NOUVEAUX DERIVES TRIAZOLO[4,3-alPYRIDINE, LEUR PROCEDE DE

PREPARATION, LEUR APPLICATION A TITRE DE MEDICAMENTS,

COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES ET NOUVELLE UTILISATION

NOTAMMENT COMME INHIBITEURS DE MET

La présente invention concerne de nouveaux dérivés triazolo[4,3-a]pyhdine, leur procédé de préparation, les nouveaux intermédiaires obtenus, leur application à titre de médicaments, les compositions pharmaceutiques les renfermant et la nouvelle utilisation de tels dérivés triazolo[4,3-a]pyridine.

La présente invention concerne plus particulièrement de nouveaux dérivés triazolo[4,3-a]pyhdine présentant une activité anticancéreuse, via la modulation de l'activité de protéines, en particulier des kinases.

A ce jour, la plupart des composés commerciaux utilisés en chimiothérapie sont des cytotoxiques qui posent des problèmes importants d'effets secondaires et de tolérance par les patients. Ces effets pourraient être limités dans la mesure où les médicaments utilisés agissent sélectivement sur les cellules cancéreuses, à l'exclusion des cellules saines. Une des solutions pour limiter les effets indésirables d'une chimiothérapie peut donc consister en l'utilisation de médicaments agissant sur des voies métaboliques ou des éléments constitutifs de ces voies, exprimés majoritairement dans les cellules cancéreuses, et qui ne seraient pas ou peu exprimés dans les cellules saines. Les protéines kinase sont une famille d'enzymes qui catalysent la phosphorylation de groupes hydroxy de résidus spécifiques de protéines tels que des résidus tyrosine, serine ou thréonine. De telles phosphorylations peuvent largement modifier la fonction des protéines : ainsi, les protéines kinases jouent un rôle important dans la régulation d'une grande variété de processus cellulaires, incluant notamment le métabolisme, la prolifération cellulaire, l'adhésion et la motilité cellulaire, la différentiation cellulaire ou la survie cellulaire, certaines protéines kinases jouant un rôle central dans

l'initiation, le développement et l'achèvement des événements du cycle cellulaire.

Parmi les différentes fonctions cellulaires dans lesquelles l'activité d'une protéine kinase est impliquée, certains processus représentent des cibles attractives pour traiter certaines maladies. Comme exemple, on peut citer notamment l'angiogénèse et le contrôle du cycle cellulaire et ainsi que celui de la prolifération cellulaire, dans lesquels les protéines kinases peuvent jouer un rôle essentiel. Ces processus sont notamment essentiels pour la croissance des tumeurs solides ainsi que d'autres maladies : notamment des molécules inhibitrices de telles kinases sont susceptibles de limiter des proliférations cellulaires non désirées telles que celles observées dans les cancers, et peuvent intervenir dans la prévention, la régulation ou le traitement de maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer ou encore l'apoptose neuronale.

La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés dotés d'effets inhibiteurs vis-à-vis de protéines kinases. Les produits selon la présente invention peuvent ainsi notamment être utilisés pour la prévention ou le traitement de maladies pouvant être modulées par l'inhibition de protéines kinases.

Les produits selon la présente invention présentent notamment une activité anticancéreuse, via la modulation de l'activité de kinases. Parmi les kinases pour lesquelles une modulation de l'activité est recherchée, MET ainsi que des mutants de la protéine MET sont préférées.

La présente invention concerne également l'utilisation desdits dérivés pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de l'homme.

Ainsi, un des objets de la présente invention est de proposer des compositions ayant une activité anticancéreuse, en agissant en particulier vis-

à-vis de kinases. Parmi les kinases pour lesquelles une modulation de l'activité est recherchée, MET est préférée.

Dans la partie pharmacologique ci-après, il est montré dans des tests biochimiques et sur des lignées cellulaires, que les produits de la présente demande inhibent ainsi notamment l'activité d'autophosphorylation de MET et la prolifération des cellules dont la croissance dépend de MET ou de ses formes mutantes.

MET, ou Hepatocyte Growth Factor Receptor, est un récepteur à activité tyrosine kinase exprimé en particulier par les cellules épithéliales et endothéliales. Le HGF, Hepatocyte Growth Factor, est décrit comme le ligand spécifique de MET. Le HGF est sécrété par les cellules mésenchymales et active le récepteur MET qui s'homodimérise. Par voie de conséquence, le récepteur s'autophosphoryle sur les tyrosines du domaine catalytique Y1230, Y1234 et Y1235. La stimulation de MET par le HGF induit la prolifération, le scattering (ou dispersion), la motilité cellulaire, la résistance à l'apoptose, l'invasion et l'angiogénèse.

MET de même que le HGF, sont retrouvés surexprimés dans de nombreuses tumeurs humaines et une grande variété de cancers. MET est aussi retrouvé amplifié dans des tumeurs gastriques et glioblastomes. De nombreuses mutations ponctuelles du gène MET ont aussi été décrites dans des tumeurs, en particulier dans le domaine kinase mais aussi dans le domaine juxtamembranaire et le SEMA domain. Surexpression, amplification ou mutations provoquent l'activation constitutive du récepteur et une dérégulation de ses fonctions.

La présente invention concerne ainsi notamment de nouveaux inhibiteurs de la protéine kinase MET et de ses mutants, pouvant être utilisés pour un traitement anti-prolifératif et anti-métastatique notamment en oncologie.

La présente invention concerne également de nouveaux inhibiteurs de la protéine kinase MET et de ses mutants, pouvant être utilisés pour un traitement anti- angiogénique, notamment en oncologie. La présente invention a pour objet les produits de formule (I):

dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène; un atome d'halogène; un radical aryle ; ou un radical hétéroaryle, ces radicaux aryle et hétéroaryle étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical Rc, -COORc, -CO-Rc ou un radical -CO-NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, tous ces radicaux étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après;

Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou cycloalkyle ; tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, et les radicaux hydroxyle, alcoxy, CN, CF3, -NR1 R2, hétérocycloalkyle, -COOH, -COOaIk, -CONR1 R2 et - NR1 COR2 ; les radicaux alkyle et cycloalkyle, étant de plus éventuellement substitués par un radical aryle ou hétéroaryle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ;

les radicaux cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle ou hétéroaryle étant de plus éventuellement substitués par un radical alkyle lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, O-hétérocycloalkyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ; NR1 R2 étant tel que : soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; NR3R4 étant tel que : soit, R3 et R4 étant identiques ou différents, l'un de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2; NHaIk, N(alk)2, et les radicaux alkyle, phényle, CH2-phényle et hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis

parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2; NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) et alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; ou un radical aryle ou hétéroaryle, ces radicaux aryle et hétéroaryle étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou un radical cycloalkyle, tous deux éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR1 R2, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle eux-mêmes éventuellement substitués comme indiqué ci-après ; Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle; tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, et les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétérocycloalkyle,-NR1 R2, -COOH, -COOaIk et -CONR1 R2, les radicaux aryle ou hétéroaryle étant de plus éventuellement substitués par un radical alkyle lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, O- hétérocycloalkyle et alcoxy;

NR1 R2 étant tel que : soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ;

NR3R4 étant tel que : soit, R3 et R4 étant identiques ou différents, l'un de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, et les radicaux alkyle, phényle et CH2-phényle, dans lesquels les radicaux alkyle ou phényle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy . NH2, NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 6 atomes de carbone,

lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I). La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; un radical phényle éventuellement substitué comme indiqué ci-après; ou un radical pyrazolyle éventuellement substitué par un radical hétérocycloalkyle ou par un radical alkyle lui-même éventuellement substitué par un radical hydroxyle ou par un radical O-hétérocycloalkyle ;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO-NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou cycloalkyle, tous deux éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR1 R2 et phényle lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, alkyle, NH2, NHaIk et N(alk)2 ;

Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle; NR1 R2 est tel que soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ;

NR3R4 étant tel que soit R3 et R4 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle ou alcoxy, soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 ou 2 ; tous les radicaux alkyle (alk) ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle : Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; ou un radical phényle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle; ou un radical pyrazolyle éventuellement substitué par un radical pipéridyle ou par un radical alkyle lui- même éventuellement substitué par un radical hydroxyle ou par un radical tetrahydro-2H-pyran-2yl)oxy;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou cycloalkyle éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy et NR1 R2;

Rd représente un atome d'hydrogène ;

NR1 R2 étant tel que soit R1 et R2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NH2 ; NHaIk et N(alk)2 soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi(s) parmi O, S, N et NH, éventuellement substitué par un radical alkyle, phényle ou -CH2-phényle, ces derniers radicaux étant eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy,. NH2, NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle : Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'iode; un radical phényle éventuellement substitué par un ou deux radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et le radical méthyle; ou un radical pyrazolyle éventuellement substitué par un radical pipéridyle ou par un radical éthyle lui-même éventuellement substitué par un radical hydroxyle ou par un radical tetrahydro-2H-pyran-2yl)oxy;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical cyclopropyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical alcoxy ou NR1 R2;

Rd représente un atome d'hydrogène ,

NR1 R2 étant tel que soit R1 et R2 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical morpholinyle ou pipérazinyle éventuellement substitué sur le second atome d'azole par un radical alkyle; les radicaux alkyle ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a ainsi pour objet les produits de formule (I):

dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène; un atome d'halogène; un radical aryle; ou un radical hétéroaryle, ces radicaux aryle et hétéroaryle étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical Rc, -COORc, -CO-Rc ou un radical -CO-NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, tous ces radicaux étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après;

Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou cycloalkyle ;

tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, et les radicaux hydroxyle, alcoxy, CN, CF3, -NR1 R2, -COOH, -COOaIk, -CONR1 R2 et -NR1 COR2 ; les radicaux alkyle et cycloalkyle étant de plus éventuellement substitués par un radical hétérocycloalkyle, aryle ou hétéroaryle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ; les radicaux cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle ou hétéroaryle étant de plus éventuellement substitués par un radical alkyle lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ;

NR1 R2 étant tel que : soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ;

NR3R4 étant tel que : soit, R3 et R4 étant identiques ou différents, l'un de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres

hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, oxo, alcoxy, NH2; NHaIk,

N(alk)2, et les radicaux alkyle, phényle, CH2-phényle et hétéroaryle, tels que dans ces derniers radicaux les radicaux alkyle, phényle et hétéroaryle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle et alcoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, NH2; NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) et alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Notamment, dans les produits de formule (I), tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, et les radicaux hydroxyle, alcoxy, CN, CF3, -NR1 R2, -COOH, -COOaIk, -CONR1 R2 et -NR1 COR2 ; les radicaux alkyle étant de plus éventuellement substitués par un radical aryle ou hétéroaryle eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ; les radicaux cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle ou hétéroaryle étant de plus éventuellement substitués par un radical alkyle lui-même éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux hydroxyle, alkyle, alcoxy et NR3R4 ;

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; ou un radical aryle ou hétéroaryle, ces radicaux aryle et hétéroaryle étant éventuellement substitués comme indiqué ci-après;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou un radical cycloalkyle, tous deux éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR1 R2, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle eux-mêmes éventuellement substitués comme indiqué ci-après ;

Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle; tous les radicaux définis ci-dessus alkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, aryle et hétéroaryle, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, et les radicaux hydroxyle, alcoxy,

-NR1 R2, -COOH, -COOaIk et -CONR1 R2,

NR1 R2 étant tel que : soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ;

NR3R4 étant tel que : soit, R3 et R4 étant identiques ou différents, l'un de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R3 et R4 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical

alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, hétérocycloalkyle, hétéroaryle ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 3 à 10 chaînons et éventuellement un ou plusieurs autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, et les radicaux alkyle, phényle et CH2-phényle, dans lesquels les radicaux alkyle ou phényle sont eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy . NH2, NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 6 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle :

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; ou un radical phényle éventuellement substitué comme indiqué ci-après;

Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO-NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou cycloalkyle, tous deux éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR1 R2 et phényle lui-même éventuellement

substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, alkyle, NH2, NHaIk et N(alk)2 ;

Rd représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle;

NR1 R2 est tel que soit , R1 et R2 étant identiques ou différents, l'un de R1 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et l'autre de R1 et

R2 représente un atome d'hydrogène, un radical cycloalkyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NR3R4, ou phényle eux-mêmes éventuellement substitués; soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ;

NR3R4 étant tel que soit R3 et R4 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle ou alcoxy, soit R3 et R4 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autre hétéroatome choisi parmi O, S, N et NH, ce radical y compris l'éventuel NH qu'il contient étant éventuellement substitué ; les radicaux cycliques que peuvent former R1 et R2 ou R3 et R4 respectivement avec l'atome d'azote auquel ils sont liés, étant éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents tels que définis ci-dessus ; tous les radicaux alkyle ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle:

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'halogène; ou un radical phényle éventuellement substitué par un atome d'halogène ; Rb représente un atome d'hydrogène, un radical -CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical alkyle ou cycloalkyle éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy et NR1 R2; Rd représente un atome d'hydrogène ;

NR1 R2 étant tel que soit R1 et R2, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les radicaux hydroxyle, alcoxy, NH2 ; NHaIk et N(alk)2 soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical cyclique renfermant de 4 à 7 chaînons et éventuellement un autres hétéroatomes choisi(s) parmi O, S, N et NH, éventuellement substitué par un radical alkyle, phényle ou -CH2-phényle, ces derniers radicaux étant eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy,. NH2, NHaIk et N(alk)2 ; tous les radicaux alkyle (alk) ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

Dans les produits de formule (I) et dans ce qui suit :

- le terme radical alkyle (ou alk) désigne les radicaux, linéaires et le cas échéant ramifiés, méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-

butyle, tert-butyle, pentyle, isopentyle, hexyle, isohexyle et également heptyle, octyle, nonyle et décyle ainsi que leurs isomères de position linéaires ou ramifiés : on préfère les radicaux alkyles renfermant de 1 à 6 atomes de carbone et plus particulièrement les radicaux alkyle renfermant de 1 à 4 atomes de carbone de la liste ci-dessus ;

- le terme radical alcoxy désigne les radicaux linéaires et le cas échéant ramifiés, méthoxy, éthoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy linéaire, secondaire ou tertiaire, pentoxy ou hexoxy ainsi que leurs isomères de position linéaires ou ramifiés : on préfère les radicaux alkoxy renfermant de 1 à 4 atomes de carbone de la liste ci-dessus ;

- le terme atome d'halogène désigne les atomes de chlore, de brome, d'iode ou de fluor et de préférence l'atome de chlore, de brome ou de fluor.

