【발명의 명칭】

신규한 AIMP1 단백질의 단편과 이를 유효성분으로 포함하는 발모 촉진용 조 성물 【기술분야】

본 발명은 신규한 AIMP1 단백질의 단편 및 이를 유효성분으로 포함하는 탈모 개선 및 발모 촉진용 조성물에 관한 것으로， 보다 상세하게는 서열번호 1로 표시되 는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드， 또는 상기 폴리펩 티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드; 상기 폴리펩티드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드; 이들 폴리펩티 드를 포함하는， 탈모 개선 및 발모 촉진용 약학적, 화장료， 식품용 조성물에 관한 것이다.

【배경기술】

본 출원은 2016년 7월 28일에 출원된 대한민국 특허출원 제 10-2016-0096256 호를 우선권으로 주장하고, 상기 명세서 전체는 본 출원의 참고문헌이다. 제약산업이 과거의 천연물 의약품이나 화학적 합성 의약품에서 단백질 또는 펩티드 의약품의 개발로 바뀌어가고 있는 추세이다. 단백질은 생명체의 기능 및 구 조에 있어 기본물질이며， 인체를 구성하는 단백질은 약 100만종이 넘을 것으로 추 정된다. 이는 질병과도 직접적인 관련성이 있어， 치료제 개발에 중요한 연구대상이 되고 있으며， 이들을 이용한 단백질 또는 펩티드 의약품은 합성 의약품에 비해 부 작용이 적고 약효가 빨라 의약품의 혁신분야로 평가되고 있다. 현재 주요 제약사의 파이프라인에 있어 바이오의약품의 중요성이 점차 증가하고 있으나 펩티드 (Pept ides)와 같은 특정 바이오의약품이 출시되기까지 주요 기술적 문제가 존재한 다. 구체적으로 전달 기술 향상， 안정성 및 반감기를 늘린 펩티드 개발， 긴 ( long- chain) 펩티드 합성 등이 상업화의 걸림돌로 작용하고 있다. 펩티드는 약 50개 이 하의 아미노산으로 구성되어 있는 것을 말하며 펩티드 약물로 성공하기 위해서는 짧은 서열이면서 활성을 나타내는 것을 발굴하는 것이 관건인 것으로 알려져 있다. 펩티드 길이가 길면 합성 비용이 많이 들고 제조가 용이하지 않으며， 인체 흡수상 의 문제가 있는 것으로 알려져 있다. 한편， 인간을 포함한 동물의 경우， 태아 발생기부터 인생 전체를 통해 모낭

(hair follicles)은 수 차례의 퇴화 및 재생 과정을 거치게 된다. 인간의 모발 성 장의 경우， 신생아 시기부터 청소년 시기 전반에 걸쳐 모낭이 계속 커나가서 두발 은 점점 더 두꺼워진다. 모낭 (hair follicles)은 상피세포 및 간엽세포 등과 같은 여러 종류의 세포로 이루어져 있다. 간엽세포 (mesenchymal cells)는 태아기 및 출 생후 모낭의 유도 조직체 (inductive organizer)로서의 역할을 수행한다. 모낭 원 시 세포 (follicle germ eel Is)는 벌브 매트릭스 세포 (bulbar matrix eel Is)로서, 모낭에서 대부분의 유사 분열증식 (mitotic proliferation)을 담당한다. 발생기 동 안, 벌브 매트릭스 내의 세포들은 상향으로 이동하며 증식하며， 모발 매트릭스， 내 부 및 외부 시트 세포 (sheath cells)로 분화한다. 모낭의 중심축에 위치한 모발 매트릭스 그룹은， 수질 (medulla), 모발 피질 (cortex) 및 모발 각층 (cuticle)을 이루는 세포로 계속 분화해간다. 이러한 세포들은, 증식하는 모낭에서 모발을 형성 하는 데에 필수적인 모발 피질 및 각층 세포의 각화 (keratinization) 현상과 더불 어 계속적으로 상향 이동한다.

모발사이클 (hair cycle)은 3단계로 나누어진다: 1) 모낭사이클 중에서 활 발한 성장기에 해당하는 성장기 (Anagen), 2) 퇴화기 (Catagen), 3) 휴지기 (Telogen). 각 단계별 기간은 각 개인별 연령, 호르몬 인자， 영양 및 건강 상태, 유전적 성향에 따라 달라진다. 모발 성장을 촉진하는 데에 관여하는 성장 인자는 아직 명확히 밝혀지지는 않고 있다. 인간 성인에서 100,000 내지 150,000개의 두피 모발 중에서， 약 90%가 성장기에 있고, 나머지 10% 정도가 휴지기에 있는 것으로 알려져 있다. 그리고， 매일 약 500 내지 1000개의 단단한 모발이 빠지는 것으로 알 려져 있다. 인간의 경우， 모발의 성장속도는 신체 부위에 따라 약간 상이한 데, 두 정부 모발의 경우에는 0.44隱 /일인 데 반해， 턱수염이나 체모의 경우에는 0.27mm/ 일로 알려져 있다. 쥐와 같은 동물의 경우, 모발 사이클 변화가 동기화되어 있어 서， 모든 부위의 모발이 동일한 활동 상태에 있는 것으로 알려져 있다. 쥐의 경우, 모발 성장의 제 1 사이클이 출생 후 빨리 시작하여 생후 약 21일째까지 지속된다. 그리고， 제 2 사이클은 생후 약 35일째 이후에 시작된다. 예전에는 주로 어린 쥐 ( 생후 8일 내지 12일)를 항암제 -유도 탈모증 (alopecia) 모델로 사용해왔다. 제 1 모 발 성장 사이클에 있는 쥐에 항암제 처리를 한 경우, 10일 이내에 완전히 탈모된 것으로 알려져 있다. 이 경우, 제 2 모발 성장 사이클에 이를 때까지는 탈모 상태가 그대로 유지되었다. 따라서， 쥐의 경우， 탈모증으로부터 회복될 때까지 20 내지 30 일이 소요되었다.

탈모 또는 탈모증 (Alopeci a)은 모발이 손실되는 질환이다. 탈모시 모발 손 실은 두피 모발에 한정되지 않으몌 신체 부위 중 어느 부위에서라도 발생할 수 있 다. 탈모증의 종류로는 여러가지가 알려져 있는 데， 예를 들면 원형 탈모증 (alopeci a areata) , 남성형 탈모증 (androgenet ic alopecia) , 폐경기 탈모증 (postmenopausal alopecia) , 여성형 탈모증 ( female pattern alopeci a) , 지루성 탈 모증 (seborrheic alopeci a) , 비강상 탈모증 (alopeci a pi tyroides) , 노인성 탈모 증 (seni le alopeci a) , 항암제 -유발 탈모증， 방사선—유발 탈모증， 발모광 (tr ichot i l lomania)에 기인한 탈모증, 산후 탈모증 (postpartum alopeci a) 등이 있 다. 현재까지 알려져 있는 모발 성장 촉진 치료방법들은 효과가 제한적이거나 부작 용이 있는 것으로 보고되고 있다.

탈모증 자체로는 생명을 위험에 빠뜨리는 것은 아니지만， 외모와 관련되어 심각한 심리적인 스트레스를 가져오기 때문에， 효과적으로 발모를 촉진하고 탈모증 을 개선 및 치료할 수 있으면서도 부작용이 적고 안전한 새로운 치료제 개발이 필 요한상황이다.

【발명의 상세한설명】

【기술적 과제】

이에， 본 발명자들은 AIMP1 단백질의 특정 단편이 생체 내에서 우수한 발모 촉진 효과， 탈모 개선 및 치료 효과를 나타내는 것올 확인하여 본 발명을 완성하였 다. 따라서 본 발명의 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드， 또는 상기 폴리펩티드와서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은，

서열번호 6， 서열번호 7， 서열번호 8， 서열번호 9 , 서열번호 13， 서열번호 14 및 서열번호 15로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징 으로 하는 폴리펩티드， 또는 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아 미노산서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드를 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은， 상기 폴리펩티드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드 를 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은ᅳ

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는, 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약 학적 조성물을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

또한 서 ί번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상올 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈 모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

상기 폴리펩티드가 서열번호 6 , 서열번호 7， 서열번호 8， 서열번호 9， 서열 번호 13 , 서열번호 14 및 서열번호 15로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드인 것을 특징으로 하는， 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉 진용, 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

상기 약학적 조성물에 있어서 미녹시딜 (minoxidi l ) 크로마칼린 (cromakal in)， 피나시딜 (pinacidi l ) , 나미니딜 (naminidi l ) , 디페닐사이클로프로페논 ( d i heny 1 eye 1 opr openone ) , 트리코민 (tr icomin)， 시프로테론 아세테이트 (cyproterone acetate) , 다나졸 (danazol ) , 플루타미드 ( f lutamide)； 피나스테리드 ( f inaster ide) , 투로스테리드 (turoster ide)， LY-191704, MK-306 , 및 두타스테리드 (dutaster ide)로 이루어진 그룹 중에서 선택된 5ᅳ알파 환원효소 억제제 (5-alpha reductase inhibi tors)； 스트리아진 (stri azines) , 벤조피란 (benzopyrans) , 피리 디노피란 (pyr idinopyrans) 및 티안 -1-옥시드 (thi ane-1-oxides)로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 추가로 포함하는 것 을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 즐기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치 료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물올 제공하는 것이 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하 는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 이상올 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성 물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는， 발모촉진용 또는 탈모 예방용 식품용 조성물을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70¾» 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성물을 제공하 는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 h 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성 물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은,

발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료용 제제 를 제조하기 위한, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미 노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것올 특징 으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미 노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리펩티드의 용도를 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리펩티드를 유효성분으로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치 료 방법을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70¾> 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징 으로 하는 발모 촉진용， 모낭 즐기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료 방 법을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하 는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모 _, 낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예 방 및 치료 방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용, 모낭 줄기 ^' 세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

_. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조 성물을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료 용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것 이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공하는 것 이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료용 제제 를 제조하기 위한， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드의 용도를 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은，

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공하는 것이다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공하는 것이다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 조성물의 유효량올 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공하는 것이다.

