本发明涉及一类对三联苯类化合物及其应用， 尤其涉及一类对三联苯衍生物及其在 制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

有机小分子化合物从最初的细胞毒作用发展到 目前作为各类生物靶点的抑制剂， 始 终是抗肿瘤药物的研究热点之一。

James J. Li等发现一系列三联苯二甲磺基衍生物和磺胺� ��生物具有选择性环氧化酶 2抑制作用和具有口服抗炎活性。 Junko Ohkanda等设计并合成了一些三联苯类化合物， 发现它们具有法尼酰基转移酶抑制作用。 法尼酰基转移酶抑制剂是一类新的信号传导抑 制剂， 国内外的研究表明其对甲状腺癌、 胰腺癌、 肺癌、 肠癌、 肝癌等肿瘤细胞生长均 有明显的抑制作用。 Marinella Roberti 等发现一些三联苯类衍生物阻断了细胞循环的 G。一 期同时能诱导白血病细胞的分化。然而， 纵观目前的三联苯衍生物的研究现状， 因 三联苯结构复杂， 仍然存在合成繁琐， 天然得到的产量低、 成本高的问题。

发明内容

针对目前三联苯衍生物的研究现状， 本发明的目的是提供一类对三联苯衍生物及其 在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明所述的对三联苯衍生物的结构式如式（ I)所示-

( I ) 其中： 羟基或甲氧基； 氧、 羟基或甲氧基； R ₃ =氢、 羟基或甲氧基； R ₄ =氢、 羟 基或甲氧基； R ₅ =羟基或甲氧基； =羟基或甲氧基。

上述化合物的结构式中优选的实施方式是： ！^是羟基， 是羟基或氢， R ₃ 是羟基或氢, 是羟基或氢， R ₅ 是羟基或甲氧基， 是羟基或甲氧基。

上述化合物的结构式中进一步优选的实施方式 是： ！^是羟基， 是氢， R ₃ 是轻基或氢, R ₄ 是羟基或氢， R ₅ 是羟基或甲氧基， R*是羟基或甲氧基。

上述化合物的结构式中再优选的实施方式是： ！^是羟基， R ₂ 是氢， R ₃ 是氢， R ₄ 是氢， R ₅ 是羟基或甲氧基， R ₆ 是羟基或甲氧基。

上述化合物最优选是 [1， 1' :4' , ' -三联苯] -3, 4, 4' ' -三元醇。

本发明所述的对三联苯衍生物的合成是通过如 下两条合成路线实现的，具体步骤如下 反应式： 路线 1:

6

路线 2:

其中： 上式中化合物 6、 12的 为羟基或氢， 其他化合物的 为羟基或氢 或甲氧基。 上述合成步骤中的 a、 b、 c反应分别为：

a:利用相应的苯硼酸衍生物和相应的溴代苯衍� ��物做 suzuki偶联，溶剂为二氧六环， 碱为氟化钾，催化剂为 Ι,Γ-双二苯基膦二茂铁，反应温度： 30°C〜100°C ,反应时间： 2~24 小时。

b: 三溴化硼脱甲基， 溶剂为二氯甲烷， 反应温度： -30°C ~-80°C , 反应时间： 10~24 小时。

c:先利用三氟甲磺酸酐将相应的羟基磺酰化，� ��剂为二氯甲烷和水，碱为氢氧化钠， 反应温度： 0°C ~10°C , 反应时间： 0.5~2小时。 反应完毕用二氯甲垸萃取， 蒸干， 然后 和相应的苯硼酸进行 Suzuki反应， 方法如步骤 a。

上式中 3的合成： 将化合物 1 (2~4摩尔）和化合物 2 ( 1摩尔）溶于二氧六环， 加入氟化钾（2~4摩尔）， 温度： 30°C~100°C , 磁力搅拌， 氮气保护下加入催化剂 Ι,Γ-双 二苯基膦二茂铁（2%~5%摩尔）反应时间 2~24小时。用二氯甲垸或乙酸乙酯提取， 提取 液经水洗， 干燥， 减压浓缩， 残留物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到 化合物 3。

