Nouveaux composés dipeptidiques, leur procédé de fabrication et une nouvelle application thérapeutique de composés dipeptidiques.

La présente invention concerne des nouveaux composés dipeptidiques, leur procédé de fabrication et une nouvelle application thérapeutique de composés dipeptidiques.

Les infections bactériennes sont habituellement traitées par des antibiotiques capables d’inhiber la croissance de la bactérie impliquée, voire la tuer. Parmi les antibiotiques disponibles, ceux de la classe des b-lactames sont les plus utilisés en première intention. Cependant, la résistance bactérienne à cette famille de molécules ne cesse d’augmenter. Un mécanisme de résistance implique la production, par les bactéries résistantes, d’enzymes de type b-lactamase qui détruisent la structure moléculaire des antibiotiques de la classe des b- lactames. La résistance bactérienne concerne même les antibiotiques les plus récents et les plus efficaces, à savoir les carbapénèmes.

Les carbapénémases sont une classe d’enzymes parmi les b-lactamases. Les enzymes de la classe des carbapénémases sont ainsi appelées car elles sont capables d’hydrolyser le cycle lactame d’antibiotiques appartenant à la classe des Carbapénèmes.

Il existe différents systèmes de classification des enzymes b-lactamase. La classification la plus simple consiste en une classification basée sur la séquence protéinique de l’enzyme. Les enzymes sont ainsi divisés en 4 classes, A, B, C, et D (Hall BG, Barlow M. Revised Ambler classification of (beta}4actamases. J Antimicrob. Chemother. 2005 June, 55(6), 1050-1).

Les classes A, C, et D sont des enzymes ayant un résidu de sérine dans le site actif et sont de ce fait également appelées « Serine^-lactamases », ou « SBLs ». Dans ces cas, l’ouverture du cycle lactame d’une molécule antibiotique s’effectue par attaque nucléophile du groupement hydroxyle de la sérine susmentionnée, sur la fonction carbonyle du cycle lactame.

La classe B sont des enzymes ayant un ou deux cations de zinc dans leur site actif. On parle alors de « métallo^-lactamases », ou «MBLs ». Une molécule d’eau, ou un ion hydroxyde peut être complexée audits cations de zinc. La molécule d’eau nucléophile, ou ion d’hydroxyde nucléophile peuvent ensuite ouvrir le cycle lactame d’une molécule antibiotique par attaque sur la fonction carbonyle du cycle lactame.

Les enzymes de carbapénémases se trouvent parmi les classes A, B, et D. Le Schéma 1 montre la structure générale des antibiotiques de la classe des Carbapénèmes, ainsi que la structure chimique de trois Carbapénèmes utilisés cliniquement. structure générale des carbapénèmes

Imipenem Meropenem Doripenem

Schéma 1

Un moyen de lutter contre la résistance bactérienne aux antibiotiques de la classe des b- lactames, est de développer des inhibiteurs de b-lactamase. Des résultats intéressants ont été obtenus en thérapie de combinaison, dans laquelle l’administration d’un antibiotique peut être accompagnée par l’administration d’un inhibiteur de b-lactamase. Ainsi, plusieurs inhibiteurs ont été mis sur le marché, comme par exemple l’acide clavulanique, le sulbactam, l’avibactam, ou le tazobactam. Toutefois, ces composés inhibent les enzymes de type Serine- b-lactamase (SBL), mais sont inactifs envers les enzymes métallo^-lactamase de type B (MBL). Seulement quelques composés ayant une activité inhibitrice sur l’ensemble des classes A, B, C et D sont connus ce jour et aucun inhibiteur de b-lactamase de type B n’est utilisé cliniquement à ce jour. II existe donc un réel besoin de mettre à disposition de nouveaux inhibiteurs de b-lactamase, afin de lutter contre la résistance bactérienne, notamment des inhibiteurs ayant un effet contre l’ensemble des classes des b-lactamases. L’un des buts de l’invention est la mise à disposition de composés dipeptidiques pour utilisation comme inhibiteurs de b-lactamases.

L’un des autres buts de l’invention est la mise à disposition de composés dipeptidiques ayant une activité inhibitrice sur l’ensemble des classes A, B, C et D des b-lactamases. L’un des autres buts de l’invention est la mise à disposition de composés dipeptidiques pour utilisation comme médicament.

L’un des autres buts de l’invention est la mise à disposition de nouveaux composés dipeptidiques.

L’un des buts de l’invention est la mise à disposition de procédés de synthèse de composés dipeptidiques.

L’un des autres buts de l’invention est la mise à disposition de compositions pharmaceutiques comprenant ces composés dipeptidiques.

Un autre but de l’invention est l’utilisation de ces composés comme médicament en combinaison avec un traitement antibiotique, séparée ou étalée dans le temps.

Un premier objet de la présente invention est un composé de Formule I

Formule I dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio, • R-2 représente

■ H,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ Ci à Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li,

• R ₃ représente

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle,

• R ₄ représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ Ci à Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio,

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

^■ trityle, ou

^■ -C(0)R ₆ , Ri, étant un groupement aryle, notamment phényle, ou un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle, ledit aryle, alkylaryle ou hétéroaryle pouvant être substitué sur le cycle aromatique par un ou plusieurs substituants choisis parmi : halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

-N(¾)2, RS étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C ₃ à Cio, cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio, ledit composé de Formule I pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule I sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule I ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations, pour son utilisation comme inhibiteur de b-lactamases.

Le terme « aryle » désigne un groupement aromatique comprenant 5 à 16 atomes de carbone au sein du cycle aromatique, notamment de 6 à 12 atomes de carbone, en particulier comprenant 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ou 16 atomes de carbone. Phényle ou naphtyle sont des exemples de groupements aryles selon la présente invention.

Le terme « hétéroaryle » désigne un groupement aryle tel que défini ci-dessus, comprenant des atomes autres que les atomes de carbone, en particulier N, O ou S au sein du cycle aromatique. Pyridyle, imidazoyle, ou furanyle sont des exemples de groupements hétéroaryles selon la présente invention.

Par « groupement alkyle linéaire en Ci à Cio » il faut entendre : un groupe méthyle en Ci, un groupe éthyle en C2, un groupe propyle en C3, un groupe butyle en C4, un groupe pentyle en C5, un groupe héxyle en Cr _>, un groupe heptyle en C7, un groupe octyle en Cx, un groupe nonyle en C9, ou un groupe décyle en Cio.

Par « groupement alkyle ramifié », il faut comprendre un groupe alkyle linéaire tel que défini ci-dessus comprenant des substituants choisis parmi la liste des groupes alkyles linéaires définie ci-dessus, lesdits groupes alkyles linéaires étant également susceptibles d’être ramifiés. Parmi les groupements alkyles ramifiés on peut notamment citer un groupement /f/V-butyle, .svc-butyle et iso-propyle.

Par « groupement hétéroalkyle linéaire en Ci à Cio », il faut entendre : une chaîne alkyle linéaire de 1 à 10 atome(s) de carbone, notamment de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10 atome(s) de carbone, en particulier de 2 à 10, ou de 5 à 10 atomes de carbone, comprenant un ou plusieurs hétéroatomes, en particulier choisi(s) parmi O, ou N, notamment 1, 2, 3, 4 ou 5 hétéroatomes. On peut notamment citer une chaîne à base d’éthylène glycol ou d’éthylène amine.

Par « groupement hétéroalkyle ramifié », il faut comprendre un groupe hétéroalkyle tel que défini ci-dessus comprenant des substituants choisis parmi la liste des groupes alkyles linéaires ou d’hétéroalkyles linéaires définis ci-dessus, lesdits groupes alkyles linéaires ou hétéroalkyles linéaires étant également susceptibles d’être ramifiés.

Par « groupement cycloalkyle en Ci à Cio » il faut entendre : un groupe cyclopropyle en C ₃ , un groupe cyclobutyle en C ₄ , un groupe cyclopentyle en C ₅ , un groupe cyclohexyle en Cr _> , un groupe cycloheptyle en C ₇ , un groupe cyclooctyle en Cx, un groupe cyclononyle en C ₉ , ou un groupe cyclodécyle en Cio.

Par « groupement cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio » il faut entendre : un groupement cycloalkyle tel que défini ci-dessus, comprenant en outre un ou plusieurs hétéroatomes, notamment choisi(s) parmi O, N, ou S, dans son cycle, en particulier 1 ou 2 hétéroatomes. Parmi les groupements cyclohétéroalkyles, on peut citer morpholine, ou tetrahydropyranyle.

Par « groupement Ci à C 10-alkylaryle » il faut entendre un groupement aryle tel que défini ci- dessus, lié à l’atome d’oxygène, dans le cas de R ₂ , ou à l’atome de soufre dans le cas de R ₄ , par un groupement alkyle en Ci à Cio tel que défini ci-dessus.

Au sens de la présente invention, il est entendu par « pharmaceutiquement acceptable » ce qui est utile dans la préparation d’une composition pharmaceutique et qui est de pureté et de qualité suffisante pour une utilisation vétérinaire ou humaine.

Au sens de la présente invention, il est entendu par « sous la forme d’un sel » un composé salifié, de préférence un sel d’ammonium comprenant un atome d’azote protoné, en particulier sous forme de chlorhydrate, ou de trifluoroacétate, ou comprenant un atome d’oxygène déprotoné, sous forme de carboxylate.

Au sens de la présente Invention, l’expression « ledit aryle, alkylaryle ou hétéroaryle pouvant être substitué sur le cycle aromatique par un ou plusieurs substituants » se réfère, indépendamment l’un de l’autre, à l’ensemble des groupements Ri à R ₄ . Les composés selon la présente invention comportent au moins deux centres asymétriques, notamment 2 ou 4 centres asymétriques. En effet, lesdits composés sont des dipeptides constitues d’un dérivé de cystéine, et d’un dérivé de tryptophane (Schéma 2). Chacun de ces deux dérivés comprend un centre asymétrique * dont la configuration peut être R, ou S, ou un mélange de ces configurations. Les groupements Ri, R2, R3 et R4 peuvent par ailleurs également comprendre un ou plusieurs centre(s) asymétrique(s).

Les inventeurs ont trouvé que les composés selon la présente invention peuvent être utilisés dans la lutte contre la résistance bactérienne aux antibiotiques appartenant à la classe des b- lactames. Il a été trouvé que les molécules selon la présente invention inhibent les enzymes de type b-lactamase et peuvent ainsi être utilisées en antibiothérapie, en combinaison avec un traitement antibiotique.

En d’autres termes, les composés de Formule I peuvent être utilisés dans le cadre de la prévention ou d’un traitement d’une infection bactérienne, dans lequel l’infection bactérienne est traitée par au moins un antibiotique appartenant à la classe des b4actames.

