【발명의 명칭】

신규한뉴클레오사이드또는뉴클레오타이드유 도체 및 이들의 용도 【기술분야】

₅ 관련출원（들）과의 상호 인용

본출원은 2018년 1월 24일자한국특허출원제 10-2018-0009009호에 기초한 우선권의 이익을 주장하며， 해당 한국 특허 출원의 문헌에 개시된 모든내용은본명세서의 일부로서 포함된다.

본발명은신규한뉴클레오사이드또는뉴클레오 타이드유도체， 이의 ₁₀ 라세미체, 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염; 이를 유효성분으로포함하는바이러스감염관련 질환의 예방또는치료용 약학적 조성물; 및 이의 용도에 관한것이다.

【발명의 배경이 되는기술】

뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체들은 임상에서 바이러스 ₁₅ 감염 또는암관련질병의 치료에사용되고있다.

et a _{l .} , ₂₀₁₂ ； K _{ang et al .} ， ₂₀₁₅ ， _{de Wi lde et al . , 2014} ） . 세포 기반의 ₂₀ 항바이러스 시험을 수행한 결과 젬스타빈（Gemcita _bine ）은 인플루엔자 바이러스（A형， B형）， 엔테로바이러스（콕사키바이러스, 폴리오바이러스） 그리고코로나비리데（코로나바이러스）에 대해서 광범위한효능을보였다. 하지만， 배양 세포에 대하여 광범위한 독성이 관찰되었으며， 인플루엔자 바이러스의 경우 감염용으로 사용되는 M _{ad in-Darby} C _{anine 25} Ki _dney （MDCK； 개의 신장세포유래） 세포의 경우에는 _{100 uM} 농도를 ₃ 일간 투여할경우 _50% 가량의 세포사멸이 유도되었다.

따라서， 항바이러스 활성은 유지하면서 세포 독성을 개선시킬 수 있는 신규한 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체를 합성하여 항바이러스효능을조사하였다.

₃₀ 【발명의 내용】

【해결하고자하는과제】

본 발명의 목적은 항바이러스 활성을 나타내는 신규한 뉴클레오사이드또는뉴클레오타아드화합물， 이의 라세미체, 입체이성질체 2019/147050 1 ^» (：1/10公019/001036

또는 이들의 약학적으로허용가능한 염을제공하는 것이다.

본 발명의 다른목적은 이의 제조방법을제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 화합물 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

【과제의 해결 수단】

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명자들이 연구노력한 결과， 새롭게 고안하여 합성한 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체들이 항바이러스활성을확인하고본발명을완성하였 다. 이하， 본발명을더욱상세하게 설명한다. 뉴클레오사이드또는뉴클레오타이드유도체 화합물

본 발명은 하기 화학식 ₁ 로 표시되는 화합물， 이의 라세미체 입체이성질체또는이들의 약학적으로허용가능한염을제공한다:

[화학식 1]

1¾는수소또는할로이고;

_¾ 는 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴이고（여기서， 상기 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴은 비치환되거나 ₁ 내지 ₄ 개의 수소가 할로， 아미노 시아노， 니트로， 아지도, 티올， 히드록시， € _1-6 알킬， 0 _1-6 할로알킬， 0 _1-6 아미노알킬， 0 _1-6 히드록시알킬， 0 _1-6 디히드록시알킬, - ₆ 알콕시， 0 _1-6 사이클로알킬 헤테로사이클릴， _0- 알콕시-- 알킬 및 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기로 치환될 수 있음｝; 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

¾， ¾ 및 ¾ 는 각각 독립적으로 수소， 0 _1-6 알킬， ₆ 할로알킬， 아릴또는헤테로아릴이고 ;

상기 할로는 ， 01 , 또는 I 이고;

상기 헤테로사이클릴은질소， 산소， 황또는이들의 조합으로구성된 5 군으로부터 선택되는 ₁ 개 이상의 헤테로원소를 포함하는 ₃ 원 내지 ₁₀ 원 단일 또는융합고리 형태이며 헤테로아릴은 질소， 산소， 황또는 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 ₁ 개 이상의 헤테로원소를 포함하는 5원내지 ₁₀ 원단일또는융합고리 형태일수있고;

상기 각각의 사이클로알킬 및 헤테로사이클릴은 선택적으로 ₁ 내지 ₁₀ 3개의 0 _1-6 알킬， 히드록시， 옥소， 0 _1-6 히드록시알킬， 할로 시아노, 니트로, 0 _1-6 할로알킬, - ₆ 알콕시， 포르밀, - ₆ 알킬포르밀， 카르복시， 0 _1-6 알킬카르복시， 아미노, 0 _1-6 알킬아미노， 디（ ₆ 알킬）아미노, 카바모일， 0 _{1- 6} 알킬카바모일 , 디（（ ₆ 알킬）카바모일 또는 0 _1-3 알콕시- ₃ 알킬로 치환될 수있고;

₁₅ 상기 각각의 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 1 내지 3개의 0 _1-6 알킬， 0 _1-6 알콕시， 0 _1-3 알콕시- ₃ 알킬， 0 _1-6 히드록시알킬， 0 _!-6 할로알킬， 할로， 시아노， 피라지닐 , 히드록시 , 옥소， 니트로， 포르밀， 0 _1-6 알킬포르밀， 카르복시， 0 _1-6 알킬카르복시， 아미노， 0 _1-6 알킬아미노, 디（에 ₆ 알킬）아미노， 카바모일， 0 _1-6 알킬카바모일， 디（ - ₆ 알킬）카바모일 또는 ₆ 알킬설포닐로 ₂₀ 치환될수있음. 본발명의 일실시양태에 따르면 상기 화학식에서，

1는헤테로사이클랄또는 -쌔（：（0）¾이고;

₂₅ ¾는수소또는할로이고;

_¾ 는헤테로아릴또는헤테로사이클릴이고（ 여기서， 헤테로아릴또는 헤테로사이클릴은비치환되거나 ₁ 내지 ₄ 개의 수소가할로， 아미노， 시아노， 니트로, 아지도， 티올 히드록시， - ₄ 알킬 , 0 _1-4 할로알킬， 0：- ₄ 아미노알킬 , 0 _1-4 히드록시알킬， 0 _1-4 디히드록시알킬, 0 _1-4 사이클로알킬, （ ₄ 알콕시， ₃₀ 헤테로사이클릴, 0 _1-3 알콕시- ₃ 알킬 및 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된치환기로치환될수있음） _{2019/147050 1»} （： ₁ ^ _{1{2019/001036}

¾， ¾ 및 ¾ 는 각각 독립적으로 수소， 0 _1-4 알킬, 0 _1-4 할로알킬， 아릴또는헤테로아릴이고 ;

할로는 （：1， 또는 I 이고;

상기 헤테로사이클릴은질소 산소 황또는이들의 조합으로구성된 5 군으로부터 선택되는 ₁ 개 이상의 헤테로원소를 포함하는 ₃ 원 내지 ₁₀ 원 단일 또는융합고리 형태이며， 헤테로아릴은 질소 산소 황또는 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 ₁ 개 이상의 헤테로원소를 포함하는 5원내지 ₁₀ 원단일또는융합고리 형태일수있고;

상기 각각의 사이클로알킬 및 헤테로사이클릴은 선택적으로 ₁ 내지 ₁₀ 3개의 0 _1-4 알킬, 히드록시， 옥소, ₄ 히드록시알킬， 할로, 시아노， 니트로， 0 _1-4 할로알킬， 0 _1-4 알콕시， 포르밀, - ₄ 알킬포르밀, 카르복시, - ₄ 알킬카르복시， 아미노， 0 _1-4 알킬아미노, 디（ - ₄ 알킬）아미노， 카바모일， 0 _{1- 4} 알킬카바모일 , 디（ ₄ 알킬）카바모일 또는 0 _1-3 알콕시-（ᄂ ₃ 알킬로치환될 수있고;

₁₅ 상기 각각의 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 1 내지 3개의 0 _1-6 알킬， 0 _1-6 알콕시， 0 _1-3 알콕시-（ ₃ 알킬， 0 _1-6 히드록시알킬, - ₆ 할로알킬, 할로， 시아노 , 피라지닐 , 히드록시 , 옥소， 니트로， 포르밀， 0 _1-4 알킬포르밀， 카르복시 , 0 _1-6 알킬카르복시， 아미노， 0 _1-4 알킬아미노, 디（ ₄ 알킬）아미노, 카바모일 , 0 _1-4 알킬카바모일 , 디（ - ₄ 알킬）카바모일 또는 0 _1-4 알킬설포닐로 ₂₀ 치환될수있는것인，

화합물， 이의 라세미체 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한염 . 본발명의 일실시양태에 따르면 상기 화학식에서，

₂₅ ¾는피리디닐， 피리미디닐 피라지닐， 피리다지닐또는트리아지닐 이고 （여기서， 상기 피리디닐， 피리미디닐， 피라지닐， 피리다지닐 또는 트리아지닐은 비치환되거나 ₁ 내지 ₄ 개와 수소가 할로， 아미노， 시아노， 니트로， 아지도， 티올， 히드록시， 0 _1-4 알킬 , 0 _1-4 할로알킬， 0 _1-4 아미노알킬， 0 _1-4 히드록시알킬 , 0 _!-4 디히드록시알킬 , 0 _1-4 사이클로알킬 , 0 _1-4 알콕시 , ₃₀ 헤테로사이클릴， _{0 -} 알콕시 - ₃ 알킬 및 아릴로 이루어진 군으로부터 선택된치환기로치환될수있음）;

