本发明涉及多取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸化合物， 进一步涉及该辛垸 化合物的制备、 以及含有这些化合物的药物组合物及其用途。 背景技术

血栓是由血小板粘附于血管壁内膜开始的。 当血管内皮细胞损伤后， 内 皮下的胶原纤维暴露，血小板粘附于破损处， 活化并释放二憐酸腺苷（ADP)、 血栓素 A ₂ (TXA ₂ )、 5-羟色胺 （5-HT)等物质， 促使更多的血小板粘附和聚 集， 活化的血小板为凝血反应提供了必须的憐脂表 面； 内皮破损后组织因子 的暴露， 激活了凝血系统， 凝血因子粘附在血小板憐脂表面， 经过一系列酶 解反应， 使纤维蛋白原变成纤维蛋白， 之后结成细网分布于血小板之间并网 罗白细胞和大量红细胞使血栓团块迅速增大， 最终与血小板紧密结合形成一 个牢固的血栓。 无论是动脉系统血栓如动脉栓塞性心血管疾病 ， 还是静脉系 统血栓如肺梗塞及深静脉血栓等疾病对人类的 健康已构成了极大的威胁。 合 理使用抗凝药物， 提高对血栓栓塞性疾病的诊治水平， 已成为当今临床关注 的问题。

抗血小板治疗是血栓栓塞性疾病防治治疗的重 要组成部分。 在临床上已 应用多年， 抗血小板药物能阻止血小板黏附、 聚集和释放， 进而防止动脉血 栓形成。 抗血小板药物通过阻断花生四烯酸途径， 增高血小板内环憐酸腺苷 (cAMP) 水平， 影响血小板钙内流以及其他作用抑制血小板聚 集和释放功 能。 血栓形成通常在易损斑块基础上发生裂隙或破 裂， 继而激活血小板和凝 血系统。 因此凡作用于血小板黏附、 激活、 聚集和血栓形成中的任何环节可 能对血栓栓塞性疾病起预防和治疗作用。

作为莨菪碱类药物， 山莨菪碱能抑制血栓素 A ₂ 的合成， 防止血小板聚 集和释放， 防止微血栓形成， 抑制抗原抗体复合物沉积。 其主要作用机制包 括： ①可嵌入细泡膜的脂质双层， 增加膜的流动性， 改善血液流态， 提高白 细胞的变形能力， 抑制粒细胞和血小板的聚集， 抑血栓素的合成； ②可改善 微动脉的自律性， 恢复微循环对心肌组织的灌注的冲刷作用， 减轻微血管的 阻塞及压迫， 改善前向血流灌注； ③抑制 Ca ²⁺ 内流， 防治钙超载， 解除微血 管痉挛； ④减轻迷走神经相关的再灌注伤， 改善微循环灌注； ⑤抗自由基过 氧化作用， 减轻脂质过氧化对内皮及白细胞膜的损伤。 山莨菪碱的这些作用 机制显示， 山莨菪碱能阻滞钙离子慢通道， 抑制血小板释放血清素和血栓素 A ₂ 的代谢物血栓素 B ₂ ， 持久地抑制血管收縮性物质而扩张血管， 从而改善 血管的舒縮功能， 有效的治疗血管神经性头痛。 但是， 莨菪碱类药物对炎性 疾病和抑制 TXA ₂ 作用较弱。

作为抗血小板治疗的常用药物阿司匹林 （ASA) , 主要通过抑制血小板 环氧化酶， 进而抑制血栓素 A ₂ 的合成， 每日小剂量 (20mg~100mg)即可抑制 大部分血栓素 A ₂ 的合成， 循证医学证明了阿司匹林在心血管病预防中有 不 可替代的作用。 而人体内血小板聚集功能可能由 TXA ₂ 和前列环素 （PGI ₂ ) 之间的平衡来调节。

ASA通过灭活脂肪酸环加氧酶而抑制前列环素 （PGI ₂ )的合成及循环血 中血小板的功能。 当血管内发生血小板黏着及聚集过程时， 血小板释放多种 血小板因子， 包括 5-羟色胺 (5-HT)及血栓素 Α ₂ (ΤΧΑ ₂ )等， 具有强烈的收縮血 管活性， 并导致血栓形成。 同时， PGI ₂ 具有血管扩张活性。 ASA对 PGI ₂ 合 成的抑制远不如对 TXA ₂ 的抑制明显。 ASA可用于心脑血管事件的预防， ASA 的二级预防旨在预防有动脉粥样硬化或有血栓 形成趋向的高危人群的心血 管事件的发生， 这类患者包括既往缺血性卒中、 短暂性脑缺血（TIA)、 急性 心肌梗死、 既往心肌梗死和其他心血管疾病 （不稳定和稳定型心绞痛、 血管 性疾病术后、 周围血管性疾病、 血栓栓塞症、 心房纤颤、 心瓣膜疾病^)。全 球超过 20万例受试者的临床试验数据荟萃分析结果显� ��： ASA使心肌梗死、 卒中的发生和死亡率降低约 1/4， 其中非致死性心梗的风险减低 1/3， 非致死 性卒中的风险减低 1/4， 血管事件死亡率减低 1/6。 美国和欧洲等多个国家的 心脑血管疾病防治指南均将 ASA列为二级预防的基础用药。 ASA在心脑血 管事件的预防作用明显， 但是对治疗血管平滑肌， 特别是毛细血管、 改善微 循环作用弱。 而且 ASA对胃肠道刺激性强， 容易引起强烈的肠道反应。