【기술적 해결방법】

상기 본 발명의 목적을 달성하기 위하여， 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드， 또는 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드를 제공한다. 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서열번호 6, 서열번호 7, 서열번호 8， 서열번호 9， 서열번호 13， 서열번호 14 및 서열번호 15로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징 으로 하는 폴리템티드， 또는 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아 미노산서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드를 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은 상기 폴리펩티드를 암 호화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해, 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약 학적 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것올 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈 모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

상기 약학적 조성물에 있어서 미녹시딜 (minoxidil) 크로마칼린 (cromakalin)， 피나시딜 (pinacidil), 나미니딜 (naminidil), 디페닐사이클로프로페논 ( d i pheny 1 eye 1 opr openone ) , ^ᅵ 트리코민 (tricomin)， ^' 시프로테론 아세테이트 (cyproterone acetate), 다나졸 (danazol), 플루타미드 (f kitamide)； 피나스테리드 (finasteride), 투로스테리드 (turosteride) , LY-191704, MK-306, 및 두타스테리드 (dutasteride)로 이루어진 ᅳ그룹 중에서 선택된 5-알파 환원효소 억제제 (5-alpha reductase inhibitors); 스트리아진 (striazines) , 벤조피란 (benzopyrans) , 피리 디노피란 (pyridinopyrans) 및 티안 -1-옥시드 (thiane-1-oxides)로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 추가로 포함하는 것 을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치 료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어잔 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상올 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 '서열로 이루어진 것올 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성 물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은 .

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개와 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성물을 제공하는 것이 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성물을 제공한 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성 물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는—탈모의 예방 및 치료용 제제 를 제조하기 위한, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미 노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징 으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미 노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리펩티드의 용도를 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70¾> 이상을 가지는 아미노산 서열로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리펩티드를 유효성분으로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치 료 방법을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징 으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료 방 법을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하 는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 즐기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예 방 및 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조 성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료 용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해, 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 :성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해, 본 발명은

발모 촉진용， 모낭줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료용 제제 를 제조하기 위한, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드의 용도를 제공한다. 본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위해， 본 발명은

서멸번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 유효성분으 로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다. 또한서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다. 이하 본 발명올 상세히 설명한다. 본 발명에서 용어 'KEKA 잔기' ， 'KEKA 서열' 또는 'KEKA 영역' 은 상호 호 환적으로 사용될 수 있으며， 서열번호 16， 서열번호 33 , 서열번호 34 또는 서열번 호 35로 표시되는 AIMP1 단백질 전장 아미노산 서열 (ful l length amino acid sequence of AIMP1 protein)에서 33 내지 36번째 아미노산 영역을 의미하는 것으 로， 상기 영역은 본 발명에서 제공하는 발모촉진 활성 단편의 일례인 ΑΙΜΡΓ유래 서열번호 1의 폴리펩티드 (또는 Neo-Pep으로 칭함)를 기준으로 할 때 28 내지 31번 째 아미노산 영역에 해당한다. 이하 본 발명에서 제공하는 폴리펩타이드는 AIMP1 단백질 유래 단편으로서， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA) 영역을 포함하여 발모 촉진 효과 및 모낭의 줄기세포 증식 촉진 효과가 현저히 우수한 것 을 특징으로 한다. AIMP1의 KEKA 영역이 발모 촉진 효과， 모낭의 줄기세포 증식 촉 진 효과， 탈모의 예방, 개선 또는 치료 효과 (용도)에 핵심적이라는 사실은 본 발명 에서 최초로 공개하는 것이다. 따라서， 본 발명은 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번 째 아미노산 (KEKA)을 포함하고, 연속되는 4 내지 21개, 바람직하게는 10개 내지 21 개, 보다 바람직하게는 15개 내지 20개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하 는 폴리펩티드， 또는 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상올 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드를 제공한다.

바람직하게는, 본 발명의 상기 폴리펩티드는 서열번호 6 , 서열번호 7， 서열 번호 8， 서열번호 9， 서열번호 13， 서열번호 14 및 서열번호 15로 이루어진 군에서 선택된 아미노산서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드일 수 있다. 본 명세서에서 용어 "폴리펩티드 (polypeptide)", "펩티드 (peptide)" 및 "단 백질"은 상호 호환성 있게 사용되며， 예컨대， 자연 상태의 단백질에서 일반적으로 발견되는 바와 같이 아미노산 잔기의 중합체를 말한다. 본 명세서에 사용된 아미노산의 일문자 (삼문자)는 생화학 분야에서의 표준 약어 규정에 따라 다음의 아미노산을 의미한다: A(Ala): 알라닌; C(Cys): 시스테 인; D(Asp): 아스파르트산; E(Glu): 글루탐산; F(Phe): 페닐알라닌; G(Gly): 글라 이신; H(His): 히스티딘; I(IIe): 이소류신; K(Lys): 라이신; L(Leu): 류신; M(Met): 메티오닌; N(Asn): 아스파라진; O(Ply): 피를라이신; P(Pro): 프롤린; Q(Gln): 글루타민; R(Arg): 아르지닌; S(Ser): 세린; T(Thr): 쓰레오닌; U(Sec):셀 레노시스테인， V(Val): 발린; Trp): 트립토판; Y(Tyr): 타이로신. 본 발명에서 'AIMPKARS-interacting multi-functional protein 1) 단백질' 은 p43 단백질이라는 이름으로 먼저 알려졌으며 이후 AIMP1으로 재명명되었다 (Kim S.H. et al. , Trends in Biochemical Sciences, 30:569-574, 2005) . AIMPl은 다중- tRNA 합성효소 복합체 (mult i-tRNA synthetase complex)에 결합하여 다중 -tRNA 합성 효소의 촉매 활성 (catalytic activity)을 증진시킨다. 본 발명의 AIMP1 단백질은 당업계에 알려진 것이라면 그 구체적 서열이 특별히 제한되지 않으며， 바람직하게 인간 AIMP1일 수 있다. 상기 AIMP1 단백질의 3가지의 SNP가 알려져 있다 (NCBI SNP 데이터베이스 참조): 전장 AIMP1의 아미노산 서열 (참조: 본원 명세서의 서열번호 33) 중에서 79번째 알라닌 (Ala)이 프를린 (Pro)으로 치환 (SNP Accession No. rs3133166, 서열번호 16); 104번째 트레오닌 (Thr)이 알라닌 (Ala)으로 치환 (SNP Accession No. rs 17036670, 서열번호 34); 117번째 트레오닌 (Thr)이 알라닌 (Ala) 으로 치환 (SNP Accession No. rs2230255, 서열번호 35). 본 발명의 폴리펩티드， 즉 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내 지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루 어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드는 이의 기능적 동등물을 포함한다. 기능적 동 등물이란, 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열과 적어도 70% 이상 (70.0% 내지 99.9%), 바람직하게는 80% 이상 (80.0% 내지 99.9%), 보다 바람직하게는 90% 이상 (90.0% 내지 99.9%)의 서열 상동성 (또는 /동일성 )을 갖는 폴리펩티드를 말한다. 더 욱 바람직하게 상기 기능적 동등물은 KEKA 영역 (서열)은 불변 (constant)인 상태에 서 상기 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열과 적어도 70% 이상， 바람직하게는 80% 이상, 보다 바람직하게는 90% 이상의 서열 상동성 (또는, 동일성 )을 갖는 폴 리펩티드일 수 있다. 예를 들면， 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77 %, 78%, 79%, 80%， 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%， 90%, 91%, 92%, 93%,. 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%의 서열 상동 성을 갖는 폴리펩티드를 포함하는 것으로， 본 발명의 폴리펩티드와 실질적으로 동 질의 생리활성을 나타내는 폴리펩티 H를 말한다. 여기서ᅳ 용어 "실질적으로 "는 특 정 성질의 전체 또는 거의 동일한 정도의 성질을 나타내는 상태를 의미한다. 따라 서, 본원에서 "실질적으로 동질의 생리활성"이란, 모낭 형성을 촉진하거나 모낭의 수를 늘리는 등 발모 촉진， 모낭 줄기세포 증식 촉진, 또는 탈모 예방， 개선 또는 치료 활성을 의미한다.

가장 바람직하게 상기 기능적 동등물은 KEKA 영역 (서열)은 불변 (constant)이 고 9 내지 11의 등전점 (PI)을 가지며， 상기 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열 과 적어도 70% 이상， 바람직하게는 80% 이상， 보다 바람직하게는 90% 이상의 서 열 상동성 (또는， 동일성)을 갖는 폴리펩티드일 수 있다. 본원에서 "상동성 (homology) 또는 동일성 (identity)"은， 폴리펩티드 분자와 같은 중합체 분자간의 전체적인 관련성 (relatedness)을 의미한다. 예를 들면， 2개 폴리펩티드 서열간의 상동성 /동일성 (%)의 계산은， 최적의 비교를 위해 2개의 서열 을 배열하여 수행할 수 있다. 바람직하게는， 비교 목적으로 배열된 서열의 길이는， 기준 서열 (reference sequence)의 길이의 적어도 30% 이상, 적어도 40% 이상， 적 어도 50% 이상, 적어도 60¾> 이상， 적어도 70¾> 이상， 적어도 80% 이상， 적어도 90¾ 이상, 또는 실질적으로 100%일 수 있다. 그리고 나서， 상웅하는 아미노산 부위의 아미노산을 서로 비교한다. 제 1 서열의 부위에 위치한 아미노산이 계 2 서열의 상웅 하는 부위의 아미노산과 동일한 경우， 2개의 서열은 당해 부위에서는 동일성을 가 지는 것이다. 2개 서열의 동일성 (%)은， 2개 서열간의 최적 배열 (optimal alignment)을 위해 도입해야 하는 갭 (gap)의 숫자와 길이를 고려한, 2개 서열에서 공통되는 아미노산을 가지는 부위의 슷자의 함수이다. 2개 서열간의 비교 및 동일 성 (%)의 결정은 수학적인 알고리즘을 통해 수행할 수 있다. 예를 들면, ClustalW (Thompson 외， 1994)를 사용하여 다음의 파라미터를 사용하여 서열 동일성 수치를 측정할 수 있다: 쌍 배열 파라미터 - 방법: 정확성 (accurate), 매트릭스: PAM, 갭 개방 페널티 (Gap open penalty): 10.00, 갭 연장 페널티 (Gap extension penalty): 0.10； 다중 배열 파라미터 ― 매트릭스: PAM, 갭 개방 페널티 (Gap open penalty): 10.00, delay 동일성 (%): 30， 엔드 갭 페널티 부여 (penalize end gaps): on, ¾ 분리 거리 (Gap separation distance)： 0, 네가티브 매트릭스: no, 갭 연장 페널티: 0.20， 잔기 -특정 갭 페널티 (residue-specific gap penalties): on, 친수성 갭 페널티: on, 친수성 잔기: GPS DQEKR. 특정 잔기에서의 서열 동일성 은 단순히 유도체화된 동일한 잔기를 포함한다.