Il s’agit en particulier d’infections impliquant une bactérie Gram négative d’intérêt clinique en médecine humaine ou vétérinaire. Parmi les germes visés on peut notamment citer, à titre d’exemple : les Entérobactéries, Pseudomonas spp et Acinetobacter spp. A titre d’exemple, et de façon non-limitative, parmi les infections bactériennes on peut citer : les pneumopathies, les bactériémies, les infections urinaires (cystites et pyélonéphrites), les infections des tissus mous, les infections cutanées ou les infections du site opératoire. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle :X représente NH.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à e, notamment méthyle, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li,

• R3 représente

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, ledit aryle ou hétéroaryle pouvant être substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à C _Ô , notamment méthyle,

• R4 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à C _Ô , notamment méthyle,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ trityle,

^■ acétyle, ou

^■ benzoyle, ledit composé de Formule I pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule I sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule I ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente 0 ou 1,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ alkyle en Ci à C3, notamment méthyle,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à C3, notamment méthyle, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal choisi parmi Na, K, ou Li,

• R3 représente

^■ aryle, notamment un phényl optionnellement substitué par un ou plusieurs substituants alkyle en Ci à C3, notamment méthyle,

• R4 représente

^■ H,

^■ trityle,

^■ acétyle, ou

^■ benzoyle, ledit composé de Formule I pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ cyclohétéroalkyle en C3 à Cio,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li,

• R ₃ représente

^■ aryle,

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, si X = NH, ou NH(CO), ledit aryle est substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle, -OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cr _>, linéaire ou ramifié,

-N(¾)2, R _Ô étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C3 à Cio, cyclohétéroalkyle en C3 à Cio,

• R ₄ représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio,

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

^■ trityle, ou

^■ -C(0)R ₆ , FC, étant un groupement aryle, notamment phényle, ou un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle, ledit aryle, alkylaryle ou hétéroaryle pouvant être substitué sur le cycle aromatique par un ou plusieurs substituants choisis parmi : halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

-N(¾) ₂ , R¾ étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C ₃ à Cio, cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio, ledit composé de Formule I pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule I sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule I ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle : ledit composé de Formule I est sous la forme d’un dimère de deux molécules de Formule I liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé étant un composé de Formule II dans laquelle m, n, X, Ri, R ₂ , R ₃ et R ₄ sont tels que définis ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, dans laquelle les centres asymétriques étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Dans ce mode de réalisation, les molécules de Formule I, comprenant un groupement thiol - SH, i.e. dans le cas où R ₄ est H, sont sous la forme d’un dimère de Formule II, dans lequel les groupements thiol sont oxydés en groupements dithiol -S-S-.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle : X représente NH, et m représente 1, ledit composé étant un composé de Formule I-A dans laquelle n, Ri, R2, R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule I-A ou de Formule II-A pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I-A ou de Formule II-A étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, formule I dans laquelle : X représente O, et m représente 1, ledit composé étant un composé de Formule I-B

Formule I-B ou un dimère de Formule II-B dans laquelle n, Ri, R ₂ , R ₃ et R ₄ sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule I-B ou de Formule II-B pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I-B ou de Formule II-B étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations. Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule I dans laquelle : X représente NH(CO), et m représente 0, ledit composé étant un composé de Formule I-C

Formule I-C ou un dimère de Formule II-C dans laquelle n, Ri, R ₂ , R ₃ et R ₄ sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule I-C ou de Formule II-C pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule I-C ou de Formule II-C étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Dans ce qui précède et dans ce qui suit, on entend par « composé de Formule I », un composé de Formule I pouvant également être sous la forme d’un composé de Formule II, de Formule I-A, de Formule I-B, de Formule I-C, de Formule II-A, de Formule II-B ou de Formule II-C.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ledit composé étant présent sous la forme d’un seul diastéréoisomère, notamment avec un excès diastéréomérique supérieur à 95%.

On entend également par « supérieur à 95% », supérieur à 96%, supérieur à 97%, supérieur à 98% et en particulier supérieur à 99%.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, dans laquelle le b-lactamase appartient à la classe A, B, C ou D.

Les Inventeurs ont trouvé de façon surprenante que les molécules de la présente invention agissent à la fois sur les enzymes de type sérine-P-lactamase, ainsi que sur les enzymes de type étal 1 o-b-l actamase, qui n’opèrent pourtant pas par le même mécanisme.

Les molécules de la présente invention sont notamment des inhibiteurs des enzymes b- lactamases de la classe A, B et D.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, dans laquelle la b-lactamase appartient à la classe des carbapénémases.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, dans laquelle la carbapénémase est de type NDM, de type OXA, ou de type KPC, notamment de type NDM.

Les inventeurs ont trouvé que les composés de la présente invention, peuvent montrer une sélectivité dans l’inhibition des différents enzymes b-lactamases. A titre d’exemple, le composé de structure ci-dessous, n’inhibe pas les enzymes de type OXA-48 (classe B) et KPC-2 (classe A), mais inhibe de façon considérable l’enzyme NDM-1 (classe B), à savoir 92% d’inhibition à 5 mM.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, dans laquelle le b-lactamase appartient à la classe A, B, C ou D, notamment à la classe des carbapénémases, en particulier dans laquelle le carbapénémase est de type NDM, de type OXA, ou de type KPC.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ladite utilisation étant une utilisation dans le cadre d’un traitement d’infections bactériennes.

Par « traitement », on entend un moyen de soigner une pathologie déclarée et détectable. Un traitement d’infections bactériennes selon la présente invention, consiste en un traitement par l’administration d’au moins un antibiotique appartenant à la classe des b-lactames, notamment appartenant à la classe des carbapénèmes.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, pour son utilisation tel que défini ci-dessus, ledit composé étant utilisé en association avec un antibiotique appartenant à la classe des b-lactames.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, dans laquelle l’antibiotique est choisi parmi les dérivés de la pénicilline , les céphalosporines, les monobactames , et les carbapénèmes, en particulier choisi parmi les carbapénèmes. Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ladite utilisation étant une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps dans le cadre d’un traitement antibiotique. L’expression « utilisation simultanée » signifie que le composé selon l’invention et l’agent antibiotique sont administrés en même temps.

L’expression « utilisation séparée ou étalée dans le temps » signifie que le composé selon l’invention et l’agent antibiotique sont administrés indépendamment l’un de l’autre, par exemple avec ou sans décalage dans le temps.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule I, tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, ledit composé étant choisi parmi :

ou leurs sels, solvatés ou hydrates pharmaceutiquement acceptables.

Un deuxième objet de la présente invention est un composé de Formule III dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ cyclohétéroalkyle en C3 à Cio,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li, • R-3 représente

^■ aryle,

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, si X = NH, ledit aryle est substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cr _>, linéaire ou ramifié,

-N(¾)2, FC étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C3 à Cio, cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

• R ₄ représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio,

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

^■ trityle, ou

^■ -C(0)R ₆ , FC, étant un groupement aryle, notamment phényle, ou un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle, ledit aryle, alkylaryle ou hétéroaryle pouvant être substitué sur le cycle aromatique par un ou plusieurs substituants choisis parmi : halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

-N(¾) ₂ , R¾ étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C ₃ à Cio, cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio, ledit composé de Formule III pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule III sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule III ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule III ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations, pour son utilisation comme médicament.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule III dans laquelle : X représente O, ou NHC(O).

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule III dans laquelle : X représente O, ou NH.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule III dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à e, notamment méthyle, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li, • R-3 représente

^■ aryle,

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, ledit aryle étant substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle,

• R.4 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à e, notamment méthyle,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ trityle,

^■ acétyle, ou

^■ benzoyle, ledit composé de Formule III pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule I sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule III ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule III ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, Formule III dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente 0 ou 1,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ou ^■ alkyle en Ci à C ₃ , notamment méthyle,

• R2 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à C ₃ , notamment méthyle, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal choisi parmi Na, K, ou Li,

• R3 représente

^■ aryle, substitué par un ou plusieurs substituants alkyle en Ci à C ₃ , notamment méthyle,

• R4 représente

^■ H,

^■ trityle,

^■ acétyle, ou

^■ benzoyle, ledit composé de Formule III pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule III étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Un troisième objet de la présente invention est un nouveau composé de Formule IV

Formule IV dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C3 à Cio, ou

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

• R ₂ représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li,

• R ₃ représente

^■ aryle,

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, si X = NH, ou NH(CO), ledit aryle est substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cr _>, linéaire ou ramifié,

-N(¾)2, R _Ô étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C ₃ à Cio, cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

• R ₄ représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ hétéroaryle, notamment imidazoyle,

^■ Ci-Cio-alkylaryle, notamment benzyle,

^■ alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

^■ hétéroalkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

^■ cycloalkyle en C ₃ à Cio,

^■ cyclohétéroalkyle en C ₃ à Cio,

^■ trityle, ou

^■ -C(0)R ₆ , Ri, étant un groupement aryle, notamment phényle, ou un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle, ledit aryle, alkylaryle ou hétéroaryle pouvant être substitué sur le cycle aromatique par un ou plusieurs substituants choisis parmi : halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, notamment méthyle,

-OR ₅ , R ₅ étant un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié,

-N(¾)2, R _Ô étant tel que défini ci-dessus, cycloalkyle en C3 à Cio, cyclohétéroalkyle en C3 à Cio, ledit composé de Formule IV pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule III sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule IV ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule IV ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un mode de réalisation préféré, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle X représente NH.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle :

• n représente 0 ou 1,

• m représente une valeur comprise de 0 à 4,

• X représente NH, O, -NHC(O),

• Ri représente

^■ H,

^■ aryle, notamment phényle, ou

^■ alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle

R ₂ représente ■ H, ^■ alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle, ou

^■ M ⁺ , M étant un métal notamment choisi parmi Na, K, ou Li,

• R.3 représente

^■ aryle, substitué en ortho, méta et/ou para par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à Ce, notamment méthyle,

^■ hétéroaryle, notamment pyridyle, ledit hétéroaryle pouvant être substitué par un ou plusieurs substituants choisis parmi halogène, notamment Cl, alkyle en Ci à e, notamment méthyle,

• R.4 représente

^■ H,

^■ alkyle en Ci à C _Ô , notamment méthyle,

^■ aryle, notamment phényle,

^■ trityle,

^■ acétyle, ou

^■ benzoyle, ledit composé de Formule IV pouvant être sous la forme d’un dimère dans lequel deux molécules de Formule IV sont liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé de Formule IV ou son dimère pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule IV ou de son dimère étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle ledit composé de Formule IV est sous la forme d’un dimère de deux molécules de Formule IV liées entre elles par un pont disulfure, ledit composé étant un composé de Formule V dans laquelle n, Ri, R ₂ , R ₃ et R ₄ sont tels que définis ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, dans laquelle les centres asymétriques étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle X représente NH, et m représente 1, ledit composé étant un composé de Formule IV-A

Formule IV-A ou un dimère de Formule V-A dans laquelle n, Ri, R ₂ , R ₃ et R ₄ sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule IV-A ou de Formule V-A pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule IV-A ou de Formule V-A étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle : X représente O, et m représente 1, ledit composé étant un composé de Formule IV-B

Formule IV-B ou un dimère de Formule V-B dans laquelle n, Ri, R2, R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule IV-B ou de Formule V-B pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule IV-B ou de Formule V-B étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, dans laquelle X représente NH(CO), et m représente 0, ledit composé étant un composé de Formule IV-C

Formule IV-C ou un dimère de Formule V-C dans laquelle n, Ri, R2, R3 et R4 sont tels que définis ci-dessus, ledit composé de Formule IV-C ou de Formule V-C pouvant être sous la forme d’un sel, d’un solvaté ou d’un hydrate pharmaceutiquement acceptable, les centres asymétriques dudit composé de Formule IV-C ou de Formule V-C étant de configuration R ou S, ou un mélange de ces configurations.

