본 발명은 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

단백질 키나아제(PK)는 단백질의 티로신, 세린 및 트레오닌 잔사 상의 하이드록시 그룹의 인산화를 촉매하는 효소이다. 상기 단백질 키나아제는 세포 성장, 분화 및 증식을 야기하는 성장 인자 신호 전달에 중요한 역할을 하고, 따라서 단백질 키나아제의 활성은 세포 생명의 거의 모든 양태에 영향을 미친다.

단백질 키나아제의 돌연변이나 과발현에 의한 세포신호전달체계의 이상은 건선과 같이 비교적 생명에 위협적이지 않은 질환에서부터 암과 같은 독성(병원성) 질환에 걸친 기질(stroma) 질환에 밀접한 영향을 미친다.

단백질 키나아제는 티로신 키나아제(TK) 및 세린-트레오닌 키나아제(STK)로 분류할 수 있다.

티로신 키나아제의 활성의 주요 양태들 중의 하나는 이것이 성장 인자 수용체와 관련이 있다는 것이다. 성장 인자 수용체는 세포 표면 단백질로서, 성장 인자 리간드에 결합된 경우에는 성장 인자 수용체가 활성 형태로 전환되어 세포막의 내부 표면상의 단백질과 상호 작용하여, 상기 수용체와 기타 단백질의 티로신 잔사 상에서 인산화가 유발되고, 세포 내부에 각종 세포질성 시그널링 분자와의 복합체가 형성되어 궁극적으로는 수많은 세포 반응, 예를 들면, 세포 성장, 분화 및 증식, 세포외 미소환경에 대한 대사성 효과 발현 등이 나타난다(Schleessinger and Ullrich, Neuron. 1992 9, 303-391).

티로신 키나아제의 활성을 지닌 성장 인자 수용체는 수용체 티로신 키나아제(Receptor tyrosine kinase, RTK)로서 알려져 있다. 상기 수용체 티로신 키나아제는 다양한 생물학적 활성을 나타내는 큰 계열의 막관통(transmembrane)수용체를 포함한다.

종래에 19개 이상의 "HER RTK"로 명명되는 것과 같은 아계열의 수용체 티로신 키나아제가 알려져 있고, 상기 HER RTK에는 상피 성장 인자 수용체(EGFR), HER2, HER3, HER4 등이 포함된다. 상기 수용체 티로신 키나아제는 세포외 글리코실화리간드 결합성 도메인, 막관통 도메인 및 단백질 상의 티로신 잔사를 인산화시킬 수 있는 세포내 세포질성 도메인으로 이루어진다.

또한, 수용체 티로신 키나아제 아계열은 인슐린 수용체(IR), 인슐린 유사 성장 I 수용체(IGF-1R) 및 인슐린 수용체 관련 수용체(IRR)로 이루어진다. IR 및 IGF-IR은 인슐린, IGF-I 및IGF-II와 상호 작용하여, 세포막을 가로지르고 키나아제 도메인을 함유하는 2개의 β소단위체와 2개의 완전하게 세포외 글리코실화된 α소단위체의 이종사량체(heterotetramer)를 형성한다.

또한, 수용체 티로신 키나아제 아계열은 혈소판 유도된 성장 인자 수용체(PDGFR)로서 명명되는 PDGFRα, PDGFRβ, CSFIR, c-Kit 및 c-Fms을 포함한다. 상기 수용체는 가변수의 면역글로블린 유사 루프와 세포내 도메인으로 구성된 글리코실화 세포외 도메인으로 이루어진다. PDGFR 아계열과의 유사성으로 인해 상기 PDGFR 그룹에 포함되는 태아 간 키나아제(Flk) 수용체 아계열이 알려져 있다. 상기 Flk 아계열은 키나아제 삽입물 도메인-수용체 태아 간 키나아제-1(KDR/Flk-1), Flk-1R, Flk-1, Fms-유사 티로신 키나아제 1 또는 3(Flt-1 또는 Flt-3) 등으로 이루어진다.

티로신 키나아제 성장 인자 수용체 계열로서 MET은 c-Met으로서 명명되고 사람 간세포 성장 인자 수용체 티로신 키나아제(hHGFR)로서 1차적 종양 성장 및 전이에 일정 역할을 하는 것으로 여겨지고 있다(Plowman et al.,DN&P, 1994, 7, 6, 334-339).

수용체 티로신 키나아제 이외에도, 비수용체 티로신 키나아제 또는 세포성 티로신 키나아제(CTK)로 불리우는 특정 계열의 완전한 세포내 TK가 존재한다. 상기 비수용체 티로신 키나아제는 세포외 도메인과 막관통 도메인을 함유하지 않고, Src, Frk, Btk, Csk Abl, Zap70, Fes, Fak, Jak 및 Ack 아계열로 이루어진다. 이중 Src 아계열은 Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr, AUR1(Aurora-B), AUR2(Aurora-A), AUR3(Aurora-C), Yrk 등을 포함한다(Bolen, Oncogene. 1993, 8, 2025-2031).

수용체 티로신 키나아제 및 비수용체 티로신 키나아제와 관련된 병원성 질환은 건선, 간경변, 당뇨병, 혈관형성, 재발 협착증, 안과질환, 류마티스성 관절염, 자가면역 질환, 죽상경화증, 신장 장애 등이 포함된다.

상기에서 살펴본 PK 중에서 Bcr-Abl, EGFR, VEGFR 등의 수용체 티로신 키나아제는 좋은 항암제 타겟으로 많이 연구되어 왔으며, 글리벡, 이레사 등의 항암제가 개발되어 시판되고 있다.

