[0001] 技术领域

本发明涉及一类利用超分子自组装来合成有 机杂化且具有优异抗肿瘤活性的四核铂配合物 及其制备方法， 具体涉及带氨基侧臂的四核铂配合物的制备方 法及其抗肿瘤活性。

背景技术

[0002] 自从人们发现 G-四链体 DNA 是潜在的抗肿瘤靶标以来， 人们在能稳定 G-四链体 DNA的有机小分子方面做了大量的研究工作。 但是到目前为止绝大部分稳定 G-四链体 DNA 的小分子为有机化合物， 仅有一小部分是金属配合物。 由于金属配合物具有很多有机小分子 难以比拟的优点， 如刚柔相济的几何结构变化和丰富的电化学性 质， 同时还具有光学、 磁学 以及催化等多种性能。 在结合模式方面， 金属配合物除了能与 G-四链体 DNA通过Iΐ - Iΐ堆 积作用外， 还能通过与碱基或者磷酸根骨架形成共价键的 方式稳定 G-四链体结构， 进而达 到抗肿瘤的效果。 这均使得人们不断在金属配合物里寻找合适的 抗肿瘤药物。

[0003] 铂类配合物作为抗肿瘤药物的研究开始于二十 世纪六十年代， 在顺铂基础上铂类似 物的设计合成与抗肿瘤活性筛选一直是抗肿瘤 药物研究领域的热点。 结构不同的各种铂类配 合物其抗肿瘤活性也有高低之分， 造成这种活性的差异与配合物结构的亲脂性有 重要关系。 而动力学惰性的 Pt(II)配位构型为正方形， 为我们下一步的自组装提供了一个模板。

[0004] 桥联配体是一系列含氮的杂环， 可以通过改变桥联配体的尺寸进而达到对整个 Pt配 合物尺寸调控的目的。

[0005] 本发明通过超分子自组装有机杂化四核铂配合 物， 使其具有高的抗癌活性以及靶向 性。

发明内容

[0006] 本发明的目的在于针对现有技术的不足， 提供一种具有抗癌活性的有机杂化四核铂 配合物， 其结构通式如式 （I) 所示：

式 （I)

式 （I) 中， 表示同一种桥联配体， 该桥联配体为式 （11)、 式 （111)、 式 一种

（II)

式 （IV) 发明同时提供了该有机杂化四核铂配合物的制 备方法， 是利用超分子自组装将辅基配体与桥 联配体组装成四核结构， 得到所述的有机杂化四核铂配合物。 所述的辅基配体是氯离子被硝 酸根取代的顺铂； 所述的桥联配体是式 （11)、 （ΙΠ)、 (IV) 中的一种。

[0007] 具体来说反应步骤为： 将顺铂进行脱氯， 加入所述桥联配体， 于 50-100 度避光反应 4-7 天获得所述有机杂化四核铂配合物。 顺铂脱氯过程， 是将顺铂溶于适量的水中再加入相 当于顺铂两倍摩尔量的硝酸银， 在氮气保护下避光反应 15 小时， 用低温离心机离心， 弃去 沉淀， 保留清夜。 接着在所述清液中加入所述桥联配体， 顺铂与桥联配体的摩尔比为 1:1-1.1:1 , 反应结束后往反应器中加入无水乙醇得到沉淀 ， 离心去上清， 然后再用无水乙醇 洗涤 2-3次， 离心得到浅色固体物质， 即有机杂化四核铂配合物。

[0008] 这个反应过程關可〕以由以下反应式表示：

反应式 I

¾一 ·?