본원에서 용어 "실질적으로 "는 특정 성질의 전체 또는 거의 동일한 정도의 성질을 나타내는 상태를 의미한다. 본원에서 용어 "실질적으로 동일한' '은， 아미노 산 또는 핵산 서열간의 비교와 관련하여 사용되고 있다. 본원 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는, 상웅하는 부위에 등일한 잔기를 가지는 경 우에 2개의 서열은 "실질적으로 동일한" 것으로 이해될 것이다. 당업계에서 잘 알 려져 있는 바와 같이 , 아미노산 또는 핵산 서열은 다양한 종류의 알고리즘을 사용 하여 비교할 수 있는 데, 예를 들면 핵산 서열 비교를 위해서는 BLASTN을， 아미노 산 서열 비교를 위해서는 BLASTP, 갭 (gapped) BLAST, PSI— BLAST와 같은 컴퓨터 프 로그램을 사용할 수 있다. 상기한 컴퓨터 프로그램의 예는 아래 문헌에 기재되어 있다: Altschul 외， Basic local alignment search tool , J. Mol. Biol., 215(3)： 403-410, 1990； Altschul 외， Methods in Enzymology\ Altschul et al., Nucleic Acids Res. 25:3389-3402, 1997； Baxevanis 외， Bioinfor atics: A Practical Guide to the Analysis of Genes and Proteins, Wiley, 1998； 및 Misener 외， (eds. ) , Bioinforma t ics Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology, Vol. 132), Humana Press, 1999. 동일한 서열을 검색하는 것 이외에， 상기한 컴퓨 터 프로그램에서는 통상적으로 서열 동일성의 정도 (degree of identity)를 제공해 준다. 2개의 서열에 있어서， 일정 길이의 잔기에 걸쳐 상응하는 부위의 잔기 (residue) 중 적어도 70%, 바람직하게는 적어도 80% 이상, 적어도 85% 이상， 적어 도 90% 이상， 적어도 91% 이상， 적어도 9 이상， 적어도 93% 이상， 적어도 94% 이 상， 적어도 95% 이상， 적어도 96% 이상， 적어도 97% 이상， 적어도 98¾> 이상， 적어 도 99% 이상이 동일한 경우에 "실질적으로 동일한" 서열인 것으로 간주된다. 바람 직하게는， 상기한 "일정 길이의 잔기"는 적어도 1, 2， 3, 4， 5, 6， 7, 8, 9， 10， 11, 12, 13, 14, 15, 16， 17, 18, 19， 20, 21， 22， 23， 24, 25， 26， 27， 28, 29， 30, 31， 32, 33, 34， 35, 36, 37,38, 39， 40， 41, 42, 43， 44， 45， 50， 55, 60, 65, 70， 75， 80， 85， 90， 95, 100， 105, 110, 115， 120, 125, 130, 135, 140, 145， 150, 155, 160， 165， 160, 165， 170, 175, 180, 185, 190, 195， 200， 205， 210, 215, 220, 225, 230， 235, 240, 245, 250， 255, 260， 265, 270， 275， 280， 285, 290， 295, 300 또는 그 이상의 잔기일 수 있다.

본원에서 상기 용어 "상웅하는' '은 소정의 폴리펩티드의 아미노산 잔기의 위 치 (posit ion)/정체 (identity)를 결정하는 데에 종종 사용된다. 통상의 기술자라면, 폴리펩티드 내의 잔기는 기준 펩티드 (reference-related polypeptide)에 기초한 원형 숫자 시스템 (canonical numbering system)을 사용하여 종종 지정된다. 따라 서, 예를 들어 제 190번째 위치의 잔기에 "상응하는" 아미노산은 특정 아미노산 쇄 에서 반드시 제 190번째 위치에 있을 필요는 없으며， 통상의 기술자라면 "상웅하는" 아미노산을 확인하는 방법에 대해서 쉽게 이해할 수 있다.

상기 "기능적 동등물 "은 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열 중 일부가 부가, 치환 또는 결실의 결과로 생성된 것일 수 있다. 상기에서 아미노산의 치환은 바람직하게는 보존적 치환이다. 천연에 존재하는 아미노산의 보존적 치환의 예는 다음과 같다: 지방족 아미노산 (Gly, Ala, Pro), 소수성 아미노산 (lie, Leu, Val), 방향족 아미노산 (Phe, Tyr, Trp), 산성 아미노산 (Asp, Glu), 염기성 아미노산 (His, Lys, Arg, Gin, Asn) 및 황 함유 아미노산 (Cys, Met). 또한 상기 기능적 동등물에 는 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열상에서 아미노산의 일부가 결실된 변형체 도 포함된다. 상기 아미노산의 결실 또는 치환은 바람직하게는 본 발명의 폴리펩티 드의 생리활성에 직접적으로 관련되지 않은 영역에 위치해 있다. 본 발명에서 생리 활성에 직접적으로 관련된 영역은 KEKA 영역이며， 상기 결실 또는 치환은 상기 여 역 이외의 부분에 위치하는 것일 수 있다. 아울러 상기 본 발명의 폴리펩티드의 아 미노산 서열의 양 말단 또는 서열 내에 몇몇의 아미노산이 부가된 변형체도 포함된 다. 또한， 본 발명의 기능적 동등물의 범위에는 본 발명에 따른 단백질의 기본 골 격 및 이의 생리활성을 유지하면서 단백질의 일부 화학 구조가 변형된 단백질 또는 폴리펩티드 유도체도 포함된다. 예를 들어， 본 발명의 단백질의 안정성， 저장성， 휘발성 또는 용해도 등을 변경시키기 위한 구조변경이 이에 포함된다.

본 명세서에서 서열 상동성 및 동질성은 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열과 후보 서열을 정렬하고 갭 (gap)을 도입한 후 본 발명의 폴리펩티드의 아미노 산 서열에 대한 후보 서열의 아미노산 잔기의 백분율로서 정의된다. 필요한 경우， 최대 백분율 서열 동질성을 수득하기 위하여 서열 동질성의 부분으로서 보존적 치 환은 고려하지 않는다. 또한, 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열의 N-말단, C- 말단 또는 내부 신장, 결손 또는 삽입은 서열 동질성 또는 상동성에 영향을 주는 서열로서 해석되지 않는다. 또한, 상기 서열 동질성은 두 개의 단백질 또는 폴리펩 티드의 아미노산 서열의 유사한 부분을 비교하기 위해 사용되는 일반적인 표준 방 법에 의해 결정할 수 있다. BLAST또는 이와 같은 컴퓨터 프로그램은 두 개의 단백 질 또는 폴리펩티드를 각각의 아미노산이 최적으로 매칭되도록 정렬한다 (하나 또는 두 서열의 전장 서열을 따라 또는 하나 또는 두 서열의 예측된 부분을 따라) . 상기 프로그램은 디폴트 오프닝 페널티 (defaul t opening penal ty) 및 디폴트 갭 페널티 (default gap penalty)를 제공하며 컴퓨터 프로그램과 함께 연계되어 사용될 수 있 는 PAM250 (표준 스코링 매트락스; Dayhof f et al . , in At las of Protein Sequence and Structure , vol 5, supp 3 , 1978)와 같은 스코링 매트릭스를 제공한다. 예를 들어, 백분율 동질성은 다음과 같이 계산할 수 있다. 일치하는 서열 ( ident i cal mat d es)의 총 수에 100을 곱한 다음 대응되는 스팬 (matched span) 내의 보다 긴 서열의 길이와 두 서열을 정렬하기 위해 보다 긴 서열 내로 도입된 갭 (gaps)의 수 의 합으로 나눈다. 본 발명의 폴리펩티드는 유전공학적 방법에 의해 작제될 수 있다. 우선， 통 상적인 방법에 따라 본 발명의 폴리펩티드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열을 작제한다. 폴리뉴클레오티드 서열은 예를 들면， 인간 AIMP1 유전자를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 주형으로 적절한 프라이머를 사용하여 PCR 증폭함으로써 작제 할 수 있다. 다른 방법으로 당업계에 공지된 표준 방법에 의해， 예컨대， 자동 DNA 합성기 (Biosearch 또는 Appl ied Biosys terns 사에서 판매하는 것)를 사용하여 DNA 염기서열을 합성할 수도 있다. 작제된 폴리뉴클레오티드 서열은 이 폴리뉴클레오티 드와 작동가능하게 연결되어 (operat ively l inked) 그 폴리뉴클레오티드 염기 서열 의 발현을 조절하는 하나 또는 그 이상의 발현 조절 서열 (expression control sequence) (예: 프로모터， 인핸서 등)을 포함하는 백터에 삽입시키고， 이로부터 형 성된 재조합 발현 백터로 숙주세포를 형질전환시킨다. 생성된 형질전환체를 상기 DNA 서열이 발현되도록 하기에 적절한 배지 및 조건 하에서 배양하여, 배양물로부 터 상기 DNA 서열에 의해 코딩된 실질적으로 순수한 단백질을 회수한다. 상기 회수 는 당업계에 공지된 방법 (예컨대, 크로마토그래피)을 이용하여 목적 펩티드를 분리 (단리) 또는 / 및 정제하는 것을 의미한다.