- le terme radical cycloalkyle désigne un radical carbocyclique saturé renfermant 3 à 10 atomes de carbone et désigne ainsi notamment les radicaux cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle et cyclohexyle et tout particulièrement les radicaux cyclopropyl, cyclopentyle et cyclohexyle ;

- le terme radical hétérocycloalkyle désigne ainsi un radical carbocyclique monocyclique ou bicyclique, renfermant de 3 à 10 chaînons interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes, identiques ou différents, choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou de soufre : on peut citer par exemple les radicaux morpholinyle, thiomorpholinyle, homomorpholinyle, aziridyle, azétidyle, pipérazinyle, pipéridyle, homopipérazinyle, pyrrolidinyle, imidazolidinyle, pyrazolidinyle, tétrahydrofuryle, tétrahydrothiényle, tetrahydropyranyle, tetrahydropyranne, oxodihydropyridazinyle, ou encore oxétanyle tous ces radicaux étant éventuellement substitués ; on peut citer notamment les radicaux tetrahydropyranyle, morpholinyle, thiomorpholinyle, homomorpholinyle, pipérazinyle, pipéridyle, homopipérazinyle ou encore pyrrolidinyle,

- le radical -O-hétérocycloalkyle désigne un radical hétérocycloalkyle tel que défini ci-dessus portant une fonction -O- (oxy): on peut citer par exemple les radicaux morpholinyloxy, thiomorpholinyloxy, homomorpholinyloxy, aziridyloxy, azétidyloxy, pipérazinyloxy, pipéridyloxy, homopipérazinyloxy, pyrrolidinyloxy, imidazolidinyloxy, pyrazolidinyloxy, tétrahydrofuryloxy, tétrahydrothiényloxy, tetrahydropyranyloxy, hexahydropyrannoxy, oxodihydropyridazinyloxy, ou encore oxétanyloxy tous ces radicaux étant éventuellement substitués ; on peut citer notamment les radicaux tetrahydro- 2H-pyran-2yloxy, morpholinyloxy, thiomorpholinyloxy, homomorpholinyloxy, pipérazinyloxy, pipéridyloxy, homopipérazinyloxy ou encore pyrrolidinyloxy ;

- les termes aryle et hétéroaryle désignent des radicaux insaturés ou partiellement insaturés, respectivement carbocycliques et hétérocycliques, monocycliques ou bicycliques, renfermant au plus 12 chaînons, pouvant éventuellement contenir un chaînon -C(O), les radicaux hétérocycliques contenant un ou plusieurs hétéroatomes identiques ou différents choisis parmi O, N, ou S avec N, le cas échéant, éventuellement substitué ;

- le terme radical aryle désigne ainsi des radicaux monocycliques ou bicycliques renfermant 6 à 12 chaînons tels que par exemple les radicaux phényle, naphtyle, biphényle, indényle, fluorényle et anthracényle, plus particulièrement les radicaux phényle et naphtyle et encore plus particulièrement le radical phényle. On peut noter qu'un radical carbocyclique contenant un chaînon -C(O) est par exemple le radical tétralone ;

- le terme radical hétéroaryle désigne ainsi des radicaux monocycliques ou bicycliques renfermant 5 à 12 chaînons : des radicaux hétéroaryles monocycliques tels que par exemple les radicaux thiényle tel que 2-thiényle et 3-thiényle, furyle tel que 2-furyle, 3-furyle, pyrannyle, pyrrolyle, pyrrolinyle, pyrazolinyle, imidazolyle, pyrazolyle, pyridyle tel que 2-pyhdyle, 3-pyhdyle et 4-pyhdyle, pyrazinyle, pyrimidinyle, pyridazinyle, oxazolyle, thiazolyle, isothiazolyle, diazolyle, thiadiazolyle, thiathazolyle, oxadiazolyle, isoxazolyle tel que 3- ou 4-isoxazolyle, furazannyle, tétrazolyle libre ou salifié, tous ces

radicaux étant éventuellement substitués parmi lesquels plus particulièrement les radicaux thiényle tel que 2-thiényle et 3-thiényle, furyle tel que 2-furyle, pyrrolyle, pyrrolinyle, pyrazolinyle, imidazolyle, pyrazolyle, oxazolyle, isoxazolyle, pyridyle, pyridazinyle, ces radicaux étant éventuellement substitués ; des radicaux hétéroaryles bicycliques tels que par exemple les radicaux benzothiényle tel que 3-benzothiényle, benzothiazolyle, quinolyle, isoquinolyle, dihydroquinolyle, quinolone, tétralone, adamentyl, benzofuryle, isobenzofuryle, dihydrobenzofuranne, éthylènedioxyphényle, thianthrényle, benzopyrrolyle, benzimidazolyle, benzoxazolyle, thionaphtyle, indolyle, azaindolyle, indazolyle, purinyle, thiénopyrazolyle, tétrahydroindazolyle, tétrahydrocyclopentapyrazolyle, dihydrofuropyrazolyle, tétrahydropyrrolopyrazolyle, oxotétrahydropyrrolopyrazolyle, tétrahydropyranopyrazolyle, tétrahydropyhdinopyrazolyle ou oxodihydropyridino-pyrazolyle, tous ces radicaux étant éventuellement substitués ;

Comme exemples de radicaux hétéroaryles ou bicycliques, on peut citer plus particulièrement les radicaux pyrimidinyle, pyridyle, pyrrolyle, azaindolyle, indazolyle ou pyrazolyle, benzothiazolyle ou benzimidazolyle éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants identiques ou différents comme indiqué ci-dessus.

Le ou les radicaux carboxy des produits de formule (I) peuvent être salifiés ou estérifiés par les groupements divers connus de l'homme du métier parmi lesquels on peut citer, par exemple :

- parmi les composés de salification, des bases minérales telles que, par exemple, un équivalent de sodium, de potassium, de lithium, de calcium, de magnésium ou d'ammonium ou des bases organiques telles que, par exemple, la méthylamine, la propylamine, la triméthylamine, la diéthylamine, la triéthylamine, la N,N-diméthyléthanolamine, le tris (hydroxyméthyl) amino méthane, l'éthanolamine, la pyridine, la picoline, la dicyclohexylamine, la

morpholine, la benzylamine, la procaïne, la lysine, l'arginine, l'histidine, la N-méthylglucannine,

- parmi les composés d'estérification, les radicaux alkyle pour former des groupes alcoxy carbonyle tel que, par exemple, méthoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, tert-butoxycarbonyle ou benzyloxycarbonyle, ces radicaux alkyles pouvant être substitués par des radicaux choisis par exemple parmi les atomes d'halogène, les radicaux hydroxyle, alcoxy, acyle, acyloxy, alkylthio, amino ou aryle comme, par exemple, dans les groupements chlorométhyle, hydroxypropyle, méthoxyméthyle, propionyloxyméthyle, méthylthiométhyle, diméthylaminoéthyle, benzyle ou phénéthyle.

Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques des produits de formule (I) peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydrique, bromhydhque, iodhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, propionique, acétique, trifluoroacétique, formique, benzoïque, maléique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, ascorbique, les acides alcoylmonosulfoniques tels que par exemple l'acide méthanesulfonique, l'acide éthanesulfonique, l'acide propanesulfonique, les acides alcoyldisulfoniques tels que par exemple l'acide méthanedisulfonique, l'acide alpha, bêta-éthanedisulfonique, les acides arylmonosulfoniques tels que l'acide benzènesulfonique et les acides aryldisulfoniques.

On peut rappeler que la stéréoisomérie peut être définie dans son sens large comme l'isomérie de composés ayant mêmes formules développées, mais dont les différents groupes sont disposés différemment dans l'espace, tels que notamment dans des cyclohexanes monosubstitués dont le substituant peut être en position axiale ou équatoriale, et les différentes conformations rotationnelles possibles des dérivés de l'éthane. Cependant, il existe un autre type de stéréoisomérie, dû aux arrangements spatiaux différents de substituants fixés, soit sur des doubles liaisons, soit sur des cycles, que l'on appelle souvent isomérie géométrique ou isomérie cis- trans. Le terme stéréoisomères est utilisé dans la présente demande dans

son sens le plus large et concerne donc l'ensemble des composés indiqués ci-dessus.

Lorsque NR1 R2 ou NR3R4 forme un cycle comme défini ci-dessus, un tel cycle aminé peut être choisi notamment parmi les radicaux pyrrolidinyle, pyrazolidinyle, pyrazolinyle, pipéridyle, azépinyle, morpholinyle, homomorpholinyle, pipérazinyle ou homopipérazinyle, ces radicaux étant eux- mêmes éventuellement substitués comme indiqué ci-dessus ou ci-après : par exemple par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy, phényle et CH2-phényle, les radicaux alkyle ou phényle étant eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle, alcoxy,. NH2, NHaIk et N(alk)2

Le cycle NR1 R2 ou NR3R4 peut plus particulièrement être choisi parmi les radicaux pyrrolidinyle, morpholino éventuellement substitué par un ou deux radicaux alkyle ou pipérazinyle éventuellement substitué sur le second atome d'azote par un radical alkyle, phényle, ou et CH2-phényle, eux-mêmes éventuellement substitués par un ou plusieurs radicaux identiques ou différents choisis parmi les atomes d'halogène et les radicaux alkyle, hydroxyle et alcoxy.

La présente invention a pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou ci-après dans laquelle:

Ra représente un atome d'hydrogène ; un atome d'iode; ou un radical phényle éventuellement substitué par un atome d'halogène ; Rb représente un atome d'hydrogène, un radical CO-Rc ou un radical -CO- NRcRd; avec Rc représente un radical cyclopropyle ou un radical alkyle éventuellement substitué par un radical alcoxy ou NR1 R2;

Rd représente un atome d'hydrogène ,

NR1 R2 étant tel que soit R1 et R2 identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle soit R1 et R2 forment avec l'atome d'azote auquel ils sont liés un radical morpholinyle ou pipérazinyle éventuellement substitué sur le second atome d'azole par un radical alkyle; les radicaux alkyle ou alcoxy ci-dessus renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a tout particulièrement pour objet les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus répondant aux formules suivantes :

- λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl]cyclopropanecarboxamide - 1 -[2-(morpholin-4-yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée

- 1 -[2-(4-méthylpipérazin-1 -yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée.

- 1 -(2-méthoxyéthyl)-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-yl]urée

- 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl)sulfanyl]-1 ,3-benzothiazol-2- amine

- 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-amine - λ/-{6-[6-(4-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl]-1 ,3- benzothiazol-2-yl}cyclopropanecarboxamide

- 6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-amine

- λ/-(6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide - λ/-(6-{[6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(3-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl] sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 -(2-hydroxyéthyl)-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxannide

- λ/-(6-{[6-(1 -pipéridin-4-yl-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyπdin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques desdits produits de formule (I).

La présente invention a encore pour objet tout procédé de préparation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus. Les produits selon l'invention peuvent être préparés à partir de méthodes conventionnelles de chimie organique.

Préparation de composés de formule (I)

Les schémas 1 , 2 et 3 ci-dessous sont illustratifs des méthodes utilisées pour la préparation des produits de formule (I). A ce titre, ils ne sauraient constituer une limitation de la portée de l'invention, en ce qui concerne les méthodes de préparation des composés revendiqués.

Les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus selon la présente invention peuvent ainsi notamment être préparés selon le procédé décrit dans les schémas 1 ,2 et 3 ci-dessous.

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 1 tel que défini ci-après.

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 2 tel que défini ci-après.

La présente invention a ainsi également pour objet le procédé de préparation de produits de formule (I) selon le schéma 3 tel que défini ci-après. Schéma 1 :

cychsat ⁱ on

( I )

Rb = H

Dans le schéma 1 ci-dessus, les substituants Ra et Rb ont les significations indiquées ci-dessus.

