentation d'un séparateur à bande, afin de séparer les cuticules de la partie molle des larves.

Avantageusement, la séparation s'effectue immédiatement après l'abattage de manière à ce que les larves n'aient pas le temps de refroidir à température ambiante.

Le séparateur à bande utilisé est un séparateur à bande 601 de la société Baader.

Le diamètre des perforations du tambour est de 1 ,3 mm.

La partie molle des insectes est récupérée dans une cuve.

Les cuticules sont récupérées à l'aide d'un couteau racleur.

Détermination de la quantité de tréhalose des cuticules

La quantité de tréhalose dans les cuticules récupérées à l'étape 2 a été mesurée de la façon suivante :

Le tréhalose est analysé par GC-MS.

Programme de température : 150 °C, suivi d'une rampe à 10 °C/min jusqu'à 260 'Ό, après 5 minutes à cette température, une rampe de 25 °C/min jusqu'à 310 °C et maintien de cette température pendant 2 minutes. Température de l'injecteur : 280 °C, de l'interface : 250 °C, le ratio de split est de 10, le volume de l'injection est de 1 μ\-. Par exemple, une colonne sH-RXI-5mS, 30 m x 0,25 mm x 0,25 μηι est utilisée.

La préparation de l'échantillon pour analyse est réalisée de façon suivante : une quantité précise de l'échantillon (entre 10 et 300 mg) est pesée dans un tube Falcon, 9.75 mL de méthanol y sont ajoutés ainsi que 250 μί d'une solution de standard interne (myo-inositol, 25 μg mL) dans le DMSO. Le mélange est agité à 80 °C pendant 10 minutes, 100 μ\- de BSTFA sont alors ajoutés et le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes supplémentaires à température ambiante, 1 mL d'acétonitrile est alors ajouté et l'échantillon ainsi préparé injecté sur un appareil de GC-MS.

La quantité mesurée est de 1 ,2 mg de tréhalose par g de matière sèche.

• Etape 3 : Maturation de la partie molle des insectes

La partie molle des insectes est laissé à reposer dans la cuve de récupération de l'étape 2, sous agitation pendant 1 h et à une température d'environ 90°C.

• Etape 4 : Séparation de la partie molle en une fraction solide, une fraction aqueuse et une fraction huileuse

La partie molle est ensuite séparée en trois fractions à l'aide d'un décanteur trois phases. Le décanteur utilisé est le Tricanter® Z23 de chez Flottweg.

Conditions de la séparation :

- Débit : jusqu'à 500Kg/h;

- Vt bol : 4806 t/mm (3000G) ;

- Y min : 5% (1 ,4 t/mm).

Trois fractions sont obtenues à l'issue de cette phase de séparation : une fraction huileuse, une fraction solide, et une fraction aqueuse.

Ces fractions présentent les caractéristiques indiquées dans le Tableau 2 suivant :

* Résultats moyens calculés sur plusieurs échantillons de chacune des fractions, exprimés sur le % de matière sèche

Tableau 2 : Caractéristiques de la fraction huileuse, de la fraction solide et de la fraction aqueuse.

Détermination de la taille des protéines solubles de la fraction solide et de la fraction aqueuse

Préparation de l'échantillon solide (fraction solide) : 30 mg de l'échantillon sont solubilisés dans 1 L de phase mobile et filtrés utilisant le filtre chromafil xtra PES- 45/25.

Préparation de l'échantillon liquide (fraction aqueuse) : 400 μΙ_ sont solubilisés dans 1600 μΙ_ de la phase mobile et filtrés utilisant le filtre Chromafil xtra PES-45/25, juste avant l'injection. 1 ,5 mL de l'échantillon ainsi préparé sont centrifugés pendant 15 min à 12000 rpm (10625 g).