상기에서 "실질적으로 순수한 폴리펩티드 또는 단백질 "이라 함은 본 발명에 따른 단백질 숙주세포로부터 유래된 어떠한 다른 단백질도 실질적으로 포함하지 않 는 것을 의미한다. 본 발명의 단백질 합성을 위한 유전공학적 방법은 다음의 문헌 을 참고할 수 있다: Maniatis et al .， Molecular Cloning; A laboratory Manual , Cold Spring Harbor laboratory, 1982； Sambrook et al . , supra; Gene Expression Technology, Method in Enzymology, Genetics and Molecular Biology, Method in Enzymology, Guthrie & Fink (eds.), Academic Press, San Diego, Calif, 1991； 및 Hitzeman et al . , J. Biol. Chem. , 255:12073-12080, 1990.

또한， 본 발명의 폴리펩티드는 해당분야에 공지된 기술로 화학적으로 합성할 수 있다 (Creightwi, Proteins: Structures and Molecular Principles, W.H. Freeman and Co., NY (1983)). 즉， 본 발명의 폴리펩티드는 통상의 단계적인 액체 또는 고체상 합성， 단편 웅축, F-M0C 또는 T-B0C 화학법을 이용하여 제조할 수 있 다 (Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins, Williams et al., Eds. , CRC Press, Boca Raton Florida, (1997)； A Practical Approach, At her ton & Sheppard, Eds. , IRL Press, Oxford, England, (1989)). 바람직한 제 조방법은 고체상 합성방법 (solid phase synthesis)을 이용하는 것이다. 본 발명의 폴리펩티드는 보호된 아미노산간의 웅축반웅 (condensation reaction)에 의하여 통 상의 고체상 방법으로， C-말단으로부터 시작하여 규명된 아미노산 서열에 따라 순 차적으로 진행하면서 합성할 수 있다. 웅축 반응 후 보호기 및 C-말단 아미노산이 연결된 담체를 산분해 (acid decomposition) 또는 아미놀리시스 (aminolysis)와 같 은 공지의 방법에 의해 제거할 수 있다. 상기 언급된 펩티드 합성법은 관련 서적에 상세히 기술되어 있다 (Gross and Meienhofer ' s, The Peptides, vol 2., Academic Press, 1980) .

유전공학적 방법에 의해 제조된 단백질 또는 화학적으로 합성된 단백질은 예 를 들면 추출법, 재결정법, 다양한 크로마토크래피 (겔 여과법, 이온 교환， 침전, 흡착， 역전상), 전기영동， 역류 분배법 등 당껍계에 공지된 방법으로 분리 및 정제 할수 있다. _. 또한, 본 발명은 본 발명의 폴리펩티드, 즉 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미 노산을 포함하는 폴리펩티드를 암호화 (coding)하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 상기 폴리뉴클레오티드는 전술한 본 발명의 폴리펩티드를 암호화하는 것이라면 그 염기 구성이 특별히 제한되지 않는다. 바람직하게는, 본 발명의 폴리펩티드를 암호 화하는 폴리뉴클레오티드는， 서열번호 22(서열번호 6의 N5 폴리펩티드를 암호화)， 서열번호 23(서열번호 7의 N6 폴리펩티드를 암호화)， 서열번호 24(서열번호 8의 N7 폴리펩티드를 암호화) , 서열번호 25(서열번호 9의 N8 폴리펩티드를 암호화)， 서열 번호 29(서열번호 13의 N12 폴리펩티드를 암호화) , 서열번호 30(서멸번호 14의 N13 폴리펩티드를 암호화)， 및 서열번호 31(서열번호 15의 N14 폴리펩티드를 암호화)로 이루어진 군에서 선택된 염기 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티 드일 수 있다. 본 명세서에서 "폴리뉴클레오티드" , 핵산은 단일 -가닥 또는 이중-가닥의 형 태로 된 데옥시리보뉴클테오티드 (DNA) 또는 리보뉴클레오티드 (RNA)를 말한다. 다른 제한이 없는 한， 자연적으로 생성되는 뉴클레오티드와 비슷한 방법으로 핵산에 흔 성화되는 자연적 뉴클레오티드의 공지된 아날로그도 포함된다. 또한 본 발명은, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것올 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이 상을 유효성분으로 포함하는, 발모 촉진용 모낭 줄기세포 증식 촉진용 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70¾ 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것올 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용, 모낭 즐기세포 증식 촉진용, 또는 탈 모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 바람직하게， 본 발명의 약학적 조성물에서 상기 폴리펩티드는 서열번호 6， 서열번호 7， 서열번호 8 , 서열번호 9， 서열번호 13 , 서열번호 14 및 서열번호 15로 이루어진 군에서 선택된 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드일 수 있다. 또한 본 발명은， 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티 드를 유효성분으로 포함하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모 예방 및 치료용 약학적 조 성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용, 또는 탈모 예방 및 치료 용 약학적 조성물을 제공한다. , 본 명세서에서 "모발''은 두발, 머리카락， 안면 모발 및 /또는 체모를 의미하 며， 이는 두발， 속눈썹, 눈썹， 콧수염， 턱수염, 귀털， 코털， 가슴털, 음모， 보조 모발 등을 광범위하게 포함하며 , 이에 한정되지 않는다.

본 명세서의 "발모 촉진"은 이미 생성된 모발의 성장 뿐만 아니라 모낭으로 부터 모발 생성 및 성장을 촉진하는 것을 포함하는 것으로서， 모낭 형성 촉진, 모 낭의 구조적 안정화와 영양분과 산소 공급의 원활화， 새로운 모발 주기의 성장기의 더욱 빠른 유도 및 /또는 모발 주기의 주 성장기 (생장기 )의 연장 및 /또는 모발의 성 장 속도의 증가 및 /또는 모간의 폭의 증가 등을 모두 포괄하며， 이는 모발 성장의 유도 또는 개선， 그리고 이것이 눈에 더 잘 보이게 하는 것을 포함하지만， 이에 한 정되지 않는다.

본 명세서에서 "탈모 또는 탈모증 (alopecia) "은， 모발손실의 구체적인 생물 학적 메카니즘에 상관없이， 모발 손실이 발생하는 모든 증상을 포괄하는 의미로 사 용된다. 본 명세서에서 "탈모 예방 및 치료' '은 모발 손실의 예방, 개선 및 치료를 총칭하는 광범위한 의미로 사용된다.

본 발명에 따른 폴리펩티드는 그 자체 또는 염, 바람직하게는 약학적으로 허 용가능한 염의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명에서 "약학적으로 허용가능한"이란 생리학적으로 허용되고， 인간에게 투여될 때 활성성분의 작용을 저해하지 않으며， 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반웅 또는 이와 유사한 부작용을 일으키지 않는 것을 말한다. 상기 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산 ( free acid)에 의하여 형성된 산 부가염이 바람직하며， 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있다. 상기 유기산은 이에 제한되는 것은 아니나， 구연산 초산, 젖산， 주석산, 말레인산 푸마르산， 포름산， 프로피온산， 옥살산， 트리플로오로아세트산， 벤조산， 글루콘산， 메타술폰산， 글리훌산, 숙신산， 4-를루엔술폰산， 글루탐산 및 아스파르트산을 포함한다. 또한 상기 무기산은 이에 제한되는 것은 아니나， 염산， 브롬산， 황산 및 인산을 포함한다.

본 발명의 약학적 조성물은 본 발명의 폴리펩티드의 발모 촉진 및 /또는 탈모 예방 및 차료 효과를 위해 약학적으로 허용되는 담체와 함께 당업계에 공지된 방법 으로 투여 경로에 따라 다양하게 제형화될 수 있다. 상기 담체로는 모든 종류의 용 매, 분산매질, 수중유 또는 유중수 에멀견, 수성 조성물， 리포좀, 마이크로비드 및 마이크로좀이 포함된다.

투여 경로로는 경구적 또는 비경구적으로 투여될 수 있다. 비경구적인 투여 방법으로는 이에 한정되지는 않으나 정맥내， 근육내， 동맥내， 골수내， 경막내， 심 장내, 경피， 피하， 복강내, 비강내， 장관 국소， 설하 또는 직장내 투여일 수 있 다.

본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여하는 경우 본 발명의 약학적 조성물은 적합한 경구 투여용 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립， 정제， 환제, 당의정제， 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제， 현탁액, 웨이퍼 등의 형태로 제형화 될 수 있다. 적합한 담체의 예로는 락토즈， 덱스트로즈， 수크로즈， 솔비를， 만니 틀， 자일리를， 에리스리를 및 말티를 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등올 포함하는 전분류， 샐를로즈， 메틸 셀를로즈， 나트륨 카 르복시메틸셀를로오즈 및 하이드록시프로필메틸샐를로즈 등을 포함하는 셀를로즈 류， 젤라틴， 폴리비닐피를리돈 등과 같은 층전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈， 한천， 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해 제로 첨가할 수 있다. 나아가, 상기 약학적 조성물은 항웅집제， 윤활제， 습윤제， 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

또한， 비경구적으로 투여하는 경우 본 발명의 약학적 조성물은 적합한 비경 구용 담체와 함께 주사제, 경피 투여제 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화될 수 있다. 상기 주사제의 경우에는 반드시 멸균되어야 하며 박테리아 및 진균과 같은 미생물의 오염으로부터 보호되어야 한다. 주사제의 경우 적합한 담체와 예로는 이에 한정되지는 않으나， 물, 에탄을, 폴리올 (예를 들어, 글 리세를， 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) , 이들의 흔합물 및 /또는 식물유를 포함하는 용매 또는 분산매질일 수 있다. 보다 바람직하게는, 적합한 담 체로는 행크스 용액， 링거 용액， 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buf fered sal ine) 또는 주사용 멸균수， 10% 에탄올， 40%프로필렌 글리콜 및 5 ) 덱 스트로즈와 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 상기 주사제를 미생물 오염으로 부터 보호하기 위해서는 파라벤， 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산， 티메로살 등과 같 은 다양한 항균제 및 항진균제를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 주사제는 대 부분의 경우 당 또는 나트륨 클로라이드와 같은 등장화제를 추가로 포함할 수 있 다.