Les composés (I) pour lesquels Ra et Rb ont les mêmes significations peuvent être obtenus à partir des composés (I) pour lesquels Rb = H.

Rc-COCl

( I ) Rb = H Rb = CORc

Plus particulièrement, les composés (I) pour lesquels Rb = CORc (avec Rc comme défini ci-dessus) peuvent être obtenus, par exemple : par réaction d'un chlorure d'acide de formule Rc-COCI en présence, par exemple, d'un solvant comme la pyridine à une température voisine de 20 ⁰ C, par réaction d'un anhydride d'acide de formule Rc-CO-O-CO-Rc, en présence, par exemple d'un solvant comme la pyridine à une température voisine de 20 ⁰ C, par réaction avec un acide carboxylique de formule Rc-COOH dans les conditions, par exemple, décrites par D. DesMarteau et coll., (Chem. Lett., 2000, 9, 1052) en présence de 1 -hydroxybenzotriazole et de 1 -(3- diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide et en présence d'une base telle la triéthylamine, à une température comprise entre 20°C et la température du reflux du solvant.

( I ) ( I )

Rb = H Rb = CO-O-Rc

Plus particulièrement, les composés (I) pour lesquels Rb = CO-O-Rc (avec Rc comme défini ci-dessus) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction avec un chlorocarbonate Rc-O-COX (X = Cl) sur les composés (I) pour lesquels Rb = H, dans un solvant tel le tétrahydrofurane, en présence d'une

base telle l'hydrogénocarbonate de sodium, ou dans la pyridine, à une température voisine de 20 ⁰ C. )

( I ) Rb = H

Rc(Rd)NH

Rb = CON(Rc)Rd

Plus particulièrement, les composés (I) pour lesquels Rb = CON(Rc)Rd (avec Rc et Rd comme définis ci-dessus) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction des carbamates (D) où R = phényl, avec des aminés Rc(Rd)NH (avec Rc et Rd tels que définis ci-dessus) en présence d'un solvant aprotique tel le tétrahydrofurane, à une température voisine de 20 ⁰ C.

Les carbamates (D) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction avec un chlorocarbonate R-O-COX (X = Cl) sur les composés (I) pour lesquels Rb = H, dans un solvant tel le tétrahydrofurane, en présence d'une base telle l'hydrogénocarbonate de sodium, ou dans la pyridine, à une température voisine de 20°C.

( I ) ( I )

Rb = H Rb = Rc

Plus particulièrement, les composés (I) pour lesquels Rb = Rc (avec Rc comme défini ci-dessus) peuvent être obtenus, par exemple :

- par déprotection des carbamates (E) avec R = t-Butyl selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple avec de l'acide trifluoroacétique, dans un solvant comme le dichlorométhane à une température voisine de 20 ⁰ C

- à partir des composés (I) pour lesquels Rb = H par application des méthodes décrites dans le brevet EP 0408437 ou par R. A Glennon et coll. (Journal of Médicinal Chemistry, 1981 , 24, 766-769).

Les carbamates (E) peuvent être obtenus, par exemple, par réaction des carbamates (D) où R = t-butyl, avec des halogénures Rc-X (avec Rc tel que défini ci-dessus) en présence d'un solvant comme la N,N-diméthylformamide, en présence d'une base comme l'hydrure de sodium, à une température comprise entre 20 ⁰ C et 90°C.

Les composés (I) pour lesquels Rb = H peuvent être obtenus par cyclisation des composés (C) selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple par application des méthodes décrites par H. Masaichi et coll. (Journal of Médicinal Chemistry, 2007, 50(18), 4453-4470), par réaction du

thiocyanate de potassium et du brome en présence d'acide comme l'acide acétique à une température comprise entre 20 ⁰ C et la température de reflux du solvant.

Les composés (C) peuvent être obtenus par réduction des composés (B) selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple à l'aide de chlorure d'étain dans un solvant comme l'éthanol, ou alternativement à l'aide d'hydrogène en présence d'un catalyseur comme le palladium sur charbon ou le nickel de Raney.

Les composés (B) peuvent être obtenus par couplage des composés (A) avec Ra tel que défini ci-dessus avec le tétrafluoroborate de 4- nitrobenzènediazonium (produit commercial), dans les conditions décrites par exemple par M.A. Biamonte et coll. (Journal of Organic Chemistry, 2005, 70,

717-720) en présence ou non d'une base comme l'hydrogénocarbonate de sodium, par exemple dans un solvant comme le diméthylsulfoxyde, l'acétone ou l'acétonitrile à une température comprise entre 20 ⁰ C et la température de reflux du solvant.

( A1 ) ( A2 ) ( A )

Les composés (A) sont soit commerciaux, soit préparés par application des méthodes décrites dans le brevet EP 0254623 ou dans le brevet US 4244953 à partir des dérivés hydrazino de formule (A2) par réaction avec le disulfure de carbone dans un solvant tel que la pyridine ou le chloroforme à une température comprise entre 20°C et le reflux du solvant.

Les composés (A2) sont soit commerciaux, soit obtenus par application des méthodes décrites dans le brevet EP 0254623, dans le brevet US 4244953 ou selon R. Church et coll. (Journal of Organic Chemistry 1995, 60, 3750-

3758) à partir des dérivés 2-chloro pyridines (A1 ) par action de l'hydrazine ou de l'hydrate de l'hydrazine.

Les composés (A1 ) sont soit commerciaux, soit peuvent être obtenus à partir de la 2-chloro-5-iodopyridine (composé commercial), par exemple : à partir des acides boroniques de formule Ra-B(OH)2 en présence de phosphate de potassium et de tétrakistriphénylphosphine de palladium dans un solvant comme le diméthylsulfoxyde à une température voisine de 80 ⁰ C, à partir des esters boroniques Ra-B(OR)2 en présence de dichloro-bis (triphénylphosphine) de palladium dans un solvant tel que, par exemple, le 1 ,2-diméthoxyéthane, en présence d'une base telle la soude 1 N, à une température voisine de 80 ⁰ C.

Ra-B(OH) ₂

( D ( I )

Ra = I et Rb = H Rb = H

Les composés (I) pour lesquels Rb = H peuvent également être obtenus à partir du composé (I) pour lequel Rb = H et Ra = I par réaction des acides boroniques de formule Ra-B(OH)2 ou par réaction des esters boroniques Ra- B(OR)2 comme décrit pour la préparation des composés (A1 ).

Schéma 2 :

O ₂ N. _^ S fonctionnalisation 0 N _x /-\ s réduction H ₂ N^ /\ s

-NH, // — N _/ \) — ^H N

^{^} N Rb c^^-N Rb

( G )

diazotation

couplage

( H )

( A )

Dans le schéma 2 ci-dessus, les substituants Ra et Rb ont les significations indiquées ci-dessus. Les composés (I) pour lesquels Ra et Rb ont les mêmes significations indiquées ci-dessus peuvent être obtenus par réaction de couplage des composés (A) avec Ra tel que défini ci-dessus avec les composés (H) avec Rb tel que défini ci-dessus, comme décrit pour la préparation des composés (B) ci-dessus. Les composés (H) pour lesquels Rb a les mêmes significations indiquées ci- dessus peuvent être obtenus par diazotation des composés (G) selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple, par action d'acide nitreux (HNO2) ou de nitrite de sodium (NaNO2) en présence d'acide comme l'acide tétrafluoroborique aqueux, à une température voisine de 20 ⁰ C. Les composés (G) pour lesquels Rb a les mêmes significations indiquées ci- dessus, peuvent être obtenus par réduction des composés (F) selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple, à l'aide d'hydrogène en présence d'un catalyseur comme le palladium sur charbon ou le nickel de Raney, dans un solvant comme le tétrahydrofurane par exemple, à une température comprise entre 20 ⁰ C et le reflux du solvant.

Les composés (F) pour lesquels Rb a les mêmes significations indiquées ci- dessus, peuvent être obtenus à partir du 2-amino-6-nitro-benzothiazole (produit commercial) comme décrit ci-dessus pour la préparation des composés (I) à partir des composés (I) pour lesquels Rb=H.

Schéma 3 :

réduction

( L )

Dans le schéma 3 ci-dessus, les substituants Ra et Rc ont les significations indiquées ci-dessus.

Les composés (I) pour lesquels Ra a les mêmes significations que ci-dessus et pour lesquels Rb = CORc peuvent être obtenus par réaction de couplage des composés (L) avec Ra tel que défini ci-dessus avec les composés (K) avec Rc tel que défini ci-dessus, dans les conditions décrites par exemple par R. Varala et coll. (Chemistry Letters, 2004, 33(12), 1614-1615), par M. Winn et coll. (Journal of Médicinal Chemistry, 2001 , 44, 4393-4403) en présence d'une base comme par exemple le carbonate de potassium dans un solvant comme le diméthylsulfoxide à une température comprise entre 20 ⁰ C et la température de reflux du solvant. De telles réactions peuvent également être réalisées sous microondes.

Les composés (K) pour lesquels Rc a les mêmes significations indiquées ci- dessus peuvent être obtenus par exemple, par réduction des composés (J) avec du DL-dithiotréitol, en présence d'hydrogénocarbonate de sodium ou de dihydrogénophosphate de potassium dans un solvant tel l'éthanol et à une température comprise entre 20 ⁰ C et le reflux du solvant.

Les composés (J) pour lesquels Rc a les mêmes significations indiquées ci- dessus peuvent être obtenus à partir du thiocyanate de 2-amino-1 ,3- benzothiazol-6-yle (produit commercial) comme décrit ci-dessus pour la préparation des composés (I) avec Rb = CORc à partir des composés (I) avec Rb = H.

bromation

( L1 ) ( L )

Les composés (L) sont soit commerciaux (Ra = H), soit préparés par bromation des composés (L1 ), selon une méthode usuelle pour l'homme de métier, par exemple selon les conditions décrites par E. S. Hand et coll., (Journal of Organic Chemistry, 1980, 45, 3738-3745) ou à l'aide de brome dans un solvant comme l'éthanol à une température comprise entre 20 ⁰ C et le reflux du solvant.

Les composés (L1 ) sont soit commerciaux (Ra = H), soit peuvent être obtenus à partir de la 6-bromo[1 ,2-4triazolo[4,3-a]pyridine (produit commercial) par réaction de couplage par application des méthodes décrites par C. Enguehard et coll. (Helvetica Chimica Acta (2001 ), 84, 3610-3614), par exemple :

- à partir des acides boroniques de formule Ra-B(OH)2 en présence de d'hydrogénocarbonate de sodium et de tétrakistriphénylphosphine de palladium dans un solvant comme le diméthylsulfoxyde ou le dioxanne à une température voisine de 80°C,

- à partir des esters boroniques Ra-B(OR)2 en présence de dichloro-bis (triphénylphosphine) de palladium dans un solvant tel que, par exemple, le 1 ,2-diméthoxyéthane, en présence d'une base telle la soude 1 N, à une température voisine de 80 ⁰ C.

Parmi les produits de départs de formule(s) (A), (A1 ), (A2), (F), (G), (L) et (L1 ), certains sont connus et peuvent être obtenus soit commercialement, soit selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier, par exemple à partir de produits commerciaux.

II est entendu pour l'homme du métier que, pour la mise en œuvre des procédés selon l'invention décrits précédemment, il peut être nécessaire d'introduire des groupements protecteurs des fonctions amino, carboxyle et alcool afin d'éviter des réactions secondaires.

La liste suivante, non exhaustive, d'exemples de protection de fonctions réactives peut être citée :

- les groupements hydroxyle peuvent être protégés par exemple par les radicaux alkyle tels que tert-butyle, triméthysilyle, tert-butyldiméthylsilyle, méthoxyméthyle, tétrahydropyrannyle, benzyle ou acétyle,

- les groupements amino peuvent être protégés par exemple par les radicaux acétyles, trityle, benzyle, tert-butoxycarbonyle (BOC), benzyloxycarbonyle, phtalimido ou d'autres radicaux connus dans la chimie des peptides,

Les fonctions acides peuvent être protégées par exemple sous forme d'esters formés avec les esters facilement clivables tels que les esters benzyliques ou tert- butyliques ou des esters connus dans la chimie des peptides.

On trouvera une liste de différents groupements protecteurs utilisables dans les manuels connus de l'homme du métier et par exemple dans le brevet BF 2 499 995.

On peut noter que l'on peut soumettre, si désiré et si nécessaire, des produits intermédiaires ou des produits de formule (I) ainsi obtenus par les procédés indiqués ci-dessus, pour obtenir d'autres intermédiaires ou d'autres produits de formule (I), à une ou plusieurs réactions de transformations connues de l'homme du métier telles que par exemple : a) une réaction d'estérification de fonction acide, b) une réaction de saponification de fonction ester en fonction acide, c) une réaction de réduction de la fonction carboxy libre ou estérifiée en fonction alcool, d) une réaction de transformation de fonction alcoxy en fonction hydroxyle, ou encore de fonction hydroxyle en fonction alcoxy, e) une réaction d'élimination des groupements protecteurs que peuvent porter les fonctions réactives protégées, f) une réaction de salification par un acide minéral ou organique ou par une base pour obtenir le sel correspondant, g) une réaction de dédoublement des formes racémiques en produits dédoublés, lesdits produits de formule (I) ainsi obtenus étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères.