Les conditions de mise en œuvre de la chromatographie (HPLC Nexera XR de Shimadzu) sont les suivantes : la colonne utilisée est une Superdex Peptide GL 10/300 (GE Healthcare), la détection est réalisée par un détecteur DAD à 215 nm, la vitesse de la phase mobile est de 0,3 mL/min et elle est composée de ACN (acétonitrile)/H ₂ 0/TFA (acide trifluoroacétique) (30/70/0,1 ), l'analyse est réalisée à 25 La distribution de taille des protéines solubles de la fraction solide est présentée ci-dessous :

Poids moléculaire (kDa) %

Tableau 3 : Distribution de la taille des protéines solubles dans la fraction solide La distribution de taille des protéines solubles de la fraction aqueuse est présentée dans le Tableau 4 ci-dessous :

Poids moléculaire (kDa) %

la fraction aqueuse

Détermination de la quantité de tréhalose dans la fraction solide et la fraction aqueuse

La quantité de tréhalose dans ces fractions a été mesurée de la façon suivante :

Le tréhalose est analysé par GC-MS.

Programme de température : 150 °C, suivi d'une rampe à 10 °C/min jusqu'à 260 'Ό, après 5 minutes à cette température, une rampe de 25 ^< Ό/πΉη jusqu'à 310 °C et maintien de cette température pendant 2 minutes. Température de l'injecteur : 280 °C, de l'interface : 250 °C, le ratio de split est de 10, le volume de l'injection est de 1 μΐ.

La préparation de l'échantillon pour analyse est réalisée de façon suivante : une quantité précise de l'échantillon (entre 10 et 300 mg) est pesée dans un tube Falcon, 9.75 mL de méthanol y sont ajoutés ainsi que 250 μί d'une solution de standard interne (myo-inositol, 25 μοΛηί.) dans le DMSO. Le mélange est agité à 80 °C pendant 10 minutes, 100 μ\- de BSTFA sont alors ajoutés et le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes supplémentaires à température ambiante, 1 mL d'acétonitrile est alors ajouté et l'échantillon ainsi préparé injecté sur un appareil de GC-MS.

La quantité mesurée dans la fraction solide est de 3,82 mg de tréhalose par g de matière sèche.

La quantité mesurée dans la fraction aqueuse est de 33,2 mg de tréhalose par g de matière sèche.

En outre, la fraction aqueuse comporte moins de 1 % en poids de sédiments insolubles sur le poids total de la fraction aqueuse.

• Etape 5 : Concentration de la fraction aqueuse

La fraction aqueuse obtenue à l'étape 4 est ensuite concentrée par évaporation, à l'aide d'un évaporateur à flot tombant.

La fraction aqueuse concentrée obtenue a une concentration en matière sèche d'environ 65%.

• Etape 6 (optionnel): Mélanqeaqe de la fraction aqueuse concentrée et/ou des cuticules avec la fraction solide

L'étape 6 n'a pas été mise en œuvre dans cet Exemple.

• Etape 7 : Séchage de la fraction solide

La fraction solide obtenue à l'étape 4 est séchée à l'aide d'un sécheur à disque de la société Haarslev pendant 5h afin d'obtenir une fraction solide sèche ou un mélange sec.

D'un point de vue microbiologique, la fraction solide comporte moins de 10 UFC/g d'entérobactéries.

· Etape 8 : Broyage

La fraction solide sèche est enfin broyée à l'aide d'un broyeur à marteau continu (6 mobiles réversibles - épaisseur 8 mm). Le broyeur est alimenté par une trémie avec trappe de réglage de débit (180kg/h). La grille perforée utilisée pour contrôler la granulométrie en sortie est de 0,8 mm. La vitesse de rotation du moteur est de 3000tr/min (motorisation électrique, puissance absorbée 4kW (5,5 CV)).

Les caractéristiques d'une poudre d'insectes obtenue sont présentées dans le Tableau 5 ci-après.

^* Les pourcentages indiqués sont des pourcentages en poids sur le poids sec total de la poudre d'insectes.

Tableau 5 : Caractéristiques d'une poudre d'insectes obtenue dans l'Exemple 1.

EXEMPLE 2 : Procédé de traitement d'insectes selon l'invention

Les étapes 1 à 5 ont été mises en œuvre tel que cela est décrit dans l'Exemple

1 .

