биоматериалом «Аллоплант»

Изобретение относится к медицине, в частности к рефлексотерапии, гепатологии и может быть использовано для лечения острых и хронических вирусных гепатитов или циррозов печени.

Вирусные гепатиты представляют собой серьезную медико- социальную проблему. По данным ВОЗ 1/3 населения мира является носи- телем различных видов гепатотропных вирусов. В настоящее время вирус- ными гепатитами инфицировано около 2 млрд. населения всего земного шара, у 300-400 млн. человек инфекция протекает в хронической форме. При этом 25% из них ежегодно умирает от цирроза печени и гепатоцелюл- лярной карциномы (Шахгильдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. «Па- рентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилак- тика)», М.: ФГОУ ВУНМЦ Роздрава, 2003. - 384с). Таким образом, разра- ботка новых и эффективных методов лечения данной патологии, наряду с профилактикой осложнений, представляется весьма актуальной.

Согласно современным представлениям, основным фактором, опре- деляющим процессы повреждения печени и элиминации вируса, является иммунный ответ организма (Дружинин А.В., Аникушина А.К., Сотникова Н.Ю. «Особенности иммунного ответа больных HBV-инфекцией в зависи- мости от варианта течения заболевания», Российский журнал гастроэнте- рологии, гепатологии, колопроктологии, 2002, Т.ХП, - N«l . - Приложение 34» 16. - с.25). В настоящее время предлагается много способов патогенети- ческой терапии, включающей применение иммуностимуляторов и иммуно- модуляторов (рибомунил, продигиозан, пирогенал, миелопид, спленин, ти- малин, Т - активин, деринат, полудан, иммунал, различные интерфероны - виферон, анаферон и др.). Недостатки - ввиду того, что большинство вы- шеперечисленных препаратов представляют собой высокомолекулярные вещества животного, микробного, растительного происхождения разной степени очистки, при их применении существует большая опасность аллер- гических реакций и развития аутоиммунных или опосредованных иммун- ной системой нарушений. Так, по данным как отечественных, так и зару- бежных исследователей, применение иммуностимуляторов может вызвать усиление лизиса как инфицированных, так и здоровых гепатоцитов, то есть выраженый иммунный ответ активизирует иммунные механизмы повреж- дения печени (Раре G.R., Gerlach Т. J., Diepoldier Н.М. et al., « Roleofthespeci- ficT-cellresponseforclearanceandcontrolofhepatitis С virus.», J. ViralHepatit, - 1999. Vol. 6. - Suppl 1. - P.36-40).

Известны способы базисной терапии, включающие нормализацию ра- боты желудочно-кишечного тракта, коррекцию обменных нарушений и уменьшение гепатоцитолиза (диета Ν« 5 по Певзнеру, режим, лечение со- путствующих заболеваний органов пищеварения и других органов и систем, использование гепотопротекторов, витаминов, спазмолитиков, ферментных препаратов, энтеросорбентов, дезинтоксикационных и других средств. (Григорьев П.Я., Яковенко Э.П., «Диагностика и лечение хронического ге- патита и цирроза печени», Советская медицина, 1985, Ν 12, с. 61-67.).

Однако базисная терапия недостаточно эффективна и часто сопрово- ждается хронизацией процесса с исходом в цирроз печени.

Известен способ лечения цирроза печени посредством интраопераци- онного инъекционного введения в ткань печени диспергированного биома- териала «Аллоплант» (Патент РФ 2189257, МПК A61L27/00, опубл. 20.09.2002, «Биоматериал аллоплант для регенеративной хирургии»). Ука- занный биоматериал имеет предельно низкие антигенные свойства и обес- печивает селективный рост тканей на месте имплантации без отторжения и рубцевания. Известный слособ стимулирует регенерацию печёночной ткани с восстановлением её структуры и объема. Недостатком известного способа является травматичность вмешательства, дороговизна и труднодоступ- ность, обусловленная необходимостью операционной и обученного персо- нала.

Известен способ лечения токсического гепатита и цирроза печени пу- тем эндоскопического канюлирования пупочной вены диспергированным биоматериалом «Аллоплант» (Патент РФ Ν«2205647, МПК А61К 35/32, опубл. 10.06.2003,). Способ позволяет благодаря известным свойствам биоматериала «Аллоплант» стимулировать регенерацию гепатоцитов. Но также как и предыдущий он является травматичным т сложным в реализа- ции.

Наиболее близким к предложенному и взятым в качестве прототипа является способ лечения различных заболеваний посредством акупунктур- ного введения биоматериала «Аллоплант» (Патент РФ N° 2238076, МПК А61Н39/08, опубл.20.10.2004). Согласно изобретению диспергированный биоматериал «Аллоплант» в количестве 10-100 мг разводят на 5-15 мл фи- зиологического раствора и вводят в биологически активные точки с целью их длительной стимуляции и пролонгирования эффекта. Недостатки спосо- ба заключаются в сложности акупунктурной диагностики, доступной лишь узким специалистам, и отсутствии оптимадьного рецепта точек, что делает невозможным применение известного способа врачами, не владеющими методами рефлексотерапии.

