FORMULATIONS NUTRITIONNELLES

COMPRENANT UN ISOLAT DE PROTEINES DE POIS

DOMAINE TECHNIQUE DE L'INVENTION

La présente invention concerne des formulations nutritionnelles comprenant un isolât de protéines de pois.

Plus particulièrement, l'invention concerne l'application de ces formulations nutritionnelles : en boissons, par le biais de mélanges de poudres à reconstituer, notamment pour la nutrition diététique (sport, minceur),

- en boissons prêtes-à-boire pour la nutrition diététique ou clinique,

en liquides (boissons ou poches entérales) pour la nutrition clinique, en laits fermentés de type yaourts (brassés, à la grecque, à boire...) en boissons laitières/végétales,

en crèmes laitières/végétales (telle que la crème pour café ou « coffee whitener »), crèmes desserts, desserts glacés ou sorbets.

en biscuits, muffins, pancakes, barres nutritionnelles (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif),

en pains ou pains sans gluten enrichis en protéines,

en céréales hyperprotéinées, obtenues par cuisson extrusion (« crisps » pour inclusion / céréales petit déjeuner / « snacks »),

en fromages.

CONTEXTE DE L'INVENTION

Les poudres et liquides nutritionnels

Les poudres et liquides nutritionnels fabriqués en pédiatrie, pour les enfants ou les adultes comprennent une sélection d'ingrédients nutritionnels bien définis (glucides, protéines, matières grasses, fibres, vitamines et/ou oligoéléments...).

Certains sont utilisés comme une source unique d'alimentation, tandis que d'autres le sont comme compléments alimentaires.

Ces produits nutritionnels comprennent des poudres qui peuvent être reconstituées, avec de l'eau ou un autre liquide aqueux, en liquides nutritionnels de type poche entérale ou boissons prêt-à-boire.

Ces formulations nutritionnelles en poudre et liquides pour les boissons prêt-à-boire et les poches entérales sont particulièrement populaires en nutrition et leur utilisation continue d'augmenter dans le monde entier.

Les formulations nutritionnelles en poudre sont typiquement préparées en faisant un mélange intime de différentes poudres.

Les formulations nutritionnelles prêtes-à-boire ou administrées par voie entérale sont typiquement préparées en faisant une ou deux solutions séparées qui sont mélangées ensuite ensemble, puis traitées thermiquement pour permettre une conservation d'au moins 12 mois à température ambiante. Une première solution représente la phase aqueuse contenant des glucides, des protéines, des fibres, des minéraux, et des émulsifiants hydrosolubles, et la seconde représente la phase lipidique contenant l'huile et des émulsifiants liposolubles.

Il est bien entendu que l'ajout de cette seconde phase lipidique est fonction des formules nutritionnelles visées.

Ces formulations nutritionnelles en poudre et liquides sont notamment recherchées pour leur apport en protéines et leur apport en nutriments énergétiques.

De manière traditionnelle, on a surtout recours aux protéines de lait.

Pour des raisons de coût et de considérations environnementales, il est cependant préféré d'avoir recours à des protéines végétales alternatives aux protéines de lait pour l'enrichissement en protéines dans les boissons mix poudres et les boissons prêtes-à-boire.

Les protéines de soja (isolats, hydrolysats) sont utilisées en grande majorité, mais également des protéines de riz, de blé et de pommes de terre (notamment pour l'amélioration du goût végétal des produits finis).

Dans le cadre de la végétalisation des produits du marché et de la réduction de coût, il peut être proposé de développer de nouvelles solutions à base de protéines de pois pour permettre de trouver une alternative aux protéines de lait pour l'enrichissement en protéines, dans les produits finis telles que les boissons (mix poudre à reconstituer pour la nutrition diététique (sport/minceur) et les boissons prêtes-à-boire pour la nutrition clinique et diététique), et les poches entérales.

En ce cas, les protéines de pois doivent répondre à certaines fonctionnalités telles qu'une bonne solubilité, une faible viscosité en solution, une bonne résistance aux traitements thermiques pour les liquides traités thermiquement ainsi qu'une bonne stabilité de la viscosité au cours du temps.

Elles doivent aussi répondre aux recommandations nutritionnelles recommandées par la FAC7WHO, en termes de profil en acides aminés et en profil de digestibilité.

Or, il a été constaté que lorsque l'on choisit d'utiliser des protéines extraites du pois en mélange à sec dans des bases nutritionnelles poudres, même à des concentrations très faibles, et que lorsque l'on tente de reconstituer la formule nutritionnelle, celle-ci peut présenter une sensation sableuse indésirable en bouche, liée à la granulométrie, la solubilité et la composition desdites protéines.

On déplore également la trop grande viscosité des formulations à haute teneur en protéines contenant des protéines de pois.

Une solution alternative aux protéines de lait doit donc impérativement respecter les bonnes propriétés sensorielles et fonctionnelles auxquelles répondent naturellement les protéines de lait.

Les laits ou desserts fermentes type yaourts brassés, à la Grecque, fermes

Un yaourt, yogourt ou yoghourt est un lait ensemencé par des ferments lactiques afin de l'épaissir et de le conserver plus longtemps.

Pour s'appeler yaourt il doit contenir obligatoirement, et uniquement, deux ferments spécifiques, le Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus et le Streptococcus thermophilus, qui lui donnent sa spécificité de goût, sa texture et apportent aussi certains bénéfices nutritionnels et de santé.

D'autres laits fermentés (à texture de yaourt) ont été créés au cours des dernières années. Ils peuvent contenir ou pas ces deux bactéries, et en plus des souches telles que Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium bifidum, B. longum, B. infantis et B. brève.

Les yaourts sont ainsi une excellente source de probiotiques, c'est à dire de microorganismes vivants qui, lorsqu'ils sont ingérés en quantité suffisante, exercent des effets positifs sur la santé, au-delà des effets nutritionnels traditionnels.

Qu'il soit ferme, brassé ou liquide, il conserve son appellation de yaourt, car c'est en effet, outre les définitions de la Réglementation, sa fabrication qui conditionne sa texture finale.

Ainsi, pour obtenir un yaourt ferme, on ensemence directement le lait dans le pot.

Tandis que dans le cas du yaourt brassé (dit aussi « bulgare »), le lait est ensemencé dans une cuve, puis brassé avant d'être versé dans son pot.

Enfin, le yaourt liquide, dit aussi yaourt à boire, est brassé puis battu jusqu'à l'obtention de la texture adéquate et versé dans des bouteilles.

Mais il existe également d'autres types de yaourts nature, comme les yaourts à la grecque, de texture plus épaisse.

Le pourcentage en matières grasses peut également jouer sur la texture du yaourt, qui peut être fabriqué à base de lait entier, demi-écrémé ou écrémé (une étiquette ne comportant que le mot « yaourt » désigne obligatoirement un yaourt réalisé avec du lait demi-écrémé).

Dans tous les cas, sa Date Limite de Consommation (D.L.C) ne peut excéder 30 jours et il doit toujours être conservé au réfrigérateur entre 0° et 6° .

On distingue ainsi trois principales classes de yaourt :

o Yaourt brassé

Plus liquide, il est souvent plus acidulé que le yaourt nature. Seule sa texture diffère. On le nomme aussi yaourt bulgare - en référence aux origines supposées du yaourt et au Lactobacillus bulgaricus, l'un des deux ferments à l'œuvre dans la transformation du lait en yaourt. Il est fabriqué en cuve avant d'être conditionné en pots.

II est particulièrement adapté à la réalisation de boissons, comme les lassis, les cocktails de fruits...

o Yaourt à la grecque

Particulièrement épais, c'est un yaourt nature très égoutté (technique traditionnelle) ou enrichi de crème. Gourmand, très savoureux, il est indispensable à la réalisation du tsatsiki et pour tous les plats d'Europe de l'Est, et tout simplement mélangé à des fines herbes, c'est un délicieux dip d'apéritif. A froid, il peut se substituer à la crème fraîche épaisse,

o Yaourt à boire

S'il existe nature, il est le plus souvent sucré et aromatisé, et fabriqué avec un yaourt brassé battu. Imaginé en 1 974, il a permis aux adolescents de renouer avec le plaisir du lait, en dégustant le yaourt sans cuillère, à même la bouteille. Il existe depuis peu également en « yaourt à verser », en brique de 950 g, pour ceux qui veulent associer céréales et yaourts au petit déjeuner. Peu énergétique - de 52 kcal pour un yaourt à 0% fabriqué à partir de lait écrémé ; à 88 kcal pour un yaourt au lait entier - le yaourt « nature » est naturellement peu riche en matières grasses et en glucides, mais contient des protéines en quantité intéressante. C'est également une source de micronutriments (notamment calcium et phosphore) ainsi que de vitamines B2, B5, B12 et A. Constitué à 80% d'eau, le yaourt participe activement à l'hydratation du corps.

La consommation régulière de yaourt est ainsi reconnue pour améliorer la digestion et l'absorption du lactose (avis du 19 octobre 2010 de l'EFSA). D'autres études montrent des bénéfices potentiels sur l'amélioration des diarrhées des enfants, et du système immunitaire chez certaines personnes comme les personnes âgées.

Toutefois, la consommation de lait de vache est de plus en plus critiquée, remise en question et on assiste à un nombre croissant de personnes qui décident tout simplement de l'éliminer de leur alimentation, pour des raisons par exemple d'intolérance au lactose, ou des problèmes d'allergénicité.

Des solutions de yaourts base laits végétaux ont donc été proposées, car les laits végétaux sont beaucoup plus digestes que le lait de vache, sont riches en vitamines, minéraux et en acides gras non saturés.

Dans la suite de notre exposé, par souci de simplicité, nous continuerons à employer le terme « yaourt » même si l'origine des protéines n'est pas laitière (officiellement, les « yaourts » qui sont fabriqués à partir d'ingrédients autres que du lait fermenté, des ingrédients laitiers, ou des ferments classiques de type Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus et Streptococcus thermophilus n'ont pas le droit à cette appellation).

La source végétale la plus usitée est le soja. Cependant, même si le lait de soja présente la plus grande richesse en calcium et en protéines, il est également très indigeste ; c'est pourquoi il est déconseillé pour les enfants.

De plus, il n'est pas non plus conseillé d'abuser des produits à base de soja car leurs effets sur la santé peuvent être contre-productifs lorsqu'ils sont consommés en grande quantité.

Par ailleurs, il est communément admis que 70 % de la production mondiale du soja est

OGM. Le lait et les boissons laitières ; les boissons végétales

Le lait est un aliment qui contient une source de protéines non négligeables et de haute qualité biologique. Pendant longtemps, les protéines animales ont été plébiscitées pour leurs excellentes qualités nutritionnelles car elles contiennent tous les acides aminés essentiels en proportions adéquates.

Cependant, certaines protéines animales peuvent être allergènes, entraînant des réactions très gênantes, voire même dangereuses au quotidien.

L'allergie aux produits laitiers est une des réactions allergiques les plus répandues. Les études démontrent que 65 % des personnes qui souffrent d'allergies alimentaires sont allergiques au lait. La forme adulte de l'allergie au lait, appelée ici «allergie aux produits laitiers», est une réaction du système immunitaire qui crée des anticorps pour combattre l'aliment indésirable. Cette allergie est différente de l'allergie aux protéines du lait de vache (protéines bovines), également appelée l'APLV, qui touche les nouveau-nés et les enfants. Les manifestations cliniques de cette allergie sont principalement gastro-alimentaires (50 à 80% des cas), également cutanées (1 0 à 39% des cas) et respiratoires (19 % des cas).

Au vu de tous les désavantages cités ci-dessus liés à la consommation des protéines laitières, il en résulte un grand intérêt pour l'emploi de protéines de substitution, également appelées protéines alternatives, parmi lesquelles se classent les protéines végétales.

Les laits végétaux, obtenus à partir d'ingrédients végétaux peuvent être une alternative aux laits d'origine animale. Ils pallient et évitent les APLV. Ils sont exempts de caséine, de lactose, de cholestérol, sont riches en vitamines et en sels minéraux, sont également riches en acides gras essentiels mais pauvres en acides gras saturés. Certains possèdent également des taux de fibres intéressants.

Outre le fait que certains laits végétaux sont pauvres en calcium, que d'autres du fait de leur rareté botanique sont indisponibles dans le commerce, il faut également mentionner gue certains laits végétaux sont également allergènes. C'est le cas par exemple des laits végétaux préparés à partir d'oléagineux, comme par exemple les laits de soja.

Au vu de tous les désavantages des protéines laitières mais également du caractère allergène dangereux conféré par certaines protéines végétales, il existe une réelle demande de la part des consommateurs, non satisfaite à ce jour, pour des laits végétaux possédant une innocuité indiscutable et reconnue et pouvant de ce fait être consommés par toute la famille. Les fabricants traditionnels commencent également à chercher de nouvelles sources de protéines pour enrichir leurs produits.

La société Demanderesse s'est également attelée à cette recherche afin de pouvoir répondre aux demandes croissantes des industriels et des consommateurs pour des composés possédant des propriétés nutritionnelles intéressantes sans pour autant présenter les inconvénients de certains composés déjà existants. Les travaux de la Demanderesse ont portés sur la formulation de nouveaux laits végétaux possédant une innocuité indiscutable et reconnue, et pouvant de ce fait être consommés par toute la famille.

Les crèmes laitières pour crème à café, beurre, fromage, crèmes Chantilly, sauces, nappages, décoration de gâteaux

Les crèmes laitières sont des produits à plus de 30 % de matière grasse (MG) obtenus par concentration du lait, se présentant sous la forme d'une émulsion de gouttelettes d'huile dans le lait écrémé. Elles peuvent être utilisées pour différentes applications, soit directement comme produit de consommation (utilisée par exemple comme crème à café) ou comme matière première en industrie pour la fabrication d'autres produits tels que le beurre, le fromage, les crèmes Chantilly, les sauces, les crèmes glacées, ou encore les nappages et la décoration de gâteaux.

Il existe différentes variétés de crèmes : fraîche, allégée, liquide, épaisse, pasteurisée. Les crèmes se distinguent selon leur teneur en matière grasse, leur conservation et leur texture.

La crème crue est la crème issue de la séparation du lait et de la crème, directement après l'écrémage et sans passer par l'étape pasteurisation. Elle est liquide et contient de 30 à 40% de matières grasses. Toujours de texture liquide, la crème pasteurisée a subi le processus de pasteurisation. Elle a donc été chauffée à 72° C pendant une vingtahe de seconde afin d'éliminer les microorganismes indésirables pour l'homme. Cette crème se prête particulièrement bien au foisonnement. Elle prend ainsi une texture plus légère et volumineuse en étant battue pour y incorporer des bulles d'air. Elle est parfaite pour les chantilly par exemple.

Certaines crèmes liquides vendues en magasins sont dites de longue conservation. Elles peuvent être stockées plusieurs semaines dans un endroit frais et sec. Pour se conserver aussi longtemps, ces crèmes ont été soit stérilisées, soit chauffées selon le procédé UHT. Pour la stérilisation, il s'agit de chauffer la crème pendant 15 à 20 minutes à 1 15 °C. Avec le procédé UHT (ou Ultra Haute Température), on chauffe la crème pendant 2 secondes à 1 50° C. La crème est ensuite rapidement refroidie, ce qui a pour résultat de mieux conserver ses qualités gustatives.

La crème est naturellement liquide, une fois qu'elle est séparée du lait, après écrémage. Afin qu'elle prenne une texture épaisse, elle passe par l'étape de l'ensemencement. On incorpore ainsi des ferments lactiques qui, après maturation, donneront à la crème cette texture plus épaisse et ce goût plus acide et plus riche.

À côté des technologies traditionnelles (millénaires ou centenaires) d'obtention de la crème à partir du lait, se sont développées depuis cette dernière décennie, des technologies d'assemblage ou de reconstitution de la crème à partir d'ingrédients laitiers.

Ces technologies nouvelles de reconstitution des crèmes laitières présentent des avantages évidents dans les procédés industriels, par rapport à la crème fraîche : faible coût de stockage des matières premières, plus grande flexibilité dans la formulation, indépendance vis-à-vis de la saisonnalité de la composition du lait.

Aussi, les crèmes laitières reconstituées peuvent bénéficier de l'image de naturalité généralement attribuée aux produits laitiers, puisque la réglementation exige pour leur fabrication l'utilisation exclusive d'ingrédients laitiers avec ou non adjonction d'eau potable et les mêmes caractéristiques de produit fini que la crème de lait (Codex Alimentarius, 2007).

Le développement du domaine des crèmes laitières reconstituées a ouvert de nouvelles possibilités dans la formulation des crèmes, et plus particulièrement celle de la naissance du concept des crèmes végétales.

Les crèmes végétales sont des produits similaires aux crèmes laitières dont la matière grasse laitière est remplacée par la matière grasse végétale (Codex Alimentarius, codex Stan 192, 1995).

Elles sont formulées au départ de quantités bien définies d'eau, de matières grasses végétales, de protéines laitières ou végétales, de stabilisants, d'épaississants et d'émulsifiants de faible poids moléculaire.

Les paramètres physico-chimiques, tels que la granulométrie, la rhéologie, la stabilité et l'aptitude au foisonnement sont les caractéristiques qui intéressent au premier chef les industriels et les chercheurs du domaine de la substitution des crèmes laitières par des crèmes végétales.

Par exemple, comme dans toute émulsion, la taille des gouttelettes dispersées (granulométrie) est un paramètre clé de la caractérisation des crèmes car il présente un impact non négligeable, d'une part, sur d'autres propriétés physico-chimiques telles que la rhéologie et la stabilité, et d'autre part, sur les propriétés sensorielles telles la texture et la couleur des crèmes.

L'influence du type d'émulsifiant inclut tant les émulsifiants de faible poids moléculaire tels les mono, diglycérides et phospholipides, que ceux de haut poids moléculaire comme les protéines, ainsi que des interactions protéines/émulsifiants de faible poids moléculaire.

Il est ainsi connu que la concentration de l'émulsifiant lipidique influence également la taille des gouttelettes des crèmes. Dans les systèmes stabilisés par des protéines, une concentration très élevée de l'émulsifiant lipidique peut entraîner une forte augmentation de la taille moyenne des gouttelettes, du fait d'une forte agrégation des gouttelettes suite à la désorption des protéines.

Le type de protéines utilisées dans la formulation peut également affecter la granulométrie des crèmes. En effet, dans les mêmes conditions d'émulsification, les crèmes à base de sources protéiques riches en caséines, telles la poudre de lait écrémé, présentent en général des diamètres moyens de gouttelettes plus petits que celles à base de sources protéiques riches en protéines de lactosérum, telles que la poudre de lactosérum .

Les différences de granulométrie entre les crèmes préparées à partir des deux sources protéiques (caséines ou protéines de lactosérum) sont liées aux différences de propriétés interfaciales à l'interface huile/eau, les caséines ayant une plus grande capacité d'abaissement de la tension interfaciale que les protéines de lactosérum.

Par ailleurs, la concentration en protéines dans la formulation influence la granulométrie des crèmes. En effet, il a été démontré qu'à fraction massique d'huile constante, la taille des gouttelettes diminue avec la concentration en protéines jusqu'à une certaine concentration au-delà de laquelle la taille varie très peu.

La présence simultanée des molécules amphiphiles de poids moléculaire faible (surfactif) et élevé (protéines) dans une formulation de crèmes se traduit généralement par une diminution de la taille des gouttelettes au cours de l'émulsification. Par ailleurs, l'adsorption compétitive à l'interface huile/eau entre tensioactifs et protéines conduit généralement au cours de la maturation à une désorption des protéines de la surface des gouttelettes, ce qui ce qui peut entraîner des modifications granulométriques.

Finalement, il apparaît que les conditions d'émulsification, le choix des ingrédients (tant protéiques que lipidiques) utilisés dans la formulation, ainsi que la température, influencent les propriétés finales des crèmes.

Il apparaît que les crèmes végétales peuvent conduire à de nouvelles propriétés technofonctionnelles. Ainsi, la résistance à la congélation pouvant conférer une grande stabilité aux crèmes glacées en est un exemple. Elles peuvent également présenter une stabilité en liaison chaude ou froide, ce qui est un avantage considérable, puisque ces crèmes peuvent être utilisées indifféremment dans la préparation de plats chauds ou froids.

Si les crèmes végétales peuvent apporter de nouvelles fonctionnalités et montrer des propriétés texturales comparables voire plus intéressantes que celles des crèmes laitières, il n'en demeure pas moins qu'elles peuvent présenter des défauts sensoriels, notamment par rapport à leur gout et leur odeur, même parfois après l'ajout d'arômes (cas des protéines de soja, ou des protéines de pois). La société Demanderesse a donc mené des travaux sur les crèmes végétales (dont le domaine des « non dairy » coffee creamers) afin d'approfondir les connaissances sur l'influence de leurs ingrédients, comme les protéines de pois et leurs interactions entre eux (protéines-protéines, protéines-matière grasse, protéines-eau, etc.) sur les propriétés finales des crèmes.

La société Demanderesse a également développé des recettes de fromages végétaliens.

Le fromage est normalement un aliment obtenu à partir de lait coagulé ou de crème laitière, puis d'un égouttage suivi ou non de fermentation et éventuellement d'affinage.

Le fromage est ainsi fabriqué à partir de lait de vache principalement, mais aussi de brebis, de chèvre, de bufflonne ou d'autres mammifères. Le lait est acidifié, généralement à l'aide d'une culture bactérienne. Une enzyme, la présure, ou un substitut comme de l'acide acétique ou du vinaigre, est ensuite adjointe afin de provoquer la coagulation et former le lait caillé et le petit-lait.

Il est connu de réaliser des alternatives végétaliennes au fromage (notamment des fromages de type mozzarella), en substituant les caséinates de lait par des amidons natifs et modifiés, plus particulièrement des amidons stabilisés acétates.

Cependant, il est encore recherché à améliorer le caractère de « déchiquetabilité » (terme anglosaxon de « shredability »), la fonte, la stabilité au gel / dégel, la saveur (notamment aux Etats- Unis pour les préparations de pizza).

Des essais ont été menés en combinant huile, amidons modifiés et protéines de pois sans donner plein satisfaction.

