NITRATES ORGANIQUES, LEURS PROCEDES DE PREPARATION ET LEUR UTILISATION DANS LE TRAITEMENT DE MALADIES CARDIO- VASCULAIRES.

La présente invention est relative à de nou- veaux nitrates organiques, à leurs procédés de prépara¬ tion ainsi qu'à leur utilisation dans le traitement de maladies vasculaires et notamment dans le traitement de 1'angor.

La crise d'angine de poitrine résulte d'une ischémie myocardique brutale et réversible et apparaît lorsque les besoins en oxygène du myocarde sont supé¬ rieurs aux apports de la circulation coronaire.

Les nitrates organiques, utilisés depuis de nombreuses années dans le traitement de la crise angi- neuse induisent une relaxation de la fibre musculaire lisse vasculaire en augmentant le taux de la guanylate cyclase soluble, par l'intermédiaire de l'oxyde nitrique formé lors de la transformation des nitrates en présence de cystéine. De manière générale, leurs effets hémodyna¬ miques sont les suivants :

- vasodilation veineuse, surtout avec diminu¬ tion du retour veineux, des pressions de remplissage ven- triculaire et du volume du ventricule gauche (VG) , donc diminution de la tension pariétale ventriculaire ;

- vasodilation artérielle : diminution de la post-charge et diminution du temps d'éjection du ventri¬ cule gauche ;

- augmentation réflexe de la fréquence car- diaque et de la contractilité (P. UNGER et al., Rev. Méd.

Brux., 1989, SL, 82-88) .

Le chef de file de ces produits est la trini- trine, d'action très rapide ; d'autres dérivés ont été développés et présentent une action moins rapide et plus prolongée que cette dernière.

On peut citer, à titre d'exemple de nitrates organiques, outre la trinitrine (nitroglycérine), le

tétranitro-érythritol, l'hexanitroinositol, le tétra- nitropentaérythritol, le propatyl-nitrate, le 5-mono¬ nitrate d'isosorbide (IS-5-MN) , le dinitrate d'isosor- bide, le 2-mono-nitrate d'isosorbide (IS-2-MN) , le 2- nitrate d'isomannide, la trinitrotriéthanolamine, et leurs dérivés substitués, notamment les dérivés aminopro- panol des l,4:3,6-dianhydrohexitol nitrates.

Les nitrates organiques agiraient, après péné¬ tration dans la fibre musculaire lisse, en activant la guanylate cyclase, conformément au schéma ci-après :

GUS_Γ_IIZ_ΓE CYCLASE

GTP σ SMP

.REI 1AXaTI

R-CNO- = MTROGLYERINE qui montre que c'est le S-nitrosothiol (R"-SNO) , qui activerait la guanylate cyclase.

La déplétion intracellulaire en groupements thiols serait responsable du phénomène de tachyphylaxie aux nitrates organiques, définie comme la perte d'acti¬ vité d'une substance lors de son administration répétée, avec la nécessité d'augmenter la dose pour obtenir le même effet. La prévention de cette tachyphylaxie peut prendre plusieurs formes : elle peut consister en 1'instauration d'intervalles libres (administrations discontinues, for¬ mulations à action brève) (U. ELKAYAM, Ann. Inter. Med., 1991, 114. 8, 667-677) ;

- l'administration simultanée de dérivés de la cystéine ;

1'administration de dérivés permettant d'éviter cette tachyphylaxie ; la Demande de Brevet EP 362 575 décrit par exemple, des nitrates d'acides gras liés à des acides aminés soufrés, qui empêchent ou atté¬ nuent la tachyphylaxie. Cependant, on ne dispose pas, en ce qui concerne les composés décrits dans cette Demande, de recul suffisant tant du point de vue pharmacologique que du point de vue toxicologique.

La Demanderesse s'est en conséquence donné pour but de fournir de nouveaux nitrates organiques qui présentent une activité nettement améliorée (notamment au niveau du transport et du franchissement des barrières cellulaires), ne provoquent aucune tachyphylaxie et dont la toxicologie et la pharmacologie des produits de départ est bien connue.

La présente invention a pour objet des nitrates organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule I suivante :

R-CO-(A) _n -Y-B (I) dans laquelle : E représente a. l'un des restes C, D, E, F et G suivants :

(reste C]

reste C dans lequel :

R _j _ représente un atome d'hydrogène, un groupe al yle en C- _] _ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué ou un benzyle éventuellement substitué ;

2 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en ^c l à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué, un benzyie éventuellement substitué, un groupe acyle en ^-Cg, un benzoyle éven¬ tuellement substitué, un alcoxy-carbonyle ou un groupe CO-X dans lequel X représente un reste C ou un reste D, E, F ou G tels que définis ci-après, et m représente 1 (cycle à 5 centres) ou 2 (cycle à 6 centres) .

(reste D)

reste D dans lequel : - _j _ et R2 ont la même signification que ci-dessus ; R3 représente un groupe OH, un groupe O-alkyle en C- _j _ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un groupe O-phényle éventuellement substitué, un groupe O-benzyle éventuel¬ lement substitué, un reste E tel que défini ci-après, un reste de type Y-B- ou un groupe NH-CH(COOR3)CH ₂ -S- R4, dans lequel R4 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Cι_ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué, un S- phényle éventuellement substitué, un benzyie éventuel¬ lement substitué, ou l'un des groupes suivants : CH3- CO-NH-CH ₂ , B-Y-CO-CH( H-COO-C(CH ₃ )3)CH ₂ -S, ou B-Y-CO- CH( H ₂ .HC1)CH ₂ -S, B et Y étant tels que définis ci- après, et m représente 1 ou 2.

(reste E) ,

reste E dans lequel : R^, R3 et m ont la même signification que ci-dessus.

(reste F) ,

reste F dans lequel :

R2 et R4 ont la même signification que ci-dessus

(reste G)

reste G dans lequel :

R5 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en Cι_ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué, un S-phényie éventuellement substitué, un benzyie éventuellement substitué, un groupe CH -CO-NH-CH ₂ ou B-Y-CO-C5ZH3-S et Z représente CH ou N. b. un résidu d'aminoacide soufré, éventuellement protégé. c. R représente également, lorsque n est différent de 0 et A est un reste soufré H ou I tels que définis ci- après, un groupe OH, un groupe O-alkyle en ^-Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un groupe O-phényle éventuellement substitué, un groupe O-benzyle éventuel¬ lement substitué, un reste E tel que défini ci-dessus

ou un reste Y-B, B et Y étant tels que définis ci- après ; représente un groupe CH , un acide aminé substitué ou non, avec la fonction acide liée à Y et la fonction aminé liée à CO ou l'un des restes suivants :

(reste H) ,

reste H dans lequel :

R2 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C- _j _ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué, un benzyie éventuellement substitué, un groupe acyle en C-*_ à Cg, un benzoyle éventuellement substitué, un groupe alcoxy-carbonyle, ou un groupe CO-X dans lequel X représente l'un des restes C, D, E, F ou G tels que définis ci-dessus pour R. (1) est la liaison avec Y,

(2) est la liaison avec R-CO.

(reste I) ,

reste I dans lequel :

Rg représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C _] _ à Cg (linéaire, ramifié ou cyclique) , un phényle éventuellement substitué, un S-phényle substitué, un benzyie éventuellement substitué ou 1'un des groupes suivants : CH3-CO- H-CH ₂ , S-CH ₂ -CH-(CO-R ₇ )-NH-CH ₂ -CH ₂ - NH-B dans lequel R7 représente un groupe OH, un groupe O-alkyle en C- _j _-Cg, un groupe O-phényle éventuellement substitué, un groupe O-benzyle éventuellement substi-

tué, un reste E tel que défini ci-dessus ou un reste Y- B, B et Y étant tels que définis ci-après, (1) et (2) ont la même signification que ci-dessus. a est égal à 0 ou 1 ou supérieur à 1 ; ï représente un atome d'oxygène ou un groupe NH. B représente α) un reste dianhydro 1,4:3,6 hexitol mono-nitrate de formule (a)

β) un reste itol nitrate en C- _j _ à Cg de formules (b)

(b _1# (b ₂ ) (b ₃ ) γ) un reste d'inositol "p" nitrates, p étant un nombre entier de 1 à 5, de formule (c)

(c _x ) (c ₅ ) δ) l'un des groupes suivants :

. un groupe -CH ₂ -C(CH ₂ -ON0 ₂ )3, dérivé du pentaérythri- tol,

. un groupe -CH ₂ -C(C H ₅ ) (CH ₂ -ON0 ₂ ) , dérivé de l'éthyl- triméthylol-méthane,

. un groupe -CH ₂ -CH ₂ -N(CH ₂ -CH ₂ -ON0 ₂ ) ₂ , dérivé de la triéthanolamine, avec toutes les combinaisons OH, ON0 ₂ .

Les composés de formule I conformes à 1'inven- tion englobent leurs différents isomères.

Dans la présente invention, les substituants dès groupes phényle substitué et benzyie substitué, sont

avantageusement choisis parmi les groupes suivants : N0 , halogène, CV dans lequel V représente un halogène ou un alkyle inférieur.

On obtient ainsi des nitrates organiques qui, de manière inattendue, présentent à la fois une activité nettement améliorée par rapport aux nitrates de l'Art an¬ térieur et n'entraînent pas de tachyphylaxie. De tels nitrates sont particulièrement utiles comme vaso- relaxants, notamment dans le traitement de certaines ma- ladies cardiovasculaires et plus particulièrement dans le traitement de 1'angine de poitrine.

Ils ont de plus l'avantage de présenter des données pharmacologiques et toxicologiques similaires à celles des nitrates organiques connus qui peuvent, de plus, servir de témoins.

Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, les composés préférés de formule I compren¬ nent pour R, A, Y et B, respectivement les radicaux sui¬ vants :

R représente l'un des restes suivants

A. représente un reste d'aminoacide éventuellement substi¬ tué, lorsque n est différent de 0, et notamment la gly¬ cine et ses dérivés, la proline et ses dérivés, l'alanine et ses dérivés, la valine et ses dérivés, et la phényl- alanine et ses dérivés.