Задача изобретения состоит в разработке эффективного и доступного способа лечения вирусных гепатитов или циррозов печени.

Техническим результатом является повышение эффективности лече- ния за счет введения биоматериала «Аллоплант» в биологически активные точки, обеспечивающего коррекцию системного иммунного ответа.

Поставленная задача решается, а технический результат достигается способом лечения вирусных гепатитов или циррозов печени путём йнъек- ционного введения диспергированного биоматериала «Аллоплант», раз- вед ённого в физиологическом растворе в соотношении 30-50 мг биомате- риала на 4,0-12 мл физиологического раствора, в биологически активные точки, которое осуществляют сеансами в количестве 8-10 за курс чередова- нием от сеанса к сеансу следующих рецептов точек: первый сеанс - парные точки на задней поверхности туловища справа и слева от заднесрединного меридиана - VI 8 Тань Шу, VI 9 Дань Шу, V47 Хунъ Мэнь, V48 Ян Ган, V49 И Шэ и точки на заднесрединном меридиане - Т8 Цзинъ Со, Т9 Чжи Ян, вто- рой сеанс - точки на передней поверхности туловища справа от перерднес- рединного меридиана - F13 Чжан Мэнь, F14 Ци Мэнь, VB24 Жи Юе, VB25 Цзин Мэнь, RP19 Фу Ай и точки на переднесрединном меридиане -J5 Ши Мэнь, J12 Чжун Ванъ, J14 Тань Чжун, и так далее с повторением через ка- ждый сеанс, причём инъекции осуществляют с промежутком между сеан- сами от 1 до 7 дней и длительностью курса от 2-х до 4-х недель по 0,5-1,0 мл раствора на 1 инъекцию, а лечение проводят на фоне базисной терапии.

Достижение технического результата обусловлено следующим.

Известна возможность восстановления всех структурных элементов паренхимы печени при её цирротическом поражении путём локального вве- дения диспергированного биоматериала «Аллоплант». Это обеспечивается стимуляцией активности макрофагов печени, что является ключевым фак- тором регенерации печени и инволюции соединительной ткани при циррозе (Мусина Л. А., «Цирроз печени и его коррекция с применением биоматериа- ла Аллоплант», - Оренбург, 1999 (канд). Известна общая иммуностимули- рующая активность иглоукалывания, а также большая концентрация и осо- бенные морфометрические характеристики макрофагов (CD68), Т-хелперов (CD4), Т-супрессоров (CD45R) в проекции точки акупунктуры и вне её (Гурьянова Е.А., «Мррфофункциональные аспекты влияния акупунктуры на взаимодействие нейромедиаторов в структурах органов иммуногенеза и кожи», Чебоксары 2011, докт.). Известны гепатотропные, нацеленные на гепато-билиарную систему, клинические эффекты стимуляции точек мери- дианов печени, желчного пузыря, селезёнки, передне- и заднесрединного меридиана (А.М.Овечкин, «Основы чжэнь-цзю терапии», Саранск, изд.Голос, 1991 ; И.З.Самосюк, В.П.Лысенюк, «Акупунктура», М., Аст- Пресс книга, 2004).

Авторами предложенного изобретения, выявлена возможность опо- средованной активации моноцитарно-макрофагального звена, элиминации повреждающих агентов и регенерации гепатоцитов в паренхиме печени при акупунктурном введении диспергированного биоматериала «Аллоплант». Для этого опытно-экспериментальным путём, используя иммунологические методы контроля, была выявлена совокупность биологически активных то- чек для акупунктуры, оптимальных для лечения вирусных гепатитов или циррозов печени. Данная совокупность точек представляет собой унифици- рованный рецепт, предусматривающий чередование воздействия на точки передней и задней поверхности туловища. При воздействии на точки задней поверхности туловища используется 12 сегментарных точек, включающих 5 симметричных парных, по обеим сторонам от заднесрединного меридиана, а именно шу-точки меридиана мочевого пузыря - VI 8 Гань Шу, VI 9 Дань Шу, V47 Хунь Мэнь, V48 Ян Ган, V49 И Шэ, 2 точки на заднесрединном меридиане - Т8 Цзинь Со, Т9 Чжи Ян. На эти точки воздействуют на 1-м, 3- м, 5-м, и далее, сеансе. Воздействие на точки передней поверхности туло- вища включает 8 точек, из них 5 сегментарно-Локальных точек в правом подреберье, а именно 2 точки меридиана печени - F13 Чжан Мэнь, F14 Ци Мэнь, 2 точки меридиана желчного пузыря -„ VB24 Жи Юе, VB25 Цзин Мэнь, 1 точка меридиана селезёнки-поджелудрчной железы - RP19 Фу Ай _; а также 3 иммунные точки на переднесрединном меридиане - J5 Ши Мэнь, Л 2 Чжун Вань, J 14 Тань Чжун. Предложенное авторами последовательное чередование точек позволяет достигнуть максимального эффекта от. стиму- ляции акупунктурных точек без опасности их истощения.