또한, 항암제 타겟으로 연구되고 있는 RTK 중에서도 간세포 성장인자(Hepatocyte Growth Factor/Scatter Factor, HGF/SF) 수용체인 c-Met(Hepatocyte Growth Factor Receptor: HGFR)을 타겟으로 하는 항암제가 많이 개발되고 있다(J. G. Christensen, J. Burrows et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; WO 2004/076412; WO 2006/021881 A; WO 2006/021886; WO 2007/064797).

c-Met은 종양 형성, 증대된 세포 운동성 및 침입성 하에서의 종양 진행, 및 전이에 수반되는 폐암, 위암, 피부암, 신장암, 직장암, 췌장암 등의 많은 인간 암에서 과발현 또는 활성화되어 있다(J. G. Christensen et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; W. G. Jiang et al., Critical Reviews in Oncology/Hematology, 2005, 53, 35-69). c-MET 및 이의 리간드인 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 정상적으로는 주로 상피 및 간엽 기원의 세포 각각으로 한정되어 발현된다. c-MET 및 HGF/SF는 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 전이, 세포 증식 및 생존, 형태 형성성 분화 및 3-차원적 관상 구조물(신 세뇨관 세포, 선 형성 등)의 조직화에서 중요한 것으로 밝혀졌다. HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-MET 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 반응(증식, 운동성, 침입성 등)을 유도한다.

또한 c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 다양한 인간 암에서 증가된 수준으로 공-발현되는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 수용체 및 리간드는 통상적으로 상이한 세포 유형에 의해 발현되기 때문에, c-Met 신호전달은 대부분 보편적으로 종양-기질 (tumor-stroma) 상호작용에 의해 조절된다.

또한, c-Met의 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 키나아제를 활성화시키는 생식계 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다.

c-Met 및/또는 HGF/SF의 발현은 상이한 유형의 암(폐, 결장, 유방, 전립선, 간, 췌장, 뇌, 신장, 난소, 위, 피부, 뼈 등의 암)의 질환 진행 상태와 연관되어 있으며, c-Met 또는 HGF/SF의 과발현은 폐, 간, 위 및 유방을 포함한 많은 주요 인간 암에서 나쁜 예후 및 질환 결과와 상관되는 것으로 밝혀졌다. 또한, c-Met은 췌장암, 신경교종 및 간세포암과 같은 성공적인 치료법이 없는 암에 직접 관련되어 있다고 보고되었으며, c-Met이 과발현되면서 ERBB3 신호전달체계 활성화로 야기된 폐암이 게피티니브(Gefitinib; 이레사(상품명:Irresa))에 내성을 갖게 된다고 보고되었다 (J. A. Engelman, K. Zejnullahu et. al. Science, 2007, 316, 1039-1043).

HGF/SF는 c-Met의 세포외 도메인에 결합하여 c-Met을 활성화시키며, c-Met의 활성화는 각각 Gab1 및 Grb2 매개된 PI3-키나제 및 Ras/MAPK 활성화를 통한 티로신 포스포릴화 및 다운스트림 시그널화를 이끌어, 세포 운동성 및 증식을 유도한다.

c-Met은 수용체 활성화, 형질전환 및 침습을 이끄는 다른 단백질과 상호작용하는 것으로 밝혀졌고, 또한 c-Met은 초점부착(focal adhesion)을 형성하는 α6β4 인테그린(Integrin:라미닌과 같은 세포외 기질(ECM) 성분에 대한 수용체)과 상호작용하여 HGF/SF 의존적 침습적 성장을 촉진하는 것으로 보고되었다.

이에, 본 발명자들은 단백질 키나아제 억제제를 개발하기 위한 연구를 수행하 던 중, 단백질 키나아제에 대한 우수한 저해 활성을 갖는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체가 이상 세포 성장의 치료에 유용한 c-Met, Ron, KDR, Lck, Flt1, Flt3, Tie2, TrkA, TrkB, b-Raf, Aurora-A 등과 같은 단백질 키나아제에 대한 억제효과를 나타내므로, 이상 세포 성장 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 알아내고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 신규 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 단백질 키나아제에 대한 우수한 저해 활성을 나타내는바, 이상 세포 성장질환의 치료에 유용한 다양한 단백질 키나아제, 예를들면 c-Met, Ron, KDR, Lck, Flt1, Flt3, Tie2, TrkA, TrkB, b-Raf, Aurora-A 등에 대하여 우수한 억제효과를 나타내므로, 이상 세포 성장 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 활성 c-Met과 루시페라아제(Luciferase) 발현벡터를 나타내는 모식도이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

화학식 1

상기 화학식 1에서,

R ¹ 은 수소 또는 NHR ⁴ 이고, 여기서, 상기 R ⁴ 는 수소, C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 벤질이고;

R ² 는 수소, 할로겐, C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬, -NHR ⁵ , -NR ⁶ R ⁷ , OR ⁵ , -CN, -NHC(O)R ⁶ , -SO ₂ R ⁶ , -OS(O) ₂ R ⁶ , 피롤리딘, 피페리딘 및 모폴린 중에서 선택되되 상기 벤즈옥사졸 고리의 5번 또는 6번 위치에 치환되는 어느 하나 또는 상기 벤즈옥사졸 고리의 5번 및 6번 위치에 접합되는 C ₆ -C ₁₂ 의 아릴이고, 여기서, 상기 R ⁵ 는 수소, C ₁ -C ₆ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알키닐, C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알케닐, C ₆ -C ₁₂ 의 아릴, 할로겐으로 치환된 C ₆ -C ₁₂ 의 아릴 또는 트리할로겐메틸로 치환된 C ₆ -C ₁₂ 의 아릴이고, 상기 R ⁶ 은 C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, R ⁷ 는 C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 C ₆ -C ₁₂ 의 아릴이고;

R ³ 는 수소, C ₁ -C ₄ 의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 4-피페리딘이며;

A는 탄소 또는 질소이다.

바람직하게는 상기 R ¹ 은 수소 또는 -NHR ⁴ 이고, 여기서 R ⁴ 는 수소, 메틸 또는 벤질이고;

상기 R ² 는 수소, 불소, 염소, 메틸, -CN, -NHR ⁵ , -NR ⁶ R ⁷ , OR ⁵ , -CN, -NHC(O)R ⁶ , -SO ₂ R ⁶ , -OS(O) ₂ R ⁶ , 피롤리딘, 피페리딘 및 모폴린 중에서 선택되되 상기 벤즈옥사졸 고리의 5번 또는 6번 위치에 치환되는 어느 하나 또는 상기 벤즈옥사졸 고리의 5번 및 6번 위치에 접합되는 벤젠이고, 여기서 R ⁵ 는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 페닐, 4-플루오로페닐, 2,6-디플루오로페닐, 3,5-디플루오로페닐 또는 3,5-디트리플루오로메틸이고, R ⁶ 는 메틸 또는 에틸이고, R ⁷ 은 메틸 또는 페닐이고;

상기 R ³ 는 수소, 메틸 또는 4-피페리딘이며;

상기 A는 탄소 또는 질소이다.