X représente un atome d'oxygène ou un groupe NH, E. est un reste dérivé des composés suivants :

1,43,6-dianhydro-D-glucitol-5-nitrate

1,4:3,6-dianhydro-D-glucitol-2-nitrate

1,4:3,6-dianhydro-D-manitol-5-nitrate

1, 4 : 3 , 6-dianhydro-D-iditol-5 -nitrate

l, 4 : 3 , 6-dianhydro-5-déoxy-L-iditol-5- amino-2 -nitrate

1, 4 : 3 , 6-dianhydro-2-déoxy-D-glucitol- 2 -amino - 5 -ni t rat e

1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-D-glucitol- 5-amino-2-nitrate

1,4:3,6-dianhydro-2-déoxy-D-manitol- 2-amino-5-nitrate. De manière générale, les nitrates organiques conformes à 1'invention comprennent un thioacide R-COOH associé à un nitrate organique de type itol ou dianhydro itol, au niveau d'une fonction OH ou NH dudit nitrate. On distingue ainsi plusieurs restes selon le radical R de l'acide associé au nitrate :

. thioproline et ses dérivés (restes C, D, E) ; . dérivés de la cystéine (reste F) et des autres acides aminés soufrés ; . dérivés de l'acide thiosalicylique (reste G) ou de 1'acide 3-mercaptopicolinique.

De manière inattendue, l'ensemble de ces pro- duits présentent à la fois une activité sur le système cardiovasculaire (activité vasorelaxante) , et notamment une activité antiangineuse et une diminution du phénomène de tachyphylaxie.

La présente invention a également pour objet un procédé de préparation d'un nitrate organique conforme à l'invention, caractérisé en ce que l'on fait réagir :

I. soit un thioacide de type R-COOH, dans lequel R a la même signification que ci-dessus avec un dérivé de formule II : (A) _n -Y-B, dans laquelle A, Y, B et n ont la même signification que ci-dessus,

II. soit un dérivé de formule III : R-C0-(A) _n , dans laquelle R, A et n ont la même signification que ci- dessus, avec un dérivé de formule Y-B, dans laquelle Y et B ont lr_. même signification que ci-dessus, dans un sol- vant approprié et dans des conditions non épimérisantes.

De manière avantageuse, le solvant est notam¬ ment et ce de manière non limitative : du dichloro- méthane, de l'acétonitrile, du diméthylformamide, de l'acétate d'éthyle ou du tétrahydrofuranne.

Selon un mode de mise en oeuvre avantageux dudit procédé, les dérivés de formule II sont choisis parmi :

Selon un autre mode de mise en oeuvre avanta¬ geux dudit procédé, le dérivé de formule III est :

De manière inattendue, les dérivés de formule II présentent une activité sur le système cardiovascu- laire et notamment une activité antigineuse. Aussi bien les dérivés de formule I que les dérivés de formule II trouvent application comme médica¬ ments dans le traitement de maladies cardiovasculaires et notamment dans le traitement de l'angine de poitrine.

Outre les dispositions qui précèdent 1'inven- tion comprend encore d'autres dispositions, qui ressorti- ront de la description qui va suivre, qui se réfère à des exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la pré¬ sente invention.

Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples sont donnés uniquement à titre d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne constituent en aucune manière une limitation. EXEMPLES : I - SYNTHESE DES INTERMEDIAIRES. I-a : de type (A) _n -Y-B de formule II, avec n ≈ 1 :

Le Tableau I ci-après montre les différents dérivés synthétisés.

TABLEAU I

Dans les exemples qui suivent, les abrévations utilisées ont les significations ci-après :

Boc pour butoxycarbonyl

DCC " 1,3-dicyclohexylcarbodiimide DCU " 1,3-dicyclohexylurée

HOBt " 1-hydroxybenzotriazole-hydrate

CMC " l-cyclohexyl-3-(2-morpholinoéthyl)carbodiimide métho-p-toluènesulfonate

CMU " l-cyclohexyl-3-(2-morpholinoéthyl)urée métho-p-toluènesulfonate

CBZ " benzyloxycarbonyl.

Exemple 1 : Glycine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, ester du 5-

O-nitro, 1,4;3,6-dianhydro-D-glucitol (1) :

1 g (5,23 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D- glucitol-5-nitrate, 0,92 g (5,25 mmoles) de N-t-Boc glycine, 2,22 g (5,24 mmoles) de CMC et 0,08 g

(0,52 mmoles) de 4-pyrrolidinopyridine sont agités

24 heures à température ambiante dans 40 ml de dichloro- méthane (stabilisé sur a ylène et séché sur alumine) . Après filtration du CMU, on ajoute 50 ml de dichloro- méthane et la solution est lavée successivement avec

30 ml d'une solution à 5 % d'acide acétique, 30 ml d'eau,

30 ml d'une solution demi-saturée en bicarbonate de sodium, trois fois 30 ml d'eau, puis séchée sur sulfate de sodium. Après filtration et évaporâtion, le produit est recristallisé dans l'acétate d'ethyle. On obtient

0,85 g (Rdt = 47 %) .

dianhydro-D-glucitol, onochlorhydrate (2) :

A 45 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2 N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 6,6 g du produit précédent (1) . La solution est agitée 10 heures à te pe-

rature ambiante et le précipité formé est filtré et lavé à l'éther puis recristallisé dans le méthanol. On obtient

3,2 g (Rdt = 59 %) de produit purifié.

20 F = 196'C (déc) , [α] _D = +113,5 (c 0,6 eau) .

N O

9,73 39,81 9,6 40,1

Exemple 3 : Glycine, ester du 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-D-glucitol, monochlorhydrate (3) :

4 g (20,9 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D- glucitol-2-nitrate, 3,4 g (19,4 mmoles) de N-t-Boc glycine, 8,8 g (20,9 mmoles) de CMC et 0,28 g (2 mmoles) de 4-pyrrolidinopyridine sont agités 24 heures à tempéra- ture ambiante dans 120 ml de dichloromethane (stabilisé sur amylène et séché sur alumine) . Après filtration du

CMU, on ajoute 130 ml de dichloromethane et la solution est lavée et séchée comme pour (1) . On isole 5,85 g d'une huile correspondant au produit attendu. Cette huile est solubilisée dans 42 ml d'une solution d'acide chlor- hydrique 2 N dans l'acétate d'ethyle. Après 10 heures à température ambiante, le précipité formé est filtré et lavé à l'éther puis recristallisé dans le méthanol anhydre. On obtient 2,5 g (Rdt = 45 %) . ₂₀

F = 188-189'C (déc), [α] _D = +88,1 (c 0,6 eau) .

Analyse

Exemple 4 : Glycine, N-[(benzyloxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (4) :

On agite à température ambiante une solution de 1,43 g (7,5 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 70 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 1,54 g (7,41 mmoles) de

N-CBZ glycine et 1,53 g (7,41 mmoles) de DCC. Après

24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chrom tographie l'huile obtenue (silice 230-400 mesh ASTM) . Le composé isolé est cristallisé avec de l'éther puis recristallisé dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique. On obtient 2 g (Rdt =

70 %) .

20 F = 75-76 ^* C, [α] _D = +24,7 (c 1, éthanol) .

Analyse

Exemple 5 : Glycine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du 5- amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (5) : On agite à température ambiante une solution de 6 g (31,5 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- toi-5-amino-2-nitrate dans 270 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 5,4 g (30,8 mmoles) de N-t-Boc glycine et 6,4 g (31 mmoles) de DCC. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on recristallise dans le méthanol le composé isolé. On obtient 7,75 g (Rdt = 72 %) . F = 118'C. Exemple 6 : Glycine, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-0- nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (6) :

A 35 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 1,7 N dans le méthanol, on ajoute 4,75 g du composé pré¬ cédent (5) . La solution est agitée 10 heures à tempéra- ture ambiante et le précipité formé est filtré et lavé à l'éther anhydre. On recristallise dans le méthanol, on obtient 3,3 g (Rdt = 85 %) .

20 F = 198'C (déc), [α] _D = -2,5 (c 1, eau). Analyse

La forme base de ce composé est préparée ainsi : dans une suspension de 2,35 g de (6) on fait bar¬ boter de l'ammoniac à température ambiante et sous agita¬ tion. On filtre le chlorure d'ammonium formé et après évaporation du solvant, on observe une cristallisation de l'huile résiduelle. Après recristallisation dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique, on ob¬ tient 1,85 g (Rdt = 90 %) . F = 81 ^* C. Exemple 7 : L-alanine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol (7) :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (10,5 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 70 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2 g (10,5 mmoles) de N- t-Boc-L-alanine, 4,46 g (10,5 mmoles) de CMC et 1,42 g (10,5 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on ajoute du dichloromethane et la phase organique est lavée et séchée comme pour (1). On isole 3,15 g d'un solide qui est recristallisé dans le méthanol. On obtient 2,15 g

(Rdt = 56 %) .

20 F = 133 ^* C, [α] _D = +15 , 8 (c 0 , 6 éthanol) . Analyse

Exemple 8 : L-alanine, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-0- nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol monochlorohydrate (8) : A 38 ml d'une solution d'acide chlorhydrique

1,7 N dans le méthanol, on ajoute 3,05 g du composé pré¬ cédent (7) . La suspension est agitée 24 heures à tempéra¬ ture ambiante (le milieu devient limpide après 3 heures de réaction) , puis on concentre sous vide et on précipite un solide blanc par ajout d'éther. On obtient 2,6 g de solide que l'on recristallise dans le méthanol. On récu¬ père finalement 2,1 g (Rdt = 83 %) .

20 F = 189 ^* C (déc), [α] _D = +9,3 (c 0,6 eau)

Analyse C H

Cale. 36,31 5,42 Tr. 36,5 5,5

Exemple 9 L-valine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du

5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol

(9) :

On agite à température ambiante une solution de 3,4 g (17,8 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 220 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,7 g (17 mmoles) de N- t-Boc-L-valine, 7,56 g (17,8 mmoles) de CMC et 2,4 g

(17,8 mmoles) d'HOBt. Après 21 heures de réaction, on ajoute du dichloromethane et on procède comme pour la préparation de (1) ; le solide est alors recristallisé dans le mélange méthanol-éther de pétrole ; on obtient

3,55 g (Rdt = 54 %) .

20 F = 130-131 ' C , [Ct] _D = +30 , 66 ( c 0 , 6 éthanol ) .

Analyse

Le traitement de ce composé par une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle permet d'enlever le groupement t-butoxy-carbonyl et conduit au chlorhydrate d'aminé correspondant (10). Ce composé n'a pas été recristallisé.

Exemple 10 : L-phénylalanine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro- L-iditol (11) :

On agite à température ambiante une solution de 3,8 g (20 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 250 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 5,2 g (19,6 mmoles) de N-t-Boc-L-phénylalanine, 8,48 g (20 mmoles) de CMC et 2,7 g (20 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on

procède comme pour la préparation (1) ; le solide est alors recristallisé dans l'éthanol absolu ; on obtient 4,45 g (Rdt = 52 %) d'un solide blanc. F ≈ 157-159'C, [α]n°= +25 (c 0,6 éthanol) .