Dans ce qui précède et dans ce qui suit, on entend par « composé de Formule IV », un composé de Formule IV pouvant également être sous la forme d’un composé de Formule V, de Formule IV-A, de Formule IV-B, de Formule IV-C, de Formule V-A, de Formule V-B ou de Formule V-C.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, ledit composé étant présent sous la forme d’un seul diastéréoisomère, notamment avec un excès diastéréomérique supérieur à 95%.

On entend également par « supérieur à 95% », supérieur à 96%, supérieur à 97%, supérieur à 98% et en particulier supérieur à 99%. Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, choisi parmi :

ou leurs sels, solvatés ou hydrates pharmaceutiquement acceptables.

Procédures d’obtention des composés selon l’invention

Les composés selon la présente Invention peuvent être obtenus par des méthodes connues de l’homme de l’art. Les inventeurs ont également mis au point une voie de synthèse innovante, illustrée par le Schéma 3, pour le cas où X = NH, et m représente 1

Schéma 3

La première étape consiste en une addition de la cystéine A sur un aldéhyde B, pour conduire à un produit thiazolidine-4-carboxylique C. Le choix de l’aldéhyde B permet de contrôler l’identité du groupement R _3.

Une étape 2 de couplage peptidique entre l’acide carboxylique C et le dérivé de Tryptophane D permet d’isoler le dipeptide E. Le groupement R ₂ est un groupement formant un ester avec l’acide carboxylique du tryptophane, de préférence un groupement méthyle. A ce stade le groupement Ri peut être choisi par rutilisation d’un dérivé de tryptophane D portant ledit groupement Ri. Ledit dérivé de tryptophane peut être obtenu par des méthodes classiques, comme par exemple celles décrites dans la publication Tetrahedron, 2000, 56, p.5479-5492, ou dans la publication Eur. J. Org. Chem., 2000, p.3051-3057.

Une réduction à l’étape 3 permet ensuite d’ouvrir le cycle thiazolidine pour obtenir le composé F. Ledit composé F correspond à un composé de Formule I dans laquelle R4 est un atome d’hydrogène.

Le composé F peut ensuite être refonctionnalisé selon le Schéma 4, afin d’accéder à d’autres composés de Formule F

Par exemple, un groupement R4 autre qu’un atome d’hydrogène peut optionnellement être introduit lors d’une étape 4 d’alkylation du groupement thiol pour conduire au composé G.

2 étapes supplémentaires 5 et 6 peuvent ensuite optionnellement être mises en œuvre pour modifier le groupement R2. En effet, la matière première D (Schéma 3) est aisément disponible sous la forme d’ester méthylique, dans laquelle le groupement R2 est un méthyle. Il est alors possible d’hydrolyser, ou saponifier, ledit ester G lors d’une étape 5, pour obtenir l’acide carboxylique de formule H, dans laquelle R2 = H, puis de mettre en œuvre une réaction d’estérification lors d’une étape 6, afin d’obtenir le composé I portant le groupement R2 souhaité.

Schéma 4

Un quatrième objet de la présente invention est donc un procédé de synthèse d’un composé de Formule I, dans laquelle X représente un groupement NH, et m représente 1, comprenant :

• une étape 3 de réduction d’un dipeptide E pour obtenir un composé F, ledit composé de formule F ayant la structure de la Formule I dans laquelle R ₄ est un atome d’hydrogène,

R ₂ représente un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, groupement Ci à Cio-alkylaryle, ou un groupement benzyle, ou un groupement cycloalkyle en C ₃ à Cio, et

• optionnellement une étape 4 d’alkylation de la fonction thiol du composé F, pour obtenir le composé de Formule G, ledit composé de Formule C ayant la structure de la Formule I dans laquelle R ₄ est tel que défini précédemment, et optionnellement une étape d’hydrolyse ou de saponification de l’ester de Formule G, pour obtenir un acide, ou un sel de Formule H ledit composé de Formule H ayant la structure de la Formule I dans laquelle R ₂ représente H ou M ⁺ , M ⁺ étant tel que défini ci-dessus, et • optionnellement une étape d’estérification de l’acide, ou du sel de Formule H, pour obtenir un composé de Formule I

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un procédé de synthèse tel que défini ci-dessus, d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, ledit procédé comprenant : · une étape 2 de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane

D pour obtenir le dipeptide E,

R _I étant tel que défini précédemment, et

R2 représente un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, groupement alkylaryle, ou un groupement benzyle, ou un groupement cycloalkyle en C3 à Cio, et une étape 3 de réduction d’un dipeptide E pour obtenir un composé F, ledit composé de formule F ayant la structure de la Formule I dans laquelle R4 est un atome d’hydrogène,

R2 représente un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, groupement Ci à Cio-alkylaryle, ou un groupement benzyle, ou un groupement cycloalkyle en C ₃ à Cio, et

• optionnellement une étape 4 d’alkylation de la fonction thiol du composé F, pour obtenir le composé de Formule G, ledit composé de Formule C ayant la structure de la Formule I dans laquelle R4 est tel que défini précédemment, et

• optionnellement une étape d’hydrolyse ou de saponification de l’ester de Formule G, pour obtenir un acide, ou un sel de Formule H ledit composé de Formule H ayant la structure de la Formule I dans laquelle R2 représente H ou M ⁺ , M ⁺ étant tel que défini ci-dessus, et • optionnellement une étape d’estérification de l’acide, ou du sel de Formule H, pour obtenir un composé de Formule I

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un procédé de synthèse tel que défini ci-dessus, d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, ledit procédé comprenant : · une étape 1 d’addition de la cystéine A sur un aldéhyde B, pour obtenir le composé thiazolidine-4-carboxylique C, étape 1

-

R. ₃ étant tel que défini ci-dessus, et une étape 2 de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane D pour obtenir le dipeptide E,

R _I étant tel que défini précédemment, et

R. ₂ représente un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, groupement alkylaryle, ou un groupement benzyle, ou un groupement cycloalkyle en C ₃ à Cio, et • une étape 3 de réduction d’un dipeptide E pour obtenir un composé F, ledit composé de formule F ayant la structure de la Formule I dans laquelle R ₄ est un atome d’hydrogène,

R ₂ représente un groupement alkyle en Ci à Cio, linéaire ou ramifié, groupement Ci à Cio-alkylaryle, ou un groupement benzyle, ou un groupement cycloalkyle en C ₃ à Cio, et optionnellement une étape 4 d’alkylation de la fonction thiol du composé F, pour obtenir le composé de Formule G, ledit composé de Formule C ayant la structure de la Formule I dans laquelle R ₄ est tel que défini précédemment, et

• optionnellement une étape d’hydrolyse ou de saponification de l’ester de Formule G, pour obtenir un acide, ou un sel de Formule H ledit composé de Formule H ayant la structure de la Formule I dans laquelle R2 représente H ou M ⁺ , M ⁺ étant tel que défini ci-dessus, et • optionnellement une étape d’estérification de l’acide, ou du sel de Formule H, pour obtenir un composé de Formule I

Les inventeurs ont également mis au point la synthèse du Schéma 5 pour le cas ou X = NH(CO) et m représente 0 :

La première étape, l’étape 1’, consiste en une réaction d’acylation de la cystéine A permettant d’introduire le groupement R ₃ . Un couplage peptidique au stade 2’, suivi d’une hydrolyse des fonctions esters et thioesters permet d’isoler le composé N. Les groupements R ₂ et R ₄ peuvent ensuite être introduits de façon classique, respectivement par une réaction d’estérification, et par une réaction d’alkylation de la fonction thiol.

Les inventeurs ont également mis au point la synthèse du Schéma 6 pour le cas où X = O :

Schéma 6

La première étape, l’étape 1”, consiste en l’ouverture du cycle époxyde de la matière première O, par un thiolate protégé, permettant d’obtenir le composé P, dans lequel la fonction thiol est protégée par un groupement protecteur. Ledit groupement protecteur peut être groupement trityle, ou un autre groupement classiquement utilisé pour protéger une fonction thiol. Le groupement P peut également être un groupement R ₄ tel que défini ci- dessus. Une réaction d’alkylation classique au cours de l’étape 2” permet ensuite de former la liaison éther, et d’introduire le groupement R3.

Le groupement ester peut être saponifié ou hydrolysé au cours de l’étape 3” pour conduire au composé R sous la forme d’acide carboxylique, ou carboxylate.

Une étape 4” de couplage peptidique entre l’acide carboxylique R et le dérivé de Tryptophane D permet d’isoler le dipeptide S. Des réactions classiques de déprotection, saponification, alkylation et estérification donnent accès aux autres composés de Formule I.

