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Title:
N-CONTAINING HETEROARYL DERIVATIVE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING SAME AS ACTIVE INGREDIENT
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2020/175968
Kind Code:
A1
Abstract:
The present invention relates to an N-containing heteroaryl derivative and a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of cancer, comprising same as an active ingredient, wherein the derivative exhibits high inhibitory activity against various protein kinases, particularly high inhibitory efficacy against ret proto-oncogene (RET) enzymes, and has an excellent effect of inhibiting the proliferation of medullary thyroid cancer cells and lung cancer cells, which express the RET fusion gene, and thus can be effectively used in the treatment of cancer, for example, medullary thyroid cancer or lung cancer. In particular, the derivative can be effectively used in the treatment of cancer in which the RET fusion gene is expressed.

Inventors:
JO SEO HYUN (KR)
LI HUA (KR)
RYU HEE SUN (KR)
KIM SEUNG SU (KR)
DO WOO MI (KR)
KIM HYUN KYUNG (KR)
KIM HWAN (KR)
JUNG HONG RYUL (KR)
LEE SUN HWA (KR)
SON JUNG BEOM (KR)
KIM NAM DOO (KR)
Application Number:
KR2020/002925
Publication Date:
September 03, 2020
Filing Date:
February 28, 2020
Export Citation:
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Assignee:
VORONOI CO LTD (KR)
VORONOIBIO CO LTD (KR)
International Classes:
C07D401/14; A61K31/517; A61K31/519; A61P35/00; C07D405/12; C07D487/04; C07D495/04
Domestic Patent References:
WO2018017983A12018-01-25
WO2006067614A22006-06-29
WO2014105958A22014-07-03
Foreign References:
KR20160077217A2016-07-01
KR20120101721A2012-09-14
Attorney, Agent or Firm:
DANA PATENT LAW FIRM (KR)
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Claims:
2020/175968 1»(:1/10公020/002925 청구범위

[청구항 1] 하기화학식 1로표시되는화합물,이의이성질체,이의용매화물,이의 수화물,또는이의약학적으로허용가능한염:

[화학식 1]

의사이클로알킬이고;

,는(:5-6의방향족고리또는 0및 3로이루어지는군으로부터 선택되는하나이상의헤테로원자를하나이상포함하는 5내지 6원자의 방향족헤테로고리를나타내고,이때,상기헤테로방향족고리는하나 이상의직쇄또는분지쇄의 알킬로치환될수있고;

II2는수소또는직쇄또는분지쇄의(: 의알콕시이고;

은수소또는직쇄또는분지쇄의(: 의알킬이며 ;

는수소,직쇄또는분지쇄의(:내의알콕시또는 0및 3로이루어지는 군으로부터선택되는하나이상의헤테로원자를하나이상포함하는 5 내지 6원의헤테로아릴이고,상기헤테로아릴은할로겐,또는직쇄또는 분지쇄의 알킬로이루어지는군으로부터선택되는치환기로하나 이상치환될수있고;및

및 는독립적으로 N또는(:!!이다).

[청구항 2] 제 1항에 있어서,

서상기 XI

의 _6의 알킬이고, XI또는 X4가 0또는 3일때,존재하지않는것인, 화합물,이의이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염. 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[청구항 3] 제 1항에 있어서,

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 4] 제 1항에 있어서,

II4는수소,메톡시,피라졸릴,싸이아졸릴또는아이소옥사졸릴이고,상기 피라졸릴,싸이아졸릴및아이소옥사졸릴은할로겐및직쇄의 _3의 알킬로이루어지는군으로부터선택되는치환기로하나이상치환될수 있는,

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 5] 제 1항에 있어서,

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 6] 제 1항에 있어서,

은사이아노, 6의할로알킬,직쇄의 (:내의알킬또는 (:3-6

사이클로알킬이고;

XI

4 가 0또는 3일때,존재하지 않으며;

는수소또는직쇄의 (:내의 알콕시이고·, 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 은수소또는직쇄의 (:내의 알킬이며;및

4는수소,직쇄의 (: 의 알콕시또는 0및 3로이루어지는군으로부터 선택되는하나이상의 헤테로원자를하나이상포함하는 5원의 헤테로아릴이고,상기 헤테로아릴은할로겐및직쇄의 알킬로 이루어지는군으로부터선택되는치환기로하나이상치환될수있는, 화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 7] 제 1항에 있어서,

은사이아노, _3의할로알킬,직쇄의 _3의알킬또는 (:3-5

사이클로알킬이고;

I

때 ,존재하지 않으며 ;

II2는수소또는직쇄의 _3의알콕시이고;

은수소또는직쇄의 _3의알킬이며;및

II4는수소,메톡시,피라졸릴,싸이아졸릴또는아이소옥사졸릴이고,상기 피라졸릴,싸이아졸릴및아이소옥사졸릴은할로겐및직쇄의 _3의 알킬로이루어지는군으로부터선택되는치환기로하나이상치환될수 있는,

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 8] 제 1항에 있어서,

은사이아노,트라이플루오로메틸,직쇄의 _3의 알킬, (그3-4

사이클로알킬이고;

일 때 ,존재하지 않으며 ;

II2는수소또는직쇄의 _3의 알콕시이고;

은수소또는직쇄의 _3의 알킬이며;및 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 9] 제 1항에 있어서,

고;

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염.

[청구항 ] 제 1항에 있어서,

상기 화학식 1로표시되는화합물은하기화합물군으로부터선택되는 어느하나인것인,

화합물,이의 이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의

약학적으로허용가능한염 :

<1>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵 세인- 1 -카복사마이드;

<2>(1 4 )- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 - 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵 세인- 1 -카복사마이드;

<3>(1 4/?)-1 -메톡시- -((幻- 1-(6-(4 -메틸- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸 )-4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1- 카복사마이드;

<4>(1 45)-1 -메톡시- -( )- 1-(6-(4 -메틸- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸 )-4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1- 카복사마이드;

<5>(1/%45)- -( )-1-(6-(3,5 -다이메틸- 1산-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵 세인- 1 -카복사마이드;

<6>(1 4/?)- -( )-1-(6-(3,5 -다이메틸- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵 세인- 1 -카복사마이드;

<7>1 -메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)#(4-( 싸이아졸- 5 -일)벤질)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<8> -(4-(아이소옥사졸- 4 -일)벤질)- 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3- 일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<9>(1 4及)- 4-(4-((5 -사이아노- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)-八 ( ¾-1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 -메톡시사이클로 핵세인- 1 -카복사마이드;

<10>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시- 4-(4-((5-(트라이플루오로메틸)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<11>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시- 4-(4-((5-(트라이플루오로메틸)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<12>(1/%4 )-4-(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2- 일)- -((5)-1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 -메톡시 사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<13>(1 4 )- 4-(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2- 일)- -((5)-1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1 -메톡시 사이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<14>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)퓨로[3, 2 -쐬피리미딘- 2 -일)사 이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<15>(1 4及)- -((幻- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)퓨로[3, 2 -쐬피리미딘- 2 -일)사 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 이클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<16>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[2, 3 -쐬피리미딘- 2- 일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<17>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[2, 3 -쐬피리미딘- 2- 일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<18>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[3, 2 -쐬피리미딘- 2- 일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<19>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[3, 2 -쐬피리미딘- 2- 일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<20>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시- 4-(9 -메틸- 6-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)- 9산-퓨린 -2 -일)사이 클로핵세인- 1 -카복사마이드;

<21>(1,%4찌-( )-1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)-: 1- 메톡시- 4-(7 -메틸- 4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)- 7산-피롤로[2, 3 ]피 리미딘- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<22>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시- 4-(7 -메틸- 4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)- 7산-피롤로[2, 3 ]피 리미딘- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<23> -벤질- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클 로핵세인- 1 -카복사마이드;

<24> -(4 -메톡시벤질)- 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2- 일)사이클로핵세인- 1 -카복사 이드;

<25>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4- (4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카 복사마이드;

<26>(1,%4찌-( )-1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4- (4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카 복사마이드;

<27>(찌-(1_(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마 이드;

<28>(5)-1-(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피페리딘 _4 -카복사마이드; 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

<29>(5)-1-(4-((5 -사이클로뷰틸 -1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)- - (1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<30>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(7 -메틸- 4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -피롤로[2, 3 -쐬피리미딘- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드;

<31>(5)-1-(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -메틸- 7好-피롤 로[2, 3 -쐬피리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일 )에틸)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<32>(5)-1-(4-((5 -사이클로뷰틸 -1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -메틸- 7好-피롤로 [2, 3 -쐬피리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일) 에틸)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<33>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퓨로[3, 2 ]피리미딘- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드;

<34>(5)-1-(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퓨로[3, 2 ]피리 미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡 시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<35>(5)-1-(4-((5 -사이클로뷰틸 -1 -피라졸- 3 -일)아미노)퓨로[3, 2 ]피리미 딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시 피페리딘- 4 -카복사마이드;

<36>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[3, 2 ]피리미딘- 2 -일)피페 리딘- 4 -카복사마이드;

<37>(5)-1 -(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[3, 2 ] 피리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4- 메톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<38>(5)-1-(4-((5 -사이클로뷰틸 -1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[3, 2 ]피 리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메 톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<39>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[2, 3 ]피리미딘- 2 -일)피페 리딘- 4 -카복사마이드;

<40>(5)-1 -(4-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[2, 3 ] 피리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4- 메톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<41>(5)-1-(4-((5 -사이클로뷰틸 -1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노[2, 3 ]피 리미딘- 2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메 的

2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 톡시피페리딘- 4 -카복사마이드;

<42>(찌-(1_(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(7 -메틸- 6-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -퓨린 -2 -일)피페리딘- 4- 카복사마이드;

<43>(5)-1-(6-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -메틸- 7 -퓨린 -2 -일)- -(1_(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피 페리딘- 4 -카복사마이드;

<44>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(9 -메틸- 6-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 9 -퓨린 -2 -일)피페리딘- 4- 카복사마이드;

<45>(5)-1-(6-((5 -사이클로프로필- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 9 -메틸- 9 -퓨린 -2 -일)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피 페리딘- 4 -카복사마이드;

<46> -벤질 -4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2- 일)피페리딘- 4 -카복사마이드;

<47> 벤질- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리 딘- 4 -카복사마이드;

<48>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-(4-((5- 메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드; <49>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-(7 -메틸 -4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)- 7 -피롤로 [2, 3 -쐬피리미딘- 2 -일)피페 리딘- 4 -카복사마이드;

<50>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-(4-((5- 메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노 [3, 2 -쐬피리미딘- 2 -일)피페리딘- 4- 카복사마이드;및

<51>(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-(4-((5- 메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)싸이에노 [2, 3 -쐬피리미딘- 2 -일)피페리딘- 4- 카복사마이드.

[청구항 11] 제 1항의화학식 1로표시되는화합물,이의이성질체 ,이의용매화물, 이의수화물,또는이의약학적으로허용가능한염을유효성분으로 함유하는암의예방또는치료용약학적조성물.

[청구항 12] 제 11항에 있어서,

2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

KIT(D816V), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT(V559D,T670I), KIT(V559D,V654A), LCK, MAP3K2, MEK5, MERTK, MLK2, MLK3, NEK7, NEK9, PDGFRA, PDGFRB, PLK4, PYK2, RET, RET(M918T), RET(V804L), RET(V804M), RIOK3, ROS1, RSK2, RSK3, SLK, SNARK, SRC, STK16, SYK, TIE1, TNK1, TNK2, TRKA, TRKB, TRKC, TYK2, YES, YSK4로이루어지는군으로부터선택되는하나이상의단백질

키나아제에대하여저해활성을나타내는것을특징으로하는것인 , 약학적조성물.

[청구항 13] 제 11항에 있어서,

상기화합물은 RET (ret proto-oncogene)효소저해활성을나타내는것을 특징으로하는것인,약학적조성물.

[청구항 14] 제 11항에 있어서,

상기암은가성점액종,간내담도암,간모세포종,간암,갑상선암, 갑상성수질암,결장암,고환암,골수이형성증후군,교모세포종,구강암, 구순암,균상식육종,급성골수성백혈병 ,급성림프구성백혈병 ,

기저세포암,난소상피암,난소생식세포암,남성유방암,뇌암,

뇌하수체선종,다발성골수종,담낭암,담도암,대장암,만성골수성백혈병 , 만성림프구백혈병,망막모세포종,맥락막흑색종,바터팽대부암,방광암, 복막암,부갑상선암,부신암,비부비동암,비소세포폐암,설암,

성상세포종,소세포폐암,소아뇌암,소아림프종,소아백혈병,소장암, 수막종,식도암,신경교종,신우암,신장암,심장암,십이지장암,악성 연부조직암,악성골암,악성림프종,악성중피종,악성흑색종,안암, 외음부암,요관암,요도암,원발부위불명암,위림프종,위암,위유암종, 위장관간질암,윌름스암,유방암,육종,음경암,인두암,임신융모질환, 자궁경부암,자궁내막암,자궁육종,전립선암,전이성골암,전이성뇌암, 종격동암,직장암,직장유암종,질암,척수암,청신경초종,췌장암,침샘암, 카포시육종,파제트병 ,편도암,편평상피세포암,폐선암,폐암, 폐편평상피세포암,피부암,항문암,횡문근육종,후두암,흉막암,혈액암, 및흉선암으로이루어진군으로부터선택되는 1종이상의암인것을 특징으로하는것인,약학적조성물.

[청구항 15] 제 11항에 있어서,

상기암은 RET융합유전자를발현하는암인것을특징으로하는것인, 약학적조성물.

Description:
2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 명세서

발명의 명칭 : 을포함하는헤테로아릴유도체및이를

유효성분으로포함하는약학적조성물 기술분야

[1] N을포함하는헤테로아릴유도체및이를유효성 으로포함하는암의예방 또는치료용약학적조성물에관한것이다.

