本发明涉及化学合成领域，更具体涉及一种含 氟的氘代二苯基脲的合成及生产的 方法和工艺。 背景技术

已知的 ω-二苯基脲衍生物是 c-RAF激酶活性的化合物。例如在 WO 2000/042012 中公开了一类 ω-羧基芳基取代的二苯基脲， 及其在治疗癌症以及相关疾病中的用途。

ω-二苯基脲化合物如索拉非尼 (Somfenib)最先被发现是 c-RAF激酶的抑制剂， 之 后不断的研究发现它还能抑制 MEK 和 ERK 信号传导通路、 血管内皮生长因子 -2(VEGFR-2)、 血管内皮生长因子 -3(VEGFR-3)、 以及血小板源生长因子 - β (PDGFR- β；)的酪氨酸激酶的活性 (Curr Pharm Des 2002;8:2255 - 2257), 因此它被称之为多激酶 抑制剂， 具有双重抗肿瘤作用。

索拉非尼 (Sorafenib；)， 商品名 Nexavar, 是由拜耳公司和 ONXY公司共同研制的 一种新型的口服多激酶抑制剂， 由于它在一项针对晚期肾癌的 III期临床研究中的卓 越表现， 2005年 12月被 FDA快速批准用于治疗晚期肾细胞癌， 2006年 11月在中国 上市。 然而,索拉非尼 (Somfenib) 具有多种副作用， 例如高血压、 体重减轻、 皮疹等。

BAY 73-4506是一种索拉非尼 3-氟基的衍生物，也是作为多激酶的抑制剂靶� ��作 用于肿瘤及其血管。 尤其是， BAY 73-4506是一种有效的 Raf激酶、 p38激酶、 血小 板生长因子受体 (PDGFR)激酶以及血管内皮生长因子受体 (VEGFR)激酶 2和 3的抑制 剂。对于这些特殊激酶的抑制已与预防或治疗 骨质疏松症、炎症性疾病、增生性疾病、 血管生成性疾病包括癌症密切相关 (Dumas等， 专利 PCT Publication WO 2005009961 A2， Hedbom S等， Journal of Clinical Oncology, 25 , (Suppl. 18)： Abs， 3593)。 该化合物目前正进行肾细胞癌 (ClinicalTrials.gov Web Site 2008, May 05)、 实体瘤 (J Clin Oncol, 2008, 26(15, Suppl.): Abst 2558)、 肝癌 (ClinicalTrials.gov Web Site 2010, May 17)和转移性结肠癌 (ClinicalTrials.gov Web Site 2010, May 17)治疗的临床评价。 BAY 73-4506 正在进行治疗多发性骨髓瘤的临床前评价 (Blood, 2008, 112(11): Abst 2766)。

然而， 本领域仍需要开发对 mf激酶有抑制活性、 或更好药效学性能的化合物及 其制备工艺。 发明内容 本发明的目的就是提供一类新型的具有 mf激酶抑制活性和更好药效学性能的化 合物及其用途。

本发明的另一目的是提供氘代的 ω -二苯基脲及其中间体的一系列合成方法， 从 而满足药物工业生产方面中的标准， 并提高操作性和安全性。 明的第一方面， 提供了一种式 V所示的中间体， 式中， X为 Cl、 Br、 I、 或 0S0 ₂ CF _:

在另一优选例中， Y为 Cl， 结构式为 。

在本发明的第二方面， 提供了一种制备下式化合物的方法，

所述方法包括：

(a) 在惰性溶剂中以及碱存在下， 式 B2化合物与式 V化合物反应， 形成所述化 合物;

碱

B2 V

式中， X为 Cl、 Br、 I、 或 0S0 ₂ CF _{3 ;}

或者， 所述方法包括：

(b) 在惰性溶剂中， 式 B'化合物与 CD ₃ NH ₂ 或 CD ₃ NH ₂ · HC1反应， 形成所述的 化合物； CM4309

式中， C1-C8直链或支链垸基， 或芳基；

或者， 所述方法包括：

(c) 在惰性溶剂中， 4-氯 -3-三氟甲基苯异氰酸酯 (環)与式 5化合物反应， 形成所

或者， 所述方法包括：

(d) 在惰性溶剂中， 在 CDI和。¾ ₂ 存在下， 式 5化合物与式 6化合物反应，

6

或者， 所述方法包括：

(e) 在惰性溶剂中， 将 3-氟 -4-氨基-苯酚与式 V反应， 从而形成式 B1化合物； 在惰性溶剂中， 将 B1化合物与式 W进行反应， 从而形成式 M化合物； 和在惰性溶 剂 -氯 -3-三氟甲基苯胺进行反应， 从而形成所述化合物

式中， R为氢、 甲基、 硝基和氯； 所述的惰性溶剂选自氯仿、 二氯甲垸、 四氢呋 喃、 1， 4-二氧六环、 甲苯、 吡啶、 DMF、 DMSO、 或其混合溶剂； 所述的碱选自吡 啶、 碳酸钾、 碳酸钠、 碳酸氢钠、 碳酸氢钾、 三乙胺、 N， N-二乙基异丙胺、 N， N- 二甲胺吡啶、 N-甲基吗啡， 或其组合；

或者， 所述方法包括：

(f) 在惰性溶剂中， 将 4-氯 -3-三氟甲基苯胺与式 W进行反应， 从而形成式 B化 合物； 合物。

式中， R为氢、 甲基、 硝基和氯； 所述的惰性溶剂选自氯仿、 二氯甲垸、 四氢呋 喃、 1， 4-二氧六环、 甲苯、 吡啶、 DMF、 DMSO、 或其混合溶剂； 所述的碱选自吡 啶、 碳酸钾、 碳酸钠、 碳酸氢钠、 碳酸氢钾、 三乙胺、 N， N-二乙基异丙胺、 N， N- 二甲胺吡啶、 N-甲基吗啡， 或其组合。

在另一优选例中， 所述的式 B2化合物是通过以下该方法制备：

(i) 在惰性溶剂中， 将 3-氟 -4-氨基苯酚和 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯进行缩 合， 从

B2

在另一优选例中， 所述的惰性溶剂包括 (但并不限于；)： 二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙 腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 Ν,Ν-二甲基乙酰胺、 Ν-甲基吡洛 垸酮、 二甲基亚砜、 或其组合。

在另一优选例中， 所述的碱选自叔丁醇钾、 氢化钠、 氢化钾， 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠或组合。

在另一优选例中， 在方法 还包括： 在催化剂存在下进行反应， 所述的催化剂 选自： 碘化亚铜和脯氨酸； 或碘化亚铜和吡啶甲酸。

在另一优选例中， 各反应在温度 0-200°C下进行。

在另一优选例中， 反应时间为 0.2-72小时，较佳地为 0.5-64小时，更佳地为 1-48 小时。

在本发明的第三方面， 提供了一种制备 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基;)酰胺 的方法， 包括步骤：

(al)在碱性条件下， 于惰性溶剂中， 将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯与 1 , 1 , 1-三氘代甲胺 或其盐进行反应， 从而形成 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺； 或者

(a2) 在惰性溶剂中， 将 3-氯 -吡啶 -2-甲酰氯与氘代甲胺进行反应， 形成 4-氯吡啶 -2-(N-l，, r,r-三氘代甲基)甲酰胺。

在另一优选例中， 所述的惰性溶剂包括： 四氢呋喃、 乙醇、 甲醇、 水、 或其混合 溶剂。

在另一优选例中， 步骤 (al)和 (a2)中， 反应温度为 - 10°C至回流温度， 较佳地为 -4

°〇至60°〇， 更佳地为 5-50°C。

在另一优选例中，步骤 (al)和 (a2)中,反应时间为 0.5-72小时，较佳地为 1 -64小时， 更佳地为 2-48小时。

在另一优选例中， 步骤 (al)中， 所述的碱性条件为反应体系中存在碳酸钾、 碳酸 钠、 碳酸铯、 氢氧化钠、 氢氧化钾或其组合。

在本发明的第四方面， 提供了一种式 B2中间体，

B2

在本发明的第五方面， 提供了一种式 B2化合物的制备方法， 其特征在于， 包括 步骤： 在惰性溶剂中， 将 3-氟 -4-氨基苯酚和 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯进行缩合， 从而形成 B2化合物：

