ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ОБЛАДАЮЩАЯ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИМ ЭФФЕКТОМ В ОТНОШЕНИИ ДЕМИЕЛИНИЗИРУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (ВАРИАНТЫ)

Настоящее изобретение относится к области химико- фармацевтической промышленности и медицины и касается средств лечения демиелинизирующих заболеваний, в частности, рассеянного склероза.

Демиелинизирующие заболевания - заболевания, основным патологическим процессом при которых является демиелинизация, то есть разрушение миелиновой оболочки нейронов центральной или периферической нервной системы. Это повреждение ухудшает проводимость сигналов в пострадавших нервах. Наиболее распространенным демиелинизирующим заболеванием является рассеянный склероз, характеризующийся поражением сразу нескольких отделов ЦНС.

Рассеянный склероз (PC) - дегенеративное, воспалительные, неврологические заболевания и характеризуется демиелинизации центральной нервной системы. Заболевание в основном поражает молодых людей, с более высокой частотой встречается у женщин.

Рассеянный склероз (PC) - самое частое заболевание центральной нервной системы у лиц молодого возраста. В подавляющем большинстве случаев в начале заболевания течение PC ремиттирующее, когда периоды проявления разнообразной симптоматики сменяются фазами полного благополучия или значительного улучшения состояния. Однако со временем болезнь начинает неуклонно прогрессировать, и, почти с неизбежностью, приводит к значительной инвалидизации пациентов. Это хроническое прогрессирующее заболевание, характеризующееся множественными очагами поражения в центральной нервной системе. До сих пор так и не найдено какого-нибудь одного фактора, являющегося непосредственной причиной заболевания. Поэтому наиболее распространенной является гипотеза о мультифакторной природе PC. Под этим термином понимается сочетанное воздействие внешних и генетических факторов, приводящее к развитию хронического воспалительного, демиелинизирующего и нейродегенеративного процессов. Особое значение в изучении PC занимают эпидемиологические исследования, которые не только оценивают общее количество больных с данной патологией, но и позволяют открыть новые направления в изучении этиологии и патогенеза PC, указать направления для исследований новых методов лечения, планировать и организовывать оказание медико-социальной помощи этим больным. Исследования эпидемиологии и этиологии PC можно разделить на три направления: описательная эпидемиология, т.е. изучение частоты встречаемости PC; аналитическая эпидемиология, т.е. исследования участия внешних факторов в этиологии PC; генетическая эпидемиология PC, т.е. изучение вклада наследственных факторов в развитие заболевания. Распространение PC в мире (результаты описательных эпидемиологических исследований). За последнее десятилетие были унифицированы методы описательного эпидемиологического исследования, что наряду с унификацией диагностических шкал и подходов к классификации больных способствовало накоплению определенного объема объективной информации, позволяющей судить о реальном распространении PC в мире [Гусев Е.И., Бойко А.Н., Завалишин И.А. и др. "Эпидемиологические исследования рассеянного склероза. Методические рекомендации МЗ РФ" .422003/82, М., 2003, 80]. Традиционно принято выделять три зоны, различающиеся по частоте встречаемости PC. Зона высокого риска (распространенность более 50 случаев на 100 000 населения) включает Северную и часть Центральной Европы, северные районы США, юг Канады, юг Австралии и Новую Зеландию. Зона среднего риска (от 10 до 49 случаев на 100 000 населения) - некоторые области Центральной и Северной Европы, Восточную и южную Европу, юг США и остальную территорию Австралии. Зона низкого риска PC - большинство регионов Центральной и Южной Америки, Азии, Африки и Океании (менее 10 случаев на 100 000 населения). Первые систематизированные исследования, проведенные в Европе, Северной Америке и Австралии, в 1950-1980 гг., позволили сформулировать основные «классические» характеристики распространения PC [Гусев Е.И., Бойко А.Н., Завалишин И. А. и др. "Эпидемиологические исследования рассеянного склероза. Методические рекомендации МЗ РФ", JV°2003/82, М, 2003, 80; Гусев Е.И., Завалишин И.А., Бойко А.Н. и др. "Эпидемиологические характеристики рассеянного склероза в России"// Журн. неврол. и психиат. 2002, спец. выпуск «Рассеянный склероз», С. 3-6; Landtblom А.-М., Riise Т., Boiko А., Soderfeldt В. "Distributions of multiple sclerosis in Sweden based on mortality and disability compensation statistics" // Neuroepidemiology, 2002, V. 21 , P. 167-79; Lauer K. "Environmental associations with the risk of multiple sclerosis: the contribution of ecological studies" // Acta Neurol. Scand., 1995, V. 91 (Suppl. 161), P. 77-88]. Болеют преимущественно лица европейской расы (кавказоиды); более высокая частота встречаемости PC в зонах, более удаленных от экватора, т.е. для Северного полушария - наличие градиента убывания частоты PC «Север-Юг» (сумма географического и этнического факторов); наличие семейного PC (5-10% от всех случаев PC); у 60% больных PC начинается в возрасте от 20 до 40 лет, средний возраст клинического начала колеблется в разных популяциях от 29 до 33 лет; более высокая частота PC у женщин, но у мужчин выше вероятность развития неблагоприятного первично-прогредиентного течения PC, особенно в возрасте старше 40 лет; показатели распространенности и заболеваемости PC могут значительно варьировать на соседних территориях и даже на одной территории, но в разные временные периоды; доказано изменение частоты PC среди перемещенного населения (мигрантов) при смене зон проживания в виде изменения риска развития заболевания в зависимости от возраста переезда (до и после 15 лет); временно-пространственная концентрация больных в возрасте 15-18 лет; описаны «кластеры РС» - зон резко повышенной частоты PC и «микроэпидемии РС» - резкое увеличение заболеваемости PC на ограниченной территории в определенный временной промежуток; риск развития РС определяется суммой наследственных, внешних и социальных факторов. В последнее время отмечено стирание традиционного градиента «Север-Юг» в Северном полушарии, выявление РС среди этнических групп, которые ранее считались «свободными» от РС, и увеличение числа случаев РС в «нетипичных» возрастных группах, т.е. с началом заболевания в возрасте моложе 18 и старше 45 лет (особенно существенно среди детей и подростков). Характерной особенностью является повышение частоты встречаемости РС (т.е. общего количества больных) во многих регионах [А.Н. Бойко, Н.Ф. Смирнова, С.Н. Золотова, Е.И. Гусев Российский государственный медицинский университет, Москва. Эпидемиология и этиология рассеянного склероза. Consilium Medicum. 2008; 07].