上式中 5的合成： 将化合物 4 ( 1-2摩尔）和化合物 3 ( 1摩尔）溶于二氧六环， 加入氟化钾（2~4摩尔）， 温度： 30°C~100°C , 磁力搅拌， 氮气保护下加入催化剂 1，1'-双 二苯基膦二茂铁（2%~5%摩尔）反应时间 2~24小时。用二氯甲烷或乙酸乙酯提取， 提取 液经水洗， 干燥， 减压浓缩， 残留物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到 化合物 5。

上式中 6的合成： 将化合物 5 (1摩尔)溶解在二氯甲烷中， 温度降至 -45°C~-78°C， 加入三溴化硼（1.5摩尔）， 回温， 搅拌 24小时， 乙酸乙酯萃取， 萃取物用硅胶柱层析纯 化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到化合物 6。

上式中 9的合成： 将化合物 8 ( 1-2摩尔）和化合物 7 ( 1摩尔） 溶于二氧六环， 加入氟化钾 （2^4摩尔）， 温度： 30°C~100°C， 磁力搅拌， 氮气保护下加入催化剂 1，1'-双 二苯基膦二茂铁（2%~5%摩尔）反应时间 2~24小时。用二氯甲烷或乙酸乙酯提取， 提取 液经水洗， 干燥， 减压浓縮， 残留物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到 化合物 9。

上式中 11的合成： 将化合物 9 ( 1摩尔）溶于二氯甲垸， 加入 10%氢氧化钠水溶 液， 温度降至 0Ό~10Ό， 加入三氟甲磺酸酐（2摩尔）， 回温， 搅拌 0.5〜2小时， 然后倾 入水中， 二氯甲垸萃取， 蒸干， 溶于二氧六环， 加入化合物 10 ( 1.5摩尔）， 氟化钾（2~4 摩尔）， 温度： 30°C~10(TC， 磁力搅拌， 氮气保护下加入催化剂 1，1'-双二苯基膦二茂铁 (2%~5%摩尔）反应时间 2〜24小时。用二氯甲烷或乙酸乙酯提取，提取 液经水洗，干燥， 减压浓缩， 残留物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到化合物 11。

上式中 12的合成： 将化合物 11 (1摩尔)溶解在二氯甲垸中，温度降至 -45°C~ -78'C， 加入三溴化硼（1.5摩尔）， 回温， 搅拌 24小时， 乙酸乙酯萃取， 萃取物用硅胶柱层析纯 化， 石油醚： 乙酸乙酯洗脱， 得到化合物 12。

其中 2、 4、 8和 10均购自 Sigma- Aldrich 。

其中 1或 7从 Sigma-Aldrich购买或购买原料经溴代而来。

本发明所述的对三联苯衍生物结构简单， 合成方便， 成本低廉， 适于规模化生产。 实验测定： 本发明所述的对三联苯衍生物表现出较高的细 胞毒活性， 具有开发为抗肿瘤

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08.l00/ll0ZN3/X3d Ή NMR (300 MHz, DMS0-d6, rt) S6.82(d, J=10.0 Hz, 1H)， 6.85 (d, J=10.0 Hz, 2H), 6.97 (d, J=10.0 Hz, 1H)， 7.10(s, 1H)， 7.51 (d, J=10.0 Hz, 2H)， 7.55 (d, J=10.0 Hz, 2H), 7.60 (d, J=10.0 Hz, 2H)， 9.02 (s, 1H), 9.05 (s, 1H)， 9.54 (s, 1H)； ¹³ C DEPT (75 MHz, (CD ₃ ) ₂ C0, rt) 5113.7， 113.7, 115.7， 115.7， 118.2, 118.2, 126.5， 126.5, 126.6, 127.7, 127.7， 131.9， 132.7， 138.99, 139.1, 144.9, 145.4, 157.1;HRMS (ESI) calcd for C ₁₈ H ₁₅ 0 ₃ (M+H) ⁺ 279.1021, found279.1108。