Les réactions a) à g) peuvent être réalisées dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier telles que, par exemple, celles indiquées ci- après.

a) Les produits décrits ci-dessus peuvent, si désiré, faire l'objet, sur les éventuelles fonctions carboxy, de réactions d'estérification qui peuvent être réalisées selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.

b) Les éventuelles transformations de fonctions ester en fonction acide des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, réalisées dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier notamment par hydrolyse

acide ou alcaline par exemple par de la soude ou de la potasse en milieu alcoolique tel que, par exemple, dans du méthanol ou encore par de l'acide chlorhydrique ou sulfurique.

La réaction de saponification peut être réalisée selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier, telles que par exemple dans un solvant tel que le méthanol ou l'éthanol, le dioxane ou le diméthoxyéthane, en présence de soude ou de potasse.

c) Les éventuelles fonctions carboxy libre ou estérifié des produits décrits ci- dessus peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool par les méthodes connues de l'homme de métier : les éventuelles fonctions carboxy estérifié peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool par les méthodes connues de l'homme du métier et notamment par de l'hydrure de lithium et d'aluminium dans un solvant tel que par exemple le tétrahydrofuranne ou encore le dioxane ou l'éther éthylique.

Les éventuelles fonctions carboxy libre des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, réduites en fonction alcool notamment par de l'hydrure de bore.

d) Les éventuelles fonctions alcoxy telles que notamment méthoxy des produits décrits ci-dessus peuvent être, si désiré, transformées en fonction hydroxyle dans les conditions usuelles connues de l'homme du métier par exemple par du tribromure de bore dans un solvant tel que par exemple le chlorure de méthylène, par du bromhydrate ou chlorhydrate de pyridine ou encore par de l'acide bromhydrique ou chlorhydrique dans de l'eau ou de l'acide trifluoro acétique au reflux.

e) L'élimination de groupements protecteurs tels que par exemple ceux indiqués ci-dessus peut être effectuée dans les conditions usuelles connues de l'homme de métier notamment par une hydrolyse acide effectuée avec un acide tel que l'acide chlorhydrique, benzène sulfonique ou para-toluène

sulfonique, formique ou trifluoroacétique ou encore par une hydrogénation catalytique.

Le groupement phtalimido peut être éliminé par l'hydrazine.

f) Les produits décrits ci-dessus peuvent, si désiré, faire l'objet de réactions de salification par exemple par un acide minéral ou organique ou par une base minérale ou organique selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier : une telle réaction de salification peut être réalisée par exemple en présence d'acide chlorhydrique par exemple ou encore d'acide tartrique, citrique ou méthane sulfonique, dans un alcool tel que par exemple l'éthanol ou le méthanol .

g) Les éventuelles formes optiquement actives des produits décrits ci-dessus peuvent être préparées par dédoublement des racémiques selon les méthodes usuelles connues de l'homme du métier.

Les produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ainsi que leurs sels d'addition avec les acides présentent d'intéressantes propriétés pharmacologiques notamment en raison de leurs propriétés inhibitrices de kinases ainsi qu'il est indiqué ci-dessus.

Les produits de la présente invention sont notamment utiles pour la thérapie de tumeurs. Les produits de l'invention peuvent également ainsi augmenter les effets thérapeutiques d'agents anti-tumoraux couramment utilisés.

Ces propriétés justifient leur application en thérapeutique et l'invention a particulièrement pour objet à titre de médicaments, les produits de formule (I) telle que définie ci-dessus, lesdits produits de formule (I) étant sous toutes les formes isomères possibles racémiques, énantiomères et diastéréoisomères, ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques pharmaceutiquement acceptables desdits produits de formule (I).

L'invention a tout particulièrement pour objet, à titre de médicaments, les produits répondant aux formules suivantes :

- λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl]cyclopropanecarboxamide - 1 -[2-(morpholin-4-yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)- 1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée

- 1 -[2-(4-méthylpipérazin-1 -yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée.

- 1 -(2-méthoxyéthyl)-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-yl]urée

- 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl)sulfanyl]-1 ,3-benzothiazol-2- amine

- 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-amine - λ/-{6-[6-(4-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl]-1 ,3- benzothiazol-2-yl}cyclopropanecarboxamide

- 6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine

- λ/-(6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 H-pyrazol-4-yl)[1 ^^triazoloμ.S-alpyhdin-S-yllsulfanylH ,3- benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide - λ/-(6-{[6-(3-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl] sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide

- λ/-(6-{[6-(1 -(2-hydroxyéthyl)-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxannide

- λ/-(6-{[6-(1 -pipéridin-4-yl-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide ainsi que les sels d'addition avec les acides minéraux et organiques ou avec les bases minérales et organiques pharmaceutiquement acceptables desdits produits de formule (I).

L'invention concerne aussi des compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif l'un au moins des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce produit ou un prodrogue de ce produit et, le cas échéant, un support pharmaceutiquement acceptable.

L'invention s'étend ainsi aux compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif l'un au moins des médicaments tels que définis ci-dessus.

De telles compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent également, le cas échéant, renfermer des principes actifs d'autres médicaments antimitotiques tels que notamment ceux à base de taxol, cis- platine, les agents intercalants de l'ADN et autres.

Ces compositions pharmaceutiques peuvent être administrées par voie buccale, par voie parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses ou par injection par voie intraveineuse ou intramusculaire.

Ces compositions peuvent être solides ou liquides et se présenter sous toutes les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine comme, par exemple, les comprimés simples ou dragéifiés, les pilules, les tablettes, les gélules, les gouttes, les granulés, les préparations

injectables, les pommades, les crèmes ou les gels ; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut y être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs.

La posologie usuelle, variable selon le produit utilisé, le sujet traité et l'affection en cause, peut être, par exemple, de 0,05 à 5 g par jour chez l'adulte, ou de préférence de 0,1 à 2 g par jour.

La présente invention a également pour objet l'utilisation des produits de formule (I) tels que définis ci-dessus ou de sels pharmaceutiquement acceptables de ces produits pour la préparation d'un médicament destiné à l'inhibition de l'activité d'une protéine kinase. La présente invention a également pour objet l'utilisation de produits de formule (I) tels que définis ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie caractérisée par le dérèglement de l'activité d'une protéine kinase.

Un tel médicament peut notamment être destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie chez un mammifère.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est une protéine tyrosine kinase.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine tyrosine kinase est MET ou ses formes mutantes. La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est dans une culture cellulaire.

La présente invention a également pour objet l'utilisation définie ci-dessus dans laquelle la protéine kinase est dans un mammifère.

La présente invention a notamment pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement de maladies liées à une prolifération non contrôlée. La présente invention a particulièrement pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention d'une maladie choisie dans le groupe suivant : troubles de la prolifération de vaisseaux sanguins, troubles fibrotiques, troubles de la prolifération de cellules 'mesangial', désordres métaboliques, allergies, asthmes, thromboses, maladies du système nerveux, rétinopathie, psoriasis, arthrite rhumatoïde, diabète, dégénérescence musculaire et cancers.

La présente invention a ainsi tout particulièrement pour objet l'utilisation d'un produit de formule (I) tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un médicament destiné au traitement ou à la prévention de maladies en oncologie et notamment destiné au traitement de cancers.

Parmi ces cancers, on s'intéresse au traitement de tumeurs solides ou liquides, au traitement de cancers résistant à des agents cytotoxiques

Les produits de la présente invention cités peuvent notamment être utilisés pour le traitement de tumeurs primaires et/ou de métastases en particulier dans les cancers gastriques, hépatiques, rénaux, ovariens, du colon, de la prostate, du poumon (NSCLC et SCLC), les glioblastomes, les cancers de la thyroïde, de la vessie, du sein, dans les mélanomes, dans les tumeurs hématopoiétiques lymphoïdes ou myéloïdes, dans les sarcomes, dans les cancers du cerveau, du larynx, du système lymphatique, cancers des os et du pancréas.

La présente invention a aussi pour objet l'utilisation des produits de formule (I) telle que définie ci-dessus pour la préparation de médicaments destinés à la chimiothérapie de cancers.

De tels médicaments destinés à la chimiothérapie de cancers peuvent être utilisés seuls ou en en association.

Les produits de la présente demande peuvent notamment être administrés seuls ou en association avec de la chimiothérapie ou de la radiothérapie ou encore en association par exemple avec d'autres agents thérapeutiques.

De tels agents thérapeutiques peuvent être des agents anti-tumoraux couramment utilisés.

Comme inhibiteurs de kinases, on peut citer la butyrolactone, le flavopiridol et la 2(2-hydroxyéthylamino)-6-benzylamino-9-méthylpuhne appelée olomucine.

La présente invention a encore pour objet à titre de produits industriels nouveaux, les intermédiaires de synthèse de formules (A), (B), (C), (D), (E), (H), (L), (L1 ), (J) et (K) tels que définis ci-dessus et rappelés ci-après :

( L ; ( L1

tels que définis ci-dessus dans lesquels Ra, Rb et Rc ont les définitions indiquées ci-dessus et R représente un radical t-butyl ou phényl.

Les exemples suivants qui sont des produits de formule (I) illustrent l'invention sans toutefois la limiter.

Partie expérimentale

La nomenclature des composés de cette présente invention a été effectuée avec le logiciel ACDLABS version 10.0.

Les spectres de RMN 1 H à 400 MHz ont été effectués sur spectromètre BRUKER AVANCE DRX-400 avec les déplacements chimiques (δ en ppm) dans le solvant diméthylsulfoxide-dβ (DMSO-dβ) référencé à 2,5ppm à la température de 303K.

Les spectres infrarouge (IR) ont été effectués sur un spectromètre infrarouge à transformée de Fourier Nicolet Nexus, le domaine spectrale est compris entre 4000 et 400 cm ^"1 avec une résolution de 2 cm ^"1 .

Les spectres de masse (SM) ont été obtenus soit par la méthode A, soit par la méthode B :

Méthode A :

Appareil WATERS UPLC-SQD ; Ionisation : électrospray en mode positif et/ou négatif (ES+/-) ; Conditions chromatographiques : Colonne : ACQUITY BEH Ciβ 1 ,7 μm - 2,1 x 50 mm ; Solvants : A : H ₂ O (0,1 % acide formique) B : CH ₃ CN (0,1 % acide formique) ; Température de colonne : 50 ⁰ C ; Débit : 1 ml/min ; Gradient (2 min) : de 5 à 50 % de B en 0,8 min ; 1 ,2 min : 100 % de B ; 1 ,85 min : 100 % de B ; 1 ,95 : 5 % de B ; Temps de rétention = Tr (min). Méthode B :

Appareil WATERS ZQ ; Ionisation : électrospray en mode positif et/ou négatif (ES+/-) ; Conditions chromatographiques : Colonne : XBridge Ci ₈ 2,5 μm - 3 x 50 mm ; Solvants : A : H ₂ O (0,1 % acide formique) B : CH ₃ CN (0,1 % acide

formique) ; Température de colonne : 70 ⁰ C ; Débit : 0,9 ml/min ; Gradient (7 min) : de 5 à 100 % de B en 5,3 min ; 5,5 min : 100 % de B ; 6,3 min : 5 % de B ; Temps de rétention = Tr (min).

Exemple 1 : 6-([1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1,3-benzothia zol- 2-amine

Exemple 1 a : 6-([1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- amine

Le composé peut être préparé de la manière suivante: A une solution de 1 ,15 g de 4-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)aniline dans 33 ml d'acide acétique glacial sont ajoutés en une seule fois 1 ,84 g de thiocyanate de potassium. Après agitation pendant environ 15 minutes, 0,243 ml de brome dilué dans 5 ml d'acide acétique glacial sont coulés goutte à goutte en maintenant la température aux environs de 20 ⁰ C. Un précipité se forme peu à peu et le mélange réactionnel est agité environ 18 heures à une température voisine de 20°C puis est versé sur 100 ml d'eau. Le pH est amené aux environs de 8 par addition de carbonate de potassium. Après 3 heures d'agitation à une température voisine de 20 ⁰ C, le précipité est essoré et lavé par 3 fois 20 ml d'eau, et séché au dessicateur sous pression réduite sur pentaoxyde de phosphore. On obtient 1 ,31 g de 6-([1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-amine sous forme d'un solide jaune.

Point de fusion : 260-266°C (Buchï)

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 300 ; [M-H] ^" m/z = 298 ; Tr = 2,38 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 7.10 (td, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.26 (m, 2 H) 7.48 (ddd, J=9.3, 6.8,1.0 Hz,1 H) 7.61 (s large, 2 H) 7.80 (m, 1 H) 7.88 (dt, J=9.3,1.0 Hz, 1 H) 8.48 (dt, J=6.8,1.0 Hz, 1 H)

Exemple 1 b: 4-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)aniline Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une solution de 6,21 g de chlorure stanneux, dihydrate dans 8 ml d'éthanol sont ajoutés 1 ,5 g de 3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine. La solution orange obtenue est portée aux alentours de 60 ⁰ C. 8,2 ml d'une solution aqueuse 10N d'acide chlorhydrique est coulée goutte à goutte à cette température et le mélange réactionnel est agité environ 30 minutes à cette même température. Après retour à une température voisine de 20 ⁰ C, 200 ml d'eau sont ajoutés et le pH de la suspension est ajusté à environ 12 par addition de soude à 30%. Le milieu est extrait par 3 fois 250 ml d'acétate d'éthyle. Les phases organiques rassemblées sont lavées par 3 fois 200 ml d'eau, 200 ml d'une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et concentrées sous pression réduite. On obtient 1 ,09 g de 4-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)aniline sous forme d'un solide beige.