本发明提供一种新的化合物， 该化合物不但能扩张血管、 改善微循环、 抑制 TXA ₂ ， 对炎性疾病也有作用， 特别是对血管神经性头痛有特效， 并且 该化合物对胃肠道刺激小， 生物活性高， 服用剂量小， 人体能长期耐受。 发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术中存在的不足 之处， 而提供一种新的多 取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸化合物及衍生物或其药� �盐或其水合物或溶剂 物， 所要解决的技术问题是根据药物分子设计安全 、 有效、 稳定和可控的原 则， 经过靶标确定， 模型建立， 先导化合物发现和优化， 运用 3D构效关系和 多取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸化合物的药物动力学 （ADMET) 性质来改 善和创造出比目前环氧化酶抑制物抑制血栓素 A ₂ 分泌作用更强且具有镇痛， 镇静作用的一系列新化合物。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的， 申请人根据本发明一系列化 合物的 3D、 4D、 5D、 6D构效关系的基础知识，结合计算机对化合物� �� ADMET 性质模拟而对多取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸母核进行一系列结构变� �， 通 过大量辛苦的创造性劳动与多次试验结果得到 由以下通式（ I )表示的一种 多取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸化合物及衍生物或其药� �盐或其水合物或溶

( I )

多取代的 8-氮杂环【3.2.1】辛垸化合物包括式

在每种情况下， 每个取代基 、 R ₂ 选自氢原子或 d Cs的直链或支链垸 烃、 羟基、 乙酰氧基、 乙酰氧基苯甲酰基， R ₃ 为乙酰氧基苯甲酰基。 所述由通式 I所示的化合物或其药用盐或其水合物或溶剂� �中 为 -(CH ₂ ) _n H, n为 1~5。

所述由通式 I所示的化合物或其药用盐或其水合物或溶剂� �中 R ₂ 为氢 原子、 羟基和乙酰氧基苯甲酰基。

本发明还具有的技术方案是涉及含有药学有效 量的式

的载体的药物组合物。

本发明中引用的每篇文献的内容均全文引入本 申请作为参考。

本发明的各个方面、 特点和优点将通过以下的详细叙述而达到更好 的理 解。 提供该详细叙述仅是为了说明本发明的目的， 并非旨在限制本发明。 具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、 创作特征、 达成目的与功效易于明白了 解， 下面结合具体实施方案， 进一步阐述本发明

在下文列出的核磁共振光谱 （NMR) 中， 化学位移 ppm表示， 以四甲 基甲硅垸为内标。 各縮写词分别具有以下含意： br=宽峰， s=单峰， d=双峰， ₁₌ 三重峰， ₌ 四重峰， „!=多重峰。

实施方案一， 式 I的新颖化合物，

( I )

在一个具体的实施方案中， 本发明包括式 （ I ) 化合物， 其中：

在每种情况下， 每个取代基 、 R ₂ 选自： 氢原子或 d Cs的直链或支链 垸烃、 羟基、 乙酰氧基、 乙酰氧基苯甲酰基， R ₃ 为乙酰氧基苯甲酰基。

具体实施方案包括以下化合物：

2 - (乙酰氧基)苯甲酸 -9 -甲基 -3 -氧杂 -9-氮杂三环 [3.3丄 0 ² · ⁴ ]壬垸 -7-酯

2- (乙酰氧基)苯甲酸 -6 -羟基 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯

2- (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯

2,2-二 (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8-氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3,6-二酯

定义

如上文所用以及贯穿本申请说明书的详细说明 和所附的专利申请范围， 下 列术语应被理解为具有以下含义， 除非另行说明。

本申请所用的术语 "本发明的化合物" 以及相当的表述， 意为包括如上所 述的式 I化合物， 该表述还包括其药学上可接受的盐以及溶剂化 物， 例如水合 物。 为了明晰起见， 有时当上下文允许时会在文中举出某些具体例 子， 但这些 例子纯粹是作为例证， 并非旨在排除上下文所允许的其它例子。

本申请所用的术语 "治疗"， 无论动词或名词， 均包括预防性治疗以及现存 的病症的治疗。

"有效量" 旨在描述能产生预期疗效的化合物的量。

"药学上可接受的盐"意为这些活性成分与酸生� ��的任何盐， 其不会产生 不希望的毒性或副作用。 这些酸是药学专业人员所熟知的。 适宜的盐的非限制 性例子如下： 氯化物： 溴化物； 碘化物； 天冬氨酸盐； 苯甲酸盐； 柠檬酸盐； 酒石酸盐； 憐酸盐； 富马酸盐； 甘油憐酸盐； 葡糖憐酸盐 (glucose phosphate); 乳酸盐； 马来酸盐； 乳清酸盐； 草酸盐； 硫酸盐； 三氯乙酸盐； 三氟乙酸盐； 苯磺酸盐； 甲苯磺酸盐及甲磺酸盐。