H ₃ N

0 _¾

3

2 3 本发明所提供的有机杂化四核铂配合物 可用于制备抗肿瘤药物。 更具体的来说是用于制备 治疗顺铂耐药性肿瘤药物。 这些药物还可含有药学上可接受的辅助剂λ。

[0009] 与现有技术相比， 本发明具有以下有益效果：

本发明以来源丰富易得的顺铂为辅基配体与 相应的桥联配体， 通过超分子自组装的方法合成 和表征了一系列具有正方形构型的四核 Pt(II)配合物。 通过对人宫颈癌细胞 （HeLa)、 人肝癌 细胞 （HepG2)、 人乳腺癌细胞 （MCF-7)、 人肺癌细胞 （A549)以及耐顺铂肺癌细胞 (A549/cisR) 的 MTT筛选， 得到的数据表明该类化合物均具有优异的抗肿 瘤活性， 特别是人 肺癌细胞 A549/cisR的 MTT实验数据表明该类化合物的抗肿瘤活性为顺 铂的 10倍。

[0010]

附图说明

[0011] 图 1. 四核配合物 I和顺铂在对耐顺铂肺癌细胞 （A549/cisR) 的 MTT筛选。

[0012]

具体实施方式

[0013] 以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技 术方案。

[0014] 实施例 1

以顺铂为辅助配体且桥联配体为式 （in) 的有机杂化四核铂配合物的合成： (III)

将 6毫升水中， 在氮气保护下于暗处加入 0.6毫摩尔量的硝酸银， 40°C搅拌 15 小时， 反应完毕后， 离心弃去沉淀， 保留清夜； 往上述的清液中加入 0.3 毫摩 尔的桥联配体 (L ¹ ),整个反应在氮气保护下于 60度避光反应 5 天， 反应结束后， 往反应液中 加入大量无水乙醇， 析出浅黄色固体， 离心得浅黄色固体， 产物真空干燥。 产率: 63%。 元素 分析 (％)，

理论值： C ₃₂ H ₄₈ N ₂₄ 0 ₂₄ Pt ₄ · 5H ₂ 0 (2021.24): C, 19.00; H, 2.89; N, 16.61. 实验值： C,19.36; H, 3.08; N, 16.53. ¹⁹⁵ Pt NMR (D ₂ 0, δ /ppm): -878, and K ₂ PtCl ₄ 被用作内标物（ δ =0).

所合成的有机杂化四核铂配合物结构式如下 所示：

实施例 2

实施例 1所制的化合物的抗肿瘤活性试验和结果。

[0015] 细胞系以及培养条件： HepG2 (人肝癌细胞株)、 Hela (人宫颈癌细胞株)、 MCF-7 (人乳 腺癌细胞株)、 A549 (人肺癌细胞)、 A549/cisR (耐顺铂肺癌细胞)由中山大学实验与动物中心 提供。 细胞用含 10%胎牛血清的 DMEM 培养基培养， 其中含有每毫升 100 单位青霉素和 100 微克链霉素， 细胞接种于直径为 10 厘米 的培养皿后， 37度、 5% C0 ₂ 环境中培养， 细 胞长满时用胰蛋白酶消化法进行传代。

[0016] 细胞毒性测试： 细胞毒性采用 MTT法测定 。 将细胞用 0.25%胰蛋白酶消化成单细胞 悬液， 采用血球计算版进行活细胞数， 调整活细胞浓度为 5 X 10 ⁴ 每毫升接种于 96孔培养 板， 每孔 160 微升， 培养 24小时之后， 再分别加入不同浓度的四核铂配合物 （浓度分别如 图 1所示）， 置 37度， 在含 5% C0 ₂ 的培养箱中孵育 48小时， 于结束前 4小时加入 MTT 20 微升每孔， 4小时后弃上清液， 加入 DMSO 100微升每孔， 振荡 10分钟左右， 置酶标仪测 定 OD值， 波长设置为 570纳米和 607纳米双波长。 按下列公式计算存活率， 同时作图并求 得半数杀伤浓度 (/C ₅₀ )， 评价药物的细胞毒性。

[0017] 存活率％=加药孔平均 OD值 /对照孔平均 OD值 X 100%

a/C _5Q 值： 与空白样对照， 当细胞的存活率只有 50%时的配合物浓度。 总共做了 3次平行试验 所取得的平均值。

[0018] 由结果可知， 所合成的有机杂化四核铂配合物 （I) 表现出很优异的抗肿瘤活性， IC ₅₀ 值比顺铂都要低。 值得注意的是， 该配合物对耐顺铂的人肺癌细胞的抗肿瘤活性 比顺铂提高 了 10倍。