DOMAINE DE L'INVENTION

La présente invention propose un nouveau matériau solide à base de polymère contenant des unités cellobiose au moins partiellement oxydées, susceptible d'être utilisé dans le domaine médical, notamment en tant que compresse. Un tel matériau, avantageusement un textile, peut être obtenu en soumettant un matériau solide à base d'un polymère contenant des unités cellobiose à un procédé en au moins deux étapes : une mise en contact avec un mélange oxydant comprenant un hypohalite, un halite, et un sel d'oxoammonium ou un précurseur dudit sel ; la mise en contact du matériau ainsi traité avec une solution d'acide périodique ou de l'un de ses sels ; puis éventuellement la mise en contact du matériau ainsi traité avec un halite.

ETAT DE LA TECHNIQUE

Les compresses hémostatiques chirurgicales, ou compresses, doivent être hémostatiques, résorbables et facilement manipulables par les chirurgiens. Ces propriétés peuvent être obtenues grâce à des textiles à base de cellulose oxydée.

Pour rappel, la cellulose est un homopolymère appartenant à la classe des polysaccharides. Elle est formée d'un enchaînement linéaire de molécules de glucose ou unités anhydroglucose (D-anhydroglucopyranose), reliées entre elles par des liaisons glycosidiques β-1,4. La cellulose peut être aussi définie comme un enchaînement d'unités cellobiose :

Cellobiose

Actuellement, de telles compresses sont obtenues en soumettant le textile à base de cellulose à l'action du N0 ₂ en présence de solvants, tel que décrit par exemple dans le document EP 0 492 990. Ainsi, le produit de référence, actuellement commercialisé sous le nom de Surgicel ^® , est obtenu à l'aide d'un tel procédé. Toutefois, cette technologie requiert des matières premières coûteuses, dangereuses et difficiles à recycler, ainsi qu'une installation exigeante. C'est pourquoi, il a été tenté de développer d'autres voies pour obtenir des compresses. Le document WO 2009/016325 décrit un procédé d'oxydation alternatif de la cellulose au sein d'un tissu, à l'aide d'un système catalytique oxydant comprenant du l-oxo-2,2,6,6- tétraméthylpipéridine-1 -oxyde (TEMPO), du NaBr et du NaClO. Cette réaction se déroule à basse température et à un pH basique devant être strictement contrôlé pendant la réaction.

Parallèlement, il est connu par exemple du document EP 2 216 345, que l'oxydation de la cellulose par un système oxydant comprenant du TEMPO, du NaClO et du NaC10 ₂ conduit à une cellulose partiellement oxydée sélectivement au niveau de l'alcool primaire en C ₆ , présentant un degré de polymérisation élevé, une bonne résistance mécanique et une bonne stabilité à la lumière.

Par ailleurs, Singh et al. ont décrit un procédé d'oxydation de la cellulose, basé sur l'utilisation du periodate de sodium. La cellulose ainsi traitée, qui présente des fonctions aldéhyde et une ouverture de cycle, montre une résorption in vivo lente. Ces fonctions aldéhyde peuvent être utilisées pour immobiliser notamment des enzymes d'intérêt.

Il existe toutefois un besoin évident de développer de nouvelles compresses de cellulose oxydée. Des propriétés recherchées pour de telles compresses sont notamment :

- des propriétés hémostatiques satisfaisantes ;

- une résorption contrôlable, avantageusement de l'ordre de 2 semaines après implantation dans l'organisme ;

- une bonne stabilité mécanique ;

- susceptibles d'être obtenues à l'aide d'un procédé peu coûteux et facilement transposable au niveau industriel.

EXPOSE DE L'INVENTION

La présente invention propose un nouveau matériau solide à base de cellulose oxydée, utilisable en tant que compresse et susceptible d'être obtenu grâce à un procédé original. Ainsi et selon un premier aspect, la présente invention propose un matériau solide à base d'un polymère contenant des unités cellobiose, dans lequel :

- au moins une partie des unités cellobiose présente au moins une des deux fonctions alcool primaire, portée par le carbone C ₆ , oxydée en fonction acide carboxylique ; et

- au moins une partie des unités cellobiose présente au moins un des deux cycles, ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ .

Dans le cadre de la présente invention, on entend par « matériau solide » aussi bien des fibres ou micro fibrilles, que des assemblages de fibres ou des fibres solidarisées, sous la forme d'un fil, ou sous la forme d'un tissu formé de fils, tissés ou tricotés par exemple, ou bien sous la forme d'un non tissé, ou bien sous la forme d'une nappe de fibres formant une matrice orientée, ou bien encore sous forme de mousse ou de poudre. Dans le cadre de la présente invention, on comprend par « fil », un assemblage linéaire de fibres (ou de microfilaments) liées entre elles de manière solidaire. Un fil de cellulose est donc à distinguer d'une fibre de cellulose, qui désigne un objet individuel et non un assemblage solidaire d'objets. Selon un mode de réalisation particulier, le matériau solide ne correspond pas à des fibres individualisées. Typiquement, un fil est obtenu par filage de fibres du même type, mais peut également être obtenu par filage de fibres différentes, comme par exemple des fibres de cellulose en combinaison avec des fibres synthétiques.

Dans un mode de réalisation privilégié, les fils sont mis sous forme de tissu à l'aide du tricotage. Différentes mailles peuvent être envisagées, notamment le jersey (classiquement tricoté avec un fil de 220 dtex à 42 filaments) ou le crochet (avantageusement tricoté avec du fil 110 dtex à 40 filaments).

De manière privilégiée, le matériau solide est un textile. Dans le cadre de l'invention, on entend par « textile » un assemblage de fils ou de fibres, avantageusement solidarisées entre eux ou entre elles, formant une entité solide et insoluble. Ainsi et de manière appropriée, le textile peut être un tissu, avantageusement obtenu par tissage ou tricotage de fils, ou un non tissé obtenu par assemblage de fibres.

Le polymère constitutif des fibres du matériau selon l'invention contient des unités cellobiose. Il peut par exemple s'agir de cellulose naturelle ou de cellulose modifiée. Dans le cas de la cellulose modifiée, il s'agit avantageusement de la viscose, qui correspond à de la cellulose régénérée.