B2

在本发明的第六方面，提供了本发明第一或第 四方面所述的中间体的用途， 它们 被用于制备氘代二苯基脲或用作制备氘代二苯 基脲的原料。

在另一优选例中， 所述的氘代二苯基脲包括 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基]酰 脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-l，,r, r-三氘代甲基) B比啶酰胺 (CM4309); 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基 甲酰基;)吡啶 -1-氧化物；

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)吡 啶酰胺对甲苯磺酸盐 (CM4309 · TsOH);

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)吡 啶酰胺盐酸盐； 或

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)吡 啶酰胺甲磺酸乙醇合物。

在本发明的第七方面， 提供了一种下式化合物 (CM4309)的用途， 所述化合物用 于制备抑制磷酸激酶 (如 mf激酶)的药物组合物。

在另一优选例中， 所述的药物组合物用于治疗和预防以下疾病： 癌症、 心血管 疾病、 炎症、 免疫性疾病、 肾病、 血管发生 (angiogenesis；)、 或前列腺疾病。

在另一优选例中， 所述的癌症包括 (但并不限于；)： 非小型细胞肺癌、 子宫癌、 直 肠癌、 脑癌、 头癌、 颈癌、 膀胱癌、 前列腺癌、 乳腺癌、 固体肿瘤、 肾癌、 血癌、 肝 癌、 胃癌、 或胰腺癌。

在本发明的第八方面， 提供了一种治疗方法， 它包括步骤： 给需要治疗的对象施 用本发明的 CM4309化合物， 或其晶型、 药学上可接受的盐、 水合物或溶剂合物， 或 施用含所述化合物的药物组合物， 从而抑制磷酸激酶 (如 mf¾酶)。 较佳地， 所述的疾 病包括： 癌症、 心血管疾病、 炎症、 免疫性疾病、 肾病、 血管发生、 或前列腺疾病。

应理解， 在本发明范围内中， 本发明的上述各技术特征和在下文 (如实施例;)中具 体描述的各技术特征可以互相组合， 从而构成新的或优选的技术方案。 限于篇幅， 在 此不再 累述。 附图说明

图 1显示了 CM4306, CM4308和 CM4309对人肝细胞癌 SMMC-7721裸鼠移植 模型的抑制作用 (Mean土 SEM；)。图中， "treatment"表示治疗的时间为 14天。 "control" 表示空白对照。 具体实施方式

本发明人经过研究， 意外地发现， 本发明的含氟的氘代 ω-二苯基脲及其药学上 可接受的盐与未经氘代的化合物相比， 具有明显更优异的药物动力学和 /或药效学性 能， 因此更适合作为抑制 mf激酶的化合物， 进而更适用制备治疗癌症以及相关疾病 的药物。 此外， 本发明人还发现， 采用新的式 V或式 B2中间体， 可以高效、 简便地 制备高纯度的二苯基脲化合物。 在此基础上完成了本发明。 定义

如本文所用， "卤素"指？、 Cl Br、 和 I。 更佳地， 卤原子选自 F C1和 Br 如本文所用， "垸基"包括直链或支链的垸基。 优选的垸基是 C1-C4垸基， 例 如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基等。

如本文所用， "氘代"指化合物或基团中的一个或多个氢被氘� ��取代。 氘代可以 是一取代、 二取代、 多取代或全取代。 术语 "一个或多个氘代的"与 "一次或多次氘 代"可互换使用。

在另一优选例中， 氘在氘取代位置的氘同位素含量是大于天然氘 同位素含量

(0.015%), 更佳地大于 50%, 更佳地大于 75%, 更佳地大于 95%, 更佳地大于 97%, 更佳地大于 99%, 更佳地大于 99.5%

在另一优选例中， 式 ω化合物至少含有 1个氘原子， 更佳地 3个氘原子， 更佳地 5个氘原子。

如本文所用， 术语 "化合物 CM4306 "指化合物 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基] 酰脲;) -苯氧基;) -Ν-甲基吡啶酰胺。

如本文所用， 术语 "化合物 CM4308 "指化合物 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基] 酰脲； )-3-氟 -苯氧基;) 甲基吡啶酰胺。

如本文所用， 术语 "化合物 CM4309 "指化合物 4-(4-(3-(4-氯 -3 三氟甲基;)苯基] 酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-1 ',Ι ',Ι，-三氘代甲基)吡啶酰胺。

如本文所用，术语" TsOH "表示对甲苯磺酸。 CM4309 'TsOH表示化合物 CM4309 的对甲苯磺酸盐。 氘代二苯基脲

在本发明的优选的氘代二苯基脲化合物具有式 I结构：

R ² R ^{1 1} R ¹² O

R ¹ 、丄 . R ³ ― R ¹⁰ 、丄 0、丄人.，R ⁶ (I)

式中：

X 是 N或者 N ⁺ -0-；

R ¹ 是卤素 (如 F、 CI或 Br)， 一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基；

R ² 是未氘代的、 一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基， 或者部分或全部卤 素取代的 C1-C4垸基；

R ³ 、 R ⁴ 、 R ⁵ 、 R ⁸ 、 R ⁹ 、 R ¹⁰ 、 R"、 R ¹² 、 R ¹³ 、 R ¹⁴ 分别是氢、 氘、 或卤素 (如 F,C1, 或 Br);

R ⁶ 是氢、 氘、 或一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基；

R ⁷ 是氢、 氘、 或一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基；

附加条件是 R ² 、 R ³ 、 R ⁴ 、 R ⁵ 、 R ⁶ 、 R ⁷ 、 R ⁸ 、 R ⁹ 、 R ¹⁰ 、 R"、 R ¹² 、 R ¹³ 或 R ¹⁴ 中至 少一个是氘代的或氘。

在另一优选例中，氘在氘取代位置的氘同位素 含量至少是大于天然氘同位素含量 (0.015%), 较佳地大于 30%, 更佳地大于 50%, 更佳地大于 75%, 更佳地大于 95%, 更佳地大于 99%。

在另一优选例中， 式①化合物中的除 H之外的其他元素 (如 N、 C、 0、 F等;)全部 或基本上(>99 _W t%；)为丰度最高的天然存在的元素， 例如 ¹⁴ N、 ¹² C、 ¹⁶ 0和 ¹⁹ F。

在另一优选例中， 式 ω化合物至少含有 1个氘原子， 更佳地 3个氘原子， 更佳地

5个氘原子。

在另一优选例中， R ¹ 选自卤素； 更佳的是氯；

在另一优选例中， R ² 是三氟甲基；

在另一优选例中， R ⁶ 或 R ⁷ 分别独立地选自： 氢、 氘、 氘代的甲基、 或氘代的乙 基； 更佳地， 选自一氘甲基、 二氘甲基、 三氘甲基、 一氘乙基、 二氘乙基、 三氘乙基、 四氘乙基、 或五氘乙基。

在另一优选例中， R ⁶ 或 R ⁷ 分别独立地选自： 氢、 甲基或三氘甲基。

在另一优选例中， R ³ 、 R ⁴ 或 R ⁵ 分别独立地选自： 氢或氘。

在另一优选例中， R ⁸ 、 R ⁹ 、 R ^1Q 或 R ¹¹ 分别独立地选自： 氢或氘。

在另一优选例中， R ¹² 、 R ¹³ 或 R ¹⁴ 分别独立地选自： 氢或氘。

在另一优选例中， 所述化合物是选自下组的优选化合物：

N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν，-(4-(2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基甲酰基 )-4-吡啶基 氧;)苯基；)脲；