본 발명의 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체의 구체적인 화합물은 하기와 같다.

1) 3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

2) 3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-메틸-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

3) 3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-벤질-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

4) 3-(벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-� �라졸-4-일)피리딘-2-아민;

5) 3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페 리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

6) 3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-일)-N-메틸-5-( 1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민 ;

7) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-카보나이트릴;

8) 3-(5-(클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-N-메틸-5-(1-(피� ��리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

9) 3-(6-메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

10) 3-(6-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

11) 3-(6-플루오로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리� �-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

12) 3-(5-(메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-� ��)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

13) 3-(나프토[2,3-d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일 )-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

14) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-프로필벤즈[d]옥사졸-5-아민;

15) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-메틸벤즈[d]옥사졸-5-아민;

16) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-에틸벤즈[d]옥사졸-5-아민;

17) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-이소프로필벤즈[d]옥사졸-5-아� �;

18) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-부틸벤즈[d]옥사졸-5-아민;

19) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N,N-디메틸벤즈[d]옥사졸-5-아민;

20) 5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(5-(피롤� �딘-1-일)벤즈[d]옥사졸-2-일)피리딘-2-아민;

21) 3-(5-(피페리딘-1-일)벤즈[d]옥사졸-2일)-5-(1-(피� ��리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

22) 3-(5-모폴리노벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리� �-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

23) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-페닐벤즈[d]옥사졸-5-아민;

24) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-메틸-N-페닐벤즈[d]옥사졸-5-아� �;

25) N-(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-� ��)피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-일)아세트아마� ��드;

26) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-이소프로필벤즈[d]옥사졸-6-아� �;

27) 5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-3-(6-(피롤� �딘-1-일)벤즈[d]옥사졸-2-일)피리딘-2-아민;

28) 3-(6-(피페리딘-1-일)벤즈[d]옥사졸-2일)-5-(1-(피� ��리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

29) 3-(6-모폴리노벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리� �-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

30) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-페닐벤즈[d]옥사졸-6-아민;

31) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-메틸-N-페닐벤즈[d]옥사졸-6-아� �;

32) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-(4-플루오로페닐)벤즈[d]옥사졸- 6-아민;

33) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-(2,6-디플루오로페닐)벤즈[d]옥� �졸-6-아민;

34) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-(3,5-디플루오로페닐)벤즈[d]옥� �졸-6-아민;

35) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페� ��)벤즈[d]옥사졸-6-아민;

36) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-아민;

37) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-벤즈[d]옥사졸-6-아민;

38) 3-(5-에톡시벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

39) 3-(5-메톡시벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

40) 3-(6-메톡시벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

41) 3-(6-에톡시벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

42) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[ d ]옥사졸-6-일 메탄설포네이트;

43) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-올;

44) 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-6-올;

45) 3-(벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일) 피리딘-2-아민;

46) 3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-메틸-5-(1메틸-1H-피라졸 -4-일)피리딘-2-아민;

47) 3-(6-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-메틸-1H-피� �졸-4-일)피리딘-2-아민;

48) 3-(벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1H-피라졸-4-일)피리딘 -2-아민;

49) 5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3-(옥사졸로[4,5-c]피리 딘-2-일)피리딘-2-아민;

50) 3-(옥사졸로[4,5-c]피리딘-2-일)-5-(1-(피페리딘-4- 일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민;

51) 5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)- 3-(옥사졸로[4,5-c]피리딘-2-일)피리딘-2-아민; 또는

52) 2-(5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)벤즈[d]� ��사졸.

본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 약학적으로 허용가능한 염이란 표현은 환자에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 갖는 농도로서 이 염에 기인한 부작용이 화학식 1의 염기 화합물의 이로운 효능을 떨어뜨리지 않는 화학식 1의 염기 화합물의 어떠한 유기 또는 무기 부가염을 의미한다. 이들 염은 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 질산, 황산, 과염소산, 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 젖산, 말레산, 푸마린산, 글루콘산, 메탄설폰산, 글리콘산, 숙신산, 타타르산, 갈룩투론산, 엠본산, 글루탐산, 아스파르트산, 옥살산, (D) 또는 (L) 말산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 4-톨루엔술폰산, 살리실산, 시트르산, 벤조산, 말론산 등을 사용할 수 있다. 또한, 이들 염은 알칼리 금속염(나트륨염, 칼륨염 등) 및 알칼리 토금속염(칼슘염, 마그네슘염 등) 등을 포함한다. 예를들면, 산부가염으로는 아세테이트, 아스파테이트, 벤즈에이트, 베실레이트, 바이카보네이트/카보네이트, 바이설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포메이트, 퓨마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루큐로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 하이벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오디드/요오디드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말리에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-나프실레이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/수소 포스페이트/이수소 포스페이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트, 알루미늄, 알기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올아민, 글라이신, 라이신, 마그네슘, 메글루민, 올아민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민, 아연염 등이 포함될 수 있으며, 이들 중 하이드로클로라이드 또는 트리플루오로아세테이트가 바람직하다.

또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체는 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 화합물을 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토니트릴 등에 녹이고 과량의 유기산을 가하거나 무기산의 산 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 이어서 이 혼합물에서 용매나 과량의 산을 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 따른 상기 화학식 1의 화합물은 하기 반응식 1~6에 나타낸 바와 같은 방법으로 제조될 수 있다.

이하, 상기 제조방법을 반응식을 이용하여 설명한다.