Point de fusion : 210°C (Banc-KÏŒfler) SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 243 ; Tr = 0,42 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 5.43 (s large, 2 H) 6.50 (d, J=8.5 Hz, 2 H) 7.08 (td, J=6.9, 1.0Hz, 1 H) 7.21 (d, J=8.5 Hz, 2 H) 7.45 (ddd, J=9.3, 6.9, 1.0 Hz, 1 H) 7.84 (dt, J=9.3, 1.0 Hz, 1 H) 8.47 (dd,J=6.9, 1.0 Hz, 1 H)

Exemple 1 c: 3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une solution de 1 g de [1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridine-3-thiol dans 15 ml de dimethylsulfoxyde sont ajoutés par petites portions 1 ,57 g de tétrafluoroborate de 4-nitrobenzènediazonium. Après 4 jours d'agitation à une température voisine de 20 ⁰ C, le mélange est versé sur 100 ml d'eau. Le précipité est essoré, lavé par 3 fois 20 ml d'eau, 1 fois par 10 ml d'éthanol et 10 ml d'oxyde de diéthyle puis séché à l'air. On obtient 1 ,22 g de 3-[(4- nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide jaune.

Point de fusion : 178-180°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 273 ; Tr = 3,10 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 7.16 (td, J=6.7, 1.1 Hz, 1 H) 7.31 (d, J=9.0 Hz, 2 H) 7.58 (ddd, J=9.3, 6.8, 1.1 Hz, 1 H) 8.01 (dt, J=9.3, 1.1 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=9.0 Hz, 2 H) 8.42 (dt, J=6.8, 1.1 Hz, 1 H)

Exemple 2: λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-yl]cyclopropanecarboxamide

Exemple 2a : λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol- 2-yl]cyclopropanecarboxamide Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une suspension de 0,1 g de 6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-amine et de 2 ml de pyridine, 0,037 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle est ajouté. Après une nuit à température voisine de 20 ⁰ C, 0,037 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle est ajouté. Après une nuit à une température voisine de 20 ⁰ C, 0,037 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle est à nouveau ajouté. Après une nuit à une température voisine de 20°C, 10 ml d'eau sont ajoutés et le précipité est essoré, lavé par 3 fois 2 ml d'eau, 3 fois 2 ml d'éthanol, 2 fois 2 ml d'oxyde de diéthyle et séché à l'étuve à 50 ⁰ C sous pression réduite. On obtient 0,068 g de λ/-[6-([1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl]cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide.

Point de fusion : 187-190°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 368 ; [M-H] ^" m/z = 366 ; Tr = 0,71 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.94 (m, 4 H) 1.96 (m, 1 H) 7.10 (td, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.35(dd, J=8.6, 2.2 Hz, 1 H) 7.51 (ddd, J=9.3, 6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=8.6 Hz, 1 H) 7.91 (d large, J=9.3Hz, 1 H) 8.05 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.47 (d large, J=6.8 Hz, 1 H) 12.67 (s large, 1 H)

Le composé λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-yl]cyclopropanecarboxamide peut également être préparé de la manière suivante:

A une suspension de 36,44 mg de [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine-3-thiol et de 20,25 mg d'hydrogénocarbonate de sodium et de 2 ml d'acétonitrile, sont ajoutés 100 mg de tétrafluoroborate de 2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3- benzothiazole-6-diazonium. Après 6 jours d'agitation à une température voisine de 20 ⁰ C, le mélange est versé sur 20 ml d'eau. Le précipité est essoré, lavé par 2 fois 10 ml d'oxyde de diéthyle puis séché à l'air. On obtient ainsi 40 mg de λ/-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-yl]cyclopropanecarboxamide.

Exemple 2b: tétrafluoroborate de 2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3- benzothiazole-6-diazonium

Le composé peut être obtenu de la manière suivante : A une solution de 0,5 g de λ/-(6-amino-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide et de 2 ml d'acide tétrafluoroborique aqueux (solution à 48%), sont ajoutés 133,1 mg de nitrite de sodium et 1 ,5 ml d'eau. Le milieu réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 16 heures. Le précipité formé est filtré, lavé à l'éther diéthylique puis séché à l'air. On obtient ainsi 566 mg de tétrafluoroborate de 2- [(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3-benzothiazole-6-diazonium sous forme de solide blanc.

Point de fusion : 200 ⁰ C (Banc-KÏŒfler)

SM : méthode A ; [M] ⁺ : m/z = 245 ; [BF4] ^" : m/z = 87 ; Tr = 0,28 min. IR : 2253 cm ^"1 (aryl-diazonium cation); 1150-1000 cm ^"1 , 533 et 523 cm ^{" 1} (tetrafluoborate)

Exemple 2c : λ/-(6-amino-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide Le composé peut être préparé de la manière suivante :

Dans un autoclave sont chargés 1 ,5 g de λ/-(6-nitro-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide, 150 mg de palladium sur charbon (10%) et 150 ml de tétrahydrofurane. Le milieu est ensuite agité sous pression d'hydrogène à 15 bars et chauffé à 50 ⁰ C. Après retour à pression ordinaire et à température ambiante, le milieu est filtré sur célite et le filtrat est concentré par évaporation sous pression réduite. On obtient ainsi 1 ,3 g de λ/-(6-amino- 1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme de solide blanc.

Point de fusion > 260 ⁰ C (Banc-KÏŒfler) SM : méthode A ; [IvRH] ⁺ : m/z 234 ; Tr = 0,34 min. Exemple 2d :λ/-(6-nitro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide Le composé peut être préparé de la manière suivante :

A une suspension de 5 g de 2-amino-6-nitro-benzothiazole (produit commercial) et de 50 ml de pyridine anhydre, sont ajoutés goutte à goutte 2,3 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle. Le milieu réactionnel est ensuite maintenu sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. Le précipité formé est filtré, rincé par 100 ml d'eau, 2 fois 10 ml d'éthanol, 2 fois 20 ml d'oxyde de diéthyle puis essoré et séché à l'air. On obtient ainsi 5,14 g de λ/-(6-nitro-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme de poudre blanche. Point de fusion > 260°C (Banc-Kόfler)

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.92 - 1.05 (m, 4 H) 1.97 - 2.08 (m, 1 H) 7.86 (d, J=8.9 Hz, 1 H) 8.26 (dd, J=8.9, 2.4 Hz, 1 H) 9.01 (d, J=2.4 Hz, 1 H) 13.02 (m étalé, 1 H)

Exemple 3 : 1 -[2-(morpholin-4-yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin- 3-ylsulfanyl)-1,3-benzothiazol-2-yl]urée

Exemple 3a : 1 -[2-(morpholin-4-yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une suspension de 0,3 g de [6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)- 1 ,3-benzothiazol-2-yl]carbamate de phényle dans 7 ml de tétrahydrofurane est ajouté 0,1 ml de 2-(morpholin-4-yl)éthanamine. Après une nuit d'agitation à une température voisine de 20 ⁰ C, 0,028 ml de 2-(morpholin-4- yl)éthanamine est ajouté et le mélange réactionnel est agité une nuit à une température voisine de 20 ⁰ C. Le mélange est alors versé sur 100 ml de dichlorométhane. La phase organique est lavée par 50 ml d'une solution aqueuse de soude 2N. La phase aqueuse est additionnée d'acide acétique glacial pour ajuster le pH aux environs de 4, extraite par 3 fois 100 ml de dichlorométhane, 3 fois 100 ml d'acétate d'éthyle, 3 fois 100 ml de n-butanol, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et concentrées sous pression réduite. On obtient un solide qui est repris par 20 ml d'eau, essoré lavé par 2 fois 2 ml d'eau, 3 fois 5 ml d'acétonitrile, 3 fois 5 ml d'oxyde de diéthyle et séché à l'air. On obtient 0,13 g de 1 -[2-(morpholin-4-yl)éthyl]-3-[6- ([1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion : 204-207°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode A ; [M+H]+ m/z = 456 ; [M+H-C7H12N2O2]+ m/z = 300 ; [C7H13N2O2]+ m/z = 157 (pic de base) ; [M-H]- m/z = 454 ; Tr = 0,45 min. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 2.35 - 2.44 (m, 6 H) 3.25 (m partiellement masqué, 2H) 3.58 (m, 4 H) 6.88 (m large, 1 H) 7.11 (d large, J=6.8 Hz, 1 H) 7.29 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1 H) 7.44 - 7.53 (m, 2 H) 7.90 (d large, J=9.3 Hz, 1 H) 7.95 (s large, 1 H) 8.48 (d large, J=6.8 Hz, 1 H) 11.23 (m étalé, 1 H) Exemple 3b : [[6-([1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl] carbamate de phényle.

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une suspension de 1 g de 6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3- benzothiazol-2-amine dans 27 ml de tétrahydrofurane, sont ajoutés 1 ,68 ml de chlorocarbonate de phényle puis 2,7 ml d'eau et 1 ,12 g

d'hydrogénocarbonate de sodium. Le mélange est agité à une température voisine de 20 ⁰ C pendant environ 48 heures. Le précipité est essoré, lavé par 10 ml de tétrahydrofurane à 10% d'eau, 3 fois par 10 ml d'acétate d'éthyle et séché à l'air. On obtient 0,59 g de [[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]carbamate de phényle.

SM : méthode B ; [M+H]+ m/z = 420 ; [M-H]- m/z = 418 ; Tr = 3.71 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 7.11 (td, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.25 - 7.33 ( m, 3 H) 7.36 (dd, J=8.5, 2.0 Hz, 1 H) 7.45 (t, J=7.8 Hz, 2 H) 7.51 (ddd, J=9.3, 6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 7.91 (d large, J=9.3 Hz, 1 H) 8.05 (d large, J=2.0 Hz, 1 H) 8.48 (d large, J=6.8 Hz, 1 H) 12.68 (m étalé., 1 H)

Exemple 4 : 1 -[2-(4-méthylpipérazin-1 -yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1,3-benzothiazol-2-yl]urée. Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 3a mais à partir de 0,2 g de [[6-([1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl]carbamate de phényle et de 75,15 mg de 2-(4-méthylpipérazin-1 - yl)éthanamine. Après essorage du précipité formé, lavage par 3 fois 0,5 ml de tétrahydrofurane, 2 fois 0,5 ml d'oxyde de diéthyle et séchage à l'air, on obtient 0,110 g de 1 -[2-(4-méthylpipérazin-1 -yl)éthyl]-3-[6-([1 ,2,4]thazolo[4,3- a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion : 180-185 ⁰ C (Banc-KÏŒfler)

SM : méthode A ; [M+H]+ m/z = 469 ; [M+H-C8H15N3O]+ m/z = 300 (pic de base) ; [C8H16N3O]+ m/z = 170 ; [M-H]- m/z = 467 ; Tr = 0,44 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 2.15 (s, 3 H) 2.21 - 2.43 (m, 10 H) 3.25 (m partiellement masqué, 2 H) 6.72 (m large, 1 H) 7.11 (td, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.30 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1 H) 7.47 - 7.54 (m, 2 H) 7.90 (dt, J=9.3, 1.0 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.48 (dt, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 10.91 (m étalé, 1 H)

Exemple 5 : 1 -(2-méthoxyéthyl)-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl)-1,3-benzothiazol-2-yl]urée

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 3a mais à partir de 0,2 g de [[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)-1 ,3-benzothiazol-2- yl]carbamate de phényle et de 0,05 ml de 2-méthoxyéthanamine. Après essorage du précipité formé, lavage par 3 fois 2 ml d'oxyde de diisopropyle, séchage à l'étuve aux environs de 50 ⁰ C sous pression réduite, on obtient

0,143 g de 1 -(2-méthoxyéthyl)-3-[6-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl)- 1 ,3-benzothiazol-2-yl]urée sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion : 252-257°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode A ; [M+H]+ m/z = 401 ; [M-H]- m/z = 399 ; Tr = 0,62 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 3.27 (s, 3 H) 3.31 (m partiellement masqué, 2 H) 3.40 (t, J=5.4Hz, 2 H) 6.83 (t large, J=5.6 Hz, 1 H) 7.11 (td, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.31 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1 H) 7.50 (ddd, J=9.3, 6.8, 1.0 Hz, 1 H) 7.55 (d, J=8.3 Hz, 1 H) 7.91 (dt, J=9.3, 1.0 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.49 (dt, J=6.8, 1.0 Hz, 1 H) 10.73 (m large, 1 H).