Analyse C H N

Cale. 54,91 6,22 9,60 Tr. 54,7 6,2 9,6

Exemple 11 : L-phénylalanine, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (12) :

A 50 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2 N dans le méthanol, on ajoute 4,2 g du composé précé¬ dent (11) . On agite 20 heures à température ambiante puis on concentre sous vide, la masse visqueuse obtenue est chromatographiée sur silice (230-400 mesh ASTM) . On isole une huile qui est traitée par de l'éthanol ; on élimine la fraction huileuse insoluble et on précipite un solide blanc de la phase éthanolique par ajout d'éther. Le pro¬ duit est recristallisé dans le mélange méthanol-éther diisopropylique. On obtient 2,15 g de produit, (Rdt =

Exemple 12 : L-proline, N-t(t-buto_cy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-0-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (13) :

On agite à température ambiante une solution de 2,5 g (13,1 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 125 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2,8 g (13,0 mmoles) de N-t-Boc-L-proline, 5,5 g (13 mmoles) de CMC et 1,75 g (13 moles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on pro¬ cède comme pour la préparation de (1) ; le solide obtenu

est recristallisé dans l'acétate d'ethyle, on obtient

2,9 g (Rdt = 57 %) .

20 F = 117-118'C, [α] _D = +5,2 (c 0,6 éthanol). Analyse C H N

Cale. 49,60 6,50 10,84

Tr. 49,7 6,7 10,6

Exemple 13 L-proline, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol monochlorohydrate (14) :

A 17 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2,2 N dans le méthanol, on ajoute 3,3 g de composé précé¬ dent (13). On agite 20 heures à température ambiante puis on concentre sous vide et on précipite le produit par ajout d'éther. Après recristallisation dans l'éthanol, on obtient 2,2 g (Rdt = 80 %) d'un solide blanc.

20 F = 173"C (déc), [α] _D = -28,1 (c 0,6 eau).

Analyse C H N Cl Cale. 40,81 5,60 12,97 10,95

Tr. 40,7 5,8 12,8 11,1

Exemple 14 : Glycine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du

2-amino, 2-déoxy, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol

(15) : On agite à température ambiante une solution de 4 g (21 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-2-déoxy-D-glu- citol-2-amino-5-nitrate dans 180 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,6 g (20,5 mmoles) de

N-t-Boc glycine et 4,28 g (20,7 mmoles) de DCC. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie sur silice (230-400 mesh

ASTM) . Le composé isolé est recristallisé dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique ; on obtient 4,8 g

(Rdt = 67 % ) . - 20

F = 112 -113 ' C, [α] _D = +101 , 8 ( c 0 , 6 éthanol ) .

Analyse

Exemple 15 : Glycine, amide du 2-amino, 2-déo_cy, 5-0- nitro, 1,4:3,6-diaτιhydro-D-glucitol monochlorhydrate (16) :

A 60 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 1,85 N dans le méthanol, on ajoute 7,3 g du composé pré¬ cédent (15) . On agite 16 heures à température ambiante, on filtre le précipité formé et on le lave à 1'éther anhydre. On recristallise ce composé dans le méthanol et on obtient 2,95 g (Rdt = 49 %) de solide blanc.

F = 193-194'C, [α] _D = +95 (c 0,6 eau). Analyse C H

Cale. 33,87 4,87 Tr. 33,7 5,1 I-b : de type (A) _n -Y-B avec n ≈ 2 :

Exemple 16 : 5-[[2-[[(2-pyrrolidinyl (28)) carbonyl] amino]- -oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-L-iditol monochlorhydrate (49) :

(49)

HCI

On agite à température ambiante une solution de 5,35 g (21,6 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 190 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 4,65 g (21,6 mmoles) de N-t-Boc-L-proline, 4,46 g (21,6 mmoles) de DCC et 2,92 g (21,6 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU et on évapore le solvant. On chromatographie l'huile sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 7,8 g (Rdt = 81 %)

du composé attendu. Celui ci n'a pu être cristallisé ; il est traité directement.

A 60 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute les 7,8 g du com- posé précédent. La solution est agitée 6 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide blanc formé est filtré, lavé à l'acétate d'ethyle puis à l'éther. Après recristallisa¬ tion dans l'éthanol, puis dans le méthanol, on obtient 4,5 g de produit (Rdt = 67 %) . 20

F = 179'C (déc), [α] _D = -21,1 (c 1, eau).

Analyse C

Cale. (0,04 HCI) 40,85

Tr. 40,7 I-c : de type R-CO-A de formule III :

Exemple 17 : N-[4-(3-for__yl-2,2-diméthyl-L-thiazolidine) carbonyl]-, glycine (17) .

Ce composé est préparé par saponification de l'ester correspondant.

dont la synthèse est décrite par KING et al., J. Chem. Soc. 1957, 880-885.

On agite à température ambiante une solution de 6,24 g d'ester dans 63 ml de dioxanne et on ajoute 25,8 ml d'une solution 1 N de soude. Après une heure de réaction, on concentre la solution et on acidifie avec 25 ml d'une solution 1 N d'acide chlorhydrique. Le préci¬ pité blanc est filtré, lavé avec du tétrachlorure de car-

bone puis à l'éther. On obtient 4,35 g d'acide (Rdt = 74 %) de pureté suffisante pour être engagé dans l'étape suivante.

II - SYNTHESE DES COMPOSES DE FORMULE I avec n ≈ 0. Le Tableau II ci-après montre les différents dérivés synthétisés.

25 TABLEAU II

Exemple 18 : 2-0-[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazol- idinyl)carbonyl]-, 5-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glu- citol (18) :

5 g (26,1 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D-glu- citol-5-nitrate, 6,15 g (26,3 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 5,4 g (26,1 mmoles) de DCC, 3,55 g (26,2 mmoles) d'HOBt et 0,435 g (2,9 mmoles) de 4-pyrrolidinopyridine sont agités dans 225 ml de dichloromethane (stabilisé sur amylène et séché sur alumine) pendant 24 heures à tempe-

rature ambiante. Après filtration du DCU, on procède comme pour (1) . Le résidu d'évaporation est chromatogra¬ phie sur silice (230-400 mesh ASTM) et le produit isolé est recristallisé dans l'acétate d'ethyle puis lavé à l'éther de pétrole. On obtient 5,5 g (Rdt = 51 %) .

20 F = 106-110'C, [α] _D = +10,6 (c 0,6 acétone).

Analyse C H N

Cale. 44,33 5,45 6,89 Tr. 44,4 5,5 6,8

Exemple 19 : 2-0-[(4-L-thiazolidinyl)carbonyl]-, 5-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glucitoi, monochlorhydrate (19) :

A 32 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2 N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2,5 g (6,1 mmoles) du produit précédent (18) . La solution est agitée 1 heure à température ambiante et le précipité formé est filtré puis lavé à l'éther. Après recristallisation dans l'étha¬ nol, on obtient 2,85 g de produit (Rdt = 76 %) .

Exemple 20 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-N-[(t- butoxy)carbonyl]-, ester du 5-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro- D-glucitol (20) :

1,91 g (10 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro--D-glu- citol-5-nitrate, 3,5 g (12 mmoles) de N-t-Boc-S-acé- tamidométhyl-L-cystéine (12 mmoles), 2,47 g (12 mmoles) de DCC, 1,6 g (12 mmoles) d'HOBt et 0,2 g (1,3 mmoles) de 4-pyrrolidinopyridine sont agités dans 100 ml de di¬ chloromethane (stabilisé sur amylène et séché sur alu¬ mine) pendant 6 heures. Après filtration du DCU, la solu- tion est lavée et séchée comme pour (1) . Le produit isolé après chromatographie est recristallisé dans le mélange

acétone-éther diisopropylique (50-50). On obtient 3,4 g

(Rdt = 73 %) .

20 F = 105-106 ^* C, [α] _D = +59 (c 0,5 acétone). Analyse C H N O

Cale. 43,87 5,85 9,03 34,37 Tr. 43,8 5,8 8,7 34,1 Exemple 21 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-, ester du 5-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glucitol, monochlor- hydrate (21) :

A 24 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2 N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2,9 g (6,2 mmoles) du produit précédent (20) . La solution est agitée 5 heures à température ambiante et le précipité formé est filtré puis lavé à 1'éther. Après chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) , le produit est recristallisé du mélange éthanol-acétone. On obtient 2,15 g (Rdt = 85 %) .

F = 152-155'C. Exemple 22 : 2-0-[2-[(phénylméthyl)thio]benzoyl]-, 5-0- nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (22) :

10,5 g (40 mmoles) de chlorure d'acide thio- salicylique S-benzylé sont dissous dans 100 ml de pyri- dine anhydre et introduits dans le réacteur. On coule alors goutte à goutte à température ambiante une solution de 5,7 g (30 mmoles) de l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol-5- nitrate dans 50 ml de pyridine anhydre. Sous agitation, on chauffe à 40'C le mélange réactionnel pendant 24 heures. On évapore la pyridine sans dépasser 40 ^* C et le résidu est repris dans le dichloromethane, lavé à l'eau, à l'acide chlorhydrique 1 N, à l'eau, avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, puis à 1'eau jusqu'à neutralité et séché sur sulfate de sodium. Le produit visqueux est alors chromatographie sur silice (230-400 mesch ASTM) et le composé isolé est recristal¬ lisé dans le mélange éther diisopropylique-acétate d'ethyle 80-20. On obtient 6,1 g de produit (Rdt = 49 %) .

F = 98-99 ' C .

Analyse C

Cale. 57,55 Tr. 57,4 Exemple 23 2-0-[2-[(acétylamino)méthyl]thio]benzoyl]-, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (23) :

3,8 g (20 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D-glu- citol-5-nitrate, 5 g (22 mmoles) d'acide S-acétamino- méthyle thiosalicyclique, 4,5 g (22 mmoles) de DCC et 0,44 g (3 mmoles) de 4-pyrrolidinopyridine sont agités 48 heures à température ambiante dans 60 ml de dichloro¬ methane (stabilisé sur amylène, séché sur alumine) . Après filtration du DCU, la solution est lavée et séchée comme pour (1) . Le produit isolé après chromatographie est re- cristallisé dans l'éthanol. On obtient 5,6 g (Rdt = 67 %) .

20 F = 126-127 ^* C, [α] _D = +93,4 (c 0,5 acétone).

Analyse C H Cale. 48,23 4,56

Tr. 47,8 4,4 Exemple 24 : 5-0-[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl]-, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (24) : 6 g (31,4 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D-glu- citol-2-nitrate, 7,38 g (31,6 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 6,48 g (31,4 mmoles) de DCC, 4,26 g (31,5 mmoles) d'HOBt et 0,52 g (3,5 mmoles) de 4-pyr- rolidinopyridine sont agités dans 270 ml de dichloro- méthane (stabilisé sur amylène et séché sur alumine) pen¬ dant 24 heures. Après filtration du DCU, on ajoute 200 ml de dichloromethane et la solution est lavée et séchée comme pour (1) . Le produit isolé est recristallisé du mé¬ lange acétate d'éthyle-éther de pétrole. On obtient 7,6 g (Rdt = 60 %) .

