DOMAINE DE L’INVENTION

La présente invention concerne des composés dérivés de 7-azaindole utiles en tant qu’inhibiteurs des kinases AXL et/ou FLT3, notamment pour le traitement du cancer. La présente invention concerne également leur procédé de préparation.

ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE

AXL est un Récepteur Tyrosine Kinase (RTK) appartenant à la famille TAM composée de TYRO-3, AXL et MER. Initialement découvert et mis en évidence chez des patients atteints de leucémie myéloïde chronique (LMC), l’implication du récepteur AXL dans un grand nombre d’autres cancers liquides et solides (sein, leucémies, poumon, prostate, gastrointestinal, ovaires, mélanome, pancréas, foie, thyroïde, ...) est aujourd’hui bien détaillée et validée (Paccez et al., Int. J. Cancer (2014), 134: 1024-1033). Plus spécifiquement, AXL est un régulateur clé du phénotype mésenchymal des cellules cancéreuses ; les cellules cancéreuses mésenchymales sont des cellules plus agressives (augmentation de leur capacité d’invasion et de migration, de leur capacité à survivre et s’adapter en situation de stress et de leur capacité à résister aux thérapies ciblées et aux chimiothérapies traditionnelles). En conséquence, la surexpression d’AXL et de son ligand GAS6 (Growth Arrest-Specific 6) a été corrélée à la progression tumorale (invasion, métastase), à un mauvais pronostic vital, mais également aux phénomènes de résistance aux traitements. Ainsi, le fort potentiel oncogénique d’AXL a été mis en évidence et cette protéine est considérée comme une nouvelle cible thérapeutique dans le traitement du cancer (Wu et al., Oncotarget (2014), 5(20): 9546-9563).

Par ailleurs, plusieurs études ont également permis de démontrer la surexpression ou l’inhibition d’AXL dans de nombreuses pathologies autres que le cancer comme par exemple : les maladies auto-immunes (Yanagita et al. Am. J. Pathol. (2001), 158, 1423-1432), l’inflammation (Fiebeler et al. Am. J. Kidney Dis. (2004), 43 : 286-295, Weinger et al. J. Neuroinflammation (2011 ) 8 : 49), le rejet de greffes, les scléroses (Weinger et al. Am. J. Pathol. (2009) 175 : 283-293), les anomalies vasculaires (Ekman et al. Clin. Biochem. (2010) 43 : 110-114), l’obésité (Hsiao et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. (2013) 98 : E267-274), les maladies infectieuses (Shibata et al. J. Immunol. (2014) 192(8) : 3569-81 ), et notamment l’entrée virale dans les cellules, les maladies neurodégénératives (Fourgeaud, et al., Nature (2016), 532: 240-244), l’endométriose, les maladies et insuffisance rénales.

FLT3 (Fms-Like Tyrosine kinase 3, aussi connu sous les noms de CD135 ou STK-1 pour Cluster of Différentiation antigen 135 et Stem œil tyrosine kinase 1 respectivement) est un RTK jouant un rôle essentiel dans la survie, la prolifération et la différenciation des cellules souches hématopoïétiques. Depuis plusieurs années, de nombreuses équipes ont démontré la surexpression de ce récepteur dans les cellules leucémiques. Par exemple, l'activation du récepteur FLT3 par son ligand stimule la prolifération des cellules de leucémie myéloblastiques aiguë (LMA) tout en inhibant également l'apoptose. Par ailleurs, la mutation du gène FLT3 est l’altération génétique la plus fréquemment observée dans la LMA et est reconnue comme une mutation responsable du développement des pathologies myéloblastiques en entraînant une activation constitutive de la protéine. Dans le même sens, l’altération génétique de FLT3 est un facteur de très mauvais pronostic pour la survie des patients. Les deux classes de mutation somatique les plus fréquentes sont des duplications de certaines parties du gène provoquant l’expression d’une protéine nommée FLT3-ITD (Internai Tandem Duplication), dans environ 23% des cas de LMA, et l’apparition de mutations ponctuelles dans le domaine kinase (mutation de l’acide aspartique D835) entraînant l’expression de FLT3-KDM. En conséquence, l’organisation mondiale de la santé recommande d’identifier les mutations de FLT3 chez les patients atteints de LMA afin d’établir un premier diagnostic et de définir le traitement.

Le RTK FLT3 se retrouve ainsi au centre des recherches pour le traitement des leucémies aiguës comme la LMA ou la LLA (leucémie lymphoblastique aiguë) ou des syndromes myéloprolifératifs comme la myélofibrose par exemple. Plusieurs inhibiteurs de FLT3 de première et deuxième génération ont été développés et testés en phase clinique mais, à ce jour, aucun n’a été approuvé ou mis sur le marché. En effet, de nombreux problèmes ont été rencontrés lors des phases cliniques avec ces composés comme des effets secondaires importants ou l’apparition de résistances. Le développement de nouveaux inhibiteurs de FLT3 devra plus particulièrement résoudre les problèmes d’aplasie médullaire et de cardiotoxicité (prolongation du QTc) observés avec les inhibiteurs actuels.

De récentes publications ont également permis de soulever l’intérêt d’inhiber AXL seul ou simultanément à FLT3 dans le traitement des patients atteints de LMA et porteurs de la mutation FLT3-ITD [Park et al., Blood (2013), 121 (11 ): 2064-2073, Park et al., Leukemia (2015), 29(12): 2382-2389]

A ce jour, il existe plusieurs inhibiteurs de kinase actifs sur AXL (Myers et al., J. Med. Chem. (2015), 59(8): 3593-3608) mais aucun n’est réellement sélectif ou spécifique de cette kinase. Dans une grande majorité des cas, l’activité sur AXL est secondaire vis-à-vis de l’activité principale recherchée sur MET ou MER du fait de la similarité de séquence entre ces RTKs. C’est notamment le cas pour le Bosutinib ou le Cabozantinib, qui sont des inhibiteurs de kinase multi-cibles ou MTKI ( MultiTargeted Kinase Inhibitors) déjà sur le marché, ou bien le BMS777607 (actuellement en phase clinique 2). C’est également le cas du dérivé de 7- azaindole NPS-1034, qui présente un profil d’inhibition relativement large, en inhibant un large panel de kinases comme AXL/DDR1/FLT3/KIT/MEK/MET/ROS1 et TIE1. NPS-1034

Un autre inhibiteur de la kinase AXL est le R428 (encore appelé BGB324), actuellement en phase clinique. Ce composé - de structure bien différente des inhibiteurs de kinases actuellement sur le marché - s’est révélé actif également sur d’autres kinases comme ABL/KIT/JAK2-3/LCK/PDGFRB/TI E2...

R428/BGB324

Il existe donc un besoin pour de nouveaux composés inhibiteurs d’AXL et/ou FLT3 (de préférence d’AXL et FLT3) plus sélectifs. La présente invention propose ainsi de nouveaux dérivés de 7-azaindole inhibant fortement la kinase AXL principalement, ainsi que FLT3 et/ou ses mutants, pour une application dans le traitement des maladies médiées par la kinase AXL et/ou FLT3 et/ou ses mutants, notamment le cancer.