제조방법 1

하기 반응식 1로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

출발물질인 화학식 2의 화합물을 브롬화반응시켜 화학식 3의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);

상기 단계 1에서 제조된 화학식 3의 화합물을 염소화반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);

상기 단계 2에서 제조된 화학식 4의 화합물을 화학식 5의 화합물을 치환반응시켜 화학식 6의 화합물을 제조하는 단계(단계 3);

상기 단계 3에서 제조된 화학식 6의 화합물을 고리화반응시켜 화학식 7의 화합물을 제조하는 단계(단계 4);

상기 단계 4에서 제조된 화학식 7의 화합물과 아민화합물(R ⁴ NH ₂ )을 치환반응시켜 화학식 8의 화합물을 제조하는 단계(단계 5);

상기 단계 5에서 제조된 화학식 8의 화합물과 화학식 9의 화합물을 스즈키 커플링 반응(Suzuki coupling reaction)을 수행하여 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계(단계 6); 및

상기 단계 6에서 제조된 화학식 10의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조하는 단계(단계 7)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 1]

(상기 반응식 1에서,

R ² , R ⁴ 및 A는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R ^4' 는 수소 또는 R ⁴ 이고, n은 1-3의 정수이고, 화학식 1a는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며, NBS: N-브로모숙신이미드, NaOBr: 나트륨하이포브로마이드 PPTS: 파라톨루엔설폰산-피리딘 염, Pd(dppf)Cl ₂ :1,1`-비스(디페닐포스피노)페로센디클로로 팔라듐, Pd(Ph ₃ P) ₂ Cl ₂ : 비스트리페닐포스핀디클로로팔라듐, TFA: 트리플루오로아세트산, Boc: 3급-부톡시카보닐을 의미한다)

제조방법 2

하기 반응식 2로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

화학식 11의 화합물과 아민화합물(NH ₂ R ⁴ 또는 NHR ⁶ R ⁷ )을 치환반응시켜 화학식 12의 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및

상기 단계 1에서 제조된 화학식 12의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1b의 화합물을 제조하는 단계(단계 2)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 2]

(상기 반응식 2에서,

R ⁴ , R ⁶ 및 R ⁷ 은 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R ⁸ 은 -NHR ⁴ 또는 -NR ⁶ R ⁷ 이고, n은 1-3의 정수이며, 화학식 1b는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다)

제조방법 3

하기 반응식 3으로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

화학식 11의 화합물을 염기성 처리시켜 화학식 13의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);

상기 단계 1에서 제조된 화학식 13을 알킬화반응시켜 화학식 14의 화합물을 제조하는 단계(단계 2); 및

상기 단계 2에서 제조된 화학식 14의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1c의 화합물을 제조하는 단계(단계 3)를 포함하여 이루어지거나 또는

상기 단계 1에서 제조된 화학식 13의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1d의 화합물을 제조하는 단계(단계 4)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 3]

(상기 반응식 3에서,

R ⁵ 및 R ⁶ 는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, X는 할로겐이고, n은 1-3의 정수이고, R ⁹ 은 -R ⁵ 또는 -SO ₂ R ⁶ 이며, 화학식 1c 및 1d는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다)

제조방법 4

하기 반응식 4로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

화학식 8의 화합물과 화학식 15의 화합물을 스즈키 커플링 반응(Suzuki coupling reaction)을 수행하여 화학식 16의 화합물을 제조하는 단계(단계 1); 및

상기 단계 1에서 제조된 화학식 16의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1e의 화합물을 제조하는 단계(단계 2)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 4]

(상기 반응식 4에서,

R ² , R ³ , R ⁴ 및 A는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R ^4' 는 수소 또는 R ⁴ 이고, n은 1-3의 정수이고, 화학식 1e는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며, A는 탄소 또는 질소이다)

제조방법 5

하기 반응식 5로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

출발물질인 화학식 17의 화합물을 염소화반응시켜 화학식 18의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);

상기 단계 1에서 제조된 화학식 18의 화합물과 화학식 5의 화합물을 치환반응시켜 화학식 19의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);

상기 단계 2에서 제조된 화학식 19의 화합물을 고리화반응시켜 화학식 20의 화합물을 제조하는 단계(단계 3);

상기 단계 3에서 제조된 화학식 20의 화합물과 화학식 9의 화합물을 스즈키 커플링 반응(Suzuki coupling reaction)을 수행하여 화학식 21의 화합물을 제조하는 단계(단계 4); 및

상기 단계 4에서 제조된 화학식 21의 화합물을 탈보호반응시켜 화학식 1f의 화합물을 제조하는 단계(단계 5)를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 5]

(상기 반응식 5에서,

R ² 및 A는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, n은 1-3의 정수이고, 화학식 1f는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다)

제조방법 6

하기 반응식 6으로 표시되는 바와 같이, 본 발명의 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은

화학식 22의 화합물과 화학식 15의 화합물을 스즈키 커플링 반응(Suzuki coupling reaction)을 수행하여 화학식 1g의 화합물을 제조하는 단계를 포함하여 이루어지는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 6]

(상기 반응식 6에서,

R ² , R ³ 및 A는 화학식 1에서 정의한 바와 같고, 화학식 1g는 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다)

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

이때, 상기 이상세포 성장 질환은 폐암, 뼈암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문 주위 암, 위암, 결장암, 유방암, 자궁암, 나팔관 암, 자궁내막 암, 자궁경부암, 질암, 외음부암, 호지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 또는 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 또는 수뇨관 암, 신세포암, 신우암, 중추 신경계(CNS) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종 등이 바람직하다.

또한, 상기 이상세포 성장 질환은 건선, 양성 전립선 비대 또는 망막증인 것이 바람직하다.

나아가, 상기 이상세포 성장 질환은 양성 증식성 질환인 것이 바람직하며, 상기 양성 증식성 질환은 섬유선종, 경화성 선질환, 유두종 등이 바람직하다.

상기 화학식 1로 표시되는 피라졸 및 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 및 수화물은 c-Met, Ron, KDR, Lck, Flt1, Flt3, Tie2, TrkA, TrkB, b-Raf, Aurora-A 등의 단백질 키나아제를 억제할 수 있다.