Exemple 6 : 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl)sulfanyl]-1 ,3- benzothiazol-2-amine

Exemple 6a : 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl)sulfanyl]-1 ,3- benzothiazol-2-amine

Le composé peut être obtenu comme décrit dans l'exemple 1 a à partir de 230 mg de 4-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl)sulfanyl]aniline, de 13 ml d'acide acétique, de 0,24 g de thiocyanate de potassium et de 32 μl de brome. On obtient ainsi 0,25 g de 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl)sulfanyl]-1 ,3-benzothiazol-2-amine sous forme de poudre orange .

Point de fusion ~ 190 ⁰ C (Banc-KÏŒfler).

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 426 ; [M-H] ^" m/z = 424 ; Tr = 2,98 min. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm7.27 (d, J=8.6 Hz, 1 H) 7.31 (dd, J=8.6, 2.0 Hz, 1 H) 7.61 (s large, 2 H) 7.65 (dd, J=9.5, 1.4 Hz, 1 H) 7.73 (d , J=9.5 Hz, 1 H) 7.81 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.71 (s large, 1 H) Exemple 6b : 4-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl)sulfanyl]aniline

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 1 b à partir de 4,02 g de chlorure stanneux, dihydrate, de 60 ml d'éthanol, de 1 ,89 g de 6-iodo-3- [(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine et de 4,45 ml d'une solution aqueuse 12N d'acide chlorhydrique. On obtient ainsi 0,23 g de 4-[(6- iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl)sulfanyl]aniline sous forme d'un solide orange-marron.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 369 ; Tr = 3,06 min.

Exemple 6c : 6-iodo-3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridine

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 1 c à partir de 1 ,18 g de 6-iodo-[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridine-3-thiol, de 10 ml de diméthylsulfoxyde et de 1 ,21 g de tétrafluoroborate de 4-nitrobenzènediazonium. On obtient ainsi 1 ,89 g de 6-iodo-3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'une poudre orange.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ : m/z 399 ; Tr = 3,74 min. Exemple 6d : 6-iodo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine-3-thiol Le composé peut être préparé de la manière suivante :

Une solution de 1 ,37 g de 2-hydrazinyl-5-iodopyridine, de 40 ml de tétrahydrofurane et de 1 ,25 g de N,N'-thiocarbonyldiimidazole est portée au reflux pendant une heure. Après refroidissement, le milieu réactionnel est concentré par évaporation sous pression réduite et la poudre ainsi obtenue est ensuite agitée à froid en présence de 25 ml d'eau. Le précipité ainsi obtenu est filtré, lavé par deux fois 10 ml d'eau et séché à l'air. On obtient ainsi 1 ,40 g de 6-iodo-[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine-3-thiol.

Point de fusion >264°C (Banc-Kόfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ : m/z 278 ; [M-H] ^" : m/z 276 ; Tr = 0,57 min. Exemple 6e : 2-hydrazinyl-5-iodopyridine

Le composé peut être obtenu comme décrit dans le brevet WO 2006/114213, exemple 32A page 40.

Exemple 7 : 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-amine

Exemple 7a : 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine Le composé peut être préparé comme décrit dans l'exemple 1 a à partir de 0,24 g de 4-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}aniline, de 10 ml d'acide acétique, de 0,28 g de thiocyanate de potassium et de 37 μl de brome dilué dans 2 ml d'acide acétique glacial. On obtient ainsi 0,14 g de 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-amine sous forme d'un solide rosé pâle.

Point de fusion : > 264°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 394 ; [M-H] ^" m/z = 392 ; Tr = 3,47 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 7.27 (d, J=8.3 Hz, 1 H) 7.31 - 7.38 (m, 3 H) 7.60 (s large, 2 H) 7.77 (dd, J=8.6, 5.4 Hz, 2 H) 7.82 (dd, J=9.8, 1.5 Hz, 1 H) 7.87 (d, J= 1.7 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=9.9 Hz, 1 H) 8.59 (s large, 1 H)

Le composé 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-amine peut également être obtenu de la manière suivante : A une solution de 20 mg de 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl)sulfanyl]-1 ,3-benzothiazol-2-amine et de 1 ml de diméthylsulfoxyde sont ajoutés 35 mg de phosphate de potassium, 80 mg d'acide 4- fluorophénylboronique et 3 mg de tétrakistriphénylphosphine de palladium. Le

milieu réactionnel est chauffé à 80 ⁰ C pendant 18 heures. Sont ajoutés alors 5 mg de tétrakistriphénylphosphine de palladium et le milieu est à nouveau porté à 80 ⁰ C pendant 2 jours. Après refroidissement du milieu réactionnel par un bain de glace, 15 ml d'eau sont ajoutés et le milieu est maintenu sous agitation à froid pendant une heure puis pendant 18 heures à température ambiante. La phase aqueuse est extraite par 3 fois 30 ml d'acétate d'éthyle, les phases organiques réunies sont séchées sur sulfate de sodium, filtrées et concentrées par évaporation sous pression réduite. On obtient ainsi 20 mg de 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-amine.

Exemple 7b : 4-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}aniline

Le composé peut préparé comme dans l'exemple 1 b à partir de 1 ,88 g de chlorure stanneux, dihydrate, de 25 ml d'éthanol, de 0,61 g de 6-(4- fluorophényl)-3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridine et de 2,06 ml d'une solution aqueuse 10N d'acide chlorhydrique. On obtient ainsi 0,24 g de 4-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl]sulfanyl}aniline sous forme d'un solide jaune.

Point de fusion : 217°C (Banc-KÏŒfler) SM : méthode A ; [M+H] ⁺ : m/z 337 (pic de base) ; [2IvRNa] ⁺ : m/z 695; Tr = 0,81 min.

Exemple 7c : 6-(4-fluorophényl)-3-[(4-nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridine

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 1 c à partir de 0,83 g de 6-(4-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine-3-thiol, de 8 ml de diméthylsulfoxyde et de 0,80 g de tétrafluoroborate de 4- nitrobenzènediazonium. On obtient ainsi 0,61 g de 6-(4-fluorophényl)-3-[(4- nitrophényl)sulfanyl][1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'une meringue brune . SM : méthode A ; [M+H] ⁺ : m/z = 367 ; Tr = 0,98 min.

Exemple 7d: 6-(4-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine-3-thiol Le composé peut être préparé de la manière suivante :

Une solution de 1 ,2 g de 5-(4-fluorophényl)-2-hydrazinylpyridine, de 15 ml de disulfure de carbone et de 50 ml de chloroforme est portée au reflux pendant 18 heures. On ajoute ensuite 15 ml de disulfure de carbone et le milieu réactionnel est maintenu au reflux pendant 4 heures, puis 15 ml de disulfure de carbone et le milieu réactionnel est maintenu au reflux pendant 2 heures, puis 20 ml de disulfure de carbone et le milieu réactionnel est maintenu au reflux pendant 24 heures. Le milieu réactionnel est ensuite maintenu sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. Après ajout de 20 ml d'éthanol, le milieu est porté au reflux pendant 29 heures. Après refroidissement, le milieu est concentré par évaporation sous pression réduite et la poudre jaune résultante est purifiée par chromatographie, sous pression d'argon, sur gel de silice (éluant : dichlorométhane/méthanol 97/3). On obtient ainsi 0,63 g de 6-(4-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine-3-thiol sous forme d'une poudre jaune.

Point de fusion : 249°C (Banc-Kόfler)

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ : m/z = 246 ; [M-H] ^" : m/z = 244; Tr = 0,77 min.

Exemple 7e: 5-(4-fluorophénvl)-2-hvdrazinvlpvhdine Le composé peut être préparé comme décrit par R. Church et al., Journal of Organic Chemistry (1995), 60(12), 3750-8.

Exemple 8 : λ/-{6-[6-(4-fluorophényl)-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- ylsulfanyl]-1,3-benzothiazol-2-yl}cyclopropanecarboxamide Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 2 à partir de 0,13 g de 6-{[6-(4-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-amine, de 0,081 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle et de 5 ml de pyridine. On obtient ainsi 0,11 g de λ/-{6-[6-(4-fluorophényl)-

[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-ylsulfanyl]-1 ,3-benzothiazol-2- yl}cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide jaune.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 462 ; [M-H] ^" m/z = 460; Tr = 0,97 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.92 (m, 4 H) 1.96 (m ,1 H) 7.34 (t, J=8.8 Hz, 2 H) 7.45 (dd,J=8.4, 2.0 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=8.4 Hz, 1 H) 7.77 (dd, J=8.8, 5.5 Hz, 2 H) 7.84 (dd, J=9.6, 1.7 Hz, 1 H) 8.01 (dd, J=9.6, 1.0 Hz, 1 H) 8.11 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.61 (s large, 1 H) 12.57 (m étalé, 1 H).

Exemple 9 : 6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin- 3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-amine

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

Une solution de 0,25 g de 6-[(6-iodo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl)sulfanyl]- 1 ,3-benzothiazol-2-amine, de 5 ml de 1 -2-diméthoxyéthane, de 1 ,2 ml de NaOH (solution aqueuse 1 N) et de 0,14 g d'acide (1 -méthyl-1 H-pyrazol-4- yl)boronique est agitée sous argon pendant 30 minutes. Sont ajoutés ensuite 20 mg de di-chlorobis(triphénylphosphine) de palladium et le milieu réactionnel est porté à 65°C pendant 30 minutes. Sont ajoutés alors 20 mg de di-chlorobis(thphénylphosphine) de palladium et le milieu réactionnel est porté au reflux pendant une nuit. On ajoute à nouveau 20 mg de di- chlorobis(triphénylphosphine) de palladium et 0,61 g d'acide (1 -méthyl-1 H- pyrazol-4-yl)boronique. Le milieu est porté au reflux pendant 4 heures et laissé sous agitation à une température voisine de 20 ⁰ C pendant 2 jours. On ajoute alors 10 ml de dioxane, 1 ml d'eau, 20 mg de di- chlorobis(thphénylphosphine) de palladium et le milieu est transvasé dans un tube scellé et porté sous micro-ondes à 150 ⁰ C pendant 15 minutes. Après retour à une température voisine de 20°C, le milieu est concentré par évaporation sous pression réduite. Le résidu ainsi obtenu est chromatographié sous pression d'argon sur gel de silice (éluant dichlorométhane / méthanol 95/5). On obtient ainsi 0,14 g de 6-{[6-(1-méthyl-

1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- amine sous forme d'un solide orange-marron.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 380 ; [M-H] ^" m/z = 378 ; Tr = 0,5 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm3.88 (s, 3 H) 7.27 (d, J=8.3 Hz, 1 H) 7.35 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 1 H) 7.60 (s, 2 H) 7.75 (dd, J=9.5, 1.3 Hz, 1 H) 7.87 (d, J=2 Hz, 1 H) 7.91 (d, J=9.5 Hz, 1 H) 8.02 (s, 1 H) 8.33 (s, 1 H) 8.57 (s, 1 H)

Exemple 10 : λ/-(6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanec arboxamide

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 2 à partir de 0,13 g de 6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-amine, de 0,034 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle et de 2 ml de pyridine. On obtient ainsi 0,1 g de λ/-(6-{[6-(1 -méthyl-1 H-pyrazol-4- yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide jaune pâle.

Point de fusion ~ 196°C (Banc-Kόfler).

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 448 ; [M-H] ^" m/z = 446 ; Tr = 3,32 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.89 - 1.00 (m, 4 H) 1.94 - 2.01 (m, 1 H) 3.87 (s, 3 H) 7.43 (dd,J=8.5, 2.0 Hz, 1 H) 7.67 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 7.77 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 7.94 (d, J=9.5 Hz, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 8.12 (d, J=2 Hz, 1 H) 8.33 (s, 1 H) 8.58 (s, 1 H) 12.62 (br. s., 1 H)

Exemple 11 : λ/-(6-{[6-(1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Exemple 11 a: λ/-(6-{[6-(1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3- yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

Dans un tube en verre scellé, on charge 104 mg de 3-bromo-6-(1 H-pyrazol-4- yl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine, 100 mg de (6-sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide, 110 mg de carbonate de potassium et 1 ml de diméthylsulfoxyde. Le milieu est chauffé sous micro-ondes à 185°C pendant 12 minutes. Après retour à une température voisine de 20 ⁰ C, le milieu est jeté sur 60 ml d'eau et le précipité ainsi formé est filtré sur verre fritte, lavé à l'eau, essoré et séché. Le solide ainsi obtenu est chromatographié sous pression d'argon sur gel de silice (éluant dichlorométhane / méthanol 85/15 puis 90/10). On obtient ainsi un solide qui est trituré dans 2 ml d'éthanol, filtré, lavé 2 fois avec 1 ml d'éthanol puis 3 fois avec 1 ml d'oxyde de diéthyle et séché. On obtient ainsi 82 mg de λ/-(6-{[6-(1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide jaune pâle.