Таким образом, предложенный авторами способ позволил выявить новый эффект от акупунктурного введения диспергированного биомате- риала «Аллоплант», который заключается в нормализации субпопуляций лимфоцитов и снижении количества цитокинов, в частности, TNF-α и цир- кулирующих иммунных комплексов в периферической крови. Также было выявлено новое свойство диспергированного бирматериала «Аллоплант», основанное на специфичности иммунного ответа, которое заключается в повышении титров иммуноглобулинов анти-НВс Ig G, что, наряду с исчез- новением или снижением титров анти-НВс Ig М, является свидетельством формирования надёжного постинфекционного иммунного ответа.

Способ осуществляют следующим образом. Всем больным назначают базисную терапию, включающую полупостельный, постельный режим, дие- ту N« 5А по Певзнеру, дезинтоксикационные и симптоматические средства по показаниям (Григорьев П.Я., Яковенко Э.П., «Диагностика и лечение хронического гепатита и цирроза печени», Советская медицина, 1985, N 12, с. 61-67.). Диспергированный биоматериал Аллоплант для аккупунктурного введения предварительно разводят в физиологическом растворе в соотно- шении 30-50 мг биоматериала на 4-12 мл раствора, в зависимости от коли- чества задействованных в сеансе точек. Инъекции осуществляют в следую- щие акупунктурные точки: на 1-ом, 3-ем, 5-ом и далее сеансах задействуют 12 точек: 10 шу-точек меридиана мочевого пузыря и 2 точки заднесредин- ного меридиана - VI 8 Ганъ Шу, VI 9 Дань Шу, V47 Хунъ Мэнъ, V48 Ян Ган, V49 И Шэ и Т8 Цзинь Со, Т9 Чжи Ян, вводя от 0,5 до 1,0 мл раствора на од- ну точку. На 2-ом, 4-ом и далее сеансах задействуют 8 точек: 5 сегментар- но-локальных точек меридианов печени, желчного пузыря и селезёнки в правом подреберье и 3 иммунные точки переднесрединного меридиана - F13 Чжан Мэнъ, F14 Ци Мэнъ, VB24 Жи Юе, VB25 Цзин Мэнъ, RP19 Фу Ай и J5 Ши Мэнъ, J12 Чжун Ванъ, J14 Тань Чжун. Таким образом, происходит чередование точек от сеанса к сеансу, промежуток времени между которы- ми составляет от 1 до 7 суток. Допустимый промежуток между сеансами от 1 до 7 суток выявлен опытно-экспериментальным путём, характеризуется достижением макрофагально-гистиоцитарной фазы и коррелирует с резуль- татами работ по исследованию процессов резорбции в тканях биоматериа- лов Аллоплант (Р.А.Хасанов, «Инъекционные формы аллотрансплантатов серии «Аллоплант». Получение и биологическая активность», Пермь, 1999, (канд). Курс лечения включает 8-10 сеансов в течение 2-4 недель. Способ хорошо переносится больными и не имеет побочных реакций.

Клинические примеры:

Пример 1.