상기 아릴은페닐이고 ;

상기 헤테로사이클릴은 테트라하이드로피라닐， 테트라하이드로퓨라닐 _{2019/147050 1»} （： ₁ ^ _12019/001036

디하이드로퓨라닐 디하이드로피라닐 디옥사닐 디티아닐， 디옥솔라닐， 이미다졸리디닐 이미다졸리닐， 피롤리닐， 옥세타닐 피롤리디닐， 피페리디닐， 피페라지닐， 몰포리닐， 티오몰포리닐 , 디옥소티오몰포리닐， 디옥소테트라하이드로티오페닐， 디옥소티올라닐 옥소피페리디닐，

₅ 옥소피롤리디닐 옥소이미다졸리디닐또는옥소옥사졸리디닐일 수있고 ;

상기 헤테로아릴은 테트라졸릴 이미다졸릴， 피리디닐 피리다지닐， 피리미디닐， 트리아지닐， 피롤릴， 피라졸릴 트리아졸릴， 피라지닐， 퓨릴 티에닐， 이속사졸릴 티아졸릴 이소티아졸릴， 티아디아졸릴， 퓨라자닐， 옥사졸릴， 인돌릴， 이소인돌릴， 인다졸릴， 퀴놀리닐 이소퀴놀리닐

₁₀ 벤조티아졸릴， 벤조옥사졸릴 벤조퓨라닐 벤조이미다졸릴， 벤조트리아졸릴 또는아자인돌릴이고;

상기 각각의 사이클로알킬 및 헤테로사이클릴은 선택적으로 ₁ 내지 3개의 0 _1-4 알킬 히드록시 옥소 할로 또는 0 _1-4 할로알킬로 치환될 수 있고;

₁₅ 상기 각각의 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 ₁ 내지 ₃ 개의 0 _1-4 알킬 0 _1-4 할로알킬， 할로， 히드록시 또는옥소로치환될수있는것인， 화합물 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한염.

₂₀ 본발명의 일실시양태에 따르면 상기 화학식에서，

_\ 는 옥소피롤리디닐， 옥소이미다졸리디닐 또는 -■:½¾이고， 상기 옥소피롤리디닐 및 옥소이미다졸리디닐은 비치환되거나 또는 ₁ 내지 3개의 수소가 플루오로 메틸 및 트리플루오로메틸로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기로 치환될 수 있고;

₂₅ ¾는수소또는플푸오로이고;

요 ₃ 는피리디닐 피리끼디닐 피라지닐또는피리다지닐이고 (여기서， 상기 피리디닐， 피리미디닐， 피라지닐 또는 피리다지닐은 비치환되거나 ₁ 내지 ₄ 개의 수소가 플루오로 클로로， 메틸， 시아노， 니트로， 아미노， 메톡시， 트리플루오로메틸 및 페닐로이루어진 군으로부터 선택된 치환기로

₃₀ 치환될수있음)인，

화합물 이의 라세미체， 입체이성질체， 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염. 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

본발명의 일 실시양태에 따르면， 상기 화학식에서，

_Y 는 옥소피롤리디닐， 옥소이미다졸리디닐， 니코티노일아미노, 피콜리노일아미노， 플루오로니코티노일아미노， 메틸니코티노일아미노， 피리다지닐카르보닐아미노， 플루오로피콜리노일아미노,

₅ 메틸피콜리노일아미노또는트리플루오로메틸 니코티노일아미노이고;

화합물， 이의 라세미체, 입체이성질체， 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염. 본 발명의 일 실시양태에 따르면,상기 화합물은，

₁₀ 1） -（1-（（21?，41^510-3,3-디플루오로-4-히드록시- 5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란-2-일） -2-옥소-1，2-디히드로피리미딘-4- 일）니코틴아마이드;

2） 1^-（ 1 ^_ （（2요, 41?, 51?） ^_ 3， 3 -디 _■ 루오로- 4 -히드록시- 5 ^_ （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4-

₁₅ 일）피콜린아마이드;

3） 1 _\[ -（ 1-（（21?， 4요， 510 ^_ 3， 3 ^_ 디들루오로- 4 -히드록시 -5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）- 2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일）- 6 -플루오로니코틴아마이드 ;

4） -（ 1-（（2 4묘， 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-

₂₀ （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）- 2 -옥소- 1,2 -디히드로피리미딘- 4 - 일）- _{6 -} 메틸니코틴아마이드 ;

5） 1（ 1-（（2 4 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일）피리다진- _{3 -} 카르복시아마이드 ;

₂₅ 6） 1 （1-（（2요，4묘,510-3,3-디플루오로-4-히드록� �-5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）- 4-（2 -옥소이미다졸리딘- 1- 일）피리미딘- ₂ （내）_온;

₃₀ 2（내）_온;

8） -（ 1-（（21?, 4묘， 5묘）-3 , 3 -디풀루오로- 4-히드록시- 5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-4-（3 -메틸- 2 -옥소이미다졸리딘- 1- 일）피리미딘- 2（1¾-온; 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

9) ( 1-( (2묘， 4 510-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 )- 5 -플루오로피콜린아마이드 ;

10) (1-((2 4 510-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

₅ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일)- 2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 5 -메틸피콜린아마이드;

11) -( 1-( (2 4요， 510-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 _{)- 2 -} 옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 2 -메틸- 6-(트리플루오로메틸)니코틴아마이드;

₁₀ 12) -( 1-( (2 4 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 3 -메틸피콜린아마이드;

13) 1^- ( 1_ ( ( 2묘 , 4묘， 51? ) ^_ 3， 3 -디들루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 _{)-2 -} 옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4-

₁₅ 일)- 6 -메틸피콜린아마이드;

14) (1-((2 4 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 )- 6-(트리플루오로메틸 )니코틴아마이드 ;

15) -( 1-( (2 4묘, 510-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

₂₀ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 )-1 -메틸- 111-피라졸- 4 -카복스아마이드 ;

16)이소프로필 ((3)-(((2 3요，510-4,4-디플루오로-3-히드록시-5-(4- (니코틴아미도)-2-옥소피리미딘-1(2 -일)테트라하이드로퓨란-2-

₂₅ 17) -( 1-( (2 4^510-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일)- 2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 6 -페닐피콜린아마이드;

18) 1-((2요， 4요， 51?) ^_ 3 , 3 ^_ 디들루오로·· 4 -히드록시 _5 ^_ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-4-(3 -메틸- 2 -옥소피롤리딘- 1-

₃₀ 일)피리미딘- 2(내)_온;

19) - ( 1 ^_ ( (2묘, 4요, 510 ^_ 3 ,3 ^_ 디들루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 )-5 -니트로피콜린아마이드 ; 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

20) 5 -아미노- -( 1-( (2요, 41? , 510-3 , 3 -디플로오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)피콜린아마이드 . 히드로클로라이드 ;

21) ^(1-( (21^ , 4 510-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

₅ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 ) -5 -메톡시피콜린아마이드 ;

25) -( 1-( (2묘 , 4요, 5幻-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 5 -페닐피콜린아마이드;

26) ( 1-( (2 3 41? ,510-3 -플루오로- 4 -히드록시 -5- ₂₀ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)니코틴아마이드;

27) ( 1-( (2£， 3묘, 4묘, 510-3 -플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 6 -페닐피콜린아마이드;

₂₅ 28) 1 ( 1_( (23,31?， 41^,510-3 -들루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 _{)-2 -} 옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 ) -5-페닐피콜린아마이드 ;

29) (1-(( 2 3묘,4요, 510 -3 -플루오로- 4 -히드록시- 5- (히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 _)-2 -옥소- 1 ,2 -디히드로피리미딘- 4-

₃₀ 일)- 2 -메틸피리미딘- 4 -카복스아마이드; 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

31) 5 -아미노- ( 1-( (2£， 31?， 4요， 5幻-3 -플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1, 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)피콜린아마이드;

32) 1( 1-( (2£ , 31?, 4 510 -3 -플루오로- 4 -히드록시 _5_

₅ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 6 -메틸니코틴아마이드;

일)피리다진- 3 -카복스아마이드 ;

₁₀ 34) -(1-((23,3요，41^，510-3-들루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 6 -메틸피라진- 2 -카복스아마이드 ;

35) 5 -들루오로- (1_( (2 , 31?,4묘, 5묘) ^_ 3 ^_ 들루오로- 4_히드록시 -5- (히드록시메틸 ₎ 테트라히드로퓨란 -2 -일 ₎ -2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4-

₁₅ 일)피콜린아마이드;

36) (1-((23,3 4요，510-3-플루오로-4-히드록시-5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)피리미딘- 4 -카복스아마이드 ;

37) 5 -시아노- -(1-((2 31?，4묘，510-3-플루오로-4-히드록시-5- ₂₀ (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)피콜린아마이드;