배경기술

[2] 암의발생은화학물질,방사선,바이러스를포함 는여러가지환경적인

요인과종양유전자,종양억제유전자,세포사멸 (apoptosis)과 DNA복구에 관련된유전자의변화등에관련되어 있는데,최근이러한암의분자적

메커니즘을이해함에따라새로운치료법인표적 항암치료가가능하게되었다.

[3] 표적치료제들은일반적으로암세포가특징적으 로가지고있는분자를

표적으로하여그효과를나타낼수있도록만들어 지며 ,분자적표적이되는 것은암세포의신호전달경로 (signal transduction pathway),혈관신생 (angiogenesis), 세포간질 (matrix),세포주기조절인자 (cell cycle regulator),세포사멸 (apoptosis) 등에관련된유전자들이다.현재치료에서중요 표적치료제로사용되고있는 것으로는티로신키나아제 (tyrosine kinase)억제제를비롯한'신호전달경로 억제제’와’신생혈관생성억제제’들이 있다.

[4] 티로신잔기상의단백질의인산화 (phosphorylation)는세포내신호전달 (signal transduction)의중요요소이다.이러한반응을족매 수있는효소를티로신 키나아제 (tyrosine kinase)라고한다.많은수의트랜스멤브레인수용 들은 티로신키나아제활성을갖는도메인을포함하며 ,수용체티로신

키나아제 (RTK)로서분류된다.

[5] RTK는세포성장,분화,생존및세포예정사 (programmed cell death)와같이

다양한과정에서세포외신호들을전달한다.세 외리간드와의결합에대한 반응으로, RTK는일반적으로이량화되어인산화된형태의 RTK를인식하여, 상호반응하는효과기 (effector)를통한세포내신호전달및자동인산화 유도한다.이 RTK패밀리의많은멤버가존재하며,이중하나는 RET

원암유전자 (proto oncogene)로서 ,이는 120kDa의단백질 RET (형질감염동안 재배열되는단백질)을암호화한다. RET는신경교유도성향신경인자 (GDNF) 패밀리의성장인자에대한수용체이다. RET에대한두개의리간드가

동정되었다; GDNF및뉴트린 (NTN). RET는이의리간드가보조수용체와 결합하고,이후복합체가 RET와상호작용할때,활성화된다 (Eng, 1999 Journal Clinical Oncology: 17(1) 380-393).

[6] 활성화는티로신잔기에서 RET를인산화시키며 , RAS-RAF및 PI3키나아제 경로및가능한다른경로를통해세포성장및분화 에대한신호전달을 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 유도한다.

[7] RET를활성화하는점돌연변이 (point mutant)는 3개의연관된우성유전된암 증후군;다발성내분비신생물유형 2A와 2B(MEN2A및 MEN2B),및가족성 갑상선수질암 (FMTC)을유발하는것으로알려져있다 (Santoro et al.2004

Endocrinology: 145, 5448-5451).

[8] 거의모든 MEN2A의경우및일부 FTMC의경우에서는,세포외및막근접

시스테인풍부도메인 (juxtamembrane cysteine-rich domain)에서시스테인치환이 일어나는반면, MEN2B의 95%에서는키나아제도메인 (M918T)상의 918번 코돈에서단일점돌연변이가일어난다. 918번코돈은촉매코어 (catalytic core)내의기질인식포켓상에위치하는것으로여 진다.이자리에서의 돌연변이는 RET촉매도메인의활성루프의구조를바꿈으로서 , RET를 구조적으로활성화하는것으로사료된다. M918T돌연변이는산발성

수질암에서도발견되는데,이는진행성질환의 현형 (phenotype)과관련있다. 시험관내연구에서는돌연변이가기질특이성에 영향을미쳐 , RET가 c-src및 c-abl과같은비-수용체티로신키나아제에의해선 호되는기질을인식하고, 인산화함을보여준다 (Eng et al. 1996 JAMA276, 1575-1579; Ponder et al. 1999 Cancer Research59, 1736-1741; Schilling et al. 2001 International Journal of

Cancer95, 62-66; Santoro et al. 1995 Science267, 381-383; Zhou et al. 1995

Nature273, 536-539).

[9] RET유전자상의돌연변이가 MEN2패밀리의대부분에서동정됨에따라,분자 진단테스트가가능해지고,임상진단확인을위 서도유용할수있다. RET 돌연변이테스트는를리머라제 (polymerase)연쇄반응에기초한프로토콜을 이용하여수행될수있는데,여기서표적액손서 은직접시퀀싱 (direct sequencing)또는제한효소엔도뉴클라아제절단 (restriction endonuclease digestion)을위해증폭된다 (Zhong et al. 2006 Clinica Chimica Acta364, 205-208).

[ 1이 RTK패밀리의다른멤버는혈관내피성장인자수용 체 2(VEGFR2 (키나아제 삽입도메인포함수용체, KDR(Flkl로도언급됨)))이다. VEGFR2는혈관내피 성장인자 (VEGF)에대한수용체이다. VEGF는정상혈관형성 (angiogenesis)과 질환관련혈관형성모두 (Jakeman, et al. 1993 Endocrinology 133, 848-859; Kolch, et al. 1995 Breast Cancer Research and Treatment36, 139-155)및혈관

투과성 (Connolly, et al. 1989 J. Biol. Chem264, 20017-20024)의중요한자극제인 것으로간주된다.항체와 VEGF의격리에의한 VEGF작용의길항작용은종양 성장을억제할수있다 (Kim, et al. 1993 Nature362, 841-844). VEGF유전자의이형 분열은혈관화 (vascularisation)에있어서치명적인결함을유발한 (Carmeliet, et al. 1996 Nature 380435-439; Ferrara, et al. 1996 Nature 380439-442).

[11] VEGF의 VEGFR2에대한결합은,수용체이량화 (dimerisation)를유도하여 , 특정세포내티로신잔기의 VEGFR2자동인산화를초래한다.자동인산화는 티로신키나아제의촉매활성을증가시키고,포 포리파아제 C-Y와같은세포질 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 신호전달을위한잠재적인도킹자리 (docking site)를제공한다.이단백질 상호작용은 VEGFR2,예를들어,내피세포의증식,생존및이주에 대한세포 반응을유도하는데필수적인세포내시그널링을 매개한다 (Ryan et al. 2005 British Journal Cancer: 92(Suppl.l) S6-S13).

[12] 병리적인혈관형성에서 VEGF-매개 VEGFR2시그널링의중요한역할에대한 인식은 VEGFR2활성화를억제하기위한다양한선택적인접 근법의발전으로 이어졌다.이들은소분자 ATP-경쟁적인티로신키나아제억제제를포함하 , 이것은 ATP결합억제에있어서,자동인산화및연속적인 포내신호전달이 일어나지못하게한다 (Ryan, 2005).

[13] VEGF수용체티로신키나아제의억제제인퀴나졸 (Quinazoline)유도체는 국제특허공개공보 W098/13354호및 WO01/32651호에기술되어있다.

W098/13354호및 WO01/32651호에서는,내피성장인자수용체 (EGFR) 티로신키나아제에대해일부활성을가지며 , VEGF수용체티로신키나아제에 대한활성을갖는화합물을개시하고있다.

[14] VEGFR2티로신키나아제억제제인 ,화합물

4-(4 -브로모- 2 -플루오로아닐리노)- 6 -메톡시 -7-(1-메틸피폐리딘- 4 -일메톡시 )퀴나 졸린이개시되어있다 (Wedge et al., 2002 Cancer Research62, 4645-4655).이 화합물은코드번호 ZD6474및일반상품명반데타닙 (Vandetanib)인, Zactima (등록상표)로도알려져있다.이하,상기화합물 반데타닙이라한다.

[15] 반데타닙은 VEGFR2티로신키나아제에대한 ATP-결합의강력하고가역적인 억제제로서개발되었다.또한반데타닙은 EGFR티로신키나아제활성을 억제한다. EGFR시그널링경로는비정상적인 EGFR활성이종양세포증식 , 생존및침입뿐만아니라 VEGF가과발현을증가시키는암진행에있어서또 중요한인자이다. EGFR시그널링의억제는종양내피세포에서의선 적인 세포사멸 (apoptosis)을유도하는것으로밝혀지고있다.

[16] 2002년,반데타닙은리간드의존성 RET티로신키나아제활성의강력한

억제제로서, RET의시그널링과변형능력을억제할수있다는보 고가있었다. 또한반데타닙은시험관내에서 RET-의존성갑상선종양세포성장에대한 강력한성장억제효과를가짐이보고되었다 (Carlomagno et al. 2002 Cancer Research: 62, 7284-7290).

[17] 반데타닙은 RET의돌연변이된활성형대부분및야생형수용체 도억제하였다. 따라서 , VEGFR2및 EGFR티로신키나아제의억제뿐만아니라,반데타 에 의한 RET티로신키나아제의억제는 RET-의존성종양세포성장을유도하는 RET유전자의돌연변이를수반하는,종양치료에 어서추가적인항종양 효과를부여할수도있다 (Ryan, 2005).

발명의상세한설명

기술적과제 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[18] 본발명의 일목적은 N을포함하는헤테로아릴유도체또는이의 이성질체 , 이의용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을제공하는 것이다.

[19] 본발명의다른목적은 N을포함하는헤테로아릴유도체또는이의 이성질체 , 이의용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을

유효성분으로함유하는암의 예방또는치료용약학적조성물을제공하는 것이다.

[2이 본발명의또다른목적은 N을포함하는헤테로아릴유도체또는이의

이성질체,이의용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을 유효성분으로함유하는암의 예방또는치료방법을제공하는것이다.

[21] 본발명의또다른목적은암의 예방또는치료에사용하는약제의제조에

사용하기 위한상기 을포함하는헤테로아릴유도체또는이의 이성질체,이의 용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염의용도를제공하는 것이다.

과제해결수단

[22] 상기목적을달성하기위하여 ,

[23] 본발명의 일측면에 따라,하기화학식 1로표시되는화합물,이의 이성질체, 이의용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을제공한다:

[26] (상기 화학식 1에서,

[27] 아노, _ 6 의할로알킬,직쇄또는분지쇄의 _ 6 의알킬또는 (: 3-7 의 킬이고;

[28] 5-6 의방향족고리또는 0및 8로이루어지는군으로부터선택되는

하나이상의헤테로원자를하나이상포함하는 5내지 6원자의방향족헤테로 고리를나타내고,이 때,상기 헤테로방향족고리는하나이상의직쇄또는 분지쇄의 (: 알킬로치환될수있으며 ;

[29] 는수소또는직쇄또는분지쇄의 (:내의알콕시이고;

[3이 II 3 은수소또는직쇄또는분지쇄의 (: 의 알킬이며 ;

[31] II 4 는수소,직쇄또는분지쇄의 (:내의알콕시또는 0및 3로이루어지는

군으로부터선택되는하나이상의헤테로원자를 하나이상포함하는 5내지 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

6원의헤테로아릴이고,상기헤테로아릴은할 겐,또는직쇄또는분지쇄의 Q_ 6 의알킬로이루어지는군으로부터선택되는치환 기로하나이상치환될수있고; 및

[32] B 1 및 B 2 는독립적으로 N또는 CH이다).

[33] 본발명의다른측면에따라,상기화학식 1로표시되는화합물,이의이성질체, 이의용매화물,이의수화물,또는이의약학적으 허용가능한염을

유효성분으로함유하는암의 예방또는치료용약학적조성물을제공한다.

[34] 본발명의다른측면에따라,상기화학식 1로표시되는화합물,이의이성질체, 이의용매화물,이의수화물,또는이의약학적으 허용가능한염을

유효성분으로함유하는약학적조성물을필요한 대상에게투여하는단계를 포함하는암의예방또는치료방법을제공한다.

[35] 본발명의다른측면에따라,암의예방또는치료 사용하기위한

약제 (medicament)의제조에사용하기위한,상기화학식 1로표시되는화합물, 이의입체이성질체,이의용매화물,이의수화물 는이의약학적으로허용 가능한염의용도 (use)를제공한다.

발명의효과

[36] 본발명에따른화학식 1로표시되는화합물은다양한단백질키나아제

대하여높은저해활성을나타내고,특히 , RET (ret proto-oncogene)효소저해능이 우수하고, RET융합유전자를발현하는갑상선수질암세포및 폐암세포의증식 억제효과가우수한바,암,예를들어,갑상선수질 암또는폐암의치료에 유용하게사용될수있고,특히 RET융합유전자가발현된암의치료에유용하게 사용될수있다.

발명의실시를위한최선의형태

[37] 이하,본발명을상세히설명한다.

[38] 한편,본발명의실시형태는여러가지다른형태 변형될수있으며,본

발명의범위가이하설명하는실시형태로한정되 는것은아니다.또한,본 발명의실시형태는당해기술분야에서평균적인 지식을가진자에게본발명을 더욱완전하게설명하기위해서제공되는것이다 .나아가,명세서전체에서어떤 구성요소를 "포함”한다는것은특별히반대되는기재가없 한다른

구성요소를제외하는것이아니라다른구성요소 를더포함할수있다는것을 의미한다.

[39] 본명세서에서,“할로겐”은 F, Cl, Br,또는 I일수있다.

[4이 본명세서에서, "할로알킬”은본원에정의된바와같은하나이 의할로겐 원자로치환된탄소원자를갖는직쇄또는분지쇄 알킬 (탄화수소)를의미할수 있다.상기할로알킬의예로는하나이상의할로 원자,예를들어 F, Cl, Br, I로 독립적으로치환된메틸,에틸,프로필,아이소프 로필,아이소뷰틸및 -뷰틸을 포함하나,이에한정되는것은아니다. 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[41] 본명세서에서, "알킬”은탄소원자로이루어진직쇄또는분지 의비고리형 포화탄화수소를의미할수있다.대표적인 -( V알킬)은 -메틸, -에틸, # 프로필, -뷰틸, - -펜틸및 - -핵실, - -헵틸과 - -옥틸을포함하고;가지친 사슬포화알킬은 -아이소프로필, -2급( ) -뷰틸, -아이소뷰틸, -3급 ) -뷰틸,

-아이소펜틸, 2 -메틸펜틸, 3 -메틸펜틸, 4 -메틸펜틸, 2, 3 -다이메틸뷰틸등을포함할 수있다. -( V알킬)은치환될수도치환되지않을수도있다. 를들어 , _ 8 알킬기는페닐로치환되어벤질기를이룰수있다 .