До недавнего времени не существовало лекарственных средств, которые могли бы существенно повлиять на течение РС. Два последних десятилетия изменили представление об этом заболевании как о некурабельном. Это произошло в связи с внедрением в клиническую практику препаратов иммуномодулирующего ряда - интерферонов, глатирамера ацетата, финголимода и др. Иммуномодулирующая терапия позволяет значительно сократить число обострений PC и замедлить нарастание инвалидизации пациентов. В настоящее время принято назначать иммуномодулирующую терапию сразу же после установления диагноза, так как отсроченное назначение лечения снижает его эффективность. В связи с этим очевидно, что важна правильная постановка диагноза на самых ранних этапах заболевания. Несмотря на то, что сейчас имеются такие дополнительные методы исследования, как МРТ (магнитно-резонансная томография) и исследование вызванных потенциалов (ВП), примерно половине пациентов правильный диагноз ставится только через 5 лет после начала заболевания, и это время для проведения лечения оказывается упущенным. [Шмидт Т.Е. // РМЖ "Человек и лекарство" 2010, JN° 5, 224].

Симптомы заболевания включают усталость, онемение, дрожь, покалывание, дизестезию, нарушения зрения, головокружение, когнитивные нарушения, урологических дисфункция, снижение подвижности и депрессии. Четыре типа классификации клинических моделей болезни: ремитирующего, вторично-прогрессирующий, первично-прогрессирующий и прогрессивно- рецидивирующим [Hauserand S.L., Goodkin D.E., "Multiple Sclerosis and Other Demyelinating Diseases in Harrison's Principles of Internal Medicine", 14th Edition, vol. 2, McGraw-Hill, 1998, pp. 2409-2419].

Современные методы терапии направлены на облегчение симптомов заболевания, насколько это возможно. В зависимости от типа препарата лечение обычно предполагает использование иммуномодулирующих агентов, таких как интерфероны (интерферон бета-Ι-, бета- 1 -6- и альфа- 2), глатиромерацетат или кортикостероиды, такие, как метилпреднизолон и преднизолон. Кроме того, химиотерапевтические средства, такие, как метотрексат, азатиоприн, циклофосфамид, кладрибин, финголимод, терифлуномид, диметилфумарат и циклоспорина активно используются в терапии PC.

Например, известен патент RU 2496486 С1 , раскрывающий твердую фармацевтическую композицию для подавления иммунной системы и лечения рассеянного склероза. Фармацевтическая композиция в форме таблетки или капсулы содержит модулятор S 1P рецепторов, представляющий собой 2-амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]проп� �н-1 ,3- диол (финголимод) или его фармацевтически приемлемую соль, лактулозу, полиэтиленгликоль-6000 и поливинилпирролидон.

Также известен патент RU 2552951 С2, раскрывающий таблетки, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, пригодные для лечения рассеянного склероза, содержащие в ядре диметилфумарат в качестве активного вещества, гидроксипропилцеллюлозу; лактозу.

В настоящее время выпускаются таблетки Волвит, содержащие биотин (biotin) 5 мг и вспомогательные вещества: целактозу 80, Na лаурилсульфат, Na кроскармеллозу, магний стеариновокислый, кремния диоксид коллоидный (безводный), покрытие Opadry II 85 G 54348 розовый (http://compendium.com.ua/info/ 171919/kusum/volvit-sup-sup-). Известна заявка WO2014016003, в которой раскрывается применение Биотина в высоких дозировках, 50-700 мг в день, для лечения рассеянного склероза. Отмечается, что биотин может использоваться в форме гелевых капсул, таблеток, в том числе с пленочным покрытием, пастилок и пилюль. Наполнители, которые могут использоваться, известны из уровня техники: Тальк, микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, манноза, крахмал (в частности кукурузный крахмал), стеарат магния (E572) и стеариновая кислота (Е570). Этот список не является исчерпывающим. Когда этот состав подготовлен в форме капсул, предпочтительным наполнителем является микрокристаллическая целлюлоза. Когда состав находится в форме таблетки, покрытой оболочкой, покрытие пленки может быть сформировано из любого вещества, известного в данной области, такого как гипромелоза (Е464), этилцеллюлоза, макрогол, тальк, диоксид титана (Е171) или оксид железа (Е 172). Хотя в источнике и перечислены некоторые вспомогательные вещества, отсутствуют данные о наличии разработанных и описанных конкретных готовых лекарственных форм с высокими дозировками Биотина. Из источника не ясно, удалось ли авторам создать формы с высоким процентным содержанием вещества или их нужно принимать несколько для приема определенной дозы. Данный источник может быть указан в качестве ближайшего аналога-прототипа.