₂₅ 39) 1 (1-( (2^31?, 41? ,510 -3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 _{)-2 -} 옥소- 1 ,2 -디히드로피리미딘- 4- 일)- 5 -메톡시피콜린아마이드;

40) ( 1- ( ( 2 , 3요 , 4요， 5요 ) -3 -플루오로- 4 -히드록시 -5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일)- 2 -옥소- 1， 2 -디히드로피리미딘- 4-

₃₀ 일 )-2 -메틸- 6_(트리들루오로메틸)니코틴아마이드 ;

일 )-6-(트리플루오로메틸 )니코틴아마이드 ; _{2019/147050 1»} （： ₁ ^ _{1{2019/001036}

_{42) 6 -} 플루오로- N-( _l-((2S ， _3R,4R ， _5R)-3- 플루오로- _4- 히드록시- _5- (히드록시메틸 ₎ 테트라히드로퓨란 - _{2 -} 일 _{)-2 -} 옥소- ₁ ， _{2 -} 디히드로피리미딘- _4- 일)니코틴아마이드;

₄₄₎ 이소프로필 ( (3)-( ( ( _21? ， _{3 4 510-4 -} 플루오로- _{3 -} 히드록시 - _5-(4- ( _{2 -} 메틸피리미딘- _{4 -} 카복사미도)- _{2 -} 옥소피리딘- ₁₍ 別)_일)테트라히드로퓨란-

_{2 -} 일)메톡시) (펜옥시)포스포일)- 알라니네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 것일수있다. 다만 이에 제한되지 않는다. 본발명의 화학식 ₁ 의 화합물은 약학적으로허용가능한 염의 형태로 존재할 수 있다. 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산 (打근근 ₃ 1)에 의해 형성된산부가염이 유용하다. 본발명의 용어 "약학적으로허용가능한 염'이란환자에게 비교적 비독성이고무해한유효작용을 갖는 농도로서 이 염에 기인한 부작용이 화학식 ₁ 로 표시되는 화합물의 이로운 효능을 저하시키지 않는상기 화합물의 임의의 모든유기산또는무기산부가염을 의미한다.

이때， 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며 무기산으로는 염산， 인산， 황산 또는 질산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 메탄술폰산， _I -톨루엔술폰산， 아세트산 , 트리플루오로아세트산， 말레인산細크比比 _{301(1) ,} 숙신산， 옥살산, 벤조산， 타르타르산,

3 _{01 3) ,} 구연산 ( _{301(1) ,}

글루탐산， 아스파르트산, 아스코르브산， 카본산, 바닐릭산 또는 요오드화수소 ₈₀₁₍₁₎ 등을사용할수있다. 다만， 이들에 제한되지 않는다.

또한， 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 이때， 금속염으로는 특히 나트륨， 칼륨， 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하나 이들에 제한되는 것은 아니다. 또한 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염 (예 질산은)과 반응시켜 얻을수있다. 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

본 발명의 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체의 염으로는 약학적으로 허용가능한 염으로서 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체 화합물과 동등한 항바이러스 활성을 나타내는 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드유도체의 염이면제한없이 모두사용가능하다. 뉴클레오사이드또는뉴클레오타이드유도체화 합물의 제조방법

본 발명의 화학식 ₁ 의 화합물은 일련의 반응에 의해 _{4 -} 아미노- _1- （（ _21? ， ₄ 묘 _{510-3 , 3 -} 디플루오로- _{4 -} 히드록시 - _{5 -}

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 - _{2 -} 일）피리미딘- ₂ （ ₁ 비_온 또는 _{4 -} 아미노- _{1- 10} （（ ₂ 모 _31? ， _{41? , 510-3 -} 플루오로- _{4 -} 히드록시 - _5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란-

_{2 -} 일）피리미딘- ₂ （내）_온으로부터 합성될 수 있고， 구체적인 일 양태로서 하기 반응식 ₁ 에 따라제조할수있다.

그러나 하기 반응식 ₁ 은본발명의 화합물의 예시적인 제조방법일 뿐， 본 발명의 화합물의 제조방법은 이에 제한되지 않으며， 당업계에 ₁₅ 공지된방법을이용하거나적절히 변경하여 수행될수있다.

상기와 같이， 본 발명의 화합물의 출발물질인 _{4 -} 아미노- ₁ _ （（ _21? ， _41? ， _510-3 ， _{3 -} 디플루오로- _{4 -} 히드록시 - _{5 -}

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 - _{2 -} 일）피리미딘- ₂ （내）_온 또는 _{4 -} 아미노- _1- （（ ₂ 묘 ₃ 묘， _41? ， _{510-3 -} 플루오로- _{4 -} 히드록시 - _5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란- _{20 2 -} 일）피리미딘- ₂ （내）_온으로부터 당업계에 공지된 하나 이상의 반응을 추가로수행하여 치환기（ _¾ ）를도입할수있다. 예컨대 하기 반응식 ₁ 에 따라 화합물（1）에서 알코올에 보호화 반응을 수행하여 화합물 （ ₂ ）를 합성하고 다양한 카르보닐 할라이드를 ₂₅ 이용하여 아마이드반응을통하여 본발명의 표제 화합물인뉴클레오사이드 유도체화합물（3）을수득할수있다.

[반응식 _1]

바람직하게는 상기 보호화 반응에서 종래 보호기로서 사용되는 다양한 ₃₀ 기들을제한없이 보호기 （미로서 사용할수 있고， 본발명에 따른구체적인 2019/147050 1 ^» (：1/10公019/001036

일 실시예에서는 트리메틸실릴0 _1¾ 또는 아!：-부틸디메틸실릴0 _¾ 幻기를 사용하였다.

또한, 상기 반응은상기 중간체 (2)를 ? _{7 1½} /01용매에서 원하는 표제 화합물에 적합한 치환기 _(¾) 를 포함하는 카르보닐 할라이드와 반응을 통해 수행할수 있다. 바람직하게， 상기 반응은 -78 ~ 60 ：에서 7내지 18 시간동안반응을통해수행할수있다. 예컨대， 하기 반응식 ₂ 에 따라 화합물( ₄₎ 에서 포스포아미다이트 반응을 수행하여 화합물 ( ₅₎ 를 합성하고 다양한 카르보닐 할라이드를 이용하여 아마이드 반응 후 탈보호화 반응을 통하여 본 발명의 표제 화합물인 뉴클레오타이드유도체 화합물 ( ₆₎ 을수득할수 있다.

바람직하게는， 상기 반응은 상기 화합물( ₄₎ 를 용매에서 _{1- 6} 故 ₁ 을 이용하여 포스포아미다이트 화합물( ₅₎ 를 합성하고 원하는 표제 화합물에 적합한 치환기(¾)를 포함하는 카르보닐 할라이드와 반응 후 탈보호화 반응을 통해 수행할 수 있다.바람직하게,상기 탈보호화 반응은

0 °C 내지 상온에서 TBAF(Tetrabutylammonium fluoride) 용액을 이용하여

_0.5 내지 ₁ 시간동안반응을통해수행할수있다. 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체 화합물을 포함하는 조성물 이의 용도및 이를 이용한예방또는치료방법

본 발명은 하기 화학식 ₁ 의 화합물, 이의 라세미체, 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염관련 질환의 예방또는치료용 약학적 조성물을제공한다.

[화학식 1]

2 _019/147050 1»（：1^1{2 _019/001036

상기 화학식 ₁ 은위에서 정의한바와같다 _.

본 발명의 화학식 ₁ 의 화합물， 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로허용가능한 염은항바이러스활성을나타낼수 있다. 따라서， 본발명의 화학식 ₁ 의 화합물， 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 범용적 항바이러스 활성을 나타냄으로써 바이러스 감염관련 질환의 예방또는치료에 유용하게 사용될 수 있다.

구체적으로 본 발명의 약학적 조성물은 바이러스 감염관련 질환의 예방또는치료에 유용하게 사용될 수 있다.

상기 바이러스 질환은 볘 狀 인플루엔자（ 1 _{1½1 3} ）， 피코나 _{01 113} ）， 플라비（£1크 ） , 알파（ 크） , 플레보바이러스（ _!> 1 ₁ 1 ₆ 1 _{30 1113} ） , 에볼라（ ₆ 1x）1 ₃ ） 또는 코로나（（:이체크） 바이러스에 의해 일어나는질환일수있으나， 이에 제한되지 않는다.

본발명에 있어서， 상기 용어 "예방’이란본발명의 조성물의 투여로 탄키라제 관련 질환의 발생, 확산및 재발을억제시키거나지연시키는모든 행위를 의미하고, 상기 용어 ”치료”란 본 발명의 조성물의 투여로 상기 질환의 증세가호전되거나이롭게 변경되는모든행위를의미한다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 유효성분으로서 화학식 ₁ 로 표시되는 화합물, 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 조성물의 총중량을 기준으로 _0.1 내지 ₇₅ 중량 _% 로， 보다 바람직하게는 ₁ 내지 ₅₀ 중량 _% 로함유할수있다.