[42] 본명세서에서, "사이클로알킬”은비방향족인포화또는불포 탄소고리를 의미할수있다.대표적인사이클로알킬에는사 클로프로필,사이클로뷰틸, 사이클로펜틸,사이클로펜타다이엔일,사이클 핵실,사이클로핵센일,

1 ,3 -사이클로핵사다이엔일, 1 ,4 -사이클로핵사다이엔일,사이클로헵틸,

1,3 -사이클로헵타다이엔일, 1,3, 5 -사이클로헵타트라이엔일,사이클로옥틸과 사이클로옥타다이엔일이포함되지만이에한정 되지는않는다.

사이클로알킬기는치환될수도치환되지않을수 도있다.한실시태양에서는이 사이클로알킬기는(: 3-8 사이클로알킬기일수있다.

[43] 본명세서에서, "아릴”은방향족탄화수소고리로부터하나의 소가제거되어 유도된임의의작용기또는치환기를의미할수있 다.아릴기는단환식아릴기 또는다환식아릴기일수있다.아릴기의고리형 탄소수는 5이상 30이하, 5 이상 20이하,또는 5이상 15이하일수있다.아릴기의 예로는페닐기,나프틸기, 플루오렌일기,안트라센일기,페난트릴기,바이 페닐기,터페닐기,쿼터페닐기, 퀸크페닐기,섹시페닐기,트라이페닐렌기,피렌 일기,벤조플루오란텐일기, 크리센일기등을예시할수있지만,이들에한정 지않는다.

[44] 본명세서에서, "헤테로아릴”은이종원소로 0, I 5 , 및 3중 1개이상을

포함하는아릴고리기일수있다.헤테로아릴기 고리형성탄소수는 2이상 30 이하또는 2이상 20이하일수있다.헤테로아릴은단환식헤테로아 릴또는 다환식헤테로아릴일수있다.다환식헤테로아 는예를들어 , 2환또는 3환 구조를갖는것일수있다.헤테로아릴의예로는 이에닐,싸이오펜,퓨릴, 피롤릴,피라졸릴,이미다졸릴,싸이아졸릴,옥 졸릴,아이소싸이아졸릴, 옥사다이아졸릴,트라이아졸릴,피리딘일,비피 리딜,피리미딜,트라이아진일, 트라이아졸릴,아크리딜기,피리다진일기,피라 진일,퀴놀린일,퀴나졸린, 퀴녹살린일,페녹사질,프탈라진일,피리미딘일 ,피리도피리미딘일,피리도 피라진일,피라지노피라진일,아이소퀴놀린,인 돌,카바졸,

이미다조피리다진일,이미다조피리딘일,이미 조피리미딘일,

피라졸로피리미딘일,이미다조피라진일또는 라졸로피리딘일, 아릴카바졸, 헤테로아릴카바졸, 알킬카바졸기 ,벤조옥사졸,벤조이미다졸,

벤조싸이아졸,벤조카바졸,벤조싸이오펜,다이 벤조싸이오페닐,

싸이에노싸이오펜,벤조퓨란일 ,페난트롤린,아이소옥사졸릴,옥사다이아졸릴 , 싸이아다이아졸릴,벤조싸이아졸릴,테트라졸 ,페노싸이아진일, 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 다이벤조실롤및다이벤조퓨란일등이 있으나,이들에 한정되지 않는다.본 발명의 일실시태양에서 헤테로아릴은또한헤테로사이클로알킬고리에 융합된아릴고리또는사이클로알킬고리에융합 된헤테로아릴을포함하는 바이사이클릭 헤테로사이클로-아릴을포함할수있다.

[45] 본발명의 일측면은하기화학식 1로표시되는화합물,이의 이성질체,이의 용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을제공한다.

[46] [화학식 1]

[48] (상기 화학식 1에서,

[49] 아노, 6 의할로알킬,직쇄또는분지쇄의 (:내의알킬또는 (:„의

킬이고;

[5이 5-6 의방향족고리또는 0및 8로이루어지는군으로부터선택되는

하나이상의헤테로원자를하나이상포함하는 5내지 6원자의방향족헤테로 고리이고,이 때,상기헤테로방향족고리는하나이상의 직쇄또는분지쇄의 _ 6 알킬로치환될수있고;

[51] II 2 는수소또는직쇄또는분지쇄의 (:내의알콕시이고;

[52] II 3 은수소또는직쇄또는분지쇄의 (: 의 알킬이며 ;

[53] 는수소,직쇄또는분지쇄의 (:내의알콕시또는 0및 3로이루어지는

군으로부터선택되는하나이상의헤테로원자를 하나이상포함하는 5내지

6원자의 헤테로아릴이고,상기헤테로아릴은할로겐,또 직쇄또는분지쇄의 0 의알킬로이루어지는군으로부터선택되는치환 기로하나이상치환될수 있고;및

[54] 및 : 는독립적으로 이다).

[55]

알킬이고, X I 또는 X 4 가 0또는 3인경우,존재하지 않을수있다.보다 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[56] 구체적으로상기 는수소,메톡시,피라졸릴,싸이아졸릴또는

아이소옥사졸릴이고,상기 피라졸릴,싸이아졸릴및아이소옥사졸릴은할 겐 및직쇄의 _ 3 의알킬로이루어지는군으로부터선택되는 치환기로하나이상

[57] 본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에 있어서 ,

[58] 가사이아노, _ 6 의할로알킬,직쇄의 _ 6 의알킬또는(: 3-7

사이클로알킬이고;

존재하지 않으며;

[6이 II 2 는수소또는직쇄의(: 1 6 의 알콕시이고;

[61] 은수소또는직쇄의(: 1 6 의 알킬이며;

[62] 요 4 는수소,직쇄의(:내의 알콕시또는 0및 3로이루어지는군으로부터 선택되는하나이상의 헤테로원자를하나이상포함하는 5원자의

헤테로아릴이고,상기 헤테로아릴은할로겐 이루어지는 군으로부터선택되는치환기로하나이상치환될 수있고;및

[63] 및 : 는독립적으로 N또는 일수있다.

[64] 본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에 있어서 ,

[65] 은사이아노, 3 의할로알킬,직쇄의 _ 3 의알킬또는(: 3-6

사이클로알킬이고; 2020/175968 1»(:1/10公020/002925

, (¾ 5 또는 이고,여기서상기 XI또는

- 4

X 4 는 0또는 3이며 ,상기 X 2 또는 X 3 은 또는 N이고,상기요 5 또는요 6 은각각 X 1 또는 X 4 가 N일때 ,직쇄의 _ 3 의알킬이고, X 1 또는 X 4 가 0또는 3일때 , 존재하지않으며;

67; II 2 는수소또는직쇄의 _ 3 의알콕시이고;

68; 은수소또는직쇄의 _ 3 의알킬이며 ;

69; 는수소,메톡시,피라졸릴,싸이아졸릴또는아이 소옥사졸릴이고,상기 피라졸릴,싸이아졸릴및아이소옥사졸릴은할 겐및직쇄의 _ 3 의알킬로 이루어지는군으로부터선택되는치환기로하나 이상치환될수있고;및

및 는독립적으로 N또는(:!!일수있다.

본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에있어서 , 은사이아노,트라이플루오로메틸,직쇄의 _ 3 의알킬또는(: 3-5 의 사이클로알킬이고;

[73] ,, 資 5 또는 이고,여기서상기 XI또는

.4

X 4 는 0또는 3이며,상기 X 2 또는 은 또는 N이고,상기 ^또는요 6 은각각 X 1 또는 X 4 가 N일때,메틸이고, X 1 또는 X 4 가 0또는 3일때,존재하지않으며 ;

II 2 는수소또는직쇄의 _ 3 의알콕시이고;

] ] ] ] ] ]

402561 은수소또는직쇄의 _ 3 의알킬이며 ;

777777 661

는수소,메톡시, , | | =\ -,또는

0 、此 이고;및

77] 및 는독립적으로 N또는(:!!일수있다.

78] 본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에있어서 ,

79] 은사이아노,트라이플루오로메틸,메틸또는( 3-4 의사이클로알킬이고;

80] 2020/175968 1»(:1/10公020/002925 이고

2 는수소또는메톡시이고;

은수소또는메틸이며;

는수소,메톡시 , ,또는

0 , 、影 이고;미

84] 및 는독립적으로 N또는(:!!일수있다.

85] 본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에 있어서 ,

86] 이(: 3-4 의사이클로알킬인경우,

87]

는직쇄의 _ 3 의알콕시이고,구체적으로는메톡시이며;

3 은직쇄의 _ 3 의알킬이고,구체적으로는메틸이며 ;

] ] ]

29038 1

9 98888861 는할로겐으로치환된피라졸릴이고,구체적으 플루오로(印로치환된 피라졸릴이며,보다구체적으로 , \ 이고;

[91] 는 N또는(:!!이며 ;및

[92] 는 N일수있다.

[93] 본발명의다른구체예에서 ,화학식 1로표시되는화합물에 있어서 ,

[94] 이사이아노,트라이플루오로메틸인경우,

[95] 이고

는직쇄의(: 의 알콕시이고,구체적으로 _ 3 의 알콕시이며 ,보다 구체적으로메톡시이고;

[97] II 3 은직쇄의(: 의 알킬이고,구체적으로 _ 3 의 알킬이며,보다구체적으로 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 메틸이며 ;

[98] 는할로겐으로치환된피라졸릴이고,구체적으 플루오로(印로치환된

피라졸릴이며,보다구체적으로 이고;

[99] 는(:!!이며;및

[100] 는 N일수있다.

[101] 본발명에 따른상기 화학식 1로표시되는화합물의 예로는아래기재된 [표 1] 내지 [표 5]에나열된실시예화합물 1내지 51또는이들의 약학적으로

허용가능한염을들수있다:

[102] 뷰틸뷰틸뷰틸뷰틸뷰틸

[103] 본발명의상기화학식 1로표시되는화합물은약학적으로허용가능한 의 형태로사용할수있으며,염으로는약학적으로 용가능한유리산(6^ )에 의해 형성된산부가염이유용하다.산부가염은염산, 산,인산,황산, 브롬화수소산,요드화수소산,아질산,아인산등 과같은무기산류,지방족모노 및다이카르복실레이트,페닐-치환된알카노에 트,하이드록시 알카노에이트 및알칸디오에이트,방향족산류,지방족및방향 설폰산류등과같은무독성 유기산,트라이플루오로아세트산,아세테이트, 안식향산,구연산,젖산, 말레인산,글루콘산,메탄설폰산, 4 -톨루엔설폰산,주석산,푸마르산등과같은 유기산으로부터 얻는다.이러한약학적으로무독한염의종류로 설페이트, 피로설페이트,바이설페이트,설파이트,바이설 파이트,니트레이트,포스페이트, 모노하이드로겐포스페이트,다이하이드로겐 스페이트,메타포스페이트, 피로포스페이트클로라이드,브로마이드,아이 다이드,플루오라이드, 아세테이트,프로피오네이트,데카노에이트,카 프릴레이트,아크릴레이트, 포메이트,아이소부티레이트,카프레이트,헵타 노에이트,프로피올레이트, 옥살레이트,말로네이트,석시네이트,수베레이 트,세바케이트,푸마레이트, 말리에이트,부틴- 1,4 -다이오에이트,핵세인- 1,6 -다이오에이트,벤조에이트, 클로로벤조에이트,메틸벤조에이트,다이니트 벤조에이트,

하이드록시벤조에이트,메톡시벤조에이트,프 레이트,테레프탈레이트, 벤젠설포네이트,톨루엔설포네이트,클로로벤 설포네이트,크실렌설포네이트, 페닐아세테이트,페닐프로피오네이트,페닐부 레이트,시트레이트,락테이트,

(3 -하이드록시부티레이트,글리콜레이트,말레이 트,타트레이트,

메탄설포네이트,프로판설포네이트,나프탈렌 - 1 -설포네이트,

나프탈렌 -2 -설포네이트,만델레이트등을포함한다.

[104] 본발명에 따른산부가염은통상의 방법으로제조할수있으며 ,예를들면

화학식 1의유도체를메탄올,에탄올,아세톤,메틸렌클 라이드,아세토니트릴 등과같은유기용매에녹이고유기산또는무기산 을가하여 생성된침전물을 여과,건조시켜 제조하거나,용매와과량의산을감압증류한후 조시켜 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 유기용매하에서결정화시켜서제조할수있다.

[105] 또한,염기를사용하여약학적으로허용가능한 속염을만들수있다.알칼리 금속또는알칼리토금속염은예를들면화합물을 과량의알칼리금속수산화물 또는알칼리토금속수산화물용액중에용해하고 ,비용해화합물염을

여과하고,여액을증발,건조시켜얻는다.이때, 속염으로는나트륨,칼륨또는 칼슘염을제조하는것이제약상적합하다.또한, 에대응하는염은알칼리 금속또는알칼리토금속염을적당한음염 (예,질산은)과반응시켜얻는다.

[106] 나아가,본발명은상기화학식 1로표시되는화합물및이의약학적으로

허용가능한염뿐만아니라,이로부터제조될수 는용매화물,광학이성질체, 수화물등을모두포함한다.