Задачей настоящего изобретения является создание эффективной в отношении демиелинизирующих заболеваний твердой лекарственной формы биотина, разработка способа получения и фармацевтического состава биотина - лекарственного средства замедленного высвобождения с более высоким содержанием активного компонента при наличии устойчивых технологических свойств и стабильности, а также воспроизводимой кинетики высвобождения активного вещества.

Поставленная задача достигается вариантами фармацевтических составов, обладающих терапевтическим действием в отношении проявлений демиелинизирующих заболеваний, таких как рассеянный склероз, выполненных в виде твердых лекарственных форм, включающих в качестве активного начала Биотин и определенные сочетания целевых добавок. Технический результат: стабильность, ко нтро л иру емое высвобождение и высокая точность дозирования, а также обеспечение улучшенной технологичности, биодоступности и высокой и стабильной концентрации Биотина в крови.

Биотин является водорастворимым витамином группы В. Биотин это кофактор в метаболизме жирных кислот, лейцина и в процессе глюконеогенеза.

Витамин Н (биотин, витамин В7) - белое кристаллическое вещество, разрушаемое при высокой температуре и растворимое в щелочной водной среде. Биотин участвует в образовании жирных кислот и некоторых биологически активных веществ. Биотин способен производиться кишечной микрофлорой, но, этого недостаточно для обеспечения потребности организма в витамине Н.

Функции витамина Н в организме человека.

Биотин регулирует уровень сахара в крови и очень важен для углеводного обмена.

Витамин Н контролирует процессы глюконеогенеза, отвечая за участие глюкозы в обмене веществ.

Биотин играет важную роль в усвоении белка и сжигании жира.

Витамин В7 содержит серу, которая очень важна для здоровья волос, ногтей и кожи - биотин еще называют «витамином красоты». Витамин H необходим для нормальной деятельности нервной системы. Биотин принимает участие в синтезе полезной флоры кишечника [http ://www.100vitaminov.ru/vitamin_h.php] .

Витамин Н апробируется в инновационных методах использования в онкологии. Известно, что антитела могут блокировать факторы роста раковой опухоли или их рецепторы, активизируя иммунологическую атаку на опухоль. Возможно использование т.н. стрептавидин/биотиновой системы и антителоэнзимного комплекса, чтобы доставить пролекарство-активирующий фермент к опухоли для селективного преобразования пролекарства непосредственно в самой опухоли [D. Wilkins, A. Mayer, 2006].

Дефицит т.н. голокарбоксилазысинтетазы (Holocarboxylasesynthetase

- HLCS) считается аутосомным рецессивным заболеванием, a HLCS является ферментом, который катализирует инкорпорацию биотина в карбоксилазу и ги стоны. Больные дети, имеющие мутантную форму HLCS, хорошо отвечают на целевую терапию биотином [Y. Suzuki et al., 2005].

Кофермент ацетилкарбоксилазы - биотинзависимый фермент, катализирует карбоксилирование ацетил-СоА, чтобы воспроизвести малонил-СоА. Он играет большую роль в жировом обмене. Исследование молекулярного механизма функционирования описываемого кофермента

- это важный шаг к созданию новых лекарственных препаратов с улучшением метаболизма липидов [L. Tong, 2005].

Достаточно убедительно показано, что биотин (водорастворимый витамин) является простетической группой карбоксилаз. Кроме того, он не только выступает в роли карбоксилазного кофактора, но и участвует в иммунитете и во многих проявлениях метаболизма. В последние годы значительный прогресс был сделан в расшифровке генного механизма, в котором участвует биотин на транскрипционном и посттранскрипционном уровнях, и в понимании механизмов взаимодействия биотина и генной экспрессии [A. Vilches-Flores, С. Fernandez-Mejia, 2005].

Общепринято полагать, что митохондриальный окислительный распад является одним из факторов старения, происходящего за счет ингибирования пути биосинтеза гема в митохондрии, последующего повреждения ДНК. Дефицит ряда миронутриентов способствует этому. К ним относятся железо, цинк, пантотеновая кислота и, как оказалось, биотин. Магний и марганец, участвуя в митохондриальном обмене, не воздействуют на гем непосредственно. Предполагается, что коррекция содержания в организме данных нутриентов и биотина может способствовать снижению активности процессов старения [В. Ames, Н. Atamna, D. Killilea, 2005].

Сохраняется большой интерес к ферменту биотинидазе, который участвует в метаболизме биотина. Дефицит биотинидазы был открыт еще в 1982 году. Обсуждаются вопросы взаимодействия биотинидазы и белков-гистонов, роль фермента в функциях хроматина ДНК [В. Wolf, 2005].

Очень важно, что, как и в витаминах А и D, в Биотине обнаружились ярко выраженные свойства гормона. Н. Watanabe с соавторами [2007] доказали гормональный контроль биотина над генами, ответственными за эмбриогенез и развитие скелета. На фоне недостаточности биотина его гормональная активность резко снижается и тормозится развитие клеток соединительной и костной тканей.