20 F = 93 ^* C, [α] _D = -15,6 (c 0,6 éthanol).

Analyse C H N

Cale. (0,15H ₂ O) 44,03 5,48 6,84

Tr. 44,0 5,4 6,8

Exemple 25 : 5-0-[(4-L-thiazolidinyl)carbonyl]-, 2-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glucitol, monochlorhydrate (25) :

A 65 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2 N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 6,8 g du composé précédent (24) . La solution est agitée 1 heure à tempéra- ture ambiante et le précipité formé est filtré et lavé à l'éther avant d'être recristallisé dans le méthanol. On obtient 2,35 g (Rdt = 40 %) .

20 F = 175 ^* C (déc), [α] _D = +15,8 (c 0,6 eau)

Exemple 26 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-N-[(t- butoxy)carbonyl]-, ester du 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro- D-glucitol (26) :

3,5 g (18 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-D- glucitol-2-nitrate, 5,3 g (18 mmoles) de N-t-Boc-S acé- tamidométhyl-L-cystéine, 3,78 g (18 mmoles) de DCC, 2,43 g (18 mmoles) d'HOBt et 0,3 g (2 mmoles) de 4-pyr- rolidinopyridine sont agités dans 150 ml de dichloro¬ methane (stabilisé sur amylène et séché sur alumine) pen¬ dant 24 heures. Après filtration du DCU, on ajoute 250 ml de dichloromethane et la solution est lavée et séchée comme pour (1) . Le produit isolé est recristallisé du mélange acétone-éther diisopropylique (40-60) . On obtient 3,95 g (Rdt = 46 %) .

20 F = 115'C, [α] _D = +11,2 (c 0,6 éthanol).

Analyse C H N Cale. 43,86 5,84 9,02

Tr. 43,8 5,9 9,0

Exemple 27 L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-, ester du 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol, mono¬ chlorhydrate (27) :

A 21 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 5 2 N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2,3 g du composé précédent (26) . La solution est agitée 1 heure à tempéra¬ ture ambiante et le précipité formé est filtré et lavé à l'éther avant d'être recristallisé dans l'éthanol. On ob¬ tient 1,75 g (Rdt = 88 %) .

-LO 20

F = 161-162'C, [α] _D = +31,6 (c 0,6 eau).

Analyse C H N

Cale. 35,86 5,01 10,45

Tr. 35,4 4,9 10,3

15 Exemple 28 : 5-0-[2-[(phénylméthyl)thio]benzoyl]-, 2-0- nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (28) :

7,8 g (30 mmoles) de chlorure d'acide thio- salicylique S-benzylé sont dissous dans 65 ml de pyridine anhydre et introduits dans le réacteur. On coule alors 20 goutte à goutte à 40"C une solution de 4 g (21 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-D-glucitol-2-nitrate dans 35 ml de py¬ ridine anhydre. Sous agitation, on laisse réagir pendant 24 heures. On traite alors comme pour (22). Le produit est recristallisé dans le mélange méthanol-acétone (40- 5 20) . On obtient 4,4 g de produit (Rdt = 51 %) .

20 F = 105-106 ^* C, [α] _D = +77,2 (c 2, acétone).

Analyse C H N

Cale. 57,55 4,59 3,35 0 Tr. 57,5 4,5 3,3

Exemple 29 Bis[5-0[(2-thio)benzoyl]-, 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol] (29) :

13,5 g (60 mmoles) d'acide acétamidométhyl thiosalicylique sont agités avec 50 ml de chlorure de 5 thionyle pendant 1 heure à 70 ^* C, on évapore sous vide le chlorure de thionyle en excès en évitant de dépasser

50 ^* C. Après refroidissement, on ajoute 60 ml de pyridine

sèche, ce qui provoque une vive effervescence et une mon¬ tée en température. Par décantation, on récupère la solu¬ tion noire et on y ajoute goutte à goutte une solution de 3,8 g (20 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-D-glucitol-2-ni- trate dans 10 ml de pyridine. On agite 30 heures à 40 ^* C et on évapore la pyridine sous vide. On reprend au dichloromethane, on filtre sur silice et la solution est lavée et séchée comme pour (1) . Le produit récupéré est chromatographie sur colonne de silice. On isole 3,5 g de produit qui est recristallisé dans le mélange acétone- éthanol (1-2). On obtient 1,8 g (Rdt = 34 %) de produit.

20 F = 140-142'C, [α] _n = +79,2 (c 0,5 acétone).

Analyse

Exemple 30 : 5-[[(4-L-thiazolidinyl)carbonyl]amino]-, 5- déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, mono- chlorhydrate (30) : * Méthode A :

On agite à 0 ^* C une solution de 3,2 g

(16,85 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-iditol-5- amino-2-nitrate dans 120 ml de dichloromethane anhydre.

On ajoute successivement 1,87 g (14,05 mmoles) de -L-thioproline, 2,9 g (14,05 mmoles) de DCC et 1,9 g (14,05 mmoles) d'HOBt. Après 3 heures à cette tempéra¬ ture, on agite encore 20 heures à température ambiante. Après filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie l'huile sur silice (230-400 mesch ASTM) . L'huile isolée est solubilisée dans du dichloromethane et on fait barboter du chlorure d'hydrogène. Après évapora¬ tion du solvant, le résidu est cristallisé avec le métha¬ nol puis recristallisé dans ce solvant. On obtient 2,6 g (Rdt = 54. %) . * Méthode B :

On agite à température ambiante une solution de 5 g (26,3 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-

iditol-5-amino-2-nitrate dans 300 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 6,13 g (26,3 mmoles) de N-t-Boc-L-thioproline, 5,43 g (26,3 mmoles) de DCC et 3,55 g (26,3 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 200 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu d'évaporation est chromatographie sur silice (230- 400 mesh ASTM) et on isole 10,5 g d'une huile corres¬ pondant au 5-[ [3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro- L-iditol (50) . Celle-ci n'a pas été cristallisée ; elle est traitée directement.

A 80 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute les 10,5 g du com- posé précédent. La solution est agitée 3 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide blanc formé est filtré puis lavé à l'éther. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 7,35 g de produit (30) (Rdt = 81 %) . F = 185-199'C (déc), [cx] ^ = -60,7 (c 2, eau). Analyse

Cale. Tr. Exemple 31 : 5-[[(3-formyl 2,2-diméthyl-4-L-thiazo- lidinyl)carbonyl]amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (31)

On agite à température ambiante une solution de 2,94 g (15,5 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 150 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2,95 g (15,5 mmoles) de N-foππyl-L-diméthylthioproline, 3,20 g (15,5 mmoles) de DCC, 2,1 g (15,5 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réac¬ tion, on filtre le DCU, évapore le solvant et chromato¬ graphie le solide obtenu (sur silice 230-400 mesh ASTM) . Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 3,05 g (Rdt = 54 %) de solide blanc.

20 F = 158 ^* C, [α] _D = -59 (c 0,6 acétone).

Analyse C H N

Cale. 43,20 5,30 11,63 Tr. 43,0 5,3 11,7

Exemple 32 : 5-[[(2,2-diméthyl-4-L-thiazo- lidinyl)carbonyl]amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (32) :

On agite à température ambiante une solution de 3 g (15,8 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 130 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,07 g (15,5 mmoles) de -L-diméthylthioproline, 3,26 g (15,7 mmoles) de DCC et 2,14 g (15,7 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU, évapore le solvant et chromatographie le résidu huileux sur silice (230-400 mesch ASTM) . On procède ensuite comme pour (30) et on obtient 2,7 g (Rdt = 47 %) de produit recristallisé dans le méthanol.

20 F = 196 ^* C (déc), [α] _D = de -12 à +17 (c 0,6 eau) ; variation due à 1'instabilité du produit dans 1'eau ; il se transforme en :

qui évolue lui-même vers la forme oxydée (cystine) .

Analyse C H N Cl Cale. 38,97 5,45 11,36 9,58

Tr. 38,5 5,4 11,1 9,5

Exemple 33 : L-cystéine, S-[(acétyla ino)méthyl]-N-[(t- butoxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro,

1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (33) : On agite à température ambiante une solution de 2,56 g (13,5 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 120 ml de dichloromethane

anhydre. On ajoute successivement 3,95 g (13,5 mmoles) de N-t-Boc-S-acétamidométhyl-L-cystéine, 2,8 g (13,5 mmoles) de DCC, 1,82 g (13,5 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie sur silice le composé pâteux isolé (230- 400 mesh ASTM) . On recristallise le solide obtenu dans l'acétate d'ethyle. On obtient 5,9 g (Rdt = 94 %) .

20 F = 152'C, [α] _D = +26,1 (c 0,6 acétone). Analyse C H N

Cale. 43,96 6,07 12,06

Tr. 44,1 6,0 12,0

Exemple 34 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthy1]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-idi- toi, monochlorhydrate (34) :

A 13 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 1,6 N dans le méthanol, on ajoute 2 g du composé précé¬ dent (33). La solution est agitée 24 heures à température ambiante et on filtre le solide blanc. On évapore le sol- vant du filtrat et on chromatographie le composé visqueux obtenu (silice 230-400 mesh ASTM). On cristallise l'huile isolée avec de la pyridine et de l'acétone et le solide est recristallisé du mélange éthanol-acétone, puis dans l'éthanol. On obtient 0,95 g (Rdt = 55 %) .

20 F = 183 ^* C, [αJ _D = +28,3 (c 0,6 eau)

Exemple 35 : L-cystéine, S-[(2-nitro-phényl)thio]-N-[(t- butoxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (35) :

A une solution de 2 g (4,3 mmoles) de (33) dans 12 ml d'acide acétique anhydre, on coule, à tempéra- ture ambiante et sous agitation, une solution de 1 g

(5,2 mmoles) de chlorure de 2-nitrobenzènesulfényle.

Après 2 heures 30 de réaction, on évapore l'acide acé-

tique sous vide. L'huile obtenue est cristallisée à l'éther, puis on chromatographie le produit sur silice (230-400 mesh ASTM) . Le solide isolé est recristallisé dans le méthanol. On obtient 1,1 g (Rdt = 38 %) . 20

F = 157-158'C, [α] _D = +5,33 (c 0,6 acétone).

Analyse

Dans les conditions de la réaction, un sous- produit est obtenu en quantité importante ; il correspond au sel de l'aminé (36) formé après départ du groupement t-butoxy-carbonyle.