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基） 苯基)脲基)苯氧基 )-2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基甲酰 基;)吡啶 -1-氧化物；

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ- 啶酰胺 (CM4309);

Η

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基 甲酰基;)吡啶 -1-氧化物；

γ .' 0 、Ύ

中间体

如本文所用， 术语 "本发明的中间体"指式 V化合物、 式 B'化合物 (尤其是式 B2化合物)。

上式化合物中的除 H之外的其他元素 (如 N、 C、 O等；)全部或基本上 (>99wt%；)为 丰度最高的天然存在的元素， 例如 ¹⁴ N、 ¹² C和 ¹⁶ 0。 活性成分

如本文所用， 术语 "本发明化合物"指式①所示的化合物。 该术语还包括及式 (I) 化合物的各种晶型形式、 药学上可接受的盐、 水合物或溶剂合物。

特别优选的化合物是 CM4309或其药学上可接受的盐。

如本文所用， 术语 "药学上可接受的盐"指本发明化合物与酸或碱� ��形成的适合 用作药物的盐。 药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。 一类优选的盐是本发明化合 物与酸形成的盐。 适合形成盐的酸包括但并不限于： 盐酸、 氢溴酸、 氢氟酸、 硫酸、 硝酸、 磷酸等无机酸， 甲酸、 乙酸、 丙酸、 草酸、 丙二酸、 琥珀酸、 富马酸、 马来酸、 乳酸、 苹果酸、 酒石酸、 柠檬酸、 苦味酸、 甲磺酸、 苯甲磺酸， 苯磺酸等有机酸； 以 及天冬氨酸、 谷氨酸等酸性氨基酸。 制备方法

下面更具体地描述本发明式 ω结构化合物和新颖中间体的制备方法， 但这些具体 方法不对本发明构成任何限制。 本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述 的或本 领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制 得， 这样的组合可由本发明所属领域的 技术人员容易的进行。

本发明使用的未氘代的 ω-二苯基脲及其生理上相容的盐的制备方法是 已知的。对 应氘代的 ω-二苯基脲的制备可以用相应的氘代起始化合 物为原料， 用同样的路线合 成。 例如， 本发明式 (I)化合物可按 WO 2000/042012中所述的制备方法制备， 不同点 在于在反应中用于氘代的原料代替非氘代的原 料。

通常， 在制备流程中， 各反应通常在惰性溶剂中， 在室温至回流温度 (如 0°C-80 °C， 优选 0°C-50°C)下进行。反应时间通常为 0.1小时 -60小时， 较佳地为 0.5-48小时。

以化合物 CM4309为例， 一种优选的制备流程如下：

CM4309

如合成路线一所示， 3-氟 -4-氨基 -苯酚 (化合物 I)和 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (化合物 II) 在 NN'-羰基二咪唑、 光气或三光气作用下， 反应得到 1-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基; )-3-(2- 氟 -4-羟基-苯基;) -脲 (化合物 111)。 吡啶甲酸甲酯 (化合物 IV)和氘代甲胺或氘代甲胺盐酸 盐在碱 (例如碳酸钠、 碳酸钾、 氢氧化钠、 三乙胺、 吡啶等;)的作用下、 或直接混合反 应，得到吡啶 -2-(N-l，,r,r-三氘代甲基)甲酰胺 (化合物 V)。化合物 III和化合物 V在碱 (如 叔丁醇钾、 氢化钠、 氢化钾， 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠;)或任 选的催化剂 (如碘化亚铜和脯氨酸、 或碘化亚铜和吡啶甲酸)的作用下， 得到化合物 CM-4309o 上述反应在惰性溶剂， 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四 氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜等中， 温度 0-200°C下进行。

以化合物 CM4309为例， 另一种优选的制备流程如下：

IX CM4309 如合成路线二所示， 吡啶甲酸酯 (化合物 VI)和 3-氟 -4-氨基 -苯酚 (化合物 I)在碱 (如 叔丁醇钾、 氢化钠、 氢化钾， 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠;)或任选 的催化剂 (如碘化亚铜和脯氨酸、或碘化亚铜和吡啶甲� �)的作用下，得到胺 (化合物 νπ)。 再和化合物 II在 NN'-羰基二咪唑、 光气或三光气作用下、 或和 4-氯 -3-三氟甲基 -苯基 异氰酸酯 (化合物環)反应得到脲 (化合物 IX)。 化合物 IX和氘代甲胺或氘代甲胺盐酸盐在 碱 (例如碳酸钠、 碳酸钾、 氢氧化钠、 三乙胺、 吡啶等;)的作用下、 或直接混合反应得到 化合物 CM4309。上述反应在惰性溶剂， 如二氯甲垸、二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜等中， 温度 0-200°C下进行。

以化合物 CM4309为例， 另一种优选的制备流程如下：

合成路线三

CM4309

如合成路线三所示， 2-氟 -4-甲氧基苯胺苯胺 (化合物 X)和化合物 II在 Ν'Ν'-難二 咪唑、 光气或三光气作用下、 或和 4-氯 -3-三氟甲基-苯基异氰酸酯 (化合物環)反应得到 脲 (化合物 ΧΙ)。利用本领域已知的各种去甲基方法得到 1-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基; )-3-(4- 羟基苯基;)脲 (化合物 111)。 然后使用和合成路线一中描述的同样方法， 或本领域已知的 各种合成方法，化合物 III和化合物 V反应得到化合物 CM4309。上述反应在惰性溶剂， 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲 基亚砜等中， 温度 0-200°C下进行。

以化合物 CM4309为例， 另一种优选的制备流程如下：

如合成路线四所示，化合物 V和化合物 3-氟 -4-氨基-苯酚在惰性溶剂中和碱性条 件下反应得到 4-(4-氨基 -3-氟 -苯氧基；) -吡啶 -2-(N-l，,r,r-三氘代甲基;)酰胺 (化合物 Bl)。 在惰性溶剂中， 将 B 1化合物与式 W进行反应， 从而形成式 M化合物； 和在惰 性溶剂中， 将式 M 化合物与 4-氯 -3-三氟甲基苯胺进行反应， 从而反应得到化合物 CM4309 o 上述反应在惰性溶剂， 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四 氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜、 吡啶等中， 温度 0-200°C下进行。

以化合物 CM4309为例， 另一种优选的制备流程如下：

CM4309

B1

如合成路线五所示， 在碱性条件下， 将 4-氯 -3-三氟甲基苯胺与式 W进行反应， 从而形成式 B化合物； 在碱性条件下， 将 B1化合物与式 B化合物进行反应， 从而反 应得到化合物 CM4309。 上述反应在惰性溶剂， 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己 垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜、 吡啶等中， 温度 0-200°C下 进行。

以化合物 CM4309为例， 一种特别优选的制备流程如下：

合成路线六

氘代可以通过氘代甲胺引入的。

可通过以下反应得到氘代甲胺或其盐酸盐。 硝基甲垸在碱 (氢化钠、 氢化钾、 氘 代氢氧化钠、 氘代氢氧化钾、 碳酸钾等；)， 或在相转移催化剂下， 和氘水反应得到氘 代硝基甲垸， 如有必要， 重复上述实验， 以得到高纯度的氘代硝基甲垸。 氘代硝基甲 垸还原， 如锌粉、 镁粉、 铁或镍等作用下， 得到氘代甲胺或其盐酸盐。