Point de fusion > 260 ⁰ C (Banc-KÏŒfler). SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 434 ; Tr = 0,65 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.89 - 0.99 (m, 4 H) 1.94 - 2.03 (m, 1 H) 7.45 (dd, J=8.5, 2.0 Hz,1 H) 7.67 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 7.83 (dd, J=9.5, 1.7 Hz, 1 H) 7.94 (dd, J=9.5, 1.0 Hz, 1 H) 8.08 (br. s., 1 H) 8.15 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.39 (br. s., 1 H) 8.59 - 8.65 (m, 1 H) 12.66 (br. s., 1 H) 13.11 (br. s., 1 H) Exemple 11 b: (6-sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une suspension de 2 g de (6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide et de 70 ml d'éthanol, on ajoute une solution de 33,6 mg de dihydrogénophosphate de potassium dans 8 ml d'eau à 20°C, suivi de 3,2 g de DL-dithiothréitol. Le milieu réactionnel est agité au reflux pendant 5h puis ramené à une température voisine de 20 ⁰ C. 400 ml d'eau sont alors ajoutés et le précipité formé est filtré sur verre fritte, lavé abondamment à l'eau, essoré puis séché. On obtient ainsi 1 ,5 g de (6- sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide jaune pâle.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 251 ; [M-H] ^" m/z = 249 ; Tr = 3,77 min.

Exemple Hç : (6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé de la manière suivante: A une solution de 10 g de thiocyanate de 2-amino-1 ,3-benzothiazol-6-yle (produit commercial) et de 100 ml de pyridine, on ajoute 5,3 ml de chlorure de cyclopropanecarbonyle en maintenant la température voisine de 20 ⁰ C. Le milieu réactionnel est agité pendant 4 heures puis 500 ml d'eau sont ajoutés. Le précipité formé est filtré sur verre fritte, lavé abondamment à l'eau, essoré puis séché. On obtient ainsi 13 g de (6-thiocyanato-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'une solide jaune pâle utilisé tel quel dans les étapes ultérieures.

Exemple 11 d : 3-bromo-6-(1 H-pyrazol-4-yl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine Le composé peut être préparé de la manière suivante: A une solution de 170 mg de 6-(1 H-pyrazol-4-yl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine dans 4 ml d'éthanol est ajoutée une solution de 0,058 ml de brome et de 2 ml d'eau. Le mélange réactionnel est agité environ 2 jours à une température voisine de 20 ⁰ C puis on ajoute 20 ml d'une solution aqueuse saturée en hydrogénocarbonate de sodium. Après 30 minutes d'agitation, le précipité formé est filtré sur verre fritte, lavé par trois fois 5 ml d'eau, essoré puis séché. Le résidu solide obtenu est chromatographié sous pression d'argon sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle / méthanol 85/15). On obtient ainsi 110 mg de 3-bromo-6-(1 H-pyrazol-4-yl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme de solide blanc. SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 264 ; [M-H] ^" m/z = 262 ; Tr = 0,35 min. Exemple 11 e : 6-(1 H-pyrazol-4-yl)-[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridine Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A un mélange de 400 mg de 6-bromo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine (produit commercial), de 8 ml de diméthysulfoxyde, de 69 mg de

tétrakistriphénylphosphine de palladium et de 424 mg de carbonate de sodium en solution dans 2 ml d'eau, sont ajoutés 272 mg d'acide (1 H-pyrazol- 4-yl)boronique. Le milieu réactionnel est chauffé sous micro-ondes à 150 ⁰ C pendant 20 minutes. Après retour à une température voisine de 20 ⁰ C, le milieu est concentré par évaporation sous pression réduite puis repris par 40 ml d'eau. La phase aqueuse est extraite par 3 fois 20 ml d'acétate d'éthyle. Le précipité formé dans la phase aqueuse est filtré sur verre fritte, lavé à l'eau, essoré puis séché. On obtient ainsi 200 mg de 6-(1 H-pyrazol-4-yl)- [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide blanc. SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 186 ; [M-H] ^" m/z = 184 ; Tr = 0,21 min.

Exemple 12 : λ/-(6-{[6-((3-f luoro-4-méthyl)phényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl] sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Exemple 12a : λ/-(6-(f6-((3-fluorO-4-méthvl)phénvl)f1.2.41triazolof4.3- aipyridin- 3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 11 a à partir de 348 mg de 3-bromo-6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine, de 250 mg de (6-sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide, de 280 mg de carbonate de potassium et de 4 ml de diméthylsulfoxyde. On obtient ainsi 146 mg de λ/-(6-{[6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion = 191 °C (Banc-Kόfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 476 ; [M-H] ^" m/z = 474 ; Tr = 1 ,04 min. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.89 - 0.96 (m, 4 H) 1.93 - 2.00 (m, 1 H) 2.28 (d, J= 1.5 Hz, 3 H) 7.40 - 7.49 (m, 3 H) 7.57 (dd, J= 11.2, 1.5 Hz, 1 H) 7.67 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 7.87 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 7.99 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 8.13 (d, J=U Hz, 1 H) 8.61 - 8.66 (m, 1 H) 12.65 (br. s., 1 H)

Exemple 12b : 3-bromo-6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridine

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

Un mélange de 450 mg de 6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]thazolo[4,3- a]pyhdine, de 10 ml de chloroforme et de 356 mg de N-bromosuccinimide est porté au reflux pendant une nuit. Le milieu est refroidi à une température voisine de 20 ⁰ C puis concentré par évaporation sous pression réduite. Le résidu ainsi obtenu est chromatographié sous pression d'argon sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle / méthanol 80/20). On obtient ainsi 534 mg de 3-bromo-6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide beige.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 306 ; Tr = 0,88 min.

Exemple 12c : 6-((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 11 e à partir de 400 mg de 6-bromo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine (produit commercial), de 8 ml de diméthysulfoxyde, de 69 mg de tétrakistriphénylphosphine de palladium, de

424 mg de carbonate de sodium en solution dans 2 ml d'eau et de 370 mg d'acide ((3-fluoro-4-méthyl)phényl)boronique. On obtient ainsi 456 mg de 6-

((3-fluoro-4-méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion = 236°C (Banc-Kόfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 228 ; Tr = 0,71 min.

Exemple 13 : λ/-(6-{[6-(3-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl] sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Exemple 13a : λ/-(6-{[6-(3-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl] sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 11 a à partir de 480 mg de 3-bromo-6-(3-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine, de 411 mg de (6- sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide, de 454 mg de carbonate de potassium et de 10 ml de diméthylsulfoxyde. On obtient ainsi 148 mg de λ/-(6-{[6-(3-fluorophényl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl] sulfanyl}- 1 ,3-benzothiazol-2-yl) cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide beige.

Point de fusion > 260 ⁰ C (Banc-KÏŒfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 462 ; [M-H] ^" m/z = 460 ; Tr = 0,98 min. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.92 (br. s., 4 H) 1.95 (br. s., 1 H) 7.23 - 7.31 (m, 1 H) 7.46 (d,J=8.6 Hz, 1 H) 7.50 - 7.70 (m, 4 H) 7.88 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 8.01 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 8.13 (br.s., 1 H) 8.69 (br. s., 1 H)

Exemple 13b : 3-bromo-6-(3-fluorophényl)-[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdine

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 12b à partir de 360 mg de 6-(3-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine, de 10 ml de chloroforme et de 300 mg de N-bromosuccinimide. On obtient ainsi 480 mg de 3-bromo-6-(3- fluorophényl)-[1 ,2,4]thazolo [4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide ocre.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 292 ; Tr = 0,77 min. Exemple 13c : 6-(3-fluorophényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 12c à partir de 400 mg de 6-bromo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine (produit commercial), de 8 ml de diméthysulfoxyde, de 69 mg de tétrakistriphénylphosphine de palladium, de 424 mg de carbonate de sodium en solution dans 2 ml d'eau et de 345 mg d'acide (3-fluorophényl)boronique. On obtient ainsi 361 mg de 6-((3-fluoro, 4- méthyl)phényl)-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion = 210 ⁰ C (Banc-KÏŒfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 214 ; Tr = 0,59 min.

Exemple 14 : λ/-(6-{[6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H- pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol- 2-yl)cyclopropanecarboxamide

Exemple 14a : λ/-(6-{[6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol- 4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 11 a à partir de 240 mg de 3-bromo-6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl)

[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine, de 170 mg de (6-sulfanyl-1 ,3-benzothiazol-2- yl)cyclopropanecarboxamide, de 170 mg de carbonate de potassium et de 4 ml de diméthylsulfoxyde. On obtient ainsi 240 mg de λ/-(6-{[6-(1-[2- (tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide blanc. Point de fusion ~ 110 ⁰ C (Banc-KÏŒfler).

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 562 ; [M-H] ^" m/z = 560 ; Tr = 0,84 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.90 - 0.98 (m, 4 H) 1.27 - 1.67 (m, 6 H) 1.91 - 2.01 (m, 1 H) 3.32 - 3.39 (m, 1 H) 3.52 (ddd, J=11.5, 8.6, 3.4 Hz, 1 H) 3.70 - 3.80 (m, 1 H) 3.89 - 3.98 (m, 1 H) 4.23 - 4.36 (m, 2 H) 4.51 (t, J=3.3 Hz, 1 H) 7.42 (dd, J=8.6, 2.0 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=8.6 Hz, 1 H) 7.78 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 7.94 (dd, J=9.5, 1.0 Hz, 1 H) 8.05 (s, 1 H) 8.11 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.36 (s, 1 H) 8.58 (s, 1 H) 12.65 (br. s., 1 H).

Exemple 14b : 3-bromo-6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H- pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 12b à partir de 440 mg de 6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl)

[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine, de 10 ml de chloroforme et de 226 mg de N- bromosuccinimide. On obtient ainsi 245 mg de 3-bromo-6-(1 -[2-(tétrahydro- 2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdine sous forme d'une laque incolore.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 392 ; Tr = 0,64 min.

Exemple 14c : 6-(1 -[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4- yl)[1 ,2,4] triazolo [4,3-a]pyridine

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 9 à partir de 320 mg de 6-bromo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine (produit commercial), de 15 ml de 1 -

2-diméthoxyéthane, de 69 mg de di-chlorobis(thphénylphosphine) de palladium, de 3,2 ml de NaOH (solution aqueuse 1 N) et de 990 mg de 1 -[2-

(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-4-(4,4,5,5-tétramà ©thyl-1 ,3,2-dioxaborolan-

2-yl)-1 H-pyrazole. On obtient ainsi 445 mg de 6-(1-[2-(tétrahydro-2H-pyran-2- yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4] triazolo [4,3-a]pyridine sous forme d'une huile jaune qui cristallise.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 314 ; Tr = 0,49 min.

Exemple 14d : 1-[2-(tétrahydro-2H-pyran-2-yloxy)éthyl]-4-(4,4,5,5-tétra méthyl- 1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)-1 H-pyrazole. Le composé peut être préparé comme décrit dans le brevet US2007/0265272, p 39.

Exemple 15_L λ/-(6-{[6-(1 -(2-hydroxyéthyl)-1 H-pyrazol-4-yl)

[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1,3-benzothi azol-2- yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé de la manière suivante:

A une solution de 215 mg de λ/-(6-{[6-(1-[2-(tétrahydro-2H-pyran-2- yloxy)éthyl]-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3- benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide et de 10 ml de méthanol, on ajoute 45 mg de résine Amberlyst 15 forme H+ et on agite le milieu réactionnel 16h à une température voisine de 20 ⁰ C. Après addition de 5 ml de dichlorométhane, on rajoute de la résine pour compléter la réaction (suivie par LC/MS), soit successivement 45 mg, 40 mg puis 150 mg de résine tout en agitant à une température voisine de 20 ⁰ C et sur une période totale de 4

jours. Le milieu réactionnel est ensuite filtré et la résine est lavée avec 4 fois 15 ml d'un mélange CH ₂ CI ₂ /MeOH/NH ₄ OH à 28% (12/3/0,5 en volumes). Le filtrat obtenu est concentré par évaporation sous pression réduite. On obtient ainsi 65 mg de λ/-(6-{[6-(1-(2-hydroxyéthyl)-1 H-pyrazol-4-yl)[1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide sous forme d'un solide blanc.

Point de fusion ~ 182°C (Banc-Kόfler).

SM : méthode A ; [IvRH] ⁺ m/z = 478 ; [M-H] ^" m/z = 476 ; Tr = 0,63 min.

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.88 - 1.00 (m, 4 H) 1.91 - 2.03 (m, 1 H) 3.75 (q, J=5.5 Hz, 2 H) 4.16 (t, J=5.6 Hz, 2 H) 4.95 (t, J=5.3 Hz, 1 H) 7.44 (dd, J=8.6, 2.0 Hz, 1 H) 7.67 (d, J=8.3 Hz, 1 H) 7.81 (dd, J=9.5, 1.5 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=9.3 Hz, 1 H) 8.06 (s, 1 H) 8.12 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.38 (s, 1 H) 8.62 (s, 1 H)

Exemple 16 : λ/-(6-{[6-(1 -pipéridin-4-yl-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanec arboxamide

Exemple 16a : λ/-(6-{[6-(1 -pipéridin-4-yl-1 H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyridin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide

Le composé peut être préparé de la manière suivante: Un mélange de 102 mg de 4-{4-[3-({2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3- benzothiazol-6-yl}sulfanyl)[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyridin-6-yl]-1 H-pyrazol-1 - yl}pipéridine-1 -carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle et de 1 ,52 ml d'acide chlorhydrique (solution 4N dans le dioxane) est agité à une température voisine de 20 ⁰ C pendant une nuit, puis concentré par évaporation sous pression réduite. Le résidu ainsi obtenu est repris par 5 ml d'éther diisopropylique puis filtré sur verre fritte, lavé par deux fois 2 ml d'éther diisopropylique, essoré puis séché. On obtient ainsi 101 mg de λ/-(6-{[6-(1 - pipéπdin-4-yl-i H-pyrazol-4-yl) [1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-3-yl]sulfanyl}-1 ,3-

benzothiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide, chlorhydrate sous forme de solide ocre.