[107] 용어 "수화물 (hydrate)”은비공유적분자간력 (non-covalent intermolecular

force)에의해결합된화학양론적 (stoichiometric)또는

비화학양론적 (non-stoichiometric)양의물을포함하고있는본발명 화합물 또는그것의염을의미한다.본발명의상기화학 1로표시되는화합물의 수화물은비공유적분자간힘으로결합되는화학 양론적또는비화학양론적 양의물을포함할수있다.상기수화물은 1당량이상,바람직하게는, 1당량내지 5당량의물을함유할수있다.이러한수화물은물 는물을함유하는

용매로부터본발명의상기화학식 1로표시되는화합물,이의이성질체또는 이들의약제학적으로허용가능한염을결정화시 켜제조될수있다.용어

"용매화물 (solvate)”은비공유적분자간력에의해결합된화 학양론적또는 비화학양론적양의용매를포함하고있는본발명 의화합물또는그것의염을 의미한다.그에관한바람직한용매들로는휘발 ,비독성,및/또는인간에게 투여되기에적합한용매들이 있다.용어 "이성질체 (isomer)”는동일한화학식 또는분자식을가지지만구조적또는입체적으로 다른본발명의화합물또는 그것의염을의미한다.이러한이성질체에는호 이성질체 (tautomer)등의구조 이성질체와,비대칭탄소중심을가지는 R또는 S이성체 ,기하이성질체 (트랜스, 시스)등의입체이성질체 ,광학이성질체 (enantiomer)가모두포함된다.이들 모든이성체및그것의혼합물들역시본발명의범 위에포함된다.

[108] 본발명의다른측면은,하기반응식 A에나타낸바와같이 ,

[109] 화학식 2로표시되는화합물과화학식 3으로표시되는화합물을반응시켜

화학식 4로표시되는화합물을제조하는단계 (step 1);

[110] 화학식 4로표시되는화합물을환원시켜화학식 5로표시되는화합물을

제조하는단계 (step 2);

[111] 화학식 5로표시되는화합물과화학식 6으로표시되는화합물을반응시켜

화학식 7의화합물을제조하는단계 (step 3);및

[112] 화학식 7로표시되는화합물의보호기를제거하는단계 (step 4)를포함하는 상기화학식 1의화합물의제조방법을제공한다.

[113] [반응식 A] 2020/175968 1»(:1/10公020/002925

[114]

[115] 상기반응식

[116] 0|, ,요 2 , 화학식 1에서정의한바와같고;

[117] X는할로겐이 보호기로사용되는

테트라하이드로 11)년1'(¾)) 11)을나타낸다.

[118] 단계 1은화학식 2로표시되는화합물의할로겐과화학식 3으로표시되는

화합물의유기붕소가반응하여탄소-탄소결합 15011(1)이형성된화학식 4로 표시되는화합물을제조하는단계로서 ,할로겐과유기붕소를반응시켜 탄소-탄소결합을만드는조건이라면한정되지 으며,당업자에게널리알려진 방법을사용할수있다.본발명에서는실시예 1과같은조건으로반응을 수행하였으나,이는일례일뿐,이에한정되는것 아니다.

[119] 단계 2는화학식 4로표시되는화합물의이중결합을단일결합으 에스터를 카복실산으로환원시키는단계로써,당업계에 널리알려진환원방법을 사용할수있다.

[120] 단계 3은화학식 5로표시되는화합물의카복실기와화학식 6으로표시되는 화합물의아미노기의반응을통해아마이드결합 을포함하는화학식 7로 표시되는화합물을제조하는단계로,상기아미 기와카복실기의반응은 당업계에서널리알려진방법을사용할수있다.

[121] 단계 4는반응식에서화학식 7로표시되는화합물의아민보호기를탈보호화 시켜화학식 1의화합물을제조하는단계로서,아민보호기를 거할수있는 조건이라면한정되지않으며,당업자에게널리 려진방법을사용할수있다. 본발명에서는실시예 1과같은조건으로반응을수행하였으나,이는일 일뿐, 이에한정되는것은아니다.

[122] 본발명의다른측면은,하기반응식:8에나타낸 와같이,

[123] 화학식 2로표시되는화합물과화학식 8로표시되는화합물을반응시켜화학식 9로표시되는화합물을제조하는단계( £ ? 1);

[124] 화학식 9로표시되는화합물을환원시켜화학식 으로표시되는화합물을 2020/175968 1»(:1/10公020/002925 제조하는단계 (step 2);

[125] 화학식 W으로표시되는화합물과화학식 6으로표시되는화합물을반응시켜 화학식 11로표시되는화합물을제조하는단계 ( 6? 3);및

[126] 화학식 11로표시되는화합물의보호기를제거하는단계 (step 4)를포함하는 상기화학식 1의화합물의제조방법을제공한다.

[127] [반응식 B]

[128]

상기반응식:6에서 ,

[129] 화학식 1에서정의한바와같고;

[13이 X는할로겐이며, 11保보호기로사용되는

테트라하이드로피란 11 ) 년1(¾) ) 11)을나타낸다.

[131] 단계 1은화학식 2로표시되는화합물의할로겐과화학식 8로표시되는

화합물의아민이반응하여탄소-아민결합 (15011(1)이형성된화학식 9로표시되는 화합물을제조하는단계로서,할로겐과아민을 응시켜탄소-아민결합을 만드는조건이라면한정되지않으며,당업자에 널리알려진방법을사용할수 있다.본발명에서는실시예 27과같은조건으로반응을수행하였으나,이는 일례일뿐,이에한정되는것은아니다.

[132] 단계 2는화학식 9로표시되는화합물의에스터를카복실산으로 원시키는 단계로써,당업계에서널리알려진환원방법을 용할수있다.

[133] 단계 3은화학식 으로표시되는화합물의카복실기와화학식 6으로표시되는 화합물의아미노기의반응을통해아마이드결합 을포함하는화학식 11로 표시되는화합물을제조하는단계로,상기아미 기와카복실기의반응은 당업계에서널리알려진방법을사용할수있다.

[134] 단계 4는반응식에서화학식 11로표시되는화합물의아민보호기를탈보호화 시켜화학식 1의화합물을제조하는단계로서,아민보호기를 거할수있는 조건이라면한정되지않으며,당업자에게널리 려진방법을사용할수있다. 본발명에서는실시예 27과같은조건으로반응을수행하였으나,이는일 례일 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 뿐,이에 한정되는것은아니다.

[135] 본발명에 따른화학식 1로표시되는각각의화합물은하기실시예에 나타난 제조방법에 따라제조할수있으나,이는일례일뿐,이에 한정되는것은아니며, 각제조단계는당업자에게 널리 알려진방법을사용할수있다.

[136] 본발명의다른측면은,상기 화학식 1로표시되는화합물,이의 광학이성질체 또는이의 약학적으로허용가능한염을유효성분으로함유 하는암의 예방또는 치료용약학적조성물을제공한다.

[137] 상기화합물은 AMPK-alphal, AMPK-alpha2, ARK5, AURKA, AURKB, AURKC, AXL, BLK, CSF1R, CSNK2A2, DAPK1, DAPK3, EPHB6, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR3(G697C), FGR, FLT1, FLT3, FLT3(D835H), FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(ITD,F691L), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), FLT3(R834Q), FLT4, GCN2, HCK, JAK1, JAK2, JAK3, KIT, KIT(A829P),

KIT(D816H), KIT(D816V), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT(V559D,T670I),

KIT(V559D,V654A), LCK, MAP3K2, MEK5, MERTK, MLK2, MLK3, NEK7, NEK9, PDGFRA, PDGFRB, PLK4, PYK2, RET, RET(M918T), RET(V804L), RET(V804M), RIOK3, ROS1, RSK2, RSK3, SLK, SNARK, SRC, STK16, SYK, TIE1, TNK1, TNK2, TRKA, TRKB, TRKC, TYK2, YES, YSK4로이루어지는 군으로부터선택되는하나이상의단백질키나아 제에 대하여 저해활성을 나타낼수있다.

[138] 또한,상기화합물은 RET (ret proto-oncogene)효소저해활성을나타낼수있다.

[139] 상기 암은가성점액종,간내담도암,간모세포종,간암 ,갑상선암,

갑상성수질암,결장암,고환암,골수이형성증후 군,교모세포종,구강암,구순암, 균상식육종,급성골수성백혈병 ,급성림프구성백혈병 ,기저세포암,난소상피암, 난소생식세포암,남성유방암,뇌암,뇌하수체선 종,다발성골수종,담낭암, 담도암,대장암,만성골수성백혈병 ,만성림프구백혈병 ,망막모세포종, 맥락막흑색종,바터팽대부암,방광암,복막암, 갑상선암,부신암,비부비동암, 비소세포폐암,설암,성상세포종,소세포폐암, 아뇌암,소아림프종,

소아백혈병,소장암,수막종,식도암,신경교종, 우암,신장암,심장암, 십이지장암,악성 연부조직 암,악성골암,악성림프종,악성중피종,악성흑 종, 안암,외음부암,요관암,요도암,원발부위불명 ,위림프종,위암,위유암종, 위장관간질암,윌름스암,유방암,육종,음경암, 두암,임신융모질환, 자궁경부암,자궁내막암,자궁육종,전립선암, 이성 골암,전이성뇌암, 종격동암,직장암,직장유암종,질암,척수암,청 경초종,췌장암,침샘암, 카포시육종,파제트병 ,편도암,편평상피세포암,폐선암,폐암,

폐편평상피세포암,피부암,항문암,횡문근육종 ,후두암,흉막암,혈액암,및 흉선암으로이루어진군으로부터선택되는 1종이상일수있다.

[140] 또한,상기 암은 RET융합유전자를발현하는암일수있다.

[141] 본발명에 따른화학식 1로표시되는화합물은다양한단백질키나아제 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 대하여높은저해활성을나타내고 (실험예 1참조),특히 , RET (ret proto-oncogene) 효소저해능이우수하고 (실험예 2참조), RET융합유전자를발현하는

갑상선수질암세포및폐암세포의증식 억제효과가우수한바 (실험예 3참조), 암,예를들어 ,갑상선수질암또는폐암의치료에유용하게사 될수있고,특히 RET융합유전자가발현된암의치료에유용하게사 용될수있다.

[142] 본발명에 따른상기 약학적조성물에 있어서 ,상기화학식 1로표시되는

화합물또는이의 약학적으로허용가능한염은임상투여시에경구 및비경구의 여러 가지제형으로투여될수있는데,보다바람직하 는비경구제형일수 있다.제제화할경우에는보통사용하는중진제, 량제,결합제,습윤제,붕해제, 계면활성제등의 희석제또는부형제를사용하여조제된다.경구 여를위한 고형제제에는정제,환제,산제,과립제,캡슐제 이포함되며,이러한

고형제제는하나이상의 화합물에 적어도하나이상의부형제 예를들면,전분, 탄산칼슘,수크로오스 (sucrose)또는락토오스 (lactose),젤라틴등을섞어 조제된다.또한단순한부형제 이외에스테아린산마그네슘,탈크등과같은 윤활제들도사용된다.경구투여를위한액상제 로는현탁제,내용액제,유제, 시럽제등이해당되는데흔히사용되는단순희석 제인물,리퀴드파라핀이외에 여러 가지부형제,예를들면습윤제,감미제,방향제, 존제등이포함될수 있다.비경구투여를위한제제에는멸균된수용 ,비수성용제 ,현탁제 ,유제가 포함된다.비수성용제,현탁용제로는프로필렌 리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜,올리브오일과같은식물성 기름,에틸올레이트와같은주사 가능한에스터등이사용될수있다.

[143] 상기화학식 1로표시되는화합물또는이의 약학적으로허용가능한염은임상 투여시에 경구및비경구의 여러 가지제형으로투여될수있다.제제화할 경우에는보통사용하는중진제 ,증량제 ,결합제 ,습윤제 ,붕해제 ,계면활성제 등의 희석제또는부형제를사용하여조제된다.경구 여를위한고형제제에는 정제,환제,산제,과립제,캡슐제등이포함되며, 러한고형제제는하나이상의 화합물에 적어도하나이상의부형제 예를들면,전분,탄산칼슘,

수크로오스 (sucrose)또는락토오스 (lactose),젤라틴등을섞어조제된다.또한 단순한부형제 이외에스테아린산마그네슘,탈크등과같은윤 제들도 사용된다.경구투여를위한액상제제로는현탁 ,내용액제,유제,시럽제등이 해당되는데흔히사용되는단순희석제인물,리 드파라핀이외에 여러 가지 부형제,예를들면습윤제,감미제,방향제,보존 등이포함될수있다.

비경구투여를위한제제에는멸균된수용액 ,비수성용제 ,현탁제 ,유제가 포함된다.비수성용제,현탁용제로는프로필렌 리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜,올리브오일과같은식물성 기름,에틸올레이트와같은주사 가능한에스터등이사용될수있다.

[144] 상기화학식 1로표시되는화합물또는이의 약학적으로허용가능한염을유효 성분으로하는약학적조성물은비경구투여할수 있으며 ,비경구투여는 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 피하주사,정맥주사,근육내주사또는흉부내주 를주입하는방법에 의한다.

[145] 이때,비경구투여용제형으로제제화하기 위하여상기 화학식 1로표시되는 화합물또는이의 약학적으로허용가능한염을안정제또는완충제 와함께물에 혼합하여용액또는현탁액으로제조하고,이를 플또는바이알단위 투여형으로제조할수있다.상기조성물은약학 으로허용가능한담체, 멸균되고/되거나방부제,안정화제,수화제또는 유화촉진제,삼투압조절을 위한염 및/또는완충제등의보조제,및기타치료적으로 용한물질을함유할 수있으며 ,통상적인방법인혼합,과립화또는코팅방법에 따라제제화할수 있다.