D ₂ 0 还原

CH ₃ N0 ₂ CD ₃ N0 ₂ CD ₃ NH ₂ -HCI 或 CD ₃ NH ₂ 再者可以通过以下反应得到氘代甲胺或其盐酸 盐。

其具体合成方法在实施例 1中有详细的说明。 本发明的主要优点包括：

(1) 本发明化合物对磷酸激酶 (Kinase)例如 mf激酶具有优异的抑制性。

(2) 通过本发明的式 、 式 B或式 B2中间体， 可以方便、 高效、 高纯度地制备 多种氘代二苯基脲。

(3) 反应条件更加温和， 操作过程更为安全。 下面结合具体实施例， 进一步阐述本发明。应理解， 这些实施例仅用于说明本发 明而不用于限制本发明的范围。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法， 通常按照 常规条件， 或按照制造厂商所建议的条件。 除非另外说明， 否则份数和百分比为重量 份和重量百分比。 实施例 1 : N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν，-(4-(2-(Ν-1，,1，,1，-三氘甲基氨基甲酰 基) -4-吡啶基氧)苯基)脲 (化合物 CM4307)

合成路线:

1、 4-氯吡啶-2-(^-1，,1，,1，-三氘代甲基)甲酰胺(3) 的制备

在配有尾气处理装置的 250 mL单颈圆底烧瓶中， 加入氯化亚砜 (60 mL), 维持温 度在 40-50°C之间， 向其中缓慢的滴加无水 DMF(2 mL), 滴加完毕后， 继续搅拌 10分 钟， 在 20分钟内向其中分批加入烟酸 (20 g， 162.6 mmol) , 溶液的颜色逐渐由绿色转 变为浅紫色。 将温度升到 72°C， 搅拌回流 16小时， 产生大量的固体沉淀物。 冷却到 室温， 用甲苯 (100 mL)稀释， 浓缩至近干， 然后再用甲苯稀释， 浓缩至干。 过滤， 用 甲苯洗涤， 得到淡黄色的 3-氯 -吡啶 -2-甲酰氯固体。 冰浴下将此固体慢慢的加入到氘 代甲胺的四氢呋喃饱和溶液中， 维持温度低于 5 °C， 继续搅拌 5小时。 浓缩， 加乙酸 乙酯， 析出白色固体， 滤除， 滤液用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 浓缩至干， 得到淡黄色的 4-氯吡啶 -2-(N-l，,r,r-三氘代甲基)甲酰胺 (3) (20.68 g) , 收率 73%。

1H NMR (CDC1 ₃ , 300 MHz): 8.37 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.96(br, 1H), 7.37(d, 1H). 2、 4-(4-氨苯氧基)-2-吡啶-(^-1，,1，,1，-三氘代甲� �)甲酰胺(5)的制备

向 100 mL干燥的无水 DMF中依次加入对氨基苯酚 (9.54 g, 0.087 mol) ,叔丁醇钾 (10.3 g, 0.092 mol) , 溶液变成深褐色， 室温下搅拌 2小时后， 向其中加入 4-氯吡啶 -2-(N-r, l，,r-三氘代甲基）甲酰胺 (3)(13·68 g, 0.079 mol) , 无水碳酸钾 (6.5 g, 0.0467 mol) , 将反应液温度升到 80°C后继续搅拌过夜。 TLC检测反应完毕， 冷却到室温， 将 反应液倒入乙酸乙酯 (150 mL)和饱和食盐水 (150 mL)的混和溶液中， 搅拌分层， 静置 后分液， 水层用乙酸乙酯萃取 (100 mLx3)， 合并萃取液， 用饱和水洗涤 (100 mLx3)， 无水硫酸钠干燥， 浓缩， 得到淡黄色的 4-(4-氨苯氧基) -2-吡啶 -(N-Γ, Γ,Γ-三氘代甲基) 甲酰胺 (18.00 g)， 收率 92%。

1H NMR (CDC1 ₃ , 300 MHz): 8.32 (d, 1H), 7.99 (br, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.91-6.85 (m, 3H), 6.69 (m, 2H), 3.70 (br, s, 2H).

3、 ^(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-^-(4-(2-(^1，,1，,1，-三 氘甲基氨基甲酰基)-4-吡啶 基氧)苯基)脲 (CM4307)的制备

向 120 mL二氯甲垸中加入 5-氨基 -2-氯 -三氟甲基苯 (15.39 g, 78.69 mol) , NN'-羰 基二咪嗤 (CDIX13.55 g, 83.6 mmol), 室温搅拌 16小时后， 向其中缓慢的滴加 4-(4-氨 苯氧基 )-2-吡啶 -(N-Γ, Γ,Γ-三氘代甲基)甲酰胺 (18 g, 73 mmol)的二氯甲垸 (180 mL)溶 液， 室温下继续搅拌 18小时。 TLC检测反应完毕， 旋去部分二氯甲垸溶剂至 100 mL 左右， 室温放置数小时， 有大量白色固体析出， 抽滤， 固体用大量二氯甲垸洗涤。 滤 液浓缩去除部分溶剂后，又析出部分固体，合 并两次固体，用大量二氯甲垸再次洗涤， 得到白色粉状的 N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν，-(4-(2-(Ν-Γ, Γ,Γ-三氘甲基氨基甲酰 基) -4-吡啶基氧)苯基)脲 CM4307纯品 (20.04 g) , 收率 58%。

1H雇 R (CD ₃ OD, 300 MHz): 8.48 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.55 (m, 5H), 7.12 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), ESI-HRMS m/z: C21H13D3C1F3N403, Calcd. 467.11, Found 490.07 (M+Na) ⁺ .

另外， 可将化合物 CM4307溶于二氯甲垸中， 与过氧苯甲酸进行反应， 制得相 应的氧化产物： 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基） 苯基)脲基)苯氧基 )-2-(Ν-Γ, Γ,Γ-三氘甲基 氨基甲酰基;)吡啶 -1-氧 实施例 2

基于 4-氯吡啶-2-^-1，,1，,1，-三氘代甲基)酰胺(中间 体 Α2)合成 CM4309

1： 4-氯吡啶-2-(^-1，,1，,1，-三氘代甲基)酰胺(中� �体 Α2)的制备

方法 1: 将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯 (50g， 291mmol, leq)置入盛有 250mL四氢呋喃的三口瓶 中， 搅拌并加入 1, 1, 1-三氘代甲胺盐酸盐 (31g， 437mmol, 1.5eq) , 无水碳酸钾 (80g， 583mmol, 2eq) , 室温搅拌反应 20小时后加入水 (250mL)和甲基叔丁基醚 (150mL)， 搅 拌并分层， 获得有机相。 水相用甲基叔丁基醚萃取 (lOOmL) , 合并有机相并加入无水 硫酸钠干燥并过滤， 减压除去溶剂得到标题化合物， 为浅黄色液体 48g， 纯度 99%, 收率 96%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.64(dd, J = 2Hz, 5.2Hz, 1H), 7.97(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.2Hz, 1H), 8.74(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₇ H ₄ D ₃ C1N ₂ 0: 173, found： 174 [M +H]+

A2

将 4-氯 -2-B比啶甲酸 (200mg, 1.27mmol, leq)溶于 N，N-二甲基甲酰胺 (DMF， 5mL)， 加入 1 ,1, 1-三氘代甲胺盐酸盐（179mg， 2.54mmol , 2eq) , 2-(7-偶氮苯并三氮 唑) -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯 (HATU, 965mg, 2.54mmol, 2eq) , Ν,Ν-二异丙基 乙胺 (DIEA, 492mg, 3.81mmol, 3eq) , 并在室温下搅拌反应 16小时， 加入水 (20mL)， 用乙酸乙酯 (30mL)萃取， 并用饱和食盐水 (10mL X 3)洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压除去溶剂得到标题化合物， 200mg浅黄色液体， 纯度 97%, 收率 91%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.64(dd, J = 2Hz, 5.2Hz, 1H), 7.97(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.2Hz, 1H), 8.74(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₇ H ₄ D ₃ C1N ₂ 0: 173, found： 174 [M +H]+