La société Demanderesse a trouvé que l'utilisation des isolats de protéines de pois conforme à l'invention permettait de répondre à ce cahier des charges, notamment en termes de « shredability », fonte et saveur.

Les crèmes glacées

Les crèmes glacées contiennent classiquement des graisses animales ou végétales, des protéines (protéines de lait, protéines d'œuf) et/ou du lactose.

Les protéines jouent alors le rôle de texturant en plus d'apporter du goût à la crème glacée. Elles sont essentiellement produites par la pesée des ingrédients, leur pré-mélange, leur homogénéisation, pasteurisation, réfrigération à 4°C (permettant la maturation), puis la congélation avant emballage et stockage.

De nombreuses personnes souffrent cependant d'une intolérance aux produits laitiers ou d'autres ingrédients d'origine animale qui les empêchent de consommer du lait ou de la crème glacée traditionnelle.

Pour ce groupe de consommateurs, il n'y a jusqu'à présent pas d'alternative à la crème glacée contenant du lait ayant une valeur sensorielle comparable.

Dans les préparations de crème glacée jusqu'ici connues présentant des ingrédients végétaux, principalement à base de soja, des tentatives ont été faites pour remplacer les émulsifiants animaux par des protéines végétales.

Des protéines végétales séchées, obtenues dans les procédés classiques d'extraction aqueuse ou hydro-alcoolique et après le séchage sous forme de poudre ont été souvent utilisées. Ces protéines se révèlent être des mélanges hétérogènes de polypeptides, dont certaines fractions possèdent à des degrés variables des propriétés particulièrement bonnes comme émulsifiants ou agents de formation de gel, comme agents de liaison de l'eau, de la mousse ou des agents améliorant la texture.

Jusqu'à présent, les produits de protéines végétales ont été obtenus presque exclusivement à partir de fèves de soja, sans fractionnement en fonction de leurs propriétés fonctionnelles spécifiques.

Par ailleurs, le gout des crèmes glacées préparées à partir desdites protéines de soja est rédhibitoire.

La société Demanderesse a donc mené des travaux sur les crèmes végétales et a trouvé que les isolats de protéines de pois selon l'invention permettaient de répondre au cahier des charges recherché.

Les produits de biscuiterie, produits de pâtisserie, produits de panification et produits céréaliers hyperprotéinés

Pour obtenir une allégation « riche en protéines » il faut, selon la réglementation en vigueur, que l'apport calorique lié aux protéines soit égal ou supérieur à 20 % de l'apport énergétique total du produit fini.

Cela signifie que, dans les produits contenant une teneur en matière grasse conséquente comme les biscuits ou les cakes (entre 10 % pour les plus maigres à 25 % pour les plus riches avec une moyenne à 18 % de matière grasse), le taux d'incorporation des protéines pour atteindre l'allégation est important et est supérieur à 20 %.

Cependant, le remplacement d'au moins 1 /5 ^ème de la formulation par une protéine, quelle qu'elle soit et quelle que soit la matrice (biscuits / cake), constitue un vrai défi technologique, car ces reformulations ne sont pas sans conséquence sur :

- les propriétés structurales et/ou texturales des préparations hyperprotéinées ainsi produites (liées notamment à leur niveau d'hydratation) et également des produits finis,

- le procédé de fabrication des préparations hyperprotéinées (aptitude à être façonnées par moulage, « machinabilité »),

- la qualité sensorielle des préparations hyperprotéinées et des produits finis.

La société Demanderesse a déjà proposé une protéine de pois, le NUTRALYS® BF, pour augmenter la teneur en protéines de biscuits, tout en limitant les impacts négatifs sur la préparation et le produit fini.

La solution venait d'une protéine de pois présentant peu ou pas de propriétés fonctionnelles (pouvoir émulsifiant/ pouvoir gélifiant) et peu d'interaction avec l'eau, cette protéine étant peu soluble.

Cependant cette protéine ne permet pas de répondre complètement aux problématiques techniques évoquées ci-dessus.

Ainsi il est possible d'obtenir de bons résultats sur des biscuits « source de protéines », c'est-à-dire où 12 % des apports caloriques totaux sont apportés par les protéines. Mais sur des allégations « riche en protéine » cette protéine NUTRALYS® BF présente des limites et les produits ne sont pas optimisés en termes de texture, celle-ci restant pâteuse.

La société Demanderesse a donc continué à travailler pour optimiser les qualités de protéines végétales, notamment issues du pois, en proposant de nouveaux isolats de protéines de pois conformes à l'invention, qui permettent de mieux répondre aux défis technologiques tel l'enrichissement en protéines des produits du « baking ».

En effet l'isolât de protéine de pois obtenu selon l'invention permet de combiner les bénéfices du NUTRALYS® BF, à savoir peu de fonctionnalité (pouvoir émulsifiant / pouvoir gélifiant) mais avec une forte solubilité.

La société Demanderesse a ainsi trouvé que ces deux propriétés, à sa connaissance jamais associées à ce jour, pouvaient être combinées pour offrir une source protéique permettant un fort enrichissement en protéines sans impact négatif sur le procédé de préparation ou la texture des préparations ou produits finis.

RESUME DE L'INVENTION

La présente invention propose de nouvelles formulations nutritionnelles contenant un isolât de protéines de pois susceptible de se substituer en tout ou partie à la protéine de lait ou de soja, neutre en goût, et qui présentent des propriétés adaptées :

o au mélange de poudres,

o aux boissons stérilisées UHT prêtes-à-boire protéinées (voire riches en protéines ou dites hyperprotéinées) et

o aux liquides nutritionnels administrées par voie entérale,

où une faible viscosité de la boisson et une amélioration de la solubilité de la protéine de pois sont recherchées et également en :

o laits fermentés de type yaourts (brassés, à la grecque, à boire...)

o boissons laitières/végétales,

o crèmes laitières/végétales (tel en « coffee whitener »), desserts glacés ou sorbets, où la capacité émulsifiante dudit isolât de protéines de pois est d'intérêt pour son utilisation dans les matrices de ces produits laitiers en substitution partielle ou totale des protéines laitières,

o fromages végétaliens,

où l'ajout dudit isolât de protéines de pois permet d'améliorer la shredability, la fonte et la saveur des formages végétaliens de type Mozzarella.

La présente invention propose également de nouvelles formulations nutritionnelles contenant un isolât de protéines de pois présentant des propriétés adaptées :

aux biscuits, muffins, pancakes, barres nutritionnelles (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif),

aux pains ou pains sans gluten enrichis en protéines,

en céréales hyperprotéinées, obtenues par cuisson extrusion (« crisps » pour inclusion / céréales petit déjeuner / « snacks ») L'invention conduit également à améliorer le goût de la protéine de pois (diminution des notes pois, notes vertes) pour être plus neutre dans les applications/produits finis (à forte teneur en protéine et standards) utilisant l'isolât de protéines de pois en substitution partielle ou totale de protéines de lait, propriété importante pour tous les types de produits laitiers, boissons laitières ou végétales, laits fermentés de type yaourts, crèmes laitières ou végétales...

L'invention a précisément pour objet une formulation nutritionnelle comprenant un isolât de protéines de pois qui :

o présente entre 0,5 et 2 % d'acides aminés libres,

o présente une viscosité à 20 °C:

■ de 1 1 à 18.1 0 ^-3 Pa. s. à un taux de cisaillement de 10 s ^-1 ,

^■ de 9 à 1 6.10 ^"3 Pa.s. à un taux de cisaillement à 40 s ^-1 , et

^■ de 8 à 1 6.10 ^"3 Pa.s. à un taux de cisaillement de 600 s ^-1 , o présente une solubilité :

^■ de 30 à 40 % dans des zones de pH de 4 à 5

■ de 40 à 70 % dans des zones de pH de 6 à 8.

De préférence, l'isolât de protéines de pois présente une digestibilité exprimée selon le Coefficient d'Utilisation Digestive (CUD) d'une valeur comprise entre 93,5 et 95 %.

De préférence, l'isolât de protéines de pois présente un degré d'hydrolyse (DH) compris entre 5 et 10 %.

En particulier, l'isolât de protéines de pois est présenté, selon le test SYMPH ID, comme une protéine de « viscosité rapide » , traduisant une assimilation duodénale rapide des acides aminés constitutifs dudit isolât.

De préférence, l'isolât de protéines de pois a été pasteurisé à haute température et de courte durée avant d'être séché par atomisation.

Dans un mode de réalisation de la présente invention, la formulation nutritionnelle comprend au moins un isolât de protéine de pois et au moins une protéine de lait. La protéine de lait représente de préférence au moins 10, 15, 20, 25, 30, 40, 45 ou 50% en poids par rapport au poids total de protéines, lorsque la formulation nutritionnelle est en poudre.

Dans un autre mode de réalisation de la présente invention, la formulation nutritionnelle comprend au moins un isolât de protéine de pois, une protéine végétale autre, telle qu'une protéine de soja, riz et/ou blé, et au moins une protéine de lait.

L'isolât de protéines de pois représente :

o entre 40 et 100 %, de préférence entre 50 et 100 %, 60-100%, 70-100%, 80-1 00% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle en poudre.

o entre 0,1 % et 100% de la protéine totale pour les boissons prêtes-à-boire pour la nutrition clinique et minceur, de préférence entre 20-100%, 30-100%, 40-100%, 50 et 100 %, 60-100%, 70-100%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle et

o entre 52% et 100% de la protéine totale pour les boissons prêtes-à-boire pour la nutrition du sportif, 60-100%, 70-1 00%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle, o entre 0,1 % et 1 00 % de la protéine totale pour les laits fermentes de type yaourts, de préférence entre 20-100%, 30-100%, 40-100%, 50 et 100 %, 60-1 00%, 70-100%, 80-100%, 20-60%, 30-50% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle,

o entre 0,1 % et 100 % de la protéine totale pour les boissons laitières, de préférence entre 20-100%, 30-1 00%, 40-100%, 50 et 100 %, 60-1 00%, 70-100%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle

o entre 0,1 % et 100 % de la protéine totale pour les crèmes laitières, desserts glacés ou sorbets, plus particulièrement entre 50 -100 %, 60-1 00%, 70-100%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale pour les coffee whitener et entre 20-100%, 30-100%,

40-100%, 50-100%, ou 40-90% de la protéine totale pour les crèmes laitières, desserts glacés ou sorbets,

o entre 5 % et 100 % de la protéine totale pour les biscuits, muffins, pancakes, barres nutritionnelles (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif), de préférence entre 20-100%, 30-1 00%, 40-100%, 50 et 100 %, 60-1 00%, 70-100%, 80-100% ou

50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle

o entre 5 % et 100 % de la protéine totale pour les pains ou pains sans gluten enrichis en protéines, de préférence entre 10-100%, 20-100%, 30-100%, 40-100%, 50 et 100 %, 60-100%, 70-100%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle

o entre 5 % et 100 % de la protéine totale pour les céréales hyperprotéinées, obtenues par cuisson extrusion (« crisps » pour inclusion / céréales petit déjeuner / « snacks »), de préférence entre 20-100%, 30-100%, 40-100%, 50 et 100 %, 60- 100%, 70-100%, 80-100% ou 50-90% de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle.

Pour les fromages végétaliens, environ 5 % en poids d'isolats de protéines de pois dans la recette suffisent à améliorer leurs caractéristiques techniques et organoleptiques.

Par exemple, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 0,1 - 10%, 1 0-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100%, en particulier en poids, de la protéine totale dans la formulation nutritionnelle, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

L'invention a également pour objet une formulation nutritionnelle telle que décrite ci- dessus, pour une utilisation comme source protéique unique ou comme complément alimentaire, destiné aux nourrissons, enfants et/ou adultes.

Elle a encore pour objet l'utilisation de cette formulation nutritionnelle comme source protéique unique ou comme complément alimentaire, destiné aux nourrissons, enfants et/ou adultes.

DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION

La présente invention concerne des formulations nutritionnelles comprenant un isolât de protéines de pois selon la présente invention. Elle concerne également l'isolât selon la présente invention, et en particulier son utilisation de l'isolât selon la présente invention pour la préparation des formulations nutritionnelles.

Plus particulièrement, l'invention concerne l'application de ces formulations nutritionnelles en boissons, par le biais de mélanges de poudres à reconstituer, pour la nutrition diététique (sport, minceur), et en boissons prêtes-à-boire pour la nutrition clinique (voie orale ou poche entérale) et diététique, où l'on recherche une faible viscosité de la boisson et une amélioration de la solubilité de la protéine de pois.

Egalement, l'invention concerne l'application de ces formulations nutritionnelles en boissons laitières ou végétales, en laits fermentés de type yaourts (brassés, à la grecque, à boire) et en crèmes laitières ou végétales, desserts glacés ou sorbets.

Enfin, l'invention concerne l'application de ces formulations nutritionnelles en biscuits, muffins, pancakes, barres nutritionnelles (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif), en pains ou pains sans gluten enrichis en protéines, en petites céréales obtenues par cuisson extrusion (« crisps ») hyperprotéinés, où l'on recherche plus particulièrement des solutions hyperprotéinées sans impact négatif sur le procédé de préparation ou la texture des préparations ou produits finis.

Quant au goût, il a été trouvé par la société Demanderesse que la sensation sableuse indésirable en bouche de la poudre reconstituée résultant du mélange à sec d'une protéine de pois dans une formulation nutritionnelle en poudre enrichie en protéines peut être réduite ou éliminée par la mise en œuvre d'un isolât de protéines de pois particulier.

II a également été trouvé que l'incorporation dans ladite formule nutritionnelle de l'isolât de protéines de pois de l'invention permet d'améliorer le goût de la protéine de pois en diminuant la note pois et la note végétale.

Au sens de l'invention, on entend par « formulations nutritionnelles en poudre », des formulations en poudre comprenant :

o au moins une protéine végétale, et en particulier de pois,

o de manière facultative, au moins une protéine d'origine laitière, et

o de manière facultative, au moins un ingrédient de type matières grasses et glucides, qui sont reconstituables avec un liquide aqueux, et qui conviennent pour l'administration orale à un être humain.

L'expression « mélange à sec » tel qu'utilisé ici, sauf indication contraire, se réfère au mélange des composants ou des ingrédients pour former une poudre nutritionnelle de base ou, à l'addition d'un composant sec, en poudre ou granulé ou d'un ingrédient à base poudre pour former une formulation nutritionnelle en poudre.

Tous les pourcentages, parties et rapports, tel qu'utilisé ici, se rapportent au poids de la formulation totale, sauf indication contraire.

Les formulations alimentaires en poudre et les procédés de fabrication correspondant de la présente invention peuvent comprendre, consister ou consister essentiellement en les éléments essentiels de l'invention telle que décrite ici, ainsi que tout élément supplémentaire ou facultatif décrit ici ou autrement utiles dans les applications de la formulation nutritionnelle. Les formulations nutritionnelles en poudre de la présente invention comprennent un isolât de protéines de pois.

Les formulations nutritionnelles en poudre de la présente invention sont généralement sous la forme de compositions particulaires aptes à l'écoulement ou sensiblement fluides, ou au moins des compositions particulaires qui peuvent être facilement moulées et mesurées à l'aide d'une cuillère ou d'un autre dispositif similaire, dans lequel les compositions peuvent facilement être reconstitués par l'utilisateur prévu avec une solution aqueuse, typiquement de l'eau, pour former une formulation nutritionnelle liquide pour utilisation orale ou entérale immédiate.

Dans ce contexte, l'utilisation « immédiatement » signifie généralement dans environ 48 heures, plus typiquement pendant environ 24 heures, de préférence juste après la reconstitution.

Les formulations nutritionnelles en poudre comprennent des isolats de protéines de pois qui, dans certains modes de réalisation, peuvent représenter jusqu'à 100% de la protéine apportée.

Les formulations alimentaires en poudre peuvent être formulées avec tous types et quantités de nutriments suffisantes de manière à former un complément alimentaire, ou une formulation nutritionnelle spécialisée destinée à être utilisée chez les personnes suivant un régime alimentaire particulier destiné à la diététique du sport et de la minceur.

Dans un exemple de réalisation, la formulation nutritionnelle en poudre peut être formulée pour une utilisation :

o pour réparer les muscles après un effort intense, par exemple chez le sportif, ou o pour assurer chez le sportif le maintien ou la construction de la masse musculaire, ou

o comme substitut de repas par des personnes désirant perdre du poids via un effet satiétogène.

Les formulations alimentaires en poudre peuvent avoir une densité calorique adaptée aux besoins nutritionnels de l'utilisateur final, bien que dans la plupart des cas, les poudres reconstituées comprennent d'environ 350 à environ 400 kcal / 100 ml.

Les formulations alimentaires en poudre peuvent présenter un taux protéique adapté aux besoins nutritionnels de l'utilisateur final, bien que dans la plupart des cas, les poudres reconstituées comprennent d'environ 20 à environ 91 g de protéines / 1 00 g, y compris d'environ 40 à environ 65 g de protéines / 100g.

Ainsi, la formulation peut comprendre entre 20 et 95 % de protéines par rapport au poids totale de la formulation, par exemple entre 20-90%, 30-80%, ou 40-60%.

Par exemple, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 40- 50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% de la protéine totale de la formulation, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

Par ailleurs, les formulations alimentaires en poudre peuvent présenter un taux de matière grasse adapté aux besoins nutritionnels de l'utilisateur final, bien que dans la plupart des cas, les poudres reconstituées comprennent d'environ 0,5 à environ 13 g /100 g, y compris d'environ 3 à environ 7 g /100 g.

Ainsi, la formulation peut comprendre entre 0 et 20 % de lipides par rapport au poids totale de la formulation, par exemple entre 0,5-1 5%, 1 -10%, ou 3-7% (en particulier % en poids). Les formulations nutritionnelles en poudre de la présente invention peuvent être emballées et scellées dans des conteneurs simples ou multi-usage, puis stockées dans des conditions ambiantes jusqu'à environ 36 mois ou plus, plus typiquement d'environ 12 à environ 24 mois.

Pour multi-utilisation des conteneurs, ils peuvent être ouverts et couverts pour une utilisation répétée par l'utilisateur final, à condition que le paquet recouvert soit ensuite stocké dans des conditions ambiantes (par exemple, éviter les températures extrêmes) et les contenus utilisés dans environ un mois ou deux.

Les domaines d'applications des formulations nutritionnelles selon l'invention sont notamment :

o la nutrition diététique (sport, minceur),

o la nutrition clinique (sous forme de boisson, de crème dessert ou de poche entérale), o les produits laitiers (sous forme de yaourts, boissons laitières, crèmes laitières, desserts glacés ou sorbets),

o les produits de biscuiterie, produits de pâtisserie, produits de panification et produits céréaliers hyperprotéinés.

Dans le domaine du sport, il est connu que les protéines participent à l'entretien et à la croissance du muscle. L'apport en protéines est également important pour les athlètes qui pratiquent la musculation ou le renforcement musculaire.

Ces protéines doivent être équilibrées en termes de profil en acide aminés et doivent respecter les recommandations de la FAO/WHO. Leur digestibilité est un facteur important allant d'une rapide digestibilité à une plus lente digestibilité en fonction du moment de l'apport en protéines.

Les boissons protéinées ou hyperprotéinées prêtes à boire permettent alors de faire bénéficier l'organisme d'un apport protéique de choix, les calories en moins.

Ces boissons hyperprotéinées doivent :

être riches en protéines, pauvres en glucides et en graisses ;

avoir bon goût ;

être conçues pour aider à perdre du poids, en stimulant la perte de graisse et en aidant à la récupération musculaire ;

être satiétogènes ;

permettre de faire face aux fringales, sans sucres ni graisses ajoutées ;

présenter un contenu équilibré en acides aminés essentiels, en fibres, en vitamines et minéraux ;

être hypocaloriques.

Ces boissons prêtes-à-boire peuvent être avantageusement préparées avec les isolats de protéines de pois conformes à l'invention. Elles peuvent être d'ailleurs utilisées comme seule source de protéines.

Par exemple, les boissons végétales alternatives au lait de vache, contiennent en moyenne de 4,5 à 1 1 g de protéines pour 100 ml de boisson, de préférence de l'ordre de 7 g de protéines pour 100 ml, et sont très pauvres en fibres (de l'ordre de 0,5 à 1 g pour 100 ml). Ainsi, la boisson peut comprendre entre 1 et 20 % de protéines par rapport au poids totale de la boisson, par exemple entre 3-15%, ou 6-8%.

Par exemple, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 50- 60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% de la protéine totale, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages. De préférence, il représente au moins 52 %. Notamment, l'apport en protéines de pois est compris entre 52 et 100 % de l'apport en protéines totales.

Pour les boissons prêtes à boire, l'apport en protéines de pois peut aller de 0 à 100%, de préférence de 0,01 ou 0,1 à 100 %. Par exemple, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 0,1 -10%, 10-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% de la protéine totale, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

Grâce à un goût dépourvu de note végétale marquante, cette source protéique est bien adaptée à tout type de boissons et grâce à sa viscosité modérée, peut être incorporée jusqu'à 100 % sans altérer le goût final (même si, pour les très hautes teneurs, il peut être avantageux d'ajouter des arômes).

Dans le domaine des boissons « minceur », i.e. destinées à être utilisées dans des régimes hypocaloriques ou destinées à la perte de poids, comme mentionné précédemment, ces boissons protéinées ou enrichies en protéines ne sont pas uniquement efficaces pour une prise rapide de muscles. Ce type de boisson est également très avantageux dans le cadre d'un régime minceur basé sur la consommation de protéines.

Il est connu que les boissons minceurs sont idéales pour aider à la perte de poids. Elles permettent plus particulièrement de :

procurer un effet de satiété

protéger les muscles et de tonifier le corps, évitant la reprise de poids.

Comme pour les boissons « sport », ces boissons minceurs présentent :

o un contenu équilibré en acides aminés essentiels, en fibres, en vitamines et minéraux

o un contenu réduit en sucres, en matières grasses et en calories. C'est ainsi que les boissons protéinées sont en effet d'une grande efficacité pour perdre rapidement quelques kilos. Ces préparations riches en protéines réduisent ou stoppent simplement la sensation de faim chez la personne qui en consomme. En prenant par exemple une telle boisson, l'utilisateur peut réduire de manière considérable la quantité de nourriture à consommer, et permettre une perte de pois rapide (dans le cadre d'un processus de substitut de repas pour contrôle du poids, ou substitut de la ration journalière totale pour contrôle du poids).