Un cinquième objet de la présente invention est donc un procédé de synthèse d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, dans laquelle X représente un groupement O, et m représente 1, comprenant :

• une étape 4” de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane D pour obtenir le dipeptide E,

D optionnellement au moins 1 étape de déprotection/refonctionalisation pour obtenir un composé de Formule I

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un procédé de synthèse tel que défini ci-dessus, d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, ledit procédé comprenant : · une étape 3” de saponification, ou d’hydrolyse du groupement ester du compose de

Formule Q, pour obtenir un acide carboxylique de Formule R, une étape 4 de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane D pour obtenir le dipeptide E,

• optionnellement au moins 1 étape de déprotection/refonctionalisation pour obtenir un composé de Formule I

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un procédé de synthèse tel que défini ci-dessus, d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, ledit procédé comprenant :

• une étape 2’ ’ d’alkylation de l’alcool P pour obtenir un éther de Formule Q sans laquelle R3 est tel que défini dans la revendication 1, et • une étape 3” de saponification, ou d’hydrolyse du groupement ester du compose de Formule Q, pour obtenir un acide carboxylique de Formule R, une étape 4” de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane D pour obtenir le dipeptide E,

• optionnellement au moins 1 étape de déprotection/refonctionalisation pour obtenir un composé de Formule I

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un procédé de synthèse tel que défini ci-dessus, d’un composé de Formule I tel que définie ci-dessus, ledit procédé comprenant :

• une étape 1” d’ouverture d’un époxyde de formule O par un thiol nucléophile protégé par un groupement protecteur p, pour obtenir un alcool secondaire de Formule P, O dans laquelle p est un groupement protecteur, notamment un trityle, une étape 2” d’alkylation de l’alcool P pour obtenir un éther de Formule Q sans laquelle R3 est tel que défini dans la revendication 1, et • une étape 3” de saponification, ou d’hydrolyse du groupement ester du compose de Formule Q, pour obtenir un acide carboxylique de Formule R, une étape 4” de couplage peptidique entre ledit composé C et un dérivé de tryptophane D pour obtenir le dipeptide E,

• optionnellement au moins 1 étape de déprotection/refonctionalisation pour obtenir un composé de Formule I

Les différentes matières premières utilisées dans les synthèses décrites ci-dessus, peuvent être utilisées avec des stéréochimies, R, S ou racémique, selon la stéréochimie que l’on souhaite obtenir dans le produit final. Par ailleurs, dans le cas où R4 est un atome d’hydrogène, le composé peut être obtenu sous la forme d’un thiol, ou alors sous la forme d’un dimère tel que défini ci-dessus. Des mélanges peuvent être obtenus, et les deux composés peuvent alors être séparés, par exemple par des techniques de chromatographie. Un composé thiol peut également être transformé en dimère dans des conditions oxydantes, par exemple en présence d’oxygène. Un sixième objet de la présente invention concerne un procédé de synthèse d’un dimère de Formule I tel que définie ci-dessus, comprenant :

• une étape G” d’oxydation d’un composé de Formule I :

Un septième objet de la présente invention est une composition pharmaceutique pour son utilisation comme inhibiteur de b-lactamases, en association avec un agent antibiotique, comprenant,

• un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, et

• un excipient pharmaceutique acceptable.

On entend par « excipient », toute substance non active associée au principe actif d'un médicament et dont la fonction est de faciliter l'administration, la conservation et/ou le transport du principe actif jusqu'à son site d'absorption.

Les « excipients pharmaceutiquement acceptables » s’entendent de substances non toxiques, biologiquement tolérables et biologiquement aptes à être administrées à un sujet, tel qu’une substance inerte, ajoutée à une composition pharmacologique ou utilisée comme véhicule, support ou diluant pour faciliter l’administration d'un agent et qui est compatible avec celui- ci. Selon l’invention, un excipient pharmaceutiquement acceptable peut être, par exemple, et sans limitation : des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, des gélifiants, des dispersants, des solubilisants, des stabilisants, des conservateurs, des édulcorants, etc. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps dans le cadre d’un traitement antibiotique.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, comprenant un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, et un agent antibiotique, notamment un agent antibiotique appartenant à la classe des b-lactames, comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps dans le cadre d’un traitement antibiotique.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, dans laquelle l’antibiotique est choisi parmi les dérivés de la pénicilline , les céphalosporines, les monobactames, et les carbapénèmes.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique en association avec un agent antibiotique, comprenant,

• un composé de Formule I tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable,

• un excipient pharmaceutique acceptable, dans laquelle ledit agent antibiotique appartient notamment à la classe des b-lactames, notamment choisi parmi les dérivés de la pénicilline, les céphalosporines, les monobactames, et les carbapénèmes.

Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, ladite composition étant formulée pour un mode d’administration intraveineux, ou pour un mode d’administration orale.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, ledit composé de Formule I étant sous une forme galénique, à raison de 10 à 200 mg/kg de poids corporel du patient.

De « 10 à 200 mg/kg » s’entend de toutes les doses comprises de 10 mg/kg à 200 mg/kg, par exemple 10, 50, 100, 150 ou 200 mg/kg.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique pour son utilisation, telle que définie ci-dessus, ledit composé de Formule I étant présent à raison de 0,2 g à 3 g par dose unitaire. De « 0,2 à 3 g par dose unitaire » s’entend de toutes les doses comprises de 0,2 g à 3 g, par exemple 0,2, 0,5, 1, 2 ou 3 g.

Les compositions de la présente invention sont notamment administrées à raison de 2 à 4 doses par jour.

Un huitième objet de la présente invention est une composition pharmaceutique comprenant un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, ou un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, en combinaison avec un excipient pharmaceutique acceptable.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, ou un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, ledit composé étant présent à raison de 10 mg/kg à 200 mg/kg de poids corporel du patient.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, ou un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, en combinaison avec un excipient pharmaceutique acceptable, ledit composé de Formule IV ou III étant notamment étant présent à raison de 0,2 à 3 g par dose unitaire.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un nouveau composé de Formule IV tel que défini ci-dessus, ou un composé de Formule III tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, ledit composé étant présent à raison de 0,2 à 3 g par dose unitaire.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, comprenant un composé choisi parmi :

Un neuvième objet de la présente invention est une méthode de traitement d'infections bactériennes chez l'homme ou l'animal, comprenant l'administration, en combinaison avec un antibiotique appartenant à la classe des b-lactames, d'une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé de formule I tel que défini ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable.

Un dixième objet de la présente invention est un kit comprenant :

- un premier récipient contenant un composé de Formule I tel que défini ci- dessus, pour son utilisation telle que définie ci-dessus, son sel, solvaté ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, et

- un deuxième récipient contenant un antibiotique, en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séquentielle ou séparée en antibiothérapie.

Les exemples et figures suivants illustrent l’invention, sans en limiter la portée.

La Figure 1 représente le spectre RMN du proton de la molécule MAF056. A est un signal caractéristique du monomère thiol. B est un signal caractéristique du dimère dithiol. Exemples

ABREVIATIONS

AcOEt Acétate d’éthyle MeOH Méthanol

BzCl Chlorure de benzoyle MgS0 ₄ Sulfate de magnésium

CH2CI2 Dichl orométhane MS Spectrométrie de Masse

Concentration Minimale Cyanoborohydrure de

CMI NaBEFCN d’inhibition sodium

DMF Diméthylformamide NaCl Chlorure de sodium

DMSO Diméthyl sulfoxyde NaHC0 ₃ Bicarbonate de sodium l-Ethyl-3-(3-

EDCI diméthylaminopropyl) NaOH Hydroxyde de sodium carbodiimide

New Delhi métallo-bêta-

ESI Ionisation par électronébuliseur NDM-1 lactamase

EÎ2Ü Ether diéthylique OXA-48 Oxacillinase-48

Résonance magnétique

Et ₃ N Triéthylamine RMN ¹³ C nucléaire du carbone Spectrométrie de Masse

EtOH Ethanol SMHR Haute Résolution

H ₂ 0 Eau TES Triéthylsilane

HCl Acide chlorhydrique TFA Acide trifluoroacétique

HOBt Hydroxybenzotriazole Trp Tryptophane

Concentration inhibitrice

CI50 TrtSH Triphénylméthane thiol médiane Klebsiella pneumoniae

KPC-2

Carbapénémase-2 Résonance magnétique

RMN Ή nucléaire du proton

Les composés décrits dans les exemples ci-dessous ont été préparés selon les schémas suivants :

Dérivés dans lesquels X = NH

Dérivés dans lesquels X = NHC(O)

Exemple 1 Composé MAF019 Du 4-méthylbenzaldéhyde (1,07 mL, 9,07 mmol, 1,1 éq.) a été additionné à une solution de L- cystéine (1 g, 8,25 mmol, 1 éq.) dans un mélange d’Et0H/H ₂ 0 (80 mL/8 mL). Le mélange réactionnel a été agité sous argon et à température ambiante pendant 24 h. Le solvant a été évaporé sous pression réduite et le solide ainsi obtenu a été lavé par de 1Έΐ2q puis séché sous vide pour obtenir le composé MAF019. RMN Ή (300 MHz, DMSO-ξ) d = 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1H, CH _I ), 7.32 (d, J= 8.0 Hz, 1H, CH _A Î), 7.16 (m, 2H, CH _M ), 5.63 (s, 0.5H, SŒ/NH), 5.46 (s, 0.5H, SŒ/NH), 4.24 (dd, J= 7.1 Hz, J = 4.4 Hz, 0.5H, Œ/COOH), 3.88 (dd, J = 8.6 Hz, J = 7.3 Hz, 0.5H, Œ/COOH), 3.40- 3.26 (m, 1H, G¾S), 3.17-3.04 (m, 1H, CH ₂ S), 2.30 (s, 1.5H, Œ/ ₃ ), 2.28 (s, 1.5H, Œ/ ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, DMSO-^) d = 173.0 (COOH), 172.3 (COOH), 138.1 (C _M ), 137.6 (C _M ), 136.8 (CM), 135.9 (CM), 129.0 (CH r), 128.8 (CH A r), 127.2 (CH A r), 126.9 (CH A r), 71.7

(NCHS), 71.1 (NCHS), 65.4 (CHN), 64.9 (CHN), 38.5 (CH ₂ S), 37.9 (CH ₂ S), 20.7 (CH ), 20.7 (CH ). Masse ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 224.1, [M+Na] ⁺ = 246.1. SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour CnHi NNa0 ₂ S [M+Na] ⁺ : 246.0559, trouvée : 246.0565. Exemple 2 Composé MAF021

Le composé MAF019 (489 mg, 2,19 mmol, 1,0 éq.) a été dissous dans du DMF anhydre (10 mL). De la Et ₃ N (0,92 mL, 6,57 mmol, 3 éq.), de l’HOBt (355 mg, 2,63 mmol, 1,2 éq.), de l’EDCI (0,46 mL, 2,63 mmol, 1,2 éq.) et du L-Trp-COOMe ont été additionnés à température ambiante. Le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 5 jours, puis une solution aqueuse saturée en NaHC0 ₃ (50 mL) a été ajoutée. La phase aqueuse a été extraite par de l’AcOEt (3 x 50 mL), puis les phases organiques rassemblées ont été séchées sur MgSCO, filtrées et concentrées sous pression réduite. Le brut réactionnel a été purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane/AcOEt 8/2) pour obtenir le composé MAF021 sous la forme d’un solide blanc (583 mg, 65%).