Les fibres mises en œuvre selon l'invention sont obtenues par exemple à partir de cellulose naturelle, c'est-à-dire de fibres directement issues d'un végétal, soit en étant récoltées sur le végétal, soit en étant obtenues par un traitement mécanique du végétal, comme par un broyage, un pressage, un concassage et/ou une séparation. Les fibres de cellulose sont également des fibres de cellulose modifiée, c'est-à-dire de cellulose naturelle ou de cellulose naturelle solubilisée, ayant réagi avec un composant chimique.

Le terme « fibres de cellulose » inclut aussi, au sens de la présente invention, les fibres de cellulose régénérées, c'est-à-dire les fibres de cellulose naturelle, éventuellement modifiée, solubilisées dans un solvant, puis reformées sous forme de fibres. Des exemples de fibres de cellulose naturelle d'origine végétale sont le coton, le chanvre, le jute ou la pulpe de bois. Ces fibres de cellulose peuvent aussi être d'origine bactérienne.

Les fibres de cellulose artificielle sont obtenues par un procédé de traitement de la cellulose naturelle.

L'expression « à base d'un polymère contenant des unités cellobiose » signifie que ce polymère constitue l'ingrédient majeur voir unique du matériau. Toutefois, il n'est pas exclu que le matériau comprenne d'autres constituants, par exemple au moins un autre polymère ne contenant pas d'unités cellobiose tel que des polymères constitutifs des fibres synthétiques. Dans un mode de réalisation particulier, d'autres polymères contenant éventuellement des unités anhydroglucose peuvent être associés, tels que l'alginate, l'acide hyaluronique, l'amidon ou d'autres glycosaminoglycanes. On entend par « polymère contenant des unités cellobiose » un polymère qui comprend au moins deux unités cellobiose dans sa chaîne et dans un cas extrême qui est constitué uniquement d'unités cellobiose, tel que la cellulose.

Selon l'invention, ledit polymère est modifié, au moins partiellement, au niveau de ses unités cellobiose. Selon une première caractéristique privilégiée du polymère, au moins une partie des unités cellobiose présente au moins une des deux fonctions alcool primaire, portée par le carbone C ₆ , oxydée en fonction acide carboxylique. En d'autres termes, la fonction portée par le carboné C ₆ est soit une fonction alcool soit une fonction acide carboxylique. La présence d'une fonction aldéhyde au niveau du C ₆ est donc avantageusement exclue.

Au niveau d'une unité cellobiose du polymère, plusieurs cas de figure peuvent se présenter :

- les deux unités anhydroglucose formant l'unité cellobiose présentent une fonction alcool primaire (non modifiée) en C ₆ ;

- les deux unités anhydroglucose formant l'unité cellobiose présentent une fonction acide carboxylique en C ₆ ;

- une des deux unités anhydroglucose formant l'unité cellobiose présente une fonction acide carboxylique en C ₆ , l'autre présentant une fonction alcool en C ₆ .

Selon une seconde caractéristique privilégiée du polymère, au moins une partie des unités cellobiose présente au moins un des deux cycles ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ . En d'autres termes, les carbones C ₂ et C ₃ peuvent être non modifiés, c'est-à-dire qu'ils forment un cycle et portent une fonction alcool. Ainsi, la présence d'une fonction cétone au niveau de C ₂ et/ou C ₃ est avantageusement exclue. Alternativement, le cycle entre les carbones C ₂ et C ₃ peut être ouvert. Dans ce cas de figure et de manière avantageuse, les carbones C ₂ et/ou C ₃ peuvent porter des fonctions aldéhyde et/ou acide carboxylique, éventuellement fonctionnalisées. Des fonctions acétal et semi-acétal, résultant de la réaction des groupements alcool avec les groupes aldéhyde, peuvent également être présentes.

A nouveau, au niveau d'une unité cellobiose du polymère, plusieurs cas de figure peuvent se présenter :

- les deux unités anhydroglucose présentent des carbones C ₂ et C ₃ engagés dans le cycle et porteurs d'une fonction alcool (non modifiés) ;

- les deux unités anhydroglucose présentent un cycle ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ , ceux-ci portant avantageusement des fonctions aldéhyde et/ou acide carboxylique, éventuellement fonctionnalisées ;

- une des deux unités anhydroglucose formant l'unité cellobiose présente un cycle ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ , ceux-ci portant avantageusement des fonctions aldéhyde et/ou acide carboxylique, éventuellement fonctionnalisées ; l'autre unité anhydroglucose est non modifiée, c'est-à-dire que les carbones C ₂ et C ₃ sont engagés dans le cycle et portent une fonction alcool. Selon l'invention, ces deux caractéristiques doivent se retrouver dans le polymère, au niveau d'au moins une unité cellobiose ou éventuellement au niveau d'au moins deux unités cellobiose distinctes, chacune portant une des deux caractéristiques décrites ci- dessus.

Dans le cas où le polymère contenant des unités cellobiose est de la cellulose ou de la viscose, le polymère constitutif du matériau selon l'invention est donc un dérivé de cellulose ou de viscose, plus précisément un dérivé oxydé. Selon un mode de réalisation privilégié et comme il sera détaillé ci-dessous, la première caractéristique peut être conférée au matériau en le soumettant à l'action d'un mélange oxydant comprenant un hypohalite, un halite et un sel d'oxoammonium ou un précurseur dudit sel. Toutefois, toute méthode de conversion du groupement alcool primaire porté par le carbone C ₆ exclusivement en groupement acide carboxylique constitue une alternative envisageable à l'utilisation du mélange oxydant décrit ci-dessus. Ainsi d'autres procédés permettant l'oxydation sélective du carbone en C ₆ d'une unité anhydroglucose peuvent être mis en œuvre, notamment à l'aide d'ions nitrosonium (essentiellement TEMPO et dérivés), avec ou sans catalyse par des éléments de transition, avec ou sans NaBr, avec ou sans enzyme oxydante, avec ou sans agent complexant, tel que par exemple décrit dans US 6,716,976.

Ainsi et à ce stade, au moins une partie, éventuellement toutes les unités anhydroglucose du polymère sont converties en unités glucuronique. Le polymère en présence correspond donc à un acide poly glucuronique.