2： 4-(4-氨基-3-氟-苯氧基)-吡啶-2-(^-1，,1，,1，-三� ��代甲基)酰胺 Bl的制备 将叔丁醇钾（15g， Ommol, 1.3eq)置入盛有 N， N-二甲基乙酰胺 (DMA, 50mL) 的溶液中，在 0-5度下缓慢滴加 3-氟 -4-氨基 -苯酚 (16g， 127mmol, 1.3eq)的 DMA(50mL) 溶液， 在室温下搅拌反应 20分钟， 升温至 100°C并缓慢滴加 4-氯吡啶 -2-(N-l',r,r- 三氘代甲基)酰胺 A2(17g， 97mmol， leq)的 DMA(50mL)， 滴加完毕后继续搅拌 0.5小 时， 冷却至室温， 向反应液中加入乙酸乙酯 (1.5L)稀释并搅拌 0.5小时， 过滤除去无机 盐，用水洗涤 (500mL X 3)，无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，向粗品� ��加入乙醇 (lOOmL) 并回流搅拌 2小时， 冷却至室温过滤得到标题化合物， 为褐色固体 20g， HPLC纯度 96%, 收率 80%。 1H NMR(CD ₃ OD-d4 , 400 MHz): δ 6.74-6.77(m, 1H), 6.87(dd, J = 2.4Hz, 11.6Hz, 1H), 6.93(t, J = 10Hz, 1H), 7.02(dd, J = 2.8Hz, 6Hz, 1H), 7.54(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.44(d, J = 6Hz, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₁₃ H ₉ D ₃ C1N ₃ 02: 264, found： 265 [M +H]+

3: 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-l，,l，,l，-三氘代甲 基)吡啶酰胺 (CM4309)的制备

方法 1:

在室温下， 将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (13g， 58mmol, l. leq)置入盛有二氯 甲垸 (70mL)的单口瓶中， 并将 4-(4-氨基 -3-氟-苯氧基) -吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基) 酰胺 (14g， 53mmol , leq)的二氯甲垸 (350mL)溶液缓慢滴加至上述溶液中， 室温搅拌 20小时，反应完毕过滤并用二氯甲垸 (20mL X 2)洗涤，得到浅褐色固体 13g，纯度 98%, 收率 50%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

I, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺

在室温下，将 4-氯 -3-三氟甲基 -苯胺 (300mg， 1.53mmol, 1.05eq)溶于二氯甲垸 (5mL) 中， 加入 Ν,Ν-羰基二咪唑 (CDI， 265mg, 1.64mmol， 1.12eq)并室温搅拌 16小时， 将 4-(4-氨 -3-氟-苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν-Γ, Γ, Γ-三氘代甲基)酰胺 (386mg， 1.46mmol， leq)加 入到上述反应液中， 继续室温搅拌 20小时， 将溶剂减压除去， 加入石油醚 (10mL)与 乙酸乙酯 (5mL)回流搅拌 2小时，冷却至室温过滤得到 CM4309,为浅褐色固体 635mg， 纯度 95%, 收率 90%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺ 实施例 3

基于 4-氯吡啶-2-^-1，,1，,1，-三氘代甲基)酰胺(中间 体 A2)合成 CM4309

CM4309

1-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -3-(2-氟 -4-羟基-苯基) -脲 B2的制备

在室温下， 将 3-氟 -4-氨基 -苯酚 (500mg， 3.93mmol, leq)溶于 N， N-甲基甲酰胺 (3mL)中， 并将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (917mg， 4.13mmol, 1.05eq)的二氯甲垸 (3mL)溶液滴加到上述溶液中， 室温搅拌反应 16 小时， 加入水 (10mL)并用乙酸乙酯 (20mL)萃取， 用饱和食盐水 (10 mL X 3)洗涤， 有机相用无水硫酸钠干燥， 减压除去溶 剂后固体用石油醚 (15 mL)与乙酸乙酯 (5 mL)回流搅拌 2小时，冷却至室温过滤得到标 题化合物， 为褐色固体 1.2g， 纯度 98%, 收率 89%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 6.56-6.59(m, 1H), 6.64(dd, J = 2.4Hz, 12.4Hz, 1H), 7.59-7.63(m, 3H),8.11(br, 1H), 8.28(br, 1H), 9.34(br, 1H), 9.69(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₁₄ H ₉ C1F ₄ N ₂ 0 ₂ :348, found： 349 [M +H] ⁺

3: 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( N-l，,l，,l，-三氘代甲 基)吡啶酰胺 (CM4309)的制备

将叔丁醇钾 (906mg， 8.09mmol, 1.4eq)溶于 N， N-甲基乙酰胺 (DMA, 5mL)中， 在 0度下缓慢滴加 1-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基; )-3-(2-氟 -4-羟基-苯基) -脲 (2.8g， 8.09mmol, 1.4eq)的 DMA(5mL)溶液至上述溶液， 在室温下搅拌反应 20分钟， 升温至 100°C缓慢 滴加 4-氯 -N-氘代甲基吡啶 -2-甲酰胺 (lg， 5.78mmol, leq)的 DMA(5mL)溶液， 滴加完 毕后， 冷却至室温， 向反应液中加入乙酸乙酯 (200mL)稀释并搅拌 0.5小时， 过滤除去 无机盐， 用水洗涤 (5mL X 3)， 无水硫酸钠干燥， 减压除去溶剂， 粗品通过层析柱分离 (石油醚： 乙酸乙酯 =4: 1)得到 520mg的 CM4309,为褐色固体， 纯度 98%, 收率 20%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H). MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁴ 实施例 4

基于 4-氯吡啶-2-^-1，,1，,1，-三氘代甲基)酰胺(中间 体 A2)合成 CM4309

(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -氨基甲酸苯酯 B3的制备

将 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (4.9g， 25mmol, leq)加入至二氯甲垸 (50mL)中， 室温下 缓慢滴加氯甲酸苯酯 (3.9g， 25mmol , leq)的二氯甲垸 (10mL)溶液， 继续搅拌反应 1 小时。 加入稀盐酸 (IN, 50mL) , 再用水洗涤 (40mL X 3)， 分层。 有机相用无水硫酸钠 干燥， 过滤， 除去溶剂得到标题化合物， 为类白色产品 7.5g， 纯度 99%, 产率 94%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.25 -7.30(m, 3H), 7.45(t, J = 8Hz, 2H),

7.67-7.78(m, 2H), 8.07(d, J = 2Hz, 1H), 10.73 (br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₁₄ H ₉ C1F ₃ N0 ₂ :315, found： 316[M +H] ⁺

4-[4-({[4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】甲酰基 }氨基) -3-氟苯氧基】 -N-氘代甲基吡啶 -2-甲 酰胺 CM4309的制备

在室温下， 将 (4-氯 -3-三氟甲基-苯基;) -氨基甲酸苯酯 (0.95g， 3.0mmol, leq)溶于 吡啶 (10mL)，并加入 4-(4-氨 -3-氟-苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν-Γ,Γ, Γ-三氘代甲基)酰胺 (0.79g，

3.0mmol, leq) , 升温至 85 °C搅拌反应 2小时。 减压除去溶剂， 加入乙酸乙酯 (50mL)， 用稀盐酸洗涤 (IN, 10mL) ,用饱和食盐水 (10mL)洗涤， 分层，无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压除去溶剂， 加入乙酸乙酯 (3mL)， 搅拌 1 小时， 过滤得到标题化合物， 为类白色 固体 0.5g， 纯度 96%, 收率 35%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz,