В целом, анализируя мировую литературу по биотину, можно говорить о том, что сформировалось понятие об особенной генетической болезни - биотинзависимом множественном карбоксилазном дефиците. Причиной болезни является, как предполагается, снижение активности голокарбоксилазной синтетазы. Выявлен интересный факт: природа Биотина двойственна - он является одновременно переносчиком карбоксила, кофактора карбоксилазы, и лигандом неизвестной функции относительно гистонов [R.Gravel., М. Narang, 2005].

Ферменты, содержащие в качестве коэнзима Биотин, катализируют реакции карбоксилирования, сопряженные с распадом АТФ, и реакции транскарбоксилирования (протекающие без участия АТФ), при которых субстраты обмениваются карбоксильной группой. Реакции карбоксилирования и транскарбоксилирования имеют важное значение в организме при синтезе высших жирных кислот, белков, пуриновых нуклеотидов (соответственно нуклеиновых кислот).

Установлено, что Биотин регулирует экспрессию генов, ответственных за метаболизм инсулина и глюкозы. Он стимулирует работу генов, ответственных за усвоение глюкозы крови (через продукцию инсулина, через инсулиновые рецепторы, панкреатическую и печеночную глюкокиназу). Напротив, Биотин уменьшает экспрессию печеночной фосфоэнолпируваткарбооксикиназ ы - фермента, стимулирующего производство глюкозы печенью. Таким образом, Биотин регулирует деятельность генов, которые обеспечивают интермедиаторный обмен, особенно углеводный и жировой.

Обнаружение Bottin и др., того факта, что недостаток биотина можно представить как тяжелое и диффузное миелинизирующее нарушение, послужило в дальнейшим поддержкой идеи о том, что биотин вовлечен в миелиновый метаболизм. (Tourbah A. "Biotin and demyelinating diseases - a new connection?" // Mult. Scler., 2015). Предлагаемые препаративные формы обеспечивают Биотин в чрезвычайно высоких дозировках в частности для применения при рассеянном склерозе.

Наполнители или разбавители добавляют к активному веществу с целью гомогенизации готового лекарственного средства и подобраны таким образом, чтобы обеспечить высокую биодоступность, оптимальные показатели сыпучести, насыпной плотности.

В вариантах реализации данные композиции, предпочтительно, но не исключительно, содержат одну стандартную дозу Биотин. Предпочтительно стандартная доза находится в виде твердой лекарственной формы, такой как таблетка или капсула, и более предпочтительно представляет собой таблетку. В частности, данный препарат может включать в себя 100мг, 300мг или 600 мг Биотина в твердой лекарственной форме.

Одним из вариантов является фармацевтическая композиция в виде твердой лекарственной формы, обладающая терапевтическим эффектом в отношении демиелинизирующего заболевания, в частности рассеянного склероза, содержащая в качестве действующего вещества биотин и в качестве целевых добавок -лактозу, крахмал и/или модифицированный крахмал, микрокристаллическую целлюлозу, растворимый поливинилпирролидон, аэросил, смазывающий агент, гипромеллозу, Бенецел МР-824, Лудипресс LCE при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Биотин 15,0- 20,0

Лактоза 3,0- 6,0

Крахмал и/или модифицир 10-17

крахмал растворимый поливинилпирролидон

Смазывающий агент 0,9-1,1

Аэросил 0,5-1 ,2

Бенецел МР-824 8,0-9,0

Лудипресс LCE 15,0-18,0 Гипромеллоза 17,0-20,0

Микрокристалическая целлюлоза остальное

Смазывающий агент может быть выбран из стеариновой кислоты, ее фармацевтически приемлемых солей, их смесей, глицерил бегената, натрий фумарил стеарата и т.п.

Лактоза может представлять собой безводную лактозу, лактозу моногидрат, таблетозу-80, Целлактозу 80.

Крахмал кроме свойств глиданта, позволяет решать и другие производственные задачи, выполняя функции антиадгезива, дезинтегранта и связующего. Его выбирают из крахмалов, таких как картофельный, кукурузный, пшеничный. Модифицированный крахмал может представлять собой Primojel фирмы Avebe, «Starch-1500» (Крахмал- 1500) фирмы Colorcon и т.п. Предпочтительно, согласно изобретению, используют смесь картофельного крахмала и крахмала- 1500.

Гипромеллоза выполняет роль связующего и пластификатора.

Например, можно использовать Метоцел марок Methocel К100, Methocel К15М. Предпочтительной маркой водорастворимого поливинилпирролидона является Коллидон, например Коллидон VA-64.

При использовании в качестве наполнителя лактоза и микрокристаллическая целлюлоза могут быть в виде микрочастиц размерами 100- 150 мкм. Процесс получения твердой формы включает в себя стадии перемешивания Биотина и вспомогательных веществ, добавляемых последовательно с перемешиванием для каждого в течение 2-4 минут, увлажнения 5% раствором поливинилпирролидона или его смесью с крахмальным клейстером, полученным из части крахмала (и/или модифицированного крахмала) с получением влажной грануляционной смеси; высушивания с получением сухой грануляционной смеси; измельчения с получением измельченной грануляционной смеси; смешивания со смазывающим веществом и аэросилом измельченной грануляционной смесью в течение 4- 6 минут с получением готовой смеси; получения из готовой смеси твердой лекарственной формы для перорального применения. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления окончательную перемешанную смесь прессуют в таблетки. В других предпочтительных вариантах осуществления окончательную перемешанную смесь заключают в капсулы.