De par ce profil d’inhibition bien spécifique et unique à ce jour pour ce type de structure, ces composés peuvent être utilisés en thérapie dans le traitement des pathologies associées à une dérégulation des protéines kinases, notamment AXL et/ou FLT3 (et/ou ses mutants). Dans le cas des cancers, en touchant AXL et/ou FLT3, ces composés vont agir de façon agressive en s’attaquant simultanément à la tumeur, son microenvironnement et aux métastases tout en empêchant l’apparition de résistance. Les inhibiteurs de la présente invention peuvent ainsi être utilisés pour le traitement de nombreux cancers liquides (comme les leucémies chroniques ou aigues, les lymphomes, les syndromes myéloprolifératifs) ainsi que solides, comme les cancers de la peau, du sein, du poumon, de la plèvre, de la vessie, de la prostate, gastro-intestinal, ovaires, du pancréas, du foie, du rein, de la thyroïde, des glandes salivaires, de la tête et cou, colorectal, du col de l’utérus, de l’endomètre, de la vulve, de la peau, du cerveau, les sarcomes et le mélanome. De plus, ces composés peuvent permettre de re sensibiliser les patients résistants à d’autres traitements anticancéreux. Ces inhibiteurs pourraient également être utiles dans le traitement de maladies non cancéreuses dans lesquelles AXL et/ou FLT3 sont impliquées comme les maladies auto-immunes, inflammatoires, le rejet de greffes et les fibroses. RESUME DE L’INVENTION

La présente invention a ainsi pour objet un composé de formule (I): dans laquelle

X représente un atome d’hydrogène ou un atome d’halogène,

Y est choisi parmi -CH2OH, -CH=NOH, -CH2NH2, un aryle hétéroaryle optionnellement mono ou polysubstitué, un hétéroaryle optionnellement mono ou polysubstitué, et -L-(CH2)p-W,

- L représente -C(0)NH-, -CH ₂ NH-, -CH=N-, -NHC(O)-, ou -CH ₂ N=CH-,

- p est un entier de 0 à 2,

- quand L représente -CH2NH-, -CH=N-, ou -CH2N=CH-, W est choisi parmi :

• un alkyle en C1-C6,

• un aryle en C6-C10 éventuellement mono- ou polysubstitué ; et

• un hétéroaryle à 5-10 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, ledit hétéroaryle étant optionnellement mono- ou polysubstitué ;

- quand L représente -C(0)NH- ou -NHC(O)-, W est choisi parmi:

• un aryle en C6-C10 optionnellement mono- ou polysubstitué ;

• un hétéroaryle à 5-10 chaînons comprenant de 1 à 2 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, ledit groupe hétéroaryle étant optionnellement mono- ou polysubstitué; et

• un cycloakyle en C3-C6 optionnellement substitué par un groupe C(0)NHR ou NHC(0)R dans lequel R représente un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C1-C6, notamment le groupe

Cy représente un groupe phényle ou un groupe hétéroaryle à 5-10 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O ou S, ledit hétéroaryle étant optionnellement substitué par un groupe oxo, un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci ou un de leurs mélanges, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses. La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant un composé selon l’invention ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci en tant que principe actif, et un excipient pharmaceutiquement acceptable, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto-immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses.

DESCRIPTION DETAILLEE

En règle générale, les termes et définitions suivantes sont utilisés.

L’expression « couplage peptidique » dans la présente invention désigne la réaction permettant de former une liaison amide -NH-C(O)-. Les techniques utilisées dans cette réaction sont communes aux synthèses peptidiques, c'est-à-dire procèdent par activation d’un acide carboxylique pour réagir avec une amine. Les réactions de couplage peptidique utilisées dans la présente invention sont ainsi dérivées des synthèses peptidiques, et directement applicables à l’objet de la présente invention.

Les réactions de couplage peptidique sont bien connues de l’homme du métier, et peuvent notamment être réalisées en employant un agent de couplage tel que, le N,N'- dicyclohexylcarbodiimide (DCC) ou le chlorhydrate du 1-éthyl-3-(3'- diméthylaminopropyljcarbodiimide (EDO), ou le N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarbodiimide), ou un benzotriazole (tel le tétraflu oroborate du 0-(1 H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'- tétraméthyluronium (TBTU), hexafluorophosphate de benzotriazol-1-yl- oxytris(diméthylamino)phosphonium (BOP), hexafluorophosphate du 0-(7-azabenzotriazol-1- yl)-1 ,2,3-tétraméthyluronium (HATU), hexafluorophosphate du 0-benzotriazol-1-yl-N,N,N',N'- tétraméthyluronium (HBTU), tétrafluoroborate du O-benzotriazol-1-yl-tétraméthyle (TBTU)), ou un mélange N-hydroxybenzotriazole (HOBT)/EDCI, dans un solvant tel que le chloroforme, le dichlorométhane, le dichloroéthane, l’acétate d’éthyle, le diméthylformamide (DMF), le tétrahydrofurane (THF), le diméthylsulfoxide (DMSO), la N-méthyl pyrrolidinone (NMP), de préférence à température comprise entre 20°C et 150°C.

Alternativement, un couplage peptidique a lieu par activation dans un premier temps de l’acide carboxylique par transformation en le chlorure d’acyle (notamment en présence de chlorure de thionyle ou de chlorure d’acétyle) ou un anhydride correspondant (par exemple en présence d’anhydride acétique ou isopropylique), puis réaction avec l’amine souhaitée, de préférence en présence d’une base pour neutraliser l’acide libéré lors de la réaction (notamment HCl dans le cas d’un chlorure d’acyle).

Le terme C(O) est équivalent à « C=0 ».

L’expression « groupe alkyle » ou « alkyle » dans la présente invention désigne un groupe aliphatique saturé linéaire ou ramifié contenant 1 à 6 atomes de carbone, si cela n’est pas explicité. Des exemples de groupes alkyles couverts par l’objet de la présente invention sont les groupes méthyle, éthyle, propyle, butyle, tert-butyle, isopropyle.

Dans certains modes de réalisation, il est précisé qu’un ou plusieurs atomes d’hydrogène du groupe alkyle sont optionnellement remplacés par un atome de fluor. Dans ce cas, de préférence, 1 à 3 atomes d’hydrogène au plus sont concernés. Un exemple est le groupe CH2CF3.

L’expression "groupe aryle" ou « aryle » dans la présente invention désigne un groupe cyclique aromatique (mono- ou polycyclique) contenant entre 6 et 10 atomes de carbone. Des exemples de groupes aryles couverts par l’objet de la présente invention sont les groupes phényles, napthyles, de préférence phényle.

L’expression "groupe hétéroaryle" ou « hétéroaryle » dans la présente invention désigne un groupe cyclique aromatique (mono- ou polycyclique) à 5 à 10 chaînons, contenant entre 2 et 9 atomes de carbone et entre 1 et 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi l’azote, l’oxygène ou le soufre. Des exemples de groupes hétéroaryles sont les groupes furane, pyrrole, thiophène, thiazole, isothiazole, imidazole, oxazole, isoxazole, pyrazole, pyridine, pyrazine, pyridazine, pyrimidine, quinoline, indole, quinoxaline, benzofurane, dihydrobenzofurane, benzodioxole, benzotriazole, benzimidazole, de préférence choisi parmi pyrrole, imidazole, thiophène, pyridine, pyrimidine, benzofurane, benzodioxole, indole et benzimidazole.

L’expression “cycloalkyle” ou « groupe cycloalkyle » désigne un groupe aliphatique saturé cyclique contenant 3 à 6 atomes de carbone, si cela n’est pas explicité. Des exemples de groupes cycloalkyles couverts par l’objet de la présente invention sont les groupes cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle ou cyclohexyle. De préférence, il s’agit du cyclopropyle.