1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H),

8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺ 实施例 5

CM 4309

[2-氟 -4(2-Λ代甲基甲酰胺基-吡啶 -4-基氧基) -苯基卜氨基甲酸苯酯 B4的制备 将 4-(4-氨 -3-氟-苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν-Γ,Γ, Γ-三氘代甲基)酰胺 2.60g， lOmmol, leq) 溶于二氯甲垸 (15 mL)，加入吡啶 (1.58g， 20mmol, 2eq) ,室温下，将氯甲酸苯酯 (1.88g， 12mmol, 1.2eq)溶于二氯甲垸 (15mL)滴加至上述溶液中， 室温搅拌反应 1小时。 用稀 盐酸 (IN, 30mL)洗涤， 饱和食盐水 (10mL X 2)， 分层。 有机相用无水硫酸钠干燥， 过 滤， 减压除去溶剂得标题化合物 3.6g， 纯度 95%, 收率 94%。

1H NMR(DMS0-d6, 400 MHz): δ 7.10-7.13(m, 1H), 7.21(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.26(t, J = 6.4Hz, 3H), 7.36(dd, J = 2.8Hz, 1 1.6Hz, 1H), 7.43-7.47(m, 3H), 7.80(t, J = 8.4Hz, 1H), 8.55(d, J = 5.2Hz, 1H), 8.79(br, 1H), 10.10(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₀ H ₁₃ D ₃ FN ₃ O ₄ :384, found :385 [M +H]+

4-[4-({[4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】甲酰基 }氨基) -3-氟苯氧基】 -N-氘代甲基吡啶 -2-甲 酰胺 CM4309的制备

在室温下， 将 [2-氟 -4(2-氘代甲基甲酰胺基 -吡啶 -4-基氧基;) -苯基] -氨基甲酸苯酯 (1.92g, 5mmol， leq)溶于吡啶（10mL)，加入 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (0.98g， 5mmol， leq), 温度升至 85 °C搅拌反应 2小时。 减压除去溶剂， 加入乙酸乙酯 (lOOmL) , 用饱和食盐 水 (30mL X 3)洗涤， 分层， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压除去溶剂得到浅褐 色固体， 加入乙酸乙酯 (5mL)并在 50°C下搅拌 30分钟， 过滤得到标题化合物， 为灰白 色固体 (0.6g)， 纯度 95%, 收率 25%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺ 实施例 6

基于中间体 B7合成 CM4309

2)以 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲卜 3-氟-苯氧基 吡啶 -2-甲酸 (中间体 B7)为 关键

1： 4-氯吡啶 -2-甲酸叔丁酯 A7的制备

将 4-氯吡啶 -2-甲酸 (10.5 g， 66.64 mmol)悬浮于氯化亚砜 (40 mL)中， 升温至 80°C 回流， 滴加 N， N-二甲基甲酰胺 (0.2 mL)， 回流反应 2小时， 减压除去二甲亚砜得到 浅黄色的酰氯， 并加入二氯甲垸 (60 mL) o 在 -40°C下， 将上述配制的二氯甲垸溶液滴 加至叔丁醇 (25 mL)、 吡啶 (20mL)与二氯甲垸 (80 mL)的混合溶液中。 将该反应液升温 至 50°C并搅拌反应 16小时。 减压除去溶剂， 加入乙酸乙酯 (150 mL)， 并用饱和食盐 水洗涤 (50 mL X 2)， 再用氢氧化钠溶液 (I N)洗涤 (50 mL X 2)， 分层， 有机相用无水硫 酸钠干燥，减压除去溶剂，真空干燥得到标题 化合物，为浅黄色固体 l l. lg,纯度 95%, 收率 78%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 1.56(s, 9H), 7.80(dd, J = 2.4Hz, 5.2Hz, 1H), 8.02(d, J = 2Hz, 1H), 8.69(d, J = 5.2Hz, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₁₀ H ₁₂ ClNO ₂ :213, found： 158(M-Bu ^l +H) ⁺ .

2: 4-(4-氨基 -3-氟-苯氧基) -吡啶 -2-甲酸叔丁酯 B5 的制备

将叔丁醇钾 (5 g， 23.47mmol, 1.4eq)溶于 N， N-二甲基乙酰胺 (DMA, 12mL), 在 0°C下缓慢滴加 3-氟 -4-氨基苯酚 (4.2g， 32.86mmol, 1.4eq)的 DMA(15mL)溶液， 滴 加完毕后在室温下搅拌 30分钟。 升温至 100°C并缓慢滴加 4-氯吡啶 -2-甲酸叔丁酯的 DMA溶液 (18mL)，搅拌 1小时， 降至室温， 加入乙酸乙酯 (500mL)， 过滤除去不溶物， 用饱和食盐水洗涤 (200mL X 3)， 无水硫酸钠干燥， 减压除去溶剂得到褐色固体， 柱层 析分离 (石油醚： 乙酸乙酯 = 3: 1)得到标题化合物， 为浅褐色固体 1.38g， 纯度 98%, 收率 20%。

1H NMR(CD ₃ OD-d4 , 400 MHz): δ 1.61(s, 9H), 6.78-6.80(m, 1H), 6.89-6.97(m, 2H),

7.07(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.55(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.48(d, J = 5.6Hz, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₁₆ H ₁₇ FN ₂ O ₃ :304, found： 249(M-Bu ^l +H) ⁺ .

3: 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲】 -3-氟-苯氧基 } 比啶 -2-甲酸叔丁酯 B6 的 制备

在室温下， 将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (1.06g， 4.77 mmol, 1.05eq)溶于二 氯甲垸 (10mL)， 并将 4-(4-氨基 -3-氟-苯氧基) -吡啶 -2-甲酸叔丁酯 (1.38g， 4.54 mmol, leq)的二氯甲垸 (50mL)溶液缓慢滴加至上述溶液中， 室温搅拌 16 小时。 减压除去溶 剂， 得到的固体用柱层析分离 (二氯甲垸： 甲醇 =30: 1)得到标题化合物， 为红棕色固体 1.9g, 纯度 94%, 收率 80%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 1.54(s, 9H), 7.08(dd, J = 2Hz, 8.8Hz, 1H),

7.18(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.34(dd, J = 2.4Hz, 3.6Hz, 1H), 7.46(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.61-7.66(m, 2H), 8.13-8.19(m, 2H), 8.58(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.76(d, J = 1.6Hz, 1H), 9.53(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₄ H ₂₀ ClF ₄ N ₃ O ₄ :525, found :526(M +H) ⁺ .

4: 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲卜 3-氟-苯氧基 吡啶 -2-甲酸 B7的制备 在室温下， 将 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -3-氟-苯氧基 } 比啶 -2-甲酸叔丁 酯 (1.8g， 3.43mmol)溶于二氯甲垸 (15mL)，加入三氟乙酸 (15mL)与三乙基硅垸 (0.2mL)， 升温至 50°C搅拌反应 16小时。 减压除去溶剂， 加入水 (50mL)与乙酸乙酯 (50mL)， 分 层， 除去有机相， 水层过滤并用水 (20mL X 2)洗涤， 得到标题化合物， 为灰色固体， 真空干燥的 1.48g， 纯度 85%, 收率 92%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.13(dd, J = 1.2Hz, 9.2Hz, 1H), 7.38-7.41(m, 2H), 7.61-7.66(m, 3H), 8.15(s, 1H), 8.22(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.67(d, J = 5.6Hz, 1H), 9.06-9.08(m, 1H), 10.21-10.28(m, 1H), 1 1.96(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₀ H ₁₂ ClF ₄ N ₃ O ₄ :469, found :468(M-H) ".