具体的或优选的实施方案

此外， 本发明涉及式 I化合物在治疗患有可通过施用治疗有效量的� � I化 合物而得到改善的生理病症的患者中的用途。 可利用本发明化合物治疗的生理 病症的具体实施方案包括但肯定不限于血栓栓 塞性疾病， 如心 I梗死、 脑血栓 形成、 深静脉血栓形成、 脑栓塞、 肺栓塞和其它血栓栓塞性疾病。 可利用本发 明治疗的生理病症的其它实施方案包括这样一 些生理病症， 如关节炎、 类风湿 性关节炎、 类风湿性脊椎炎、 痛风性关节炎、 创伤性关节炎、 风疹性关节炎、 牛皮癣关节炎、 血管神经性头痛。

在一个具体的实施方案中， 本发明涉及式 I化合物在治疗患有血管神经性 头痛病症的患者中的用途， 包括给患者施用生理有效量的该化合物。

此外， 本发明涵盖药物组合物， 其包含式 I化合物和选自以下化合物的第 二化合物： β2肾上腺素能激动剂、 抗胆碱能剂、 抗凝血药， 及其药学上可接受 的载体。 在这样的药物组合物中， 式 I化合物和第二化合物以这样的量存在， 使得它们能够提供治疗上有效的活性， 即形成累加或协同效应。 可用这样的药 物组合物治疗的特定血管栓塞性疾病包括但不 限于血管神经性头痛。 此外， 本发明涉及治疗患有血栓栓塞性疾病的患者的 方法， 包括对患者施 用式 I化合物和选自以下化合物的第二化合物： β2肾上腺素能激动剂、 抗胆碱 能剂、 抗凝血药。 在这一方法中， 式 I化合物和第二化合物以这样的量存在， 使得它们能够提供治疗上有效的活性， 即形成累加或协同效应。 在本发明这样 的方法中， 本发明的化合物可在第二化合物之前对患者施 用， 第二化合物可在 本发明化合物之前施用， 或本发明化合物和第二化合物可同时施用。 应用于本 方法的肾上腺素能激动剂、 抗胆碱能剂、 抗凝血药的特定实例将在下面说明。 药物组合物

如上面所解释， 本发明化合物显示了有用的药物活性， 相应地， 可包含在 药物组合物中， 用来治疗患有某些医学病征的患者。 因此， 根据本发明的进一 步的方面， 本发明提供含有本发明化合物和药学上可接受 的载体的药物组合物。 此处所用的术语 "药理学上可接受的"优选表示已经通过国家食� ��药品监督管 理局批准， 或已列入中国药典。适当药学载体在 E.W.Martin编著的 "Remington' s Pharmaceutical Sciences " 中有所描述。

本发明的药物组合物可依照常用的方法制备， 使用或多种药学上可接受的 辅料或赋形剂。 除了其它成分以外， 所述辅料可包括稀释剂、 充填剂、 粘合剂、 崩解剂、 助流剂、 润滑剂、 表面活性剂、 无菌水介质以及各种非毒性有机溶剂。 所述药物组合物可以片剂、 胶囊剂、 丸剂、 持续释放制剂、 颗粒、 粉剂、 水溶 液或悬浮液、 注射溶液、 酏剂、 或糖浆等形式给药， 并可包含一种或多种甜味 剂、 矫味剂、 着色剂或稳定剂， 以获得药学上可接受的制剂。 赋形剂的选择以 及赋形剂中活性物质的含量通常是依照活性化 合物的溶解性和化学性质、 具体 的给药方式以及用药实践中须遵守的规定来决 定。 例如， 赋形剂如乳糖、 微晶 纤维素、 预胶凝淀粉、 未改性淀粉、 硅化微晶纤维素、 甘露醇、 山梨醇、 木糖 醇、 dextmte、 果糖、 柠檬酸钠、 碳酸钠、 憐酸氢钙二水合物、 无水憐酸氢钙、 硫酸钙、 以及粘合剂如聚乙烯吡咯垸酮、 羟丙基甲基纤维素、 乙基纤维素、 羟 乙基纤维素、 甲基纤维素、 羧甲基纤维素钠、 预胶凝淀粉、 淀粉、 聚乙二醇、 聚氧化乙烯、 聚卡波非、 凝胶和阿拉伯树胶以及崩解剂如交联羧甲基纤 维素钠、 淀粉羟乙酸钠、 交聚维酮、 淀粉、 微晶纤维素、 藻酸和一些结合了润滑剂如硬 脂酸镁、 硬脂酸钙、 硬脂酸的复合硅酸盐、 氢化植物油、 矿物油、 聚乙二醇、 脂肪酸甘油酯、 月桂基硫酸钠和助流剂如二氧化硅、 滑石、 淀粉以及一些适当 的润湿剂如月桂基硫酸钠、 脱水山梨糖醇酯、 聚氧乙烯脂肪酸酯、 泊洛沙姆、 聚氧乙烯醚、 多库酯钠、 聚氧乙烯蓖麻油和苯扎氯铵都可用来制备片剂 。 制备 胶囊时， 单独使用充填剂如乳糖、 微晶纤维素、 预凝胶淀粉、 未改性淀粉、 硅 化微晶纤维素或使用如上述的加有或未加粘合 剂的两种或多种充填剂的混合物 以及适当的上面列出的润湿剂、 崩解剂、 助流剂、 润滑剂等是很有利的。 当使 用水性悬浮液时， 它们可含有乳化剂或促进悬浮的试剂。 也可使用稀释剂如蔗 糖、 乙醇、 聚乙二醇、 丙二醇、 甘油以及氯仿或它们的混合物。 这类药学上可 接受的载体也可以是无菌的水和油， 包括来源于石油、 动物、 植物或合成的油， 例如花生油、 豆油、 矿物油、 芝麻油等等。 当药物组合物为静脉内注射时， 水 是优选的载体。 盐水溶液以及葡萄糖和甘油的水溶液也可作为 液体载体使用， 尤其是用于注射溶液。 适宜的药物赋形剂包括甘露醇、 人血清白蛋白 (HSA)、淀 粉、 葡萄糖、 乳糖、 蔗糖、 明胶、 麦芽、 大米、 面粉、 白垩、 硅胶、 碳酸镁、 硬脂酸镁、 硬脂酸钠、 单硬脂酸甘油酯、 滑石、 氯化钠、 脱脂奶粉、 甘油、 丙 二醇、 水、 乙醇等等。 这些组合物可采取溶液、 悬浮液、 片剂、 丸剂、 胶囊、 粉剂、 持续释放制剂等形式。