상기 단백질 키나아제 중 c-Met은 항암제 타겟으로 연구되고 있는 간세포 성장인자(HGF/SF) 수용체로서, 이를 타겟으로 하는 항암제가 많이 보고되어 있다(J. G. Christensen, J. Burrows et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; WO 2004/076412; WO 2006/021881 A; WO 2006/021886; WO 2007/064797).

c-Met은 종양 형성, 증대된 세포 운동성 및 침입성 하에서의 종양 진행, 및 전이에 수반되는 폐암, 위암, 피부암, 신장암, 직장암, 췌장암 등의 많은 인간 암에서 과발현 또는 활성화되어 있다(J. G. Christensen et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; W. G. Jiang et al., Critical Reviews in Oncology/Hematology, 2005, 53, 35-69). c-MET 및 이의 리간드인 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 정상적으로는 주로 상피 및 간엽 기원의 세포 각각으로 한정되어 발현된다. c-MET 및 HGF/SF는 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 전이, 세포 증식 및 생존, 형태 형성성 분화 및 3-차원적 관상 구조물(신 세뇨관 세포, 선 형성 등)의 조직화에서 중요한 것으로 밝혀졌다. HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-MET 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 반응(증식, 운동성, 침입성 등)을 유도한다.

또한 c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 다양한 인간 암에서 증가된 수준으로 공-발현되는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 수용체 및 리간드는 통상적으로 상이한 세포 유형에 의해 발현되기 때문에, c-Met 신호전달은 대부분 보편적으로 종양-기질(tumor-stroma) 상호작용에 의해 조절된다.

또한, c-Met은 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 키나아제를 활성화시키는 생식계 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다.

c-Met 및/또는 HGF/SF의 발현은 상이한 유형의 암(폐, 결장, 유방, 전립선, 간, 췌장, 뇌, 신장, 난소, 위, 피부, 뼈 등의 암)의 질환 진행 상태와 연관되어 있으며, c-Met 또는 HGF/SF의 과발현은 폐, 간, 위 및 유방을 포함한 많은 주요 인간 암에서 나쁜 예후 및 질환 결과와 상관되는 것으로 밝혀졌다. 또한, c-Met은 췌장암, 신경교종 및 간세포암과 같은 성공적인 치료법이 없는 암에 직접 관련되어 있다고 보고되었으며, c-Met이 과발현되면서 ERBB3 신호전달체계 활성화로 야기된 폐암이 게피티니브(Gefitinib; 이레사(상품명:Irresa))에 내성을 갖게 된다고 보고되었다 (J. A. Engelman, K. Zejnullahu et. al. Science, 2007, 316, 1039-043).

본 발명에 따른 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 c-Met 키나아제 활성 실험에서 IC ₅₀ 가 20 μM 이하의 c-Met 키나아제 저해 활성을 갖는 결과를 나타내었다.

또한, 본 발명에 따른 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 암세포 증식억제 실험에서 GI ₅₀ 가 HT-29, A549 및 SK-MEL-28에 대해서 100 μM 이하의 암세포 증식억제 활성을 갖는 결과를 나타내었다.

따라서, 본 발명에 따른 피라졸 및 벤즈옥사졸 치환된 피리딘 유도체 또는 이의 약학적인 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 c-Met의 발현으로부터 유도되는 상술한 각종 암을 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.

경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 화합물의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.001-100 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.01-35 mg/kg/일이다. 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.07-7000 mg/일이며, 바람직하게는 0.7-2500 ㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

하기 실시예에서, "Et"는 에틸을 의미하고, "Me"는 메틸을 의미하고, " t -Bu"는 3급-부틸을 의미하고, "Boc"는 3급-부톡시카보닐을 의미하고, "EtOAc"는 에틸 아세테이트를 의미하고, "NEt ₃ " 또는 "Et ₃ N"은 트리에틸아민을 의미하고, "Et ₂ O"는 디에틸에테르를 의미하고, "MeOH"는 메탄올을 의미하고, "DMSO"는 디메틸설폭사이드를 의미하고, "CDCl ₃ "는 중수소화 클로로폼을 의미하고, "CH ₂ Cl ₂ "는 메틸렌클로라이드(이염화탄소)를 의미하고, "DMF"는 디메틸 폼아마이드를 의미하고, "SOCl ₂ "는 티오닐클로라이드를 의미하고, "MsCl"는 메탄설포닐클로라이드를 의미하고, "PPTS"는 파라톨루엔설폰산-피리딘 염을 의미하고, "TFA"는 트리플루오로아세트산을 의미하고, "X-Phos"는 2-디사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트리아이소 프로필바이페닐을 의미하고, " t -Butyl X-Phos"는 2-디-3급-부틸포스피노-2',4',6'-트리아이소프로 필바이페닐을 의미하고, "Pd(Ph ₃ P) ₂ Cl ₂ "는 비스트리페닐포스핀디클로로팔라듐을 의미하고, "Pd ₂ (dba) ₃ "는 트리스(디벤질리딘아세톤)디팔라듐을 의미하고, "Pd(dppf)Cl ₂ "는 1,1'-비스(디페닐포스피노페로센)디클로팔라� �을 의미하고, " t -BuONa"는 나트륨3급-부톡사이드를 의미하고, "Na ₂ CO ₃ "는 탄산나트륨를 의미하고, "K ₂ CO ₃ "는 탄산칼륨을 의미하고, "KI"는 요오드화칼륨을 의미하고, "MgSO ₄ "는 황산마그네슘을 의미하고, "KOH"는 수산화칼륨을 의미한다.

<실시예 1> 3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

단계 1: 5-브로모-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-카복� �산의 제조

2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-카르복실산� �로부터 참조문헌에 나와 있는 방법으로 목적화합물(5-브로모-2-옥소-1,2-디하이드로피� ��딘-3-카복실산)을 얻었다(참조문헌: A. D. Cale, Jr., T. W. Gero et. al. J. Med. Chem. 1989, 32, 2178-2199; 미국특허 등록번호 5,034,531).

