La présente invention concerne de nouveaux ligands cycliques azotés et des complexes métalliques formés par ces ligands, les applications diagnostiques et t. ^* - érapeu tiques de ces complexes notamment en image - rie par résonance magnétique, en radiologie par rayons X, comme agents de déplacement chimique in vivo et en médecine nucléaire.

L' invention concerne également un procédé de préparation de ces ligands . L ' invention a ainsi pour objet des ligands de formule I 2

dans laquelle A _1# A ₂ , A3 et A ₄ identiques ou différents représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe :

m et n étant des nombres entiers identiques ou diffé- rents tels que la somme de m et n soit comprise entre 1 et 5,

R _A et R5 identiques ou différents représentant un atome d'hydrogène, un groupe alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-i-Cg, un groupe hydroxyalkyle ou poly- hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, un groupe fonctionnel permettant la fixation du macro¬ cycle de formule I sur une macromolécule, un groupe alkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C _j -Cg, hydroxyalkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne

linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, ou polyhydroxyalkoxy (en C ₁ -Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, un groupe aryle ou aryle substitué par un ou plusieurs substituants identiques ou différents choi- sis parmi un atoαe d'halogène, le groupe hydroxy, le groupe nltro, un groupe alkyle en -^-Cg, hydroxyalkyle en C ₁ -Cg, polyhydroxyalkyle en C-^-Cg, alkoxy en C- _j^ -Cg et alkoxy (en C _j -Cg) alkyle, un groupe aralkyle ou aralkyle substitué par un ou plusieurs substituants identiques ou différents choisis parai un atoae d'ha¬ logène, le groupe hydroxy, le groupe nltro, un groupe alkyle en C _j -Cg, hyâroxyalkyle en C-^-Cg, polyhydroxy- alkyle en C _j -C , alkoxy en C-^-C et alkoxy (en C^Cg) alkyle, le radical alkyle du groupe aralkyle étant à chaîne linéaire ou ramifiée en C ₁ -Cg,

R ₁₀ représente le groupe R ou R ₅ , le groupe hydroxy ou un groupe alkoxy en C^-Cg,

^R _l ' ^R 2' ^R 3 identiques ou différents sont choisis parai

un atoαe d'hydrogène, et les groupes - SCH-COOH, 9 ^R 9 ^R 9 ^R 9 ^R 13

-CH-P0 ₃ H ₂ , -CH-COO", -CH-PO3 ^"" et -CH-P0 ₂ ", représentant un atoαe d'hydrogène, un groupe alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, hyâroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C _j -Cg, polyhydroxyalky- le à chaîne linéaire ou ramifiée en C- _j^ -Cg, alkoxy (en C-^-Cg) alkyle en C ₁ -Cg à chaîne linéaire ou ramifiée, R ₁₃ représentant un groupe alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, un groupe hydroxy- ou polyhydroxy- alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, un groupe alkoxy (en C _j^ -Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, un groupe hydroxy- ou polyhydroxy¬ alkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg,

B représente le groupe N-W, W représentant le

groupe - CW- )-^ -(C)_- X, dans lequel p et q sont des

^R 12 nombres entiers identiques ou différents de 0 à 6, R^ et ^~ ι~ identiques ou différents ont la même significa¬ tion que R-LO lorsque p est différent de O et ont la même signification que R ₄ et R- lorsque p est égal à 0 et X représente un groupe

- C ), ou un groupe -CH

Rg et R ₇ formant avec l'atome de carbone auxquels ils sont attachés un hétérocycle, éventuellement composé de 2 cycles accolés, comportant jusqu'à 12 chaînons dont 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi l'oxygène, -N ^* -,

N-Rg, R ₈ représentant un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en ^~ - ^~ - à chaîne linéaire ou ramifiée, hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, polyhydroxyalkyle à chaîne llnalre ou ramifiée en C-^-Cg ou alkoxy à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, le phosphore et le soufre, 1'hétérocycle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi les groupes hydroxy, mercapto, alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C ₁ -Cg, hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, polyhydroxy¬ alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, alkoxy (en C _j -Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, hydroxyalkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne liné- aire ou ramifiée en C-^-Cg, polyhydroxyalkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, et un groupe fonctionnel permettant la fixation de 1'hétérocycle sur une macromolécule, avec la condition que lorsque p et q sont égaux à O, Rg et R représen-

tent un groupe -CH2-, -CH- ou -CH-, R^ _Q étant tel que ^c 10 défini précédemment; ou W représentant un groupe

-(CH ₂ ) _p -(

dans lequel p, q, R ₁ ,R ₂ ,R3,R ₁₁ ,R ₁₂ ,A ₁ ,A ₂ ,A3 et A sont tels que définis précédemment et Z représente un hété¬ rocycle, éventuellement formé de deux cycles accolés, comportant jusqu'à 12 chaînons dont 1 à 4 hétéroatoαes choisis parmi l'oxygène, N - , ^ N-Rg, Rg étant tel que défini . précédemment, le phosphore et le soufre, l'hétérocyle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi les groupes hydroxy, mercapto, alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^ Cg, hydroxy- ou polyhydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, alkoxy (en C^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, hydroxy- ou polyhydro- xyalkoxy (en C ₁ -Cg) alkyle à chaîne linéaire ou rami- fiée en C-^-Cg et un groupe fonctionnel permettant la fixation d'une macromolécule; 1 représente un nombre entier de 0 à 5 ; sous réserve que au moins deux groupes parmi R^, R et

Rg Rg Rg R ₃ représentent -CHC00H, -CH-CCO ^" , -CHP0 ₃ H ₂ .

^R 9 ^R 9 ^R 13

-CH-PO3 ou -CH-P0 ₂ ^" , Rg et R ₁₃ étant tels que défi¬ nis précédemment; étant entendu que les groupes A- _j _, R ₂ , R4, R5, g, g,

^R 10' ^R ll' ^R 12 ^{e R} 13 Peuvent être différents de A-^, R ₂ , R ₄ , R ₅ , R ₈ , Rg, R ₁₀ , n, i2 ^{e R} 13 respective ^¬ ment lorsque 1, m, n et q sont différents de O, ou lorsqu'ils sont présents plusieurs fois, ainsi que les sels de ces composés formés avec des bases, minérales ou organiques, ou des aminoacides basiques.

Des composés de formule I préférés sont ceux répondant à la formule générale II :

dans laquelle R _χ , R ₂ , R ₃ et ont la même significa- tion que précédemment et R'^, R' ₂ et R' ₃ identiques ou différents représentent le groupe R ou R5.

On préfère en particulier les composés de formule générale II dans laquelle R^, R ₂ et R3 repré¬ sentent le groupe CH ₂ -COOH. Parmi ces composés, on préfère en outre le groupe de composés de formule générale III :

dans laquelle R" ₂ et R"3 sont choisis parmi un atome d'hydrogène, le groupe méthyle et le groupe éthyle, W étant tel que défini précédemment.

Parmi les groupes X préférés on peut raen- tionner les groupes thiényle, dihydrothiényle, tétra- hydrothiényle, furyle, dihydrofuryle, tétrahydrofury- le, pyrannyle, dihydropyrannyle, tétrahydropyrannyle, pyrrolyle, 2H-pyrrolyle, dihydropyrrolyle, tétrahydro- pyrrolyle, imidazolyle, pyrazolyle, pyridyle, 3-hydro- xy 6-méthyl 2-pyriâyle, pyrazinyle, pyrimiâinyle, pyridazinyle, thiazolyle, isothiazolyle, oxazolyle, isoxazolyle, furazannyle, pyrrolidinyle,Δ2-pyrroli- nyle, imidazolidinyle,Δ2-imidazolinyle, pyrazolidi- nyle, Δ 3-pyrazolinyle, pipériâinyle, pipérazinyle, morpholinyle, pyrannyle, tétrahyâropyrranyle, tétra- zoyle, dioxannyle et dioxolannyle, éventuelleαent substitués par un ou plusieurs groupes choisis parmi hydroxy, mercapto, alkyle à chaîne linéaire ou rami¬ fiée en C _j^ -Cg, hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, polyhydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C- _j^ -Cg, alkoxy à chaîne linéaire ou ramifiée en C- _j^ -Cg, alkoxy (en C-^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, hydroxyalkoxy (en C ₁ -Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en Cj _^ -Cg et polyhydroxyalkoxy (en ^~ i" ^~ ^ alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C _j^ -Cg.