En nutrition clinique, il est connu que la nutrition entérale est une solution thérapeutique de nutrition par sonde qui est utilisée lorsque le tube digestif est fonctionnel et accessible mais lorsque le patient ne peut s'alimenter normalement ou encore dans les cas de dénutrition sévère.

Cette technique permet d'apporter directement les nutriments dans le tube digestif. Elle remplace, de manière totale ou partielle, l'alimentation orale traditionnelle par des formules nutritives «complètes» apportant l'ensemble des nutriments nécessaires à l'organisme. Ces formules sont généralement conditionnées dans des poches souples (en PVC) et administrées au moyen de sondes naso-gastriques ou, gastrostomies, naso-jéjunale, naso- duodénale, jéjunostomie.

Ces mélanges nutritionnels sont composés de protéines, lipides, glucides, vitamines et minéraux avec ou sans fibres.

On distingue plusieurs catégories : les mélanges polymériques (standards) et les mélanges semi-élémentaires («prédigérés»), ces derniers étant indiqués dans des cas bien spécifiques (syndrome du grêle court, insuffisance pancréatique exocrine, etc.) :

Mélanges polymériques

o hypocaloriques (0,5 - 0,75 kcal /ml), normo ou hyperprotéinés, avec ou sans fibres o isocaloriques (1 kcal / ml), normo ou hyperprotéinés, avec ou sans fibres o hypercaloriques (1 ,25 -1 ,5 kcal / ml) normo ou hyperprotéinés, avec ou sans fibres o formules spécifiques (troubles du métabolisme glycémique, insuffisance respiratoire).

Les semi-élémentaires sont des mélanges iso ou hypercaloriques normo ou hyperprotéinés, à base de peptides et de triglycérides à chaînes moyennes.

Les isolats de protéines de pois, comme source de protéines, par leurs propriétés fonctionnelles sont particulièrement bien adaptés à cet usage.

Par ailleurs, ils permettent de préserver les mêmes propriétés que les protéines de lait, et ce pour un coût moindre.

Dans le domaine de la substitution (totale ou partielle) des protéines laitières dans les yaourts, boissons laitières, crèmes laitières, crèmes glacées ou sorbets, il est recherché des protéines végétales dont les propriétés fonctionnelles sont équivalentes, voire améliorées par rapport aux protéines laitières.

Le terme « propriétés fonctionnelles » signifie dans la présente demande toute propriété non nutritionnelle qui influence l'utilité d'un ingrédient dans un produit laitier.

Ces diverses propriétés contribuent à l'obtention des caractéristiques finales désirées du produit laitier. Quelques-unes de ces propriétés fonctionnelles sont la solubilité, la viscosité, les propriétés moussantes, les capacités émulsifiantes.

Les protéines jouent également un rôle important dans les propriétés sensorielles des matrices alimentaires dans lesquelles elles sont utilisées, et il existe une réelle synergie entre les propriétés fonctionnelles et les propriétés sensorielles.

Les propriétés fonctionnelles des protéines ou fonctionnalités sont donc les propriétés physiques ou physico-chimiques qui ont une incidence sur les qualités sensorielles des systèmes alimentaires générées au cours des transformations technologiques, de la conservation ou des préparations culinaires domestiques.

On constate quel que soit l'origine de la protéine qu'elle intervient sur la couleur, la flaveur et/ou la texture d'un produit. Ces caractéristiques organoleptiques interviennent de façon déterminante dans le choix du consommateur et elles sont dans ce cas largement prises en compte par les industriels. La fonctionnalité des protéines est le résultat d'interactions moléculaires de ces dernières avec leur environnement (autres molécules, pH, température...).

Ici, il s'agit des propriétés de surface qui regroupent les propriétés d'interaction des protéines avec d'autres structures polaires ou apolaires en phase liquide ou gazeuse : cela recouvre les propriétés émulsifiantes, moussantes...

La société Demanderesse a constaté qu'il existait un réel besoin, non satisfait, de disposer d'une formulation nutritionnelle possédant des propriétés fonctionnelles intéressantes, pouvant être employée dans la confection de produits laitiers comme un substitut au moins partiel des protéines laitières.

Les isolats de protéines de pois, comme source de protéines, notamment pour leurs propriétés d'amélioration du goût, sont particulièrement bien adaptés à cet usage.

Plus particulièrement, dans ces domaines d'application particuliers, i.e. :

o laits fermentés de type yaourts (brassés, à la grecque, à boire...)

o boissons laitières/végétales,

o crèmes laitières/végétales (tel en « coffee whitener »), desserts glacés ou sorbets, la société Demanderesse a trouvé que :

En matière de « non dairy coffee whiteners » ou encore appelés « non dairy coffee creamers », comme il sera démontré ci-après :

o La viscosité des émulsions après pasteurisation avant séchage est plus proches du témoin lait que les protéines de pois de type NUTRALYS®, ce qui permet de sécher une émulsion de faible viscosité à haute matière sèche ; o La floculation dans le café semble être moins importante avec les isolats de protéines de pois conformes à l'invention, qu'avec les protéines de pois de type NUTRALYS® mais ceci peut être corrélé avec l'amélioration de leur solubilité au pH acide du café, ou par une meilleure stabilité aux ions divalents contenus dans l'eau de reconstitution du café.

Par ailleurs, de manière facultative, pour améliorer les pouvoirs floculants, il peut être choisi d'ajouter des agents tamponnant tels que des citrates de sodium , des sels type NaCI (sel) qui favorise la solubilité des protéines, ou des agents complexant des ions divalents plus performants que les sels de phosphates. o Quant au pouvoir émulsifiant desdits isolats pour cette application particulière, il peut être avantageusement choisi d'utiliser des émulsifiants complémentaires, comme par exemple le E472 (Esters monoacétyltartriques et diacétyltartriques des mono- et diglycérides d'acides gras), ou de faire varier les concentrations en E471 , ou en ajustant la concentration en protéines ou ajustant le procédés d'homogénéisation.

En matière de « yaourts brassés », dans les recettes de fabrication telles que celles qui seront exemplifiées, ci-après,

o La température avant homogénéisation peut varier entre 65 à 80°C, o La pression d'homogénéisation peut varier entre 150 à 250 bars, o La température de pasteurisation peut varier entre 80-85°C pendant 30min à

90-95° C de 5 à 10min,

o La température de fermentation peut varier entre 30 à 45°C, préférentiellement de 38 à 42°C

o II est possible d'élargir le type de ferments à tous ceux utilisés dans le domaine des yaourts comme spécifié dans la réglementation « yaourt. »

Quant à la formulation desdits yaourts :

o En plus de l'amidon modifié et de la pectine, comme stabilisants, il peut être choisi de la graine de caroube, ou de la gomme guar en différentes proportions, o L'amidon retenu est un amidon modifié, préférentiellement un amidon qui déploie peu de viscosité, voire complètement solubilisé. Sa proportion peut varier entre 2,5 et 5 % en poids de la composition totale, de préférence entre 2,8 et 3,5 %.

o II peut être avantageusement choisi d'ajouter des arômes, permettant d'apporter une note « plus laitière », lactiques, ou des préparations de fruits, même si la note végétale est bien plus atténuée avec les isolats de protéines de pois selon l'invention en regard des protéines de pois.

En matière de « yaourts à boire », les recettes selon l'invention sont similaires à celles mises en œuvre pour les « yaourts brassés », la quantité de protéines est cependant plus faible que celle des yaourts brassés, la quantité d'amidon est choisie préférentiellement entre 1 ,5% et 2,5% en poids de la composition totale, et l'amidon peut être dans un état solubilisé ou non pour cette matrice. Dans le domaine de l'enrichissement en protéines, l'apport en calories des protéines peut s'avérer compliqué dans les produits de cuisson (terme anglosaxon de « baking ») :

dans les produits secs contenant de la matière grasse comme les biscuits, cela oblige à mettre une concentration importante de protéines dans la formulation. Ce qui a un impact certain :

o sur la texture du produit fini (augmentation de la dureté / perte de croustillance, texture pâteuse)

o sur le goût du produit fini (amertume, goût de haricot...) et

o sur le procédé de fabrication (problématique de façonnage/ rhéologie de la pâte / compétition pour l'eau avec les autres ingrédients...)

- dans les produits humides comme le pain, l'incorporation de protéines à un impact sur la rhéologie de la pâte. Les protéines ajoutées entrant en compétition avec le réseau de gluten, cela a pour conséquence une diminution du volume du pain et une texture plus compacte et pâteuse.

Une application plus critique encore est la réalisation de crisps hyper protéinés, c'est-à- dire de petites céréales obtenues par extrusion et destinées à être utilisées en inclusion dans des barres de céréales ou autres agglomérations de céréales comme les « clusters » ou « mûesli ». Une teneur en protéines supérieure à 70% est recherchée dans ces crisps hyperprotéinés, ce qui a pour conséquence de réduire considérablement la part d'amidon dans la recette, lequel est responsable de l'expansion et donc de la croustillance. Sans ces amidons, les crisps hyperprotéinés sont denses et très durs.

Des travaux sont réalisés depuis plusieurs années sur les fonctionnalités des protéines pour sélectionner la protéine ayant le moins d'impact sur la texture des produits de cuisson enrichis en protéines.

Pour la société Demanderesse, c'est dans ce contexte que la protéine de pois NUTRALYS® BF a été développée car elle présente une faible solubilité et peu d'interaction avec l'eau.

Cependant, cette protéine de pois ne permet toutefois pas à répondre complètement aux problématiques techniques évoquées ci-dessus.

Ainsi un biscuit « riche en protéines » avec du NUTRALYS® BF n'est pas optimisé en terme de texture, celle-ci restant pâteuse.

Pour les crisps hyper protéinés, le NUTRALYS® BF ne permet pas non plus d'atteindre la texture croustillante recherchée.

En pain, malgré une augmentation du volume du pain après cuisson, le volume reste malgré tout inférieur à celui du pain témoin.

Pour solutionner ces difficultés, la société Demanderesse a ainsi trouvé que les isolats de protéines de pois conformes à l'invention permettaient :

d'améliorer la solubilité par rapport aux protéines de pois,

de diminuer la viscosité dans de l'eau par rapport aux protéines de pois. Les isolats de protéines de pois développés présentent à la fois une forte solubilité et une faible viscosité, ce qui constitue une combinaison nouvelle de propriétés.

Ce faisant, la société Demanderesse a vaincu un préjugé technique qui veut que pour répondre aux problématiques des produits de cuisson, il fallait plutôt choisir une protéine de pois ayant peu d'interaction avec l'eau, alors qu'il s'avère qu'une protéine soluble mais peu visqueuse performe mieux.

Nature des isolats de protéines de pois

Les isolats de protéines de pois selon l'invention sont tout d'abord caractérisés par leur teneur en acides aminés libres (déterminée selon la norme NF EN IS013903:2005).

Cette valeur est comprise entre 0,5 et 2 %. Par exemple, cette valeur peut être comprise entre 0,5-1 %, 1 -1 ,5% ou 1 ,5-2 %, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

A titre comparatif, les protéines de pois (tel le NUTRALYS ^® S85F) présentent une teneur en acides aminés libres de l'ordre de 0,18 %. Les isolats de protéines de pois présentent une teneur en protéines totales exprimée en N.6,25 de plus de au moins 70% en poids de produit sec, de préférence au moins 80% en poids, par exemple entre 80 et 99%, 80 et 95%, 80 et 90% ou 80 et 85%. Les isolats de protéines de pois selon l'invention sont également caractérisés par

o leur profil de viscosité dans l'eau à 15 % de matière sèche et à 20° C, déterminé en fonction du taux de cisaillement ;

o leur profil de solubilité dans l'eau, en fonction du pH, de préférence à 20 °C. Pour la détermination du profil de viscosité dans l'eau, les mesures sont effectuées

o sur une solution aqueuse d'isolats de protéines de pois à 15 % de matière sèche, o en rhéomètre AR2000 de la société TA Instruments,

o présentant une géométrie à cylindres concentriques,

o avec un taux de cisaillement de 0,6 10 ^-3 à 600 s ^-1 en 3 minutes (log) et o à la température de 20°C (3 min d'équilibre température avant test).

Les taux de cisaillement produits dans le rhéomètre permettent de mimer les conditions de traitement que peuvent subir les solutions d'isolat de protéines de pois selon l'invention :

o un taux de cisaillement de 1 à 10 s ^-1 est ainsi caractéristique d'une boisson au repos (texture à la cuillère pour des produits plus visqueux), o un taux de cisaillement de 40 à 50 s ^-1 est la texture en bouche, o un taux de cisaillement de 300-1 000 s ^-1 est équivalent au cisaillement dans des pompes d'acheminement du produit.

C'est ainsi que les isolats de protéines de pois conformes à l'invention présentent une viscosité :

o de 1 1 à 8. 0 ^-3 Pa.s. à un taux de cisaillement de 10 s ^-1 , de préférence 12 à

17.1 0 ^-3 Pa.s., de manière encore plus préférée de 13 à 161 0 ^"3 Pa.s.,

o de 9 à 16. 0 ^-3 Pa.s. à un taux de cisaillement à 40 s ^-1 , de préférence de 10 à

15.1 0 ^-3 Pa.s., de manière encore plus préférée de 1 0 à 14.10 ³ Pa.s., et o de 8 à 16.10 ^-3 Pa.s. à un taux de cisaillement de 600 s ^-1 , de préférence de 9 à 15.1 0 ^-3 Pa.s., de manière encore plus préférée de 9,8 à 4.10 ³ Pa.s.

Ce qui traduit une remarquable stabilité desdits isolats, quelle que soit la force de cisaillement qu'ils subissent.

Les isolats de protéines de pois sont ensuite caractérisés par leur profil de solubilité dans l'eau, en fonction du pH.

Le principe de la méthode utilisée est le suivant, comme il sera développé dans la partie exemple :

o suspendre l'isolât de protéines de pois à 2,5 % en poids dans de l'eau distillée, o ajuster au pH souhaité : ici à 3, 4, 5, 6,7 ou 8 avec NaOH 0,1 N ou HCI 0,1 N, o mélanger pendant 30 minutes à 1 1 00 rpm ,

o centrifuger 15 minutes à 3000 g, o mesurer la matière sèche d'une portion du surnageant.

La solubilité des isolats de protéines de pois est ainsi :

o de 30 à 40 % dans des zones de pH de 4 à 5,

o de 40 à 70 % dans des zones de pH de 6 à 8,

ce qui traduit leur remarquable solubilité dans ces zones de pH.

A titre comparatif, les protéines de pois (tel le NUTRALYS ^® S85F) présentent :

o de 1 0 à 15 % de solubilité dans des zones de pH de 4 à 5,

o de 20 à 50 % de solubilité dans des zones de pH de 6 à 8. Les isolats de protéines de pois sont caractérisés également par leur profil de digestibilité totale, en regard d'une protéine de pois intacte, et par leur cinétique de digestion.

Comme il sera exemplifié ci-après, la digestibilité mesurée in vivo permet d'attribuer aux isolats de protéines de pois selon l'invention un Coefficient d'Utilisation Digestive (CUD) d'une valeur comprise entre 93,5 et 95 %.

Pour mesurer la cinétique de digestion des isolats de protéines de pois, il est utilisé un modèle in vitro de digestion dynamique dans des conditions physiologiques équivalentes à l'estomac puis l'intestin grêle (voir exemple 1 section 4).

Comme il sera exemplifié ci-après, le comportement des isolats selon l'invention dans un tel modèle montre leur positionnement original entre des protéines intactes de pois (digestion de type « intermédiaire rapide ») et de lactosérum (digestion de type « rapide »).

Les isolats de protéines de pois sont enfin caractérisés dans un modèle de digestibilité in vitro comme des « protéines à digestibilité rapide ».

Pour obtenir ce résultat, le comportement gastrique de 5 protéines (protéines de pois, protéines de lactosérum et caséinates de sodium , et deux lots d'isolats de protéines de pois selon l'invention) est évalué dans un modèle de digestion in vitro (voir exemple page 32, exemple 1 section 5).

Les cinétiques de digestion des protéines dépendent dans une large mesure du temps de séjour dans l'estomac et du temps de vidange gastrique.

La viscosité est une caractéristique importante déterminant le taux de vidange gastrique.

Ainsi, les mesures de viscosité in vitro dans les conditions gastriques sont sélectionnées comme paramètres pertinents pour caractériser les protéines.

Les préparations protéiques sont introduites dans un système in vitro de simulation la digestion gastrointestinale, en l'occurrence ici le système développé par la société N IZO (système SIMPHYD pour SIMulation of PHYsiological Digestion) tel que présenté sur le site www.nizo.com dans leur brochure intitulée Bioavailabilty of your ingrédients qui fait référence à l'article publié dans Appl Environ Microbiol. 2007, Jan;73(2) : 508-1 5.

Ce dispositif présente un système de mesures rhéologiques en ligne qui permet de comparer le comportement des protéines testées.

Les profils de viscosité au cours du temps sont mesurés en conditions gastriques de pH et de libération d'enzymes. Comme il est illustré ci-après, comparées aux protéines de lactosérum (classées dans la catégorie « basse viscosité) et aux caséinates de sodium (classés dans les protéines de « haute viscosité prolongée ») :

les protéines de pois présentent une augmentation rapide de viscosité durant l'acidification, qui revient à la ligne de base à pH 2 (protéines dites de « viscosité intermédiaire rapide »), tandis que

les isolats de protéines de pois selon l'invention présentent une augmentation très légère de viscosité après l'acidification, diminuant ensuite pour atteindre des valeurs similaires aux protéines de petit lait, durant 30 minutes (protéines dites de « viscosité rapide »). Basés sur leur comportement gastrique in vitro, les isolats de protéines de pois selon l'invention sont donc transportés rapidement dans le duodénum, ce qui résultera en une assimilation rapide de leurs acides aminés.

L'évaluation des propriétés émulsifiantes des isolats de protéines de pois est réalisée en comparaison avec les protéines de pois et les protéines de lait.

Elle a été réalisée à l'aide du granulomètre Malvern Mastersizer 2000E en voie liquide. Le principe de la mesure est basé sur la diffraction de la lumière.

Les poudres sont mises en solution à 1 % en poids dans de l'eau azidurée sous agitation pendant 6 h à 750 rpm .

4 ml d'huile de consommation combinant 4 huiles végétales (tournesol, colza, oléisol, pépins de raisins) (par exemple huile Lesieur Isio 4) sont ajoutés à 20 ml de protéines (ou isolât de protéines) à 1 %.

L'ensemble est passé à un homogénéiseur (Ultraturax) pendant 3 minutes à 13500 rpm, puis les émulsions ainsi formées sont analysées au granulomètre afin d'en déterminer la taille des globules gras.

Comme il sera exemplifié ci-après, les isolats de protéines de pois selon l'invention présentent de meilleures propriétés émulsifiantes que les protéines laitières.

Par ailleurs, leur propriété émulsifiante équivalente aux caséinates les rend tout particulièrement intéressant pour la réalisation d'émulsions séchées type « coffee whitener ».

La présente invention est relative à l'isolât de protéines de pois tel que décrit ci-dessus et à son utilisation pour la préparation d'une formulation nutritionnelle.

Préparation des isolats de protéines de pois selon l'invention

La préparation des isolats de protéines de pois selon l'invention comporte une hydrolyse des protéines de pois par voie enzymatique ou non enzymatique, de manière à ce que ledit isolât de protéines de pois présente un degré d'hydrolyse (DH) compris entre 5 % et 10 %, de préférence entre 6 % et 8 %, de manière encore plus spécifique de 6,5 % à 7 %.

Dans un premier mode de réalisation, l'hydrolyse est réalisée par une endopeptidase. Il est choisi une endopeptidase non spécifique, dérivée d'une souche ^'Aspergillus en particulier une souche de Aspergillus spp ou Aspergillus Oryzae.

Il est choisi plus particulièrement une endopeptidase EC 3-4-1 1 . La quantité exacte d'enzyme ajoutée à la suspension pour obtenir les caractéristiques souhaitées des isolats de protéines de pois variera en fonction de caractéristiques spécifiques telles que:

(1 ) l'enzyme ou le système enzymatique utilisé;

(2) le degré final désiré d'hydrolyse; et/ou

(3) la distribution de poids moléculaire / final souhaité.

Étant donné que ces paramètres sont connus, l'homme de l'art peut facilement déterminer les conditions appropriées pour obtenir les caractéristiques désirées de l'isolât de protéines de pois.

Dans un mode de réalisation particulier, la protéine de pois initiale utilisée pour préparer l'isolât de protéines de pois selon l'invention est une composition de protéine de pois telle que décrites dans la demande WO 2007/1 7572 ou préparée par un procédé tel que décrit dans la demande WO 2007/17572 (l'enseignement étant incorporé par référence). Dans un mode de réalisation particulier, la composition de protéines de pois initiale est la composition commercialisée par ROQUETTE FRERES sous le nom de marque NUTRALYS® S85F.

Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la suspension de protéines de pois est amenée à une valeur de 5 à 20 % en poids de matière sèche, en particulier de 1 5 à 20 %.

La température de réaction est ajustée à une valeur comprise entre 50 et 60 °C, de préférence de l'ordre de 55 °C.

En règle générale, le système d'enzyme ou une enzyme est ajouté à la suspension en des quantités dans la gamme d'environ 0,3 à 1 % poids/volume.

La réaction d'hydrolyse est typiquement effectuée dans une durée souhaitée afin d'obtenir le degré d'hydrolyse et/ou le profil désiré de poids moléculaire désiré, en l'occurrence ici pendant une période d'environ 45 minutes à environ 2 h 30 minutes, de préférence d'environ 1 heure.

Une fois encore, le temps nécessaire à la réaction d'hydrolyse dépend des caractéristiques comme indiqué ci-dessus, mais peut être facilement déterminée par l'homme du métier.

Dans d'autres réalisations, la suspension contenant des protéines de pois peut être hydrolysée en utilisant des moyens non enzymatiques, par exemple par hydrolyse mécanique (physique) et/ou chimique. Cette technique est également bien connue dans l'état de l'art.