단계 2: 5-브로모-2-클로로니코티노일 클로라이드의 제조

반응용기에 5-브로모-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-카복� �산(20.0 g, 91.7 mmol), 티오닐클로라이드(SOCl ₂ , 91.7 mL)와 DMF(1.4 mL)를 차례로 넣은 후, 70-80 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물의 온도를 실온으로 낮추고 반응물을 감압농축하여 주황색 고체의 목적화합물(5-브로모-2-클로로니코티노일 클로라이드)을 얻었다(22.7 g 97%). 상기 화합물을 더 이상의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

단계 3: 5-브로모-2-클로로-N-(5-클로로-2-하이드록시페� ��)니코틴아마이드의 제조

2-아미노-4-클로로페놀(14.5 g)과 트리에틸아민(12.8 mL)이 용해되어 있는 메틸렌클로라이드 용액에 5-브로모-2-클로로니코티노일 클로라이드(22.7 g, 89.1 mmol)를 얼음중탕을 이용하여 0 ℃에서 천천히 넣었다. 반응물의 온도를 실온으로 높이고 질소분위기 하에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물에 넣고 30분 동안 교반한 후 유기층을 분리하고, 수층을 메틸렌클로라이드를 이용하여 추출하였다. 혼합한 유기층을 무수 황산마그네슘을 이용하여 건조시키고, 감압농축하였다. 상기 농축물에 에틸에테르를 넣고 30분 동안 교반한 후, 여과하여 갈색 고체의 목적화합물(5-브로모-2-클로로-N-(5-클로로-2-하 이드록시페닐)니코틴아마이드)을 얻었다(16.5 g, 51%). 상기 화합물은 더 이상의 정제 없이 다음 반응에 사용하였다.

단계 4: 2-(5-브로모-2-클로로피리딘-3-일)-5-클로로벤즈 [d]옥사졸의 제조

반응용기에 5-브로모-2-클로로-N-(5-클로로-2-하이드록시페� ��)니코틴아미드(16.5 g), 파라톨루엔설폰산 피리딘염(2.9 g) 및 크실렌(xylene, 228 mL)을 넣고, 150~170 ℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물의 온도를 약 100 ℃ 로 낮추고 반응 중 생성된 타르가 흘러나오지 않게 반응물을 여과하고, 뜨거운 크실렌으로 생성된 타르를 여러 번 씻고 여과하였다. 여액을 감압농축하고, 에틸에테르에 농축물을 넣고 30분 동안 교반하였다. 에틸에테르에 용해되지 않은 고체를 여과하고, 차가운 에틸아세테이트로 씻어 준 후 건조하여 갈색 고체의 목적화합물(2-(5-브로모-2-클로로피리딘-3-일)-5 -클로로벤즈[d]옥사졸)을 얻었다(7.2 g, 45%).

¹ H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) 8.66-8.62 (m, 2H), 7.85 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H).

단계 5: 5-브로모-N-3급-부틸-3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2 -일)피리딘-2-아민의 제조

고압반응용기(sealed tube)에 2-(5-브로모-2-클로로피리딘-3-일)-5-클로로벤즈 [d]옥사졸(8.1 g), 3급 부틸아민(50.4 mL) 및 디메틸폼아마이드(60 mL)를 넣고 마개를 막아 밀봉하였다. 반응물을 50-70 ℃에서 65시간 동안 교반한 후 감압농축하였다. 고체 농축물에 에틸에테르를 넣고 40-50 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 얼음 중탕을 이용하여 냉각시켰다. 생성된 고체를 여과하고 차가운 에틸에테르로 씻어주어 등황색 고체의 목적화합물(5-브로모-N-3급-부틸-3-(5-클로로벤� ��[d]옥사졸-2-일)피리딘-2-아민)을 얻었다(5.2 g, 57%).

¹ H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.64 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.47 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₁₆ H ₁₅ NBrClN ₃ O(M ⁺ ) 381.0, 379.0, found 380.9.

단계 6: 3급-부틸 4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5-(5-클로로벤즈[d]옥사 졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1 -카복실레이트의 제조

반응용기에 5-브로모-N-3급-부틸-3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2 -일)피리딘-2-아민(3.5 g, 9.3 mmol), 3급-부틸 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일 )-1H-피라졸-1-일)-피페리딘-1-카복실레이트(4.6 g), Pd(Ph ₃ P) ₂ Cl ₂ (330 mg) 및 1,4-디옥산(30 mL)을 넣고 질소분위기 및 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응물에 1 M 탄산나트륨 수용액(27.9 mL)을 넣고 2시간 동안 110 ℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 후 반응물을 셀라이트를 이용하여 여과하고 여액을 농축하였다. 농축물에 물을 넣어 주고 메틸렌클로라이드로 여러 번 추출하였다. 혼합한 유층을 황산마그네슘으로 건조하고 감압농축하였다. 농축물에 에틸에테르를 넣고 10분 동안 교반하고 여과하여 초록색 고체의 목적화합물(3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5 -(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-1H-피라졸-1-일)� �페리딘-1-카복실레이트)을 얻었다(4.3 g, 84%).

¹ H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.63 (s, 1H), 8.45 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.30 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.77(s, 1H), 7.72 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.32 (dd, J= 8.6, 2.0 Hz, 1H), 4.35-4.26 (m, 3H), 2.92 (t, J= 12.1 Hz, 2H), 2.20-2.17 (m, 2H), 2.05-1.90 (m, 2H), 1.60 (d, J= 3.7 Hz, 9H), 1.48 (s, 9H) ; GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₉ H ₃₅ ClN ₆ O ₃ (M ⁺ ) 550.3, found 550.2.

여기서 사용된 3급-부틸 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일 )-1H-피라졸-1-일)-피페리딘-1-카복실레이트는 참고문헌에 나와 있는 방법으로 제조하였다(참고문헌: WO 2006/021881).

단계 7: 3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5-(5-클로로 벤즈[d]옥사졸-2-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1- 카복실레이트(1.5 g, 2.7 mmol) 및 트리플루오로아세트산(10 mL) 반응물을 60 ℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물의 온도를 실온으로 낮추고 감압농축하였다. 농축물에 에틸에테르를 넣고 30분 동안 교반한 후 여과하여 연두색 고체의 목적화합물(3-(5-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1 -(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민� �� 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(1.8 g, 85%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.78 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.41 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.86 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 8.7, 1.8 Hz, 1H), 4.64-4.56 (m, 1H), 3.62-3.57 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 2H), 2.36-2.26 (m, 4H) ; GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₀ H ₁₉ ClN ₆ O(M ⁺ ) 394.1, found 394.1.