On préfère en particulier les groupes : pyrrolidinyle, imidazolyle, oxazolyle, pyrrolyle, pyridyle, pyrannyle, tétrahydropyrannyle, furyle, dihydrofuryle, tétrahydrofuryle, dioxannyle, oxazi- nyle, thiényle, morpholinyle, pipéridinyle et dioxo¬ lannyle dans lesquels 1'atome d'azote est éventuelle¬ ment substitué par un groupe alkyle en C^-Cg, un groupe hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en

C-i-Cg. un groupe polyhydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en , un groupe alkoxy à chaîne linéaire ou ramifiée en C ₁ -C ₆ , et 1'hétérocycle est éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi hydroxy, mercapto, alkyle en C ₁ -C ₆ et hy ^d roxyalkyle en C _j^ -Cg.

En outre, parmi les groupes X préférés constitués de deux cycles accolés, on peut mentionner les groupes benzofuryle, isobenzofuryle, chroményle, indolizinyle, isoindolyle, indolyle, indazolyle, purinyle, quinolyle, phtalazinyle, quinazolinyle, ptéridinyle, isochromannyle, indolinyle et iso-indo- linyle, éventuellement substitués par un ou plusieurs groupes choisis parmi hydroxy, mercapto, alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^Cg, hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en _Cl -Cg, polyhydroxy _¬ alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^Cg, alkoxy à chaîne linéaire ou ramifiée en C ₁ -Cg, alkoxy ₍ en C-j^-Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C _j -Cg, hydroxyalkoxy ⁽ en C^Cg) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en _]L -Cg et polyhydroxyalkoxy ₍ en C^Cg ₎ alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^Cg.

Parmi les groupes Z préférés, on peut citer les groupes suivants : thiophènediyle, dihydrothiophè- nediyle, tétrahydrothiophènediyle, furannediyle, dihydrofurannediyle, tétrahydrofurannPdiyle, pyranne- diyle, dihydropyrannediyle, tétrahydropyrannediyle, pyrrole ^d iyle, 2H-pyrrolediyle, dihydropyrrolediyle, tétrahydropyrrolediyle, imidazolediyle, pyrazolediyle, pyridinediyle, 3-hydroxy 6-méthyl 2-pyridinediyle, pyrazinediyle, pyrimidinediyle, pyridazinediyle, thiazole ^d iyle, isothiazolediyle, oxazolediyle, isoxa- zolediyle, furazannediyle, pyrrolidinediyle,Δ2-pyrro- linediyle ^, imidazolinediyle, Δ 2-imidazolinediyle _,

pyrazolidinediyle, ~-~ 3-pyrazolinediyle, pipéridine- diyle, pipérazinediyle, morpholinediyle, pyrannediyle, tétrahydropyrranediyle, tétrazolediyle, dioxannediyle, dioxolannediyle, benzofurannediyle, isobenzofuranne- diyle, chromenediyle, indolizinediyle, purinediyle, quinoléinediyle, phtalazinediyle, qulnazolineάiyle, ptéridinediyle, isochromannediyle, indolediyle, iso- -indolediyle, indazolediyle, indolinediyle et iso- indolinediyle. D'une façon générale, les hétérocycles préférés sont ceux dans lesquels un hétéroatome est placé en position β par rapport à l'azote du macro¬ cycle.

Parmi les groupes fonctionnels permettant la fixation d'une macromolécule sur le macrocycle ou sur 1*hétérocycle on peut citer notamment les groupes :

-CH ₂ -CH-CH ₂ , -CH ₂ -0-(CH ₂ ) ₃ -N -CH ₂ -0-(CH ₂ ) -SH,

-CH ₂ -0-(CH ₂ ) ₃ -NHNH ₂ , -CH ₂ -0-CH ₂ -

-CH ₂ -0-CH ₂ -CH ₂ -NH ₂ , - CH ₂ -0-CH ₂ -

0 O

Il II

-CH ₂ -0-CH ₂ -C-NH-(CH ₂ ) _1Q -C-NH-NH ₂ ,

O

CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₃ -Nh ,-CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₃ NH- ?C-CH-CH ₃ ,

CH ₂

CH ₂ -C ₆ H ₄ -0(CH ₂ ) ₅ C0 ₂ CH ₂ C6H ₅ ,-CH ₂ -C6H4-0-CH ₂ -C0 ₂ -CH ₂ CgH ₅

⁰ CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₅ CONH H ₂ , -CH ₂ -CgH ₄ -CO HNH-C-CH-CH ₃ ,

CH ₂

CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₄ -SH, CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₃ NHNH ₂ ,

0

-CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₅ -C0 H --<Nfl | ^• -*CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ ) ₃ Br,

O CH ₂ -CgH ₄ -0(CH ₂ )gCONHNH-(CH ₂ ) ₃ -NHNH ₂ , -CH ₂ -SH,

CH ₂ -NHNH ₂ , -CH ₂ C0NH H ₂ , (CH ₂ ) ₃ SH,

-CH ₂ -CgH -0-CH ₂ -COBr, -CgH NHCOCH ₂ Br,

O n

-CH ₂ -CgH ₄ -OCH ₂ -C-NH- ⁽ CH ₂ ^)~ ^2- - ^CH 2~ ^C 6 ^H 4 ^_NH 2' O

-CgH ₄ -N ₂ , -CgH ₄ NCS, -CH ₂ -CgH ₄ -NH-C-(CH ₂ ) ₂ -S-S- H

-NHCO-NH-NH ₂ , -NCS-NH-NH ₂ , -CH ₂ -CgH ₄ -0-CH ₂ -C ΛH-CH _2i

O O

H II -CH ₂ -CgH ₄ -O-CH ₂ -C-NH(CH ₂ ) ₁₀ -C-NHNH ₂ ,

P

-CH ₂ -CgH ₄ -0-CH ₂ -CHOH-CH ₂ -NH( CH ₂ ) _1Q -C-NHNH ₂ ,

O CH

Il I ^J

-OCH ₂ -C-N-CH ₂ -(CHOH) ₄ -CH ₂ OH,

Parmi les composés de formule I que l'on préfère, l'on peut citer les composés dans lesquels W représente les groupes :

CH- :-Q.-∞2-Q - -CH-5-CH-

^C 2 ^H 5 OH

On préfère en particulier les composés de formule I suivants :

Les macromolécules peuvent être des pro¬ téines, par exemple l'albumine, des anticorps notam¬ ment les anticorps onoclonaux, des fragments d'anti¬ corps, des azialogl coprotélnes, ou des polymères, par exemple le dextran ou la polylysine. Les ligands de formule I peuvent être pré¬ parés par la succession d'étapes suivantes : a) réaction d'un composé de formule : W - NH ₂ IV

W étant tel que défini précédemment avec un composé de formule

P-(ÇH) _m -(ÇH) _n -ÇH-NH-Ts

^R 4 ^R 10 ^R 5 dans laquelle R ₄ , R ₅ , R _1Q , m et n sont tels que définis précédemment, P représente un groupe partant choisi parmi les groupes mésyloxy, tosyloxy et les atomes de Br, Cl et I et Ts signifie le groupe tosyle pour donner un composé de formule VII

^R 4 ^R lO ^R 5 (CH) _πι -(CH) _n -CH-NH-Ts VII

W-N

(ÇH) ' _π m _ι -(CH) _n n-ÇH-NH-Ts

^{ 4 10

b) réaction du composé de formule VII avec un composé de formule VIII :

OT _g

OT-(ÇH) _n -(ÇH) _m [N-(ÇH) _m -(ÇH) _n -ÇHJθTs VIII ^R 5 ^R 10 ^R 4 ^{Ts R} 4 ^R 10 ^R 5 ¹

1 étant tel que défini précédemment pour obtenir un composé de formule IX

c) élimination du groupe tosyle, et d) alkylation du composé obtenu. L'élimination du groupe tosyle peut être réalisée notamment par réaction des composés de formule IX, - soit avec l'acide brom ydrique dans l'acide acétique au reflux, comme décrit dans WO-8 602 352 - soit avec 1'acide suifurique concentré à environ

100 ^β C comme décrit dans EP-287 465

- soit avec du sodium dans 1'ammoniac liquide comme décrit dans Helvetica Chimica Acta, vol. 71, 1988, p. 685 - soit avec du sodium dans le butanol à une tempéra¬ ture d'environ 100"C comme décrit dans Helvetica Chimica Acta, vol. 73, 1990, p. 716.