Exemple 36 : L-méthionine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du 5-amino, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-idi¬ tol (37) :

On agite à température ambiante une solution de 3,85 g (22 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 190 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 5 g (20 mmoles) de N-t- Boc-L-méthionine, 4,15 g (21 mmoles) de DCC et 2,7 g (21 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU, on évapore le solvant et on chromatogra¬ phie l'huile obtenue (silice 230-400 mesh ASTM). Le com- posé isolé est recristallisé dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique (1-2) . On obtient 4,7 g (Rdt = 55 %) . F = 96 ^* C.

Le traitement de ce composé par une solution d'acide chlorhydrique 1,7 N dans le méthanol permet d'en¬ lever le groupement t-butoxy-carbonyle et conduit au chlorhydrate d'aminé correspondant (38) .

Exemple 37 : 5-[[2-t(phénylméthyl)thio]benzoyl]amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (39) : On agite à température ambiante une solution de 3 g (15,8 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 130 ml de dichloromethane

anhydre. On ajoute successivement 3,2 g (13,1 mmoles) d'acide thiosalicylique S-benzylé et 2,75 g (13,3 mmoles) de DCC. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU, on évapore le solvant et on chromatographie l'huile obtenue (silice 230-400 mesh ASTM) . Après recristallisation du mélange acétone-hexane, on obtient 2,55 g (Rdt = 47 %) .

20

F = 87-88'C, [α] _D = +29,3 (c 2 acétone).

Analyse C H N Cale. 57,68 4,84 6,72

Tr. 57,6 5,0 6,7

Exemple 38 2-[[(4-L-thiazolidinyl)carbonyl]amino]-, 2- déoxy, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol, mono¬ chlorhydrate (40) On agite à température ambiante une solution de 4,45 g (23,4 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-2-déoxy-D- glucitol-2-amino-5-nitrate dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,1 g (23,3 mmoles) de -L-thioproline, 4,8 g (23,3 mmoles) de DCC et 3,15 g (23,3 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU, on évapore le solvant et on chromatogra¬ phie le composé obtenu (silice 230-400 mesh ASTM) . On procède ensuite comme pour (30) et on recristallise du méthanol le chlorhydrate obtenu. On isole 2,3 g (Rdt = 29 %) .

20 F = 187-188'C (déc), [α] _D = +11,8 (c 0,6 eau).

Analyse C

Cale. 35,14 Tr. 35,2

Exemple 39 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-N-[(t- butoxy)carbonyl]-, amide du 2-amino, 2-déoxy, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (41) :

On agite à température ambiante une solution de 4,15 g (21,8 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-2-déoxy-D- glucitol-2-amino-5-nitrate dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 6,4 g (21,8 mmoles) de

N-t-Boc-S-acétamidométhyl-L-cystéine, 4,53 g (21,9 mmoles) de DCC et 2,95 g (21,8 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM). Le composé isolé est recristallisé dans l'acétate d'ethyle ,- on obtient 4,5 g (Rdt = 44 %) .

20 F = 90-92'C, [α] _D = +78,1 (c 0,6 éthanol).

Exemple 40 : L-cystéine, S-[(acétylamino)méthyl]-, amide du 2-amino, 2-déoxy, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glu- citol, monochlorhydrate (42) : A 23 ml d'une solution d'acide chlorhydrique

2,2 N dans le méthanol, on ajoute 4,3 g de composé précé¬ dent (41) . On agite 18 heures à température ambiante et on concentre la solution avant de la chromatographier sur silice (230-400 mesh ASTM) . Le composé isolé est recris- tallisé dans l'éthanol ; on obtient 3,1 g (Rdt = 83 %) .

20 F = 94-95'C, [α] _D = +74,8 (c 0,6 eau).

Analyse C H N Cl

Cale. (0,8 H ₂ 0) 34,71 5,23 13,49 8,53 Tr. 34,7 5,4 13,3 8,6

Exemple 41 : L-méthionine, N-[(t-butoxy)carbonyl]-, amide du 2-amino, 2-déoxy, 5-0-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D-glu- citol (43) :

On agite à température ambiante une solution de 3,26 g (18 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-2-déoxy-D-glu- citol-2-amino-5-nitrate dans 170 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 4,5 g (18 mmoles) de N- t-Boc-L-méthionine, 7,65 g (18 mmoles) de CMC et 2,42 g (18 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on ajoute du dichloromethane et on procède comme pour la préparation de (1). On isole 5,4 g d'un solide qui est

recristallisé dans le mélange éthanol-éther diiso¬ propylique (1-4). On obtient 2,55 g (Rdt = 34 %) .

20 F = 114 ^* C, [α] _D = +67,6 (c 0,6 éthanol). Analyse

Le traitement de ce composé par une solution d'acide chlorhydrique 1,7 N dans le méthanol conduit au chlorhydrate correspondant (44) .

Exemple 42 2-[[2-[(phényl éthyl)thio]benzoyl]amino]-, 2-déoxy, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D-glucitol (45) :

On agite à température ambiante une solution de 3,5 g (18,4 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-2-déoxy-D- glucitol-2-amino-5-nitrate dans 160 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 4,5 g (18,4 mmoles) d'acide thiosalicylique S-benzylé et 3,8 g (18,4 mmoles) de DCC. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie le résidu sur silice (230-400 mesh ASTM) et on recristallise le composé isolé dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropy¬ lique. On obtient 2,2 g (Rdt = 36 %) .

20 F = 86-90'C, [α] _D = +64,8 (c 0,6 éthanol). Analyse C H N

Cale. 57,68 4,84 6,72

Tr. 57,7 4,8 6,6

Exemple 43 : 5-[t(3-acétyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (51) :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (10,5 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 80 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 1,84 g (10,5 mmoles) de N-acétyl-'L-thioproline, 4,45 g (10,5 mmoles) de CMC et

1,42 g (10,5 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on ajoute 50 ml de dichloromethane et on effectue les

lavages comme pour (1) . Après séchage de la phase orga¬ nique sur sulfate de sodium, filtration et évaporation du solvant, le solide obtenu est recristallisé dans l'acé¬ tate d'ethyle. On obtient 1,6 g de produit (Rdt = 44 %) . 0

F = 169 ^* C, [αl _D = -62,0 (c 1, éthanol).

Analyse C H N

Cale. 41,50 4,93 12,10

Tr. 41,4 4,9 12,1 Exemple 44 : 5-[[(3-benzoyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol

(52) :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (10,5 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 100 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2,5 g (10,5 mmoles) de

N-benzoyl-L-thioproline, 2,16 g (10,5 mmoles) de DCC et

1,42 g (10,5 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-

400 mesh ASTM) et le produit isolé est recristallisé dans le méthanol ; on obtient 2,04 g de composé (Rdt = 40 %) .

20 F = 166-167'C, [α] _D = -106,9 (c 1, DMSO) .

Analyse C H N

Cale. 49,87 4,68 10,26

Tr. 49,7 4,6 10,2

Exemple 45 : 5-[[(3-t-butoxycarbonyl-2-méthyl-4-L- thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro,

1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (53) :

On agite à température ambiante une solution de 3 g (15,7 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 120 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,9 g (15,7 mmoles) de

N-t-Boc-2-méthyl-L-thioproline, 3,26 g (15,7 mmoles) de

DCC et 2,13 g (15,7 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de

réaction et filtration du DCU, on ajoute 80 ml de dichlo¬ romethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM). On isole 5,6 g d'un solide blanc qui est recristallisé dans l'acétate d'ethyle. On obtient 4,17 g de produit (Rdt = 63 %) . La RMN indique une seule configuration pour le carbone 2.

20 F = 129-130'C, [α] _D = -18,8 (c 1, éthanol). Analyse

Exemple 46 : 5-[[(2-méthyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (54) :

A 34 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 4,09 g du composé précédent. La solution est agitée 16 heures à température ambiante et le solide blanc formé est filtré puis lavé à l'éther. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 2,58 g de produit (Rdt = 74 %) . La RMN montre qu'il correspond à un mélange de deux diastéréoisomères en 2.

20 F = 209 ^* C (déc.), [α] _D = -55,1 (c 1, eau) .

Analyse C

Cale. 37,13

Tr. 37,2

Exemple 47 : 5-[[(3-1-butoxycarbonyl-2-méthoxycarbonyl-4- L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro,

1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (55) :

On agite à température ambiante une solution de 1,73 g (9,1 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 50 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2,66 g (9,1 mmoles) de

N-t-Boc-2-méthoxycarbonyl-L-thioproline, 1,89 g

(9,1 mmoles) de DCC et 1,23 g (9,1 mmoles) d'HOBt. Après

24 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 50 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu huileux obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) . On isole 2,44 g d'un solide blanc qui est recristallisé dans le méthanol. On obtient 2,04 g de produit (Rdt = 48 %) . La RMN indique une seule configuration pour le carbone 2.

20

F = 132-133 ^* C, [αl _D = -13,9 (c 1, éthanol). Analyse

Cale. Tr. Exemple 48 : 5-[[3-t-butoxycarbonyl-2-phényl-4-L- thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (56) :

On agite à température ambiante une solution de 5 g (26,29 mmoles) de 1,4:3,6-dianhydro-5-déoxy-L- iditol-5-amino-2-nitrate dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 8,1 g (26,29 mmoles) de N-t-Boc-2-phényl-L-thioproline, 5,4 g (26,29 mmoles) de DCC et 3,6 g (26,29 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu huileux obtenu après évaporation est chro- matographié sur silice (230-400 mesh ASTM) . On isole 10,7 g d'un solide blanc qui est recristallisé dans l'acétate d'ethyle. On obtient 9,3 g de produit (Rdt = 73 %) . La RMN indique une seule configuration pour le carbone 2.

Exemple 49 : 5-[[(2-phényl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (57) :

A 15 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2 g du composé pré¬ cédent. La solution est agitée 16 heures à température ambiante et . après évaporation du solvant, on récupère 1,66 g d'un solide blanc. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 0,95 g de produit (Rdt = 50 %) . La RMN montre qu'il correspond à un mélange de deux diastéréoisomères en 2.

F = 197 ^* C (déc.) , [α]

Analyse Cale. (0,6 H ₂ 0) Tr. Exemple 50 : 5-[[(3-t-butoxycarbonyl-2-butyl-4-L- thiazolidinyl) carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (58) : On agite à température ambiante une solution de 4 g (21 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L-iditol- 5-amino-2-nitrate dans 100 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 6,08 g (21 mmoles) de N-t-Boc-2- butyl-L-thioproline, 4,34 g (21 mmoles) de DCC et 2,84 g (21 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et fil¬ tration du DCU, on ajoute 120 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu huileux obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM). On isole 7,8 g d'un solide blanc qui est recristallisé dans un mélange d'acétate d'ethyle et d'éther de pétrole. On obtient 4,76 g de produit (Rdt = 49 %) . La RMN indique une seule configuration pour le carbone 2.