Пациент С, 47 лет. 8 месяцев назад проходил курс лечения в инфек- ционном отделении ГКБ,с диагнозом: острый вирусный гепатит В, желтуш- ная форма, средней степени тяжести. Из эпидемиологического анамнеза- контакта с инфекционными больными не им,ел, но более года назад зани- мался лечением зубов. Заболел остро, с болями в. правом подреберье, уве- личением печени и селезёнки, нарушениями пигментного обмена (кожный зуд, тёмная моча, иктеричные склеры). Получал стандартное (базисное) ле- чение. Период реконвалесценции протекал без особенностей, выписался в удовлетворительном состоянии, однако на протяжении последующих меся- цев отмечал периодически возникающую тошноту, боли в правом подребе- рье, общую слабость. При обследовании через 6 месяцев после выписки: объективно: печень умеренно болезненна, выступает из-под края реберной дуги на 1 см по среднеключичной линии, селезёнка не увеличена, умерен- ная иктеричность склер. Биохимический анализ крови: общий билирубин 81,4 мкмоль/л, прямой билирубин 15,2 мкмоль/л, непрямой билирубин 24,Змкмоль/л, АЛТ 144,2 ед/л, ACT 151,4 ед/л. При иммунологическом об- следовании выявлены: положительные HbsAg, HbeAg, aHraHbsIgM, иммун- ный статус: CD3 ⁺ - 1,29* 10 ⁹ /л, CD4 ⁺ - 0,68* 10 ⁹ /л, CD8 ⁺ - 0,43* 10 ⁹ /л, CD19 ⁺ - 0,13* 10%, CD25 ⁺ - 0,09* 10 ⁹ /л. Проведён курс лечения по предложенной методике, включавший 10 сеансов в течение двадцати двух дней. Процеду- ры переносил легко, побочных явлений, осложнений в период лечения не было. После 3-го сеанса уменьшилась слабость, прекратилась тошнота и улучшился аппетит. К концу второй недели размеры печени нормализова- лись. К 14 дню от начала терапии: общий билирубин 57,4 мкмоль/л, прямой билирубин 7,3 мкмоль/л, непрямой билирубин 18,6мкмоль/л, АЛТ 85,5 ед/л, ACT 95,4 ед/л. Через 4 недели после начала лечения наблюдалась нормали- зация иммунного статуса: снизилось количество CD8 ⁺ , CD19 ⁺ при увеличе- нии количества CD3 ⁺ , CD4 ⁺ - лимфоцитов. Самочувствие удовлетвори- тельное, жалоб нет. Печень безболезненная при пальпации, размеры в пре- делах нормы. Наблюдается в течение трёх лет. Признаков хронизации про- цесса нет. Работоспособность полностью восстановлена.

Пример 2.

Пациентка Е., 71 год. Болеет около года, когда стала отмечать появле- ние болей в эпигастрии и в правой половине живота, увеличение живота (асцит) и связанную с этим одышку, общую слабость. Полгода назад обсле- довалась и прошла курс лечения в ГКБ. Вирусные инфекции, паразитарная инвазия, онкопатология, профессиональные вредности были исключены. Вредных привычек не имеет. Поставлен диагноз: Цирроз печени, идиопати- ческий (криптогенный), субкомпенсированный. Проведён курс консерва- тивной терапии (альбумин, полиглюкин, глюкоза 5% внутривенно, диуре- тики, лактулоза внутрь). Выписалась с улучшением, но сохранились явле- ния асцита и общей слабости. Из лечебных мероприятий -диета N°5. Взята на лечение по предложенноу согласно изобретению способу. Объективно - асцит 2 степени (живот симметрично увеличен с признаками портальной гипертензии на передней брюшной стенке). Печень - передний край высту- пает на 1,0 см ниже рёберной дуги, бугристый, безболезненый. По УЗИ: Отмечалось увеличение обеих долей печени с преобладанием правой доли. На фоне среднеочаговой диффузной неоднородности паренхимы печени определялись множественные изоэхогенные узлы и гиперэхогенные тяжи как по ходу ветвей воротной вены, так и по межсегментарным перегород- кам. Определялось увеличение объемного кровотока в воротной вене на 68,7%, в селезеночной вене на 35,4% по сравнению с нормой за счет рас- ширения диаметра их стволов. Биохимический анализ в начале лечения - диспротеинемия (общий белок 88,2 г/л, альбумин 36,5 г/л), холестерин 7,86 мМ/л, АЛТ 121 ,3 ед/л, ACT 154 ед/л, общий билирубин 87мг/л, прямой билирубин 8,3 мкмоль/л, непрямой билирубин 19,6 мкмоль/л, СОЭ 35мм/ч. В течение 14 дней цроведено 8 сеансов по предложенной согласно изобре- тению схеме, причём за сеанс использовалось разведение 50 мг биомате- риала на 12 мл физраствора. Сеансы переносила удовлетворительно, ос- ложнений не было.

Спустя 1 месяц после лечения: самочувствие и работоспособность пациент- ка оценивает как хорошее. По УЗИ: Размеры печени приближены к норме, сохраняется неоднородность паренхимы печени, значительно уменьшилось количество изоэхогенных узлов и гиперэхогенных тяжей. По биохимиче- скому анализу крови показатели приблизились к норме- общий белок 88,2 г/л, альбумин 56,4 г/л, холестерин 6,46 мМ/л, АЛТ 76,3 ед/л, ACT 64 ед/л, общий билирубин 25мг/л, прямой билирубин 5,3 мкмоль/л, непрямой би- лирубин 15,6мкмоль/л, СОЭ 15мм/ч.

Всего было пролечено 12 больных с вдрусным гепатитом и 7 больных с циррозом печени. У всех больных были отмечены положительные резуль- таты лечения.

Таким образом^ предложенное изобретение позволяет повысить эф- фективность лечения гепатитов или циррозов печени благодаря коррекции системного иммунного ответа. Способ не имеет побочных реакций, хорошо переносится больными и может быть рекомендован для широкого клиниче- ского применения.