경피 투여제의 경우 연고제 크림제, 로션제， 겔제， 외용액제， 파스타제， 리 니멘트제， 에어를제 등의 형태가 포함된다. 상기에서 경피 투여는 약학적 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학적 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다. 예컨대, 본 발명의 약학적 조성.물을 주사형 제형으 로 제조하여 이를 30 게이지의 가는 주사 바늘로 피부를 가볍게 단자 (pr ick)하거나 피부에 직접적으로 도포하는 방법으로 투여될 수 있다. 이들 제형은 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 ,문헌 (Remington' s Pharmaceut ical Science , 15th Edi t ion, 1975, Mack Publ i shing Company , East on, Pennsylvani a)에 기술되어 있 다.

흡입 투여제의 경우, 본 발명에 따라 사용되는 화합물은 적합한 추진제， 예 를 들면， 디클로로플루오로메탄， 트리클로로플루오로메탄， 디클로로테트라플루오로 에탄， 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체를 사용하여， 가압 팩 또는 연무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 편리하게 전달할 수 있다. 가압ᅳ에어로졸의 경우, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브를 제공하여 결정할 수 있다. 예를 들면， 흡입기 또는 취입기에 사용되는 젤라틴 캡슐 및 카트리지는 화합물 및 락토오즈 또는 전분 과 같은 적합한 분말 기제의 분말흔합물을 함유하도록 제형화할 수 있다.

그 밖의 약학적으로 허용되는 담체로는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다 (Remingt이！' s Pharmaceut ical Sciences , 19th ed. , Mack Publ i shing Company, East on, PA, 1995) .

또한 본 발명에 따른 약학적 조성물은 하나 이상의 완충제 (예를 들어， 식염 수 또는 PBS) , 카보하이드레이트 (예를 들어， 글루코스， 만노즈， 슈크로즈 또는 덱 스트란)， 항산화제， 정균제, 킬레이트화제 (예를 들어， EDTA 또는 글루타치온)， 아 쥬반트 (예를 들어 알루미늄 하이드록사이드)， 현탁제 농후제 및 /또는 보존제를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속， 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 당업계에 공지된 방법을 사용하여 제형 화될 수 있다.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 투여하거나， 탈모 예방 또는 발 모 촉진 효과가 있는 공지의 화합물과 병용하여 투여할 수 있다. 이러한 병용 치료 (combinat ion therapy)는， 동일한 조성물 내에 포함시키거나 동시에 투여하는 방식 이 포함되며， 본 발명의 폴리펩티드를 하나 이상의 다른 탈모 치료 /발모 촉진제를 이용한 치료 과정에 1회 이상 투여하는 것을 포함하며， 이에 한정되는 것이 아니 다.

본원에서 "투여 형태" 또는 "단일 투여 형태' '는， 치료할 환자를 위한 치료 단백질의 물리적으로 개별적인 유닛 (physical ly discrete uni t )을 의미한다. 각 치료 유닛은, 목적하는 치료 효과를 나타낼 수 있도록 미리 계측된 양의 활성 물질 을 포함한다. 하지만， 치료 조성물의 총 투여량은 충분한 의료적인 판단내에서 담 당 의사에 의해 결정된다.

본 발명의 폴리펩티드 또는 본 발명의 폴리펩티드를 포함하는 약학적 조성물 과 병용하여 추가적으로 사용할 수 있는 탈모 예방또는 발모 촉진 효과가 씼는 공 지의 화합물의 예로는， 미녹시딜 (minoxidi l ) 크로마칼린 (cromakal in)， 피나시딜 (pinacidi l ) , 나미니딜 (naminidi l ) , 디페닐사이클로프로페논

( d i pheny 1 eye 1 opr openone ) , 트리코민 (tr icomin) , 시프로테론 아세테이트 (cyproterone acetate) , 다나졸 (danazol ) , 플루타미드 ( f lutamide)； 피나스테리드 ( f inaster ide) , 투로스테리드 (turoster ide) , LY-191704, MK-306 , 및 두타스테리드 (dutaster ide)로 이루어진 그룹 중에서 선택된 5-알파 환원효소 억제제 (5-alpha reductase inhibi tors)； 스트리아진 (str iazines) , 벤조피란 (benzopyrans) , 피리 디노피란 (pyr idinopyrans) 및 티안 -1-옥시드 (thiane-1-oxides)로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 포함되며， 이에 한정 되는 것은 아니다. 또한 본 발명은， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것올 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이 상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성 물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한 다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성 물올 제공한다. 바람직하게， 본 발명의 화장료 조성물에서의 폴리펩티드는 서열번호 ₆ ， 서열 번호 7， 서열.번호 8， 서열번호 9， 서열번호 13 , 서열번호 14 및 서열번호 15로 이 루어진 군에서 선택된 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드일 수 있다. 또한 본 발명은, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티 드를 유효성분으로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물 을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으 로도 제조될 수 있으며， 본 발명의 폴리펩티드 이외에도 피부과학적으로 허용 가능 한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적 용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.

또한， 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명에 따른 폴리템티드 외에 추가로 지방 물질， 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제， 연화제， 항산화제， 현탁화제， 안정화제， 발포제 ( foaming agent ) , 방향제, 계면활성제, 물， 이온형 또는 비이온형 유화제， 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제， 보존제， 비타민, 차단제， 습윤 화제, 필수 오일, 염료， 안료， 친수성 또는 친유성 활성제， 지질 소낭 또는 화장품 에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에 서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부과 학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

적합한 화장료 조성물의 제형으로는 예를 들면 용액， 겔, 고체 또는 반죽 무 수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀견， 현탁액， 마이크로에멀견， 마이크 로캡슐， 미세과립구 또는 이온형 (리포좀) , 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 뇨림, 스킨, 로션, 파우더， 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱 ( onceal st i ck)의 형태로 제 공될 수 있다. 또한， 포말 (foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물을 첨가할 수 있는 제 품으로는 이에 한정되는 것은 아니나 스킨로션， 스킨 소프너 , 스킨토너 , 수렴화장 수, 유연화장수, 영양화장수, 아스트린젠트， 로션, 밀크로션， 모이스처 로션， 영양 로션, 바디크림， 마사지크림， 영양크림， 모이스처 크림， 핸드크림 , 에센스， 영양에 센스, 팩, 비누， 샴푸， 클렌징품， 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 트리트먼트， 미용액， 유액， 프레스파우더, 루스파우더， 아이새도 등의 제형을 포함 한다.

상기 본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 본 발명의 폴리펩티드의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 50 중량 ¾>, 바람직하게는 0.01 내지 10 중량 %범위로 함유될 수 있다. 또한 본 발명은, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이 상을 유효성분으로 포함하는， 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성 물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성물을 제공한 다. ᅳ

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 h 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품용 조성 물을 제공한다. 바람직하게， 본 발명의 식품용 조성물에서의 폴리펩티드는 서열번호 ₆ ， 서열 번호 7， 서열번호 8, 서열번호 9， 서열번호 13 , 서열번호 14 및 서열번호 15로 이 루어진 군에서 선택된 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드일 수 있다. 또한 본 발명은， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티 드를 유효성분으로 포함하는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 발모촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 발모 촉진용 또는 탈모 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 식품용 조성물은 기능성 식품 ( funct ional food) , 영양 보조 제 (nutri t ional supplement ) , 건강식품 (heal th food) 및 식품 첨가제 ( food addi t ives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형들은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 식품용 조성물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나， 과립화， 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한， 본 발명의 식품용 조성물은 발모 촉진 또는 탈모 예방이나 개선의 효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활 성 성분과 함께 흔합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. 또한， 기능성 식품으로 는 음료 (알콜성 음료 포함)， 과실 및 그의 가공식품 (예: 과일 통조림， 병조림， 잼 ， 마아말레이드 등) , 어류， 육류 및 그 가공식품 (예: 햄， 소시지콘비이프 등)， 빵 류 및 면류 (예: 우동, 메밀국수， 라면， 스파게티， 마카로니 등) , 과즙， 각종 드링 크， 쿠키， 엿， 유제품 (예: 버터， 치이즈 등)， 식용식물유지， 마아가린, 식물성 단 백질， 레토르트 식품， 넁동식품， 각종 조미료 (예: 된장, 간장， 소스 등) 등에 본 발명의 식품용 조성물을 첨가하여 제조할 수 있다.

본 발명의 폴리펩티드의 식품용 조성물의 바람직한 함유량으로는， 이에 한정 되지 않지만， 바람직하게는 최종적으로 제조된 식품 중 0.01 내지 50 중량 ¾ 이다. 본 발명의 식품용 조성물을 식품첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농 축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명은, 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예 방 및 치료용 제제를 제조하기 위한， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이 루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이 상올 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선 택된 하나 이상의 폴리펩티드의 용도를 제공한다. 또한 본 발명은， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으≤ 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이 상의 폴리템티드를 유효성분으로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개 체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 즐기세포 증식 촉진용, 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)올 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징 으로 하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방 법을 제공한다.

또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 4 내지 21개의 아미노산으로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드와 서열 상동성 70% 이상을 가지는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 중에서 선택된 하나 이상의 폴리 펩티드로 필수적으로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하 는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예 방 및 치료 방법을 제공한다. 또한 본 발명은, 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예 방 및 치료용 제제를 제조하기 위한， 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루 어진 폴리펩티드의 용도를 제공한다. 또한 본 발명은， 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티 드를 유효성분으로 포함하는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다.