또한， 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체， 희석제 또는부형제를추가로포함할수 있으며， 각각의 사용목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제， 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형， 멸균 주사 용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며， 경구 투여하거나 정맥내, 복강내， 피하， 직장, 국소투여 등을포함한다양한경로를통해투여될수 있다. 이러한 조성물에 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토즈， 덱스트로즈， 수크로스， 솔비톨， 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨， 말티톨, 전분， 아카시아고무， 알지네이트， 젤라틴， 칼슘포스페이트 , 칼슘 실리케이트 , 셀룰로즈， 메틸셀룰로즈, 미정질셀룰로스， 폴리비닐피롤리돈, 물 , 메틸히드록시벤조에이트， 프로필히드록시벤조에이트， 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한， 본 발명의 조성물은 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

중전제， 항응집제 윤활제 습윤제 향료， 유화제 방부제 등을 주가로 포함할수 있다.

본 발명의 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다.본 발명에 있어서 상기 용어 "약학적으로 유효한 양”은 의학적 치료에 적용 가능한 5 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며， 유효용량 수준은 환자의 건강상태 질환의 종류， 중증도， 약물의 활성， 약물에 대한 민감도， 투여 방법 투여 시간， 투여 경로 및 배출 비율， 치료 기간 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. ₁₀ 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고， 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며， 단일 또는 다중 투여될 수 있다 _. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 었는 양을 투여하는 것이 중요하며 이는당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

2 ₀ 방법으로도본발명의 범위를 한정하는 것은아니다.

본 발명의 다른 실시양태에 따르면 본 발명은 화학식 ₁ 로 표시되는 화합물， 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는， 개체에게서 바이러스관련 질환을 예방또는치료하는방법을제공한다.

₂₅ 본 발명에 있어서， 상기 용어 개체’란， 상기 바이러스 관련 질환이 발명하였거나 발병할수 있는 인간을 포함한원숭이， 소， 말， 양 돼지 닭 칠면조， 메추라기 고양이 개 마우스， 쥐 토끼 또는 기니아 피그를 포함한 모든 동물을 의미하고， 본 발명의 약학적 조성물을 개체에게 투여함으로써 상기 질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 본 ₃₀ 발명의 약학적 조성물은기존의 치료제와병행하여 투여될 수 있다.

본 발명에 있어서 상기 용어 ’투여’'란， 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며， 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

투여될 수 있다.복강내 투여 정맥내 투여 근육내 투여， 피하투여， 피내 투여， 경구 투여 국소 투여 비내 투여， 폐내 투여 직장내 투여될 수 있으나， 이에 제한되지는 않는다.또한， 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다.

₅ 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제， 피하 주사제 피내 주사제， 근육주사제， 점적 주사제 등이다.

본 발명의 약학적 조성물은 예방 또는 치료하고자 하는 질환의 종류에 따라， 유효성분으로서 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체 화합물 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 ₁₀ 염 이외의 공지된 각 질환의 예방 또는 치료에 사용되는 공지의 약물을 추가로 포함할 수 있다. 예컨대， 바이러스 질환의 예방 또는 치료에 사용되는 경우 유효성분으로서 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체 화합물， 이의 라세미체， 입체이성질체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 이외에 공지된 항바이러스제를 추가로 포함할 수 있고， 이들 질환의 ₁₅ 치료를 위해 공지된 다른 치료와 병용될 수 있다.다른 치료에는 화학요법 방사선 치료， 호르몬 치료， 골수 이식 줄기-세포 대체치료， 다른 생물학적 치료 면역치료등이 포함되지만， 이에 한정되는 것은아니다.

【발명의 효과】

본 발명의 신규한 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체는 ₂₀ 항바이러스 및 항암 활성이 우수하므로， 바이러스 감염관련 질환의 예방 또는치료에 유용하게 사용될 수 있다.

【발명을실시하기 위한구체적인 내용】

이하， 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다.이들 실시예는오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐， ₂₅ 본발명의 범위가 이들실시예에 의해 한정되는 것은아니다. 제조예_ 1：_ 4-아미노-1-（（21? 5요）-33-디플루오로-4-

（트리메틸실릴옥시）- _5- （（트리메틸실릴옥시）메틸）테트라히 드로퓨란 - _2- 일）피리미딘- 2（110 -온（1-시의 제조

2019/147050 1 ^» （：1/10公019/001036

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（내）-온

교반하였다. 반응액을 ¾0此에 희석시킨 후 포화 060 ₄ 수용액으로 5회 세척하였다. 유기층을 ₂ 엤 ₄ 로탈수시키고, 감압농축하여 흰색 고체로 600

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）괴리미딘- 2（1H）_온 （1 _g, 4.078

_■ol ）를 _{pyr idine} （10 ml）에 용해시킨 후 TMSC1（1.54 ml , 12.234 mmol）를 가하였다. 70°C에서 6시간동안교반하였다. 반응액을 EtOAc에 희석시킨후 포화 CuS0 ₄ 수용액으로 5회 세척하였다. 유기층을 Na _2S04 로 탈수시키고， 감압농축하여 흰색고체로 1.57요의 표제화합물을수득하였다.

LC-MS（ESI , m/z） 390.KM+H ⁺ ） 실시예 1 : （ 1-（（21¾ ,쏴 .510-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5 -

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일）니코틴아마이드의 제조 단계 1： 4 -아미노- 1-（（2 4 510-3 ,3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（내）-온 ,

가하고 같은 온도에서 7시간동안교반하였다. 반응액을 ¾0此에 희석시킨 후 포화（노¾） ₄ 수용액으로 5회 세척하였다. 유기층을 여로 탈수시키고， 감압농축하여 흰색 고체로 1.67 _g 의 표제 화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI, m/z) = 513.0(M+H ⁺ ) 단계 2： 상기 단계 1로부터 수득한 화합물 (1.65 g, 3.219 _ol )을 5 DCM(6 ml )에 용해시킨 후 4 M HC1 in dioxane(8 ml)를 0°C에서 천천히 가하였다. 상온에서 ₁ 시간 동안 교반한 후 반응액을 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 정제수로 희석하고 2 N NaOH수용액을 가하여 pH를 6 내지 7로 조절하였다. 석줄된 고체 ( _{precipi tate)} 를 여과, 건조하여 흰색고체로 1.08 g의 표제화합물을수득하였다.

1 ₀ LC-MS (ESI , m/z) = 369.0 (M+H ⁺ ) 실시예 2： N-(l-((2R,4R.5R)-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-2-옥 소-1,2-디히드로피리미딘-4- 일)피콜린아마이드의 제조

₁₅

20

실시예 3： N-(l-((2R,4R,5R)-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-2-옥 소-1.2-디히드로피리미딘-4-일)- 6-플루오로니코틴아마이드의 제조

₂₅ 6-f luoroni cot inoyl chloride (133 mg, 0.834 _ol )와 I -A (200 mg,

0.490 mmol)를 상기 실시예 1과 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 38.6 m _g 의 표제화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI , m/z) = 386.2(M+H ⁺ )

30 실시예 4： N-(l-((2R.4R.5R)-3.3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1.2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )-

6-메틸니코틴아마이드의 제조

1X413犯 ， ^1 _%) = 382.3(¾1대 ⁺ ) 실시예 5： (1-((2 41?.51?)-3.3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨련:-2-일)-2-� �소-1,2-디히드로피리미딘-4- 일)피리다진- _3- 카르복시아마이드의 제조 pyr idazine-3-carbonyl chlor ide(210 mg, 1.472 mmol)와 I -A (500 mg,

1.226 mmol )를 상기 실시예 1과 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 54.4 mg의 표제화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI , m/z) - 369.2(M+H ⁺ ) 실시예 6： N-(l-((2R,4R,5R)-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-4-(2- 옥소이미다졸리딘-1- 일)피리미딘-2(110-온의 제조 단계 1: I-A(200 mg, 0.49 mmol )를 chloroform(5 ml )에 용해시킨 후 2-chloroethyl isocyanate(0.04 ml , 0.49 mmol )를 가하고 상온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 농축하여 정제 없이 다음 반응을 진행하였다. 단계 2： 상기 단계 1로부터 수득한화합물을 THF(2.5 ml)에 용해시킨 후 60% NaH(37 mg, 1.47 mmol )를 -20°C에서 가하고 서서히 온도를 올려 상온에서 ₁₈ 시간동안교반하였다. 반응물에 얼음을 넣고 ₅ 분간교반한후 EtOAc로 희석하고 유기층을 Na ₂ S0 ₄ 로 탈수시킨 후 감압 농축하였다. 농축 잔사를 MeOH로 희석하고 DCM을 가하여 석출된 고체 (precipitate)를 여과, 건조하여 흰색고체로 96.1 mg의 표제화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI , m/z) = 332.2(M+H ⁺ ) 실시예 7： N-(l-((2R,4R,5R)-3,3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5 - 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-4-（2 -옥소피롤리딘- 1 -일）피리미딘- 2（내）_온의 제조 단계 1: _{? 1001 1} ^ ₇₁ 4_1） ₁ ， ₀₁₁₁₀₁ ） ₁ 1（:1 _1101· （0.4 ₁ ^1 , 3.434 _（）1）와 1묘쇼（1.2 _{1111 , 8} .587 _ ₀₁ ）를 1X1（8.5 ）에 용해된 1^（162 阿， 0.397