很自然， 本发明的药物组合物将含有治疗有效量的活性 化合物以及适量 的载体， 以便提供适当的供患者使用的剂型。 尽管静脉注射是一种非常有效 的给药形式， 也可使用下面讨论的其它方式， 如注射、 口服、 鼻腔或肠胃外 给药方式。

治疗方法

根据文献中以及本申请下面描述的测试， 式 I化合物具有抗血小板聚集作 用， 这些测试结果被认为与人体或其它动物体内的 药物活性相关。 因此， 在进 一步的实施方案中， 本发明涉及使用结构式 I或包含它的药物组合物来治疗患 有或易患可用抗血小板聚集剂来改善的病症的 患者。 例如， 式 I化合物用于治 疗血栓栓塞性疾病， 如心肌梗死、 脑血栓形成、 深静脉血栓形成、 脑栓塞、 肺 栓塞和其它血栓栓塞性疾病、 关节炎、 类风湿性关节炎、 类风湿性脊椎炎、 痛 风性关节炎、 创伤性关节炎、 风疹性关节炎、 牛皮癣关节炎、 血管神经性头痛。

依照本发明另一个特点， 提供了治疗方法， 可用于治疗患有或易患可用抗 血小板聚集剂来改善的病症 （如上文所述的病症） 的人类或动物患者， 该方法 包括给患者施用冶疗有效量的本发明的化合物 或含有本发明的化合物的药物组 此外， 本发明涵盖治疗患有血管神经性头痛的患者的 方法， 包括对患者 施用本发明的化合物和选自以下化合物的第二 化合物： β2肾上腺素能激动 剂、 抗胆碱能剂、 钙拮抗剂。 在这样组合治疗方法中， 本发明的化合物可在 第二化合物之前施用， 本发明的化合物可在第二化合物施用后施用， 或者本 发明的化合物和第一化合物也可同时施用。

给药模式

根据本发明， 式 I化合物或包含该化合物的药物组合物可以肠� �外、 经直 肠方式对患者施用。 口服给药

此处考虑的用法是口服固体剂型， Remington' S Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. l990(Mack Publishing Co. , Easton, PA 18042)第 89章对口服固体剂型作了一 般说明， 该内容此处通过引用而并入本申请。 固体剂型包括片剂、 胶囊、 丸剂、 锭剂、 扁囊剂或小丸剂。 另外， 脂质体或类蛋白包囊也可用来配制本发明组合 物（如美国第 4， 925， 673 号专利中报导的类蛋白微球体）。也可用脂质 体包囊， 脂质体可用各种聚合物（如美国第 5,013,556号专利）衍生。 Marshall,K (In:Modern Pharmaceutics Edited by G.S.Banker and C- T.Rhodes Chapter 10, 1979) 介绍了用 于治疗的可的固体剂型， 此处通过引用而该文并入本申请。 一般来说， 制剂将 包括本发明的化合物和在胃环境下保护化合物 的惰性成份， 并在肠内释放生物 活性物质， 即本发明的化合物。

还特别地涵盖本发明化合物的口服剂型。 可将该化合物化学修饰， 使得口 服递送更有效。 一般而言， 预期的化学修饰是给该组分的分子本身增添至 少一 个附加部分， 该附加部分可使该药物 (a) 抑制蛋白水解； 和 (b)从胃或肠道吸收 到血液中。 同时， 还需要提高本发明化合物的总体稳定性， 延长其在体内的循 环时间。 此类附加部分的实例包括： 聚乙二醇、 乙二醇和丙二醇的共聚物、 羧 甲基纤维素、右旋糖酐、聚乙烯醇、聚乙烯吡 咯垸酮和聚脯氨酸。参阅 Abuchowski 禾口 Davis, 1981, Soluble Polymer-Enzyme Adducts,Enzymes as Drugs,Hocenberg禾口 Roberts编辑， Wiley-Interscience,New York,367-38 3页； Newmark et al. ， 1982, J.Appl.Biochem.4: 185-189。 可以使用的其它聚合物有聚 -1， 3-二氧戊环和聚 -1， 3， 6-三氧辛环 (poly-l,3,6-tioxocane)。 对于上述的药物用途， 聚乙二醇附加部分 是优选的。