Sans vouloir être lié à une quelconque théorie, cette première étape permettrait de contrôler l'acidité du tissu, propriété importante pour l'hémostase. Toutefois, à l'issue de cette étape, le matériau obtenu est peu résorbable, propriété améliorée grâce à la mise en œuvre de la deuxième étape du procédé selon l'invention :

Selon un mode de réalisation privilégié et comme il sera décrit ci-dessous, l'ouverture du cycle entre les carbones C ₂ et C ₃ est obtenue en soumettant le matériau à l'action d'une solution d'acide périodique ou de l'un de ses sels. Là encore, tout procédé alternatif permettant l'ouverture du cycle entre C ₂ et C ₃ et l'oxydation des fonctions alcool portées par ces carbones peut être mis en œuvre. De manière connue, le traitement par le periodate entraîne, outre l'ouverture du cycle entre les carbones C ₂ et C ₃ , l'oxydation des fonctions alcool portées par ces carbones en fonctions aldéhyde. Ces fonctions peuvent servir au greffage de molécules d'intérêt, telles que des enzymes, permettant ainsi de fonctionnaliser le matériau.

En outre, ces fonctions aldéhyde peuvent être converties en fonctions acide carboxylique. Ces fonctions acide carboxylique peuvent également être fonctionnalisées, de manière à générer par exemple des fonctions ester ou amide. Ainsi, le matériau selon l'invention est riche en fonctions acide carboxylique qui peuvent être portées par :

- le carbone en C ₆ ;

- le carbone en C ₆ et le carbone en C ₂ ;

- le carbone en C ₆ et le carbone en C ₃ ;

- le carbone en C ₆ , le carbone en C ₂ et le carbone en C ₃ .

A noter que dans le cadre de l'invention, les fonctions acide carboxylique peuvent être sous forme protonée ou sous forme d'ion carboxylate, par exemple complexé à du calcium.

De manière avantageuse, le degré ou taux d'oxydation global du matériau selon l'invention, qui correspond à la conversion des fonctions alcool et/ou aldéhyde en fonctions acide carboxylique, est supérieur à 10%, avantageusement supérieur à 12%, voire supérieur à 15%>.

Pour rappel, le degré ou taux d'oxydation est défini comme la masse des groupements acide carboxylique contenus dans 100g du matériau. La mesure de l'oxydation du polymère, en particulier de la cellulose, peut être évaluée par exemple par titrimétrie, selon le protocole décrit par Sobue et Okubo en utilisant la méthodologie décrite dans la Pharmacopée US, par résonnance magnétique nucléaire (RMN) (Kumar et al.), ou encore par spectrométrie infra rouge (Fujisawa et al).

Pour rappel et selon l'invention, le polymère doit présenter les deux caractéristiques précitées. En pratique, la chaîne polymérique peut présenter :

- des unités cellobiose présentant uniquement une ou les deux fonctions alcool primaire, portées par le carbone C ₆ , oxydées en fonction acide carboxylique. L'éventuel carbone C ₆ ne portant pas de fonction acide carboxylique porte une fonction alcool primaire. Par ailleurs, ces unités cellobiose restent non modifiées au niveau des carbones C ₂ et C ₃ , c'est-à-dire que ceux-ci sont engagés dans le cycle et portent une fonction alcool ;

des unités cellobiose présentant uniquement un ou les deux cycles ouverts entre les carbones C ₂ et C ₃ . L'éventuel cycle non ouvert entre C ₂ et C ₃ porte des fonctions alcool au niveau des carbones C ₂ et C ₃ . Par ailleurs, ces unités cellobiose restent non modifiées au niveau du carbone C ₆ , c'est-à-dire que celui-ci porte une fonction alcool primaire ;

des unités cellobiose présentant à la fois au moins une des deux fonctions alcool primaire portée par le carbone C ₆ , voire les deux, oxydée en fonction acide carboxylique et au moins un des deux cycles ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ , voire les deux, comme illustré dans le schéma ci-dessous pour une unité anhydroglucose de cellobiose dans laquelle les carbones C ₂ et C ₃ portent des fonctions aldéhydes :

Dans le cadre de la présente invention, il a été démontré qu'un matériau solide, notamment sous forme de textile et présentant les caractéristiques structurales énoncées ci-dessus, pouvait être utilisé en tant que compresse médicale, susceptible de présenter les propriétés attendues en terme de stabilité mécanique, de tenue au vieillissement, de propriétés hémostatiques et de caractère résorbable.

Dans le cadre de l'invention, on entend par « stabilité mécanique » le fait que le matériau soit manipulable avec des ustensiles, notamment des pinces, ou même manuellement, tout en conservant une bonne tenue mécanique. La stabilité mécanique confère également au matériau la propriété de pouvoir être conservé plusieurs mois, voire plusieurs années, à température ambiante, sans que son intégrité soit altérée.

Dans le cadre de l'invention, on entend par « hémostatique » le fait que le matériau soit capable d'arrêter les saignements lorsqu'il est appliqué localement. Dans le cadre de l'invention, on entend par « caractère résorbable » le fait que le matériau soit totalement ou majoritairement dégradé in vivo 2 semaines après implantation, avantageusement après 1 semaine. La résorption peut être quantifiée visuellement, en observant le degré de dégradation du matériau, ou par tout autre méthode adaptée comme l'histologie par exemple.

En fonction de sa structure, le matériau selon l'invention présente un caractère résorbable modulable. Ainsi, selon les applications envisagées, il peut être implanté pour des durées variables : une implantation à court terme, se traduisant par une résorption totale du matériau au terme d'une durée maximale de 30 jours ou une implantation à long terme se traduisant par une résorption complète du matériau au terme d'une durée supérieure à 30 jours.

De manière générale, la présente invention présente un intérêt dans le domaine médical, ledit matériau pouvant être utilisé en tant que compresse, pansement implantable, prothèse, endoprothèse vasculaire ou matrice de recellularisation, pour une implantation ou une régénération d'organe.

Avantageusement, il s'agit d'une compresse. De manière classique, une compresse peut se présenter sous forme d'éponge ou de textile. Dans le cadre de l'invention, une compresse correspond préférentiellement à un textile obtenu à l'aide du procédé revendiqué.