L’expression "atome d’halogène" dans la présente invention désigne un atome de fluor, de chlore, de brome ou d’iode. De préférence, il s’agit du brome ou du fluor, notamment du fluor. L’expression "groupe alcoxyle" ou « alcoxyle » dans la présente invention désigne un groupe alkyle lié à un oxygène. Des exemples de groupes alcoxyle sont les groupes méthoxy, éthoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, tert-butoxy. De préférence, il s’agit d’un groupe méthoxy ou éthoxy.

L’expression "groupe aryloxy" dans la présente invention désigne un groupe aryle lié à un atome d’oxygène. Des exemples de groupes aryloxy sont les groupes phényloxy. L’expression « groupe hydroxyle » ou « hydroxyle » dans la présente invention désigne : OH. L’expression « groupe oxo » désigne le substituant : =0.

L’expression «groupe aryle ou hétéroaryle éventuellement substitué » dans la présente invention désigne un aryle ou hétéroaryle optionnellement substitué par un ou plusieurs (de préférence 1 à 4, de manière encore préférée 1 ou 2, substituants indépendamment choisis parmi : un atome d’halogène, un groupe nitro -(NO2), un groupe cyano (CN), un alcoxyle en C1-C6, un aryloxy en C5-C10, un alkyle en Ci-Cedans lequel 1 ou plusieurs atomes d’hydrogène est optionnellement remplacé par un atome de fluor, un hétéroaryle, un hydroxyle, un groupe -CONHalkyl en C1-C6, un groupe -NHCOalkyl en C1-C6, et un groupement NR2R3 dans lequel R2 et R3 représentent indépendamment un groupe alkyle en C1-C6, ou un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C1-C6.

De préférence, les substituants sont indépendamment choisis parmi : o un atome d’halogène, notamment un fluor ou un chlore, o un groupe oxo, o un hydroxyle, o un alcoxyle en C ₁ -C ₆ , notamment un méthoxy, o un alkyle en C1-C6, dans lequel 1 ou plusieurs atomes d’hydrogène est optionnellement remplacé par un atome de fluor, de préférence un groupe méthyle ou CH2CF3, et o un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène (notamment un fluor ou un chlore) et/ou un alkyle en C1-C6, par exemple un fluorophényl (de préférence le 4-fluorophényle) ou un méthylfluorophényle (par exemple le 4-fluoro-2-méthylphényle);

L’expression "7-azaindole" dans la présente invention désigne le motif 1 H-pyrrolo[2,3- b]pyridine:

Dans la présente invention, on entend désigner par « pharmaceutiquement acceptable » ce qui est utile dans la préparation d'une composition pharmaceutique qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation vétérinaire de même que pharmaceutique humaine.

Dans la présente invention, l’expression « composition pharmaceutique » désigne toute composition consistant en une dose efficace d’au moins un composé de l’invention et au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. De tels excipients sont sélectionnés, en fonction de la forme pharmaceutique et de la méthode désirée d’administration, à partir des excipients usuellement connus par l’homme du métier. On entend désigner par « sels pharmaceutiquement acceptables » d’un composé, des sels qui sont pharmaceutiquement acceptables, comme défini ici, et qui possèdent l’activité pharmacologique souhaitée du composé parent. De tels sels comprennent :

(1 ) les hydrates et les solvatés,

(2) les sels d’addition d’acide pharmaceutiquement acceptable formés avec des acides inorganiques pharmaceutiquement acceptables tels que l’acide chlorhydrique, l’acide bromhydrique, l’acide sulfurique, l’acide nitrique, l’acide phosphorique et similaires ; ou formés avec des acides organiques pharmaceutiquement acceptables tels que l’acide acétique, l’acide benzènesulfonique, l’acide benzoïque, l’acide camphresulfonique, l’acide citrique, l’acide éthane-sulfonique, l’acide fumarique, l’acide glucoheptonique, l’acide gluconique, l’acide glutamique, l’acide glycolique, l’acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2- hydroxyéthanesulfonique, l’acide lactique, l’acide maléique, l’acide malique, l’acide mandélique, l’acide méthanesulfonique, l’acide muconique, l’acide 2-naphtalènesulfonique, l’acide propionique, l’acide salicylique, l’acide succinique, l’acide dibenzoyl-L-tartrique, l’acide tartrique, l’acide p-toluènesulfonique, l’acide triméthylacétique, l’acide trifluoroacétique et similaires, ou

(3) les sels d’addition de base pharmaceutiquement acceptable formés lorsqu’un proton acide présent dans le composé parent est soit remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin, un ion de métal alcalino-terreux ou un ion d'aluminium ; soit coordonné avec une base organique ou inorganique pharmaceutiquement acceptable. Les bases organiques acceptables comprennent la diéthanolamine, l’éthanolamine, N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires. Les bases inorganiques acceptables comprennent l’hydroxyde d’aluminium, l’hydroxyde de calcium, l’hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium et l’hydroxyde de sodium.

L’expression « mélanges d’énantiomères » dans la présente invention désigne tout mélange d’énantiomères. Le mélange peut être racémique, c'est-à-dire 50/50 de chaque énantiomère en poids (w/w), ou non racémique, c'est-à-dire enrichi en l’un ou l’autre des énantiomères , par exemple de manière à obtenir un excès énantiomérique supérieur ou égal à 95%, de préférence supérieur ou égal à 98%, de manière encore préférée supérieur à 99%. L’expression « mélanges de diastéréomères» dans la présente invention désigne tout mélange de diastéréomères quelle que soit la proportion.

L’expression « traitement » s’applique à tous types d’animaux, de préférence aux mammifères et plus préférentiellement aux humains. Dans le cas du traitement d’un animal non humain, l’expression référera à un traitement vétérinaire.

La présente invention concerne donc un composé de formule (I): dans laquelle

X représente un atome d’hydrogène ou un atome d’halogène,

Y est choisi parmi -CH2OH, -CH=NOH, -CH2NH2, un aryle optionnellement mono ou polysubstitué, un hétéroaryle optionnellement mono ou polysubstitué, et -L-(CH2)p-W,

- L représente -C(0)NH-, -CH ₂ NH-, -CH=N-, -NHC(O)-, ou -CH ₂ N=CH-,

- p est un entier de 0 à 2,

- quand L représente -CH2NH-, -CH=N-, ou -CH2N=CH-, W est choisi parmi:

• un alkyle en C1-C6, de préférence un méthyle,

• un aryle en C6-C10 , préférablement un phényle, éventuellement mono- ou polysubstitué, avantageusement par 1 ou 2 groupes indépendamment choisis parmi : o un atome d’halogène, o un hydroxyle, o un alcoxyle en C1-C6, de préférence un méthoxy, o un alkyle en C1-C6, dans lequel 1 ou plusieurs atomes d’hydrogène est optionnellement remplacé par un atome de fluor, de préférence un trifluorométhyle, et o un hétéroaryle à 5-10 chaînons comprenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, notamment un groupe hétéroaryle à 5 chaînons comprenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S tel qu’un triazole, de préférence un 1 ,2,4-triazole ;