La réaction d'alkylation peut être réalisée:

- soit de manière directe par réaction du composé ob- tenu à l'étape c) avec de l'acide chloracétique ou un chloracétate comme décrit dans EP-287 465

- soit de manière indirecte par réaction du composé obtenu à 1'étape c) avec un ester de 1'acide ^~ -bromo- acétique ou Cx -chloroacétique tel que le bromacétate de tert-butyle ou le chloracétate de tert-butyle dans le DMAC ou le DMF en présence d'une base comme décrit dans EP-299 795 ou le bromacétate d'éthyle dans l'éthanol en présence de carbonate de césium comme décrit dans J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1989, p. 794, suivie d'une saponification du composé obtenu par une méthode connue de saponification ou par l'acide tri- fluoroacétique en excès à température ambiante dans le cas des esters de tertiobutyle comme décrit dans EP-299 795. Le groupe des composés de formule générale

II telle que définie précédemment peuvent en outre être préparés par la succession d'étapes suivantes : a) réaction d'un composé de formule W - NH ₂ IV dans laquelle W est tel que défini précédemment avec un composé de formule

dans lequel R' ₂ est tel que défini précédemment et P' représente un groupe tosyle, mésyle, phénylsulfonyle, ou 4-méthoxyphénylsulfonyle, pour obtenir un composé de formule XI

R

W-N < NHP' XI i

H

b) réaction du composé de formule XI avec un composé de formule XII

R'3 et P' étant tels que définis précédemment pour obtenir le composé de formule XIII

c) réaction du composé de formule XIII avec un composé de formule

P' et R'i étant tels que définis précédemment pour obtenir un composé de formule XV

d) élimination du groupe P' pour obtenir le composé de formule XVI

e) alkylation du composé de formule XVI. Les réactions des étapes a) et b) sont effectuées à une température de l'ordre de 40 à 100"C dans un solvant tel que le DMF, le toluène ou l'acéto- nitrile.

La réaction de 1'étape c) a lieu dans le DMF en présence de NaH à chaud comme décrit dans Org. Synth. 1979, vol. 58, p. 86-97 ou avec le carbonate de césium dans du DMF sec à une température de l'ordre de 40 à 80°C comme décrit dans J. Org. Chem. 1984, vol. 49, p. 110-113 ou encore par catalyse par transfert de phase.

Les réactions d'élimination du groupe P' et d'alkylation ont lieu comme décrit précédemment pour la préparation des composés de formule I.

Les composés de formule XV peuvent également être préparés de la manière suivante : a) réaction de la benzylamine avec un com¬ posé de formule X telle que décrite précédemment pour obtenir un composé de formule XVII :

B _Z -NH NH-P' XVII

B _z représentant le groupe benzyle, b) réaction du composé de formule XVII avec un composé de formule XII tel que décrit précédemment pour obtenir un composé de formule XVIII

-n f

2

NH-P'

B ₂ XVIII

c) réaction du composé de formule XVIII avec un composé de formule XIV pour obtenir un composé de formule XIX,

d) hydrogénation du composé XIX pour obtenir un composé de formule XX,

e) réaction du composé de formule XX avec un composé de formule W-P", w étant tel que défini précé¬ demment et P" représentant le groupe P'ou un atome de chlore ou de brome pour obtenir un composé de formule XV telle que définie précédemment.

Les réactions d'élimination du groupe P' et d'alkylation ont lieu comme décrit précédemment pour la préparation des composés de formule I.

Les aminés de formule IV sont des produits connus, comme par exemple la 2-aminoβéthyl-l-éthyl pyrrolidine, la 2-arainoéthyl-l-méthyl pyrrolidine, le 2-aminométhylfuranne, le 2-aminométhyl tétrahydro- furanne et la 2-méthylamino pyrldlne commercialisés par la firme ALDRICH, ou peuvent être préparés par exemple de la manière suivante : a) époxydation d'un composé de fonule XXI :

par de l'acide chloroperbenzolque, comme décrit dans Journal of Pharmaceutic Sciences, 1970, vol. 59, p. 1676- 1679,

b) réaction du composé obtenu avec un azo- ture tel que NaN ₃ dans du méthanol aqueux en présence de chlorure d'ammonium tel que décrit dans Tetrahedron Letters vol. 31, 1990, p. 5641-5644, pour obtenir un composé de formule XXII

c) réduction du composé de formule XXII par de l'hydrogène sur charbon palladié comme décrit dans Synthetis 4, 1990, p. 366-368, pour obtenir l'aminé correspondante de formule XXIII

XXIII

La même procédure peut être répétée pour préparer les aminés suivantes :

Hjfc

à partir des composés suivants

Les procédés de préparation de ces composés sont décrits de manière plus détaillée par Normant, Castro, C.R. Acad. Sciences, 259, 1964, p. 830;

Ficini, Bull Soc. Chim. Fr., 1956, p. 119-123; Mikal- lovic, Helv. Chim. Acta, vol. 56, n* 8, 1973, p. 3056; Colonge, Buendia, C.R. Acad. Sciences, 261, 1965; Olsen, Chem. Ber. vol. 91, 1958, p. 1589-1594. L'a iné de formule

posé de formule

que l'on met à réagir avec SOCl ₂ pour obtenir

1

CH ₅ suivie d'une réaction du produit obtenu avec NaN ₃ suivie d'une hydrogénation catalytique.

Les composés de formules X et XII peuvent être préparés par réaction d'un composé de formule

R' ₂ (R' ₃ ) \

HO NH ₂ XXIV

R' ₂ et '3 étant tels que définis précédemment avec un composé de formule P'-Cl, P' étant tel que défini pré¬ cédemment pour obtenir le composé de formule

q e l'on met à réagir avec KOH aqueux pour obtenir le composé deformule X ou XII correspondant, comme décrit dans Helvetica Chimica Acta, vol. 68, 1985, p. 289, ou en faisant réagir un composé de formule

avec le chlorure de tosyle en présence de pyridine de façon à obtenir un composé de formule

T

Les dimères de formule I peuvent être prépa¬ rés par un procédé analogue à celui décrit plus haut, à savoir : a) réaction d'un composé de formule

H ₂ N-W*-NH ₂ (IV bis)

W' représentant un groupe

Pu Pu

-(CH ₂ ) _p -(C) _q -X'-(Ç) _q -(CH ₂ ) _p -

'12 <12

p, q, R^ et R ₁₂ étant tels que définis précédemment et X' représentant un groupe choisi parmi :