Une fois que les protéines de pois ont été hydrolysées au degré souhaité, la réaction d'hydrolyse est arrêtée, par exemple, par inactivation de l'enzyme, ou par d'autres moyens classiques.

Dans un mode de réalisation, l'inactivation de l'enzyme est effectuée par traitement thermique.

Conformément à la pratique établie, la préparation d'enzyme peut convenablement être inactivée en augmentant la température de la suspension d'incubation à une température à laquelle les enzymes deviennent inactivées, par exemple à environ 70° C pendant environ 10 minutes.

Les isolats de protéines de pois ainsi obtenus sont ensuite traités à haute température courte durée (HTST), puis pasteurisés, éventuellement concentrés à une matière sèche de 10 à 30 %, avant d'être séchés par atomisation. Par exemple, l'isolât peut être pasteurisé à une température comprise entre 130 °C et 150° C pendant une période denviron 1 seconde à environ 30 secondes. La présente invention est ainsi relative à un isolât de protéines de pois obtenu ou susceptible d'être obtenu par le procédé tel que décrit ci-dessus.

La présente invention est également relative à une formulation nutritionnelle comprenant un isolât de protéines de pois selon l'invention ainsi qu'à l'utilisation de cet isolât pour préparer une formulation nutritionnelle.

Les isolats de protéines de pois selon l'invention sont présents dans la formulation nutritionnelle selon l'invention dans une quantité allant jusqu'à 1 00 % en poids, notamment, dans une quantité comprise entre 52 et 60 % en poids, en particulier de la formulation nutritionnelle. Par exemple, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 0,1 -10%, 1 0-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-1 00% de la protéine totale de la formulation nutritionnelle, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

Par ailleurs, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 0,1 - 10%, 10-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% en poids de la formulation nutritionnelle, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages. De préférence, il représente 0,1 -60%, 1 -50%, 1 -20% ou 1 -10% ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

Dans un mode de réalisation particulier, l'isolât de protéines de pois selon la présente invention peut représenter 0,1 -10%, 10-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% en poids de la formulation nutritionnelle, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages et il peut représenter 0,1 -1 0%, 10-20%, 20-30%, 40-50%, 50-60%, 60- 70%, 70-80%, 80-90% ou 90-100% de la protéine totale de la formulation nutritionnelle, ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages. De préférence, il représente 0,1 -60%, 1 -50%, 1 -20% ou 1 -10% ou une quelconque combinaison de ces gammes de pourcentages.

Au moins une partie des isolats de protéines de pois présents dans les formulations alimentaires en poudre est séchée par atomisation avant d'être introduite (via mélange à sec ou autre) dans la formulation nutritionnelle en poudre.

Nature des autres ingrédients

Les formulations en poudre nutritionnelles peuvent comprendre au moins une matière grasse, une protéine ou un hydrate de carbone, dans lesquelles au moins une partie de la protéine est un isolât de protéines de pois.

Les formulations liquides nutritionnelles peuvent comprendre au moins une protéine, hydrate de carbone et, matière grasse dans lesquelles au moins une partie de la protéine est un isolât de protéines de pois.

En général, une source de matières grasses, de glucides et de protéines, en plus de l'isolât de protéines de pois peut être utilisée ici, à condition que ces macronutriments soient également compatibles avec les éléments essentiels des formulations nutritionnelles selon l'invention.

Bien que les concentrations totales ou les quantités de matière grasse, de protéines et d'hydrates de carbone peuvent varier selon les besoins nutritionnels de l'utilisateur, ces concentrations ou quantités tombent le plus souvent dans l'une des gammes suivantes, y compris de toute autre matière grasse essentielle, protéines, hydrates de carbone et ou des ingrédients tels que décrits ici : pour les mix poudres pour boissons :

o les concentrations en matières grasses sont d'environ 0,5 % à environ 13 %, préférentiellement d'environ 1 % à environ 9 %, plus préférentiellement encore d'environ 1 % à environ 3 % en poids de la formulation nutritionnelle en poudre ; o les concentrations en protéines sont d'environ 20 % à environ 91 %, préférentiellement d'environ 40 % à environ 90 %, plus préférentiellement encore comprise entre environ 40 % et environ 65 % en poids de la formulation nutritionnelle en poudre;

o les concentrations en glucides sont d'environ 0,9 % à environ 70 %, soit préférentiellement entre environ 2 % à environ 7 %, soit préférentiellement encore entre environ 20 % à environ 40 %, en poids de la formulation nutritionnelle en poudre,

pour les liquides :

o les concentrations en matières grasses sont d'environ 1 % à environ 10 %, préférentiellement d'environ 1 ,5 % à environ 7 %, plus préférentiellement encore d'environ 1 .5 % à environ 5 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ; o les concentrations en protéines sont d'environ 1 % à environ 15 %, préférentiellement d'environ 3 % à environ 1 1 %, plus préférentiellement encore d'environ 4 % à environ 7 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ; o les concentrations en glucides sont d'environ 5 % à environ 45 %, préférentiellement d'environ 9 % à environ 20 %, plus préférentiellement encore d'environ 13 % à environ 17 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide, pour les produits laitiers (sous forme de yaourts, boissons laitières, crèmes laitières, desserts glacés ou sorbets) :

o les concentrations en matières grasses sont d'environ 0% à environ 15 %, préférentiellement d'environ 1 ,5 % à environ 1 0 %, plus préférentiellement encore d'environ 3 % à environ 6 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ; o les concentrations en protéines sont d'environ 1 % à environ 25 %, préférentiellement d'environ 2 % à environ 20 %, plus préférentiellement encore d'environ 2,5 % à environ 15 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ;

o les concentrations en glucides sont d'environ 5 % à environ 45 %, préférentiellement d'environ 9 % à environ 25 %, plus préférentiellement encore d'environ 13 % à environ 20 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide. pour les produits de biscuiterie, produits de pâtisserie, produits de panification et produits céréaliers hyperprotéinés: o les concentrations en matières grasses sont d'environ 0% à environ 25 %, préférentiellement d'environ 1 % à environ 20 %, plus préférentiellement encore d'environ 1 0 % à environ 1 8 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ; o les concentrations en protéines sont d'environ 1 % à environ 30 %, préférentiellement d'environ 2 % à environ 25 %, plus préférentiellement encore d'environ 2,5 % à environ 15 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide ;

o les concentrations en glucides sont d'environ 15 % à environ 75 %, préférentiellement d'environ 20 % à environ 60 %, plus préférentiellement encore d'environ 20 % à environ 55 %, en poids de la formulation nutritionnelle en liquide.

Des exemples non limitatifs de matières grasses (en poudre ou liquide) ou des sources convenables de celles-ci pour une utilisation dans les formulations alimentaires en poudre et liquides décrits ici comprennent l'huile de noix de coco, l'huile de noix de coco fractionnée, l'huile de soja, l'huile de maïs, l'huile d'olive, l'huile de carthame, l'huile de carthame riche en acide oléique, huile de tournesol, huile de tournesol riche en acide oléique, les huiles de palme et de palmiste, l'oléine de palme, huile de canola, huiles marines, huiles de coton, matières grasses d'origine laitière, et leurs combinaisons.

Des exemples non limitatifs d'hydrates de carbone ou des sources convenables de ceux- ci pour une utilisation dans les formulations alimentaires en poudre et liquides décrits ici peuvent comprendre les maltodextrines, les dextrines, l'amidon hydrolysé ou modifié ou l'amidon de maïs, les polymères de glucose, le sirop de maïs, les hydrates de carbone dérivés du riz, le glucose, le fructose, le lactose, le sirop à haute teneur en fructose, le miel, les alcools de sucre (par exemple, le maltitol, l'érythritol, le sorbitol), et des combinaisons de ceux-ci.

Des exemples non limitatifs de protéines, en plus des isolats de protéines de pois, pour une utilisation dans les formulations alimentaires en poudre et liquides comprennent des protéines hydrolysée, partiellement hydrolysées ou les protéines ou les sources de protéines non hydrolysées, qui peuvent être dérivées de toute source connue, tel que du lait (par exemple, la caséine, le lactosérum), des animaux (par exemple, viande, poisson), des céréales (par exemple, le riz, le maïs), des oléagineux (soja, colza), des légumineuses à grains (lentilles, pois chiches, haricots) ou des combinaisons de ceux-ci.

Des exemples non limitatifs de telles protéines comprennent des isolats de protéines de lait, des concentrés protéiques de lait, tels que les concentrés de protéines de lactosérum , caséine, isolats de protéines de lactosérum , les caséinates, le lait de vache entier, lait écrémé, protéine de soja isolats de protéine partiellement ou totalement hydrolysées, protéines de soja concentrées, et ainsi de suite.

Dans un mode de réalisation particulier, la formulation nutritionnelle en poudre comprend une combinaison d'un isolât de protéines de pois et d'une protéine à base de lait.

Dans un exemple de ce mode de réalisation particulier, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en poudre en une quantité d'au moins 1 0, 15, 20, 25, 30, 40, 45 ou 50 % en poids par rapport au poids totale de protéine, de préférence d'environ 45 % en poids par rapport au poids totale de protéine. Par exemple, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en poudre en une quantité de 10-60 %, 20-50%, 30-40% en poids par rapport au poids totale de protéine. De préférence, le reste des protéines est apporté par l'isolât de protéines de pois selon l'invention.

Dans un autre exemple de ce mode de réalisation particulier, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en liquide pour la nutrition clinique en une quantité d'au moins 10, 15, 20, 25, 30, 40, 45 ou 50 % en poids par rapport au poids totale de protéine, de préférence d'environ 50 % en poids. Par exemple, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en liquide pour la nutrition clinique en une quantité de 10-60 %, 20-50%, 30-40% ou 45-55% en poids par rapport au poids totale de protéine. De préférence, le reste des protéines est apporté par l'isolât de protéines de pois selon l'invention.

Dans un autre exemple de ce mode de réalisation particulier, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en liquide pour le sport en une quantité d'au moins 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60 ou 75 % en poids par rapport au poids totale de protéine, de préférence d'environ de 75 % en poids. Par exemple, la protéine à base de lait est présente dans la formulation nutritionnelle en liquide pour le sport en une quantité de 1 0-60 %, 20-50%, 30-40% ou 45-55% en poids par rapport au poids totale de protéine. De préférence, le reste des protéines est apporté par l'isolât de protéines de pois selon l'invention.

Nature des ingrédients facultatifs

Les formulations nutritionnelles selon l'invention peuvent comprendre en outre d'autres ingrédients qui peuvent modifier les caractéristiques chimiques, physiques, hédoniques ou de transformation des produits ou servir de composants nutritionnels pharmaceutiques ou complémentaires lorsqu'elles sont utilisées pour certaine population ciblée.

Beaucoup de ces ingrédients facultatifs sont connus ou autrement adaptés pour une utilisation dans d'autres produits alimentaires et peuvent également être utilisés dans les formulations nutritionnelles conformes à l'invention, à condition que ces ingrédients facultatifs soient sûrs et efficaces pour l'administration orale et sont compatibles avec les ingrédients essentiels autres du produit sélectionné.

Des exemples non limitatifs de tels ingrédients facultatifs comprennent des conservateurs, des antioxydants, des agents émulsifiants, des agents tampons, des agents actifs pharmaceutiques, des nutriments supplémentaires, des colorants, des arômes, des agents épaississants et des stabilisants, etc.

Les formulations nutritionnelles en poudre ou liquide peuvent comprendre en outre des vitamines ou des nutriments liés, tels que la vitamine A, la vitamine E, la vitamine K, la thiamine, la riboflavine, la pyridoxine, la vitamine B12, les caroténoïdes, la niacine, l'acide folique, l'acide pantothénique, la biotine, la vitamine C, la choline, l'inositol, leurs sels et leurs dérivés, et des combinaisons de ceux-ci. Les formulations nutritionnelles en poudre ou liquide peuvent comprendre en outre des minéraux, tels que de phosphore, le magnésium, le fer, le zinc, le manganèse, le cuivre, le sodium, le potassium, le molybdène, le chrome, le sélénium , le chlorure, et des combinaisons de ceux-ci.

Les formulations nutritionnelles en poudre ou liquide peuvent également comprendre un ou plusieurs agents masquant pour réduire par exemple les saveurs amères dans les poudres reconstituées.

Des agents de masquage appropriés comprennent des édulcorants naturels et artificiels, des sources de sodium, telles que le chlorure de sodium, et des hydrocolloïdes tels que la gomme de guar, la gomme xanthane, la carraghénane, et des combinaisons de ceux-ci.

La quantité d'agent de masquage dans la formulation nutritionnelle en poudre peut varier en fonction de l'agent de masquage particulier sélectionné, les autres ingrédients de la formulation et d'autres variables de formulation ou de produits cibles.

Procédé de fabrication de la formulation nutritionnelle en poudre selon l'invention La poudre de base nutritive (comprenant l'isolât de protéines de pois selon l'invention) peut être préparée par mélange à sec de tous les ingrédients eux-mêmes sous forme poudre.

En variante, la poudre de base nutritive peut être préparée en utilisant des procédés conventionnels en voie humide qui comprennent généralement l'utilisation de deux ou plusieurs suspensions qui sont finalement mélangées, traitées puis séchées.

Au moins une partie de la protéine végétale présente dans la formulation nutritionnelle en poudre mélangée à sec est un isolât de protéines de pois qui a avantageusement été séché par atomisation avant d'être mélangé à sec avec la poudre de base nutritionnelle, laquelle comporte généralement au moins des glucides, des vitamines et des minéraux.

Dans certains modes de réalisation, l'isolât de protéines de pois peut être traité à haute température courte durée (HTST) puis pasteurisé avant d'être séché par atomisation.

Plus précisément, l'isolât de protéines de pois peut être ajouté à l'eau et on le laisse s'hydrater; l'eau peut ou non être chauffée.

Cette suspension est ensuite traitée HTST avant d'être séchée par atomisation. Facultativement, l'isolât de protéines de pois peut être homogénéisé classiquement après le traitement HTST et avant le séchage par atomisation. Par exemple, l'isolât peut être pasteurisé à une température comprise entre 130°C et 150°C pendant une période d'environ 1 seconde à environ 30 secondes.

L'étape de séchage par atomisation est une étape de séchage par atomisation classique qui est effectuée à des températures et des temps bien connus, conventionnels, pour produire une protéine végétale séchée par atomisation.

Domaine d'utilisation des formulations nutritionnelles en poudre

Les formulations nutritionnelles en poudre mélangées à sec décrites et comprenant des isolats de protéines de pois conformes à l'invention, après reconstitution, présentent une sensation en bouche améliorée. Un individu peut consommer de préférence au moins une portion de la formulation nutritionnelle en poudre reconstituée de façon quotidienne, et dans certains modes de réalisation, peut consommer deux, trois ou même plus de portions par jour.

Chaque portion est de préférence administrée en une dose unique, bien que la portion puisse aussi être divisée en deux ou plusieurs portions partielles, à prendre deux fois ou plus au cours de la journée.

Les formulations nutritionnelles en poudre peuvent être reconstituées pour une utilisation chez les nourrissons, les enfants et les adultes.

Par « environ » est entendu la valeur plus ou moins 10 %, de préférence plus ou moins 5%.

DESCRIPTION DES FIGURES

Figure 1 : Distribution de la taille des particules de l'émulsion que forme les formules nutritionnelles de nutrition clinique selon l'invention Figure 2 : Analyse sensorielle de mélanges de poudres formulés avec des isolats de protéines de pois conformes à l'invention

Figure 3 : Analyse sensorielle de boissons « prêtes-à-boire » pour la nutrition clinique.

Figure 4 : Suivi de la viscosité au cours de la digestion in vitro des isolats de protéines de pois selon l'invention Figure 5 : Profil de solubilité des isolats de protéines de pois en fonction du pH

Figure 6 : Analyse sensorielle de boissons « prêtes-à-boire » pour sportif.

Figure 7 : Analyse sensorielle des crèmes dessert pour nutrition clinique.

Figure 8 : Distribution des tailles des globules gras de l'émulsion préparée avec 100 % de protéines de lait pour une préparation pour desserts glacés Figure 9 : Distribution des tailles des globules gras de l'émulsion préparée avec 50 % de protéines de lait et 50 % de la protéine de pois NUTRALYS® S85F pour une préparation pour desserts glacés

Figure 10 : Distribution des tailles des globules gras de l'émulsion préparée avec 50 % de protéines de lait et 50 % d'isolat de protéines de pois selon l'invention n ° 1 pour une préparation poir desserts glacés

Figure 11 : Distribution des tailles des globules gras de l'émulsion préparée avec 50 % de protéines de lait et 50 % d'isolat de protéines de pois selon l'invention n °2 pour une préparation poix desserts glacés Figure 12 : profil de fonte de crèmes glacées végétaliennes préparées avec les isolats de protéines de pois selon l'invention

Figure 13 : Analyse sensorielle des desserts glacés

Figure 14 : solubilité des isolats de protéines de pois en fonction du pH en comparaison avec les caséinates de sodium

Figure 15 : Analyse sensorielle des yaourts brassés - Aspects Goût

Figure 16 : Analyse sensorielle des yaourts brassés - Aspects Texture

Figure 17 : Analyse sensorielle des boissons laitières aromatisées à la fraise : aspect goût

Figure 18 : Analyse sensorielle des boissons laitières aromatisées à la fraise : aspect texture

Figure 19 : Analyse de la viscosité des pâtes de muffins au chocolat Figure 20 : Analyse de la viscosité des pâtes de pancakes

Figure 21 : Analyse de digestibilité par le suivi des viscosités selon le dispositif SIMPHYD de N IZO L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples qui suivent, lesquels se veulent illustratifs et non limitatifs.

EXEMPLES

Matériels et méthodes

Mesure du DH (Degré d'Hydrolyse)

Cette mesure est basée sur la méthode de détermination de l'azote aminé sur des protéines et isolats de protéines selon l'invention par le kit M EG AZYME (référence K-PANOPA) et le calcul du degré d'hydrolyse.

Principe :

Les groupes « azote aminé » des acides aminés libres de l'échantillon réagissent avec le N-acétyl-L-cystéine et l'OPhthaldialdéhyde (OPA) pour former des dérivés d'isoindole.

La quantité de dérivé d'isoindole formée au cours de cette réaction est stœchiométrique avec la quantité d'azote aminé libre. C'est le dérivé d'isoindole qui est mesuré par l'augmentation de l'absorbance à 340 nm.

Mode opératoire :

Dans un bêcher de 100 ml, introduire une prise d'essai P ^* , exactement pesée, de l'échantillon à analyser. (Cette prise d'essai sera de 0,5 à 5,0 g en fonction de la teneur en azote aminé de l'échantillon.)

Ajouter environ 50 ml d'eau distillée, homogénéiser et transvaser dans une fiole jaugée de 100 ml, ajouter 5ml de SDS à 20% et amener au volume avec de l'eau distillée ; agiter pendant 15 minutes sur l'agitateur magnétique à 1 000 rpm.

Dissoudre 1 comprimé du flacon 1 du kit Megazyme dans 3 ml d'eau distillée et agiter jusqu'à dissolution complète. Prévoir un comprimé par essai.

Cette solution n ° 1 est à préparer extemporanément.

La réaction se fait directement dans les cuves de spectrophotomètre.

o Blanc :

Introduire 3,00 ml de la solution n ° 1 et 50 μΙ d'eau distillée,

o Standard :

Introduire 3,00 ml de la solution n ° 1 et 50 μΙ du flacon 3 du kit Megazyme.

o Echantillon :

Introduire 3,00 ml de la solution n ° 1 et 50 μΙ de la préparation de l'échantillon.

Mélanger les cuves et lire les mesures d'absorbance (A1 ) des solutions après 2 mn environ au spectrophotomètre à 340 nm (spectrophotomètre équipé de cuves de 1 ,0 cm de trajet optique, pouvant mesurer à une longueur d'onde de 340 nm , et vérifié selon le mode opératoire décrit dans le manuel technique du constructeur qui s'y rapporte). Amorcer ensuite les réactions immédiatement en ajoutant 100 μΙ de la solution OPA flacon

2 du kit Megazyme dans les cuves de spectrophotomètre.

Mélanger les cuves et les placer environ 20 minutes dans l'obscurité.

Faire ensuite la lecture des mesures d'absorbance du blanc, du standard et des échantillons au spectrophotomètre à 340 nm. Mode de calcul :

La teneur en azote aminé libre, exprimée en pourcentage en masse de produit tel quel, est donnée par la formule suivante :

(AAech - AAbic) x 3,15 x 14,01 x V x 100

[ NH ₂ %brut ] =

6803 x 0,05 x 1000 x m

(ΔΑ ech - ΔΑ bic) x 12,974 x V m x 1000

Où : ΔΑ =A2 - A1

V = Volume de la fiole

m = masse de la prise d'essai en g

6803 = coefficient d'extinction du dérivé d'isoindole à 340 nm (en L. mol ^-1 .cm- ¹ ).

14,01 = masse molaire de l'Azote (en g. mol ^-1 )

3,15 = volume final dans la cuve (en ml)

0,05 = prise d'essai dans la cuve (en ml)

Le degré d'hydrolyse (DH) est donné par la formule

Azote protéique (%)

DH =

Azote aminé (%) x 100 où l'azote protéique est déterminé selon la méthode de DUMAS selon la norme ISO 16634.

Mesure de la solubilité dans l'eau à différents pH

Cette mesure est basée sur la dilution de l'échantillon dans de l'eau distillée, sa centrifugation et l'analyse du surnageant.

Mode opératoire :

Dans un bêcher de 400 ml, introduire 150 g d'eau distillée à une température de 20°C +/- 2° C, mélanger avec un barreau magnétique et ajouter précisément 5 g de l'échantillon à tester.

Ajuster ou non le pH à la valeur souhaitée avec NaOH 0,1 N.

Compléter le contenu en eau à 200 g.

Mélanger pendant 30 minutes à 1000 rpm et centrifuger pendant 15 minutes à 3000 g. Collecter 25 g du surnageant.

Introduire dans un cristallisoir préalablement séché et taré.

Placer dans une étuve à 1 03°C +/- 2° C pendant 1 heine.