5: 4-[4-({[4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】甲酰基 }氨基) -3-氟苯氧基】 -N-氘代甲基吡啶 -2- 甲酰胺 CM4309的制备

方法 1 :

在室温下， 将 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -3-氟-苯氧基 } 比啶 -2-甲酸

(1.48g, 3.15mmol, leq)溶于 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 (20mL)， 加入 1, 1, 1-三氘代甲胺盐酸 盐 (0.45g， 6.29mmol , 2eq) , 2-(7-偶氮苯并三氮唑) -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯 (HATU, 2.40g, 6.29mmol, 2eq)与 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (DIEA, 1.20g, 9.44mmol, 3eq) , 并室温搅拌 16小时。 向上述反应液中滴加水 (50mL)， 搅拌 0.5小时， 过滤得到浅红色 固体， 加入乙酸乙酯 (150mL)， 用饱和食盐水 (50 X 3)洗涤， 分层， 有机相用无水硫酸 钠干燥， 过滤， 减压除去溶剂得 1.2g CM4309， 为浅红色固体， 纯度 97%, 收率 79%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

I, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺

将 4- {4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基} -吡啶 -2-甲酸 (1 g, 2.13mmol)悬浮 于甲醇 (20mL)中， 室温下加入浓硫酸 (5mL)并回流 3小时， 减压除去溶剂， 柱层析 (二 氯甲焼： 甲醇 =10: 1)分离得到白色固体 4- {4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲基] -苯氧基 吡啶 -2-甲酸甲酯 B8(0.83g)， 纯度 97%, 收率 80%。

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₄ C1F ₄ N ₃ 0 ₄ :483, found： 484 [M+H]+

将 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基} -吡啶 -2-甲酸甲酯 (0.83 g , 1.71mmol， leq)置入盛有 15mL 四氢呋喃的三口瓶中， 搅拌并加入 1 ,1 ,1-三氘代甲胺 盐酸盐 (0.24 g, 3.43mmol, 2eq) , 无水碳酸钾 (0.47 g, 3.43mmol, 2eq) , 室温搅拌反 应 20小时后， 加入水 (10mL)和甲基叔丁基醚 (25mL)， 搅拌并分层， 获得有机相。 水 相用甲基叔丁基醚萃取 (15mL)， 合并有机相并加入无水硫酸钠干燥并过滤， 减压除去 溶剂得到 CM4309, 浅红色固体 680 mg， 纯度 95%, 收率 82%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.06-7.10(m, 1H), 7.19(dd, J = 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 7.35(dd, J = 2.8Hz, 12Hz, 1H), 7.43(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(br, 1H), 8.17(t, J = 8.8Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.75(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.78(br, 1H), 9.54(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ C1F ₄ N ₄ 0 ₃ :485, found： 486 [M +H] ⁺ 实施例 CM4309的氧化物 BO的制备

在室温下， 将 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( Ν-1 ',1 ',1 '- 三氘代甲基)吡啶酰胺 (0.5 g， 1.03mmol, leq)溶于二氯甲垸 (10mL)与四氢呋喃 (10 mL)， 加入间氯过氧苯甲酸 (0.54 g, 3.09mmol, 3eq), 升温至 50°C搅拌反应 20小时。 减压 除去溶剂， 加入乙酸乙酯 (50mL)， 用稀的氢氧化钠溶液 (IN, 20mL X 2)洗涤， 饱和食 盐水 (20mL X 2)洗涤， 分层。 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压除去溶剂， 柱层 析纯化 (乙酸乙酯)得到标题化合物 (0.23g)， 为白色固体化合物 BO， 纯度 95%, 收率 45%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.10(dd, J = 1.2Hz, 8.8Hz, 1H), 7.32-7.38(m, 2H), 7.61-7.63(m, 2H), 7.89-7.91(m, 1H), 8.13-8.17(m, 2H),8.42(d, J = 6.8Hz, 1H), 8.76(d, J = 1.6Hz, 1H), 9.53(br, 1H), 11.35(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C ₂₁ H ₁₂ D ₃ ClF ₄ N ₄ O ₄ :501, found： 502 [M +H] ⁺ 实施例 8

CM4309盐的制备

1: CM4309盐酸盐 (4309 · HC1)的制备

将 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基) 吡啶酰胺 (2.5 g， 5.16 mmol, leq)悬浮于乙醇 (50 mL)中， 加热回流至溶液澄清， 趁热 过滤除去不溶物后，将滤液加热回流，加入浓 盐酸 (37%, 6.39 mmol, 0.6 mL, 1.24 eq), 澄清液保持 0.5分钟左右， 关掉油浴自然冷却至室温， 搅拌 1小时， 过滤得到不溶物， 50度真空干燥 20小时， 得到标题化合物， 为浅灰色固体 2.56g， 收率： 95%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.08-7.10(m, 1H), 7.24(dd, J = 3.2Hz, 5.6Hz, 1H), 7.36(dd, J = 2.8Hz, 11.6Hz, 1H), 7.52(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.64(s, 2H), 8.14(s, 1H), 8.18(t, J = 9.2Hz, 1H), 8.56(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.89(br, 1H), 8.97(br, 1H), 10.05(br, 1H), 10.23(br, 1H).

熔点： 240°C-241.5 °C

元素分析 理论值： C, 48.29%; H, 3.67%; N, 10.73%. 实测值： C, 48.33%; H, 3.20%; N, 10.93%.

2： CM4309甲磺酸乙醇合物 (4309 · MeS0 ₃ H · CH ₃ CH ₂ OH)的制备

将 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基) 吡啶酰胺 (2.1 g， 4.33 mmol, leq)悬浮于乙醇 (50 mL)中， 加热回流至溶液澄清， 趁热 过滤除去不溶物后， 将滤液加热回流， 加入甲磺酸 (85%, 8.66mmol, 0.6mL, 2 eq), 澄清液保持 0.5分钟左右， 关掉油浴自然冷却至室温， 搅拌 1小时， 过滤得到不溶物， 50度真空干燥 20小时， 得到标题化合物， 为淡红色固体 2.25g， 收率为 89%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.05(t, J = 6.8Hz, 3H), 2.48(s, 3H), 3.44(q, J = 6.8Hz, 2H), 7.11(dd, J = 1.2Hz, 8.4Hz, 1H), 7.31(dd, J = 2.8Hz, 6Hz, 1H), 7.38(dd, J = 2.4Hz, 11.6Hz, 1H), 7.61-7.65(m, 3H), 8.14-8.19(m, 2H), 8.60(d, J = 6Hz, 1H), 8.90(t, J = 1.2Hz, 1H), 8.99(br, 1H), 9.39(br, 1H), 9.66(br, 1H).

熔点： 157.5 °C-158.rC 3： CM4309对甲苯磺酸盐 (4309 · TsOH)的制备

将 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯氧基) -2-( Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基) 吡啶酰胺 (2.16 g， 4.33 mmol, leq)悬浮于乙醇 (50 mL)中， 加热回流至溶液澄清， 趁热 过滤除去不溶物后， 将滤液加热回流溶清， 一次性快速加入甲磺酸 (70%, 8.66mmol, ImL, 2 eq), 澄清液保持 0.5分钟左右， 关掉油浴自然冷却至室温， 搅拌 1小时， 过 滤得到不溶物， 50度真空干燥 20小时， 得到白色晶体 2.36g， 收率为 83%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 2.30(s, 3H), 7.09-7.14(m, 3H), 7.24(dd, J = 2.4Hz, 5.2Hz, 1H), 7.37(dd, J = 2.4Hz, 11.6Hz, 1H), 7.48-7.50(m, 3H), 7.61-7.66(m, 2H), 8.15-8.19(m, 2H), 8.56(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.79(br, 1H), 8.85(br, 1H), 9.56(br, 1H), 10.38(br, 1H).