_■01 ）에 _50 에서 천천히 가하였다. 반응액을 10 에서 24시간동안교반한 후 으로 희석하여 정제수로 세척하였다. 유기층을 必여로 탈수시키고,

실시예 8： 1 （ 1-（（2 쐬.510-3.3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-4-（3 -메틸- 2 -옥소이미다졸리딘- 1- 일）피리미딘- 2（110 -온의 제조 단계 1： （2 31?， 510-5-（4 - 아미노 -2 -옥소피리미딘- 1（別）-기）-4,4_ 디플루오로 -2-（（3 -플루오로벤조일옥시）메틸） 테트라히드로퓨란 -3 -일 3 - 플루오로벤조에이트（200 ₁ 犯, 0.394 _ ₀₁ ）를 1X1（4 ）에 용해시킨 후

_?5 （ ］ ₁₆ （0.05 _{011 , 0.591} _。1）과 （土1이 _0! 이 _{111 6} （0.06 이1， 0.472 빼 ）를 가하였다. 상온에서 ₁ 시간 동안 교반한 후 반응액을 감압 농축하였다. 농축물을 _{? 1} ^（1^ ₁₆ （4 ）에 용해시킨 후 2-（±1 ₀₁ ^_ _{0 -} _

단계 2： 상기 단계 1로부터 수득한 화합물（170 ₁ 收， 0.288 _ ₀₁ ）을 6에（1 ）에 용해시킨후 7 ₃ 근抑（2 ）룰가하고상온에서 18시간 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

용해시킨 후 ¾0 16.5山， 0.213 _1111110 1)와 _0X3 ^1 ±1 ₀₁ 걔 ₆₍ 0.27 , 3.189 ₁ ^ ₁₀ 1)을 0° (:에서 천천히 가한다. 반응액을 상온에서 22시간 동안 교반한 후 감압 농축하였다.얻어진 잔사를 에테르로 세척 후 건조하여 살구색고체로 339 미용의 화합물을 수득하였다. 수득한 6 1 _{110101) 0} 1 ₀ 1 1 ₀₁ ^1 ₆₍₈ 8 ₁ ， 0.552 _。1)와 [)^¾¾(0.48 ₁ ^1， 2.76 ₁₁₁₁₁₀ 1)를 1)01(1.2 )에 용해된 1^(150 ! _1¾ ， 0.368 ₁ ^ ₀ 1)에 _78°(：에서 천천히 가하였다. 반응액을 상온에서 ₁₈ 시간 동안 교반한 후 _£01 으로 희석하여 정제수로 세척하였다. 유기층을 ₂ 엤 ₄ 로 탈수시카고 감압 농축 후 컬럼

8과 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 67.5 미용의 표제 화합물을 수득하였다.

1X46犯 ，미八) = 382.8(¾1+}1 ⁺ ) 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

실시예 11: (1-((21?,센,510-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-2-옥 소-1,2-디히드로피리미딘-4-일)- _2- 메틸- _6-( 트리플루오로메틸)니코틴아마이드의 제조 2-미 1171-6-(1；1' 11101'(仰61:1 _¾ 사)1 (：01;111 301(1(205 1.000

_■0 1)를 0X8171 (止101· ^6(0.36 ， 3.000 _01)과 반응시켜 얻어진 2 - 11161;1171-6-(1；1 11101"(仰61;111)1^(：01^11071 (±10^(16(164.7 1 , 0.737 _。1)와 1-쇼(200 0.491 1^1101)를 상기 실시예 8과 유사한 방법으로 반응시켜 흰색고체로 75 ₀ 의 표제화합물을수득하였다.

1名-! 犯 ， ^1 _{%) = 450.6} «州 ⁺ ) 실시예 12: ( 1-( (21?,쏴, 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일)-

3 -메틸피콜린아마이드의 제조 단계 1： 3-0161;1171 (：01 301(1(300 미용, 2.188 _。1)를 0X31^ (±101^(16(0.56 , 6.563 _01)과 반응시켜 얻어진 3161;111 (：01 0 1 (±101^(16(86 1 , 0.552 _01)와 1^(150 11退, 0.368 _01)를 상기 실시예

실시예 13 : -( 1-( (21? ,쌉 , 51?)-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )-

6 -메틸피콜린아마이드의 제조

6_11161;1111^（：01 801（1（300 미요, 2.188 _01）를 0X81^

（±101^（16（0.56 1111 , 6.563 _01）과 반응시켜 얻어진 6-1«61±71 （：01 0 1 （±10^（16（68.71 , 0.442 _。1）와 1^（15011退， 0.368 _01）를 상기 실시예 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

8과유사한방법으로반응시켜 흰색 고체로 14.4 화합물을수득하였다. ᄄ시 犯 ,미/幻 = 383.0（¾1+ ） 실시예 14： -（1-（（2 41?.51?）-3,3-디플루오로- 4 -히드록시- 5 - （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）-

_6- （트리플루오로메틸）니코틴아마이드의 제조 단계 1： 6-（ 1 ₁₁ 아 _0!116 내 ₇₁ ） （: _{01; 1 301} （1（150 _! ， 0.784 _■01 ）를 _0X8 ^1 （±1 ₀₁ ^（1 ₆ （0.13 _{1111 , 1.569 1} 에 ₁₀₁ ）과 반응시켜 얻어진 6- （1;!·오은 11 _{10! 00161;1¾} ，1） （: _{01; 0} 1 （±1 _0! （1 ₆ （62 ₁₁ 退, 0.294 _。1）와 1_쇼（100 _11¾ ，

0.245 _■01 ）를 상기 실시예 9와 유사한 방법으로 반응시켜 살구색 고체로

실시예 _ 15^ _ （1-（（2묘,4요,5요）-3,3 -디플-〒오로- 4-히드록시 -5 -

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）-

_{1 -} 메틸-:내-피라졸- _{4 -} 카복스아마이드의 제조 단계 1： 1-미 1 _¾ ，卜내 ₁ ） ₇ 대 ₂₀₁₆ -4-。 ₃₁₁₃ （« _{71 301} （1 （300 미용， 2.380 _ ₀₁ ）를 _0X3 ^1 ＜土1이 （1 ₆ （0.4 _{1111 , 4} .720 _ ₀₁ ）과 반응시켜 얻어진 1 -

₀₁ 1 _¾ ，1-1｝ ）^ _32016-4 ᄀ: ₃₁₁ ） _01¾ 1 （止1 ₀ （1 ₆ （85 _! , 0.588 _。1）와 1_/（200 ₀ , 0.490 ₁ ^ ₀₁ ）를 상기 실시예 9와 유사한 방법으로 반응시켜 살구색 고체로 148 화합물을수득하였다.

1X46犯 , ₁₁₁ / ₂ ） = 516.1（¾1州 ⁺ ） 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（148 _1¾ ， 0.287 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 18.2 표제화합물을수득하였다. 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

1X413犯 ,이/ = 372 _'1 내 ⁺ ） 실시예 16: 이소프로필 （ ）-（（（2131?, 510-4, 4 -디플루오로- 3- 히드록시 -5-（4-（니코틴아미도） -2 -옥소피리미딘- 1（2 - 일）테트라하이드로퓨란 -2 -일）메톡시）（펜옥시）포스포일）斗 -알라니네이트의 제조 단계 1： 4-꽤 ₀ _1-（（2묘，4묘，510-4-（（ ₆₁ :-는） 1（1½ _61;]1 1 ₃₁₁ 1）（光 ₇ :卜

3 , 3 -（1오 11101· 0_5_（ ]¾ 0x^6 thyl）tetr 0 -요- 1） pyr 11111（1111-2（ 1고） -01½ 단계 3： 단계 2로부터수득한화합물（442 ₁ 犯， 0.683 _ ₀₁ ）을 ^（0.5 ）에 녹이고 0 °（：로 냉각한다. 표 ₁₁₁ ^ 0.16 를 천천히 넣은후

chloride(0.27 ml, 3.189 mmol)과 반응시켜 얻어진 6-pheny 1 p i co 1 i noy 1 chloride(159.9 mg, 0.735 mmol)와 I-A(200 mg, 0.49 mmol)를상기 실시예 ₉ 와 유사한 방법으로 반응시켜 노란색 액체로 정제 없이 얻었으며 다음 단계를진행하였다

LC-MS (ESI, m/z) = 589.KM+H ⁺ ) 단계 2： 단계 1로부터 수득한화합물 (0.49 mmol)을상기 실시예 1의 단계 2와유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 123 mg의 표제 화합물을 수득하였다.