Placer ensuite dans un dessiccateur (avec agent déshydratant) pour refroidir à température ambiante et peser. Le contenu en matières sèches solubles, exprimé en % en poids, est donné par la formule suivante :

(m1 - m2) x (200 + P) x 100

= % de solubilité

P1 x P

Où :

o P = poids, en g, de l'échantillon = 5 g

o m 1 = poids, en g, du cristallisoir après séchage

o m2 = poids, en g, du cristallisoir vide

o P1 = poids, en g, de l'échantillon collecté = 25 g

Mesure de la digestibilité in vitro

Le dispositif SIMPHYD de N IZO est un modèle statique de simulation des processus de digestion le long du tractus gastrointestinal.

La digestion gastrique est combinée avec une mesure de viscosité en ligne au cours du temps. Adaptée aux conditions physiologiques, l'acidification gastrique est initiée avec de l'HCI concentrée et les enzymes de digestion enzymatique (pepsine et lipase) sont ajoutées.

Tous les échantillons sont soumis au dispositif SIMPHYD à la concentration de 3 % (m/v). Les mesures sont réalisées comme suit :

o On détermine une ligne de base de viscosité pendant 5 minutes, à pH naturel et à 37° C

o On acidifie ensuite à pH 2 avec de l'HCI et maintient à 37° C pendant 15 minutes, o On ajoute pepsine et lipase à 20 minutes.

La viscosité est suivie pendant 3 heures, à l'aide d'un rhéomètre TA Instruments AR-2000 sous vitesse de cisaillement de 75 s ^-1 .

Les mesures sont réalisées en double. Si l'écart entre deux mesures est trop important, une troisième mesure est réalisée.

Le profil des protéines testées est comparé avec ceux établis par Hall et al (article de 2003 intitulé Casein and whey exert différent effects on plasma amino acid profiles, gastrointestinal hormone sécrétion ans appetite publié dans Br. J. Nutr. 89 : 239-248) pour des protéines dites « rapides » et « lentes » (respectivement protéines de lactosérum et caséinates de sodium).

Les profils des viscosités obtenues sont présentés dans la Figure 21.

La viscosité apparente de l'échantillon de protéines de lactosérum témoin ne change pas durant le processus gastrique, tandis que la viscosité apparente du témoin caséinates de Na augmente après l'acidification gastrique et reste élevée après l'ajout des enzymes digestives.

Après 5 minutes d'acidification, les protéines de pois (NUTRALYS® S85M) affichent un premier pic de viscosité, suivi d'un second à 15 minutes, puis le profil de viscosité rejoint celui des protéines de lactosérum, à des valeurs légèrement supérieures.

La viscosité commence à chuter avant l'ajout des enzymes digestives. Les isolais de protéines de pois selon l'invention montrent une très petite augmentation en viscosité apparente, qui diminue à nouveau à des valeurs légèrement au-dessus de celles des protéines de lactosérum, pendant 30 minutes.

Le comportement des isolats de protéines de pois selon l'invention traduit leur caractère « rapide » caractéristique de protéines plus satiétogènes que les protéines dites « lentes ». Ce qui induit un vidage gastrique plus rapide et une augmentation post-absorptive des aminoacides plasmiques.

Mesure du pouvoir émulsifiant

Comme indiqué ci-avant, les mesures sont effectuées par diffusion de la lumière de poudre de protéines remise en solution, les émulsions obtenues étant analysées au granulomètre pour la taille des globules gras formés.

Les résultats sont exprimés par :

o Le Dmode, diamètre de la population principale,

o Le D(4,3), diamètre moyen arithmétique

o Les D10, D50 et D90, diamètres pour lesquels il y a 10 %, 50 % et 90 % de passants. Le tableau ci-après regroupe la taille des globules gras des émulsions réalisés à partir : o Des deux isolats de protéines de pois conformes à l'invention n ° 1 et n °2, o De différentes protéines de lait

o D'un lot de caséinates de sodium .

Le AD correspond à la différence entre le D90et le D10 ; il traduit l'état de dispersion des émulsions.

Plus cette valeur est petite, plus les tailles des gouttelettes sont proches, et plus l'émulsion est homogène.

Les isolats de protéines de pois selon l'invention présentent :

o de bonnes propriétés émulsifiantes (Dmode plus faible : 23,4 et 23,6 μιη , respectivement)

o Une stabilité d'émulsion (AD) du même ordre voire plus faible que certaines protéines de lait concentrées ou que les caséinates de sodium et o une homogénéité d'émulsion équivalente aux protéines de lait.

Leurs propriétés les rendent par ailleurs tout à fait transposable aux applications où un certains pouvoir émulsifiant est recherché comme les préparations de desserts glacés, non dairy coffee whitener, pour lesquelles les caséinates sont recherchés.

Exemple 1 : préparation des isolais de protéines de pois selon l'invention et caractérisation des isolats de protéines de pois référencés « 1 » et « 2 » selon l'invention

Procédé de préparation des isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1

On délaye 1 500 kg de protéine de pois (commercialisée par la société demanderesse sous le nom de marque NUTRALYS® S85F) dans 8500 litres d'eau préchauffée à 55° C.

On agite durant 3 h à 55°C.

On ajoute 0,5 % (poids/poids) de d'endoprotéase FLAVORPRO 750 MDP (de la société BIOCATALYST).

On agite durant 1 h à 55°C.

Le degré hydrolyse obtenu est alors de 7.

On inhibe la réaction par chauffage du milieu à 70°C et on maintient à cette température pendant 10 minutes minimum.

On applique un traitement UHT (barème 140°C - 1 0 s).

On sèche par atomisation à une matière sèche d'environ 93%.

Procédé de préparation des isolats de protéines de pois selon l'invention n °2

On délayage 1500 kg de protéine de pois (commercialisée par la société demanderesse sous le nom de marque NUTRALYS® S85F) dans 8500 litres d'eau préchauffée à 55°C.

On agite durant 3 h à 55°C.

On ajoute 0,3 % (poids/poids) d'endoprotéase ENZECO FUNGAL PROTEASE (de la société EDC).

On agite durant 1 h à 55° C, le degré hydrolyse obteru est alors de 6,5.

On inhibe la réaction enzymatique par chauffage du milieu à 70° C et maintient durant 10 minutes minimum.

On applique un traitement UHT (barème 140°C - 1 0 s).

On sèche par atomisation ensuite à une matière sèche d'environ 93%.

Caractéristiques des isolats de protéines de pois ainsi préparés 7. Teneur en acides aminés libres

Mesures effectuées selon la norme NF EN IS013903:2005

2. Profil de viscosité

Pour la détermination du profil de viscosité dans l'eau, les mesures sont effectuées

o sur une solution aqueuse d'isolats de protéines de pois à 15 % de matière sèche (eau osmosée et azidurée à 200 ppm pour prévenir tout risque bactériologique), o en rhéomètre AR2000 de la société TA Instruments,

o présentant une géométrie à cylindres concentriques,

o avec un taux de cisaillement de 0,6 10 ^"3 à 600 s ^-1 en 3 minutes (log) et o à la température de 20°C (3 min d'équilibre température avant test).

Avant mesure, la solution est agitée pendant au moins 10 heures, à 750 tr/min et à 20 °C.

Le pH n'est pas ajusté.

Le tableau suivant permet de comparer les profils de viscosité des isolats de protéines de pois conformes à l'invention, en regard de ceux des protéines de lait contrôle et de la protéine de pois NUTRALYS® S85F.

On constate que les isolats de protéines de pois conformes à l'invention présentent un comportement Newtonien comme celui des protéines de lait alors que la protéine de pois NUTRALYS® S85F a un comportement rhéofluidifiant très marqué.

De plus, les viscosités des isolats de protéines de pois n ° 1 et 2 sont très proches des viscosités des protéines de lait, voire mêmes plus basses.

3. Profil de solubilité dans l'eau en fonction du pH

Les résultats sont présentés dans le tableau suivant et sont illustrés par la Figure 5.

4. Etude de stabilité

Une étude de stabilité dans le temps des isolats de protéines de pois conformes à l'invention est menée afin de mesurer leur comportement en regard des protéines de pois intactes.

L'étude est menée après stockage 6 mois selon un barème température / humidité relative de :

o 40°C +/- 2 °C

o à 75 % +/- 5 % d'humidité relative.

Les mesures sont exprimées en % de perte de solubilité (mesurée selon le mode opératoire ci-avant).

On constate ainsi qu'à pH7, le NUTRALYS® S85F perd environ la moitié de sa solubilité alors que les isolats de protéines de pois ne perdent qu'au maximum 1 /5 de leur solubilité, et conservent dans tous les cas une solubilité supérieure à celle du NUTRALYS® S85F initial. 4-Profil de digestibilité

Le but de cette étude est d'évaluer la digestibilité protéique totale des isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 et 2 et de la compara au NUTRALYS® S85F.

Pour cette étude, 48 rats Sprague Dawley (Charles River, Lyon, France) de 100 - 125 grammes au début de l'étude ont été randomisés en fonction de leur poids dans 4 groupes de 12 rats.

Cette expérience a été conduite en accord avec la législation européenne d'expérimentation animale et dans le respect du bien-être animal (projet APAFIS n ° 0000501 ).

A leur arrivée, les rats ont subi une période de quarantaine de 7 jours pendant laquelle ils ont reçu un aliment standard pour rats en croissance.

A partir du premier jour d'étude, les rats ont reçu les régimes suivants et ce, pour 10 jours :

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Les consommations d'aliment, de boisson et l'évolution pondérale sont suivis les premier et cinquième jours d'étude puis de façon quotidienne jusqu'au dixième et dernier jour d'étude.

Lors des 5 derniers jours d'étude, urines et fèces sont aussi collectés de façon quotidienne. Les taux protéiques des aliments et fèces sont déterminés par la méthode Kjeldahl (norme ISO 1871 :2009).

Les analyses de l'azote des fèces et aliments permettra de calculer le Coefficient d'Utilisation Digestive (CU D) :

[quantité .absorbée - quantité .excrétée .dans .les .fèces]

quantité .absorbée Tous les rats ont eu la croissance attendue. Elle était significativement plus faible dans le groupe contrôle déficient en protéine, comme toujours dans ce schéma expérimental.

La consommation de boisson n'a pas été modifiée par les différents régimes.

Les modifications des autres paramètres urinaires et fécaux sont directement liées au régime contrôle ou expérimental.

En fonction des différents jours expérimentaux, on a pu calculer les digestibilités suivantes :

Digestibilité (%)

Régime CUD J6 J7 J8 J9 J10 Moyenne

Protéine de n 12 12 12 12 12 12,00 pois

NUTRALYS® moyenne 96,5 96,3 95,3 95,0 95,8 95,8

S85F écartype 2,6 1 ,4 1 ,4 1 ,7 1 ,9 0,8

Isolât de n 12 12 12 12 12 12,00 protéines de

pois selon moyenne 94,6 94,7 93,8 92,1 93,8 93,8 l'invention n ° 1 écartype 4,6 2,1 1 ,8 3,6 3,5 1 ,3 n 12 12 12 12 12 12,00

Isolât de

protéines de moyenne 95,2 95,7 95,2 93,2 94,6 94,8 pois selon

l'invention n °2 écartype 2,9 1 ,9 2,1 2,8 1 ,8 1 ,0

D'un point de vue statistique, la digestibilité protéique du NUTRALYS® S85F est significativement différente de celle de l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 (p = 0.0003).

Néanmoins, d'un point de vue biologique, ces différences ne sont absolument pas significatives.

On peut donc conclure à des digestibilités similaires entre le NUTRALYS et les isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 et n °2 avecles arrondis suivants :

Régime Global (arrondi)

Protéine de pois

moyenne 96

NUTRALYS®

S85F écartype 1

Isolât de protéines de

moyenne 94

pois selon l'invention

n ° 1 écartype 1

Isolât de protéines de

moyenne 95

pois selon l'invention

n °2 écartype 1

5- Cinétique de digestion.

Cet essai utilise une technique in vitro de simulation de digestion protéique selon la méthode suivante.

L'utilisation de méthodes de digestion in vitro permet un criblage efficace de différents produits alimentaires riches en protéines en fonction de leurs propriétés physico-chimiques et de leur comportement au cours de leur passage dans l'estomac et l'intestin grêle. Ici, nous comparons des solutions à 3% (m/m) de protéine pour le NUTRALYS® S85F, les isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 et n °2 et les contrôles communément utilisés dans ce genre de tests que sont la caséine et le lactosérum.

Ces 5 solutions sont donc testées dans un modèle in vitro de digestion dynamique dans des conditions physiologiques équivalentes à l'estomac puis l'intestin grêle.

Ce modèle de digestion est couplé à un suivi en temps réel de la viscosité grâce à un rhéomètre à contrainte imposée (AR-2000, TA Instruments, New Castle, DE, USA) équipé d'un rotor à ailette en acier inoxydable (hauteur 39 mm et diamètre 28 mm).

Les solutions protéiques ont été testées dans les mêmes conditions, à savoir un cisaillement régulier à 37°C et à la vitesse de 150s- ¹ pendant 3h.

La viscosité de base a été monitorée pendant 5 minutes avant de procéder à une acidification progressive de la solution jusqu'à un pH contenu entre 1 ,5 et 2.

Cette acidification prend en général 15 minutes.

Une fois le pH de la solution stabilisé entre 1 ,5 et 2, on ajoute un cocktail enzymatique de pepsine stomacale (Sigma-AIdrich, St. Louis, MO, USA) et de lipase (Novozyme, Gladesaxe, Danemark). Les courbes de suivis de viscosité sont présentées dans la Figure 4.

Le suivi de la viscosité au cours de la digestion in vitro traduit bien la cinétique de digestion des protéines. Ainsi la digestion du lactosérum ne donne pas lieu à une modification de la viscosité car il s'agit d'une protéine rapidement digérée. La caséine quant à elle montre une viscosité très augmentée après l'acidification, ce qui traduit une digestion lente.

La protéine de pois de type NUTRALYS® démontre un comportement intermédiaire entre ces 2 standards, il est qualifié « d'intermédiaire rapide ».

Cependant, les isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 et n °2 montrent un comportement encore intermédiaire entre le NUTRALYS® S85F et le lactosérum.

II est à noter que l'association de protéines rapides avec des protéines intermédiaires peut faciliter la digestion et allonger le temps de diffusion des acides aminés dans la circulation sanguine, ce qui présente un intérêt pour la synthèse protéique au sein des muscles après un effort long.

Exemple 2 : Remplacement des protéines de lait par les isolats de protéines de pois dans des boissons prêtes-à-boire traitées UHT pour la nutrition clinique

Les formulations nutritives à base de protéines de lait, de pois et d'isolats de protéines de pois sont présentées dans le tableau suivant :

Formulation Formulation

Formulation

Formulation nutritionnelle nutritionnelle

Ingrédients nutritionnelle avec contrôle selon l'invention selon l'invention

protéines de pois n ° 1 n °2

Maltodextrine

GLUCIDEX ® IT19

17, 10 17,60 17,60 17,60 (ROQUETTE

FRERES)

Concentrât de

protéines de lait

1 1 ,00 5,53 5,53 5,53 (MPC 80 - FONTERRA) Protéines de pois

5,67 NUTRALYS® S85F

Isolât de protéines de

pois n ° 1 (selon

5,67

l'invention - cf.

exemple 1 ci-dessus)

Isolât de protéines de

pois n °2 (selon

5,67

l'invention - cf.

exemple 1 ci-dessus)

Saccharose 3,20 3,4 3,4 3,4

Huile de colza 4,02 3,78 3,78 3,78

Huile de tournesol 2,68 2,52 2,52 2,52

Lécithine de soja 0,40 0,40 0,40 0,40

Arôme vanille 0,36 0,36 0,36 0,36

Mélange de minéraux

0,492 0,273 0,273 0,273 VITABLEND 7398

Mélange de minéraux

0,469 0,469 0,469 VITABLEND 7402

Eau déminéralisée 60,75 60 60 60

Total 100 100 100 100

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Leurs valeurs nutritionnelles pour 100 ml sont les suivantes.

Composition en m inéraux (pour 1 00 m l) :

Formulation

Formulation

(mg) nutritionnelle selon

contrôle

l'invention n °2

Na 67,8 107,7

Ca 242,0 241 ,4

K 163,9 160,4

Cl 65,0 64, 1

P 154,0 135,3

Mg 25,4 24,9

Le procédé de fabrication des boissons est le suivant o Mélanger à sec toutes les poudres (protéines de lait, protéines de pois, isolats de protéines de pois, maltodextrines et le saccharose),

o Peser 90 % de l'eau à 55°C,

o Ajouter le mélange de poudre dans l'eau à 55°C, dsperser avec un fouet pendant 1 min puis mélanger avec un SILVERSON pendant 30 minutes à 55° C,

o Dans un récipient de mélange à part, dissoudre les minéraux avec l'eau restante à

50°C et ajouter immédiatement à la solution,

o Ajouter l'arôme vanille à ladite solution,

o Placer la lécithine et l'huile dans un récipient de mélange à part, agiter et chauffer à environ 55° C,

o Après 35 min d'hydratation, ajouter la lécithine et le mélange d'huile au lot principal en utilisant un cisaillement de 1 0 000 trs/min pendant 5 minutes,

o Préchauffer le produit à 75° C par batch de 3 I en bécher au bain marie (montée en température de l'ordre de 10 min) et homogénéiser à 200 bar (1 étage) sur un homogénéisateur de 10 l/h (environ 20 min par batch),

o Refroidir le produit à 30° C pendant 5 minutes à 45minut.es selon les batch, o Ajuster à pH 6,8 - 7, à 30° C, avec de la soude à 33 %,

o Chauffer de nouveau le produit au bain-Marie à 75 Ό (montée en température pendant 10 minutes),

o Stériliser le produit à 142 °C pendant 5 secondes dans un échangeur tubulaire puis refroidir dans l'échangeur à 25°C

o Conditionner le produit en bouteilles

o Stocker a + 4°C. Les analyses réalisées sur la formulation sont les suivantes :

1 . Analyse des tailles de particules de l'émulsion que forment les formulations nutritionnelles selon l'invention

L'objectif ici est d'analyser l'aspect des formulations nutritionnelles base isolats de protéines de pois en regard du contrôle base protéines de lait.

Les analyses ont été effectuées avec un analyseur de taille de particule réf. 2000 de MALVERN. Les résultats obtenus sont présentés dans la Figure 1 et dans le tableau suivant (les valeurs du tableau sont la moyenne de 3 mesures).

Le Dmode est le diamètre principal des particules. Le d10, d50 et d90 sont les valeurs de diamètre des particules représentant respectivement 10 %, 50 % et 90 % des particules totales. Taille des particules (μηι)

Après homogénéisation et avant l'étape de

traitement thermique

Dmode d10 d50 d90

Formulation contrôle :

0,3 0,2 0,4 1 ,4

100 % protéine de lait

Formulation nutritionnelle

selon l'invention n ° 1

50% isolats protéines de 0,3 0,2 0,9 10,3 pois n ° 1 + 50 % protéines

de lait

Formulation nutritionnelle

selon l'invention n °2

50% isolats protéines de 0,3 0,2 0,5 6,7 pois n ° 2+ 50 % protéines

de lait

Formulation nutritionnelle

avec protéines de pois 46,1 0,3 25,4 78,4 100 % protéines de pois

Les quatre échantillons présentent une répartition de particules bimodale. Le premier pic (première famille de particules), centré sur 0,3 μιη , est majoritaire dans les trois premières formulations. Pour la formulation nutritionnelle avec protéines de pois, cette population est minoritaire.

Le second pic de la répartition bimodale (deuxième famille de particules) est fonction de l'échantillon :

o pour les formulations 1 et 2 selon l'invention, il y a une population centrée sur 3 μιη, mais le volume de ladite population est plus forte pour la formulation n ° 1 ;

o pour la formule contrôle : le deuxième pic est centré sur 10 μιη ;

o la formulation nutritionnelle avec protéines de pois marque sa différence en présentant un second pic centré sur 46 μιη.

Il en est déduit que les isolats de protéines de pois n ° 1 et n ° 2 permettent d'obtenir des tailles d'émulsion de la boisson proche de celle obtenue avec de la protéine de lait.

Par ailleurs, l'isolât de protéines de pois n °2 donne même une meilleure répartition de la taille d'émulsion (répartition moins bimodale et meilleure stabilité d'émulsion représentée par la différence entre le D90 et D10) que l'isolât de protéines de pois n ° 1 . 2. Analyse des viscosités

L'objectif ici est de démontrer la stabilité des formulations nutritionnelles base isolats de protéines de pois en regard du contrôle base protéines de lait, et de démontrer également l'avantage technologique à choisir ces isolats en regard des protéines de pois.

Les paramètres de mesure sont les suivants :

o Rhéomètre: Physica MCR301

o Outils : Tools: concentric cylinder CC27

o Température: 20° C (5 minutes pour être à l'équilibre) o Cisaillement : 0,05 à 1000 s ^-1 en 6 minutes

Le résultat des mesures de viscosités est présenté dans le tableau suivant (l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 est analyséici) :

Le traitement thermique n'affecte pas les 3 formulations nutritionnelles de la même manière :

o Pour la formulation contrôle, le traitement thermique conduit à une diminution de la viscosité ;

o Pour la formulation n ° 1 , il y a augmentation de la viscosité et augmentation du comportement rhéofluidifiant, mais cette augmentation de viscosité reste faible et se rapproche de celle de la formulation contrôle.

On constate en effet qu'avant le traitement thermique, la formulation contrôle présente la viscosité la plus importante, puis la formulation base protéines de pois.

Après le traitement thermique, au contraire, la formulation contrôle présente la viscosité la plus basse, puis la formulation conforme à l'invention n ° 1 .

En conclusion, la formule nutritionnelle n ° 1 selon l'invention et la formule contrôle base protéines de lait ont un comportement rhéologique qui est semblable en termes de viscosité et de résistance thermique.