[146] 경구투여용제형으로는예를들면정제,환제,경/ 연질캅셀제,액제,현탁제, 유화제 ,시럽제 ,과립제 ,엘릭시르제 ,트로키제등이 있는데,이들제형은 유효성분이외에 희석제 (예:락토즈,덱스트로즈,수크로즈,만니톨,솔비 톨, 셀룰로즈및/또는글리신),활택제 (예:실리카,탈크,스테아르산및그의 마그네슘또는칼슘염 및/또는폴리에틸렌글리콜)를함유하고있다.정 제는 마그네슘알루미늄실리케이트,전분페이스트, 라틴,메틸셀룰로즈,나트륨 카복시메틸셀룰로즈및/또는폴리비닐피롤리 등과같은결합제를함유할수 있으며,경우에 따라전분,한천,알긴산또는그의 나트륨염등과같은붕해제 또는비등혼합물및/또는흡수제,착색제,향미제 ,및감미제를함유할수있다.

[147] 상기화학식 1로표시되는화합물,이의광학이성질체또는이 약학적으로 허용가능한염을유효성분으로함유하는암의 예방또는치료용약학적 조성물은개별치료제로투여하거나,사용중인 른항암제와병용투여하여 사용할수있다.

[148] 본발명의다른측면은,상기 화학식 1로표시되는화합물,이의 이성질체,이의 용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염을유효성분으로 함유하는약학적조성물을필요한대상에게투여 하는단계를포함하는암의 예방또는치료방법을제공한다.

[149] 본발명의다른측면은,암의 예방또는치료에사용하는약제의제조에

사용하기 위한상기 화학식 1로표시되는화합물또는이의 이성질체,이의 용매화물,이의수화물,또는이의 약학적으로허용가능한염의용도를제공하는 것이다.

[15이 이하,본발명을실시예및실험예에의해상세히 명한다.

[151] 단,하기실시예 및실험예는본발명을예시하는것일뿐,본발명 내용이 하기실시예및실험예에 한정되는것은아니다.

[152] <정제용중압액체크로마토그래피 (Medium pressure liquid chromatography;

MPLC)>

[153] 중압액체크로마토그래피는 TELEEDYNE ISCO사의 CombiFlash Rf +UV를 사용하였다.

[154] <분석용 LC-MS (ACQUITY UPLC H-Class Core System) ñ 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[155] Waters사제조 UPLC system (ACQUITY UPLC PDA Detector)에 Waters사제조 mass QDA Detector가장착된장비를사용하였다.사용컬럼은 Waters사의 ACQUITY UPLC®BEH C18 (1.7/ffli, 2.1X50mm)였으며컬럼온도는 30°C에서 진행하였다.

[156] 이동상 A는 0.1%포름산이포함된물,이동상 B는 0.1%의포름산이포함된 아세토니트릴을사용하였다.

[157] Gradient condition( 10-100% B로 3분,이동속도 =0.6ml/min)

[158] <정제용 Prep-150 LC System (Preparative-Liquid chromatography UV

spectrometry)>

[159] Waters !제조 Prep 150 LC system (2545 Quaternary gradient module, 2998

Photodiode Array Detector, Fraction collector HI)에 Waters사제조장비를 사용하였다.사용컬럼은 Waters사의 XTERRA®Prep RP18 OBDä (lO^in, 30X300mm)였으며컬럼온도는실온에서진행하였다 .

[160] Gradient condition(3- 100% B로 120분,이동속도 =40ml/min)

[161] <카이랄화합물분리용 SFC조건>

[162] Waters사제조 80Q Preparative SFC system을사용하였다.사용컬럼은

DAICEL사의 CHIRALPAPAS GO/ffliJSOXSOmm l.D.)였으며컬럼온도는 실온에서진행하였다.이동상으로 C0 2 ,보조용매로 0.1%암모니아수가첨가된 메탄올을사용하여 130분간흘려주었다.

[163] <NMR분석>

[164] NMR분석은 Bruker사제조 AVANCEm 400또는 AVANCEm 400 HD를

사용해서수행하였고,데이터는 ppm(parts per million(6))으로나타내었다.

[165] 사용된시판시약은추가정제없이사용하였다. 발명에서실온이란 20 25 O C 정도의온도를말한다.감압하농축또는용매증 제거는회전식증발기 (rotary evaporator)를사용하였다.

[166] <제조예 1>메틸 1-메톡시- 4-(4, 4, 5, 5테트라메틸- 1,3, 2다이옥사보로란- 2-일)사이 클로핵스- 3 -엔 -1-카복시레이트의제조

[167] 하기반응식 1로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[168] [반응식 1]

[170] 단계 1: 1,4 -다이옥사피로 [4.5]데칸- 8 -온 (3 , 1921^101)을브로모폼 (388은, 1.5411101)에녹인후 0。 (:로냉각한뒤수산화칼륨 (86 1.5411101)을메탄올

(5001111)에녹여반응혼합물에 4시간동안천천히적가한다. 25。 (:에서 12시간 교반한뒤반응혼합물에물 (5001111)을첨가하고유기용매를감압농축후 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 에틸아세테이트및소금물로추출하여유기층을 합하였다.유기층을

황산나트륨으로건조한후감압하여농축후

중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 /n-핵세인)로정제하여 액체의 메틸 8 -메톡시 - 1,4 -다이옥사피로 [4.5]데케인- 8 -카복시레이트 (28g, 47%)를

수득하였다.

[171] >H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 3.97 (t, / = 2.8Hz, 4H), 3.76 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 2.05 - 2.00 (m, 4H), 1.88 - 1.80 (m, 2H), 1.67 - 1.63 (m, 2H)

[172] 단계 2:메틸 8 -메톡시- 1,4 -다이옥사피로 [4.5]데케인- 8 -카복시레이트 (28g,

121mmol)를 1,4 -다이옥세인 (300ml)에녹인뒤 6M HC1 (260ml)를첨가하여 상온에서 6시간동안교반하였다.반응혼합물에차가운물 첨가하고 에틸아세테이트및소금물로추출하여유기층을 합하였다.유기층을

황산나트륨으로건조한후감압하여농축하여 액체의 메틸

1-메톡시- 4 -옥소사이클로핵세인- 1-카복시레이트 (18.6g, lOOmmol, 82%)를 수득하였다.

[173] 'H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 3.73 (s, 3H), 3.30 (s, 3H), 2.57 - 2.46 (m, 2H), 2.30

- 2.21 (m, 4H), 2.13 - 2.05 (m, 2H)

[174] 단계 3:피리딘 (3.74g, 47mmol)을톨루엔 (100ml)에 희석하고 Tf 2 0 (14.5g,

51mmol)을톨루엔 (10ml)에 희석하여상온에서 천천히 적가한다.그리고메틸 1-메톡시- 4-옥소사이클로핵세인- 1-카복시레이트 (8g, 43mmol)를천천히 적가하고 40°C에서 12시간교반하였다.반응혼합물을감압하여농축 후 중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 /n-핵세인)로정제하여 액체의 메틸 1-메톡시 - 4-(((트라이플루오로메틸)설폰일)옥시 )사이클로핵스- 3 -엔 - 1-카복시레 이트 (3.2g, 23%)를수득하였다.

[175] 'H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 5.68 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.32 - 3.26 (s, 3H), 2.75

- 2.65 (m, 1H), 2.62 - 2.48 (m, 2H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.26 - 2.08 (m, 2H)

[176] 단계 4:메틸

1-메톡시 - 4-(((트라이플루오로메틸)설폰일)옥시 )사이클로핵스- 3 -엔 - 1-카복시레 이트 (2.6g, 8.17mmol)와

4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 2-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)- 1,3, 2 -다이 옥사보로레인 (2.49g, 9.8mmol), KOAc (3.2g, 32.7mmol), Pd(dppf)Cl 2 . CH 2 C1 2 (1.33g, 1.63mmol)를 1,4 -다이옥세인 (80ml)에녹인뒤 90°C에서 1시간동안 교반하였다.반응혼합물을 Celite여과및감압농축후

중압액체크로마토그래피 (테트라하이드로퓨란/ n-핵세인)로정제하여 액체의 메틸 1 -메톡시 -4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸 - 1 ,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)사이클로핵스- 3- 엔- 1-카복시레이트 (2.4g, 8.1mmol)를수득하였다.

[177] 'H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 6.46 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.66 - 2.57 (m, 1H), 2.42 - 2.34 (m, 1H), 2.33 - 2.18 (m, 2H), 2.09 - 2.01 (m, 1H), 1.98 - 1.88 (m, 1H) 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[178] <제조예 2>(5)- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -아민의 제조

[179] 하기반응식 2로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[180] [반응식 2]

[181]

[182]

65511111101)을 DMF (3(X)1111)에녹인후 4 -플루오로- 1 -피라졸 (28은, 22811111101)을 첨가하여 100。(:에서 16시간교반하였다.반응혼합물을물 (1¾에 넣고고체를 석출시킨다.여과하여고체의

1-(6-(4 -플루오로-내-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -온 (37.4 83%)을 수득하였다.

[183] MS (!1 ) : 206.13 +1] + , 1界1乂: ^ I (111111) : 1.47

[184] 단계 2: 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -온 (32

15511111101)과 ( )- (+)-2 -메틸- 2 -프로페인설핀아마이드 (64 53011111101)를톨루엔 (6401111)에녹인후 11(0¾) 4 (213은, 93511111101)를첨가하고 110。(:에서 16시간 교반하였다.반응혼합물에물 (801신)을넣고에틸아세테이트및소금물로 추출하여유기층을합하였다.유기층을황산나 륨으로건조한후감압하여 농축하고중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 / 핵세인)로정제하여 고체의 (及,及)- -(1-(6-(4 -플루오로- 1好

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸리딘)- 2 -메틸프로페인- 2 -설핀아마이드 (3 ,

53%)를수득하였다.

[185] MS (!1 ) : 309.14 +1] + , 1界1乂: ^ I知如) : 1.55

[186] ¾ NMR (400 MHz, 0)0 3 ) 5 = 8.88 ((!, / = 2.0 8.43 ((1(1, / = 4.6, 0.6

1¾, 7.65-7.64 , , , , ,

[187] 단계 3: (及,及 )- -(1-(6-(4 -플루오로- 1산

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸리딘)- 2 -메틸프로페인- 2 -설핀아마이드 (3 , 1(X)11111101)을테트라하이드로퓨란 (10001111)에녹인후 -78。(:로냉각하고

-8신%出(노 (1 301.5811止)를 30분동안천천히 적가하였다. -78。(:에서 1시간 교반한뒤 메탄올과물을넣어 반응을종결시켰다.그리고에틸아세테이트및 소금물로추출하여유기층을합하였다.유기층 황산나트륨으로건조한후 감압하여농축하고중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트/ 핵세인)로 정제하여고체의 ( )- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1산 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 2 -메틸프로페인- 2 -설핀아마이드 (24.4 75%)를 수득하였다.

[188] MS (!1 ) : 311.21 +1] + , 1界1乂: ^ I (111111) : 1.46

[189] ¾ NMR (400 MHz, 0)0 3 ) 3 = 8.69-8.68 ((1(1, / = 4.4, 0.4 8.44 ((!, / = 2.0

1¾, 7.90 - (!, / = 6.8

[190] 단계 4: (及 )- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1好

-피라졸 일)피리딘- 3 -일)에틸)- 2 -메틸프로페인- 2 -설핀아마이드 (22.8

7311111101)를 1,4 -다이옥세인 (2001111),메탄올 ( )에녹인후 4M

11(:1/1,4 -다이옥세인 (1801111)을첨가하여상온에서 12시간교반하였다.반응 혼합물을감압농축하고에틸에터 (1001111)에 적가후여과하여고체의 (5

)- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -아민 (17 , 67.811111101)을 수득하였다.

[191] MS (11 ) : 208.21 ^+1]÷, 111 5 1乂: ^ I知如) : 0.76

[192] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) 3 = 8.72 - 8.69 ( 4¾, 8.61-8.60 ((!, / = 2.4

1¾, 8.19-8.17 (111, 1¾, 7.97-7.96 ( 1¾, 7.95知, 1¾, 4.55 ( 1¾, 1.58 ((!, / = 6.8

[193] 5) - 1 -(6-(4 -메틸 - 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -아민의제조

[194] 유사한방법으로표제의화합물을제조하였다. (수율: 40%)

[195]

[196] <제조예 4>(5)- 1-(6-(3,5 -다이메틸- 1산-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -아민의 제조

[197] 제조예 2와유사한방법으로하기반응식 3을통하여표제의화합물을

제조하였다.

[198] [반응식 3]

[199]

2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[200] 단계 1: MS: ^ 216.1 +印十

[201] ¾ NMR (400 MHz, 0001 3 ) 5 = 8.90 - 8.89 ((1(1, / = 0.8, 2.4 1¾, 8.24 - 8.16

((¾ / = 2.4, 8.8 1¾, 7.95 - 7.89 ((¾ / = 0.4, 8.4 1¾, 5.96知, 1¾, 2.63 (山 /

= 0.8 , 2.59 - 2.53 ( 3¾, 2.23知, 3¾

[202] 단계 : m/z 319.3 [M+H]十

[203] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) 5 = 8.93 - 8.92 (山 / = 4.0 1¾, 8.40 - 8.37 ((¾ /

= 2.4, 8.8 1¾, 7.94 - 7.91 ((!, / = 12.0 1¾, 6.17知, 1¾, 2.76知, 3¾, 2.63知,

3¾, 2.21知, 3¾, 1.23知, 911)

[204] 단계 3: MS: m/z 321.3 [M+H]十

[205] ¾ NMR (400 MHz, 0001 3 ) 3 = 8.40 (山 / = 2.4 7.90 ((1(1, / = 2.4, 8.8

1¾, 7.76 ((!, /= 8.4 1¾, 6.10知, 1¾, 5.52 ((!, / = 5.6 1¾, 4.53 - 4.50 (111,

[211] 단계 1: tert-뷰틸 -[(4 -브로모페닐)메틸]카바메이트 (2g, 6.99mmol)와싸이아졸 (535.46mg, 6.29mmol)을 DMF (20ml)에녹인후 Pd(OAc) 2 (313.82mg, 1.40mmol)와 KOAc (2.06g, 20.97mmol)를첨가하고 90°C에서 16시간교반하였다.