20 F = 91-92'C, [α] _n = +4,3 (c 1, éthanol).

Analyse

Exemple 51 : 5-[[(2-butyl-4-L-thiazolidinyl) carbonyl] 5 amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (59) :

A 28 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 3,8 g du composé précédent. La solution est agité 16 heures à température 10 ambiante et le solide blanc formé est filtré, puis lavé à l'éther. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 2,33 g de produit (Rdt = 71 %) . La RMN montre qu'il correspond à un mélange de deux diastéréoisomères en 2.

15

F = 198-200'C (déc.) [< ]D°= -34,2 (C 1, DMSO) Analyse C H

Cale. 42,31 6,09

Tr. 42,1 6,0

20 ITI - SYNTHESE DES COMPOSES DE FORMULE I v c n ≈ 1. III-a : R-CO + A-Y-B :

Le Tableau III ci-après montre les différents dérivés synthétisés.

25 TABLEAU III

TABLEAU III

Exemple 52 : 5-[[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L- thiazolidinyl) carbonyl] amino] 1-oxo éthyl] amino]-, 5- déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (60) :

On agite à température ambiante une solution de 1 g (4,05 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 35 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes¬ sivement 0,94 g (4,05 mmoles) de N-t-Boc-L-thioproline, 0,83 g (4,05 mmoles) de DCC et 0,55 g (4,05 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU et évapore le solvant. On chromatographie l'huile sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 1,8 g d'une huile qui cristallise. Le solide obtenu est recristallisé dans le

mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique, puis lavé à l'éther de pétrole. On obtient 1,33 g de produit (Rdt = 71 %) .

20 F = 127-129 ^* C, [α] _D = -38,3 (c 0,6, éthanol).

Analyse

Exemple 53 : 5-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl)carbonyl] amino] 1-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (46) : * Méthode A :

A 132 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 18 g du composé précédent (60) . La solution est agitée 16 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide blanc formé est filtré, puis lavé à l'éther ; en concentrant les eaux mères, on récu¬ père un deuxième jet de produit qui est ajouté au pré¬ cédent. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 11,9 g de produit (Rdt = 76 %) .

* Méthode B :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (8,09 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 70 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes- sivement 1,07 g (8 mmoles) de -L-thioproline, 1,65 g

(8 mmoles) de DCC et 1,09 g (8 mmoles) d'HOBt. Après

24 heures de réaction, on filtre le DCU et on évapore le solvant. On chromatographie l'huile sur silice (230-

400 mesh ASTM) et on isole un composé qui est transformé en son chlorhydrate, comme pour (30) ,* le solide est chauffé à reflux dans l'acétate d'ethyle, filtré et

recristallisé du 67 %) .

F = 183 ^* C (déc), Analyse

Cale. Tr.

Exemple 54 : 5-[[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl] amino] l-(2-méthyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (61) :

On agite à température ambiante une solution de 5 g (19,1 mmoles) de la forme base correspondant à (8) dans 190 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes- sivement 4,5 g (19,1 mmoles) de N-t-Boc-L-thioproline, 4 g (19,1 mmoles) de DCC et 2,6 g (19,1 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU et évapore le solvant. On chromatographie l'huile sur silice (230- 400 mesh ASTM) et on isole une huile qui est solubilisée à chaud dans l'acétate d'ethyle ; on cristallise ainsi le DCU restant. On ajoute au filtrat l'éther diisopropy¬ lique, ce qui permet de récupérer 6,5 g de composé attendu. Le solide ainsi obtenu est recristallisé deux fois dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropy- ligue. On obtient 4,8 g de produit (Rdt = 52 %) .

Exemple 55 : 5-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] l-(2-méthyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (62) :

A 14 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2 g du composé pré¬ cédent (61) . La solution est agitée 5 heures à tempéra¬ ture ambiante et le solide blanc formé est filtré puis

lavé à l'éther. Après recristallisation dans l'éthanol puis dans le méthanol, on obtient 0,95 g de produit (Rdt = 54 %) .

Exemple 56 : 5-[[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl] amino] l-(2-isopropyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (63) :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (6,9 mmoles) de la forme base correspondant à (10) dans 70 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes¬ sivement 1,63 g (6,9 mmoles) de N-t-Boc-L-thioproline, 1,43 g (6,9 mmoles) de DCC et 0,95 g (6,9 mmoles) d'HOBt. Après 20 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 80 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu huileux obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 2,55 g d'une pâte blanche qui est recristallisée dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique. On obtient 1,95 g de produit (Rdt = 56 %) .

20 F = 108-109 ^* C, [α] _D = -57,5 (c 0,6, éthanol).

Analyse C H N

Cale. 47,61 6,39 11,10 Tr. 47,5 6,4 11,2

Exemple 57 : 5-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] l-(2-isopropyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (64) : A 50 ml d'une solution d'acide chlorhydrique

2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 5,9 g du composé précédent (63) . La solution est agitée 3 heures à tempe-

rature ambiante et le solide blanc formé est filtré puis lavé à l'éther. Après recristallisation dans l'éthanol, on obtient 3 g de produit (Rdt = 58 %) .

F = 169'C (déc) , Analyse

Cale. Tr. Exemple 58 5-[[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl] amino] l-(2-benzyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (65) :

On agite à température ambiante une solution de 5 g (14,8 mmoles) de la forme base correspondant à (12) dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,45 g (14,8 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 3,05 g (14,8 mmoles) de DCC et 2 g (14,8 mmoles) d'HOBt. Après 20 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu pâteux obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 8,5 g d'une pâte blanche qui est recristallisée dans l'acétate d'ethyle. On obtient 5,2 g de produit (Rdt = 63 %) .

20 F = 139-140 ^* C, [α] _D = -68,7 (c 1, éthanol)

Exemple 59 : 5-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] l-(2-benzyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlorhydrate (66)

A 23 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans • 1'acétate d'ethyle, on ajoute 3,65 g du composé précédent (65) . La solution est agitée 15 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide pâteux formé est récupéré, lavé à l'acétate d'ethyle puis à l'éther. Après recris-

tallisation dans l'éthanol, on obtient 1,8 g de produit

(Rdt = 55 %) .

20 F = 142-152 'C (déc) , [α] _D = -25, 0 (c 1, eau) . Analyse C H N Cl

Cale. (0,8 H ₂ 0) 45,33 5,32 11,13 7,04

Tr. 45,1 5,0 11,5 6,9

Exemple 60 : 5-_[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl] amino] l-(2-(2'-thiométhyl) éthyl (2S))- oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-L-iditol (67) :

On agite à température ambiante une solution de 7,2 g (22,4 mmoles) de la forme base correspondant à

(38) dans 220 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 5,22 g (22,4 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 4,62 g (22,4 mmoles) de DCC et 3,03 g

(22,4 mmoles) d'HOBt. Après 20 heures de réaction, on filtre le DCU et évapore le solvant. Le résidu huileux est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 11,9 g d'un solide blanc qui est recristallisé dans le mélange acétate d'éthyle-éther diisopropylique. On obtient 9,90 g de produit (Rdt = 82 %) .

20

F = 141 ^* C, [α] _D = -54,66 (c 0,6, éthanol). Analyse C H N

Cale. 44,76 6,01 10,44

Tr. 44,9 6,0 10,3

Exemple 61 : 5-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] l-(2-(2'-thiométhyl) éthyl (2S))-oxo éthyl] amino]-, 5- déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol, monochlor- hydrate (68) :

A 68 ml d'une solution d'acide chlorhydrique

IN dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 8,5 g du composé précédent (67) . La solution est agitée 16 heures à tempé- rature ambiante et le solide blanc formé est filtré, lavé à l'acétate d'ethyle puis à l'éther. Après recristallisa-

tion dans le méthanol, on obtient 3,7 g de produit (Rdt = 49 %) .

F = 149 ^* C, Analyse

Cale. Tr.

Exemple 62 : 5-[[[N-[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl]-2-pyrrolidinyl (2S)] carbonyl] amino]-, 5- déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (69) :

On agite à température ambiante une solution de 5,11 g (17,7 mmoles) de la forme base correspondant à (14) dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 4,12 g (17,7 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 3,65 g (17,7 mmoles) de DCC et 2,39 g (17,7 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et fil¬ tration du DCU, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le solide jaune obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 7,8 g d'une huile qui cristallise. Après recristallisation dans l'acétate d'ethyle, on obtient 5,4 g de produit (Rdt = 60 %) .

F = 161-162'C, [α] _D = -126,4 (c 1, éthanol). Analyse C H N

Cale. 47,80 6,02 11,15

Tr. 48,0 5,9 11,2

Exemple 63 : 5-[[[N-[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl]-2- pyrrolidinyl (2S)] carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol monochlorhydrate (70) :

A 20 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 2,86 g du composé précédent (69) . La solution est agitée 18 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide blanc formé est filtré puis lavé a l'éther. Après recristallisation dans le méthanol, on obtient 2,06 g de produit (Rdt = 82 %) .

20 F = 185 ' C (déc) , [α] _D = -133 (c 1, eau)

Exemple 64 : 2-[[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] 1-oxo éthyl] amino]-, 2-déoxy, 5-0-nitro, 1,4:3,6-dianhy- dro-D-glucitol, monochlorhydrate (71) :

On agite à température ambiante une suspension de 5,3 g (21,4 mmoles) de la forme base correspondant à

(16) dans 200 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 5 g (21,4 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 4,42 g (21,4 mmoles) de DCC et 2,9 g

(21,4 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et fil- tration du DCU, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230- 400 mesh ASTM) et on isole 5,75 g (Rdt = 58 %) d'une mousse sèche qui n'a pu être cristallisée. Le produit est traité directement.

A 41 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 5,75 g du composé précédent. La solution est agitée 16 heures à température ambiante et le solide blanc formé est filtré, lavé à l'acétate d'ethyle puis à l'éther. Après recristallisa¬ tion dans le méthanol, on obtient 2,6 g de produit (Rdt = 52 %) .

20 F = 195 ^* C (déc), [α] _D = +24,5 (c 1, eau). Analyse

Cale.

Tr.

Exemple 65 : 2-0-[2-[[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl] amino] 1-oxo éthyl]-, 5-O-nitro, 1,4:3,6- dianhydro-D-glucitol (72) :

On agite à température ambiante une suspension de 2,07 g (7,27 mmoles) de (2) dans 60 ml de dichloro-

méthane anhydre. On ajoute 1,03 ml de triéthylamine

(7,33 mmoles), ce qui provoque la dissolution du solide.

On ajoute successivement 1,7 g (7,27 mmoles) de N-t-Boc-

L-thioproline, 3,08 g (7,27 mmoles) de CMC et 0,98 g (7,27 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on ajoute 140 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . L'huile obtenue après évaporation est chromatographiée sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 1,97 g d'un solide qui est recristallisé dans le mélange acétate d'éthyle-éther de pétrole. On obtient

1,71 g de produit (Rdt = 50 %) .