本发明化合物在体内的释放部位可以是胃、 小肠 （十二指肠、 空肠或回肠） 或大肠。 本领域技术人员可提供在胃中不溶解， 而在十二指肠或肠的其它部位 释放药物的制剂。 优选的是， 通过保护本发明化合物或者使所述化合物在胃 部 环境以外 （例如在肠内） 释放， 在释放时可避免胃部环境的有害作用。

为了保证对曾的充分抵抗能力， 必须采用至少能抵抗 pH值 5.0的包衣。 用 作肠溶包衣的较常用的惰性成分的实例为乙酸 偏苯三酸纤维素 (cellulose acetate trimellitate， CAT )、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯 (HP CP)、 HPMCP 50、 HPMCP 55、 聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯 (PVAP)、 Eudragit L30D, Aquateric、 乙酸邻苯二 甲酸纤维素 (CAP)、 Eudragit L、 Eudragit S和虫胶。 这些包衣可按混合膜的形式 使用。

对于不意在抵抗胃部环境的片剂也可使用包衣 ， 或包衣混合物。 这种情况 可包括糖衣或者使片剂较易于吞咽的包衣。 对于干药物 （即粉末） 的递送， 胶 囊可包含硬壳 （例如明胶）： 对于液体形式， 可使用软明胶外壳。 扁囊剂的外壳 材料可以是稠淀粉或其它可食用纸。 对手丸剂、 锭剂、 模制片或模印片， 可使 用湿块化技术 (moist massing techniques)。

药物可以制成粒度约 1毫米的颗粒或小粒， 以微细多颗粒形式包含在所 述制剂内。 用于胶囊给药的材料的制剂也可以为粉末剂、 略经压縮的填料 (lightly compressed plugs), 或者甚至片剂。 所述药物可通过压縮制备。

也可包含着色剂和矫味剂。 例如， 可以先配制本发明化合物 （例如采用 脂质体或微球体包囊)， 然后， 再将其包含在可食用的产品（例如， 含着色剂 和矫味剂的冷冻饮料） 内。

可用惰性材料来稀释或增加药物的体积。 这些稀释剂可包括碳水化合物， 尤其是甘露糖醇、 α-乳糖、 无水乳糖、 纤维素、 蔗糖、 改性右旋糖酐和淀粉。也 可使用某些无机盐 （包括三憐酸钙、 碳酸镁和氯化钠） 作为填料。 m些市售的 稀释剂为 Fast-Flo、 Emdex、 STA-Rx 1500、 Emcompress和 Avicell。

可在药物制剂中加入崩解剂， 以形成固体剂型。 用作崩解剂的材料包括但 不限于淀粉， 包括基于淀粉的市售崩解剂 Explotab。 淀粉羟乙酸钠、 安伯莱特 (Amloerlite), 羧甲基纤维素钠、 ultramylopectin藻酸钠、 明胶、 橙皮、 酸性羧甲 基纤维素、 天然海绵和膨润土都可以使用。 另一种形式的崩解剂是不溶性阳离 子交换树脂。 可使用粉末状树胶作为崩解剂和粘合剂， 所述崩解剂和粘合剂可 包括粉末状树胶如琼脂、 卡拉牙胶或黄蓍胶。 也可使用藻酸及其钠盐作为崩解 剂。

可以使用粘合剂粘住药物， 以形成硬质片剂， 粘合剂包括来自于天然产物 的材料如阿拉伯胶、 黄蓍胶、 淀粉和明胶。 其它粘合剂包括甲基纤维素 (MC)、 乙基纤维素（EC)和羧甲基纤维素（CMC)。 可在醇溶液中使用聚乙烯吡咯垸酮 (PVP) 和羟基丙基甲基纤维素 (HPMC), 以使药物成粒状。

可在药物制剂中加入抗磨剂anti-frictional agent) ,以防在配制过程中发生粘 附。 可使用润滑剂作为在药物和模具壁之间的层， 这些润滑剂可包括但不限于 硬脂酸 （包括其镁盐和钙盐)、 聚四氟乙烯 (PTFE)、 液体石蜡、 植物油和蜡。 也 可以使用可溶性润滑剂， 例如月桂基硫酸钠、 月桂基硫酸镁、 各种分子量的聚 乙二醇、 Carbowax 4000和 6000。

可加入助流剂， 它们在配制过程中可改善药物的流动性， 有助于在压制过 程中的重排。 助流剂可包括淀粉、 滑石、 热解硅胶和水化硅铝酸钙 (hydmted silicoaluminate )。

为了有助于药物在含水环境中溶解， 可加入表面活性剂作为湿润剂。 表面 活性剂可包括阴离子洗涤剂， 例如月桂基硫酸钠、 磺基琥珀酸二辛酯钠 (dioctyl sodium sulfosuccinate)和二辛基磺酸钠。 也可以使用阳离子洗涤剂， 可包括苯扎 氯铵或苄索氯铵。 在制剂中可用作表面活性剂的有效非离子洗涤 剂为聚桂醇

400、 聚氧乙烯 (40 )硬脂酸酯 (polyoxyl 40 stearate)、 聚氧乙烯氢化蓖麻油 10、 50 和 60、 单硬脂酸甘油酯、 聚山梨醇酯 40、 60、 65和 80、 蔗糖脂肪酸酯、 甲基 纤维素和羧甲基纤维素。 这些表面活性剂可单独地或以不同比率的混合 物存在 于本发明化合物的制剂中。