반응혼합물에물 (100ml)을넣고에틸아세테이트 (100ml*2)및소금물로 추출하여유기층을합하였다.유기층을황산나 륨으로건조한후감압하여 농축하고중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 /n-핵세인)로정제하여 노란색고체의 tert-뷰털 (4-(싸이아졸- 5 -일)벤질)카바메이트 (400mg, 13.기%)를 수득하였다.

[212] MS: m/z 291.1 [M+H] +

[213] 'H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 8.05 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.32 (d, / = 8.0 Hz, 2H), 5.00 (br s, 1H), 4.33 (d, /= 5.2 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)

[214] 단계 2: ten-뷰털 Aq(4 -싸이아졸- 5 -일페닐)메틸]카바메이트 (350mg,

1.21mmol)를 4M HC1/에틸아세테이트 (20mL)에녹인후상온에서 1시간 교반하였다.반응혼합물을감압농축하고에틸 터에적가후여과하여노란색 고체의 (4-(싸이아졸- 5 -일)페닐)메탄아민 (310mg, crude, HC1 salt)을수득하였다.

[215] MS: m/z 192.1 [M+H] +

[216] <제조예 6>(4-(아이소옥사졸- 4-일)페닐)메탄아민의제조

[217] 하기반응식 5로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[218] [반응식 5] 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[219]

[22이

4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)아이소옥사졸 (511.13mg, 2.62mmol)을 DMF (4ml)에녹인후 Pd(dppf)Cl 2 CH 2 C1 2 (142.69 mg, 174.72나 mol), KF (304.53mg, 5.24mmol),물 (0.5mL)을첨가하고 50C에서 30분동안

교반하였다.반응혼합물에물 (20ml)을넣고다이클로로메테인 (30ml*2)및 소금물로추출하여유기층을합하였다.유기층 황산나트륨으로건조한후 감압하여농축하고중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 /n-핵세인)로 정제하여 흰색고체의 ieri-뷰틸 (4-(아이소옥사졸- 4 -일)벤질)카바메이트 (164mg, 34.22%)를수득하였다.

[221] MS: m/z 275.2 [M+H] +

[222] 'H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) d = 9.40 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.63 (d, / = 8.0 Hz, 2H), 7.28 (d, / = 8.4 Hz, 2H), 4.12 (d, / = 6.0 Hz, 2H), 1.39 (s, 9H)

[223] 단계 2: ten-뷰털 (4-(아이소옥사졸- 4 -일)벤질)카바메이트 (230mg,

838.45^01)1- 4M HC1/에틸아세테이트 (20mL)에녹인후상온에서 1시간 교반하였다.반응혼합물을감압농축하고에틸 터에 적가후여과하여 연한 노란색고체의 (4-(아이소옥사졸- 4 -일)페닐)메탄아민 (310mg, crude, HCl salt)을 수득하였다.

[224] MS: 192.1 +印十

[225] <제조예 7>3-아미노- 1//-피라졸- 5 -카보나이트릴의제조

[226] 하기반응식 6로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[227] [반응식 6]

凡 / = 45.7 Hz, 1¾, 7.04知, 1¾

[232] 단계 2: 3 -나이트로 -1 -피라졸- 5 -카복사마이드 (1은, 6.4 1111110 1)을피리딘 (12센)에 녹인후 ?001 3 (1.2센)를첨가하고 6시간동안교반하였다.반응혼합물을 얼음물에 넣어반응을종결시킨뒤다이클로로메테인으로 추출하여유기층을 황산나트륨으로건조한후감압농축하여고체의 3 -나이트로 -1산 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피라졸- 5 -카보나이트릴 (0.7g, 79%)를수득하였다.

[233] UPLC V. t. (min) : 0.87

[234] 단계 3: 3 -나이트로- 1//-피라졸- 5 -카보나이트릴 (0.7g, 5mmol)을아세트산

(14ml),물 (3ml)에녹인후 Zinc powder (1.6g, 25mmol)을첨가하고상온에서 6시간교반하였다.반응혼합물을여과한뒤 여과액에물과에틸아세테이트를 첨가하고암모니아수로중화시켜유기층을추출 하였다.유기층을

황산나트륨으로건조한후감압농축하여 액체의

-피라졸- 5 -카보나이트릴 (80mg, 14%)를수득하였다.

[235] MS (m/z) : 109.03 [M+l] + , UPLC r. t. (min) : 0.33

[236] <제조예 8>메틸 4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)사이클로핵스 -3 -엔 -1-카복시레이트의제조

[237] 하기반응식 7로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[238] [반응식 7]

[239]

[24이 단계 1:메틸 4 -옥소사이클로핵산카복시레이트 (2 12.8111111101)와 1)표¾쇼

(8.9211^, 51.2211111101)를톨루엔 (41신)에녹인후 451에서 30분동안가열한다.이 혼합물에 1^0 (8.45!1止, 51.2211111101)을다이클로로메테인 ( )에 희석하여 45° (:에서 10분동안적가하고 2시간교반하였다.반응혼합물에 1N ^1 (6011^) 및 MTBE (6011止*2)을넣어서추출한후합한유기층을물 (5011止)과소금물 (5011止)로씻어준다.유기층을황산나트륨으로 조한후감압농축하여 노란색 액체의 메틸

4-(((트라이플루오로메틸)설폰일)옥시 )사이클로핵스- 3 -엔 -1 -카복시레이트 (2.5 67.73%)를수득하였다.

[241] ¾ NMR (400 MHz, 0001 3 ) 3 = 5.82 - 5.74 ( 1¾, 2.67 - 2.57 ( 1¾, 2.51 - 2.38 知!, 4¾, 2.21 - 2.10 (111, 1¾, 1.99 - 1.87 ( 1¾, 1.37 - 1.19知!, 1¾

[242] 단계 2:메틸

4-(((트라이플루오로메틸)설폰일)옥시 )사이클로핵스- 3 -엔 -1 -카복시레이트 (1.5 5.2011111101)와

4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 2-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)- 1,3, 2 -다이 옥사보로레인 (1.45은, 5.721^01), 0 (2.04 20.8211111101),모(1((¾¾ )(:1 2 . (:¾(¾ (424.9811¾, 520.40나11101)를 1,4 -다이옥세인 (20센)에녹인뒤 90。 (:에서 14시간 동안교반하였다.반응혼합물을

중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 / 핵세인)로정제하여노란색 액체의 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 메틸

4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 - 1 -카복시레 이트 (0 , 40.6%)를수득하였다.

[243] <제조예 9>(찌(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시 피페리딘- 4 -카복사마이드다이하이드로클로라이드의 제조

식 8로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

]

메탄올 (1501신)에녹여반응혼합물에 4시간동안천천히 적가한다. 25。 (:에서 12시간교반한뒤 반응혼합물에물 (5001111)을첨가하고유기용매를감압농축 후에틸아세테이트및소금물로추출하여유기층 을합하였다.유기층을 황산나트륨으로건조한후감압하여농축후

중압액체크로마토그래피 (에틸아세테이트 / 핵세인)로정제하여 액체의 1-細代 -뷰틸) 4 -메틸 4 -메톡시피페리딘- 1,4 -다이카복시레이트 (10.3 50%)을

수득하였다.

[248] MS (!1 ) : 174.18 +1] + , 1界1乂: ^ I (111111) : 1.46

[249] ¾ NMR (400 MHz, 0)0 3 ) 5 = 3.85 - 3.70 (111,211), 3.77知, 3¾, 3.26知, 3¾, 3.22 -

3.08 (111, 2¾, 1.87 1.46知, 911)

[25이 단계 2: 1-( -뷰틸) 4 -메틸 4 -메톡시피페리딘- 1,4 -다이카복시레이트 (10.3은,

37.711111101)을에탄올 (40 ),테트라하이드로퓨란 (的 )에녹인후 6N NaOH ( 1111)을첨가하고 70。 (:로가열하여 3시간동안교반하였다.반응혼합물에물과 에틸아세테이트를첨가하고중탄산나트륨으로 중화시켜유기증을주줄하였다. 유기층을황산나트륨으로건조한후감압농축하 여 액체의 \-itert

-부톡시카보닐)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복실산 (8.8 90%)을수득하였다.

[251] MS (11 ) : 160.15 +1] + , 111 5 1乂: V. I知如) : 1.36

[252] 단계 3: (5)- 1-(6-(4 -플루오로-내-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에탄- 1 -아민

다이하이드로클로라이드 (7.1은, 25.5_ 10 1)와 \-

-부톡시카보닐)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복실산

34.711111101), 1)표¾쇼 ( )을 DMF (1101111)에녹인후상온에서 2시간교반하였다. 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 반응혼합물을에틸아세테이트및소금물로추출 하여유기층을합하였다.

유기층을황산나트륨으로건조한후감압하여농 축하고

중압액체크로마토그래피(에틸아세테이트 /!!-핵세인)로정제하여 액체의

-뷰틸(5)-4-((1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)카바모일)- 4 -메 톡시피페리딘- 1 -카복시레이트(8.걔, 84%)를수득하였다.

[253] MS(!1 ) : 348.24 0。+ 1]+, 1界1乂: V. I(111111) : 1.73

[254] 단계 4: -뷰틸(5)-4-((1-(6-(4 -플루오로- 1산

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)카바모일)- 4 -메톡시피페리딘- 1 -카복시레이트 (8.7 19.411111101)를 1,4 -다이옥세인( ),메탄올( )에녹인후 4M

11(:1/1,4 -다이옥세인(201111)을첨가하여상온에서 4시간교반하였다.반응 혼합물을감압농축하고에틸에터(1001111)에 적가후여과하여고체의(찌 -(1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복 사마이드다이하이드로클로라이드(5.1 63%)를수득하였다.

[255] MS(11 ) : 348.24 ^+1] + , 111 5 1乂: V. I(111111) : 1.04

[256] <실시예 1>(1/%4찌-( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1- 카복사마이드;및

[257] <실시예 2>(1 4及)- -( )- 1-(6-(4 -플루오로- 1 -피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1- 메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1- 카복사마이드의 제조

[258] 하기반응식 9로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 다.

[259] [반응식 9]

[261] 단계 1: 2, 4 -다이클로로퀴나졸린(1 , 5()11111101)과 5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -아민

(5.3걔, 55^01), 1)표¾쇼(8.81111)을 DMSO(1671신)에녹인후 60。(:에서 2시간동안 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 교반하였다.반응혼합물을물에 넣은뒤 여과하여고체의 2 -클로로- -(5 -메틸- 1산 -피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(13 100%)을수득하였다.

[262] MS(!1 ) : 260.11 +1] + , 1界1乂: ]·. I(111111) : 1.27

[263] 단계 2: 2 -클로로#(5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(5은, 19.211111101)과 테트라하이드로퓨란( )에 녹인후 70。(:에서 6시간교반하였다.반응혼합물을에틸아세테이 및소금물로 추출하여유기층을합하였다.유기층을황산나 륨으로건조한후감압하여 농축하고중압액체크로마토그래피(에틸아세 테이트/다이클로로메테인)로 정제하여고체의 2 -클로로- -(5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1好

-피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(3Jg, 55%)을수득하였다.

[264] MS(11 ) : 344.22 ^+1] + , 111 5 1乂: V. I(111111) : 1.24

[265] 단계 3: 2 -클로로#(5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(3.걔, 10.811111101)과메틸

1 -메톡시- 4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 - 1-

111111101)을 1,4 -다이옥세인(901111),물(171111)에녹인뒤 120 에서 6시간

교반하였다.반응혼합물을에틸아세테이트및 금물로추출하여유기층을 합하였다.유기층을황산나트륨으로건조한후 압농축하여고체의 메틸 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노 )퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 - 1 -카복시레이트(4 78%)를수득하였다.

[266] MS(11 ) : 478.38 ^+1] + , 111 5 1乂: V. I知如) : 1.24

[267] 단계 4:메틸 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 - 1 -카복시레이트(4 8.3811111101),암모늄포메이트(7.92은, 12611111101), ?(1/0(1.78은), (1(01¾ 2 (0.59은)를 에탄올(421신)에녹인후 80。(:에서 12시간교반하였다.반응혼합물을 여과 및감압농축하고

중압액체크로마토그래피(에틸아세테이트/ 이클로로메테인)로정제하여 고체의 메틸 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 1 -카복시레이트(4g , 99%)를 수득하였다.

[268] MS(11 ) : 480.37 ^+1] + , 111 5 1乂: V. I知如) : 1.22

[269] 단계 5:메틸 1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -211-피란- 2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 1 -카복시레이트(4

8.3811111101)을에탄올(20 ),테트라하이드로퓨란( )에녹인후 6N NaOH (71신)을첨가하고 70。(:로가열하여 3시간동안교반하였다.반응혼합물에물과 에틸아세테이트를첨가하고중탄산나트륨으로 중화시켜유기증을주줄하였다. 유기층을황산나트륨으로건조한후감압농축하 여고체의 메틸

1 -메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -211-피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 1-카복실산 (3.8g, 98%)를수득하였다.

[27이 MS (m/z) : 466.33 [M+l] + , UPLC r. t. (min) : 1.10

[271] 단계 6:메틸 1-메톡시- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2//-피란- 2 -일)

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 1-카복실산 (3.8g,

8.16mmol)과 (S)-l-(6-(4 -플루오로- 1H-피라졸- 1-일)피리딘- 3 -일)에탄- 1-아민 (2.73g, 9.8mmol), DIPEA (7.13ml, 40.8mmol), HATU (4.03g, 10.61mmol)을 DMF (30ml)에녹인후 1시간동안교반하였다.반응혼합물을에틸아세 이트및 소금물로추출하여유기층을합하였다.유기층 황산나트륨으로건조한후 감압하여농축하고중압액체크로마토그래피 (메탄올/다이클로로메테인)로 정제하여고체의 AK (幻- 1-(6-(4 -플루오로-

-피라졸- 1-일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2H- 피란- 2 -일)- 1//-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1-카복사마이 드 (4g, 75%)를수득하였다.