<실시예 2> 3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-메틸-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 t-부틸아민과 2-아미노-4-클로로페놀 대신 메틸아민과 2-아미노페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 연두색 고체의 목적화합물(3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-메틸-5-(1-(� ��페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(38.8 mg, 65%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.73 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.33 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.78 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.44-7.40 (m, 2H), 4.57-4.52 (m, 1H), 3.56-3.52 (m, 2H), 3.31-3.15 (m, 5H), 2.31-2.24 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₁ H ₂₂ N ₆ O(M ⁺ ) 374.2, found 374.1.

<실시예 3> 3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-벤질-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 t-부틸아민과 2-아미노-4-클로로페놀 대신 벤질아민과 2-아미노페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 연두색 고체의 목적화합물(3-(벤즈[d]옥사졸-2일)-N-벤질-5-(1-(� ��페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(8.6 mg, 25%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.56 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.44 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.73-7.66 (m, 2H), 7.42-7.26 (m, 7H), 4.60-4.55 (m, 1H), 3.61-3.57 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 2H), 2.42-2.22 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₇ H ₂₆ N ₆ O(M ⁺ ) 450.2, found 450.1.

<실시예 4> 3-(벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-� �라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 대신 2-아미노페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리 딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(52 mg, 63%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.76 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.83 (d, J= 7.5Hz, 1H), 7.72 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.51-7.45 (m, 2H), 4.65-4.60 (m, 1H), 3.62-3.53 (m, 2H), 3.06-2.90 (m, 2H), 2.40-2.29 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₀ H ₂₀ N ₆ O ₂ (M ⁺ ) 360.2, found 360.1.

<실시예 5> 3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페 리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-4-에틸설포닐페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-� ��)-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2 -아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(19 mg, 57%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.76 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.05-7.95 (m, 3H), 4.66-4.55 (m, 1H), 3.62-3.57 (m, 2H), 3.30-3.21 (m, 2H), 2.36-2.29 (m, 5H), 1.35-1.17 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₂ H ₂₄ N ₆ O ₃ S (M ⁺ ) 452.2, found 452.2.

<실시예 6> 3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-일)-N-메틸-5-( 1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민 의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 t-부틸아민과 2-아미노-4-클로로페놀 대신 메틸아민과 2-아미노-4-에틸설포닐페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(5-(에틸설포닐)벤즈[d]옥사졸-2-� ��)-N-메틸-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)� �리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(20 mg, 58%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.55 (s, 1H), 8.48 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.96 (m, 3H), 4.70-4.50 (m, 1H), 3.62-3.58 (m, 2H), 3.26-3.20 (m, 5H), 2.36-2.29 (m, 6H), 1.26 (t, J= 7.4 Hz, 3H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₃ H ₂₆ N ₆ O ₃ S (M ⁺ ) 466.2, found 466.1.

<실시예 7> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-카보나이트릴의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-4-시아노페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)벤즈[d]옥사졸-5-카보� ��이트릴의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(16 mg, 91%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.75 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.47 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.91 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.86 (dd, J= 1.6, 8.5 Hz, 1H), 4.65-4.55 (m, 1H), 3.63-3.50 (m, 4H), 3.39-2.30 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₁ H ₂₀ N ₇ O (MH ⁺ ) 386.2, found 385.9.

<실시예 8> 3-(5-(클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-N-메틸-5-(1-(피� ��리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 t-부틸아민 대신 메틸아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(5-(클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-N-� ��틸-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘 -2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(6 mg, 24%).

¹ H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.64 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.44 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.93 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.49 (dd, J= 8.7, 2.1 Hz, 1H), 4.58-4.40 (m, 1H), 3.44-3.40 (m, 2H), 3.20-3.00 (m, 5H), 2.26-1.97 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₁ H ₂₁ N ₆ O (M ⁺ ) 408.2, found 408.1.

<실시예 9> 3-(6-메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-� �)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-5-메틸페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(6-메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(� ��페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(105 mg, 69%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.52 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.44 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.70 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.33 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 4.49-4.46 (m, 1H), 3.43-3.39 (m, 2H), 3.12-3.09 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.26-2.14 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₁ H ₂₃ N ₆ O (MH ⁺ ) 375.2, found 375.1.

<실시예 10> 3-(6-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4 -일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-5-클로로페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(6-클로로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1 -(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민� �� 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(25 mg, 45%).

¹ H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.56 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.44 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.96 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.5 (dd, J= 2.0, 8.5 Hz, 1H), 4.55-4.48 (m, 1H), 3.46-3.37 (m, 2H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.28-1.99 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₀ H ₂₀ ClN ₆ O (MH ⁺ ) 395.1, found 395.5.

<실시예 11> 3-(6-플루오로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리� �-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-5-플루오로페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(6-플루오로벤즈[d]옥사졸-2-일)-5 -(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아� ��의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(9 mg, 41%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) d 8.78 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.4 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.85-7.81 (m, 1H), 7.56 (dd, J= 2.7, 7.8 Hz, 1H), 7.27-7.24 (m, 1H), 4.63-4.58 (m, 1H), 3.62-3.57 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 2H), 2.36-2.30 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₀ H ₂₀ FN ₆ O (MH ⁺ ) 379.2, found 379.1.

<실시예 12> 3-(5-(메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-� ��)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-4-메틸페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(5-(메틸벤즈[d]옥사졸-2-일)-5-(1-( 피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(24 mg, 33%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.83 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.38 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.64-7.53 (m, 2H), 7.33 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 4.61-4.58 (m, 1H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.29-3.21 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.36-2.30 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₁ H ₂₃ N ₆ O (MH ⁺ ) 375.2, found 375.1.