LC-MS (ESI, m/z) = 445.0(M+H ⁺ ) 실시예 18: _l -((2R,4R.5R)-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-4-(3- 메틸-2-옥소피롤리딘-1- 일)피리미딘-2(1H)_온의 제조 단계 1: 3-me t hy 1 d i hydr o f ur an~2 ( 3H ) -one (1 g, 9.988 mmol)를 Hydrogen bromide solut ion(33 wt . % in acetic acid, 9.98 ml, 30.266 mmol), thionyl chlor ide(6 ml, 50.432 _ol)과 반응시켜 얻어진 4-bromo- 2-methylbutanoyl chloride (0.12 ml, 0.919 mmol)와 I -A (250 mg, 0.513 mmol)를 상기 실시예 9와 유사한 방법으로 반응시켜 주황색 고체로 349 _mg 의 화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI, m/z) = 516.1 (M+H ⁺ ) 단계 2： 단계 1로부터 수득한화합물 (300 mg, 0.581 mmol)을 DMFC0.6 ml)에 용해시킨 후 TEA0.2 ml, 1.402 _ol)를 가하고 200°C에서 1시간 동안 microwave reactor로 반응하였다. 반응액을 EtOAc에 희석시킨 후 정제수로세척하였다.유기층을 Na _2S 0 ₄ 로탈수시키고， 감압농축하여 노란색 고체로 210 mg의 표제화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI, m/z) = 490.1 (M+H ⁺ ) 실시예 _받! _ N~(1~((2R,4R, 5R)~3 , 3 -디플 T오로- 4 -히드록시 -5 -

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )- 2 _019/147050 1»（：1^1{2 _019/001036

5 -니트로피콜린아마이드의 제조 단계 1: 5- 1; ₁₀₁₎ 1: ₀ 1 ₃₀₁₍ 1(300 미용， 1.785 _■0 1)를 _0X3 ^1 ±1 ₀₁ ^1 ₆₍₀ .46 ₁₁₁ 1 , 5.353 _。1)과 반응시켸 얻어진 5-］ 1； ₁₀₁₎ 1： ₀ 1 ₀₇ 1

1石_1 犯 ,미/ = 414.0 »대 ⁺ ) 실시예 20： 5 -아미노--(1-((21?,쐬,5{0-3.3 -디플로오로- 4 -히드록시-

5-(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일)- 2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)피콜린아마이드.히드로클로라이드의 제조 상기 실시예 19의 단계 1로부터 수득한 화합물 (110 _11¾ ， 0.197 때 ₁₀ 1)를 수소 기체 하에서 10% ?1/0(55빠)과 반응시켜 얻어진 화합물 (90

₁ ， 0.197■ )을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 노란색고체로 ₈₂ 의 표제화합물을수득하였다.

8과유사한방법으로반응시켜 흰색고체로 110 의 화합물을수득하였다.

0>1此犯 ,미/幻 = 543.2 州 ⁺ ) 실시예 22： 1 (1-((21?,쐬,5幻-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

(히드톡시메틸 )테트라히드로퓨란- 2-일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일)- _{6 -} 메톡시니코틴아마이드의 제조 단계 _1: 6_11161;110乂 (；01; 301(1 (200 (1退, 1.305 _01 )를 0X3^1 1＜ 1( (0.22 1111 , 2.611 _01 )과 반응시켜 얻어진 6_11161;110乂711 01^11071 (土 1이^(1 _{6 ( 168 1} ， 0.980 _ _{01 )} 와 4 -아미노- 1-((2요，41?，510-3,3-디플루오로- 4 -히드록시 -5-(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )피리미딘- 2( 1 -온

실시예 23： 6 -클로로- -( 1-( (2묘, , 510-3, 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5-(히드록시메틸)테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일 ₎ 니코틴아마이드의 제조

6-chloronicot inoyl chloride (117 m _g, 0.668 _ol)와 4시아미노-l- ( (2R， 4R， 5R)-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시- 5- (히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일)피리미딘- 2( 1H)-온

히드로클로라이드 (200 mg, 0.668 _ol )를상기 실시예 1과유사한방법으로 반응시켜 흰색고체로 _{95 mg} 의화합물을수득하였다.

LC-MS (ESI, m/z) = 547.1 (M+H ⁺ ) _{2019/147050 1»} （： _1/10 公 _019/001036

단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（95 ₁ 將, 0.173 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 30.4 표제 화합물을수득하였다.

1石-1\13犯 ， ₀₁ 八） = 403.0（¾!+中） 실시예 24： -（ 1-（（21? , 41? , 510-3 , 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）- ₂ -메틸피리미딘- _{4 -} 카복스아마이드의 제조 단계 1： 2_ _1!1 1 ₁ >，^>0· ₁₁₆ -4-。 ₃ ）¥ _¾ ，1 크 선 （200 _!! 退， 1.448

_ ₀₁ ）를 _0X8171 （±1이 （1 ₆ （0.24 _{1111 , 2.896} _ ₀₁ ）과 반응시켜 얻어진 2 - _!!161: 】 _¾ ） _{50 1 116} -4-。3 _01¾] （止1 ₀₁ （! ₆ （104이요， 0.668 _（）1）와 4 -아미노- 1-（（ 2묘 , 4묘 , 5幻-3， 3 -디플루오로- 4 -히드록시 -5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（ III） _온

히드로클로라이드（200 ₁ 雄, 0.668 _{1 01} ）를상기 실시예 1과유사한방법으로 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（246 ₁ 收, 0.466 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로 반응시켜 흰색 고체로 83 ^의 표제 실시예 25： （1-（（21?,犯.510-3,3-디플루오로-4-히드록시-5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1.2 -디히드로피리미딘- 4 -일）- _{5 -} 페닐피콜린아마이드의 제조 단계 1： 5_ ₁ ）1 _½1¾] （： _{01 301} （1 （300 이당， 1.505 _ ₀₁ ）를 _0X8 ^1 （±1 ₀ ^（1 ₆ （0.25 _{1111 , 3.011} _ ₀₁ ）과 반응시켜 얻어진 5- _{1 611} 1 （： _{01 0} 1 1 ₀₁ ^（ （138 ₁ ， 0.637 _ ₀₁ ）와 1^（200 ₀ 退， 0.490 _ ₀₁ ）를 상기 실시예 9와 유사한 방법으로 반응시켜 살구색 고체로 190 화합물을 수득하였다. 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

I乂:-1此 犯 ， 미八) = 589.2 ( _¾1 내 ⁺ ) 실시예 27： (1-((2 31?,41?,51?)-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1.2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )-

6 -페날피콜린아마이드의 제조

25

단계 1： 4 -아미노- l-((2R,3R，4R,5R)-3-플루오로-4-히디록시-5-

2019/147050 1 ^» (：1^1{2019/001036

단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（272 ₁ 犯， 0.477 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로반응시켜 흰색 고체로 134 ₀ 의 표제 실시예 28： （1-（（25,31?,쌉,510-3 -플루오로- 4-히드록시 -5 - （히드록시메틸）테트라히드로퓨란- 2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）- 5 -페닐피콜린아마이드의 제조 단계 1 : 5_1）11611 1 （：01 801（1 （300 미용， 1.505 _。1）를 0X3^1 （±101^（16（0.25 미1， 3.011 _01）과 반응시켜 얻어진 5-1）11611711 （：01 10 1

실시예 29： （ 1-（（25.3^쌉, 510-3 -플루오로- 4 -히드록시 _5_

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）- 2 -메틸피리미딘- 4 -카복스아마이드의 제조 단계 1: 2-1헤 _¾ 1· 116-4-0 130 71 301(1 (200 11塔, 1.448 ■ ₀ 1 )를 0X8171 (±101 1(^(0.24 , 2.896 _■0 1 )과 반응시켜 얻어진 2- 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036 실시예 30： （1-（（25,3 41?,510-3-플루오로-4-히드록시-5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4-일）- 5 -니트로피콜린아마이드의 제조

2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

실시예 32： （1-（（25.3!^.41?,510-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1.2 -디히드로피리미딘- 4 -일）- 6 -메틸니코틴아마이드의 제조

₃₀

단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（729 ₁ ， 1.470 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 석출된 고체（ ₆ 1 ₆ ）를 여과， 건조하여 흰색 고체로 523.2 _§ 의 표제 화합물을 2 _019/147050 1»（：1/10公 _019/001036

화합물을수득하였다.

-1狀（此 I _’ ^1 _% ） = 366.1（¾1州 ⁺ ） 실시예 35： 5-플루오로- N-（l-（（2S,3R,4R,5R）-3-플루오로-4-히드록시-

5-（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 ,2 -디히드로피리미딘 - 4- 일）피콜린아마이드의 제조 단계 1: 5_군 1 _{1101 0} ＜： ₀ 1 ₈₀₁ （1 （141 미당， 1 ， ₀ 1）를 ₀ 乂 ₈ 1 1

（±1 ₀₁ ^（1 ₆ （0.257 _1« 1 , 3 _■0 1）과 반응시켜 얻어진 5야 1 _1101" （ （： ₀ 1 ₀ 1

（:1!1 ₀₁ 1 ₆ 1^01 （120.54 ₁ , 0.615 _。1）와 1-8（200 , 0.513 _ ₀ 1）를상기 실시예 ₉ 와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 115 ₀ 의 화합물을 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（115 ₁ ， 0.22 _ ₀ 1）을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로 반응시켜 흰색 고체로 표제 화합물을수득하였다. 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

상기 실시예 9와유사한방법으로반응시켜 흰색 고체로 106 화합물을 수득하였다.