• un hétéroaryle à 5-10 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, tel qu’un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, thiophene, pyridine, pyrimidine, benzofurane, benzodioxole, indole, benzimidazole, ledit hétéroaryle étant optionnellement mono- ou polysubstitué, avantageusement il est optionnellement substitué par 1 à 4 groupes indépendamment choisis parmi: o un atome d’halogène, o un groupe oxo o un hydroxyle, o un alcoxyle en C1-C6, o un alkyle en C ₁ -C ₆ , dans lequel 1 ou plusieurs atomes d’hydrogène est optionnellement remplacé par un atome de fluor, et o un aryle en C ₆ -C ₁₀ éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C ₁ -C ₆ , de préférence un fluorophényle (notamment le 4- fluorophényle) ou un térazole substitué par un alkyle en C ₁ -C ₆ tel qu’un méthyle ;

- quand L représente -C(0)NH- ou -NHC(O)-, W est choisi parmi:

• un aryle en C ₆ -C ₁₀ optionnellement mono- ou polysubstitué, avantageusement il est optionnellement substitué par un atome d’halogène, un hydroxyle, un alkyle en C ₁ -C ₆ , ou un alcoxyle en C ₁ -C ₆ , préférablement un atome de fluor, un hydroxyle, méthoxy ou trifluorométhyle, de manière encore préférée par un hydroxyle,

• un hétéroaryle à 5-10 chaînons comprenant de 1 à 2 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, tel qu’un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, thiophene, pyridine, pyrimidine, benzofurane, benzodioxole, indole, benzimidazole, ledit hétéroaryle étant optionnellement mono- ou polysubstitué avantageusement il est optionnellement substitué par 1 à 4 substituants indépendamment choisis parmi: o un atome d’halogène, o un hydroxyle, o un groupe oxo, o un alcoxyle en C ₁ -C ₆ , o un alkyle en C ₁ -C ₆ dans lequel 1 ou plusieurs atomes d’hydrogène est optionnellement remplacé par un atome de fluor, et o un aryle en C ₆ -C ₁₀ éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C ₁ -C ₆ , de préférence un fluorophényle, notamment le 4-fluorophényle; et

• un cycloakyle en C ₃ -C ₆ optionnellement substitué par un groupe C(0)NHR ou NHC(0)R dans lequel R représente un aryle en C ₆ -C ₁₀ éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C ₁ -C ₆ , en particulier un phényle éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C ₁ -C ₆ , de préférence un phényle éventuellement substitué par un atome d’halogène, notamment il s’agit du cyclopropyle substitué

Cy représente un phényle ou un hétéroaryle à 5-10 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O et S, ledit hétéroaryle étant optionnellement substitué par un groupe oxo, un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci ou un de leurs mélanges, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses.

Le composé de formule (I) selon l’invention peut se trouver sous la forme d’un stéréoisomère ou d’un mélange de stéréoisomères, tels que des tautomères, énantiomères ou diastéréoisomères.

Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, le composé de l’invention est de formule (la): dans laquelle X, Y et Cy sont tels que définis ci-avant et ci-après.

Dans un mode de réalisation particulier, X représente un halogène, notamment le fluor. Dans un mode de réalisation particulier, X représente un hydrogène.

Cy représente de préférence un phényle, furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, 3-oxo-2,3- dihydro-1 H-pyrazole, thiophene, pyridine, 2(1 H)-pyridinone, 4(1 H)-pyridinone, pyrimidine, pyrimidine-2,4-dione, benzofurane, benzodioxole, indole ou benzimidazole. Dans certains modes de réalisation, Cy représente un phényle ou un hétéroaryle monocyclique à 5-7 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O ou S. Ainsi, de manière encore préférée, Cy représente un phényle, thiophène, furane, pyridine ou pyrimidine. De manière encore plus préférée, Cy représente un phényle, thiophène, pyridine ou pyrimidine. En particulier, Cy représente un phényle ou un thiophène. Dans un mode de réalisation particulier, Y représente -CH=NOH, CH ₂ NH ₂ , aryle ou hétéroaryle optionnellement mono ou polysubstitué.

Dans un autre mode de réalisation particulier, Y représente -CH2OH.

Dans un autre mode de réalisation particulier, Y représente -L-(CH2)p-W, avec L, p et W tels que définis ci-avant ou ci-après.

Par exemple, quand L représente -CH2NH-, -CH=N-, ou -CH2N=CH-, de préférence -CH2NH- , p est compris entre 0 et 2, de préférence égal à 1 ou 2, préférablement 1, et W est avantageusement choisi parmi:

• un phényle éventuellement substitué par 1 ou 2 groupes indépendamment choisis parmi un atome de brome, un atome de fluor, un hydroxyle, un méthoxy, un trifluorométhyle, et un triazole, de préférence parmi un atome de brome, un atome de fluor, un hydroxyle, un méthoxy et un 1,2,4-triazole, et

• un hétéroaryle choisi parmi un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, thiophene, pyridine, pyrimidine, benzofurane, benzodioxole, indole et benzimidazole, de préférence choisi parmi indole, pyridine, imidazole, benzimidazole, benzofurane, benzodioxole et pyrazole, ledit hétéroaryle étant optionnellement substitué par 1 à 4 groupes indépendamment choisis parmi: un atome d’halogène (notamment le fluor ou le brome), un groupe oxo, un hydroxyle, un méthoxy, un méthyle, un trifluorométhyle, un phényle et un fluorophényle, notamment choisi parmi un méthyle, un phényle et le 4-fluorophényle.

En particulier, dans ce mode de réalisation, W peut être choisi parmi un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, 3-oxo-2,3-dihydro-1 H-pyrazole, thiophene, pyridine, 2(1H)-pyridinone, 4(1 H)-pyridinone, pyrimidine, pyrimidine-2,4-dione, benzofurane, benzodioxole, indole, benzimidazole, optionnellement substitué par 1 à 4 groupes indépendamment choisis parmi un méthyle, un phényle et le 4-fluorophényle.

En particulier, quand L représente CH2NH, CH=N, ou CH2N=CH, de préférence CH2NH, p est de préférence égal à 1 ou 2, notamment 1 , et W est alors de préférence choisi parmi :

Encore plus préférablement, W est un imidazole, notamment non substitué.

Dans le mode de réalisation où L représente -CH2NH-, -CH=N-, ou -CH2IYCH-, de préférence -CH2NH-, X représente de préférence un halogène, notamment le fluor, et Cy représente avantageusement un phényle ou un hétéroaryle monocyclique à 5-7 chaînons contenant de 1 à 3 hétéroatomes indépendamment choisis parmi N, O ou S, en particulier un thiophène.

En outre, quand L représente -C(0)NH- ou -NHC(O), de préférence - NHC(O)-, p est compris entre 0 et 2, de préférence égal à 0 ou 1 , notamment 0, et W est avantageusement choisi parmi:

• un phényle ou naphtalène optionnellement mono- ou polysubstitué, avantageusement par un atome d’halogène, un hydroxyle, un alkyle en C1-C6, ou un alcoxyle en C1-C6, préférablement un atome de fluor, un hydroxyle, méthoxy ou trifluorométhyle, de manière encore préférée par un hydroxyle,

• un hétéroaryle choisi parmi un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, thiophene, pyridine, pyrimidine, benzofurane, benzodioxole, indole et benzimidazole, ledit hétéroaryle étant optionnellement substitué par 1 à 4 substituants indépendamment choisis parmi: o un atome d’halogène, notamment le fluor, o un hydroxyle, o un groupe oxo, o un méthoxy, o un méthyle ou trifluorométhyle, et o un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C1-C6, de préférence un fluorophényle, notamment le 4- fluorophényle, et • un cycloakyle en C3-C6 optionnellement substitué par un groupe -C(0)NHR ou -NHC(0)R dans lequel R représente un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène et/ou un alkyle en C1-C6, notamment le cyclopropyle substitué

En particulier, dans ce mode de réalisation, W peut être choisi parmi un furane, pyrrole, imidazole, pyrazole, 3-oxo-2,3-dihydro-1 H-pyrazole, thiophene, pyridine, 2(1 H)-pyridinone, 4(1 H)-pyridinone, pyrimidine, pyrimidine-2,4-dione, benzofurane, benzodioxole, indole, benzimidazole, optionnellement substitué par 1 à 4 choisis parmi: o un atome d’halogène, notamment le fluor, o un méthyle, et o un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène, de préférence un fluorophényle, notamment le 4-fluorophényle.