D'autres mesures de viscosités ont été faites sur les mêmes recettes de boisson, cette fois en prenant également une formule nutritionnelle préparée avec l'isolât de protéines de pois n °2 (en changeant notamment le mode de cuisson, ici stérilisation UHT (142 °C - 5 s) à 20 l/h en ligne avec une homogénéisation en phase descendante à 75°C à 200 bars après le traitement thermique) et après un mois de stockage des boissons à + 4°C. Viscosité en Pa.s à 20 ° C

Après traitement thermique Après 1 mois stockés à 4 °C

10s ^"1 100s- ^"1 1000s ^"1 10s ^"1 100s- ^"1 1000s- ^"1

Formulation contrôle :

0,049 0,047 0,045 0,085 0,076 0,068

100 % protéine de lait

Formulation

nutritionnelle selon

l'invention n ° 1

0,101 0,073 0,057 0,157 0,097 0,065

50% isolats protéines

de pois n ° 1 + 50 %

protéines de lait

Formulation

nutritionnelle selon

l'invention n °2

0,107 0,075 0,057 0,155 0,095 0,064

50% isolats protéines

de pois n ° 2 + 50 %

protéines de lait

Formulation

nutritionnelle avec

0,963 0,343 0, 159 1 ,47 0,459 0,202

protéines de pois

100 % protéines de pois

Ces résultats montrent que toutes les formulations ont une viscosité qui augmente après un mois à 4° C. Les formulations n ° 1 et 2 ont une vscosité qui augmente très légèrement, du même ordre de grandeur que celle de la formule contrôle, après un mois, en comparaison avec la formulation avec la protéine de pois.

Les boissons contenant les isolats de protéine de pois n ° 1 et 2 sont beaucoup plus stables que la boisson contenant la protéine de pois, et se rapprochent de la stabilité de la boisson contenant la protéine de lait.

Exemple 3 : Remplacement des protéines de lait par les isolats de protéines de pois dans des boissons prêtes-à-boire traitées UHT pour la nutrition du sportif

Les formules nutritionnelles présentent les compositions suivantes :

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids. Leurs valeurs nutritionnelles pour 100 ml sont les suivantes

Les conditions de préparation desdites boissons sont les mêmes que celles de l'exemple 2.

On réalise des mesures de viscosité desdites boissons prêtes-à-boire pour sportifs.

L'objectif ici est également de démontrer la stabilité des formulations nutritionnelles base isolats de protéines de pois en regard du contrôle base protéines de lait, et de démontrer également l'avantage technologique à choisir ces isolats en regard des protéines de pois.

Les paramètres de mesure sont les suivants :

o Rhéomètre: Physica MCR301

o Outils : Tools: concentric cylinder CC27

o Température: 20° C (5 minutes pour être à l'équilibre)

o Cisaillement : 0,05 à 1000 s ^-1 en 6 minutes

Le résultat des mesures de viscosités est présenté dans le tableau suivant :

On en déduit que :

avant UHT, les formulations contenant des isolats de protéines de pois ont une viscosité intermédiaire entre les protéines de lait et les protéines de pois, après UHT, les formulations contenant des isolats de protéines de pois perdent de la viscosité, alors que les protéines de pois en gagnent ; les protéines de lait restant les plus visqueuses.

Les isolats de protéines de pois sont donc plus stables au traitement thermique que les protéines de pois et sont plus adaptés aux boissons UHT prêtes-à-boire sport de par leur faible viscosité, propriétés requises par les boissons UHT prêtes-à-boire sport.

Exemple 4 : Remplacement des protéines de lait par les isolats de protéines de pois dans une formule liquide nutritionnelle traitée UHT pour la nutrition clinique entérale

Les formules nutritionnelles ont alors les compositions suivantes

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Les valeurs nutritionnelles pour 100 ml sont les suivantes.

Le procédé de fabrication des boissons est le suivant :

o Mélanger les caséinates dans l'eau à 50°C, ajouter les protéines, et mélanger sur plaque magnétique pendant 10 minutes,

o Ajouter les hydrates de carbone et les minéraux sous mélangeur SILVERSON, o Ajouter l'huile sous SILVERSON pendant 5 min (10 000 rpm),

o Homogénéiser à 60°C à 250 bars dans un homogénéisateur haute pression N IRO

SOAVI 2K (2 étages), o Ajuster le pH à 6,9 avec une solution d'acide citrique à 50 %, o Stériliser à l'autoclave dans des bocaux en verre à 120° C pendant 1 5 minutes, o Refroidir à température ambiante.

Dans ces conditions opératoires, les isolats de protéines de pois peuvent être avantageusement mis en œuvre pour substituer les protéines de lait.

Exemple 5 : Comparaison des propriétés sensorielles de 4 mélanges de poudre formulés avec des isolats de protéines de pois conformes à l'invention pour sportifs

Le panel est constitué de 13 personnes.

Le panel est qualifié à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

En effet, il a reçu une formation pour la bonne utilisation des descripteurs sensoriels de goût et de texture, tels que, par exemple :

La méthode leur permet également de s'exprimer sur d'autres descripteurs qui n'auraient pas été anticipés dans cette liste. Produits

Les formules nutritionnelles sont des mélanges de poudre destinés au sportif de composition suivante :

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Ils sont reconstitués juste avant la dégustation dans de l'eau à température ambiante. Conditions de dégustation

- Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

- Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit)

- En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

- Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

- Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Test

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann, 2000 - Le profil Flash: Un outil rapide et innovant d'évaluation sensorielle descriptive. In: L 'innovation: de l'idée au succès - Douzièmes rencontres AGORAL. Pp. 335-340, 22 & 23 mars 2000. Paris, France: Lavoisier, Tec & Doc). Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur sensoriel :

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994 - Mul tiple factor analysis (AFMULT package). In: Computational Statistics Et Data Analysis, Volume 18, Issue 1, August 1994, Pages 121- 140) sur les données-rangs des produits.

Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les analyses ont été réalisées à l'aide du logiciel R (en vente libre) :

R version 2.14.1 (201 1 -12-22)

Copyright (C) 201 1 The R Foundation for Statistical Computing

ISBN 3-900051 -07-0

20 Platform : Î386-pc-mingw32/i386 (32-bit)

Le logiciel est un environnement de travail qui nécessite le chargement de modules contenant les fonctions de calcul comme le package FactoMineR version 1 .19

Résultats

La représentation graphique des résultats est présentée sur la Figure 2.

3 groupes se distinguent : la protéine de pois PISANE® commercialisée par la société COSUCRA, la protéine de pois NUTRALYS® S85F, et les deux isolats de protéines de pois conformes à l'invention de l'exemple 1 .

Les panélistes ont établi peu de différence entre deux isolats de protéines de pois conformes à l'invention de l'exemple 1 .

Ceux-ci sont moins sableux, pois et papier / carton que les produits témoins et sont plus amers et plus fraise / banane (arômes utilisés dans cette formulation).

Le mix avec PISANE® s'est démarqué en termes de texture car sa mise en application a généré la formation de mousse.

Le mix avec NUTRALYS® S85F s'est quant à lui démarqué pour son goût sucré. Exemple 6 : Comparaison des propriétés sensorielles de boissons « prêtes-à-boire » pour la nutrition clinique

Le panel est constitué de 14 personnes.

Le panel est, comme dans l'exemple 3, qualifié à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

En effet, il a reçu une formation pour la bonne utilisation des descripteurs sensoriels de goût et de texture, tels que, par exemple :

Descripteur Définition Mode opératoire Référence

Solution à 3% en poids de petits pois dans de l'eau

POIS Goût typique de pois Goûtez le produit

(homogénéisation au

mélangeur)

Goût typique de

VANILLE Goûtez le produit Solution d'arôme vanille vanille

Goût typique de

CARAMEL Goûtez le produit Caramel

caramel

Solution de chlorure de

SALE Goût salé Goûtez le produit sodium à 0.01 g/L dans de l'eau minérale

Solution d'acide tannique à

Sensation

ASTRINGENT Goûtez le produit 0.5g/L dans de l'eau

d'assèchement

minérale

Evaluation de la

Mâchez une unité de produit

texture douce et

CREMEUX / et vérifiez s'il provoque un Crème fraîche, crème

fondante du produit.

NAPPANT contact mou et s'il tapisse la épaisse

(pas onctueux / très

bouche.

onctueux)

Evaluation de la force

nécessaire pour Au bout de quelques

décoller des produits mastications consécutives,

qui adhèrent à pressez le produit entre les

COLLANT Caramel mou

l'intérieur de la cavité dents et mesurez la force

buccale, nécessaire pour qu'il se

(pas collant / très décolle des dents.

collant)

Evaluation de la

facilité du produit à Frottez la langue contre le

EPAIS s'écouler en bouche, palais et vérifiez si le produit Lait concentré sucré, miel

(pas épais / très s'écoule facilement.

épais) La méthode leur permet également de s'exprimer sur d'autres descripteurs qui n'auraient pas été anticipés dans cette liste.

Produits

Les produits sont des boissons « prêtes-à-boire » dont les recettes sont celles de l'exemple 2.

Ils sont présentés aux panélistes à température ambiante.

Conditions de dégustation

- Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

- Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit)

- En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

- Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

- Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les données-rangs des produits. Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les analyses ont été réalisées à l'aide du logiciel R (en vente libre) :

R version 2.14.1 (201 1 -12-22)

Copyright (C) 201 1 The R Foundation for Statistical Computing

ISBN 3-900051 -07-0

20 Platform : Î386-pc-mingw32/i386 (32-bit) Le logiciel est un environnement de travail qui nécessite le chargement de

modules contenant les fonctions de calcul comme le package FactoMineR version 1 .19

Résultats

La représentation graphique des résultats est présentée sur la Figure 3.

Le NUTRALYS® S85F a été présenté en double pour tester la répétabilité du panel : on peut voir sur le graphique que les deux points sont proches sur la première dimension (la plus importante) mais pas sur la deuxième, on considère donc que cette deuxième dimension est constituée de bruit de mesure. Ainsi il n'y a pas de différence significative entre les deux isolats de protéines de pois conformes à l'invention, puisqu'ils sont proches sur la première dimension.

Il apparaît que les deux isolats de protéines de pois conformes à l'invention sont plus vanille / caramel et salés que le NUTRALYS® S85F qui se trouve être plus pois / végétal et astringent en goût ; plus crémeux / nappant, épais et collant en texture. Exemple 7 : Comparaison des propriétés sensorielles de boissons « prêtes-à-boire » pour sportifs

Le panel est constitué de 12 personnes.

Le panel est, comme dans l'exemple 3, qualifié à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon Produits

Les produits sont des boissons « prêtes-à-boire » dont les recettes sont celles de l'exemple 3. Ils sont présentés aux panélistes à température ambiante.

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur sensoriel : noix fraî

F A

Voici la liste de descripteurs présentée aux panélistes à titre indicatif

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les notes des produits. L'ensemble des descripteurs généré par un juge est un groupe de variable. Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les traitements statistiques ont été effectués avec le logiciel R version 2.14.1 (201 1 -12-

22).

Résultats

La représentation graphique des résultats est présentée sur la Figure 6.

Sur la dimension 1 , on distingue deux familles : les deux isolats de protéines de pois selon l'invention / les deux protéines de pois et avec la dimension 2 on peut caractériser les 4 échantillons selon leur texture, odeur et goût.

En texture, les boissons prêtes à boire avec la PISANE ® et le NUTRALYS® S85F sont plus épaisses que celles avec les isolats de protéines de pois selon l'invention.

En odeur, la boisson avec l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 est plus vanille que l'isolât de protéines de pois selon l'invention n °2, tandis qu'avec la PISANE®, l'odeur est plus pois.

En goût, la PISANE® apparaît piquant et chimique et comme pour l'odeur, plus pois, noix et végétale. Les boissons prêtes à boire avec la PISANE et le NUTRALYS® S85F ont en commun le caractère amer et papier-carton. Concernant les boissons avec les isolats de protéines de pois conformes à l'invention, le la boisson n ° 1 (avec isolât n ° 1 ) est plus lactée etvanille et la boisson n °2 est plus céréales et confiture de lait / caramel. Exemple 8 : Remplacement des protéines de laits par des isolats de protéines de pois dans des crèmes desserts traitées UHT pour la nutrition clinique.

Les formulations nutritives à base de protéines de lait, de pois, de pois concurrent et d'isolats de protéines de pois selon l'invention sont présentées dans le tableau suivant (substitution de l'ordre de 23 %) :

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids. Les valeurs nutritionnelles pour 100 g sont les suivantes :

Le procédé de fabrication des boissons est le suivant :

o Préchauffer l'eau à 50° C,

o Mélanger à sec toutes les poudres (protéines de lait, protéines de pois, isolats de protéines de pois, maltodextrines, dextrines, le saccharose et l'amidon),

o Ajouter le mélange de poudre dans l'eau à 50°C, dsperser avec un fouet pendant 1 min puis mélanger avec un mélangeur SILVERSON à 3000 trs/min pendant 30 minutes à 50° C,

o Ajouter l'arôme à ladite solution,

o Placer la lécithine et l'huile dans un récipient de mélange à part, agiter et chauffer à 50°C,

o Après 30 min d'hydratation, ajouter la lécithine et le mélange d'huile au lot principal en utilisant un cisaillement de 1 0 000 trs/min pendant 5 minutes,

o Stériliser le produit à 133°C pendant 55 sec dans un échangeur tubulaire puis conditionner à 70° C,

o Stocker à 4° C.

Comparaison des propriétés sensorielles de crèmes desserts pour la nutrition clinique. Le panel est qualifié à la dégustation de produits formulés. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

Le panel est constitué de 26 personnes, parmi le personnel Roquette, et le jour de la dégustation, 1 1 personnes étaient présentes, parmi lesquelles 6, ont spécifiquement été entraînées sur la thématique des crèmes desserts.

Les produits ont été préparés puis conservés au réfrigérateur.

Ils sont servis aux panélistes à température ambiante. Conditions de dégustation

Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit) · En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur sensoriel : Fondant

Voici la liste de descripteurs présentée aux panélistes à titre indicatif :

CREMES DESSERTS

Descripteur Définition Mode opératoire Référence

ASPECT

qui renvoie la lumière, Jaune d'œuf

Brillant explorez visuellement le produit

(pas brillant / très brillant) cru qui présente des particules (nombreuses

Granuleux

et/ou de taille importante) explorez visuellement le produit Sucre roux (aspect) (pas granuleux / très granuleux)

GOUT

Saveur élémentaire provoquée par une Sucre en

Sucré Goûtez le produit

solution de saccharose poudre

Saveur élémentaire qui provoque une

Amer sensation âpre, désagréable, par une Goûtez le produit Caféine / café solution de caféine

Pois Qui le goût de pois Goûtez le produit Pois TEXTURE

à la cuillère

qui résiste à l'écoulement évaluez la résistance du produit à la

Epais

contrainte en tournant la cuillère dans le Miel (cuillère) (pas épais / très épais)

pot

qui forme un mince filet d'écoulement / prenez une unité de produit avec une

Court tombe par paquet cuillère. Levez et tournez la cuillère. SojaSun

(texture longue / courte) Vérifiez la longueur du filet d'écoulement

Texture en bouche

Phase initiale (perçue dès l'introduction dans la bouche)

Epais qui s'écoule difficilement en bouche prenez une unité de produit en bouche et

Mascarpone (en bouche) (pas épais / très épais) faites le circuler dans la cavité buccale

Phase masticatoire (perçue pendant la mastication)

Evaluation de la capacité de dissolution

gardez le produit en mouvement dans la

du produit en bouche sous l'action de la

Fondant bouche et évaluez le temps mis pour le Glace salive.

dissoudre.

(pas fondant / très fondant)

qui présente un contact doux et fond en prenez une unité de produit en bouche et

Crème fraîche

Crémeux bouche vérifiez s'il provoque un contact mou et

épaisse

(pas crémeux / très crémeux) s'il tapisse la cavité buccale

Granuleux qui présente des particules glissez la langue contre le palais et

évaluer la perception de petits grains en Sucre roux (en bouche) (lisse / très granuleux)

bouche

Phase résiduelle (modifications opérées pendant la mastication) qui adhère aux parois de la cavité placez un échantillon sur la langue, le

buccale comprimer contre le palais et évaluez la

Collant Caramel mou force nécessaire pour l'enlever avec la

(pas collant / très collant)

langue

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les données-rangs des produits. Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les traitements statistiques ont été effectués avec le logiciel R version 2.14.1 (201 1 -12-22)

Résultats

Comme il apparaît sur la Figure 7, les crèmes desserts sont discriminés de façon consensuelle par l'ensemble des panélistes, avec une dimension 1 très importante à presque 64% qui nous décrit les produits extrêmes de la façon suivante.

Le témoin lait est le plus brillant en aspect, fondant en bouche mais le moins épais, et en goût le plus sucré.

En texture, les crèmes desserts avec la PISANE® C9 et le N UTRALYS® S85F sont plus épaisses que celles avec l'isolât de protéine de pois selon l'invention.

En goût, la crème dessert avec l'isolât de protéine de pois est moins pois que l'essai avec la PISANE® C9 et le NUTRALYS® S85F. Exemple 9. Remplacement des protéines de lait par les isolais de protéines de pois dans les crèmes glacées/desserts glacés

4 recettes sont élaborées :

o Témoin : avec 100 % de protéines de lait

o Recette n ° 1 : 50 % de protéine de lait remplacés par de la protéine de pois

NUTRALYS® S85F.

o Recette n °2 : 50 % de protéine de lait remplacés par de l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 ;

o Recette n °3 : 50 % de protéine de lait remplacés par de l'isolât de protéines de pois selon l'invention n °2 ;

Témoin Recette n ° 1 Recette n °2 Recette n °3

Eau 48,70 48,77 48,79 48,79

Saccharose 13,00 13,00 13,00 13,00

Crème (35 % de matière

27,40 27,40 27,40 27,40 grasse)

Lactose 0,00 2,10 2,10 2,10

Poudre de lait écrémée 5,80 2,05 2,05 2,05

Sirop de glucose 70/81 4,00 4,00 4,00 4,00

Protéine de pois

0,00 1 ,58 0,00 0,00

NUTRALYS ® S85F

Isolât de protéines de

0,00 0,00 1 ,56 0,00 pois selon l'invention n ° 1

Isolât de protéines de

0,00 0,00 0,00 1 ,56 pois selon l'invention n °2

Stabilisants

0,60 0,60 0,60 0,60

(CREMODAN SE30)

Arôme vanille

0,50 0,50 0,50 0,50

FF 10836706

TOTAL 100,00 100,00 100,00 100,00 quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Valeurs nutritionnelles pour 100 g

Energie (kcal) 181 ,75 174,63 174,47 168,31

Matière grasse (g) 10,03 10,15 10,15 10,15

Glucides (g) 20,33 20,30 20,33 20,30

Dont sucres (g) 19,59 17,54 17,55 17,54

Protéines (g) 2,53 2,50 2,50 2,50

Dont protéines de lait (q) 2,53 1 ,25 1 ,25 1 ,25

Dont protéines

0,00 1 ,25 1 ,25 1 ,25 végétales (g) Fibres (g) 0,14 0,14 0,14 0,14

Matière sèche (%) 33,98 33,85 33,86 33,87

Lactose (%) 4,09 4,06 4,06 4,06

ESDL (%) 3,84 3,95 3,95 3,95

Taux de substitution de

0 50 50 50 la protéine de lait (%)

Le procédé de fabrication est le suivant :

o Ajouter le lait écrémé dans le récipient (40/45°C),

o Ajouter les ingrédients en poudre dans le récipient et mélanger pendant 15 minutes à 80 Hz dans le batch cooker CHOCOTEC,

o Mélanger les stabilisants et le sucre ensemble, puis incorporer le mélange dans le récipient,

o Mélanger pendant 20 minutes à 80 Hz,

o Incorporer la crème et le sirop de glucose

o Mélanger pendant 1 5 minutes à 80 Hz

o Pasteuriser à 80° C pendant 3 minutes,

o Refroidir à 70° C - La moitié du mélange obtenu est homogénéisé directement ; l'autre moitié est refroidie à 50 °C. Quand le premèr lot est homogénéisé, le deuxième lot est réchauffé à 70 °C et ensuite homogénéisé,

o Homogénéiser à 200 bar,

o Refroidir dans le récipient de maturation à 4°C etajouter l'arôme

o Laisser mâturer durant 23 h

o Fouetter pour obtenir un foisonnement de 95 - 100 % et congeler à -30° C pendant 1 heure

Conserver la crème glacée à -20°C.

Analyses

Caractérisation des mélanges durant le procédé de fabrication

On note que l'aptitude au foisonnement des préparations réalisées avec les isolats de protéines de pois conforme à l'invention est identique à celle du témoin et n'est pas significativement différent de celle réalisée avec la protéine de pois. Mesures de la viscosité

Viscosité (Pa.s)

Maturation 10 s-1 100 s-

Avant 0,24 0,098

Témoin

Après 0,23 0,095

Avant 0,36 0,18

Recette n ° 1

Après 0,35 0,2

Avant 0,18 0,10

Recette n °2

Après 0,18 0,10

Avant 0,2 0,1 1

Recette n °3

Après 0,16 0,098

La recette avec la protéine de pois présente les plus fortes viscosités. Les recettes avec isolât de protéines de pois conformes à l'invention sont équivalentes à la recette témoin.

Analyse des tailles de particules

L'analyse de la taille des particules a été réalisée à différentes étapes de préparation de la crème glacée dans le but d'évaluer la capacité émulsifiante et la stabilité de l'émulsion :

o Distribution des tailles des globules gras après l'étape d'homogénéisation, o Distribution des tailles de globules gras après l'étape de maturation,

o Distribution des tailles des globules gras de la crème glacée (équivalent à la distribution des tailles des globules gras après l'étape de fouettage). Ces analyses ont été également faites avec addition de SDS à 0,1 % afin de déterminer si l'émulsion a été créée par agrégation / floculation ou par coalescence.

Les résultats sont présentés dans les Figures 8 à 11.

Pour chaque recette, la distribution des tailles de particules a tendance à diminuer ou à devenir plus monomodale après maturation.

Cette évolution est très perceptible pour la recette avec la protéine de pois NUTRALYS ® S85F. Cela montre que la protéine de pois NUTRALYS® S85F est le plus lent émulsifiant pour migrer à l'interface des globules gras.

Au contraire, la recette n °3 (avec l'isolât de proëines de pois conforme à l'invention n °2) est aussi bon émulsifiant que la recette à 100 % protéines de lait.