Rf : 0.71 (Cyclohexane/AcOEt 3:7). RMN Ή (300 MHz, CDC1 ₃ ) d = 8.16 (s, 1 H, CONtf), 7.68 (d, J= 8.0 Hz, 0.8H, CH _M ), 7.55 (m, 1H, CH _M ), 7.35 (m, 1H, CH _M ), 7.24-7.06 (m, 4H, CH _M ), 6.99 (m, 1H, CH _M ), 6.95-6.92 (m, 2H, CH _M ), 5.49 (s, 0.20H, SŒ/NH), 4.95 (dd, J = 13.9, 5.9 Hz, 1H, CHCOO ), 4.70 (s, 0.80H, SŒ/NH), 4.30 (dd, J = 7.8, 3.7 Hz, 0.8H, NHŒ/CO), 3.86 (m, 0.2H, NHŒ/CO), 3.75 (s, 2.4H, COOŒC), 3.70 (s, 0.6H, COOCH3), 3.60 (dd, J = 11.0, 3.7 Hz, 0.8H, G¾S), 3.46-3.29 (m, 3.2H, G¾S + CH 2), 2.34 (s, 2.4H, CH3), 2.34 (s, 0.6H, CH3). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCI3) d = 172.5 (CO), 172.1 (CO), 171.2 (CO), 138.5 (CM), 136.2 (CM), 136.1 (CM), 135.5 (CM), 129.4 (CHM), 127.8 (CM), 127.4 (CHM), 127.1 (CHM), 122.8 (CHM), 122.5 (CHM), 122.4 (CHM), 120.0 (CHM), 118.7 (CHM), 118.5 (CHM), 111.5 (CHM), 110.2 (CM), 71.2 (SCH), 71.1 (SCH), 66.7 (NCH), 66.2 (NCH), 52.8 (CH), 52.6 (CH ₃ ), 38.3 (CH ₂ S), 37.0 (CH ₂ S), 27.5 (CH ₂ ), 21.3 (CH ₃ ). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 424.2, [M+Na] ⁺ = 446.2, [2M+Na] ⁺ = 869.3. SMHR : (ESI+-MS, m/z) calculée pour C ₂₃ H ₂₅ N ₃ 0 ₃ SNa [M+Na] ⁺ : 446.1509, trouvée: 446.1501.

Exemple 3 Composé MAF024 - Dimère

Le composé MAF021 (500 mg, 1,18 mmol, 1,0 éq.) a été dissous dans du MeOH anhydre (12 mL), puis du NaBH ₃ CN (79 mg, 1,18 mmol, 1 éq.), a été additionné à température ambiante. Le mélange a été agité sous argon pendant 15 minutes, puis du TFA (0,18 mL, 2,36 mmol, 2,0 éq.) a été additionné goutte à goutte. Le milieu réactionnel a été agité sous argon et à température ambiante pendant 3 h, puis une solution aqueuse saturée en NaHC0 ₃ (30 mL) a été additionnée. La phase aqueuse a été extraite par de TAcOEt (3 x 50 mL). Les phases organiques rassemblées ont été lavées par une solution aqueuse saturée en NaCl, séchées sur MgSCL, filtrées et concentrées sous pression réduite pour obtenir le composé MAF024 - dimère sous la forme d’un solide blanc (452 mg, 90%).

Rf : 0.49 (Cyclohexane/AcOEt 3:7). RMN Ή (300 MHz, DMSO-ÎC) d = 11.07 (s, 2 H, NH), 8.63 (s, 2 H, NH), 7.49 (m, 4 H, NH, CH _M ), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 2H, CH _M ), 7.21 (m, 2H, CH _M ), 7.09 - 6.90 (m, 12H, CH _M ), 4.64 (m, 2H, tfCOOMe), 3.60 (d, J = 6.9 Hz, 6H, COO CH ), 3.51-3.24 (m, 8H, SŒH, CtfCO, CH 2), 3.16 (d, J= 4.7 Hz, 4H, CH 2), 2.70 (d, J = 5.7 Hz, 2H, SC77H), 2.24 (m, 6H, CH3). RMN ¹³ C (75 MHz, DMSO-ÎC) d = 172.5 (CO), 136.6 (CM), 129.2 (CHM), 128.9 (CHM), 127.5 (CM), 124.3 (CH), 121.4 (CHM), 118.9 (CHM), 118.5 (CHM), 111.9 (CHM), 109.5, 62.6 (CHNH), 53.1 (CHNH), 52.5 (CH ₃ ), 50.5 (CH ₂ NH), 27.4 (CH ₂ ), 26.7 (CH ₂ S), 21.2 (CH ₃ ). SMHR : (ESI ⁺ -MS, m/z) calculée pour C ₄₆ H ₅₃ N ₆ 0 ₆ S ₂ [M+H] ⁺ : 849.3468, trouvée: 849.3456.

Exemple 4 Composé MAF025

Le composé MAF024 (100 mg, 0,235 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans du MeOH anhydre (5 mL). Du NaOH (19 mg, 0,470 mmol, 2 éq.), du phosphate de triméthyle (55 pL, 0,470 mmol, 2 éq.), et du 1,4-dithioerythritol (145 mg, 0,940 mmol, 4 éq.) ont été additionnés et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 16 h. Le milieu réactionnel a été acidifié jusqu’à pH 1 par addition d’une solution aqueuse d’HCl à IM, puis concentré sous pression réduite. Le produit a été purifié par chromatographie sur colonne flash (CH ₂ Cl ₂ /MeOH, 95:5) pour obtenir le composé MAF025 sous la forme d’un solide blanc (35 mg, 35%).

Rf : 0.40 (CH ₂ Cl ₂ /MeOH, 9:1). RMN Ή (300 MHz, MeOD) d = 7.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H, CH _AX ), 7.20 (m, 2H, C// _Al ), 7.07-7.02 (m, 4H, C// _Al ), 6.90 (d, J = 7.7 Hz, 2H, C// _Al ), 3.50 - 3.35 (m, 5H), 3.18 (m, 1H, CHK), 2.87 (m, 1H, SŒH), 2.74 (m, 1H, SŒH), 2.29 (s, 3H,

CH ₃ ), 1.97 (s, 3 H, SCH ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, MeOD) d = 173.5 (CO), 169.1 (CO), 140.1, 138.0 (3 x CM), 130.7 (CH A r), 130.5 (CH A r), 129.0 (CM), 124.6 (CH), 122.4 (CH A r), 119.9 (CH Ac), 119.5 (CHM), 112.5 (CH A r), 111.6 (CCH), 59.6 (CHNH), 53.2 (CHNH), 53.1 (CH ₂ NH), 35.7 (CH ₂ S), 29.1 (CH ₂ ), 21.2 (CH ₃ ), 15.4 (SCH ₃ ). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 426.2, [M+Na] ⁺ = 448.2. SMHR : (ESI ⁺ -MS, m/z) calculée pour C ₂₃ H ₂₈ N ₃ 0 ₃ S [M+H] ⁺ : 426.1846, trouvée: 426.1837.

Exemple 5 Composé MAF027 De la L-cystéine (1 g, 8,25 mmol, 1,0 éq.) a été dissoute dans de GH2O distillée. (25 mL) et du NaOH (1 g, 24,80 mmol, 3 éq.) a été ajouté. La solution ainsi obtenue a été refroidie à 0 °C et du BzCl (2 mL, 17,23 mmol, 2,1 éq.) a été additionné sous forte agitation, tout en gardant la température du milieu en dessous de 5 °C. Le milieu réactionnel a été agité à température ambiante pendant 30 minutes, puis refroidi à 0 °C. Le milieu a été neutralisé par ajout d’une solution aqueuse d’HCl à IM, ce qui a entraîné la précipitation du produit. La suspension a été filtrée, puis le solide a été lavé avec de l’eau froide, puis séché sous un vide poussé. Une recristallisation dans du CHCL a permis d’isoler le composé MAF027 sous la forme d’un solide blanc (2,67 g, 98%).

Rf : 0.46 (AcOEt/MeOH 9:1); RMN *H (300 MHz, CDCL) d = 7.95 (d, J = 9.0 Hz, 2 H, 2 x C#Ar), 7.80 (d, J= 9.0 Hz, 2 H, 2 x CH _I ), 7.61-7.55 (m, 2 H, NH, CH _I ), 7.45-7.35 (m, 5H, 5 x CH _AI ), 4.96-4.90 (m, 1 H, Œ/NH), 3.68 (d, J = 6.0 Hz, 2 H, CH ₂ S). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCL) d = 193.8 (COS), 173.0 (COOH), 168.9 (CONH), 136.3 (C _M ), 134.2 (CH _A r), 133.8 (CM), 132.8 (CHM), 128.9 (CH r), 128.8 (CH A r), 127.7 (CH A r), 127.5 (CH A r), 54.7 (Œ/NH), 30.1 (CH ₂ S). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 330.1, [M+Na] ⁺ = 352.1. SMHR : (ESU-MS, m/z) calculée pour Ci ₇ Hi ₅ N0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 352.0614, trouvée: 352.0612.

Exemple 6 Composé MAF028

Le composé MAF027 (1 g, 3,04 mmol, 1,0 éq.) a été dissous dans un mélange de DMF anhydre (15 mL). De la Et3N (1,27 mL, 9,11 mmol, 3 éq.), de l’HOBt (492 mg, 3,64 mmol, 1,2 éq.), de l’EDCI (0,64 mL, 3,64 mmol, 1,2 éq.), et du L-Trp-COOMe (773 mg, 3,04 mmol, 1 éq.) ont été additionnés séquentiellement à température ambiante. Le mélange ainsi obtenu a été agité sous argon pendant 36 h à 40 °C, puis une solution aqueuse saturée en NaHCC (25 mL) a été additionnée. La phase aqueuse a été extraite par de l’AcOEt (3 x 50 mL) et les phases organiques rassemblées ont été séchées sur MgSCL anhydre, filtrées et concentrées sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur colonne (Cyclohexane/AcOEt, 8:2) pour obtenir le composé MAF028 sous la forme d’un solide blanc (174 mg,

Rf : 0.31 7.99 (s, 1 H, NH), 7.94 (dd, J = 3.0 Hz, J = 9.0 Hz, 2H, 2 x C// _Ar ), 7.65-7.35 (m, 9 H, 9 x C// _Ar ), 7.25-7.19 (m, 2 H, CH _Ai, NH), 7.11 (dt, J = 3.0 Hz, J = 9.0 Hz, 1H, / _Ar ), 7.05-6.99 (m, 2 H, 2 x / _Ar ), 4.91- 4.84 (m, 2 H, 2 x Œ/NH), 3.65 (C Hj), 3.61-3.55 (m, 2H, G¾S), 3.32 (t, J = 6.0 Hz, J = 3.0 Hz, 2H, C Hi). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCh) d = 193.6 (COS), 172.0 (CO), 169.8 (CO), 167.8 (CO), 136.5 (CA _T ), 136.1 (C _Ar ), 134.1 (Œ/ _Ar ), 133.1 (C _Ar ), 132.1 (Œ/ _Ar ), 128.9 (Œ/ _Ar ), 128.7 (Œ/ _Ar ), 127.6 (( // _.Ai ), 127.3 (C// _Al ), 123.3 (CH _Ar ), 122.3 (C// _Al ), 119.8 (C// _Al ), 118.6 (C// _Al ), 111.4 (Œ/ _Ar ), 109.8 (CA _T ), 54.6 (Œ/NH), 53.3 (Œ/NH), 52.6 (CH ), 30.3 (ŒfcS), 27.6 (CH ₂ ).