Avantageusement, quand L représente -C(0)NH- ou -NHC(O), de préférence - NHC(O)-, p est de préférence égal à 0 ou 1 , notamment 0, et W est avantageusement choisi parmi:

• la 2(1 H)-pyridinone, optionnellement substitué par 1 à 4 substituants, notamment 1 à 2, indépendamment choisis parmi: o un aryle en C6-C10 éventuellement substitué par un atome d’halogène, de préférence un fluorophényle, notamment le 4-fluorophényle, et o un méthyle, et

• un cycloakyle en C3-C6 optionnellement substitué par un groupe -C(0)NHR ou -NHC(0)R dans lequel R représente un aryle en C6-C10, notamment un phényle, éventuellement substitué par un atome d’halogène, notamment le cyclopropyle substitué

En particulier, quand L représente C(0)NH- ou -NHC(O)-, de préférence -NH(CO)-), p est de préférence égal à 0 ou 1 , notamment 0 et W est alors choisi parmi :

Dans le mode de réalisation où L représente -C(0)NH- ou -NHC(O), de préférence - NHC(O), X représente un atome d’hydrogène ou un atome d’halogène, notamment le fluor, et Cy représente avantageusement un phényle.

De préférence, le composé est choisi parmi :

Compositions et Applications thérapeutiques

Les composés de la présente invention inhibent les récepteurs AXL et/ou FLT3 (et/ou ses mutants). De préférence, les composés de l’invention inhibent à la fois les récepteurs AXL, et FLT3 (et/ou ses mutants).

Plus particulièrement les composés de l’invention sont utilisés comme inhibiteurs de la prolifération des lignées cellulaires cancéreuses U20S, HepG2, A549, HCT116 et/ou HeLa.

Les composés de la présente invention et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, ou les compositions de l’invention sont donc utiles en tant qu’inhibiteurs d’AXL et/ou FLT3 (et/ou ses mutants), en particulier pour l’inhibition de la prolifération cellulaire et/ou de l’angiogenèse impliquée dans des maladies animales ou humaines.

La présente invention a pour objet les composés de de formule (I) tels que définis ci-dessus pour leur utilisation dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses.

Plus particulièrement, les composés peuvent être employés pour préparer des compositions pharmaceutiques comprenant à titre de principe actif au moins un composé de formule (I) décrits ci-dessus ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci, avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.

Ainsi, la présente invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un composé selon l’invention ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci en tant que principe actif, et un excipient pharmaceutiquement acceptable, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto-immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses. Lesdits excipients sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d’administration souhaité parmi les excipients habituels qui sont connus de l’homme du métier. Un objet de l’invention concerne donc l’utilisation des composés de formule (I) tels que définis ci-dessus ou d’une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus dans la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto-immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses.

En d’autres termes, l’invention porte sur l’utilisation d’un composé de formule (I) tel que défini ci-dessus ou d’une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus pour la préparation d’un médicament pour la prévention et/ou le traitement du cancer, des maladies auto immunes, inflammatoires, du rejet de greffes et des fibroses.

AXL et FLT3 étant impliquées dans de nombreux processus biologiques et des cibles thérapeutiquement validées, les composés de la présente invention et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, ou les compositions de l’invention, sont utiles en tant que médicament, notamment dans le traitement de pathologies associées à une dérégulation des protéines kinases, notamment AXL et/ou FLT3 (et/ou ses mutants). Ils peuvent notamment être destinés au traitement ou à la prévention d’une maladie médiée par AXL et/ou FLT3, telle que la tumorigénèse, les troubles immunitaires humains, les maladies inflammatoires, les maladies thrombotiques, les maladies cardio-vasculaires, les infections virales, bactériennes ou parasitaires, le rejet de greffe, les fibroses, les scléroses, les maladies neurodégénératives, l’endométriose, les maladies et insuffisance rénales, la neurofibromatose, les tumeurs hématologiques malignes et les cancers tels que les leucémies, les lymphomes, les syndromes myéloprolifératifs, le cancer de la peau, le cancer du poumon, le cancer de la plèvre, le cancer gastro-intestinal, le cancer du pancréas, les tumeurs du cerveau, le cancer du col de l'utérus, le cancer de l'ovaire, le cancer du foie, le cancer de la vessie, le cancer du sein, le mélanome, le cancer colorectal, le carcinome de l'endomètre, le carcinome des glandes salivaires, le cancer du rein, le cancer de la tête et du cou, le cancer de la prostate, le cancer de la vulve, le cancer de la thyroïde ou les sarcomes.

En particulier, le composé de formule (I) tel que défini ci-dessus ou la composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus est utile dans la prévention et/ou le traitement des cancers choisis parmi la tumorigénèse, les leucémies, les lymphomes, les syndromes myéloprolifératifs, le cancer de la peau, le cancer du poumon, le cancer de la plèvre, le cancer gastro-intestinal, le cancer du pancréas, les tumeurs du cerveau, le cancer du coi de l’utérus, le cancer de l'ovaire, le cancer du foie, le cancer de la vessie, le cancer du sein, le mélanome, le cancer colorectal, le carcinome de l'endomètre, le carcinome des glandes salivaires, le cancer du rein, le cancer de ia tête et du cou, le cancer de ia prostate, le cancer de la vulve, le cancer de ia thyroïde et les sarcomes. Les composés de la présente invention et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, ou les compositions de l’invention sont particulièrement utiles pour utilisation pour le traitement ou la prévention des cancers liquides ou solides. Les cancers liquides sont notamment les hémopathies malignes choisies parmi le lymphome non hodgkinien, le lymphome hodgkinien, le myélome, le sarcome myéloïde et les leucémies telles que la leucémie lymphoblastique aiguë (LLA), la leucémie myéloïde aiguë (LMA), la leucémie lymphoïde chronique (LLC), ou la leucémie myéloïde chronique (LMC). Les cancers solides sont typiquement les cancers du foie, du pancréas, des poumons, du sein, de la prostate, du rein, de la tête et cou, de la thyroïde, colorectal, le mélanome ou les cancers chimiorésistants.

Les composés de la présente invention peuvent être utilisés seuls ou en combinaison avec un agent thérapeutique supplémentaire, notamment utile dans un traitement contre le cancer, typiquement choisi parmi le groupe constitué d’un agent chimiothérapeutique ou antiprolifératif, un agent anti-inflammatoire, un agent immunomodulateur ou immunosuppresseur, un agent pour le traitement d'un trouble neurologique, un agent pour traiter une maladie cardiovasculaire, un agent pour le traitement de troubles osseux destructifs, un agent pour traiter une maladie du foie, un agent anti-viral, un agent pour traiter des troubles sanguins, un agent pour le traitement du diabète, un agent pour le traitement de troubles d’immunodéficience et d’un agent pour le traitement de la douleur. De préférence, l'agent thérapeutique supplémentaire est un agent chimiothérapeutique tel que l’étoposide.