有可能增强本发明化合物的吸收的添加剂为例 如脂肪酸、 油酸、 亚油酸和 亚麻酸。 控释口服制剂可为理想的。 可将药物结合到允许通过扩散或浸出机理 释放的惰性基质 （例如树胶） 中。 也可在制剂中加入缓慢退化的基质。 一些肠 溶包衣也具有延缓释放的作用。

这种药物的另一种控释形式是通过基于 Oros药物体系的方法 (Alza公司）， 即将药物包封在半渗透膜内， 此膜可使水进入， 并由于渗透作用而经过单一开 口排出药物。

其他包衣也可用于所述制剂。 它们包括可在包衣盘内涂覆的各种糖。 治疗 剂也可采取薄膜包衣片剂的形式， 用于这种形式的材料可分为两类。 第一类是 非肠溶材料， 包括甲基纤维素、 乙基纤维素、 羟乙基纤维素、 甲基羟乙基纤维 素、 羟丙基纤维素、 羟丙基-甲基纤维素、 羧基甲基纤维素钠、 聚维酮和聚乙二 醇。 第二类由肠溶材料组成， 它们一般是邻苯二甲酸酯。

可使用各材料的混合物， 以提供最佳薄膜包衣。 薄膜包衣可在盘包衣机 中或在流化床内实现， 或通过压縮包衣实现。

直肠给药

直肠给药的固体组合物包括按照已知方法配制 并含有本发明化合物的栓 剂。 本发明药物组合物中的活性成分的百分比是可 以变化的， 其构成比例应达 到适用的剂量。 显然， 几种单位剂型可几乎同时给药。 采用的剂量将由医生决 定， 并取决于所需的治疗效果、 给药途径、 治疗持续时间和患者的病症。 成人 剂量， 若为口服， 则按每公斤体重计算， 每天约为 0.01-100 mg， 优选为 0.1-70 mg， 更优选为 0.5-10 m _{g ;} 若为静脉给药， 按每公斤体重计算， 每天约为 0.001-10 mg， 优选为 0.001-1 mg。 在每种具体情况中， 剂量应根据治疗对象的个体因素而 确定， 例如年龄、 体重、 总的健康状况以及可影响医药产品功效的其它 特征。

此外， 为了达到所需的疗效， 可根据需要而频繁地使用本发明化合物。 有 些患者对剂量高低的反应非常迅速， 可采用低得多的维持剂量。 对于其它患者， 按照每个具体患者的生理要求， 以每天 1至 4剂进行长期治疗可为必需的。 通 常， 该活性产品可以每天口服给药 I至 4次。 当然， 对于某些患者而言， 处方量 应不超过每天 1剂或 2剂。

自然， 本发明化合物作为一种有效的治疗药物， 优选是用于人类， 但也可 用于动物。 因此， 本领域技术人员可以很容易地理解， 本发明的方法和药物组 合物具体地适合给药于任何动物， 具体为哺乳动物， 其中包括但不限于诸如猫 科或犬科之类的家畜， 诸如 （但不限于） 牛、 马、 山羊、 绵羊和猪之类的农畜， 野生动物 （不管是处于野生环境还是动物园环境， 诸如小鼠、 大鼠、 兔、 山羊、 绵羊、 猪、 狗、 猫之类的研究动物， 诸如鸡、 火鸡、 鸣禽之类的禽类， 即， 用 于兽医用途。

制备法细节

式 I化合物可通过应用或改进己知的方法来制备� � 这些方法是指迄今为止 所使用的或文献中所述的方法， 例如 R.C丄 arock在 Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, 1989中所述的， 或如本申请所述的那些方法。 在下述反应中， 可能有必要保护某些反应官能团， 例如羟基， 以避免其不 希望地参与反应。可以根据标准的规程使用常 规保护基，例如可参阅 T.W.Greene 禾口 RG.MWuts的 Protective Grooups in Organic Chemistry, John Wi ley and Sons, 1991 。

实施例

本发明的各个方面、 特点和优点将通过以下的具体实施例而达到更 好的 理解。 提供该详细叙述仅是为了说明的目的， 并非旨在限制本发明。

实施例 1 : 2 - (乙酰氧基)苯甲酸 -9 -甲基 -3 -氧杂 -9-氮杂三环 [3.3丄 0 ² · ⁴ ]壬垸 -7- 酯的制备

2 - (乙酰氧基)苯甲酸 -9 -甲基 -3 -氧杂 -9-氮杂三环 [3.3丄 0 ² · ⁴ ]壬垸 -7-酯主要通 过下列反应制得：

在 500ml三口烧瓶中加入 155g 9-甲基 -3-氧代 -9-氮杂三环 [3.3.1.02.4]壬 烧 -7-醇， 然后加入 150ml甲苯， 再加入 150mlDAPT (2S)-N-[N-(3， 5-二氟苯 乙酰基) -L-丙氨酰 ]-2-苯基甘氨酸叔丁酯， 再加入 180g2- (乙酰氧基）苯甲酸 搅拌，水浴加热 50°C搅拌反应，反应 8个小时后冷却，冷却到室温以后分层， 分层除去 DAPT层后减压浓縮， 浓縮后得固体 280.7g收率 88.5% , 粗品于 800ml乙酸乙酯中精制， 得固体 214.5g， 收率 76.4%。 HPLC含量 98.3%。熔 点： 236.35 °C