MS ESI ⁺ : [M+Na] ⁺ = 552.2, [2M+Na] ⁺ = 1081.3. SMHR : (ESI+-MS, m/z) calculée pour C ₂₉ H ₂₇ N ₃ 0 ₅ SNa [M+Na] ⁺ : 552.1564, trouvée: 552.1553.

Exemple 7 Composé MAF030

Le composé MAF028 (50 mg, 0,094 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans de l’EtOH anhydre (5 mL). Du NaOH (23 mg, 0,566 mmol, 6 éq.) a été additionné et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 2 h. Le milieu réactionnel a été acidifié jusqu’à pH 1 par addition d’une solution aqueuse d’HCl à IM, puis la phase aqueuse a été extraite par de l’AcOEt. La phase organique a été lavée par de l’H ₂ 0, par une solution aqueuse saturée en NaCl, puis séchée sur MgS0 ₄ , filtrée, et concentrée sous pression réduite, pour obtenir le composé MAF030 sous la forme d’un solide blanc (37 mg, quantitatif).

RMN Ή (300 MHz, MeOD-d ₄ ) d = 8.0 (s, 1 H, NH), 7.79 (d, J = 6.0 Hz, 2H, 2 x C H _Ï ), 7.57-7.43 (m, 4H, 4 x C H _Aï ), 7.30 (d, J = 9.0 Hz, 1H, C H _Ai ), 7.12 (s, 1 H, C H _Ai ), 7.79 (dt, J =

1.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1 H, C tf _Ar ), 6.95 (dt, J = 1.0 Hz, J= 8.0 Hz, 1 H, C tf _Ar ), 4.78-4.68 (m, 1H + 1H, 2 x Œ/NH), 3.42-3.20 (m, 2 H, CH ₂ ), 3.01-2.82 (ddd, J= 6.0 Hz, J= 12.0 Hz, J= 24.0 Hz, 2 H, G¾S). RMN ¹³ C (75 MHz, MeOD-d ₄ ) d = 174.9 (CO), 172.3 (CO), 170.3 (CO), 138.0 (CA r), 135.1 (CAT), 133.0 (CH r), 129.6 (CHA r), 128.8 (CAT), 128.5 (CH _Aî ), 124.6 (CH r), 122.4 (CH r), 119.8 (CH _Ar ), 119.2 (CH _Ar ), 112.2 (CH _Ar ), 110.7 (CCH), 57.4 (CHNH), 54.7 (CHNH), 28.3 (CH ₂ ), 26.9 (CH ₂ S). MS ESI ⁺ : [M+Na] ⁺ = 434.1, [2M+Na] ⁺ = 845.2. SMHR : (ESI ⁺ -MS, m/z) calculée pour C _2i H _2i N ₃ 0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 434.1145, trouvée: 434.1133.

Exemple 8 Composé MAF047 Du (2S)-glycidate de méthyle (0,20 mL, 2,29 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans du MeOH anhydre (22 mL). Du TrtSH (948 mg, 3,435 mmol, 1,5 éq.) et de la Et ₃ N (0,32 mL, 2,29 mmol, 1.0 éq.) ont été additionnés et le mélange a été agité à 65 °C sous argon pendant 48 h, puis le solvant a été évaporé sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur colonne (Cyclohexane/AcOEt 8:2) pour obtenir le composé MAF047 sous la forme d’une huile incolore (705 mg, 81%).

Rf : 0.43 (Cyclohexane/AcOEt 7:3); RMN Ή (300 MHz, CDCh) d = 7.45-7.42 (m, 6H, 6 x C# _Ar ), 7.32-7.19 (m, 9H, 9 x CH _Ar ), 4.00 (td, J = 6.0 Hz, J = 3.0 Hz, 1H, CH- OH), 3.72 (s, 3 H, C¾), 2.62 (ddd, J= 24.0 Hz, J= 12.0 Hz, J= 3.0 Hz, 2 H, G¾S). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCL) d = 173.4 (CO), 144.4 (CA _T ), 129.5 (CHA r), 127.9 (CHA r), 126.7 (CHA r), 69.3 (C-OH), 66.6 (C), 52.6 (C¾), 31.2 (CH ₂ S). SMHR : (ESC-MS, m/z) calculée pour C ₂₃ H ₂₂ 0 ₃ SNa

[M+Na] ⁺ : 401.1182, trouvée: 401.1195.

Exemple 9 Composé MAF048 Le composé MAF047 (680 mg, 1,80 mmol, 1,0 éq.) et du bromure de 4-méthylbenzyle (366 mg, 1,98 mmol, 1,1 éq.) ont été dissous dans du DMF anhydre (6 mL). La solution a été refroidie à 0 °C, puis du NaH à 60% (79 mg, 1,98 mmol, 1,1 éq.) a été additionné. Le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 16 h puis la réaction a été stoppée par ajout d’EtOH absolu (5 mL). De GH2O (20 mL) a été ajoutée et le produit a été extrait par de l’AcOEt (3 x 25 mL). Les phases organiques rassemblées ont été lavées par une solution aqueuse saturée en NaCl, séchées sur MgSCE, filtrées et concentrées sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur colonne (Cyclohexane/AcOEt 9:1) pour obtenir le composé MAF048 sous la forme d’une huile incolore (630 mg, 73%).

Rf : 0.77 (Cyclohexane/AcOEt 7:3); RMN Ή (300 MHz, CDCI3) d = 7.58 (m, 6H, 6 x CH _I ), 7.39-7.23 (m, 14H, 14 x CH _I ), 4.55 (dd, J= 63.0 Hz, J= 6.0 Hz, 2H, CH ₂ - O), 3.75-3.70 (m, 4 H, CH- O + C¾), 2.78 (dd, J= 6.0 Hz, J= 3.0 Hz, 2H, G¾S), 2.44 (s, 3 H, C¾). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCI3) d = 171.2 (CO), 144.5 (CM), 137.4 (CM), 134.0 (CM), 129.5 (CH A r), 128.9 (CH _I ), 128.1 (CHM), 127.9 (CHM), 126.6 (CHM), 76.8 (C-O), 72.5(CH ₂ 0), 66.8 (Q, 51.9 (CH3), 34.3 (CH ₂ S), 21.1 (CH ). MS ESI ⁺ : [M+Na] ⁺ = 505.2, [2M+Na] ⁺ = 987.4. SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C _3i H ₃ o0 ₃ SNa [M+Na] ⁺ : 505.1808, trouvée: 505.1799.

Exemple 10 Composé MAF051

Le composé MAF048 (600 mg, 1,243 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans de l’EtOH anhydre (10 mL). Du NaOH (149 mg, 3,729 mmol, 3 éq.) a été additionné et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 2,5 h. Le mélange réactionnel a été acidifié jusqu’à pH 1 par addition d’une solution aqueuse d’HCl à IM. De l’AcOEt a été additionné puis la phase organique a été lavée par de l’H ₂ 0 et par une solution aqueuse saturée en NaCl. La phase organique a été séchée sur MgSCL, filtrée, et concentrée sous pression réduite pour obtenir le composé MAF051 sous la forme d’un solide blanc (580 mg, quantitatif).

RMN Ή (300 MHz, CDCI3) d = 7.79 (m, 6H, 6 x CH _M ), 7.41-7.21 (m, 14H, 14 x CH _M ), 4.55 (dd, J = 63.0 Hz, J = 9.0 Hz, 2 H, CH 2 O), 3.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H, CH- O), 2.78 (m, 2 H, CH ₂ S), 2.44 (s, 3 H, CH 3). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCI3) d = 176.5 (CO), 144.5 (CM), 137.6 (CM), 133.9 (CM), 129.6 (CHM), 129.0 (CM), 128.3 (CHM), 128.0 (CHM), 126.7 (CHM), 76.5 (CH-O), 72.5 (CH ₂ 0), 66.9 (C), 34.2 (CH ₂ S), 21.2 (CH ). MS ESI ⁺ : [M+Na] ⁺ = 491.2, [2M+Na] ⁺ = 959.3. SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C ₃ oH ₂₈ 0 ₃ SNa [M+Na] ⁺ : 491.1651, trouvée: 491.1649. Exemple 11 Composé MAF052

Le composé MAF048 (550 mg, 1,174 mmol, 1,0 éq.) a été dissous dans du DMF anhydre (6 mL). De la Et3N (0,49 mL, 3,521 mmol, 3 éq.), de l’HOBt (190 mg, 1,408 mmol, 1,2 éq.), de l’EDCI (0,25 mL, 1,408 mmol, 1,2 éq.), et du L-Trp-COOMe (299 mg, 1,174 mmol, 1 éq.), ont été additionnés séquentiellement à température ambiante. Le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 42 h. Une solution aqueuse saturée en NaEICC (25 mL) a été additionnée, puis la phase aqueuse a été extraite par de l’AcOEt (3 x 50 mL). Les phases organiques rassemblées ont été séchées sur MgS0 ₄ anhydre, filtrées et concentrées sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur colonne (Cyclohexane/AcOEt 7:3) pour obtenir le composé MAF052 sous la forme d’un solide blanc (470 mg,

Rf : 0.69 7.86 (s, 1 H, NH), 7.69 (d, J= 6.0 Hz, 1H, NH), 7.58-7.55 (m, 6H, CH ), 7.48-7.35 (m, 17H, CH ), 7.11 (d, J= 1.0