Plus généralement, l'utilisation première du matériau solide selon l'invention dépend du type de matériau en présence :

- les fibres ou micro fibrilles peuvent être associées dans un non-tissé ou une mousse, d'où l'utilisation du matériau selon l'invention pour l'élaboration d'un non-tissé ou d'une mousse ;

- les fibres ou micro fibrilles peuvent être associées dans un fil, d'où l'utilisation du matériau selon l'invention pour l'élaboration d'un fil ;

- un fil peut être tissé ou tricoté pour former un tissu, d'où l'utilisation du matériau selon l'invention pour l'élaboration d'un tissu ;

- un tissu peut être utilisé comme compresse, d'où l'utilisation du matériau selon l'invention en tant que compresse ;

- les fibres ou micro fibrilles peuvent être divisées pour obtenir une poudre. Dans le cadre de l'invention, il a été mis en évidence un procédé d'obtention d'un matériau présentant l'ensemble des caractéristiques mentionnées ci-dessus. Plus précisément, l'invention vise un procédé permettant d'obtenir un matériau solide à base d'un polymère dont les unités cellobiose présentent les caractéristiques suivantes :

♦ au moins une partie des unités cellobiose présente au moins une fonction acide carboxylique porté par le carbone C ₆ , les autres carbones C ₆ portant une fonction alcool primaire ; et

♦ au moins une partie des unités cellobiose présente au moins un des deux cycles ouvert entre les carbones C ₂ et C ₃ , les autre carbones C ₂ et C ₃ formant un cycle et portant une fonction alcool.

Selon l'invention, ce procédé comprend les étapes suivantes :

- une première étape de mise en contact d'un matériau solide à base de polymère contenant des unités cellobiose et d'un mélange oxydant comprenant un hypohalite, un halite et un sel d'oxoammonium ou un précurseur dudit sel ; puis

- une deuxième étape de mise en contact du matériau ainsi traité et d'une solution d'acide périodique ou de l'un de ses sels.

Selon un autre aspect, la présente invention vise un procédé de traitement d'un matériau solide à base de polymère contenant des unités cellobiose comprenant les étapes suivantes :

- une première étape de mise en contact du matériau solide et d'un mélange oxydant comprenant un hypohalite, un halite et un sel d'oxoammonium ou un précurseur dudit sel ; puis

- une deuxième étape de mise en contact du matériau ainsi traité et d'une solution d'acide périodique ou de l'un de ses sels.

Selon un mode de réalisation particulier et dans une troisième étape, le matériau ainsi traité est mis en contact avec une solution d'halite.

Ce procédé peut être mis en œuvre soit directement sur le matériau déjà mis en forme, à savoir un textile, soit sur des fils qui seront ensuite tissés ou tricotés, voire sur des fibres qui seront ensuite associées par électrospinning ou cardage/aiguilletage sous forme de non tissé, orienté ou non, ou de fils. De manière avantageuse, le procédé selon l'invention est mis en œuvre sur un matériau solide présentant sa forme finale, avantageusement sous forme de textile. Il est toutefois envisageable de changer de forme de matériau entre les étapes. Ainsi et à titre d'exemple, la première étape peut être mise en œuvre sur des fibres qui pourront, entre les 2 étapes, être assemblées sous forme de non tissé ou de fil. De même, la première étape peut être réalisée sur des fils qui seront ensuite tricotés ou tissés, la deuxième étape étant réalisée sur le tricot ou le tissu.

Avantageusement en amont du procédé selon l'invention, le matériau peut être soumis à une étape de désensimage permettant l'élimination des corps gras utilisés dans la filature. Ces corps gras sont essentiellement constitués d'huiles d'ensimage et de colle acrylate enduits autour des filaments. Différents protocoles de désensimage sont connus de l'art antérieur et peuvent être mis en œuvre.

Selon un mode de réalisation particulier, le matériau solide à base de polymère comprenant des unités cellobiose, soumis au procédé selon l'invention, est dépourvu de cellulose oxydée.

Par « dépourvu de cellulose oxydée », on entend, au sens de la présente invention, présentant un degré d'oxydation inférieur à 1%. Il s'agit de préférence des fibres de cellulose naturelle ou synthétique, ou bien des fibres synthétiques ou bien des fibres naturelles contenant éventuellement de la cellulose, mais dépourvues de cellulose oxydée, c'est-à-dire n'ayant pas reçu de traitement chimique oxydant particulier.

Par fibres synthétiques, on entend des fibres qui n'ont aucun polymère précurseur naturel, tel que les fibres obtenues par polymérisation d'un monomère synthétique, par exemple dérivé du pétrole.

Les fibres synthétiques, résorbables ou non, comprennent notamment les polyamides tels que les nylons, les polyesters, les polyacrylates, les polyuréthannes, des acides polylactiques et polyglycoliques, les polyéthylènes glycols, les poly-a-oléfines et les polymères halogénés, leur copolymères ou leur combinaison.

La première étape du procédé selon l'invention est donc celle permettant l'oxydation sélective d'au moins un groupement alcool primaire situé en position 6 des unités cellobiose présentes dans le matériau solide.

Cette première étape est réalisée en présence d'un hypohalite, d'un halite et d'un sel d'oxoammonium ou d'un précurseur dudit sel, avantageusement en solution aqueuse. Dans le cadre de la présente invention, on entend par « précurseur de sel d'oxoammonium » une espèce chimique propre à générer un sel d'oxoammonium par réaction avec un des constituants du mélange oxydant, notamment par oxydation par un des constituants du mélange.

Les sels d'oxoammonium sont des oxydants hydrosolubles capables d'oxyder sélectivement les alcools primaires, lorsque la réaction se déroule dans des conditions appropriées de pH et de température. Les sels d'oxoammonium privilégiés selon l'invention sont les sels di-tert-alkylés, en particulier les sels de l-oxo-2,2,6,6- tétraméthylpipéridine-1 -oxyde, appelés communément TEMPO, et ses dérivés.

Les sels d'oxoammonium, catalyseurs de cette première étape d'oxydation partielle, sont régénérés in situ par un système oxydant secondaire ou auxiliaire, en l'occurrence en présence d'un hypohalite, préférentiellement Phypochlorite de sodium (NaCIO). Ce dernier est à son tour régénéré in situ par la réaction d'un halite, préférentiellement le chlorite de sodium NaC10 ₂ après qu'il ait réagi avec les aldéhydes nouvellement formés par oxydation de l'alcool primaire en position 6.

Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la première étape d'oxydation est réalisée en présence d'une quantité substœchiométrique de sel d'oxoammonium ou de l'un de ses précurseurs par rapport à la quantité d'unités anhydroglucose présentes dans le matériau traité. En pratique et de manière adaptée, le sel d'oxoammonium ou l'un de ses précurseurs représente de 0,0003 à 0,0006 mole par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose). A noter que pour les quantités de réactifs mentionnées dans la description, celles-ci correspondent au cas particulier où le polymère contenant des unités cellobiose est de la cellulose. Ainsi, dans le cas d'un mélange de polymères ou de polymères ne présentant pas uniquement des unités cellobiose, ces quantités sont calculées en fonction du nombre d'unités cellobiose présentes.

Selon un autre mode de réalisation préféré de l'invention, la première étape d'oxydation est réalisée en présence d'une quantité en hypohalite substœchiométrique par rapport à la quantité d'unités anhydroglucose présentes dans le matériau traité, avantageusement de 0,0006 à 0,0049 mole d'hypohalite par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose). Typiquement, une quantité de 0,0012 mole d'hypohalite par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose) est utilisée.

Selon un autre mode de réalisation préféré de l'invention, la première étape d'oxydation est réalisée en présence d'un excès stœchiométrique en halite par rapport à la quantité d'unités anhydroglucose présentes dans le matériau traité, avantageusement de 0,006 à 0,025 mole d'halite par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose). Typiquement, une quantité de 0,012 mole d'halite par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose) est utilisée.

Selon un mode de réalisation particulier, ces 3 constituants sont présents dans le mélange oxydant dès le début de la réaction.

De manière avantageuse, le mélange oxydant est formulé dans de l'eau déminéralisée, de manière à ne pas perturber la force ionique et le pH.

Selon un autre aspect de l'invention, la première étape d'oxydation est avantageusement réalisée dans un milieu réactionnel dont le pH est neutre, voire légèrement acide, avantageusement compris entre 5 et 7. En d'autres termes, cette première réaction est réalisée à pH compris entre 5 et 7.

Selon un autre aspect de l'invention, cette étape d'oxydation est préférentiellement réalisée à une température supérieure à 40°C, avantageusement de l'ordre de 60°C. Typiquement, cette réaction d'oxydation se déroule pendant une durée comprise entre 1 et 6 heures, avantageusement de 4 à 5 heures. Selon un mode de réalisation particulier, le matériau obtenu à l'issue de cette première étape présente un taux d'oxydation compris entre 10 et 16%, avantageusement compris entre 12 et 15%. Un moyen radical pour stopper la réaction d'oxydation est d'ajouter au milieu réactionnel un alcool primaire, tel que l'éthanol, en excès qui va réagir avec le sel d'oxoammonium et diluer considérablement par effet de masse la réaction avec la cellulose.

A l'issue de cette première étape, il peut être utile de protoner les fonctions acide carboxylique présentes dans le matériau ainsi traité.

De manière classique, cette étape est réalisée par incubation du matériau dans un milieu de protonation. Ceci est avantageusement réalisé par incubation dans de l'acide chlorhydrique (HC1), avantageusement dans un ou plusieurs bains de HC1 de 0,1 à 1 mol/1 (N), pendant plusieurs heures.

En pratique et pour éviter des manipulations du matériau traité, le milieu d'oxydation peut être éliminé par vidange et remplacé par le milieu de protonation. A l'issue de cette première étape d'oxydation, et éventuellement de protonation, le matériau est avantageusement lavé et séché.

Le lavage de la compresse se fait de manière avantageuse dans un milieu contenant un solvant et/ou de l'eau. Un alcool et/ou de l'eau déminéralisée et/ou de l'acétone constituent un milieu privilégié de lavage, par exemple de l'éthanol à 50%> puis de l'éthanol à 95%.

Ces lavages peuvent être répétés et durent généralement quelques heures, avantageusement de 1 à 10 heures.

De manière appropriée, le matériau ainsi traité est séché par tout moyen adapté, notamment à l'air en statique ou dynamique ou encore sous vide, et ce avantageusement pendant plusieurs heures. La deuxième étape d'oxydation est réalisée en présence d'acide périodique, ou l'un de ses sels, dans le milieu réactionnel. En d'autres termes, il s'agit d'incuber le matériau dans une solution d'acide périodique, ou de l'un de ses sels. Il s'agit avantageusement d'une solution aqueuse. L'ion periodate est connu pour couper les glycols et les transformer en dialdéhydes. De cette façon, il n'y a pas coupure de la chaîne polymérique, mais plutôt acquisition d'une plus grande flexibilité par ouverture des cycles. Dans le cadre de l'invention, il a été montré qu'il était possible de moduler les propriétés de résorption du matériau traité en jouant sur l'intensité (temps, température, concentration des réactifs, ...) de cette étape : plus la réaction est « poussée », plus le matériau obtenu se résorbe rapidement.

De manière avantageuse, l'acide périodique ou l'un de ses sels est présent à hauteur de 0,003 à 0,012 mole par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose), avantageusement 0,006 mole par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose).

Avantageusement, le sel d'acide périodique est le periodate de sodium. Selon un autre aspect de l'invention, la deuxième étape d'oxydation est réalisée à un pH compris entre 2 et 5, avantageusement égal à 3.

Selon un autre aspect de l'invention, cette deuxième étape est réalisée à une température comprise entre 5 et 60°C, avantageusement égale à 35°C.

En outre, la durée classique de cette étape est avantageusement comprise entre 1 et 6 heures, avantageusement égale à 3h.

De manière avantageuse, cette réaction se déroule à l'abri de la lumière.

Comme déjà dit, une troisième étape d'oxydation peut être mise en œuvre sur le matériau solide cellulosique ayant subi les deux premières étapes d'oxydation.