-CH

R'g et R' formant avec les atomes de carbone auxquels ils sont attachés un hétérocycle, éventuellement composé de 2 cycles accolés, comportant jusqu'à 12 chaînons dont 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 1'oxy¬ gène, -N=, ^X N-Rg, Rg représentant un atome d'hydro-

gène, un groupe alkyle en C^-Cg à chaîne linéaire o ramifiée, hydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifié en C-L-Cg, polyhydroxyalkyle à chaîne llnalre ou rami fiée en C ₁ -C ₆ ou alkoxy à chaîne linéaire ou ramifié - en C^-Cg, le phosphore et le soufre, 1'hétérocycl étant éventuellement substitué par un ou plusieur groupes choisis parmi les groupes hydroxy, mercapto, alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, hyâro¬ xyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C-^-Cg, ° polyhydroxyalkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C ₁ -C ₆ , alkoxy (en C ₁ -C ₆ ) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée en C^-Cg, hydroxyalkoxy (en C _j -Cg) alkyle & chaîne linéaire ou ramifiée en C _j .-Cg, polyhydroxy¬ alkoxy (en C ₁ -C ₆ ) alkyle à chaîne linéaire ou ramifiée 5 en C _j -C , et un groupe fonctionnel permettant la fixa¬ tion de 1'hétérocycle sur une macro-molécule, avec la condition que lorsque p et q sont égaux à O, Rg' et Ry ^' représentent un groupe -CH -, -CH» ou -CH-, R± _Q

^R 10

0 étant tel que défini précédemment; avec un composé de formule V tel que défini précé¬ demment pour donner un composé de formule VII bis :

^{5 R} 5 ^R 10 ^R 4 ^R 4 ^R 10 ^R 5 Ts-HN-CH-(CH) _n -(CH)m. (CH) '_m-(CH) ' _n n-CH-NH-Ts

N-W'-N

X

Ts-HN-CH-(CH) _n n-(CH) 'm (CH) _m -(CH) _n -ÇH-NH-Ts

^R 5 ^R 10 ^R 4 ^R 4 ^R 10 ^R ï

VII bis

~ C ^" .

b) réaction du composé de formule VII bis avec un composé de formule VIII tel que décrit précé¬ demment pour obtenir un composé de formule IX bis :

₅ -RlO -R ₄

IX bis

c) élimination des groupes tosyles, et d) alkylation du composé obtenu.

La présente invention a en outre pour objet des complexes formés par au moins un ligand de formule I avec au moins un ion métallique choisi parmi les ions des lanthanides, les ions des métaux de transi¬ tion, le baryum, le bismuth, le plomb et les radioiso-

topes ^99m Tc, ¹¹¹ In, ⁹⁰ Y, ⁶⁴ Cu et ¹⁶⁹ Yb, ainsi que les sels de ces complexes avec des bases minérales ou organiques pharmaceutiquement acceptables ou des arai- noacides basiques. Les complexes sont mono- ou polymétalliques de préférence mono- ou bi-métal1iques, neutres ou io¬ niques.

Dans ces complexes, les ions métalliques sont de préférence le gadollnium, l'europiu , le dysprosium, le fer (Fe ³⁺ ), le manganèse (Mn ²⁺ ) et le baryum.

Comme exemples de sels, on peut citer ceux formés avec l'hydroxyde de sodium, la N-méthylgluca- mine, la dléthanolamine, la lysine et l'arginine. Les complexes peuvent être obtenus par réaction des ligands avec un sel ou un oxyde des mé¬ taux dans un solvant aqueux et éventuellement neu¬ tralisation pour former un sel.

Il va de soi que la présente invention englobe non seulement les ligands de formule I et les complexes précédemment définis sous forme de mélange racémlque mais également des stéréoiso èreβ de ces ligands et complexes.

Les complexes selon l'invention formés par les ligands de formule I peuvent être utilisés dans des applications diagnostiques in vitro et in vivo chez l'homme et chez l'animal.

En imagerie par résonance magnétique et en spectroscopie RMN in vivo, ils peuvent être utilisés comme agents de relaxation; à cet effet on préfère les complexes formés avec les métaux suivants : Gd 3°+, Mn2+ et Fe ⁺ ; comme agents de susceptibilité magnétique : à cet effet, on préfère les complexes formés avec les métaux Dy ³⁺ , Ho ³⁺ ,Tb ³⁺ et Er ³⁺ ; ou comme agents de

déplacement chimique : à cet effet on préfère les com _¬ plexes formés avec les métaux Eu ³⁺ , Pr ³⁺ et Yb ³⁺ .

Les complexes formés par les ligands de for¬ mule I et les métaux choisis de préférence parmi les lanthanides, La ³⁺ , Bi ² +, _Ba 2+ _{et pb} 2+ pe _{UVβnt ê1:re} utilisés en imagerie par rayons X.

En médecine nucléaire, les complexes formés par les ligands de formule I et les métaux ^99m Tc, In, Cu et ¹⁶⁹ Yb, peuvent être utilisés dans des applications radiodiagnostiques et les complexes for _¬ més avec les métaux ⁹⁰ γ, Hlm _f 169γb, 212 _{Bi et} 64 _Cu peuvent être utilisés dans des applications radio- thérapeutiques après couplage du complexe à une bio _¬ molécule appropriée.

Les complexes formés par les ligands de formule I et les ions métalliques choisis de préfé _¬ rence parmi Eu ³ * et Tb ³⁺ peuvent être utilisés dans des applications diagnostiques in vitro par photo _¬ luminescence, telles que des fluoroim uno-essais.

La présente invention a en conséquence éga¬ lement pour objet une composition de diagnostic adβi- nistrable à l'homme, caractérisée en ce qu'elle com _¬ prend au moins un complexe formé par un ligand de formule I avec au moins un ion métallique choisi parmi les ions des lanthanides, les ions des métaux de transition, le baryum, le bismuth, Je plomb et les radioisotopes suivants ^99m Tc, ¹¹¹ in, ⁹⁰ Y, ⁶⁴ Cu et Yb, ainsi que les sels de ces complexes avec des bases minérales ou organiques pharmaceutiquement acceptables ou des aminoacides basiques, le complexe étant éventuellement couplé à une biomolécule, à un polymère ou encapsulé dans un liposome.

L'invention a en outre pour objet une com¬ position thérapeutique comprenant un complexe tel que

décrit précédemment couplé à une biomolécule ou à un polymère, ou encapsulé dans un liposome.

Ces compositions peuvent être constituées notamment par des solutions dans un solvant aqueux physiologiquement acceptable d'un complexe selon l'Invention.

Avantageusement, une formulation des compositions de l'invention comprend en plus d'au moins un complexe selon l'invention, de 0,05 à 10% en mole du ligand correspondant sous forme de complexe calcique ou de zinc.

Les compositions de diagnostic selon l'in¬ vention peuvent être administrées :

- par voie parentérale dont la voie intra- veineuse, la voie intra-artérielle, la voie intra- lymphatique, la voie sous cutanée

- par vole orale

- par voie sous-arachnoldienne

- par voie intrabronchique sous forme d'aérosol.

En imagerie par résonance magnétique, les doses sont très variables selon les voies d'adminis¬ tration.

Pour la voie intraveineuse ou intra-arté- rielle, la dose est d'environ 0,01 à 2 mM/kg.

Pour la voie orale cette dose peut aller jusqu'à 10 mM/kg.

Pour les autres voies d'administration, les doses utiles sont généralement inférieures à 1 mM/kg et même généralement pour la voie sous-arachnoldienne inférieures à 0,05 mM/kg.

Dans 1'utilisation comme agents de déplace¬ ment chimique pour la spectroscopie in vivo, comme agents de susceptibilité magnétique en IRM et comme

agents de constraste en radiologie par rayons X les doses sont les mêmes, sauf par voie intraveineuse ou intra-artérielle où les doses peuvent être de 0,2 à 5 mM/kg.

Les exemples suivants illustrent la prépa¬ ration de composés selon la présente demande. EXEMPLE 1 :

Préparation du composé de formule :

a) préparation du composé de fαraule

8,3g (82 mmoles) de tétrahydrofurfurylamine et 32,4 g (164 mmoles) de tosylaziridine sont dissous dans 500 cm ³ de toluène sec à une température de 100"C. Le mé¬ lange est agité pendant 2Oh à cette température. Le milieu réactionnel est ensuite filtré à chaud et le solvant est évaporé. L'huile obtenue est filtrée sur un bouchon de silice. Après évaporation du solvant, on obtient 28,4 g d'un produit gommeux qui cristallise lentement.