Hz, 1H, CH _Ai ), 5.07 (dt, J= 9.0 Hz, J = 6.0 Hz, 1H, Œ/NH), 4.54 (s, 2H, CH ₂ O), 3.86-3.82 (m, 4H, CH-0 + G %), 3.46 (d, J= 6.0 Hz, 2H, G ¾), 2.72 (d, J= 6.0 Hz, 2H, G¾S), 2.51 (s, 3 H, C H ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCla) d = 172.2 (CO), 170.5 (CO), 144.8 (CA _T ), 137.9 (CA _T ), 136.1 (CAT), 133.9 (CAT), 129.8 (CHA r), 129.2 (CH r), 128.4 (CH r), 128.1 (CH A r), 127.4 (CAT), 126.8 (CHA r), 123.3 (CHA r), 122.3 (CHA r), 119.7 (CHA r), 118.7 (CHA r), 111.3 (CHA r), 109.8 (CA _T ), 78.2 (CH- O), 72.7 (CH ₂ O), 66.6 (C), 52.5 (CHN H), 52.1 (CHa), 34.9 (CH ₂ S), 27.9 (CH ₂ ), 21.3 (CHa). SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C ₄₂ H ₄ oN ₂ 0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 691.2601, trouvée: 691.2596. Exemple 12 Composé MAF054

Le composé MAF052 (300 mg, 0,449 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans de l’EtOH anhydre (2,5 mL). Du NaOH (54 mg, 1,346 mmol, 3 éq.) a été additionné et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 3 h. Le mélange réactionnel a été acidifié jusqu’à pH 5 par addition d’une solution aqueuse d’HCl à IM. De l’AcOEt a été additionné et la phase organique a été lavée par de l’ELO et par une solution aqueuse saturée en NaCl. La phase organique a été séchée sur MgSCL, filtrée, et concentrée sous pression réduite pour obtenir le composé MAF054 sous la forme d’un solide blanc (293 mg, quantitatif). RMN Ή (300 MHz, CDCh) d = 7.63 (s, 1H, NH), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H, C// _Ar ), 7.33 - 7.21 (m, 6H, 6x / _Ar ), 7.19-6.99 (m, 12H, 12x / _Ar ), 6.91 (d, J = 2.4 Hz, 4H, 4xC f/ _Ar ), 6.78 (d, J = 2.0 Hz, 1H, CH), 6.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H, Œ/NH), 4.18 (s, 2H, CH ₂ O), 3.54 (t, J = 5.3 Hz, 1H, CH-O), 3.19 (m, 2H, G ), 2.42 (d, J = 5.3 Hz, 2H, G¾S), 2.19 (s, 3 H, C H ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCh) d = 175.8 (CO), 171.4 (CO), 144.7 (C _Ar ), 137.9 (CA _T ), 136.1 (C _Ar ), 133.7 (C _Ar ), 129.8 (Œ/ _Ar ), 129.2 (Œ/ _Ar ), 128.4 (Œ/ _Ar ), 128.1

(Œ/ _Ar ), 127.5 (CA _T ), 126.9 (Œ/ _Ar ), 123.5 (Œ/ _Ar ), 122.3 (Œ/ _Ar ), 119.8 (Œ/ _Ar ), 118.7 (Œ/ _Ar ), 111.3 ( Œ/ _Ar ), 109.4 (C _Ar ), 78.1 (CH-O), 72.7 (CH ₂ 0), 66.7 (C), 52.6 (Œ/NH), 34.7 (CH ₂ S), 27.5 (CH ₂ ), 21.3 (CH ). SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C _4i H ₈ N ₂ 0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 677.2444, trouvée: 677.2430.

Exemple 13 Composé MAF055 Le composé MAF052 (50 mg, 0,075 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans du CH2CI2 anhydre (4 mL). Du TFA (13 pL, 0,164 mmol, 2,2 éq.) et du TES (1,2 pL, 0,0075 mmol, 0,1 éq.) ont été additionnés et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 2 h. La réaction a été stoppée par addition d’une solution aqueuse saturée en NaHC0 ₃ (20 mL) et le produit a été extrait par du CH2CI2 (3 x 25 mL).

Les phases organiques rassemblées ont été lavées par de GH2O et par une solution aqueuse saturée en NaCl, puis séchées sur MgSCL, filtrées et concentrées sous pression réduite pour obtenir le composé MAF055 sous la forme d’un solide blanc (18 mg, 56%).

RMN Ή (300 MHz, CDCL) d = 8.08 (s, 1 H, NH), 7.54 (d, J = 6.0 Hz, 1H, Ctf _Ar ), 7.33 (d, J = 6.0 Hz, 1H, C# _Ar ), 7.27-7.11 (m, 7H, CH _Aï ), 7.04 (d, J = 1.0 Hz, 1H, CH _Aï ), 4.95 (dd, J =

9.0 Hz, J = 6.0 Hz, 1H, Œ/NH), 4.48 (q, J= 9.0 Hz, 2H, CH ₂ O), 4.00 (dd, J= 6.0 Hz, J= 3.0 Hz, 1H, CH. O), 3.67 (s, 3H, C H ₃ ), 3.33 (ddd, J= 12.0 Hz, J= 6.0 Hz, J= 1.0 Hz, 2H, CH 2), 2.83 (m, 2H, G¾S), 2.35 (s, 3H, C H ₃ ), 1.53 (t, J = 9.0 Hz, 1H, SH). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCL) d = 172.2 (CO), 170.4 (CO), 138.2 (C _Ar ), 136.2 (C _Ar ), 133.7 (C _Ar ), 129.4 (CH _Aî ), 128.4 (CH _AÏ ), 127.5 (C _Ar ), 123.1 (CH _Aî ), 122.4 (CH _Aî ), 119.8 (CH _Aî ), 118.8 (CH _Aî ), 111.3

(CH _Aî ), 109.8 (C _AT ), 79.9 (CH- O), 72.9 (CH ₂ O), 52.5 CHN H), 52.2 (CH ₃ ), 27.9 (CH ₂ ), 27.2

(CH 2 S), 21.3 (C¾). SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C ₂₃ H ₂₆ N ₂ 0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 449.1505, trouvée: 449.1497. Exemple 14 Composé MAF056

Le composé MAF054 (50 mg, 0,076 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans du CH2CI2 anhydre (4 mL). Du TFA (13 pL, 0,168 mmol, 2,2 éq.) et du TES (1,3 pL, 0,0077 mmol, 0,1 éq.) ont été additionnés et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 2 h. La réaction a été stoppée par addition d’une solution aqueuse saturée en NaHC0 ₃ (20 mL) et le produit a été extrait par du CH2CI2 (3 x 25 mL). Les phases organiques rassemblées ont été lavées par de IΉ2O et par une solution aqueuse saturée en NaCl, puis séchées sur MgSCL, filtrées et concentrées sous pression réduite pour obtenir le composé MAF056 sous la forme d’un solide blanc (17 mg, 53%, mélange 80% thiol and 20% dimère par RMN ¾).

RMN Ή (300 MHz, MeOD-d ₄ ) d = 7.60 (d, J= 7.8 Hz, 1H, CH _I ), 7.34-6.83 (m, 8H), 4.73 (m, 1H, Œ/NH), 4.38 (dd, J = 28.7, 11.3 Hz, 2H, CH ₂ O), 4.11-4.01 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 6.0, 4.2 Hz, 1H, O CH), 2.77 - 2.57 (m, 2H, CH ₂ S), 2.29 (2xs, 3H, C Hj), 1.29 (s, 1H, SH).

RMN ¹³ C (75 MHz, CDCh) d = 175.0 (CO), 171.4 (CO), 138.2 (C _M ), 136.2 (C _M ), 133.6 (CM), 129.4 (CHM), 128.4 (CHM), 127.6 (CM), 123.4 (CHM), 122.4 (CHM), 119.9 (CHM), 118.8 (CHM), 111.4 (CHM), 109.6 (CM), 79.8 (CH- O), 72.9 (CH ₂ O), 52.8 (Œ/NH), 27.1 (CH ₂ ), 27.1 (CH ₂ S), 21.3 (CH ). SMHR : (ESC-MS, m/z) calculée pour C ₂₂ H ₂₄ N ₂ 0 ₄ SNa [M+Na] ⁺ : 435.1349, trouvée: 435.1338.

Exemple 15 Composé MAF063

Le compose MAF019 (118 mg, 0,530 mmol, 1,2 éq.) a été dissous dans du DMF anhydre (2,5 mL). De la Et ₃ N (0,18 mL, 1,326 mmol, 3 éq.), de l’HOBt (72 mg, 0,530 mmol, 1,2 éq.), de l’EDCI (0,09 mL, 0,530 mmol, 1,2 éq.), et le composé AD128, préparé selon la méthode décrite dans la publication Tetrahedron, 2000, 56, p.5479-5492, (130 mg, 0,442 mmol, 1,0 éq.) ont été ajoutés à température ambiante. Le mélange a été agité sous argon pendant 40 h à température ambiante puis une solution aqueuse saturée en NaHC0 ₃ (25 mL) a été ajoutée. La phase aqueuse a été extraite par de l’AcOEt (3 x 50 mL), puis les phases organiques rassemblées ont été séchées sur MgS0 ₄ , filtrées et concentrées à pression réduite. Le brut réactionnel a été purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane/AcOEt 8/2) pour obtenir le composé MAF063 sous la forme d’un solide blanc (144 mg, 65%).

Rf : 0.51 (Cyclohexane/AcOEt 1:1); RMN Ή (300 MHz, CDC1 ₃ ) d = 8.27 (s, 0.4H, CONtf), 8.20 (s, 0.6H, CONtf), 7.97 (d, J = 9.7 Hz, 0.53H, N//), 7.79 (d, J = 9.5 Hz, 0.41H, N//),

7.50-6.94 (m, 13H), 6.55 (d, J = 8.1 Hz, 0.41H, CH _M ), 5.45-5.27 (m, 1.44H, Ph CH, S CH), 4.82 (m, 1H, Œ/COO), 4.35-4.14 (m, 1H, Œ/CONH), 3.86-3.757 (m, 0.56H), 3.71-3.62 (m, 1H, CH//S), 3.50 - 3.46 (3 x s, 3H, COO CH ₃ ), 3.32-3.20 (m, 1H, CH//S), 2.35 - 2.28 (3 x s, 3 H, CH ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCh) d = 172.10 (CO), 171.41 (CO), 170.98 (CO), 140.39 (CM), 139.96 (CM), 138.63 (CM), 138.57 (CM), 136.41 (CM), 135.31 (CM), 135.00 (CM), 129.44 (CH AI), 129.33 (CH r), 128.64 (CH r), 128.58 (CH r), 128.28 (CH r), 127.39 (CH r), 127.15 (CH AI), 127.08 (CH r), 122.51 (CH r), 122.32 (CH A r), 121.70 (CH A r), 119.82 (CH A r), 119.38 (CH _I ), 119.01 (CH A r), 114.45 (CM), 111.61 (CH A r), 111.33 (CH A r), 71.55 (SCH),

71.13 (SCH), 70.63 (SCH), 66.39 (NCH), 66.28 (NCH), 65.92 (NCH), 56.32 (CH), 56.09 (CH), 52.36 (COOCH ), 52.21 (COOCH3), 45.92 (CH), 45.64 (CH), 45.47 (CH), 38.10 (CH ₂ S), 36.77 (CH ₂ S), 36.65 (CH ₂ S), 21.30 (CH ). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 500.2, [M+Na] ⁺ = 522.2. SMHR : (ESL-MS, m/z) calculée pour C ₂₉ H ₂₉ N ₃ 0 ₃ SNa [M+Na] ⁺ : 522.1822, trouvée: 522.1802.