Cette troisième étape est alors réalisée en présence d'un halite, avantageusement en présence d'une solution aqueuse d'halite. Cette étape permet l'oxydation sélective des fonctions aldéhydes obtenues après la réaction au periodate en fonctions acide carboxylique. De préférence, l'halite est un chlorite, et encore plus préférentiellement le chlorite de sodium. De manière avantageuse, la solution comprend de 0,0025 à 0,012 mole d'halite par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose), avantageusement 0,006 mole par gramme de polymère contenant des unités cellobiose (cellulose). Selon un mode préféré de réalisation, la troisième étape est réalisée à un pH compris entre 5 et 7, avantageusement égal à 5,8.

La température à laquelle se déroule cette réaction est avantageusement supérieure à 15°C, encore plus avantageusement égale à 35°C. Alternativement, elle peut être réalisée à température ambiante.

Typiquement, la troisième réaction d'oxydation du matériau cellulosique est réalisée pendant une durée comprise entre 0,25 et 2 heures, avantageusement de 0,5 à 1 heure.

La conversion des fonctions aldéhyde en fonctions acide carboxylique permet, grâce à la mesure du taux d'oxydation, de quantifier la réaction ayant lieu à la seconde étape du procédé selon l'invention. Ainsi et selon un mode de réalisation privilégiée, la combinaison des étapes 2 et 3 permet une augmentation du taux d'oxydation comprise entre 1 et 7%, avantageusement entre 2 et 4%.

Ainsi et selon la présente invention, l'oxydation des unités cellobiose a lieu selon le schéma suivant :

Cellulose lox 1

Cellox 3 Cellox 2 De manière avantageuse, à l'issue de chacune des étapes du procédé selon l'invention, le matériau est lavé dans un bain d'eau distillée et/ou d'éthanol et/ou d'acétone, éventuellement de manière répétée. Il est ensuite avantageusement séché comme décrit ci-dessus.

Ensuite, une éventuelle étape d'acidification ou de protonation, comme décrite ci-dessus, peut être mise en œuvre.

D'autre part et de manière connue, un matériau à base de cellulose oxydée doit présenter soit des fonctions acide carboxylique protonées, soit complexées avec des ions calcium (Ca ²⁺ ), pour développer les propriétés hémostatiques recherchées.

Dans le cas où il est souhaité un matériau oxydé présentant des fonctions acide carboxylique complexées avec des ions calcium (Ca ²⁺ ), plusieurs possibilités existent : - soit l'oxydation est mise en œuvre à l'aide de réactifs se présentant sous forme de sels de calcium. Dans ce cas, à l'issue de la réaction, les fonctions acide carboxylique se présentent sous la forme (COO) ₂ Ca.

- alternativement, il peut être envisagé de réaliser l'incubation en présence de la source de calcium (notamment acétate de calcium ou CaCl ₂ ), après l'oxydation ; - une troisième possibilité consiste à incuber la compresse dans un milieu contenant une source de calcium, après l'étape de protonation. Là encore, des sources de calcium particulièrement adaptées sont l'acétate de calcium ou le CaCl ₂ . Dans cette nouvelle étape, les ions Ca ²⁺ vont remplacer les protons des fonctions carboxylates. A l'issue du procédé selon l'invention, le matériau traité subit un ou plusieurs lavages, avantageusement à l'éthanol, et un séchage, réalisés dans les conditions décrites ci- dessus.

Il peut également subir des traitements liés à l'application visée : conditionnement en emballages individuels, stérilisation, etc.

A noter que, comme démontré dans le cadre de la présente demande, l'ordre des deux premières étapes du procédé est crucial, notamment lorsqu'il est mis en œuvre sur un textile. En effet, l'inversion des deux étapes entraîne une dégradation du textile. Le procédé selon l'invention susceptible d'être mis en œuvre sur tout matériau solide, et notamment sur un textile, présente de nombreux avantages parmi lesquels :

- il met en œuvre des réactifs peu coûteux, facilement manipulables et non dommageables pour l'environnement, contrairement au N0 ₂ .

- Lorsqu'il est mis en œuvre sur un textile, il permet d'obtenir un produit présentant des caractéristiques de résistance mécanique, d'hémostase et de résorption compatibles avec une utilisation en tant que compresse.

- Il permet de contrôler le degré et la régiosélectivité des réactions d'oxydation de manière précise. Ainsi, la première étape d'oxydation permet d'obtenir un degré d'oxydation supérieure ou égale à 10% voire supérieure ou égale à 12% ; la deuxième étape, lorsqu'elle est suivie d'une conversion des fonctions aldéhyde en acide carboxylique, permet encore d'augmenter le niveau d'oxydation au moins de 1%, voire de 7%.

- Il permet de contrôler les modifications oxydatives, alors que d'autres techniques telles que le N0 ₂ sont non sélectives : les fonctions alcool attaquées ainsi que les groupements formés ne sont pas contrôlés. A titre d'exemple, le N0 ₂ attaque le C ₆ mais également les C ₂ et C ₃ , au niveau desquels il engendre la formation aussi bien d'aldéhyde, d'acide carboxylique que de cétone (sans coupure du cycle dans ce dernier cas), tout en laissant des traces d'azote sur le produit final.

EXEMPLES DE RÉALISATION

L'invention et les avantages qui en découlent ressortiront mieux des exemples de réalisation présentés ci-dessous qui n'ont toutefois aucune portée limitative.

Ces exemples sont basés sur des tissus fabriqués à partir de fils de cellulose régénérée (ou viscose) tricotés, en maille crochet ou jersey.

1/ Procédé d'obtention du matériau solide cellulosique :

1) Première étape

Cette étape permet l'oxydation partielle de la cellulose via la conversion de fonctions alcool primaire portées par le carbone C ₆ des unités cellobiose en fonctions acide carboxylique. Les conditions générales de cette étape sont décrites dans le Tableau 1 ci-dessous :

Sous une hotte aspirante, 200 ml d'une solution tampon d'acétate de sodium (0,5 M, pH = 5,8) sont placés dans un erlen de 1 1, puis 0,12 mole de NaC10 ₂ sont ajoutés. 10 g de cellulose régénérée tricotée sont ensuite placés dans la solution de NaC10 ₂ . 0,006 mole de TEMPO et une solution aqueuse de NaCIO à 2% en chlore actif (0,012 mol) sont ensuite ajoutés au mélange réactionnel. Le volume total du mélange réactionnel est 500 ml. L'erlen est fermé et placé dans un bain-marie thermostaté maintenu à une température de 60°C pendant une durée de 1 à 6 h, et typiquement de 4 à 5 h. L'oxydation est arrêtée par addition d'un excès d'éthanol.