L'isolât de protéines de pois conforme à l'invention n ° 1 est moins émulsifiant que l'isolât de protéines de pois conforme à l'invention n °2 apiès homogénéisation mais a tendance à être aussi bon après maturation.

Exemple 10 : Substitution totale des protéines de lait par les isolais de protéines de pois dans les crèmes glacées/desserts glacés

3 recettes sont élaborées pour ces crèmes glacées végétaliennes :

o Témoin : 100 % protéines de pois NUTRALYS® S85F,

o Recette 1 : 100 % d'isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 , o Recette 2 : 100 % d'isolats de protéines de pois selon l'invention n °2.

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Les valeurs nutritionnelles (pour 1 00 g sont les suivantes) :

Le procédé de fabrication est le suivant :

o Chauffer l'eau à 45°C,

o Mélanger les ingrédients,

o Mélanger les stabilisants avec le saccharose,

o Ajouter l'eau et mélanger pendant 20 minutes,

o Introduire la matière grasse (huile de coco fondue) et mélanger,

o Pasteuriser à 80° C pendant 3 minutes

o Refroidir à 70° C,

o Homogénéiser le mélange à 200 bars (en 2 étages) - 30 % dans le 2 ^ème étage, o Ajouter l'arôme,

o Laisser mâturer sous agitation à 4°C pendant 20 mhutes,

o Fouetter entre 90 - 100 % et refroidir à -30 °C perdant 1 heure,

o Stocker a - 18° C.

Analyses

Mesure du pouvoir foisonnant (desserts glacés)

o Pesée d'une coupelle de volume V donné, vide

Masse mesurée = m _c où m _c est la masse de la coupelle vide

o Pesée d'une coupelle de volume V donné, remplie à ras bord par le mélange avant foisonnement

Masse mesurée= mc + rrimix où rrimix est la masse de mélange correspondant au volume V

o Pesée d'une coupelle de volume V donné, remplie à ras bord par le mélange après foisonnement (sortie de congélateur)

Masse mesurée = mc + m _g iace où m _g iace est la masse de glace (mélange foisonné en sortie du congélateur) correspondant au volume V.

La mesure de foisonnement est alors donnée par la formule :

(iTImix ^— ITlglace)

Foisonnement = x 100

m glace

Caractérisation du procédé de préparation

Mesure de viscosité

o Mesures réalisées à 4°C

o Rhéomètre : Physica MCR 301 Anton Paar

o Géométrie : cylindre concentrique CC27

o Consigne : 0 à 200 s ^-1 en 5 minutes Avant maturation Viscosité (mPa.s)

Référence 10 s- ¹ 100 S ^"1 200 S ^"1

Témoin 131 60 50

Recette 1 23 51 40

Recette 2 22 50 39

Après maturation Viscosité (mPa.s)

Référence 10 s- ¹ 100 S ^"1 200 S ^"1

Témoin 120 65 56

Recette 1 76 50 48

Recette 2 74 50 44

On note ainsi une plus faible viscosité lorsque la recette comporte des isolats de protéines de pois selon l'invention.

Mesure de la texture

o Température de mesure : sortie du congélateur,

o Rhéomètre : Machine INSTRON 9506

o Géométrie : conique

o Consigne : déformation imposée jusqu'à 20 minutes,

On constate que la dureté est globalement meilleure pour les recettes avec isolats de protéines de pois selon l'invention. Plus particulièrement, l'isolât de protéines de pois selon l'invention n °2 présente une dureté remarquablementélevé, sans doute en relation avec son pouvoir foisonnant plus élevé (1 01 %).

Mesure de la taille de l'émulsion du mélange et du dessert glacé

Protocole :

o Analyseur laser de taille de particules (granulomètre) MALVERN 3000 en voie liquide (le solvant est de l'eau déminéralisée) o Modèle optique : 1 ,46+0.001 i avec une vitesse d'agitation de 1900 tours/minutes. Les mélanges avant et après maturation sont caractérisés avec et sans SDS :

o Sans SDS : l'échantillon est introduit directement dans le bêcher du granulomètre ne contenant que de l'eau,

o Avec SDS : 0,1 %, soit 0,6 g de SDS est introduit directement dans le bêcher du granulomètre. Après solubilisation du SDS, l'échantillon est ajouté pour analyse. La crème glacée finale est introduite non décongelée dans le bol du granulomètre. Après fusion et dispersion de la glace, la mesure est effectuée.

La taille de l'émulsion, avant et après maturation, avec et sans SDS, est donnée dans le tableau suivant.

Sans SDS, l'émulsion du mélange contenant de la protéine de pois (témoin) présente une taille de particules plus petite que les émulsions préparées à partir des isolats de protéines de pois selon l'invention.

Avec SDS, les agglomérats de matières grasses sont dispersés, and le Dmode est ainsi plus proche pour les 3 essais. A noter que la formule avec l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 présente un pic de granulométrie avec de plus larges particules.

On ne constate aucun changement majeur après maturation. Les formules avec les isolats de protéines de pois selon l'invention sont plus polydisperses par rapport à celle avec les protéines de pois.

La taille d'émulsion de la crème glacée, en tant que telle, est mesurée sans présence de

SDS.

La taille du pic majeur (Dmode) est similaire pour les trois crèmes glacées. Cependant, les formules avec les isolats de protéines de pois selon l'invention sont plus polydisperses, spécialement avec l'isolât n °2.

Une étude comparative a été réalisée avec des glaces commerciales, qui montrent que ces dernières ont encore plus de particules grossières que les recettes témoins, 1 et 2, en relation avec leur contenu élevée en globules de matières grasses.

Mesure du comportement à la fonte

Protocole :

De manière empirique, des échantillons de dessert glacés d'un volume donné sont posés sur une grille au-dessus d'un bêcher. On mesure ensuite :

o Le temps au bout duquel la première goutte tombe dans le bêcher,

o Le % de glace fondue au cours du temps, pendant 3 heures.

La Figure 12 illustre bien le fait que la fonte est plus faible pour les crèmes glacées préparées à partir des isolats de protéines de pois selon l'invention.

Analyse sensorielle

Le panel est constitué de 1 5 personnes.

Le panel est, comme dans les exemples précédents, qualifié à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs Répétabilité, capacité à repérer un doublon.

Comparés aux glaces préparées avec les protéines de pois, celles de l'invention sont moins amères, ont moins le gout de pois et sont moins colorées.

Les desserts glacés avec les isolats de protéines de pois selon l'invention n ° 1 présentent un peu de cristaux de glace et un goût vanille plus prononcé, sont plus sucrés, et plus gras que les autres produits.

Les desserts glacés avec les isolats de protéines de pois selon l'invention n °2 sont sucrés et gras, plus crémeux. Ils présentent un goût « thé vert » un peu plus prononcé. Conclusion

Durant le procédé de fabrication des desserts glacés, les isolats de protéines de pois selon l'invention conduisent à une plus faible viscosité en comparaison avec les protéines de pois.

La texture avec l'isolât n ° 1 est plus dure, mais nést pas perçue par les panélistes.

Les deux isolats conduisent surtout à abaisser la fonte des desserts glacés correspondant. En terme de goût, la meilleure perception est pour les desserts glacés préparés avec l'isolât n ° 1 , de saveur sucrée et d'arôme prononcé, de moincres amertume et saveur « pois ».

Exemple 11 : comparaison des propriétés sensorielles de crèmes glacées

Le panel est constitué de 20 personnes.

Le panel est qualifié à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Il a reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

En effet, il a reçu une formation pour la bonne utilisation des descripteurs sensoriels de goût et de texture, tels que, par exemple :

Descripteur Définition Mode opératoire Référence

F laveurs

Gout Pois Goût typique de pois. Goûtez le produit. Pois

Saveur élémentaire provoquée Sucre en

Sucré Goûtez le produit.

par une solution de saccharose. poudre

Texture en bouche

Evaluation de la force

nécessaire pour obtenir une Comprimez une unité de Confiserie

Dur déformation ou une rupture du produit entre les dents type sucre produit. incisives. cuit

(pas dur / très dur)

Explorez visuellement et

Evaluation de la quantité de tactilement en déplaçant le bulles d'air emprisonnées et doigt parallèlement à l'état de Mousse au

Aéré

visibles, surface et exercez des chocolat (pas aéré / très aéré) pressions différentes de haut

en bas. Evaluation de propriété de

texture de la surface qualifiant la Dégustez une unité de produit

Aqueux perception de la quantité d'eau et évaluez la quantité d'eau Pastèque libérée par un produit, perçue en bouche.

(pas aqueux / très aqueux)

Evaluation de la présence de

Frottez la langue contre le

Cristaux cristaux d'eau Glace palais et vérifiez si le produit

d'eau (pas de cristaux / beaucoup de recristallisée contient des cristaux

cristaux)

Après déglutition d'une unité

de produit, évaluez la

Evaluation de la pellicule grasse présence ou non d'une

Gras après déglutition, pellicule grasse au niveau du Huile d'olive

(pas gras / très gras) palais ou des dents en

balayant leur surface avec la

langue.

La méthode leur permet également de s'exprimer sur d'autres descripteurs qui n'auraient pas été anticipés dans cette liste. Produits

Les crèmes glacées sont les recettes n ° 1 , n °2 et n3 celles de l'exemple 9.

Conditions de dégustation

- Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

- Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit)

- En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

- Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

- Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur sensoriel : Croustillant Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les données-rangs des produits. Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les analyses ont été réalisées à l'aide du logiciel R (en vente libre) :

R version 2.14.1 (201 1 -12-22)

Copyright (C) 201 1 The R Foundation for Statistical Computing

ISBN 3-900051 -07-0

20 Platform : Î386-pc-mingw32/i386 (32-bit)

Le logiciel est un environnement de travail qui nécessite le chargement de modules contenant les fonctions de calcul comme le package FactoMineR version 1 .19

Résultats

Les résultats sont présentés dans la Figure 13.

Les 3 échantillons sont tous évalués en texture onctueux/crémeux, froid et fondant et en goût pois, vanille et amer.

Néanmoins quelques descripteurs permettent de les différencier :

• La crème glacée au NUTRALYS® S85F apparaît plus dure avec un goût de pois et carton.

• Celle avec isolât de protéines de pois conforme à l'invention n ° 1 est plus grasse et aérée avec une note noix.

• Celle avec isolât de protéines de pois conforme à l'invention n ° 2 est jugée plus sucrée.

Exemple 12 : Utilisation des isolats de protéines de pois dans des matrices de « non dairy coffee creamers/whiteners » a. Substitution de 100 % des caséinates de sodium

L'objectif est ici de substituer 100 % des caséinates de sodium et d'obtenir un produit stable dans le café.

La mesure de la viscosité des émulsions après pasteurisation et celle de la stabilité dans le café permettent d'illustrer l'amélioration des propriétés fonctionnelles des isolats de protéines de pois par rapport au NUTRALYS® dans leurs capacités à substituer les caséinates de sodium . Les recettes élaborées sont les suivantes :

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Le procédé de fabrication est le suivant :

o Fondre la matière grasse à 80° sous agitation constante,

o Ajouter le Dimodan H P dans la matière grasse fondue pour solubiliser les monoglycérides,

o Chauffer 90 % de l'eau à 50°C et ajouter les proténes. Hydrater sous agitation constante pendant 30 minutes,

o Solubiliser les sels de phosphates dans l'eau résiduelle à 40°C,

o Après 30 minutes d'hydratation, ajouter le sirop de glucose et les sels de phosphates dans le mélange principal,

o Pré-émulsifier le mélange de matières grasses/Dimodan HP dans le mélange principal pendant 5 minutes à 10.000 rpm,

o Placer le produit à 75° C dans un homogénéisateur àhaute pression Niro Panda 2K

Soavi (GEA) à une pression de 1 60 bar au 1 ^er étage, 30 bar dans le deuxième étage, o Pasteuriser à 80°C durant quelques secondes puis placer le produit dans l'eau froide pour stopper le traitement thermique Les analyses réalisées sur la formulation sont les suivantes : 7. Analyse de viscosité

Les mesures de viscosité des émulsions concentrées après l'étape de traitement thermique sont réalisées à 65°C, température habituelle d'atomisation.

Appareillage :

o Rhéomètre Physica MCR 301 Anton Paar

o Géométrie : CC27

o Méthode 0 à 1000 S ^"1 en 660 s

Les résultats obtenus sur les différentes recettes sont les suivants :

Les viscosités des émulsions des recettes 2 et 3 après pasteurisation sont plus proches du témoin lait que celle de la recette 4 préparée avec de la protéine de pois, ce qui permet de sécher une émulsion de faible viscosité à haute matière sèche comme ici à 60 % en poids.

2. Solubilité en fonction du pH

La Figure 14 illustre l'évolution de la solubilité des isolats de protéines de pois selon l'invention par rapport au caséinate, en fonction du pH , et traduit leur excellent comportement. Evaluation de la stabilité dans le café

Reconstitution du café :

o Peser 2 g de café soluble

o chauffer de l'eau de consommation (charge en calcium de 136mg et en magnésium de 60mg) à 80°C et ajouter 135 g de ladite eau au 2g,

o ajouter 12,7 g d'émulsion concentrée dans le café.

La floculation dans le café semble être moins importante avec les recettes contenant les isolats de protéines de pois selon l'invention, par rapport à celle obtenue avec la protéine de pois. Cependant, ce peut être corrélé avec l'amélioration de la solubilité desdits isolats par rapport à la protéine de pois. b. Substitution de 50 % des caséinates de sodium

L'objectif est ici de substituer 50 % des caséinates de sodium et d'obtenir un produit stable dans le café.

La mesure de la viscosité des émulsions après pasteurisation et celle de la stabilité dans le café permettent d'illustrer l'amélioration des propriétés fonctionnelles des isolats de protéines de pois par rapport au NUTRALYS® dans leurs capacités à substituer les caséinates de sodium .

Les recettes élaborées sont les suivantes :

Les quantités étant données en pourcentage en poids. Les valeurs nutritionnelles pour 100 g sont les suivantes.

Le procédé de fabrication est le suivant :

o Fondre la matière grasse à 80° sous agitation constante,

o Solubiliser les mono et diglycérides dans l'huile liquide,

o Solubiliser les protéines en poudre dans de l'eau à 50° C pendant 30 minutes, o Ajouter le sirop de glucose et les sels de phosphates déjà solubilisé dans une part d'eau

o Pré-émulsifier les matières grasses fondues dans la solution aqueuse par agitation à 10.000 rpm

o Pasteuriser à 80° C durant quelques secondes

o Placer le produit à 75° C dans un homogénéisateur àhaute pression Niro Panda 2K Soavi (GEA) à une pression de 1 60 bar au 1 ^er étage, 30 bar dans le deuxième étage, o Diluer le mélange à 50 % de Matière Sèche pour atomiser à 180° C (Tiniet) et 90° C (Toutiet) dans dispositif présentant une capacité d'évaporation de 10 à 12 l/h.

Les analyses réalisées sur la formulation sont les suivantes :

1 ) pH de l'émulsion

2) Capacité d'émulsion

La mesure de la taille des globules lipidiques (par analyseur laser de taille de particules) permet de déterminer la capacité des isolats de protéines de pois selon l'invention à former les globules lipidiques de taille la plus petite possible.

Ces résultats montrent bien que le mélange 50/50 présente une distribution granulométrique semblable au témoin 100 % caséinate. 3) Viscosité des émulsions à 60% de matière sèche à 65 °C (avant atomisation) Appareillage :

o Rhéomètre Physica MCR 301 Anton Paar

o Géométrie : CC27

5 o Méthode 0 à 1000 S ^"1 en 660 s

La plus faible viscosité du mélange 50/50 permet d'atomiser à une matière sèche supérieure à celle requise classiquement pour les caséinates.

4) Stabilisation du « non dairy coffee creamer » en poudre dans le café Reconstitution du café :

a. Peser 2 g de café soluble

b. ajouter 8 g d'émulsion et 1 50 ml d'eau de consommation (charge en calcium de 136 mg et en magnésium de 60 mg) à 80°C

La stabilité de l'émulsion dans le café est déterminée par la mesure de la variation de couleur de la préparation - mesure de coloration selon les codifications L (balance des blancs), a (balance des jaunes) et b (balance des verts), la couleur blanche dans le café étant un des critères clefs recherchés par l'industriel et le consommateur.

L'écart de 2 points pour la mesure du paramètre L des cafés préparés à partir du mélange 50/50 (L= +96) en regard des cafés témoins préparés à partir de caséinates (L= +98) traduit une excellente stabilité du mélange avec les isolats de protéines de pois conformes à l'invention.

Exemple 13. Utilisation des isolats de protéines de pois pour la préparation de5 yaourts brassés

L'objectif est ici de substituer 30 % des protéines de lait.

Les recettes élaborées sont les suivantes :

Recette avec Recette avec isolât Recette avec protéines de de protéines de protéines de pois

Recette pois pois conformes à

Contrôle l'invention n ° 1 Recette 3

Recette 1

En % Recette 2

Lait écrémé reconsititué 88,80 74,50 74,50 74,50

Crème (Les fayes 35% MG) 2,75 2,42 2,42 2,42

Sucre 6,00 6,00 6,00 6,00

Amidon modifié CLEARAM®

1 ,50 3,20 3,20 3,20

CR 4015 de Roquette Frères

NUTRALYS® S85F 1 ,40

NUTRALYS® F85F 1 ,40 Isolât protéines de pois

1 ,40

selon l'invention n ° 1

PROM ILK 852 A Ingredia 0,77

Pectine CM 020

0,18 0,16 0,16 0,16

HERBSTREITH & FOX

Eau 12,32 12,32 12,32

Total 100,00 100,00 100,00 100

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Le procédé de fabrication est quant à lui le suivant :

o chauffer de l'eau à 60°C,

o ajouter les protéines et laisser hydrater pendant 1 heure,

o ajouter la crème sous POLYTRON durant 2 minutes,

o ajouter le mélange sucre/amidon pendant 10 à 15 minutes,

o homogénéiser à haute pression (2 étages : 1 ^er étage 180 bars - 2 ^ème étage 200 bars) à 75-80° C,

o pasteuriser avec un échangeur tubulaire Power Point International à 95° C, 6 0 minutes - 20 l/h,

o ajouter les ferments (YoFlex® YF-L812 - 50 U/250L) ,

o acidifier à 42° C jusqu'à pH 4,6 (durée d'acidification de 5 - 6 heures),

o agiter à 3600 rpm rt à 42°C,

o lisser à 37/38°C à 3600 rpm en Spindle 2G

5 o mettre en pot et stocker à 4°C.

Mesure de la viscosité

Les valeurs sont données à ± 5 %. J+3

Surface

Viscosité (Pa.s) d'hystérésis

(Pa) référence 5s- ¹ 10 s- ¹ 40 S ^"1 100 s- ¹ 350 S ^"1

Recette 2 4,3 2,6 1 ,03 0,53 0,2 4130

Recette 1 3,9 2,38 0,98 0,52 0,21 3335

Recette 3 3,76 2,3 0,97 0,53 0,22 2610

Recette Contrôle 3,12 2,1 0,79 0,4 0,15 2420

La Recette 3 a le comportement le plus proche de la Recette contrôle avec cependant une inversion de la courbe de viscosité par rapport à l'évolution de la viscosité de la Recette contrôle à j+7 et J+14.

La recette 3 reprend en effet en viscosité à J+14, et est la plus résistante au cisaillement à

J+14. La recette 1 est plus visqueuse et résistante au cisaillement que la Recette 3 à J+7, mais cela s'inverse à partir de J+ 14.

La Recette 2, avec l'isolât de protéines de pois conforme à l'invention, est la plus visqueuse des 4 recettes, et est plus visqueuse que la recette Contrôle. Sa viscosité diminue au cours du temps.

Ces résultats démontrent que par son comportement, l'isolât de protéines de pois conforme à l'invention permettrait de diminuer la quantité d'amidon dans cette Recette s'il est souhaité de la rapprocher de la viscosité de la Recette Contrôle.

Même chose mais dans une moindre mesure pour les Recettes 1 et 3.

Exemple 14 : comparaison des propriétés sensorielles des yaourts brassés

Pour l'évaluation du goût, le panel est constitué de 1 1 personnes. Pour celui de la texture, le panel est constitué de 12 personnes

Les panels sont qualifiés à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Ils ont reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

En effet, ils ont reçu une formation pour la bonne utilisation des descripteurs sensoriels de de goût et de texture, tels que, par exemple :

Descripteurs de goût :

arôme / odeur

saveur / sensation bouche lacté végétal arôme off flaveur

lait AG pois / végétal vanille papier / carton acide lactosérum céréales caramel lessive amer lait fermenté végétal chimique salé lait reconstitué astringent /

bébé noix fraîche colle asséchant yaourt pomme de terre métallique sucré beurre piquant Descripteurs de texture

Produits

Les 3 produits de l'exemple 1 1 testés (recette contrôle, recette 1 et recette 2) ont été évalués 3 jours après leur production et ont été présentés à une température d'environ 1 0°C (produits stockés au réfrigérateur, évalués à sa sortie).

Conditions de dégustation

- Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

- Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit) - En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

- Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

- Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

Descripteur sensoriel : Croustillant

Deux listes de descripteurs, relatives au goût ou à la texture, ont été proposées aux panélistes à titre indicatif, celles-ci vous sont fournies en annexe de ce rapport.

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les données-rangs des produits. Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les traitements statistiques ont été effectués avec le logiciel R version 2.14.1 (201 1 -12-

22). Résultats :

Les résultats sont présentés dans les Figures 15 (goût) et 16 (texture) :

• Le yaourt brassé au N UTRALYS® S85F a une texture filante et granuleuse en bouche accompagnée d'un goût de pois, carton, noix fraîche ;

• Celui avec la protéine de lait apparaît plus gras et crémeux, épais avec un aspect granuleux, son goût est plus typique du yaourt, sucré et lacté ;

• Celui avec isolât de protéines de pois conforme à l'invention n ° 1 se situe entre le contrôle et les essais avec NUTRALYS® S85F, se démarque par un goût céréale et lait fermenté ainsi qu'une texture particulièrement nappante en bouche. Exemple 15. Utilisation des isolais de protéines de pois pour la préparation de boissons laitières aromatisées à la fraise

L'objectif est ici de substituer 50 % des protéines de lait.