Exemple 16 Composé MAF064

Le compose MAF063 (134 mg, 0,268 mmol, 1,0 éq.) a été dissous dans du MeOH anhydre (3 mL) puis du NaBILCN (18 mg, 0,268 mmol, 1 éq.) a été additionné à température ambiante. Le mélange a été agité sous argon pendant 15 minutes puis du TFA (0,04 mL, 0,536 mmol, 2,0 éq.) a été additionné goutte à goutte. Le milieu réactionnel a été agité sous argon et à température ambiante pendant 3 h, puis une solution aqueuse saturée en NaHCC (30 mL) a été additionnée. La phase aqueuse a été extraite par de TAcOEt (3 x 50 mL). Les phases organiques rassemblées ont été lavées par une solution aqueuse saturée en NaCl, séchées sur MgSCL, filtrées et concentrées sous pression réduite pour obtenir le composé MAF064 sous la forme d’un solide blanc (72 mg, 53%).

Rf : 0.43 (Cy cl ohexane/ AcOEt 4:6); RMN Ή (250 MHz, CDCh) d = 8.42 (bs, 1H, CONtf), 8.17-7.88 (m, 1H, Ntf), 7.43 - 6.94 (m, 13H), 6.81 (d, J= 8.0 Hz, 0.5H), 5.56 - 5.24 (m, 1H, Ph CH), 4.99 (d, J= 5.5 Hz, 0.5H, CHCOO), 4.92 - 4.88 (m, 0.5H, CHCOO), 3.63-3.62 (2 x s, 1.5H, COOCH ₃ ), 3.59-3.54 (m, 1H, CH/ NH), 3.50-3.49 (2 x s, 1.5H, COO CH ₃ ), 3.39-3.14 (m, 2H, ŒNH, CH/ NH,), 2.87-2.63 (m, 2H, CH ₂ S), 2.34-2.30 (m, 3H, CH ₃ ). RMN ¹³ C (75 MHz, CDCh) d = 172.41 (CO), 172.18 (CO), 172.06 (CO), 171.95 (CO), 171.80 (CO), 140.28 (CM), 139.35 (CM), 139.26 (CM), 137.12 (CM), 136.43 (CM), 135.85 (CM), 135.74 (CM), 135.61 (CM), 135.39 (CM), 129.26 (CHM), 128.93 (CHM), 128.88 (CHM), 128.82 (CHM), 128.66(Œ/ _Ar ), 128.57 (CHM), 128.28 (CHM), 128.15 (CHM), 128.08 (CHM), 127.54 (CHM), 127.20 (CHM), 127.14 (CHM), 126.80 (CM), 122.48 (CHM), 122.23 (CHM), 119.82 (CHM), 119.76 (CHM), 119.51 (CHM), 119.45 (CHM), 119.35 (CHM), 119.24 (CHM), 115.09 (CM), 114.09 (CM), 114.02 (CM), 111.44 (CHM), 111.28 (CHM), 62.82 (NCH), 62.62 (NCH), 62.39 (NCH), 56.53 (CH), 56.02 (CH), 55.53 (CH), 55.08 (CH), 52.50 (COOCH ), 52.31 (COOCH3), 51.88 (CH2NH), 51.75 (CH ₂ NH), 51.55 (CH ₂ NH), 51.52 (CH ₂ NH), 45.37 (CHCOO), 45.15 (CHCOO), 44.65 (CHCOO), 27.20 (CH ₂ S), 27.06 (CH ₂ S), 26.92 (CH ₂ S), 26.83 (CH ₂ S), 21.22 (C¾). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 502.2, [M+Na]+ = 524.2. SMHR : (ESI ⁺ - MS, m/z) calculée pour C ₂₉ H ₃₂ N ₃ 0 ₃ S [M+H] ⁺ = 502.2159, trouvée: 502.2141.

Exemple 17 Composé MAF065

Le composé MAF064 (50 mg, 0,100 mmol, 1,0 éq.) a été dissous à température ambiante dans de l’EtOH anhydre (1,5 mL). Du NaOH (12 mg, 0,299 mmol, 3 éq.) a été additionné et le mélange a été agité sous argon et à température ambiante pendant 3 h. Le mélange réactionnel a été acidifié jusqu’à pH 3 par addition d’une solution aqueuse d’HCl à IM. De l’AcOEt a été additionné et la phase organique a été lavée par de l’ELO et par une solution aqueuse saturée en NaCl. La phase organique a été séchée sur MgS0 ₄ , filtrée, et concentrée sous pression réduite pour obtenir le composé MAF065 sous la forme d’un solide blanc (45 mg, 93%, mélange racémique complexe et thiol/dimère par RMN ¹ H).

RMN Ή (300 MHz, MeOD-d ₄ ) d = 7.57 - 6.85 (m, 15H), 5.62-5.20 (m, 1H, Ph CH), 4.85- 4.70 (m, 1H, CHCOO), 4.13 - 3.77 (m, 2H, ŒCNH), 3.70-3.38 (m, 1H, ŒNH), 2.95 - 2.43

(m, 1H, CH//S), 2.33-2.25 (m, 3H, CH ₃ ), 2.04-1.84 (m, 1H, ŒHS), 1.28 (s, 1H, SH). RMN ¹³ C (75 MHz, MeOD-d ₄ ) d = 173.89 (COOH), 173.73 (COOH), 172.63 (COOH), 172.52 (COOH), 172.28 (COOH), 172.19 (COOH), 172.03 (COOH), 167.76 (CONH), 167.59 (CONH), 167.27 (CONH), 167.20 (CONH), 166.93 (CONH), 166.81 (CONH), 142.49 (C _M ), 142.32 (CM), 142.27 (CM), 141.95 (CM), 141.87 (CM), 141.10 (CM), 140.96 (CM), 140.83 (CM), 140.67 (CM), 138.12 (CM), 137.95 (CM), 131.37 (CHM), 131.20 (CHM), 130.88 (CHM), 130.73 (CHM), 130.62 (CHM), 130.05 (CHM), 129.86 (CHM), 129.61 (CHM), 129.41 (CHM), 128.09 (CHM), 127.90 (CHM), 123.50 (CHM), 123.27 (CHM), 122.68 (CHM), 119.83 (CHM), 115.42 (CM), 114.69 (CM), 112.49 (CHM), 112.27 (CHM), 61.32 (CH), 61.15 (CH), 60.11 (CH), 59.16 (CH), 58.40 (CH), 57.91 (CH), 51.15 (CH ₂ NH), 50.81 (CH ₂ NH), 50.52 (CH ₂ NH), 46.58 (CHCOO), 46.33 (CHCOO), 46.10 (CHCOO), 30.72 (CH ₂ SS), 30.43 (CH ₂ SS), 30.19 (CH ₂ SS), 26.83 (CH ₂ S), 25.43 (CH ₂ S), 25.13 (CH ₂ S), 21.26 (C¾). MS ESI ⁺ : [M+H] ⁺ = 488.2, [M+Na] ⁺ = 510.2. SMHR : (ESI+-MS, m/z) calculée pour C ₂₈ H ₃ oN ₃ 0 ₃ S [M+H] ⁺ : 488.2002, trouvée: 488.1983.

Exemple 18 Procédure générale des tests in vitro d'inhibition de la b-lactamase

Les valeurs de CI50 ont été déterminées par rapport au panel de la carbapénémase purifiée : OXA-48, KPC-2 et NDM-1 par dosage spectrophotométrique, en utilisant le spectrophotomètre UV ULTROSPEC 2000 et le logiciel SWIFT II (GE Healthcare, Velizy- Villacoublay, France). Les composés ont été dissous dans des solutions mères de DMSO à 10 mM ; des solutions mères plus diluées ont ensuite été préparées si nécessaire en les dissolvant également dans du DMSO. Les conditions d'essai étaient les suivantes : 100 mM de tampon de phosphate, pH 7 (ajouté avec 50 mM de Zn ²⁺ lors du test NDM-1, et avec 50 mM de NaHC0 ₃ lors du test OXA-48), 100 pM d’imipenem (Tianam). La réaction a été suivie à 297 nm, pendant 600 secondes à 25 °C avec 3 minutes d'incubation (composé/carbapénémase). Chaque composé inhibiteur a été dosé à sept concentrations différentes, en triple pour calculer une valeur d'erreur avec un intervalle de confiance de 95% (p < 0,05). Les valeurs de CI50 ont été déterminées à l'aide de l'équation CI50 = ((1/0,5 x vO) - m)/q, où vO est le taux d'hydrolyse du substrat rapporteur (vO étant le taux mesuré en l'absence d'inhibiteur), q l'interception de l'axe des y et m la pente de la régression linéaire résultante.

Exemple 19 Procédure générale de la détermination des concentrations minimales d'inhibition

Les valeurs de CMI ont été déterminées par microdilution du bouillon, en triple, dans un bouillon Mueller Hinton ajusté en cations, conformément aux directives du Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI). Les souches cliniques entérobactériennes E. coli NDM-l GUE exprimant la carbapénémase NDM-l ont été utilisées. Les expériences ont été réalisées dans des plaques de microtitration contenant le milieu avec de l'imipénem et des inhibiteurs (dissous dans du DMSO). Trois concentrations d'inhibiteurs ont été testées : 50, 100 et 200 mM. Les plaques ont été incubées pendant une nuit à 37 °C pendant 18-24 h.

Exemple 20 Résultats des tests d’inhibition et des déterminations des valeurs CI50 Le Tableau 1 résume les résultats obtenus lors des tests d’inhibition selon l’exemple 18, et les déterminations des valeurs de CI ₅₀ selon l’exemple 19. Les composés obtenus selon les exemples 1 à 18 ont été testés, ainsi que d’autres composés qui ont été obtenus de la même façon par la mise en œuvre desdits exemples.