또한서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로 구성되 는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용, 모낭줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다. 또한 서열번호 1로 표시되는 아미노산서열로 이루어진 폴리펩티드로 필수적 으로 구성되는 조성물의 유효량을 이를 필요로하는 개체에 투여하는 것을 특징으로 하는 발모 촉진용， 모낭 줄기세포 증식 촉진용， 또는 탈모의 예방 및 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 상기 '유효량' 이란 개체에게 투여하였을 때， 모발 성장 촉진 및 염증의 개선， 치료, 예방 효과를 나타내는 양을 말하며， 상기 '개체' 란 동물， 바 람직하게는 포유동물, 특히 인간을 포함하는 동물일 수 있으며, 동물에서 유래한 세포, 조직, 기관 등일 수도 있다. 상기 개체는 상기 S과가 필요한 환자 (pat ient ) 일 수 있다. 본 발명의 상기 '제제 또는 조성물' 은 식품 조성물, 화장료 조성물， 약학적 조성물 등의 형태일 수 있으며 이는 전술한 바와 같다. 본 발명의 용어 '~을 포함하는 (compri sing)' 이란 '함 으로 하는' 과 동일하게 사용되며， 조성물 또는 방법에 있어서， 언급되지 않은 추 가적인 성분 요소 또는 방법 단계 등을 배제하지 않는다 . 용어 '〜로 구성되는

(consi st ing of ) ' 이란 별도로 기재되지 않은 추가적인 요소, 단계 또는 성분 등을 제외하는 것을 의미한다. 용어 '필수적으로 구성되는 (essent i al ly consist ing of ) ' 이란 조성물 또는 방법의 범위에 있어서, 기재된 성분 요소 또는 단계와 더불어 이의 기본적인 특성에 실질적으로 영향을 미치지 않는 성분 요소 또는 단계 등을 포함하는 것을 의미한다.

【발명의 효과】

따라서， 본 발명은 신규한 AIMP1 단백질의 단편과 이를 유효성분으로 포함하 는 발모 촉진용 또는 탈모 예방， 개선， 치료용 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 신규한 폴리펩티드 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물은 발모를 향상시키므로, 탈모 개선 및 방지， 발모 촉진에 유용하게 이용될 수 있다.

【도면의 간단한 설명】

도 1에서, 도면의 상단부는 본 발명의 폴리펩티드의 생체 내 발모 촉진 효과 를 확인하기 위한 마우스 실험의 개요를 나타내며， 도면의 하단부는 실험 시작 전 (Day 0) 마우스의 등 피부의 털을 제거한 모습 (왼쪽 패널)과 약 2주 후 (Day 13)에 서의 털이 자관 모습 (오른쪽 패널)의 사진도를 보여준다 [대조군 (Con) : 20% Glycerol /PBS; 3% Minoxidi l (MM, 140mM)； Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴 리펩티드, ΙΟΟηΜ)； FGF7 ( ΙΟΟηΜ) ] . 도 2에서, 도면의 좌측부에서는 탈모후 Dayl3에서의 대조군 마우스와 Neo- Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드) 투여군 마우스에서의 모발 생장을 비교 하기 위해 위상차 현미경을 통해서 관찰한 피부 조직 및 모낭 부위의 횡단면 및 종 단면을 보여주고, 도면의 우측부에서는 성장기 모낭세포 수와 진피층 두께를 상호 정량적으로 비교한 그래프로 보여준다. 도 3에서는， 탈모후 Day 6에서의 대조군 마우스와 Neo-Pep 폴리펩티드 (서열 번호 1의 폴리펩티드) 투여군 마우스에서의 모발 생장을 비교하기 위하여 위상차 현미경을 통해서 관찰한 피부 조직 및 모낭 부위의 횡단면을 보여준다. BrdU (세포 증식 마커) , β -catenin (모낭 세포와시그널링 마커) , Cytokerat in 15 (모낭 줄기 세포 마커)의 증식 결과를 통해 알 수 있는 바와 같이， Neo-Pep 폴리펩티드 (서열 번호 1의 폴리펩티드) 투여군 마우스에서 모발 성장기 (anagen phase)가 대조군 마 우스에 비해 보다 일찍 시작된다는 점을 확인할 수 있다. [대조군 (Con): 20% Glycerol/PBS; Neo-Pep폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드， ΙΟΟηΜ)]. 도 4는， Neo— Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드)가 농도 의존적 (InM, ΙΟ ^η Μ, ΙΟΟηΜ, ΙΟΟΟηΜ 사용)으로 CD34+ 모낭 줄기세포 (hair follicle stem cell)의 증식을 유도한다는 것올 보여주는 In vitro assay 결과 그래프이다. 도 5는， Ne으 Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드， ΙΟΟηΜ)가 β -cat en in 경로를 통해 CD34+ 모낭 줄기세포 (hair follicle stem cell)의 증식을 유도함을 보여주는 In vitro assay 결과 그래프로서, 본 발명 폴리펩티드의 처리에 의하여 β-catenin의 표적 유전자인 AXIN, CD44 및 TCF7의 mRNA 발현량이 증가됨을 보여준 다 [대조군 (Con): 20% Glycerol/PBS; Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티 드， ΙΟΟηΜ)]. 도 6는， 피부이식세포-유도된 원형 탈모증. (alopecia areata)을 가진 C3H/HeJ 마우스를 이용하여 발모 촉진 효과를 확인한 사진도이다. [대조군 (Control-treated mice, 100 ^의 20% glycerol/PBS); Neo-Pep 폴리펩티드 투여군 (Pepti de-treated mice, 100 ^의 20% glycerol/PBS 중 ΙΟΟηΜ Neo-Pep 폴리펩티드 ( 서열번호 1)] 도 7은, 피부이식세포-유도된 원형 탈모증 (alopecia areata)을 가진 C3H/HeJ 마우스의 피부조직 절편에서의 모낭의 상태 및 염증 유무를 확인한 사진도 이다. [대조군 (Control-treated mice, 100 ^의 20% glycerol/PBS); Neo-Pep 폴리 펩티드 투여군 (Peptide-treated mice, 100 의 20% glycerol/PBS 증 ΙΟΟηΜ Neo- Pep 폴리펩티드 (서열번호 1)] 도 8은， 본 발명에 따른 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)， 및 이의 19개 또 는 20개의 아미노산으로 이루어진 단편 N1 (서열번호 2)， N2 (서열번호 3)， N3 (서 열번호 4), N4 (서열번호 5)， N5 (서열번호 6)， N6 (서열번호 7)， N7 (서열번호 8) 및 N8 (서열번호 9)의 CD34+ 모낭 줄기세포 (hair follicle stem cell)의 증식효과 여부를 확인하기 위한 In vitro Assay 결과 그래프이다 (각 펩티드는 100 nM씩 처리 됨 ). 도 9는, 본 발명에 따른 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 단편 (15개의 아 미노산으로 이루어진 15mer)인 N9 (서열번호 10), N10 (서열번호 11)， Nil (서열번 호 12)， N12 (서열번호 13), N13 (서열번호 14)， 및 N14 (서열번호 15)의 생체내 발모촉진 효과를 확인한 사진도이다. [대조군 (Con): 20% Glycerol /PBS; 3% Minoxidil (丽 X， 140 mM); N9 내지 N14 폴리펩티드 단편 (서열번호 10 내지 15; 100 nM)].

【발명의 실시를 위한 형태】

이하본 발명을 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실 시예에 한정되는 것은 아니다.

[실험 방법] ,

생체 내 실험 (In vivo study)

마우스 (C57BL6 7주령 수컷， Orient Bio Inc.에서 구입)의 등 피부의 털을 이 발기 (clipper)로 잘라내고, 제모 크림 (Niclean, 일동제약)을 발랐다. 제모된 부위 는 약 2x2.5cm이다. 그리고 나서, 대조군으로서 20¾> glycerol /PBS (Con)를 사용하 고， 실험군으로서 3% Minoxidil (墜， 140mM) , FGF7 (100nM), 본 발명의 폴리펩티 드 "Neo-Pep" (서열번호 1의 폴리펩티드， 100nM)를 13일 동안 1일 1회 80μ1씩 붓 으로 도포하였다 (각 군당 n=6). 해마톡실린-에오신 (H&E) 염색

C57BL6 7주령 수컷 마우스 (Orient Bio Inc.에서 구입)의 피부 샘플을 채취 하여 , OCT compound Tissue— Tek)를 사용하는 동결 주형 (cryomold) 내에 넣은 후, - 80 ^° C 동결기에 저장하였다. Microm HM 525 (Thermo Scientific)로 조직절편을 만든 후， 슬라이드 글래스에 준비된 피부 절편을 4% 파라포름알데하이드로 10분간 고정 시키고, PBS로 5분씩 2회 세척한 뒤， 50μ1의 헤마톡실린 용액 (Sigma Aldrich)으로 6분간 염색하고, 물과 PBS로 5분간 세척하였다. 그리고나서, 에오신 (Sigma Aldrich)으로 염색하고， 물로 짧게 그리고 PBS로 5분간, 95¾> 에탄올 및 100% 에탄 올로 각각 두 번씩 짧게 세척하였다. 자일렌 (Xylene, Duksan)으로 2분씩 2번 처리 한후, 염색된 조직 절편을 커버 슬라이드로 덮어 고정하였다. 증식 어세이 (proliferation assay)를 위한 CD34+ 세포 분리

C57BL6 7주령 수컷 마우스 (Orient Bio Inc.에서 구입)의 등 피부의 털을 이 발기 (clipper)로 잘라내고， 마우스의 제모된 등 부위의 피부 조직 샘플을 채취하였 다. 체취된 피부조직 샘플을 collagenase, DNase I， Hyaluronidase를 이용하여 배

_ TM

지내에 침지시키고， Gentle MACS Dissociator (Miltenyi Biotec)를 사용하여 세포 들을 분리하였다. 세포를 분리한 후， 분리된 세포들을 마우스 CD34-Biotin 항체 (Miltenyi Biotec)와 함께 배양하였다. 세포 및 항체 용액을 streptavidin microbeads (Miltenyi Biotec)와 함께 배양한 후, LS 칼럼 (Miltenyi Biotec)을 사ᅳ 용하여 분리하였다. 회수된 세포들을， 10% FBS, 1% 페니실린 /스트렙토마이신 용액 을 포함하는 DMEM 배지에서 95% 0 ₂ 및 C0 ₂ 의 습기찬 공기 증에서 37 ^° C에서 배양 하였다. ᅳ BrdU증식 어세이 (BrdU Proliferation Assay)

세포의 증식은 BrdU세포 증식 어세이 킷트 (Cell Signaling)를 사용하여 확 인할 수 있다ᅳ Miltenyi Biotec사에서 제시하고 있는 프로토콜을 사용하여 증식 어 세이를 수행하였다. 간단히 요약하면， 실험대상 세포를 BrdU와 함께 2시간 동안 배 양하였다. 1차 BrdU 검출 항체를 1시간 동안 배양하였고， 2차 항-마우스 IgG, HRP- 컨쥬케이트 항체를 30분간 배양하였다. 모발 생장 In vitro어세이 및 mRNA 발현량 확인

Cyquant Assay (Thermo Fisher)를 사용하여 모발 생장 In vitro 어세이를 수 행했다. Assay 실험조건은 다음과 같다: Cell - CD34+ 모낭 줄기세포; 배양 플레이 트 - 96 well plate; 세포 수 - 3XK) ³ 세포 /웰; 최종 폴리펩티드의 농도 - 100 nM; 배양 시간 24시간.