Другим вариантом является фармацевтическая композиция в виде твердой лекарственной формы, обладающая терапевтическим эффектом в отношении демиелинизирующего заболевания, в частности рассеянного склероза, которая может диспергироваться в ротовой полости менее чем за 10 минут содержащая в качестве действующего вещества биотин и в качестве целевых добавок - маннит, ароматизатор, низкокалорийный подсластитель, смазывающий агент, лактозу, крахмал или прежелатинизированный крахмал, при следующих соотношениях компонентов, масс.%:

Биотин 1 ,65-2,49

Маннит 16,50-33,17 Ароматизатор 1,99-3,96

Низкокалорийный подсластитель 0,50-0,99

Смазывающий агент 0,50-0,99

Лактоза 49,09-60,73

Крахмал или

прежелатинизированный крахмал 12,27-15,18

Распадаемость в воде - 3,6-5,8 мин; растворение, «вращающаяся корзинка» - 93,8% (при необходимых - не менее 75).

В качестве низкокалорийного подсластителя может быть выбран аспартам, изомальт, ксилит, стевиозид и др. Предпочтительно включение аспартама.

При использовании в качестве наполнителя лактоза может быть в виде микрочастиц размерами 100-150 мкм.

В качестве ароматизатора могут использоваться предпочтительно натуральные ароматизаторы, такие как «абрикос», шоколад, мёд и т.п.

Смазывающий агент, лактоза, крахмал выбираются, как это определено для вышеприведенного варианта твердой формы.

Другим вариантом является состав твердой лекарственной формы с замедленным высвобождением активного начала, содержащим следующие компоненты, в масс.%:

Биотин 40-60

Метоцел (METHOCEL) К 100 LV 14-21

Метоцел (METHOCEL) К4М 5-10

Микрокристаллическая целлюлоза 7-17

Коповидон 1 ,5-3

Коллоидный диоксид кремния 0,4-1 Фармацевтически приемлемая соль

стеариновой кислоты 0,6-1

Целевой профиль замедленного высвобождения составляет, по меньшей мере 20-24 часа.

Было обнаружено, что влажная грануляция проявляет тенденцию к потенциальному воздействию на стабильность вследствие влияния влаги и вероятности термического разложения лекарственного вещества во время сушки. Для сухой грануляции методом вальцевания, порошкообразные частицы лекарственного вещества и наполнители соединяются под высоким давлением для образования ленты, а перед прессованием (таблетирование) разбиваются для образования гранул размалыванием. Также обнаружено, что риск неудовлетворительной однородности состава таблетки и отклонение массы таблетки с биотином может быть снижен при осуществлении контроля фракционного состава и свойств сыпучести. Еще одним объектом изобретения является способ получения таблеток биотина замедленного высвобождения методом вальцевания, предпочтительно при использовании субстанции биотина микронизированной с распределением частиц по размеру d ₉₀ <50 микрон. В частности, гранулометрический состав частиц с d ₉ o<50 микрон: d ₉₀ - 62,62 мкм, d ₅₀ - 25,86 мкм, - 8,23 мкм.

Способ получения фармацевтического состава в виде таблетированной формы с замедленным высвобождением характеризуется тем, что Биотин, комбинацию Метоцел К4М и Метоцел К 100 LV, микрокристаллическую целлюлозу и коповидон просеивают вместе, перемешивают до однородности, добавляют фармацевтически приемлемая соль стеариновой кислоты, коллоидный диоксид кремния, перемешивают, смесь уплотняют вальцеванием, добавляют коллоидный диоксид и перемешивают вместе с предварительно уплотненными гранулами с последующим добавлением фармацевтически приемлемой соли стеариновой кислоты, перемешиванием и формованием твердой лекарственной формы.

Таблетки могут быть спрессованы в капсулообразной форме, либо полученная таблет-смесь может быть рассыпана в капсулы.

Предпочтительно перемешивание ведут при скорости мешалки 20 об. /минуту. Любую из стадий перемешивания осуществляют до однородного состояния, предпочтительно в течение 3-6 минут. На стадии вальцевания может использоваться сетка размером 1 ,6 мм для предварительной грануляции и 0,63 мм - для тонкой грануляции, и процесс осуществляют предпочтительно при гидравлическом давлении 90 бар.

Предложенный способ обеспечивает особенно хорошую текучесть, однородность и сжимаемость в готовой смеси при использовании определенных вспомогательных компонентов согласно предложенному составу.

Процесс получения твердой формы включает в себя стадии сухого перемешивания Биотина и вспомогательных веществ с образованием смеси; смачивания сухой смеси предварительно подготовленной водой (в этом случае крахмал вводится сухим) или крахмальным клейстером с получением влажной грануляционной смеси; высушивания с получением сухой грануляционной смеси; измельчения с получением измельченной грануляционной смеси; смешивания со смазывающим веществом измельченной грануляционной смесью с получением готовой смеси; получения из готовой смеси твердой лекарственной формы для перорального применения. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления окончательную перемешанную смесь прессуют в таблетки. В других предпочтительных вариантах осуществления окончательную перемешанную смесь заключают в капсулы.

Возможность осуществления изобретения продемонстрирована ниже представленными примерами.