• Etape 6 (optionnel): Mélanqeaqe de la fraction aqueuse concentrée et des cuticules avec la fraction solide

La totalité (100%) de la fraction aqueuse concentrée obtenue à l'étape 5, ainsi que 0,05% en poids des cuticules récupérées à l'étape 2 ont été mélangés à la totalité de la fraction solide obtenue à l'étape 4, pour obtenir un mélange.

Un mélangeur à vis conique de la société Vrieco-Nauta® a été utilisé.

• Etape 7 : Séchage du mélange

Le mélange obtenu à l'étape 6 est séché à l'aide d'un sécheur à disque de la société Haarslev pendant 5h afin d'obtenir un mélange sec.

D'un point de vue microbiologique, le mélange sec comporte moins de 10 UFC/g d'entérobactéries.

• Etape 8 : Broyage

Le mélange sec est enfin broyé à l'aide d'un broyeur à marteau continu (6 mobiles réversibles - épaisseur 8 mm). Le broyeur est alimenté par une trémie avec trappe de réglage de débit (180kg/h). La grille perforée utilisée pour contrôler la granulométrie en sortie est de 0,8 mm. La vitesse de rotation du moteur est de 3000tr/min (motorisation électrique, puissance absorbée 4kW (5,5 CV)).

Les caractéristiques d'une poudre d'insectes obtenue sont présentées dans le Tableau 6 ci-après.

^* Les pourcentages indiqués sont des pourcentages en poids sur le poids sec total de la poudre d'insectes.

Tableau 6 : Caractéristiques de la poudre d'insectes obtenue dans l'Exemple 2. EXEMPLE 3 : Procédé selon l'invention et procédés comparatifs

I. Préparation des échantillons

Le procédé selon l'invention de transformation de pulpe de larves de Tenebrio molitor en huile (fraction huileuse ou « TMO » pour Tenebrio Molitor Oil), en phase aqueuse (fraction aqueuse ou « SW » pour Stick Water) et en protéines solides (fraction solide ou « SPC » pour Solid Protein Cake) et un procédé comparatif ont été reproduits.

L'objectif est de comparer la qualité des produits obtenus par les 2 procédés.

1. Procédé selon l'invention

Les larves sont dans un premier temps abattues par blanchiment (étuvage) puis les cuticules des larves sont séparées de la partie molle (« décutilées ») au travers d'un séparateur à bandes de la marque Baader.

8 kg de partie molle résultant de l'étape de séparation est alors envoyée pour maturation dans un réacteur pilote d'une capacité de 10 litres, ledit réacteur étant préalablement chauffé à 50 °C, sous agitation mécanique à 350 tours/min afin de garantir une homogénéisation au cœur de la partie molle. Après une montée progressive en température de la partie molle, la température est directement régulée dans la masse de celle-ci à 90 'C. Après une heure de chauffage à 90 'C, le réacteur est vidé. La partie molle chauffée est ensuite séparée. L'utilisation d'un tricanteur n'étant pas possible à l'échelle du laboratoire, la partie molle est centrifugée à 10000 g pendant 15 minutes afin de séparer les différentes phases obtenues (voir Figure 2). Chaque phase (TMO, SW et SPC) est collectée manuellement et stockée à -20 ^< C dans l'attente des analyses physico-chimiques.

2. Procédé comparatif

8 kg de partie molle résultant de l'étape de séparation sont utilisés. Cette partie molle provenait du même lot de partie molle que celui utilisé pour le procédé selon l'invention.