I乂:- ] 犯 ，며/ = 496.1 01州 ⁺ ） 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（115 ₁ 收， 0.225 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로 반응시켜 흰색 고체로 표제 실시예 37： 5 -시아노- （1-（（2 3!?,쐬,51?）-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5 - （히드록시메틸）테트라히드로퓨란- 2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일）피콜린아마이드의 제조 단계 1: 5 - 0 요1101^（：01 ^1 ^c id （148 ， 1 _ ₀₁ ）를 （》比1 1

（±1 ₀₁ ^（1 ₆ （0.257 ₁₁₁₁ ， 3 _■01 ）과 반응시켜 얻어진 5 - 0父요1101）：1（：01오 （±1 ₀₁ ^（^ 1101 （125 미용， 0.615 _■01 ）와 1-6（200 ， 0.513 _ ₀₁ ）를 상기 실시예 ₉ 와 유사한 방법으로 반응시켜 노란색 액체로 100 의 화합물을 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（100 退, 0.192— ₀₁ ）을 ^’ 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 노란색 고체로 52 2019/147050 1 ^» （：1/10公019/001036

실시예 38： (1-((25,3묘,4!?,51?)-3-플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-2-옥 소-1,2-디히드로피리미딘-4-일)- _5- 메틸피콜린아마이드의 제조 단계 1: 5_11161;1171 (：01 801(1 (200 01묘， 1.458 _01)를 0X81^ (±10^(16(0.37 1111 , 4.375 1111101)과 반응시켜 얻어진 5_11161:1171 (：01 071 실시예 39： (1-((2 31?.쏴,5{0-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일)- 2 -옥소- 1 ,2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )-

_{5 -} 메톡시피콜린아마이드의 제조 단계 1: 51161:1 0뱐 01 801(1 (200 0塔, 1.305 _01)를 0X8^1 실시예 40： 1 (1-((2 31^.41?,510-3-플루오로-4-히드록시-5-

(히드록시메틸)테트라히드로퓨란-2-일)-2-옥 소-1,2-디히드로피리미딘-4-일)- 2 _019/147050 1»（：1^1{2 _019/001036

2 -메틸- 6（트리플루오로메틸）니코틴아마이드의 제조 단계 1： 2-미 ] _¾ ，1-6-（1; _1· 오 1 ₁₁₀₁ _ ₀₁₁₁ 1 _¾ ，1） （: ₀₁ : 。 （200 _!! 退，

0.974 _ ₀ 1）를 _0X3 ^1 （±1 ₀₁ ^（1 ₆ （0.25 , 2.922 _ ₀ 1）과 반응시켜 얻어진 21 ₆ 내卜 6_（1; ₁ ， 1 _1101'011161; 1 ₁₇ 1） ₁₁ 1（: _{01 110} :，1 （ 1 ₀₁ （ （329 ₁ ， 1.572 _（）1）와 4 -아미노- ]_-（（2모, 31?, 4요, 5요） ^_ 3 ^_ 들루오로- 4-히디록시 -5 - （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（내）_온 （200 _1¾ ， 0.816 유사한 방법으로 반응시켜 노란색 고체로 98

1乂:-1此犯 ， 0 ₁ / _å ） = 577.1 «대 ⁺ ） 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（98 ₁ 收， 0.169 _ ₀ 1）을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 64.8 실시예 41： 1 （1-（（25,3 41?,510-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4 -일）-

_6- （트리플루오로메틸）니코틴아마이드의 제조 단계 1： 6-（1: _1· ^ 1 ₁₁ 아 _{01116 7} 1） （: _{0 11 801} （1（200 _! ， 1.046 _■0 1）를 _0X8 ^1 （±1 ₀₁ ^（1 ₆ （0.26 ₁₁ ）1 , 3.139 _ ₀ 1）과 반응시켜 얻어진 6 -

（ 1 ₁ 그이 _011161; 1 ₁ :，1） ₁ 0介 ₁₀ 1 （土1 ₀₁ （ （189 ₁₁ 退， 0.769 _〔）1）와 4 -아미노- 1-（（ 21?， 3묘， 4요 , 51?） -3 -플루오로- 4 -히디록시 -5- （히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（ -온 （200 陶, 0.816 _1111110 1）를 상기 실시예 27과 유사한 방법으로 반응시켜 노란색 고체로 202 의 화합물을수득하였다.

563.1（¾1州 ⁺ ） 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（202 ₁ 雄， 0.359 _ ₀ 1）을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로 반응시켜 흰색 고체로 표제 _{2019/147050 1»} （： ₁ ^ _{1{2019/001036}

실시예 42： 6 -플루오로- (1-((2 3 쌉,5的-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-(히드록시메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 , 2 -디히드로피리미딘- 4- 일)니코틴아마이드의 제조 단계 1: 6_군 1 ₁₁₀₁ ： ₀₁₁₁₍ ： _{01 301(} 1 (200 ₁ ， 1.417 _。1)를 _0X8 ^1 (土1아 ^ _{6(0.36 1111 , 4.252} _ )과 반응시켜 얻어진 6 1 ₁₁₀₁ 이 «)1 ₁₀ 1

(±1 ₀ (1 ₆ (100.5 미요, 0.513 _■01) 와 1-6(200 _{11¾, 0.513} _。1)를 상기 실시예 9와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 175 화합물을 수득하였다.

1兄-1路犯 , ^1 _%) =513.1 州 ⁺ ) 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물 (175 ₁ , 0.342 _■01) 을 상기 실시예 1의 단계 2와유사한방법으로 반응시켜 흰색 고체로 표제 화합물을수득하였다.

I乂:- 1 犯 , 幻 = 369.0 (¾1대 ⁺ ) 실시예 43： 1 (1-((2 3 此,51?)-3 -플루오로- 4 -히드록시- 5-

(히드록사메틸 )테트라히드로퓨란 -2 -일 )-2 -옥소- 1 ,2 -디히드로피리미딘- 4 -일 )- 6 -메톡시니코틴아마이드제조 단계 1： 6- _{0161;]1(¾¾ 01 301(1 (200 1} , 1.305 _ ₀₁₎ 를 ₀ 乂 1 1 _{01[(16(0.33 1111 , 3.915} _ ₀₁₎ 과 반응시켜 얻어진

(±1 ₀ ^3 ₆ (213미용, 1.026 _ ₀₁₎ 와 1-6(200 _1¾ ， 0.513

9와유사한방법으로반응시켜 흰색고체로 125 화합물을수득하였다. 525.1 +市) 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물 (125뺘， 0.238 _ ₀₁₎ 을 상기 실시예 1의 단계 2와 유사한 방법으로 반응시켜 흰색 고체로 31.4 표제화합물을수득하였다.

比-1狀犯 ，며八) = 381.1(¾1州 ⁺ ) 실시예 44： 이소프로필 ( (幻-(( (21?, 510-4 -플루오로- 3- 2019/147050 1 ^» （：1^1{2019/001036

히드록시 -5-（4-（2 -메틸피리미딘- 4 -카복사미도）- 2 -옥소피리미딘- 1（211）- 일）테트라히드로퓨란 -2 -일）메톡시）（히드록시）포스포릴）- 알라니네이트제조 단계 1： 4 -아미노- 1-（（2묘，3요，41?，510-4-（ ₆ -부틸디메틸실릴）옥시）- 3 -플루오로- 5-（히드록시메틸）테트라히드로퓨란 -2 -일）피리미딘- 2（내）-온（395 단계 2： 단계 1로부터 수득한 화합물（307 ₁ 收， 0.488 _ ₀₁ ）을 상기 실시예 9의 아마이드를 얻은 방법과 유사한 방법으로 반응시켜 노란색

상기 실시예를구조와명칭으로아래 표 ₁ 과같이 정리하였다.

[표 1]

2019/147050 1 ^» （：1/10公019/001036

2019/147050 1 ^» （：1/10公019/001036

2019/147050 1 ^» （：1/10公019/001036

실험예 ₁ ： 항인플루엔자바이러스효능시험

실시예의 화합물들이 다양한 인플루엔자 바이러스에 활성을 나타내는지 알아보기 위하여 다음과같이 실험하였다.

( ₁₎ 인플루엔자바이러스에 감염된세포의 준비

MDCK(Mad in-Darby canine kidney) 세포는 미국 에서 구입하였으며， 10%소혈청 (fetal bovine serum, FBS)이 포함된 MEM(minimal essential medium)에서 배양하였으며, 배양기의 온도는 37 °C, 이산화탄소 농도는 5%로유지하였다.

인플루엔자 바이러스 A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) (이하，

“PR8”이라함) , A/HongKong/8/68 (H3N2) (이하， ’’HK"이라 함)， B/Lee/40 (이하， “Lee”라 함)은 ATCC에서 구입하였다. 인플루엔자 바이러스 PR8과 HK은 10일된 계란에 접종하여 37 °C에서 증식시켰다. 인플루엔자 바이러스 Lee는 MDCK 세포에 감염시켜 증식시켰으며， 이때 배양액에는 혈청이 없는 상태에서， 2 y g/ml의 TPCK-trypsin(Sigma, (St . Louis, M0)이 첨가되었다. 배양온도는 35°C를유지하였다. 감염 3일후에， 계란의 요막 액 (al lantoic f luids) 또는세포 배양액을 1,000대이에서 5분간원심분리하여 불순물을 정제함으로써 증식된 바이러스를 획득하였다. 바이러스 역가는닭적혈구에 포함된 혈구응집소 (hemagglutinin, HA)를 이용하거나， MDCK 세포에 바이러스를 감염시켜 바이러스 플라크 (plaque) 수를 측정하였다. 각 바이러스를분주하여 70 °C에서 보관하였다.