Le tissu de cellulose partiellement oxydée est essoré puis incubé pendant 12 h dans une solution aqueuse d'HCl IN sur un agitateur orbital. La solution aqueuse d'HCl IN est renouvelée et l'incubation est poursuivie pendant 2 h.

Le tissu de cellulose partiellement oxydée est essoré, puis lavé avec de l'éthanol à 50% pendant 1 h sur un agitateur orbital. Cette opération est renouvelée deux fois. Le tissu est alors essoré, puis lavé avec de l'éthanol à 95% pendant 1 h sur un agitateur orbital, puis enfin essoré et laissé sécher à l'air sous hotte aspirante pendant au moins 12 h.

2) Deuxième étape :

Cette étape permet l'ouverture du cycle entre les carbones C ₂ et C ₃ des unités cellobiose. Simultanément, les fonctions alcool portées par ces carbones sont oxydées en fonctions aldéhyde.

Les conditions générales de cette étape sont présentées dans le Tableau 2 ci-dessous :

NaI0 ₄ (mole par gramme de cellulose) 0,003 à 0,012, par exemple 0,006 pH du milieu réactionnel 2 à 5, par exemple 3

Température (°C) 5 à 60, par exemple 35

Durée de la réaction (h) 1 à 6, par exemple 3 10 g du matériau obtenu à l'issue de la première étape d'oxydation partielle sont mélangés avec 0,06 mole d'ion periodate dans un erlen de 1 1. Le volume total du mélange réactionnel est 500 ml. Le pH est ajusté à 3 et la réaction est réalisée sous agitation pendant 3 h, à une température de 35°C et à l'abri de la lumière. Le matériau cellulosique est ensuite rincé deux fois à l'eau distillée avant de subir une acidification et un lavage à l'éthanol, comme décrit plus haut.

3) Troisième étape (optionnelle) : Cette étape permet l'oxydation des fonctions aldéhyde portées par les carbones C ₂ et C ₃ des unités cellobiose en fonctions acide carboxylique.

Les conditions générales de cette étape sont présentées dans le Tableau 3 ci-dessous :

10 g du matériau obtenu à l'issue des deux premières étapes sont mélangés avec 0,06 mole de chlorite de sodium préparé dans un tampon acétique à pH 5,8. La réaction est réalisée pendant 30 minutes, à la température ambiante. Le volume total du mélange réactionnel est d'environ 150 ml. Le matériau cellulosique est ensuite rincé deux fois à l'eau distillée avant de subir une acidification et un lavage à l'éthanol, comme décrit plus haut. Le matériau est ensuite séché.

4) Suivi de la formation des fonctions aldéhyde :

La présence de fonctions aldéhyde a été suivie grâce au réactif Purpald ^® qui révèle leur présence par l'apparition d'une coloration pourpre intense.

L'intensité de cette coloration a été gradée pour différents produits: de 0 pour une solution qui ne présente pas de coloration pourpre à +++ pour une solution pourpre très intense. Les résultats sont présentés dans le Tableau 4 ci-dessous :

Ces expériences révèlent que la première étape ne génère pas de fonctions aldéhyde au niveau du C ₆ , alors que la deuxième étape entraîne concomitamment la coupure du cycle entre les carbones C ₂ et C ₃ et la génération de fonctions aldéhyde au niveau de ces carbones. Ce test s'avère également positif sur une compresse Surgicel ^® obtenu par un traitement au N0 ₂ .

II/ Evaluation des propriétés physiques du matériau

1) Degré d'oxydation du tissu obtenu :

Le degré d'oxydation du tissu de cellulose partiellement oxydée représente la masse des groupements acide carboxylique contenus dans 100 g dudit tissu. Cette valeur est mesurée par titrimétrie, selon la méthode d'échange de calcium décrite par Sobue et Okubo, et recommandée par l'United States Pharmacopeia (USP, 1990).

Le degré d'oxydation de différents tissus (essai 1 : crochet ; essai 2 : jersey), obtenu à l'aide du procédé en deux étapes (TEMPO/NaC10/NaC10 ₂ puis NaI0 ₄ ), a été mesuré.

Les conditions expérimentales et les degrés d'oxydation mesurés sont présentés dans le Tableau 5 ci-dessous :

En conclusion, le taux d'oxydation est suffisant pour que le matériau obtenu à l'aide du procédé selon l'invention possède de bonnes propriétés hémostatiques. 2) Stabilité du tissu obtenu :

Le tissu de cellulose partiellement oxydée obtenu conserve une excellente résistance mécanique après 1 mois, dans une étuve à 60°C. Cet échantillon conserve un bon aspect, sans dégradation. Ce même échantillon a été stérilisé par irradiation aux rayons β, puis a été soumis à un procédé de vieillissement qui n'a pas provoqué de dégradation du tissu.

Une stabilité équivalente à celle du produit Surgicel ^® a également été observée après 3 mois à 25°C et en humidité contrôlée, ou après un stress thermique à 60°C.

3) Degré de polymérisation apparent du tissu obtenu :

La mesure du degré de polymérisation apparent a été réalisée par la mesure de la viscosité suivant la norme NF G06-037 (décembre 1981).

Les résultats obtenus sont présentés dans le Tableau 6 ci-dessous :

En conclusion, le procédé selon la présente invention aboutit à un matériau (essais 1 et 2) avec un degré de polymérisation apparent, mesuré par la viscosité, du même ordre que le produit de référence (Surgicel®).