Le procédé comparatif diffère de celui selon l'invention par deux étapes :

- à l'issue de la séparation, une étape additionnelle de coagulation de la partie molle est effectuée à partir de 4 kg de partie molle, dans un réacteur pilote, sous agitation (350 tours/min) avec une température des parois du réacteur fixée à 100 °C pendant 20 minutes ; puis

- la partie molle est diluée par ajout d'eau et chauffée. Deux dilutions de la partie molle ont été réalisées pour ces essais, 1 : 0,5 (m/m, masse/masse) et 1 : 0, 75 (m/m). Concrètement, un volume d'eau à 50 °C (2 litres ou 3 litres en fonction de la dilution) est ajouté dans le réacteur pilote. La régulation de la température dans la masse de pulpe est effectuée à 90 °C pendant une heure puis le réacteur est vidé. La partie molle diluée est alors centrifugée dans les mêmes conditions que précédemment et les 3 phases collectées et stockées à - 20 °C dans l'attente des analyses physicochimiques.

II. Analyses des échantillons

Détermination de la matière sèche des échantillons

La matière sèche des TMO, SW et SPC est déterminée par séchage jusqu'à masse constante à 105 °C selon la norme ISO 6496. La différence de masse du produit avant et après séchage sert de mesure pour la teneur en matière sèche. Ces teneurs sont exprimées en pourcentage de masse. La teneur en humidité est obtenue par soustraction de la matière sèche à la valeur 100.

Détermination de l'indice de peroxyde dans du TMO

L'indice de peroxyde est déterminé selon la norme française NF EN ISO 3960 (juin 2010) et exprimé en MEQ d'oxygène actif/kg d'huile.

Teneur en sédiments du TMO et de la SW

Le filtre utilisé est un tamis en inox de pores 50 μηι, préalablement taré. La quantification des sédiments est effectuée après passage de 300 mL de TMO ou de 750 mL de SW (750 mL) par pesées des résidus dans le tamis.

Dans le cas de la SW, la matière sèche des sédiments est alors déterminée comme décrite précédemment.

Evaluation de l'émulsion dans la SW

L'évaluation de l'émulsion dans la SW est effectuée après centrifugation de 50 mL de SW collectée. La collecte de l'émulsion (surnageant) est réalisée après avoir placé les tubes à -20 ° pour faciliter la séparation. L'émulsion est alors pesée et le résultat est exprimé en pourcentage d'émulsion dans le stick water.

Détermination de la matière grasse dans la SW

La détermination de la matière grasse ou lipides dans les échantillons de SW est effectuée par extraction à l'éther de pétrole après hydrolyse selon le règlement CE 152/2009. La quantité de lipides est rapportée à la matière sèche de l'échantillon considéré (SW ou SPC).

Détermination de la digestibilité pepsique de la SW

La digestibilité pepsique est déterminée sur la SW d'après la directive 72/199/CE, sans dégraissage.

Dosage du tréhalose dans la SW et le SPC

Le tréhalose est déterminé dans la SW et le SPC après leur lyophilisation. 40 mg d'échantillon sec sont extraits à l'aide de 2 mL de DMSO pendant 1 heure, sous agitation à 80 °C. 250 μί de l'extrait sont alors mélangés à 50 μί de myo-inositol, utilisé comme étalon interne (1 g/L dans le DMSO). Après homogénéisation, 100 μΙ_ de ce mélange est dérivé avec 100 μΙ_ de BSTFA-TMCS (99 : 1 ) directement dans le vial GC-MS pendant 30 minutes à 60 °C. Avant injection, 600 μΙ_ d'acétonitrile sont ajoutés au vial GC-MS. Les résultats sont exprimés en mg de tréhalose/g sec à l'aide d'une gamme étalon de tréhalose effectuée dans les mêmes conditions (Fig. 3).

Les extraits dérivés et les différents points de gamme étalon sont analysés sur une GC-MS-QP2010 de Shimadzu. La colonne utilisée est une colonne SH-Rxi 5 ms (Schimadzu) de longueur 30 m, de diamètre 0,25 mm et de finesse 0,25 μ. Le programme de température de la GC-MS est le suivant : 100 °C, suivi d'une rampe à 10 °C/min jusqu'à 300 °C maintenus pendant 2 min.

La température de l'injecteur est de 280 °C, celle de l'interface est de 250 °C, le ratio de split est de 10, le volume de l'injection est de 1 μί. La détection est effectuée en mode SIM (Selected Ion monitoring) avec les m/z spécifiques de 305 pour le myo- inositol et de 361 pour le tréhalose.