또한 β -catenin 경로를 통해 CD34+ 모낭 줄기세포의 증식을 유도하는지 확 인하기 위하여， β-catenin의 표적 유전자인 AXIN, CD44 및 TCF7의 mRNA 발현량을 다음과 같은 방법으로 확인하였다. 구체적으로 각 시험물질을 처리하여 8시간동안 CD34+ 세포를 배양한 뒤， 상기 배양된 세포를 회수하여 Gene JET RNA purification kit (Thermo Fisher, K0731)를 이용해 RNA를 분리하고, Maxima first strand ^' cDNA synthesis kit (Thermo Fisher, K1642)를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 여기에 각 유전자 특이적 프라이머 (TCF7: 5 ' -ATCCTTGATGCTGGGATTCTG-3' 및 5'- CTTCTCTTGCCTTGGGTTCTG-3' ， AXIN2: 5 ' -CTCCTTGGAGGCAAGAGC-3' 및 5'- GGCCACGCAGCACCGCTG-3' ， CD44: 5 ' -CCACAGCCTCC1TTCAATAACC-3' 및 5'- GGAGTCnCGCnGGGGTA-3' ), Maxima SYBR green/ROX qPCR master mix(Thermo Fisher, K0222) 및 7500 Real-time PCR system(Appl ied Biosys terns, 2720； condition: 40 cycles, 2 step (95 ^° C 15 sec, 54 ^° C 60 sec)를 이용하여 qRT-PCR 을 진행하였으며， 각유전자의 발현 수준은 ΔΔ 방법으로 계산되었다.

조직학적 분석 (Histology)

C57BL6 7주령 수컷 마우 (Orient Bio Inc.에서 구입)의 피부 샘플을 채취하 여， 파라핀 블락에 위치시켰다. Cytokeratin 15 항체 (Abeam), BrdU 항체 (Novusbio), β-catenin 항체를 사용하여 IHC(Immunohistochemistry)를 수행하였 다.

참고로, β-catenin은 모낭 시그널링 마커 (hair follicle signaling marker)로서, Cytokeratin 15은 모낭 줄기세포 마커 (hair follicle stem cell marker)로서， BrdU는 세포 증식 마커 (cell proliferation marker)로서 사용된다. 실시예 1: 본 발명의 폴리펩티드의 생체 내 발모 촉진 효과

본 발명에 따른 폴리템티드의 생체 내 발모 촉진 및 탈모 예방 또는 치료효 과를 마우스를 이용하여 확인하였다. 마우스의 등 피부에서 털을 제거하고, 본 발 명에 따른 폴리펩티드를 처리한 후 털이 다시 자라는 양상을 대조군과 비교 관찰하 였다 (참조: 도 1).

구체적으로, 마우스 (C57BL6 7주령 수컷， Orient Bio Inc.에서 구입)의 등 피 부의 털을 이발기 (clipper)로 잘라내고, 제모 크림 (Niclean, 일동제약)을 발랐다. 제모된 부위는 약 2x2.5cm이다. 그리고 나서， 대조군으로서 20% glycerol /PBS (Con)를 사용하고， 실험군으로서 3¾) Minoxidil (丽 X， 140mM) , FGF7 (ΙΟΟηΜ), 본 발 명의 폴리펩티드 "Neo-Pep" (서열번호 1의 폴리펩티드， GL Biochem 합성， ΙΟΟ ^η Μ)를 13일 동안 1일 1회 80μ1씩 붓으로 도포하였다 (각 군당 η=6). 비교 관찰을 위해 실 험 시작 전과 후 마우스의 등 피부를 사진 촬영하였다. 도 1의 하단의 마우스 등 피부 사진으로 알 수 있듯이， 등 피부 제모 후 13 일이 경과된 경우， 본 발명의 폴리펩티드 "Neo-Pep" (서열번호 1의 폴리펩티드)로 처리한 마우스에서의 등의 털이 대조군 및 기타 실험군 (즉， 丽 X 및 FGF7)에 비해 월등히 많이 자랐음을 관찰하였다. 또한， 상기 마우스의 등 피부를 채취하여 OCT compound(Ti ssue-Tek)를 사용 하는 동결 주형 (cryoraold) 내에 넣은 후, -80 ^° C 동결기에 저장하였다. Mi crom 丽 525 (Thermo Scient i f ic)로 조직절편을 만든 후, 슬라이드 글래스에 준비된 피부 절 편을 4% 파라포름알데하이드로 10분간 고정시키고， PBS로 5분씩 2회 세척한 뒤, 50 μ ΐ의 헤마록실린 용액 (Sigma Aldr ich)으로 6분간 염색하고， 물과 PBS로 5분간 세 척하였다. 그리고나 A] , 에오신 (Sigma Aldr ich)으로 염색하고， 물로 짧게 그리고 PBS로 5분간, 95% 에탄올 및 100% 에탄올로 각각 두 번씩 짧게 세척하였다. 자일렌 (Xylene , Duksan)으로 2분씩 2번 처리한 후， 염색된 조직 절편을 커버 슬라이드로 덮어 고정하였다. 헤마톡실린과 에오신 (H&E)으로 염색한 각 군의 마우스 등 피부 절편에서 성장기 (anagen)에 있는 모낭 (hai r fol l i cle)의 수를 세고, 정량적으로 비 교하였다. 도 2에서 보여지는 바와 같이, H&E 염색한 마우스 등 피부 절편에서 성장기 (anagen phase)의 모낭 (hair fol l icle)의 수를 비교한 결과， 본 발명의 폴리펩티드 "Neo-Pep" (서열번호 1의 폴리펩티드)을 처리한 마우스 등 피부에서 대조군 (Con)에 비교하여 두 배 이상의 성장기 모낭이 관찰되었으며， 진피층 (dermis) 두께도 훨씬 두꺼운 것을 확인하였다.

상기 실험 결과를 통해, 본 발명에 따른 폴리펩티드 "Ne으 Pep" (서열번호 1) 가 체내에서 발모 촉진 및 탈모 개선 및 치료 효과가 있음을 확인하였다. 실시예 2 : 본 발명의 폴리펩티드의 (3— catenin시그널링을 통한모낭줄기세 포 증식 유도

β -catenin 은 모발 생장에 매우 중요한 단백질로서, 모낭 줄기세포 증식과 의 관련성이 매우 큰 인자로서 모낭 세포의 시그널링 마커로서 역할을 한다. 또한， Cytokerat in 15은 모낭 줄기세포의 바이오 마커로서 역할올 하며, BrdU는 세포 증 식 마커로서 역할을 하는 인자로 알려져 있다. 도 3에서， 탈모후 Day 6에서의 대 조군 마우스와 Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드) 투여군 까우스에서 의 모발 생장을 비교하기 위하여 위상차 현미경을 통해서 관찰한 피부 조직 및 모 낭 부위의 횡단면을 보여준다. BrdU (세포 증식 마커), β-catenin (모낭 세포의 시그널링 마커)， Cytokeratin 15 (모낭 줄기세포 마커)의 증식 결과를 통해 알 수 있는 바와 같이， Ne으 Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드) 투여군 마우스에 서 모발 성장기 (anagen phase)가 대조군 ！마우스에 비해 보다 일찍 시작된다는 점 을 확인할 수 있다. 또한 도 4의 모발생장 In vitro assay 결과 그래프를 통해 확인할 수 있는 바와 같이， Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드)가 농도 의존적 (ΙηΜ, ΙΟηΜ, ΙΟΟηΜ, ΙΟΟΟηΜ 사용)으로 CD34+ 모낭 줄기세포 (hair follicle stem cell)의 증식을 유도한다는 것을 확인하였다. 그리고， 도 5의 In vitro assay 결과 그래프 에서와 같이, Ne으 Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드， ΙΟΟηΜ)가 β -cat en in 경로를 통해 CD34+ 모낭 줄기세포의 증식을 유도함을 확인할 수 있다. 구체적으로 는, 본 발명에 하른 Neo— Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티드, ΙΟΟηΜ)를 사용 한 경우， β-catenin의 표적 유전자인 AXIN, CD44 및 TCF7의 mRNA 발현량이 대조군 에 비해 약 2배 내지 5배 정도 증가하였음을 확인하였다. 실시예 3: 원형 탈모증 (Alopecia areata) 마우스 모델에서의 발모 촉진 효

Ά

원형 탈모증 (Alopecia areata)은 여러ᅳ 종류의 포유류 동물에서 성장기 (anagen)의 모낭 (hair follicle)을 대상으로한 세포 -매개 자가면역 질환 (cell- mediated autoi隱 une disease)으로 알려져 있다. 인간의 경우， 원형 탈모증은 임상 적으로 원형 탈모증 (alopecia areata, patchy hair loss), 전부 탈모증 (alopecia totalis, hair loss on the head) 및 전신 탈모증 (alopecia universal is, total body hair loss)의 3종류로 세분화된다.

본 발명에 따른 폴리펩티드의 인간의 모발 생장 사이클에 미치는 영향을 확 인하기 위해， 인간의 원형 탈모증의 병리상태를 반영하는 동물 모델로서 C3H/HeJ 마우스 (Jackson Laboratory, USA)를 사용하였다. C3H/HeJ 마우스 사용의 장점은, 어린 마우스에 원형 탈모증에 걸린 나이가 많은 쥐의 전 두께 피부이식 (full thickness skin graft)을 하게 되면 8 내지 10주 이내에 원형 탈모증 (patchy alopecia)이 발생하고， 20주가 경과되면 탈모가 전신 피부에까지 확장되어 만성적 인 상태의 전신 탈모증 (alopecia universalis) 상태에까지 된다는 것이다.