Rendement : 70%. CCM : silice; CH ₂ C1 ₂ /acétate d'éthyle : 90/10; Rf: 0,3.

b) Préparation du composé de formule

9,9g (20 mmoles) de produit préparé en a) sont dissous dans 1200 cm ³ de DMF sec. Le réacteur étant placé sous atmosphère d'argon, on ajoute 30 g de Cs ₂ C0 ₃ pulvéru¬ lent sec et on porte le mélange à 30"C. Une solution de 11,35 g de N-tosyl-bis(2-tosyloxy éthyl)a iné dans 300 cm ³ de DMF est introduite goutte à goutte. Le é- lange réactionnel est agité jusqu'à disparition des produits de départ. Lorsque la réaction est terminée, le mélange est filtré et le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu est repris avec 500 cm ³ de dichlorométhane. La solution chlorométhylénique est filtrée et lavée trois fois à l'eau. Après séchage sur MgS0 ₄ , le dichlorométhane est évaporé. Le résidu est purifié par chromatographie sur silice. On obtient 7 g de produit pur (Rendement : 49%).

CCM : silice; CH ₂ C1 ₂ /acétate d'éthyle :95/5; Rf _: 0,4. RMN : 150-130 ppm, groupes aromatiques, groupes tosyle; 80, 71 , 8 , 53, 34, 8 et 29 , 8 ppm, motif tétrahydrofur furyle; 61-53 ppm, macrocycle; 26, 24 ppm

CH3 des groupes tosyle.

c) Préparation du composé de formule

HCl

A 250 cm ³ de n-butanol sec, on ajoute 5g de produit obtenu en b). Le mélange est agité sous atmosphère d'azote sec et porté à la température de 100'C. Après dissolution complète, on ajoute par petites portions 15 g de sodium à la solution. Lorsque l'addition est terminée, le butanol est évaporé et le résidu est repris à l'eau. La solution aqueuse est évaporée et le résidu est repris à l'éthanol absolu.

Après évaporation de l'éthanol, on reprend le produit au dichlorométhane et on filtre les sels. La solution chlorométhylénique est évaporée et le résidu huileux obtenu est dissous dans 200 cm ³ d'acide chlorhydrique 1M. La solution acide est évaporée à sec. Après séchage on obtient 1,8 g de produit sous forme de chlorhydrate.

CCM silice-dioxanne/eau/ammoniaque : 8/3/2; Rf : 0,1. d) Préparation du composé de formule :

580 mg de produit préparé en c) 3t 1,5 g d'hydrogéno- carbonate de sodium sont mis en suspension dans 40 cm ³ de DMF sec. Le réacteur est placé sous atmosphère d'argon et le mélange porté à une température de 50*C. On ajoute alors goutte à goutte une solution de 1 cm ³ de bromacétate de tertiobutyle et 10 cm ³ de DMF sec. Après 24h, le DMF est évaporé sous pression réduite. Le produit est alors dissous dans CH ₂ C1 ₂ et séparé des sels par filtration. Après évaporation du dichloromé- thane, on obtient une huile jaune qui est purifiée par chromatographie sur s,ilice. On obtient 650 mg de pro¬ duit pur qui cristallise lentement. CCM : silice; CH ₂ Cl ₂ /méthanol 10%; Rf : 0,5. I.R. : 1710 cm ^"1 bande du carbonyle. RMN ⁺ H : 1,43 ppm, singulet, tertiobutyle.

RMN ¹³ C : 173 ppm, carbonyle; 83 ppm, C quaternaire terbutyle; 28 ppm, groupes méthyle; 74, 69, 30, 26 ppm motif tétrahydrofuranne. Spectre de masse : / t*H ⁺ 599. e) Préparation du composé de formule :

650 mg de produit préparé en d) sont dissous dans 10 cm ³ d'acide trifluoroacétique. Le mélange est agité pendant 24h à température ambiante. L'acide trifluoro¬ acétique est ensuite évaporé et le résidu est coévaporé avec de 1'eau. Le produit est ensuite purifié sur une résine IRA 458 0H~. On obtient finalement 150 mg de produit.

CCM : silice; acétate d'éthyle/isopropanol/ammoniaque

:12/35/30; Rf : 0,6.

RMN ¹³ C : 170 ppm, carbonyle;74,65, 27, 22 ppm, motif tétrahydrofuranne.

Spectre de masse : MH ⁺ 431

On prépare le complexe de gadolinium du com¬ posé décrit ci-dessus en mettant en suspension dans 100 ml d'H 0 à 80* C Gd 0 ₃ (4 mmoles) et le composé brut obtenu à l'exemple précédent (8 mmoles) et en agitant la suspension pendant 24 heures.

. La solution est refroidie à température ambiante puis le solvant est chassé sous pression réduite.

Le solide résultant est dissous dans 15 ml d'H ₂ 0 et 5 ml de C ₂ H ₅ OH et est ajouté goutte à goutte à 750 ml d'acétone placée sous agitation rapide.

Le précipité qui se forme est filtré puis lavé avec de l'acétone et séché sous vide à tempéra¬ ture ambiante.

EXEMPLE 2

Préparation du composé de formule

N N

HO 2C y ^• C0 ₂ H a) Préparation du composé de formule

N N

/ ^s ' \

29 g (40 mmoles) de monobenzyl tritosylcycléne prépa¬ rés selon le procédé décrit dans EP-255 471 sont réduits sous une pression de 4.10^ Pa d'hydrogène en présence de charbon palladié dans 500 cm ³ d'acide acétique. Le mélange est agité pendant 24 h à 70*C. Après filtration, le solvant est évaporé. Le solide obtenu est lavé successivement avec une solution de carbonate de potassium puis à l'eau. 23,7 g de poudre blanche sont obtenus. CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ /CH ₃ 0H (95/5) Rf = 0,3; PF - 195'C Rendement : 93%. b) Préparation du composé de formule

5 g (7,8 mmoles) de tritosylcycléne préparés en a), 1,45 g (8,6 mmoles) de 2-chlorométhyl 1-méthyl imidazole tel que décrit dans JOCELYN P.C., J. Chem. Soc., 3305, (1957) et 2,7 cm ³ (19,7 mmoles) de trié- thylamine sont dissous dans 50 cm ³ de dichlorométhane. Le milieu réactionnel est chauffé au reflux pendant 1 h. On ajoute 1,45 g (8,6 mmoles) de réactif chloré à la solution. On chauffe au reflux pendant 12 h. On ajoute 1,35 cm ³ (9,85 mmoles) de triéthylamine en solution dans 10 cm ³ de dichlorométhane et le milieu réactionnel est chauffé de nouveau pendant 12h au reflux. Après refroidissement, la triéthylamine est éliminée par lavage à 1'eau. La phase organique séchée sur MgS0 ₄ est concentrée puis purifiée par chromato- graphie sur silice. 6 g de poudre blanche sont obte- nus.

CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ /CH ₃ 0H (90/10) Rf 0,6,

Rendement : 53%.

RMN ¹ H (DMSO) $> = 2,41 ppm 2s, CH ₃

-=•* = 2,65 ppm m, CH ₂

3,05 ppm< «i < 3,7 ppm m, CH ₂

6,7 ppm< à < 7,05 ppm d, CH = CH 7,4 ppm< à < 7,75 ppm m, CH - CH c) Préparation du composé de formule

6 g (8,3 mmoles)de substrat préparé en b) sont dissous dans 80 cm ³ de n-BuOH sec. La solution placée sous atmosphère inerte est chauffée à 100*C. 5 g (220 mmo¬ les) de sodium sont ajoutés très lentement à la solu¬ tion. Celle-ci est ensuite maintenue pendant 12 h à 100* C. Le solvant est évaporé. Le produit est repris plusieurs fois à l'eau et séché avant d'être extrait par le dichlorométhane (trois fois 20 cm ³ ). Le solvant est évaporé et le résidu dissous dans 50 cm ³ d'acide chlorhydrique 6N. La solution est concentrée et lavée trois fois avec 15 cm ³ de dichlorométhane. Après séchage, 2,9 g de produit sont isolés sous forme de chlorhydrate.