III/ Evaluation des propriétés précliniques du matériau 1) Résorption :

Les études précliniques ont été réalisées à l'aide de 3 types d'implants conformément à la norme ISO 10993-6 (2007) :

- le Surgicel ^® , pris comme référence ;

- l'implant Testl correspond, quant à lui, à un matériau de type jersey, traité selon la première réaction d'oxydation (NaCIO, TEMPO et NaC10 ₂ ) pendant une durée de 6 heures, puis selon la deuxième réaction d'oxydation au periodate pendant une durée de 6 heures ; - l'implant Test2 a reçu un traitement équivalent à celui du Testl, à l'exception de la durée de la deuxième réaction d'oxydation au periodate, d'une durée de 3 heures seulement. Ces études ont été menées sur 6 rats femelles de souche Sprague-Dawley. Les zones d'incision ont été tondues, les rats ont été anesthésiés. 2 incisions de chaque côté de la colonne vertébrale ont été effectuées (une incision dite craniale et une incision dite caudale). 4 implants de 1 x 1 cm ont été mis en place par animal. Les incisions du plan cutané ont été fermées par des agrafes.

Après 14 jours, les rats ont été sacrifiés par inhalation de C0 ₂ . Les produits ont été retirés et les sites d'implantation ont été prélevés et analysés macroscopiquement.

Au site d'implantation a été évaluée la présence d'une nécrose, d'un exsudât, d'une néo vascularisation et d'une encapsulation, grâce à une grille de scores. L'échelle de note est la suivante : absent (0) ; réaction légère (1) ; réaction modérée (2) ; réaction marquée (3) ; réaction sévère (4).

Pour la résorption, c'est la persistance résiduelle du produit qui a été évaluée. L'échelle est la suivante :

la note (0) est attribuée en cas de dégradation totale ;

la note (1) est attribuée s'il reste des petits fragments du produit ;

la note (2) est attribuée en cas de persistance modérée ;

la note (3) est attribuée lorsque le produit est intact.

Les résultats sont présentés dans le Tableau 7 ci-dessous :

(*) seuls trois sites d'implantation ont été évalués pour le produit référence (Surgicel ).

A J14, on observe une réaction légère à modérée des produits tests et de la compresse contrôle (exsudât et néo vascularisation). Les produits tests sont majoritairement résorbés ; pour le produit Testl , 3 sites sont complètement résorbés sur 4 et 1 site montre des petits fragments ; pour le produit Test2, 3 sites sont non résorbés ; enfin, pour le produit contrôle, 2 sites sur trois sont résorbés et 1 site montre une persistance modérée. Ainsi, le matériau obtenu par le procédé, objet de l'invention, possède une vitesse de résorption comparable au produit commercial référence Surgicel ^® , et même meilleure, si l'on considère que le tissu utilisé dans cette étude a un grammage supérieur à celui du Surgicel ^® .

Par ailleurs, ces études mettent en évidence que plus la durée de la réaction d'oxydation au periodate est longue, plus la résorption est rapide. Ainsi, le contrôle de la durée de la deuxième étape du procédé selon l'invention permet de moduler la vitesse de résorption du matériau cellulosique, en fonction de l'application qui lui est destinée.

2) Hémostase :

La performance hémostatique a été testée sur le textile cellulosique traité chez l'animal sur un modèle de saignement per opératoire versus le produit de référence Surgicel®. La méthodologie consiste à créer chez le porc des lésions de forme carrée et de surface prédéterminée sur des organes (rate et foie) puis de recouvrir les plaies ainsi créées des compresses à tester.

Les observations portent sur le comportement au contact du sang et le temps nécessaire pour établir l'hémostase (cf Tableau 8 ci-dessous). Foie et rate ont été choisis comme organe test car à la fois leur nature tissulaire et l'intensité du saignement qu'ils engendrent sont différentes.

On observe un comportement hémostatique du textile cellulosique testé comparable à celui du produit de référence, quel que soit l'organe testé: le comportement au contact du sang est identique à celui de la référence et le temps nécessaire pour obtenir l'arrêt du saignement équivalent pour chaque organe considéré.

Cette étude permet de mettre en évidence le pouvoir hémostatique du matériau. IV/ Caractéristiques du produit obtenu par inversion des étapes 1 et 2 :

Les conditions générales sont rassemblées dans le Tableau 9 ci-après :

Etape 1 :

10g de cellulose sont mélangés avec 0,06mole d'ion périodate dans un erlen de IL. Le volume total du mélange réactionnel est de 505mL. Le pH est ajusté à 3,0 et la réaction est réalisée dans un bain-marie sous agitation discontinue pendant 3h à une température de 35°C et à l'abri de la lumière. Le matériau cellulosique obtenu est ensuite rincé deux fois à l'eau purifiée avant de subir une acidification puis lavé plusieurs fois à l'éthanol. Après essorage le matériau est séché pendant 16h sous flux d'air.

Etape 2 :

Le matériau précédent, obtenu à l'état sec, est soumis à la réaction TEMPO/NaC10/NaC102. Les conditions générales sont rassemblées dans le Tableau 10 ci-après :

Sous hotte aspirante, 200mL d'une solution tampon d'acétate de sodium (0,5M, pH 5,8) sont placés dans un erlen de IL puis 0,12mole de NaC102 sont ajoutés. 10,1g du matériau obtenu précédemment sont ensuite placés dans la solution de NaC102. 0,006mole de TEMPO et une solution aqueuse de NaCIO à 2% en chlore actif (0,012mol) sont ensuite ajoutés au mélange réactionnel. Le volume réactionnel est ajusté à 500mL avec de la solution tampon acétate de sodium. L'erlen est fermé et placé dans un bain-marie thermostaté à la température de 60°C pendant 5h. A l'issue de la réaction, le textile a disparu du milieu réactionnel. Le milieu réactionnel est alors précipité en présence d'éthanol mais le précipité obtenu est inexploitable. REFERENCES

Fujisawa S, Okita Y, Fukuzumi H, Saito T, Isogai A. 2011. Préparation and characterization of TEMPO-oxidized cellulose nanofibril films with free carboxyl groups. Carbohydrate Polymers 84(l):579-583.

Kumar V, Yang T. 1999. Analysis of carboxyl content in oxidized celluloses by solid- state 13C CP/MAS NMR spectroscopy. Int J Pharm. Jul 20;184(2):219-26. Singh M, Ray AR, Vasudevan P, Verma K, Guha SK. 1979. Potential bioso lubie carriers: biocompatibility and biodegradability of oxidized cellulose. Biomater Med Devices Artif Organs, 7(4):495-512.

Sobue H, Okubo M. 1956. Détermination of carboxyl group in cellulosic materials with the "dynamic ion exchange method". Tappi, 39(6) :415.