Пример 1. Лекарственные формы

А. Таблетки

Биотин 19,33

Лактоза 5,47

Крахмал картофельный 8

Крахмал 1500 7,5

Микрокристалическая целлюлоза 13,03

Коллидон VA-64 4,25

Стеарат магния 1 , 1

Аэросил 1 ,2

Бенецел МР-824 8,12

Лудипресс LCE 15

Гипромеллоза (Methocel) 17

Б. Капсулы

Биотин 15,28

Лактоза 3,17

Крахмал картофельный 4,83

Крахмал 1500 7

Микрокристалическая целлюлоза 16,03

Коллидон VA-64 4

Стеарат магния 0,9

Аэросил 0,89 Бенецел MP-824 9,9

Лудипресс ЬСЕ 18

Гипромеллоза (Methocel) 20 В. Таблетки, масс.%

Биотин 2,49

Маннит 33,13

Ароматизатор «Абрикос» 2

Аспартам 0,50

Магния стеарат 0,50

Лактозы моногидрат 49,09

Крахмал картофельный 12,29

Рационально изготавливать препараты в форме, покрытой оболочкой.

Эстетические причины - придание внешнего приятного вида.

Практические - покрытие дает возможность увеличить механическую прочность, устранить, при наличии, неприятный вкус и запах; защищает от воздействия внешней среды, как-то: света, влаги, кислорода воздуха, уменьшение или даже отсутствие агрессивного воздействия на слизистые оболочки пищевода и желудка лекарственного вещества.

В качестве оболочки возможно использование композиции на основе готовой смеси марки «Opadry И», но, не ограничиваясь этим. При таблетировании, покрытие на таблетки-ядра наносят пленкообразующим составом на основе порошка ORADRY II массовой концентрацией 19 ± 1%. Покрытие таблеток-ядер производят известным способом.

Таблетки, с активным ингредиентом, обладают высокой биодоступностью - 86,9% при р> 0,95, согласно первому варианту и 91 ,4% - согласно второму варианту, что свидетельствует об эффективности предлагаемого фармацевтического состава, с установленным сроком годности более 2,5 лет. Содержание примесей при хранении в течение 3 лет не превышало 2%, что свидетельствует о высокой стабильности предлагаемых вариантов составов.

Изучение технологических характеристик составов с разным содержанием компонентов показало, что для прессования оптимальным по критериям сыпучесть и насыпная плотность является использование заявленных составов.

В частности, сыпучесть по примеру 1 составила 10,4 г/с, примеру 2 - 10,1 г/с, примеру 3 - 10,5 г/с, пример 1 без крахмала, вместо аэросила тальк - 7.86 г/с, пример 2 без лудипресса - 8.35 г/с.

Кроме того, при исследовании фармакокинетики составов различного качественного и количественного состава, max содержание в крови имело большой разброс у разных пациентов от 150 до 700 мкг/л при использовании в качестве контроля составов, где в качестве вспомогательных веществ использовалась смесь лактозы, крахмалы, талька, микрокристаллической целлюлозы, стеарата магния (как это отмечалось в прототипе). В то время как при введении заявленных составов такой вариабельности не наблюдалось, в среднем содержание составило 600-800 мкг/л.

Пример 2.

В качестве экспериментальной патоморфологической модели рассеянного склероза эксперименте применяется аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) (Cross А.Н., Stark J.L. "Humoral immunity in multiple sclerosis and its animal model, experimental autoimmune encephalomyelitis" // Immunol. Res. 2005. V.32, No 1-3. P.8598.).

Для моделирования аутоиммунного энцефаломиелита у животных приготовляется энцефалитогенная эмульсия (гомогенат гомологичного мозга животных в полном адъюванте Фрейнда), которая вводится в подушечки задних лап морских свинок (Абдурасулова И.Н., Сердюк С.Е., Гмиро В.Е. 2007. // Нейроиммунология. V, N 1. С.4-10). В настоящее время описано более 20 белков миелина (Baumann, Pham-Dinh, 2001), из которых обладают иммуногенными свойствами и наиболее часто используются для индукции ЭАЭ: основной белок миелина - ОБМ, протеолипидный протеин - ПЛП, гликопротеины: миелин ассоциированный гликопротеин - МАГ и миелин олигодендроцитарный гликопротеин - МОГ, олигодендроцитарный специфический белок - ОСБ. Выявлено, что не только целые белки, но и определенные фрагменты этих белков способны при введении животным вызывать ЭАЭ.

Группа животных N°10 контрольная группа, им вводилась энцефалитогенная эмульсия, без лечения. Животным, составляющим опытные группы, на фоне введения энцефалитогенной эмульсии с первого дня индуцирования патологического процесса, ежедневно, в течение 15 дней перорально вводились физиологический раствор и ГЛС Биотин 300мг, в пересчете на животный вес, в соответствии с формулой эквивалентные дозы человека (ЭДЧ) -Табл.1.

Для оценки эффективности терапевтического действия исследуемого препарата на модели ЭАЭ рассчитывали следующие показатели:

1) общее число заболевших животных (в % от числа животных в группе);

2) средний клинический индекс (КИ) на фазе заболевания;

3) количество смертельных случаев;

Показатели сопоставлялись с соответствующими показателями животных контрольной группы (с индуцированным ЭАЭ, но без введения препаратов и с введением физиологического раствора). Результаты развития у животных проявлений аллергического энцефаломиелита приведенные в таблице 1 и регистрируют высокую потенциальную клиническую эффективности ГЛС Биотина. Таблица 1. Влияние готового лекарственного средства Биотин в твердой лекарственной форме

Анализ средних клинических индексов у животных контрольных и опытных групп свидетельствует, что применение ГЛС Биотина уменьшает показатель КИ в 2,0-2,5 раза, т.е. существенно нивелирует развитие клинических симптомов экспериментального аллергического энцефаломиелита у животных.