La présente invention concerne également un kit comprenant : a) une première composition comprenant un composé selon l'invention ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci en tant que principe actif, et un excipient pharmaceutiquement acceptable, et b) une deuxième composition comprenant un agent thérapeutique supplémentaire, notamment utile dans un traitement contre le cancer, typiquement choisi parmi le groupe constitué d’un agent chimiothérapeutique ou antiprolifératif, un agent anti-inflammatoire, un agent immunomodulateur ou immunosuppresseur, un agent pour le traitement d'un trouble neurologique, un agent pour traiter une maladie cardiovasculaire, un agent pour le traitement de troubles osseux destructifs, un agent pour traiter une maladie du foie, un agent anti-viral, un agent pour traiter des troubles sanguins, un agent pour le traitement du diabète, un agent pour le traitement de troubles d’immunodéficience et d’un agent pour le traitement de la douleur, en tant que produit de combinaison pour utilisation séparée, concomitante ou étalée dans le temps. Ledit kit est utile dans la prévention et/ou le traitement du cancer. Les compositions pharmaceutiques selon l’invention peuvent être administrées par voie parentérale, telle que par voie intraveineuse ou intradermique, ou par voie topique, orale ou nasale. Les formes administrables par voie parentérale incluent les suspensions aqueuses, les solutions salines isotoniques ou les solutions stériles et injectables qui peuvent contenir des agents de dispersion et/ou des mouillants pharmacologiquement compatibles. Les formes administrables par voie orale incluent les comprimés, les gélules molles ou dures, les poudres, les granules, les solutions et suspensions orales. Les formes administrables par voie nasale incluent les aérosols. Les formes administrables par voie topique incluent les patchs, les gels, les crèmes, les pommades, les lotions, les sprays, les collyres.

De préférence, les composés ou compositions de l’invention sont administrés par voie orale ou parentérale (notamment intraveineuse).

La dose efficace d’un composé de l’invention varie en fonction de nombreux paramètres tels que, par exemple, la voie d’administration choisie, le poids, l’âge, le sexe, l’état d’avancement de la pathologie à traiter et la sensibilité de l’individu à traiter.

La présente invention, selon un autre de ses aspects, concerne également une méthode de traitement des pathologies ci-dessus indiquées qui comprend l’administration, à un patient en ayant besoin, d’une dose efficace d’un composé selon l’invention, ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptable ou d’une composition selon l’invention, de préférence par voie parentérale (notamment intraveineuse) ou voie orale.

Procédé de préparation des composés de l’invention

La présente invention concerne également les méthodes de préparation des composés décrits ci-dessus, notamment à partir du 5-bromo-3-iodo-//-/-pyrrolo[2,3-b]pyridine (II).

Selon le premier mode de réalisation, la méthode concernant l’invention est représentée dans le Schéma 1.

Schéma 1 où X et Cy sont tels que définis précédemment et Y est un groupe parmi -CHO, -CN, -CH2OH, -CO2H ou -NO2.

La méthode comprend au moins les étapes de : a) tosylation du 5-bromo-3-iodo- ^' //-/-pyrrolo[2,3-b]pyridine (II), par exemple avec le chlorure de toluène-4-sulfonyle en présence d’une base comme l’hydrure de sodium, pour obtenir l’intermédiaire (III), b) réaction de couplage de type Suzuki-Miyaura en présence d’un catalyseur au palladium comme le palladium dichloro [1 ,1 '-fî/s(diphénylphosphino)ferrocène] (Pd(dppf)Cl2), avec l’intermédiaire de formule (IV) dans lequel U représente un acide boronique ou son ester de pinacol, pour obtenir le composé de formule (V), c) réaction de couplage de type Suzuki-Miyaura en présence d’un catalyseur au palladium comme le palladium dichloro [1 ,1 '-fî/s(diphénylphosphino)ferrocène] (Pd(dppf)Cl2), avec l’intermédiaire de formule (VI) dans lequel U’ représente un acide boronique ou son ester de pinacol, pour obtenir l’intermédiaire de formule (VII), et d) hydrolyse du groupement tosyle par une base, de préférence l’hydroxyde de sodium ou le carbonate de césium, pour obtenir un composé de formule (I). La synthèse générale des composés intermédiaires aminés (VIII) est représentée dans le

Schéma 2.

Schéma 2 où X est tel que défini précédemment et Y est un groupement cyano ou nitro avec n égal 0 ou 1.

La méthode comprend au moins l’étape de : e) hydrogénation catalytique des fonctions nitro ou cyano en présence de catalyseur, par exemple palladium sur charbon ou nickel de Raney, et d’hydrogène par exemple sous pression d’hydrogène ou libéré in situ par du formiate d’ammonium sous irradiation micro ondes

L’homme du métier appliquera naturellement toutes les autres techniques de synthèse bien décrites et connues pour synthétiser ces types de composés.

Les composés de formule (I) dans lesquels Y représente un groupe L-(CH2) _P -W avec L représentant un groupe amide -NHCO-, sont par exemple obtenus par une méthode de synthèse à partir des dérivés amino-7-azaindoles représentée sur le Schéma 3 :

Schéma 3 où W, X et p sont tels que définis précédemment.

La méthode du Schéma 3 comprend au moins une étape de réaction de couplage peptidique entre un acide de formule W-(CH ₂ ) -C(0)0H et l’intermédiaire aminé de formule (VIII) tels que défini précédemment, notamment en présence d’au moins un agent activateur comme l’héxafluorophosphate de 2-(7-aza-//-/-benzotriazol-1-yl)-/V,/V,/V',/V-tétraméthylu ronium (HATU) et d’une base comme la diisopropyléthylamine (DIEA).

L’homme du métier appliquera naturellement toutes les autres techniques de synthèse bien connues pour obtenir ces types de composés amides. Les composés de formule (I) dans lesquels Y représente un groupe L-(CH2) _P -W avec L représentant un groupe -CONH-, sont par exemple obtenus par une méthode de synthèse à partir des dérivés 7-azaindole carboxyliques de formule (IX) représentée sur le Schéma 4 selon deux méthodes parmi d’autres:

Schéma 4 où W et p sont tels que définis précédemment.

De manière avantageuse, les méthodes du Schéma 4 comprennent au moins une étape de réaction de couplage peptidique entre un acide de formule (IX) et une amine de formule W- (CH2) -NH2, soit par couplage, soit par génération in situ des chlorures d’acyle par action préalable du chlorure de thionyle.

L’homme du métier appliquera naturellement toutes les autres techniques de synthèse bien connues pour obtenir ces types de composés amides. Selon un autre mode de réalisation, concernant la méthode de synthèse des composés imines ou amines secondaires de la présente invention, i.e. les composés de formule (I) dans laquelle Y représente un groupe L-(CH2) -W avec L représentant un groupe -CH=N- ou -CH2NH-, trois méthodes parmi d’autres sont représentées dans le Schéma 5 :

Schéma 5 où W, X, Cy et p sont tels que définis précédemment.