实施例 4:

制备化合物 [1， 1，：4，， ，- Terphenyl]- 2， ，3,4,4， ， ，6， -pentamethoxy- (9CI) (结构式 11， 其中 = R ₂ = =R ₅ =0CH ₃ . )

将甲氧基苯硼酸（1摩尔）和 1， Γ —联苯一 2, 6-二甲氧基， 4一羟基， 4， —溴（2 摩尔）放入二氧六环中 (10ml), 加入 KF(3摩尔）， 氮气保护下加入 Pd-DPPF (2%摩尔）， 加热回流 24小时， 乙酸乙酯萃取， 萃取物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯 =10: 1 洗脱。 Mp 170°C〜172°C。

Ή NMR (300 MHz, CDC13, rt) δ 3.81(s, 6H), 3.87 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.91(s, 3H), 6.81 (s, 2H)， 6.94 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J=2.0 Hz, 1H)， 7.00(d, J=15.0 Hz, 2H), 7.58 (d, J=15.0 Hz, 2H)； ¹³ C NMR (75 MHz, CDC rt) δ 55.4, 55.7, 55.8, 56.0, 56.0, 103.1， 103.1, 110.5， 114.2， 114.2, 114.3, 117,6, 123.2， 126.2, 128.2， 128.2, 134.0, 141.6, 147.8, 148.1, 157.9, 157.9， 159.3; HRMS (ESI) calcd for C ₂₃ H ₂₅ 0 ₅ ( +H) ⁺ 381.1702, found381.1703。

实施例 5：

制备化合物 [1, 1，：4', 1'，- Terphenyl]- 2， ，3,4,4， ， -tetmethoxy- (9CI) (结构式 11, 其中 R _t = R ₂ = 0CH ₃ , R ₃ = H, ¾ =R ₅ =0CH ₃ , )

将对甲氧基苯硼酸（1.5摩尔）和 1， 一联苯一 2-甲氧基，4一羟基， 4' —溴（1 摩尔）放入二氧六环中 （10ml), 加入 KF(3摩尔）， 氮气保护下加入 Pd-DPPF (2%摩尔）， 加热回流 24小时， 乙酸乙酯萃取， 萃取物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯 =10: 1 洗脱。 Mpl3rC〜132'C。

Ή NMR (300 MHz, CDC1 ₃ ， rt) δ 3.87 (s, 3H)， 3.89 (s, 3H)， 3.92 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 6.94 (d， J=15 Hz, 1H), 7.00 (d, J=19, Hz, 2H), 7.12 (d， J=3.0 Hz, 1H), 7.14 (s， 1H), 7.15 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.21 (dd, J=13.0， 3.0 Hz, 1H)， 7.37 (d, J=13 Hz, 1H), 7.58 (d, J=19 Hz， 2H)； ¹³ C NMR (75 MHz, CDC1 ₃ ， rt) δ 159.2, 156.6, 148.3, 148.1, 141.2, 133.5, 130.93, 130.87, 128.8， 128.1, 128.1, 121.8， 119.2, 114.2, 114.2， 112.9, 110.8， 109.8， 55.9， 55.9， 55.7, 55.4. HRMS (ESI) calcd for C ₂₂ H ₂₃ 0 ₄ (M+H) ⁺ 351.1600, found 351.1595。

实施例 6:

制备化合物 [1, 1，：4，， 1，'- Terphenyl]- 2， ，3， 4， 4， ， -tetol- (9CI) (结构式 12， 其中 R _t =0H)