CCM : Si0 ₂ ; CHCI3/CH3OH/NH4OH (4/4/2). Rf - 0,3. d) Préparation du composé de formule :

tBuθ ₂ •CO-tBu

2,2 g (5,8 mmoles) de produit préparé en c) et 6,3 g (58 mmoles) de carbonate de sodium sont mis en sus¬ pension dans 35 cm ³ de DMF sec. Le mélange est placé sous atmosphère inerte et chauffé à 60*C. 3,75 g (19,2 Ξ mmoles) de bromoacétate de terbutyle en solution dans 35 cm ³ de DMF sont ajoutés goutte à goutte. Après 24 h de réaction, le DMF est évaporé. Le produit est repris dans 100 cm ³ de dichlorométhane et lavé trois fois avec 70 cm ³ d'eau. La phase organique est séchée sur 10 MgS0 ₄ , concentrée et purifiée par chromatographle sur silice. Après évaporation du solvant et séchage, on isole 1,4 g de poudre blanche. Rendement 40%. CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ Cl ₂ /EtOH (90/10); Rf- 0,5. IR (KBr) : 1720 cm ^-1 C = O. ₁ 5 RMN H ⁺ (DMS0) : & = 1,4 ppm : 2s, C(CH ₃ ) ₃ 2 < i < 3,5 ppm : m, CH ₂ - CH 6,5 < 4 < 7,05 ppm : d, CH - CH RMN ¹³ C (DMS0):-i = 27,4 ppm, CH ₃ ^ ≈ 31,7 ppm, CH ₃ 20 ^ - 48,9 ppm, CH ₂

^• ^ ≈ 55,0 ppm, CH ₂ ≈ 55,7 ppm, CH ₂ « ≈ 80,9 ppm, C i = 121,0 ppm, HC = CH 25 & - 125,5 ppm, HC = CH à = 146,0 ppm, C = N J ≈ 171,6 ppm, C = O à = 172,3 ppm, C = 0

- 0 spectre de masse ( FAB ) M = 632 (M + Na ⁺ )

Z

/

e) Préparation du composé de formule :

1 g (1,64 m ole) de produit préparé en d) est dissous dans 40 cm ³ d'acide trifluoroacétique. La solution placée sous atmosphère inerte est agitée pendant 20 h à température ambiante. L'acide trifluoroacétique est ensuite évaporé puis azéotropé avec de l'eau. Le pro¬ duit brut est purifié sur une résine IRA 458. 600 mg de poudre blanche sont isolés. Rendement 83%. CCM : Si0 ₂ ; AcOEt/Isopropanol/NH OH ; Rf - 0,5.

RMN H ⁺ (DMSO) 2,6 < ^• * < 4 ppm : m; CH ₂ et CH3 6,8 < J < 7,1 ppm : d; CH - CH

< ^* » ^*•*** 7,4 ppm : m; OH

RMN ¹³ C (DMSO) = 32,7 ppm, CH ₃

= 49,6 ppm, CH ₂

= 50,7 ppm, CH ₂ 51,2 ppm, CH ₂

= 54,8 ppm, CH ₂

= 122,0 ppm, CH = CH d = 125,7 ppm, CH ≈ CH - 144,0 ppm, C = N -4 = 170,1 ppm, 2C = 0 -i - 171,1 ppm, 1C = O

EXEMPLE 3 :

Préparation du composé de formule

a) Préparation du 2:5-ditosyl-l,4:3,6- dianhydrosorbitol de formule :

Le 2:5 ditosyl-l,4:3,6-dianhydroβorbitol est préparé à partir du 1,4:3,6-dianhydro-D-sorbitol, disponible commercialement sous le nom Isosorbide ® par la société Aldrich Chimie (Strasbourg) selon la méthode décrite dans J. Am. Chem. Soc. 68 (1946) p. 927 et J. Chem. Soc. (1946) p. 393.

Masse obtenue pour 100 g d'Isosorbide ® : 213 g; rendement : 69 %. CCM : Si0 ₂ , éluant CH ₂ C1 ₂ / AcOEt : 97/3, Rf : 0,6. b) Préparation du 2:5-diazido-l,4:3,6- dianhydrosorbitol.

Le 2:5-diazido-l,4:3,6-dianhydrosorbitol est préparé à partir du composé obtenu à l'étape précéden¬ te selon la méthode décrite dans Carbohydrate Research 85 (1980) p. 259. Masse obtenue pour 150 g du composé de l'étape précédente : 37 g; rendement 57 %; CCM : S10 ₂ ; éluant : éther de pétrole/éther éthylique : 85/15; Rf : 0,25.

I.R. : 2100 cm ^-1 ; bande azide.

c) Préparation du 2:5-diamino-l,4:3,6- dianhyάrosorbitol.

4,5 g (22,95 mmoles) du composé obtenu à l'étape précédente sont dissous dans 200 cm ³ d'éthanol à 95* C. I g de palladium sur charbon est ajouté à la solution puis la suspension est placée en autoclave sous une pression de 13-14.10 ⁵ Pa d'hydrogène, à une température de 50* C. Le milieu réactionnel est agité pendant 7 heures sous pression d'hydrogène constante puis est laissé une nuit au repos sous pression résiduelle d'hydrogène.

Le milieu réactionnel est filtré et le solvant évaporé. Le résidu huileux obtenu est repris dans l'acétonitrile et le précipité blanc formé est éliminé par filtration.

La solution obtenue est évaporée pour donner 3,3 g d'une huile incolore.

Rendement : 100 %.

I.R. : disparition de la bande azide à 2100

cm ^-1 . Bandes NH à 3360 et 3280 cm ^-1 .

RMN ¹³ C : 55,67 ppm - 59,17 ppm - 72,41 ppm ^• 75,58 ppm - 82,33 ppm - 92,68 ppm.

CCM: Si0 ₂ ; éluant CH ₂ Cl ₂ /MeOH/NH ₃ : 16/4/0,1,

Rf = 0,37. d) Préparation du composé de formule :

NHTs TsHN

Dans un ballon tricol de 500 cm ³ sont introduits 5g (34,7 mmoles) du composé obtenu à l'étape précédente et 27,3 g (0,139 mole) de tosyla- ziridine en solution dans 250 cm ³ d'acétonitrile. Le mélange est agité et porté à 70* C pendant 4 jours. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu purifié sur colonne de silice.

17 g du produit attendu sont obtenus avec un rendement de 52 %.

CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ Cl ₂ /MeOH : 95/5, Rf - 0,35.

e) Préparation du composé de formule :

Dans un ballon tricol de 2 1 placé sous atmosphère d'argon sont introduits 15 g (16,1 mmoles) du composé obtenu à l'étape précédente, 750 cm ³ de DMF sec et 32 g de Cs ₂ C0 ₃ anhydre. Une solution de 18,25 g (32,18 mmoles) de blséthanolamine tosylée dans 200 cm ³ de Di.F est ajoutée lentement. Le mélange est chauffé à 40 ^* C pendant 3 jours. La solution est filtrée et le DMF est évaporé. Le composé est purifié sur colonne de silice. 8 g du produit du titre sont obtenus avec un rendement de 36 %.

CCM : Si0 ₂ CH ₂ Cl ₂ /AcoEt : 90/10, Rf ≈ 0,65.

RMN ¹ H : 7,4-7,8 ppm, multiplet : H aromati¬ que, H des groupes tosyles, 2,4 ppm, singulet : méthyle, tosyle. f) Préparation du composé de formule

4 g (2,91 mmoles) de produit obtenu à l'étape précédente sont introduits dans 350 cm ³ de n-butanol sec. le mélange est chauffé à 110* C sous agitation. Le réacteur est purgé à l'azote sec et 20 g de Na sont ajoutés par petites portions sur 8 heures. La température est ensuite ramenée à 80" C et le mélange réactionnel est placé sous agitation pendant une nuit.