Les recettes élaborées sont les suivantes :

Le procédé de fabrication est quant à lui le suivant :

o Chauffer ie lait et l'eau à 50 ° C

o Ajouter les protéines dans le mélange,

o Hydrater pendant 1 heure à 50 ° C sous agitation,

o Préchauffer la matière grasse à 50 ° C après 45 minites,

o Ajouter le sucre et l'amidon à la préparation principale,

o Ajouter l'agent colorant, l'arôme et la purée de fraises à la préparation principale, o Mélanger pendant 5 m inutes,

o Pré-émulsifier la matière grasse ans la préparation principale pendant 5 minutes à 1 0000 rpm ,

o Homogénéiser le produit en ligne à 65 ° C - 1 90 bais (2 étages)

o Stériliser le produit à 30 l/h avec un temps de séjour de 7 secondes à 138 ° C sur un échangeur tubulaire

o Refroidir à 40 ° C et stocker à +4° C. Exemple 16 : comparaison des propriétés sensorielles des boissons laitières aromatisées à la fraise

Pour l'évaluation du goût, le panel est constitué de 12 personnes.

Les panels sont qualifiés à la dégustation de produits formulés avec la protéine de pois. Ils ont reçu une formation et un entraînement afin de vérifier ses performances en termes de :

Capacité à discriminer les produits

Consensus, utilisation correcte des descripteurs

Répétabilité, capacité à repérer un doublon

En effet, ils ont reçu une formation pour la bonne utilisation des descripteurs sensoriels de de goût et de texture, tels que, par exemple :

Liste des descripteurs :

Descripteur ; Définition Mode opératoire Référence

Aspect

! absence de particules Matrice liquide :

! hétérogènes à la surface du Explorez visuellement le eau pure

Lisse ■_

produit produit. Matrice poudre :

! (pas lisse / très lisse) sucre glace

! Aspect brillant ou lustré

„ .,, , ! résultant de la tendance d'une Explorez visuellement le

Brillant , , Jaune d'œuf cru

! surface a réfléchir la lumière. produit.

! (pas brillant / très brillant)

Texture en bouche

Frottez la langue contre le

1 Evaluation de la facilité du

palais et vérifiez si le Lait concentré Epais ! produit à s'écouler en bouche.

produit s'écoule sucré, miel ! (pas épais / très épais)

facilement.

! Evaluation de propriété de

Dégustez une unité de

! texture de la surface qualifiant

produit et évaluez la

Aqueux j la perception de la quantité Pastèque

quantité d'eau perçue en

1 d'eau libérée par un produit,

bouche.

j (pas aqueux / très aqueux)

Mâchez une unité de

! Evaluation de la texture douce

produit et vérifiez s'il Crème fraîche, Crémeux j et fondante du produit.

provoque un contact mou crème épaisse

! (pas crémeux / très crémeux)

et s'il tapisse la bouche.

Mâchez une unité de

! Evaluation de la granulosité et

produit jusqu'à ce qu'il soit

„ , , ! du nombre de particules d'un

Sableux . prêt à avaler et évaluez la Certaines poires

! produit.

perception de petits grains

j (pas sableux / très sableux)

dans la bouche. Odeur et goût

Conditions de dégustation

- Au laboratoire d'analyse sensorielle : box individuels de dégustation, murs blancs, ambiance calme (pour faciliter la concentration)

- Lumière blanche (pour avoir exactement la même vision du produit)

- En fin de matinée ou d'après-midi (pour être au maximum des capacités sensorielles)

- Produits anonymés par un code à 3 chiffres (pour éviter que le code n'influence l'appréciation des produits)

- Produits présentés dans un ordre aléatoire (pour éviter les effets d'ordre et de rémanence)

Exercice

La méthode employée pour comparer les produits a été le Profil Flash (JM Sieffermann,

2000).

Les produits sont tous présentés simultanément. Il s'agit de comparer les produits entre eux en réalisant une succession de classements : les panélistes choisissent les descripteurs qui leur semblent les plus pertinents pour discriminer les produits entre eux et classent les produits selon ces descripteurs, il est possible que plusieurs produits soient regroupés sur un même rang.

Exemple :

De

Deux listes de descripteurs, relatives au goût ou à la texture, ont été proposées aux panélistes à titre indicatif, celles-ci vous sont fournies en annexe de ce rapport.

Traitement des données

La méthode de traitement statistique adaptée à ce type de données est l'Analyse Factorielle Multiple (J. Pagès, 1994) sur les données-rangs des produits. Pour que les résultats soient plus clairs, l'AFM a été réalisée plusieurs fois; en global, et par critère (aspect, odeur, goût, texture). Les graphiques présentés synthétisent l'ensemble des résultats fournis par cette méthode.

Les traitements statistiques ont été effectués avec le logiciel R version 2.14.1 (201 1 -12-

22).

Résultats :

Les résultats sont présentés dans les Figures 17 (goût) et 18 (aspect et texture en bouche).

En termes de goût, les panélistes ont bien identifié le contrôle en le qualifiant de plus sucré, lacté (odeur et gout), et fraise (odeur et gout) que les essais formulés avec la protéine de pois.

L'essai avec l'isolât de protéines de pois selon l'invention n ° 1 est qualifié en odeur et goût de végétal-céréales en gardant une odeur lactée, tandis que l'essai au NUTRALYS reste en odeur et gout végétal-pois.

En terme de texture, tous les produits ont été jugés aqueux. Leur caractérisation se fait essentiellement sur la dimension 1 , on distingue alors deux familles :

- le témoin lait qui est jugé plus nappant en bouche suivi de l'essai avec le NUTRALYS®. l'isolât de protéines de pois selon l'invention n °1 est jugé plus gras.

Exemple 17 : enrichissement en protéines de biscuits (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif)

Les formulations présentent la composition suivante l Isolât de Isolât de NUTRALYS® \

NUTRALYS® iprotéines de pois: protéines de

Témoin S85F

Pea-BF ! selon l'invention ; pois selon Roquette Frères j

n ° 1 l'invention n °2

Eau 6 7,4 6,7 6,5 6,5

Sodium bicarbonate 0,3 0,3 0,3 0.3 0,3

! Ammonium bicarbonate 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Saccharose 18 17.7 17,7 17,9 17,9

Sirop de glucose 4779 2,5 2.5 2,5 2.5 2.5 Roquette Frères

: Matière grasse Biscuitine 13 12,8 12,8 12,9 12,9

500

Lécithine de soja 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Farine de blé 57,8 37.2 37,2 37.6 37,6

Protéines testées 0 19.7 19,7 19,9 19,9

Poudre de lait écrémé 1 ,5 1 ,5 1 ,5 1 ,5 1 ,5

Sel 0,2 0.2 0,2 0.2 0,2

Sodium pyrophosphate 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Poudre de vanille 0, 1 0,1 0,1 0, 1 0,1

100 100 100 100 100

Les quantités étant indiquées en pourcentage en poids.

Les valeurs nutritionnelles de ces formules sont les suivantes :

Le procédé de fabrication étant le suivant :

Dissoudre les bicarbonates de sodium et d'ammonium dans l'eau. Ajouter le sucre et le sirop de glucose et mélanger dans un mélangeur planétaire de type Hobart équipé de la pâle plate, pendant 1 min vitesse 1 pour bien dissoudre les sucres.

Ajouter la matière grasse et de la lécithine et mélanger pendant 2 min vitesse 2 Ajouter le reste des poudres en une seule fois et mélanger pendant 2 min vitesse 1 puis 1 min vitesse 2.

Laisser reposer la pâte pendant 15 min pour parfaire l'hydratation des poudres et l'homogénéité de la préparation

Déposer la pâte dans la trémie de la rotative à biscuit afin que la pâte soit pressée dans une empreinte entre deux rouleaux afin de former les biscuits.

Récupérer les biscuits sur un tapis convoyeur puis déposer sur une plaque de cuisson

- Cuire dans un four à chaleur tournante type M IWE Econo pendant 9 min à 170° C

(ventilation vitesse 2)

Les analyses réalisées sont les suivantes :

Un des premiers critères importants dans la réalisation de biscuits sur rotative est la « machinabilité » de la pâte.

Une pâte sur-hydratée sera collante et ne se décollera pas des empreintes.

Une pâte trop sèche ne comblera pas bien les empreintes et formera des biscuits avec des anomalies.

Le fait d'ajouter une quantité importante de protéines a un impact sur la texture de la pâte. Le tableau ci-dessous illustre les ajustements d'hydratation nécessaires pour compenser l'incorporation de différentes protéines dans une pâte à biscuits.

En effet, les protéines ayant une affinité plus ou moins importantes pour l'eau vont lier une partie de l'eau de formulation. Celle-ci ne sera donc plus disponible pour « plastifier » la pâte qui sera alors trop sèche pour être formée. L'augmentation de l'hydratation de la pâte sera alors indispensable pour corriger ce défaut. Isolât de

NUTRALYS® Isolât de protéines

NUTRALYS® protéines de pois

Témoin S85F de pois selon

Pea-BF selon l'invention Roquette Frères l'invention n°1

n°2

% d'augmentation

d'eau dans la recette

0 23,2 11 ,7 7,8 7,8 pour que la pâte soit

façonnable

Malheureusement dans un biscuit sec (moins de 3% d'eau dans le produit fini), il n'est pas souhaitable d'ajouter trop d'eau car cela va impacter le temps et les conditions de cuisson.

De plus, le fait d'ajouter plus d'eau aura un effet sur la cinétique de concentration des sucres et de recristallisation de ceux-ci. Or ce dernier point est déterminant pour la texture, notamment la croustillance, du biscuit.

Des protéines solubles mais peu fonctionnelles comme les isolats de protéines de pois de la présente invention permettent ainsi de limiter cette correction à seulement + 8 % d'eau ajoutée contre près de 12% pour une protéine non fonctionnelle et non soluble et plus de 23% pour une protéine soluble et fonctionnelle.

Une rapide analyse sensorielle réalisée sur les biscuits produits a donné les résultats suivants.

Exemple 18 : enrichissement en protéines de muffins au chocolat (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif)

Les formulations présentent la composition suivante :

NUTRALYS®

NUTRALYS®

XF Isolât de protéines de pois S85F

Roquette selon l'invention n °2 Roquette Frères

Frères

Farine de blé complet 120,0 120,0 120,0

SweetPearl® P200 Roquette Frères 210,0 210,0 210,0

Poudre de lait écrémé 10,0 10,0 10,0

Poudre de coco (déshuilée) 15,0 15,0 15,0

NUTRISOFT® 55 de Brenntag 5,0 5,0 5,0

Levure chimique 5 5 5

Protéines testées 60,0 60,0 60,0

NUTRALYS® WF Roquette Frères 60,0 60,0 60,0

WPC 515 de FONTERRA 52,0 52,0 52,0

Sel 2,0 2,0 2,0

Huile végétale 80,0 80,0 80,0 NEOSORB ® 70/70

50,0 50,0 50,0

Roquette Frères

Chocolat noir 20,0 20,0 20,0

Eau 160,0 160,0 160,0

Extrait de vanille 10,0 10,0 10,0

Œuf complet

140,0 140,0 140,0 liquide

1000,0 1000,0 1000,0

Les quantités étant indiquées en poids (en gramme).

Le procédé de fabrication étant le suivant :

Chauffer le mélange B afin de fondre le chocolat

Mélanger les poudres A dans un mélangeur planétaire type Hobart équipé d'une pâle plate pendant 1 min vitesse 1

Ajouter aux poudres le mélange B fondu et mélanger 2 min vitesse 1

Ajouter enfin C et mélanger 2 min Vitesse 1 . Racler le bol et mélanger à nouveau 2 min vitesse 2

Répartir la préparation dans des moules à muffin en papier (70g par moule) Cuire dans un four ventilé type M IWE Econo à 180 °C pendant 15 min (ventilation vitesse 2, Oura fermé).

Les analyses réalisées sont les suivantes :

Viscosité des pâtes des muffins :

La mesure est effectuée en rhéomètre AR2000 de la société TA Instruments, avec le profil suivant :

o Temps : 600 s

o Vitesse : 160 rpm

o Température : 25 °C.

Les résultats sont présentés dans la Figure 19.

Dans les muffins, la viscosité de la préparation aura un impact sur la pousse à la cuisson et donc sur le volume final. Les isolats de protéines de pois selon l'invention montrent une viscosité bien plus faible que les autres protéines de pois.

Exemple 19 : enrichissement en protéines d'un mix instant pour pancakes (destinés à la nutrition spécialisée / minceur ou sportif)

L'objectif est ici de substituer 50 % des protéines laitières. Les formulations présentent la composition suivante :

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Les valeurs nutritionnelles de ces formules sont les suivantes :

Le procédé de fabrication étant le suivant :

• Mélanger toutes les poudres.

• Ajouter l'eau et mélanger au fouet pour obtenir une préparation homogène

• Laisser reposer 2 minutes

• Cuire dans une poêle à pancake ou muiti crêpes pendant environ 2 minutes en retournant les pancakes à mi-cuisson

Les analyses réalisées sont les suivantes :

Impact sur la viscosité des préparations

La mesure est effectuée en rhéomètre RVA, avec le profil suivant

Temps (s) Vitesse (tours/min) Température (°C)

60 20 25

120 50 25

180 100 25 Les résultats sont présentés à la Figure 20.

Les mesures de viscosités RVA des préparations enrichies en protéines montrent que celles avec l'isolât de protéines de pois selon l'invention plus sont moins visqueuses qu'avec les autres protéines de pois.

Cette influence sur la viscosité a un impact sur la pousse des pancakes à la cuisson.

Une rapide analyse sensorielle réalisée sur les pancakes produits a donné les résultats suivants.

Exemple 20 : pain sans gluten enrichi en protéines.

Le pain traditionnel a une teneur en protéine d'environ 10%.

Dans les produits sans gluten en revanche le teneur en protéines est très faible. La complémentation en protéines de ces produits est alors recherchée pour rééquilibrer les valeurs nutritionnelles grâce à des protéines sans gluten comme la protéine de pois.

Les formulations présentent la composition suivante :

Protéines de

MIX B SCHAR pois de

diverses

origines

g % g %

MIX B SCHAR 500,0 49,1 % 430,0 42,2%

Protéine de pois 0,0 0,0% 70,0 6,9%

Levure sèche 8,0 0,8% 8,0 0,8%

Eau 500,0 49,1 % 500,0 49,1 %

Huile de canola 6,0 0,6% 6,0 0,6%

Sel 5,0 0,5% 5,0 0,5%

1019,0 100% 1019,0 100% Les valeurs nutritionnelles de ces formules sont les suivantes

MIX B SCHAR Pain enrichi à la protéine Pain de farine de blé de pois de diverses traditionnel pour 100G origines

calories (KCAL) 236 241 267 Protéines 2,9 9,7 9,6 Matière grasse 1 ,5 2,2 1 ,0 Hydrates de carbone 52,7 45,5 54,8

...dont DPI, 2 2,9 2,6 1,0

Fibres 2,4 2,1 1 ,6

... Fibre insoluble 2,4 2, 1 1,6 ...Fibre so lubie 0,0 0, 1 0,0 kCal/proteins (%) 4,8 16, 1 λ Α,Α

Les analyses réalisées sont les suivantes :

Viscosité des pâtes obtenues à partir de 4 origines de protéines de pois différentes (dont les isolats selon l'invention) :

Le mix SCHAR correspond ici à la référence témoin pour un pain sans gluten. Les résultats montrent que l'enrichissement en protéines de ce mix a un impact sur la viscosité de la préparation et sur le volume final (hauteur maximale) excepté pour les isolats de protéines de pois obtenus selon l'invention qui n'affectent ni la viscosité de la préparation ni le volume final. Exemple 21 : pain enrichi en protéines

Les formulations présentent la composition suivante :

Les quantités sont indiquées en poids (en gramme).

Les valeurs nutritionnelles de ces formules sont les suivantes

Les analyses réalisées sont les suivantes :

NUTRALYS PEA-BF Isolât de protéine de pois n °.

Volume (cm ) 1505 1745

Poids du pain après cuisson (g) 441 ,3 435,0

Perte en eau pendant la cuisson 1 1 ,7% 13,3%

Poids de 3 disques of chapelure / diamètre 50mm (g) 20,4 13,0

Densité du pain (g/cm ) 0,293 0,249

Densité de la mie (g/cm ) 0,346 0,221 Volume et densité sont en faveur des isolats de protéines de pois selon l'invention, ce qui permet une meilleure pousse donc un pain plus aéré et moelleux, moins dense.

Une rapide analyse sensorielle réalisée sur les pains produits a donné les résultats suivants.

Les crisps hyperprotéinés sont de petites céréales obtenues par cuisson extrusion présentant une teneur en protéines supérieure à 60%.

Ces céréales sont utilisées en inclusion dans des préparations céréalières telles que les barres de céréales ou les clusters.

Ces crisps hyperprotéinées sont parfois la seule solution pour enrichir en protéines ces produits céréaliers car l'incorporation de protéines sous forme poudre impacte trop la texture du produit fini.

La difficulté technique des crisps hyperprotéinés est d'atteindre des teneurs en protéines supérieures à 60%, voire 70%, tout en préservant la croustillance.

La croustillance des produits extrudés est directement liée à l'expansion. Dans les céréales obtenues par cuisson extrusion, l'expansion a lieu en sortie de filière sous la pression de la vapeur d'eau.

Les formulations des crisps hyperprotéinés à 75% de protéines présentent la composition suivante :

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Le mode opératoire est le suivant :

Les crisps ou céréales extrudées ont été obtenues sur un extrudeur à bi-vis corotatives de marque CLEXTRAL Evolum 25 équipée d'un profil de vis cisaillant.

Pour comparer les essais les paramètres sont fixés dans un premier temps afin de n'avoir que la variable « type de protéine ». La conduite d'extrusion est la suivante.

Les analyses effectuées sont les suivantes.

La méthode d'évaluation de la qualité des crisps est basée sur la somme des scores obtenus sur différents critères d'aspect et de texture selon le référentiel détaillé ci-dessous.

Une première note sur l'aspect général des crisps est obtenue en faisant la somme de : une note de 1 à 4 sur la forme des crisps avec la note de 1 pour une forme très irrégulière et 4 pour une forme bien ronde.

Une note de 1 à 2 sur la couleur avec 1 pour une couleur non satisfaisante (trop sombre/ irrégulière) et 2 pour une couleur acceptable.

Une seconde note sur l'évaluation de la texture et du niveau d'expansion en faisant la somme de :

Une note de 1 à 5 sur la dureté avec la note de 1 pour les produits « très durs » / 3 pour les produits « croquants » et 5 pour les produits « croustillants »

Une mesure du niveau d'expansion radiale établie par le rapport du diamètre moyen des crisps par le diamètre de la filière.

Le tableau suivant résumé les résultats obtenus. Les scores les plus élevés représentent les meilleurs résultats.

Les résultats ci-dessus montrent que les meilleurs produits ont été obtenus avec l'isolât de protéines de pois obtenu selon l'invention.

Une protéine peu fonctionnelle et peu soluble comme la protéine de pois NUTRALYS®BF donne des produits moyens en termes de texture mais inacceptables en termes d'aspect. Une protéine soluble et fonctionnelle comme le NUTRALYS® S85F donne des résultats médiocres en aspect et texture. Exemple 23 : Barres nutritionnelles hyperprotéinées pour sportifs

Le défi technique dans les barres nutritionnelles hyperprotéinées est la maitrise de la texture durant la durée de conservation du produit.

En effet les barres nutritionnelles hyperprotéinées ont tendance à durcir dans le temps.

Dans la littérature, on trouve différentes hypothèses pour expliquer ce phénomène, notamment la migration d'eau entre les ingrédients et l'agrégation des protéines.

Le choix de la ou des protéines est donc crucial pour la qualité du produit fini.

Préparation des barres nutritionnelles selon différentes recettes :

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Analyses :

Mesure de la dureté des barres nutritionnelles.

Est réalisé le suivi de la dureté (déterminée sur pénétromètre INSTRON® - force requise pour la pénétration d'un couteau à 40 % de l'épaisseur de la barre à vitesse constante) pendant 1 mois, avec des mesures à J+i , J+7, J+u, J+2i , J+28 sur les différentes recettes présentées ci-avant. Les résultats sont les suivants

L'augmentation du taux d'incorporation de l'isolât de protéines de pois selon l'invention n °2 est inversement proportionnelle à la diminution de la dureté des barres, et ce, quel que soit le temps de conservation.

Un optimum est obtenu pour un ratio de 37,5% d'isolat de protéines de pois selon l'invention n °2 / 12,5 % NUTRALYS® S85XF / 50% WPC Exemple 24. Fromages véqétaliens de type Mozzarella contenant des isolais de protéines de pois.

La recette de fromage végétalien contenant des isolats de protéines de pois selon l'invention n °2 est donnée dans le tableau suivant.

Le témoin est une recette contenant quant à elle des protéines de pois de type NUTRALYS F85F.

Les quantités étant données en pourcentage en poids.

Le procédé de préparation de la recette est le suivant : o ajouter l'eau dans un récipient muni d'une double enveloppe chauffante (type Stephan Bowl - www. stephan-machinery.com/index. php?id=3 ) et chauffer à 50° C, o ajouter tous les ingrédients poudre, à l'exception de l'acide citrique,

o mélanger à 750 rpm pendant 2 minutes à 50°C,

o ajouter les huiles et mélanger 2 minutes à 750 rpm ,

o ajouter l'acide citrique et mélanger 1 minute à 750 rpm,

o chauffer le mélange à 75° C en mélangeant à la main régulièrement de manière à éviter que cela ne brunisse,

o arrêter l'entrée de vapeur dans la double enveloppe

o cuire pendant 5 minutes, en mélangeant régulièrement

o arrêter la cuisson et stocker à +6 °C.

Les analyses de couleur, de texture, de « shredability » et de stabilité au gel/dégel et à la fonte ont été entreprises.

Si la couleur et la texture des deux recettes sont équivalentes, la recette avec l'isolât de protéines de pois n °2 présente un meilleur comportement en « shredability » et une meilleure stabilité à la fonte. La saveur est par ailleurs reconnue meilleure avec la recette n °2.