CDC TMS): 51.89(q 4H)， 52.06(s 3H)， 52.25(s 3H)， 52.57(m 2H), 52.76(q 2H), 53.98(t 1H), 57.17(d 2H), 57.45(d 1H), 57.98(d 1H);MS 316(M+1 100%)

实施例 2:

2- (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯的制备

2- (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯主要通过下列反 制得：

第一步反应：

以内 -1H-吲哚 -3-羧酸 -8-甲基 -8-氮杂双环 [3.2.1]辛 -3-基酯盐酸盐水解制 得， 在 1000ml的三口烧瓶中加入 500ml二氯甲垸， 加入 321g内 -1H-吲哚 -3- 羧酸 -8-甲基 -8-氮杂双环 [3.2.1]辛 -3-基酯盐酸盐， 在缓慢加入 220ml40%的 NaOH溶液， 然后水浴加热搅拌反应， 温度设置在 50~70°C， 反应 5个小时 之后， 撤掉水浴锅室温搅拌， 搅拌待温度降到室温后将溶液倒入分液漏斗中 静置分层， 分出有机层后， 再倒入 400ml二氯甲垸搅拌 15分钟后静置分层， 分液后合并二氯甲垸层进行减压浓縮，浓縮完 毕后得固体 120g，收率 85.1%。

在 1000ml三口瓶中加入 170g 2- (乙酰氧基）苯甲酸， 然后缓慢加 500g 二氯亚砜,再加 20个小时， 减压浓縮后加入 400ml二氯甲垸溶解， 然后再缓慢加入 llOg中间体 I， 搅拌反应 24个小时， 待反应完全后， 加入 10%NaHCO ₃ 溶液调成中性， 再加入 200ml纯化水搅拌 20分钟后静置分层， 分出水相后， 减压蒸出二氯甲垸后得固体 207.5g， 收率 87.9%, 粗品于 700ml乙酸乙酯中精制， 得固体 163.8g， 收率 78.9%。 HPLC

99.1%。 熔点： 204.04 °C。

CDCWTMS): 51.54(m 4H), 51.87(q 4H), 52.06(s 3H), 52.25(m 2H), 52.29(s 3H), 53.98(t 1H), 57.19(d 2H), 57.45(d 1H), 57.94(d 1H);MS 302(M+1 100%)

实施例 3：

2- (乙酰氧基)苯甲酸 -6 -羟基 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯的制备 2- (乙酰氧基)苯甲酸 -6 -羟基 -8-甲基 -8 -氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3-酯主要通 过下列反应制得:

在 500ml三口烧瓶中加入 155g 9-甲基 -3-氧代 -9-氮杂三环 [3.3丄 0 ² · ⁴ ]壬垸 -7-11, 然后加入 150ml甲苯， 再加入 150mlDAPT (2S)-N-[N-(3， 5-二氟苯乙 酰基) -L-丙氨酰 ]-2-苯基甘氨酸叔丁酯， 再加入 180g2- (乙酰氧基）苯甲酸搅 拌， 水浴加热 50°C搅拌反应， 反应 8个小时后冷却， 冷却到室温以后分层， 分层除去 DAPT层后减压浓縮， 浓縮后得固体 280.7g， 收率 85.1%。

第二

在 1000ml三口烧瓶中加入 260g中间体 I， 然后加入 400mlDMF， 再 入 25gNaH， 维持温度 30°C搅拌反应， 反应 6小时。

于第二 .应的溶液中， 搅拌下缓慢滴加 10%的冰醋酸水溶液 600ml， 滴力 1 ]完：毕毕后后，， 室温搅拌 3个小时， 然后用 1000ml氯仿萃取 3次， 合并有机 层层，， 减减压压浓浓縮， 得固体 204g。 收率 78.1%, HPLC含量 98.9%。 熔点： 228.62

°c

Ή-ΝΜΚ(500Ηζ, CDCb/TMS): 51.71(q 2H), 51.88(q 4H), 51.94(br 1H),

52.05(s 3H), 52.26(t 1H), 52.31(m 1H), 53.31(m 1H), 53.97(t 1H), 57.17(d 2H)， 57.4 l(d 1H)， 57.93(d 1H);MS 318(M+1 100%)

实施例 4: 2,2-二 (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8-氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3,6-二酯 制备

2,2-二 (乙酰氧基)苯甲酸 -8-甲基 -8-氮杂双环 [3.2.1]辛垸 -3,6-二酯主要通 过下列反应制得：

第一步反应：

在 500ml的三口烧瓶中加入 280ml二氯甲烷，加入 200 ± 6 籽某 - laH, 5aH -托垸 - 3a -醇托品酸酯， 在缓慢加入 100ml40%的 NaOH溶液， 然后水浴 加热搅拌反应， 温度设置在 60~80°C， 反应 5个小时之后， 撤掉水浴锅， 室温搅 拌， 搅拌待温度降到室温后， 将溶液倒入分液漏斗中静置分层， 分出有机层后， 再倒入 200ml二氯甲垸搅拌， 15分钟后静置分层， 分液后， 合并二氯甲垸层进 行减压浓縮， 浓縮完毕后得固体 90g， 收率 91.7%。