Après élimination complète du butanol, le résidu huileux est repris par HCl aqueux 1 M. La solution est filtrée et lavée au dichlorométhane.

Après évaporation, le chlorhydrate d'aminé est récupéré sous forme d'un solide blanc. 2g de produit sont obtenus.

CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ Cl ₂ /MeOH/NH ₄ aqueux : 4/4/2, flamme ayant pour origine Rf » 0.

RMN ¹³ C : 40,72 ppm - 48,42 ppm, H des macro¬ cycles,

63,89 ppm - 66,03 ppm - 66,40 ppm - 70,16 ppm - 82,05 ppm - 83,25 ppm, motif bishétéro- cycle central. g) Préparation du composé de formule :

3,9 g de produit obtenu à l'étape précédente dans 45 cm ³ d'acétonitrile sont introduits dans un ballon tricol de 500 cm ³ muni d'un réfrigérant, d'un barreau magnétique et placé sous argon.

15 g de carbonate de sodium anhydre sont ajoutés avec 40 cm ³ d'acétonitrile.

Le mélange est agité et porté à 40*C. Une solution de 10,8 g de bromoacétate de terbutyle dans 30 cm ³ d'acétonitrile est ensuite ajoutée goutte à goutte. Le mélange est filtré après 24 heures et la solution reactionnelle est concentrée. L'huile obtenue est reprise à l'éther éthylique.

Le solide obtenu est lavé plusieurs fois à l'éther. Après purification sur colonne de silice, on

obtient 5,6 g du composé du titre.

CCM:Si0 ₂ ; CH ₂ Cl ₂ /MeOH:90/10, Rf = 0,4 Spectre de masse FAB (glycérol) MH ⁺ Na ⁺ 1162

h) Préparation du composé de formule

Le produit obtenu à l'étape précédente est dissous dans 30 cm ³ d'acide trifluoroacétique.

Le milieu réactionnel est agité à tempéra¬ ture ambiante pendant 16 heures. Le solvant est évaporé et le résidu est repris à l'eau.

La solution obtenue est concentrée. Le pro¬ duit est purifié sur résine IRA 458.

CCM:S10 ₂ ; AcOEt/Isopropanol/ammoniaque aqueuse : 12/35/30 Rf - 0,25 + 0,42.

Spectre de masse FAB (glycérol), MH ⁺ 803.

RMN ¹³ C : 171,9 ppm - 171,6 ppm - 167,4 ppm, carbonyles ;

57,55 ppm - 61,23 ppm - 62,57 ppm - 68,80 ppm - 79,18 ppm - 80,10 ppm : système hétérocyclique central,

53,9 ppm : méthylène des carboxyméthyles;

50,62 ppm - 41,64 ppm : macrocycles.

EXEMPLE 4 :

Préparation du composé de formule

a) Préparation du 2:5-ditosyl-l,4:3,6-di- anhydromannitol de formule :

Le produit du titre est préparé à partir de 73 g (0,5 mole) de l,4:3,6-dianhydro D-mannitol, dis- ponible commercialement sous le nom Isomannide ® par la société Aldrich Chimie (Strasbourg) selon la mé¬ thode décrite dans Journal of Organometallic Chemistry 253 (1983) 249-252.

Masse obtenue = 196,2g ;

Rendement : 86,5%. b) Préparation du 2:5-diazido-2,5-didéoxy- -1,4:3,6-dianhydro-iditol.

Le composé du titre est préparé à partir de 98 g (0,2 mole) du composé obtenu à l'étape précédente selor. la méthode décrite dans Carbohydrate Research 85 (1980) 259-269.

Masse obtenue : 36 g (rendement : 85%).

c) Préparation du 2:5-diamino-2,5-didéoxy- -1,4:3,6-dianhydro-iditol.

Le composé du titre est obtenu à partir de 12 g (0,06 mole) du composé de l'étape précédente selon les méthodes décrites dans JACS 78 (1956) 3180 et Synthetic Communications 19 (1989) 1493-1498. Masse obtenue : 9g.

d) Préparation du composé de formule :

N

TsHN NHTs 8,8 g (0,06 mole) du composé obtenu à l'étape précédente sont dissous dans 800 ml d'acéto¬ nitrile en présence de 48,15 g (0,244 mole) de N-to- sylaziridine.

Le mélange réactionnel est chauffé au reflux pendant 48 h. Le milieu est évaporé à sec pour être ensuite chromatographié sur colonne. 26,1 g de produit sont ainsi obtenus soit un rendement de 51%.

CCM (CH ₂ C1 ₂ 95/AcOEt 5/MeOH 5) : Rf * 0,5. RMN-H (200 MHz) (DMSO): 2,3 ppm, CH ₃ tosyle

7,3 et 7,6 ppm, H aromatique. RMN ¹³ C 128, 130, 138 et 143 ppm, C aromati¬ que,

85, 70, 68 ppm, C du système bishé- térocyclique central,

22 ppm, C du CH3 du groupe tosyle.

e) Préparation du composé de formule

30 g du produit obtenu à l'étape précédente

(0,0323 mole) sont dissous dans 1,8 1 dm DMF anhydre en présence de 94 g de Cs ₂ C0 ₃ , sous argon, à40*C. Une heure plus tard, est ajouté lentement à cette suspen¬ sion, une solution de 36,6 g (0,0645 mole) de diétha- nolamine tritosylée dans 0,9 1 de DMF.

Le milieu réaction est porté à 40*C pendant 48 h. Après filtration, évaporation du DMF, le résidu obtenu est chromatographié sur colonne.

16 g de produit sont ainsi obtenus, soit un rendement de 36%.

CCM:Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 95/AcoEt 4/MeOH 1 : Rf ≈ 0,15.

I.R. (pastille de KBr) : disparition de la bande caractéristique de la liaison NH-Tte à 3300 cm ^"1 .

RMN ¹³ C (200 MHz) (DMSO) : 128, 130, 138 et 143 ppm, C aromatiques,

83,68 et 66 ppm, C du système bishétéro- cyclique central,

75 ppm et massif à 50 ppm, C des deux cycles formés,

22 ppm, CH ₃ tosyl.

f) Préparation du composé dm formule

16 g (0,0116 mole) de produit obtenu à l'étape prcédente sont dissous dans 840 ml de n-butanol préalablement chauffé au reflux. A cette solution sont ajoutés lentement 73,6 g (3,2 moles) de sodium coupé en morceaux. Le milieu réactionnel est porté à 80*C pendant 12 h. Après élimination complète du solvant, le produit est repris dans 300 ml d'acide chlorhydrique. La solution obtenue est lavée 2 fois au CH C1 ₂ . La phase aqueuse est évaporée à sec. On ob¬ tient 7,0 g de produit attendu soit un rendement de 90%.

CCM:Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 4/MeOH 4/NH4OH 2 : Rf = 0,1 (révélation à l'I ₂ ).

RMN ¹³ C (DMSO) : 83,68 et 66 ppm, C du sys¬ tème hétérocyclique central, 44, 42, 38 et 37 ppm, C du bicycle.

g) Préparation du composé de formule

6 g (0,00886 mole) du produit obtenu à l'étape précédente sont mis en suspension dans 150 ml de CH ₃ CN à 40*C en présence de 18,8 g (0,177 mole) de Na ₂ C0 ₃ . Au milieu est ajouté goutte à goutte une solu¬ tion de 13,8 g (0,070 mole) de BrCH ₂ C00tBu dans 80 ml de CH ₃ CN. Le milieu réactionnel est chauffé à 40*C sous agitation pendant 72 heures. Après filtration, la solution est concentrée. Le produit attendu cristal¬ lise. Après filtration et lavage à l'éther, on obtient 8,3 g du produit attendu, soit un rendement de 77%.

CCM : S10 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 85/MeOH 15 : Rf - 0,6.

I.R. : 1710 cm" ¹ , bande carbonyle.

RMN^-H: 1,4 ppm singulet, groupement tertio¬ butyle.