[272] MS (m/z) : 654.44 [M+l] + , UPLC r. t. (min) : 1.32

[273] 단계 7: -( )-1-(6-(4 -플루오로-

-피라졸- 1-일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2//- 피란- 2 -일)- 1//-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1-카복사마이 드 (4g, 6.12mmol)를 TFA (12ml)에녹인후 60°C에서 30분간교반하였다.반응 혼합물에물과에틸아세테이트를넣고중탄산나 트륨으로중화하여유기증을 추출하였다.유기층을황산나트륨으로건조한 감압하여농축하고

초임계유체크로마토그래피를이용하여분리정 제하여고체의 (lrAS)-N-((S )-1-(6-(4 -플루오로- 1H-피라졸- 1-일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1//- 피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1-카복사마이드 (722mg, 21%,실시예 1)와 (U4RHV-(0S)-l-(6-(4 -플루오로-

-피라졸- 1-일)피리딘- 3 -일)에틸)- 1-메톡시 - 4-(4-((5 -메틸- 1H-피라졸- 3 -일)아미노) 퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1-카복사마이드 (1680 mg, 48%,실시예 2)를각각 얻었다.

[274] MS (m/z) : 570.38 [M+l] + , UPLC r. t. (min) : 1.26

[275] 상기실시예 1, 2와유사한방법으로실시예 3내지 22를제조하였으며,실시예 1내지 22의화학구조,화합물명과 NMR, LC-MS분석결과를하기표 1에 정리하여나타내었다. 石

1 ! 卜一

WO 2020/175968 PCT/KR2020/002925

^0

2020/175968 1 » (:1/10公020/002925

[281]

[282] <실시예 23> -벤질- 4-(4-((5 -메틸- 1好

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드의제조

[283] 하기반응식 으로표시된방법을통해표제의화합물을제조하 였다.

[284] [반응식 1이 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[286] 단계 1: 2 -클로로-

-(5 -메틸- 1 -테트라하이드로피란- 2 -일-피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(70011¾, 2.0411111101)과메틸

4-(4, 4, 5, 5 -테트라메틸- 1,3, 2 -다이옥사보로란- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 - 1 -카복시레 이트(90011¾, 3.3811111101)를상온에서 1,4 -다이옥세인(101111),물(1.3 )에녹인뒤 ¾00 3 (844.1711¾, 6.1111111101),모(1((¾¾幻(:1 2 .(:1¾(:1 2 (20(¾1¾, 244.911111101)을첨가하고 90。(:에서 2시간교반하였다.반응혼합물을에틸아세테이 및소금물로 추출하여유기층을합하였다.유기층을황산나 륨으로건조한후감압 농축하고중압액체크로마토그래피(석유에터 /에틸아세테이트)으로정제하여 고체의 메틸 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 -1 -카복시레이트(6701^, 73.53%)를수득하였다.

[287] MS: 448.1 +印十

[288] ¾ NMR(400 MHz, 0001 3 ) 8 = 8.03(1奸(1, /= 2.8 8.4

7.80((1, / = 8.0 1¾, 7.73(ᄂ / = 7.6 1¾, 7.45比 / = 8.0 1¾, 6.92知, 1¾,

5.23((¾ / = 2.4, 10.0 1¾, 4.12 - 4.08( 1¾, 3.75 - 3.72( 3¾, 3.71 - 3.65

(111, 1¾, 3.04 - 3.02( 1¾, 2.73 - 2.67( 1¾, 2.42知, 4¾, 2.30 - 2.21( 1¾, 2.14 - 2.09(111, 1¾, 1.96 - 1.84( 2¾, 1.82知, 5¾, 1.63 - 1.56( 1¾

[289] 단계 2:메틸 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵스- 3 -엔 -1 -카복시레이트(6301^, 1.4111111101), ¥<1/0(149.811고용, 10% ), (1(011) 2 (98.851고용, 140.771111101, 20% ! 切)를메탄올(411止)에녹인후,수소기류하 상온에서 1.5시간교반하였다. 반응혼합물을여과및감압농축하여고체의 메틸

4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로- 2 -피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸 린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복시레이트(60011¾, 94.81%)를수득하였다.

[29이 MS : 111/ å 450.2 +印 +

[291] ¾ NMR(400 MHz, 0001 3 ) 3 = 8.00(1奸 1¾, 7.87 - 7.69( 3¾, 7.50 - 7.42( 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

1¾, 7.06 - 6.95知1, 1¾, 5.33 - 5.21知1, 1¾, 4.12 - 4.05 ( 1¾, 3.73 - 3.71 ( 3¾, 3.70 - 3.65 (111, 1¾, 3.00 - 2.84 ( 1¾, 2.75 - 2.68 ( 1¾, 2.46 - 2.42 ( 3¾, 2.24 - 2.05 (111, 6¾, 1.94 - 1.87 ( 2¾, 1.75 - 1.60知1, 6¾

[292] 단계 3:메틸 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복시레이트 (550 11 ¾, 1.2211111101)을물 (211止),메탄올 (1(¾1止)에녹인후 011 (15(¾1¾, 3.7511111101)을 첨가하고상온에서 16시간교반하였다.반응혼합물에물과에틸아세 테이트를 넣고물층을추출하였다.물층에 1N HC1를적가하여 1^를 5~6으로적정하고 고체침전물을여과및감압농축하여고체의 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복실산 (40011¾, 72.60%)을수득하였다.

[293] MS: 436.3 +印十

[294] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-J 6 ) 5 = 10.33知, 1¾, 8.60 (山 / = 8.4 7.80 -

7.73 (111, 1¾, 7.71 - 7.65 (III, 1¾, 7.47比 / = 7.6 1¾, 6.84 - 6.80 (III, 1¾, 5.35 凡 / = 9.6 1¾, 1¾, 3.93 ((!, / = 11.2 1¾ 1¾, 3.65 (바, / = 3.6, 10.8 2¾, 2.87 -

2.76知1, 1¾, 2.75 - 2.63 ( 1¾, 2.36知, 3¾, 2.33 - 2.26知1, 1¾, 2.07 - 2.00 , 4¾, 1.91 - 1.85知1, 1¾, 1.83 - 1.58知1, 5¾, 1.58 - 1.44 ( 3¾

[295] 단계 4: 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복실산 (17011¾,

377.52나 11101)과페닐메탄아민 (50.211¾, 468.55나 11101, 51.07^), 1 111 (172.251¾, 453.03나 11101), [ ) 표¾쇼 (222.6(¾1¾, 1.7211111101, 0.311止)을다이클로로메테인 (3:1止)에 녹인후상온에서 16시간교반하였다.반응혼합물을감압농축하고 11 ( 그1 (2011소)를적가후여과하여고체의 -벤질- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2산 -피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마 이드 (190!!¾, 95.93%)를수득하였다.

[296] MS: m/z 525.4,印十

[297] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-J 6 ) 8 = 14.79 - 14.48 (III, 1¾, 12.21 - 11.98 (III, 1¾,

8.90 - 8.82 (111, 1¾, 8.40 - 8.31 ( 1¾, 8.11 - 8.03 ( 1¾, 7.91 ((!, / = 7.6 Hz, 1¾, 7.78 (ᄂ / = 7.6 Hz, 1¾, 7.37 - 7.27 ( 2¾, 7.25 - 7.15 ( 2¾, 7.02 - 6.75 ( 1¾, 5.47 - 5.34 (111, 1¾, 4.36 - 4.27 ( 2¾, 3.93 ((!, / = 12.0 1¾, 3.66知, 1¾, 3.08 -

2.96知 1, 1¾, 2.62 - 2.59 ( 1¾, 2.33 - 2.30 ( 3¾, 2.16 - 1.79知 1, 7¾, 1.77 - 1.47

(따 7¾

[298] 단계 5: -벤질- 4-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드 (19(¾1¾, 362.141111101)를 4M Ha/MeOH (90.54나니에 넣고상온에서 1시간교반하였다. 반응혼합물을감압농축하고메탄올에녹인뒤 염기성 레진을이용해 1^를 7-8로맞춘후여과하였다.여과한고체를的^- 150

고체의 라세믹혼합물 -벤질- 4-(4-((5 -메틸- 1산 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)사이클로핵세인- 1 -카복사마이드 (3(¾1¾, 27.27%)를수득하였다.

[299] MS: ^ 441.2 +印 +

[300] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-J 6 ) 3 = 12.11 ((!, / = 1.6 1¾, 10.21知, 1¾, 8.57 (山

/ = 7.6 1¾, 8.37 - 8.12 (111, 1¾, 7.82 - 7.64 (III, 2¾, 7.47比 / = 7.2 1¾, 7.36

- 7.18 (111, 5¾, 6.76 (1奸 1¾, 4.32 - 4.24 ( 2¾, 2.95 - 2.66 ( 1¾, 2.42 - 2.18 (111, 5¾, 2.12 - 1.79 ( 3¾, 1.78 - 1.52 ( 4¾

[301] 상기실시예 23과유사한방법으로실시예 24내지 26을제조하였으며,실시예 23내지 26의화학구조,화합물명과 NMR, ^^8분석결과를하기표 2에 정리하여나타내었다.

2020/175968 1»(:1/10公020/002925

-02

[303] <실시예 27> (찌- (1-(6-(4 -플루오로- 1好 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노) 퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드의 제조

[304] 하기반응식 11으로표시된방법을통해표제의화합물을제조 였다.

[305] [반응식 11]

[306]

[307] 단계 1 : 2, 4 -다이클로로퀴나졸린(1 , 5()11111101)과 5 -메틸- 111-피라졸- 3 -아민

(5.3걔, 55^01), 1)표¾쇼(8.81111)을 DMSO(1671신)에녹인후 60。(:에서 2시간동안 교반하였다.반응혼합물을물에 넣은뒤 여과하여고체의 2 -클로로- -(5 -메틸- 1산 -피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(13 100%)을수득하였다.

[308] MS(!1 ) : 260.11 +1] + , 1界1乂: ]·. I(111111) : 1.27

[309] 단계 2: 2 -클로로- -(5 -메틸- 1 -피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민(901¾,

0.34711111101)과

)-此(1-(6-(4 -플루오로-내-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시피페리딘- 4- 카복사마이드다이하이드로클로라이드(14611 , 0.34711111101), 1)표¾쇼(0.21111, 1.3911111101)를에탄올(31111)에녹인후마이크 파반응기를이용하여 170。(:에서 1시간반응하였다.반응혼합물을에틸아세테이 및소금물로추출하여 유기층을합하였다.유기층을황산나트륨으로 조한후감압하여농축하고 ¾ £1 )- 150 1乂: 3 111으로정제하여고체의(찌-(1-(6-(4 -플루오로- 1好

-피라졸- 1 -일)피리딘- 3 -일)에틸)- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1산-피라졸- 3 -일)아미노) 퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드(981뼉, 50%)를수득하였다.

[31이 MS(!1 ) : 571.49 +1] + , 1界1乂: V. I知如) : 1.36

[311] 상기실시예 27과유사한방법으로실시예 28내지 45를제조하였으며,실시예 27내지 45의 화학구조,화합물명과 NMR, ^^8분석 결과를하기표 3에 정리하여 나타내었다.

〕【벼 1 2 - -

WO 2020/175968 PCT/KR2020/002925

1

2020/175968 1»(:1/10公020/002925

2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[317] <실시예 46> -벤질 -4 -메톡시 - 1 -(4-((5 -메틸 - 1산

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드의 제조

[318] 하기반응식 12으로표시된방법을통해표제의화합물을제조 였다.

[319] [반응식 12]

[32이

[321] 단계 1 : 1-( -뷰틸) 4 -메틸 4 -메톡시피페리딘- 1,4 -다이카복시레이트 (ί.2g, 4.3911111101)을메탄올 (1011소)에녹인후 4M HCl/MeOH (60:11니을첨가하여 상온에서 1시간교반하였다.반응혼합물을감압농축하여 체의 메틸

4 -메톡시피페리딘- 4 -카복시레이트 (0.8 86.91%)을수득하였다.

[322] ¾ NMR (400 MHz, Methanol -山) 3 = 3.79知, 3¾, 3.30 - 3.25 ( 2¾, 3.28知, 3¾, 3.22 - 3.19 (111, 2¾, 2.27 - 2.09 ( 4¾

[323] 단계 2:메틸 4 -메톡시피페리딘- 4 -카복시 715.41 ^^01), 1)표¾쇼

(462.3111¾, 3.5811111101, 715.41나 11101)를 DMF (10 11止)에 녹인후 2 -클로로- -(5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1好

-피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민 (270.5611¾, 786.95나11101)을첨가하여 60。 (:에서 12시간교반하였다.반응혼합물을에틸아세테이 트및소금물로추출하여 유기층을합하였다.유기층을황산나트륨으로 조한후감압농축하고 중압액체크로마토그래피 (석유에터/에틸아세테이트)로정제하여고체의 메틸 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노 )퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복시레이트 (30011¾, 87.26%)를수득하였다.

[324] MS: ^ 481.3 +印十

[325] ¾ NMR (400 MHz, 0001 3 ) 3 = 7.64 - 7.46 ( 4¾, 6.68知, 1¾, 5.23 (加 (1, / = 2.6 211), 3.58 - 3.44

(111, 2¾, 3.34知, 3¾, 2.39知, 3¾, 2.16 - 1.98 ( 6¾, 1.92 (加山 / = 13.2도¾ 2¾, 1.60 (1奸 (1, / = 9.6 1¾, 211)

[326] 단계 3:메틸 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복시레이트 (250mg,

520.23_1)를물 (lmL),메탄올 (5mL)에녹인후 NaOH (50mg, 1.25mmol)를 첨가하고상온에서 16시간교반하였다.반응혼합물에 1N HC1를첨가하여 pH를 4-5로적정한다.에틸아세테이트를넣어물층을 출하고동결건조하여고체의 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1H-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복 실산 (120mg, 49.44%)을수득하였다.