De manière avantageuse, les méthodes du Schéma 5 comprennent au moins une étape d’amination réductrice entre soit, un composé de formule (VIII) dans lequel n est égal à 1 , avec des aldéhydes de formule W-CHO, soit entre les 7-azaindoles aldéhydes de formule (X) et une amine de formule W-(CH2) -NH2.

Les méthodes du Schéma 5 comprennent également une réaction de condensation entre les composés 7-azaindoles aldéhydes de formule (X) et une amine de formule W-(CH2) _P -NH2 pour former les composés imines de formule (XI).

Les aldéhydes de formule W-CHO et les amines de formule W-(CH2) -NH2 sont notamment disponibles dans le commerce, ou facilement obtenus selon des procédés de préparation connus par l’homme du métier.

L’homme du métier appliquera naturellement toutes les autres techniques de synthèse bien connues pour obtenir ces types de composés imines et amines.

Une méthode pour synthétiser les composés phénols selon la présente invention est représentée dans le Erreur ! Source du renvoi introuvable, suivant :

De manière avantageuse, la méthode comprend au moins l’étape suivante : j) déméthylation du composé méthoxyphényle en présence de tribromure de bore (BBr3) pour former l’hydroxyphényle désiré.

L’homme du métier appliquera naturellement toutes les autres techniques de synthèse bien connues pour synthétiser les hydroxyphényles souhaités.

DESCRIPTION DES FIGURES

Figure 1 : Évaluation de l’activité anti-cancéreuse des composés 4 et 15 sur les cellules HepG2. Les valeurs sont des moyennes de triplicates + écart-type.

Figure 2 : Évaluation de l’activité anti-cancéreuse des composés 4 et 15 sur les cellules HCT 116. Les valeurs sont des moyennes de triplicates + écart-type.

Figure 3 : Évaluation de l’activité anti-cancéreuse des composés 4 et 15 sur les cellules A549. Les valeurs sont des moyennes de triplicates + écart-type. Figure 4 : Évaluation de l’activité anti-cancéreuse des composés 4 et 15 sur les cellules U20S. Les valeurs sont des moyennes de triplicates + écart-type.

EXEMPLES

L’invention sera mieux comprise à la lecture des exemples suivants, qui sont donnés à titre purement illustratifs et ne devraient pas être interprétés comme limitant la portée de la présente invention.

Exemple 1. Synthèse Matériel

Les synthèses et analyses ont été réalisées dans les conditions suivantes.

Résonance Magnétique Nucléaire ¹ H et ¹³ C:

Appareil : Bruker Avance 400 (400 MHz); Bruker Avance 300 (300 MHz)

Conditions d’utilisation : Température ambiante, déplacements chimiques exprimés en partie par million (ppm), multiplicité des signaux indiquée par des lettres minuscules (singulet s, doublet d, triplet t, quadruplet q, multiplet m), sulphoxyde de diméthyle d ₆ , méthanol d4, chloroforme di comme solvants deutérés.

Chromatographie Liquide Haute Pression (HPLC):

Appareil : Agilent Technology 1260 Infinity

Conditions d’utilisation : Colonne Zorbax SB-C18 ou Eclipse plus (2.1 x 50 mm), 1.8 pm; température: 30°C, débit : 0.5 mL/min pour les méthodes X et Y et 0.4 mL/min pour la méthode Z, gradient d’élution Eau (A) /Acétonitrile (B) /Acide formique 0.1% (Temps (min)/% B) :

• Method X: 0/10, 0.3/10, 5.7/100, 6.0/100

• Method Y: 0/10, 1/50, 6/100, 8/100

• Method Z: 0/10, 11/100, 15/100

Spectrométrie de Masse (MS) :

Appareil·. Quadripole Agilent Technologies 6120

Conditions d’utilisation : ElectroSpray (ESI) en mode positif et/ou négatif.

Pesées :

Appareil : Denver Instrument TP214 (précision 0.1 mg)

Conditions d’utilisation : Pesées effectuées au milligramme près.

Réactions sous pression :

Appareil : Autoclave Parr 300 mL.

Conditions d’utilisation : Hydrogénation sous 20 bars d’hydrogène.

Réaction sous irradiation micro-ondes :

Appareil : CEM Discover SP® Conditions d’utilisation : Puissance de 200 Watts, Vitesse d’agitation moyenne

Dans la suite, les abréviations suivantes sont utilisées :

1 ^ère étape, synthèse de la 5-bromo-3-iodo-1-(toluène-4-sulfonyl)-1/-/-pyrrolor2,3-b1py ridine (III)

3 g de 5-bromo-3-iodo-1/-/-pyrrolo[2,3-b]pyridine (II) sont dilués dans 60 ml_ de THF anhydre sous argon et refroidis dans un bain de glace. 558mg (1 .5 eq) d’hydrure de sodium (60%) sont ajoutés lentement et le milieu est agité à 0°C pendant 20 minutes. Puis le chlorure de tosyle (2.11g, 1 ,2 eq) est ajouté, et le milieu est agité à TA pendant 5 heures. Le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est suspendu dans un minimum d'éthers de pétrole et filtré. Le précipité est lavé deux fois avec une solution d’hydroxyde de sodium 2M, puis séché sous vide pendant une nuit.

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d6) d (ppm) 8.52 (d, J = 1 .9, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.01 (m, 3H), 7.44 (d, J = 8.2, 2H), 2.51 (s, 3H).

Rendement : 97% ; HPLC : 99% ; MS [M+1] : 476.9-478.9

2 ^ème étape, synthèse générale des 3-5-bis-aryl-1/-/-pyrrolor2,3-b1pyridines

Méthode 1 : Dans un schlenck sous argon, le 5-bromo-3-iodo-1-(toluène-4-sulfonyl)-1/-/- pyrrolo [2,3-b] pyridine (100 mg),, le premier acide boronique à coupler (1 eq) et K2C03 (3 eq) sont, suspendus dans un mélange dioxane/eau (9/1 , 3 mL), Le mélange est dégazé sous Argon pendant 20 minutes. Pd(dppf)Ch (2%) est ajouté et le mélange est agité pendant 5 heures à reflux. Après contrôle de l’achèvement de la réaction de couplage par analyse LC/MS, le second acide boronique (1 ,2 eq) et K2C03 (3 eq) sont ajoutés au milieu qui est dégazé à nouveau sous argon pendant 20 minutes. Pd(dppf)Ch (2%) est alors ajouté et le mélange est agité à reflux pendant la nuit. Les solvants sont évaporés, le résidu est repris dans l'acétate d'éthyle. La phase organique est, lavée avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, puis une solution aqueuse saturée en NaCI, séchée sur Na2S04 anhydre, filtrée et évaporée. Le milieu est repris dans un mélange de tétrahydrofurane/ méthanol (1/1 , 6 mL) et agité pendant 3 heures à TA avec du carbonate de césium (3 eq). Les solvants sont évaporés, le résidu est repris dans l'acétate d'éthyle, lavé avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, puis une solution aqueuse saturée en NaCI, séché sur Na2S04 anhydre, filtré et évaporé à sec, puis purifié sur colonne de silice phase inverse (eau/acétonitrile) avec 1% d'acide trifluoroacétique. Le composé est isolé après neutralisation avec NaHC03.