Mesure de la couleur de la SW lyophilisée

La couleur a été comparée à un nuancier (Nuancier RAL Classic K7) et caractérisée par le code couleur de ce nuancier.

Détermination de la fraction soluble du SPC

Les expériences ont été réalisées à partir des SPC lyophilisés. 1 g d'échantillon est pesé (m,) dans un tube de 50 mL préalablement taré. 30 mL d'eau à température ambiante sont ajoutés et le tube est agité (vortex) plusieurs minutes. Après centrifugation, le liquide surnageant est retiré et un second lavage avec 30 mL d'eau est effectué dans les mêmes conditions que le premier. Après avoir retiré le surnageant, le culot de SPC lavé est placé à l'étuve à 60 °C pendant 48 heures puis pesé. Un contrôle (SPC non lavé) est également placé dans l'étuve pour déterminer le pourcentage de matière sèche réelle et corriger la pesée initiale d'échantillons avant lavage (%MS).

Le pourcentage de soluble est déterminé comme :

(mi x %MS) - mSPC lavé sec

mi x %MS

Détermination de la taille des protéines solubles du SPC

La taille des protéines solubles des SPC est déterminée par chromatographie d'exclusion stérique.

40 mg d'échantillon lyophilisé sont solubilisés dans la phase mobile composée d'acétonitrile/H ₂ 0/TFA (acide trifluoroacétique) (30/70/0,1 ) afin d'atteindre une concentration de 30 mg/mL et filtrés à 45 μηι après centrifugation en utilisant le filtre chromafil xtra PES-45/25. En parallèle, la solubilité des SW et SPC secs dans la phase mobile est déterminée après séchage des résidus de centrifugation à l'étuve.

Les conditions de mise en œuvre de la chromatographie réalisée sur une chaîne HPLC Nexera XR de Shimadzu sont les suivantes : la colonne utilisée est une Superdex Peptide GL 10/300 (GE Healthcare), la détection est réalisée par un détecteur DAD à 215 nm, la vitesse de la phase mobile (mode isocratique) est de 0,3 mL/min. Elle est composée d'un mélange acétonitrile/H20/TFA (acide trifluoroacétique) (30/70/0,1 ), l'analyse est réalisée à 25 °C.

Pour déterminer la distribution des masses moléculaires, quatre protéines « standard » de masse moléculaire connue ont d'abord été injectées afin de définir des intervalles de temps de rétention correspondant à différentes masses moléculaires. Pour analyser la distribution moléculaire des échantillons, l'aire totale du chromatogramme est d'abord intégrée à 215 nm puis séparée en fractions correspondant aux cinq catégories de masses moléculaires. Les résultats sont exprimés en pourcentage de protéines solubles par catégories de taille moléculaire.

La détermination de la partie soluble dans la phase mobile est obtenue de manière analogue à celle dans l'eau, mais à 25% (température de l'analyse).

III. Résultats

1. Fraction huileuse

Les résultats pour la fraction huileuse sont présentés en Figure 4, 5 et 6.

Les Figures 4 et 5 relatives à la teneur en humidité et à la teneur en sédiments mettent en évidence que la séparation de la fraction huileuse est notablement meilleure dans le procédé selon l'invention. En effet, on constate sur ces Figures une plus forte teneur en humidité et en sédiments dans la fraction huileuse selon le procédé comparatif. Ce résultat est inattendu car il est bien connu de l'homme de l'art que l'augmentation d'une phase et/ou le chauffage permet usuellement d'améliorer la séparation des phases d'un milieu complexe.

Par ailleurs, sur la Figure 6, on constate que l'indice peroxyde de la phase huileuse obtenue par le procédé selon l'invention est inférieur à celui de la phase huileuse obtenue par le procédé comparatif. La phase huileuse obtenue par le procédé selon l'invention présente donc une meilleure capacité de conservation. Ceci est particulièrement avantageux car cela permet d'éviter ou de diminuer l'ajout de conservateur tel que des antioxydants. 2. Fraction aqueuse

Les résultats pour la fraction huileuse sont présentés en Figures 7 à 13.