Point de fusion > 260 ⁰ C (Banc-KÏŒfler).

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 517 ; [M-H] ^" m/z = 515 ; Tr = 2,66 min. RMN 1 H (400 MHz, DMSO-c/ ₆ ) δ ppm 0.85 - 1.01 (m, 4 H) 1.93 - 2.05 (m, 1 H) 2.05 - 2.30 (m, 4 H) 3.02 - 3.18 (m, 2 H) 3.33 - 3.44 (m, 2 H) 4.42 - 4.57 (m, 1 H) 7.44 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=8.6 Hz, 1 H) 7.86 (d, J=9.5 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=9.8 Hz, 1 H) 8.13 (s, 2 H) 8.48 (s, 1 H) 8.67 (s, 1 H) 12.70 (s, 1 H). Exemple 16b : 4-{4-[3-({2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3-benzothiazol-6- yl}sulfanyl) [1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-6-yl]-1 H-pyrazol-1 -yl}pipéridine-1 - carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 11a à partir de 134 mg de 4-{4-[(3-bromo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin)-6-yl]-1 H-pyrazol-1 - yl}pipéridine-1 -carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle, de 83 mg de (6-sulfanyl- 1 ,3-benzothiazol-2-yl) cyclopropanecarboxamide, de 83 mg de carbonate de potassium et de 3,5 ml de diméthylsulfoxyde. On obtient ainsi 103 mg de 4- {4-[3-({2-[(cyclopropylcarbonyl)amino]-1 ,3-benzothiazol-6- yl}sulfanyl)[1 ,2,4]thazolo[4,3-a]pyhdin-6-yl]-1 H-pyrazol-1 -yl}pipéhdine-1 - carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle sous forme d'un solide beige.

SM : méthode A ; [M+H] ⁺ m/z = 617 ; [M-H] ^" m/z = 615 ; Tr = 0,99 min.

Exemple 16c : 4-{4-[(3-bromo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyhdin)-6-yl]-1 H-pyrazol-1 - yl}pipéridine-1 -carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle

Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 12b à partir de 120 mg de 4-[4-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-6-yl)-1 H-pyrazol-1 -yl]pipéridine-1 - carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle, de 5 ml de chloroforme et de 58 mg de N-bromosuccinimide. On obtient ainsi 134 mg de 4-{4-[(3- bromo[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin)-6-yl]-1 H-pyrazol-1 -yl}pipéridine-1 - carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle sous forme d'un solide vert.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 447 ; [M-H] ^" + HCOOH m/z = 491 ; Tr = 3,71 min.

Exemple 16d : 4-[4-([1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyπdin-6-yl)-1 H-pyrazol-1 - yl]pipéridine-1 -carboxylate de 2-méthylpropan-2-yle Le composé peut être préparé comme dans l'exemple 9 à partir de 180 mg de 6-bromo-[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine (produit commercial), de 10 ml de 1 - 2-diméthoxyéthane, de 35 mg de di-chlorobis(triphénylphosphine) de palladium, de 1 ,8 ml de NaOH (solution aqueuse 1 N) et de 377 mg de 4-[4- (4,4,5,5-tétraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)-pyrazol-1 -yl]-pipéridine-1 - carboxylate de tert-butyle. On obtient ainsi 120 mg de 4-[4-([1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pyhdin-6-yl)-1 H-pyrazol-1 -yl]pipéridine-1 -carboxylate de 2-méthylpropan-2- yle sous forme d'une laque incolore.

SM : méthode B ; [M+H] ⁺ m/z = 369 ; [M-H] ^" + HCOOH m/z = 413 ; Tr = 3,25 min. Exemple 16e : 4-[4-(4,4,5,5-tétraméthyl-1 ,3,2-dioxaborolan-2-yl)-pyrazol-1 -yl]- pipéridine-1 -carboxylate de tert-butyle

Le composé peut être préparé comme décrit dans le brevet WO2007/066187, p 34.

Exemple 17: Composition pharmaceutique On a préparé des comprimés répondant à la formule suivante :

Produit de l'exemple 7 0,2 g

Excipient pour un comprimé terminé à 1 g

(détail de l'excipient : lactose, talc, amidon, stéarate de magnésium).

L'exemple 7 est pris à titre d'exemple de préparation pharmaceutique, cette préparation pouvant être réalisée si désiré avec d'autres produits en exemples dans la présente demande.

Partie pharmacoloqique : Protocoles expérimentaux

I) Expression et Purification de MET, domaine cvtoplasmique

Expression en Baculovirus:

L'ADN recombinant His-Tev-MET (956-1390) en pFastBac(lnvitrogen) est transfecté dans des cellules d'insectes et après plusieurs étapes d'amplification virale, le stock de baculovirus final est testé pour l'expression de la protéine d'intérêt.

Après infection pendant 72h à 27°C avec le virus recombinant, les cultures de cellules SF21 sont récoltées par centrifugation et les culots cellulaires sont stockés à -80 ⁰ C. Purification :

Les culots cellulaires sont remis en suspension dans le tampon de lyse (tampon A [50 mM HEPES, pH 7.5, 250 mM NaCI, Glycérol 10%, TECP 1 mM ]; + cocktail d'inhibiteurs de protéases Roche Diagnostics sans EDTA, réf 1873580), agités à 4°C jusqu'à homogénéité, puis lysés mécaniquement en utilisant un appareil de type « Dounce ».

Après centrifugation, le surnageant de lyse est incubé 2h à 4°C avec de la résine Nickel Chelate (His-Trap 6 Fast Flow ™, GE HealthCare). Après lavage avec 20 volumes de Tp A, la suspension est packée dans une colonne, et les protéines sont éluées par un gradient de tampon B (TpA + 290 mM imidazole).

Les fractions contenant la protéine d'intérêt au vu de l'analyse électrophorétique (SDS PAGE) sont rassemblées, concentrés par Ultrafiltration (cut-off 1OkDa) et injectées sur une colonne de chromatographie d'exclusion (Superdex â„¢ 200 , GE HealthCare) équilibrée en tampon A . Après clivage enzymatique du tag Histidine, la protéine est réinjectée sur une nouvelle colonne de chromatographie IMAC Nickel Chelate (His-Trap 6 Fast Flow â„¢, GE HealthCare) équilibrée en Tampon A. Les fractions éluées par un gradient de tampon B et contenant la protéine d'intérêt après électrophorèse (SDS PAGE), sont finalement rassemblées et conservées à -80 ⁰ C.

Pour la production de protéine autophosphorylée, les fractions précédentes sont incubées 1 h à température ambiante après ajout d'ATP 2mM, MgCI2 2mM, et Na3VO4 4mM. Après arrêt de la réaction avec 5mM d'EDTA, le mélange réactionnel est injecté sur une colonne de dessalage HiPrep (GE HealthCare) préalablement équilibré en tampon A + Na3VO4 4mM, les fractions contenant la protéine d'intérêt (analyse SDS PAGE) sont rassemblées et stockées à -80 ⁰ C. Le taux de phosphorylation est vérifié par spectrométrie de masse (LC-MS), et par peptide mapping.

Il) Tests A et B A) Test A : Essai HTRF MET en format 96 puits

Dans un volume final de 50μl de réaction enzymatique, MET 5nM final est incubé en présence de la molécule à tester (pour une gamme concentration finale de 0,17 nM à 10 μM, DMSO 3% final) en tampon MOPS 1 OmM pH 7.4 , DTT 1 mM, Tween 20 0.01 %. La réaction est initiée par la solution substrats pour obtenir les concentrations finales de poly-(GAT) 1 μg/ml, ATP 10μM et MgCI2 5mM. Après une incubation de 10 min à température ambiante, la réaction est arrêtée par un mix de 30 μl pour obtenir une solution finale d' Hepes 5OmM pH 7.5, fluorure de potassium 50OmM, BSA 0,1 % et EDTA 133mM en présence de 80ng Streptavidine 61 SAXLB Cis-Bio Int. et 18ng anti-Phosphotyrosine Mab PT66-Europium Cryptate par puits. Après 2 heures d' incubation à température ambiante, la lecture est faite à 2 longueur d' ondes 620nm et 665 nm sur un lecteur pour la technique TRACE / HTRF et le % d' inhibition est calculé d' après les ratios 665/620.

Les résultats obtenus par ce test A pour les produits de formule (I) en exemples dans la partie expérimentale sont tels que IC50 inférieure à 50OnM et notamment à 10OnM.

B) Test B : Inhibition de l'autophosphorylation de MET ; technique ELISA (pppY1230,1234,1235)

a) Lysats cellulaires : Ensemencer les cellules MKN45 en plaque 96 puits (CeII coat BD polylysine) à 20 000 cellules/puits sous 200μl en milieu RPMI + 10%SVF + 1 % L-glutamine. Laisser adhérer 24h à l'incubateur.

Les cellules sont traitées le lendemain de l'ensemencement avec les produits à 6 concentrations en duplicate pendant 1 h. Au moins 3 puits contrôles sont traités avec la même quantité de DMSO finale.

Dilution des produits : Stock à 1 OmM dans le DMSO pur - Gamme de 1 OmM à 30μM avec un pas de 3 en DMSO pur - Dilutions intermédiaires au 1/50 dans du milieu de culture puis prélèvement de 10μl ajoutés directement aux cellules (200μl) : gamme finale de 10000 à 3OnM.

A la fin de l'incubation, éliminer délicatement le surnageant et faire un rinçage avec 200μl de PBS. Puis mettre 10Oμl de tampon de lyse directement dans les puits sur la glace et incuber à 4°C pendant 30minutes. Tampon de lyse : 1 OmM Tris,HCI pH7.4, 10OmM NaCI, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 % Triton X- 100, 10% glycerol, 0.1 % SDS, 0.5% deoxycholate, 2OmM NaF, 2mM Na3VO4, 1 mM PMSF et cocktail anti protéases.

Les 10Oμl de lysats sont transférés dans une plaque en polypropylène fond en V et l'ELISA est réalisé de suite ou la plaque est congelée à -80 ⁰ C. b) ELISA PhosphoMET BioSource Kit KHO0281 Dans chaque puits de la plaque du kit, ajouter 70μl de tampon de dilution du kit + 30μL de lysat cellulaire ou 30μl de tampon de lyse pour les blancs. Incuber pendant 2h sous agitation douce à température ambiante.

Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Incuber avec 10Oμl d'Anticorps anti-phospho MET pendant 1 h à température ambiante. Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Incuber avec 100 μl d'Anticorps anti-lapin HRP pendant 30 minutes à température ambiante (sauf pour les puits chromogen seul).

Rincer 4 fois les puits avec 400μl de tampon de lavage du kit. Mettre 100μL de chromogen et incuber 30minutes dans le noir à température ambiante.

Arrêter la réaction avec 10Oμl de solution stop. Lire sans tarder à 45OnM 0,1 seconde au Wallac Victor plate reader.

C) Test C : Mesure de la prolifération cellulaire par puise de 14C-thymidine Les cellules sont ensemencées dans des plaques Cytostar 96 puits sous 180μl pendant 4 heures à 37°C et 5% CO2 : Les cellules HCT116 à raison de 2500 cellules par puits dans du milieu DMEM + 10% sérum de veau fœtal + 1 % de L-Glutamine et les cellules MKN45 à raison de 7500 cellules par puits dans du milieu RPMI + 10% sérum de veau fœtal + 1 % de L-Glutamine. Après ces 4 heures d'incubation, les produits sont ajoutés sous 10μl en solution 20 fois concentrée selon la méthode de dilution citée pour l'ELISA. Les produits sont testés à 10 concentrations en duplicate de 1000OnM à 0,3nM avec un pas de 3.

Après 72h de traitement, ajouter 10μl de 14C-thymidine à 10μCi/ml pour obtenir 0,1 μCi par puits. L'incorporation de 14C-thymidine est mesurée sur un Micro-Beta (Perkin-Elmer) après 24 heures de puise et 96h de traitement.

Toutes les étapes de l'essai sont automatisées sur les stations BIOMEK 2000 ou TECAN.

Les résultats obtenus par ce test B pour les produits de formule (I) en exemples dans la partie expérimentale sont tels que IC50 inférieure à 10microM et notamment à i microM.

Les résultats obtenus pour les produits en exemples dans la partie expérimentale sont donnés dans le tableau de résultats pharmacologiques ci- après, comme suit : pour le test A, le signe + correspond à inférieur à 50OnM et le signe ++ correspond à inférieur e 10OnM. pour le test B le signe + correspond à supérieur à 50OnM et le signe ++ correspond à inférieur e 10OnM.

pour le test C le signe + correspond à inférieur à 10microM et le signe ++ correspond à inférieur e i microM.

Tableau de résultats pharmacologiques :