Méthode 2 : Le 5-bromo-3-iodo-1-(toluène-4-sulfonyl)-1/-/-pyrrolo [2,3-b] pyridine (III) (100 mg),le premier acide boronique à coupler (IV) (1 eq) et le carbonate de potassium (3 eq) sont suspendus dans un mélange dioxane/eau (3/1 , 3 mL), et le mélange est dégazé sous argon pendant 20 minutes. Pd(dppf)Cl2 (2%) est ajouté et le mélange est agité à 80°C sous irradiation micro-ondes pendant 1 à 3 fois 20 minutes jusqu’à consommation totale du réactif de départ. Le milieu réactionnel est lavé par une solution aqueuse saturée en NaHC03 et extrait à l’acétate d’éthyle. Les solvants sont évaporés, le résidu est repris dans l'acétate d'éthyle, lavé avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, séché sur Na2S04 anhydre, filtré et évaporé à sec, puis purifié sur colonne de silice. Le composé est alors dissout dans un mélange dioxane/eau (3/1, 4 mL), en présence du second acide boronique ou son ester de pinacol (VI) (1 ,2 eq) et K2C03 (3 eq). Le milieu est dégazé à nouveau sous argon pendant 20 minutes, Pd(dppf)Cl2 (0.025 eq) est alors ajouté et le mélange est agité à 120°C pendant 45 minutes sous irradiation micro-ondes. 500 pL de soude 1 M (3 eq) sont ajouté au milieu réactionnel et agité à 100°C pendant 45 minutes sous irradiation micro-ondes. Le milieu réactionnel est lavé avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, extrait à l'acétate d'éthyle, séché sur Na2S04 anhydre, filtré et évaporé à sec, puis purifié sur colonne de silice phase normale (dichlorométhane/méthanol-ammoniaque).

Synthèse des amines

Méthode 1 : Synthèse des amines par réduction des composés nitrés correspondants. Protocole 1 : Le dérivé nitro est placé dans 200 mL de méthanol dans un autoclave. 10% massique de palladium sur charbon 10% est ajouté sous argon. L'autoclave est fermé, purgé en Argon, et placé sous 30 bars d'hydrogène. Le milieu est agité à température ambiante pendant une nuit. L'autoclave est ensuite vidé, purgé en Argon. Le milieu est filtré sur célite puis lavé au méthanol. Le filtrat est évaporé, repris en acétate d'éthyle, lavé deux fois avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, une fois avec une solution aqueuse saturée en NaCI, séché sur Na2S04, filtré sur coton et évaporé à sec pour donner le dérivé amine désiré.

Protocole 2 : 100 mg (0.3 mmol) de dérivé nitro et 189 mg (10 eq) de formiate d’ammonium sont mis en suspension dans 3 ml_ de méthanol sous argon. Une suspension de 15 mg de palladium sur charbon dans 1 ml_ de méthanol est alors ajoutée et le tout est agité pendant 30 minutes à 130°C sous irradiations micro-ondes. Le milieu est filtré sur célite puis lavé au méthanol. Le filtrat est évaporé à sec puis purifié sur colonne de silice phase normale (éluant : dichlorométhane/méthanol 97/3).

Synthèse des différents acides carboxyliques non commerciaux :

L’acide 1-(4-fluoro-phényl)-6-méthyl-2-oxo-1 ,2-dihydro-pyridine-3-carboxylique a été obtenu conformément à la procédure décrite [Flynn ét al. Organic Process Research & Development (2014), 18(4), 501-510] (HPLC : 97% ; MS [M+1] : 248.2).

L’acide 1-(4-fluoro-phénylcarbamoyl)-cyclopropane carboxylique a été obtenu conformément à la procédure décrite [Zhan ét al. Médicinal Chemistry Letters (2014), 5(6), 673-678] (HPLC : 100% ; MS [M+1] : 224.1)

Synthèse générale des composés amides à partir des composés amino-7-azaindoles et d’acides carboxyliques.

L’acide carboxylique (1eq) est dissout dans du DMF anhydre et placé dans un schlenck séché, sous atmosphère d'Argon. La N,N'-dicyclohexylcarbodiimide (1eq), puis le dérivé amino-7- azaindole (1 eq) sont ajoutés. Le milieu est alors agité à 70°C pendant une nuit. Le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est alors dissout dans de l'acétate d'éthyle, lavé deux fois avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, une fois avec une solution aqueuse saturée en NaCI, séché sur sulfate de sodium anhydre, filtré sur coton, évaporé à sec, et purifié sur colonne de silice phase inverse (eau/acétonitrile) avec 1% d'acide trifluoroacétique pour donner le dérivé amide désiré.

Amination réductrice à partir d’amino-azaindoles

Le dérivé aldéhyde (1 eq) et le dérivé amine (1 eq) sont placés dans un ballon et dissout dans un mélange méthanol / acide acétique (9/1). Le mélange est agité 3 heures à température ambiante puis le cyanoborohydrure de sodium (2 eq) est ajouté et le milieu est agité à température ambiante pour la nuit. Le solvant est évaporé, le résidu est repris en acétate d'éthyle, lavé deux fois avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, une fois avec une solution aqueuse saturée en NaCI, séché sur Na2S04anhydre, filtré sur coton et évaporé à sec. Le résidu obtenu est purifié sur colonne de silice avec un gradient de 100% dichlorométhane à 90/10 dichlorométhane/méthanol-ammoniacal.

Amination réductrice à partir des formyl-azaindoles

Le dérivé aldéhyde (1 eq) et le dérivé amine (1 eq) sont dissous dans un mélange méthanol / acide acétique (9/1). Le mélange est agité 3 heures à température ambiante puis le cyanoborohydrure de sodium (2 eq) est ajouté et le milieu est agité à température ambiante pour la nuit. Le solvant est évaporé, le résidu est repris en acétate d'éthyle, lavé deux fois avec une solution aqueuse saturée en NaHC03, une fois avec une solution aqueuse saturée en NaCI, séché sur Na2S04 anhydre, filtré sur coton et évaporé à sec. Le résidu obtenu est purifié sur colonne de silice avec un gradient de 100% dichlorométhane à 90/10 dichlorométhane/méthanol-ammoniacal.

Exemple 2. TESTS BIOLOGIQUES

L’évaluation des activités anti-cancéreuses ont été réalisées sur les lignées cellulaires cancéreuses humaines suivantes : a- Activité anti-tumorale des composés

Les lignées cellulaires cancéreuses (1x10 ⁴ cellules par puits) sont distribuées dans des plaques 96 puits et incubées avec des concentrations croissantes de composé pendant 36 heures. La prolifération cellulaire est déterminée en mesurant la réduction du MTS [3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfop henyl)-2H-tetrazolium] en présence de phénazine éthosulfate (PES), à l’aide du kit Cell Titer 96 Aqueous One Solution (Promega). Les valeurs sont normalisées par rapport à celles des puits contrôle traités avec du DSMO (0).

Les résultats sont illustrés en Figures 1 à 4 et dans le tableau suivant :

EC50 des activités anti-tumorale des composés 4 et 15 sur les cellules U20S, A549, HCT116 et HepG2. Les valeurs EC50 ont été calculées à partir de courbes dose-réponse sigmoïdales en utilisant le logiciel Prism 5.0 Graph-Pad (GraphPad Software, La Jolla, CA, USA), en normalisant les valeurs à celles des puits contrôle traités avec du DSMO (0%) et les puits contrôle ne contenant pas de cellules (100%).

Les composés 4 et 15 sont donc fortement inhibiteurs de la prolifération cellulaire dans au moins deux types cellulaires différents, indiquant que ces molécules sont capables de bloquer la croissance tumorale (prolifération des cellules épithéliales).