将 [1， :4', 1，， -Terphenyl]- 2， ，3,4,4， ， -tetmethoxy- (9CI) (1 摩尔）溶解在 二氯甲垸中， 温度降至 -45°C， 加入三溴化硼 （1.5摩尔）， 回温， 搅拌 24小时， 乙酸乙 酯萃取，萃取物用硅胶柱层析纯化，石油醚： 乙酸乙酯 =10: 3洗脱得到该化合物。 Mp>260'C。

'Η NMR (300 MHz, DMS0— d6， rt) 66.75 (d, J二 14· 0 Hz, 1H), 6.83 (d, J=13.0 Hz, 1H), 6.84 (d, J=13.0 Hz, 2H)， 7.03 (d, J=13.0 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.07 (s, 1H)， 7.20 (d, J=12.0 Hz, 1H), 7.42 (d, J=14.0 Hz, 2H)， 8.87 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)； ¹³ C NMR (75 MHz, CDC1 ₃ ， rt) δ 113.2, 115.1， 115.6, 115.7， 116.5, 117.0, 119.8, 126.0, 127.3， 127.3, 129.3, 130.2, 130.7, 139.4, 144.1, 144.4, 154.2 157.2; HRMS (ESI) calcd for C ₁₈ H ₁₅ 0 ₄ (M+H) +295.0970， found295.0967。

实施例 7:

制备化合物 [1， 1，：4', ，- Terphenyl]- 2' ,3,4,4， ， 6， - pentaol- (9CI) (结构 式 12, 其中 R _t = R ₂ = =Rs =0H)

将 [1, :4，， 1，，- Terphenyl]- 2， ，3, 4， 4， ， ，6， -pentamethoxy- (9CI) (1 摩尔） 溶解在二氯甲垸中， 温度降至- 45°C, 加入三溴化硼 （1.5摩尔）， 回温， 搅拌 24小时， 乙酸乙酯萃取，萃取物用硅胶柱层析纯化， 石油醚： 乙酸乙酯 =10: 3洗脱得到该化合物。 Mp>260°C。

lH NMR (300 MHz, DMSO— d6, rt) 66.54 (s, 2H), 6.58 (dd, J=13.0, 3.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J=14.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J=3.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J=14.0 Hz， 2H), 7.33 (d, J=14.0 Hz, 2H), 8.69 (s, 2H)， 8.96 (s, 1H), 9.52 (s, 1H)； ¹³ C NMR (75 MHz, DMS0-d6, rt) δ 104.4, 104.4, 114.3， 114.5, 115.5， 115.5, 118.5, 121.9, 125,3, 127.1， 127.3, 131.2， 139.4, 143.4, 143.9, 155.7， 155.7， 156.8; HRMS (ESI) calcd for C ₁₈ H ₁₆ 0 ₅ (M+H) +311.0919， found311.0907

实施例 8:

利用 MTT法检测本发明所述对三联苯衍生物的体外抑 癌活性

7.1材料与试剂

1)发明所述对三联苯衍生物（Hl、 H2、 H3、 H4、 H5、 H6)

2) MDA-MB-435细胞 （人乳腺导管癌细胞株系）

3) DMEM/F12(1:1)培养基， 为美国 HyClone公司产品

4)胎牛血清， 为美国 HyClone公司产品

5) 二甲基亚砜（DMS0) ， 四甲基偶氮唑（MTT)为美国 sigma公司产品

6)其它药品试剂为国产分析纯产品。

7.2实验

1) 用 DMS0将化合物配成 10mM的初始测量浓度。

2) 培养细胞（MDA-MB-435细胞） ： 将已经复苏的癌细胞株进行传代培养， 细胞 培养条件： 37°C， 5%二氧化碳，饱和湿度。用培养液配成单个细� ��悬液， 以 60000-100000 个 /ml密度接种 96孔板， 每孔 80 L， 于 C0 ₂ 恒温培养箱中以 37°C， 5%C0 ₂ 培养 24h， 以便细 胞适当增殖并充分贴壁。