20

F = 80-82 ^* C, [α] _D = -11,1 (c 1, éthanol).

Analyse C H N Cale. 44,06 5,44 9,07

Tr. 44,1 5,3 9,0

Exemple 66 2-0-[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] 1-oxo éthyl]-, 5-O-nitro, l,4:3,6-dianhydro-D- glucitol, monochlorhydrate (73) : On agite à température ambiante une suspension de 3,7 g (13 mmoles) de (2) dans 100 ml de dichloro¬ methane anhydre. On ajoute 1,83 ml de triéthylamine (13 mmoles), ce qui provoque la dissolution du solide. On ajoute successivement 3,03 g (22,75 mmoles) de -L-thioproline, 2,68 g (13 mmoles) de DCC et 1,76 g (13 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on filtre le DCU et évapore le solvant. Le résidu est chro¬ matographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 4,1 g d'une huile. Celle-ci est diluée dans 80 ml de dichloromethane et on fait barboter du chlorure d'hydro¬ gène pendant quelques secondes. Le chlorhydrate précipite sous forme de pâte ; après élimination du solvant et lavage de la pâte au dichloromethane puis à l'éther, on observe un durcissement du produit qui forme une poudre fine après filtration. Après triturations et lavages à

l'hexane et à l'éther, on obtient finalement 2,84 g de produit (Rdt = 54 %) .

20 F = 103 ^* C, [α] _D = +24,2 (c 1, eau). Analyse C

Cale. (0,3 H ₂ 0 + 0,05 HCI) 35,41

Tr. 35,4

Exemple 67 : 5-0-[2-[[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl] amino] 1-oxo éthyl]-, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-D- glucitol, monochlorhydrate (74) :

On agite à température ambiante une suspension de 6,04 g (21,21 mmoles) de (3) dans 200 ml de dichloro¬ methane anhydre. On ajoute 2,98 ml de triéthylamine (21,21 mmoles), ce qui provoque la dissolution du solide. On ajoute successivement 4,95 g (21,21 mmoles) de N-t- Boc-L-thioproline, 8,99 g (21,21 mmoles) de CMC et 2,87 g (21,21 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction, on ajoute 100 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu obtenu après évapora- tion est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole 7,4 g d'une mousse sèche qui n'a pu être cristallisée. Le produit est traité directement.

A 62 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 7,2 g du composé précédent. La solution est agitée 18 heures à température ambiante et après élimination du solvant, le résidu est lavé à l'acétate puis à l'éther. Après cristallisation et recristallisation dans l'éthanol, on obtient 2,7 g de produit (Rdt = 43 %) . 20

F = 85 ^* C, [α] _D = +8,3 (c 1, eau).

Exemple 68 : 5-[ [2-[[(3-acétyl-4-L-thiazolidinyl) carbo¬ nyl] amino] 1-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (75) :

On agite à température ambiante une solution de 3 g (12,13 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 120 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 2,13 g (12,13 mmoles) de N-acétyl-L-thio- proline, 2,5 g (12,13 mmoles) de DCC et 1,64 g (12,13 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 80 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . Le résidu huileux obtenu après évaporation est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) . On isole un solide qui est recris¬ tallisé successivement dans l'acétate d'ethyle puis dans le méthanol. On obtient 2,2 g de produit (Rdt = 44 %) .

Exemple 69 : 5-[ [2- [ [(3-benzoyl-4-L-thiazolidinyl) carbo¬ nyl] amino] 1-oxo éthyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (76) :

On agite à température ambiante une solution de 1 g (4,05 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 60 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes¬ sivement 1,24 g (5,25 mmoles) de N-benzoyl-L-thioproline, 1,08 g (5,25 mmoles) de DCC et 0,71 g (5,25 mmoles) d'HOBt. Après 24 heures de réaction et filtration du DCU, on ajoute 40 ml de dichloromethane et on effectue les lavages comme pour (1) . On chromatographie le résidu obtenu après évaporation sur silice (230-400 mesh ASTM) . On isole un solide blanc qui est recristallisé dans l'éthanol. On obtient 0,65 g de produit (Rdt = 26 %) . F = 135-136'C.

Exemple 70 : 5-[[[[2-[(phénylméthyl)thio]benzoyl]amino]l- oxo éthyl]amino]-, 5-déoxy, 2-0-nitro, 1,4:3,6-dianhydro- L-iditol (47) :

On agite à température ambiante une solution de 2 g (8,09 mmoles) de la forme base correspondant à (6) dans 70 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute succes¬ sivement 2 g (8,19 mmoles) d'acide thiosalicylique S-ben- zylé et 1,68 g (8,19 mmoles) de DCC. Après 24 heures de réaction, filtration du DCU et évaporation du solvant, on chromatographie l'huile obtenue (silice 230-400 mesh ASTM) ,- le composé isolé est recristallisé dans le métha¬ nol. On obtient 2,08 g (Rdt = 54 %) .

20 F = 113 ^* C, [α] _D = +22,5 (c 0,4 éthanol).

Analyse

Cale.

Tr. Ill-b : R-CO-A + Y-B :

Le Tableau IV ci-après montre le dérivé syn¬ thétisé suivant cette méthode.

TABLEAU IV

Exemple 71 : 5-[[2-[[(3-formyl-2,2-diméthyl-4-L-thiazo- lidinyl)carbonyl]amino]1-oxo éthyl]amino]-, 5-déoxy, 2-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (48) :

On agite à température ambiante une solution de 2,85 g (15 mmoles) de 1,4:3, 6-dianhydro-5-déoxy-L-idi- tol-5-amino-2-nitrate dans 90 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,07 g (12,4 mmoles ⁾ de N- _[ 4-(3-forτ _t ryl-2-2 diméthyl-L-thiazolidine)carbonyl]-, glycine, 2,58 g (12,5 mmoles) de DCC et 1,68 g (12,4 mmoles) d'HOBt. Après 22 heures de réaction, on filtre le DCU et on évapore le solvant ; on chromatogra ^¬ phie le résidu huileux sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole le composé qui est recristallisé dans le métha ^¬ nol puis dans l'éthanol. On obtient 2,82 g (Rdt = 54 %) . ₂ 0

F = 142-143 ^* C, [α] _D = +29,3 (c 2, acétone).

Analyse C H N

Cale. 43,05 5,30 13,39

Tr. 43,2 5,2 13,4 IV - SYNTHESE DES COMPOSES DE FORMULE I a ec n = 0 et

R = CO-X.

Exemple 72 5-[[[N-[(3-t-butoxycarbonyl-4-L-thiazolidi- nyl) carbonyl]-4-thiazolidinyl (4R)] carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-O-nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol (77) :

On agite à température ambiante une solution de 4,65 g (15,2 mmoles) de la forme base correspondant à

(30) dans 250 ml de dichloromethane anhydre. On ajoute successivement 3,55 g (15,2 mmoles) de N-t-Boc-L-thio- proline, 3,14 g (15,2 mmoles) de DCC et 2,06 g

(15,2 mmoles) d'HOBt. Après 48 heures de réaction, on filtre le DCU et évapore le solvant. Le résidu huileux est chromatographie sur silice (230-400 mesh ASTM) et on isole un solide blanc qui est recristallisé dans le mélange méthanol-éther _ diisopropylique, puis dans le méthanol. On obtient 3,2 g de produit (Rdt = 40 %) .

F = 156 ^* C, [α_D°= -159,1 (c 1, éthanol) .

Analyse N

10,76 10,8 Exemple 73 : 5-[[[N-[(4-L-thiazolidinyl) carbonyl]-4- thiazolidinyl (4R)] carbonyl] amino]-, 5-déoxy, 2-0- nitro, 1,4:3,6-dianhydro-L-iditol monochlorhydrate (78) :

A 12 ml d'une solution d'acide chlorhydrique 2N dans l'acétate d'ethyle, on ajoute 1,8 g du composé précédent (77) . La solution est agitée 18 heures à tempé¬ rature ambiante et le solide blanc formé est filtré, lavé à l'acétate d'ethyle puis à l'éther. Après recristallisa¬ tion dans le méthanol, on obtient 0,83 g de produit (Rdt = 52 %) . 20

F = 174 ^* C (déc), [ct] _D = -174,9 (c 1, eau) .

Analyse

Cale.

Tr. COMPTE RENPV PflftRMftCOLOglOUE CONCERNANT LES COMPOSES

SELON L'INVENTION.

TESTS PHARHACOLOGIQUES :

EffîlF?'?- ^{A :} Effet vasorelaxant des composés conformes à l'invention sur des vaisseaux isolés. Des rats Wistar adultes, pesant entre 250 et

350 g, sont anesthésiés par injection intrapéritonéale de pentobarbital sodique (30 mg/kg) . L'aorte thoracique est

prélevée rapidement et placée dans une solution de tampon bicarbonate de type Krebs-Ringer réfrigérée et oxygénée (composition [rtiM] : NaCl, 118 ; KC1, 4,7 ; CaCl ₂ , 2,5 ; MgS0 ₄ , 1,2 ; KH ₂ P0 ₄ , 1,2 ; NaHC0 ₃ , 25,0 ; EDTA calcium disodique, 0,026 ; glucose, 11,1). L'aorte est disséquée dans le but d'enlever le tissu conjonctif, puis section¬ née en 6 anneaux (longueur 5-10 mm). L'enthothélium est ôté par abrasion modérée de la surface intimale des seg¬ ments aortiques à l'aide d'une paire de pinces. Ces seg- ments sont ensuite placés entre deux crochets dans une cuve à organes isolés remplie de 25 ml de tampon bicarbo¬ nate (pH 7,4) thermostaté à 37 ^* C et oxygénée à l'aide d'un mélange 95 % 0 ₂ -5 % C0 ₂ (pH 7,4). Un des crochets est fixé à un point fixe, tandis que le second est rac- cordé à un transduceur, dans le but de mesurer les varia¬ tions de tension isométrique (exprimées en grammes) . Après une période d'équilibration de 30 min, les segments sont étirés progressivement de façon à atteindre le niveau de tension basale pour lequel la réponse contrac- tile à la noradrénaline (10 ^~7 M) est maximale (tension optimale ; moyenne 2 g). L'absence d'endothélium est vérifiée par addition d'une concentration unique d'acétylcholine (10 ^" ^ M), après pré-contraction des vais¬ seaux par la noradrénaline (10 ^" ' M). L'intégrité du muscle lisse vasculaire est également vérifiée en ajou¬ tant une concentration unique d'un vasodilatateur dont la réponse est indépendante de la présence de 1'endothélium, le SIN-1 (10 ^~5 M) . Après cette procédure initiale, les aortes sont lavées, équilibrées pendant une période de 30 min, puis de nouveau contractées (noradrénaline 10 ^~7 M) . L'effet relaxant de la substance à tester est ensuite évalué en ajoutant des concentrations croissantes de cette substance (de 10~° à 10 ^~4 M). Le maximum d'inhi¬ bition de la contraction provoquée par la noradrénaline (exprimée en pourcentage) est ensuite calculé ("relaxation maximale"). Lorsque cette relaxation maxi-

maie est supérieure à 50 %, la concentration de substance testée produisant une inhibition de 50 % de la contrac¬ tion maximale (IC ₅₀ ) est calculée. Le Tableau V suivant rassemble les IC50 et les pourcentages de relaxation maximale des différents composés testés.