Sur la Figure 7, on constate une plus faible teneur en humidité pour la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention. Du fait de la dilution, la teneur en matière sèche est moins importante dans le procédé comparatif, ce qui nécessite par conséquent des équipement plus importants pour récupérer la partie (matière sèche) qui présente un intérêt et une utilisation plus intense en termes de consommation d'énergie et de consommation d'eau notamment.

Les Figures 8 à 10 relatives à la teneur en sédiments, à la teneur en émulsion et à la teneur en lipides mettent en évidence que la séparation de la fraction aqueuse est notablement meilleure dans le procédé selon l'invention. En effet, on constate sur ces Figures une plus forte teneur en sédiments, en émulsion et en lipides dans la fraction huileuse selon le procédé comparatif. Ce résultat est inattendu car il est bien connu de l'homme de l'art que l'augmentation d'une phase et/ou le chauffage permet usuellement d'améliorer la séparation des phases d'un milieu complexe.

On constate également que :

- sur la Figure 1 1 , la digestibilité pepsique des protéines de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention est meilleure que celle obtenue par le procédé comparatif ; et

- sur la Figure 12, la teneur en tréhalose de la fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention est meilleure que celle obtenue par le procédé comparatif.

La présence de tréhalose est intéressante car le tréhalose a la capacité de stabiliser les protéines et est, de ce fait, considéré comme un conservateur biologique naturel.

Enfin, la Figure 13 propose 3 photographies de la fraction aqueuse obtenue soit par le procédé selon l'invention, soit par le procédé comparatif, et lyophilisée. La fraction aqueuse obtenue par le procédé selon l'invention a une couleur notablement plus clair. Il ressort donc de ces figures qu'un produit différent est obtenu par le procédé selon l'invention. Cette différence de couleur peut potentiellement s'expliquer par la réaction de Maillard qui peut avoir lieu lors des étapes de coagulation et de chauffage en milieu aqueux qui sont effectuées dans le procédé comparatif. Lors de la réaction de Maillard, les protéines de faibles tailles présentes dans le milieu sont plus susceptibles de réagir, réduisant ainsi la teneur du milieu en protéines de faibles tailles. Ceci peut notamment avoir pour conséquence une diminution de la digestibilité de la fraction aqueuse. 3. Fraction solide

Les résultats pour la fraction solide sont présentés en Figures 14 à 17.

Sur la Figure 14, on peut constater que la teneur en tréhalose de la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention est meilleure que celle obtenue par le procédé comparatif.

Sur la Figure 15, on peut constater que la teneur en partie soluble de la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention est meilleure que celle obtenue par le procédé comparatif. Il est intéressant de disposer d'une teneur importante en partie soluble car la partie soluble facilite la formulation des aliments et confère une meilleure biodisponibilité, notamment en libérant les protéines de plus petite taille.

Sur les Figures 16 et 17, il est mis en évidence que la teneur en petite protéines, à savoir des protéines inférieures à 550Da est plus importante dans la fraction solide obtenue par le procédé selon l'invention que dans celle obtenue par le procédé comparatif.

On peut ainsi constater que les protéines de petite taille sont mieux préservées par le procédé selon l'invention. Cela se traduit par une plus forte solubilité dans l'eau ou la phase mobile et par une proportion plus importante de protéines de petites tailles dans cette fraction solide, le procédé comparatif ayant vraisemblablement contribué à la destruction de ces produits lors des phases de coagulation et de chauffage.

4. Consommation d'énergie

Enfin, des calculs de consommation d'énergie ont été effectués afin de comparer le procédé selon l'invention avec les deux procédés comparatifs.

Le procédé comparatif à une dilution 1 :0,5 engendre un coût 19,8 fois supérieur à celui du procédé selon l'invention et le procédé comparatif à une dilution 1 :0,75 engendre un coût 20,2 fois supérieur à celui du procédé selon l'invention.