Существенная разница между опытными и контрольными результатами свидетельствует о выраженном профилактическом эффекте Биотина на развитие аутоиммунного энцефаломиелита при моделировании рассеянного склероза у животных.

Пример 3.

п/ Ингредиенты Постав Мг/табл %-ное К-во Общи п щик содер таблеток й

ж эквиваленты объем ние о 100 мг серии

2333.3 (г)

700.0

Интрагранулярные компоненты

1 Биотин (партия DSM 300.0 60 233.33

050914) (d90<50 0 г

микрон).

2 Метоцел К4М Colorcon/ 30.00 6 70.00

Премиум CR Колоркон г

3 Метоцел К 100 LV Colorcon/ 70.00 14 163.33 г

Премиум CR Колоркон

4 Микрокристаллическа КПМ 87.40 17.48 203.93 г

я целлюлоза (Авицел Биополимер/

рН 102)

5 Коповидон BASF 7.50 1.50 17.50

(КоллидонУА 64) Коллоидный диоксид Evonik/ 1.20 0.24 2.80 г

6 кремния (Аэросил 200 Эвоник

Фарма) USP/NF*

3.50

г

7 Магния стеарат НФ Macron/ 1.50 0.30

/NF/ Макрон

Экстрагранулярные компоненты

8 Коллоидный диоксид Evonik/ 0.90 0.18 2.10 г кремния (Аэросил 200 Эвоник

Фарма) USP/NF*

9 Магния стеарат НФ Macron/ 1.50 0.30 3.50 г

/NF/ Макрон

Масса таблетки/пластифицированной 500.0 100.0 700.0 г смеси 0

Пример 4

п/ Ингредиенты Поставщик Мг/капс %-ное К-во капсул Общи п содер эквивалента й ж о 100 мг объем ние 2333.3 серии

(г)

700.0

Интрагранулярные компоненты

1 Биотин (партия DSM 300.00 60 233.33

050914) ( d90<90 г

микрон).

2 Метоцел К4М Colorcon/ 45.00 9.00 105.00 Премиум CR Колоркон г

3 Метоцел К 100 LV Colorcon/ 105.00 21.00 245.00г

Премиум CR Колоркон

4 Микрокристаллическа КПМ 37.40 7.48 87.27г

я целлюлоза (Авицел Биополимер

рН 102) /

5 Коллидон VA 64 BASF 7.50 1.50 17.50г

Коллоидный диоксид Evonik/ 1.20 0.24 2.80г

6 кремния (Аэросил 200 Эвоник

Фарма) USP/NF*

7 Магния стеарат НФ Macron/ 1.50 0.30 3.50

/NF/ Макрон г

Экстрагранулярные компоненты

8 Коллоидный диоксид Evonik/ 0.90 0.18 2.10 г кремния (Аэросил 200 Эвоник

Фарма) USP/NF*

9 Магния стеарат НФ Macron/ 1.50 0.30 3.50 г /NF/ Макрон

Масса смеси 500.00 100.0 700.0 г

Пример 5. Способ получения

1. Просеивание интрагранулярных компонентов:

- через сито ASTM#30 просеивали вместе субстанцию биотина, комбинацию Метоцел К4М и Метоцел К 100 LV, Авицел рН 102 и Коллидон VA64;

- через сито ASTM#20 просеивали коллоидный диоксид кремния. Через сито ASTM#60 просеивали магния стеарат.

2. Смешивание (предварительное компактирование) - Просеянные вспомогательные вещества перемешивали в смесителе. Длительность перемешивания составила 6 минут при 20 об/мин.

- Просеянный стеарат магния и коллоидный диоксид кремния добавляли к предыдущей фазе и вновь перемешивали. Длительность перемешивания составила 3 минуты при 20 об/мин.

3. Уплотнение (компактирование) вальцеванием

Вышеуказанную смесь поместили в роликовый пресс (Alexanderwerk WP120) , оснащенный вальцами 25 мм. Пресс был запущен в работу согласно нижеприведенным параметрам, использовалась сетка размером 1,6 мм для предварительной грануляции и 0.63 мм - для тонкой грануляции.

Винтовой питатель, об/мин 30

Вальцы, об/мин 5

Тонкий гранулятор, об/мин 60

Ширина зазора между вальцами, мм 2

Гидравлическое давление, бар 90

4. Просеивание экстрагранулярных вспомогательных субстанций:

- через сито ASTM#20 просеивали Аэросил.

- через сито ASTM#60 просеивали магния стеарат

5. Смешивание (предварительное смазывание)

- В смеситель емкостью 1 л помещали просеянный Аэросил вместе с предварительно уплотненными гранулами. Длительность перемешивания составила 4 мин при 20 об/мин.

- Просеянный магния стеарат поместили в вышеупомянутый смеситель.

- Смеситель запустили в работу на 2 минуты при 20 об/мин.

6. Прессование Пластифицированную смесь помещают в таблеточный пресс с пуансонами типа D, прессуют согласно следующим параметрам:

Насыпная плотность (г/мл) 0,516

Плотность после уплотнения (г/мл) 0,727

Индекс Карра (%) 29,03

Соотношение по Хауснеру 1 ,41

Прессование составов, как в случае примера 3, так и в случае примера 4 было равномерным, с минимизированным отклонением от установленных параметров (менее 0,31% в отличие от прототипа с 0,96%).