<실시예 13> 3-(나프토[2,3-d]옥사졸-2-일)-5-(1-(피페리딘-4-일 )-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 1에서 사용한 2-아미노-4-클로로페놀 대신 2-아미노-나프탈레놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1 내지 단계 7과 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(3-(나프토[2,3-d]옥사졸-2-일)-5-(1-(� �페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 이트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(22 mg, 44%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.84 (d, J= 1.96 Hz, 1H), 8.43 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.08-8.01 (m, 3H), 7.60-7.52 (m, 2H), 4.62-4.59 (m, 1H), 3.62-3.56 (m, 2H), 3.24-3.18 (m, 2H), 2.40-2.28 (m, 4H); LC/MS m/z calcd for C ₂₄ H ₂₃ N ₆ O (MH ⁺ ) 411.2, found 411.0.

<실시예 14> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-프로필벤즈[d]옥사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

단계 1: 3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5-(5-(프로필� �미노)벤즈[d]옥사졸-2-일)피리딘-3-일)-1H-피라� ��-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 제조

고압반응용기에 3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5-(5-클로로벤 즈[d]옥사졸-2-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카 복실레이트(198 mg, 0.36 mmol), 트리스(디벤질리딘아세톤)디팔라듐(66 mg), 나트륨-3급-부톡사이드(104 mg), 2-디-3급-부틸포스피노-2',3',6'-트리아이소프로 필바이페닐(61 mg), 프로필아민(0.3 mL) 및 톨루엔(1.2 mL)을 넣고 질소로 반응용기의 공기를 치환한 후 밀봉하였다. 반응물을 110 ℃에서 24시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시킨 후 메틸렌클로라이드로 희석하고 셀라이트를 이용하여 여과하였다. 여액을 농축하고 농축물을 관크로마토그래피로 정제하여 연두색 고체의 목적화합물(3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5 -(5-(프로필아미노)벤즈[d]옥사졸-2-일)-1H-피라� ��-1-일)피페리딘-1-카복실레이트)을 얻었다(99 mg, 48%).

¹ H NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.76 (s, 1H), 8.41 (d, J= 2.5Hz, 1H), 8.28 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.33 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.90 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 6.63 (dd, J= 8.7, 2.3 Hz, 1H), 4.32-4.26 (m, 3H), 3.70 (s, 1H), 3.14 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 2.92 (t, J= 12.2 Hz, 2H), 2.20-2.17 (m, 2H), 1.99-1.94 (m, 2H), 1.73-1.67 (m, 2H), 1.61 (s, 9H), 1.49 (s, 9H), 1.04 (t, J= 7.4 Hz, 3H).

단계 2: 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-프로필벤즈[d]옥사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

반응용기에 3급-부틸-4-(4-(6-(3급-부틸아미노)-5-(5-(프로필� �미노)벤즈[d]옥사졸-2-일)-1H-피라졸-1-일)피페� ��딘-1-카복실레이트(99 mg, 0.17 mmol) 및 트리플루오로아세트산(2 mL)을 넣고, 반응물을 60 ℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물의 온도를 실온으로 낮추고, 감압농축하였다. 농축물에 에틸에테르를 넣고 30분 동안 교반한 후 여과하여 연두색 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-프로필벤즈[d]옥사� ��-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(105 mg, 81%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.89 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.41 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.78 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.36 (dd, J= 8.8, 2.2 Hz, 1H), 4.68-4.58 (m, 1H), 3.63-3.56 (m, 2H), 3.35-3.20 (m, 4H), 2.41-2.27 (m, 4H), 1.83-1.71 (m, 2H), 1.06 (t, J= 7.4 Hz, 3H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₃ H ₂₇ N ₇ O(M ⁺ ) 417.2, found 417.2.

<실시예 15> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-메틸벤즈[d]옥사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 14에서 사용한 프로필아민 대신 메틸아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 14의 단계 1 및 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-메틸벤즈[d]옥사졸- 5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(6 mg, 83%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.83 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.39 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.67 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.16 (dd, J= 8.7, 2.4 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 1H), 3.59 (d, J= 13.5 Hz, 2H), 3.22 (dd, J= 12.6, 3.6 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.40-2.25 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₁ H ₂₃ N ₇ O (M ⁺ ) 389.2, found 389.1.

<실시예 16> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-에틸벤즈[d]옥사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 14에서 사용한 프로필아민 대신 에틸아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 14의 단계 1 및 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-에틸벤즈[d]옥사졸- 5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(3 mg, 48%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.77 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.73 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.31 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 1H), 3.59 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 3.24 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 2.42-2.22 (m, 4H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₂ H ₂₅ N ₇ O (M ⁺ ) 403.2, found 403.1.

<실시예 17> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-이소프로필벤즈[d]옥사졸-5-아� �의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 14에서 사용한 프로필아민 대신 이소프로필아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 14의 단계 1 및 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-이소프로필벤즈[d]� ��사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(9 mg, 41%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.65 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.43 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.76 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.30 (dd, J= 8.7, 2.2 Hz, 1H), 4.65-4.59 (m, 1H), 3.85-3.77 (m, 1H), 3.63-3.59 (m, 2H), 3.27-3.22 (m, 2H), 2.43-2.31 (m, 4H), 1.36 (d, J= 6.5 Hz, 6H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₃ H ₂₇ N ₇ O (M ⁺ ) 417.2, found 417.2.

<실시예 18> 2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일) 피리딘-3-일)-N-부틸벤즈[d]옥사졸-5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염의 제조

실시예 14에서 사용한 프로필아민 대신 부틸아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 14의 단계 1 및 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 고체의 목적화합물(2-(2-아미노-5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-부틸벤즈[d]옥사졸- 5-아민의 삼트리플루오로아세트산 염)을 얻었다(13 mg, 85%).

¹ H NMR (300 MHz, CD ₃ OD) δ 8.82 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.40 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.72 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.27 (dd, J= 8.7, 2.1 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 1H), 3.54 (d, J= 15.6 Hz, 2H), 3.23 (d, J= 13.8 Hz, 2H), 2.40-2.30 (m, 4H), 1.79-1.64 (m, 2H), 1.56-1.40 (m, 2H), 1.38-1.24 (m, 2H), 0.99 (t, J= 7.4 Hz, 3H); GC-MS (EI) m/z calcd for C ₂₄ H ₂₉ N ₇ O (M ⁺ ) 431.2, found 431.1.