[327] MS: m/z 467.3 [M+H] +

[328] 단계 4: 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 - - 4 -카복실산 (110mg, 235.78umol)과 페닐메탄아민 (147.45mg, 1.38mm HATU (107.58mg, 282.94umol), DIPEA (371.00mg, 2.87mmol, 0.5 로로메테인 (3mL)에녹인후 상온에서 1시간교반하였다.반응혼합물을다이클로로메 인및소금물로 추출하여유기층을합하였다.유기층을황산나 륨으로건조한후감압 농축하고 Prep-150 LC System으로정제하여고체의 N

-벤질- 4 -메톡시- 1-(4-((5 -메틸- 1H-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4- 카복사마이드 (50mg, 44.97%)를수득하였다.

[329] MS: m/z 472.1 [M+H] +

[33이 'H NMR (400 MHz, CDC1 3 ) d = 8.49 - 8.05 (m, 1H), 7.80 - 7.65 (m, 1H), 7.62 - 7.43

(m, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 5H), 7.17 - 7.06 (m, 1H), 6.85 (t, / = 5.6 Hz, 1H), 6.57 - 6.33 (m, 1H), 4.65 (d, / = 12.0 Hz, 2H), 4.47 (d, / = 6.0 Hz, 2H), 3.43 - 3.28 (m, 5H), 2.30 (s, 3H), 2.22 - 2.16 (m, 2H), 1.92 (d, / = 14.4 Hz, 2H)

[331] 실시예 46의화학구조,화합물명과 NMR, LC-MS분석결과를하기표 4에

정리하여나타내었다.

[332] [표 4]

[333] <실시예 47> -벤질- 1-(4-((5 -메틸- 1好

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드의제조

[334] 하기반응식 13으로표시된방법을통해표제의화합물을제조 였다.

[335] [반응식 13] 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[336]

[337] 단계 1 : 2 -클로로- -(5 -메틸- 1-(테트라하이드로- 2 -피란- 2 -일)- 1好

-피라졸- 3 -일)퀴나졸린- 4 -아민 (30(¾1¾, 872.57^01)4메틸

피페리딘- 4 -카복시레이트 (187.4111¾, 1.3111111101), XI (28.9711¾, 174.51 ( X11101), [ ) 표¾쇼 (742.0(¾1¾, 5.7411111101, 1.0(¾1止)를 DMF (1(¾1止)에녹인뒤 80(:에서 12시간 교반하였다.반응혼합물을에틸아세테이트및 금물로추출하여유기층을 합하였다.유기층을황산나트륨으로건조한후 압농축하고

중압액체크로마토그래피 (석유에터/에틸아세테이트)로정제하여 액체의 메틸 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로- 2 -피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸 린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복시레이트 (31511¾, 59.18%)를수득하였다.

[338] MS: 451.3 +印 +

[339] 단계 2:메틸 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)- 1

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복시레이트 (28011¾,

621.49나 11101)를테트라하이드로퓨란 (5:1止)에녹인뒤 011 (1001¾, 2.5011111101), 물 (111止)을넣고상온에서 12시간교반하였다.반응혼합물에물을넣고 에틸아세테이트로씻어주었다.물층에 11 ( :1 (1011止)를적가하여 를 7로 적정하고에틸아세테이트를이용해유기층을추 출하였다.유기층을

황산나트륨으로건조한후감압농축하고고체의

1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로- 2 -피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸 린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복실산 (26011¾, 89.09%)을수득하였다.

[34이 MS: 437.1 +印 +

[341] 단계 3: 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -211-피란- 2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복실산 (230!1¾, 514.45^01), 페닐메 514.45 ( X11101, 56.08^), £)표¾쇼 (66.4¾1¾, 514.45^01, 89.64山 , 11¾, 514.45^01)1-다이클로로메테인 (411止)에녹인후 상온에서 12시간교반하였다.반응혼합물을물 (2011止)에 넣고고체를 석출시킨다.여과하여고체의 -벤질- 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2산 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

-피란- 2 -일)- 1 -피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드 (160!1¾, 59.17%)를수득하였다.

[342] MS: 526.2 +印 +

[343] ¾ NMR (400 MHz, DMSO-J 6 ) 5 = 10.31 - 9.98 (1피 1¾, 8.44 - 8.32 (III, 2¾, 7.56 (ᄂ / = 7.6 Hz, 1¾, 7.42 - 7.35 ( 1¾, 7.34 - 7.28 ( 2¾, 7.23 ((!, / = 7.2도¾, 3¾,

7.11比 / = 7.2 1¾, 6.52知, 1¾, 5.34 ((¾ / = 2.0, 10.0 1¾, 4.76凡 / = 12.0

Hz, 2¾, 4.26 ((!, / = 6.0 Hz, 2¾, 3.92 ((!, /= 12.0 Hz, 1¾, 3.64 0-, 1 = 3.2, 10.8 Hz, 1¾, 2.94 (ᄂ /= 12.4 2¾, 2.33知, 3¾, 2.05 - 1.95 (1피 1¾, 1.91 - 1.66 (1피 4¾,

1.63 - 1.47 (111, 4¾

[344] 단계 4: -벤질- 1-(4-((5 -메틸- 1-(테트라하이드로 -2 -피란 -2 -일)-

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드 (13011¾,

247.32^01)#메탄올 (211소)에녹인후 4M HCl/MeOH (1011 )을넣고상온에서 1시간교반하였다.반응혼합물을감압농축하고 틸아세테이트를넣어 50°

(:에서 12시간교반하였다.생성되는고체를여과하고 1^1)-150

정제하여고체의 -벤질- 1-(4-((5 -메틸- 1산

-피라졸- 3 -일)아미노)퀴나졸린- 2 -일)피페리딘- 4 -카복사마이드 (26!1¾, 23.81%)를 수득하였다.

[345] MS: 442.2 +印 +

[346] ¾ NMR (400 MHz, DMSO -成) 5 = 12.21 - 11.97 (III, 1¾, 9.97知, 1¾, 8.42 - 8.23

(111, 2¾, 7.59 - 7.48 ( 1¾, 7.35 - 7.28 ( 3¾, 7.26 - 7.19知 1, 3¾, 7.12 - 7.05知1, 1¾, 6.43知, 1¾, 4.78 ((!, / = 13.2 211), 4.26 ((!, / = 6.0 211), 3.31知, 1¾, 2.92

(ᄂ / = 12.0 2¾, 2.26知, 3¾, 1.82 - 1.78 (III, 2¾, 1.56 ((1(1, / = 3.6, 12.4 211)

[347] 상기실시예 47과유사한방법으로실시예 48내지 51을제조하였으며,실시예 47내지 51의화학구조,화합물명과 NMR, ^^8분석결과를하기표 5에 정리하여나타내었다.

2020/175968 1»(:1/10公020/002925

[349]

[35이 <실험예 1>본발명에따른화합물의다양한키나아제저 활성평가

[351] 본발명에따른화합물의보다많은효소에대한저 해활성을평가하기위해 하기와같은실험을수행하였다.구체적으로,본 명의실시예화합물중 선별된실시예 15, 19, 22에대하여, Disco verX사에의뢰하여효소 (kinase) 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 선택성을측정하기로하고, scanMAXä Kinase분석용패널을사용하여실험을 진행하였다.이때,효소에처리되는약물의농도 DMSO에:4iM로하였고,하기 식 1과같은방법으로조절백분율(% control)을정하였고,그결과를하기표 6에 나타내었다.

[352] [식 1]

[353] (실시예화합물 -양성대조군)/(음성대조군-양성대조군) X 100

[354] 여기서,상기양성대조군은 0%의조절백분율을나타내는화합물을말하며, 음성대조군은 DMSO로 100%의조절백분율을나타낸다.또한,본발명의효 소 선택성은각각의효소에대하여조절백분율이 < 35%(즉 35%미만)이면해당 효소에대하여활성을갖는것으로판단하였다.

2020/175968 1»(:1/10公020/002925

[355] [표 6]

2020/175968 1 » (:1^1{2020/002925

[356] 상기표 6에서확인할수있듯이,본발명에따른화합물은 AMPK-alphal, 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 나열된효소에대하여억제활성을갖고있음을나 타내는것이며,이로부터상기 나열된효소와관련된질환에사용시유용한효과 가있음을암시하는것이다. 따라서,본발명에따른유도체화합물은따른 AMPK-alphal, AMPK-alpha2, ARK5, AURKA, AURKB, AURKC, AXL, BLK, CSF1R, CSNK2A2, DAPK1, DAPK3, EPHB6, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR3(G697C), FGR, FLT1, FLT3, FLT3(D835H), FLT3(D835V), FLT3(D835Y), FLT3(ITD), FLT3(ITD,D835V), FLT3(ITD,F691L), FLT3(K663Q), FLT3(N841I), FLT3(R834Q), FLT4, GCN2, HCK, JAK1, JAK2, JAK3, KIT, KIT(A829P), KIT(D816H), KIT(D816V), KIT(L576P), KIT(V559D), KIT(V559D,T670I), KIT(V559D,V654A), LCK, MAP3K2, MEK5, MERTK, MLK2, MLK3, NEK7, NEK9, PDGFRA, PDGFRB, PLK4, PYK2, RET, RET(M918T), RET(V804L), RET(V804M), RIOK3, ROS1, RSK2, RSK3, SLK, SNARK, SRC, STK16, SYK, TIE1, TNK1, TNK2, TRKA, TRKB, TRKC, TYK2, YES, YSK4키나아제관련질환의치료또는예방용조성 로유용하게사용될 수있다.

[357]

[358] <실험예 2> RET (ret proto-oncogene)효소저해능평가

[359] 본발명에따른실시예화합물의 RET (ret proto-oncogene)효소에저해활성을 평가하기위해하기와같은실험을수행하였다. 시예화합물을정제된 human RET (658-end, signalchem)효소와반응하여하기와같은방법으로 소저해능을 평가하였다.반응버퍼는 40mM Tris-HCl pH 7.4, 20mM MgCl 2 , 0.5 mg/mL BSA,및 50uM DTT조성을사용하였으며모든시험물은반응버퍼 상에서반응을 수행하였다.시험시 human RET (658-end, 0.8ng)효소와정제된 ATP (10uM), 특이적인기질용액을 25 상에서 1시간반응시킨후효소활성은 in vitro

ADP-Glo™ kinase assay (promega)를이용하여확인하였다. 2:2:1비율로

효소활성반응액과 ADP-Glo반응액 ,효소능 detection용액을반응시켜서

Luminescence를즉정하였다.화합물을처리하지않 용매대조군효소활성의 형광도를기준으로각화합물들의처리농도에따 른효소활성저해정도를 산출하였으며,이때효소활성저해를 50%억제하는각화합물의농도를 IC 50 (nM)값으로결정하였다.각화합물의 IC 5Q 는 3개씩의데이터세트로결정하였고 프리즘 (버전 7.01,그래프패드)소프트웨어를이용하여구하였 다.그결과를아래 표 7에나타내었다.

[36이

[361] <실험예 3> RET융합유전자를발현하는갑상선수질암및폐암 세포증식

억제활성평가

[362] 본발명에따른화합물의 RET융합유전자를발현하는갑상성수질암세포및 폐암세포증식에대한억제활성을평가하기위해 하기와같은실험을

수행하였다. RET융합유전자를발현하는폐암세포주중에 LC-2/ad세포는 RPMLF12 (1:1) (Invitrogen)에 10% FBS (HyClone)을넣은후배양하고,갑상선 2020/175968 1»(:1^1{2020/002925 수질암세포주인 TT세포는 10% FBS를첨가한 F-12 (Invitrogen)를사용한다. Ba/F3세포는 10% FBS와 5 ng/ml IL-3 (R&D Systems)을넣은 RPMI-1640를 사용한다.형질도입된 Ba/F3세포는같은배지에 lug/ml puromycin (Invitrogen)을 추가하여배양한다.세포는화합물을처리하기 24시간전에, 3000-5000개세포를 white clear bottom 96 well plate (Coming)의 well마다분주해놓는다.화합물은 다이메틸설폭사이드에희석시켜 (3배씩희석,총 12개농도)최종농도가 0.3nM - 50uM이되도록 0.5ul씩주입하였다.살아있는세포의측정은화합 물처리후 72시간뒤에 CellTiter-Glo luminescent cell- viability reagent (Promega)를사용하여 상온에서 10분보관한후에,판독기 (SynergyNeo, Biotek)를이용하여발광강도를 측정하였다.각시험은세번씩반복하였다.결과 은대조군과비교한

세포성장비율 (%)로산줄하였다. GraphPad Prism version 5.0프로그램을 사용하여그래프를그리고 IC 5Q (nM)값을계산하였다.하기표 7에 LC-2/ad, Ba/F3(naive), Ba/F3 KIF5B-RET, Ba/F3 KIF5B-RET(V804M)세포에대한각 실험화합물의성장저해활성을측정한결과를나 타내었다.

2020/175968 1»(:1/10公020/002925

[363] [표 7]

2020/175968 1»(:1^1{2020/002925

[364] 상기표 7에나타난바와같이,본발명의실시예화합물은 RET (ret

proto-oncogene)효소저해능이우수하고, RET융합유전자를발현하는갑상선 수질암세포주및폐암세포주의증식을우수하게 저해하고있는것을확인할수 있다.특히, RET야생형보다 RET융합유전자에대하여선택적으로우수한저해 활성을나타내는바,본발명의화합물은 RET융합유전자에대하여특이적으로 저해활성을나타내는것을알수있다.따라서본 명에따른화합물은상기 2020/175968 1»(:1/10公020/002925 실험에서확인한바와같이,암세포증식을억제 수있어,암질환,예를들어 갑상선수질암과폐암의예방및치료를위한약학 적조성물로유용하게사용될 수있다.