본 실험에서는， 상기와 같은 방법으로 피부이식 후 25주 경과되어 전신 탈모 증을 가진 C3H/HeJ 암컷 마우스를 대상으로 하여， 면도 또는 제모와 같은 사전 조 치없이， 대조군 (Control -treated mi ce , 100 ^의 20% glycerol /PBS)과 Neo-Pep 폴, 리펩티드 투여군 (Pept ide-treated mice , 100 / 의 20% glycerol /PBS 중 ΙΟΟηΜ Neo- Pep 폴리펩티드 (서열번호 1) )으로 구분하여 14주 동안 브러시 (brush)를 이용하여 매일 1회 탈모 부위를 중심으로 국부 투여하였다. 대조군과 Neo-Pep 폴리펩티드 투 여군에 각 4마리의 마우스를 사용하였다. 실험 시작시점부터 2주마다 실험 마우스의 사진을 찍었으며， 도 6에서는 실 험 시작후 1주 및 14주 시점의 마우스의 피부 발모 상태를 보여주고 있다. Neo-Pep 폴리펩티드 투여군 (Pept ide-treated mi ce , 100 ^의 20% glycerol /PBS 중 ΙΟΟηΜ Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1) )의 경우, 투여 후 11주가 경과된 이후부터 모발이 다시 자라기 시작하여， 14주가 경과한 때에는 4마리 중 3마리의 마우스 (#11 , #13， #14 마우스)에서 경도와 중등도 사이 (mi Id to moderate)의 발모 효과가 나타남으로 써， 발모 효과가 일관되게 나타났다. 이에 반해, 대조군의 경우, 4마리 마우스 중 1마리 (#18 마우스)에서만 경도 (mi Id)의 발모 효과를 보였으며， 2마리 (#15 및 #17 마우스)는 탈모가 더 심해졌고， 1마리 (#16 마우스)는 실험 종료이전에 사망함으로 써 , 일관된 발모 효과를 보이지 못했다. 한편， 로 7의 마우스의 피부조직 사진도에서는， 탈모 부위 및 그 주위의 탈 모가 없는 부위의 피부조직을 회수하여 Fekete ' s acid alcohol formal in 내에 고 정시킨 후， H & E 염색된 피부조직 절편을 분석하여, 모낭의 상태， 변형 또는 염증 유무를 확인한 결과를 보여주고 있다.

도 7에서 볼 수 있는 바와 같이, 특히 대조군의 피부조직에서 모낭 내 및 모 낭 주위에 염증성 세포가 복합적으로 많이 침윤 (mixed inf i ltrat ion)되어 있고 특 히 림프구 침윤이 많이 발견되는 데， 이는 원형 탈모증 (alopeci a areata)을 진단 하는 데 사용되는 주요 특성이다. 그리고， 모낭 위축 ( fol l icular dystrophy)은， 모낭이 뒤를리고 변형되거나 약하거나 분열된 모간 (hair shaft )을 가지는 상태를 의미하는 데， 원형 탈모증에서 자주 나타나는 현상이다.

도 7에서 확인할 수 있는 바와 같이， 대조군의 피부조직에서 염증 및 기형 모간 (deformed hair shaft )의 발생이 나타났으나, 대조군에 비해 Neo-Pep 폴리펩티 드 투여군의 피부 조직에서는 염증 및 기형 모간의 발생이 현저히 적었다. 그리고， 전체적인 탈모 상태의 모습은 피부 표면 또는 피부 표면 인근의 모간 파열 (hai r shaft breakage)에 따라 달라지는 데， 모간 파열 등 기형 모간이 상대적으로 많은 대조군에서 탈모 상태가 더 뚜렷하게 관찰되었다. 실시예 4 : 본 발명의 폴리펩티드 단^의 모낭 줄기세포 증식 효과 비교 본 발명자는， 상기 실시예를 통해 발모 촉진 효과가 확인된 Neo-Pep 폴리펩 티드 (서열번호 1)에서， 발모 촉진 및 탈모 개선 효과를 가지는 이의 펩티드 단편 을 확인하기 위해, N1 (서열번호 2)， N2 (서열번호 3)， N3 (서열번호 4)， N4 (서열 번호 5)， N5 (서열번호 6)， N6 (서열번호 7)， N7 (서열번호 8) , 및 N8 (서열번호 9)을 제조하였다.

아래 표 1에서， 본 발명의 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)와 이의 단편 N1 (서열번호 2)， N2 (서열번호 3) , N3 (서열번호 4)， N4 (서열번호 5)， N5 (서열번호 6) , N6 (서열번호 7)， N7 (서열번호 8) 및 N8 (서열번호 9)의 아미노산 서열, PI 및 정보를 보여준다.

【표 1】

참고로， 본 발명의 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)는 AIMP1 단백질 (서열 번호 16)에서 6-46번째 아미노산 잔기에 해당한다.

MANNDAVLKRLEQKGAEADQ 11 EYLKQQVSLLKEKA I LQATLREEKKLRV

ENAKLKKE I EELKQEL I QAE I QNGVKQ I PFPSGTPLHANSMVSENV I QST AV VSSGTKEQIKGGTGDEKKAKEKIEKKGEKKEKKQQSIAGSADSKPI DVSRLDLRIGCI ITARKHPDADSLYVEEVDVGEIAPRTWSGLVNHVPLE QMQNRMVILLCNLKPAKMRGVLSQAMVMCASSPEKIEILAPPNGSVPGDR ITFDAFPGEPDKELNPKKKIWEQIQPDLHTNDECVATYKGVPFEVKGKGV CRAQTMSNSGIK 상기 실험방법에 기재되어 있는 CD34+ 모낭 줄기세포 In vitro 어세이 및 BrdU 증식 어세이 (BrdU Prol i ferat ion Assay) 방법을 사용한 결과， CD34+ 모낭 줄 기세포의 상대적인 세포수 (relat ive cel l number)를 비교한 도 8에서 확인할 수 있 는 바와 같이, 본 발명에 따른 폴리펩티드 Neo— Pep (서멸번호 1)와, 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 19개 또는 20개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드 단편인 N5 (서열번호 6) , N6 (서열 번호 7)， N7 (서열번호 8) 및 N8 (서열번호 9)은 CD34+ 모낭 줄기세포 (hai r fol l icle stem cel l )의 증식을 유도하였다.

이에 반해, 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 28 내지 31번째 아미노산 ( EKA)을 포함하지 않는 연속되는 20개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드 Να)- Pep (서열번호 1)의 단편인 N1 (서열번호 2)， N2 (서열번호 3)， N3 (서열번호 4)， N4 (서열번호 5)는 CD34+ 모낭 줄기세포 (hair fol l icle stem cel l )의 증식효과가 전혀 없었다.

상기 결과를 통해， 본 발명의 Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1의 폴리펩티 드) 뿐만 아니라, N5 (서열번호 6)， N6 (서열번호 7)， N7 (서열번호 8) 및 N8 (서 열번호 9)과 같이 Neo-Pep 폴리펩티드의 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노 산 (KEKA)을 활성 아미노산 잔기로 포함하고 연속되는 아미노산으로 이루어진 이의 폴리펩티드 단편이 발모 촉진 또는 탈모 개선 효과를 가진다는 것을 확인하였다. 실시예 5 : 본 발명의 폴리펩티드 단편의 In vivo 발모 촉진 효과 비교 본 발명자는, 상기 실시예를 통해 발모 촉진 효과가 확인된 Neo-Pep 폴리펩 티드 (서열번호 1)의 단편 중에서 발모 촉진 또는 탈모 개선 효과를 가지는 폴리펩 티드 단편을 추가적으로 확인하기 위해, 15개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드 단편인 N9 (서열번호 10) , N10 (서열번호 11)， Nil (서열번호 12)， N12 (서열번호 13) , N13 (서열번호 14)， 및 N14 (서열번호 15)를 제조하였다.

^' 아래 표 2에서， 본 발명의 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 단편 N9 (서 열번호 10)， N10 (서열번호 11) , Nil (서열번호 12) , N12 (서열번호 13)， N13 (서 열번호 14)， 및 N14 (서열번호 15)의 아미노산서열， PI 및 Tm정보를 보여준다.

【표 2】

도 9에서 볼 수 있는 바와 같이， 상기 실시예 1에서와 동일한 방법을사용하 여 피부 제모후 13일 경과된 마우스 등 피부사진으로 알 수 있듯이， 본 발명에 따 른 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하고 연속되는 15개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드 단편인 N12 (서열번호 13) , N13 (서열번호 14) 및 N14 (서열번호 15)로 처리한 마우스 등의 털이 대조군 (Con, 20% Glycerol /PBS 처리군)에 비해서 월등히 많이 자랐으며, 포지티브 실험군 (MNX, 3% Minoxidi l 처리군)에 비해서도 유사하거나 월등히 많이 자랐다.

이에 반해， 폴리펩티드 Neo-Pep (서열번호 1)의 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 포함하지 않는 연속되는 15개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드 Neo- Pep (서열번호 1)의 단편인 N9 (서열번호 10)， N10 (서열번호 11) 및 Nil (서열번 호 12)은 마우스 등의 털이 거의 자라지 않았다.

상기 결과를 통해, 본 발명의 Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1)의 단편인 N12 (서열번호 13) , N13 (서열번호 14) 및 N14 (서열번호 15)와 같이， Neo—Pep 폴 리펩티드 (서열번호 1)의 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA)을 활 성 아미노산 잔기로 포함하고 연속되는 아미노산으로 이루어진 이의 폴리펩티드 단 편이 발모 촉진 또는 탈모 개선 효과를 가진다는 것을 추가적으로 확인함으로써， Neo-Pep 폴리펩티드 (서열번호 1)의 아미노산 서열에서 28 내지 31번째 아미노산 (KEKA) 잔기를 활성 부위로서 포함하는 것이 발모 촉진 또는 탈모 개선 효과에 필 수적임을 확인하였다.