TABLEAU V

D'une façon générale, les produits qui présen¬ tent une relaxation maximale supérieure à 80 % avec une IC50 inférieure à 50 μM sont considérés comme particuliè¬ rement intéressants ; toutefois, ce Tableau ne prend pas en compte les données concernant la tachyphylaxie, et certains produits tel que le (46) peuvent, si l'on tient compte de ce critère supplémentaire, présenter un inté¬ rêt.

Exemple B : Effets hémodynamiques des composés conformes à l'invention chez le chien éveillé hypertendu (n = 3) .

Le Tableau VI suivant et la figure 1 montrent plus particulièrement l'évolution en fonction du temps de l'effet du composé (46) sur les divers paramètres hémo¬ dynamiques, le composé étant administré p.o. à la dose de 3 mg/kg. Le composé (46) diminue de manière significa¬ tive, prononcée et prolongée la pression artérielle sys- tolique (PAs) et la pression télédiastolique du ventri¬ cule gauche (PTDVG) . Les figures 1 (figures la, lb, le, ld, le) illustrent ces résultats et montrent les varia¬ tions (Δ) des paramètres hémodynamiques suivants : PAs (figure la), PAd (figure lb) , PTDVG (figure le), FC (figure ld) et activité vasorelaxante (figure le) .

63 TABLEAU VI

B . Mnvp _rτ - _f| - _: (π = 3 ₎

^PA s = ^p ression artérielle systolique

^PA d = ^p ression artérielle diastolique

PTD ^VG = ^p ression telediastolique du ventricule _g auch _. d ^p /dt = activité vasorelaxante FC = fréquence cardiaque vb = valeur basale

^p .-jcffτtrpi«a ç _: Effets hémodynamiqτ_.es des composés conformes à l'invention chez le porc ou le chien ânesthésié.

Les porcs sont de race "German land" (20- 26 kg) et sont utilisés après un jeûne d'une nuit. Les chiens, pesant entre 16 et 26 kg, sont les descendants d'un croisement de Labrador et de Harrier.

Pour les porcs, la sédation, l'analgésie et l'anesthésie sont induites par la kétamine HCI (20 mg/kg i.m.), le méthonidate HCI (10 mg/kg i.m.), la xylacine HCI (3 mg/kg i.m.) et du pentobarbital sodique (25- 30 mg/kg en bolus i.v. ou 0,16 mg/kg/min en perfusion i.v) . Pour les chiens, l'anesthésie est induite à l'aide de pentobarbital sodique (45 mg/kg i.v.) et maintenue avec une perfusion i.v. (débit 8 mg/kg/h) . Les porcs ou les chiens sont mis sous respira¬ tion artificielle à l'air ambiant. L'analyse des gaz du sang (p0 , pC0 ₂ ) est réalisée à intervalles de temps réguliers et de peut être délivré via le respi¬ rateur, si nécessaire. Les paramètres hémodynamiques enregistrés in¬ cluent la pression ventriculaire gauche (PVG ; cathéter Millar PC350 Tip inséré via l'artère carotidienne) , la pression sanguine systémique (PAs, PAd ; cathéter •plein dans une artère fémorale) , la pression de fin de diastole ventriculaire gauche (PTDVG) , la contractilité ventricu¬ laire (PVGdp/dt- _j ^- _ς ) et la fréquence cardiaque (FC) .

Après une période d'équilibration de l'ordre de 45 minutes, les composés étudiés sont administrés par voie intraduodénale (i.d.) ou par voie intraveineuse (i.v.) chez plusieurs animaux (1 à 4). Les variables hémodynamiques sont enregistrées de manière continue pen¬ dant 1 à 3 heures, en fonction de la durée d'action des composés.

Les effets des composés étudiés sont présentés comme la différence absolue par rapport à la valeur

basale (vb) mesurée avant l'administration des composés et sont présentés sur le Tableau VII (a, b, c) .

Une activité antiangineuse s'apprécie par une diminution des PAs et des PTDVG (baisse du retour vei¬ neux) .

TABLEAU VII a (i.d.) Effets hémodynamiques chez le Porc.

TABLEAU VII b (i.v.) Effets hémodynamiques chez le Porc

TABLEAU VII c (i.d.)

Effets hémodynamiques chez le Chien.

TABLEAU VII d (i.v.) Effets hémodynamiques chez le Chien.

Exemple D : Mesure de l'activité relaxante des composés conformes à 1 ' invention sur les vaisseaux sanguins isolés de cobaye. L'artère pulmonaire de cobayes mâles (350-

500 g) est isolée et coupée en bandelettes spiralées

(1 mm de large, 15 mm de long) . Celles-ci sont disposées dans une cuve à organes à 37 ^* C remplie d'une solution de

NaCl à 0,9 % et oxygénée à l'aide d'un mélange 95 % 0 - 5 % C0 ₂ (Tyrode, pH 7,4), pour mesurer les variations de longueur.

Après avoir enlevé le calcium des tissus (Tyrode sans calcium et EDTA 0,2 mM) , les bandes sont dé¬ polarisées en présence d'une solution concentrée en ions K+ (40 mM) , qui est réalisée en remplaçant le NaCl par des quantités équimolaires de KCl, puis une contraction de longue durée est induite par des ions Ca ²⁺ (0,5 mM) .

Les composés étudiés sont ensuite introduits dans la cuve à organes à des concentrations croissantes.

Chaque composé est testé sur au moins quatre bandelettes spiralées de vaisseau.

La puissance de relaxation des composés est mesurée en calculant les concentrations qui donnent une relaxation de 50 % (IC5 _Q ), à partir des courbes concen¬ tration/effet. Le Tableau VIII suivant illustre ces ré¬ sultats.

TABLEAU VIII Effets relaxant sur le vaisseau pulmonaire isolé chez le coba e,

'IC5 _Q illustre l'effet relaxant sur le vaisseau pulmo¬ naire isolé.

Exemple E : Absence de tachyphylaxie chez le chien. Comparaison avec le mononitrate d'isosorbide (IS-5-MN) .

Le produit (46) est testé dans un modèle de tachyphylaxie, chez le chien anesthésié. L'IS-5-MN est utilisé comme substance de référence.

8 chiens de chaque sexe, pesant entre 16 et 24 kg sont utilisés. Ces chiens sont les descendants d'un croisement de Labrador et Harrier. L'anesthésie est in¬ duite à l'aide de pentobarbital sodique (45 mg/kg i.v.) et maintenue avec une perfusion i.v. (débit : 8 mg/kg/h) . Les animaux sont ventilés, à l'aide d'un respirateur de type "Bird Mark 7", utilisant l'air ambiant, et cathété- risés. La pression artérielle périphérique systémique

(PAs) est mesurée dans une artère fémorale au moyen d'un transduceur de pressions (Combitrans, B. Braun Melsungen AG, 3508 Delsungen, Allemagne) . Les gaz du sang artériel sont mesurés à intervalles réguliers. Le composé (46) est administré par voie intraduodénale (i.d.) à la dose de 0,75 mg/kg et sous un volume de 10 ml/animal, dissous dans de l'eau. L'IS-5-MN est également dissous dans l'eau et donné par voie i.d. à la dose de 5 mg/kg dans un volume de 10 ml/animal. Trois heures (dans le cas de l'IS-5-MN) ou quatre heures (dans le cas du (46) ) après la première ad¬ ministration, les composés sont réadministrés à la même dose et par la même voie. Le paramètre hémodynamique choisi pour l'étude de la tachyphylaxie est la pression artérielle systolique (PAs) , dans la mesure où ce para¬ mètre est très sensible à l'administration des composés.

Au moment de la seconde administration des composés conformes à l'invention, la PAs est revenue ap¬ proximativement à la valeur contrôle (avant la première administration) .

Les résultats obtenus sont présentés dans les Tableaux IX et X, qui correspondent aux figures 2 [2a (témoin : IS-5-MN) et 2b (composé (46) ) ] qui illustrent l'effet en fonction du temps d'une administration réité- rée de ces produits sur la PAs chez le chien anesthésié ; les courbes (-•-) correspondent à la première administra¬ tion et les courbes (...O...) correspondent à la deuxième administration.

TABLEAU IX.A 1ère Administration de IS-5-MN 1. Paramètres :

2. Moyennes

TABLEAU IX . B 2ème Administration de IS-5-MN 1 . Paramètres :

?.. Moyennes (n = 4!

72

TABLEAU X.A 1ère Administration du composé (46) 1. Param.^- _rff . _:

73

TABLEAU X.B 2ème Administration du composé (46) ParaniBt-.rPfi :

2. MnvPnnP.ς _: (n = 4)

A la première administration, l'IS-5-MN à 5 mg/kg et le composé (46) à 0,75 mg/kg induisent, en moyenne, une chute similaire (-30 mm de Hg) de la PAs.

L'effet maximal est atteint 5 minutes après l'administration pour l'IS-5-MN et 60 min après pour le composé (46) . La durée d'action du composé (46) est plus longue, raison pour laquelle 1'intervalle est de 4 heures entre la première et la deuxième administration. La deuxième administration de IS-5-MN entraîne une chute de la PA qui atteint son maximum à 5 min (-19 mm de Hg) sui¬ vie d'un retour rapide à la valeur contrôle. La deuxième administration du composé (46) entraîne une chute de la PA, qui atteint son maximum à 60 min (-33 mm de Hg) .

L'étude est interrompue 120 minutes après la deuxième administration.

Ces résultats confirment les données anté¬ rieures en ce qui concerne l'IS-5-MN (développement d'une tachyphylaxie après une administration répétée) , chez le chien. Ils montrent par ailleurs, l'absence de déve¬ loppement d'une tachyphylaxie après l'administration de (46).

Ainsi que cela ressort de ce qui précède, 1'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui vien¬ nent d'être décrits de façon plus explicite ; elle en em¬ brasse au contraire toutes les variantes qui peuvent ve¬ nir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écar¬ ter du cadre, ni de la portée, de la présente invention.