Среднее значение прочности - 20,63 Кр.

Пример 6. Способ получения

1. Просеивание интрагранулярных компонентов:

- через сито ASTM#30 просеивали вместе субстанцию Биотина, комбинацию Метоцел К4М и Метоцел К 100 LV, Авицел рН 102 и

Коллидон VA64;

- через сито ASTM#20 просеивали коллоидный диоксид кремния. Через сито ASTM#60 просеивали стеарат магния.

2. Смешивание (предварительное компактирование)

- Просеянные вспомогательные вещества перемешивали в смесителе.

Длительность перемешивания составила 6 минут при 20 об/мин.

- Просеянный Магния стеарат и Коллоидный диоксид кремния добавляли к предыдущей фазе и вновь перемешивали. Длительность перемешивания составила 3 минуты при 20 об/мин.

3. Уплотнение (компактирование) вальцеванием

Вышеуказанную смесь поместили в роликовый пресс (Alexanderwerk WP120) , оснащенный вальцами 25 мм. Пресс был запущен в работу согласно нижеприведенным параметрам, использовалась сетка размером

1.6 мм для предварительной грануляции и 0,63 мм - для тонкой грануляции.

Винтовой питатель, об/мин 30

Вальцы, об/мин 5

Тонкий гранулятор, об/мин 60

Ширина зазора между вальцами, мм 2

Гидравлическое давление, бар 90

4. Просеивание экстрагранулярных вспомогательных субстанций:

- через сито ASTM#20 просеивали Аэросил;

- через сито ASTM#60 просеивали магния стеарат.

5. Смешивание (предварительное смазывание)

- В смеситель емкостью 1 л помещали просеянный Аэросил вместе с предварительно уплотненными гранулами. Длительность перемешивания составила 4 мин при 20 об/мин.

- Просеянный магния стеарат поместили в вышеупомянутый смеситель.

- Смеситель запустили в работу на 2 минуты при 20 об/мин.

Затем на капсуляторе рассыпается в капсулы Ν°3 ИЛИ N°2, ИЛИ N°l , или Ν2Ο и капсул ируется.

Способ обеспечивает высокую точность заполнения капсул наполнителем (с допуском не превышающим ± 3%)

Пример 7

В качестве экспериментальной патоморфологической модели рассеянного склероза эксперименте применяется аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) (Cross А.Н., Stark J.L. "Humoral immunity in multiple sclerosis an dits animal model, experimental autoimmune encephalomyelitis" // Immunol. Res. 2005. V. 32, N 1-3. P.8598).

Для моделирования аутоиммунного энцефаломиелита у животных приготовляется энцефалитогенная эмульсия (гомогенат гомологичного мозга животных в полном адъюванте Фрейнда), которая вводится в подушечки задних лап морских свинок (Абдурасулова И.Н., Сердюк С.Е., Гмиро В.Е. 2007. // Нейроиммунология. V, N 1. С.4-10).В настоящее время описано более 20 белков миелина (Baumann, Pham-Dinh, 2001), из которых обладают иммуногенными свойствами и наиболее часто используются для индукции ЭАЭ: основной белок миелина - ОБМ, протеолипидный протеин - ПЛП, гликопротеины: миелин ассоциированный гликопротеин - МАГ и миелин олигодендроцитарный гликопротеин - МОГ, олигодендроцитарный специфический белок - ОСБ. Выявлено, что не только целые белки, но и определенные фрагменты этих белков способны при введении животным вызывать ЭАЭ.

Группа животных NelO - контрольная группа, им вводилась энцефалитогенная эмульсия, без лечения. Животным, составляющим опытные группы, на фоне введения энцефалитогенной эмульсии с первого дня индуцирования патологического процесса, ежедневно, в течение 15 дней перорально вводились физиологический раствор и ГЛС Биотин 300мг по примеру 1 , в пересчете на животный вес, в соответствии с формулой эквивалентные дозы человека (ЭДЧ) - Таблица 2.

Для оценки эффективности терапевтического действия исследуемого препарата на модели ЭАЭ рассчитывали следующие показатели:

1) общее число заболевших животных (в % от числа животных в группе);

2) средний клинический индекс (КИ) на фазе заболевания; 3) количество смертельных случаев;

Показатели сопоставлялись с соответствующими показателями животных контрольной группы (с индуцированным ЭАЭ, но без введения препаратов и с введением физ. раствора).

Результаты развития у животных проявлений аллергического энцефаломиелита приведенные в таблице 2 и регистрируют высокую потенциальную клиническую эффективности ГЛС Биотина.

Анализ средних клинических индексов у животных контрольных и опытных групп свидетельствует, что применение ГЛС Биотина уменьшает показатель КИ в 2,0-2,5 раза, т.е. существенно нивелирует развитие клинических симптомов экспериментального аллергического энцефаломиелита у животных.

Существенная разница между опытными и контрольными

результатами свидетельствует о выраженном профилактическом эффекте Биотина на развитие аутоиммунного энцефаломиелита при

моделировании рассеянного склероза у животных.

Таблица 2. Влияние готового лекарственного средства Биотин в твердой лекарственной форме

Заявленные композиции могут быть применены в качестве лекарственных средств для лечения демиелинизирующих заболеваний, в частности: при диффузном склерозе, оптикомиелите, остром поперечном миелите, острый рассеянный энцефаломиелите и т.п., предпочтительно при лечении рассеянного склероза в медицине.