熔点： 240.7 °C -241 °C 实施例 9

对于 c-Kit、 PDGFR-β蛋白酪氨酸激酶分子水平抑制活性

1、 实验方法

本实施例采用酶联免疫吸附法 （Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)测 定二苯基脲化合物对 _C -Kit、 PDGFR-β蛋白酪氨酸激酶分子水平抑制活性。

测定的化合物： CM4306、 CM4308(4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -3-氟-苯 氧基) -N-甲基吡啶酰胺)、 CM4309。

主要试剂：

反应底物 PolyCGlu,Tyr;) _4:1 购自 Sigma 公司； 抗磷酸化酪氨酸的单克隆抗体 PY99 购自 Santa Craz公司；辣根过氧化物酶标记羊抗鼠的 IgG 购自 Calbiochem 公司； ATP、 DTT、 OPD 购自 Amresco 公司；酶标板购自 Coming 公司； Sul 1248购自 Merk公司。

实验方法：

参见 Roskoski, R., Jr. Sunitinib: a VEGF and PDGF receptor protein kinase and angiogenesis inhibitor. Biochem Biophys Res Commun, 356: 323-328, 2007， 具体包括： 激酶反应底物 Poly(Glu,Tyr) _4:1 用无钾离子的 PBS稀释成 20 μ _β /πι1, 包被酶标板。 在包被好酶标板孔内加入受试的二苯基脲样品 (受试样品先用 DMSO配制成 10- ² Μ的 储存液， 临用前用反应缓冲液稀释到所需浓度， 加至实验孔内， 使其在 100 μΐ反应体 系的终浓度为 10- ⁵ mol/L)。 同时设立阳性对照孔， 加入阳性对照化合物 Sul l248。

加入用反应缓冲液稀释的 ATP溶液 （ATP终浓度 5 μΜ)， 最后， 加入用反应缓冲 液稀释的受试酪氨酸激酶。 反应体系总体积为 100 μ1。 同时设立阴性对照孔和无酶对 照孔。

将反应体系置于湿盒内， 37。C摇床避光反应 1 h， 反应结束后 T-PBS洗板三次。 加 入抗体 PY99 ΙΟΟ μΙ/孔， 37°C摇床反应 30 min。 T-PBS洗板三次。 加入辣根过氧化物 酶标记的羊抗鼠的 IgG 100 μΐ/孔， 37°C摇床反应 30 min。 T-PBS洗板三次。 加入 OPD 显色液 100 μΐ/孔， 室温避光反应 1-10 min。 加入 2 M H ₂ S0 ₄ 50 μΐ中止反应， 用可调 波长式微孔板酶标仪 VERSAmax测 ₄₉₂ 值。

通过下列公式计算样品的抑制率：

2、 实验结果

以上实验结果为两次试验的均值。

3、 评价标准和结果评价

在阳性对照化合物的抑制活性符合参考范围的 前提下， 受试化合物在实验浓 度 10— ⁵ mol/L下， 抑制率大于 50%判定其有效； 抑制率小于 50%判定无效。

结果显示， CM4306、 CM4308、 CM4309对蛋白酪氨酸激酶 c-Kit、 PDGF -β 的抑制率大于 50%， 故在分子水平具有显著的针对 c-Kit、 PDGF -β酪氨酸激酶 的抑制活性。 实施例 10

CM4306、 CM4308和 CM4309的大鼠药代动力学研究

3雄性 SD大鼠， 体重 220 g左右， 禁食过夜后， 同时灌胃给予 4 mg/kg (折算成 碱) CM4306、 CM4308和 CM4309的混合溶液 [PEG400为载体]。 分别在给药后 0.25， 0.5 , 1.0, 2.0, 3.0, 5.0, 7.0, 9.0， 24， 36, 48和 72 h采血， 用 LC/MS/MS测定血 浆中 CM4306和 CM4307的浓度。 大鼠灌胃给予 4 mg/kg CM4306, CM4308和 CM4309后的药动学参数 化合物 大鼠 Tmax Cmax AUC(O-t) AUC(O-oo) MRT(O-oo) tl/2z

编号 h ng/mL Ng-h/mL ng-h/mL h h

CM4306 7 8.0 642 23431 24613 28.2 14.8

8 2.0 1568 40239 41544 23.2 12.8

9 8.0 651 24571 25008 23.9 10.0 平均值 6.0 954 29414 30388 25.1 12.5 标准差 3.5 532 9392 9663 2.7 2.4

CM4308 7 6.0 279 9327 9541 24.1 11.7

8 1.0 817 18558 18973 21.7 11.4

9 8.0 378 11473 11605 21.0 10.1 平均值 5.0 491 13119 13373 22.2 11.1 标准差 3.6 286 4831 4958 1.6 0.9

CM4309 7 24.0 470 22220 27384 45.9 26.7

8 1.0 933 35592 41702 39.1 23.4

9 8.0 530 25601 28899 36.7 20.9 平均值 11.0 644 27804 32661 40.6 23.7 标准差 11.8 252 6953 7866 4.8 2.9 结果显示， CM4309(23.7hr ± 2.9hr)的 tl/2 显著高于 CM4306(12.5hr± 2.4hr)和 CM4308(l l.lhr±0.9hr；)。

CM4309(32611 ng'h/mL ±7866 ng-h/mL) 的 AUC(0-∞)显著高于 CM4308(13371 ng-h/mL + 4958 ng-h/mL)。 实施例 11 CM4306、 CM4308和 CM4309的体内药效学研究

肿瘤裸鼠移植模型的建立： 收获对数生长期的 SMMC-7721细胞， 计数后将细胞 悬于 lxPBS , 调整细胞悬液浓度至 1.5xl0 ⁷ /ml， 在裸鼠右侧腋下皮下接种肿瘤细胞， 3xl0 ⁶ /0.2ml/鼠。 共接种 45只裸鼠。 在肿瘤体积达到 30-130mm ³ 时， 将动物进行随机 分组， 共获得 34只动物， 使各组肿瘤差异小于均值的 10%, 并开始给药。 对照组 10 只裸鼠， 治疗组每组 8只裸鼠。 CM4306、 CM4308和 CM4309单剂量 30mg/kg 每日 灌胃给药连续 2周； 停药后继续观察， 直至肿瘤体积大于 2000mm ³ ， 试验期间每周测 定两次动物体重和肿瘤大小。化合物溶解在 Cremophor EL/ethanol/water (12.5: 12.5:75) 中。

肿瘤体积 (Tumor volume, TV)的计算公式为： TV=axb ² /2。 其中 a、 b分别代表肿 瘤测量长和宽。 相对肿瘤体积 (relative tumor volume, RTV)计算公式为： RTV=Vt/V。。 其中 V。为分组给药时的肿瘤体积， Vt为测量时的肿瘤体重。 抗肿瘤活性的评价指标 为相对肿瘤增值率 T/C(%)， 计算公式为： T/C(%)=Cr _RTV /C _RTV ;)xl00%。 T _RTV 为治疗组 RTV, C _RTV 为阴性对照组 RTV。

疗效评价标准： T/C(%)≤40%并经统计学分析 p<0.05为有效。

给药结束后， CM4306 30mg/kg的 17。(％)为 64.1%， CM4308的 17。(％)为 51.0%, CM4309为 27.0%。其中 CM4309在 30mg/kg的抑制率<40%， 肿瘤体积与对照比较有 显著差异 (p<0.01)， 表现显著的抑制肿瘤生长的作用。 在相同剂量下， CM4306 和 CM4308 的瘤体积之间没有显著差异（p>0.05), 而 CM4309 与 CM4306(p<0.05)和 CM4308(p<0.01)的瘤体积之间有显著差异 （图 1) 。 实施例 12-14 药物组合物

活性化合物 20g

淀粉 140g

微晶纤维素 60g

其中， 活性化合物分别为实施例 6-8 中制备的 CM4309、 CM4309 氧化物或 CM4309的甲磺酸乙醇合物。 按常规方法， 将上述物质混合均匀后， 装入普通明胶胶 囊， 各得到 1000颗胶囊。 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作 为参考，就如同每一篇文献被单独 引用作为参考那样。 此外应理解， 在阅读了本发明的上述讲授内容之后， 本领域技术 人员可以对本发明作各种改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书 所限定的范围。