(2)세포병변효과 (cytopathic effect)의 감소즉정

96 -웰 플레이트에 충분히 자란 MDCK 세포를 인산완중식염수 (phosphate-buffered sal ine, PBS)로 세척을 한 뒤， 50-100 플라크 형성 단위 (plaque forming units, PFU)의 인플루엔자 바아러스를 웰 마다 접종하였다. ₁ 시간 가량 바이러스가 세포에 감염이 되도록 방치하는데, 이때 PR8, HK, Lee 바이러스를 35 。(:에서 감염이 되도록 하였다. 바이러스가포함된 배양액을제거하고 인산완충식염수로세척을한 후， 각실시예 화합물이 다양한농도로희석된 2 ^g/ml TPCK-trypsin포함 MEM 배양액을 웰 마다 첨가하였다. 감염 후 3일째 되는 날， 3-(4, 5- dimethylthiazol-2-yl )-2,5-dipheyltetrazol imbromide (MTT)를 이용하여 세포 생존도 (cel l viabi l ity)를 측정하였다［Y. Jang et al . , 2016. Antiviral activity of KR-23502 targeting nuclear export of inf luenza B virus r ibonucleoproteins , Antiviral Res 134： 77-88］ .

방법을간단히 정리하면， 세포배양액을제거하고웰마다 100 i _{l l} 의

MTT 용액 (2.5 mg/ml)을 첨가하고 37°C에서 1 시간 방치하였다. MTT solvent (4 mM HC1 , 0.1% Nondet P-40 (NP40) in isopropanol )을 100 u 1 첨가하여 반응을 정지시킨 후 540 nm - 690 에서 spectrophotometer (모델명: SpectraMax M3 plate reader , 제조사: Molecular Devices , Sunnyvale, CA)로 흡광의 세기를 측정하였다. 50% 세포 독성 농도 (CC _{50 ,} 정상 세포의 50%의 손상을 가하는 화합물의 농도)와 50% 유효 농도 (EC _{50 ,} 바이러스감염으로 인한세포독성을 _50% 정상화시키는농도)를 계산하였다. 비교군으로는, 종래의 표준 항바이러스제인 아만타딘 (AMT; Sigma) , 오셀타미버 카르복실레이트 (oseltamivir carboxyl ate) (0SV-C； US Biological , Swampscott , MA)및 리바비린 (RBV; Sigma)이사용되었다.

［표到 뉴클레오사이드또는뉴클레오타이드유도체의 항인플루엔자 바이러스효능 2019/147050 1 ^» (：1/10公019/001036

실험예 ₂ ： 항코로나바이러스효능시험

실시예의 화합물들이 다양한 항코로나바이러스에 활성을 나타내는지 알아보기 위하여 다음과같이 실험하였다.

_1. 코로나바이러스에 감염된세포의 준비.

Huh- 7 (Human he _patoma-7) 세포는 일본 세포주은행 (JCRB)에서 구입하였으며， 10% 소혈청 (fetal bovine serum, FBS)이 포함된 DMEM (Dulbecco's Modified Ea _gle's medium)에서 배양하였다. MRC-5 세포는 미국 에서 구입하였으며， 10% 소혈청이 포함된 MEM(Minimal essential medium)에서 배양하였다. 배양기의 온도는 37 °C， 이산화탄소농도는 5%로 유지하였다.

메르스바이러스 (MERS-CoV/KOR/KNIH八) 02_05_2015)는

질병관리본부로부터 분양받았으며， 인간코로로나바이러스 hCoV 229E, 0C43, 고양이 복막염바이러스 (FIPV: feline infectious _{per itonit is)} 는 에서 구입하였다. 메르스바이러스는 Huh-7세포에 감염시켜 37 °C에서 증식시켰다. 동일한 방법으로 hCoV 229E와 0C43는 MRC-5 세포에 감염시켜 증식하였고， FIPV는 CRFK 세포에서 증식하였다. 감염 2~3일후 에 세포 배양액을 3,000 제에서 20분간 원심분리하여 세포 불순물을 제거함으로써 증식된 바이러스를 획득하였다. 바이러스 역가는 각 바이러스 증식에 이용한 세포에 바이러스를감염시켜 바이러스플라크 ( _plaque) 수를측정하였다. 각 바이러스는소량으로분주하여 70 °C에 보관하였다.

2. 세포병변효과 (cytopathic effect)의 감소 측정

96 -웰 플레이트에 자란 Huh-7 (메르스)， MRC-5 (hCoV 229E, 043) ,

CRFK (FIPV) 세포에 각 해당 바이러스를 웰 마다 접종한후， 각 실시 예 화합물이 다양한 농도로 희석되어 포함한 배양액을 윌 마다 첨가하였다. 감염 후 3일째 되는 날, 3-(4, 5-d i me t h _{y 11 h i azo 1 -2-y 1 )} -2 , 5 - 2019/147050 1 ^» (：1/10公019/001036

dipheyltetrazol imbromide （MTT）를 이용하여 세포 생존도（cel l viabi l ity）를 측정하였다. 흡광세기는 540 nm - 690 nm에서 spectrophotometer （모델명: SpectraMax M3 plate reader , 제조사:

Molecular Devices , Sunnyvale, CA）로측정하였다. 50%세포독성 농도（CC _{50 ,} 정상 세포의 50%의 손상을 가하는 화합물의 농도）와 50% 유효 농도（EC _{50 ,} 바이러스감염으로인한세포독성을 _50% 정상화시키는농도）를 계산하였다. 비교군으로는 gemcitabine（Sigma）이사용되었다.

[표 3] 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체의 항코로나바이러스효능

실험예 ₃ ： 항모기매개바이러스 (뎅기,지카, 치쿤구니아 ₎ 효능시험 실시예의 화합물들이 다양한 항모기매개바이러스에 활성을 나타내는지 알아보기 위하여 다음과같이 실험하였다.

_1. 플라비바이러스와알파바이러스에 감염된 세포의 준비.

Vero (African _green monke _y kidne _y) 세포는 미국 ATCC에서 구입하였으며, 10%소혈청이 포함된 DMEM에서 배양하였다. 배양기의 온도는 37 °C , 이산화탄소농도는 5%로유지하였다.

플라비바이러스속에 속하는뎅기바이러스 New Guinea C (NGC) (이하，

"DENV" 라함)는 영국 NCPV (National Col lection of Patho _genic

Vi ruses)에서 구입하였고 , 지카바이러스 (■766)은 미국 ATCC에서 구입하였다. 알파바이러스 속에 속하는 치쿤구니아 바이러스는 국내환자 분리주로 질병관리 ^‘ 본부 국가병원체자원은행에서 분양 받았다. 플라비바이러스와 알파바이러스는 Vero 세포에 감염시켜 37 °C에서 증식시켰다. 바이러스 역가는 Vero 세포에 바이러스를 감염시켜 바이러스 플라크 ( _plaque) 수를 측정하였다. 각 바이러스는 소량으로 분주하여 70 °C에 보관하였다. 2. 면역형광염색법 (Immmofluorescence assa _y) 을 이용한 바이러스 감염 감소측정 _96- 웰 플레이트에 자란 _Vero 세포에 각 뎅기바이러스 또는 지카바이러스를 웰 마다 접종한 후,각 실시 예 화합물이 다양한 농도로 희석되어 포함한 배양액을 윌 마다 첨가하였다.감염 후 ₃ 일째 되는 날, 플라비바이러스 막단백질에 교차반응을 보이는 _4G2 단클론 항체를 이용하여 감염된 세포를 면역형광염색법으로 분석하고， 형광값은 이미지분석 장비인 Operetta (PerkinElmer)를 이용하여 측정하였다.

3. 세포병변효과 (c _ytopathic effect)의 감소즉정

96 -웰들레이트에 자란 Vero세포에 치쿤구니아바이러스를 웰마다 접종한후, 각실시 예 화합물이 다양한농도로 희석되어 포함한배양액을 월 마다 첨가하였다. 감염 후 3일째 되는 날, 3-(4,5-dimeth _ylthiazol _2- yl )-2,5-di _{pheyltetrazol} imbromide (MTT)를 이용하여 세포 생존도 (cel l viabi lit _y) 를 측정하였다. 흡광세기는 540 nm - 690 에서 s _{pectrophotometer} (모델명: S _pectraMax M3 _plate reader , 제조사: Molecular Devices, Sunnyvale, CA)로측정하였다. 50%세포독성 농도 (CC _50, 정상 세포의 50%의 손상을 가하는 화합물의 농도)와 50% 유효 농도 (EC _50, 바이러스감염으로인한세포독성을 50%정상화시키는농도)를 계산하였다. 비교군으로는클로로퀸 (Chloro _quine ， Si _gma) 이사용되었다.

[표 4] 뉴클레오사이드 또는 뉴클레오타이드 유도체의 항모기매개바이러스효능