在 1000ml三口瓶中加入 240g2- (乙酰氧基） 苯甲酸， 然后缓慢加 500g二 氯亚砜，再加 10mlDMF,60~80°C热水浴搅拌 20个小时， 减压浓縮后加入 400ml 二氯甲垸溶解， 然后再缓慢加入 90g中间体 I， 搅拌反应 24个小时， 待反应完 全后， 加入 10%NaHCO ₃ 溶液调成中性， 再加入 200ml纯化水搅拌 20分钟后静 置分层， 分出水相后， 减压蒸出二氯甲垸后得固体 187.6g， 收率 62.3%。粗品于 500ml乙酸乙酯中精制， 得固体 153.6g， 收率 81.8%。 HPLC含量 98.7%。 熔点: 405.83 °C

!H-NMRCSOOHz, CDCb/TMS): 51.86(q 4H), 51.97(q 2H), 52.09(s 6H), 52.25(m 1H), 52.28(s 3H), 52.85(m 1H), 53.95(t 1H), 54.07(m 1H), 57.16(d 4H)， 57.42(d 2H), 57.93(d 2H);MS 480(M+1 100%)

生物活性测定

本研究通过观察大肠杆菌内毒素体外诱生昆明 小鼠单核细胞分泌血栓素 A ₂ ， 以及本发明化合物对血栓素分泌量的影响。 验证本发明的各化合物对血小 板活性物质的抑制。

内毒素 (大肠杆菌内毒素)作为一种重要的致炎因子， 在感染性疾病、 血栓形 成性疾病中起重要作用， 其能刺激各种致组织细胞损伤的因子产生， 血栓素 A ₂ 就是其中比较重要的一个因子。 血栓素 B ₂ 是血栓素 A ₂ 重要的代谢产物， 因其在 体内半衰期短， 故血栓素 可反映其水平。 血栓素 A ₂ 的生成起始于单核细胞或 巨噬细胞或血小板膜上的憐脂中的花生四烯酸 ， 最后在血栓素合成酶的作用下 生成血栓素 A ₂ ， 随后分解为血栓素 B ₂ ， 它的形成调节血小板的变形、 粘附、 聚 集和颗粒的分泌， 同时还参与炎症反应、 血管收縮、 细胞损伤、 免疫调控等一 系列的生物学效应。

材料和方法

设计： 完全随机分组设计， 随机对照的动物实验。

材料： 实验纳入雄性昆明小鼠 36只， 普通级， 普通饲养环境。 实验动物分 组： 随机分为 6 组， 每组 6 只， 分别为正常对照组、 模型对照组、 实施例一组、 实施例二组、 实施例三组， 实施例四组。

方法： 小鼠外周血单核细胞分离及与实施例化合物混 合培养： 昆明小鼠 36 只麻醉下摘眼球取血， 肝素抗凝， 以 Hanks 液稀释 1倍， 于离心管中加入淋巴细 胞分离液（比重 1.077 )，再沿管壁缓慢加入 2倍体积之上述稀释全血， 2000r/min, 离心 20min， 位于分离液与稀释血浆之间薄薄的白色层带即 为单个核细胞， 将吸 管缓缓插到界面， 轻轻吸出单个核细胞， 放入离心管中， 以 Hanks 液洗 2次， 最 后用 RPMI-1640(含 100g/L小牛血清， 以下简称为完全 1640)混悬，置玻璃平皿中， 37°C， 体积分数 0.05二氧化碳培养箱内培养 4h， 吸弃上清及游离细胞， 重新加入 完全 1640混悬， 重复上述操作 1次， 所剩贴壁细胞即为单核细胞 (90%)。 以完全 1640制成细胞数为 I X 10 ⁹ ! ¹ 混悬液， Trypan Blue 染色鉴定活细胞数 > 98%。 分 置 24 孔培养板中， 每孔 0.5ml。 6组单核细胞进行如下处理： 正常对照组每孔加 完全 1640 0.5ml _; 模型对照组同样每孔加完全 1640 0.5ml; 实施例一组加浓度 为 5mg/l实施例一化合物 0.5ml、实施例二组加浓度为 5mg/l实施例二化合物 0.5ml、 实施例三组加浓度为 5mg/l实施例三化合物 0.5ml、 实施例四组加浓度为 5mg/l实 施例四化合物 0.5ml。最后使每孔终体积均为 lml。另取两个 24孔培养板， 每孔只 加单核细胞悬液 lml。

内毒素活化单核细胞：上述分离之单核细胞培 养 3d后换液 1 次，除正常对照 组外， 将 10mg/l 的大肠杆菌内毒素 ΙΟμΙ加入其余 5组， 共育 2h; 同时取只加单 核细胞悬液的后两板，每组加大肠杆菌内毒素 浓度分别为 0.01、 0.1、 1、 10、 100、 400mg/l， 各 ΙΟμΙ, 共育 2h。

以上所有操作均为每一相同条件下 (即每组)设 6个平行孔， 大肠杆菌内毒素 为终浓度。

实验结束后，收集培养板各孔中的上清液， -20°C保存，待严格按血栓素 B ₂ 试 剂盒说明书行放免分析法测定。

主要观察指标： 不同实施例化合物对同一浓度大肠杆菌内毒素 刺激的血栓 素 A ₂ 分泌量的影响。 结果

不同实施例化合物均能显著抑制血栓素 A ₂ 的分泌。

*与正常对照组比较， PO.01 ; **与模型对照组比较， PO.01

本实验结果表明， 实施例化合物均能显著抑制血栓素 A ₂ 的分泌 (P<0.01)。