3) 待细胞贴壁并长至对数生长期后， 弃去孔中原培养基， 实验组分别加入含有 梯度稀释的发明所述对三联苯化合物（药物浓 度依次为 10 mM、 20 mM、 50 mM、 70 mM、 100 mM、 ) 的 100 培养基。 阴性对照组加入含有同等浓度 DMS0的同体积培养基， C0 ₂ 恒温培养箱中培养 72h。

4) 显微镜下观察细胞生长状态， 然后每孔加入 10 μΐ (5mg/mL) MTT溶液。 培养

3h。

5) 每孔加终止液 lOOul (100ml灭菌水， 10 mg SDS, 0. lml HCL )， C0 ₂ 恒温培养箱 中孵育 8- 12 h。

6) 使用 Model680酶标仪测定每孔在 590nm处的吸光值。

7 ) 利用 Excel软件分析处理数据。

其中：

对肿瘤细胞的生长抑制率按下式计算： 阴性对照组 0D值 -实验组 0D值

抑制率 =

阴性对照组 0D值-空白组 0D值 发明所述对三联苯衍生物体外抑癌活性（细胞 毒活性） 实验结果 （生长抑制率） 统 计见下表：

mM 20 50 70 100

H1 7.209339 13.23553 18.18899 20.35021

H2 41.78514 46.77394 52.16911 53.08408

H3 4.527528 9.102382 3.959615 9.954251

H4 41.85203 63.33807 67.2188 73.65515

H5 7.439887 5.374823 11.76803 11.51344

H6 45.79915 36.15276 36.12447 62.23479

AFS8 23.74192 45.1333 53.55021 60.11315 上表中所述 Hl、 H2、 H3 H4、 H5、 H6、 AFS8化合物结构及名称是:

HI: ！^是羟基； R ₂ -氢； R ₃ =氧； 氢； R ₅ =甲氧基； R«=甲氧基 (即： [1,1，：4，，广-三 联苯]- 4''-一元醇 -3， 4,-二甲氧基）。

H2: 是羟基； R ₂ 是氢； R ₃ 是氢； R ₄ 是氢； R ₅ 是羟基； 是羟基 (即： [1,1' :4',1''- 三联苯 ]-3， 4, 4''-三元醇）。

H3: 是甲氧基； 是氢； 是甲氧基； 是氢； R ₅ 是甲氧基； R ₆ 是甲氧基（即： [1,1' :4，， ，-三联苯] - 2，， 3, 4， 4，'-四甲氧基）。

H4: R^羟基； R ₂ 是氢； 是羟基； 是氢； 是羟基； Re是羟基（即： [1, :4', '- 三联苯]- 2'， 3, 4， 4' '-四元醇）。 H5 : 是甲氧基； R ₂ 是氢； R ₃ 是甲氧基； R ₄ 是甲氧基； R ₅ 是甲氧基； 是甲氧基（即： [1， 1， :4' , Γ， -三联苯]- 2， , 3， 4, 4，， 6, -五甲氧基)。

H6:！^是羟基; R ₂ 是氢; R ₃ 是羟基； 是羟基; R ₅ 是羟基; R ₆ 是羟基（即: [1, 1， :4' , 1" - 三联苯] - 2'， 3， 4, 4' ' 6' -五元醇）。

AFS8 : [1， :4， , Γ， -三联苯]- 2，， 3, 4, 4,， -四醇, 3，， 6， -二甲氧基。 依据如上方法， 将发明所述对三联苯衍生物对甲状腺癌、 胰腺癌、 肺癌、肠癌或肝 癌细胞进行了外抑癌活性 （细胞毒活性） 实验， 结果表明均有较高的细胞毒活性， 提示 具有开发为抗肿瘤药物的潜质。

进一步的药理实验表明： 本发明所述的对三联苯衍生物半数致死量（IC ₅ 。， 即样品 对肿瘤细胞的抑制率为 50%时的浓度）为〉 lOOmg/公斤体重。