RMN ¹³ C (DMSO) 175 ppm, C du groupe carbo- nyle,

85 ppm, C quaternaire du groupe terbutyle,

27 ppm, CH ₃ ,

63,68 et 80 ppm, système bishétérocyclique central .

h) Préparation du composé de formule :

0,3 g (0,0073 môle) du produit obtenu à l'étape précédente sont dissous dans 130 ml de CF3COOH, à température ambiante. Après 12 h de réaction, le milieu réactionnel est concentré puis repris à l'eau et évaporé. Le produit est purifié sur résine IRA 458.

CCM : Si0 ₂ ; AcOEt 12/isopropanol 35/NH OH 30 : Rf - 0,2 + 0,35.

RMN ¹³ C:167 et 172 ppm, C acide,

63, 68 et 80 ppm, système hétérocyclique central,

54 ppm, CH ₂ en ^* Λ de COOH,

Multiplet de 40 <•** <50 ppm, C des deux cycles.

Spectre de masse FAB (glycérol), MH ⁺ 803.

EXEMPLE 5

Préparation du composé de formule :

N N

/ \ / \

HO C '' ^' C0,H

a) Préparation du 3,4-époxy tétrahydrofuran- ne

Le produit du titre est obtenu à partir de

58 g (0,83 mole) de 2,5-dihydrofuranne disponible commercialement auprès de la société Aldrich Chimie

(Strasbourg) selon la méthode décrite dans Journal of

Pharmaceutical Sciences 59 (1970) 1676-1679.

Masse obtenue : 54 g. Rendement : 71%. b) Préparation du 3-hydroxy 4-azido tétra- hydrofuranne.

Le produit du titre est obtenu à partir de 54 g (0,63 mole) du produit obtenu à l'étape précé¬ dente selon la méthode décrite dans Tetrahedron Let- ters 3 (1990) 5641-5644. Masse obtenue : 73 g; rendement 90%. c) Préparation du 3-hydroxy 4-amino tétra- hydrofuranne.

Le composé du titre est obtenu à partir de 24 g (0,19 mole) du produit de l'étape précédente selon la méthode décrite dans Synthetls 4 (1990) 366- 368.

Masse obtenue : 20 g. d) Préparation du composé de formule :

10 g (0,097 mole) du produit de l'étape précédente sont mélangés à 38,2 g (0,19 mole) de N-tosylaziridine dans 600 ml d'acétonitrile à 50"C pendant 72 heures. La solution est concentrée puis le

résidu obtenu est cristallisé dans un mélange acétate d'éthyle/toluène.

Après filtration, lavage et séchage, 31 g de produit sont obtenus, soit un rendement de 64%.

CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 90/MeOH 10 : Rf - 0,5.

RMN ¹ H (200 MHz) (DMSO) : 2 doublets à 7,4 et 7,7 ppm, protons aromatiques,

5 ppm, OH, protons de 1'hétérocycle : singulet à 4 ppm, multiplet à 3,7 ppm, multiplet à 3,4 ppm,

2<i <3 ppm, CH ₂ -CH ₂ et CH ₃ (T _g ).

e) Préparation du composé de formule :

18 g (0,0362 mole) du produit de l'étape précédente sont mis en solution dans 1200 ml de DMF en présence de 54 g (0,165 mole) de carbonate de césium, à une température de 40*C, sous argon.

Une solution de 20,6 g (0,0363 mole) de dié- thanolaminé tritosylée est ajoutée dans 600 ml de DMF. Après la fin de la réaction, le milieu réac¬ tionnel est filtré puis concentré.

Le résidu est chromatographié sur colonne.

15 g de produit sont obtenus, rendement : 58%.

CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 95/MeOH 5 : Rf - 0,2.

I.R. (KBr) 3300 cm ^"1 , NHTs.

RMN ¹ H (DMSO) Protons aromatiques :

7,6 ppm triplet,

7,4 ppm doublet,

5,1 ppm, doublet, OH;

Protons du tétrahydrofuranne : 4,1 ppm, singulet.

2< J < 3,9 ppm massif.

f) Préparation du composé de formule :

20,5 g (0,028 mole) du produit de l'étape précédente sont dissous dans 440 ml de n-butanol au reflux.

32,0 g (1,4 mole) de sodium en copeaux sont ajoutés lentement. Le milieu réactionnel est ensuite porté à une température de 80*C, sous agitation.

Après élimination du butanol à l'eau, le résidu est repris dans 300 ml d'HCl IN. La solution obtenue est lavée au CH ₂ C1 ₂ puis évaporé à sec.

9 g de produit sont obtenus; CCM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 4/MeOH 4/NH ₄ 0H 2 :

Rf = 0,1 (I ₂ )

RMN ¹³ C : 84-72-69 et 67 ppm, C du tétra¬ hydrofuranne;

45 et 42 ppm, C cycle.

g) Préparation du composé de formule :

54 g (0,147 mole) du produit de l'étape précédente sont mis en suspension dans 1,5 1 d'acéto¬ nitrile, en présence de 155,5 g (1,46 mole) de Na ₂ C0 ₃ , à une température de 40*C.

Une solution de 114,5 g (0,6 mole) de bromo- acétate de terbutyle dans 0,7 1 d'acétonitrile est ajoutée lentement. Le milieu réactionnel est ensuite filtré et évaporé à sec. Le résidu obtenu est cristal¬ lisé dans l'éther éthylique puis chromatographié sur colonne. 69 g du produit sont obtenus. Rendement : 72%.

CMM : Si0 ₂ ; CH ₂ C1 ₂ 80/MeOH 20 : Rf - 0,6. I.R. (KBr) 1710 cm" ¹ , C - O.

RMN ¹³ C : 170 et 173 ppm, C carbonyle,

81 ppm, C quaternaire,

84, 72, 69 et 67 ppm, C tétrahydrofuranne,

55 ppm, C du CH ₂ ^~ n ^~ \ de l'ester, 52, 49 et 46 ppm, C du cycle,

28 ppm, CH ₃ du terbutyle. h) Préparation du composé de formule :

38 g (0,063 mole) du produit de l'étape précédente sont mis en solution dans 600 ml d'acide trifluoroacétique à température ambiante.

Après 18 heures, le milieu réactionnel est concentré à sec puis repris à l'eau. Après purifi¬ cation sur résine IRA 458, 20 g de produit sont obtenus. Rendement : 73%.

CCM:Si0 ; AcOEt 12/Isopropanol 35/NH ₄ OH 30 : Rf » 0,45 et 0,5. o

R N^C : 170 ppm, C,

73, 72, 69 et 67 ppm, C du tétrahydrofuran- ne,

55 ppm, C de CH ₃ en - du COOH, 55 ppm < i <45 ppm, C du cycle.

Spectre de masse : FAB (glycérol) MH ⁺ 433.

EXEMPLE 6

Préparation du composé de formule

3D

a) Préparation du composé de formule

0,7 g (2,7 mmoles) du composé obtenu à l'étape c) de l'exemple 1 ci-dessus, 0,7 g de paraformalάéhyde et 2,5 g (16,2 mmoles) de diéthyl- méthyl-phosphite obtenu selon la méthode décrite dans Organic Préparations and Procédures Int. 11(1) 11-16 (1979) dans 30 ml de THF sont chauffés au reflux pen¬ dant 12 heures.

Après évaporation, la solution est chroma- tographiée sur alumine en éluant un dichlorométhane.

0,5 g d'une huile jaune pâle sont obtenus, soit un rendement de 30%.

CCM:Si0 ₂ ; CH ₂ Cl ₂ /Me0H : 90/10;

Rf - 0,2.

b) Préparation du composé de formule :

0,5 g (0,8 mmoles) du composé obtenu à l'étape précédente dans 25 ml d'HCl 6N sont chauffés au reflux pendant 12 heures.

Après évaporation, le produit est purifié sur silice silanisée.

0,25 g du composé du titre sont obtenus, soit un rendement de 42%.

CCM:Si0 ₂ ; dioxanne/eau/NH ₃ : 8/3/2;

Rf : 0,1.